BRPI0807836A2

BRPI0807836A2 - " derivados de 1-benzenossulfonil-1h-indol como inibidores da atividade de ccr9 ".

Info

Publication number: BRPI0807836A2
Application number: BRPI0807836-0A
Authority: BR
Inventors: Philipp Lehr; Anthony Winiski
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2007-02-06
Filing date: 2008-02-04
Publication date: 2014-08-05
Also published as: US20100075963A1; KR20090116732A; JP2010517976A; EP2118060A1; CN101605759A; MX2009008425A; CA2676145A1; ATE483685T1; EP2118060B1; EA200901042A1; AU2008212887A1; DE602008002901D1; WO2008095908A1

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOS DE 1-BENZENOSSULFONIL-1H-INDOL COMO INIBIDORES DA ATIVIDADE DE CCR9"..

A presente invenção refere-se a 1-benzenossulfonil-1H-indóis, 5 mais especificamente a 1-benzenossulfonil-1H-indóis como inibidores da atividade de CCR9,

Ligante de quimiocina CC 25 (CCL25), originalmente descrito como quimiocina expressada no timo (TECK), representa um papel crucial no retorno de células T para o intestino delgado por meio da sinalização a10 través do receptor de quimiocina CC 9 (CCR9). CCL25 é constitutivamente expressado dentro do intestino delgado, especialmente nas criptas epiteliais, enquanto sendo fraco ou nada no cólon e em outras superfícies mucosas. CCR9 é o único receptor conhecido para TECK/CCL25, A expressão de CCR9 correlata fortemente com a habilidade dos linfócitos T periféricos para 15 retorno para o intestino delgado. A maior parte dos linfócitos intraepiteliais intestinais (IEL) e linfócitos T de lâmina própria (LPL) é CCR9+, enquanto que uma porcentagem muito mais baixa de células T que circulam no sangue é CCR9+. As células T de CCR9+ encontradas no sangue periférico quase exclusivamente apresentam o receptor de retorno intestinal α4β7,

Bloqueando CCR9 com anticorpo contra TECK/CCL25 inibe significativamente retorno dos linfócitos T para o intestino delgado. Além disso, há uma localização rígida de TECK/CCL25 e LPL de CCR9+ no intestino delgado ao invés do grosso, sugerindo um mecanismo distintivo de recrutamento de linfócitos em segmentos diferentes do trato gastrintestinal.

Estudos também sugeriram um papel de TECK/CCL25 na inte

ração de linfócitos T-endotélio em mucosa intestinal inflamada. Há um aumento de expressão de TECK/CCL25 e uma adesão de LPL intensificada à mucosa intestinal pequena após estimulação de TNFa. Dessensibilização de CCR9 ou anti-TECK/CCL25 poderia atenuar o recrutamento dos linfócitos 30 para os microvasos do intestino delgado. Desse modo, o bloqueio alvejado das interações de CCL25-CCR9 pode fornecer um tratamento terapêutico eficaz em doenças imune-mediadas, por exemplo, distúrbios intestinais, tais como doenças ou condições autoimunes e inflamatórias. Infiltração de linfócitos T (células T) no intestino delgado e cólon foi especificamente ligada à patogênese de doenças Celíacas, alergias de alimentos, artrite reumatoide, doenças humanas inflamatórias do intestino (IBD) que incluem doença de 5 Crohn e colite ulcerativa, por exemplo, incluindo proctite ulcerativa. Doenças que são também descritas ser mediadas por CCR9, por exemplo, incluem doenças alérgicas, psoríase, dermatite atópica, asma, doenças fibróticas, distúrbios e doenças que originam ou mediadas por transplantação, por exemplo, rejeição a enxerto, e câncer, tal como leucemia (leucemia linfocítica 10 aguda), tumor sólido, timoma, carcinoma tímico.

Agora compostos foram descobertos que apresentam atividade surpreendente como inibidores de CCR9.

Em um aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto da fórmula

v-15 em que

R-ι é (Ci-i2)alquila, (C-M2)alcóxi, (C3.i2)cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5-i2)cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6-i8)arila, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, halogênio, halo(C-|.4)alquila, preferivelmente CF3, (Ci-4)alcóxi, halo(C-|.4) 20 alcóxi, (C-i-4)alquiltio,

em que heterociclila é heterociclila alifática ou aromática compreendendo 3 a 12 membros do anel e 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, O, S, opcionalmente anelados com outro sistema de anel,

em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são in25 substituídas ou substituídas, por um ou mais halogênio, halo(Ci-4)alquila, halo(Ci-4)alcóxi, (Ci.4)alquila, (Ci-4)alcóxi ou (C1-^alquiltio,

R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (C-m) alcoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, halogênio, halo(Ci-4)alquila, tal como CF3, (Ci-4)alquila, (C-|.4)alcóxi, (C1_4)alquiltio em forma livre ou na forma de um sal na fabricação de um me

dicamento para o tratamento de distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9, preferivelmente doença inflamatória do intestino.

Preferivelmente em um composto da fórmula (I)

Ri é (Ci-i2)alquila, por exemplo, terc-butila, (Ci--i2)alcóxi, (C3--I2) cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5-i2)cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6-i8)arila, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, halogênio, por exemplo, cloro, halo(C-i-4) alquila, preferivelmente CF3, (Ci-4)alcóxi, halo(C-|.4)alcóxi, (Ci-4)alquiltio,

em que heterociclila é heterociclila alifática ou aromática compreendendo 3 a 12 membros do anel e 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, O, S, opcionalmente anelados com outro sistema de anel, por exemplo, 4-morfolin-4-ila ou 4-oxazol-5-ila,

em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são insubstituídas ou substituídas, por um ou mais halogênio, halo(Ci.4)alquila, halo(C1.4)alcóxi, (Ci-4)alquila, (C-|.4)alcóxi ou (C-|.4)alquiltio,

R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (C-m) alcoxicarbonila, tal como, por exemplo, metoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, por exemplo, amino, metilamino, dimetilamino, isopropilamino, piperidin

1-ila, morfolin-4-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, halogênio, halo(C-|.4)alquila, tal como CF3, (C-|.4)alquila, (C-i_4)alcóxi, (Ci.4)alquiltio.

Em um composto da fórmula (I) cada substituinte definido simples pode ser um substituinte preferido, por exemplo, independentemente um do outro que substituinte definido.

Preferivelmente em um composto da fórmula (l)> Ri é terc-butila, CF3, cloro, um sistema de anel de 6 membros alifático tendo 2 heteroátomos selecionados de N, O, tal como, por exemplo, morfolin-4-ila, e R2 e R3 são como definidos acima.

Preferivelmente em um composto da fórmula (I), R2 é hidrogênio, ciano, hidroxicarbonila, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino 5 substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, por exemplo, amino é NH2, metilamino, dimetilamino, isopropilamino, hidroxicarbonil-isopropilamino, piperidin-1-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, morfolin-4-ila, e Ri e R3 são como definidos acima.

Preferivelmente em um composto da fórmula (I) R3 é hidrogênio, 10 ciano, cloro, hidroxicarbonila, metoxicarbonila, aminocarbonila, sulfonilaminocarbonila, por exemplo, C0-NH-S02-(4-terc-butil-fenila), e Ri e R2 são como definidos acima.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto da

fórmula

. -15 em que

Ri é (C4_i2)alquila ramificada, preferivelmente terc-butila, (Cw2) alcóxi, (C3.-i2)cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5--I2) cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6-i8)arila, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, cloro ou flúor, halo(Ci-4) 20 alquila, preferivelmente CF3, (Ci.4)alcóxi, halo(Ci-4)alcóxi, (C-|.4)alquiltio,

em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são in25 substituídas ou substituídas por um ou mais halogênio, halo(C-i.4)alquila, halo(Ci-4)alcóxi, (Ci-4)alquila, (Ci.4)alcóxi ou (Ci_4)alquiltio,

R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são

(N) hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (C-m) alcoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, com a condição que se R2 for 4-metilpiperazin-1-il-carbonila, então R2 está na posição 3 do sistema de anel, clo5 ro, halo(Ci-4)alquila, tal como CF3, (C1^JaIquiIa, (C-M)alcóxi, (CM)alquiltio com a condição que

selecionado do grupo que consiste em

- ácido 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-

carboxílico,

- ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carboxílico,

indol-7-carboxílico,

- ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-carboxílico,

- ácido 5-cloro-1-(4-morfolin-4-il)-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-

carboxílico,

um composto da fórmula

Cl

COOH

e um composto da fórmula

Cl

sejam excluídos.

10

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto

15

- éster de metila de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H

20

- ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-3-

carboxílico, - ácido 5-cioro-1-(4-oxazol-5-il)-benzenossulfonil)-1H-indol-3- carboxílico,

- ácido 5-cloro-1-(4-trifluorometil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-

carboxílico,

- ácido 5-cloro-1-(4-cloro-benzenossulfonil)-1H-indol-3-

carboxílico,

- ácido 5-cloro-1 -(4-morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1 H-indol-2-

carboxílico,

- ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-2-carboxílico,

- ésterde metila de ácido 1-(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)1 H-indol-6-carboxilico,

- ácido 1-(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1H-indol-6-

carboxílico,

- amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1Hindol-2-carboxílico,

- [1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3-il]-morfolin4-il-metanona,

- ácido 2-{[1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3- carbonil]amino}-2-metil-propiônico,

- [1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-3-il]-(4-metilpiperazin-1 -íl)-metanona,

- metilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro1 H-indol-3-carboxílico,

- dimetilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro1 H-indol-3-carboxílico,

- [1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3-il]-piperidin

1-il-metanona,

- amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1Hindol-3-carboxílico,

- isopropilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5- cloro-1 H-indol-3-carboxilico,

-1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carbonitrila, -1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-carbonitrila,

- 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-carbonitrila,

- amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol-6- carboxílico e

- 4-terc-butil-N-[1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-

carbonil]-benzenossulfonamida,

por exemplo, compostos 1 a 27 como expostos na TABELA 1 nos exemplos.

Compostos fornecidos pela presente invenção são designados doravante como "composto(s) da (de acordo com a) presente invenção". Um composto da presente invenção inclui um composto em qualquer forma, por exemplo, na forma livre, na forma de um sal, na forma de um solvato e na forma de um sal e um solvato.

Em outro aspecto a presente invenção fornece um composto da presente invenção na forma de um sal, tal como um cloridrato.

Tais sais incluem preferivelmente sais farmaceuticamente acei

táveis, embora sais farmaceuticamente inaceitáveis sejam incluídos, por exemplo, para preparação/isolamento/propósitos de purificação.

A presente invenção inclui um composto da presente invenção em qualquer forma isomérica e em qualquer mistura isomérica. A presente invenção também inclui tautômeros de um composto fornecido pela presente invenção onde tautômeros possam existir.

Em outro aspecto a presente invenção fornece um processo para a produção de um composto da fórmula (I) ou (II) compreendendo as etapas

a. reagir um composto da fórmula

em que R2 e R3 são como definidos acima com um composto da fórmula O

CI-S-^x /) (IV)

ο

em que R1 é como definido acima,

e isolar um composto da fórmula (I) ou (II) obtido da mistura de reação, e, opcionalmente também reagir um composto da fórmula (I) ou (II) obtido para obter outro composto da fórmula (I) ou (II).

Aquela reação é uma reação de sulfonilação de amina, por e

xemplo, reagindo uma amina com um sulfonilcloreto. Tais reações são conhecidas e podem ser realizadas quando apropriadas, por exemplo, reagindo um composto da fórmula (III) com um composto da fórmula (IV) em solvente orgânico, por exemplo, um solvente orgânico polar, tal como N1N10 dimetilformamida, na presença de uma base, tal como um hidreto, por exemplo, hidreto de sódio, ou um sal de sódio ou de potássio de um álcool, tal como terc-butilálcool.

Para obter outro composto da fórmula (I) ou (II) um composto da fórmula (I) ou (II) obtido pode ser convertido em outro composto da fórmula (I) ou (II), por exemplo, também reagindo um composto da fórmula (I) ou (II) obtido, por exemplo, um composto da fórmula (I) ou (II) obtido pode ser submetido a outras reações, tais como apropriadas, por exemplo, tais como convencionais; por exemplo, se Ri em um composto da fórmula (I) ou (II) for halogênio, por exemplo, bromo, tal grupo halogênio pode ser submetido à substituição nucleofílica, por exemplo, por heterociclila, tal como heterociclila alifática compreendendo um átomo de nitrogênio no anel heterocíclico, tal como morfolina, em solvente orgânico, por exemplo, um éter, tal como dioxano, por exemplo, na presença de rac-BINAP e K3PO4, e tratando uma mistura desse modo obtida com Pd(dba)2 sob uma atmosfera inerte, por exempio, sob argônio.

Em um intermediário da fórmula (III) ou da fórmula (IV) (materiais de partida), grupos funcionais, se presentes, podem ser opcionalmente na forma protegida ou na forma de um sal, se um grupo formador de sal estiver presente. Grupos de proteção, opcionalmente presentes, podem ser removidos para um estágio apropriado, por exemplo, de acordo com, por exemplo, analogamente a, um método como convencional. Por exemplo, se em um composto da fórmula Il R for carbóxi, carbóxi pode ser na forma protegida e o grupo de proteção pode ser removido para um estágio de reação apropriado, por exemplo, após reação de um composto da fórmula (III) com 5 um composto da fórmula (IV). Por exemplo, se Ri ou R2 em um composto da fórmula (III) for alcoxicarbonila, por exemplo, (Cl-^alcoxicarbonila, o grupo alcóxi pode ser removido, por exemplo, conforme apropriado, por exemplo, como convencional, por exemplo, tratando um composto da fórmula (I) ou (II), em que R1 ou R2 é alcoxicarbonila com LiOH em solvente orgânico, 10 por exemplo, um éter, tal como dioxano, para obter um composto da fórmula (I) ou (II) em que R1 ou R2 é hidroxicarbonila.

Alternativamente, para obter um composto da fórmula (I) ou (II), um composto da fórmula (III) em que R1 ou R2 é hidrogênio ou um substituinte diferente de hidroxicarbonila ou alcoxicarbonila, pode ser reagido com 15 um composto da fórmula (IV), para obter um composto da fórmula (I) ou (II) em que R1 ou R2 é hidrogênio ou um substituinte diferente de hidroxicarbonila ou alcoxicarbonila, e também reagindo tal composto obtido para obter um composto da fórmula (I) ou (II) em que R1 ou R2 é hidroxicarbonila, por exemplo, reagindo tal composto obtido com n-BuLi e um excesso de CO2, 20 para obter um composto da fórmula (I) ou (II) em que R1 ou R2 é hidroxicarbonila. Tal grupo hidroxicarbonila, por exemplo, pode ser também reagido para obter um composto da fórmula (I) ou (II) em que R1 ou R2 é alcoxicarbonila, por exemplo, por uma reação de esterificação, tal como apropriada, por exemplo, tal como convencional.

Intermediários (materiais de partida) da fórmula (III) e da fórmula

(IV) são conhecidos ou podem ser preparados de acordo com, por exemplo, analogamente a, um método como convencional ou como descrito aqui. Qualquer composto descrito aqui, por exemplo, um composto da presente invenção e intermediários da fórmula (III) e (IV) podem ser preparados como 30 apropriado, por exemplo, conforme, por exemplo, analogamente, a um método como convencional, por exemplo, ou como especificado aqui.

Os compostos da presente invenção, por exemplo, incluindo um composto da fórmula (I) ou (II), apresentam atividade farmacológica e, portanto, são úteis como farmacêuticos. Compostos da presente invenção apresentam inibição dose-dependente no

- Ensaio de proximidade de cintilação (ENSAIO SPA)

- ENSAIO DE LIGAÇÃO DE Eu-GTP

- Ensaio de Mobilização de Cálcio (ENSAIO FLIPR)

por exemplo, sob condições como convencionais, por exemplo, sob condições como descritas aqui, por exemplo, na faixa nanomolar de IC50 até a micromolar baixa.

Atividade no tratamento de doença inflamatória do intestino é,

por exemplo, determinada em um modelo de camundongo de SCID de doença inflamatória do intestino.

ENSAIO DE PROXIMIDADE DE CINTILAÇÃO (SPA)

O PRINCÍPIO DE SPA Quimiocinas medeiam suas ações através de sete receptores

acoplados à proteína G atravessando a transmembrana (GPCR) nas células-alvo. Ligação do Iigante às GPCRs estimula a troca de GTP/GDP nas proteínas G heterotriméricas, compostas das subunidades α, β, γ. O GPCR ligado ao agonista inicia o ciclo do nucleotídeo da guanina catalisando a dis20 sociação de GDP da subunidade a, permitindo a ligação de GTP endógena, e a dissociação do complexo βγ. A Ga-GTP e subunidades ββγ cada podem ativar efetores tais como adenilil ciclase, fosfolipase C e canais de íon (vide, por exemplo, Neer EJ, Cell; 80:249-57 (1995)). A Ga-GTP é inativada por uma atividade de GTPase intrínseca que hidrolisa GTP a GDP; subsequen25 temente a proteína G contendo GDP está pronta durante o próximo ciclo de ativação. Este processo pode ser monitorado in vitro medindo a ligação dos análogos de GTP resistentes à hidrólise, tais como 5'-0-(3-[35S]tiofosfato

35

([ S]-GTPyS), ás membranas celulares contendo o receptor de interesse. Um ensaio de proximidade de cintilação GTPyS (SPA) é mostrado ser um ensaio funcional útil para monitorar a ativação de CCR9 por TECK.

