BRPI1104336A2 - composição de suplemento nutricional para avestruz, método de preparação de uma composição de suplemento nutricional para avestruz e método para a manutenção de um grupo de avestruzes - Google Patents

Abstract

composição de suplemeno nutricional para avestruz, método de preparação de uma. composição de suplemento nutricional para avestruz e método para a manutenção de um grupo de avestruzes. a invenção fornece uma composição de suplemento nutricional para avestruz que inclui pela menos uma cepa bacteriana selecionada entre lactobacillus oris, lactobadfllus brevis, lactobacillus johnsonii, bifidobacterium pseudolongun subsp. globosum e enterococcus faecalis. o lactobacilius oris é normalmente de uma cepa que foi designada lo59, o lactobacílius brevis é normalmente de uma cepa que foi designada lb512, o lactobacillus johnsonii é normalmente de uma cepa que foi designada lj136, o bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum é normalmente de uma cepa que foi designada bg136, e o enterococcus faecalis é normalmente de uma cepa que foi designada p1.2. as bactérias podem ser obtidas a partir do trato gastrointestinal ou a partir de amostras de fezes de avestruzes saudáveis.

Description

COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA

AVESTRUZ, MÉTODO- DE PRE PARAÇÃQ_DF. UMA COMPOSIÇÃO_______DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ E MÉTODO PARA A MANUTENÇÃO DE UM GRUPO DE AVESTRUZES Campo Da Invenção A presente invenção refere se a um suplemento nutricional para avestruzes.

Antecedentes Da Invenção A criação de avestruz é uma indústria que cresce rapidamente em todo o inundo. Um dos grandes problemas enfrentados pela indústria é a mortalidade dos filhotes de avestruz, que pode ser superior a 50% nos primeiros três meses. Uma causa de morte predominante é infecções patogênicas do trato gastrointestinal, O tratamento com antibióticos, muitas vezes resulta no desenvolvimento de patógenos resistentes e impede a invasão da microflora intestinal protetora ocorrência natural nas aves jovens, e há também preocupações quanto aos resíduos de antibióticos na carne de avestruz destinada ao consumo humano. Existe, portanto, a necessidade de um produto alternativo para substituir os antibióticos convencionais atualmente disponíveis.

Foi demonstrado a partir de trabalhos com aves que a nutrição neonatal aumenta o desenvolvimento normal do trato intestinal e estimula o desenvolvimento imunológico. A nutrição pode, portanto, desempenhar um papel fundamental na criação de filhotes de avestruz, mas os conhecimentos sobre as exigências nutricionais dos avestruzes ainda não estão bem definidos.

Os probióticos são suplementos nutricionais microbianos vivos que, quando administrados em quantidades suficientes, conferem um beneficio para saúde do animal hospedeiro, em geral, melhorando seu equilíbrio intestinal.

Parece que a microbiota intestinal frequentemente está envolvida—com—a—seaistência a doenças em animais de criação. As condições de estresse sofridas pelo animal jovem nas práticas agrícolas modernas provocam alterações na composição e atividade da microbiota intestinal. A suplementação com probióticos pode em alguns casos, ajudar a restaurar o equilíbrio e fornecer o tipo de microbiota encontrada em ambientes mais naturais, os probióticos bacterianos têm se mostrado eficazes em suínos, bovinos e bezerros pré-ruminantes. Ά razão pelo qual os probióticos melhoram com sucesso a saúde de alguns animais de criação é multifatorial. Acredita-se que o principal efetor deste efeito benéfico seja devido à exclusão competitiva, em que a colonização do intestino pela microbiota comensal impede a adesão e o sucesso de estabelecimento das cepas patogênicas. A maioria dos probióticos é membro do grupo de bactérias produtoras de ácido lático <LAB), incluindo as espécies Lactobacillus, Bifidobacteríum e Enterococcus, Estas bactérias produzem uma variedade de substâncias, incluindo ácidos orgânicos, peróxido de hidrogênio ou bacteriocinas que são substancias inibitórias para bactérias tanto gram-positivas como gram-negatívas. Foi demonstrado recentemente que algumas espécies de LABs são essenciais para o desenvolvimento normal do epitélio intestinal e do sistema imunológico, modulando os sistemas de defesa inato do intestino.

