BRPI0713598A2 - geração de plantas com resistência patogênica aperfeiçoada - Google Patents

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Abstract

GERAçãO DE PLANTAS COM RESISTêNCIA PATOGêNICA APERFEIçOADA. A presente revelação refere-se a plantas que exibem um fenótipo de resistência patogênica modificada (por exemplo, resistência de nematódeo aumentada) devido à expressão alterada de um ácido nucléico de RMN. A invenção é adicionalmente direcionada a métodos de geração de plantas com um fenótipo de resistência patogênica modificada.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "GERAÇÃO DE PLANTAS COM RESISTÊNCIA PATOGÊNICA APERFEIÇOADA".
REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADOS
Este pedido reivindica o benefício de Pedido Provisório dos Esta- dos Unidos N2 60/813.662, depositado em 13 de junho de 2006, cuja totalidade está incorporada neste relatório por referência. ANTECEDENTES
O controle de infecção por patógenos de plantas, os quais po- dem inibir produção de frutos, sementes, folhagens e flores e causa redu- ções na qualidade e quantidade das culturas colhidas, é de importância eco- nômica significativa. Patógenos causam anualmente bilhões de dólares em danos a culturas mundialmente (Baker et al. 1997, Science 276:726-733). Consequentemente, um aumento na quantidade de pesquisas tem sido de- dicado a desenvolver novos métodos de controle de doenças de plantas. Tais estudos têm centralizado na capacidade inata da planta resistir à inva- são patogênica em um esforço de reforçar as defesas próprias da planta pa- ra agir contra ataques patógenos (Staskawicz et al. 1995, Science 268:661-667; Baker etal. supra).
Embora a maioria das culturas seja tratada com agentes pestici- das agrícolas, tais como agentes antifúngicos e antibacterianos, dano de infecção patogênica ainda resulta em perdas de receitas para a indústria agrícola regularmente. Além disso, muitos dos agentes usados para contro- lar tal infecção ou infestação causam efeitos colaterais adversos à planta e/ou ao ambiente. Plantas com resistência intensificada à infecção por pató- genos diminuiriam ou eliminariam a necessidade de aplicação de agentes químicos pesticidas, antifúngicos e antibacterianos. Há interesse significativo em desenvolver plantas transgênicas que mostram aumento na resistência a uma ampla gama de patógenos (Atkinson et al., 2003, Annu. Rev. Phytopathol.41:615-639; Williamson e Gleason, 2003, Curr. Opin. Plant Biol., 6:327-333; Stuiver e Custers, 2001, Nature 411:865-8; Melchers e Stuiver, 2000, Curr. Opin. PIantBioI. 3:147-152; Rommens e Kishore, 2000, Curr. Opin. Biotechnol.11:120-125; Williamson, 1999, Curr. Opin. Plant Biol. 2:327-331; Mourgues etal. 1998, Trends Biotechnol. 16:203-210).
Nematódeos patogênicos de plantas são pequenos animais in- vertebrados que se alimentam nas raízes de culturas causando dano às plantas e reduzindo rendimento das culturas. Nematódeos da família Hete- roderidae causam a maior parte de dano econômico entre nematódeos pa- rasíticos de plantas (Williamson, 1999, Curr. Opin. Plant BioL 2:327-331). Essa família de nematódeos parasíticos pode ser dividida em dois grupos: os nematódeos de galhas (root-knot nematodes) (gênero Meloidogyne) e os nematódeos de cisto (gêneros Heterodera e Globodera). Infecção de plantas hospedeiras pelos nematódeos de galhas usualmente resulta na formação de galhas na raiz ou "nós na raiz", e causa perda severa na produção em muitas culturas. Por contraste, nematódeos de cisto freqüentemente apre- sentam faixas mais estreitas de hospedeiros. Arabidopsis thaliana, que é suscetível a experimentos genéticos moleculares, é um modelo importante para proporcionar entendimento em interações de nematódeos em plantas porque é um hospedeiro para diversas espécies de nematódeos de galhas e de cisto (Sijmons et al., 1991, PlantJ., 1:245-254).
Vários genes cuja expressão errônea associa-se à resistência alterada a nematódeos foram identificados em diversas espécies de culturas. Por exemplo, o gene Mi de tomates confere resistência contra diversas es- pécies de nematódeos de galhas (Williamson, 1998, Annu. fíev. Phytopathol. .36:277-293). Proteína de Mi contém domínios de NBS (sítio de ligação de nucleotídeo) e LRR (repetições ricas em leucina) (Kaloshian et ai, 1998, MoL Gen. Genet., 257:376-385; Milligan et ai., 1998, Plant Cell 10:1307- .1319). O gene Hslpro-1 de um parente selvagem de beterraba sacarina con- fere resistência à nematódeo de cisto Heterodera schachtii (Cai et ai., 1997, Science, 275:832-834). A proteína Hslpro-1 contém uma seqüência de sinal predita, uma região transmembrana predita e uma região rica em leucina. O gene Gpa2 de batata confere resistência contra alguns isolados do nemató- deo de cisto Globodera pallida (van der Voort et ai., 1999, MoL Plant-Microbe Int., 12:187-206; van der Vossen, 2000, PIantJ., 23:567-576). O gene Hero de tomates confere resistência a nematódeos de cisto de batata tais como Globodera rostochiensis e G. pallida (Ernst et ai, 2002, Plant J., 31:127-136). As proteínas Gpa2 e Hero, similares à proteína Mi, contêm os domí- nios NBS e LRR. Finalmente, o gene Cre 1 de trigo confere resistência à maioria dos nematódeos europeus e apenas ao patótipo australiano;
enquanto que o gene Cre3 de trigo confere resistência a nematódeos austra- lianos (de Majnik J et ai, 2003, Moi PIantMicrobe Interact. 16:1129-1134). Os genes Crel e Cre3 não foram clonados.
Devido à importância de resistência a patógenos em plantas, métodos para produzir plantas com aumento na resistência patogênica são desejáveis.
SUMÁRIO DA DESCRIÇÃO
A descrição proporciona uma planta transgênica que apresenta aumento na resistência a um patógeno, tal como um nematódeo, em relação a plantas de controle. A planta transgênica incorporou {por exemplo, incorpo- rada estavelmente) em seu genoma de um construto de DNA que compre- ende uma seqüência de nucleotídeos que codifica uma proteína que apre- senta atividade de resistência a patógenas. A seqüência de nucleotídeo po- de ser uma seqüência de nucleotídeo identificada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4, ou um complemento desta; uma seqüência de nucleotídeos que apre- senta pelo menos 90% de identidade de seqüência a uma seqüência de nu- cleotídeos identificada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4, ou um complemento desta; uma seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo que compreende uma seqüência de aminoácidos identificada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4; ou uma seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptí- deo que apresenta pelo menos 90% de identidade de seqüência a uma se- qüência de aminoácidos identificada na coluna 4 de Tabelas 3 e 4. A seqü- ência de nucleotídeos é operativamente ligada a um promotor que direciona a expressão de uma seqüência codificante em uma célula vegetal. Em al- gumas modalidades, a planta transgênica é selecionada do grupo que con- siste em semente de colza, soja, milho, girassol, algodão, cacau, açafroa, óleo de palma, coqueiro, linho, rícino e amendoim, tomate, cenoura, alface, feijão, aspargo, couve-flor, pimenta, raiz de beterraba, repolho, berinjela, endívia, alho-poró, pepino longo, melão, ervilha, rabanete, rizomas ("roots- tock'), pepino curto (Beit alfa), abóbora, melancia, cebola branca, chicória (witloof), cebola amarela, brócolis, couve-de-bruxelas, cebolinha, aipo, espé- cie de planta das valerianáceas ("mache'), pepino, funcho, cabaça ("gourd'), abóbora-moranga, milho doce, e abobrinha.
As plantas transgênicas poderão ser produzidas introduzir na planta ou célula desta, pelo menos um vetor de transformação de planta que compreende uma seqüência de nucleotídeos que codifica ou é complemen- tar a uma seqüência que codifica um polipeptídeo de RMN identificado na coluna 4 das Tabelas 3 e 4, ou uma variante do mesmo, e cultivar planta ou célula transformada para produzir uma planta transgênica, em que a dita planta transgênica exibe resistência aumentada a pelo menos um patógeno. Em uma modalidade, o polipeptídeo de RMN apresenta pelo menos aproxi- madamente 70% de identidade de seqüência a uma seqüência de aminoáci- dos referida na coluna 4 das Tabelas 3 e 4. Em outras modalidades, o poli- peptídeo RMN apresenta pelo menos aproximadamente 80% ou 90% de identidade de seqüência (ou mais) a, ou apresenta a seqüência de aminoá- cidos referida na coluna 4 das Tabelas 3 e 4.
Métodos são fornecidos para produzir uma planta com aumento na resistência patogênica, incluindo aumento na resistência a nematódeos, compreendendo identificar uma planta que apresenta um gene RMN altera- do, e gerar progênie da planta, em que a progênie apresenta aumento na resistência patogênica, e em que o gene de RMN é aquele que é identificado na coluna 4 das Tabelas 3 e 4. Métodos são também fornecidos para identi- ficar uma planta que apresenta aumento na resistência a patógenos, compreendendo analisar pelo menos um gene de RMN da planta, e identifi- car uma planta com um gene de RMN alterado, em que a planta apresenta aumento na resistência patogênica. A invenção fornece adicionalmente plantas e partes da planta obtidas pelos métodos descritos neste relatório. LISTAGEM DE SEQÜÊNCIAS
As seqüências de ácidos nucleicos e/ou aminoácidos listadas na listagem de seqüência em anexo são mostradas usando abreviações de Ie- tras padrões para bases de nucleotídeos, e código de três letras para ami- noácidos, conforme definido em 37 C.F.R. 1.822. Apenas uma fita de cada seqüência de ácido nucleico é mostrada, mas a fita complementar entende- se como incluída por qualquer referência à fita exibida. Na listagem de sequ- ência em anexo:
SEQ ID NOs: 1 e 2 são as seqüências de mRNA (Gl 18407880 |ref|NM_114362.11) e proteína (gi|15230551 |ref|NP_190079.1) de Arabidopsis thaliana ATCHX10; antiporter cátion monovalente:próton antitransportador (ATCHX10).
SEQ ID NOs: 3 e 4 são as seqüências de mRNA (Gl|22331603 |ref|NM_148843.11) e proteína (gi|22331604|ref|NP_680096.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT3G44935).
SEQ ID NOs: 5 e 6 são as seqüências de mRNA (Gl|30692415 |ref|NM_114363.2|) e proteína (gi|30692416|ref|NP_190080.2) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT3G44940).
SEQ ID NOs: 7 e 8 são as seqüências de mRNA (Gl| 18407884 |ref|NM_114364.11) e proteína (gi|15230556|ref|NP_190081.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT3G44950).
SEQ ID NOs: 9 e 10 são as seqüências de mRNA (Gl|30688921 |ref|NM_122240.2|) e proteína (gi|15237286|ref|NP_197725.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23340).
SEQ ID NOs: 11 e 12 são as seqüências de mRNA (Gl|22327006 |ref|NM_122241.2|) e proteína (gi|15237287|ref|NP_197726.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23350).
SEQ ID NOs: 13 e 14 são as seqüências de mRNA (Gl|42568032 |ref|NM_122242.3| e proteína (gi|15237288|ref|NP_197727.1) de proteína Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23360).
SEQ ID NOs: 15 e 16 são as seqüências de mRNA (Gl|22327007 |ref|NM_122243.2|) e proteína (gi| 15237301 |ref|NP_197728.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23370).
SEQ ID NOs: 17 e 18 são as seqüências de mRNA (Gl|30688942 |ref|NM_122244.2|) e proteína (gi|15237306|ref|NP_197729.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23380).
SEQ ID NOs: 19 e 20 são as seqüências de mRNA (Gl|30688951 |ref|NM_122245.3|) e proteína (gi|15237309|ref|NP_197730.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23390).
SEQ ID NOs: 21 e 22 são as seqüências de mRNA (Gl|42570036
|ref|NM_147906.3|) e proteína (gi|22327010|ref|NP_680211.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT5G23395).
SEQ ID NOs: 23 e 24 são as seqüências de mRNA (Gl| 18394598 |ref|NM_101693.11) e proteína (gi| 15221060|ref|NP_173271.1) de Arabidopsis thaliana ATMKK7; quinase (ATMKK7).
SEQ ID NOs: 25 e 26 são as seqüências de mRNA (Gl|30685820 |ref|NM_101694.3|) e proteína (gi|22329651 |ref|NP_173272.2) cataiítica/hidro- Iase (AT1G18360) de Arabidopsis thaliana.
SEQ ID NOs: 27 e 28 são as seqüências de mRNA (Gl|30685823 |ref|NM_101695.3|) e proteína (gi|22329653|ref|NP_173273.2) HIK (HINKEL) de Arabidopsis thaliana; ligação ATP/motor de microtúbulo (HIK).
SEQ ID NOs: 29 e 30 são as seqüências de mRNA (Gl| 18394601 |ref|NM_101696.11) e proteína (gi|15221762|ref|NP_173274.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT1G18380). SEQ ID NOs: 31 e 32 são as seqüências de mRNA (Gl| 18394602
|ref|NM_101697.11) e proteína (gi| 15221764|ref|NP_173275.1) de ligação de ATP quinase/proteína quinase/proteína serina/treonina quinase/proteína- tirosina quinase (AT1G18390) de Arabidopsis thaliana.
SEQ ID NOs: 33 e 34 são as seqüências de mRNA (Gl|30685839 |ref|NM_101698.2|) e proteína (gi|30685840|ref|NP_173276.2) do fator de transcrição de Arabidopsis thaliana (AT1G18400).
SEQ ID NOs: 35 e 36 são as seqüências de mRNA (Gl|18409867 |ref|NM_115219.11) e proteína (gi| 15231843|ref|NP_190927.1) de ligação ATP proteína quinase/proteína serina/treonina quinase/proteína-tirosina qui- nase de Arabidopsis thaliana (AT3G53590).
SEQ ID NOs: 37 e 38 são as seqüências de mRNA (Gl| 18409871 |ref|NM_115220.11) e proteína (gi|15231845|ref|NP_190928.1) de ligação com ácido nucleico fator de transcrição/ligação de íon zinco de Arabidopsis thaliana (AT3G53600).
SEQ ID NOs: 39 e 40 são as seqüências de mRNA (Gl|42570491 |ref|NM_180365.2|) e proteína (gi|30693873|ref|NP_850696.1) ATRAB8, li- gação a GTP de Arabidopsis thaliana (ATRAB8).
SEQ ID NOs: 41 e 42 são as seqüências de mRNA (Gl|30693869 |ref|NM_115221.2|) e proteína (gi| 15231847|ref|NP_190929.1) ATRAB8, li- gação a GTP de Arabidopsis thaliana (ATRAB8).
SEQ ID NOs: 43 e 44 são as seqüências de mRNA (Gl| 18409875 |ref|NM_115222.11) e proteína (gi|15231849|ref|NP_190930.1) difosfatase inorgânica/ligação de íon magnésio/pirofosfatase de Arabidopsis thaliana (AT3G53620).
SEQ ID NOs: 45 e 46 são as seqüências de mRNA (Gl|42565899 |ref|NM_115223.4|) e proteína (gi|22331772|ref|NP_190931.2) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT3G53630).
SEQ ID NOs: 47 e 48 são as seqüências de mRNA (Gl| 18409886 |ref|NM_115224.11) e proteína (gi|15231853|ref|NP_190932.1) de ligação a ATP quinase/proteína quinase/proteína serina/treonina quinase/proteína- tirosina quinase de Arabidopsis thaliana (AT3G53640).
SEQ ID NOs: 49 e 50 são as seqüências de mRNA (Gl|18409888 |ref|NM_115225.11) e proteína (gi|15231854|ref|NP_190933.1) de ligação de DNA de Arabidopsis thaliana (AT3G53650).
SEQ ID NOs: 51 e 52 são as seqüências de mRNA (Gl|18391089 |ref|NM_100867.11) e proteína (gi| 152183311ref|NP_172464.1) ATOPT2 de Arabidopsis thaliana-, transportador de oligopeptídeo (ATOPT2).
SEQ ID NOs: 53 e 54 são as seqüências de mRNA (Gl|30681449 |ref|NM_179297.11) e proteína (gi|30681450|ref|NP_849628.1) catalítica de Arabidopsis thaliana (AT1G09932).
SEQ ID NOs: 55 e 56 são as seqüências de mRNA (Gl|42570079 |ref|NM_148453.2|) e proteína (gi|42570080|ref|NP_683294.2) catalítica de Arabidopsis thaliana (AT1G09935).
SEQ ID NQs: 57 e 58 são as seqüências de mRNA (Gl|30681461 |ref|NM_100868.2|) e proteína (gi|15218333|ref|NP_172465.1) HEMA2 de Arabidopsis thaliana-, glutamil-tRNA redutase (HEMA2).
SEQ ID NOs: 59 e 60 são as seqüências de mRNA (Gl|30681468 |ref|NM_100869.2J) e proteína (gi| 15218335|ref|NP_172466.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT1G09950).
SEQ ID NOs: 61 e 62 são as seqüências de mRNA (Gl|30681472 |ref|NM_100870.2|) e proteína (gi| 15218362|ref|NP_172467.1) SUT4 (TRANS- PORTADOR DE SACAROSE 4) de Arabidopsis thaliana-, transportador de carboidrato/simportador de sacarose:hidrogênio/ transportador de açúcar (sugar ροήθή (SUT4).
SEQ ID NOs: 63 e 64 são as seqüências de mRNA (Gl|18410812 |ref|NM_106181.11) e proteína (gi| 15222161 |ref|NP_177661.1) do fator de transcrição de Arabidopsis thaliana (AT1G75250).
SEQ ID NOs: 65 e 66 são as seqüências de mRNA (Gl|30680419 |ref|NM_100667.2|) e proteína (gi|18390829|ref|NP_563800.1) de ligação de calmodulina fator de alongamento de tradução de Arabidopsis thaliana (AT1G07930).
SEQ ID NOs: 67 e 68 são as seqüências de mRNA (Gl|30685575 |ref|NM_101651.2|) e proteína (gi| 15220876|refjNP_173230.1) do fator de 20 transcrição de Arabidopsis thaliana (AT1G17880).
SEQ ID NOs: 69 e 70 são as seqüências de mRNA (Gl|30684274 |ref|NM_101396.2|) e proteína (gi|18394220|ref|NP_563969.1) de proteína de Arabidopsis thaliana desconhecida (AT1G15270).
SEQ ID NOs: 71 e 72 são as seqüências de mRNA (Gl|30687074 |ref|NM_129278.2|) e proteína (gi| 15228102|ref|NP_181259.1) de ligação de RNA ligação a ácido nucleico de Arabidopsis thaliana (AT2G37220).
SEQ ID NOs: 73 e 74 são as seqüências de mRNA (Gl|30683800 |ref|NM_128379.2|) e proteína (gi|18401659|ref|NP_565666.1) de CSD2 (COBRE/ZINCO Superóxido dismutase 2); cobre, zinco superóxio dismutase (CSD2).
SEQ ID NOs: 75 e 76 são as seqüências de mRNA (Gl|42573723 |ref|NM_203229.11) e proteína (gi|42573724|ref|NP_974958.1) malato desi- drogenase/oxidorredutase de Arabidopsis thaliana (AT5G58330).
SEQ ID NOs: 77 e 78 são as seqüências de mRNA (Gl|42568623 |ref|NM_125218.31) e proteína (gi|30697051|ref|NP_568875.2) malato desi- drogenase/oxidorredutase de Arabidopsis thaliana (AT5G58330).
SEQ ID NOs: 79 e 80 são as seqüências de mRNA (Gl|42570606 |ref|NM_180883.2|) e proteína (gi|30697049|ref|NP_851214.1) de malato desidrogenase/oxidorredutase de Arabidopsis thaliana (AT5G58330).
SEQ ID NOs: 81 e 82 são as seqüências de mRNA (Gl|42566395 |ref|NM_117102.3J) e proteína (gi|15235029|ref|NP_192772.1) LHCB5 de Arabidopsis thaliana (COMPLEXO COLETOR DE LUZ DO FOTOSSISTEMA Il 5) (LIGHT HARVESTING COMPLEX OF PHOTOSYSTEM 115)] ligação de clorofila (LHCB5).
SEQ ID NOs: 83 e 84 são as seqüências de mRNA (Gl|30682653 |ref|NM_117468.2|) e proteína (gi|15236376|ref|NP_193130.1) de HOG1 de Arabidopsis thaliana (SILENCIAMENTO GÊNICO DEPENDENTE DE HOMOLOGIA 1) adenosilhomocisteinase (HOG1).
SEQ ID NOs: 85 e 86 são as seqüências de mRNA (Gl|18410828 |ref|NM_115649.11) e proteína (gi| 15230881 |ref|NP_191346.1) de AHUS5 de Arabidopsis thaliana; enzima de conjugação de ubiquitina/enzima de ativa- ção semelhante a ubiquitina (AHUS5).