SPA é uma tecnologia de ensaio homogênea e versátil para o ensaio rápido e sensível de uma gama extensiva de processos biológicos. O formato de ensaio não requer nenhuma etapa de separação e é acessível à automatização. As membranas que carregam o receptor são acopladas por meio da metade de glicoproteína às contas revestidas com aglutinina de germe de trigo fluorescentes (Amersham Bioscience, n0 RNPQ 0001). Uma 5 vez imobilizado, o receptor está bem próximo da conta de forma que, se o GPCR ligado ao agonista iniciar o ciclo de nucleotídeo de guanina, [35SJGTPyS (Amersham Bioscience, n° SJ1308) liga à membrana. A molécula radioativa será mantida em proximidade bem íntima que as partículas de queda estimulam o cintilante dentro da conta para emitir luz, que é depois 10 detectada por um contador de cintilação baseado em PMT. Radioligante não-ligado está muito distante da conta para transferir energia e portanto passa indetectado.

CÉLULAS E CULTURA DE CÉLULA

Pré-B-células de camundongo 300-19 transfeccionadas com receptor de CCR9 humano são cultivadas em suspensão em frascos de cultura de célula (suspensão de célula de 100 ml em frasco de cultura de célula de 162 cm2) a 37°C em uma atmosfera umedecida contendo 5% de CO2 em meio de RPMI 1640 suplementado com penicilina (100 lU/ml), estreptomicina (0,1 mg/ml), L-glutamina (para 4,5 mM de concentração final), 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 0,05 μΜ de 2-mercaptoetanol, 1,5 pg/ml de puromicina e 20 mM de HEPES. As células são utilizáveis para -12 passagens para preparação da membrana (isto é, densidade do receptor de CCR9 é aceitavelmente alta o bastante). Expressão de CCR9 é monitorada por análise de FACS usando anticorpo de CCR9 anti-humano de camundongo conjugado com Alexa Fluor 647, A expressão de CCR9 deve ser não menos de 50% de células positivas por meio de FACS com relação ao controle de isótipo de Alexa Fluor. Como uma aproximação, pode-se dividir uma cultura de 10x105 células/ml usando uma diluição 1:30-1:50, e alcançar a densidade de célula iniciando após 2 a 3 dias (~4 a 5 dias para uma cultura de frasco centrifugador). As células são colhidas a uma densidade de 8-10 x 105 células/ml através de centrifugação a 300 a 1000 g durante 10 minutos. Em geral, as células são cultivadas e expandidas para resultar em aproximadamente 1 χ 1010 células. A pelota de célula combinada é lavada uma vez em PBS frio (sem cálcio e magnésio), ressuspendida por meio de pipetação em tampão de membrana frio a aproximadamente 2 χ 108 células/ml, congelada em gelo seco, e armazenada a -80°C.

TAMPÃO DE MEMBRANA

Tampão de membrana pH = 7,5 (1000 ml): 7,5 mM Tris, 12,5 mM MgCI2, 0,3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 250 mM Sucrose, filtrado estéril e armazenado a +4°C

TAMPÃO DE HOMOGENEIZAÇÃO (50 mlV.

Tampão de membrana 45 ml + 10% glicerol

PREPARAÇÃO DAS MEMBRANAS

Pipetar a solução de suspensão de célula em tubos robustos e homogeneizar cada solução. Transferir os homogeneizados para tubos de centrifugação e centrifugar 10 minutos a 1000 g. Colher os sobrenadantes. 15 Adicionar 20 ml de tampão de membrana novo a cada pélete, transferir para os tubos robustos originais e homogeneizar e centrifugar mais uma vez. Colher os sobrenadantes. Centrifugar os sobrenadantes combinados a 40000 g durante 30 minutos. Ressuspender cada pelota em 3 ml de tampão de homogeneização frio com um homogeneizador Dounce. Determinar a concen•20 tração de proteína na suspensão homogênea (ensaio BIO RAD, referência

BSA). Método Bradford (Procedimento de Microensaio). Como uma aproxi

10

mação, resultados de 1 x 10 de células em um rendimento de membrana de 10 a 20 mg de proteína. Alíquotas de armazenamento a -80°C.

TAMPÕES E SOLUÇÕES OTIMIZADOS PARA TESTAGEM DOS COMPOSTOS

Tampão de HEPES/BSA: 50 mM HEPES (pH 7,4), 50 pg/ml BSA 2,5 x Tampão de ensaio: 50 mM HEPES pH 7,4, 50 pg/ml BSA, 25 mM MgCI2, 25 μΜ GDP, 250 mM NaCI, 375 pg/ml saponina

TECK: Diluições de TECK são preparadas com 0,1% BSA em PBS para render 20 vezes solução de TECK para o ensaio de ligação de GTP. Para testagem dos compostos, uma concentração de 7,4 μΜ TECK é usada para dar uma concentração final de 0,37 μΜ na reação. Diluição dos compostos: Os compostos de teste são dissolvidos em DMSO em concentração final de 100 vezes mais alta no ensaio. Diluições seriais destas soluções dos compostos concentradas são feitas em DMSO que é diluído 5 vezes em tampão de HEPES/BSA para gerar solu5 ções de compostos concentradas 20x contendo uma concentração de DMSO de 20% (v/v). A concentração final de DMSO nos ensaios é 1 % (v/v).

Diluição das membranas: Antes de uso, as membranas (2,4 mg/ml matéria-prima; batelada CCR9-1) são diluídas em tampão de HEPES/BSA para dar 60 pg/ml. 50 μΙ desta membrana são adicionados a cada poço. (3 pg/poço de concentração de ensaio final para batelada de membrana CCR9-1).

Condição do ensaio final para testagem dos compostos: 50 mM HEPES pH 7,4, 50 pg/ml BSA, 100 mM NaCI, 10 mM MgCI2, 10 μΜ GDP, 150 pg/ml Saponina, 0,37 μΜ TECK e 3 μg/poço de membrana.

PROTOCOLO DO ENSAIO

O ensaio é executado pelo formato de tempo zero, que envolve a adição seqüencial das amostras de teste, membrana, radioligante e contas como adições separadas sem qualquer pré-incubação.

Brevemente, as membranas são incubadas na presença de a20 gonista e composto com [35S]GTPyS e contas de cintilação durante 1 hora em temperatura ambiente em um misturador vibratório. Usando um robô de manipulação de líquido, os reagentes a seguir são despachados em uma White&Clear Isoplate de 96 poços (Wallac, n°s 1450-515) na seqüência a seguir:

40 μΙ tampão de ensaio (20 mM HEPES pH 7,5, 100 mM NaCI,

10 mM MgCI2, 1 μ MGDP, 10 μg/ml Saponina, 50 μg/ml BSA).

10 μΙ agonista TECK/CCL25 Humano, 25 μg/ml (R&D Systems, n° 334-TK-025)

10 μΙ amostra em 50% DMSO 50 μΙ membranas, 60 μg/ml em tampão de ensaio

50 μΙ [35SJGTPyS1 1 nM em tampão de ensaio,

40 μΙ suspensão de contas, 18,75 mg/ml tampão de ensaio. Após as placas de incubação serem centrifugadas durante 5 minutos a 1000 xg e contadas no MicroBeta Counter (EG&G Wallac) em modo de contagem de SPA de ParaLux.

ANÁLISE DOS DADOS Análise dos dados é executada com pacote de programa Excel

Fit 4.0 (Microsoft). Para determinar a qualidade da janela experimental do ensaio, o fator Z' é calculado usando apenas dados de controle (valores basais e valores estimulados). Para este ensaio, Z' é estimado com 0,73 que indica uma banda de separação grande e uma qualidade de ensaio excelente geral.

ENSAIO DE LIGAÇÃO DE Eu-GTP O PRINCÍPIO DO ENSAIO DE LIGAÇÃO DE Eu-GTP

Um método fluorométrico resolvido no tempo para medir ativação da proteína G usando um análogo de GTP marcado com európio nãoradioativo, não-hidrolizável, Eu-GTP.

MATERIAIS

Meio de RPMI 1640 com (feito de pó, Gibco n° 074-01800) Solução de Penicilina/Estreptomicina, líquida (Gibco n° 15140-

122)

■20 FBS (certificado, obtido de Gibco [n° 16000] e depois inativado

por calor)

Piruvato de sódio (Gibco n° 11360-039)

Puromicina (usada como marcador de seleção; Sigma n0 P

8833)

Inibidor de protease completo (Roche n° 1697498)

Anticorpo de CDFR9 anti-humano de camundongo conjugado com Alexa Fluor 647 (Pharmingen n° 557975)

Controle de isótipo de lgG2a conjugado com Alexa Fluor 647 (BD Pharmingen n° 557715)

TECK (aa24-150-his6, banco de dados BMP Tool Protein n°

BTP04-005213, Alíquotas de solução de matéria-prima de TECK (5 mg/ml; -350 μΜ)) armazenado a -80°C. BSA (Roche Diagnostics GmbH n0 775827)

Eu-GTP (Perkin-Elmer Life Science, Wallac, Turku, Finlândia; código do produto: AD0260), kit contém os seguintes componentes:

Eu-GTP (1,65 nmol). O Eu-GTP Iiofilizado foi reconstituído com água destilada para render uma concentração de Eu-GTP de 10 μΜ. Alíquotas do Eu-GTP reconstituído foram armazenadas a -20°C.

GDP (2,3 μιποΙ)

O GDP Iiofilizado é reconstituído com água destilada para render uma concentração de GDP de 2 mm. Alíquotas do GDP reconstituídas são armazenadas a-20°C.

VICTOR2® V Multilabel Counter (Perkin-Elmer Life Sciences, Wallac, Turku, Finlândia)

MuItiScreen Vacuum Manifold (Millipore n0 MAVM 0960R) células e cultura de célula A ser realizada como descrita aqui sob "CÉLULAS E CULTURA

DE CÉLULA" no "Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA)"

TAMPÃO DE MEMBRANA E TAMPÃO DE HOMOGENEIZAÇÃO

A serem realizados como descritos aqui sob "tampão de membrana e tampão de homogeneização" no "Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA)"

PREPARAÇÃO DAS MEMBRANAS

A ser realizada como descrita aqui sob "preparação das membranas" no "Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA)"

TAMPÕES E SOLUÇÕES OTIMIZADOS PARA TESTAGEM DOS COMPOSTOS

A serem realizados como descritos aqui sob "tampões e soluções otimizados para testagem dos compostos" no "Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA)"

Para Eu-GTP: Diluir a solução de matéria-prima de Eu-GTP a 100 nM em tampão de HEPES/BSA antes do uso. Solução de lavagem de GTP: 10 X solução de lavagem de GTP é diluída 1:10 com água destilada e esfriada em gelo. PROTOCOLO PO ENSAIO DE LIGAÇÃO DE Eu-GTP PARA TESTAGEM DOS COMPOSTOS

O ensaio de ligação de Eu-GTP é executado em um volume final de 100 μΙ em placas de filtro de Acro-Well. Os componentes do ensaio são 5 adicionados nos poços na ordem a seguir:

Adicionar 40 μΙ tampão de ensaio (2,5 X) a cada poço (Poços B2 a G12). Adicionar 5 μΙ TECK (7,4 μΜ) aos poços das colunas 2-11 e a concentração final de TECK no ensaio é 0,37 μΜ. Adicionar 5 μΙ de 0,1% BSA aos poços da coluna 12 servindo como o controle basal. Adicionar 5 μΙ de 10 cada concentração de compostos (20 vezes da concentração final em 20% DMSO) em triplicata nas colunas 3-11 (isto é, 3 poços por concentração). Adicionar 5 μΙ de 20% DMSO nos poços da coluna 2 e 12 que são os controles estimulados e basais respectivamente. A concentração de DMSO final em todos os poços é 1% (v/v). Adicionar 50 μΙ membranas (3 pg/amostra) 15 em todos os poços e misturar brevemente a 800 rpm em um agitador de placa de microtitulação (MS1 Minishaker). A placa é incubada por 30-min com agitação lenta a 300 rpm em um agitador de placa orbital (MTS 2/4 agitador de microtitulação digital). Adicionar 10 μΙ dos 100 nM Eu-GTP por poço para render uma concentração final de 10 nM. A placa é incubada para mais 20 30 min com agitação lenta a 300 rpm no agitador de placa orbital. A reação é terminada através de filtração a vácuo e a placa de filtro é lavada duas vezes por meio de filtração a vácuo com 300 μΙ de tampão de lavagem de GTP esfriado em gelo por poço. Eu-GTP retido no filtro é medido com um VICTOR2® V Multilabel Counter (340 nm de excitação/615 nm de emissão, 25 0,4 ms de demora, janela de 0,4 ms) dentro de 30 min após a etapa de lavagem.

TABELA A (ESBOCO DA PLACA)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Controle Controle

A estimuladoConc. 1 Cone. 2 Cone. 3 Cone. 4 Cone. 5 Cone. 6 Cone. 7 Cone. 8 Cone. 9 basal

B DMSO Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp1 DMSO C DMSO Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 DMSO D DMSO Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp 1 Comp1 DMSO E DMSO Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 DMSO F DMSO Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 DMSO G DMSO Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 Comp 2 DMSO H ANÁLISE DOS DADOS

O ensaio de ligação de Eu-GTP atual causado por estimulação de agonista (= a) é comparado à ligação basal (= b) e o resultado final é calculado como uma porcentagem na ligação basal [por cento em basal = (a/b x 100)- 100].

As curvas de dose-resposta para o percentual de estimulação calculado acima da ligação basal para cada composto de teste é são ajustadas usando o programa de complemento Excel XLfit® (ID Business Solutions, Guilford, Surrey, UK) para a equação logística de 4 parâmetros (Modelo 205):

y = A + ((B-A)/(1+((C/x)d))) em que x é valores de concentração, y percentual de estimulação acima da ligação basal correspondendo aos valores x.

Os parâmetros ajustados são:

A: planalto do fundo da curva, B: planalto do topo da curva, C:

valor x no meio da curva (isto é, entre os planaltos do topo e do fundo), D: fator de declive (também conhecido como o coeficiente Hill).

O IC50 para o ensaio é definido como o ponto intermediário entre o controle de solvente contendo TECK e o controle de solvente sem estímuIo.

O valor Z1 é calculado usando apenas dados de controle (6 valores basais e 6 valores estimulados) para cada experimento. O Z' varia entre

0,56 e 0,79 em todos os ensaios.

ENSAIO DE MOBILIZAÇÃO DE CÁLCIO A) O PRINCÍPIO DO ENSAIO DE MOBILIZAÇÃO DE CÁLCIO

Receptores de quimiocina são receptores de sete transmembranas acoplados à proteína Gai sensíveis à toxina de coqueluche (PTX). Vários estudos demonstraram a ativação de várias vias de sinalização para a maioria das quimiocinas e em tipos de célula múltiplos, incluindo elevação 30 da concentração de cálcio intracelular citosólico ([Ca2+],). Este processo pode ser monitorado in vitro medindo os níveis de ([Ca2+],) por meio de tinturas fluorescentes sensíveis a cálcio usando uma leitora de placa de imageamento fluorométrico (FLIPR). Mobilização de cálcio intracelular em células 4- MOLT, como medida usando a tecnologia de FLIPR, é mostrada ser um ensaio funcional útil para monitorar a ativação de CCR9 por TECK.

B) CÉLULAS E CULTURA DE CÉLULA

A linhagem de leucemia humana de células T MOLT-4 foi obtida

da American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Células MOLT-4 são cultivadas em meio, que é RPMI-1640 suplementado com 10% FCS, 2 mM L-glutamina, 100 U/ml penicilina e 100 pg/ml estreptomicina a 37°C com 5% de CO2. Albumina de soro humano (HSA) é obtida de ZLB Behring (Viena, Áustria) como uma solução a 20%.

C) PROTOCOLO DO ENSAIO DE MOBILIZAÇÃO DE CÁLCIO

As soluções a seguir são preparadas:

HPSS: 7,01 g NaCI, 0,4 g KCI, 0,2 g MgS04.7H20, 4,76 g HEPES, 2 g Glicose. H2O (em 1 L)

« Tampão de trabalho (WB): 600 ml HPSS + 0,9 ml 1 M CaCI2 + 12 ml 1 M HEPES.

o % BSA/WB: 60 ml WB + 0,06 g Albumina de Soro Bovino (BSA; Sigma A7906).

«» Tampão de Probenecida: 350 ml WB + 3,5 ml solução de matériaprima de Probenecida.

• Solução de Fluo-4: 50 pg Fluo-4, AM + 0,025 ml DMSO + 0,025 ml Plurônico F-127 (Invitrogen/Molecular Probes n° P3000MP; provido como 20% em DMSO).

« Solução de tintura: 105 ml meio + 1,05 ml solução de matéria-prima de Probenecida + 2,1 ml de 1 M HEPES + 0,21 ml solução de Fluo-4.

