BRPI0714761B1 - Formulações compreendendo compostos cíclicos - Google Patents

Abstract

formulações compreendendo compostos cíclicos. a presente invenção relata o uso do composto cíclico da fórmula (i), em que a, b independentemente em cada ocorrência são alcano-i, j-dil tendo k átomos de carbono, i e independente de j ser menor ou igual a k e k sendo selecionado de 1 a 10, em que o referido alcano-i, j-dil (i) pode compreender uma ou mais ligações duplas; (ii) é opcionalmente substituída; e/ou (iii) compreende um ciclo, em que o número total de ciclos sendo que os açúcares cíclicos no referido comosto são selecionados de 0 a 47 e menores de p (n+m); x, y independentemente em cada ocorrência são um grupo funcional biocompatível compreendendo ao menos um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre; n, m independentemente de cada um são selecionados de 0 a 20; p é selecionado de 1 a 10; n+m é igual ou maior que 1; e p.(n+m) é selecionado de 3 a 30; em que os componentes são capazes de formar um complexo com um grupo amino protonado primário e/ou um grupo de guanido protonado para a fabricação da composição avançada farmacêutica ou de diagnóstico compreendendo um agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticadamente, este referido agente ativo compreendendo um ou mais grupos de amino protonado primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidio protonado em que (a) entrega transmembrana e/ou transmucosa; (b) solubilidade dos íons solventes não aquosos e/ou (c) estabilidade do referido agente ativo é melhorada.

Description

FORMULAÇÕES COMPREENDENDO COMPOSTOS CÍCLICOS

[01] Esta invenção diz respeito ao uso de um composto cíclico da fórmula (I):

[02] Em que A, B, independentemente em cada ocorrência são alcano-i, j-diila tendo átomos de carbono, i e independentemente j sendo inferior ou igual a k e k sendo selecionado a partir de 1 a 10, onde o referido alcano-i, j-diila (i) pode incluir uma ou mais ligações duplas, (ii) é opcionalmente substituído; e/ou (iii) compreende um ciclo, onde o número total de ciclos são cíclicos de açúcar no referido composto sendo selecionado de 0 a 4 e é menor que p.(n+m); X,Y independentemente em cada ocorrência são grupos funcionais biocompatíveis compreendendo, pelo menos, um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre; n, m independentemente uns dos outros são selecionados a partir de 0 a 20; p é selecionado de 1 a 10; n+m a igual ou superior a 1, e p.(n+m) é selecionado a partir de 3 a 30; onde o composto referido é um poliéster co-éter cíclico capaz de formar um complexo com grupos de amino protonizados primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidino protonizado, para a fabricação de um farmacêutico ou para a composição diagnostica distante compreendendo um agente farmaceuticamente ou diagnosticadamente ativo, o referido agente ativo compreende um ou mais grupos de amino protonizados primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidino protonizados, onde (a) a entrega por transmembrana e/ou transmucosa, a entrega por transmembrana sendo capaz de atravessar membranas celulares; (b) a solubilidade em solventes não-aquosos; e/ou (c) estabilidade do referido agente ativo sejam melhorados.

[03] Um número crescente de drogas é de natureza peptídica ou proteica. Estas drogas, em alguns casos, têm uma vida útil limitada e/ou sua administração só pode ser efetuada de forma invasiva. Administração intravenosa muitas vezes implica na degradação significativa do medicamento no fígado. Essa degradação poderia ser evitada se fosse possível transportar a droga de uma forma que contornasse o sistema de degradação do fígado. Além disso, a administração não-invasiva é menos pesada e mais conveniente para os pacientes, médicos e funcionários. No entanto, a administração não-invasiva, por exemplo, pela via oral, bucal, sublingual, nasal, pulmonar, dérmica ou rota transdérmica é excluída porque muitas drogas, em especial peptídeos e proteínas, transportam cargas eletrostáticas. A presença de cargas eletrostáticas torna as membranas celulares em uma barreira intransponível para estas drogas. Modificações covalentes para eliminar as cargas podem ter efeitos deletérios, incluindo a desdobra da estrutura do polipeptídeo. Uma outra desvantagem da modificação covalente é que um composto é obtido pela referida alteração, que é distinto da droga para que a aprovação foi obtida.

[04] Poliésteres cíclicos (polilactona) são conhecidos na literatura como cátions íonóforos. Por exemplo, antibióticos nonactina e tetranactine, que são macrotetrólides, coordenam íons metálicos. Outros tipos de poliésteres cíclicos (poliglicólico ou ésteres láticos) têm sido estudado por cálculos de órbitas moleculares ab initio e têm sido encontrados, dependendo do número de unidades (tamanho do anel) para acomodar alguns cátions com alguma seletividade (McGeary e Bruget (2000), Lifson et al. (1983), Lifson at al. (1984)).

[05] Polímeros sintéticos e copolímeros de certos ácidos alfa-hidróxido, incluindo ácido glicólico e ácido lático, têm sido descritos como plástico biodegradável para uso em cirurgia e implantes. Exemplos específicos aproveitando a utilização generalizada incluem os polímeros lineares poli(lático), poli(glicólico) e poli(lático-co-glicólico) ácido (PLGA). Em especial, este último (PLGA) é um copolímero aprovado pela Food and Drug Administration (FDA) que é usado em uma série de dispositivos terapêuticos, devido a sua biocompatibilidade e biodegradabilidade.

[06] Polímeros cíclicos ou oligômeros de ácido lático e sua síntese foram descritas em EP-A1 1219616.

[07] Poliéteres cíclicos são conhecidos na literatura por complexar cátions. Por exemplo, 18-coroa-6 é um poliéter cíclico conhecido por complexar muitos cátions, incluindo Na+, K+ a NH4+.

[08] Polímeros sintéticos e copolímeros de polietileno glicol (PEG) têm sido utilizados para melhorar as propriedades biofarmacêuticas dos peptídeos terapêuticos e proteínas, assim como veículo para ativar ingredientes e agentes formuladores.

[09] Popescu et al. (Revue Roumaine de Chimie 43, 1059-1064 (1998)) afirmam que a complexação de sais inorgânicos (Na+, K+), da sulfonamida sulfadimidina com valinomicina ou certas éteres coroas resultaria em diferentes graus de transporte de sulfadimidina através de uma barreira de clorofórmio. Popescu at al. deixa de estabelecer a entrega reforçada da sulfadimidina em toda a membrana biológica, apesar de tudo. Além disso, eles utilizam um ácido altamente artificial, chamado ácido (pH=1 ou 6) de uma fase receptora que é a fase aquosa, por trás da barreira de clorofórmio.

[10] Em face do exposto, há uma necessidade insatisfeita para modificar drogas, em especial peptídicos ou drogas proteináceas, para melhorar as suas formulações e, com elas relacionadas, suas propriedades administrativas. A expressão "propriedade administrativa" é entendida por compreender as vias disponíveis para administração por um determinado agente ativo em uma determinada formulação.

[11] Dadas as limitações dos meios disponíveis atualmente, o problema técnico subjacente à presente invenção foi, portanto, o fornecimento de meios e métodos para modificar as propriedades de formulação dos agentes ativos farmacêuticos ou por diagnóstico.

[12] Por conseguinte, esta invenção diz respeito ao uso do composto cíclico da fórmula (I):

[13] Em que A, B, independentemente em cada ocorrência é alcano-i, j-diila tendo k átomos de carbono, i e independentemente j sendo inferior ou igual a k e k sendo selecionado a partir de 1 a 10, onde o referido alcano-i, j-diila (i) pode incluir uma ou mais ligações duplas; (ii) é opcionalmente substituído; e/ou (iii) compreende um ciclo, onde o número total de ciclos são açúcares cíclicos no referido compostos é selecionado de 0 a 4 e está a menos de p.(n+m); X,Y independentemente em cada ocorrência é um grupo funcional biocompatível compreendendo pelo menos um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre; n, m independentemente uns dos autos são selecionados a partir de 0 a 20; p e selecionado a partir de 1 até 10; n+m igual ou superior a 1; e p.(n+m) é selecionado a partir de 3 a 30, onde o referido composto é um poliéster co-éter cíclico capaz de formar um complexo com grupos de amino protonados primários e/ou secundário e/ou um grupo de guanidino protonado para a fabricação de uma composição farmacêutica ou de diagnóstico que inclui agentes ativados farmaceuticamente ou por diagnóstico, o referido agente ativo compreendendo um ou mais grupos de amino protonados primários e/ou secundário e/ou um grupo de guanidino protonado, em que (a) a entrega transmembrana e/ou transmucosal, a entrega por transmembrana sendo capaz de atravessar membranas celulares; (b) a solubilidade em solventes não aquosos; e/ou (c) a estabilidade do referido agente ativo é melhorada.

[14] A linha curvada da fórmula (I) corresponde a uma única ligação conectando covalentemente a primeira ocorrência de A, com a última ocorrência de Y. Os termos "primeira ocorrência” e "última ocorrência”, respectivamente, referem-se à contrapartida não-cíclica de um composto da formula (I), a referida contrapartida não-cíclica tendo a formula [- (A-X-)n- (-B-Y-)m-]p.

[15] O termo "alcano-i, j-diila” diz respeito a um alcano com duas valências livres em átomos de carbono l e j. Os alcano-i, j-diila selecionados são divulgados a seguir, em termos dos correspondentes monômeros.

[16] Entende-se que os compostos de acordo com a invenção podem ser caracterizados em qualquer uma das seguintes maneiras. Em primeiro lugar, eles podem ser caracterizados em termos de construção de blocos A e B, em que os referidos blocos estão ligados por grupos funcionais X e Y. Em segundo lugar, e na medida do referido grupo funcional X, Y é também definido como sendo, por exemplo, um grupo éster (-C(=O) -O-) ou grupo de amida (-C(=O) -NH-), compostos podem ser caracterizados em termos de monômeros que dão origem a esses compostos. Para explicar, ainda, os monômeros incluem - em caso de poliésteres - hidroxiácidos e em caso de poliamidas - aminoácidos. A diferença entre uma caracterização em termos de construção de blocos A, B e monômero tais como hidroxiácidos e aminoácidos, é o que segue. Os monômeros incluem estes grupos funcionais, tais como -COOH, -OH, no caso de um monômero hidroxiácido e -COOH, NH2 no caso de um monômero aminoácido, que, após a formação de um composto da invenção a partir de monômeros referidos, dão origem a grupos funcionais X, Y, como éster ou amida. Os blocos A e B, por outro lado, não incluem os grupos funcionais X, Y. Como consequência, um poliéster cíclico compreendendo monômeros de ácido lático pode tanto ser caracterizado em termos de monômero de ácido lático quanto em termos de blocos de construção A e/ou B, que é etano-1,1-diila. Do mesmo modo, o monômero ácido glicólico tem sua contrapartida em um bloco de construção A e/ou o qual é metileno (-CH2-). De acordo com o referido, os valores exemplares/preferidos de k são 2 e 1.

[17] A formação de um composto da invenção a partir de monômeros referidos podem ser referidos como polimerização. O termo "polimerização", como utilizado neste documento, inclui policondensação, ou seja, a formação de polímero em que, além do polímero, um composto de baixo peso molecular, tal como água, é formado. Além disso, não há limite mínimo para o número de monômeros em um polímero de acordo com a invenção. Como tal, o termo "polímero" ou "poli" inclui "oligômero" e "oligo", respectivamente.

[18] Os alcano-i, j-diilas selecionados incluem 1 ,k-diilas bem como alcano-i, j-diilas onde i é igual a j. Um exemplo de um alcano-i, i-diila é etano-1,1-diila está descrito acima.

[19] O termo "substituído" é entendido como para incluir quaisquer substituintes. Preferencialmente, "substituído" refere-se a uma mono-substituição. Os átomos de carbono selecionados para serem substituídos no alcano-i,j-diila são os átomos de carbono i e/ou j. Entende-se que substituintes, se presentes, introduzem mais átomos de carbono em adição ao átomo de carbono k do alcano-i, j-diila no bloco de construção A ou B. Na Figura 2 aqui anexada, substituintes são designados como "R" .

[20] Os substituintes selecionados incluem alquila linear ou ramificada, de preferência com átomos de carbono entre 1 e 10, a alquila substituinte linear ou ramificada opcionalmente sendo substituída com um ou mais de -OH, -COOH e halógeno. Outros substituintes selecionados incluem arila ou heteroarila substituídos ou não substituídos. Os arila substituídos selecionados são fenila, metilfenila, tal como 4-metil-fenila e hidróxifenila tal como 4-hidróxi-fenila. Outros substituintes selecionados do alcano-I, j-diila são uma ou mais de -OH, -COOH e halógeno.

[21] O termo "ciclo" refere-se a blocos de construção compreendendo uma estrutura cíclica, tal como a construção de blocos de nonactina (ver abaixo). Outros exemplos de um ciclo com um monômero é a forma cíclica de um açúcar ou de um derivado do açúcar. Açúcares cíclicos da invenção incluem piranoses e furanoses, tais como glucopiranoses. Se presentes, o número de monômeros sendo ou compreendendo açúcares cíclicos é inferior ao total de números de monômeros do composto da invenção. Mais preferivelmente, o número de monômeros consistidos de ou compreendendo açúcares cíclicos, se presentes, é 1,2 ou 3. Além disso, é preferível que não mais de dois monômeros sejam constituídos ou compreendam açúcares cíclicos sendo diretamente ligados uns aos outros, onde a ligação, ou seja, o grupo funcional X ou Y, respectivamente, seja -O-, referido -O- sendo um glicosídico de ligação. O termo "derivados do açúcar" inclui açúcares onde um, mais ou todos os grupos de hidróxidos são acetilados e/ou alquilados.,

[22] Entende-se que o alcano-i,j-diila pode ser cíclico. Alternativamente ou em complemento, um substituinte do alcano-i, j-diila pode ser cíclico. Ainda são previstos ciclos compreendendo átomos de ambos os alcanos-i, j-diila e o substituinte.

[23] O termo "grupo funcional biocompatível compreendendo, pelo menos, um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre" refere-se a duas classes de grupos funcionais, onde uma classe é a classe de oxigênio compreendendo grupos funcionais e a outra classe é uma classe de grupos funcionais compreendendo ou consistindo dois átomos de enxofre, onde os grupos funcionais de ambas as classes não dão origem às reações adversas ou efeitos colaterais se administrados a um organismo vivo a ser tratado com a composição farmacêutica da invenção ou a ser diagnosticado utilizando a composição diagnóstica da invenção. O termo "biocompatível" é equivalente ao termo "geralmente reconhecido como seguro (GRAS)”. Meios para avaliar a biocompatibilidade são bem conhecidos na arte, incluem testes in vitro realizados em linhas celulares, testes in vivo em animais, bem como os testes clínicos nos seres humanos e não tendo que de ser mais detalhados aqui. Qualquer teste exigido ou recomendado pelas autoridades reguladoras para a apreciação se um composto é geralmente reconhecido como seguro (GRAS), é preferencialmente utilizado para identificar estes compostos cíclicos cujo oxigênio contido no grupo funcional(s) e/são biocompatíveis. Preferencialmente, o átomo de oxigênio do referido grupo funcional biocompatível compreendendo pelo menos um átomo de oxigênio está disponível para formar um complexo com o referido grupo de amino primário protonado, o referido grupo de amino secundário ou o referido grupo de guanidino protonado. Analogamente, de preferência um ou ambos os átomos de enxofre do grupo funcional biocompatível compreende dois átomos de enxofre e está disponível para a formação complexa. Os grupos funcionais biocompatíveis selecionados compreendem pelo menos um átomo de oxigênio incluído éster (-C(=O) -O-), amida (-C(=O) -NH-), éter (-O-), oxima (-C=N-O-), tioéster (-C(=O)-S- assim como -C(=S) -O-), hemiacetal, acetal e o sulfóxido (-S(=O) -). Os preferidos são éster (-C(=O) -O-), amida (-C(=O) -NH-) e éter (-O-). Os grupos funcionais biocompatíveis preferidos compreendendo dois átomos de enxofre são dissulfeto (-S-S-) e ditioéster (-C(=S) -S). O preferido é dissulfeto (-S-S-). Os grupos funcionais compreendendo pelo menos um átomo de oxigênio que não são biocompatíveis incluem peróxido.

[24] Todas as ocorrências de A podem ser as mesmas. Alternativamente ou em complemento, todas as ocorrências de B podem ser as mesmas. Se todas as ambas as ocorrências de A são as mesmas, por exemplo, um grupo A1, tal como etano-1,1-diila e todas as ocorrências de B são as mesmas, por exemplo, um grupo B1 tal como metileno, um padrão alternado dos blocos de construção é obtido. A variável p define o número de repetições do referido padrão com o composto da invenção. Além disso, A = B pode ser válido para todas as ocorrências de A e B.

[25] Do mesmo modo, todas as ocorrências de X podem ser as mesmas. Alternativamente ou em complemento, todas as ocorrências de Y podem ser as mesmas. Além disso, X = Y pode ser válido para todas as ocorrências de X e Y.

[26] O limite inferior de 3 sobre os valores de p.(n+m) assegura que pelo menos três átomos de oxigênio são incluídos no composto da invenção. De preferência, pelo menos quatro átomos de oxigênio são incluídos no composto da invenção. Isto pode ser atingido por um valor mínimo de p.(n+m) de 4. Faixas preferíveis de p.(n+m) incluem 3 a 20, de 3 a 10, 4 a 10 e 4 a 8. Entende-se que a expressão "utilização de um composto cíclico” também pode abranger, em complemento ao uso de um composto, o uso de dois ou mais compostos distintos, tal como definido na principal incorporação.