SEQ ID NOs: 87 e 88 são as seqüências de mRNA (Gl|30696503 |ref|NM_124849.2|) e proteína (gi|15239706|ref|NP_200279.1) de ligação de DNA fator de transcrição de Arabidopsis thaliana (AT5G54680). DESCRIÇÃO DETALHADA
Definições
A não ser que de outra maneira indicado, todos os termos técni- cos e científicos usados neste relatório apresentam o mesmo significado que teriam para aquele versado na técnica da presente invenção. Profissionais são particularmente instituídos por Sambrook et ai, 1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Segunda Edição), Cold Spring Harbor Press, Plainvi- ew, N.Y., e Ausubel FM et ai, 1993, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Nova Iorque, N.Y., para definições e termos do estado da técnica. Deve-se entender que esta invenção não se limita à metodologia particular, aos protocolos, e aos reagentes descritos, à medida que esses podem variar.
Conforme usado neste relatório, o termo "vetor" ou "vetor de transformação" refere-se a um construto de ácido nucleico projetado para transferência entre diferentes células hospedeiras. Um "vetor de expressão" refere-se a um vetor que apresenta a capacidade de incorporar e expressar fragmentos heterólogos de DNA em uma célula estranha. Muitos vetores procarióticos e eucarióticos, incluindo vetores de expresão de exemplo, são comercialmente disponíveis. Seleção de vetores apropriados está dentro do conhecimento daqueles versados na técnica.
Um construto ou seqüência de ácido nucleico "heterólogo" apre- senta pelo menos uma parte da seqüência que não é nativa à célula vegetal em que ela é expressa. Heterológo, com relação a uma seqüência de contro- le, refere-se a uma seqüência de controle (por exemplo, promotora ou inten- sificadora) que não funciona na natureza para regular o mesmo gene cuja expressão está atualmente regulando. Geralmente, seqüências heterológas de ácido nucleico não são endógenas à célula ou parte do genoma nativo em que estão presentes, e são adicionadas à célula por infecção, transfec- ção, microinjeção, eletroporação, ou similares. Um construto de ácido nucle- ico "heterológo" pode conter uma combinação de seqüência de contro- le/seqüência codificante de DNA que é a mesma é, ou diferente de uma combinação de seqüência de controle/seqüência codificante de DNA encon- trada na planta nativa.
Conforme usado neste relatório, o termo "gene" significa o seg- mento de DNA envolvido na produção de uma cadeia polipeptídica, a qual pode ou não incluir regiões precedentes e posteriores à região codificante, por exemplo, seqüências 5' não-traduzidas (5' UTR) ou "lidei" e seqüências 3' UTR ou "trailet", bem como seqüências intervenientes (íntrons) entre segmentos de codificantes individuais (éxons) e seqüências reguladoras não-transcritas.
Conforme usado neste relatório, o termo "molécula de ácido nu- cleico" é pretendida incluir moléculas de DNA (por exemplo, cDNA ou DNA genômico) e moléculas de RNA (por exemplo, mRNA) e análogos do DNA ou RNA gerados usando análogos de nucleotídeos. A molécula de ácido nu- cleico pode ser de fita única ou fita dupla, mas preferencialmente é DNA de fita dupla. Por "complemento" é tencionada uma seqüência de nucleotídeo que é suficientemente complementar a uma dada seqüência de nucleotídeos de tal modo que pode hibridizar-se à dada seqüência de nucleotídeo para formar desse modo um dúplex estável.
Conforme usado neste relatório, "recombinante" inclui referência com uma célula ou vetor que foi modificado pela introdução de uma seqüên- cia heterológa de ácido nucleico ou que a célula é derivada de uma célula assim modificada. Desse modo, por exemplo, células recombinantes expres- sam genes que não são encontrados em forma idêntica dentro da forma na- tiva (não-recombinante) da célula ou expressam genes nativos que são de outra maneira anormalmente expressos, subexpressos, ou não expressos de modo algum como um resultado de intervenção humana deliberada.
Conforme usado neste relatório, o termo "expressão gênica" re- fere-se ao processo por meio do qual um polipeptídeo é produzido com base na seqüência de ácido nucleico de um gene. O processo inclui tanto trans- crição quanto tradução; consequentemente, "expressão" poderá referir-se a uma seqüência de polinucleotídeo ou polipeptídeo, ou ambas. Algumas ve- zes, expressão de uma seqüência de polinucleotídeo não levará à tradução de proteínas. "Superexpressão" refere-se ao aumento na expressão de uma seqüência de polinucleotídeo e/ou polipeptídeo em relação a sua expressão em uma planta tipo selvagem (ou outra planta de referência [por exemplo, não-transgênica]) e pode referir-se a uma seqüência que ocorre naturalmen- te ou não ocorre naturalmente. "Expressão ectópica" refere-se à expressão em um momento, local, e/ou nível elevado que não ocorre naturalmente na planta não-alterada ou planta do tipo selvagem. "Subexpressão" refere-se à diminuição da expressão de uma seqüência de polinucleotídeo e/ou polipep- tídeo, geralmente de um gene endógeno, em relação a sua expressão em uma planta do tipo selvagem. Os termos "expressão errônea" e "expressão alterada" abrangem superexpressão, subexpressão, e expressão ectópica.
O termo "introduzido" no contexto de inserção de uma seqüên- cia de ácido nucleico em uma célula, inclui, por exemplo, "transfecção", ou "transformação" ou "transdução" e inclui referência à incorporação de uma seqüência de ácido nucleico em uma célula eucariótica ou procariótica em que a seqüência de ácido nucleico poderá ser incorporada no genoma da célula (por exemplo, cromossomo, plasmídeo, plastídeo, ou DNA mitocon- drial), convertido em um replicon autônomo, ou transitoriamente expresso (por exemplo, mRNA transfectado). Conforme usada neste relatório, uma "célula vegetal" refere-se a
qualquer célula derivada de uma planta, incluindo células de tecido indiferenciado (por exemplo, calo), bem como sementes de planta, pólen, propágulos, e embriões.
Conforme usados neste relatório, os termos "nativo" e "tipo sel- vagem" em relação a uma dada característica ou fenótipo da planta refere-se à forma em que o caractere ou fenótipo é encontrado na mesma variedade de planta na natureza.
Conforme usado neste relatório, o termo "modificado" com rela- ção a uma característica da planta, refere-se a uma alteração no fenótipo de uma planta transgênica em relação à planta não-transgênica similar. Um "fe- nótipo (característica) interessante" com referência a uma planta transgênica refere-se a um fenótipo observável ou mensurável demonstrado por uma planta de geração T1 e/ou subsequente, a qual não é exibida pela planta não-transgênica correspondente similar (por exemplo, uma planta genotipi- camente similar que foi cultivada ou testada sob condições similares). Um fenótipo interessante pode representar um aperfeiçoamento na planta ou pode fornecer um meio de produzir melhorias em outras plantas. Um "aper- feiçoamento" é uma característica que pode intensificar a utilidade de uma espécie ou variedade de planta proporcionando a planta com uma única e/ou nova qualidade.
Um "fenótipo de resistência patogênica alterada" ou "resistência patogênica alterada" refere-se a uma alteração detectável na resposta de uma planta geneticamente modificada à infecção patogênica, comparada com a planta similar, mas não-modificada. O fenótipo poderá ser visível na própria planta (por exemplo, em crescimento, viabilidade ou morfologia tecidual particular da planta) ou pode ser visível na capacidade do patógeno proliferar na planta e/ou infectar a planta. Conforme usada neste relatório, "resistência patogênica aperfeiçoada" refere-se ao aumento na resistência a uma patógeno. Métodos de medição de resistência patogênica são bem- conhecidos na técnica. Vide, por exemplo, Epple et al., Plant Cell, 1997, .9:509-520, Jach et al., PIantJ., 1995, 8:97-109, Lorito et al., Proc Natl Acad Sci USA, 1998, 95:7860-7865, McDoweII et al., Plant J., 2000, 22:523-529., McDoweII et al., Mol Plant Microbe Interaet., 2005, 18:1226-1234, Schweizer et al., Plant Physiol., 1993, 102:503-511, Simons et al., Plant Cell, 1998, .10:1055-1068, Stein et al., Plant Cell, 2006, 18:731-746, Epub 2006 Fev .2006, Thomma et al., CurrOpin Immunol., 2001, 13:63-68. Por "atividade de resistência patogênica" ou "resistência patogênica" é, portanto, tencionada a capacidade de crescer ou sobreviver durante uma infecção patogênica.
Um "fenótipo de resistência a nematódeos alterada" ou "resis- tência a nematódeos alterada" refere-se a uma alteração detectável na res- posta de uma planta geneticamente modificada à infecção por nematódeos, comparada com a planta similar, mas não-modificada. O fenótipo poderá ser visível na própria planta (por exemplo, no crescimento, viabilidade ou morfo- logia tecidual particular da planta) ou pode ser visível na capacidade do pa- tógeno proliferar e/ou infectar a planta, ou ambos. Conforme usado neste relatório, "resistência a nematódeo aperfeiçoada" refere-se ao aumento na resistência a um nematódeo. Métodos de medição de resistência a nemató- deo são bem-conhecidos na técnica. Vide, por exemplo, Cai et al., Science, .1997, 275:832-834, Kaloshian et al., Mol Gen Genet., 1998, 257:376-385, Milligan et ai, Plant Cell, 1998, 10:1307-1319. Por "atividade de resistência a nematódeos" ou "resistência a nematódeo" é, portanto, tencionada a capaci- dade de crescer ou sobreviver durante uma infecção por nematódeo.
Conforme usada neste relatório, uma seqüência de polinucleotí- deo ou gene "mutante" difere da seqüência de polinucleotídeo ou gene tipo selvagem correspondente em termos de seqüência ou de expressão, em que a diferença contribui para um fenótipo ou caracterísitica modificada da planta. Em relação a uma planta ou linhagem da planta, o termo "mutante" refere-se a uma planta ou linhagem da planta que apresenta um fenótipo ou caracterísitica modificada da planta, em que o fenótipo ou característica mo- dificada está associada à expressão modificada de uma seqüência de poli- nucleotídeo ou gene tipo selvagem.
Conforme usado neste relatório, o termo "T1" refere-se à gera- ção de plantas a partir da semente de plantas TO. A geração T1 é o primeiro conjunto de plantas transformadas que podem ser selecionadas por meio de aplicação de um agente de seleção, por exemplo, um antibiótico ou herbici- da, para o qual a planta transgênica contenha o gene de resistência corres- pondente. O termo "T2" refere-se à geração de plantas por autofertilização das flores de plantas T1, anteriormente selecionada como sendo transgêni- cas.
Conforme usado neste relatório, o termo "parte da planta" inclui qualquer órgão ou tecido da planta, incluindo, sem limitação, sementes, em- briões, regiões meristemáticas, tecido de calosidade, folhas, raízes, brotos, gametófitos, esporófitos, pólen, e micrósporos. Células de planta podem ser obtidas de qualquer órgão ou tecido da planta e culturas preparadas da mesma. A categoria de plantas que pode ser usada nos métodos da presen- te revelação é geralmente tão ampla quanto a categoria de plantas superiores suscetíveis a técnicas de transformação, incluindo tanto plantas monocotiledôneas e dicotiledôneas.
Conforme usada neste relatório, "planta transgênica" inclui refe- rência a uma planta que compreende em seu genoma um polinucleotídeo heterólogo. O polinucleotídeo heterólogo pode ser estavelmente integrado no genoma, ou pode ser extracromossômico. Preferencialmente, o polinu- cleotídeo da presente revelação é estavelmente integrado no genoma de tal modo que o polinucleotídeo seja transmitido para gerações sucessivas. Uma célula, tecido, órgão, ou planta, nos quais os polinucleotídeos heterólogos foram introduzidos é considerada "transformada," "transfectada," ou "trans- gênica". Progênies direta e indireta de plantas ou células da planta transfor- madas que também contêm o polinucleotídeo heterólogo são também consi- deradas transgênicas.
Uma molécula ou proteína de ácido nucleico "isolada" ou "purifi- cada", ou parte biologicamente ativa da mesma, é substancialmente livre de outro material celular, ou meio de cultura quando produzida por meio de téc- nicas recombinantes, ou substancialmente livre de precursores químicos ou outros produtos químicos quando quimicamente sintetizadas. Preferencial- mente, um ácido nucleico "isolado" é livre de seqüências (preferencialmente, seqüências codificantes de proteína) que flanqueam naturalmente o ácido nucleico (por exemplo, seqüências localizadas nas extremidades 5' e 3' do ácido nucleico) no DNA genômico do organismo a partir do qual o ácido nu- cleico é derivado. Para os propósitos da revelação, "isolada" quando usada para referir-se a moléculas de ácido nucleico exclui cromossomos isolados. Por exemplo, em várias modalidades, a molécula de ácido nucleico de NMR isolada pode conter menos do que aproximadamente 5 kb, 4 kb, 3 kb, 2 kb, 1 kb, 0,5 kb, ou 0,1 kb de seqüências de nucleotídeos que flanqueam natural- mente a molécula de ácido nucleico no DNA genômico da célula a partir da qual o ácido nucleico é derivado. Uma proteína RMN que é substancialmen- te livre de material celular inclui preparações de proteína que apresentam menos do que aproximadamente 30%, 20%, 10%, ou 5% (em peso seco) de proteína não-RMN (também referida neste relatório como uma "proteína con- taminadora").
Identificação de Plantas com um Fenótipo de Resistência Patogênica Aper- feicoada
Marcação por ativação em plantas refere-se a um método de geração de mutações aleatórias pela inserção de um construto de ácido nu- cleico heterólogo método este que compreende seqüências reguladoras (por exemplo, um intensificador) no genoma da planta. As seqüências regulado- ras podem agir para intensificar a transcrição de um ou mais genes nativos da planta; consequentemente, [marcação por ativação] é um método útil pa- ra geração de mutantes de ganho-de-função, geralmente dominantes (vide, por exemplo, Hayashi et ai, Science, 1992, 258: 1350-1353; Weigel et ai, Plant Physiology, 2000, 122:1003-1013). O construto inserido fornece uma etiqueta molecular para identificação rápida da planta nativa cuja expressão errônea origina o fenótipo mutante. Rtiquetagem para ativação poderá tam- bém causar fenótipos de perda-de-função. A inserção pode resultar na inter- rupção de um gene nativo da planta, em cujo caso o fenótipo é geralmente recessivo.
Etiquetagem para ativação foi usado em várias espécies, inclu- indo tabaco e Arabidopsis, para identificar vários tipo diferentes fenótipos mutantes e os genes associados a esses fenótipos (Wilson et ai, Plant Cell, .1996, 8:659-671; Schaffer et ai, Cell, 1998, 93: 1219-1229; Fridborg et ai, Plant Cell, 1999, 11: 1019-1032; Kardailsky et ai, Science, 1999, 286:1962- .1965; Christensen et ai, 2000, Cell 100:469-478). Em um exemplo, usou-se etiquetagem para ativação, para identificar mutantes com resistência a do- ença alterada (Weigel et ai, supra).
Uma seleção de mutantes (ACTTAG) marcados por ativação de Arabidopsis foi usada para identificar os genes [designados N2 de NMR lis- tados na coluna 1 das Tabelas 3 e 4 (abaixo)] os quais são responsáveis por um fenótipo de resistência patogênica alterada (especificamente, um fenóti- po de resistência a nematódeo).
Concisamente, e como adicionalmente descrito nos Exemplos, um grande número de plantas Arabidopsis foi mutado com o vetor pSKI015, o qual compreende um T-DNA do plasmídeo Ti de Agrobacterium tumefaci- ens, um elemento intensificador viral, e um gene marcador selecionável (Weigel et al, Plant Physiology, 2000, 122:1003-1013). Quando o T-DNA in- sere no genoma de plantas transformadas, o elemento intensificador pode causar regulação positiva de genes nas vizinhanças, geralmente em aproxi- madamente 10 quilobase (kb) da inserção. As plantas T1 foram expostas ao agente seletivo a fim de recuperar especificamente plantas transformadas que expressaram o marcador selecionável e, portanto, carregavam inser- ções de T-DNA. As plantas T1 foram deixadas crescer até maturidade, auto- fertilizar-se e produzir sementes. A semente T2 foi colhida, marcada e arma- zenada. Linhagens ACTTAG mostranda aumento na resistência ao nemató- deo Meloidogyne javanica foram identificadas em uma seleção "genética direta" ou uma "genética reversa".
Linhagens ACTTAG que mostraram aumento na resistência pa- ra M. javanica foram identificadas por comparar o fenótipo de mudas de ACTTAG e de mudas tipo selvagem após infecção por M. javanica. Desco- briu-se a associação do gene com o fenótipo de resistência patogênica por meio de análise da seqüência de DNA genômico flanqueando a inserção de T-DNA na linhagem identificada. Consequentemente, genes e/ou polipeptí- deos de RMN poderão ser empregados no desenvolvimento de plantas ge- neticamente modificadas que apresentam um fenótipo de resistência pato- gênica modificada (por exemplo, nematódeo) ("um fenótipo de NMR"). Ge- nes RMN poderão ser usados na geração de culturas e/ou outras espécies de plantas que apresentam resistência aperfeiçoada a infecção por M. java- nica, outros nematódeos parasíticos de nematódeos de galhas e outros ne- matódeos parasíticos (por exemplo, nematódeos parasíticos de cisto) e po- derão ser também úteis na geração de uma planta com resistência aperfei- çoada a fungos, bactérias, e/ou outros patógenos. Expressão errônea de genes RMN poderá assim reduzir a necessidade de fungicidas e/ou pestici- das. O fenótipo de resistência patogênica modificada poderá adicionalmente intensificar a saúde total da planta. Ácidos Nucleicos e Polipeptídeos de NMR
Os genes RMN descobertos na seleção de etiquetagem para ativação por "genética direta" e seleção de etiquetagem para ativação por "genética reversa" são listados na coluna 1 de Tabelas 3 e 4, respectivamen- te. Os números de identificação de Arabidopsis Information Resource (TAIR) são fornecidos na coluna 2. As colunas 3 a 4 fornecem números do identifi- cador no GenBank (N-s Gl) para as seqüências de nucleotídeos e polipeptí- deos, respectivamente; cada uma das seqüências publicadas de referidas está incorporada neste relatório por referência como de 13 de junho de 2006. A coluna 5 lista função bioquímica e/ou nome de proteína. A coluna 6 lista os domínios de proteína conservados. A coluna 7 fornece os Nos. Gl para seqüências de ácido nucleicos e polipeptídeos de genes ortólogos de outras espécies de planta; cada uma das seqüências publicadas referencia- das está incorporada neste relatório por referência como da data na qual este pedido for depositado.
Conforme usado neste relatório, o termo "polipeptídeo de RMN" refere-se a uma proteína RMN de extensão completa conforme listada na coluna 1 das Tabelas 3 e 4. Fragmentos, derivados (variantes), ou ortólogos destes que são "funcionalmente ativos," significando que o fragmento de proteína, derivado, ou ortólogo exibe uma ou mais, ou as atividades funcio- nais associadas ao polipeptídeo de RMN de extensão completa, também podem ser usadas nos métodos ou composições descritas neste relatório. Por "fragmento" é tencionada uma parte da seqüência de nucleotídeo que codifica uma proteína de RMN ou uma parte da seqüência de aminoácido da proteína de RMN. Um fragmento de uma seqüência de nucleotídeo pode codificar uma porção biologicamente ativa de uma proteína de RMN, um áci- do nucleico biologicamente ativo (por exemplo, um pequeno ácido nucléico inibidor de antissenso, ou pode ser um fragmento que pode ser usado como uma sonda de hibridização ou iniciador de PCR usando métodos conhecidos na técnica. Moléculas de ácidos nucleicos que são fragmentos de uma se- quência de nucleotídeo de RMN compreende pelo menos aproximadamente .15, 20, 50, 75, 100, 200, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, .800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1400, 1500, .2000, 2500, 3000 nucleotídeos contíguos, ou até o número de nucleotídeos presentes em uma seqüência de nucleotídeo codificante de RMN de extensão completa descrita neste relatório, dependendo do uso pretendido. Por nucleotídeos ou aminoácidos "contíguos" são tencionados resíduos de nucleotídeos ou aminoácidos que são imediatamente adjacentes uns aos outros.
Em uma modalidade, um polipeptídeo de RMN funcionalmente ativo origina um fenótipo de resistência patogênica alterada quando expresso erroneamente em uma planta. Em uma modalidade adicional, expressão errônea do polipeptídeo de RMN funcionalmente ativo produz aumento na resistência a M. javanica e/ou outros nematódeos parasíticos. Em uma outra modalidade, um polipeptídeo de RMN funcionalmente ativo é capaz de resgatar atividade de RMN endógena defeituosa (incluindo defici- ente) quando expresso em uma planta ou em células da planta; o polipeptí- deo de resgate pode ser da mesma ou de uma diferente espécie como aque- la com atividade defeituosa. Em uma outra modalidade, um fragmento fun- cionalmente ativo de um polipeptídeo de RMN de extensão (por exemplo, um polipeptídeo nativo que apresenta a seqüência de um polipeptídeo RMN ou um ortólogo deste que ocorre naturalmente) retém uma de mais das pro- priedades biológicas associadas ao polipeptídeo de RMN de extensão com- pleta, tais como atividade de sinalização, atividade de ligação, atividade ca- talítica, ou atividade de localização celular ou extracelular.
O termo atividade de sinalização refere-se à capacidade de uma proteína funcionar no processo de mediação de um sinal que induz uma res- posta genética, bioquímica ou fisiológica de uma planta a ataque por um pa- tógeno. Vide, por exemplo, Apel & Hirt, Annu Rev Plant Biol., 2004, 55:373-399, Beckers & Spoel, PIantBioI (Stuttg)2006,8:1-10, Chisholm et ai, Cell,2006, 124:803-814, e Shah, Annu Rev Phytopathol., 2005, 43:229-260.