Entretanto, nem todas as cepas de LABs são aditivos nutricionais eficazes, e os probióticos parecem não ser eficazes em todos os animais. A pesquisa demonstrou que a eficácia das bactérias probíótícas, e os benefícios para a saúde que estas bactérias geram, é específica do hospedeiro. Por exemplo, há resultados contraditórios sobre se o desempenho do crescimento de aves domésticas, especi f icamente-frangos,___é melhorada^ pelo uso de probióticos (Arslan C·., Turkãsh Journal of Veterinary and Animal Sciences, 2004, Vol. 28, pãgs. 887-891; Gri L.R. et al. , Arch. Geflugelk, 2008, Vol. 72(3), págs. 136-139; Iji P.A., Australian Journal of Experimental Agriculture, 2008, Vol. 48, págs. 1280-1283). A pesquisa realizada sobre a nutrição de avestruzes, especialmente sobre a suplementação nutricional, é limitada, mas parece que as dietas desenvolvidas para aves domésticas não têm sido aplicadas com sucesso para os avestruzes, possivelmente pelo fato dos avestruzes possuírem dietas diferentes quando a natureza (por exemplo, consumo de fibras diferentes) , e sistemas digestivos diferentes e diferente utilização dos nutrientes. Portanto, é provável que os probióticos que são eficazes para as aves domésticas não são, necessariamente, eficazes para os avestruzes.

Obj eto Da Invenção Um objeto da presente invenção é fornecer um suplemento nutricional que alivie, pelo menos parcialmente, os problemas mencionados acima.

Descrição Resumida da Invenção De acordo com um primeiro exemplo de realização da invenção, é fornecida uma composição cLe suplemento nutricional para avestruz que compreende pelo menos uma bactéria selecionada entre Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus j ohnsonii, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis. A bactéria Lactobacillus oris pode ser a cepa designada como Lo59f o Lactobacillus brevis pode ser a cepa designada Lb512, o Lactobacillus johnsonii pode ser a cepa designada Ljl36, O Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum pode ser a cepa designada Bgl36 e/ou o EnbêTUUUuuus—designada PI. 2. A composição pode incluir pelo menos duas, pelo menos três, pelo menos quatro ou todas as cinco bactérias dentre Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium pseudolcngum subsp, globosum e Enterococcus faecalis. A composição pode incluir cerca de 109 ufc das bactérias acima. A composição pode também incluir outros aditivos e pode ser liofilizada ou microencapsulada em esferas de alginato. A composição pode ser misturada em uma ração para avestruz. A composição pode ser para melhorar a condição física de avestruzes e/ou para reduzir a mortalidade dos avestruzes.

De acordo com uma segunda realização da invenção, é fornecido um método de preparação de uma composição de suplemento nutricional para avestruz, conforme descrito anteriormente, compreendendo o dito método as etapas de; suspensão de células bacterianas da bactéria da composição em 5% de leite desnatado; e liofilização das células bacterianas ou microencapsulamento das células para formar esferas de alginato.

De acordo com uma terceira realização da invenção, é fornecido um método para a manutenção de um grupo de avestruzes, compreendendo o dito método a etapa de administrar uma composição, tal como a descrita acima, para os avestruzes no grupo.

Breve Descrição Da Figura A Figura 1 é um gráfico que indica o ganho de peso dos filhotes de avestruz durante os ensaios de alimentação usando o suplemento nutricional da presente invenção'.

Descrição Detalhada Da Invenção É fornecido um suplemento nutricional para avestruzes, que inclui pelo menos uma bactéria selecionada a partir de, Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bífídobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalls, para formar uma composição probiótica. 0 Lactobacillus oris ê normalmente de uma cepa que foi designada Lo59r o Lactobacillus brevis é normalmente de uma cepa que foi designada Lb512, o Lactobacillus johnsonii é normalmente de uma cepa que foi designada Ljl36, o Bífídobacterium pseudolongum subsp. globosum é normalmente de uma cepa que foi designada Bgl36f e o Enterococcus faecalls é normalmente de uma cepa que foi designada PI,2. As bactérias podem ser obtidas a partir do trato gastrointestinal ou a partir de amostras de fezes de avestruzes saudáveis, que representam a microbiota autóctone do avestruz.