[27] O composto pode ser selecionado a partir de um (i) poliéster cíclico, (ii) poliamida cíclica, (iii) poliéter cíclico, (iv) polioxima cíclica; (v) politioéster; (vi) polímero de ácidos aminóxidos; (vii) poli-dissulfeto; e (viii) um composto cíclico pertencente a mais de um de (i) a (vii). Os preferidos são os poliésteres cíclicos, depsipeptídeos cíclicos e poliéteres cíclicos. Ainda mais preferidos são os poliésteres cíclicos.

[28] A presente invenção também descreve a utilização de um poliéster (i) cíclico, (ii) poliamida, (iii) poliéster, (iv) polioxima, (v) politioéster, (vi) polímero de ácidos aminóxidos, (vii) poli-dissulfeto e (viii) um composto cíclico pertencente a mais de um de (i) a (vii), onde o referido poliéster cíclico, poliamida, poliéter, polioxima, politioéster, polímero de ácidos aminóxidos, poli-dissulfeto ou compostos pertencentes a mais de um de (i) a (vii) é capaz de formar um complexo com um grupo de amina protonado primário e/ou secundário e/ou um grupo de guanidino protonado para a fabricação de compostos farmacêuticos ou de diagnóstico que ainda compreendem agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente compreendendo um ou mais grupos de amina protonados primários e/ou secundários e/ou um grupo de guadinio protonado, em que a entrega transmembranar e/ou transmucosal; (b) a solubilidade em solventes não aquosos; e/ou (c) a estabilidade do referido agente ativo são melhoradas.

[29] O termo "cíclico" refere-se a compostos, tais como poliésteres, poliortoésteres, poliamidas, depsipeptídeos, poliéteres e polioximas da invenção, que contêm um anel. Quando utilizado para designar uma característica do composto da invenção como um todo, que é o caso aqui, o termo "anel" refere-se a um anel que inclui todos os grupos funcionais X e Y. O grupo funcional proporcionando fechamento do referido anel pode ser o mesmo ou diferente do grupo funcional que deu origem a classificação como poliéster, poliortoéster, poliamida, depsipeptídeo, polioxima ou poliéster. Preferencialmente, o grupo funcional proporcionando o fechamento é o mesmo que o grupo funcional dando origem a referida classificação, ou seja, no caso de um poliéster cíclico mais uma ligação de éster é formada quando a forma correspondente linear é convertida para a forma cíclica. O termo "forma correspondente linear" designa um polímero ou oligômero (o termo "polímero", como aqui utilizado inclui oligômeros), que tem um determinado número de monômeros ligados entre si para formar um polímero linear, em que o referido número determinado é o mesmo que o número de monômeros no composto cíclico da invenção. Em outras palavras, o número de monômeros um a um de um lado e do outro lado o número de funcionalidades do éster (no caso de poliésteres cíclicos), funcionalidades do ortoéster (em caso de poliortoésteres cíclicos), funcionalidades da amida (em caso de poliamidas cíclicas) ou o número combinado de éster e funcionalidades da amida (em caso de depsipeptídeos cíclicos) são os mesmos.

[30] O termo "polímero" é entendido para compreender ambos os polímeros em sentido estrito, ou seja, moléculas formadas a partir de uma pluralidade de blocos de construção ou um ou mais de um tipo (neste último caso, os referidos polímeros são também referidos como copolímeros), onde após a formação do polímero a partir dos blocos de construção, mais nenhuma molécula(s), tais como a água é formada, bem como policondensados, isto é, polímeros de acordo com a presente invenção, onde sobre a formação do polímero a partir dos seus blocos de construção mais molécula(s), tais como a água é/são formadas em adição ao polímero.

[31] O termo "poliéster", como utilizado neste documento, refere-se compostos que compreendem ao menos duas funcionalidades do éster, ou seja, dois grupos -C(-O) -O—. Os ésteres cíclicos são também referidos como lactonas. Os blocos de construção de poliésteres e depsipeptídeos (ver abaixo) são ou incluem, respectivamente, hidroxiácidos Os blocos de construção preferidos ou monômeros de acordo com a invenção são alfa-hidroxiácidos e beta-hidroxiácidos. Também preferidos são os hidroxiácidos com até dez átomos de carbono, em que qualquer número abaixo de dez é explicitamente incluído no âmbito de aplicação da invenção. Como tal, os alfa-hidroxiácidos preferidos incluem alfa-hidroxiácidos com dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove ou dez átomos de carbono ou até 20 átomos de carbono. Preferencialmente os beta-hidroxiácidos incluem beta-hidroxiácidos com três, quatro, cinco, seis, sete, oito e nove átomos de carbono. Os alfa-hidroxiácidos específicos preferidos são os ácido glicólico, ácido lático, ácido alfa-hidróxi-n-butírico, ácido alfa-hidróxi-n-pentanóico e ácido alfa-hidróxi-n-hexanóico. O beta-hidroxiácido preferido inclui ácido beta-hidróxipropiônico, ácido beta-hidróxi-n-butírico, ácido beta-hidróxi-n-pentanóico e ácido beta-hidróxi-n-hexanóico. Igualmente previstos são os hidroxiácidos com cadeias laterais de alquila ramificada, tais como o ácido beta-hidróxi-i-butírico e o ácido alfa-hidróxipentanóico, bem como com hidroxiácidos com uma cadeia lateral de hidroxialquila. Preferencialmente, esta referida cadeia lateral de hidroxialquila carrega um grupo terminal de hidroxila. Tais poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas, depsipeptídeos, poliéteres e polioximas podem carregar uma ou mais moléculas livres de hidroxila na cadeia lateral para maiores explorações, tais como derivatização por esterificação. Além disso, estão previstos hidroxiácidos com cadeias laterais aromáticas. Hidroxiácidos com cadeias laterais aromáticas incluem qualquer um dos ácidos alifílicos acima mencionados, onde os referidos ácidos são substituídos por um grupo de fenil. O grupo de fenil, por sua vez, pode ser substituído. Um exemplo é o ácido 2-Fenil-2-hidroxiacético (ácido mandélico). Os poliésteres cíclicos podem ser constituídos por um tipo de monômero ou uma pluralidade de tipos de monômeros. Esta referida pluralidade pode, por exemplo, ser uma pluralidade de alfa-hidroxiácidos ou uma mistura de alfa-hidroxiácidos e beta-hidroxiácidos. Os alfa-hidroxiácidos e beta-hidroxiácidos podem ser alternados.

[32] Entende-se que os poliésteres podem surgir a partir da polimerização dos hidroxiácidos. Alternativamente, os poliésteres podem surgir a partir de polimerização de um di-álcool com um di-ácido. O mesmo se aplica, mutes mutandis, às poliamidas e aos depsipeptídeos da invenção.

[33] O termo "ortoésteres”, como utilizado neste documento, refere-se a compostos contendo um átomo de carbono ligado a três grupos de alcóxi. Assim, os poliortoésteres são compostos que compreendem pelo menos duas dessas funcionalidades. Os poliortoésteres cíclicos são tautômeros de valência dos poliésteres cíclicos (ver MCGEARY e Bruget (2000)). Ambas as formas tautoméricas são adequadas para a prática da presente invenção. Além disso, é entendido que o termo "poliortoéster" é para ser subsumido sob o termo “poliéster” da invenção.

[34] O termo "politioéster" refere-se aos compostos incluindo pelo menos duas funcionalidades do tioéster, ou seja, (i) pelo menos dois grupos -C(=O) -S-, (ii) pelo menos dois grupos--C(=S) -O-, ou pelo menos um grupo -C(=O) -S- e pelo menos um grupo -C(=S) -O-.

[35] Igualmente previstos são compostos cíclicos da invenção que são poli-ditioésteres cíclicos. O termo "poli-ditio-éster", como utilizado neste documento, refere-se aos compostos compreendendo pelo menos dois grupos de ditioéster funcionais (C(=S) -S).

[36] O termo "poliamida" refere-se aos compostos incluindo pelo menos duas funcionalidades da amida, ou seja, dois grupos -C(=O) -NH-. Amidas cíclicas são também designadas lactamas. A ligação da amida também é referida como ligação peptídica, em especial no contexto de peptídeos. De preferência, os blocos de construção ou monômeros de poliamidas cíclicas são alfa-aminoácidos e beta-aminoácidos. Também os depsipeptídeos (ver abaixo) compreendem os alfa-aminoácidos. Outras preferências são os aminoácidos com até dez átomos de carbono, em que qualquer número abaixo de dez é expressamente incluído no âmbito de aplicação da invenção. Como tal, de preferência os alfa-aminoácidos incluem os alfa-aminoácidos com dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove ou dez átomos de carbono. De preferência, os beta-aminoácidos incluem os beta-aminoácidos com três, quatro, cinco, seis, sete, oito e nove átomos de carbono. Alfa-aminoácidos específicos preferidos são a ocorrência natural dos aminoácidos. Os particularmente preferidos alfa-aminoácidos são Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Met e Phe. A ocorrência de um ou mais do restante da ocorrência natural dos aminoácidos (tais como Cis, Asn, Gin, Pro Ser, Thr, Trp, Tyr), quando apropriado, também está deliberadamente prevista. Mais alfa-aminoácidos são alfa-aminoácido butírico e alfa-aminoácido i-butírico. De preferência, os beta-aminoácidos incluem beta-alanina. Além disco, o gama-aminoácido butírico pode ser utilizado como o único ou um dos monômeros nas poliamidas cíclicas ou depsipeptídeos. As poliamidas cíclicas podem consistir em um tipo de monômero ou em uma pluralidade de tipos de monômeros. Esta referida pluralidade, por exemplo, pode ser uma pluralidade de alfa-aminoácidos ou uma mistura de alfa-aminoácidos e beta-aminoácidos. Os alfa-aminoácidos e beta-aminoácidos podem alternar.

[37] O termo "poliamida" inclui também compostos dos monômeros os quais são, alfa e beta oxi-aminoácidos (ver, por exemplo, Yang et. al. J.Am.Chem.Soc., 2002, 124, 12410-12411) e os compostos relacionados.

[38] O termo "depsipeptídeo" é conhecido na arte e designa aqui compostos que contêm ou consistem em alfa-hidroxiácidos e alfa-aminoácidos, que estão ligados entre si por ligações de éster entre o grupo hidróxido de um alfa-hidroxiácido e o grupo carboxila tanto em um hidroxiácido ou um aminoácido, tal como por uma ligação de amino entre o grupo amino de um alfa-aminoácido e o grupo carboxila de tanto um hidroxiácido quanto um aminoácido. Mais do que um tipo de alfa-hidroxiácido e/ou alfa-aminoácidos podem estar presentes em um depsipeptídeo. Por outro lado, também os depsipeptídeos, onde apenas um tipo de alfa-hidroxiácido e/ou apenas um tipo de alfa-aminoácido ocorre, são incluídos nesta descrição. Os monômeros dos alfa-hidroxiácidos e os monômeros dos alfa-aminoácidos podem alternar. Uma sequência estritamente alternada implicaria em um número par de monômeros no depsipeptídeo cíclico da invenção. Alternativamente, um ou mais trechos de ésteres ligados consistem em uma pluralidade (como duas, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove ou mais) de monômeros de alfa-hidroxiácidos podendo ser seguidos por um ou mais trechos entre ligados consistindo em uma pluralidade (como duas, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove ou mais) de alfa-aminoácidos. De preferência os alfa-aminoácidos e alfa-hidroxiácidos são descritos conforme acima.

[39] O termo "poliéter" refere-se a compostos compreendendo pelo menos dois grupos funcionais de éter. Um grupo funcional de éter é representado por -O-, onde os carbonos diretamente adjacentes ao átomo de oxigênio não são substituídos por heteroátomos. Por exemplo, polímeros biocompatíveis como PEGs são para ser subsumidos sob o termo "poliéster".

[40] O termo "polioxima" refere-se a compostos compreendendo ao menos dois grupos funcionais de oxima (-C=N-O-). Uma polioxima cíclica exemplar é mostrada na Figura 2.

[41] Uma nova classe de compostos cíclicos preferenciais são polímeros cíclicos de aminoxiácidos, de preferência de alfa-aminoxiácidos. O grupo funcional contendo oxigênio, em polímeros cíclicos dos aminoxiácidos é -C(=O) -NH-O- ou -C(=O) -N(OH) -.Os polímeros dos aminoxiácidos onde o grupo funcional é -C(=O) -N(OH) - são também referidos como ácidos poli hidroxâmicos.

[42] Outra classe preferencial de compostos cíclicos são os polidissulfetos cíclicos. O termo "poli-dissulfeto", como utilizado neste documento, refere-se aos compostos compreendendo pelo menos dois grupos funcionais de dissulfeto (-S-S). Um exemplo é mostrado na Figura 2. Dissulfetos são conhecidos por serem reversíveis/quebráveis sob condições fisiológicas in vivo por agentes redutores que ocorrem naturalmente no corpo humano ou animal, tais como a glutationa e outros mercaptanos endógenos.

[43] Os termos "poliéster", "poliamida", "polioxima" e "polímero cíclico de aminoxiácidos " incluem compostos para o qual todas as ocorrências X = Y = éster (no caso de poliéster), para todas as ocorrências X = Y = amida (no caso de poliamida) etc. Também incluídos estão os compostos em que a maioria, ou seja, mais de 50% de todas as ocorrências de X e Y juntas, são éster (no caso de poliéster), amida (no caso de poliamida), éter (em caso de poliéster) ou oxima (no caso de polioxima), respectivamente. Assim, também incluídos são os compostos de um total de k grupos funcionais (X, Y), k-1 grupos funcionais são de um tipo específico, como éster, e um grupo funcional é de um tipo diferente, como amida. Em outras palavras, uma classe preferencial de compostos cíclicos da invenção são poliésteres cíclicos onde uma única ligação de amida substitui uma única ligação de éster gerando um poliéster mono-amida cíclico. Numa outra incorporação preferida, o poliéster cíclico composto por alfa-hidroxiácidos e uma única ligação de amida (CO-NH-), substitui apenas uma ligação de éster (CO-O-). Numa outra incorporação preferida, o poliéster cíclico é composto de alfa-hidroxácidos e um único aminoácido é utilizado para substituir um único alfa-hidroxiácido. Essa classe de compostos cíclicos, mantendo as principais características de toda a estrutura das ligações dos poliésteres cíclicos, pode ser sintetizada e produzida mais facilmente com rendimentos superiores. Outro exemplo deste tipo de composto são as coroas de éteres mono-oxo, como o composto mostrado na figura 2, na parte inferior à direita. Esses compostos têm k-1 grupos de éter e um grupo de éster.

[44] O termo "composto cíclico pertencente a mais de um de (i) a (vii)” inclui poliéster-co-eteres, depsipeptídeos, poli-éster-co-oximas, poli-amida-co-ésteres e similares. Os referidos "compostos pertencentes a mais de um de (i) a (iv)" incluem Peg-poliésteres (também referido por oxo-PEGs, incluindo mono-oxo PEG e di-oxo PEG, ver também figura 2): Neste caso ao menos dois oligômeros sendo compreendidos ou consistidos por um Peg ou um poliéter, referido Peg ou poliéter, respectivamente, tendo em ambas as extremidades um grupo de hidroxila e um ácido carboxílico, sendo fundidos em conjunto com uma única estrutura cíclica, formando pelo menos duas ligações de ésteres (poli-éter-co-éster cíclico). Um exemplo deste tipo de composto pode ser encontrado no pedido de patente JP55143981 (OKAHARA Mitsuo; MATSUSHIMA Kenji) (ver também K. Matsushima, N. Kawamura, Y. Nakatsuji e M. Okahara, (1982), Buil.Chem.Socipn, 55, 2181-2185). O composto cíclico descrito pode ser um composto cíclico pertencente a mais de um de poliésteres, poliamida, poliéter, polioxima e polímeros cíclicos de aminoxiácidos. Neste caso, uma ou mais ocorrências de X ou Y é -C(=O) -NH-O-.

[45] Entende-se que os monômeros preferidos dos poliésteres, poliamidas, poliéteres, polioximas e composto cíclico pertencentes a mais de um de (i) a (vii), conforme definido acima, ou seja, os preferidos hidroxiácidos, os preferidos aminoácidos e outros semelhantes, ao mesmo tempo, fornecem uma definição dos preferidos blocos de construção A, B da incorporação principal. Ao eliminar os hidróxidos e o grupo de ácido carboxílico a partir de um hidroxiácido divulgado anteriormente, um alcano-i, j-diila é obtido, em que posições i e j são as posições da hidroxila e do grupo de ácido carboxílico. Do mesmo modo, mediante a eliminação da amina e do grupo de ácido carboxílico de um aminoácido divulgado anteriormente, um alcano-i, j-diila é obtido, em que as posições i e j são as posições da amina e dos grupos de ácidos carboxílicos. Em geral, pela remoção destes grupos funcionais presentes nos referidos monômeros, que dão origem aos grupos funcionais designados X, Y na incorporação principal (por exemplo, -OH e -COOH dão origem a -C(=O) -O-, -NH2 e -COOH dão origem a -C(=O) -NH-), referido alcano-i, j-diila é obtido. O alcano-i j-diila obtido fornece um bloco de construção A ou B que pode ser vinculado a qualquer grupo funcional biocompatível contendo oxigênio X ou Y dentro do composto cíclico da invenção. Além disso, é entendido que, em sintonia com as principais incorporações, o referido alcano-i j-diila pode incluir uma ou mais ligações duplas, pode ser substituído, tal como acima definido, e/ou pode incluir um ciclo tal como definido anteriormente.