O termo atividade de ligação refere-se à capacidade de uma proteína ligar-se a uma outra proteína, um fragmento de DNA ou alguma outra molécula (por exemplo, Bogdanove, Plant Mol Biol., 2002, 50:981-989, Inohara et al., Annu Rev Biochem., 2005, 74:355-383, e Testerink & Munnik, Trends Plant Sci., 2005, 10:368-375).
O termo atividade catalítica refere-se à capacidade de uma pro- teína catalisar uma reação química. Vide, por exemplo: Bhatia etal., Crit Rev Biotechnol., 2002, 22:375-407, Pedley & Martin, Curr Opin Plant Biol., 2005,8:541-547, Rosahl, Z Naturforsch [C],1996,51:123-138, e Stone & Walker, PIantPhysioI., 1995, 108:451-457.
O termo atividade de localização celular ou extracelular refere- se a partes da proteína que interage com outros componentes da célula para localizar a proteína a uma localização subcelular ou extracelular específica (Crofts et al., Plant Physiol., 2004, 136:3414-3419, Matsuoka & Bednarek, Curr Opin Plant Biol., 1998, 1:463-469, Rusch & Kendall1 Mol Membr Biol.,1995, 12:295-307, Schnell & Hebert, Cell,2003,112:491-505).
Um fragmento de RMN, compreende preferencialmente um do- mínio de RMN, tal como um domínio de C ou N terminal ou catalítico, entre outros, e poderá compreender pelo menos aproximadamente 15, 25, 30, 50,75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, ou .450 aminoácidos contí- guos de uma proteína de RMN, ou até o número total de aminoácidos pre- sentes em uma proteína de RMN de extensão completa descrita neste rela- tório. Domínios funcionais representativos de genes de RMN são listados na coluna 6 das Tabelas 3 e 4, e podem ser identificados usando o programa INTERPRO (Mulder et ai, 2003 Nucleic Acids Res. 31, 315-318; Mulder et ai,2005 Nucleic Aeids Res. 33:D201-D205). Variantes funcionalmente ativas de polipeptídeos de RMN ou fragmentos destes de extensão completa incluem polipeptídeos com inserções, deleções ou substituições de aminoácidos que retêm uma de mais das atividades biológicas associadas ao polipeptídeo de RMN de extensão completa. Por "reter atividade biológica" entende-se que a variante apresentará pelo menos aproximadamente 30%, preferencialmente pelo menos aproximadamente 50%, mais preferencialmente pelo menos a- proximadamente 70%, ainda mais preferencialmente, pelo menos aproxima- damente 80% da atividade biológica da proteína nativa, tal como, por exem- plo, uma atividade antinematódeos. Em alguns casos, são geradas variantes que alteram o processamento pós-traducional de um polipeptídeo de RMN. Por exemplo, as variantes poderão apresentar características de transporte de proteína ou localização de proteína alterada ou meia-vida da proteína alterada comparada com o polipeptídeo nativo.
Conforme usado neste relatório, o termo "ácido nucleico de RMN" abrange ácidos nucleicos com a seqüência proporcionada no acesso do GenBank referenciado na coluna 3 das Tabelas 3 e 4. Seqüências de ácido nucleico complementares ao acesso do GenBank referenciado na co- luna 3 da Tabela 3 e da Tabela 4, bem como fragmentos funcionalmente ativos, derivados, ou ortólogos destes, poderão ser também usados nos mé- todos e composições descritas neste relatório. Um ácido nucleico de RMN desta revelação pode ser DNA1 derivado de DNA genômico ou cDNA, ou RNA.
Em uma modalidade, um ácido nucleico de RMN funcionalmente ativo codifica ou é complementar a um ácido nucleico que codifica um poli- peptídeo de RMN funcionalmente ativo. Incluído nessa definição está DNA genômico que funciona como um molde para um transcrito primário de RNA (por exemplo, um mRNA) precursor de que exige processamento, tal como "splicing", antes de codificar o polipeptídeo de RMN funcionalmente ativo. Um ácido nucleico de RMN pode incluir outras seqüências de não- codificantes que podem ou não ser transcritas; tais seqüências incluem U- TRs 5' e 3', sinais de poliadenilação e seqüências reguladoras que controlam expressão gênica, entre outras, como são conhecidas na técnica. Alguns polipeptídeos exigem eventos de processamento, tais como clivagem proteo- lítica, modificação covalente, etc., a fim de se tornarem totalmente ativos. Consequentemente, ácidos nucleicos funcionalmente ativos podem, codificar o polipeptídeo de RMN maduro ou o pré-processado, ou uma forma interme- diária. Um polinucleotídeo de RMN pode incluir também seqüências heteró- Iogas de codificação, por exemplo, seqüências que codificam um marcador incluído para facilitar a purificação do polipeptídeo fundido, ou um marcador de transformação.
Em uma outra modalidade, um ácido nucleico de RMN funcio- nalmente ativo é capaz de ser usado na geração de fenótipos de resistência patogênica com perda-de-função, por exemplo, via supressão antissenso, cossupressão, etc.
Um ácido nucleico de RMN usado nos métodos desta revelação
pode compreender uma seqüência de ácido nucleico que codifica ou é com- plementar a uma seqüência que codifica um polipeptídeo de RMN que apre- senta pelo menos aproximadamente 60%, aproximadamente 70%, aproxi- madamente 75%, aproximadamente 80%, aproximadamente 85%, aproxi- madamente 90%, aproximadamente 91%, aproximadamente 92%, aproxi- madamente 93%, aproximadamente 94%, aproximadamente 95%, aproxi- madamente 96%, aproximadamente 97%, aproximadamente 98%, ou apro- ximadamente 99% de identidade de seqüência à seqüência de polipeptídeo da entrada do GenBank referenciada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4. Em outra modalidade um polipeptídeo de RMN da revelação pode incluir um domínio de proteína conservado do polipeptídeo de RMN, tal(is) como o(s) domínio(s) de proteína listado(s) na coluna 6 das Tabelas 3 e 4. Em outra modalidade, um polipeptídeo de RMN compreende uma seqüência de poli- peptídeo com pelo menos aproximadamente 50%, aproximadamente 60%, aproximadamente 70%, aproximadamente 80%, aproximadamente 85%, aproximadamente 90% ou aproximadamente 95% ou mais de identidade de seqüência a um fragmento funcionalmente ativo do polipeptídeo da entrada do GenBank referenciada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4. Em ainda outra modalidade, um polipeptídeo de RMN compreende uma seqüência de poli- peptídeo com pelo menos aproximadamente 50%, aproximadamente 60%, aproximadamente 70%, aproximadamente 80%, ou aproximadamente 90% de identidade à seqüência de polipeptídeo da entrado do GenBank referenciada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4 ao longo de seu comprimento total e compreende um domínio de proteína conservado listado na coluna 6 das Tabelas 3 e 4.
Em outra modalidade, uma seqüência de ácido nucleico de RMN usada nos métodos da presente revelação compreende uma seqüência de ácido nucleico que apresenta pelo menos aproximadamente 60%, aproxima- damente 70%, aproximadamente 75%, aproximadamente 80%, aproxima- damente 85%, aproximadamente 90%, aproximadamente 91%, aproxima- damente 92%, aproximadamente 93%, aproximadamente 94%, aproxima- damente 95%, aproximadamente 96%, aproximadamente 97%, aproxima- damente 98%, ou aproximadamente 99% de identidade de seqüência à se- qüência de ácido nucleico da entrado do GenBank referenciada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4, ou seqüências de ácidos nucleicos que são complemen- tares a tal seqüência de RMN, ou um fragmento funcionalmente ativo deste. Conforme usada neste relatório, "porcentagem (%) de identida-
de de seqüência" com relação a uma seqüência especificada em questão, ou uma parte especificada desta, é definida como a percentagem de núcleo- tídeos ou aminoácidos na seqüência derivada candidata idêntica aos nucleotí- deos ou aminoácidos na seqüência em questão (ou parte especificada desta), após alinhar as seqüências e introduzir intervalos, se necessário para obter a percentagem máxima de identidade de seqüência, conforme gerado pelo programa WU-BLAST-2.0a19 (Altschul et ai, J. Mol. Biol., 215:403-410, 1990) com ajuste de parâmetros de pesquisa para os valores predeter- minados. Os parâmetros HSP S e HSP S2 são valores dinâmicos e são es- tabelecidos pelo próprio programa, dependendo da composição da seqüên- cia particular e da composição da base de dados particular contra a qual a seqüência de interesse está sendo pesquisada. Uma "% de valor de identi- dade" é determinada pelo número de nucleotídeos de aminoácidos idênticos pareados dividido pelo comprimento da seqüência para a qual a identidade percentual está sendo relatada. "Porcentagem (%) de similaridade de seqü- ência de aminoácidos" é determinada realizando o mesmo cálculo que para determinar % de identidade de seqüência de aminoácidos, mas incluindo substituições de aminoácidos conservativas, além dos aminoácidos idênticos na computação.
Uma "substituição conservativa de aminoácido" é aquela na qual o resíduo de aminoácido é substituído por um resíduo de aminoácido que apresenta uma cadeia lateral similar. Famílias de resíduos de aminoácidos apresentando cadeias laterais similares foram definidas na técnica. Essas famílias incluem aminoácidos com cadeias laterais básicas (por exemplo, lisina, arginina, histidina), cadeias laterais ácidas {por exemplo, ácido aspár- tico, ácido glutâmico), cadeias laterais polares não-carregadas (por exemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadeias laterais não-polares (por exemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, proli- na, fenilalanina, metionina, triptofano), cadeias laterais beta-ramifiçadas (por exemplo, treonina, valina, isoleucina) e cadeias laterais aromáticas (por e- xemplo, tirosina, fenilalanina, triptofano, histidina).
"Variantes" de seqüências de nucleotídeo que codificam RMN incluem aquelas seqüências que codificam as proteínas de RMN reveladas neste relatório mas que diferem conservativamente devido à degeneração do código genético, bem como aquelas que apresentam uma identidade de seqüência específica conforme discutidi acima. Por exemplo, preferencial- mente, substituições conservativas de aminoácidos podem ser feitas em um ou mais resíduos de aminoácidos preditos, preferencialmente não- essenciais. Um resíduo de aminoácido "não-essencial" é um resíduo que pode ser alterado a partir da seqüência tipo selvagem de uma proteína de RMN sem alterar a atividade biológica, enquanto que um resíduo de amino- ácido "essencial" é exigido para atividade biológica. Substituições de amino- ácidos podem ser feitas em regiões não-conservadas que retêm função. Em geral, tais substituições não seriam feitas em resíduos de aminoácidos con- servados, ou em resíduos aminoácidos que residem dentro de um motivo conservado, onde tais resíduos são essenciais para atividade da proteína.
Moléculas derivadas de ácido nucleico das moléculas de ácidos nucleicos em questão incluem seqüências que hibridizam-se seletivamente à seqüência de ácidos nucleicos da entrada do GenBank referenciada na co- luna 3 das Tabelas 3 e 4. A estringência da hibridização pode ser controlada por meio da temperatura, força iônica, pH, e a presença de agentes desnaturantes tal como formamida durante hibridização e lavagem. Condi- ções rotineiramente usadas são bem-conhecidas (vide, por exemplo, Current Protocol in Molecular Biology, Vol. 1, Capítulo 2.10, John Wiley & Sons, Pu- blishers (1994); Sambrook et ai, supra). Em algumas modalidades, uma mo- lécula de ácido nucleico da revelação é capaz de hibridizar a uma molécula de ácido nucleico que contém a seqüência de nucleotídeo da entrada do GenBank referenciada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4 sob condições restringentes hibridização que compreendem: pré-hibridização de filtros con- tendo ácido nucleico por 8 horas da noite para o dia a 65°C em uma solução compreendendo citrato de força única 6x (SSC) (SSC 1X é NaCI 0,15 M, ci- trato de Na 0,015 M; pH 7,0), solução de Denhardt 5 X, pirofosfato de sódio a 0,05% e 100 pg/ml de DNA de esperma de arenque; hibridização por 18 a 20 horas a 65°C em uma solução contendo SSC 6X, solução de Denhardt1X, 100 pg/ml de tRNA de levedura e pirofosfato de sódio a 0,05%; e lava- gem dos filtros a 65°C por 1 hora em uma solução contendo SSC 0,2X e SDS a 0,1% (dodecilsuIfato de sódio). Em outras modalidades, são usadas condições de hibridização moderadamente estringentes que compreendem: pré-tratamento de filtros contendo ácido nucleico por 6 horas a 40°C em uma solução contendo formamida a 35%, SSC 5X, Tris-HCI 50 mM (pH 7,5), ED- TA 5 mM, PVP a 0,1%, Ficoll a 0,1%, BSA a 1%, e 500 pg/ml de DNA de esperma de salmão desnaturado; hibridização por 18-20 horas a 40°C em uma solução contendo formamida a 35%, SSC 5X, Tris-HCI 50 mM (pH 7,5), EDTA 5 mM, PVP a 0,02%, Ficoll a 0,02%, BSA a 0,2%, 100 pg/ml de DNA de esperma de salmão, e 10% (p/vol.) de sulfato de dextrano; seguido por lavagem duas vezes por 1 hora a 55°C em uma solução contendo SSC 2X e SDS a 0,1%. Alternativamente, podem ser usadas baixas condições de bai- xa estringência que compreendem: incubação por 8 horas da noite para o dia a 37°C em uma solução compreendendo formamida a 20%, SSC 5 x, sulfato de sódio 50 mM (pH 7,6), solução de Denhardt 5X, sulfato de dextra- no a 10%, e 20 pg/ml de DNA de esperma de salmão cortado desnaturado; hibridização no mesmo tampão por 18 a 20 horas; e lavagem dos filtros em SSC 1 χ a aproximadamente 37°C por 1 hora.
Como um resultado da degeneração do código genético, várias seqüências de polinucleotídeos que codificam um polipeptídeo de RMN po- dem ser produzidas. Por exemplo, códons podem ser selecionados para aumentar a taxa em que expressão do polipeptídeo ocorre em uma espécie particular de hospedeiro, de acordo com o uso ótimo de códon imposto pelo organismo hospedeiro particular (vide, por exemplo, Nakamura et ai, 1999, Nucleic Acids Res., 27:292). Tais variantes de seqüência podem ser usados nos métodos dessa revelação.
Os métodos da revelação podem usar ortólogos dos genes de RMN de Arabidopsis. Exemplos de ortólogos de cada um dos genes de RMN de Arabidopsis são identificados na coluna 7 das Tabelas 3 e 4. Métodos de identificação dos ortólogos em outras espécies de plantas são conhecidos na técnica. Normalmente, ortólogos em diferentes espécies retêm a mesma função, devido à presença de um ou mais motivos de proteína e/ou estrutu- ras tridimensionais. Na evolução, quando um evento de duplicação gênica segue especiação, um único gene em uma espécie, tal como Arabidopsis, pode corresponder a múltiplos genes (paralógos) em um outra. Conforme usado neste relatório, o termo "ortólogos" abrange paralógos. Quando dados da seqüência são disponíveis para uma espécie particular de plantas, ortólo- gos são geralmente identificados por meio de análise de homologia de se- qüências, tal como análise BLAST, usualmente usando seqüências de prote- ína como isca. Seqüências são designadas como um ortólogo potencial se a melhor seqüência complementar ("hit') do resultado direto BLAST encontrar a seqüência pesquisada original no BLAST reverso (MA e Bork P, 1998, Proc. NatL Acad. Sei. U.S.A., 95:5849-5856; Huynen MA et ai, Genome Re- search (2000) 10:1204-1210). Programas para alinhamento múltiplas seqüências, tal como CLUSTAL (Thompson JD et ai., 1994, Nucleic Acids Res. 22:4673-4680) podem ser usados para realçar regiões conservadas e/ou resíduos de proteínas ortólogas e para gerar árvores filogenéticas. Em uma árvore filogenética representando múltiplas seqüências homologas de diversas espécies (por exemplo, encontradas por meio de análise BLAST), seqüências ortólogas de duas espécies geralmente aparecem mais próximas na árvore com relação a todas as outras seqüências dessas duas espécies. Threading estrutural ou outra análise de enovelamento protéico (por exem- pio, usando o programa de ProCeryon, Biosciences, Salzburg, Áustria) também pode identificar ortólogos potenciais. Métodos de hibridização de ácidos nucleicos também podem ser usados para descobrir genes ortólogos e são preferidos quando dados da seqüência não estão disponíveis. PRC degenerado e rastreado de bibliotecas de cDNA ou DNA genômico são mé- todos comuns para descobrir seqüências genéticas correlatas e são bem- conhecidos na técnica (vide, por exemplo, Sambrook, supra-, Dieffenbach e Dveksler (Eds.) Inieiador de PCR: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, 1989). Por exemplo, métodos para gerar uma biblio- teca de cDNA da espécie de planta de interesse e sondagem da biblioteca com sondas gênicas parcialmente homólogas são descritos in Sambrook Gt ai, supra. Uma porção altamente conservada da seqüência codificante de RMN de Arabidopsis podem ser usada como uma sonda. Ácidos nucleicos ortólogos de RMN podem hibridizar ao ácido nucleico da entrada do Gen- Bank referenciado na coluna 3 das Tabelas 3 e 4 sob condições de estrin- gência alta, moderada, ou baixa. Após amplificação ou isolamento de um segmento de um suposto ortólogo, esse segmento pode ser clonado e sequ- enciado por técnicas padrões e utilizado como uma sonda para isolar um clone completo de cDNA ou genômico. Alternativamente, é possível iniciar um projeto de EST para gerar uma base de dados de informação de seqüência para a espécie vegetal de interesse. Em uma outra abordagem, anticorpos que especificamente a polipeptídeos de RMN conhecidos são usados para isolamento do ortólogo. Análise de western blot pode determinar que um ortólogo de RMN (por exemplo, uma proteína ortóloga) está presente em um extrato bruto de uma espécie vegetal particular. Quando reatividade é observada, a seqüência que codifica o ortólogo candidato poderá ser isolada por meio de rastreamento de bibliotecas de expressão que representam a espécie vegetal particular. Bibliotecas de expressão podem ser construídas em uma variedade de vetores comerci- almente disponíveis, incluindo Iambda gt11, conforme descrito in Sambrook, et ai, supra. Uma vez que ortólogo(s) candidato(s) é(são) identificado(s) por qualquer um desses meios, as seqüências do ortólogo candidato são usadas como isca {bait) (a "consulta") para o BLAST reverso contra seqüências de Arabidopsis ou outras espécies nas quais o ácido nucleico e/ou as seqüências de polipeptídeo de RMN foram identificadas.
Ácidos nucleicos e polipeptídeos de RMN podem ser obtidos usando qualquer método disponível. Por exemplo, técnicas para isolamento de seqüências de cDNA ou DNA genômico de interesse por meio de rastreamento de bibliotecas de DNA ou usando reação em cadeia de polime- rase (PRC), conforme descrito anteriormente, são bem-conhecidas na técni- ca. Alternativamente, seqüências de ácidos nucleicos podem ser sintetiza- das. Qualquer método conhecido, tal como mutagênese sítio-dirigida (Kunkel TA et ai, 1991, Methods Enzymol., 204:125-39) ou mutagênese mediada por PRC, pode ser usado para introduzir as alterações desejadas em um ácido nucleico clonado. Em geral, os métodos da revelação envolvem incorporar a forma desejada do ácido nucleico de RMN em um vetor de expressão de planta para transformação de células vegetais, e o polipeptídeo de RMN é expresso na planta de hospedeira.
Geração de Plantas Geneticamente Modificadas com um Fenótipo de Resis- tência Patogênica
Ácidos nucleicos e polipeptídeos de RMN podem ser usados na geração de plantas geneticamente modificadas que apresentam um fenótipo de resistência patogênica modificada; em geral, fenótipos de resistência a- perfeiçoada são de interesse. Em uma modalidade, expressão alterada do gene de RMN em uma planta é usada para gerar plantas com aumento na resistência a M. javanica. Em modalidades adicionais, as plantas que expressam erroneamente RMN também podem exibir resistência alterada a patógenos nematódeos parasíticos, incluindo, mas não limitados a Meloi- dogyne spp, Heterodera spp, Globodera spp., Nacobbus spp., Belonolaimus spp., Criconemoides spp., Helicotylenchus spp., Xiphinema spp., Longidorus spp., Pratylenehus spp., Paratriehodorus spp., Tylenehorhynehus spp., Dit- ylenehus spp., Hoplolaimus spp., e Rotylenchulus spp. Aumento na resistên- cia a patógenos fúngicos também é de interesse. Os patógenos fúngicos incluem, mas não são limitados a, Alternaria brassieieola, Botrytis einerea, Erysiphe eichoraeearum, Fusarium oxysporum, Plasmodiophora brassica, Rhizoetonia solani, Colletotrichum eoceode, Selerotinia spp., Aspergillus spp., Penieillium spp., Ustilago spp., e Tilletia spp. Patógenos bacterianos de interesse incluem, mas não são limitados a, Agrobaeterium tumefaeiens, Er- winia traeheiphila, Erwinia stewartii, Xanthomonas phaseoli, Erwinia amylo- vora, Envinia earotovora, Pseudomonas syringae, Pelargonium spp, Pseu- domonas ciehorii, Xanthomonas fragariae, Pseudomonas morsprunorum e Xanthomonas eampestris. Infecção patogênica pode afetar sementes, frutos, flores, folhagens, caules, tubérculos, raízes, etc. Consequentemente, resis- tência pode ser observada em qualquer parte da planta.
