CA2534135A1

CA2534135A1 - Cosmetic use of a biguanide derivative as an anti-ageing active substance for the skin

Info

Publication number: CA2534135A1
Application number: CA002534135A
Authority: CA
Inventors: Pierre Jean-Paul Potier; Nobumichi-Andre Sasaki; Maria Conception Achab; Gisele Franck; Joanna Bakala; Francoise Picot
Original assignee: PHARMAMENS
Current assignee: Individual
Priority date: 2003-07-29
Filing date: 2004-07-29
Publication date: 2005-02-10
Also published as: FR2858227B1; EP1651171A2; JP2007500172A; WO2005011566A2; FR2858227A1; WO2005011566A3

Abstract

La présente invention concerne l~utilisation cosmétique d~un dérivé de biguanide en tant qu~actif anti-vieillissement de la peau. En particulier, l a metformine est appropriée à l~utilisation selon la présente invention.</SDOA B>The present invention relates to the cosmetic use of a biguanide derivative as an anti-aging active ingredient of the skin. In particular, metformin is suitable for use according to the present invention. </ SDOA B>

Description

Titre : Utilisatiow cosmétique d'un dérivé de biguanide en fiant qu'actif anti-vieillissement de la peau.
La présente invention concerne l'utilisation çosmétique d'un dérivé de biguanide en tant qu'actif anti-vieillissement et restructurant de la peau.
Chez les Mammifères. en général, particulièrement chez l'Homme, la peau est constituée de deux parties principales, à savoir une couche externe, l'épiderme et une couche_i.nterne, le derme.
L'épiderme assure l'imperméabilité de la peau et sa résistance. Elle se renôuvelle toutes les quatre semaines' environ par l'élimination des cellules mortes superficielles. L'épiderme est composé principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes, très majoritaires, les mélanocytes et les cellules de Langerhans. Chacun de ces types cellulaires contribue par ses fonctions propres au rôle essentiel joué dans l'organisme par la peau.
Le derme fournit à l'épiderme un support solide. C'est également son élément nourricier. II est principalement constitué de fibroblastes dispersés dans . un milieu complexe, appelé rüatrice extracellulaire, composée . principalement de fibres de collagène, d'élastine, d'acide hyaluronique et des protéoglycanes.
Le collagène représente le « ciment » du derme. II donne à la peau solidité, résistance et en assure l'hydratation (donc sa souplesse). L'élastine apporte élasticité et tonicité. L'acide hyaluronique donne du volume et participe à
l'hydratation.
Au fil des jours, la peau vieillit ce qui se manifeste d'abord par l'apparition de ridules puis de rides notamment sur le visage et/ou par un affaissement de la peau.
Le vieillissement affecte d'abord l'épiderme dont l'épaisseur se réduit. Le pouvoir de division cellulaire dans sa couche basale diminue et le temps dé
renouvellement de la couche cornée superficielle se rallonge. Title: Cosmetic use of a biguanide derivative by trusting that active anti-aging skin.
The present invention relates to the cosmetic use of a derivative of biguanide as an anti-aging and restructuring agent of the skin.
In mammals. in general, especially in humans, skin consists of two main parts, namely an outer layer, the epidermis and an inner layer, the dermis.
The epidermis ensures the impermeability of the skin and its resistance. She is Renovation every four weeks by elimination of cells superficial deaths. The epidermis is composed mainly of three types of cells which are the keratinocytes, very predominant, the melanocytes and the Langerhans cells. Each of these cell types contributes by its specific functions to the essential role played in the body by the skin.
The dermis provides the epidermis with a solid support. This is also his nourishing element. It is mainly composed of dispersed fibroblasts in . a complex medium, called extracellular rüatrice, composed . mainly collagen fibers, elastin, hyaluronic acid and proteoglycans.
Collagen is the "cement" of the dermis. It gives the skin strength, resistance and ensures hydration (so its flexibility). Elastin brings elasticity and tone. Hyaluronic acid gives volume and participates in hydration.
As the days go by, the skin ages, which is manifested first by the appearance fine lines and wrinkles especially on the face and / or by sagging skin.
Aging first affects the epidermis whose thickness is reduced. The cell division power in its basal layer decreases and the deion time Renewal of the superficial horny layer extends.