[46] Os termos "complexo" e "complexação" são bem conhecidos na arte e referem-se a uma associação reversível de moléculas, átomos, ou íons através de ligações químicas não-covalentes. Normalmente, dois parceiros de interação, um agente complexante tendo uma pluralidade de grupos funcionais e uma pequena molécula, átomo ou íon ligado pela referida pluralidade de grupos funcionais estão implícitas. Conforme utilizado aqui, o termo complexo não está limitado aos íons metálicos ligados a um agente complexante. Diz respeito, em geral, a complexos entre um composto da invenção e um cátion ou um grupo catiônico. Os compostos cíclicos da invenção fornecem grupos funcionais contendo oxigênio, sendo o oxigênio disponível para a formação do complexo. Um exemplo de um átomo de oxigênio é o oxigênio do éter nos poliéteres cíclicos. Os poliésteres cíclicos, poliamidas e, depsipeptídeos fornecem grupos carbonila (que fazem parte da amida e funcionalidades do éster), como grupos funcionais envolvidos na formação do complexo. Os poliortoésteres cíclicos fornecem átomos de oxigênio (que fazem parte dos grupos de alcóxi nos referidos poliortoésteres), como grupos funcionais envolvidos na formação do complexo.

[47] Acontece que os efeitos favoráveis da presente invenção, ou seja, a melhoria da entrega transmembrana e/ou transmucosal, de solubilidade em solventes não aquosos, e/ou de estabilidade dos agentes ativos sendo complexados com o composto cíclicos da invenção não são apenas observados com agentes ativos que são pequenas moléculas, mas também com os agentes que são peptídeos, polipeptídeos ou proteínas. Isto é particularmente surpreendente, desde que mecanismos totalmente diferentes ou efeitos são responsáveis pela referida melhoria num e noutro caso. No caso de pequenas moléculas, a complexação com compostos cíclicos da invenção tipicamente leva a uma substancial blindagem da referida molécula pequena. Isto é devido ao tamanho, onde uma pequena molécula (o composto cíclico) complexa outra pequena molécula (o agente ativo farmaceuticamente). Além disso, as pequenas moléculas, devido as suas pequenas dimensões (por exemplo na faixa de 500 Dalton ou menos) também podem ser absorvidas através de um mecanismo paracelular, ou seja, através dos pequenos poros ou canais entre as células que compõem o tecido. Se, além disso, a pequena molécula em questão dispõe de outras características específicas, incluindo uma pronunciada hidrofobicidade, a molécula é absorvida através de um percurso transcelular, ou seja, também pela absorção passiva. Além disso, tem de ser entendido que qualquer propriedade, em particular as propriedades físico-químicas da referida molécula pequena, as referidas propriedades compreendendo, por exemplo, entrega transmembrana e/ou transmucosal, se tornam menos relevantes após a complexação, desde que a complexação implique na blindagem de essencialmente toda a pequena molécula devido à similaridade de tamanho.

[48] Em caso de biopolímeros como, por exemplo, peptídeos, polipeptídeos ou proteínas, por outro lado, a blindagem de toda a molécula pelo composto cíclico da invenção tipicamente não ocorre visto que a generalidade do tamanho de um polipeptídeo ou proteína irá exceder significativamente o tamanho do referido composto cíclico, no entanto, a referida melhoria ainda ocorre. Surpreendentemente acontece que, ao contrário das pequenas moléculas que são conhecidas por atravessar membranas, a blindagem local das cargas sobre os referidos peptídeos, polipeptídeos ou proteínas que, ao contrário são conhecidos não por atravessar membranas, é suficiente para implicar a referida melhoria. Uma blindagem global de todo o peptídeo, polipeptídeo ou proteína surpreendentemente acaba por não ser a principal força motriz quando referida melhoria está para ser alcançada.

[49] Usos e métodos da invenção podem ser efetuados utilizando uma mistura de compostos cíclicos selecionados entre mais de uma classe de compostos como os poliésteres, poliortoésteres, poliamidas, depsipeptídeos, poliéteres e polioximas. Alternativamente, apenas compostos de uma determinada classe, tais como apenas poliésteres cíclicos ou apenas poliortoésteres cíclicos ou apenas poliamidas cíclicas ou apenas depsipeptídeos cíclicos ou apenas poliéteres cíclicos ou apenas polioximas cíclicas podem ser utilizadas. Se este for o caso, por exemplo, os referidos poliésteres podem ser misturas de diferentes poliésteres, os referidos poliortoésteres podem ser misturas de distintos poliortoésteres, as referidas poliamidas podem ser misturas de diferentes poliamidas e os referidos depsipeptídeos podem ser misturas de diferentes depsipeptídeos. De preferência, apenas uma espécie química, ou seja, um poliéster específico, um poliortoéster específico, um tipo específico de poliamida ou um depsipeptídeo específico é utilizado.

[50] A capacidade dos compostos da invenção para formar um complexo com referido grupo amino primário protonado ou grupo amino secundário protonado ou grupo guanidino protonado pode ser determinado de forma simples pela pessoa qualificada.

[51] Um ensaio adequado compreende uma avaliação da solubilidade de um agente ativo, tal como um peptídeo ou proteína, por exemplo, insulina ou eritropoietina, em solvente orgânico, por exemplo, metanol, etanol ou diclorometano. Em um primeiro experimento, a solubilidade do peptídeo ou proteína no solvente orgânico é determinada. Em um segundo experimento, um excesso molar de três a dez vezes, de preferência um excesso molar de três a cinco vezes de um composto da invenção, tal como um poliéster cíclico, poliortoéster, poliamida, depsipeptídeo, poliéster ou polioxima é adicionado ao peptídeo ou proteínas, juntamente com o solvente orgânico. O termo "excesso molar " refere-se a um montante do composto cíclico, que exceda a quantidade de grupos amino primários protonados, grupos amino secundários protonados e grupos de guanidino protonados do peptídeo ou da proteína. Na ausência de um composto cíclico da invenção, o peptídeo/proteína gera uma suspensão, suspensão coloidal ou depósitos em forma de partículas. O mesmo se aplica a uma mistura do referido peptídeo ou proteína com compostos cíclicos que não são capazes de formar um complexo com grupos amino primários protonados e/ou secundários e/ou um grupo de guanidino protonado. Por outro lado, um composto cíclico capaz de formar um complexo com um grupo de amino primário protonado e/ou secundário e/ou um grupo de guanidino protonado gera uma solução clara do peptídeo/proteína no solvente orgânico.

[52] Numa nova incorporação do ensaio, qualquer matéria insolúvel ainda presente em qualquer experimento pode ser removida por centrifugação e a concentração de peptídeo/proteína em uma solução pode ser posteriormente determinada por meio conhecido nesta ciência. Esses meios incluem análise por HPLC do sobrenadante da centrifugação e determinação do montante do peptídeo ou proteína pela determinação da área de pico do peptídeo/proteína no cromatograma.

[53] De preferência, a constante de dissociação Kd do referido complexo é menor que 10-3, de preferência ainda menor que 10-4, 10-5 ou 10-6.

[54] O termo "agente ativo farmaceuticamente” refere-se a qualquer agente capaz de obter efeitos farmacêuticos. O termo "droga" é utilizado aqui equivalentemente. Uma composição farmacêutica, de acordo com a invenção, pode incluir um ou mais agentes ativos farmaceuticamente. Os agentes ativos farmaceuticamente preferidos são os peptídeos, polipeptídeos, proteínas, anticorpos e os de moléculas pequenas, em especial as moléculas orgânicas pequenas. O termo "(poli) peptídeo" é aqui utilizado para designar ambos os peptídeos e polipeptídeos. Estão também incluídos os agentes ativos farmaceuticamente que são (poli) sacarídeos ou ácidos nucleicos. Os polissacarídeos preferidos são polissacarídeos contendo um ou mais grupos de ácido sulfônico (-SO3), como a heparina, que será mais discutida abaixo. No caso dos agentes ativos farmaceuticamente serem ácidos nucleicos, prevê-se a utilização dos compostos cíclicos para a blindagem das cargas positivas de íons contrários da carga negativa dos fosfatos. Os referidos contraíons (de carga positiva) incluem amônio, aminoácidos, tal como a Lys e seus derivados, e íons metálicos. Estão também inclusos os ácidos nucleicos em que o fosfato é esterificado com uma aminoalquila ou um grupo guanidinoalquila. Os ácidos nucleicos em conformidade com a presente invenção, incluem DNA, tais como cDNA ou DNA genômico e RNA. Entende-se que o termo "RNA", como utilizado neste documento, abrange todas as formas de RNA, incluindo mRNA, ncRNA (non-coding RNA), tRNA e rRNA. O termo "não-codificante do RNA" inclui siRNA (small interfering do RNA), miRNA (micro RNA), rasiRNA (repeat associated RNA), snoRNA (small nucleolar RNA), e snRNA (small nuclear RNA).

[55] Um ácido nucleico preferido é o small interfering RNA. A expressão "small interfering RNA" (siRNA), por vezes conhecida como RNA de interferência curta ou RNA silencioso, refere-se a uma classe de moléculas de RNA geralmente curtas e de dupla fita que desempenham uma variedade de papéis na biologia e, de uma forma crescente, para tratamento de uma variedade de doenças e condições. De maior notoriedade, o siRNA é envolvido na interferência do RNA (RNAI) por onde o siRNA interfere com a expressão de um gene específico (ver, por exemplo, Zamore Nat Struct Biol 2001,8(9):746-50; Tuschl T. CHEMBIOCHEM. 2001,2:239-245; Scherr e Eder, Cell Cycle. fey 2007; 6(4):444-9; Leung e Whittaker, Pharmacol Ther. 2005 agosto; 107(2):222-39; de Fougerolies et al., Nat. Rev. Drug Discov. 2007, 6:443-453).

[56] O termo "agente ativo para diagnóstico" refere-se a qualquer agente adequado para a prática de um método de diagnóstico. Exemplos incluem peptídeos, polipeptídeos, anticorpos ou pequenas moléculas orgânicas que se ligam a uma molécula-alvo, cuja presença, ausência ou quantidade é determinada. A molécula-alvo, por sua vez, pode ser qualquer molécula que ocorre no corpo humano ou animal, em um estado saudável e/ou doentio. O termo "molécula-alvo" inclui peptídeos, polipeptídeos e proteínas. Preferencialmente, o referido agente ativo por diagnóstico é detectável por rótulos.

[57] O termo "anticorpos" inclui anticorpos monoclonais, anticorpos policlonais, anticorpos de cadeia única, ou fragmentos destes, incluindo também anticorpos bioespecíficos, anticorpos sintéticos, fragmentos de anticorpos, tais como a Fab, uma F(ab2)', Fv ou fragmentos de scFv etc., ou um derivado quimicamente modificado de qualquer destes. Os anticorpos que podem ser utilizados de acordo com a invenção ou sua(s) cadeia(s) de imunoglobulina correspondentes ainda podem ser modificados através do uso de técnicas convencionais conhecidas nesta ciência, por exemplo, utilizando supressão(ões) de aminoácido, inserção(ões), substituição(ões), adição(ões) e/ou recombinação(ões) e/ou qualquer outra alteração(ões) conhecida(s) nesta ciência por si só ou em combinação. Métodos para introduzir tais modificações na sequência de DNA subjacentes à sequência de aminoácidos de uma cadeia de imunoglobulina são bem conhecidos pela pessoa competente nesta ciência; ver, por exemplo, Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor , NY, 1989.

[58] O termo "monoclonal" ou "anticorpo policlonal" (ver Harlow e Lane, (1988), op. Cit.) também diz respeito a derivados dos referidos anticorpos que mantêm ou essencialmente mantêm a sua especificidade vinculativa.

[59] O termo "fragmento scFv " (single-chain Ft, fragment) é bem compreendido na arte e preferido devido ao seu pequeno tamanho e a possibilidade de produzir estes fragmentos de forma recombinante.

[60] Em uma implementação particularmente preferida da utilização ou o método da invenção, dos referidos anticorpos ou a porção vinculante dos anticorpos é ou é derivada de um anticorpo humano ou um anticorpo humanizado.

• a. O termo "anticorpo humanizado" significa, em conformidade com a presente invenção, um anticorpo de origem não humana, onde pelo menos uma complementarity determining region (CDR) em regiões variáveis tais como a CDR3 e, de preferência, todos os 6 CDRs foram substituídos por CDRs de um anticorpo de origem humana, com uma especificidade desejada. Opcionalmente, a(s) região(ões) constante(s) não-humana(s) do anticorpo foi/foram substituídas por (uma) região constante de um anticorpo humano. Métodos para a produção de anticorpos humanizados são descritos em, por exemplo, EP-A1 0 239 400 e W090/07861.

[61] A expressão "pequena molécula", como utilizado aqui inclui os agentes listados a seguir, onde a correspondente indicação medica é também fornecida: (a) Antibióticos sintéticos e naturais: derivados de anel piridínico (ácido nalidíxico, ácido oxolínico), derivados da Penicilina (benzilpenicilina, fenoximetilpenicillna, Meticilina, oxacilina, ampicilina, Amoxicilina, Pivampicilina, Talampicilina, carbenicilina, Ticarcilina) Derivados de Cefalosporina (Cefalosporina C, Cefaloglicina, cefotaxima, Cefmetazol, Cefradina, cefalexina, cefalotina, Cefaloridina, cefazolina, Cefsulodina, Cefacetril, Cefapirina, cefuroxima, Cefamandole, Cefoxitina, Cefazol cefoperazona, Ceftriaxona) Antibióticos aminoglicosídeos (Estreptomicina, Neomicina, Gentamicina, Tobramicina, Amicacina), Polyenes (nistatina, anfoterldna B), anti-tuberculose (Para-amino ácido salicílico) (b) Neuro-transmissores: Catecolaminas (adrenalina, noradrenalina, L-Dopamina, Dopamina, carbidopa) serotonina, ácido y-amino-butirico (GABA), (c) Anti-inflamátorios e analgésicos não esteroides: ácido salicílico, ácido Acetilsalicílico; ácidos fenilacéticos: Ibuprofeno, Fenoxiprofeno, cetoprofeno, naproxeno, diclofenaco; ácidos Heterocíclico acetico: Indometacina, Ciometacina, sulindaco, Zomepirac, ácido tiaprofenico; ácidos antranilico: ácido mefenâmico, ácido flufenâmico, ácido mectofenâmico, ácido toifenâmico, ácido niflúmico, (d) Anticoagulantes: Heparina (qualquer derivado de sódio ou de cálcio), sulfato dermatam, enoxaparina sódica, dalteparina sódica; (e) Diuréticos: furosemida, Bumetanide, ácido Etacrínico, ácido Tienilico, Trianterene, Amiloride, (f) Diversos: ácido valpróico (anti-epilético) , ácido clavulânico (inibidor de β-lactamases), sais de Lítio (anti-psicóticos).

[62] Entende-se que a invenção também diz respeito a mais moléculas pequenas relevantes terapeuticamente que são modificadas de acordo com os usos e os métodos da invenção, ou seja, pela formação de complexo. Neste caso, a indicação médica prevista é a indicação que pode ser prevenida, melhorada ou curada com a pequena molécula em questão.

[63] O termo "peptídeo", de acordo com a presente invenção e com as doenças associadas a serem tratadas incluem: (a) o peptídeo é Lisinopril também conhecido como Privinil e a doença é hipertensão; (b) o peptídeo é goseretina, decapeptídeo sintético análogo do luteinizing hormone-releasing hormone (LHRH) e a doença é o câncer de próstata, (c) o peptídeo é calcitonina e a doença é osteoporose; (d) o peptídeo é Leuprolide e a doença é o câncer de próstata; (e) o peptídeo é o glucagon e a doença é a hipoglicemia; (f) o peptídeo é a Integrilina e a doença é a anti-coagulação; (g) o peptídeo é hirudina e é usado como agente anticoagulante e antitrombótico; (h) o peptídeo é a desmopressina, que é um análogo da vasopressina e é utilizada terapeuticamente como um antidiurético e na gestão de hemorragias em indivíduos com algumas formas de hemofilia e com a doença de von Willebrand, e onde o (poli)peptídeo é modificado conforme definido acima, ou seja, pela formação de um complexo com compostos cíclicos da invenção.

[64] Entende-se que a revelação também diz respeito a utilização de mais peptídeos terapeuticamente relevantes, que são modificados (ou seja, complexados) de acordo com a invenção. Neste caso, a indicação médica prevista é a indicação que pode ser prevenida, melhorada ou curada com o peptídeo ou polipeptídeo em consideração.