Os métodos descritos neste relatório são geralmente aplicáveis a todas as plantas já que o gene de RMN (ou um ortólogo, variante ou frag- mento deste) pode ser expresso em qualquer tipo de planta. Em algumas modalidades, a revelação é direcionada a culturas tais como milho, soja, al- godão, arroz, trigo, cevada, tomate, canola, grama do tipo turfgrass e linho. Outras culturas incluem alfafa, tabaco, e outras culturas de forragem. A reve- lação pode também ser direcionada para plantas que possuem frutos e ve- getais, incluindo tomate, cenoura, alface, feijão, aspargo, couve-flor, pimen- ta, raiz de beterraba, repolho, berinjela, endívia, alho-poró, pepino longo, melão, ervilha, rabanete, rizoma ("rootstock"), pepino curto ("Be'ít alpha"), abóbora, melancia, cebola branca, chicória (witloof), e cebola amarela, cebo- linha, brócolis, couve-de-bruxelas, aipo, espécie de planta das valerianáceas ("mache"), pepino, funcho, abóbora-moranga, milho doce, e abobrinha, plan- tas usadas na indústria de flores de corte, plantas que produzem grãos, plantas que produzem óleo, e plantas que produzem nozes, entre outras.
Aquele versado na técnica reconhecerá que existe uma ampla variedade de técnicas de transformação na técnica, e novas técnicas estão continuamente se tornando disponíveis. Qualquer técnica que é adequada para a planta hospedeira alvo pode ser empregada no escopo da presente revelação. Por exemplo, os constructos podem ser introduzidos em uma va- riedade de formas incluindo, mas não limitadas, como uma fita de DNA, em um plasmídeo, ou em um cromossomo artificial. A introdução dos construc- tos nas células vegetais alvo pode ser realizada por uma variedade de técni- cas, incluindo, mas não limitadas, a transformação mediada por Agrobacteri- um, eletroporação, microinjeção, coprecipitação de DNA em fosfato de cálcio por bombardeamento com microprojéteis ou transformação mediada por Ii- possomo de um ácido nucleico heterólogo. A transformação da planta é pre- ferencialmente permanente, isto é, por meio de integração dos constructos de expressão introduzidos no genoma planta hospedeira, de tal modo que os construtos introduzidos sejam passados para gerações sucessivas da plan- ta. Dependendo do uso pretendido, um construto de ácido nucleico heterólo- go que compreende um polinucleotídeo RMN pode codificar a proteína total ou uma parte biologicamente ativa da mesma.
Em uma modalidade, sistemas de vetores binários baseados em Ti podem ser usados para transferir polinucleotídeos. Vetores binários pa- drões de Agrobacterium são conhecidos daqueles versados na técnica, e muitos são comercialmente disponíveis (por exemplo, pBI121 Clontech La- boratories, Palo Alto, CA).
O procedimento ótimo para transformação de plantas com veto- res de Agrobacterium variará com o tipo de planta que é transformada. Mé- todos exemplares para transformação mediada por Agrobacterium incluem transformação de explantes de hipocótilo, ápices de brotos, tecido do caule ou folha, derivados de mudas e/ou plântulas estéreis. Tais plantas transfor- madas podem ser reproduzidas sexualmente, ou por meio de cultura de cé- lulas ou tecidos. Transformação de Agrobaeterium foi anteriormente descrita em relação a um grande número de diferentes tipos de plantas e métodos para tal transformação podem ser encontrados na literatura científica. De relevância particular são métodos para transformar culturas comercialmente importantes, tal como milho (Fromm et ai, Bioteehnology, 1990, 8:833-839; Ishida et ai, 1996, Nature Bioteehnology 14:745 - 750), semente de colza (De Block et ai, 1989, Plant Physiol., 91:694-701), girassol (Everett et ai,1987, Bio/Teehnology, 5:1201) e soja (Christou et ai, 1989, Proe. Nati Aead. Sei U.S.A., 86:7500-7504; 1989; Kline et ai, 1987, Nature, 327:70).
Expressão (incluindo transcrição e tradução) de um gene RMN poderá ser regulada com relação ao nível de expressão, ao(s) tipo(s) de te- cido(s) onde a expressão ocorre e/ou ao estágio de desenvolvimento da ex- pressão. Várias seqüências reguladoras heterólogas (por exemplo, promoto- ras e intensificadoras) são disponíveis para controlar a expressão de um á- cido nucleico de RMN. Essas incluem promotores constitutivos, induzíveis e reguláveis, bem como promotores e intensificadores que controlam expres- são em uma maneira tecido - ou temporal-específica. Promotores constituti- vos exemplares incluem o promotor E4 de frambroesa (Patente dos Estados Unidos Nos. 5.783.393 e 5.783.394), o CaMV 35S (Jones JD et ai, 1992, Transgenie Res., 1:285-297), o promotor de CsVMV (Verdaguer B et al.,1998, PlantMol. Bioi, 37:1055-1067) e o promotor de actina de melão (pedi- do PCT publicado WOOO/56863). Promotores tecido-específicos exemplares incluem os promotores de tomate E4 e E8 (Patente dos Estados Unidos Ns5.859.330) e o promotor do gene 2AII tomate (Van Haaren MJJ et al., 1993, Plant Mol. Biol., 21:625-640). Em uma modalidade, a expressão do gene de RMN está sob o controle de um promotor induzível por patógeno (Rushton et al., 2002, The Plant Ce//, 14:749-762). Em uma modalidade, expressão do gene RMN está sob o controle de seqüências reguladoras de genes cuja expressão está associada ao promotor de CsVMV.
Em ainda um outro aspecto, pode ser desejável inibir a expres- são do gene de NMT endógeno em uma célula hospedeira. Métodos exem- plares para praticar esse aspecto da revelação incluem, masnão se limitam a supressão antissenso (Smith, et al., 1988, Nature, 334:724-726; van der Krol et al., 1988, Biotechniques, 6:958-976); co-supressão (Napoli, et al., 1990, Plant Cell, 2:279-289); ribozimas (Publicação PCT WO 97/10328); e combi- nações de senso e antissenso (Waterhouse, et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 95:13959-13964). Métodos para a supressão de seqüências en- dógenas em uma célula hospedeira empregam tipicamente a transcrição ou transcrição e tradução de pelo menos uma parte da seqüência que deve ser suprimida. Tais seqüências podem ser homologas a regiões codificantes e não- codificantes da seqüência endógena. Inibição antissenso pode usar a seqüência completa de cDNA (Sheehy et ai, 1988, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 85:8805-8809), uma seqüência parcial de cDNA, incluindo fragmen- tos de seqüência codificante a 5', (Cannon et ai, 1990, Plant Mol. Bioi,15:39-47), ou seqüências de não-codificantes a 3' (Ch'ng et ai, 1989, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 86:10006-10010). Técnicas de cossupressão podem usar a seqüência completa de cDNA (Napoli et ai, supra; van der Krol et ai,1990, The Plant Cell, 2:291-299), ou uma seqüência parcial de cDNA (Smith et ai, 1990, Mol. Gen. Genetics, 224:477-481).
Testes moleculares e genéticos padrões podem ser realizados para analisar adicionalmente a associação entre um gene e um fenótipo ob- servado. Técnicas exemplares são descritas abaixo.1. Análise de DNA/RNA
Os padrões de expressão gênica estágio - e tecido-específica em mutantes versus linhagens tipo selvagem podem ser determinados, por exemplo, por hibridização in situa. A análise do status de metilação do gene, especialmente flanqueando as regiões reguladoras, pode ser efetuada. Ou- tras técnicas adequadas incluem superexpressão, expressão ectópica, ex- pressão em outras espécies de plantas e noucate de gene (genética reversa, nocaute direcionado, silenciamento gênico induzido por vírus (VIGS)) (vide, Baulcombe, 1999, Arch. ViroL SuppL 15:189-201).
Em um pedido representativo, traçar o perfil de expressão, ge- ralmente por análise de microarranjo, é usado para medir simultaneamente diferenças ou alterações induzidas na expressão de muitos genes diferentes. Técnicas para análise microarranjo são bem-conhecidas na técnica (vide, por exemplo, Schena et ai., 1995, Science, 270:467-470; Baldwin et al.,1999, Cur. Opin. Piant Biol., 2(2):96-103; Dangond,2000, Physiol. Geno- mics, 2:53-58; van Hal NL et ai., 2000, J. Biotechnol., 78:271-280; Richmond e Somerville, 2000, Cur. Opin. Plant BioL, 3:108-116). Traçar o perfil de ex- pressão de linhagens marcadas individuais pode ser realizado. Tal análise pode identificar outros genes que são coordenadamente regulados como uma conseqüência da superexpressão do gene de interesse, a qual pode ajudar a localizar um gene desconhecido em uma via particular.
.2. Análise de Produto Gênico
A análise de produtos gênicos pode incluir expressão de proteí- na recombinante, produção antissoros, imunolocalização, ensaios bioquími- cos para atividade catalítica ou outras atividades, análise do status de fosfo- rilação, e análise da interação com outras proteínas através de ensaios de duplo-híbrido em levedura.
.3. Análise das Vias
A análise das vias pode incluir localização de um gene ou produ- to gênico em uma via bioquímica, metabólica ou de sinalização particular baseado em seu fenótipo de expressão errônea ou por homologia de seqüência ou por homologia com genes correlatos. Alternativamente, a análise pode compreender cruzamentos genéticos com linhagens do tipo selvagem e outras linhagens mutantes (criando mutantes duplos) para ordenar o gene em uma via, ou determinar o efeito de uma mutação sobre a em uma via, ou determinar o efeito de uma mutação sobre a expressão de genes "repórter" a jusante em uma via.
Geração de Plantas Mutadas com um Fenótipo de Resistência Patogênica
A revelação fornece adicionalmente um método de identificar plantas que apresentam aumento na resistência patogênica, em particular, plantas que apresentam uma mutação em um gene de RMN endógeno que confere tal resistência. Esse método compreende analisar pelo menos um gene de RMN de uma população de plantas, e identificar uma planta com um gene de RMN alterado (por exemplo, mutado). O gene de RMN pode apresentar uma mutação que confere a resistência ao patógeno, ou pode apresentar uma expressão alterada quando comparado a uma planta do tipo selvagem. Progênie dessas plantas resistente ao patógeno que não é gene- ticamente modificado pode ser gerada. Métodos para produzir e identificar plantas com mutações que conferem resistência patogênica são conhecidos na técnica. Em um método, chamado "TILLING" (de targeting induced local Iesions in genomes), mutações são induzidas na semente de uma planta de interesse, por exemplo, usando tratamento com EMS. As plantas resultantes são cultivadas e autofertilizadas, e a progênie é usada para preparar amos- tras de DNA. Amplificação por PCR e sequenciamento do gene de RMN é usado para identificar se uma planta mutante apresenta uma mutação no gene de RMN. Plantas apresentando mutações de RMN podem ser em se- guida testadas para resistência patogênica, ou alternativamente, as plantas podem ser testadas para resistência patogênica, e em seguida a amplifica- ção por PCR e sequenciamento do gene de RMN é usada para determinar se uma planta que apresenta aumento na resistência patogênica apresenta um gene de RMN mutado. TILLING pode identificar mutações que podem alterar a expressão de genes específicos ou a atividade de proteínas codifi- cadas por esses genes (vide, Colbert et ai, 2001, Plant Physiol. 126:480-484; McCaIIum etal., 2000, Nature Biotechnology 18:455-457). Em um outro método, uma abordagem de gene candidato/Loci
de Características Quantitativas (QTLs) pode ser usada em um programa de reprodução auxiliada por marcador para identificar mutações no gene de RMN ou ortólogos de gene de RMN que pode conferir resistência a patóge- nos (vide, Foolad et ai, Theor. Appi Genet., 2002, 104(6-7):945-958; Rothan et ai, 2002, Theor. Appi Genet., 105(1 ):145-159; Dekkers e Hospital, 2002, Nat. Rev. Genet., 3:22-32). Desse modo, em um aspecto adicional da reve- lação, um ácido nucleico de RMN é usado para identificar se uma planta re- sistente a patógeno apresenta uma mutação no gene endógeno de RMN ou apresenta um alelo particular que causa um fenótipo de resistênica patogê- nica.
Embora a invenção tenha sido descrita com referência aos mé- todos e às modalidades específicas, será considerado que várias modifica- ções e alterações podem ser feitas sem desviar-se da invenção. Todas as publicações citadas neste relatório estão expressamente incorporadas neste relatório por referência para o propósito de descrever e revelar composições e metodologias que podem ser usadas com relação a esta invenção. Todas as patentes pedidos de patente e informação de seqüência em bases de dados públicas referenciadas (na data de depósito deste pedido citados) também estão incorporados por referência. EXEMPLOS EXEMPLO 1
Geração de Plantas com um Fenótipo de Resistência Patogênica por meio de Transformação com um Construto de Etiquetaqem para Ativação
Mutantes foram gerados usando o vetor de etiquetagem para ativação (ACTTAG), pSKI015 (Gl 6537289; Weigel D et ai, supra). Métodos padrões foram usados para a geração de plantas transgênicas de Arabidop- sis, e eram essencialmente conforme descritos no pedido PCT publicado W001/83697. Resumidamente, plantas de Arabidopsis (CoI-O) TO foram transformadas com Agrobacterium transportando o vetor pSKI015, o qual compreende T-DNA derivado do plasmídeo Ti de Agrobacterium, um gene marcador selecionável para resistência a herbicida, e o elemento intensifica- dor 35S CaMV 4X. Plantas transgênicas foram selecionadas na geração T1 com base na resistência a herbicida. A semente T2 foi coletada de plantas T1 e armazenada em uma coleção indexada, e uma parte da semente T2 foi acessada para o seleção genética direta. Semente T3 foi usada na seleção genética reversa. A semente T2 foi semeada no solo e as plantas foram expostas ao herbicida para matar plantas que não possuam o vetor ACT- TAG. A plantas T2 foram cultivadas até a maturidade, deixadas autofertilizar e criar sementes. Semente T3 (das plantas T2) foi colhida em massa para cada linhagem, e uma parte da semente T3 foi acessada para a seleção ge- nética reversa (ver abaixo).
A posição do elemento ACTTAG no genoma em cada linhagem foi determinada usando semente T3 por PCR inverso. O produto de PCR foi submetido a análise seqüencial e colocado no genoma usando uma pesqui- sa básica BLASTN e/ou uma pesquisa da base de dados Arabidopsis Infor- mation Resource (TAIR) (disponível no sítio de Internet arabidopsis.org).38.090 linhagens com seqüências de flanqueamento recuperadas foram consideradas na seleção genética reversa. EXEMPLO 2
Seleção Genética Direta para Linhagens Resistentes a Nematódeo Meloido- gine iavanica.
Conduziu-se a seleção genética direta como uma seleção primá- ria e secundária. Na seleção primária, aproximadamente 8 sementes T2 das linhagens da coleção ACTTAG de Arabidopsis e 2 sementes da Col-O tipo selvagem foram plantadas no solo. As sementes foram estratificadas por 2 dias a 4°C e crescidas em uma câmara de crescimento a 25°C com 60 a70% de umidade relativa em um ciclo curto de luz do dia de 10 horas de luz e 14 horas de escuro por 8 dias. O solo em torno de cada muda foi inoculado com 5.000 ovos do nematódeo Meloidogine javanica e as plantas foram dei- xadas crescer por mais 20 a 25 dias. Cada planta foi em seguida removida do solo e avaliada para tensão causada pelo nematódeo. Quaisquer linha- gens com uma planta não mostrando tensão foram submetidas à análise adicional.
Na seleção secundária, aproximadamente 40 sementes T2 são plantadas juntamente com a semente Col-O do tipo selvagem. As plantas foram crescidas e inoculadas com ovos de nematódeos como na seleção primária. As plantas foram avaliadas em relação à tensão 20 a 25 dias após inoculação. Todas as linhagens que apresentam pelo menos uma planta não mostrando nenhuma tensão foram deixadas a desenvolver-se por 5 sema- nas adicionais. Após esse tempo, as plantas são removidas do solo, o sis- tema radicular foi lavado e as plantas foram avaliadas em relação às galhas encontradas no sistema radicular. Plantas foram classificadas como resisten- tes se apresentassem menos de 20 nós (knots) em seu sistema radicular.
Como um resultado dessas análises, 48 linhagens ACTTAG fo- ram identificadas como resistentes ao nematódeo Meloidogine javanica. EXEMPLO 3
Caracterização da Inserção de T-DNA em Plantas Exibindo o Fenótipo de Resistência a Nematódeo: determinação de número de Iocus de ACTTAG e determinação de número de cópias de ACTTAG
Pelo fato das linhagens ACTTAG poderem apresentar inserções em mais de um Iocus genético, estimou-se o número de Ioci genéticos con- tendo as inserções de ACTTAG em cada linhagem identificada no Exemplo2. Em plantas T1, inserções de ACTTAG estão presentes no estado hemizigoto (isto é, estão presentes inseridas em uma das duas cópias do genoma da planta diplóide). Devido à segregação genética, em plantas T2 cada Ioeus genético contendo uma inserção ACTTAG está presente em uma razão 3:1; 75% das plantas T2 apresentarção a inserção de ACTTAG nesse Ioeus e 25% não apresentarão. Se uma planta T1 contém dois elementos ACTTAG em Ioci independentemente segregantes, o número de plantas T2 contendo qualquer elemento ACTTAG será 87,5% e 12,5% das plantas não conterão uma inserção. Pelo fato de que cada elemento ACTTAG contém um gene que confere resistência ao herbicida BASTA, pode-se estimar o número de Ioei genéticos contendo um elemento ACTTAG determinando a porcentagem de plantas T2 que são resistentes a BASTA.
Para determinar o número de Ioei genéticos transportando inser- ções de ACTTAG em cada linhagem, a proporção de plantas T2 resistentes ao agente seletivo, 50 a 100 sementes T2 foram semeadas no solo, deixa- das germinar, e o número de mudas T2 germinadas foi registrado. As mudas Τ2 foram pulverizadas com 60 mg/L do herbicida BASTA 6 vezes por um período de 2 semanas para matar plantas desprovidas das inserções ACT- TAG. Determinou-se o número de mudas T2 resistentes a BASTA e a por- centagem de plantas resistentes a BASTA foi calculada. Linhagens que a- presentavam 60 a 80% de mudas T2 resistentes a BASTA foram estimadas transportar uma inserção ACTTAG em um único Iocus genético. Linhagens que apresentavam mais de 80% de mudas T2 resistentes a BASTA foram estimadas transportar uma inserção ACTTAG em mais de um Iocus genéti- co.
Pelo fato de que cada Iocus genético pode conter mais de uma inserção, o número de elementos ACTTAG foi estimado em cada linhagem identificada no Exemplo 2. Para determinar o número de inserções ACTTAG presentes em cada linhagem, usou-se um método baseado em reação em cadeia de polimerase (PCR) TaqMan® usando TaqMan® Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems) e ABI PRISM 7700 Sequence Delection System (Applied Biosystems). Resumidamente, o DNA genômico foi isolado de um conjunto de pelo menos 18 mudas T2. Duas reações de PCR foram realizadas simultaneamente em uma mistura reacional usando o DNA de uma linhagem ACTTAG como molde. Uma reação de PCR detecta a pre- sença do gene BAR, o qual confere resistência ao herbicida glufosinato- amônio, usando os iniciadores de PCR específicos para o gene BAR. A ou- tra reação de PCR detecta a presença do gene ELF3 em Arabidopsis usan- do iniciadores de PCR específicos para o gene ELF3. As quantidades relati- vas dos dois produtos de PCR acumuladas durante o curso da reação foram usadas para determinar o número de cópias de ACTTAG.
Com base nessas análises, cinco linhagens de ACTTAG foram escolhidas para análise adicional (vide, Exemplo 4). A estimativa do número de Iocus de ACTTAG e a estimativa do número de cópia de ACTTAG para essas linhagens são mostradas na Tabela 1 abaixo. <table>table see original document page 39</column></row><table> EXEMPLO 4
Caracterização da Inserção de T-DNA em Plantas Exibindo o Fenótipo de Resistência a Nematódeo: Determinação do sítio de inserção de ACTTAG no aenoma de Arabidopsis Resgate de plasmídeo (Weigel et al., supra) e/ou PCR inversa (iPCR; Triglia et al., 1988, Nucleic Acid Res., 16:8186) foi usado para recu- perar DNA genômico de Arabidopsis flanqueando a inserção de T-DNA de linhagens identificadas na seleção genética direta. Os produtos dessas aná- lises foram analisados por sequenciamento de DNA e a seqüência foi sub- metida a uma pesquisa básica BLASTN do genoma de Arabidopsis alojado na base de dados Exelixis ou na base de dados Arabidopsis Information Resource (TAIR) (disponível no sítio da Internet arabidopsis.org). As localizações dos ACTTAGs para NMR1, NMR2, NMR3, NMR4 e NMR5 são descritas abaixo.