® TECK: preparado em 0,1% BSA/WB

Células MOLT-4 são colhidas e carregadas com Fluo-4/éster de acetoximetila (Fluo-4/ΑΜ) de acordo com as instruções do fabricante (Invitrogen/Molecular Probes, Eugene, OR). Brevemente, as células são incubadas (1 χ 107 células por 3 ml) em solução de tintura por 60 min a 37°C e 5% de CO2. Subsequentemente, as células são lavadas duas vezes com tampão de Probenecida e pipetadas em placas de ensaio de 96 poços (placas de poliestireno pretas, com fundo claro; Corning Costar n° 3603) a 2 χ 105 células e 0,075 ml por poço e depois centrifugadas a 1200 revoluções por 5 minuto por 3 a 4 min para uniformemente distribuir as células no fundo das placas. As placas são incubadas por 60 min na escuridão em temperatura ambiente (TA) para permitir desesterificação dos ésteres de AM intracelulares. Os compostos de teste são dissolvidos primeiro em DMSO, e 0,006 ml destas soluções de matéria-prima de DMSO é diluído em 0,194 ml WB (± 10 HSA) antes da injeção nas placas de célula (0,025 ml/poço). Após uma incubação de 30 min na escuridão em TA, mobilização de Ca2+ intracelular é monitorada após injeção de TECK (para dar uma concentração eficaz próxima da máxima de pelo menos ECso) usando um instrumento FLIPR (Molecular Devices, Ismaning/Munich, Alemanha). As leituras de linha base são 15 colhidas (em intervalos de 3,5 s) durante 25 s antes da injeção de TECK (0,025 ml/poço) seguido por intervalos de 1 s durante os 80 s após injeção de TECK. As leituras de fluorescência são executadas usando ajustes padrões, e todos os dados são normalizados usando a fórmula:

D)CÁLCULO

Resposta de cálcio = [Fmax - Fmin]/Fmin

onde Fmax representa a resposta de fluorescência máxima e Fmin a fluorescência mínima, linha base. As curvas de dose-resposta para os dados de resposta de cálcio para cada composto de teste são ajustadas usando o programa de complemento Excel XLfit® (ID Business Solutions, Guilford, 25 Surrey, UK) para a equação logística de 4 parâmetros (Modelo 205) para determinar os valores de IC50.

Os compostos da presente invenção mostram atividade em ensaios como descritos aqui e um composto da presente invenção é propenso a mostrar atividade terapêutica no tratamento de distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9.

Distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9 e que são propensos a ser de forma bem sucedida tratados com um inibidor de CCR9, por exemplo, incluem distúrbios em que a atividade de CCR9 representa um papel causai ou contributário, tal como distúrbios associados à ligação de CCRQ.,a CCL25, por exemplo, distúrbios mediados por retorno mediado por CCRQ de leucócitos em um sujeito.

5 Distúrbios como aqui usados incluem doenças.

Distúrbios que são propensos a ser mediados pela atividade de CCR9, por exemplo, incluem:

- distúrbios associados à inflamação

por exemplo, incluindo distúrbios inflamatórios (crônicos), distúr10 bios relacionados à inflamação dos brônquios, por exemplo, incluindo bronquite, cerviz, por exemplo, incluindo cervicite, conjuntiva, por exemplo, conjuntivite, esôfago, por exemplo, esofagite, músculo cardíaco, por exemplo, miocardite, reto, por exemplo, proctite, esclerótica, por exemplo, esclerite, gengiva, envolvendo osso, inflamação pulmonar (alveolite), vias aéreas, por 15 exemplo, asma, tal como asma bronquial, síndrome de angústia respiratória aguda (ARDS), distúrbios inflamatórios da pele tais como hipersensibilidade de contato, dermatite atópica; doença fibrótica (por exemplo, fibrose pulmonar), encefalite, osteólise inflamatória,

- distúrbios associados a condições do sistema imune,

-20 imune, tal como distúrbios autoimunes, por exemplo, incluindo

doença de Graves, doença de Hashimoto (tireoidite crônica), esclerose múltipla, artrite reumatoide, artrite, gota, osteoartrite, escleroderma, síndromes de lúpus, eritomatose de lúpus sistêmico, síndrome de Sjoegren, psoríase, doença inflamatória do intestino, incluindo doença de Crohn, colite, por e25 xemplo, colite ulcerativa; sepse, choque séptico, anemia hemolítica autoimune (AHA), urticária desencadeada por autoanticorpo, pênfigo, nefrite, glomerulonefrite, síndrome de Goodpastur, espondilite ancilosante, síndrome de Reiter, polimiosite, dermatomiosite, toxicidade mediada por citocina, toxicidade de interleucina-2, alopecia areata, uveíte, líquen plano, penfigoide 30 bolhoso, miastenia grave, diabetes melito tipo I, infertilidade imune-mediada tal como insuficiência ovariana prematura, insuficiência poliglandular, hipotireoidismo, pênfigo vulgar, pênfigo l-oliáceo, pênfigo paraneoplástico, hepatite autoimnune incluindo aquela associada a vírus da hepatite B (HBV) e vírus da hepatite C (HCV), doença de Addison, doenças autoimunes da pele, tais como psoríase, dermatite herpetiforme, epidermólise bolhosa, dermatose bolhosa de IgA linear, epidermólise bolhosa adquirida, doença bolhosa 5 crônica de infância, anemia perniciosa, anemia hemolítica, vitiligo, síndromes poliglandulares autoimunes tipo I, tipo Il e tipo III, Hipoparatireodismo Autoimune, Hipofisite Autoimune, Ooforite Autoimune, Orquite Autoimune, penfigoide gestacional, penfigoide cicatricial, crioglobulinemia essencial mista, púrpura trombocitopênica imune, síndrome de Goodpasture, neutropenia 10 autoimune, síndrome miastênica de Eaton-Lambert, síndrome de stiff-man, encefalomielite, encefalomielite disseminada agudo, síndrome de GuillainBarre, degeneração cerebelar, retinopatia, esclerose biliar primária, colangite esclerosante hepatite autoimune, enteropatia sensível a glúten, artrites reativas, polimiosite/dermatomiosite, doença de tecido conjuntivo mista, sín15 drome de Bechet, poliarterite nodosa angite alérgica e granulomatose (doença de Churg-Strauss), síndrome de sobreposição de poliangiite (hipersensibilidade) vasculite, granulomatose de Wegener, arterite temporal doença de Kawasaki, sarcoidose, criopatias, doença Celíaca,

- distúrbios associados à toxicidade mediada por citocina,

por exemplo, incluindo toxicidade de interleucina-2,

- distúrbios associado ao osso,

por exemplo, incluindo osteoporose, osteoartrite,

- distúrbios associados ao cérebro e aos nervos,

- distúrbios neurodegenerativos, por exemplo, incluindo distúr25 bios do sistema nervoso central como também distúrbios do sistema nervoso periférico, por exemplo, distúrbios do CNS incluindo infecções nervosas centrais, lesões cerebrais, distúrbios cerebrovasculares e suas conseqüências, doença de Parkinson, degeneração corticobasal, doença de neurônio motor, demência incluindo ALS, esclerose múltipla, distúrbios traumáticos,

incluindo trauma e conseqüências inflamatórias de trauma, lesão cerebral traumática, acidente vascular cerebral, pós-acidente vascular cerebral, póslesão cerebral traumática, doença cerebrovascular de vaso pequeno, distúrbios alimentares; outras demências, por exemplo, incluindo doença de Alzheimer, demência vascular, demência com corpos de Lewy, demência frontotemporal e parquinsonismo ligado ao cromossomo 17, demências frontotemporais, incluindo do5 ença de Pick, paralisia nuclear progressiva, degeneração corticobasal, doença de Huntington, degeneração talâmica, demência de Creutzfeld-Jakob, demência de HIV, esquizofrenia com demência, psicose de Korsakoff, distúrbios cognitivos-relacionados, tais como prejuízo cognitivo moderado, prejuízo de memória associado à idade, declínio cognitivo relacionado à ida10 de, prejuízo cognitivo vascular, distúrbios de déficit de atenção, distúrbios de hiperatividade-déficit de atenção, e perturbações de memória em crianças com inaptidões de aprendizagem; condições associadas ao eixo geométrico hipotalâmico-pituitário-adrenal,

- distúrbios neuronais, por exemplo, incluindo distúrbios de migração neuronal, hipotonia (tônus muscular reduzido), fraqueza muscular,

ataques apopléticos, retardo de desenvolvimento (dificuldade de desenvolvimento física ou mental), retardamento mental, insuficiência de crescimento, dificuldades alimentares, linfodema, microcefalia, sintomas que afetam a cabeça e o cérebro, disfunção motora;

- distúrbios associados ao olho,

por exemplo, incluindo uveoritinite, vitreoretinopatia, doença da córnea, irite, iridociclite, cataratas, uveíte, retinopatia diabética, retinite pigmentosa, conjuntivite, ceratite,

- distúrbios associados ao trato gastrintestinal

por exemplo, incluindo colite, doença inflamatória do intestino,

doença de Crohn, colite ulcerativa, ulceração péptica, gastrite, oseofagite,

- distúrbios associados ao coração e a condições vasculares por exemplo, incluindo distúrbios cardiovasculares, por exemplo,

incluindo insuficiência cardíaca, infartação cardíaca, hipertrofia cardíaca, parada cardíaca, por exemplo, incluindo todas as formas de insuficiências de bombeamento do coração tais como rendimento alto e rendimento baixo, aguda e crônica, do lado direito ou esquerdo, sistólica ou diastólica, independente da causa subjacente; infartação do miocárdio (Ml), profilaxia de Ml (prevenção primária e secundária), tratamento agudo de Ml, prevenção de complicações; distúrbios do coração, distúrbios vasculares proliferativos, vasculitides, poliarterite nodosa, conseqüências inflamatórias de isquemia, 5 doença cardíaca isquêmica, infartação do miocárdio, acidente vascular cerebral, doença vascular periférica, hipertensão pulmonar,

distúrbios isquêmicos, por exemplo, incluindo isquemia do miocárdio, por exemplo, angina estável, angina instável, angina pectoris, bronquite; arritmias assintomáticas tais como todas as formas de taquiarritmias 10 atriais e ventriculares, taquicardia atrial, agitação atrial, fibrilação atrial, taquicardia reentrante atrioventricular, síndrome de pré-excitação, taquicardia ventricular, agitação ventricular, fibrilação ventricular, formas bradicárdicas de arritmias; arritmia, doença pulmonar obstrutiva crônica,

hipertensão, tal como pressão alta sistólica ou diastólica, por exemplo, hipertensão essencial e secundária, por exemplo, incluindo distúrbios vasculares hipertensivos, tais como primária como também todos os tipos de hipertensão arterial secundária, e similares renais, endócrinos, neurogênicos;

distúrbios vasculares periféricos em que o fluxo arterial e/ou ve20 noso é reduzido resultante em um desequilíbrio entre a provisão de sangue e a demanda de oxigênio do tecido, por exemplo, incluindo arterosclerose, doença oclusiva arterial periférica crônica (PAOD), trombose arterial aguda e embolia, distúrbios vasculares inflamatórios, fenômeno de Raynaud e distúrbios venosos; aterosclerose, uma doença em que a parede do vaso é re25 modelada, por exemplo, incluindo acumulação de células, células de músculos lisos e células inflamatórias monócitos/macrófagos, no intimo da parede do vaso;

hipotensão,

- distúrbios associados ao fígado e aos rins,

por exemplo, incluindo distúrbios renais, distúrbios do rim, por

exemplo, insuficiência renal aguda, doença renal aguda, distúrbios hepáticos, por exemplo, cirrose, hepatite, insuficiência do fígado, colestase, hepatite aguda/crônica, colangite esclerosante, cirrose biliar primária, intersticial/glomerulonefrite aguda/crônica, doenças granulomatosas,

- distúrbios associados a condições do estômago ou do pâncreas

por exemplo, incluindo distúrbios do estômago, por exemplo,

úlcera gástrica, úlcera gastrintestinal, distúrbios pancreáticos, fadiga pancreática,

- distúrbios associados ao trato respiratório e ao pulmão

por exemplo, incluindo distúrbios pulmonares, doença pulmonar 10 crônica, síndrome de angústia respiratória aguda (adulta) (ARDS), asma, bronquite asmática, bronquiectasia, distúrbios de pulmão intersticiais difusos, pneumoconioses, aveolite fibrosante, fibrose pulmonar,

- distúrbios associados a condições da pele e dos tecidos con

juntivos

por exemplo, incluindo eczema, dermatite atópica, dermatite de

contato, psoríase, acne, dermatomiosite, síndrome de Sjòrgen, síndrome de Churg-Struass, queimadura de sol, câncer de pele, ferida, urticária, necrólise epidérmica tóxica,

- distúrbios associados a condições alérgicas,

•20 por exemplo, incluindo hipersensibilidade do tipo tardia, conjun

tivite alérgica, alergias a fármacos, rinite, rinite alérgica, vasculite, dermatite de contato;

- distúrbios associados à angiogênese,

por exemplo, incluindo habilidade ineficiente para recrutar provi25 são de sangue, distúrbios caracterizados por angiogênese modificada, angiogênese associada com tumor,

- distúrbios associados ao câncer e a sobreproliferação celular,

por exemplo, incluindo condições pré-malignas, distúrbios hiper

proliferativos, cânceres quer câncer primário ou metastático, cervical e me30 tastático, câncer originando de proliferação celular descontrolada, tumores sólidos, tais como aqueles descritos em W002066019, incluindo câncer pulmonar de célula não-pequena, câncer cervical; crescimento de tumor, linfoma, Iinfoma de células B ou células T, tumores benignos, distúrbios nãoproliferativos benignos, carcinoma renal, câncer esofagiano, câncer de estômago, carcinoma renal, câncer de bexiga, câncer de mama, câncer de cólon, câncer pulmonar, melanoma, câncer nasofaríngeo, osteocarcinoma, 5 câncer ovariano, câncer uterino; câncer de próstata, câncer de pele, leucemia, neovascularização de tumor, angiomas, distúrbios mielodisplásticos, não-responsividade aos sinais de indução de morte normais (imortalização), motilidade e invasidade celulares aumentadas, instabilidade genética, expressão de gene desregulada, câncer (neuro)endócrino (carcinoides), cân10 cer de sangue, Ieucemias linfocíticas, neuroblastoma; câncer de tecido macio, prevenção de metástase,

- distúrbios associados a condições diabéticas,

por exemplo, incluindo diabetes (diabetes tipo I, diabetes tipo II), retinopatia diabética, diabetes insulino-dependente, diabetes melito, diabetes gestacional), hipossecreção de insulina, obesidade;

- distúrbios associados à endometriose, a disfunções testicula

res,

- distúrbios associados a distúrbios infecciosos, por exemplo, com condições infecciosas crônicas,

2ü por exemplo, incluindo distúrbios bacterianos, otite média, doen

ça de Lyme, triodite, distúrbios virais, distúrbios parasitários, distúrbios fúngicos, malária, por exemplo, anemia de malária, sepse, sepse severa, choque séptico, por exemplo, choque séptico induzido por endotoxina, choque tóxico induzido por exotoxina, choque infeccioso (verdadeiro séptico), cho25 que séptico causado por bactérias Gram-negativas, doença inflamatória pélvica, AIDS, enterite, pneumonia; meningite, encefalites, infecção filarial linfática,

- distúrbios associados à miastenia grave,

- distúrbios associado à nefrite,

por exemplo, incluindo glomerulonefrite, nefrite íntersticial, gra

nulomatose de Wegener, fibrose,

- distúrbios associado à dor, por exemplo, distúrbios associados a CNS1 tais como esclerose múltipla, lesão da espinha dorsal, ciática, síndrome de cirurgia das costas mal sucedida, lesão cerebral traumática, epilepsia, doença de Parkinson, pós-acidente vascular cerebral, e lesões vasculares atrás no cérebro e espi5 nha dorsal (por exemplo, infarto, hemorragia, malformação vascular);

dor neuropática não-central, por exemplo, incluindo aquela associada à dor de pós-mastectomia, sensação fantasma, distrofia simpatizante reflexiva (RSD), neuralgiaradioculopatia trigeminal, dor pós-cirúrgica, dor relacionada a HIV/AIDS, dor de câncer, neuropatias metabólicas (por exem10 pio, neuropatia diabética, neuropatia vasculítica secundária à doença de tecido conjuntivo), polineuropatia paraneoplástica associada, por exemplo, à carcinoma de pulmão, ou leucemia, ou linfoma, ou carcinoma de próstata, cólon ou estômago, neuralgia trigeminal, neuralgias cranianas, e neuralgia pós-herpética;

dor associada a dano de nervo periférico, dor central (isto é, de

vido à isquemia cerebral) e várias dores crônicas, isto é, lumbago, dor nas costas (dor lombar), dor inflamatória e/ou reumática;

dor de cefaleia (por exemplo, enxaqueca com aura, enxaqueca sem aura, e outros distúrbios de enxaqueca), cefaleia do tipo tensão episódica e crônica, cefaleia semelhante a do tipo de tensão, cefaleia em salvas, e hemicrânia paroximal crônica;

dor visceral tal como pancreatite, cistite intestinal, dismenorreia, síndrome de intestino irritável, doença de Crohn, cólica biliar, cólica ureteral, infartação do miocárdio e síndromes de dor da cavidade pélvica, por exempio, vulvodinia, orquialgia, síndrome uretral 15 e protatodinia;

dor aguda, por exemplo, dor pós-operatória, e dor pós-trauma;

- distúrbios associados a distúrbios reumáticos, por exemplo, incluindo artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, artrite psoriática, artropatias cristalinas, gota, pseudogota, doença de deposição de pirofosfato de cálcio, síndromes de lúpus, lúpus sistêmico eritematoso, esclerose, escleroderma, esclerose múltipla, arterosclerose, arteriosclerose, espondiloartropatias, esclerose sistêmica, artrite reativa, síndrome de Reiter1 espondilite ancilosante, polimiosite,

- distúrbios associados à sarcoidose,

- distúrbios associados à transplantação,

por exemplo, incluindo crise de rejeição de transplante e outros 5 distúrbios seguindo transplantação, tal como rejeição de (xeno)transplante de órgão ou tecido, por exemplo, para o tratamento de recipientes de, por exemplo, coração, pulmão, coração-pulmão combinado, fígado, rim, pancreático, pele, transplantes córneos, doença de hospedeiro versus enxerto, tal como seguindo transplantação de medula óssea, lesão de reperfusão is10 quêmica,

- controle de natalidade (por meio da inibição de ovulação).