2 La maturation de ces cellules est, imparfaite et la kératinisation n'aboutit plus à créer une couche cornée régulière . et homogène. On note concomitamment une désorganisation de la partie profonde de la peau, un ralentissement du renouvellement cellulaire ainsi qu'âne diminution de !a production de collagène et d'élastine.
Outre la cause chronobiologique du vieillissement, il~ existe également des causes dites externes telles que : le soleil, le tabac, le manque de sommeil, des régimes alimentaires déficients en vitamines.
On sait aussi que l'altération de la production hormonale (essentiellement les carences en oestrogènes) associées à la ménopause accentue le vieillissement cutané. Elle contribue à la diminution de collagène et d'élastine dans le derme et à l'amoindrissement du renouvellement des cellules de l'épiderme. La peau est ainsi moins souple, moins épaisse, avec une sensation de sècheresse et d'affaissement Les élëments structurants de la péau (collagène, élastine, kératine) sont les premiers responsables de notre apparence. En effet, les modifications du taûx d'élastine et des kératines ainsi que de la densité du réseau des collagènes sont résponsables de la perte d'élasticité, des rides et de l'affaissement de la peau. C'est en partie sur eux qu'agissent les produits .
cosmétiques.
Dépuis de nombreuses années, on conna?t des produits cosmétiques pour combattre le vieillissement de la peau. Toutefois aucun n'est satisfaisant à
ce jour.
Or de façôn surprenante, les inventeurs ont découvert q'un dërivé de biguanide, avantageusement la metformine, avait un effet anti-vieillissement et restructurant sur l'épiderme et le derme papillaire et donc sur 1a peau.
30, Des compositions pharmaceutiques à base de biguanides sont déjà
connues. Elles sont utilisées sous forme orale dâns ~ le traitement de certaines formes de diabète, et principalement du diabète du type II non 2 The maturation of these cells is imperfect and the keratinization is not successful more to create a regular stratum corneum. and homogeneous. We notice concomitantly a disorganization of the deep part of the skin, a slow cell renewal as well as a decrease in collagen and elastin production.
In addition to the chronobiological cause of aging, there are also so-called external causes such as: sun, tobacco, lack of sleep, diets deficient in vitamins.
It is also known that the alteration of hormonal production (essentially estrogen deficiency) associated with menopause accentuates the skin aging. It contributes to the decrease of collagen and of elastin in the dermis and the decrease in the renewal of cells of the epidermis. The skin is thus less flexible, less thick, with a feeling of drought and subsidence The structuring elements of the peel (collagen, elastin, keratin) are the first responsible for our appearance. Indeed, the modifications of the elastin and keratin levels and the density of the network of collagen are responsible for the loss of elasticity, wrinkles and the sagging of the skin. It is partly on them that the products act.
cosmetics.
For many years, we have known cosmetics for fight the aging of the skin. However, none is satisfactory this day.
Surprisingly enough, the inventors have discovered that one of the biguanide, advantageously metformin, had an anti-aging effect and restructuring on the epidermis and the papillary dermis and thus on the skin.
30, Pharmaceutical compositions based on biguanides are already known. They are used in oral form in the treatment of certain forms of diabetes, and mainly type II diabetes no

3 insulino-dépendant, comme agents antihyperglycémiants qui favorisent le retour à l'équilibre glycémique:w La metformine est le dérivé de biguanide lé plus utilisé dans ce type de traitement.
Ce médicament est administré par vôie orale sous forme de comprimés contenant 500, 850 mg ou 1 g de principe âctif.
La posologie journalière est comprise entre 1 ef 2 g.
L'évaluation clinique de la metformine en phase I a montré l'absence de toxicité de la molécule étudiée aux doses hypoglycémiantes. La tolérance au produit se révèle bonne, sa toxicité chronique quasi-nulle. II n'y a pas de modification de la croissance ni du comportement des animaux; la formule sanguine, l'urémie et les fonctions hépatiques ne sont pas altérées.
L'effet antihyperglycémique de la metformine serait dû d'une part à
l'augmentation de l'activité de l'insuline endogène et d'autre part à l'action de la metFormine à travers des mécanismes indépendants de l'insuline. En effet, l'action de la metFormine se traduit par la diminution de l'absorption intestinale du glucose, l'augmentation dé l'absorption cellulaire du glucose sanguin et la diminution de la production du glucose par le foie (suppression de la néoglucogenèse) ainsi que la quantité d'insuline nécessaire pour normaliser la glycémie. Ces effets résultent; en partie, du pouvoir de' la metformine à amplifier l'action de l'insuline existante par une augmentation de l'activité de l'enzyme tyrosine kinase du récepteur de l'insuline, ce qui déclenche la cascade de signalisation "post-récepteur".
La metformine est également connue dans des compositions topiques pour favoriser la cicatrisation et comme ayant une action angiogénique (FR 2 809 310).
De plus, certains dérivés de biguanides sont également connus comme ayant une action anti-inflammatoire (US 4 163 800).
Toutefois, aucun de ces documents ne décrit ni ne suggère que les dérivés de biguanides, en particulier la metformine, ont une action cosmétique anti-vieillissement et restructurant de l'épiderme et du derme papillaire et que 3 insulin-dependent, as antihyperglycemic agents that promote the back to glycemic equilibrium: w Metformin is the most used biguanide derivative in this type of treatment.
This medicine is given by oral tablet containing 500, 850 mg or 1 g of active principle.
The daily dosage is between 1 ef 2 g.
The clinical evaluation of metformin in phase I showed the absence of toxicity of the molecule studied at hypoglycemic doses. Tolerance the product is good, its chronic toxicity almost zero. There is no change in growth and behavior of animals; the formula blood, uremia and liver functions are not impaired.
The antihyperglycaemic effect of metformin is due on the one hand to increase in the activity of endogenous insulin and secondly to the action metFormine through mechanisms independent of insulin. In effect, the action of metFormine results in decreased absorption intestinal glucose, increased cellular glucose uptake blood glucose and the decrease in glucose production by the liver (suppression gluconeogenesis) and the amount of insulin required for normalize blood sugar. These effects result; in part, the power of 'the metformin to boost the action of existing insulin by increasing activity of the insulin receptor tyrosine kinase enzyme, which triggers the "post-receiver" signaling cascade.
Metformin is also known in topical compositions for promote healing and as having an angiogenic action (FR 2 809-310).
In addition, some biguanide derivatives are also known as having an anti-inflammatory action (US 4,163,800).
However, none of these documents describe or suggest that derivatives biguanides, in particular metformin, have an anti-aging and restructuring of the epidermis and papillary dermis and that