NMR1: A borda direita do inserto ACTTAG está logo à montante do nucleotídeo -5042 do cromossomo 3 do DNA de Arabidopsis thaliana, clone BAC F14D17 (> gi|7671394|emb|AL353992.1|ATF14D17). Determinou-se que o flanco oposto deste inserto é uma borda esquerda logo à jusante do nucle- otídeo ~ 5042 do cromossomo 3 do DNA de Arabidopsis thaliana, clone BAC F14D17 (>gi|7671394|). NMR2: A borda esquerda do inserto ACTTAG está logo a mon- tante do nucleotídeo -931 do DNA genômico de Arabidopsis thaliana, cro- mossomo 5, clone BAC:T32G24 (>gi|4589451 |dbj|AB025642.1 |AB025642).
NMR3: A borda esquerda do inserto ACTTAG está logo a mon- tante do nucleotídeo -51143 do DNA genômico de Arabidopsis thaliana, cromossomo 1, clone BAC:F15H18 (>gi|6684172). O flanco oposto que é uma borda esquerda, está logo a montante do nucleotídeo -51333 do cro- mossômico 1 do DNA de Arabidopsis thaliana, clone BAC:F15H18 (>gi|6684172).
NMR4: A borda esquerda do inserto ACTTAG está logo a mon- tante do nucleotídeo -120310 do DNA genômico de Arabidopsis thaliana, cromossomo 3, clone BAC: F4P12 (>gi|6434215). O flanco oposto que é uma borda esquerda, está logo a jusante do nucleotídeo -120307 no cro- mossômico 3 do do DNA genômico de Arabidopsis thaliana, clone BAC: F4P12 (>gi|6434215).
NMR5: A borda direita do inserto ACTTAG está logo a montante do nucleotídeo -126494 do DNA genômico de Arabidopsis thaliana, cromos- somo 1, clone BAC: F21M12 (>gi|2160155). O flanco oposto que é uma bor- da direita, logo a jusante do nucleotídeo ~ 126507 do cromossomo 1 do DNA de Arabidopsis thaliana, clone BAC: F21M12 (>gi|2160155). EXEMPLO 5
Análise de Identificação e expressão de genes candidatos em plantas ACT- TAG exibindo o fenótipo de resistência patogênica alterada
Genes com os códons de iniciação de tradução em aproxima- damente 10 kbp dos insertos de ACTTAG nas linhagens resistentes a nema- tódeos são considerados estar dentro do "espaço de ativação". As expres- sões desses genes candidatos estão provavelmente reguladas positivamen- te nas linhagens resistentes a nematódeos devido aos elementos intensifi- cadores 35S de CaMV 4 X nos insertos de ACTTAG. Os genes candidatos para linhagens NMR1, NMR2, NMR3, NMR4 e
NMR5 de ACTTAG são listados na coluna 2 da Tabela 2. Esses genes candidatos foram analisados em relação à expres- são alterada em folhas de planta T2 de 30 dias resistente a BASTA crescida sob ciclo de 10 horas de luz/14 horas de escuro em câmara de Conviron. Plantas tipo selvagem crescidas no mesmo plano e, portanto, nas mesmas condições ambientais foram usadas como controles para o ensaio de RT- PCR quantitativa em tempo real com corante verde SYBR. Especificamente, RNA foi extraído de tecidos derivados de plantas que exibem o fenótipo de resistência patogênica e de plantas COL-O tipo selvagem. RT-PCR quantita- tiva em tempo real com corante SYBR green foi realizada usando iniciadores específicos para os genes com IDs de seqüências apresentadas na coluna 3 da Tabela 2 e para um gene de actina expresso constitutivamente (ACT2, controle positivo). Os resultados das análises de expressão dos genes can- didatos em relação as linhagens NMR1, NMR2, NMR3, NMR4 e NMR5 de ACTTAG são mostrados na coluna 5 da Tabela 2. Tabela 2. Análise de expressão dos genes candidatos em relação às linhagens NMR1, NMR2, NMR3, NMR4 e NMR5 de ACTTAG.
<table>table see original document page 42</column></row><table> <table>table see original document page 43</column></row><table> <table>table see original document page 44</column></row><table> EXEMPLO 6
<table>table see original document page 45</column></row><table> <table>table see original document page 46</column></row><table> <table>table see original document page 47</column></row><table> <table>table see original document page 48</column></row><table> <table>table see original document page 49</column></row><table> <table>table see original document page 50</column></row><table> <table>table see original document page 51</column></row><table> <table>table see original document page 52</column></row><table> <table>table see original document page 53</column></row><table> <table>table see original document page 54</column></row><table> <table>table see original document page 55</column></row><table> Tabela 3. -continuação-
<table>table see original document page 56</column></row><table> <table>table see original document page 57</column></row><table> <table>table see original document page 58</column></row><table> <table>table see original document page 59</column></row><table> <table>table see original document page 60</column></row><table> Tabela 3. continuacao-
<table>table see original document page 61</column></row><table> <table>table see original document page 62</column></row><table> <table>table see original document page 63</column></row><table> EXEMPLO 7
Identificação de genes de resistência a nematódeo de Arabidopsis usando um seleção "genética reversa"
Uma seleção "genética reversa" foi usada para identificar genes de resistência a nematódeos (RMN) de Arabidopsis. Nessa abordagem, ge- nes de Arabidopsis foram considerados genes de resistência a nematódeos candidatos. Para determinar se a expressão errônea desses genes causou um fenótipo de resistência a nematódeo, linhagens de ACTTAG com os e- Iementos intensificadores 35S CaMV preditos dentro de 9 kbp ("espaço de ativação") dos códons de iniciação de tradução desses genes foram identificados a partir das 38.090 linhagens ACTTAG com uma disposição de FST descrita no Exemplo 1. Linhagens ACTTAG com insertos próximos aos genes candidatos foram avaliadas em relação a um fenótipo de resistência a nematódeo (Meloidogine javanica) conforme descrito no Exemplo 2. Linha- gens ACTTAG contendo insertos de ACTTAG dentro do "espaço de ativa- ção" de onze genes candidatos foram determinadas ser resistentes a nema- tódeos. Esses genes são listados na Tabela 4.
Os resultados de análises PFAM (Bateman et ai, 1999, Nucleic Acids Res. 27:260-262), e/ou INTERPRO (Mulder et ai, 2003 Nucleie Aeids Res. 31, 315-318; Mulder et ai, 2005 Nueleie Aeids Res. 33:D201-D205) são mostrados na Tabela 4. <table>table see original document page 65</column></row><table> <table>table see original document page 66</column></row><table> <table>table see original document page 67</column></row><table> Tabela 4 continuacao
<table>table see original document page 68</column></row><table> <table>table see original document page 69</column></row><table> <table>table see original document page 70</column></row><table> Tabela 4. -continuação-
<table>table see original document page 71</column></row><table> <table>table see original document page 72</column></row><table> <table>table see original document page 73</column></row><table> <table>table see original document page 74</column></row><table> <table>table see original document page 75</column></row><table> Tabela 4. -continuaçao-
<table>table see original document page 76</column></row><table>
ligaçao a NAD- tABELA 4. continuacao
<table>table see original document page 77</column></row><table> <table>table see original document page 78</column></row><table> EXEMPLO 8
Recapitulação do fenótipo resistente a nematódeo
Genes identificados nas seleções genéticas diretas e reversas foram testados para identificar se superexpressão direta pode conferir resistência a nematódeos. Para realizar isto, os genes listados na coluna 2 das Tabelas 3 e 4 foram clonados em um vetor de transformação de plantas depois do promotor de CsVMV constitutivo e transformados em plantas Arabidopsis usando o método de imersão floral. O vetor de transformação de plantas contém um gene que codifica um marcador selecionável conduzido pelo promotor RE4, para proporcionar resistência a um agente citotóxico, e funciona como um marcador selecionável. Sementes das plantas transfor- madas foram plaqueadas em meio ágar contendo o agente citotóxico. Após10 dias, as plantas transgênicas foram identificadas como plantas verdes sadias e transplantadas para o solo. Plantas não-transgênicas de controle foram germinadas em meio ágar, deixadas crescer por 10 dias e em segui- da transplantadas para o solo. Semente T2 foi coletada de 20 transforman- tes primários contendo cada construto.
Plantas T2 foram testadas em relação à resistência a nematódeos em experimentos replicados. Em cada experimento, aproximadamente 13 sementes T2 de um evento transgênico foram plantadas no solo em uma bandeja de 10 fileira. Cada bandeja continha 8 fileiras semeadas com 8 li- nhagens transgênicas (1 evento por fileira) e 2 fileiras semeadas com se- mentes Col-O tipo selvagem; 1 das fileiras cotendo Col-O será inoculada e funcionará como o controle negativo, a outra não será inoculada e funciona- rá como o controle positivo. As sementes foram estratificadas por 2 dias a4°C e cultivadas em uma câmara de crescimento a 25°C com 60 a 70% de umidade relativa em um ciclo curto de luz do dia de 10 horas de luz e 14 horas de escuro por 8 dias. O solo em torno de cada muda transgênica e as plantas Col-O funcionando como o controle negativo foi inoculado com 5.000 ovos do nematódeo Meloidogine javanica e as plantas foram deixadas cres- cer por mais 40 a 50 dias. Nesse momento, as plantas foram removidas do solo, o sistema radicular foi lavado e o número de galhas por planta é regis- trado. Um sistema de classificação foi desenvolvido para comparar o número de galhas em cada planta. Plantas com 0 a 5 galhas foram dadas uma clas- sificação de 1, plantas com 6 a 10 galhas foram dadas uma classificação de 2, plantas com 11-15 galhas foram dadas uma classificação de 3, plantas com 16 a 20 galhas foram dadas uma classificação de 4 e plantas com mais de 20 galhas foram dadas uma classificação de 5. Em geral, uma planta foi taxada como resistente se apresentasse menos de 20 galhas. Cada planta resistente (apresentando menos de 20 galhas) foi classificada por número de galha em seu sistema radicular. Os genes na Tabela 5 mostraram resultados de recapitulação positivos.
TABELA 5
<table>table see original document page 80</column></row><table>
EXEMPLO 9
Resistência a Nematódeo é conferida por superexpressão de At1q18350
O efeito de superexpressão de At1g18350 (NMR3-A) sobre re- sistência a nematódeo foi testado por cultivar plantas T2 contendo o promo- tor de CsVMV conduzindo a expressão de At1g18350 a partir de 20 eventos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada construto foi testado em 4 experimentos de replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o número de galhas conforme descritos acima. Em relação a cinco dos even- tos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram de forma sig- nificativamente diferente das plantas de controle tipo selvagem inoculadas indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas do que as plantas transgênicas conforme determinados por um teste ANOVA de duas vias (p ≤ 0,05) e indicando que elas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 6 mostra o número de eventos, o valor ρ de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle.
TABELA 6
<table>table see original document page 81</column></row><table> EXEMPLO 10
Resistência a Nematódeo é conferida por superexpressão de At3q53620
O efeito da superexpressão de At3g53620 (NMR4-D) sobre a resistência a nematódeo foi testado por cultivar plantas T2 contendo o pro- motor de CsVMV conduzindo a expressão de At3g53620 a partir de 20 even- tos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada constru- to foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o núme- ro de galhas conforme descritos acima. Em relação a sete dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente diferente das plantas de controle tipo selvagem inoculadas indicando que elas apresentavam significativamente menos galhas do que as plantas transgênicas conforme determinado por um teste ANOVA de duas vias (p <0,05) e indicando que são resistentes a infecção por nematódeo. Tabela 7 mostra o número de eventos, o valor ρ de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de con- trole. TABELA 7
<table>table see original document page 82</column></row><table>
EXEMPLO 11
Resistência a Nematódeo é conferida por superexpressão de At1qQ9960
O efeito da superexpressão de At1g09960 (NM5-F) sobre resis- tência a nematódeos foi testado por cultivar plantas T2 contendo o promotor de CsVMV conduzindo a expressão de At1g09960 a partir de 20 eventos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada construto foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o número de galhas conforme descritos acima. Em relação a onze dos eventos de trans- formação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente dife- rente das plantas de controle tipo selvagem inoculadas indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas transgênicas conforme determinados por um teste ANOVA de duas vias (p ≤ 0,05) e indicando que as mesmas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 8 mostra o número de evento, o valor-p de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle.
TABELA 8
<table>table see original document page 82</column></row><table> TABELA 8 -continuação-
<table>table see original document page 83</column></row><table>
EXEMPLO 12
Resistência a nematódeo é conferida por superexpressão de At1a07930 O efeito da superexpressão de At1g07930 (NMR1002) sobre
resistência a nematódeo foi testado por cultivar plantas T2 contendo o pro- motor de CsVMV conduzindo a expressão de At1g07930 a partir de 20 even- tos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada constru- to foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o nú- mero de galhas conforme descritos acima. Em relação a seis dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente diferente das plantas de controle do tipo selvagem inoculadas, indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas transgênicas conforme determinado por um teste ANOVA de duas vias (p <0,05) e indicando que as mesmas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 9 mostra o número de evento, o valor-p de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle. TABELA 9
<table>table see original document page 84</column></row><table>
EXEMPLO 13
Resistência a nematódeo é conferida por superexpressão de At1g15270
O efeito da superexpressão de At1g15270 (NMR1004) sobre resistência a nematódeo foi testada por cultivar plantas T2 contendo o pro- motor de CsVMV conduzindo a expressão de At1g15270 a partir de 20 even- tos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada constru- to foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o nú- mero de galhas conforme descritos acima. Em relação a dez dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente diferente das plantas de controle do tipo selvagem inoculadas indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas trans- gênicas conforme determinado por um teste ANOVA de duas vias (p < 0,05) e in- dicando que as mesmas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 10 mostra o número do evento, o valor-p de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de con- trole.
TABELA 10
<table>table see original document page 84</column></row><table> TABELA 10 -continuação-
<table>table see original document page 85</column></row><table>
EXEMPLO 14
Resistência a nematódeo é conferida por superexpressão de At2a37220
O efeito da superexpressão de At2g37220 (NMR1005) sobre resistência a nematódeos foi testada por cultivar plantas T2 contendo o pro- motor de CsVMV conduzindo a expressão de At2g37220 a partir de 20 even- tos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada constru- to foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o nú- mero de galhas conforme descrito acima. Em relação a seis dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente diferente das plantas de controle do tipo selvagem inoculadas indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas transgênicas conforme determinado por um teste vias de duas ANOVA (p < 0,05) e indicando que as mesmas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 11 mostra o número de evento, o valor-p de ANOVA, a classificação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle.
TABELA 11
<table>table see original document page 85</column></row><table> TABELA 11 -continuação-
<table>table see original document page 86</column></row><table>
EXEMPLO 15
Resistência a nematódeo é conferida por superexpressão de At4a10340
O efeito da superexpressão de At4g10340 (NMR1008) sobre resistência a nematódeos foi testado por cultivar plantas T2 contendo o promotor de CsVMV conduzindo a expressão de At4g10340 a partir de 20 eventos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada construto foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o número de galhas conforme descrito acima. Em relação a cinco dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significa- tivamente diferente das plantas de controle inoculadas do tipo selvagem in- dicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas transgênicas conforme determinado por um teste ANOVA de duas vias (p < 0,05) e indicando que as mesmas são resistentes a infecção por nematódeos. Tabela 12 mostra o número de evento, o valor ρ de ANOVA, a classificação media das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle.