Embora a inibição de ovulação não seja um distúrbio, controle

de natalidade (por meio da inibição de ovulação) é também significado ser abrangido pela definição de "Distúrbios que estão propensos a ser mediados por atividade de CCR9" de acordo com a presente invenção.

Distúrbios que estão propensos a ser mediados por CCR9, por exemplo, incluem preferivelmente

- distúrbios autoimunes,

- distúrbios inflamatórios,

- distúrbios alérgicos,

- distúrbios seguindo transplantação,

- câncer;

mais preferivelmente distúrbios autoimunes, distúrbios inflamatórios, distúrbios seguindo transplantação;

tais como

doença celíaca, alergia alimentares, artrite reumatoide, doenças inflamatórias do intestino (IBD), doença de Crohn, colite ulcerativa, psoríase, dermatite atópica, asma, doenças fibróticas, doenças seguindo transplantação, rejeição de GVH, câncer, leucemia (leucemia linfocítica aguda), tumores sólidos, carcinoides, timoma, carcinoma tímico,

preferivelmente IBD, tal como doença de Crohn, colite ulcerativa, por exemplo, incluindo proctite ulcerativa. Em outro aspecto, a presente invenção fornece

- um composto da presente invenção para uso como um farmacêutico,

- o uso de um composto da presente invenção como um farma

cêutico,

- o uso de um composto da presente invenção para a fabricação de um medicamento,

por exemplo, para o tratamento de distúrbios mediados pela atividade de CCR9;

por exemplo, um composto da presente invenção para o trata

mento de distúrbios mediados pela atividade de CCR9, tais como distúrbios associados à interrupção da ligação de CCR9 a CCL25, tais como distúrbios mediados por retorno mediado por CCR9 de leucócitos em um sujeito; para o tratamento de distúrbios mediados pela atividade de CCR9,

Compostos da fórmula (I) e (II) são 1-benzenossulfonil-1H

indóis.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece

- o uso de um 1-benzenossulfonil-1H-indol como um farmacêutico,

-o uso de um 1-benzenossulfonil-1H-indol para a fabricação de

um medicamento,

por exemplo, para o tratamento de distúrbios mediados pela atividade de CCR9; por exemplo, tais como indicados acima.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto da presente invenção para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doença inflamatória do intestino.

Para uso farmacêutico, um ou mais compostos da presente invenção podem ser usados, por exemplo, uma combinação de dois ou mais compostos da presente invenção, preferivelmente um composto da presente invenção é usado.

Um composto da presente invenção pode ser usado como um farmacêutico na forma de uma composição farmacêutica. Em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção em associação a pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável, por exemplo, veículo e/ou diluente apropriados, por exemplo, incluindo enchedo5 res, aglutinantes, desintegrantes, condicionadores de fluxo, lubrificantes, açúcares ou adoçantes, fragrâncias, conservantes, estabilizantes, agentes umectantes e/ou emulsificantes, solubilizantes, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece - uma composição farmacêutica da presente invenção para o

uso de tratar distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9,

- o uso de uma composição farmacêutica da presente invenção para tratar distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9;

- o uso de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção para o tratamento de doença inflamatória

do intestino.

- o uso de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção para tratar distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9,

Tratamento de distúrbios (doenças) como aqui usados inclui pro

filaxia (prevenção).

Para tal tratamento, a dosagem apropriada, claro, variará, dependendo, por exemplo, da natureza química e dos dados farmacocinéticos de um composto da presente invenção usado, do hospedeiro individual, do 25 modo de administração e da natureza e severidade das condições sendo tratadas. Porém, em geral, para resultados satisfatórios em mamíferos maiores, por exemplo, seres humanos, uma dosagem diária indicada inclui uma faixa

- de cerca de 0,0001 g a cerca de 1,5 g, tal como 0,001 g a 1,5

g,

- de cerca de 0,001 mg/kg peso do corpo a cerca de 20 mg/kg peso do corpo, tal como 0,01 mg/kg peso do corpo a 20 mg/kg peso do corpo, de um composto da presente invenção, por exemplo, administrada em doses divididas até quatro vezes por dia.

Um composto da presente invenção pode ser administrado a mamíferos maiores, por exemplo, seres humanos, por modos similares de administração que convencionalmente usados com outros mediadores, por exemplo, inibidores de peso molecular baixo, da atividade de CCR9.

Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratar distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9, por exemplo, incluindo distúrbios como especificados acima cujo tratamento compreende 10 administrar a um sujeito em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção; por exemplo, na forma de uma composição farmacêutica.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece:

- um composto da presente invenção para a fabricação de um medicamento,

- o uso de um composto da presente invenção para a fabricação de um medicamento, por exemplo, uma composição farmacêutica,

para o tratamento de distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9.

Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratar doença inflamatória do intestino cujo tratamento compreende administrar a um sujeito em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção; por exemplo, na forma de uma composição farmacêutica.

Um composto da presente invenção pode ser administrado por 25 qualquer rota convencional, por exemplo, enteralmente, por exemplo, incluindo administração nasal, bucal, retal, oral; parenteralmente, por exemplo, incluindo administração intravenosa, intra-arterial, intramuscular, intracardíaca, subcutânea, infusão intraóssea, transdérmica (difusão através da pele intacta), transmucosal (difusão através de uma membrana mucosa), inalató30 ria; topicamente; por exemplo, incluindo administração epicutânea, intranasal, intratraqueal; intraperitoneal (infusão ou injeção na cavidade peritoneal); epidural (peridural) (injeção ou infusão no espaço epidural); intratecal (injeção ou infusão no fluido cérebro-espinhal); intravitreal (administração por meio do olho); ou por meio de dispositivos médicos, por exemplo, para liberação local, por exemplo, stents, por exemplo, na forma de tabletes revestidos ou não-revestidos, cápsulas, soluções (injetáveis), soluções de infusão, 5 soluções sólidas, suspensões, dispersões, dispersões sólidas; por exemplo, na forma de ampolas, frascos, na forma de cremes, géis, pastas, pó inalador, espumas, tinturas, bastões labiais, gotas, pulverizações, ou na forma de supositórios.

Para uso tópico, por exemplo, incluindo administração ao olho, resultados satisfatórios podem ser obtidos com administração local de uma concentração de 0,5 a 10%, tal como 1 a 3% de várias vezes de substância ativa diariamente, por exemplo, 2 a 5 vezes ao dia.

Um composto da presente invenção pode ser administrado na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um sal de adi15 ção de ácido ou sal de metal; ou na forma livre; opcionalmente na forma de um solvato. Um composto da presente invenção na forma de um sal apresenta a mesma ordem de atividade que um composto da presente invenção na forma livre; opcionalmente na forma de um solvato.

Um composto da presente invenção pode ser usado para qualquer método ou usado como descrito aqui sozinho ou em combinação com uma ou mais, pelo menos uma, outra segunda substância de fármaco.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece:

- Uma combinação de um composto da presente invenção com pelo menos uma segunda substância de fármaco;

- Uma combinação farmacêutica compreendendo um composto

da presente invenção em combinação com pelo menos uma segunda substância de fármaco;

- Uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção em combinação com pelo menos uma segunda subs

tância de fármaco e um ou mais excipiente(s) mais farmaceuticamente aceitáveis);

- Um composto da presente invenção em combinação com pelo menos uma segunda substância de fármaco, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica, para o uso em qualquer método como definido aqui, por exemplo

- Uma combinação, uma combinação farmacêutica ou uma composição farmacêutica, compreendendo um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância de fármaco para uso como um farmacêutico;

- O uso como um farmacêutico de um composto da presente invenção em combinação com pelo menos uma segunda substância de fár

maco, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica;

- O uso de um composto da presente invenção para a fabricação de um medicamento para o uso em combinação com uma segunda substância de fármaco; por exemplo, para qualquer tratamento terapêutico como

indicado aqui;

- Um método para tratar distúrbios mediados pela atividade de CCR9 em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo coadministrar, concomitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção e pelo menos uma se

-20 gunda substância de fármaco, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica;

- Um composto da presente invenção em combinação com pelo menos uma segunda substância de fármaco, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica, para o uso na preparação de um

medicamento para o uso em distúrbios mediados pela atividade de CCR9.

Combinações incluem combinações fixas em que um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância de fármaco estão na mesma formulação; kits em que um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância de fármaco em formulações se

paradas são fornecidos no mesmo pacote, por exemplo, com instrução para coadministração; e combinações livres em que um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância de fármaco são empacotados separadamente, mas instrução para administração concomitante ou seqüencial é dada.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece:

- Um pacote farmacêutico compreendendo uma primeira substância de fármaco que é um composto da presente invenção e pelo menos

uma segunda substância de fármaco, além de instruções para administração combinada;

- Um pacote farmacêutico compreendendo um composto da presente invenção além de instruções para administração combinada com

pelo menos uma segunda substância de fármaco;

- Um pacote farmacêutico compreendendo pelo menos uma segunda substância de fármaco além de instruções para administração combinada com um composto da presente invenção.

Tratamento com combinações de acordo com a presente inven

ção pode fornecer melhorias comparadas a tratamento simples.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece:

- Uma combinação farmacêutica compreendendo uma quantidade de um composto da presente invenção e uma quantidade de uma segunda substância de fármaco, em que as quantidades são apropriadas para

produzir um efeito terapêutico sinergístico;

- Um método para melhorar a utilidade terapêutica do composto da presente invenção compreendendo coadministrar, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto da presente invenção e uma segunda substância de fármaco.

- Um método para melhorar a utilidade terapêutica de uma se

gunda substância de fármaco compreendendo coadministrar, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto da presente invenção e uma segunda substância de fármaco.

Uma combinação da presente invenção e uma segunda subs

tância de fármaco como um par de combinação podem ser administradas por qualquer rota convencional, por exemplo, como exposta acima para um composto da presente invenção. Um segundo fármaco pode ser administrado em dosagens conforme apropriado, por exemplo, em faixas de dosagem que são similares àquelas usadas para tratamento simples, ou, por exemplo, no caso de sinergia, faixas de dosagem convencionais até mesmo mais baixas.

Composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção podem ser fabricadas de acordo, por exemplo, analogamente, com um método como convencional, por exemplo, processos de mistura, granulação, revestimento, dissolução ou liofilização. Formas de dosagem de unidade 10 podem conter, por exemplo, de cerca de 0,1 mg a cerca de 1500 mg, tal como 1 mg a cerca de 1000 mg.

Composições farmacêuticas compreendendo uma combinação da presente invenção e composições farmacêuticas compreendendo um segundo fármaco como descrito aqui, podem ser fornecidas conforme apro15 priado, por exemplo, de acordo, por exemplo, analogamente, com um método como convencional, ou como descrito aqui para uma composição farmacêutica da presente invenção.

Pelo termo "segunda substância de fármaco" é significado um fármaco quimioterapêutico, especialmente qualquer agente quimioterapêutico, diferente de um agente da presente invenção.

Por exemplo, uma segunda substância de fármaco como aqui usada inclui:

- outros inibidores de CCR9 que um composto da presente invenção, por exemplo, incluindo anticorpos e compostos de peso molecular

baixo,

- fármacos anti-inflamatórios e/ou imunomoduladores,

- fármacos antialérgicos

- fármacos anticâncer

- fármacos anestésicos - fármacos antidiarreicos.

Para tratamento de IBD o termo "segunda substância de fármaco" é significado incluir um fármaco anti-inflamatório e/ou um imunomodulador, por exemplo, incluindo um fármaco que é ativo na prevenção ou tratamento de IBD e/ou que é ativo em tratar manifestações de IBD, por exemplo, sintomas de IBD, tais como um fármaco anestésico ou um fármaco antidia rreico.

Fármacos anti-inflamatórios e/ou imunomoduladores que são propensos ser úteis em combinação com um composto da presente invenção incluem por exemplo

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de mTOR, incluindo rapamicina da fórmula

41

HO,,

H3CO 39

35

36 CH3 I 3 O 32/^\ 33 ΓΙ 31 i 34 ; 1 Ã o 30

28 ^OH

-o

Η3°°"'

25

11

OCH

3 H3C1 18 20 17 22 CH3 19 21 e derivados de rapamicina, por exemplo, incluindo

derivados de 40-0-alquil-rapamicina, tais como derivados de 40-

O-hidroxialquil-rapamicina, tais como 40-0-(2-hidróxi)-etil-rapamicina (everolimus),

derivados de 32-deoxo-rapamicina e derivados de 32-hidróxirapamicina, tais como 32-deoxorapamicina,

derivados de rapamicina 16-0-substituídos tais como 16-pent-2-inilóxi-32- deoxorapamicina, 16-pent-2-inilóxi-32(S ou R)-di-hidro-rapamicina, 16-pent

2-inilóxi-32(S ou R)-di-hidro-40-0-(2-hidroxietil)-rapamicina,

derivados de rapamicina que são acilados ao grupo oxigênio na posição 40, por exemplo, 40-[3-hidróxi-2-(hidróxi-metil)-2-metilpropanoato]rapamicina (também conhecido como CCI779), derivados de rapamicina que são substituídos na posição 40 através de heterociclila, por exemplo, 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (também conhecida como ABT578),

os assim chamados rapálogos, por exemplo, como descritos em W09802441, W00114387 e W00364383, tais como AP23573, e

compostos descritos sob o nome TAFA-93, AP23464, AP23675, AP23841 e biolimus (por exemplo, biolimus A9).

- mediadores, por exemplo, inibidores, de calcineurina, por exemplo, ciclosporina A, FK 506;

- ascomicinas tendo propriedades imunossupressivas, por e

xemplo, ABT-281, ASM981;

- corticosteroides; ciclofosfamida; azatiopreno; leflunomida; mi

zoribina;

- ácido micofenólico ou sal; por exemplo, sódio, micofenolato de

mofetila;

- 15-deoxispergualina ou um homólogo imunossupressor, análogo ou derivado do mesmo;

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de bcr-abl tirosina cinase;

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade do receptor

c-kit de tirosina cinase;

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de receptor PDGF de tirosina cinase, por exemplo, Gleevec (imatinib);

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de p38 MAP

cinase,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de receptor VEGF de tirosina cinase,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de PKC, por exemplo, como descrito em W00238561 ou W00382859, por exemplo, o

composto do Exemplo 56 ou 70;

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de JAK3 cinase, por exemplo, a-ciano-(3,4-di-hidróxi)-]N-benzilcinamamida de Nbenzil-3,4-di-hidróxi-benzilideno-cianoacetamida (Tyrphostin AG 490), prodigiosina 25-C (PNU156804), [4-(4'-hidroxifenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-P131), [4-(3'-bromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-P154), [4-(3\5'-dibromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquina5 zolina] WHI-P97, KRX-211, 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1-il}-3-oxo-propionitrila, na forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, monocitrato (também chamado CP-690,550), ou um composto como descrito em W02004052359 ou W02005066156;

- mediadores, por exemplo, agonistas ou moduladores da ativi

dade de receptor S1P, por exemplo, FTY720 opcionalmente fosforilado ou um análogo do mesmo, por exemplo, 2-amino-2-[4-(3-benziloxifeniltio)-2- clorofenil]etil-1,3-propanodiol opcionalmente fosforilado ou ácido 1-{4-[1-(4- ciclo-hexil-3-trifluorometil-benziloxi-imino)-etil]-2-etil-benzil}-azetidino-3-

carboxílico ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis;

- anticorpos monoclonais imunossupressores, por exemplo, anticorpos monoclonais para receptores de leucócitos, por exemplo, receptor Blys/BAFF, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD40, CD45, CD52, CD58, CD80, CD86, receptor IL-12, receptor IL-17, receptor IL-23 ou

seus ligantes;

- outros compostos imunomoduladores, por exemplo, uma molécula de ligação recombinante tendo pelo menos uma porção do domínio extracelular de CTLA4 ou um mutante do mesmo, por exemplo, pelo menos uma porção extracelular de CTLA4 ou um mutante do mesmo unida a uma

seqüência de proteína de não-CTLA4, por exemplo, CTLA4lg (por exemplo, designada ATCC 68629) ou um mutante da mesma, por exemplo, LEA29Y;

- mediadores, por exemplo, inibidores das atividades das moléculas de adesão, por exemplo, antagonistas de LFA-1, antagonistas de ICAM-1 ou 3, antagonistas de VCAM-4 ou antagonistas de VLA-4,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de MIF,

- agentes de 5-aminossalicilato (5-ASA), tais como sulfasalazina, Azulfidine®, Asacol®, Dipentum®, Pentasa®, Rowasa®, Canasa®, Colazal®, por exemplo, fármacos contendo mesalamina; por exemplo, mesalazina em combinação com heparina;

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de TNF-alfa, por exemplo, incluindo anticorpos que ligam a TNF-alfa, por exemplo, infli

ximab (Remicade®), talidomida, lenalidomida,

- fármacos anti-inflamatórios não-esteroidais de liberação de óxido nítrico (NSAIDs), por exemplo, incluindo fármacos doadores de No de inibição de COX (CINOD);

- fosfordiesterase, por exemplo, mediadores, tais como inibidores da atividade de PDE4B,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de caspase,

- mediadores, por exemplo, agonistas, do receptor acoplado à proteína G GPBAR1,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de ceramida

cinase,

- fármacos 'anti-inflamatórios multifuncionais' (MFAIDs), por exemplo, inibidores da fosfolipase citosólica A2 (cPLA2), tais como inibidores da fosfolipase A2 atracada à membrana ligada a glicosaminoglicanos;

- antibióticos, tais como penicilinas, cefalosporinas, eritromicinas, tetraciclinas, sulfonamidas, tais como sulfadiazina, sulfisoxazol; sulfo

nas, tais como dapsona; pleuromutilinas, fluoroquinolonas, por exemplo, metronidazol, quinolonas tais como ciprofloxacina; levofloxacina; probiótico e bactérias comensais, por exemplo, Lactobacillus, Lactobacillus reuteri;

- fármacos antivirais, tais como ribivirina, vidarabina, aciclovir, ganciclovir, zanamivir, fosfato de oseltamivir, fanciclovir, atazanavir, amanta

dina, didanosina, efavirenz, foscarnet, indinavir, lamivudina, nelfinavir, ritonavir, saquinavir, estavudina, valaciclovir, valganciclovir, zidovudina.