[65] O termo "(poli)peptídeo", de acordo com a presente invenção e doenças associadas a serem tratadas incluem: (a) (poli)peptídeo é insulina (incluindo insulina lispro, a insulina aspart, e a doença é diabetes; (b) o (poli)peptídeo é Epoetina alfa e a doença é a anemia; (c) o (poli)peptídeo é Epoetina beta e a doença é a anemia; (d) o (poli)peptídeo é darbepoetina e a doença é a anemia; (e) o (poli)peptídeo é eritropaletina e a doença é a anemia ou insuficiência renal crônica; (f) o (poli)peptídeo é filgrastim e as indicações são doenças imunológicas, leucemia, úlceras no pé diabético; Leucopenia, e doenças neoplásticas; (g) o (poli)peptídeo é o Lenograstim e a indicação é Leucopenia; (h) o (poli)peptídeo é a Sargramostin e a indicação é Leucopenia; (i) o (poli)peptídeo é a Molgramostina e a indicação a Leucopenia; (j) o (poli)peptídeo é Mirimostim e a indicação é Leucopenia; (k) o (poli)peptídeo é o Nartograstim e a indicação é Leucopenia; (I) o (poli)peptídeo é o GCSF e a doença é Quimioterapia neutropenia induzida; (m) o (poli)peptídeo é GMCSF e a indicação é transplante autólogo de medula óssea; (n) o (poli)peptídeo é uma asparaginase e a doença é o câncer; As formas preferidas de câncer propícias ao tratamento com asparaginases são leucemias linfoblásticas e linfoma de grandes células; (o) o (poli)peptídeo são produtos de Fator Vlla, Fator VIII, Fator IX (fatores de coagulação sanguínea) e as doenças são Hemofilia A, Hemofilia b; (p) o (poli)peptídeo é um interferon a-alfa-(inclui interferon alfa-2a, interferon alfa-2b, interferon alfacon-1 , interferon alfa 3n) e a doença é as hepatites crônicas B ou C e alguns tipos de câncer; (q) o (poli) peptídeo é um interferon β (onde o -beta- inclui interferon beta-1a, e interferon beta 1b) para tratar a Esclerose Multipla e hepatite; (r) o (poli) peptídeo é um interferon γ (onde -gama-inclui o interferon gamma -1b) e a doença é fibrose, tuberculose, meningite ou câncer; (s) do (poli) peptídeo é o crescimento do hormônio humano (hGH) e a doença é a deficiência no crescimento Humano em crianças; (t) o (poli) peptídeo é somatrem/somatropina e a doença é a Deficiência do hormônio de crescimento em crianças; (u) o (poli) peptídeo é um superóxido dismutase e a doença é a uma lesão cerebral; (v) o (poli) peptídeo é a interleucina-2 e a doença é o câncer (câncer renal metastático) ou uma condição que exija imunoestimulação; (w) o hormônio do crescimento humano (hGH) antagonista B2036 é bem conhecido no art. B2036 é obtida a partir de hGH mediante a introdução de nove aminoácidos substituídos conferindo propriedades antagônicas e aumentando a afinidade do receptor (ver E.U.A. patente 5.849.535). Para os efeitos do tratamento da acromegalia qualquer outro hormônio do crescimento (GH) — receptor antagônico (em alternativa ou em complemento a GH-receptor antagônico B2036) está prevista; (x) o (poli) peptídeo é o Transtuzumabe e a doença é o câncer. Entende-se que a termo (poli) peptídeos como utilizado aqui inclui peptídeos, polipeptídeos e proteínas.

[66] Entende-se que a revelação também diz respeito à utilização dos novos (poli) peptídeos terapeuticamente relevantes, que são modificados (ou seja, complexados), de acordo com a invenção. Neste caso, a indicação médica prevista é a indicação que pode ser prevenida, melhorada ou curada com o (poli) peptídeo em consideração.

[67] O agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente, de acordo com a invenção exibe um ou mais grupos selecionados a partir dos grupos amino primários protonados (-NH3+), grupos amino secundários protonados (-NH2+-) e grupos guanidino protonados (-NH-C(=NH2+)-NH2). Como detalhado a seguir, a presença de uma ou mais cargas positivas limita as possibilidades de formular e transportar o referido agente. Em uma implementação preferida, o referido grupo amino primário ou secundário é um grupo amino alifático primário ou secundário, respectivamente. Além disso, a referido grupo guanidino é de preferência o grupo guanidinio alifático, ou seja, um grupo ligado a um agrupamento guanidino alifático. Nos casos em que referido agente ativo é um peptídeo, polipeptídeo, proteínas ou anticorpos, entende-se que "grupo amino alifático primário" inclui ou faz referência ao grupo de aminoácidos Lys, e "grupo guanidinio alifático" inclui ou faz referência ao grupo guanidinio da Arg.

[68] Em complemento aos agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente, componentes de alimentos funcionais ou suplementos alimentares podem ser complexados com os compostos da invenção, permitindo que o componente de um alimento funcional ou o componente de um suplemento alimentar carregue um ou mais dos grupos amino primário protonados, grupos amino secundários protonados e grupos guanidinio protonados. Tais constituintes (também referidos como agentes ativos) podem substituir os agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente nos usos e nos métodos da invenção. Um exemplo de um componente de alimentos funcionais é a creatina.

[69] Assim, a presente revelação também relaciona a utilização de um composto cíclico, tal como definido nas principais incorporações; onde referido composto é capaz de formar um complexo com um grupo amino primário protonado e/ou secundário e/ou um grupo guanidinio protonado para (a) melhoria da entrega por transmembrana e/ou transmucosal; (b) a solubilidade em solventes não aquosos, e/ou (c) a estabilidade de um agente ativo, em que o referido agente ativo compreende um ou mais grupos amino primários protonados e/ou secundários e/ou um grupo guanidinio protonado.

[70] O termo agente ativo compreende agentes ativos farmaceuticamente ou drogas, agentes ativos diagnosticamente, bem como componentes de alimentos funcionais e componentes de suplementos alimentares.

[71] A composição farmacêutica pode ainda incluir veículos farmaceuticamente aceitáveis, excipientes e/ou diluentes. Exemplos de veículos farmacêuticos aceitáveis, excipientes e/ou diluentes são bem conhecidos na arte e incluem soluções de tampão fosfato salina, água, emulsões, tais como emulsões de óleo/água, diversos tipos de agentes umectantes, soluções esteireis, etc. Veículos preferidos para a entrega transmembrana ou transmucosal ou diluentes para a formulação de acordo com a invenção incluem os solventes não-aquosos discutidos mais adiante. Composições compreendendo tais veículos podem ser formuladas por métodos convencionais bem conhecidos. Estas composições farmacêuticas podem ser administradas ao sujeito a uma dose adequada. A posologia será determinada pelo médico assistente e por fatores clínicos. Como são bem conhecidas nas artes médicas, as dosagens para qualquer paciente dependem de muitos fatores, incluindo o tamanho do paciente, superfície corporal, idade, componentes particulares a serem administrados, sexo, tempo e via de administração, saúde geral, e outras drogas sendo administradas concomitantemente. Matérias proteicas farmaceuticamente ativas podem estar presentes em quantidades entre 1 ng e 10 mg/kg de peso corporal por dose, no entanto, doses abaixo ou acima desta faixa de exemplo são previstas, especialmente considerando os fatores acima mencionados. As formulações previstas compreendem ainda microesferas, lipossomas, microcápsulas e nanopartículas/nanocápsulas.

[72] Constituintes adicionais previstas dos compostos farmacêuticos ou de composições diagnósticas, de acordo com a invenção incluem ciclodextrinas (ver, por exemplo, Irie e Uekama (1999) ou Challa et al. (2005)) e/ou quitosana. Ciclodextrinas formam complexos de inclusão com moléculas hidrofóbicas presentes em um composto. Além disso, elas apresentam uma superfície exterior hidrofílica. Composições compreendendo ciclodextrinas ou quitosana podem apresentar propriedades de retardamento, ou seja, elas preveem uma liberação atrasada e/ou uma liberação durante um período prolongado de tempo do agente ativo.

[73] Assim, em outra implementação preferida, as referidas composições farmacêuticas ou de diagnóstico a serem ainda fabricadas compreendem uma ciclodextrina. Ciclodextrinas são conhecidas na arte e incluem alfa-ciclodextrina, beta e gama-ciclodextrina. Em outras palavras, o agente ativo está em uma primeira etapa complexado com compostos cíclicos, tais como poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas, depsipeptídeos, poliéteres e/ou polioximas que protegem a(s) carga(s) positiva(s) presentes no agente ativo e, em seguida, em uma segunda etapa, o agente ativo é complexado, a fim de formar uma segunda camada, com ciclodextrinas, mais especificamente para ser o interior da cavidade hidrofóbica das ciclodextrinas, gerando assim, no total, dois níveis de complexações. Isso abre possibilidades para conceber novos métodos de entrega: por exemplo, prendendo o ingrediente ativo em (i) lipossomas, (ii) microesferas, (iii) microcápsulas, (iv) nanopartículas/nanocápsulas.

[74] Para explicar, ainda, o aumento da hidrofobicidade e da blindagem da(s) carga(s) positiva(s) presentes nos agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente abrem anteriormente possibilidades indisponíveis de entrega, mediante a utilização de um sistema reforçado atualmente disponível de entrega. Por exemplo, ciclodextrinas são conhecidas por terem cavidades interiores lipofílicas e superfícies exteriores hidrofílicas e são capazes de interagir com um grande número de moléculas. Ciclodextrinas são utilizadas na formulação para melhorar a solubilidade aparente das drogas hidrofóbicas (pouco solúveis em água), aumentando assim a biodisponibilidade das drogas insolúveis através do aumento da solubilidade, dissolução, e/ou permeabilidade. No contexto da presente invenção, o aumento da hidrofobicidade do agente ativo devido à blindagem da(s) carga(s) positiva(s) por compostos cíclicos da invenção permite uma incorporação mais direta e mais profunda no núcleo lipofílico da estrutura da ciclodextrina. Em outras palavras, um agente ativo hidrofílico sendo não covalentemente e temporariamente complexado com compostos, tais como poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas, depsipeptídeos e/ou poliéteres, muda suas propriedades biofísicas e se torna hidrofóbico tal que ele - ou partes hidrofóbicas dele - pode inserir na parte interna (núcleo lipofílico) de ciclodextrinas. Como resultado, o agente ativo é complexado primeiro com compostos cíclicos da invenção, que protege a(s) carga(s) positiva(s) presentes e, em seguida, em uma segunda etapa, o complexo formado pelo agente ativo e os referidos compostos ciclos estão possibilitados a formar um complexo com um ou mais ciclodextrinas, produzindo, assim, no total, duas camadas de complexação. O complexo duplo está previsto para ser adequado à entrega de droga não-invasiva, incluindo ocular, retal, dérmica e entrega transdérmico, além disso, em entrega parenteral de droga (injeções), para alcançar a entrega para o cérebro, através do reforço da passagem da barreira hematoencefálica (BHE), e na entrega controlada da droga para atuar como veículo funcional de materiais na formulação farmacêutica para obter eficiência e precisão de entrega.

[75] Além disso, o aumento da hidrofobicidade pela blindagem da(s) carga(s) positiva(s) presentes no agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente, de acordo com os usos e os métodos da presente invenção abre possibilidades para conceber novos métodos de entrega; por exemplo, prendendo o ingrediente ativo em (i) lipossomas, (ii) microesferas, (iii) microcápsulas, (iv) nanopartículas/nanocápsulas compostas de, por exemplo, mas não se limitando a, ácidos poliacrílico (PAA), ácidos polimetacrílico (PMAA), ácidos poliláticos e glicólicos (PLEA), gabexate mesilate (GM), quitosana, amido, cloreto de tereftaloilo (CT), links cruzados de Ciclodextrinas, poli (etilcianoacrilato) (PECA), PEGs, e compostos do gênero.

[76] O termo "entrega transmembrana” refere-se à capacidade do referido agente ativo de atravessar membranas celulares. Levando em conta que as membranas celulares compreendem as camadas hidrofóbicas formadas pelas partes lipofílicas da membrana lipídica, moléculas carregadas não atravessam facilmente a membrana. Como consequência, a entrega em todas as membranas é negligenciável ou nulo. Entende-se que uma melhoria na entrega transmembrana implica também em uma melhoria da entrega transdérmica e transepitelial.

[77] O termo "entrega transmucosal” refere-se à capacidade do referido agente ativo para atravessar a mucosa. Qualquer mucosa está prevista, incluindo a mucosa da boca, nariz e pulmões. Dado que qualquer mucosa compreende membranas celulares, as considerações relativas às membranas celulares acima aplicam-se à mucosa também.

[78] O termo "solubilidade melhorada" refere-se a qualquer aumento de solubilidade nos referidos solventes não aquosos. Preferencialmente, o aumento na solubilidade é de 1,2 vezes; 1,5 vezes, duplamente, triplamente, quadruplamente, quintuplamente, decuplamente, centuplicado ou mil vezes maior. Aumentos de solubilidade em mais de três ordens de grandeza são também deliberadamente previstos.

[79] O termo "solvente não-aquoso", como utilizado neste documento, refere-se a solventes que não estão em uma base aquosa. O termo inclui os solventes orgânicos, em particular os solventes orgânicos apolares, solventes orgânicos com um momento de dipolo menor que a água, bem como solventes orgânicos que são hidrofóbicos, ou seja, solventes que são pouco ou nada miscíveis com água. O termo "solvente orgânico" é conhecido na arte e refere-se a substâncias a base de carbono, substâncias comumente utilizadas na indústria química, capazes de dissolver ou dispersar uma ou mais substâncias. De um modo geral, os solventes orgânicos são mais lipofílicos ou hidrofóbicos do que a água. Como consequência, os seus valores de logP são geralmente maiores do que zero. Solventes orgânicos, de acordo com a invenção, referem-se a solventes hidrocarbonetos insubstituídos como parafínicos, hidrocarbonetos alifáticos e aromáticos e seus derivados contendo heteroátomos, como o oxigênio (por exemplo, álcoois, cetonas, ésteres de glicol), halogênios (por exemplo, tetracloreto de carbono), nitrogênio (por exemplo, DMF, dimetil formamida e acetonitrila) ou enxofre (por exemplo, DMSO: dimetilsulfoxido). Os solventes orgânicos comumente utilizados são o metanol, etanol, álcoois de C3 a C10, acetonitrila, butanona, 1,1,1-trifluoroetano (TFE), hexafluoroisopropanol (HFIP), acetato de etila, tetracloreto de carbono, butanol, dibutil éter, dietil éter, ciclohexano, cloreto de metileno (diclorometano), hexano, acetato de butila, éter di-isopropil, benzeno, dipentil éter, clorofórmio, heptano, tetracloroetileno, tolueno, hexadecano, dimetilformamida (DMF), tetraidrofurano (THF) e dioxano.

[80] Os solventes não aquosos preferidos incluem solventes que podem ser utilizados como componentes em uma composição farmacêutica ou de diagnóstico e/ou solventes que podem ser utilizados no decurso da produção e formulação da referida composição dos produtos farmacêuticos ou de diagnóstico. Em outras palavras, o uso médico desses solventes é aprovado e/ou a sua utilização não representa uma ameaça para a saúde de um indivíduo a ser tratado. Solventes não aquosos específicos, que são deliberadamente previstos incluem os solventes orgânicos acima descritos. O termo "solvente não-aquoso" também inclui os produtos naturais, tais como óleos, incluindo azeite de oliva. Outro solvente não aquoso preferido é o veículo hidrofóbico aprovado pela FDA ou diluente, apenas como exemplo, mas não se limitando ao Cremofor EL.

[81] O termo "estabilidade" inclui o tempo prateleira do agente ativo, em estado puro ou de formulações compreendendo o agente ativo. Como tal, o termo "estabilidade" refere-se à estabilidade tanto em forma sólida (composições puras ou complexos sólidos farmacêuticos ou de diagnóstico) do agente ativo, bem como nas formas liquidas/solução (incluindo formulações líquidas). Além disso, inclui termoestabilidade, bem como a estabilidade contra a degradação enzimática. O termo "estabilidade" inclui a manutenção da atividade de natureza biológica, farmacêutica e/ou de diagnósticos. O termo "estabilidade" também se refere à estabilidade dos componentes ou de alimentos funcionais ou suplementos alimentares descritos acima. Deve ser entendido que a melhoria da estabilidade do referido agente ativo não é uma consequência óbvia da extrapolação a partir de uma melhoria da entrega transmembrana ou transmucosal. De fato, para a melhoria da estabilidade, a modulação, pelo composto cíclico, da interação entre moléculas do agente ativo é relevante, em oposição à modulação da interação entre o agente ativo e o ambiente em uma membrana ou mucosa. Isto é particularmente vantajoso para moléculas ativas facilmente degradáveis, incluindo os ácidos nucleicos.

[82] Além disso, complexação de substâncias ativas farmacêuticas com compostos cíclicos, tais como, mas não limitados à éteres coroa, oferece vantagens significativas no campo das técnicas galênicas e farmacêuticas. Na verdade, especialmente no caso dos biopolímeros, como por exemplo, peptídeos, polipeptídeos, proteínas e ácidos nucleicos que podem ser tratados principalmente em meio aquoso, a dupla e concomitante opção de ter um ingrediente farmacêutico tanto solúvel em água, bem como em solventes orgânicos (como um complexo com compostos cíclicos da invenção) pode permitir a melhoraria das formas galênicas, incluindo mas não limitados a: pílulas, comprimidos, cápsulas, supositório, elixires, aerossóis, gotas, em pó, liofilizado, emulsões, géis, cremes, adesivos e coloides. Deve ser entendido que a melhoria das formas galênicas do referido agente ativo não é uma consequência óbvia de extrapolação a partir de uma melhoria da entrega transmembrana ou transmucosal. Os compostos cíclicos, de acordo com a invenção, conduzem a um aumento da hidrofobicidade de um agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente após complexação com o composto. Concomitantemente, ocorre a blindagem da carga positiva do grupo amino primário ou secundário protonados ou o grupo guanidinio protonado. O aumento da hidrofobicidade e da blindagem da(s) carga(s) positiva(s) presentes no agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente abrem possibilidades anteriormente indisponíveis para a formulação. Por exemplo, agentes ativos predominantemente hidrofílicos, tais como peptídeos, polipeptídeos ou proteínas, incluindo anticorpos, podem ser dissolvidos (na sua forma complexada) em solventes quando a sua solubilidade na sua forma descomplexada é baixa ou nula. Tais solventes incluem os solventes não aquosos. Além disso, o aumento da hidrofobicidade do agente ativo na sua forma complexada abre novas vias de administração de agentes ativos, que até agora só podiam ser administrados de uma forma invasiva, como a forma intravenosa. Apesar dessa administração invasiva (incluindo administração intravenosa) apresentar desvantagens, como a parcial ou significativa degradação do agente ativo no fígado, nenhuma outra opção tem estado disponível até agora para um número de agentes ativos, incluindo, agentes ativos proteicos em particular. Após a complexação com compostos cíclicos de acordo com a invenção, o agente ativo torna-se suficientemente hidrofóbico para garantir permeação suficiente através das membranas celulares, tais como as membranas celulares presentes na mucosa ou na pele (ver Figura 1 para ilustração). Como consequência, as rotas de entrega não invasivas, que são mais detalhadas a seguir, podem ser consideradas para esses agentes. Em alternativa, a entrega não-invasiva pode ser uma opção também para a forma descomplexada do agente ativo, no entanto, com a desvantagem da permeação limitada da mucosa ou da pele. Nesse caso, complexação com poliésteres cíclicos, poliortoésteres cíclicos, poliamidas cíclicas, depsipeptídeos cíclicos e poliéteres, de acordo com a invenção, melhora a transferência e torna a entrega não invasiva a preferida via de entrega. A composição farmacêutica ou de diagnóstico obtida de acordo com a utilização da invenção são preferencialmente hidrofóbicas, notando que o complexo hidrofóbico do agente ativo permite o uso de veículos hidrofóbicos. Devido à hidrofobicidade (e lipofilicidade) da composição, a liberação do agente ativo na entrega pode ser retardada em relação a formulações convencionais menos hidrofóbicas. Em outras palavras, algumas composições obtidas de acordo com a invenção são formas de retardar o agente ativo composto.