4 l'utilisation de composition les comprenant permettent, d'augmenter la production du collagène de type III dans le derme papillaire, de stimuler la prolifération des kératinocytes dans l'épiderme et/ou d'augmenter l'épaisseur de l'épiderme..
La présente invention concerne donc l'utilisation cosmétique d'un dérivé de biguanide de formule générale I suivante NH NH
R1~ II II
R2'N C-N-C-R3 H
(I) dans laquelle les groupes R1 et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C~-C7, un groupe cycloalkyle, un hétérocycle, un groupe alcényle en C2-C7, un groupe aryle, un groupe aralkyle, un groupe aryloxylalkyle ou un groupe hétéroaryle ou R1 et R~ pris ensemble représentent un alkylène en C2-C7 pouvant contenir un ou plusieurs hétéroatomes et le groupe R3 représente une amine primaire, secondaire ou tertiaire ou de son sel cosmétiquement acceptable à l'exception du composé de formule NH NH
CI ~ ~ N-C-N-C-N
H 9 H ~Z I
NH NH ~CH2)6 CI ~ ~ N-C-N-C-NH
H ~5 H
en tant qu'actif anti-vieillissement et restructurant de l'épiderme et du derme papillaire.

Par le terme de « groupe alkyle en C~-C7 », ôn entend au , sens de la présente invention tout groupe alkyle en C~-C~, .linéaire ôu ramifié, comme par exemple les groupes méthyle, éthyle, prôpyle, isôpropyle ~ôu butyle ainsi que leurs isomères. 4 the use of composition comprising them make it possible to increase the type III collagen production in the papillary dermis, to stimulate the proliferation of keratinocytes in the epidermis and / or increase the thickness of the epidermis ..
The present invention therefore relates to the cosmetic use of a derivative of biguanide of the following general formula I
NH NH
R1 ~ II II
R2'N CNC-R3 H
(I) in which the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C 1 -C 7 alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycle, a C2-C7 alkenyl group, an aryl group, a group aralkyl, an aryloxylalkyl group or a heteroaryl group or R1 and R ~ taken together represent C2-C7 alkylene may contain one or more heteroatoms and the group R3 represents a primary, secondary or secondary amine tertiary or its cosmetically acceptable salt with the exception of the compound of formula NH NH
NC ~ NCNCN
H 9 H ~ ZI
NH NH ~ CH2) 6 NC ~ NCNC-NH
H ~ 5 H
as an anti-aging and restructuring active ingredient of the epidermis and dermis Papillary.

By the term "C 1 -C 7 alkyl group", it is understood to mean, in the sense of the present invention any C -C alkyl group, linear or branched, such as for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl and than their isomers.