Fármacos anti-inflamatórios que são propensos a ser úteis em combinação com um composto da presente invenção incluem, por exemplo, agentes anti-inflamatórios não-esteroides (NSAIDs) tais como derivados de ácido propiônico (aIminoprofeno, benoxaprofeno, ácido buclóxico, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, fluprofeno, flurbiprofeno, ibuprofeno, indoprofeno, cetoprofeno, miroprofeno, naproxeno, oxaprozina, pirprofeno, pranoprofeno, suprofeno, ácido tiaprofênico, e tioxaprofeno), derivados de ácido acético (indometacina, acemetacina, alclofenaco, clidanaco, diclofenaco, fenclofenaco, ácido fenclózico, fentiazaco, furofenaco, ibufenaco, isoxepaco, oxpi5 naco, sulindaco, tiopinaco, tolmetin, zidometacina, e zomepiraco), derivados de ácido fenâmico (ácido flufenámico, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, ácido niflúmico e ácido tolfenâmico), derivados de ácido bifenilcarboxíIico (diflunisal e flufenisal), oxicans (isoxicam, piroxicam, sudoxicam e tenoxican), salicilatos (ácido acetil salicílico, sulfasalazina) e as pirazolonas (a10 pazona, bezpiperilona, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona, fenilbutazona); inibidores de ciclo-oxigenase-2 (COX-2) tais como celecoxib; inibidores de fosfodiesterase tipo IV (PDE-IV); antagonistas dos receptores de quimiocina, especialmente CCR1, CCR2, e CCR3; agentes redutores de colesterol tais como inibidores de HMG-CoA reductase (lovastatina, simvas15 tatina e pravastatina, fluvastatina, atorvastatina, e outras estatinas), sequestrantes (colestiramina e colestipol), ácido nicotínico, derivados de ácido fenofíbrico (genfibrozil, clofibrat, fenofibrato e benzafibrato), e probucol; agentes anticolinérgicos tais como antagonistas muscarínicos (brometo de ipratrópio); outros compostos tais como teofilina, sulfasalazina e aminossalicilatos, 20 por exemplo, ácido 5-aminossalicílico e pró-fármacos dos mesmos, antirreumáticos.

Fármacos antialérgicos que são propensos a ser úteis em combinação com um composto da presente invenção incluem, por exemplo, antihistamínicos (antagonistas de H1-histamina), por exemplo, bromofeniramina, 25 clorfeniramina, dexclorfeniramina, triprolidina, clemastina, difenidramina, difenilpiralina, tripelenamina, hidroxizina, metdilazina, prometazina, trimeprazina, azatadina, cipro-heptadina, antazolina, pirilamina de feniramina, astemizol, terfenadina, loratadina, cetirizina, fexofenadina, descarboetoxiloratadina, e antiasmáticos não-esteroides tais como p2-agonistas (terbutalina, meta30 proterenol, fenoterol, isoetarina, albuterol, bitolterol, salmeterol e pirbuterol), teofilina, cromolin de sódico, atropina, brometo de ipratrópio, antagonistas de Ieucotrieno (zafirlukast, montelukast, pranlukast, iralukast, pobilukast, SKB-106,203), inibidores da biossíntese de Ieucotrieno (zileuton, BAY1005); broncodilatadores, antiasmáticos (estabilizantes de mastócitos).

Fármacos anticancer que são propensos a ser úteis como um par de combinação com um composto da presente invenção, por exemplo, incluem:

i. um esteroide; por exemplo, prednisona.

ii. um inibidor de adenosino-cinase; que direciona, diminui ou inibe nucleobase, nucleosídeo, metabolismos de nucleotídeo e de ácido nucleico, tais como 5-lodotubercidina, que é também conhecida como 7H

pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina, 5-iodo-7-p-D-ribofuranosila.

iii. um adjuvante; que intensifica a ligação de 5-FU-TS como também um composto que direciona, diminui ou inibe, fosfatase alcalina, tal como leucovorin, levamisol.

iv. antagonista de córtex adrenal; que direciona, diminui ou inibe a atividade do córtex adrenal e altera o metabolismo periférico dos corticos

teroides, resultando em uma diminuição em 17-hidroxicorticosteroides, tais como mitotano.

v. um inibidor da via de AKT; tal como um composto que direciona, diminui ou inibe Akt, também conhecido como proteína cinase B (PKB),

tal como deguelina, que é também conhecida como 3H-bis[1 Jbenzopirano [3,4-b:6',5'-e]piran-7(7aH)-ona, 13,13a-di-hidro-9,10-dimetóxi-3,3-dimetil-, (7aS, 13aS); e triciribina, que é também conhecida como 1,4,5,6,8-pentaazaacenaftilen-3-amina, 1,5-di-hidro-5-metil-1 -β-D-ribofuranosila.

vi. um agente de alquilação; que causa alquilação do DNA e resulta em fraturas nas moléculas de DNA como também reticulação das fitas

gêmeas, desse modo interferindo com a replicação do DNA e transcrição do RNA, tal como mostardas de nitrogênio, por exemplo, clorambucil, clormetina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalan, estramustina (Emcyt®); nitrosureias, tais como carmustina, fotemustina, lomustina, estreptozocina (estreptozoto30 cina, STZ, Zanosar®), BCNU; Gliadel; dacarbazina, mecloretamina, por exemplo, na forma de um cloridrato, procarbazina, por exemplo, na forma de um cloridrato, tiotepa, temozolomida (TEMODAR®), mitomicina, altretamina, bussulfano, estramustina, uramustina. Ciclofosfamida pode ser administrada, por exemplo, na forma como é comercializada, por exemplo, sob a marca registrada CYCLOSTIN®; e ifosfamida como HOLOXAN®.

vii. um inibidor de angiogênese; que direciona, diminui ou inibe a produção de vasos sanguíneos novos, por exemplo, que direciona metionina

aminopeptidase-2 (MetAP-2), proteína-1 de macrófagos inflamatórios (MIP

1 alfa), CCL5, TGF-beta, lipoxigenase, ciclo-oxigenase, e topoisomerase, ou que indiretamente direciona síntese de p21, p53, CDK2 e colágeno, por exemplo, incluindo fumagilina, que é conhecida como éster de mono[(3R,4S, 10 5S,6R)-5-metóxi-4-[(2R,3R)-2-metil-3-(3-metil-2-butenil)oxiranil]-1-oxaspiro [2,5]oct-6-ila] de ácido 2,4,6,8-decatetraenedióico, (2E,4E,6E,8E)-(9CI); chiconina, que é também conhecida como 1,4-naftalenodiona, 5,8-di-hidróxi-2- [(1R)-1-hidróxi-4-metil-3-pentenil]-(9CI); tranilast, que é também conhecido como ácido benzóico, 2-[[3-(3,4-dimetoxifenil)-1-oxo-2-propenil]amino]; ácido 15 ursólico; suramin; bengamida ou um derivado da mesma, talidomida, TNP470.

viii. um antiandrógeno; que bloqueia a ação dos andrógenos de origem adrenal e testicular que estimula o crescimento de tecido normal e prostático maligno, tal como nilutamida; bicalutamida (CASODEX®) que po

de ser formulada por exemplo, como descrito em US4636505.

ix. um antiestrogênio; que antagoniza o efeito dos estrogênios no nível do receptor de estrogênio, por exemplo, incluindo um inibidor de aromatase que inibe a produção de estrogênio, isto é, a conversão dos substratos androstenediona e testosterona para estrona e estradiol, respectivamen

te, por exemplo, incluindo atamestano, exemestano, formestano, aminoglutetimida, rogletimída, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, cetoconazol, vorozol, fadrozol, anastrozol, letrozol, toremifeno; bicalutamida; flutamida; tamoxifeno, citrato de tamoxifeno; tamoxifeno; fulvestrant; raloxifeno, cloridrato de raloxifeno. Tamoxifeno pode ser, por exemplo, administrado na 30 forma como é comercializado, por exemplo, NOLVADEX®; e cloridrato de raloxifeno é comercializado como EVISTA®. Fulvestrant pode ser formulado como descrito em US4659516 e é comercializado como FASLODEX®. x. um agente de anti-hipercalcemia; que é usado para tratar hipercalcemia, tal como hidrato de nitrato de gálio (III); e pamidronato de dissódio.

xi. um antimetabólito; que inibe ou rompe a síntese de DNA que 5 resulta em morte celular, tal como ácidos fólicos, por exemplo, metotrexato,

pemetrexed, raltitrexed; purinas, por exemplo, 6-mercaptopurina, cladribina, clofarabina; fludarabina, tioguanina (tioguanina), 6-tioguanina, pentostatina (deoxicoformicina); citarabina; flexuridina; fluorouracila; 5-fluorouracila (5- FU), floxuridina (5-FUdR), capecitabina; gencitabina; cloridrato de gencitabi10 na; hidroxiureia (por exemplo, Hidrea®); agentes de desmetilação de DNA, tais como 5-azacitidina e decitabina; edatrexato. Capecitabina e gencitabina podem ser administradas, por exemplo, na forma comercializada, tal como XELODA® e GEMZAR®.

xii. um indutor de apoptose; que induz a série normal dos even15 tos em uma célula que conduz a sua morte, por exemplo, seletivamente induzindo o inibidor mamífero ligado a X da proteína de apoptose XIAP, ou, por exemplo, sub-regulando BCL-xL; tal como etanol, 2-[[3-(2,3-diclorofenóxi)propil]amino]; ácido gambógico; embelina, que é também conhecida como 2,5-ciclo-hexadieno-1,4-diona, 2,5-di-hidróxi-3-undecil- (9CI); trióxido arsêni

k ■ 20 co.

xiii. um inibidor de aurora cinase; que direciona, diminui ou inibe estágios posteriores do ciclo celular do ponto de verificação de G2/M todo o trajeto através do ponto de verificação mitótico e mitose tardia; tal como binucleína 2, que é também conhecida como metanimidamida, N'-[1-(3-cloro

25 4-fluorofenil)-4-ciano-1 H-pirazol-5-il]-N,N-dimetil-(9CI).

xiv. Um inibidor de tirosina cinase de Bruton (BTK); que direciona, diminui ou inibe o desenvolvimento de células B humanas e murinas; tal como ácido terreico.

xv. um inibidor de calcineurina; que direciona, diminui ou inibe a 30 via de ativação de células T, tal como cipermetrina, que é também conhecida como ácido ciclopropanocarboxílico, éster de 3-(2,2-dicloroetenil)-2,2- dimetil-,ciano(3-fenoxifenil)metila; deltametrina, que é também conhecida como ácido ciclopropanocarboxílico, éster de 3-(2,2-dibromoetenil)-2,2- dimetil-(S)-ciano(3-fenoxifenil)metila, (1R,3R); fenvalerato, que é também conhecido como ácido benzenoacético, éster de 4-cloro-a-(1-metiletil)-ciano (3-fenoxifenil)metila; e Tirfostina 8; mas excluindo ciclosporina ou FK506.

xvi. um inibidor CaM cinase II; que direciona, diminui ou inibe

CaM cinases; constituindo uma família de enzimas estruturalmente relacionadas que incluem fosforilase cinase, miosina cinase de cadeia leve, e CaM cinases I a IV; tais como ácido 5-isoquinolinossulfônico, éster de 4-[(2S)-2- [(5-isoquinolinilsulfonil)metilamino]-3-oxo-3-(4-fenil-1-piperazinil)propil]fenila

(9CI); Benzenossulfonamida, N-[2-[[[3-(4-clorofenil)-2-propenil]metil]amino] metil]fenil]-N-(2-hidroxietil)-4-metóxi.

xvii. um inibidor de CD45 tirosina fosfatase; que direciona, diminui ou inibe resíduos de pTyr reguladoers de desfosforilação em proteínatirosina cinases da família de Src que auxilia no tratamento de uma varieda

de de distúrbios inflamatórios e imunes; tais como ácido fosfônico, [[2-(4- bromofenóxi)-5-nitrofenil]hidroximetila].

xviii. um inibidor de CDC25 fosfatase; que direciona, diminui ou inibe cinases ciclina-dependentes supraexpressadas defosforiladas em tumores; tal como 1,4-naftalenodiona, 2,3-bis[(2-hidroietil)tio].

xix. um inibidor de CHK cinase; que direciona, diminui ou inibe

sobreexpressão da proteína antiapoptótica Bcl-2; tal como desbromoimenialdisína. Alvos de um inibidor de CHK cinase são CHK1 e/ou CHK2.

xx. um agente controlador para regular genisteína, olomucina e/ou tirfostinas; tal como daidzeína, que é também conhecida como 4H-1-

benzopiran-4-ona, 7-hidróxi-3-(4-hidroxifenila); Iso-Olomoucina, e Tirfostina 1,

xxi. um inibidor de ciclo-oxigenase; por exemplo, incluindo inibidores de Cox-2; que direciona, diminui ou inibe a enzima Cox-2 (ciclooxigenase-2); tal como 1H-indol-3-acetamida, 1 -(4-clorobenzoil)-5-metóxi-2-

metil-N-(2-feniletil); ácido 5-alquil 2-arilaminofenilacético substituído e derivados, por exemplo, celecoxib (CELEBREX®), rofecoxib (VIOXX®), etoricoxib, valdecoxib; ou um ácido 5-alquil-2-arilaminofenilacético, por exemplo, ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6’-fluoroanilino)fenil acético, lumiracoxib; e celecoxib.

xxii. um inibidor de cRAF cinase; que direciona, diminui ou inibe a suprarregulação de E-selectina e adesão vascular molécula-1 induzida por

5 TNF; tal como 3-(3,5-dibromo-4-hidroxibenzilideno)-5-iodo-1,3-di-hidroindol

2-ona; e benzamida, 3-(dimetilamino)-N-[3-[(4-hidroxibenzoil)amino]-4-metilfenila]. Raf cinases representam um papel importante como cinases reguladoras de sinal extracelulares na diferenciação, proliferação, e apoptose celulares. Um alvo de um inibidor de cRAF cinase inclui, mas não é limitado a, RAF1.

xxiii. um inibidor cinase ciclina-dependente; que direciona, diminui ou inibe cinase ciclina-dependente que representa um papel na regulação do ciclo de células mamíferas; tal como N9-isopropil-olomoucina; olomoucina; purvalanol B, que é também conhecido como ácido benzóico, 2-

cloro-4-[[2-[[(1 R)-1-(hidroximetil)-2-metilpropil]amino]-9-(1-metiletil)-9H-purin6-il]amino]-(9CI); roascovitina; indirrubina, que é também conhecida como 2H-indol-2-ona, 3-(1,3-di-hidro-3-oxo-2H-indol-2-ilideno)-1,3-di-hidro-(9CI); kenpaullone, que é também conhecido como indol[3,2-d][1]benzazepin6(5H)-ona, 9-bromo-7,12-di-hidro-(9CI); purvalanol A, que é também conhe20 cido como 1-butanol, 2-[[6-[(3-clorofenil)amino]-9-(1-metiletil)-9H-purin-2- il]amino]-3-metil-, (2R)-(9CI); indirrubin-3'-mono-oxima. Progressão do ciclo celular é regulada por uma série de eventos seqüenciais que incluem a ativação e inativação subsequente das cinases ciclína-dependentes (Cdks) e ciclinas. Cdks são um grupo de serina/treonina cinases que formam comple25 xos heterodiméricos ativos ligando às suas subunidades reguladoras, ciclinas. Exemplos de alvos de um inibidor de cinase ciclina-dependente incluem, mas não são limitados a, CDK, AHR, CDK1, CDK2, CDK5, CDK4/6, GSK3beta, e ERK.

xxiv. um inibidor de cisteína protease; que direciona, diminui ou inibe cisteína protease que representa um papel vital no giro celular mamífero e apotose; tal como 4-morfolinocarboxamida,N-[(1S)-3-flúor-2-oxo-1-(2- feniletil)propil]amino]-2-oxo-1-(fenilmetil)etila]. xxv. um intercalador de DNA; que liga ao DNA e inibe a síntese de DNA, RNA, e protéica; tal como plicamicina, dactinomicina.

xxvi. um rompedor de fita de DNA; que causa cisão da fita de DNA e resulta na inibição da síntese de DNA, inibição da síntese de RNA e

5 protéica; tal como bleomicina.

xxvii. um inibidor de E3 Ligase; que direciona, diminui ou inibe a E3 ligase que inibe a transferência de cadeias de ubiquitina para proteínas, marcando-as para degradação na proteassoma; tal como N-((3,3,3-triflúor-2- trifluorometil)propionil)sulfanilamida.