[83] Em uma implementação preferida, o composto da invenção possui logP com valor superior a 1, mais preferivelmente superior a 2 e ainda mais preferível superior a 3.

[84] Além disso, a estabilidade dos agentes ativos pode ser aumentada pela complexação com os compostos cíclicos, de acordo com a invenção.

[85] Uma outra vantagem da presente invenção diz respeito à entrega invasiva, em particular à entrega por via subcutânea. O volume de uma composição farmacêutica ou de diagnóstico para a entrega por via subcutânea é intrinsecamente limitado. Se a formulação convencional não permite a obtenção de uma solução para injeção, em que o volume limitado para a injeção subcutânea compreende a dose necessária, o tratamento é pesado (intervalos curtos entre as administrações) ou impossível. Notando que o uso da invenção permite a preparação de composições com elevadas concentrações do agente ativo, estes problemas do estado da arte podem ser ultrapassados.

[86] Os compostos cíclicos, tais como poliésteres, poliortoésteres cíclicos, poliamidas cíclicas, depsipeptídeos cíclicos e poliéteres cíclicos têm a vantagem adicional de que a sua interação (formação de complexo) com o agente ativo é transitória. O termo "transitório", tal como utilizado neste documento refere-se à reversibilidade em condições fisiológicas. Após a passagem pela membrana celular, mucosa e/ou pele, ou os compostos cíclicos se separam do agente ativo, por exemplo, como uma consequência da presença de ligantes concorrentes, tais como íons amônio ou amidas primárias ou secundarias, ou eles são degradados.

[87] As condições fisiológicas, de acordo com a presente invenção, podem variar significativamente, por exemplo, quando se compara o interior de uma célula para o espaço extracelular. Condições intracelulares ideais incluem 14 mM Na+, 140 mM K+, 10-7 mM Ca2+, 20 mM Mg2+, 4 mM Cl-, 10 mM HCO3", 11 mM HPO42- e H2PO4-, 1 mM SO42-, 45 mM fosfocreatina, 14 mM carnosine, 8 mM aminoácidos, 9 mM de creatina, 1,5 mM de lactato, 5 mM ATP, 3,7 mM de hexose monofosfato, 4 mM de proteína e 4 mM de ureia. Condições intersticiais ideias incluem 140 mM Na+, 4 mM K+, 1,2 mM de Ca2+, 0,7 mM Mg2+, 108 mM Cl-, 28,3 mM HCO3-, 2 mM HPO42- e H2PO4-, 0.5 Mm SO42-, 2 mM de aminoácidos, 0,2 mM de creatina, 1,2 mM de lactato, 5,6 mM de glicose, 0,2 mM de proteína e 4 mM de ureia.

[88] Os termos "hidrofóbico" e "hidrofobicidade" são bem conhecidos na arte e designam uma baixa ou nenhuma miscibilidade com água e com o meio aquoso. Os termos "lipofílico" e "lipofilicidade" são utilizados com significados equivalentes neste documento. Um parâmetro comumente utilizado para quantificar a hidrofobicidade é o valor logP.

[89] O fluxo de massa de uma molécula na interface de dois solventes imiscíveis ou substancialmente imiscíveis é regido pela sua lipofilicidade. Quanto mais lipofílica é uma molécula, mais solúvel esta é na fase orgânica lipofílica. O coeficiente de partição de uma molécula que é observado entre água e n-octanol foi adotado como a medida padrão de lipofilicidade. O coeficiente de partição P de uma espécie A é definida como a razão P = [A]n-octanol / [A]de água. Uma figura comumente relatada é o valor IogP, que é o logaritmo do coeficiente de partição. No caso em que a molécula é ionizável, uma pluralidade de microespécies distintas (formas ionizadas e não ionizadas da molécula) irão estar, em princípio, presentes em ambas as fases. A quantidade descrevendo a lipofilicidade total de uma espécie ionizável e o coeficiente de distribuição D, definido como a razão D = [soma das concentrações de todas as microespécies]n-Octanol / [soma das concentrações de todas as microespécies]água. Análogo ao logP, frequentemente o logaritmo do coeficiente de distribuição, logD, é relatado.

[90] Se o caráter lipofílico de um substituinte numa primeira molécula está a ser avaliado e/ou a ser determinado quantitativamente, pode-se acessar uma segunda molécula correspondente àquele substituinte, onde a segunda molécula referida é obtida, por exemplo, através da quebra da ligação conectando o referido substituinte para o restante da primeira molécula e conectando a(s) valência(s) livre(s) obtida(s) com hidrogênio(s).

[91] Alternativamente, a contribuição do substituinte ao logP de uma molécula pode ser determinada. A contribuição de um substituinte πx do substituinte X ao logP da molécula R-X é definido como πx = logPR-X - logPR-H, onde R-H é o composto não substituído principal. Valores de P e D maiores que um, bem como valores logP, logD e πx superiores a zero indicam caráter lipofílico/hidrofóbico, enquanto que valores de P e D menores que um, bem como valores logP, logD e πx menores do que zero e indicam caráter hidrofílico das respectivas moléculas ou substituintes.

[92] Os parâmetros descritos acima, que caracterizam a lipofilicidade do grupo lipofílico de acordo com a invenção, podem ser determinados por meios experimentais e/ou previstos pelos métodos computacionais conhecidos na arte (ver, por exemplo, Sangster, Octanol-water Partition Coefficients: Fundamentals and Physical Chemistry, John Wiley & Sons, Chichester. (1997)).

[93] Na prática, os valores logP, logD e πx irão variar para uma certa medida de acordo com as condições especificas em que são medidos.

[94] Foi demonstrado que, para que as drogas ou os agentes ativos tenham uma probabilidade razoável de absorção, seu valor logP não deve ser superior a 5. A densidade de probabilidade dos valores logP dos medicamentos no mercado (ver, por exemplo, http://www.organic-chemistry.org/prog/peo/cLogP.html) mostra um máximo do valor logP em torno de 3.

[95] Em uma implementação preferida dos usos e dos métodos (os métodos são descritos mais adiante), os referidos compostos tal como o referido poliéster cíclico, poliortoéster, poliamida, depsipeptideo, poliéster ou polioxima é biodegradável. Além disso, sendo ainda preferido o composto biocompatível. O termo "biodegradável" refere-se a substâncias que são degradáveis nos organismos vivos. O "biocompatível" designa substâncias que não dão origem a reações adversas do corpo humano ou animal, de preferência nem na sua forma intacta, nem quando degradadas (para mais detalhes sobre o termo "biocompatível", veja acima). Como discutido acima, vários poliésteres lineares, incluindo os poli(ácido lático), poli(ácido glicólico) e poli(ácido lático-co-glicólico) (PLGA) estabeleceram características biodegradáveis e biocompatíveis. É esperado que as suas formas correspondentes cíclicas exibam características biodegradáveis e biocompatíveis muito semelhantes. Biodegradabilidade pode ser expressa em termos quantitativos, por exemplo, em termos da meia-vida de um composto cíclico da invenção no plasma. Meios e métodos para a determinação da meia-vida no plasma são conhecidos na arte. Uma análise exemplar é fornecida no Exemplo 7 aqui anexado. Em uma incorporação preferida, a meia-vida de um composto cíclico da invenção no plasma é menor do que 4 horas, preferencialmente inferior a 3 horas, 2 horas, 1 hora, 30 min, 20 min, 10 min e 5 min. O termo "biodegradável" refere-se à degradação dos referidos compostos, em que se entende que a degradação consiste em ou inclui clivagem ou hidrólise de pelo menos um dos referidos grupos funcionais X, Y dos referidos compostos cíclicos.

[96] As estruturas do polietilenoglicol cíclico (éteres coroa) são conhecidos por ligarem-se a cátions. O composto mais utilizado, 18-coroa-6, mostra uma moderada ou baixa toxicidade (em camundongos o DL 50 relatado é 0,71 g/kg, ver Toxicology and Applied Pharmacology, 1978, 44, 263-268).

[97] O polietilenoglicol cíclico (PEG), com uma junção biodegradável permite a complexação de cátions, bem como dos grupos amina e guandinio primários e secundários. Espera-se que os polietilenoglicóis cíclicos com uma junção biodegradável apresentem toxicidade in vivo negligenciável ou inexistente, devido à degradação fisiológica em condições fisiológicas da forma cíclica linear isofórmica. Outros exemplos incluem os éteres oxo-coroa, que são conhecidos na literatura (Bull. Chem. Soc. Jpn., 1982, 55, 2181-2185) ou um açúcar baseado no PEG cíclico, onde o açúcar proporciona a unidade biodegradável (para um exemplo veja a Figura 2 aqui anexada). Outros exemplos de uma junção biodegradável incluem acetais de PEG com uma cetona ou um aldeído, como acetaldeído e formaldeído.

[98] Em uma implementação alternativa, o uso de poliacrilamidas e poliacrilatos, por exemplo, poli-N-Isopropilacrilamia e butilmetacrilatos, está prevista. Estes polímeros têm pouca ou nenhuma biodegradabilidade.

[99] A formação de complexos do composto referido com os referidos grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou grupos guanidinio protonados pode ser seletiva. Esta seletividade pode ser avaliada pela pessoa qualificada, em uma forma muito clara. Para esta finalidade, ensaios aqui descritos e utilizados para determinar a capacidade de formar um complexo são realizados repetidamente (ou em paralelo), onde uma aplicação do teste é direcionada para determinar a formação de complexos com o referido composto com as referidos grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou grupo guanidio protonados e pelo menos uma futura execução do ensaio é direcionada para determinar a formação de complexos com o referido composto com espécies concorrentes. As espécies concorrentes incluem íons metálicos, tais como K+ e Na+ Seletividade significa que a maioria desses compostos forma um complexo com os referidos grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou grupos guanidio protonados ("complexo A", onde "complexo A" designa a quantidade ou concentração do complexo formado entre o referido composto cíclico por um lado e os referidos grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou os grupos guanidio protonados sobre o outro lado), enquanto o restante (ou uma fração do restante,) forma um complexo com uma ou mais espécies concorrentes ("complexo B ", onde "complexo B" designa a soma das quantidades ou concentrações de complexos com as espécies concorrentes). Em outras palavras, a relação complexo A/complexo B é superior a 1. Preferencialmente, a referida relação é de 1,2; 1, 5; 2; 3; 4; 5; 10; 100, 1.000 ou mais.

[100] Numa outra implementação preferida dos usos e métodos da invenção, um contra-íon é adicionado à composição. Contra-íons selecionados para agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente compreendendo um ou mais grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou um ou mais grupos dguanidio protonados, em especial para os peptídeos, polipeptídeos e proteínas, incluem trifluoracetato (TEA) e sais de ácidos alcanóico, de preferência de ácidos alcanóicos tendo entre 2 e 30, de preferência entre 2 e 20, ainda mais preferidos entre 2 e 10 átomos de carbono. Em outras incorporações preferidas esse contra-íon pode incluir um grupo aromático. Esses contra-íons podem ser utilizados para substituir outros íons formando um sal com o referido grupo amino primário e/ou secundário protonado e/ou o grupo guanidio protonado. Os sais de ácidos alcanóicos são mais lipofílicos do que os contra-íons que geralmente ocorrem, como o fosfato. TFA ainda exibe um valor menor de pKa, sendo a consequência uma forte ligação salínea entre o grupo amino primário ou secundário protonado ou o grupo de guanidio protonado de um lado e a TFA do outro lado. Aril carboxilatos são outros exemplos de contra-íons adequados. Outra classe preferida dos contra-íons, em especial para peptídeos, polipeptídeos e as proteínas são os ácidos aril ou alquilsulfônicos. Ácidos alqulsulfônicos preferíveis têm uma cadeia com entre 2 e 30, preferencialmente entre 8 e 10 átomos de carbono. Ácidos arilsulfônicos com um ou mais substituintes alquila no anel aromático, cada substituinte alquila preferencialmente tendo entre 2 e 30, preferencialmente entre 8 e 10 átomos de carbono, são outros exemplos de estruturas adequadas de contra-íons. Outra classe de contra-íons preferidos, em especial para os peptídeos, polipeptídeos e proteínas, são os fosfolipídeos com pelo menos um próton ácido no fosfato, tais como um fosfatídico glicerol ou açúcar fosfatidil com um próton ácido, ou um ácido fosfatídico com dois prótons ácidos. Os ácidos alcanóicos compreendidos no referido fosfolipídeo ou as moléculas fosfatidil, respectivamente, de preferência tem entre 4 e 30 cada uma, com mais preferência entre as 6 e 20, ainda mais preferidas entre 8 e 18 átomos de carbono. Os fosfolípidos compreendendo dois ácidos alcanóicos podem tanto ser simétricos quanto assimétricos. Neste último caso, uma molécula de fosfolipídeo compreende dois diferentes ácidos graxos. Em outra incorporação preferida, os fosfolipídeos são de origem natural, como por exemplo fosfatidilinositol,

[101] Por outro lado, Contra-íons preferidos para polímeros ácidos (por exemplo, heparina) ou outros agentes ácidos farmaceuticamente ou diagnosticamente ativos são fosfolipídeos que carregam uma carga positiva. De preferência que tenham um grupo amino primário livre como, mas não limitado a fosfatidil serina e fosfatidil etanolamina.

[102] Uma maior lipofilicidade do contra-íon aumenta a estabilidade do complexo formado entre um composto cíclico, tal como um poliéster, poliortoéster, poliamida ou depsipeptideo, e o referido grupo amino primário e/ou secundário protonados e/ou grupo guanidio protonado.

[103] Numa outra implementação preferida dos usos e métodos da invenção, o anel composto nos referidos compostos consiste entre 9 e 90 átomos, onde o referido anel compreende todas as ocorrências de Xe Y. Quando utilizado para designar uma característica dos compostos da invenção como um todo, o termo "anel" refere-se a um anel que inclui todos os grupos funcionais X e Y, em contraponto ao ciclo, que pode estar presente dentro de um ou mais dos monômeros. Quando o número de átomos no referido anel é determinado, quaisquer substituintes ou átomos exocíclicos são ignorados. Por exemplo, tanto o poli(ácido glicólico) cíclico quanto o poli(ácido lático) cíclico compreendem um anel da seguinte estrutura; (-O-C-C(=O) -)n; sendo n um número inteiro, o átomo central C sendo opcionalmente substituído, e o oxigênio do grupo da carbonila não fazendo parte do anel como definido acima. Ficando com estes exemplos, um anel de 9 membros de alfa-hidroxiácido especifica um poliéster cíclico trimérico, e um anel de 48 membros especifica um poliéster cíclico 16-mérico.

[104] Preferencialmente, o anel compreendido no referido poliéster potiortoéster, poliamida ou depsipeptideo, consiste em 18 a 48 átomos, preferencialmente de 18 a 36 e ainda mais preferido de 18 a 24 átomos.

[105] Além disso, é preferível que os monômeros do referido poliéster cíclico ou poliortoéster ou os monômeros de hidroxiácido, se presentes, do referido composto cíclico pertencentes a mais de um de (i) a (vii) incluam ou sejam exclusivamente alfa-hidroxiácidos.

[106] Analogamente, é preferível que os monômeros da referida poliamida cíclica ou os monômeros aminoácidos, se presentes, do referido composto cíclico pertencente a mais de um de (i) a (vii) inclumm ou sejam exclusivamente alfa-aminoácidos.

[107] Preferencialmente, o referido composto pertencente a mais de um de (i) a (vii) é um depsipeptídeo e os alfa-hidroxiácidos e alfa-aminoácidos alternam no referido depsipeptídeo.

[108] Os alfa-hidroxiácidos preferidos são o ácido glicólico e o ácido lático.

[109] O alfa-aminoácido preferido é a glicina.

[110] A poliamida cíclica preferida é a esaglicina.