As amostras dessas cepas bacterianas foram depositadas com base nos termos do Tratado de Budapeste sobre o Reconhecimento Internacional do Depósito dos Microorganismos para fins de Processos de Patentes na Coordenação Belga de Coleções de Micro-organismos (BCCM/LMG), Gent, 19 de Agosto 2011 e foram alocadas sob os números de acesso apresentados na Tabela 1. A composição da invenção pode incluir qualquer uma, duas, três, quatro ou todas as cinco bactérias dentre Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bífídobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalls, em proporções iguais ou diferentes de cada cepa. A composição também pode incluir outros aditivos, tais como leite desnatado,· alginato, antibióticos, cianocob a 1 aiitina,— B-biotina,-ác i_do_ Jõ-pantotênico, àci do fólico, L-ascorbil-2-polifosfato, mío-inositol, niacina, ácido p-amino-benzóico, cloridrato de piridoxina, ríboflavina, cloridrato de tiamina ou cloreto de colina. A composição pode ser formulada como um pó, liquido, pastilha, comprimido ou esferas (grânulos), ou sob qualquer outra formulação adequada para administração a um avestruz, ou como uma mistura para a adição na ração do avestruz. A pastilha, comprimido ou grânulo pode conter aproximadamente 109 ufc das bactérias acima. A composição pode resultar na melhoria da condição fisica dos avestruzes, tais como ganho de peso, melhoria da saúde dos avestruzes, por exemplo, menos infecções intestinais, e/ou redução da mortalidade dos avestruzes, especialmente filhotes de avestruz. A presente invenção será agora descrita em maiores detalhes pelo seguinte exemplo não limitante.

Exemplo PropÕe-se que as bactérias probióticas exerçam seus efeitos benéficos de uma ou mais formas. Em primeiro lugar, para que elas chegassem ao intestino grosso do avestruz em um estado metabolicamente ativo, viável, as bactérias têm de ser capazes de sobreviver pela passagem através do estômago extremamente ácido (pH ca. 2.0) e do intestino delgado, onde a concentração de bile pode atingir altas concentrações. As bactérias probióticas devem, portanto, ter uma boa tolerância ao ácido e bile nas concentrações encontradas. Em segundo lugar, elas devem ser capazes de colonizar o animal hospedeiro de maneira eficaz, a fim de perdurarem e produzirem um efeito benéfico, e isso significa que elas devem ser capazes de se aderirem a qualquer célula do epitélio intestinal ou mucosa que reveste o intestino. As bactérias podem também auxiliar a ctig^atão—do—aniíftal—hospedeiro-,__produzindo enzimas que ajudam a digerir o material no intestino. No caso do avestruz, a dieta é composta principalmente de fibras vegetais indigestas, e as enzimas benéficas são, portanto, celulases, xilanases e pectinases, todas as quais liberam cadeias curtas de polissacarideos na luz intestinal, que podem ser absorvidas pelas células epiteliais diretamente ou então ainda digeridas pelas enzimas das próprias aves. Por último, algumas bactérias produzem compostos que são prejudiciais para os potenciais agentes patogênicos, tais como o ácido lático, butirato e outros compostos antimicrobianos que inibem o crescimento de patógenos e permitem que os probióticos possam vencer a competição contra os patógenos.

Isolamento E Seleção De Cepas Probióticas Foi realizado um levantamento da microbiota cultivável do intestino posterior de avestruzes adultos saudáveis e filhotes de avestruz de diferentes idades criados com diferentes suplementos nutricionais. Foram isoladas diferentes cepas de bactérias Lactobacillus, Bifidobacterium e Entexococcus com potencial probiótico a partir do trato gastrointestinal ou a partir de amostras de fezes dos avestruzes.

As cepas foram caracterizadas com relação à suas capacidades de degradação de fibra, capacidade de suportar as duras condições do intestino e de colonizar o intestino, bem como a sua segurança microbiana (todos os resultados não são mostrados). Foram selecionadas cinco cepas para testes adicionais como possíveis probióticos candidatos (Tabela 1).

Tabela 1 Cepas Isoladas Selecionadas Para Testes Como Probiótico Para Avestruz Essas cepas são todas anaeróbias e pode crescei bem no intestino de avestruzes, onde as condições sãc altamente anaeróbias. No entanto, verificou-se que elas sãc razoavelmente aerotolerantes e podem sobreviver no ar por várias horas. Isso significa que elas permanecem viáveis enquanto estão sendo cultivadas e preparadas para ε administração para os avestruzes, e ainda estarian metabolicamente ativas no intestino do avestruz. A Tabela 2 resume as características das cincc cepas selecionadas. Todas as cepas foram capazes de aderir a levedura e autoagregar - indicativo de boa capacidade de adesão da célula. Além disso, três das cepas exibiran excelente adesão à mucosa. Todas as cepas apresentaram bog tolerância às condições ácidas e sais biliares. Três das cepas foram encontrados por inibirem o crescimento de cepas indicadoras, incluindo clostrídios, que podem contribuir para a enterite em filhotes de avestruz. Todas as cincc cepas selecionadas também produzem pelo menos duas enzimas ex t r a celxd a re s,—que—pode—agaidar_na nutrição, degradando compostos indigeriveis e liberando produtos que são digeríveis pelo hospedeiro.