TABELA 12
<table>table see original document page 86</column></row><table>
EXEMPLO 16
Resistência a nematódeo é conferida por superexpressão de At4q13940
O efeito dA superexpressão de At4g13940 (NMR1009) sobre A resistência a nematódeos foi testada por cultivar plantas T2 contendo o pro- motor de CsVMV conduzindo a expressão de At4g13940 a partir de 20 even- tos de transformação independentes conforme descrito acima. Cada constru- to foi testado em 4 experimentos replicados e as galhas nas raízes de cada planta foram contadas. A cada planta foi dada uma classificação para o nú- mero de galhas conforme descrito acima. Em relação a sete dos eventos de transformação, as plantas transgênicas se classificaram significativamente diferente das plantas de controle do tipo selvagem inoculadas indicando que as plantas apresentavam significativamente menos galhas que as plantas transgênicas conforme determinado por um teste ANOVA de duas vias (p <0,05) e indicando que as mesmas são resistentes a infecção por nemató- deos. Tabela 13 mostra o número de evento, o valor ρ de ANOVA, a classifi- cação média das plantas transgênicas (amostra) e a classificação média das plantas de controle. TABELA 13
<table>table see original document page 87</column></row><table> LISTAGEM DE SEQÜÊNCIA
<110> Wagner, D. Ry Haran, Shoshan
<120> GERAÇÃO DE PLANTAS COM RESISTÊNCIA PATOGÊNICA APER- FEIÇOADA
<13 0> 6616-72537-02
<150> US 60/813,662 <151> 2006-06-13
<160> 88
<170> Patente em versão 3.3 <210> 1 <211> 2196 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 1
atgtctcata tgttcctcag atgcatcggc atttcccaaa tcgcttcata tatgattgct 60
ggaatagttc tagggcctca gctttttgat gtactagaga aatcttcagg gaaactatcc 120
gtggatcctg cgttggatgg aatcgcagcg ttaagatgca tctcggtgtt tggaacacta 180
atgtttacgt ttctaatgac tgttagaacc agcaggcgag tggcgttcca tagcggaaaa 240
ttgcccgttg tgatcgggat cgtgtccttc tttgctcctc tgtttggtct cggtttccag 300
aatttttttt ctgacaacat cgaccctcac tacatgcctc taactaaagc cctaggtgag 360
cgcactgcga ttgtcataac tcaatcttcg atacttttgc cttccactac atatatcttg 420
ctagagctca agatcatcaa ctccgagcta ggtcgccttg cattgtctgc atgtgtcatc 480
aacgacatct tggggatttt ttccatgata gttgcctcta tacaagcgac ctacattcat 540
gtttcacatg caacagccta tcgtgacact gtcgcggtga tcatcttttt tctcgtcgtc 600
tttcttgttt ttaagcctat ggtgcaatgg gtcatagacc gcacaccgga agacaagcca 660
gtggaggata tgtacattca tgccgtgatt attaccgcat tggcttccgc tgcttatttt 720
gtgtttttca acatgaaata tattttagga ccattaatga ttggcatcat cataccagag 780
ggtccaccat taggatcggc tctagaggct aagtttgaga ggctcacaat gaacgtgttc 840
ttaccaatct caatcacatt cagcgcgatg agatgtgatg gagcaaggat ccttagccag 900
ttcaatgaca tcttcttcaa catcttccta acatttctta tacttgtcat aaaactggtc 960
gcatgccttg caccttgctt gtactacaag ttacctctca gtgaatcctt ggctgtttcc 1020
ttcatcttga gctacaaaag ttttgctgat tttgttctct atgaagctgt attagacgac 1080
acgtacatat cgcaagccac ttactcgttc ttaatcttat attcgctact aaatgccggg 1140
attgtcccta ctgtcttaag gaggatgtac gatccaagaa gaaagtacgt taattaccag 1200 aaaagggaca tattgcatct agaacgaaac tcagatcttc gaattctaac ttgtttgcac 1260 aaaccagaaa acgtctcaga gaccatagca ttcctacaat tgttgtcctc accgaaccta 1320
gacttcccta tcgcggttac agttctccac cttgtgaagc tcgttggtca gataaaccct 1380
atcatagtct cacacgacaa gaaattgaaa cggcttaaca aagactcata catccatacc 1440
gcaaaccttg cctttagaca attcgtgtta gaaagcttag agtctgtaac cgtgacaacg 1500
ttcactgcgt tctcgcatga aaacttgatg cacgaagaca tttgtacact tgcacttgac 1560
aaaacaacat cgatgattgt cgtcccatcg gggaggaaat ggactgtaga tgggttattc 1620
gagtctgaca acactgctat aagacatcta aaccagtcgt tactcgatcg tgcgccttgt 1680
tctatcggca tactagtaga ccgtggacaa ttctcgcgaa aaagtattgt aacgagcaaa 1740
aaaaggtaca tcattgatgt tggtgtgctc ttcattggag gcaaagacga tagggaagca 1800
ctatcattgg tgaagaggat gaaaaataac ccgaggatcc gtgtaaccgt gatccgactc 1860
gtcttcgacc atgaaataga gtcagattgg gattatattc ttgataacga aggcttaaag 1920
gatttgaaga gtactgaaga caacaaagat attgattata tagagaggat tgtgactagt 1980
agtgttgagg tagtcaaagc tgtccaattg cttgcagaag agtacgatct aatggtggtc 2040
gggagagatc atgatatgac atcacaagac ttatcaggac taatggaatg ggtcgaacta 2100
ccagagttag gtgtcatcgg ggatttgctg gcggctagag atctaagctc taaggtttcg 2160
gttttagtag ttcaacaaca acaacaacga acgtga 2196
<210> 2
<211> 731
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 2
Met Ser His Met Phe Leu Arg Cys Ile Gly Ile Ser Gln Ile Ala Ser 1 5 ίο 15
Tyr Met Ile Ala Gly Ile Val Leu Gly Pro Gln Leu Phe Asp Val Leu 20 25 30
Glu Lys Ser Ser Gly Lys Leu Ser Val Asp Pro Ala Leu Asp Gly Ile 35 40 45
Ala Ala Leu Arg Cys Ile Ser Val Phe Gly Thr Leu Met Phe Thr Phe 50 55 60
Leu Met Thr Val Arg Thr Ser Arg Arg Val Ala Phe His Ser Gly Lys 65 70 75 80
Leu Pro Val Val Ile Gly Ile Val Ser Phe Phe Ala Pro Leu Phe Gly 85 90 95 Leu Gly Phe Gln Asn Phe Phe Ser Asp Asn Ile Asp Pro His Tyr Met
100 105 110
Pro Leu Thr Lys Ala Leu Gly Glu Arg Thr Ala Ile Val Ile Thr Gln 115 120 125
Ser Ser Ile Leu Leu Pro Ser Thr Thr Tyr Ile Leu Leu Glu Leu Lys 130 135 140
Ile Ile Asn Ser Glu Leu Gly Arg Leu Ala Leu Ser Ala Cys Val Ile 145 150 155 160
Asn Asp Ile Leu Gly Ile Phe Ser Met Ile Val Ala Ser Ile Gln Ala 165 170 175
Thr Tyr Ile His Val Ser His Ala Thr Ala Tyr Arg Asp Thr Val Ala 180 185 190
Val Ile Ile Phe Phe Leu Val Val Phe Leu Val Phe Lys Pro Met Val 195 200 205
Gln Trp Val Ile Asp Arg Thr Pro Glu Asp Lys Pro Val Glu Asp Met 210 215 220
Tyr Ile His Ala Val Ile Ile Thr Ala Leu Ala Ser Ala Ala Tyr Phe
225 230 235 240
Val Phe Phe Asn Met Lys Tyr Ile Leu Gly Pro Leu Met Ile Gly Ile
245 250 255
Ile Ile Pro Glu Gly Pro Pro Leu Gly Ser Ala Leu Glu Ala Lys Phe 260 265 270
Glu Arg Leu Thr Met Asn Val Phe Leu Pro Ile Ser Ile Thr Phe Ser 275 280 285
Ala Met Arg Cys Asp Gly Ala Arg Ile Leu Ser Gln Phe Asn Asp Ile 290 295 300
Phe Phe Asn Ile Phe Leu Thr Phe Leu Ile Leu Val Ile Lys Leu Val 305 310 315 320
Ala Cys Leu Ala Pro Cys Leu Tyr Tyr Lys Leu Pro Leu Ser Glu Ser 325 330 335
Leu Ala Val Ser Phe Ile Leu Ser Tyr Lys Ser Phe Ala Asp Phe Val 340 345 350
Leu Tyr Glu Ala Val Leu Asp Asp Thr Tyr Ile Ser Gln Ala Thr Tyr 355 360 365 Ser Phe Leu Ile Leu Tyr Ser Leu Leu Asn Ala Gly Ile Val Pro Thr 370 375 380
Val Leu Arg Arg Met Tyr Asp Pro Arg Arg Lys Tyr Val Asn Tyr Gln 385 390 395 400
Lys Arg Asp Ile Leu His Leu Glu Arg Asn Ser Asp Leu Arg Ile Leu 405 410 415
Thr Cys Leu His Lys Pro Glu Asn Val Ser Glu Thr Ile Ala Phe Leu 420 425 430
Gln Leu Leu Ser Ser Pro Asn Leu Asp Phe Pro Ile Ala Val Thr Val 435 440 445
Leu His Leu Val Lys Leu Val Gly Gln Ile Asn Pro Ile Ile Val Ser 450 455 460
His Asp Lys Lys Leu Lys Arg Leu Asn Lys Asp Ser Tyr Ile His Thr 465 470 475 480
Ala Asn Leu Ala Phe Arg Gln Phe Val Leu Glu Ser Leu Glu Ser Val 485 490 495
Thr Val Thr Thr Phe Thr Ala Phe Ser His Glu Asn Leu Met His Glu 500 505 510
Asp Ile Cys Thr Leu Ala Leu Asp Lys Thr Thr Ser Met Ile Val Val 515 520 525
Pro Ser Gly Arg Lys Trp Thr Val Asp Gly Leu Phe Glu Ser Asp Asn 530 535 540
Thr Ala Ile Arg His Leu Asn Gln Ser Leu Leu Asp Arg Ala Pro Cys 545 550 555 560
Ser Ile Gly Ile Leu Val Asp Arg Gly Gln Phe Ser Arg Lys Ser Ile 565 570 575
Val Thr Ser Lys Lys Arg Tyr Ile Ile Asp Val Gly Val Leu Phe Ile 580 585 590
Gly Gly Lys Asp Asp Arg Glu Ala Leu Ser Leu Val Lys Arg Met Lys 595 600 605
Asn Asn Pro Arg Ile Arg Val Thr Val Ile Arg Leu Val Phe Asp His 610 615 620
Glu Ile Glu Ser Asp Trp Asp Tyr Ile Leu Asp Asn Glu Gly Leu Lys 625 630 635 640
Asp Leu Lys Ser Thr Glu Asp Asn Lys Asp Ile Asp Tyr Ile Glu Arg 645 650 655
Ile Val Thr Ser Ser Val Glu Val Val Lys Ala Val Gln Leu Leu Ala 660 665 670
Glu Glu Tyr Asp Leu Met Val Val Gly Arg Asp His Asp Met Thr Ser 675 680 685
Gln Asp Leu Ser Gly Leu Met Glu Trp Val Glu Leu Pro Glu Leu Gly 690 695 700
Val Ile Gly Asp Leu Leu Ala Ala Arg Asp Leu Ser Ser Lys Val Ser 705 710 715 720
Val Leu Val Val Gln Gln Gln Gln Gln Arg Thr 725 730
<210> 3
<211> 333
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 3 atggatatgc tagaggatga aatgagcctt tgcaaagtca tgatgctcta tttagcagag 60 ggacgatcgc tagagttaat agagaatata ttcagatctt ccaaaacgaa aggaagagtg 120 atatataaca ccatgatctc ggtgtatgga aaacactttg ctgagaatgc acaccagttg 180 tttctggaga tggtcaacaa cagaattcgt ctcagcggtc acaccttcaa gtatcatcta 240 gaagcatgga cgatagcctg caaaccacaa aggactcttg aattcttgca tttcatgata 300 ttgtttttta taaagggtaa gaaaaagatg tag 333
<210> 4 <211> 110 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 4
Met Asp Met Leu Glu Asp Glu Met Ser Leu Cys Lys Val Met Met Leu !5 10 15
Tyr Leu Ala Glu Gly Arg Ser Leu Glu Leu Ile Glu Asn Ile Phe Arg 20 25 30
Ser Ser Lys Thr Lys Gly Arg Val Ile Tyr Asn Thr Met Ile Ser Val 35 40 45 Tyr Gly Lys His Phe Ala Glu Asn Ala His Gln Leu Phe Leu Glu Met 50 55 60
Val Asn Asn Arg Ile Arg Leu Ser Gly His Thr Phe Lys Tyr His Leu 65 70 75 80
Glu Ala Trp Thr Ile Ala Cys Lys Pro Gln Arg Thr Leu Glu Phe Leu 85 90 95
His Phe Met Ile Leu Phe Phe Ile Lys Gly Lys Lys Lys Met 100 105 110
<210> 5 <211> 1387 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 5 agtccatgaa atttcactac ttttataact ctctctccct ccttcttctt cttccataaa 60 actcttcact aaacctaaag atctcttaag cttaattttg caagatcatg gaccaaagca 120 attctcttct tagctggact tacttctctc atggaaagac aacggaagag ctaagacaga 180 ctctcgtgta cacaacaatg gagttagaac aaacaaagct tgtggctcac gaggagctaa 240 ggaagagaga tgaacaactg atccacctag aagatgtttt aaccaaaacc ctcaaagaaa 300 gagacgaagc tctagagaaa tataatcatc tcctcttaaa taatctctta cttcaacaga 360 agcagcaaca gaatcagaat cagaaacaag aacttgtcac tcctccttta tcaggagctt 420 caagtattat tgaagacgag caagttcagc cacagcagcc gcagcttaac tcaaacaaga 480 gcttttcgtc ttcagacact gaagaaagca tcatgtcacc atcagtgatt gatccagtga 540 cgatgaacca acagattgaa gtctcaggag atgagatgtt ggctacattg ttgcctgaca 600 aaccactgcc tgaaaaggga aaactcttac aagctgttat caaggcaggt cctttgcttc 660 agacacttct cttagctggt cctctgcctc aatggcgcca cccaccgcct ccacttgaga 720 cctctgagat ccctcctgtc accattccac tacctcagtt tcagaacaat ggctgtggga 780 actccaacaa gaaaagggca ttctcaatct cagatgaaac ttattcagag actaagtatc 840 agaaagttct tctccattaa ccggctactg atctttttat ccttactcaa caaaatacta 900 atatatagtc tttctaatat accaatatac agatcacttt tcagtattaa tctcacttag 960 ggtactagtg agagtgatct ttttagtcag tttgttgtag atagagcttg atttgaattt 1020 gtggagagtg aatctgatcc atttagggtt tagatctaga gagtgatggg aatgaaactc 1080 ccctggttta actcatactc gaacatgagt gtttttttta ccaagtgaga gagttttgct 1140 atttgctttt cttttgttgt gcttattgat ttcttgtttt gtttcctaaa cccaatttta 1200 cattcatgtt ttggctccat gaatgtaaac ttattggggt gttttgtgtt ttttttcttc 1260 ctttgtaatc caatttcacc ttggtgtaaa atactaaaaa tctaaaggaa atgtgatgtt 1320 tctgttttca ggaaatgtaa tgtatagtat gtaaagactt tgattatata tatataatat 1380 atatact 1387
<210> 6 <211> 250 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 6
Met Asp Gln Ser Asn Ser Leu Leu Ser Trp Thr Tyr Phe Ser His Gly 1 5 10 15
Lys Thr Thr Glu Glu Leu Arg Gln Thr Leu Val Tyr Thr Thr Met Glu 20 25 30
Leu Glu Gln Thr Lys Leu Val Ala His Glu Glu Leu Arg Lys Arg Asp 35 40 45
Glu Gln Leu Ile His Leu Glu Asp Val Leu Thr Lys Thr Leu Lys Glu 50 55 60
Arg Asp Glu Ala Leu Glu Lys Tyr Asn His Leu Leu Leu Asn Asn Leu 65 70 75 80
Leu Leu Gln Gln Lys Gln Gln Gln Asn Gln Asn Gln Lys Gln Glu Leu 85 90 95
Val Thr Pro Pro Leu Ser Gly Ala Ser Ser Ile Ile Glu Asp Glu Gln 100 105 110
Val Gln Pro Gln Gln Pro Gln Leu Asn Ser Asn Lys Ser Phe Ser Ser 115 120 125
Ser Asp Thr Glu Glu Ser Ile Met Ser Pro Ser Val Ile Asp Pro Val 130 135 140
Thr Met Asn Gln Gln Ile Glu Val Ser Gly Asp Glu Met Leu Ala Thr 145 150 155 160
Leu Leu Pro Asp Lys Pro Leu Pro Glu Lys Gly Lys Leu Leu Gln Ala 165 170 175
Val Ile Lys Ala Gly Pro Leu Leu Gln Thr Leu Leu Leu Ala Gly Pro 180 185 190
Leu Pro Gln Trp Arg His Pro Pro Pro Pro Leu Glu Thr Ser Glu Ile 195 200 205 Pro Pro Val Thr Ile Pro Leu Pro Gln Phe Gln Asn Asn Gly Cys Gly 210 215 220
Asn Ser Asn Lys Lys Arg Ala Phe Ser Ile Ser Asp Glu Thr Tyr Ser 22S 230 235 240
Glu Thr Lys Tyr Gln Lys Val Leu Leu Ηίε 245 25C
<210> 7
<211> 219
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 7
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<210> 8 <211> 72 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <4 00> 8
Met Thr Thr Leu Ala Thr Val Val Ala Pro Thr Thr Val Val Ala Ser 15 10 15
Ser Gly Asp Gly Gly Cys Ser Gly Asp Asn Gly Ser Ser Gly Asp Asn 20 25 30
Gly Asn Pro Asn Asn Gly Val Val Ala Pro Val Gly Asn Ser Gly Gly 35 40 45
Gly Gly Gly Gly Asp Asp Gly Gly Asp Val Gly Gly Gly Asp Asp Gly 50 55 60
Gly Gly Gly Gly Val Trp Leu Trp 65 70
<210> 9 <211> 2634 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 9
atctaatggc catttaatcc gccagagaag aagaagaaga agaaaataga ttagggtttt 60 tcattccaga atagccctaa tccaaattcg aaatctttct tctgattttg atctttccga 120
tcatgtcatc ggtctgtgtt aacgaagcat taaccgatga cgagctgaga tgggtattgt 180
cgagactaga cagtgataaa gataaggaag tgtttggttt ggtctgcaag aggtggctaa 240
atctgcagag taccgaccgg aagaagctag cggcacgtgc tggtccacat atgctccgcc 300
gtctcgcttc taggttcact caaatcgtcg aattggattt gtctcagtca atttctaggt 360
ccttttatcc aggagttact gattctgacc tcgctgttat ctctgaggga ttcaagtttc 420
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tgataatcgg tggatgcaga gatatctctg acgaatctat catgttactg gcagattcct 960
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taaaggttag caactgcacg aagatcacag taacagggat aggcaagctt ttggacaaat 1200
gcagttccct ggagtatata gatgtaaggt ctcttccaca tgtgacagaa gtgagatgca 1260
gtgaagctgg tttggagttc ccaaaatgtt gtaaagttaa cttttcaggt agtttaaccg 1320
agccagatgt tctgctttga tcgttgctgt tgggatctcg ttacttgtct gttgggaaat 1380
tctggtaacc ctaaaccttc tgtgatctct ctatctgtct cgtgtatggg cacactcata 1440
gcttatagtt catcagtgag tcttctctca agctcttgta tatttttgtg cattaaatat 1500
ttggttgtag cggctgcttg attattcttc agttgctttg caaagtgtgt gtagttgttg 1560
ttgaacctgc ttctccttaa gagtaaaaaa aggtcagcac ttgatatttg taaactctga 1620
ttctcaatgt actgatttct taatacttga ttcatcccat tacacttctt ttgacatagt 1680
ttggtgcata aaagaactat gaattaaggt taacagatga gatcaactaa atatattcat 1740
ctctttctcg tgtctacaat ggaaaccaaa gtgggtaaag caaaaaaaaa gaatttgtga 1800
gtttgtacaa acattctctg actgaaacag gggaaagtag aaatgaaata tttcttgttc 1860
cacctgcact aattagctcc gtcagagaaa accactgcgg tttattgctc atcattgttt 1920
agcgctttct cgagacagtt gaaagctttc tggtagctca cgaatcccat gaaccagaag 1980
tcgaagttat cgattgtgac tatttcaagg tacttttgag atggcttctt tgtgttctga 2040
ctctggttca ctccattgat cttgcacaat gggattgaga ctttgtagtg aaccctactg 2100 agaactcctt gaggagaagc aaccttgatc gatctttcac tgcaaaatgc aatcttcttt 2160 gatgagatga agaggaggcc tgcgatggga cctgctgttg tggatagata gcattggtac 2220 gccttgaaga gtttctcttg atcgcagacc ttgaagagtc gcttataaat cttctctaag 2280 cctcccattt gaaggatctt agctcccaag gatagctttc tcttgactgt ttcagttagc 2340 tttggtccta gtttgtcctg atctctagct ccgtttgtga agctatcggt tttcttcttt 2400 cgcagcatcg attttccttt gcctgtcaaa tatgaaacct ttgaagaagt tgggatttga 2460 tggttgttga tggaagctgg gtcaggcaag taactcatcg tatcagtctt ggctgcagga 2520 aatgcaataa cttgttggtg aactctgctc agtgtcatct tggaggattg agtagtgatc 2580 ttgattcttg attttgtgaa agagaaagag agagagagat tgtgagtgat ggtt 2634
<210> 10
<211> 405
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 10
Met Ser Ser Val Cys Val Asn Glu Ala Leu Thr Asp Asp Glu Leu Arg
1 5 10 15
Trp Val Leu Ser Arg Leu Asp Ser Asp Lys Asp Lys Glu Val Phe Gly 20 25 30
Leu Val Cys Lys Arg Trp Leu Asn Leu Gln Ser Thr Asp Arg Lys Lys 35 40 45
Leu Ala Ala Arg Ala Gly Pro His Met Leu Arg Arg Leu Ala Ser Arg 50 55 60
Phe Thr Gln Ile Val Glu Leu Asp Leu Ser Gln Ser Ile Ser Arg Ser 65 70 75 80
Phe Tyr Pro Gly Val Thr Asp Ser Asp Leu Ala Val Ile Ser Glu Gly 85 90 95
Phe Lys Phe Leu Arg Val Leu Asn Leu His Asn Cys Lys Gly Ile Thr 100 105 110
Asp Thr Gly Leu Ala Ser Ile Gly Arg Cys Leu Ser Leu Leu Gln Phe 115 120 125
Leu Asp Val Ser Tyr Cys Arg Lys Leu Ser Asp Lys Gly Leu Ser Ala 130 135 140