[111] Numa outra implementação preferida dos usos e métodos da invenção, um ou mais dos referidos alfa-hidroxiácidos é o ácido glicólico e/ou um ou mais dos referidos alfa-aminoácidos é a glicina, o átomo de carbono alfa de um ou mais dos referido ácidos glicólicos e/ou glicinas sendo substituído com um grupo de alquila linear ou ramificado com 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos de carbono ou com um grupo arila substituído ou insubstituído. Substituintes aquila adequados incluem metil, etil, n-propil, i-propil, n-butil, i-butil, t-butil, n-pentil, 1 -pentil, 2-metil-butil, n-hexil, i-hexil, 2-metil-pentil, 3-metil-pentil e 2-etil-butil. Numa outra incorporação preferida, a referido grupo alquila linear ou ramificado pode conter um grupo terminal hidroxila. Este grupo hidroxila (que é um segundo grupo hidroxila no caso de um alfa-hidroxiácido) permite ainda derivatização, por exemplo, por esterificação com ácido alcanóico ou similares. Um grupo arila preferido é o fenil. O mesmo se aplica, mutates mutandis, aos alfa-aminoxiácidos. Um alfa-aminoxiácido preferido é o aminóxiglicina, que opcionalmente pode ser substituído, tal como descrito acima.

[112] Preferencialmente, monômeros com um grupo alquílico com N átomos de carbono ou um grupo arila e monômeros com um grupo alquílico com N + K átomos de carbono alternam-se no referido composto, onde N é selecionado entre 0 e 1 e K selecionado a partir de 1,2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10. O termo "alternam" implica um mesmo número de monômeros. Compostos selecionados, tais como os poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas ou depsipeptídeos são 4-mero, 6-mero, 8-mero, 10-mero, 12-mero, 14-mero e 16-mero.

[113] Preferencialmente, o referido poliéster cíclico ou poliortoéster é um éster ou ortoéster cíclico poliláctico, poliglicólico ou poli(lactico, glicolico).

[114] De preferência, os monômeros de ácido lático e os monômeros de ácido glicólico alternam no referido poliéster cíclico ou poliortoéster cíclico.

[115] Em uma implementação preferida dos usos e métodos da invenção, o referido poliéster cíclico ou poliortoéster é nonactina (ver Figura 2) ou um tetra-, penta-, hexa-, hepta-, octa-, nona- ou decamero cíclico de ácido lático, de ácido glicólico, ou de ácido lático e glicólico. No que diz respeito ao tetra-, hexa-e octamero de ácido lático e glicólico, é preferível que os monômeros de ácido lático e os monômeros de ácido glicólico alternem. O termo "alternem", como utilizado neste documento refere-se a sequências de monômeros x, y, tais como xyxyxy. No entanto, também outras sequências, como xxyyxxyy ou sequências irregulares estão previstas.

[116] Um outro poliéster cíclico ou poliortoéster cíclico preferido é um tetra-, hexa-, octa- ou decamero cíclcio de um alfa-hidroxiácido quiral, tal como ácido lático, onde a forma -R e a forma S dos monômeros alternam. Como afirmado anteriormente, os poliortoésteres cíclicos são tautômeros de valência de poliésteres cíclicos.

[117] Sequência de alternância das formas R e S de outros ácidos quirais estão também previstas. Exemplos incluem ácido mandélico, bem como aminoácidos quirais ocorrendo naturalmente, onde a ocorrência natural da forma L seria alternada com a forma D.

[118] Em uma incorporação preferida dos usos e métodos da invenção, o referido agente ativo é um (a) peptídeo, polipeptídeo, proteína ou anticorpo; (b) um sal compreendendo uma amina primária ou secundária, ou (c) um sal compreendendo um composto compreendendo um grupo guanidio. Os termos "peptídeo", "polipeptídeo" e "proteína" incluem compostos que incluem um ou mais aminoácidos ocorrendo não naturalmente, tais como a beta-alanina, ácido alfa-amino butirico, ácido gama-amino butirico, ácido alfa-amino isobutírico, norvalina, norleucina, epsilon-lisina, ornitina, homoserina e hidroxiprolina. Além disso, grupos reativos incluindo grupos terminais N- e C- podem ser bloqueados por grupos de proteção. Também ainda derivações de peptídeos, polipeptídeos e proteínas conhecidas na arte, incluindo modificações pós-translacionais naturalmente , são deliberadamente incluídas.

[119] Exemplos de agentes ativos farmaceuticamente que são sais compreendendo uma amina primária ou secundária são ibuprofeno lisinato, ou seja, o sal lisina do ibuprofeno e penicilina procaína. Em caso de ibuprofeno lisinato, ibuprofeno é o componente do sal referido proporcionando um carboxilato e lisina é o componente fornecendo um grupo de amino primário. De igual forma, em caso da penicilina procaina, a penicilina é o componente do referido sal proporcionando um carboxilato e a procaina é o componente fornecendo um grupo amino primário e secundário. Embora estes sejam apenas exemplos específicos, é previsto que qualquer droga que (i) compreende um grupo funcional de ácido carboxílico e (ii) e um sal com um composto compreendendo uma amina primária ou secundária ou um grupo de guanidio pode ser formulado como um complexo com um composto da invenção. Essas drogas incluem drogas antiinflamatórias completando estes dois requisitos, incluindo o ibuprofeno lisinato bem como antibióticos como penicilina procaina ou aminoglicosídeos. A figura 4 (B) ilustra este princípio.

[120] Preferencialmente, o referido agente ativo sendo um peptídeo, polipeptídeo ou proteína inclui um ou mais aminoácidos selecionados a partir de Lys, Arg, His e Trip. Lys e Arg são os preferidos.

[121] Em uma implementação preferida dos usos e métodos da invenção, o referido agente ativo sendo um peptídeo, polipeptídeo ou proteína compreende um ou mais aminoácidos selecionados a partir de Asp e Glu.

[122] Preferencialmente, a referida composição farmacêutica ou de diagnóstico é ácida. Esta incorporação é direcionada para agentes ativos que, em adição a grupos de amina primários e/ou secundários protonados e/ou grupo de guanidio protonados compreendem grupos que estão carregados negativamente a um pH neutro, tal como o de carboxilatos de Asp e Glu em peptídeos, polipeptídeos e proteínas. Nesse caso, o objetivo de formar um complexo com compostos da invenção, que está a aumentar a hidrofobicidade e a blindagem das cargas não poderá ser alcançado no que diz respeito aos referidos grupos que estão carregados negativamente a um pH neutro, tal como o carboxilato do Asp e Glu. Uma opção de eliminar as cargas para acidificar a composição para um pH onde uma fração significativa dos referidos grupos, que são carregados negativamente a um pH neutro, toma-se protonado e em consequência, descarregados.

[123] De preferência, a referida composição farmacêutica ou de diagnóstico tem um valor de pH entre 2 e 6. Ainda mais preferido, o valor de pH é entre cerca de 4 e 5.

[124] Alternativa à referida composição farmacêutica ou de diagnóstico sendo ácida ou em adição à esta, um ou mais dos resíduos de Asp ou Glu são esterificados com um amino álcool e/ou guanidio álcool, onde o grupo de amino dos referidos amino álcool é um grupo amina primário ou secundário. Uma ilustração da esterificação de resíduos de Asp e/ou Glu é mostrada na Figura 3. Preferencialmente, a maioria (ou seja, mais de 50%), de preferência 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99% ou todos os referidos resíduos de Glu ou Asp são esterificados. A esterificação leva à formação de uma pro-droga. Uma pró-droga "é um composto que é geralmente não-biológico e/ou farmacologicamente ativo. No entanto, quando ativado, normalmente in vivo por uma clivagem enzimática ou hidrolítica para converter a pró-droga a um composto biologicamente e/ou farmacologicamente ativo, a administração da pró-droga terá o efeito médico pretendido. Pró-drogas são tipicamente formadas por modificação química, tais como as acima descritas pela esterificação de compostos ativos biologicamente e/ou farmacologicamente. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de pró-drogas derivadas adequadas são descritas, por exemplo, em Design of Prodrugs, ed. H. BUNDGAARD, Elsevier, 1985.

[125] Preferencialmente, o referido amino álcool é um ômega-amino-alquil-ol.

[126] Preferencialmente, referido amino álcool é 4-amino-1-butanol ou 6-amino-1-hexanol. A forma esterificada do Asp e/ou Glu é aqui referida como "pseudo-lisina", visto que uma estrutura é gerada a qual é semelhante a Lys, em que uma cadeia linear alquila está ligado através de um dos seus terminais ao carboxilato (através de uma ligação de éster), onde a cadeia de alquila transporta um grupo de amino primário no outro terminal. Em alternativa ou em complemento, ômega-guanidio-álcoois podem ser utilizados, gerando, assim, as "pseudo argininas".

[127] Em uma implementação preferida, (i) um excesso do referido composto é utilizado, e/ou (ii) um segundo composto de acordo com a invenção é utilizado, em que o referido segundo composto de preferência forma um complexo com um cátion, o referido cátion sendo um contra-íon do carboxilato do referido Asp e/ou Glu. O termo "cátion" inclui cátions inorgânicos. Os cátions inorgânicos incluem íons metálicos, como Na+. Alternativa ou complemento para as opções de acidificar a composição, esterificando o referido Asp e/ou Glu, esta incorporação proporciona duas outras opções. Qualquer uma dessas quatro opções pode ser utilizada isoladamente ou em combinação.

[128] O termo "excesso" refere-se à quantidade do referido composto o qual ultrapassa uma quantidade equimolar do referido grupo de amino primário e/ou secundário e/ou grupos de guanidio para serem complexados. Esses excedentes podem ser utilizados para garantir a complexação de uma fração substancial ou a totalidade do referido grupo de amino primário e/ou secundário e/ou grupos de guanidio para serem complexados. Embora montantes equimolares possam ser suficientes para este fim, é preferível utilizar um excesso, tal como na ordem de três a dez vezes ou de preferência de três a cinco.

[129] Qualquer montante em excesso que não esteja envolvido em complexos com grupos de amino primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidio estarão disponíveis para a complexação de cátions os quais servem como contra-íons da carga negativa de carboxilatos presentes nos referidos resíduos de Asp e/ou Glu. Para também garantir a complexação desses contra-íons (além de complexação de uma fração substancial ou a totalidade dos referidos grupos de amino primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidio), um montante preferível de compostos cíclicos, como o poliéster cíclico, poliortoéster, poliamida, depsipeptideo, poliéster e/ou polioxima é um excedente superior de cinco a sete vezes ao montante dos carboxilatos. Como consequência, é preferível a utilização de uma quantidade dos referidos compostos que é uma soma de três a cinco vezes em excesso ao montante dos grupos de amino primários e/ou secundário e/ou grupos de guanidio e de cinco a sete vezes em excesso ao montante dos carboxilatos. Tal complexação de cátions por compostos cíclicos da invenção designados para complexar grupos de amino primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidio funcionará melhor quanto menos específica for a complexação do referido grupo de amino primário e/ou secundário e/ou grupos de guanidio. No caso dos compostos cíclicos da invenção serem utilizados, os quais complexam os referidos grupos de amino primário e/ou secundário e/ou grupos de guanidio com um elevado grau de especificidade, é preferível usar um segundo composto da invenção, como um poliéster cíclico, poliortoéster, poliamida e/ou depsipeptideo, onde o referido segundo composto cíclico preferencialmente forma um complexo com o referido cátion, este cátion sendo, por exemplo, um íon metálico. Nestes casos, os referidos compostos que complexam os referidos grupos de amino primários e/ou secundários e/ou grupos de guanidio são referidos como "primeiros" compostos. Numa outra implementação preferida, o primeiro composto cíclico e/ou o segundo composto cíclico são capazes de formar um complexo com um íon de amônio (NH4+).

[130] O termo "íon metálico", como utilizado neste documento, refere-se a qualquer íon metálico. De preferência, refere-se aos íons daqueles metais que estão presentes no corpo humano. Os metais específicos preferenciais incluem íons Na+, K+, Ca2+ e Mg2+. Preferencialmente, o referido agente ativo é uma pequena molécula orgânica.

[131] As composições da invenção podem incluir uma pequena molécula orgânica, como o único agente ativo. Em alternativa, podem incluir uma pluralidade de agentes ativos, em que os referidos agentes preferencialmente são selecionados a partir do grupo constituído de peptídeos, polipeptídeos, proteínas e pequenas moléculas orgânicas. Pequenas moléculas orgânicas de preferência têm um peso molecular de cerca de 500 Da ou menos. No entanto, também agentes ativos, que não necessariamente são peptídeos, polipeptídeos, proteínas, e com um peso molecular entre 500 e 5000 Da estão previstos.

[132] A presente revelação também prevê a utilização de um composto da fórmula (I):

[133] Em que A, B, independentemente em cada ocorrência é alcano-i, j-diila tendo k átomos de carbono, i e independentemente j sendo inferior ou igual a k e k sendo selecionado a partir de 1 a 10, onde o referido alcano-i, j-diila (i) pode compreender uma ou mais ligações duplas, (ii) é opcionalmente substituído, e/ou (iii) compreende um ciclo, onde o número total de ciclos sendo açúcares cíclicos no referido composto é selecionado de 0 a 4 e é menor que p(n+m); X,Y independentemente em cada ocorrência é um grupo funcional biocompatível compreendendo ao menos um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre; n, m independentemente uns dos outros são selecionados a partir de 0 a 20; p é selecionado a partir de 1 até 10; n + m é igual ou superior a 1, e p(n+m) é selecionado a partir de 3 a 30, onde o referido composto é capaz de formar um complexo com um íon metálico, para a fabricação de composições farmacêuticas ou de diagnóstico que incluam ainda o agente ativo farmaceuticamente ou por diagnóstico, o referido agente ativo formando um sal com o referido íon metálico, em que (a) entrega por transmembrana e/ou transmucosal; (b) a solubilidade em solventes não-aquosos e/ou (c) estabilidade do referido agente ativo sejam melhorados. Os agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente selecionados são peptídeos, polipeptídeos, proteínas, anticorpos e pequenas moléculas orgânicas. Os ensaios para a avaliação da capacidade para formar um complexo são conhecidos na arte e descritos acima. Estes ensaios são aplicados, mutatis mutandis, para a determinação de compostos cíclicos que são capazes de formar um complexo com um íon metálico. Agentes ativos formando um complexo com o referido metal incluem agentes ativos compreendendo uma carga negativa, tal como uma carga negativa de carboxilato. Um exemplo é ilustrado na Figura 4 (A).

[134] Entende-se que todas as implementações preferidas da principal incorporação, para estender a referida incorporação preferida, fornecem uma nova caracterização estrutural dos compostos da invenção, aplicáveis, mutatis mutandis, à utilização de acordo com a invenção divulgada logo acima.

[135] Além dos agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente, componentes de alimentos funcionais ou suplementos alimentares podem ser complexados com os acima mencionados poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas a depsipeptídeos do invento, desde que o componente de um alimento funcional ou o componente de um suplemento alimentar forme um sal com um ou mais íons metálicos. Tais constituintes (também referidos como agente ativo) podem tomar o lugar dos agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente nos usos e métodos da invenção.

[136] Assim, a presente revelação também se relaciona com a utilização de um composto cíclico da invenção, onde este referido composto cíclico é capaz de formar um complexo com um íon metálico para melhorar (a) a entrega transmembrana e/ou transmucosal; (b) a solubilidade em solventes não-aquosos e/ou (c) a estabilidade de um agente ativo, em que este referido agente ativo forma um sal com um ou mais íons metálicos. O termo agente ativo compreende agentes ativos farmaceuticamente ou drogas, agentes ativos diagnosticamente, bem como componentes de alimentos funcionais e componentes de suplementos alimentares.

[137] O termo "agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente", como utilizado neste documento também inclui polissacarídeos complexos, tais como a heparina. A heparina é um grupo heterogêneo de uma cadeia linear aniônica mucopolissacarídica, os chamados glicosaminoglicanos possuem propriedades anticoagulantes. Embora outros possam estar presentes, os principais açúcares ocorrendo na heparina são: (1) a-L-ácido idurônico 2-sulfato, (2) 2-deoxi-2-sulfamino-a-D-glicose-6-sulfato, (3) β-D-ácido glucurônico, (4) 2-acetamido-2-deoxi-a-D-glicose, e (5) α-L-ácido idurônico. Estes açúcares estão presentes em quantidades decrescentes, geralmente na ordem (2) > (1) > (4) > (3) > (5), e são unidas por ligações glicosídicas, formando polímeros de tamanhos variados. A heparina é fortemente ácida, devido ao seu teor de sulfato covalentemente ligados e grupos de ácido carboxílico. Em heparina de sódio, os prótons ácidos das unidades de sulfato são parcialmente substituídos por íons de sódio. Mostrado abaixo é um fragmento representativo da heparina de sódio:

[138] Heparina de sódio e a heparina de cálcio foram aprovadas como medicamentos. As utilizações da presente invenção são esperadas para permitir um aumento da absorção, distribuição e/ou estabilidade (meia vida) da heparina de sódio e heparina de cálcio. O mesmo se espera que seja aplicado a uma lisina sal de heparina.

[139] Preferencialmente, a referido composto e biodegradável.

[140] Preferencialmente, o referido composto é capaz de seletivamente formar um complexo com o referido íon metálico.

[141] Compostos preferidos capazes de formar um complexo com um íon metálico que são poliésteres são selecionados a partir da nonactina (ver Figura 2) e tetranactina. Compostos preferidos capazes de formar um complexo com um íon metálico que são depsipeptídeos são selecionados a partir da valinomicina e enniatina B.

[142] Preferencialmente, a referida composição farmacêutica ou de diagnóstico, deve ser transportada de uma forma não invasiva, como por via oral, bucal, sublingual, nasal, pulmonar, pela pele, transdérmicos, ocularmente e/ou retal. O termo "bucal" inclui composições que são absorvidas na boca. Como afirmado anteriormente, é uma das vantagens da presente invenção que os agentes ativos que até agora só podiam ser transportados em uma forma invasiva podem agora ser obtidos na sua forma complexada com poliésteres cíclicos, poliortoésteres, poliamidas ou depsipeptídeos da invenção e administrado em uma forma não-invasiva. Também preferida pelas razões expostas acima, é a administração subcutânea.