Tabela 2 Características Probióticas Para A Seleção De Cepas a: + símbolos indicam o aumento da aglutinação, conforme definido pelo tamanho dos agregados celulares determinados por microscopia.

b: % ligação em relação ao L. rhamnosus GG c: Inibição do crescimento de cepas indicadoras Escherichia coli ATCC 25922 (E. coli), Salmonella typhímurlum (S, typh), Staphylococcus aureus {S. aur) , Enterococcus faecíum vans (E. faec) , Clostridium perfringens (C. perf) or Clostridium botulinum (C. bot). d: S indica a sensibilidade; R indica resistência, ou a capacidade “de crescera um pH de 3.__________________ e: S indica a sensibilidade; R indica resistência, ou a capacidade de crescer em presença de 1 % bile de boi. f: Produção de amylase (amil), cellulose (cel), pectinase (pect), fitase (fit) , protease (prot) ou xilanase (xil). Preparação De Cepas Para Matéria-prima Coleta e cultivo de amostras fecais Cinco amostras de fezes recém-coletadas foram obtidas de cada grupo em recipientes plásticos estéreis. Uma pequena porção de cada amostra foi armazenada imediatamente em hastes com pontas de algodão de transporte anaeróbico (Oxoid), e a massa da amostra fecal foi imediatamente congelada e armazenada a -70 °C.

As amostras fecais foram processadas imediatamente sob condições anaeróbias estritas. As amostras foram diluídas em diluente anaeróbico, e semeadas nos seguintes meios de cultura: 1) BHI - para obter o total de bactérias cultiváveis por grama de amostra; 2) meio MRS com cisteína para selecionar espécies de Lactobacillus e Bifidobacterium; 3) Ágar triptose sulfíto cicloserina (TSC, Oxoid) foi usado para Clostridíum perfringens; 4) Ágar Salmonella-Shigella (SS) foi utilizado para Salmonella spp.; 5) Ágar McConkey (Merck) foi utilizado para EnteTobactexdaceae.

Uma única, pura e isolada colônia a partir de cada uma das cinco cepas selecionadas foi inocuiada separadamente em 5 ml de MRS-Cys e incubadas anaerobicamente durante a noite. A cultura foi corada pela técnica de coloração de Gram para verificar a pureza e 1 ml da cultura foi usada para inocular em 500 ml de caldo nSRS^Cysy que—foi incubado—durante—a^uaoJJta. As células foram então coletadas por centrifugação a 3840g durante 10 minutos a 4 °C (Beckman Coulter J2-21 M/E) antes de ser anaerobicamente ressuspensas em 50 ml de leite desnatado 5%. As células foram então microencapsuladas ou liofilizadas.

Microencapsulaçao As cinco cepas diferentes (50 ml de cada) foram misturadas após a ressuspensão, e então adicionadas a 250 ml de solução de alginato 3, 6% (Merck) . A mistura foi transferida para um funil estéril de 500 ml e gotejada lentamente em 1 1 de solução de cloreto de cálcio (CaCl2) 0,1 M, para formar esferas. As esferas de alginato foram endurecidas por 45 a 60 minutos na solução de CaCla antes de serem lavadas em solução salina 0,85% e água destilada estéril, respectivamente. Rs esferas foram secas a 30 °C durante a noite, e classificados em condições estéreis para garantir que apenas esferas de aproximadamente 4 mm de dimensão fossem incluídas antes de serem embaladas em lotes de aproximadamente 500 esferas em tubos sterilin de 20 ml.

Toda semana, três esferas de cada seleção isolada selecionada eram individualment e dissolvidas em 1 ml de tampão citrato de sódio 0,1 M usando um homogeneízador do tipo "bead beater” (LINEA TA 200S) por 10 segundos. Uma vez dissolvido, diluições seriadas foram semeadas em placas MRS-Cys para a avaliação da viabilidade.

Para garantir que os produtos finais fossem livres de possíveis contamínantes laboratoriais, as esferas em suspensão foram semeadas em ágar MacConkey agar, Bile Esculina e BHI para detectar a presença de E. coli, Enterococcus spp. e Clostridium spp., respectivamente. Colônias aleatórias foram submetidas a coloração de Gram para detectar a morfologia celular tipica de cada cepa. As —esf^rars—eram armazenadas om um des secador . Lote s frescos de esferas foram utilizados todas as semanas e transportados em sacos térmicos para o local do ensaio nutricional.

Liofilização A suspensão leite desnatado foi transferida para um balão de secagem, e coberta com etanol por 45 a 60 minutos antes de serem liofilizadas (Balzers -Pirani calibre TIG 030) a 10 mbar de pressão por 48 horas. As amostras liofilizadas foram transferidas para tubos sterilin de 20 ml e armazenadas em um dessecador em temperatura ambiente. 0,1 g de pó liofilizado de cada cepa foi ressuspenso em 1 ml de solução de Ringer e diluições apropriadas foram semeadas em placas MRS-Cys para as avaliações de viabilidade.