Val Ala Glu Gly Cys His Asp Leu Arg Ala Leu His Leu Ala Gly Cys 145 150 155 160 Arg Phe Ile Thr Asp Glu Ser Leu Lys Ser Leu Ser Glu Arg Cys Arg 165 170 175
Asp Leu Glu Ala Leu Gly Leu Gln Gly Cys Thr Asn Ile Thr Asp Ser 180 185 190
Gly Leu Ala Asp Leu Val Lys Gly Cys Arg Lys Ile Lys Ser Leu Asp 195 200 205
Ile Asn Lys Cys Ser Asn Val Gly Asp Ala Gly Val Ser Ser Val Ala 210 215 220
Lys Ala Cys Ala Ser Ser Leu Lys Thr Leu Lys Leu Leu Asp Cys Tyr 225 230 235 240
Lys Val Gly Asn Glu Ser Ile Ser Ser Leu Ala Gln Phe Cys Lys Asn 245 250 255
Leu Glu Thr Leu Ile Ile Gly Gly Cys Arg Asp Ile Ser Asp Glu Ser 260 265 270
Ile Met Leu Leu Ala Asp Ser Cys Lys Asp Ser Leu Lys Asn Leu Arg 275 280 285
Met Asp Trp Cys Leu Asn Ile Ser Asp Ser Ser Leu Ser Cys Ile Leu 290 295 300
Lys Gln Cys Lys Asn Leu Glu Ala Leu Asp Ile Gly Cys Cys Glu Glu 305 310 315 320
Val Thr Asp Thr Ala Phe Arg Asp Leu Gly Ser Asp Asp Val Leu Gly
325 330 335
Leu Lys Val Leu Lys Val Ser Asn Cys Thr Lys Ile Thr Val Thr Gly 340 345 350
Ile Gly Lys Leu Leu Asp Lys Cys Ser Ser Leu Glu Tyr Ile Asp Val 355 360 365
Arg Ser Leu Pro His Val Thr Glu Val Arg Cys Ser Glu Ala Gly Leu 370 375 380
Glu Phe Pro Lys Cys Cys Lys Val Asn Phe Ser Gly Ser Leu Thr Glu 385 390 395 400
Pro Asp Val Leu Leu 405 <210> 11 <211> 1020 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 11
atgactcatc ctttaccaca aagggtctca attcagagct tcgtttcaac tgcctcttgt 60
ctctttgttt ttccctttaa ataccttccc acttacacgg tttcatcatc aaccatcact 120
cacaatctct ctctctcttt ctctttcaca aaatcaagaa tcaagatcac tactcaatcc 180
tccaagatga cactgagcag agttcaccaa caagttattg catttcctgc agccaagact 240
gatacgatga gttacttgcc tgacccagct tccatcaaca accaccaaat cccaacttct 300
tcaaaggttt catatttgac aggcaaagga aaatcgatgc tgcgaaagaa gaaaaccgat 3 60
agcttcacaa acggagctag agatcaggac aaactaggac caaagctaac tgaaacagtc 420
aagagaaagc tatccttggg agctaagatc cttcaaatgg gaggcttaga gaagatttat 480
aagcgactct tcaaggtctg cgatcaagag aaactcttca aggcgtacca atgctatcta 540
tccacaacag caggtcccat cgcaggcctc ctcttcatct catcaaagaa gattgcattt 600
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ttcgtgagct accagaaagc tttcaactgt ctcgagaaag cgctaaacaa tgatgagcaa 840
taaaccgcag tggttttctc tgacggagct aattagtgca ggtggaacaa gaaatatttc 900
atttctactt tcccctgttt cagtcagaga atgtttgtac aaactcacaa attctttttt 960
tttgctttac ccactttggt ttccattgta gacacgagaa agagatgaat atatttagtt 1020
<210> 12 <211> 280 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 12
Met Thr His Pro Leu Pro Gln Arg Val Ser Ile Gln Ser Phe Val Ser
IC 15
Thr Ala Ser Cys Leu Phe Val Phe Pro Phe Lys Tyr Leu Pro Thr Tyr 20 25 30
Thr Val Ser Ser Ser Thr Ile Thr His Asn Leu Ser Leu Ser Phe Ser 35 40 45
Phe Thr Lys Ser Arg Ile Lys Ile Thr Thr Gln Ser Ser Lys Met Thr 50 55 60 Leu Ser Arg Val His Gln Gln Val Ile Ala Phe Pro Ala Ala Lys Thr 65 70 75 80
Asp Thr Met Ser Tyr Leu Pro Asp Pro Ala Ser Ile Asn Asn His Gln 85 90 95
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Met Leu Arg Lys Lys Lys Thr Asp Ser Phe Thr Asn Gly Ala Arg Asp
115 120 125
Gln Asp Lys Leu Gly Pro Lys Leu Thr Glu Thr Val Lys Arg Lys Leu
130 135 140
Ser Leu 145 Gly Ala Lys Ile 150 Leu Gln Met Gly Gly 155 Leu Glu Lys Ile Tyr 160 Lys Arg Leu Phe Lys Val 165 Cys Asp Gln Glu 170 Lys Leu Phe Lys Ala 175 Tyr Gln Cys Tyr Leu Ser Thr 180 Thr Ala Gly 185 Pro Ile Ala Gly Leu 190 Leu Phe Ile Ser Ser Lys Lys Ile 195 Ala Phe 200 Cys Ser Glu Arg Ser 205 Ile Lys Val Ala Ser 210 Pro Gln Gly Val Leu Ser 215 Arg Val His Tyr 220 Lys Val Ser Ile Pro Leu 225 Cys Lys Ile Asn 230 Gly Val Asn Gln Ser 235 Gln Asn Thr Lys Lys 240 Pro Ser Gln Lys Tyr Leu 245 Glu Ile Val Thr 250 Ile Asp Asn Phe Asp 255 Phe Trp Phe Met Gly Phe Val 260 Ser Tyr Gln 265 Lys Ala Phe Asn Cys 270 Leu Glu Lys Ala Leu Asn Asn Asp 275 Glu Gln 280 <210> 13 <211> 958 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana <400> 13
cacaatttct ctctctctct ctcgttctca caagatcaag aatatcaaga aacaagatca 60
cttctcaatc ctcgaagatg acattgagca gagttcatca acaagttatt gcatttcctg 12C ctgtcaatac tgctccggtg ggttacttgc ctgatccagc ttccatcaac aagcttcaaa 180 tcccaacttc ttcaaaggtt tcgatgcttc aaaagaagaa aaccgatagc ttcacaaacg 240 gagcaagaga tcaggacaag ttaggaccca agctaaccga aacagtaaag agaaagctat 300 ccttgggagc taagatcctt caaatgggag gcttagagaa gatctataag cgactcttca 360 aggtctgcga taaagagaaa ctcttcaagg cgtaccaatg ttacctatcg acaacagaag 420 gttccattgc gggcctgctc ttcatctcat caaagaagat tgccttctgt agcgaaagat 480 cgatcaaggt gacttctcct caaggagatc tcactagggt tcactacaaa gtctcaatcc 540 ccttgtgcaa gatcaatgga gtgaaccaga gtcagaacac gaagaaacca tctcagaggt 600 acctagaagt agtcacagtc gataactatg acttctggtt catgggattc gtgagctacc 660 agaaagcttt caactgtctc gagaaagcgc taaacgagga tgagcaataa acggaggagc 720 tactaattag tgcatggtgg aaaaagaaat atatcatttc tattttcacc tgtttcaatc 780 agggaatgtt aggagagaac ctagtagaga ctgacaatat tgtttgtaca aactcaattc 840 ttattttcat tgtattttgc tttttggttt ctattgtaga aacgagaaag aaattaatat 900 acttagccga tttcatcagt tttccttaat aaatagtttt cttttgcacc aaattaca 958
<210> 14 <211> 210 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 14
Met Thr Leu Ser Arg Val His Gln Gln Val Ile Ala Phe Pro Ala Val 15 10 15
Asn Thr Ala Pro Val Gly Tyr Leu Pro Asp Pro Ala Ser Ile Asn Lys 20 25 30
Leu Gln Ile Pro Thr Ser Ser Lys Val Ser Met Leu Gln Lys Lys Lys 35 40 45
Thr Asp Ser Phe Thr Asn Gly Ala Arg Asp Gln Asp Lys Leu Gly Pro 50 55 60
Lys Leu Thr Glu Thr Val Lys Arg Lys Leu Ser Leu Gly Ala Lys Ile 65 70 75 80
Leu Gln Met Gly Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Lys Arg Leu Phe Lys Val 85 90 95
Cys Asp Lys Glu Lys Leu Phe Lys Ala Tyr Gln Cys Tyr Leu Ser Thr 100 105 110 Thr Glu Gly Ser Ile Ala Gly Leu Leu Phe Ile Ser Ser Lys Lys Ile 115 120 125
Ala Phe Cys Ser Glu Arg Ser Ile Lys Val Thr Ser Pro Gln Gly Asp 130 I35 14Q
Leu Thr Arg Val His Tyr Lys Val Ser Ile Pro Leu Cys Lys Ile Asn 145 1^O 155 I60
Gly Val Asn Gln Ser Gln Asn Thr Lys Lys Pro Ser Gln Arg Tyr Leu 165 170 175
Glu Val Val Thr Val Asp Asn Tyr Asp Phe Trp Phe Met Gly Phe Val 180 185 190
Ser Tyr Gln Lys Ala Phe Asn Cys Leu Glu Lys Ala Leu Asn Glu Asp 195 200 205
Glu Gln 210
<210> 15 <211> 941 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 15
atcactcaca atctctctct cttactcttt cacaaaatca agaatcaaga tcactactca 60
attctccaag atgacattga gcagagttca ccaacaactc attacatttc ctgccgtcaa 120 gacttctccg gcgggttact tgcctgatcc agcttccatc aacaagcttc aaatcccaac 180 ttcttcaaag ttttcttttc taacaggcaa aggaaaatcg atgctacgaa agaagaaaaa 240 cgatagcttc acaaacggag ttagagatca ggacaagtta ggaccaaagc taaccgaaac 3 00 agtcaagaga aaactatcct tgggagctag gatccttcaa atgggaggct tagagaagat 3 60 ctataaacga ctctttaagg tcagcgatga agagaaactc ttcaaggcgt accaatgcta 42 0 cctatccaca accgcaggtc ccatcgctgg cctactcttc atatcatcaa agaaaattgc 480 attctgcagc gaaagatcga tcaaggtggc ttctcctcaa ggagagctca atagggttca 540 ctacaaagtc tcaatcccct tgtgcaagat caatggagtg aaccagagtc aaaacacaac 600 gaagccatct cagaagtacc ttgaagtagt cacggtcgac ggctttgact tctggttcat 660 gggattcttg agctaccaaa aagctttcaa ctgcctcgag caagcgcttt ctcttagctt 720 caagcaatga taagccaaga tatattgctt ccattgagga gctaattagt gtgggtaaaa gaggaaatat ttcatttcac tttaacctac ttcaatcaga ttatgttagg aaatgcccta gaaaccattg acaatattgt acaaactcat tttttttctt ttcttatatc tcttttgttc ttcatcgtta acatgagcaa gagatttgaa tatatttagt t
780 840 900 941 <210> 16 <211> 219 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 16
Met Thr Leu Ser Arg Val His Gln Gln Leu Ile Thr Phe Pro Ala Val 15 10 15
Lys Thr Ser Pro Ala Gly Tyr Leu Pro Asp Pro Ala Ser Ile Asn Lys 20 25 30
Leu Gln Ile Pro Thr Ser Ser Lys Phe Ser Phe Leu Thr Gly Lys Gly 35 40 45
Lys Ser Met Leu Arg Lys Lys Lys Asn Asp Ser Phe Thr Asn Gly Val 50 55 60
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Lys Leu Ser Leu Gly Ala Arg Ile Leu Gln Met Gly Gly Leu Glu Lys 85 90 95
Ile Tyr Lys Arg Leu Phe Lys Val Ser Asp Glu Glu Lys Leu Phe Lys 100 105 HO
Ala Tyr Gln Cys Tyr Leu Ser Thr Thr Ala Gly Pro Ile Ala Gly Leu
115 120 125
Leu Phe Ile Ser Ser Lys Lys Ile Ala Phe Cys Ser Glu Arg Ser 11« 130 135 140
Lys Val Ala Ser Pro Gln Gly Glu Leu Asn Arg Val His Tyr Lys Val 145 150 155 160
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Thr Lys Pro Ser Gln Lys Tyr Leu Glu Val Val Thr Val Asp Gly Phe 180 185 190
Asp Phe Trp Phe Met Gly Phe Leu Ser Tyr Gln Lys Ala Phe Asn Cys 195 200 205
Leu Glu Gln Ala Leu Ser Leu Ser Phe Lys Gln 210 215 <210> 17
<211> 940
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 17
atgaatggga gagttagaac taattttgag aggtttctcg aatgttcatc tccacgtgtc 60
ccgattcaat tttatactca ggcaagggga tcgtcttctt cttcaccaat agctttggga 120
gctattgaag aagaagaagt gagaaagcct cgcatcgtcc tcaatgatat ttggtctgcc 180
tgtaaaaact ggagcactgt tggtatcgaa gtccctcttt cgctggaaaa cttcgactcc 240
gatgttaaac agtactataa tccttcactc tccgccattc agatctttac catcaaaccc 300
ttctctgatg attcaaggag ctctgccatt gggatagatg gtacagagac aggatctgct 360
ataactgact ctgacagcaa cggcaagctt cagtgtttgg atgctggtga cttgggctac 420
ctttattttc aatataatga ggtagaaagg ccatttgata ggtttcctct cactttcaag 480
atggctgacc tagctgagga gcacactgga ctgtctagtc tgacgagttc agatctttct 540
ccaaatagct ggatttcgat agcttggtat cccatttatc caattccacc agtgataggc 600
gtggacggga tatctgccgc tttcctaacg taccatttat tgaagccaaa ctttccagaa 660
acaattggta aggatgataa ggggaatgaa caaggagagt caagtacacc agaagttcta 720
cttcctccat ttggagcaat gacttacaag gcctttggta acctgtggat gatgcctggg 780
acatcagatt atcagaacag agagatgaat gaagaatctg ctgactcgtg gctgagaaaa 840
cgcggcttct cccacagcga tttcaacttc tttatgtccc gtaagtttta cggcggaccc 900
tattaatgcc atcttgcagg tgaaatgcta agcctaacaa 940
<210> 18
<211> 301
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 18
Met Asn Gly Arg Val Arg Thr Asn Phe Glu Arg Phe Leu Glu Cys Ser 1 5 10 15
Ser Pro Arg Val Pro Ile Gln Phe Tyr Thr Gln Ala Arg Gly Ser Ser 20 25 30
Ser Ser Ser Pro Ile Ala Leu Gly Ala Ile Glu Glu Glu Glu Val Arg 35 40 45
Lys Pro Arg Ile Val Leu Asn Asp Ile Trp Ser Ala Cys Lys Asn Trp 50 55 60
Ser Thr Val Gly Ile Glu Val Pro Leu Ser Leu Glu Asn Phe Asp Ser 65 70 75 80 Asp Val Lys Gln Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Ser Ala Ile Gln Ile Phe 85 90 95
Thr Ile Lys Pro Phe Ser Asp Asp Ser Arg Ser Ser Ala Ile Gly Ile 100 105 110
Asp Gly Thr Glu Thr Gly Ser Ala Ile Thr Asp Ser Asp Ser Asn Gly 115 120 125
Lys Leu Gln Cys Leu Asp Ala Gly Asp Leu Gly Tyr Leu Tyr Phe Gln 130 135 140
Tyr Asn Glu Val Glu Arg Pro Phe Asp Arg Phe Pro Leu Thr Phe Lys 145 150 155 160
Met Ala Asp Leu Ala Glu Glu His Thr Gly Leu Ser Ser Leu Thr Ser 165 170 175
Ser Asp Leu Ser Pro Asn Ser Trp Ile Ser Ile Ala Trp Tyr Pro Ile 180 185 190
Tyr Pro Ile Pro Pro Val Ile Gly Val Asp Gly Ile Ser Ala Ala Phe 195 200 205
Leu Thr Tyr His Leu Leu Lys Pro Asn Phe Pro Glu Thr Ile Gly Lys 210 215 220
Asp Asp Lys Gly Asn Glu Gln Gly Glu Ser Ser Thr Pro Glu Val Leu 225 230 235 240
Leu Pro Pro Phe Gly Ala Met Thr Tyr Lys Ala Phe Gly Asn Leu Trp 245 250 255
Met Met Pro Gly Thr Ser Asp Tyr Gln Asn Arg Glu Met Asn Glu Glu 260 265 270
Ser Ala Asp Ser Trp Leu Arg Lys Arg Gly Phe Ser His Ser Asp Phe 275 280 285
Asn Phe Phe Met Ser Arg Lys Phe Tyr Gly Gly Pro Tyr 290 295 300
<210> 19 <211> 2621 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 19
aattaatttt ctcactcaat aatgaagaaa actgcgaaag cgtgcagata agagagatct ctctgaacag atattatagt tgatagtttg cgtactagga gtctgtgaaa gcttgcacag 120
gaagaaagca aatcgggaaa gaaaggaatc tgaatcggag aagcaatcga ggtttacgat 180
taccaaattc tgatctaatc tgattaattg tggtgatttc cgatggaaga agacggtggt 240
ggcggcggtg cgaaagttgg aatgctggag aatttcatga agacgcatca gagttctttg 300
aaatcgttat tccagagaaa gaaatcatcc tctggtcgtg atggagatgc ttctccgtcg 360
cctatcgctt ccccgaaacc tattccgcag ctctctcttc tcgccaattc cgtcgtctcc 420
cgctgttcaa agatcctgaa cattcaaaca gaagatctgc agcatcattt tgatgtagag 480
ttgcctgaga gtgttaagca actattgaca tatgcaagga actttttaga gttctgctct 540
tttcaggcac ttcatcaagt gatgaaaaaa cctgattact tgagtgatca agagttccgt 600
cagctaatgt ttgacatgat gcttgcttgg gagactccca gtgtcacaag tgagcaggaa 660
aacaaagatg cagcatctcc ctccaagcag gactcagagg atgaggatgg atggtcgcta 720
ttctattcaa gtcccactaa tatggcaatg caggttgatg aaaaaaagtc tgtcggacag 780
gaggcttttg caagaattgc tccggtttgt cctgccattg cagatgcaat aactgtacat 840
aatctttttg atgcactaac tagctcgtca ggccacaggc ttcattatat cgtatatgac 900
aaatacctcc gcacacttga caaaattttc aaggctgcaa aaagcactct aggaccttca 960
gctgccaatc ttcagcttgc caagggagaa atagtgcttg atatggatgg tgcaaatcct 1020
gttttaccgg ttcttaaaca cgtgggcatc tcagcatggc ctggtaaact gacacttacc 1080
aactgtgctc tatattttga ttcaatgggt ggtggtgaaa agcccatgcg atatgatctc 1140
actgaagaca caaaacaggt catcaaacct gagttgacag ggccattggg tgctcgtata 1200
tttgataaag ccattatgta taaatcaatt acagtaccag agccagtatt ttttgaattt 1260
acagagttta aaggcaatgc tcgtcgagac tactggttgg gaatttgcct ggagatcctt 1320
cgtgtacaat ggttcatacg aagatacaac tttaaaggga ttcaacgatc agaaatactt 1380
gcaagagcaa tccttgggat attccggtac cgtgcaataa gggaagcttt tcaagtcttc 1440
tcttcccaat acaaaacatt gcttatattt aacctggcag aaagtctccc cggcggagat 1500
atggtcttag aagctctgtc cagccgtgtc tctcgcataa ccactaatgt tgcttctgat 1560
atcggttctg ttcagtatat gaaatggccc tcaaacttat ctccagtctc actcaaattg 1620
cttgagcatt ttggcttgaa tctagaaaca gggacaaata tgggtgaaga attgacaatc 1680
gtaggagatt tttgtgttgg ggagacgagt ccattggaga tagctctgaa acagtcaatc 1740
ctagacacag acagagctga agctgctcag gcgactgtgg aacaagtgaa agtagaagga 1800
attgacacta acgttgcagt tatgaaggag ctattgttac ctttcatcaa actaggcttg 1860
catataaatc gcttagccta ttggcaagat ccttataaat caacggtgtt catgatcttg 1920
gtcagctata tgattatcag tgggtggatc ggtttcatat taccgtcaat attactccta 1980
gtagctatag taatgatgtg gcgtaagcaa ttcaacaaag ggaaagaacc aaaaaccgtt 2040 cgtgtgaaag ctccaccaag taaaaacgcg gtggagcagc ttctcgtact acaagatgca 2100
attagccagt tcgagtcgct aatccaagct gttaacgttg gtctcctcaa aataagagca 2160
attacccttg caattcttcc tcaggcgaca gatacaacgg ctatatcgct tgtggttgtg 2220
gcagttatat tggcggttgt tcctgttaag tacttaataa cggttgcgtt tgtagagtgg 2280
ttcacgaggg aagttgggtg gaggaaagcg agtagtgacc ggctagagag gcggataaga 2340
gaatggtggt ttagggtacc agcagctcct gttcagctca ttagagccga agatagcaag 2400
aagaagaaga aatgacactt ttcaattctc tcacacgcat tgtctctctt tctagacata 2460
ttgttttgat attagaattt tttattcttc ttcttttttt ttcccctttt taagtaagat 2520
tcgggtttat tcataaatat gagacgaact aactcgtttt ttgactttta actacccagt 2580
ttgacaaaaa caagttcttc aattggcaaa gtaatgtcac a 2621
<210> 20 <211> 730 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 20
Met Glu Glu Asp Gly Gly Gly Gly Gly Ala Lys Val Gly Met Leu Glu 1S 10 15
Asn Phe Met Lys Thr His Gln Ser Ser Leu Lys Ser Leu Phe Gln Arg 20 25 30
Lys Lys Ser Ser Ser Gly Arg Asp Gly Asp Ala Ser Pro Ser Pro Ile 35 40 45
Ala Ser Pro Lys Pro Ile Pro Gln Leu Ser Leu Leu Ala Asn Ser Val 50 55 60
Val Ser Arg Cys Ser Lys Ile Leu Asn Ile Gln Thr Glu Asp Leu Gln 65 70 75 80
His His Phe Asp Val Glu Leu Pro Glu Ser Val Lys Gln Leu Leu Thr 85 90 95
Tyr Ala Arg Asn Phe Leu Glu Phe Cys Ser Phe Gln Ala Leu His Gln 100 105 110
Val Met Lys Lys Pro Asp Tyr Leu Ser Asp Gln Glu Phe Arg Gln Leu 115 120 125
Met Phe Asp Met Met Leu Ala Trp Glu Thr Pro Ser Val Thr Ser Glu 130 135 140
Gln Glu Asn Lys Asp Ala Ala Ser Pro Ser Lys Gln Asp Ser Glu Asp 145 150 155 160
Glu Asp Gly Trp Ser Leu Phe Tyr Ser Ser Pro Thr Asn Met Ala Met 165 170 175
Gln Val Asp Glu Lys Lys Ser Val Gly Gln Glu Ala Phe Ala Arg Ile 180 185 190
Ala Pro Val Cys Pro Ala Ile Ala Asp Ala Ile Thr Val His Asn Leu 195 200 205
Phe Asp Ala Leu Thr Ser Ser Ser Gly His Arg Leu His Tyr Ile Val 210 215 220
Tyr Asp Lys Tyr Leu Arg Thr Leu Asp Lys Ile Phe Lys Ala Ala Lys 225 230 235 240
Ser Thr Leu Gly Pro Ser Ala Ala Asn Leu Gln Leu Ala Lys Gly Glu 245 250 255
Ile Val Leu Asp Met Asp Gly Ala Asn Pro Val Leu Pro Val Leu Lys 260 265 270