[143] A presente invenção também diz respeito a um método de preparação de uma composição farmacêutica ou de diagnóstico, com melhoria na entrega transmembrana e/ou transmucosal e/ou melhoraria na estabilidade, incluindo a etapa de (a) colocar em contato com um agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente compreendendo um ou mais elementos primários e/ou secundários dos grupos amino protonados e/ou grupos de guanidio protonados com um composto da invenção, em que o referido composto é capaz de formar um complexo com um grupo amino primário ou secundário protonados ou um grupo de guanido protonado, sendo a entrega por transmembrana capaz de atravessar as membranas celulares.

[144] Referido ato de colocar em contato deve ser efetuado em condições adequadas para a formação de um complexo entre um ou mais grupos amino primário e/ou secundário protonados e/ou grupos de guanidio protonados com o referido composto.

[145] Condições adequadas para a formação do complexo incluem uma solução dos referidos agentes ativos diagnosticamente ou farmaceuticamente e do referido composto em um solvente orgânico. Solventes orgânicos preferidos são polares e/ou solventes próticos, como metanol ou etanol. Alternativamente, também apolares e solventes apróticos, como diclorometano, podem ser utilizados. Em uma implementação preferida do método da invenção, o referido ato de colocar em contato ocorre em uma solução dos referidos agentes ativos diagnosticamente ou farmaceuticamente e dos compostos referidos em um solvente polar e/ou prótico. Numa outra implementação preferida, os referidos solventes polares e/ou prótico são posteriormente removidos, por exemplo, por evaporação. Em uma implementação ainda mais preferida, o complexo obtido a partir da evaporação é retomado em solventes apolares e apróticos. Estas duas fases de preparação de um complexo dissolvido em solventes apolares e apróticos podem produzir soluções do referido agente ativo de maior concentração, em comparação com o procedimento "direto" de combinação do agente ativo; poliéster cíclicos, poliortoéster, poliamida e/ou depsipeptídeo e solventes apolares e apróticos.

[146] A incorporação preferida de utilizações da invenção transfere, mutatis mutandis, as incorporações preferidas dos métodos da invenção.

[147] De preferência, um excesso do referido composto é utilizado.

[148] Numa outra implementação preferida do método da invenção, o referido agente ativo é um peptídeo, polipeptídeo ou proteína compreendendo um ou mais aminoácidos selecionados a partir de Asp e Glu e o método inclui nova(s) etapa(s) de (b) acidificação da referida composição farmacêutica ou de diagnóstico; (c) esterificação de um ou mais dos resíduos de Asp ou Glu com um amino álcool, onde o grupo amino dos referidos amino álcoois é um grupo amino primário e/ou (d) colocando em contato com os referidos agentes ativos farmaceuticamente ou diagnosticamente um ou mais compostos da invenção, em que o referido composto(s) de preferência forma um complexo com um íon metálico, o referido o íon metálico sendo um contra-íon do carboxilato do referido Asp e/ou Glu.

[149] A presente revelação também diz respeito a um método de preparação de uma composição farmacêutica ou de diagnóstico, com melhoria na entrega transmembrana e/ou transmucosal e/ou melhoraria na estabilidade, incluindo a etapa de colocar em contato com um agente ativo farmaceuticamente ou diagnosticamente, em que o referido agente ativo é um sal com um íon metálico, com um composto da invenção, em que a referido composto da invenção é capaz de formar um complexo com o referido íon metálico.

[150] De preferência, um solvente não aquoso é adicionado à referida composição farmacêutica ou de diagnóstico.

[151] Além disso, a presente revelação fornece os compostos adequados para o exercício dos usos e métodos reivindicados.

[152] Assim, a presente revelação fornece um composto selecionado a partir de (a) um poliéster ou poliortoéster cíclico tetramérico, hexamérico ou octamérico, onde os monômeros de ácido glicólico substituídos na posição alfa com um grupo de alquila linear ou ramificado com N átomos de carbono e monômeros de ácido glicólico substituídos alternam na posição alfa com um grupo de alquila linear ou ramificado com N+K átomos de carbono, onde N é selecionado entre 0 e 1 e k é selecionado a partir de 1, 2, 3, 4 ou 5, (b) um hexamero, heptamero ou octamero cíclico do ácido glicólico, ou do ácido Iático e glicólico; (c) um heptamero cíclico do ácido Iático; e (d) um dipsipeptídeo cíclico tetramérico, hexamérico octamérico, onde os alfa-hidroxiácidos têm entre 2 e 10, preferencialmente entre 2 e 6, ainda mais preferencialmente entre 2 e 4 átomos de carbono, e a glicina alterna no referido depsipeptideo.

[153] Preferencialmente, o monômero com um grupo alquílico com N átomos de carbono é o ácido glicólico e o monômero com um grupo alquílico com N+K átomos de carbono é o ácido lático.

[154] Preferencialmente, o alfa-hidroxiácido é um ácido glicólico ou lático.

[155] A presente revelação também proporciona uma composição farmacêutica ou de diagnóstico que inclui um ou mais compostos de acordo com a invenção.

[156] As figuras mostram:

[157] Figura 1: Esquema ilustrando entrega transmucosal de um (poli)peptídeo complexado com um hexamero de poli(ácido lático).

[158] Figura 2: Exemplos de poliésteres e poliamidas da invenção.

[159] Figura 3: Desenho esquemático da esterificação de carboxilatos do Asp e Glu em peptídeos.

[160] Figura 4: complexação de pequenas moléculas com um poliéster cíclico. (A) Sal de potássio de uma pequena molécula, onde o íon potássio forma um complexo com um poliéster cíclico. (B) Sal de lisina de uma pequena molécula, onde o grupo amino primário protonado de lisina forma um complexo com um poliéster cíclico.

[161] Figura 5: painel esquerdo: M8 dissolvido em água e acetonitrila (Padrão). O HPLC mostra dois picos devidos à oxidação da metionina original. Painel direito: M8 complexado com esaglicina cíclica: (A) Solução de metanol após a remoção do material centrifugado (sólido); (B) material após a centrifugação re-dissolvido em água e acetonitrila. Em ambos os experimentos A e B, um volume igual de solução foi injetado.

[162] Figura 6: HPLC traços da quimiocina RANTES complexada com Nonactina.

[163] Figura 7: entrega de insulina através de células Caco-2. Traços em HPLC de insulina nas câmaras de recepção. A câmara de recepção coleta a solução que vem através das células Caco-2.

[164] Figura 8: Teste de Estabilidade dos éteres oxo-coroas no plasma.

[165] Figura 9: Medida dos níveis de glucose sanquíneos mediante entrega de insulina sublingual em camundongos. PI ITT = efeitos de Insulina padrão obtidos por injeção. SubL1 ITT: administração da Dose 1 por via sublingual. SubL2 ITT: Administração da Dose 2 por via sublingual.

[166] Figura 10: Entrega de lnsulina em Lipossomos através de células Caco-2.

[167] Os seguintes exemplos ilustram a invenção, mas não devem ser entendidos como sendo limitantes.

Exemplo 1 Preparação e utilização de polímero esaglicina cíclica

[168] O polímero Esaglicina cíclica foi preparado de acordo com Cardona et al. Joumal of Peptide Research, 2003, 61, 152-157.

[169] Após a purificação por cromatografia de fase reversa, a esaglicina cíclica foi utilizada para complexar e dissolver em solventes orgânicos tais como metanol um modelo quimiocina chamado M8 com a sequência da seguinte forma: MSPPLMQTTPCCFAYIARPLPRAHIKEYFYTSGKCSNPAWFVTRKNRQVCAN PEK KWVREYINSLEMS.

[170] A solução do complexo proteína-esaglicina em metanol foi centrifugada para determinar a quantidade de proteína não dissolvida no solvente orgânico. Após a centrifugação, a solução orgânica foi transferida para um segundo frasco e o frasco original foi lavado com água/acetonitrila para re-dissolver as proteínas eventualmente precipitadas. Os cromatogramas de HPLC da Figura 5 mostram a) a solução de metanol após a complexação e centrifugação, e b) a solução água/acetonitrila utilizada para lavar o frasco da centrifugação.

Exemplo 2 Síntese e caracterização dos compostos cíclicos ésteres oxo-coroa-

[171] Este exemplo descreve a preparação de vários éteres oxo-coroa (Esquema 1).

[172] Síntese do AGE-01 é descrita em Matsushima et al. Bull. Chem. Soc. Jpn., 1982, 55, 2181-2185. No entanto, a síntese do AGE-02, bem como do AGE-04 nunca foram realizados antes. Síntese em analogia com a síntese de éteres oxo-coroa, tal como descrito em Meijer et al. Macromoléculas, 1997, 30, 8113-8128 foi considerada a abordagem mais promissora.

[173] Esquema 1: visão geral dos éteres oxo-coroa.

[174] A via de síntese conduzindo a AGE-01 encontra-se resumida no esquema 2; a abordagem difere completamente da rota descrita na literatura. De fato, as condições de pirólise necessárias para a etapa de ciclização não são aplicáveis para escalas industriais, portanto, uma abordagem alternativa teve de ser elaborada.

[175] A molécula-alvo AGE-01 é obtida em uma síntese de 5 etapas.

[176] Esquema 2: via de síntese para a AGE-01

[177] Conforme mostrado no esquema 2, a síntese começa com a monoproteção seletiva do penta etileno glicol. O penta etileno glicol 1 reagiu com o cloreto de tert-butila dipenilsil na presença de hidreto de sódio para gerar o derivado 2 monoprotegido, com 75% de rendimento após a purificação por cromatografia. Apenas uma pequena quantidade de diol diprotegido foi observada. Da etapa 2, o ácido alfa-bromofenilacético foi tratado com um grande excesso de NaH em THF, seguido pela adição por gotas da solução do diol 2 monoprotegido em DMF. Após etapas padronizadas de laboratório, o ácido carboxílico 3 foi isolado em alto rendimento (86%-rendimento quantitativo). O ácido 3 foi utilizado na etapa seguinte sem purificação suplementar. Síntese do éster 4 foi realizada a partir do ácido carboxílico 3 pela reação com a tricloroetanol, DCC e DMAP em THF seco. O tricloroetiléster 4 foi isolado como óleo incolor em moderado a bom rendimento (70%).

[178] Embora a desproteção do silil tenha sido realizada utilizando TBAF (5 eq.) em THF, uma grande quantidade de decomposição foi observada. A baixa estabilidade do tricloroetiléster 4 alterar demandou que fossem alteradas as condições iniciais. A fim de evitar a decomposição, a reação foi realizada em presença de um grande excesso (87 eq.) de ácido acético glacial. Neste caso, foi observada uma desproteção total pela reação overnight e 4 foi isolado após a purificação por cromatografia em sílica gel com 60% de rendimento. A utilização de uma quantidade reduzida de ácido acético (5 eq.) permitiu acelerar a reação e apenas alguns minutos foram necessários para a desproteção total.

[179] Tentativa de uma ciclização direta do tricloroetiléster 4 na presença de um grande excesso (10 eq.) de base, tal como K2CO3 em condições diluídas gerou o éter oxo-coroa AGE-01 em um rendimento moderado (64%).

[180] Durante a desproteção do grupo silil em 4 usando as condições TBAF/AcOH, traços deAGE-01 foram observados. Uma reação em um mesmo frasco (one pot) poderia ser prevista e, após a desproteção do agrupamento do silil, a reação foi diluída com THF e tratada overnight com K2CO3 (15 eq.). O produto AGE-01 foi isolado, com bom rendimento (74%) ao longo de duas etapas.

[181] 1H-NMR e MS estão em conformidade com a estrutura. Reações simples para descartar o ácido seco ao invés do éter oxo-coroa foram tentadas. Hidrólise do tricloroetiléster 5 sob condições redutoras utilizando pó de Zn em 90% AcOH/água, bem como sob condições básicas (LiOH/THF/MeOH), levaram ao correspondente ácido seco.

[182] A abertura do anel do oxo-coroa AGE-01 utilizando LiOH forneceu também o correspondente ácido seco.

[183] AGE-01: 1H-RMN (500 MHz, CDCI3): 3.62-3.78 (m, 20H); 4.04-4-10 (ddd, J = 2.6, 5.6, 9.1, 1H), 4.41-4.47 (ddd, J = 2.6, 7.2, 9.7, 1H), 7.31-7.40 (m, 3H), 7.46-7.52 (m, 2H); MS m/z calcd. para [M+H]+: 355, encontrou-se 355, 377 (+Na) e 393 (+K).

[184] O segundo éter oxo-coroa AGE-02 difere do AGE-01 pela posição do agrupamento fenila (Esquema 3).

[185] Esquema 3: caminho para a AGE-02

[186] Conforme mostrado no esquema 3, a síntese começa com a monoproteção seletiva do tetra etileno-glicol. O tetra etileno-glicol 6 reagiu com cloreto tert-butilo difenilsilil na presença de hidreto de sódio para gerar o produto derivado 7 monoprotegidoem rendimento moderado (63%), após a purificação por cromatografia. Neste caso, mais diol desprotegido foi observado do que para a proteção doglicol pentaetileno. Na etapa 2, o ácido alfa-bromofenilacetico foi tratado com um grande excesso de NaH em THF, seguido pela adição por gotas de uma solução do diol monoprotegido 7 em DMF. Após etapas padronizadas de laboratório, o ácido carboxílico 8 foi isolado em rendimento quantitativo. O ácido 8 foi utilizado no passo seguinte sem purificação suplementar.

[187] O agrupamento carbonila em 8 foi reduzido com o complexo BH3.THF em THF a 0°C, em seguida em temperatura ambiente, para gerar o álcool 9 em rendimento de baixo para alto. A purificação do álcool 9 por cromatografia em sílica gel gerou 9 apenas em baixo rendimento (31%). Assim, o álcool 9 não foi purificado por cromatografia em sílica gel e foi utilizado diretamente no próximo passo após etapas padronizadas de laboratório.

[188] A reação de acoplamento com tert-butilo bromoacetato e t-BuOK em t-BuOH gerou o correspondente éster 10 sem grandes problemas, com 50% de rendimento após a purificação em sílica gel. A desproteção do agrupamento do éster de tert-butila foi realizada primeiramente utilizando LiOH aquoso em THF/MeOH para gerar o ácido carboxílico 11 em rendimento quantitativo. O material bruto foi diretamente utilizado no passo seguinte sem purificação suplementar. Síntese do éster 12 foi realizada pela reação de 11 com tricloroetanol, DCC e DMAP em THF seco. O éster 12 foi isolado na forma de um óleo incolor em rendimento moderado (55%), após a purificação por cromatografia. A desproteção do silil foi realizada sem grandes problemas com 5 eq. de TBAF em THE e AcOH (5 eq.). Depois do da purificação, 13 foi isolado com 73% de rendimento. A tentativa de ciclização do tricloroetiléster 13 na presença de elevado excesso (10 eq.) de base, como K2CO3 em condições diluídas concederam o oco-coroa éter AGE-02 com 47% de rendimento, na forma de um óleo ligeiramente amarelo que se solidificou lentamente. Uma ciclização direta a partir de 12 com 15 eq. de K2CO3 após o tratamento com TBAF sem isolamento do intermediário resultou em um melhor rendimento da AGE-02 (89% para 2 etapas).

[189] AGE-02: MS m/z calcd. para [M+Hr]+ : 355, encontrou-se 355, 377 (+Na) e 393 (+K)

[190] A via de síntese levando a AGE-05 está resumida no esquema 4; a estratégia utilizada para o AGE-01 foi aplicada. Na verdade, a reação de acoplamento na etapa 2 é realizada utilizando o ácido 2-bromopropionico ao invés do ácido alfabromofenilacetico.

[191] A molécula-alvo AGE-04 é obtida em uma síntese de 5 etapas.

[192] Esquema 4: síntese da AGE-05

[193] Conforme mostrado no esquema 4 a síntese começa com a monoproteção seletiva do pentaetilenoglicol. No passo 2, o ácido 2-bromopropionico foi tratado com um elevado excesso de NaH em THF seguido pela adição por gotas de uma solução do diol monoprotegido 2 em DMF. Após etapas padronizadas de laboratório, o ácido carboxílico 3 foi isolado em alto rendimento (rendimento quantitativo). O ácido 3 foi utilizado na etapa seguinte sem purificação suplementar. A síntese do éster 4 foi realizada a partir do ácido carboxílico 3 pela reação com tricloroetanol, DCC e DMAP em THF seco. O tricloroetiléster 4 foi isolado na forma de um óleo incolor em rendimento moderado (56%).

[194] Embora a desproteção do silil realizada utilizando o TBAF (5 eq.) e o AcOH (5 eq.) em THF, o produto não foi isolado e o meio reacional foi diretamente tratado com um elevado excesso de K2CO3 após a diluição com THF. Sob estas condições, o oxo-coroa AGE-05 foi isolado em um rendimento moderado (52% para 2 etapas).

[195] AGE-05: 1H-RMN (500 MHz, CDCI3): 3.62-3.78 (m, 20H); 4.04-4-10 (ddd, J = 2.6, 5.6, 9.1, 1H), 4.41-4.47 (ddd, J = 2.6, 7.2, 9.7, 1H), 7.31-7.40 (m, 3H), 7.46-7.52 (m, 2H); MS m/z calcd. para [M+H]: 293, encontrou-se 293, 316 (+Na) e 331 (+K).

[196] Estratégia sintética para a preparação do último composto chave AGE-03 envolveu um processo de seis passos descrito no esquema 5.