Preparação de suplemento nutricional probíótíco As bactérias probióticas foram incorporadas na ração inicial de filhotes de avestruz tanto na forma de esferas encapsulada como na forma liofilizada, de modo que a concentração final de bactérias foi de 107 gitC1 de ração. Ensaio Nutricional Diferentes combinações de cepas e cepas individuais foram testadas em estudos nutricionais preliminares. Os ensaios foram monitorados pelo estabelecimento a níveis basais de grupos de bactérias selecionadas no material fecal de filhotes de avestruz, antes e durante a suplementaçao com probióticos, a fim de determinar os probióticos candidatos mais eficazes. Uma composição probiótica continha todas as 5 cepas listadas nas Tabelas 1 e 2 acima.

Os ensaios foram realizados no Centro Agrícola de Elsenburg, Stellenbosch {África do Sul) . Cento e oitenta pintos de avestruz de um dia de idade foram distribuídos aleatoriamente em 12 grupos com distribuições de massa semelhantes,--e—foram aiojados____em__baias separadas . Três repetição por grupo foram atribuídas para cada tratamento, e os quatro tratamentos diferentes eram com ou sem suplementação alimentar, e com ou sem. o promotor de crescimento, Tilosina. Os pintos tiveram acesso a alimentação inicial e água ad libitum. O suplemento nutricional foi administrado imediatamente após a alocação das aves nos respectivos grupos (~ 109 ufc de bactérias probióticas (uma cápsula de alginato)) e noramente depois de uma semana. A partir da 2a semana, a composição probiótica foi fornecida a um nível de 107 microorganismos por grama de ração seca, ou 300 mg de esferas de alginato 6xl09 ufc) por dia. O tratamento continuou por 9 semanas, e as aves eram pesadas semanalmente.

Resultados O ganho de peso pelas aves alimentadas com probiótico aumentou consideravelmente (Figura 1). Isso mostra que as bactérias probióticas isoladas com boas características a partir de filhotes de avestruz e, especialmente, aquelas listadas na Tabela 1 acima, podem ser usadas como um suplemento nutricional que irá melhorar o ganho de peso e a saúde dos filhotes. Não foram observados efeitos prejudiciais nos filhotes de avestruz.

Claims (16)

1.-COMPOSIÇÃO--DE--SUPLEMENTO__NUT RICIONAL PARA AVESTRUZ, caracterizada pelo fato de compreender pelo menos uma bactéria selecionada entre Lactobacillus oris, Lactobacíllus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis.

2. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o Lactobacillus oris é a cepa designada como Lo59 (LMG-P-26662).

3. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o Lactobacillus brevis é a cepa designada como Lb512 (L.MG-P-2 6 6 63) .

4. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o Lactobacíllus johnsonii é a cepa designada como Ljl36 ('LMG-P-2 6664) .

5. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum é a cepa designada como Bgl36 (IMG-P-26666).

6. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o Enterococcus faecalis é a. cepa designada como P1.2 fLMG-P-26665).

7. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a dita composição inclui pelo menos duas bactérias selecionadas entre Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis.

8-7-COMPOSiÇÃO--DE__SUPLEMENTO NT7TRICIQNAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a dita composição inclui pelo menos três bactérias selecionadas a partir de Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonií, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis.

9. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato dé que a dita composição inclui pelo menos quatro bactérias selecionadas entre Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis-

10. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a dita composição inclui as bactérias Lactobacillus oris, Lactobacillus brevis, Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium pseudolongum subsp. globosum e Enterococcus faecalis.

11. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de incluir aproximadamente 109 ufc de bactérias.

12. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de compreender ainda ração de avestruz.

13. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a dita composição é para melhorar a condição física dos avestruzes.

14. COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma—qualquer das reivindicações de 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a dita composição é para reduzir a mortalidade dos avestruzes.

15. MÉTODO DE PREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO DE SUPLEMENTO NUTRICIONAL PARA AVESTRUZ, de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o dito método compreende as etapas de: suspensão de células bacterianas da bactéria da composição em 5% de leite desnatado; liofilização das células bacterianas ou microencapsulamento das células para formar esferas de alginato.

16. MÉTODO PARA A MANUTENÇÃO DE UM GRUPO DE AVESTRUZES, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administração de uma composição de acordo com uma qualquer das reivindicações de 1 a 14 para os avestruzes no grupo.