5 Par le terme de « groupe cycloalkyle », on entend au sens de la présente invention tout groupe c~cloalkyle contenant de 3 à 7 atomes de carbones, comme par exemple le groupe cyclohéxanyle.
Par le terme de « hétérocycle », on entend au sens de la présente invention tout cycle contenant de 3 à 7 atomes, un ou plusieurs d'entre eux étant un hétéroatome tel que par exemple l'atome d'azote, d'oxygène ou de soufre, les autres étant des atomes de carbones.
Par le terme de « groupe alcényle en C2-C7 », on entend au sens de la présente invention tôut groupe alcényle en C2-C~, linéaire ou ramifié tel que les groupes vinyle ou allyle.
Par le terme de « groupe âryle », on entend au sens de la présente invention tout groupe aromatique hydrocarboné tel que par exemple le groupe phényle, qui peut contenir un ou plusieurs substituants, Gommé par exemple, un groupe alkyle en C~-C7 tel que défini ci-dessus, un groupe alcényle en C2-C7 tel que défini ci-dessus, ou un halogène.
Par le termé de « groupe hétéroaryle », on entend au sens de la présente invention tout groupe aromatique hydrocarboné contenant un ou plusieurs hétéroatomes, tels que par exemple des atomes de soufre nitrogène ou oxygène, et pouvant porter un ou plusieurs substituants, comme par exemple, un groupe alkyle en C~-C~ tel que défini ci-dessus, un groupe alcényle en C2-C7 tel que défini ci-dessus, ou un halogène. Des exemples de groupes hétéroaryle sont les groupes furyle, isoxazyle, pyridyle, pyrimidyle.
Par le terme de « groupe alkylène en C2-C~ », on entend au sens de la présente invention'tout groupe alkylène en C2-C7 tels que par exernple les groupes éthylène, triméthylène, tétraméthylène ou pentaméthylène.
Pâr le terme « de sel cosmétiquement acceptable », on entend au sens de la présente invention tout sel préparé à partir de tout acide non toxique WO 2005/01156By the term "cycloalkyl group" is meant for the purposes of this invention any cl -alkyl group containing from 3 to 7 carbon atoms, as for example the cyclohexanyl group.
By the term "heterocycle" is meant within the meaning of the present invention any ring containing from 3 to 7 atoms, one or more of them being a heteroatom such as, for example, the nitrogen, oxygen or sulfur atom, the others being carbon atoms.
By the term "C2-C7 alkenyl group" is meant in the sense of the C2-C6 alkenyl group, linear or branched such as vinyl or allyl groups.
By the term "red group" is meant for the purposes of this invention any hydrocarbon aromatic group such as for example the phenyl group, which may contain one or more substituents, Gummed by For example, a C 1 -C 7 alkyl group as defined above, a group C2-C7 alkenyl as defined above, or halogen.
By the term "heteroaryl group" is meant for the purposes of this invention any hydrocarbon aromatic group containing one or more heteroatoms, such as, for example, nitrogen or nitrogen oxygen, and may carry one or more substituents, such as for example, a C 1 -C 6 alkyl group as defined above, a group C2-C7 alkenyl as defined above, or halogen. Examples of heteroaryl groups are furyl, isoxazyl, pyridyl, pyrimidyl.
By the term "alkylene group C2-C ~" is meant in the sense of the C2-C7 alkylene group such as, for example, ethylene, trimethylene, tetramethylene or pentamethylene groups.
By the term "cosmetically acceptable salt" is meant in the sense of the present invention any salt prepared from any non-toxic acid WO 2005/01156

6 PCT/FR2004/002039 cosmétiquement acceptable, y compris les acides organiques et inorganiques. De tels âcides incluent. l'acide acétique, benzènesulfonique, benzoïque, citrique, éthanesulfonique, fumarique, gluconique, glutamique, bromhydrique, chlorydrique, lactique, maléfique, malique, mandélique, méthanesulfonique, mucique, nitrique, pamoique, pantothénique, phosphorique, succinique, tartarique et paratoluènesulfonique.
Avantageusement, on utilise l'acide chlorhydrique..
Dans un mode de réalisation de l'invention, le dérivé de biguanide selon la présente invention est utilisé pour augmenter la production du collagène de type 111 dans le derme papillaire, pour stimuler la prolifération des kératinocytes dans l'épiderme etlou pour augmenter l'épaisseur de l'épiderme.
De façon avantageuse, ce dérivé de biguanide a un effét tenseur et/ou raffermissant sur la peau.
II est également utilisé pour prévenir, diminuer et/ou supprimer l'apparition de rides sur la peau.
Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le groupe R3 représente l'amine secondaire de formule suivante -N
N C-N-O H
Dans un mode avantageux de réalisation de l'invention, le groupe R3 représente NH2.
Dans un autre mode de réalisation de l'invention, les groupes R1 et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C~-C7.
Avantageusement, le dérivé de biguanide est la metformine, de façon encore plus avantageuse sous la fôrme d'un chlorhydrate. 6 PCT / FR2004 / 002039 cosmetically acceptable, including organic acids and inorganic. Such acids include. acetic acid, benzenesulfonic acid, benzoic, citric, ethanesulfonic, fumaric, gluconic, glutamic, hydrobromic, hydrochloric, lactic, maleficent, malic, mandelic, methanesulfonic, mucic, nitric, pamoic, pantothenic, phosphoric, succinic, tartaric and para-toluenesulfonic.
Advantageously, hydrochloric acid is used.
In one embodiment of the invention, the biguanide derivative according to The present invention is used to increase the production of collagen type 111 in the papillary dermis, to stimulate the proliferation of keratinocytes in the epidermis and / or to increase the thickness of the epidermis.
Advantageously, this biguanide derivative has a tensor and / or firming on the skin.
It is also used to prevent, diminish and / or suppress the appearance wrinkles on the skin.
In a particular embodiment of the invention, the group R3 represents the secondary amine of the following formula -NOT
N CN-OH
In an advantageous embodiment of the invention, the group R3 represents NH2.
In another embodiment of the invention, the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom or a C 1 -C 7 alkyl group.
Advantageously, the biguanide derivative is metformin, so even more advantageous in the form of a hydrochloride.