[197] Esquema 5: síntese da AGE-03

[198] Na primeira etapa, o pentaetilenoglicol foi convertido para o seu derivativo monoprotegido 2. Posteriormente o acoplamento com t-butilobromoacetato levou ao composto 14 com 76% de rendimento. A saponificação deste éster t-butilo derivado, seguida do acoplamento do ácido 15 obtido com tricloroetanol, e remoção do grupo de proteção álcool forneceu o intermediário linear chave 16. Posteriormente, a desproteção do silil éter pelo tratamento com TBAF foi imediatamente seguida pela reação de ciclização em altas condições de diluição. De fato, o meio reacional da reação de desproteção foi diretamente diluído e K2CO3 foi adicionado. Finalmente, oxo-coroa AGE-03 foi obtido por esta sequência em um só frasco com rendimento de 61 % a partir de 16 após a purificação. Os dados RMN e MS foram de acordo com a estrutura alvo.
Exemplo 3
Síntese e caracterização de PLGA como poliésteres cíclicos

[199] Esquema 6: Visão geral dos poliésteres cíclicos

[200] A fim de criar e então otimizar a preparação dos oligoésteres cíclicos AGE-05 e AGE-06, foi decidido aplicar uma estratégia de solução-fase, levando em conta:

• - a estabilidade limitada dos blocos de construção derivados do ácido lático , bem como os intermediários obtidos e as ligações de éster formadas.
• - o risco de racemização se condições básicas viessem a ser utilizadas, possivelmente levando a misturas complexas de diasteroisômeros.
• - a compatibilidade dos grupos de proteção hidróxi e ácido dos blocos de construção.

[201] Por estas razões, o grupo THP foi escolhido para a proteção do hidróxi, em que o éster benzílico foi utilizado para uma função ácida (benzil lactato é comercialmente disponível). A estratégia de convergência sintética 3+3 é descrita no esquema 7. Os compostos cíclicos visados incluem em sua estrutura fenilactica (AGE-05) unidades de ácido lático, bem como um resíduo de Alanina (AGE-05 e AGE-06), estes compreendendo cinco ésteres e uma ligação de amida. Conforme mostrado no esquema 7, esta última foi formada na chave final do passo de macrolactamização.

[202] Esquema 7: síntese da AGE-04

[203] Esta via de síntese envolveu condições de acoplagem DIC/DMAP e remoção de grupos de proteção moderada(p-TsOH/MeOH para grupo THP e hidrogenação catalisada por Pd para o grupo benzil). Começando, respectivamente, pelos ácidos fenilláctico e lático protegidos por THP17 e 18, os trímeros 21 e 22 foram preparados por um processo de 4 passos: acoplamento com benzil lactato seguido por desproteção de THP em condições ácidas, gerando os compostos 19 e 20 que foram reagidos tanto com Boc-Ala-OH quanto com o ácido lático protegido com O-THP 18. Posteriormente, a desproteção dos grupos de proteção Boc ou benzil pelo tratamento com TFA ou hidrogenação na presença de Pd/C forneceu respectivamente o ácido 21 ou álcool 22. Acoplamento final levou a proteção total do hexâmetro 23, com 96% de rendimento. 23 linear foi obtido com 12% de rendimento global para os 11 passos. A desproteção do grupo Boc pelo tratamento com TFA (10% em diclorometano), seguido pela debenzilação final por hidrogenação gerou o aminoácido 24, que foi utilizado sem qualquer purificação para a reação de macrolactamização. Esta última foi realizada utilizando o reagente BOP-Cl em altas condições de diluição. O AGE-04 cíclico foi, então, obtido com 35% de rendimento global a partir dos precursores lineares totalmente protegidos (3 etapas).

[204] Utilizando a mesma via de síntese, o AGE-05 cíclico foi elaborado utilizando ácido lático e Boc-Ala-OH como blocos de construção (esquema 8), 17% de rendimento total das últimas três etapas.

[205] Esquema 8: síntese da AGE-06

Exemplo 4 Uso de Nonactina para complexar e dissolver, em meio orgânico, a proteína Rantes

[206] Duas amostras de 0.2mg de cada uma das proteínas dobradas Rantes foram tomadas. Uma amostra foi utilizada como padrão e dissolvida em um volume fixo (300 μl) de água/acetonitrila 50% v/v e 30 μl foram injetados no HPLC (Figura 6, HPLC seção A).

[207] A segunda amostra foi suspensa em uma mistura de DCM/MeOH 70% 30% V/V, (300 μl). A suspensão com partículas sólidas foi centrifugada e o sobrenadante injetado em HPLC (30 μl). O traço de HPLC não mostrou nenhum vestígio da presença da proteína no cromatograma (Figura 6, HPLC seção B).

[208] Então, 2.0 mg de Nonactina foram adicionados e a mistura foi misturada utilizando vortex. A suspensão se tornou uma solução límpida. Em seguida, a mistura foi centrifugada e 30 μl do sobrenadante foram injetados no HPLC. Desta vez, o traço de HPLC revelou a presença do peptídeo em proporção similar de acordo com a área do padrão, provando assim a dissolução da proteína na mistura orgânica (Figura 6, HPLC seção C). No HPLC da seção C a proteína tem um tempo de retenção diferente (eluição precoce), a partir do padrão na seção A. Este fenômeno pode ser explicado pela alta porcentagem de solventes orgânicos (como CH2Cl2 representado na figura), que transitou através da proteína complexa com nonactina causando uma eluição precoce.

Exemplo 5 Melhora da entrega de vasopressina e de glucagon

[209] Vasopressina (aminoácido peptídeo 9) e glucagon (aminoácido peptídeo29) são (os dois) moléculas bem conhecidas e estudadas com um baixo peso molecular. O principal interesse na exploração de Vasopressina e de glucagon é a pequena dimensão, tomando-os bons modelos.

[210] Sequência de Vasopressina
Cys Tyr Phe Gin Asn Cys Pro Arg Gly

[211] Sequência do glucagon:
NH2-HSQGTFTSDYAKYLDSRRAQDFVQWLMNT-COOH

[212] Os sublinhados são resíduos com aminas primárias adequadas para formar um complexo com um poliéster, de acordo com a invenção. Em negrito e itálico são os resíduos com uma função de carboxilato (ácido aspártico e o Ca termini). O μl da molécula é 6.75. Glucagon é uma boa molécula modelo, uma vez que podemos testar a molécula nativa (acima), bem como a forma do pró-fármaco para a entrega não-invasivo com a estratégia de complexação da invenção. De fato, por mutação (através da esterificação) das moléculas carboxílicas nativas (resíduos aspárticos, Ca) em pseudo-lisina (ver abaixo, obtendo assim uma forma pro-droga) o número de locais disponíveis para a complexação foram significativamente aumentados.
HSQGTFTS-psdK-YAKYL-psdKSRRAQ-psdKFVQWLMNT -COO-CH2-CO-Lys-NH2

[213] Assim, a combinação da estratégia de complexação com a estratégia do pró-fármaco éster gera uma molécula que apresenta 7 cadeias laterais disponíveis para a complexação. O complexo pró-droga peptídeo (com resíduos de Asp e Ca transformados em uma pseudo-lisina) com estrutura em coroa é muito mais solúvel no meio hidrofóbico da formulação. Assim, quanto maior a concentração da pró-droga peptídeo, bem como sua maior hidrofobicidade, levam à entrega superior em toda a membrana celular. Testes padrão para determinar a entrega em toda a membrana celular incluem um teste da monocamada de células Caco-2 (teste in vítro; ver J.E Lopez, e N.A. Peppas, (2004), J. Biomater. Sei. Polímero Edn., 15, 385-396; J.F. Liang, V.C. Yang, (2005) Biochemica/ and Biophysica/ Research Communication, 335, 734-738). Attemativamente ou além disso, o método colorimétrico de Z.Orynbayeva et al. (2005) (Angew. Chem. lnt. Ed., 44, 1092-1096) pode ser utilizado.

Exemplo 6 Testes de entrega de insulina em Caco-2 com complexos 18-coroa-6

[214] Neste exemplo, a melhoria da transferência de insulina para células Caco-2, feita pelo uso da coroa éter (CE) 18-coroa-6, é demonstrada.

[215] Na Figura 7, cromatogramas de HPLC das câmaras de recepção são mostrados. A câmara de recepção recolhe a solução que vem através de células Caco-2. A insulina deve passar pelas linhagens da célula Caco-2, sendo encontrada nas câmaras de recepção.

Protocolo de entrega de insulina para as células Caco-2

[216] Concentração de Insulina: 3mg em 125 μl de azeite de oliva/Peg, 92%/8%, v/v Veículo: azeite de oliva/Peg (esaetilenglicol)

[217] Agente da formulação: 18-coroa-6

[218] Controle positivo: lbuprofeno: 1mg em 125μl tampão fisiológico.

[219] Apôs agitação, 50 μΙ da mistura final são adicionados ao poço da célula Caco-2 em dobro.

Preparação ativa das amostras (Insulina com veículo & agente da formulação)

[220] 3 mg de insulina previamente dessalgada e 7.5 mg de 18-coroa-6 são misturados em 200 μΙ de MeOH. Após a evaporação do MeOH, 115 μΙ de azeite de oliva e 10 μΙ de Peg são adicionados. Agitação durante 2-3 minutos. Após a agitação, 50 μΙ da mistura final são adicionados ao poço da célula Caco-2 em dobro.

Controle (Insulina com agente de formulação em tampão fisiológico, sem veículo orgânico ou não aquoso presente)

[221] 7.5 mg de 18-coroa-6 são dissolvidos em 0.2 ml de metanol e posteriormente adicionado a 3 mg de insulina. Agitação da mistura durante 2-3 minutos. A solução deve estar límpida. Então o metanol é evaporado e 125 μΙ de tampão fisiológico são adicionados; 50 μΙ da solução acima são adicionados ao poço da célula Caco-2 em dobro.

[222] A insulina, na mesma concentração, em tampão fisiológico (sem agente da formulação e veículo orgânico) não atravessa as células CaCO-2.

[223] O quadro acima mostra parâmetros da Caco-2 quando tratada com diferentes misturas em presença de 18-coroa-6. TEER, que mede as junções de oclusão dascélulas Caco-2, prova as junções de oclusãos da Caco-2. As medições O.D., após o tratamento MTT, indicam a funcionalidade da célula.

Exemplo 7 Testes de estabilidade de éter oxo-coroa coroa no plasma humano

[224] O teste de estabilidade de cada éter oxo-coroa foi feito utilizando-se uma concentração de 400ng de oxo-coroa/ml de plasma. O plasma utilizado para o teste foi um pool de plasma. As amostras foram colocadas em 37°C em uma incubadora com agitação. Em seguida, de cada vez, 20 μΙ do plasma foram tratados com 80 μΙ de ACN centrifugado. Foram injetados 30 μΙ em HPLC para a análise.

[225] A figura 8 mostra a quantidade relativa (em %) do éter oxo-coroa em função do tempo.

[226] Esquema 9: Produtos da abertura de anel

Exemplo 8 Testes de entrega em camundongos pela administração sublingual

[227] Dose 1: 0.5 mg de insulina humana dessalgada com contra-íons TFA (corresponde a 0.4 mg de insulina padrão não-tratada) são misturados com 60 mg de 18-coroa-6. A estes sólidos, 250 μl de uma mistura são adicionados, esta mistura sendo composta de 200 μΙ da mistura 50%de propilenoglicole e 50% de glicerol, 200 mg de mono-decanoil-glicerol e 100 μΙ de Cremofor EL. O volume final é de cerca de 310 μl.

[228] Dose 2: 2.6 mg de insulina humana dessalgada com contra-íons TFA são misturados com 60 mg de 18-coroa-6. A estes sólidos, 250 μΙ de uma mistura são adicionados, a mistura sendo composta de 200 μΙ da mistura 50% de propilenoglicole e 50% de glicerol, 200 mg de mono-decanoil-glicerol e 100 μΙ de Cremofor EL. O volume final é de aproximadamente 310 μl.

[229] Os camundongos foram tratados com 6.5 μl das misturas 1 e 2, respectivamente. Na dose 1, cada rato foi tratado com aproximadamente 10 μg de insulina humana dessalgada com contra-íons TFA (corresponde a 8 μg de insulina padrão não-tratada). Na dose 2, cada rato foi tratado com aproximadamente 52 μg de insulina humana dessalgada com contra-íons TFA (corresponde a 41.6 μg de insulina padrão não-tratada). Os dados são mostrados na Figura 9.

[230] Resultados: entrega de insulina é medida pela diminuição da glicemia.

[231] O efeito da dose 1 está perto dos efeitos da injeção de ΙΡ. Uma vez que a dose 1 é cerca de 7 vezes a dose injetada como controle, concluiu-se que a entrega atual representa cerca de 10%. No caso da dose 2, a precipitação de insulina ocorreu, e as amostras tiveram de ser aquecidas para recuperar a solubilidade.

Exemplo 9: Entrega de insulina em lipossomas nas células Caco-2

[232] Os lipossomas foram adquiridos da Sigma-Aldrich (formação do pré- lipossoma 8; produto N°. L3531) e utilizado de acordo com o seguinte procedimento. Alternativamente, os mesmos ingredientes foram comprados por outros fornecedores (Avanti), e os lipossomas foram preparados de acordo com o procedimento indicado pela Sigma. A passagem da insulina foi determinada pela injeção em HPLC de amostras na câmara de recepção.

[233] Resultados: a incorporação da insulina humana (insulina-h) no lipossoma, de acordo com a preparação Sigma, não resultou em uma passagem mensurável da insulina pelas células Caco-2. A mesma quantidade de insulina foi complexada com 18-coroa-6 e solubilizada em solvente orgânico, como tert-butanol. A mistura orgânica contendo insulina foi misturada com a mistura de lipídios Sigma, em seguida, o solvente foi evaporado ou liofilizado. A adição de água gerou lipossomas que foram testados para a entrega em células Caco-2. A complexação com 18-coroa-6 mostrou um pico de insulina no HPLC da solução na câmara receptora. Os dados são mostrados na Figura 10.

Outras Referências

[234] Irie Uekama (1999), Advanced Drug De/ivery Reviews 36: 101-123.

[235] Ufson, S., Felder, CE. e Shanzer, A. (1983), J. Am. Chem. Soe., 105, 3866-3875. Lifson, S., Felder, CE. e Shanzer, A. (1984), J. Am. Chem. Soe., 23, 2577-2590.

[236] McGeary e Bruget (2000). Tetrahedron 56: 8703-8713. Challa et al. (2005). AAPS PharmSclTech 6: E329-E357.

Claims (10)

1. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO de fórmula (I)

   

   onde
   A, B independentemente em cada ocorrência é alcano-i, j-diila tendo átomos de carbono k, i e independentemente j sendo inferior ou equivalente a k e k sendo selecionado de 1 a 10, onde o referido alcano-i, j-diila

   • (i) pode incluir uma ou mais ligações duplas,
   • (ii) é opcionalmente substituído; e/ou
   • (iii) compreende um ciclo, onde o número total de ciclos sendo açúcares cíclicos nos compostos referidos é selecionado de 0 a 4 e está abaixo de p.(n+m);

   X,Y independentemente em cada ocorrência é um grupo biocompatível funcional compreendendo, pelo menos, um átomo de oxigênio ou dois átomos de enxofre;
   n, m independentemente uns dos outros são selecionados de 0 a 20;
   p é selecionado a partir de 1 a 10;
   n + m é igual ou maior que 1; e
   p.(n+m) é selecionado de 3 a 30,
   caracterizada pelo composto cíclico referido ser um polietileno glicol mono-oxo capaz de formar um complexo com um grupo amino primário protonado e/ou secundário protonado e/ou grupo guanidino protonado,
   compreendendo um agente farmaceuticamente ativo, o referido agente ativo compreendendo um ou mais grupos amino primários e/ou secundários protonados e/ou (um) grupos de guanidino protonado(s).
2. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelos monômeros do hidroxiácido, se presentes, do referido composto cíclico incluírem ou serem exclusivamente alfa-hidroácidos.
3. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo alfa-hidroxiácido ser um ácido glicólico ou ácido lático.
4. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 ou 3, caracterizada por um ou mais dos referidos alfa-hidroxiácidos ser ácido glicólico, o átomo de carbono alfa de um ou mais dos referidos ácidos glicólicos e/ou glicinas sendo substituído com um grupo de alquila linear ou ramificada com 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos de carbono ou com um grupo substituído ou não substituído de aril.
5. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada por monômeros com um grupo alquila com N átomos de carbono ou um grupo arila e monômeros com um grupo alquila com N + K átomos de carbono alternarem no referido composto, onde N é selecionado dentre 0 e 1 e K é selecionado dentre 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10.
6. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 5, caracterizada pelo referido agente ativo ser um:

   • (a) peptídeo, polipeptídio, proteína, anticorpo;
   • (b) um sal compreendendo uma amina primária ou secundária; ou
   • (c) um sal compreendendo um composto que compreende um grupo guanidino.
7. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo referido peptídeo, polipeptídeo ou proteína compreender um ou mais aminoácidos selecionados a partir de Lys, Arg, His e Trp.
8. FORMULAÇÃO COMPREENDENDO COMPOSTO CÍCLICO de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pela referida composição farmacêutica poder ser aplicada em uma forma não invasiva, como por via oral, bucal, sublingual, nasal, pulmonar, pela pele, transdérmica, ocular e/ou retal.
9. Método de preparação de uma composição farmacêutica com melhoria da entrega via e/ou da estabilidade, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de compreender a etapa de colocar em contato, via complexação e mediante uso de um veículo, um agente ativo farmaceuticamente compreendendo um ou mais grupos amino primários e/ou amino secundários protonados e/ou grupo(s) guanidina protonado(s) com um composto de fórmula (I)

   
10. Método de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por adicionalmente compreender a adição de um solvente não aquoso à referida composição farmacêutica.

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