xxviii. um hormônio endócrino; que agindo principalmente na

glândula pituitária causa a supressão dos hormônios nos machos, o efeito bruto sendo uma redução da testosterona para níveis de castração; em fêmeas, síntese de estrogênio e de androgênio ovarianos sendo inibida; tal como leuprolida; megestrol, acetato de megestrol.

xxix. compostos direcionando, diminuindo ou inibindo a atividade

da família de fator de crescimento epidérmica do receptor tirosina cinases (EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 como homoou heterodímeros), tais como compostos, proteínas ou anticorpos que inibem os membros da família de tirosina cinase do receptor de EGF, por exemplo, receptor de EGF, ErbBI, 20 ErbB2, ErbB3 e ErbB4 ou liga a EGF ou Iigantes relacionados a EGF, e são em particular aqueles compostos, proteínas ou anticorpos monoclonais genérica e especificamente descritos em WO 9702266, por exemplo, o composto do exemplo 39, EP0564409, W09903854, EP0520722, EP0566226, EP0787722, EP0837063, US5747498, W09810767, W09730034, 25 W09749688, W09738983 e, especialmente, W09630347, por exemplo, um composto conhecido como CP 358774, W09633980, por exemplo, um composto conhecido como ZD 1839; e WO 9503283, por exemplo, um composto conhecido como ZM105180, por exemplo, incluindo o inibidor de tirosina cinase de ação dual (ErbB1 e ErbB2) Iapatinib (GSK572016), por e30 xemplo, ditosilato de lapatinib; panituzumab, trastuzumab (HERCEPTIN®), cetuximab, iressa, OSI-774, CI-1033, EKB-569, GW-2016, E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3 ou E7.6.3, derivados de 7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidina que são, por exemplo, descritos em W003013541, erlotinib, gefitinib. Erlotinib pode ser administrado na forma como é comercializado, por exemplo, TARCEVA®, e gefitinib como IRESSA®, anticorpos monoclonais humanos contra o receptor de fator de crescimento epidérmico incluindo ABX-EGFR.

xxx. um inibidor de EGFR, PDGFR tirosina cinase; tal como ini

bidores de EGFR cinase incluindo tirfostina 23, tirfostina 25, tirfostina 47, tirfostina 51 e tirfostina AG 825; 2-propenamida, 2-ciano-3-(3,4-di-hidroxifenil)-N-fenil-(2E); tirfostina Ag 1478; Iavendustina A; 3-piridinoacetonitrila, a[(3,5-diclorofenil)metileno]-> (aZ); um exemplo de um EGFR, inibidor de 10 PDGFR tirosina cinase, por exemplo, inclui tirfostina 46, inibidor de PDGFR tirosina cinase incluindo tirfostina 46. Alvos de um inibidor de EGFR cinase incluem guanilil ciclase (GC-C) HER2, EGFR, PTK e tubulina.

xxxi. um inibidor de farnesiltransferase; que direciona, diminui ou inibe a proteína Ras; tal como ácido a-hidroxifarnesilfosfônico; ácido buta

nóico, éster de 2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-amino-3-mercaptopropil] amino]-3-metilpentil]oxi]-1-oxo-3-fenilpropil]amino]-4-(metilsulfonil)-,1-metiletila, (2S); manumicina A; L-744,832 ou DK8G557, tipifarnib (R115777), SCH66336 (lonafamib), BMS-214662.

xxxii. um inibidor de Flk-1 cinase; que direciona, diminui ou inibe -20 atividade de Flk-1 tirosina cinase; tal como 2-propenamida, 2-ciano-3-[4-

hidróxi-3,5-bis(1-metiletil)fenil]-N-(3-fenilpropil)-(2E). Um alvo de um inibidor de Flk-1 cinase inclui, mas não é limitado a, KDR.

xxxiii. um inibidor de glicogênio cinase-3 sintase (GSK3); que direciona, diminui ou inibe glicogênio cinase-3 sintase (GSK3); tal como indi

rubin-3'-mono-oxima. Glicogênio Cinase-3 Syntase (GSK-3; proteína tau cinase I), uma proteína serina/treonina cinase altamente conservada, ubiquamente expressada, está envolvida nas cascatas de transdução de sinal de processos celulares múltiplos, que é uma proteína cinase que foi mostrada estar envolvida na regulação de um arranjo diverso de funções celulares, 30 incluindo síntese protéica, proliferação de célula, diferenciação de célula, montagem/desmontagem de microtúbulo, e apoptose.

xxxiv. um inibidor de histona desacetilase (HDAC); que inibe a histona desacetilase e que possui atividade antiproliferativa; tal como compostos descritos em W00222577, especialmente N-hidróxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(1 H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, e N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida e sais 5 farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos; ácido hidroxâmico de suberoilanilida (SAHA); éster de piridino-3-ilmetila de ácido [4-(2-amino-fenilcarbamoil)-benzil]-carbâmico e derivados do mesmo; ácido butírico, piroxamida, tricostatina A, oxanflatina, apicidina, depsipeptídeo; depudecina; trapoxina, toxina HC1 que é também conhecida como ciclo[L-alanil-D-alanil-((S,2S)-(10 amino-(-oxo-oxiraneoctanoil-D-prolila] (9CI); fenilbutirato de sódio, ácido bishidroxâmico de suberoíla; Tricostatina A, BMS-27275, piroxamida, FR901228, ácido valpróco.

xxxv. Um inibidor de HSP90; que direciona, diminui ou inibe a atividade de ATPase intrínseca de HSP90; degrada, direciona, diminui ou ini15 be as proteínas de HSP90 clientes por meio da via de proteossoma de ubiquitina. Compostos que direcionam, diminuem ou inibem a atividade de ATPase intrínseca de HSP90 são especialmente compostos, proteínas ou anticorpos que inibem a atividade de ATPase de HSP90, por exemplo, 17- alilamino,17-demetoxigeldanamicina (17AAG), um derivado de geldanamici20 na; outros compostos relacionados à geldanamicina; radicicol e inibidores de HDAC. Outros exemplos de um inibidor de HSP90 incluem geldanamicina, 17-demetóxi-17-(2-propenilamino). Alvos indiretos potenciais de um inibidor de HSP90 incluem FLT3, BCR-ABL, CHK1, CYP3A5*3 e/ou NQ01*2. Nilotinib é um exemplo de um inibidor de BCR-ABL tirosina cinase.

xxxvi. um inibidor de l-capa B-alfa cinase (IKK); que direciona,

diminui ou inibe NF-capaB, tal como 2-propenenitrila, 3-[(4-metilfenil) sulfonil]-(2E).

xxxvii. um inibidor tirosina cinase de receptor de insulina; que modula as atividades de 3-cinase de fosfatidilinositol, proteína associada ao

microtúbulo, e S6 cinases; tal como ácido hidroxil-2-naftalenilmetilfosfônico, LY294002.

xxxviii. um inibidor de c-Jun N-terminal cinase (JNK) cinase; que direciona, diminui ou inibe Jun N-terminal cinase; tal como pirazoleantrona e/ou gaiato de epigalocatequeina. Jun N-terminal cinase (JNK), uma proteína cinase serina-direcionada, está envolvida na fosforilação e ativação de c- ~ Jun e ATF2 e representa um papel significativo em metabolismo, crescimen5 to, diferenciação celular, e apoptose. Um alvo para um inibidor de JNK cinase inclui, mas não é limitado a, DNMT.

xxxix. um agente de ligação de microtúbulo; que age rompendo a rede microtubular que é essencial para função celular mitótica e interfase; tal como alcalóides de vinca, por exemplo, vinblastina, sulfato de vinblastina;

10 vincristina, sulfato de vincristina; vindesina; vinorelbina; taxanos, tais como taxanos, por exemplo, docetaxel; paclitaxel; discodermolidas; cochicina, epotilonas e derivados das mesmas, por exemplo, epotilona B ou um derivado da mesma. Paclitaxel é comercializado como TAXOL®; docetaxel como TAXOTERE®; sulfato de vinblastina como VINBLASTIN R.P®; e sulfato de 15 vincristina como FARMISTIN®. Também inclusos são formas genéricas de paclitaxel como também várias formas de dosagem de paclitaxel. Formas genéricas de paclitaxel incluem, mas não são limitadas a, cloridrato de betaxolol. Várias formas de dosagem de paclitaxel incluem, mas não são limitadas a, paclitaxel de nanopartícula de albumina comercializado como ABRA'20 ΧΑΝΕ®; ONXOL®, CYTOTAX®. Discodermolida pode ser obtida, por exemplo, como descrita em US5010099. Também inclusos estão derivados de Epotolina que são descritos em US6194181, W098/0121, W09825929, W09808849, W09943653, W09822461 e W00031247. Especialmente preferida é Epotolina A e/ou B.

xl. um inibidor de proteína ativada por mitógeno (MAP) cinase;

que direciona, diminui ou inibe proteína ativada por mitógeno, tal como Benzenossulfonamida, N-[2-[[[3-(4-clorofenil)-2-propenil]metil]amino]metil]fenil]N-(2-hidroxietil)-4-metóxi. As proteína cinases ativadas por mitógeno (MAP) são um grupo de proteína serina/treonina cinases que são ativadas em res30 posta a uma variedade de estímulos extracelulares e medeiam a transdução de sinal da superfície celular para o núcleo. Elas regulam vários fenômenos celulares fisiológicos e patológicos, incluindo inflamação, morte celular apoptótica, transformação oncogênica, invasão de célula tumoral, e metástase.

xli. um inibidor de MDM2; que direciona, diminui ou inibe a interação de MDM2 e o supressor de tumor p53; tal como trans-4-iodo, 4'boranil-chalcona.

5 xlii. um inibidor de MEK; que direciona, diminui ou inibe a ativi

dade de MAP MEK cinase cinase; tal como sorafenib, por exemplo, Nexavar® (tosilato de sorafenib), butanodinitrila, bis[amino[2-aminofenil)tio] metiIeno]. Um alvo de um inibidor de MEK inclui, mas não é limitado a, ERK. Um alvo indireto de um inibidor de MEK inclui, mas não é limitado a, ciclina D1. Xliii. um inibidor de inibidor de metaloproteinase de matriz

(MMP); que direciona, diminui ou inibe uma classe de enzima de protease que seletivamente catalisa a hidrólise de ligações de polipeptídeo incluindo as enzimas MMP-2 e MMP-9 que estão envolvidas na promoção da perda de estrutura de tecido ao redor dos tumores e facilitando o crescimento de 15 tumor, angiogênese, e metástase tal como actinonina, que é também conhecida como butanodiamida, N-4-hidróxi-N1-[(1S)-1-[[(2S)-2-(hidroximetil)

1-pirrolidinil]carbonil]-2-metilpropil]-2-pentil-, (2R)-(9CI); gaiato de epigalocatequina; inibidores peptidomiméticos e não-peptidomiméticos de colágeno; derivados de tetraciclina, por exemplo, inibidor peptidomimético de hidroxa20 mato batimastat; e seus análogos oralmente biodisponíveis marimastat, prinomastat, metastat, neovastat, tanomastat, TAA211, BMS-279251, LADRAM 12-9566, MMI270B ou AAJ996, Um alvo de um inibidor de MMP inclui, mas não é limitado a, desformilase de polipeptídeo.

xliv. um inibidor de NGFR tirosina-cinase; que direciona, diminui ou inibe fosforilação da p140c‘trk tirosina dependente do fator de desenvolvimento nervoso; tal como tirfostina AG 879. Alvos de um inibidor NGFR tirosina-cinase incluem, mas não são limitados a, HER2, FLK1, FAK, TrkA, e/ou TrkC. Um alvo indireto inibe expressão de RAF1.

xlv. um inibidor de p38 MAP cinase, incluindo um inibidor de SAPK2/p38 cinase; que direciona, diminui ou inibe p38-MAPK que é um membro da família de MAPK tal como fenol, 4-[4-(4-fluorofenil)-5-(4-piridinil)1H-imidazol-2-ila]. Um exemplo de um inibidor de SAPK2/p38 cinase inclui, mas não é limitado a, benzamida, 3-(dimetilamino)-N-[3-[(4-hidroxibenzoil) amino]-4-metilfenila]. Um membro da família de MAPK é uma serina/ treonina cinase ativada por fosforilação de tirosina e resíduos de treonina. Esta cinase é fosforilada e ativada por muitas tensões celulares e estímulos in5 flamatórios, pensados estar envolvidos na regulação das respostas celulares importantes tais como apoptose e reações inflamatórias.

xlvi. um inibidor de p56 tirosina cinase; que direciona, diminui ou inibe cinase de p56 tirosina que é uma enzima que é uma tirosina cinase da família src linfoide-específica crítica para o desenvolvimento de célula T e 10 ativação; tal como damacantal, que é também conhecido como 2-antracenocarboxaldeído,9,10-di-hidro-3-hidróxi-1 -metóxi-9,10-dioxo, Tirfostina 46. Um alvo de um inibidor de p56 tirosina cinase inclui, mas não é limitado a, Lck. Lck é associado aos domínios citoplásmicos de CD4, CD8 e à cadeia beta do receptor de IL-2, e é acreditado estar envolvido nas etapas mais 15 prematuras da ativação de células T mediada por TCR.

xlvii. um inibidor de PDGFR tirosina cinase; direcionando, diminuindo ou inibindo a atividade das tirosina cinases de receptor de C-kit (parte da família de PDGFR), tal como direcionando, diminuindo ou inibindo a atividade da família de tirosina cinase de receptor c-kit, especialmente ini

- 20 bindo o receptor c-kit. Exemplos de alvos de um inibidor de PDGFR tirosina cinase incluem, mas não são limitados a PDGFR, FLT3 e/ou c-kit; tal como tirfostina AG 1296; tirfostina 9; 1,3-butadieno-1,1,3-tricarbonitrila,2-amino-4- (1 H-indol-5-ila); derivado de N-fenil-2-pirimidino-amina, por exemplo, imatinib, IRESSA®. PDGF representa um papel central na regulação da prolifera25 ção celular, quimiotaxia, e sobrevivência em células normais como também em vários estados de doença tais como câncer, aterosclerose, e doença fibrótica. A família de PDGF é composta de isoformas diméricas (PDGF-AA, PDGF-BB, PDGF-AB, PDGF-CC, e PDGF-DD) por que exerce seus efeitos celulares diferencialmente ligando às duas tirosina cinases do receptor. 30 PDGFR-α e PDGFR-β têm massas moleculares de 170 e 180 kDa, respectivamente.

xlviii. um inibidor de fosfatidilinositol 3-cinase; que direciona, diminui ou inibe Pl 3-cinase; tal como wortmanina, que é também conhecida como 3H-Furo[4,3,2-de]indeno[4,5-h]-2-benzopiran-3,6,9-triona, 11-(acetilóxi)-1,6b,7,8,9a,10,11,11.b-octa-hidro-1 -(metoximetil)-9a,11 b-dimetil-, (1S, 6bR,9aS,11 R,11 bR)-(9CI); 8-fenil-2-(morfolin-4-il)-chromen-4-ona; querceti5 na, di-hidrato de quercetina. Atividade da Pl 3-cinase foi mostrada aumentar em resposta a vários estímulos hormonais e de fator de crescimento, incluindo insulina, fator de crescimento derivado de plaqueta, fator de crescimento semelhante à insulina, fator de crescimento epidérmico, fator estimulante de colônia, e fator de crescimento de hepatócitos, e foi implicado em pro10 cessos relacionados ao crescimento celular e transformação. Um exemplo de um alvo de um inibidor de 3-cinase de fosfatidilinositol inclui, mas não é limitado a, Pi3K.

xlix. um inibidor de fosfatase; que direciona, diminui ou inibe fosfatase; tal como ácido cantarídico; cantaridina; e L-leucinamida, N-[4-(2- 15 carboxietenil)benzoil]glicil-L-a-glutamil-(E). Fosfatases removem o grupo fosforila e restabelecem a proteína para seu estado desfosforilado original. Consequentemente, o ciclo de fosforilação e desfosforilação pode ser considerado um interruptor molecular de "ativar-desativar".

I. agente de platina; que contém platina e inibe a síntese de DNA 20 formando reticulação de interfitas e intrafitas das moléculas de DNA; tal como carboplatina; cisplatina; oxaliplatina; cisplatina; satraplatina e agentes de platina tais como ZD0473, BBR3464. Carboplatina pode ser administrada, por exemplo, na forma como é comercializada, por exemplo, CARBOPLAT®; e oxaliplatina como ELOXATIN®.

li. um inibidor de proteína fosfatase, incluindo um inibidor de PP1

e PP2 e um inibidor de tirosina fosfatase; que direciona, diminui ou inibe proteína fosfatase. Exemplos de um inibidor de PP1 e PP2A incluem ácido cantarídico e/ou cantaridina. Exemplos de um inibidor de tirosina fosfatase incluem, mas não são limitados a, oxalato de L-P-bromotetramisol; 2(5H)30 furanona,4-hidróxi-5-(hidroximetil)-3-(1-oxo-hexadecil)-, (5R); e ácido benzilfosfônico.

O termo "um inibidor de PP1 ou PP2", como aqui usado, referese a um composto que direciona, diminui ou inibe Ser/Thr proteína fosfatases. Fosfatases tipo I, que incluem PP1, podem ser inibidas por duas proteínas termoestáveis conhecidas como lnibidor-1 (1-1) e lnibidor-2 (I-2). Elas preferencialmente desfosforilam uma subunidade de fosforilase cinase. Fos5 fatases tipo Il são subdivididas espontaneamente em classes de fosfatases ativas (PP2A), CA2+-dependentes (PP2B), e Mg2+-dependentes (PP2C).