7 En particulier, le dérivé peut être présent sous la forme d'âne composition cosmétique à usage local, avantageusement du type huile, crème, mousse, liniment, lotion, pommade, liquide, gel, lait ou « spray ». Les formes peuvent .
être à véhicule monophasique constituées d'un gel neutre d'hydroxypropylcellulose ou d'un gel chargé. formé ' de carboxyméthylcellulose de sodium. On peut également préparer des crèmes, formes à véhicule biphasique, comportant une phase hydrophile dispersëe dans une phase lipophile.
Avantageusement, cette composition contient de 0,02 à 2% en poids du dérivé de biguanide de formule générale 1 ou de son sel cosmétiquement acceptable et un excipient approprié. Ces excipients peuvent être choisis parmi des composés présentant une bonne compatibilité avec ce principe actif. II s'agit par exemple des polymères hydrosolubles de type polymère naturel, tels les pofysaccharides (gomme xanthane, gomme de caroube, peptine...) ou polypeptides, des dérivés cellulosiques type méthylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropyl-méthylcellulose ou encore des polymères synthétiques, polaxamers, carbomers, PVA ou PVP.
Enfin, il , est à la portée de tout homme de l'art d'ajouter dans cette composition cosmétique divers excipients type cosolvant comme l'éthanol, le glycérol, l'alcool benzylique, des humectants (glycérol), des agents facilitant la diffusion (transcurol, urée), ou encore des conservateurs anti-bactériens (p-hydroxybenzoate de méthyle à 0,15%). Elle peut également contenir des agents tensioactifs, des agents stabilisants, des émulsifiants, des épaississants, d'autres principes actifs conduisant à un effet complémentaire ou éventuellement synergique, des oligo-éléments, des huiles essentielles, des parfums, des colorants, du collagène, des filtres chimiques ou minéraux, des agents hydratants ou des eaux thermales.
Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le dérivé de biguanide ou son sel cosmétiquement acceptable est combiné avec au moins un autre principe actif.

ô
Lâ présente invention concerne également un procédé dé traitement cosmétique du vieillissement de la peau par application d'une composition comprenant un dérivé de biguanide de formule générale I suivante NH NH
.R1~ II II
~~N-C-N-C-R3 H
dans laquelle les groupes R1 et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C~-C7, un groupe cycloalkyle, un hétérocycle, un groupe alcényle en C~-C7, un groupe aryle, un groupe aralkyle, un groupe aryloxylalkyle ou un groupe hétéroaryle ou R1 et R2 pris ensemble représentent un alkylène en C2-C7 pouvant contenir un ou plusieurs hétéroatomes et le groupe R3 représente une amine primaire, secondaire ou tertiaire ou de son sel cosmétiquement acceptable à l'exception du composé de formule NH NH
CI ~ ~ N-C-N-C-N
H 9 H ~~ I
NH NH (CH2)s CI ~ ~ N-C-N-C- INH
H as H 2a Les exemples ci-après de compositions selon l'invention et d'étude d'activité
sont donnés à titre d'illustration et sans caractère limitatif.
EXEMPLES
Plusieurs . formes -phârmaceutiques ônt été préparés sans. agent conservateur. Les pourcentages sont exprimés en poids.

Exemple de formulation 1 Metformine : 1 %.
Gel neutre d'hydroxypropylcellulose (Klucel d'Aqualon type 99 MF EP) à
2,9% : complément à 100%.
Exemple de formulation 2 Metformine : 1 %.
Gel chargé de carboxyméthylcellulose de sodium (Aqualon) à 4,5%
complément à 100%.
Exernale de formulatïon 3 Metformine : 1 % en poids par rapport à la phase lipophile.
Émulsion d'hydrocérine (excipient gras de chez Roc~ contenant de la vaseline, de l'huile de paraffine, des triglycérides, des éthers de polyoxyéthylène et de la cérisine) à 33% (H/L) :- complément à 100%.
ÉTUDE DE L'ACTIVITÉ RESTRUCTURANTE ET ANTI-AGE D'UNE
POMMADE GOMPRENANT LA METFORMINE.
Cette étude a pour but d'évaluer l'activité restructurante et anti-âge d'une pommade contenant de la metformine à 1 % (exemple de formulation 3) par l'éxamen de la morpho¿ogie générale suite à la coloration panoptique et par l'évaluation du nombre de kératinocytes en mitoses et de la densité du collagène III par immunomarquages.
Mode Oaérafoire Préparation des expiants Sur une plastie cutanée mammaire, dégraissée, provenant d'une femme de 59 ans, 39 expiants sont préparés et mis en survie en milieu de culture.
. Ils .sont répartis en 3 lots (pommade, excipient seul, témoin sans traitement) de 12 expiants et 1 lot de 3 expiants.

