CA2290510A1 - Procede et trousse pour la detection de mutations dans des adn a l'aide d'enzymes de restriction - Google Patents
Procede et trousse pour la detection de mutations dans des adn a l'aide d'enzymes de restriction Download PDFInfo
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Abstract
L'invention concerne un procédé offrant la possibilité de détecter des mutations dans des ADN à l'aide d'enzymes de restriction, l'hypothèse étant qu'à cette occasion, la tenue à la coupure de l'enzyme de restriction choisie se modifie en raison de la mutation. Le segment d'ADN correspondant dans le génome, qui contient la mutation, est dupliqué par amplification en chaîne par polymérase (ACP), les amorces utilisées étant respectivement marquées. La première amorce permet la fixation du segment sur une surface porteuse, le marqueur de la deuxième amorce étant utilisé pour permettre la détection. Une enzyme de restriction est incubée avec l'amplicon obtenu par ACP, le segment muté n'étant pas coupé si le site de coupure est supprimé par la mutation. Une réaction de détection intervient après la fixation des segments sur une surface porteuse, et le marqueur de la deuxième amorce est éliminé dans le type sauvage, tandis qu'on peut l'identifier chez le mutant. On peut donc avoir une pluralité de marqueurs qui permettent une détection directe ou indirecte. On dispose ainsi d'un procédé rapide pour déceler certaines mutations dans le génome sans devoir recourir à des méthodes traditionnelles dispendieuses.
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