O termo "inibidor de fosfatase de tirosina", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe tirosina fosfatase. Proteína tirosina fosfatases (PTPs) são adições relativamente recentes à 10 família de fosfatase. Elas removem os grupos fosfato dos resíduos de tirosina fosforilados das proteínas. PTPs exibem características estruturais diversas e representam papéis importantes na regulação da proliferação celular, diferenciação, adesão e motilidade celulares, e função citoesquelética. Exemplos de alvos de um inibidor de fosfatase de tirosina incluem, mas não 15 são limitados a, fosfatase alcalina (ALP), heparanase, PTPase, e/ou ácido prostático fosfatase.

Iii. um inibidor de PKC e um inibidor de PKC delta cinase: O termo "um inibidor de PKC", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe proteína C cinase como também suas isozimas.

► 20 Proteína cinase C (PKC), uma enzima ubíqua, dependente de fosfolipídeo, é envolvida na transdução de sinal associada à proliferação celular, diferenciação, e apoptose. Exemplos de um alvo de um inibidor de PKC incluem, mas não são limitados a, MAPK e/ou NF-capaB. Exemplos de um inibidor de PKC incluem, mas não são limitados a, 1-h-pirrol-2,5-diona,3-[1-[3-(dimetil25 amino)propil]-1 H-indol-3-il]-4-(1 H-indol-3-il); bisindolilmaleimida IX; esfingosina, que é conhecida como 4-octadeceno-1,3-diol 2-amino-, (2S,3R,4E)(9CI); estaurosporina, que é conhecida como 9,13-epóxi-1H,9H-diindolo [1,2,3-gh:3,,2',1,-lm]pirrolo[3,4-j][1,7]benzodiazonin-1-ona, derivados de estaurosporina tais como descritos em EP0296110, por exemplo, midostauri30 na; 2,3,10,11,12,13-hexa-hidro-10-metóxi-9-metil-11-(metilamino)-, (9S,10R, 11R,13R)-(9CI); tirfostina 51; e hipericina, que é também conhecida como fenantro[1,10,9,8-opqra]perileno-7,14-diona, 1,3,4,6,8,13-hexa-hidróxi-IO, 11-dimetil, estereoisômero (6CI,7CI,8CI,9CI), UCN-01, safingol, BAY 43- 9006, briostatina 1, perifosina; llmofosina; RO 318220 e RO 320432; RO 6976; Isis 3521; LY333531/LY379196. O termo "um inibidor de PKC delta cinase", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui 5 ou inibe as isozimas delta de PKC. A isozima delta são umas isozimas de PKC convencionais e são Ca2+-dependentes. Um exemplo de um inibidor de PKC delta cinase inclui, mas não é limitado a, Rottlerina, que é também conhecida como 2-Propen-1-ona, 1-[6-[(3-acetil-2,4,6-tri-hidróxi-5-metilfenil) metil]-5,7-di-hidróxi-2,2-dimetil-2H-1-benzopiran-8-il]-3-fenil-, (2E)-(9CI).

liii. um inibidor da síntese de poliamina; que direciona, diminui ou

inibe espermidina de poliaminas; tal como DMFO, que é também conhecido como (-)-2-difluorometilornitina; N1 ,N12-dietilespermina 4HCI. As poliaminas espermidina e espermina são de importância vital por proliferação celular, embora seu mecanismo preciso de ação não esteja claro. Células tumorais 15 têm uma homeóstase de poliamina alterada refletida por atividade aumentada de enzimas biossintéticas e fundos gerais de poliamina elevados.

Iiv. um inibidor de proteossoma; que direciona, diminui ou inibe proteassoma, tal como aclacinomicina A; gliotoxina; PS-341; MLN 341; bortezomib; velcade. Exemplos de alvos de um inibidor de proteossoma incluem, mas não são limitados a, NADPH oxidase geradora de 0(2)(-)-, NFcapaB, e/ou farnesiltransferase, geraniltransferase I.

Iv. um inibidor de PTP1B; que direciona, diminui ou inibe PTP1B, um inibidor de proteína tirosina cinase; tal como L-leucinamida, N-[4-(2- carboxietenil)benzoil]glicil-L-a-glutamil-,(E).

Ivi. um inibidor de proteína tirosina cinase incluindo um inibidor

de tirosina cinase da família SRC; um inibidor de Syk tirosina cinase; e um inibidor de JAK-2 e/ou JAK-3 tirosina cinase;

O termo "um inibidor de proteína tirosina cinase", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe proteína tirosina cinases. Proteína tirosina cinases (PTKs) representam um papel fundamental na regulação da proliferação celular, diferenciação, metabolismo, migração, e sobrevivência. Elas são classificadas como PTKs de receptor e PTKs de não-receptor. PTKs de receptor contêm uma cadeia de polipeptídeo simples com um segmento de transmembrana. A extremidade extraceIular deste segmento contém um domínio de ligação de Iigante de afinidade alta, enquanto a extremidade citoplásmica compreende o núcleo catalítico e 5 as seqüências reguladoras. Exemplos de alvos de um inibidor de tirosina cinase incluem, mas não são limitados a, ERK1, ERK2, tirosina cinase de Bruton (Btk), JAK2, ERK %, PDGFR, e/ou FLT3. Exemplos de alvos indiretos incluem, mas não são limitados a, TNFalfa, NO, PGE2, IRAK, iNOS, ICAM-1, e/ou E-selectina. Exemplos de um inibidor de tirosina cinase inclu

10 em, mas não são limitados a, tirfostina AG 126; tirfostina Ag 1288; tirfostina Ag 1295; geldanamicina; e genisteína.

Tirosina cinases de não-receptor incluem os membros das famílias Src, Tec, JAK, Fes, Abi, FAK, Csk, e Syk. Elas ficam localizadas no citoplasma como também no núcleo. Elas exibem regulação de cinase distinta, 15 fosforilação de substrato, e função. Desregulação destas cinases foi também ligada às várias doenças humanas.

O termo "um inibidor de tirosina cinase da família SRC", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe SRC. Exemplos de um inibidor de tirosina cinase da família de SRC incluem, mas

- 20 não são limitados a, PP1, que é também conhecido como 1 H-pirazolo[3,4-

d]pirimidin-4-amina, 1-(1,1-dimetiletil)-3-(1-naftalenil)-(9CI); e PP2, que é também conhecida como 1 H-Pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina, 3-(4-clorofenil)-1-(1,1-dimetiletil)-(9CI).

O termo "um inibidor de Syk tirosina cinase", como aqui usado, 25 refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe Syk. Exemplos de alvos para um inibidor de Syk tirosina cinase incluem, mas não são limitados

a, Syk, STAT3, e/ou STAT5. Um exemplo de um inibidor de Syk tirosina cinase inclui, mas não é limitado a, piceatanol, que é também conhecido como 1,2-benzenodiol, 4-[(1 E)-2-(3,5-di-hidroxifenil)etenil]-(9CI).

30 O termo "um inibidor de Janus (JAK-2 e/ou JAK-3) tirosina cina

se", como aqui usado, refere-se a um composto que direciona, diminui ou inibe janus tirosina cinase. Inibidor de janus tirosina cinase é mostrado agentes antileucêmicos com propriedades antitrombóticas, antialérgicas e imunossupressoras. Alvos de um inibidor de JAK-2 e/ou JAK-3 tirosina cinase incluem, mas não são limitados a, JAK2, JAK3, STAT3. Um alvo indireto de um inibidor de JAK-2 e/ou JAK-3 tirosina cinase inclui, mas não é limitado a 5 CDK2. Exemplos de um inibidor de JAK-2 e/ou JAK-3 tirosina cinase incluem, mas não são limitados a, Tirfostina AG 490; e 2-naftila vinil cetona.

Compostos que direcionam, diminuição ou inibe a atividade dos membros da família c-Abl e seus produtos de fusão de gene, por exemplo, incluem PD180970; AG957; ou NSC 680410.

Ivii. um retinoide; que direciona, diminui ou inibe receptores reti

noides-dependentes; tal como isotretinoína, tretinoína, alitretinoína, bexaroteno.

Iviii. um inibidor de alongamento de RNA Il polimerase; que direciona, diminui ou inibe p70S6 cinase nuclear e citosólica estimulada por insulina em células CHO; direciona, diminui ou inibe transcrição de polimerase

Il de RNA que pode ser dependente da caseína cinase II; e direciona, diminui ou inibe o desarranjo de vesícula germinal em oócitos bovinos; tais como 5,6-dicloro-1-beta-D-ribofuranosilbenzimidazol.

Ivix. um inibidor de serina/treonina cinase; que inibe serina/ treo20 nina cinases; tal como 2-aminopurina. Um exemplo de um alvo de um inibidor de serina/treonina cinase inclui, mas não é limitado a, proteína cinase dsRNA-dependente (PKR). Exemplos de alvos indiretos de um inibidor de serina/treonina cinase incluem, mas não são limitados a, MCP-1, NF-capaB, elF2alfa, COX2, RANTES, IL8,CYP2A5, IGF-1, CYP2B1, CYP2B2, CYP2H1, 25 AI-1, HIF-1, eritropoietina, e/ou CYP1A1.

Ix. um inibidor da biossíntese de esterol; que inibe a biossíntese de esteróis tais como colesterol; tal como terbinadina. Exemplos de alvos para um inibidor da biossíntese de esterol incluem, mas não são limitados a, esqualeno epoxidase, e CYP2D6.

Ixi. um inibidor de topoisomerase; incluindo um inibidor de topoi

somerase I e um inibidor de topoisomerase II. Exemplos de um inibidor de topoisomerase I incluem, mas não são limitados, topotecan, gimatecan, irinotecan, camptotecan e seus análogos, 9-nitrocamptotecina e o conjugado de camptotecina macromolecular PNU-166148 (composto A1 em W09917804); 10-hidroxicamptotecina, por exemplo, o sal de acetato; idarrubicina, por exemplo, o cloridrato; irinotecan, por exemplo, o cloridrato; eto5 poside; teniposide; topotecan, cloridrato de topotecan; doxorrubicina; epirrubicina, cloridrato de epirrubicina; mitoxantrona, mitoxantrona, por exemplo, o cloridrato; daunorrubicina, cloridrato de daunorrubicina, valrrubicina, dasatinib (BMS-354825). Irinotecan pode ser administrado, por exemplo, na forma como é comercializado, por exemplo, sob a marca registrada CAMPTO10 SAR®. Topotecan pode ser administrado, por exemplo, na forma como é comercializado, por exemplo, sob a marca registrada HYCAMTIN®. O termo "inibidor de topoisomerase II", como aqui usado, inclui, mas não é limitado a, as antraciclinas, tais como doxorrubicina, incluindo formulação lipossomal, por exemplo, CAELYX®, daunorrubicina, incluindo formulação lipossomal, 15 por exemplo, DAUNOSOME®, epirrubicina, idarrubicina e nemorrubicina; as antraquinonas mitoxantrona e losoxantrona; e as podofilotoxinas etoposide e teniposide. Etoposide é comercializado como ETOPOPHOS®; teniposide como VM 26-BRISTOL®; doxorrubicina como ADRIBLASTIN® ou ADRIAMYCIN®; epirrubicina como FARMORUBICIN®, idarrubicina como ZAVE

- 20 DOS®; e mitoxantrona como NOVANTRON®.

Ixii. inibidor de VEGFR tirosina cinase; que direciona, diminui e/ou inibe os fatores de crescimento angiogênico conhecidos e citocinas implicadas na modulação de angiogênese normal e patológica. A família de VEGF (VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D) e suas tirosina cinases de re25 ceptor correspondentes [VEGFR-1 (Flt-1), VEGFR-2 (Flk-1, KDR), e VEGFR-3 (Flt-4)] representam um papel supremo e indispensável na regulação das facetas múltiplas dos processos angiogênicos e linfangiogênicos. Um exemplo de um inibidor de VEGFR tirosina cinase inclui 3-(4-dimetilaminobenzilidenil)-2-indolinona. Compostos que direciona, diminuem ou inibem a 30 atividade de VEGFR são especialmente compostos, proteínas ou anticorpos que inibem a tirosina cinase de receptor VEGF, inibem um receptor de VEGF ou ligam a VEGF, e são em particular aqueles compostos, proteínas ou anticorpos monoclonais genéricos e especificamente descritos em W09835958, por exemplo, 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por exemplo, o succinato, ou em W00009495, W00027820, W00059509, W09811223, W00027819 e 5 EP0769947; por exemplo, aqueles como descritos por M. Prewett et al em Cancer Research 59 (1999) 5209-5218, por F. Yuan et al em Proc. Natl. Acad. Sei. USA, vol. 93, págs. 14765-14770, dez. 1996, por Z. Zhu et al em Cancer Res. 58,1998,3209-3214, e por J. Mordenti et al em Toxicologic Pathology, Vol. 27, no. 1, págs. 14-21,1999; em W00037502 e W09410202; 10 Angiostatina, descrita por M., S. CReiIIy et al, Cell 79,1994,315-328; Endostatina descrita por M. S. 0'Reilly et al, Cell 88,1997,277-285; amidas de ácido antranílicos; ZD4190; ZD6474 (vandetanib); SU5416; SU6668; ou anticorpos de antiVEGF ou anticorpos de receptor antiVEGF, por exemplo, RhuMab (bevacizumab). Por anticorpo é significado anticorpos monoclonais 15 intactos, anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos formados de pelo menos 2 anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpos desde que eles exibam a atividade biológica desejada. Um exemplo de um inibidor de VEGF-R2, por exemplo, inclui axitinib.

Ixiii. um agonista de gonadorrelina, tal como abarelix, goserrelina, acetato de goserrelina,

Ixiv. um composto que induz processos de diferenciação celular, tal como ácido retinóico, alfa-, gama-ou 8-tocoferol ou alfa-, gama- ou 8- tocotrienol.

Ixv. um bisfosfonato, por exemplo, incluindo ácido etridônico, clodrônico, tiludrônico, pamidrônico, alendrônico, ibandrônico, risedrônico e zoledrônico.

Ixvi. um inibidor de heparanase que impede degradação de sulfato de heparan, por exemplo, PI-88.

Ixvii. um modificador de resposta biológica, preferivelmente alinfocina ou interferonas, por exemplo, interferona alfa.

Ixviii. um inibidor de telomerase, por exemplo, telomestatina.

Ixix. mediadores, tais como inibidores de catecol-O-metiltransferase, por exemplo, entacapona.

Ixx: ispinesib, permetrexed (Alimta®), sunitinib (SU11248), dietilstiIbestroI (DES)1 BMS224818 (LEA29Y).

Ixxi. somatostatina ou um análogo de somatostatina, tal como 5 octreotide (Sandostatin® ou Sandostatin LAR®).

Ixxii. antagonistas de receptor de hormônio de crescimento, tal como pegvisomant, filgrastim ou pegfilgrastim, ou interferona alfa:

Ixxiii. anticorpos monoclonais, por exemplo, úteis para tratamento de leucemia (AML), tal como alemtuzumab (Campath®), rituximab/ Ritu10 xan®), gentuzumab, (ozogamicina, Mylotarg®), epratuzumab.

Ixxiv. altretamina, ansacrina, asparaginase (Elspar®), denileucin diftitox, masoprocol, pegaspargase.

Ixxv. um inibidor de fosfodiesterase, por exemplo, anagrelida (Agrylin®, Xagrid®).

15 Ixxvi. uma vacina de câncer, tal como MDX-1379.

Tratamento de câncer com um composto da presente invenção, opcionalmente em combinação com um fármaco anticancer, tal como indicado aqui, pode ser associado à radioterapia. Tratamento de câncer com um composto da presente invenção, opcionalmente em combinação com um ►•20 fármaco anticancer, pode ser um segundo tratamento de linha, por exemplo, seguindo tratamento com outro fármaco anticancer ou outra terapia de câncer.

Anestésicos que são propensos a ser úteis como um par de combinação com um composto da presente invenção, por exemplo, incluem 25 etanol, bupivacaina, cloroprocaína, levobupivacaína, lidocaína, mepivacaína, procaína, ropivacaína, tetracaína, desflurano, isoflurano, cetamina, propofol, sevoflurano, codeína, fentanila, hidromorfona, marcaína, meperidina, metadona, morfina, oxicodona, remifentanil, sufentanil, butorfanol, nalbufina, tramadol, benzocaína, dibucaína, cloreto de etila, xilocaína, e fenazopiridina.

30 Substâncias de fármaco antidiarreico que são propensas a ser

úteis como um par de combinação com um agente ou um agente de IBD da presente invenção, por exemplo, incluem difenoxilato, loperamida, codeína. Se um composto da presente invenção for administrado em combinação com outras dosagens de substâncias de fármaco da segunda substância de fármaco coadministrada variará, claro, dependendo do tipo de fármaco coempregado, do fármaco específico empregado, da condição sen5 do tratada, como no caso de um composto da presente invenção. Em geral dosagens similares àquelas como fornecidas pelo segundo provedor de fármaco podem ser apropriadas.

Os nomes químicos dos compostos da presente invenção como indicados aqui são copiados de ISIS, versão 2.5 (Nome AutoNom 2000). Os nomes químicos podem ser derivados das segundas substâncias de fármaco e outras substâncias da Internet, por exemplo, por meio de um programa de pesquisa tal como SCI FINDER.