Application des produits Les produits à tester (pommade et excipient seul) sont appliqués par voie topiqué sur les expiants à raison dé 4 mg par expiant, pendant 10 jours, les lots non traités ne recevant aucun traitement.

Histologie Au temps T0, 3 expiants sont prélevés et sont, soit fixés (Bouin ordinaire) soit congelés. Au temps J3, J5, J7 et J10, 3 expiants de chaque lot sont prélevés et traités comme précédemment.
L'étude histologique est réalisée - sur coupes fixées en paraffine pour l'observation de la morphologie génërale après coloration au trichrome de Masson, - sur coupes congélées pour les immunomarquages suivants 1. Immunomarquage de cellules en mitoses âvec l'anticorps monoclonal anti=Ki 67 (clone 7811 ) avec les noyaux contre-colorés à l'iodure de propidium.
II, immunomarquage du collagène de type III avec l'anti-corps polyclonal anti-collagène III révélé en DAB (produit révélateur chromogène de l'imrriunomarquage).
Résultats 1. Morphologïe générale Les modifications de la structure cutanée ont été recherchées dans les différents compartiments, épiderme, jonction dermo-épidermique (JDE) et derme papillaire.
Les observations réalisées sur l'ensemble des expiants montrent que l'application de la pommade contenant la metformine induit une stimulation de la structure épidermique qui se traduit par une augmentation de son épaisseur et par un relief plus important dé la JDE. Cela représente une image destructure épidermique plus jeune. En effet, une nette réaction d'acanthose (augmentation de l'épaisseur de l'épiderme) épidermique avec une épaisseur jusqu'à 6 à 7 assises cellulaires est observée à partir de J5 de traitement pour le lot ayant reçu la pommade contenant la metformine. II
faut souligner que l'excipient seul ne manifeste aucun effet sur la structure cutanée des expiants traités.
2. Index mitotigues des kératinocytes.
Les kératinocytes en mitoses, marqués par fanti-Ki 67, ont été comptés sur toute la longueur de l'épiderme sur les coupes réalisées.
L'index mitotique, établi avec des valeurs obtenues, est deux fois plus important à J5 dans les expiants traités avec la pommade contenant la metformine par rapport aux expiants témoins et traités avec l'excipient.
D'autre part, les valeurs de l'index mitotique à J5 avaient augmenté de 25%
dans les expiants traités par rapport à celles mesurées à J3.
A J7 et à J10, cet index correspond aux valeurs normâles pour des expiants à ce stade de survie.
Ces données indiquent clairement que l'application de la pommadé
contenant la metformine stimule la prolifération des kératinocytes, surtout aprës 5 jours de traitement. Cette observation est parfaitément en corrélation avec l'acanthose visualisée au méme temps.
3. Densité du collagène de fype III
Le marquage du collagène de type III a permis d'examiner son expression dans le derme papillaire et le long de la JDE. Les résultats obtenus ' montrent que déjà à J3, dans .le lot d'expiants ayant reçu la pommade contenant la metformine, le marquage dû collagène est légèrement plus net le long de la JDE par rapport à celui visualisé dans les expiants non traités ef traités avec l'excipient.
A J5 jusqu'à J10! le marquage dans le lot d'expiants ayant reçu la pommade est plus nét dans le derme papillaire et surtout le long de la JDE.
Ces résultats montrent que l'application de la pommâde contenant la metformine induit une augmentation de l'expression du collagène de type III
dans le derme papillaire et surtout fe long de la JDE. Cette surexpression atteint son maximum à J7 et est encore bien présente à J10.
Conclusion L'application, sur des expiants de peau humaine, de la pommade contenant la metformine à 1 % pendant 10 jours induit une augmentation de l'épaisseur de l'épiderme, phënomène plus visible après 5 jours de traitement mais encore très nettement détectable à J7 et J10.
Cette acanthose est confirmée pour une augmentation de l'index mitotique de kératinocytes qui donne à J5 pour la pommade des valeurs doubles de celles relevées avec le témoin et l'excipient et avec une augmentation de l'ordre d'environ 25 % par rapport à J3. Cet index revient, à J7 et J10, à des valeurs normales.
La pommade contenant de la metformine induit également une augmentation de l'expression du collagène de type III dans le derme papillaire et le long de la JDE qui atteint son maximum à J7, et reste très visible à J10.
L'ensemble de ces observations traduit une stimulation de la structure épidermique ainsi que la restructuration de l'épiderme et du derme papillaire par la metformine. Ces types de modifications représentent des critères d'une peau plus jeune. 7 In particular, the derivative may be present in the form of donkey composition cosmetic for local use, advantageously of the oil, cream, foam type, liniment, lotion, ointment, liquid, gel, milk or "spray". Shapes can .
be a monophasic vehicle consisting of a neutral gel hydroxypropylcellulose or a charged gel. made of sodium carboxymethylcellulose. We can also prepare creams, two-phase vehicle forms, having a hydrophilic phase dispersed in a lipophilic phase.
Advantageously, this composition contains from 0.02 to 2% by weight of biguanide derivative of general formula 1 or its cosmetically acceptable and a suitable excipient. These excipients can be chosen among compounds with good compatibility with this principle active. These are, for example, water-soluble polymers of the polymer type such as pofysaccharides (xanthan gum, locust bean gum, peptin ...) or polypeptides, cellulosic derivatives such as methylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropyl methylcellulose or synthetic polymers, polaxamers, carbomers, PVA or PVP.
Finally, it is within the reach of any man of the art to add in this cosmetic composition various cosolvent type excipients such as ethanol, glycerol, benzyl alcohol, humectants (glycerol), facilitating diffusion (transcurol, urea), or anti-inflammatory bacterial (0.15% methyl p-hydroxybenzoate). It can also contain surfactants, stabilizing agents, emulsifiers, thickeners, other active ingredients leading to an effect complementary or possibly synergistic, trace elements, essential oils, perfumes, dyes, collagen, filters chemicals or minerals, moisturizers or thermal waters.
In a particular embodiment of the invention, the derivative of biguanide or its cosmetically acceptable salt is combined with less another active ingredient.

oh The present invention also relates to a method of treatment cosmetic skin aging by application of a composition comprising a biguanide derivative of the following general formula I
NH NH
.R1 ~ II II
~~ NCNC-R3 H
in which the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C 1 -C 7 alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycle, a C 1 -C 7 alkenyl group, an aryl group, a group aralkyl, an aryloxylalkyl group or a heteroaryl group or R1 and R2 taken together represent C2-C7 alkylene may contain one or more heteroatoms and the group R3 represents a primary, secondary or secondary amine tertiary or its cosmetically acceptable salt with the exception of the compound of formula NH NH
NC ~ NCNCN
H 9 H ~~ I
NH NH (CH2) s NC ~ NCNC-INH
H as H 2a The following examples of compositions according to the invention and activity study are given by way of illustration and without limitation.
EXAMPLES
Many . morphological forms have been prepared without. agent Conservative. The percentages are expressed by weight.

Formulation example 1 Metformin: 1%.
Hydroxypropylcellulose neutral gel (Klucel of Aqualon type 99 MF EP) to 2.9%: 100% supplement.
Formulation example 2 Metformin: 1%.
Gel loaded with sodium carboxymethylcellulose (Aqualon) 4.5%
100% complement.
Exernal formulation 3 Metformin: 1% by weight relative to the lipophilic phase.
Hydrocerin emulsion (excipient fat from Roc ~ containing petrolatum, paraffin oil, triglycerides, ethers of polyoxyethylene and cerisine) at 33% (H / L): - 100% complement.
STUDY OF THE RESTRUCTURING AND ANTI-AGING ACTIVITY OF A
OINTMENT COMBINING METFORMIN.
This study aims to evaluate the restructuring and anti-aging activity of a ointment containing 1% metformin (formulation example 3) by the examination of general morphology following panoptic staining and by evaluation of the number of keratinocytes in mitosis and the density of the collagen III by immunostaining.
Oaérafoire mode Preparation of the explants On a breast skin plasty, degreased, from a woman of 59 years, 39 explants are prepared and put in survival in culture medium.
. They are divided into 3 batches (ointment, excipient alone, control without treatment) of 12 expiants and 1 lot of 3 expiants.

Application of products The test products (ointment and excipient alone) are applied topically on the explants at the rate of 4 mg per expierant, for 10 days, the untreated lots receiving no treatment.