Nos Exemplos a seguir todas as temperaturas indicadas estão em ° Celsius (abreviado como °). As abreviações a seguir são usadas:

DMAP 4-(dimetilamino)piridina DMF N,N-dimetilformamida EtOAc acetato de etila rac-BINAP rac-2,2'-Bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaftila Pd(dba)2 Bis(dibenzilidenoacetona)paládio PPA anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico TA temperatura ambiente THF tetra-hidrofurano t-Bu terc-butila EXEMPLO 1 Ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-carbo

xílico (Composto 1 da Tabela 1)

A) ÉSTER DE ETILA DE ÁCIDO 1-(4-TERC-BUTIL-BENZENOSSULFONIU

5-CLORO-1H-INDOL-2-CARBOXÍLICO

244 mg de 18-coroa-6 são adicionados a 12 ml de uma solução de potássio-terc-butóxido (1 M em THF) e à mistura obtida uma solução de

2 g de éster de etila de ácido 5-cloro-1H-indol-2-carboxílico em 24 ml de THF é adicionado a gotas. A mistura obtida é esfriada para O0C (15 minutos), tratada com uma solução de 2,08 g de cloreto de 4-terc-butilbenzenossulfonila em 12 ml de THF, agitada durante 16 horas em TA e a mistura obtida é diluída com EtOAc. A fase orgânica obtida é lavada com HCI a 0,1 Ne salmoura, secada, e, da mistura obtida o solvente é evaporado. O resíduo de evaporação obtido é submetido à cromatografia.

Éster de etila de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro1H-indol-2-carboxílico é obtido.

B) ÁCIDO 1-(4-TERC-BUTIL-BENZENOSSULFONIU-5-CLORO-1 H-INDOL

2-CARBOXÍLICO

A uma solução de 1,05 g de éster de etila de ácido 1-(4-terc

butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-carboxílico em 40 ml de THF, uma solução de 318 mg de LiOHxH2O em 40 ml de HO é adicionada. A mistura obtida é agitada durante 18 horas em TA e a fase orgânica obtida é evaporada. A fase aquosa obtida é lavada com CHCI3, o pH da mistura obtida é 15 ajustado para pH=4 por adição de HCI a 6 N e a mistura obtida é extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas obtidas são secadas, da mistura obtida solvente é evaporado e o resíduo de evaporação obtido é submetido à RP-HPLC. Ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1Hindol-2-carboxílico é obtido, mp 198-202.

Analogamente como descrito no Exemplo 1, mas usando os ma

teriais de partida apropriados, os compostos dos Exemplos 2 a 10 como mostrados e caracterizados na Tabela 1 são obtidos.

EXEMPLO 11

Ácido 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-carboxílico (composto do exemplo 11 na TABELA 1)

A) 1-(4-TERC-BUTIL-BENZENOSSULFONILV1 H-INDOL

A uma solução de 300 mg de indol em 10 ml de DMF1 151 mg de NaH (60% em óleo mineral) e 596 mg de 4-terc-butila é adicionado sulfonilcloreto de benzeno. A mistura obtida é agitada durante 18 horas em TA1 30 vertida em H2O e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas obtidas são secadas, da mistura obtida solvente é evaporado e o resíduo de evaporação é precipitado de EtOH. 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol é obtido.

B) ÁCIDO 1 -(4-TERC-BUTIL-BENZENQSSULFONILV1H-INDOL-2-CARBOXÍLICO

460 μΙ de n-BuLi (de solução em hexano a 1,6 N) são adicionados mais de 10 minutos a gotas a uma solução de 105 μΙ de diisopropilamina em 2 ml de THF seco a -78°. A solução obtida é mantida aquecendo até 0°C (30 minutos) e é tratada com uma solução de 200 mg de 1-(4-terc-butilbenzenossulfonil)-1 H-indol em 1 ml de THF seco. A mistura obtida é agitada durante 30 minutos, esfriada para -78° e extinguida com excesso de CO2 seco. A mistura obtida é permitida aquecer até TA, agitada durante a noite, diluída com CH2CI2, extinguida com 2 ml de HCI a 6 N e a mistura obtida é refluxada durante 1 hora. A fase orgânica obtida é lavada com HCI a 1 N, secada, e da mistura obtida solvente é evaporado. O resíduo de evaporação é submetido à RP-HPLC. Ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol-2- carboxílico é obtido.

EXEMPLO 12:

Éster de metila de ácido 1-(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1Hindol-6-carboxílico (composto do exemplo 12 na Tabela 1)

A) ÉSTER DE METILA DE ÁCIDO 1-(4-BROMO-BENZENOSSULFONIL)1H-INDOL-6-CARBOXÍLICO

A uma solução de 500 mg de éster de metila de ácido 1 H-indol

6-carboxílico em 15 ml de DMF, 171 mg de NaH (60% em óleo mineral) são adicionados. A mistura obtida é agitada durante 15 minutos, tratada com 789 mg de cloreto de 4-bromo-benzenossulfonila, a mistura obtida é agitada 25 durante a noite em TA e diluída com EtOAc. A fase orgânica obtida é lavada com H2O1 secada, e, da mistura obtida solvente é evaporado. O resíduo de evaporação obtido é submetido á cromatografia. Éster de metila de ácido 1- (4-Bromo-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico é obtido.

B) ÉSTER DE METILA DE ÁCIDO 1-(4-MORFOLIN-4-IL-BENZENOSSULFONIL)-1H-INDOL-6-CARBOXÍLICO

A uma solução de 30 mg de éster de metila de ácido 1-(4- bromo-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico em 2 ml de dioxano seco são adicionados 8 mg de rac-BINAP, 81,8 mg (0,374 mmol) de K3PO4 e 27 μΙ de morfolina. A mistura obtida é purgada com argônio (30 minutos) e 3,58 mg de Pd(dba)2 são adicionados. A mistura obtida é agitada durante a noite em TA e diluída com EtOAc. A fase orgânica obtida é lavada com H2O, se5 cada, e, da mistura obtida solvente é evaporado. O resíduo de evaporação obtido é submetido à RP-HPLC. Éster de metila de ácido 1-(4-Morfolin-4-ilbenzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico é obtido.

EXEMPLO 13:

Ácido 1 -(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carboxílico (composto do exemplo 13 na Tabela 1)

A uma solução de 120 mg de éster de metila de ácido 1-(4- morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico em 40 ml de THF, uma solução de 62,8 mg de LiOHxH2O em 4 ml de H2O é adicionado. A mistura obtida é agitada durante 18 horas em TA e a mistura obtida é diluída com 15 EtOAc. A fase orgânica obtida é lavada com H2O, secada e da mistura obtida solvente é evaporado. O resíduo de evaporação é submetido à RPHPLC. Ácido 1-(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico é obtido.

EXEMPLO 14:

Amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H

indol-2-carboxílico (composto do exemplo 14 na TABELA 1)

A uma solução de 120 mg de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-2-carboxílico e 165 mg de NH4CI em 1 ml de DMF, 1 ml de diisopropil-etilamina e 1 ml de PPA (50% em DMF) e 2 mg de DMAP 25 são adicionados. A mistura é agitada por 18 h em temperatura ambiente. A fase orgânica obtida é filtrada e o filtrado é submetido à RP-HPLC. Amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-2-carboxílico amida é obtida.

Analogamente como descrito no Exemplo 14, mas usando os materiais de partida apropriados, os compostos dos Exemplos 15 a 22 como mostrados e caracterizados na Tabela 1 são obtidos. EXEMPLO 23:

1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2-carbonitrila (composto do exemplo 23I na TABELA 1)

A uma solução de 440 mg de amida de ácido 1 -(4-terc-butil5 benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-2-carboxílico em 6 ml de piridina, 208 μΙ de POCI3 são adicionados a gotas a 0°C sob atmosfera de argônio. A mistura obtida é agitada durante 1 hora, solvente é evaporado e o resíduo obtido é diluído com EtOAc. A mistura obtida é lavada com HCI a 1N, solução sat. de NaHCO3 e salmoura, e secada. A fase orgânica é concentrada e o resí10 duo obtido é cromatografado em sílica-gel. 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)5-cloro-1 H-indol-2-carbonitrila é obtida.

Analogamente como descrito no Exemplo 23, mas usando os materiais de partida apropriados, os compostos dos Exemplos 24 e 25 como mostrados e caracterizados na Tabela 1 são obtidos.

EXEMPLOS 26 e 27:

Amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico e 4-terc-butil-N-[1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carbonil]-benzenossulfonamida (compostos de exemplo 26 e 27 na Tabela 1)

Uma solução de 140 mg de amida de ácido 1 H-indol-6-carbo20 xílico e 23,8 mg de 18-coroa-6 em 2 ml de THF anidro é esfriada para 0°C sob atmosfera de argônio. À mistura obtida, 1,1 ml de uma solução de potássio-terc-butóxido (1M em THF) é adicionado a gotas a 0°C, e depois uma solução de 224 mg 4-terc-butilbenzeno-sulfonilcloreto em 4 ml de THF anidro. A mistura obtida é agitada durante 1 hora nesta temperatura e o solven25 te é evaporado. O resíduo obtido é diluído com EtOAc. A mistura obtida é lavada com salmoura e secada. A fase orgânica obtida é concentrada e o resíduo obtido é cromatografado em RP18.

Amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol-6-carboxílico e 4-terc-butil-N-[1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carbonil]-benzenossulfonamida são obtidos.

Os compostos como descrito nos Exemplos 1 a 27 antes são compostos da fórmula ^2ex jj ^1 Εχ Iex

O

em que R-iex e R2ex são como definidos na Tabela 1 abaixo e obtidos analogamente aos métodos como descrito antes. Pontos de fundição dos compostos correspondentes obtidos são também expostos na Tabela 1.

Exemplo R-IEX R2EX P.f. (0C)1 OU quando dado MH+ ou MNa+ 1 -O3C / 198 a 202 Jl I )>-COOH 2 -O3C 115a 120 3 -O3C 135 a 136 4 -CfcC \ 250 a 252 HOOC 5 COOH 420 MH+ 6 -O3C O 391 MH+ i) O O X | 7 / 204 a 206 [fYN> COOH 8 -Ot;: / 403 MH+ ci/^í;í>^\ COOH Exemplo s.-n-1 Riex R2EX P.f. (0C)1 OU quando dado MH+ ou MNa+. 9 COOH 368 MH+ 10 / 443 MNa+ í| I )>-COOH 11 -CfcC N 60 a 63 HOOC12 -OCo \i .COOCH, 65 a 70 13 OO V^^^COOH 268 a 270 14 -CfcC \ 88 a 90 NH^ 15 -CfcC \n 460 MH+ O ^N^^ O 16 -CfcC ! 476 MH+ O O O jU. izA I «x Z-"" \S Q 17 -CfcC \ 474 MH+ CH3---t/ \sl^^ O I Exemplo R1EX R2EX P.f. (0C)1 OU quando dado MH+ ou MNa+ 18 -cfcc \ 404 MH+ CH3n H-\\ O 19 -CfcC \ 441 MNa+ CH3n N-/ CH3/ O 20 -CfcC \n 481 MNa+ O-C1· 21 -CfcC \ 390 MH+ NH2--\ O 22 -CfcC \ 432 MH+ ch3 Vn-a / h \\ CH3/ xO 23 -CfcC 168 a 170 24 -CfcC \ 163 a 165 NC-I jl 25 -CfcC \ 164 a 165 CN Exemplo RiEX R2EX P.f. (0C)1 OU quando dado MH+ ou MNa+ 26 -CfcC O 223 a 225 /^j·^ Jjp NH2 TI CH3 134 a 136 \ 1 nXJ^"·"· ζγγ^ο

Claims

1. Uso de um composto da fórmula <formula>formula see original document page 69</formula> em que Ri é (Ci-i2)alquila, (Ci.12)alcóxi, (C3.i2)cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5-i2)cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6-i8)arila, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, halogênio, halo(Ci.4)alquila, preferivelmente CF3, (Ci-4)alcóxi, halo(C-|.4) alcóxi, (Ci.4)alquiltio, em que heterociclila é heterociclila alifática ou aromática compreendendo 3 a 12 membros do anel e 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, O, S, opcionalmente anelados com outro sistema de anel, em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são insubstituídas ou substituídas, por um ou mais halogênio, halo(Ci-4)alquila, halo(C-i-4)alcóxi, (Ci-4)alquila, (C-|.4)alcóxi ou (Ci.4)alquiltio, R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (C-m) alcoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, halogênio, halo(C|.4)alquila, tal como CF3, (Ci-4)alquila, (Ci-4)alcóxi, (C1^alquiltio na forma livre ou na forma de um sal na fabricação de um medicamento para o tratamento de distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9, preferivelmente doença inflamatória do intestino.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, em que em um composto da fórmula (I) Ri é (C-M2)alquila, por exemplo, terc-butila, (Ci-i2)alcóxi, (C3.12) cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5-i2)cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6--i8)arila, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, halogênio, por exemplo, cloro, halo(Ci-4) alquila, preferivelmente CF3, (C-i-4)alcóxi, halo(Ci.4)alcóxi, (C1.4)alquiltio, em que heterociclila é heterociclila alifática ou aromática compreendendo 3 a 12 membros do anel e 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, O, S, opcionalmente anelados com outro sistema de anel, por exemplo, 4-morfolin-4-ila ou 4-oxazol-5-ila, em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são insubstituídas ou substituídas, por um ou mais halogênio, halo(Ci.4)alquila, halo(C-|.4)alcóxi, (Ci-4)alquila, (Ci.4)alcóxi ou (C|.4)alquÍltio, R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (C1.4) alcoxicarbonila, tal como, por exemplo, metoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, por exemplo, amino, metilamino, dimetilamino, isopropilamino, piperidin1-ila, morfolin-4-ila, 4-metil-piperazin-1-ila, halogênio, halo(C-|.4)alquila, tal como CF3, (C-i.4)alquila, (C1-^alcoxi, (C-i.4)alquiltio.

3. Composto da fórmula <formula>formula see original document page 70</formula> em que R1 é (C4-12)alquila ramificada, preferivelmente terc-butila, (C1--I2) alcóxi, (C3.12)cicloalquila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C5.12) cicloalquenila, opcionalmente fundida com heterociclila, (C6--Ie)^riIa, opcionalmente fundida com heterociclila, heterociclila, cloro ou flúor, halo(C-|.4) alquila, preferivelmente CF3, (C1-^alcoxi, halo(C-i-4)alcóxi, (C1.4)alquiltio, em que heterociclila é heterociclila alifática ou aromática compreendendo 3 a 12 membros do anel e 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, O, S, opcionalmente anelados com outro sistema de anel, em que cicloalquila, cicloalquenila, arila ou heterociclila são insubstituídas ou substituídas por um ou mais halogênio, halo(C|.4)alquila, halo(C-i_4)alcóxi, (Ci.4)alquila, (Ci-4)alcóxi ou (Ci.4)alquiltio, R2 e R3 são diferentes um do outro e independentemente são hidrogênio, hidroxicarbonila, alcoxicarbonila, por exemplo, (Ci.4) alcoxicarbonila, ciano, aminocarbonila, em que amino é NH2, amino substituído uma ou duas vezes ou uma amina cíclica, com a condição que se R2 for 4-metilpiperazin-1-il-carbonila, então R2 esteja na posição 3 do sistema de anel, indol-7-carboxílico, ácido 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-carboxílico, cloro, halo(C-|.4)alquila, tal como CF3, (Ci_4)alquila, (Ci.4)alcóxi (Ci-4)alquiltio com a condição que um composto da fórmula <formula>formula see original document page 71</formula> e um composto da fórmula <formula>formula see original document page 71</formula> sejam excluídos.

4. Composto selecionado do grupo que consiste em ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-2- carboxílico, ácido 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carboxílico, éster de metila de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1Hácido 5-cloro-1-(4-morfolin-4-il)-benzenossulfonil)-1 H-indol-3- carboxílico, ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3- carboxílico, ácido 5-cloro-1 -(4-oxazol-5-il)-benzenossulfonil)-1 H-indol-3- carboxílico, ácido 5-cloro-1 -(4-trifluorometil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3- carboxílico, ácido 5-cloro-1 -(4-cloro-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-carboxílico, ácido 5-cloro-1 -(4-morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1 H-indol-2- carboxílico, ácido 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-2-carboxílico, éster de metila de ácido 1-(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1Hindol-6-carboxílico, ácido 1 -(4-Morfolin-4-il-benzenossulfonil)-1 H-indol-6-carboxílico, amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol2-carboxílico, [1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3-il]-morfolin-4- il-metanona, ácido 2-{[1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3- carbonil]amino}-2-metil-propiônico, [1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 H-indol-3-il]-(4-metilpiperazin-1 -il)-metanona, metilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1 Hindol-3-carboxílico, dimetilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro1 H-indol-3-carboxílico, [1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol-3-il]-piperidin1-il-metanona, amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol3-carboxílico, isopropilamida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro. 1H-indol-3-carboxílico, 1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol6-carbonitrila, 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-5-cloro-1H-indol2-carbonitrila,1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-3-carbonitrila, amida de ácido 1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1H-indol-6- carboxílico e4-terc-butil-N-[1 -(4-terc-butil-benzenossulfonil)-1 H-indol-6- carbonil]-benzenossulfon-amida,

5. Composto de acordo com a reivindicação 3 ou 4, na forma de um sal.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 5, para o uso como um produto farmacêutico.

7. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 3 a 5, em associação com pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.

8. Combinação farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 3 a 5, ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 7, e adicionalmente compreendendo uma segunda substância de fármaco.

9. Método para o tratamento de distúrbios que são mediados pela atividade de CCR9, cujo tratamento compreende administrar a um sujeito em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações3 a 5, ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 6, opcionalmente em combinação com uma segunda substância de fármaco.