Histology At time T0, 3 explants are taken and are either fixed (ordinary Bouin) be frozen. At time J3, J5, J7 and J10, 3 expiants of each lot are collected and treated as before.
The histological study is carried out - on paraffin sections for the observation of morphology general after Masson trichrome staining, - on frozen sections for the following immunolabelings 1. Immunolabeling mitotic cells with antibody monoclonal anti = Ki 67 (clone 7811) with the nuclei counter-stained with propidium iodide.
II, immunolabeling of type III collagen with the anti-body polyclonal anti-collagen III revealed in DAB (revealing product chromogen of the printing).
Results 1. General Morphology Changes in the cutaneous structure have been sought in the different compartments, epidermis, dermo-epidermal junction (DEJ) and papillary dermis.
The observations made on all the explants show that the application of metformin-containing ointment induces stimulation of the epidermal structure which results in an increase of its thickness and by a larger relief of the JDE. This represents a image epidermal destructure younger. Indeed, a clear reaction acanthosis (increased thickness of the epidermis) epidermal with a thickness up to 6 to 7 cell layers is observed from J5 treatment for the lot having received the ointment containing metformin. II
It must be emphasized that the excipient alone has no effect on the structure dermal treated explants.
2. Mitotigated index of keratinocytes.
Mitotic keratinocytes, labeled with fanti-Ki 67, were counted on the entire length of the epidermis on the cuts made.
The mitotic index, established with values obtained, is twice more important at day 5 in explants treated with the ointment containing the metformin compared to control explants and treated with the excipient.
On the other hand, the values of the mitotic index at D5 had increased by 25%
in the explants processed compared to those measured on D3.
At J7 and J10, this index corresponds to normal values for explants at this stage of survival.
These data clearly indicate that the application of the pomade containing metformin stimulates the proliferation of keratinocytes, especially after 5 days of treatment. This observation is perfectly in correlation with acanthosis visualized at the same time.
3. Density of Fype III collagen The labeling of collagen type III allowed to examine its expression in the papillary dermis and along the JDE. The obtained results ' show that already at day 3, in the lot of expants who received the ointment containing metformin, collagen labeling is slightly more distinct along the JDE compared to the one visualized in the untreated expiants ef treated with the excipient.
At D5 until D10! marking in the lot of expants that received the ointment is more secret in the papillary dermis and especially along the JDE.
These results show that the application of the pommade containing the metformin induces an increase in type III collagen expression in the papillary dermis and especially along the EDJ. This overexpression reaches its maximum at J7 and is still present at J10.
Conclusion The application, on explants of human skin, of the ointment containing 1% metformin for 10 days induces an increase in the thickness of the epidermis, phenomene more visible after 5 days of treatment but still very clearly detectable on D7 and D10.
This acanthosis is confirmed for an increase of the mitotic index of keratinocytes which gives J5 for the ointment double values of those recorded with the control and the excipient and with an increase in about 25% compared to J3. This index returns, on J7 and J10, to normal values.
The ointment containing metformin also induces a increased expression of type III collagen in the dermis papillary and along the JDE that reaches its maximum at J7, and remains very visible at J10.
All of these observations reflect a stimulation of the structure epidermal and restructuring of the epidermis and papillary dermis by metformin. These types of modifications represent criteria a younger skin.

Claims

1. Cosmetic Use of a Formula Biguanide Derivative following general I:

in which:
the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C1-C7 alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycle, a C2-C7 alkenyl group, an aryl group, a group aralkyl, an aryloxylalkyl group or a heteroaryl group or R1 and R2 taken together represent C2-C7 alkylene may contain one or more heteroatoms and the group R3 represents a primary, secondary or secondary amine tertiary or its cosmetically acceptable salt with the exception of the compound of formula as an anti-aging and restructuring active ingredient of the epidermis and dermis Papillary.

2. Use according to claim 1 to increase the production type III collagen in the papillary dermis, to stimulate proliferation of ketatinocytes in the epidermis and / or to increase the thickness of the epidermis.

3. Use according to any one of the preceding claims to prevent, diminish and / or suppress the appearance of wrinkles on the skin.

4. Use according to any one of the preceding claims for its tightening effect and / or firming on the skin.

5. Use according to any one of the preceding claims characterized in that the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom or an alkyl group in C1-C7.

6. Use according to any one of the preceding claims characterized in that the group R3 represents NH2.

7. Use according to claim 6characterized in that the derivative biguanide is metformin, advantageously in the form of a hydrochloride.

8. Use according to any one of the preceding claims taken separately characterized in that the biguanide derivative is in the form of a cosmetic composition for local use.

9. Use according to claim 8 characterized in that the composition contains from 0.02 to 2% by weight of the biguanide derivative or its cosmetically acceptable salt and a suitable excipient.

10. Use according to any one of the claims characterized in that the biguanide derivative or its salt cosmetically acceptable is combined with at least one other principle active.

11. Cosmetic treatment method of aging of the skin by applying a composition comprising a biguanide derivative of following general formula I:

in which:

the groups R1 and R2 represent, independently of one another, a hydrogen atom, a C2-C7 alkyl group, a cycloalkyl group, a heterocycle, a C2-C7 alkenyl group, an aryl group, a group aralkyl, an aryloxylalkyl group or a heteroaryl group or R1 and R2 taken together represent C2-C7 alkylene may contain one or more heteroatoms and the group R3 represents a primary, secondary or secondary amine tertiary or its cosmetically acceptable salt with the exception of the compound of formula