His Val Gly Ile Ser Ala Trp Pro Gly Lys Leu Thr Leu Thr Asn Cys 275 280 285
Ala Leu Tyr Phe Asp Ser Met Gly Gly Gly Glu Lys Pro Met Arg Tyr 290 295 300
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Ser Ser Arg Val Ser Arg Ile Thr Thr Asn Val Ala Ser Asp Ile Gly 435 440 445
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Gly Glu Glu Leu Thr Ile Val Gly Asp Phe Cys Val Gly Glu Thr Ser 485 490 495
Pro Leu Glu Ile Ala Leu Lys Gln Ser Ile Leu Asp Thr Asp Arg Ala 500 505 510
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Asp Ala Ile Ser Gln Phe Glu Ser Leu Ile Gln Ala Val Asn Val Gly 625 630 635 640
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Asp Thr Thr Ala Ile Ser Leu Val Val Val Ala Val Ile Leu Ala Val
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Val Pro Val Lys Tyr Leu Ile Thr Val Ala Phe Val Glu Trp Phe Thr 675 680 685 Arg Glu Val Gly Trp Arg Lys Ala Ser Ser Asp Arg Leu Glu Arg Arg 690 695 700
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Arg Ala Glu Asp Ser Lys Lys Lys Lys Lys 725 730
<210> 21
<211> 960
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 21
ttcaaacaaa ctgatatatt cattgtacac gagtcttttc tggttgaata tatttttaca 60 ttcattcaaa taagaaaaat gtctcatcgt acagatgcga tcatctggtt tctgaaaaga 120 agagagagac tagaatatgg aaaaattcaa attcaagccc aataaaccct gaacaaaatt 180 taaagcctgg cccttgtctg accatctggg ccttcttttg atttcaattt tgggaaattc 240 agattgcgtc gacgcatttc ttttgaggga tggatctgct ttctcgtcgg cggctaatca 300 aattcttcca gagggttttg aaagaaattt ctcgagatgg gtcaagctca aagtgacgag 360 aactcaattc cgacgacgac gacaacgaac actcctcctc cttctgcgaa ttcacctcgg 420 gattctgaag atacttcgtc gccatcgatg gattctcttc ttgcagaagc tgcagcatat 480 ggtgaagatg ataatgagaa tgagtctctt gaagccaaag cacagagagc tctcgattgt 540 ccttgtatag cagatttgcg taatggctct tgcgggtctc agttctccga ggcattcctt 600 tgctttctca aaagcactgc tgaagaaaag ggatcagact gcgtgaatcc atttgtagca 660 ttgcaaagct gtatcaatgc caatccggat gcattctcta aatcagttac aggggacgaa 720 aaagaaaccg agaaaaagga agagcagcct cctgtgcaag accatagaat catccctcct 780 ctctgggcca aagacccgcc tcgcagtggc aattccaagc tttagaatat caacaacaat 840 ggagtcagca tcagaagcta gtctctcctc ttttgattct tttctctaga cagcactttt 900 aagaatgtaa aagaagagta gaagaccatg atcagtggtc gtgtagatca acattgttct 960
<210> 22
<211> 162
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 22
Met Gly Gln Ala Gln Ser Asp Glu Asn Ser Ile Pro Thr Thr Thr Thr 15 10 15
Thr Asn Thr Pro Pro Pro Ser Ala Asn Ser Pro Arg Asp Ser Glu Asp 20 25 30
Thr Ser Ser Pro Ser Met Asp Ser Leu Leu Ala Glu Ala Ala Ala Tyr 35 40 45
Gly Glu Asp Asp Asn Glu Asn Glu Ser Leu Glu Ala Lys Ala Gln Arg 50 55 60
Ala Leu Asp Cys Pro Cys Ile Ala Asp Leu Arg Asn Gly Ser Cys Gly 65 70 75 80
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Lys Leu
<210> 23
<211> 924
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 23
atggctcttg ttcgtaaacg ccgtcaaatc aacctccgtc tccctgtccc accgctctct 60 gttcacctcc cctggttctc ctttgcctca tccaccgccc ccgtcatcaa caacggaatc 120 tcagcttccg atgtcgagaa actccacgtt ctcggaagag gaagcagcgg gatcgtatac 180 aaagtccacc acaaaaccac gggggagata tacgctctga aatcagtcaa cggcgacatg 240 agtcctgctt tcacaagaca attagcgcgc gagatggaga tcctccgtcg cacggattct 300 ccttatgtcg tcaggtgtca agggatcttc gagaaaccaa tcgtcggaga ggtttcgatc 360 ctcatggagt atatggacgg tggaaaccta gaatctctcc gcggcgccgt tacggagaaa 420 caactagcgg gattttcccg ccagattttg aaaggtttaa gttatctcca ctcactcaag 480 atcgttcaca gagacatcaa acctgcgaat ctactcttaa actcgaaaaa cgaagttaaa 540 atcgctgatt ttggagtgag caaaatcatt acccgatcgt tagattactg caattcctac 600 gtcggcactt gcgcttacat gagcccagag agatttgact ctgccgccgg agaaaactcc 660 gatgtttacg caggcgatat ctggagtttc ggagtgatga tacttgagct cttcgtcgga 720 cattttccgt tgcttcctca gggacaaaga cctgactggg cgacgttaat gtgcgtcgtg 780 tgctttggag aaccaccgcg tgcgccggaa ggatgttccg acgagtttag gagttttgtt 840 gactgttgtc tccgtaaaga atcgagtgag aggtggacgg cgtcgcagct tctcggtcac 900 CCttttCtCC gtgaaagtct ttag 924
<210> 24
<211> 307
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<4 00> 24
Met Ala Leu Val Arg Lys Arg Arg Gln Ile Asn Leu Arg Leu Pro Val
10 15
Pro Pro Leu Ser Val His Leu Pro Trp Phe Ser Phe Ala Ser Ser Thr 20 25 30
Ala Pro Val Ile Asn Asn Gly Ile Ser Ala Ser Asp Val Glu Lys Leu 35 40 45
His Val Leu Gly Arg Gly Ser Ser Gly Ile Val Tyr Lys Val His Ηίε 50 55 60
Lys Thr Thr Gly Glu Ile Tyr Ala Leu Lys Ser Val Asn Gly Asp Met 65 70 75 80
Ser Pro Ala Phe Thr Arg Gln Leu Ala Arg Glu Met Glu Ile Leu Arg 85 90 95
Arg Thr Asp Ser Pro Tyr Val Val Arg Cys Gln Gly Ile Phe Glu Lys 100 105 110
Pro Ile Val Gly Glu Val Ser Ile Leu Met Glu Tyr Met Asp Gly Gly 115 120 125
Asn Leu Glu Ser Leu Arg Gly Ala Val Thr Glu Lys Gln Leu Ala Gly 130 135 140
Phe Ser Arg Gln Ile Leu Lys Gly Leu Ser Tyr Leu His Ser Leu Lys 145 150 155 160
Ile Val His Arg Asp Ile Lys Pro Ala Asn Leu Leu Leu Asn Ser Arg 165 170 175
Asn Glu Val Lys Ile Ala Asp Phe Gly Val Ser Lys Ile Ile Thr Arg Ser Leu Asp Tyr Cys Asn Ser Tyr Val Gly Thr Cys Ala Tyr Met Ser 195 200 205
Pro Glu Arg Phe Asp Ser Ala Ala Gly Glu Asn Ser Asp Val Tyr Ala 210 215 220
Gly Asp Ile Trp Ser Phe Gly Val Met Ile Leu Glu Leu Phe Val Gly 225 230 235 240
His Phe Pro Leu Leu Pro Gln Gly Gln Arg Pro Asp Trp Ala Thr Leu 2^5 250 255
Met Cys Val Val Cys Phe Gly Glu Pro Pro Arg Ala Pro Glu Gly Cys 260 265 270
Ser Asp Glu Phe Arg Ser Phe Val Asp Cys Cys Leu Arg Lys Glu Ser
275 280 285
Ser Glu Arg Trp Thr Ala Ser Gln Leu Leu Gly His Pro Phe Leu Arg 290 295 300
Glu Ser Leu 305
<210> 25
<211> 1673
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 25
aaaatattat ttaaatgtta atgttgttct ctcgaatcat tccttaagaa agattttcac 60 tttccaattt gcttcactgt cttgtcgatt ctgcttctcc aaaaaatttc ttctttagtt 120 ctgagttttt ctctgttctg aaaaacccca aattttgttt tttttggcca ttcaaaattt 180 cagaagaagg cgatacaaaa tcgtctttga attctctttg tttatgatct gttcaagtaa 240 aggaacggtc gtaattgcta ctagaagctc atttcccaga ttactaaacc ggattcaaaa 300 tcgaaatgat gttccgatta gtgtcatagc tactcgacga tcatcaatgt cggtggaggc 360 gtttccgatg aggttaaaat catcacagaa gaagaggaag atgaacattg gttgcggtgt 420 ttccccttct tcgccgacga cgacggtggt agatgaggaa gtagccatta ggcggaaatt 480 ggcaatgaga cgggttttgg aggataacgg tggcgatgga agctccgtca gagatttctc 540 gctattcacg accaagagag atgacacgtt gttcactcag tcatggactc ctgttgactc 600 cgctaagaac aggggacttg ttgttctgct tcatggtctg aacgaacaca gtggcaggta 660 tagtgatttt gcaaagcagc taaatgtaaa tggattcaag gtctatggaa tagattggat 720 cggtcatggt ggaagcgatg gacttcatgc ttacgttcct tctcttgatt atgctgtcgc 780
tgatttgaaa tcgtttattg agaaggtaat tgcggaaaac ccgggattgc cctgtttctg 840
cattggccac tcaacaggag gagccatcat cttaaaggct atgctagatg caaagattga 900
agctcgagtt tcagggattg tgctaacttc acccgcagtt ggagtccaac caacttatcc 960
tatcttcggc gtaattgcac cattcctctc gttcctcata ccgagatatc agttaagtgc 1020
tgcgaaaaag aaaataatgc cggtttctcg tgacccggaa gctctattgg ctaaatactc 1080
tgacccgcta gtctacactg gatttatccg agcaagaacc ggtaacgaga tccttagact 1140
tggtgctcat ttactgcaga atctgaacag aatcaaggtt ccgtttcttg tgatgcacgg 1200
cacagctgat acagttactg atcctaaagg tactcagaag ctatacaatg aggcttcctc 1260
atccgataag tcgatcaagc tgtacgacgg gttgttacac gatctgctct ttgaaccaga 1320
acgggaaact atagctggag tcatattgga ttggctaaac cggcgggttt aaattcctca 1380
aaccaaatgt agcacagttc cttactcctt aggtaatata gagggatatg cgaaagacat 1440
aatcaatagt tcctctgttt ctgtcgattg atctcgacac tattttgaca ttacgcacac 1500
ttttattgta atgaatatac gatgttgtaa ctctgttagt ggtcatcgta accatttctt 1560
gtataaacga tactagattt atattttgtt gatagggaga taatcataat tatatatggg 1620
gtttataaga atatgaatcg tcagatgaat ttcaatagag catatttctg ate 1673
<210> 26 <211> 382 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 26
Met Ile Cys Ser Ser Lys Gly Thr Val Val Ile Ala Thr Arg Ser Ser
Gly Asp Gly Ser Ser Val Arg Asp Phe Ser Leu Phe Thr Thr Lys Arg
Ala Ile Arg Arg Lys Leu Ala Met Arg Arg Val Leu Glu Asp Asn Gly
Phe Pro Arg Leu Leu Asn Arg Ile Gln Asn Arg Asn Asp Val Pro Ile
20 25 30
Ser Val Ile Ala Thr Arg Arg Ser Ser Met Ser Val Glu Ala Phe Pro
35 40 45
Met Arg Leu Lys Ser Ser Gln Lys Lys Arg Lys Met Asn Ile Gly Cys
50 55 60
Gly Val Ser Pro Ser Ser Pro Thr Thr Thr Val Val Asp Glu Glu Val 100 105 110
Gly Asp Thr Leu Phe Thr Gln Ser Trp Thr Pro Val Asp Ser Ala Lys
11S 120 125
Asn Arg Gly Leu Val Val Leu Leu His Gly Leu Asn Glu His Ser Gly 130 135 140
Arg Tyr Ser Asp Phe Ala Lys Gln Leu Asn Val Asn Gly Phe Lys Val 145 150 155 160
Tyr Gly Ile Asp Trp Ile Gly His Gly Gly Ser Asp Gly Leu His Ala 165 170 175
Tyr Val Pro Ser Leu Asp Tyr Ala Val Ala Asp Leu Lys Ser Phe Ile 180 185 190
Glu Lys Val Ile Ala Glu Asn Pro Gly Leu Pro Cys Phe Cys Ile Gly 195 200 205
His Ser Thr Gly Gly Ala Ile Ile Leu Lys Ala Met Leu Asp Ala Lys 210 215 220
Ile Glu Ala Arg Val Ser Gly Ile Val Leu Thr Ser Pro Ala Val Gly 225 230 235 240
Val Gln Pro Thr Tyr Pro Ile Phe Gly Val Ile Ala Pro Phe Leu Ser 245 250 255
Phe Leu Ile Pro Arg Tyr Gln Leu Ser Ala Ala Lys Lys Lys Ile Met 260 265 270
Pro Val Ser Arg Asp Pro Glu Ala Leu Leu Ala Lys Tyr Ser Asp Pro 275 280 285
Leu Val Tyr Thr Gly Phe Ile Arg Ala Arg Thr Gly Asn Glu Ile Leu 290 295 300
Arg Leu Gly Ala His Leu Leu Gln Asn Leu Asn Arg Ile Lys Val Pro 305 310 315 320
Phe Leu Val Met His Gly Thr Ala Asp Thr Val Thr Asp Pro Lys Gly 325 330 335
Thr Gln Lys Leu Tyr Asn Glu Ala Ser Ser Ser Asp Lys Ser Ile Lys 340 345 350
Leu Tyr Asp Gly Leu Leu His Asp Leu Leu Phe Glu Pro Glu Arg Glu 355 360 365 Thr Ile Ala Gly Val Ile Leu Asp Trp Leu Asn Arg Arg Val 370 375 380
<210> 27
<211> 3007
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 27
atgactataa aaacaccggg aactccggtt tcgaagatgg acagaacacc agctgtaaca 60 ccaggtggaa gctcaagatc cagggaagag aagattgttg ttactgtaag gttaaggcca 120 atgaataaga gagaactgtt agctaaagac caagttgctt gggaatgtgt aaatgaccac 180 accattgtgt ctaaaccaca agttcaagaa cgtttgcatc atcagtcctc atttacattt 240 gataaagttt ttggaccaga gagtttaaca gagaatgtgt atgaagatgg tgttaagaat 300 gttgcattgt ctgctttgat gggcataaat gcaacaatat ttgcatatgg acaaacaagc 360 agtggaaaga catataccat gagaggagta acggagaaag ctgtcaatga tatttacaat 420 cacataatta agacccctga aagagatttt actatcaaga tttctggtct ggaaatatat 480 aatgaaaatg tcagagatct gctcaattca gattcgggac gtgcccttaa actccttgat 540 gatccagaga aaggtactgt ggttgaaaaa ctggttgaag aaacagctaa taacgataac 600 catttgcggc atctgattag catttgtgaa gctcaaagac aagttggaga aactgctttg 660 aatgatacta gctcgcggtc acaccaaata atcagactga caatacaaag tactcaccgc 720 gaaaattcag attgtgtgag gtcatatatg gctagtctga actttgtgga cttagcagga 780 agcgaaagag catcacaatc gcaggcagat ggaacgagac tcagggaagg ttgtcatatc 840 aatctaagtc taatgacact tacaactgtc ataaggaaat taagtgtggg gaaaagaagc 900 ggccatatac cttacagaga ctccaagctt actaggattt tacagcattc actaggtggg 960 aatgctcgaa cagccattat atgtacattg agtccagctt tggctcatgt tgaacaatca 1020 agaaatactc tatacttcgc caaccgagcc aaggaagtta caaacaatgc ccacgtgaac 1080 atggttgtct ctgataagca actagtgaaa catcttcaga aagaagtggc tagattggag 1140 gccgagcgtc gcacccctgg tccatcgaca gaaaaggatt tcaagatcca gcagatggaa 1200 atggaaatcg gagagcttag aagacaaaga gatgatgcac aaattcaact tgaggagtta 1260 cgccaaaagc ttcaagggga tcagcaacaa aataagggct taaatccttt tgaatctcca 1320 gacccaccgg tcagaaaatg tctttcctat tctgttgccg taacgcctag ctcggagaac 1380 aaaacgctaa accggaatga gagagcaaga aagactacga tgcgccaatc tatgatacgg 1440 caatcatcaa ctgctccatt tacattgatg catgaaatcc gcaaactcga acaccttcaa 1500 gaacagttag gggaggaagc aacgaaagcc cttgaagtgt tacaaaagga agtagcttgc 1560 catagactag ggaatcaaga tgcagctcag acgatagcta agcttcaagc agagataagg 1620 gaaatgcgta ctgttaaacc atctgcaatg cttaaagagg ttggagatgt catagctcct 1680 aacaagagcg taagtgccaa tctcaaggaa gagataacaa ggctccattc acaaggaagc 1740
accattgcga atctagagga gcaacttgag agcgttcaga agtcaataga taagttggtg 1800
atgtctcttc cgagcaatat cagtgctgga gatgagactc caaagacaaa gaatcatcat 1860
catcaatcaa agaagaagaa gcttcttcct ctgacaccaa gcagcgcatc caaccgccag 1920
aacttcttga aatctccatg ctctccgctt tcagcttcta ggcaagtctt ggattgtgat 1980
gctgagaaca aagctcctca agaaaacaac agttctgcag ctagaggggc gacgacacca 2040
caggggtctg agaaagagac tccacagaaa ggagaagaaa gcggagatgt ctcgtcaaga 2100
gaaggtactc caggctacag aagatcaaac tcagtgaaca tgaagaaaat gcagcaaatg 2160
tttcaaaacg cagcagagga gaatgtaaaa agcataagag catacgtaac cgaactcaaa 2220
gaacgagtag ctaaactaca gtaccagaaa caacttctcg tttgtcaggt gcttgagttg 2280
gaagcaaatg atggagctgg atatagtgta gagaacgagg agaacacgat aatggaagat 2340
gaagagcaga atcaagtggc gtggcatata actttcatag aggaaagaca acagatcata 2400
gagctgtggc atgtctgcca tgtctccata atccacagga cacaattcta cctactgttc 2460
aaaggtgacc aagccgatca aatctacatg gaagtcgagc taagacggtt aacttggtta 2520
gaacaacatc tagcagaagt aggaaacgca actccagctc gaaactgcga tgaatctgtg 2580
gtttctctat catcaagtat aaaagcattg agaagagagc gagagttttt ggcgaaaagg 2640
gttaactcga gattgacgcc tgaggagaaa gaggagctgt atatgaaatg ggatgtgcca 2700
ttggaaggga aacagaggaa acttcagttc gtgaacaagc tatggactga tccttatgat 2760
tcaaggcacg tgcaagagag tgcagagata gttgcgaagc tagttggatt ctgtgaaagt 2 82 0
ggcaacatct ctaaagagat gtttgagctc aatttcgcag tgccttcaga taaaagacag 2880
tggaacattg gttgggacaa catctctaat cttcttcacc tatgaagact tattgtgtgt 2940
ttatgatttg taaaagtaca cgacacttct ttgtctcctc tgaatttgat taaataagct 3000
ttaccag 3007
<210> 28
<211> 974
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 28
Met Thr Ile Lys Thr Pro Gly Thr Pro Val Ser Lys Met Asp Arg Thr
Pro Ala Val Thr Pro Gly Gly Ser Ser Arg Ser Arg Glu Glu Lys Ile
Val Val Thr Val Arg Leu Arg Pro Met Asn Lys Arg Glu Leu Leu Ala 35 40 45 Lys Asp Gln Val Ala Trp Glu Cys Val Asn Asp His Thr Ile Val Ser 50 55 60
Lys Pro Gln Val Gln Glu Arg Leu His His Gln Ser Ser Phe Thr Phe 65 70 75 80
Asp Lys Val Phe Gly Pro Glu Ser Leu Thr Glu Asn Val Tyr Glu Asp 85 90 95
Gly Val Lys Asn Val Ala Leu Ser Ala Leu Met Gly Ile Asn Ala Thr 100 105 no
Ile Phe Ala Tyr Gly Gln Thr Ser Ser Gly Lys Thr Tyr Thr Met Arg
115 120 125
Gly Val Thr Glu Lys Ala Val Asn Asp Ile Tyr Asn His Ile Ile Lys 130 135 140
Thr Pro Glu Arg Asp Phe Thr Ile Lys Ile Ser Gly Leu Glu Ile Tyr 145 150 155 160
Asn Glu Asn Val Arg Asp Leu Leu Asn Ser Asp Ser Gly Arg Ala Leu 165 170 175
Lys Leu Leu Asp Asp Pro Glu Lys Gly Thr Val Val Glu Lys Leu Val 180 185 190
Glu Glu Thr Ala Asn Asn Asp Asn His Leu Arg His Leu Ile Ser Ile 195 200 205
Cys Glu Ala Gln Arg Gln Val Gly Glu Thr Ala Leu Asn Asp Thr Ser 210 215 220
Ser Arg Ser His Gln Ile Ile Arg Leu Thr Ile Gln Ser Thr His Arg 225 230 235 240
Glu Asn Ser Asp Cys Val Arg Ser Tyr Met Ala Ser Leu Asn Phe Val 245 250 255
Asp Leu Ala Gly Ser Glu Arg Ala Ser Gln Ser Gln Ala Asp Gly Thr 260 265 270
Arg Leu Arg Glu Gly Cys His Ile Asn Leu Ser Leu Met Thr Leu Thr 275 280 285
Thr Val Ile Arg Lys Leu Ser Val Gly Lys Arg Ser Gly His Ile Pro 290 295 300
Tyr Arg Asp Ser Lys Leu Thr Arg Ile Leu Gln His Ser Leu Gly Gly 305 310 315 320
Asn Ala Arg Thr Ala Ile Ile Cys Thr Leu Ser Pro Ala Leu Ala His
325 330 335
Val Glu Gln Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Phe Ala Asn Arg Ala Lys Gll 340 345 350
Val Thr Asn Asn Ala His Val Asn Met Val Val Ser Asp Lys Gln Leu 355 360 365
Val Lys His Leu Gln Lys Glu Val Ala Arg Leu Glu Ala Glu Arg Arg 370 375 380
Thr Pro Gly Pro Ser Thr Glu Lys Asp Phe Lys Ile Gln Gln Met Glu 385 390 395 400
Met Glu Ile Gly Glu Leu Arg Arg Gln Arg Asp Asp Ala Gln Ile Gln 405 410 415
Leu Glu Glu Leu Arg Gln Lys Leu Gln Gly Asp Gln Gln Gln Asn Lys 420 425 430
Gly Leu Asn Pro Phe Glu Ser Pro Asp Pro Pro Val Arg Lys Cys Leu 435 440 445
Ser Tyr Ser Val Ala Val Thr Pro Ser Ser Glu Asn Lys Thr Leu Asn 450 455 460
Arg Asn Glu Arg Ala Arg Lys Thr Thr Met Arg Gln Ser Met Ile Arg 465 470 475 480
Gln Ser Ser Thr Ala Pro Phe Thr Leu Met His Glu Ile Arg Lys Leu 485 490 495
Glu His Leu Gln Glu Gln Leu Gly Glu Glu Ala Thr Lys Ala Leu Glu 500 505 510
Val Leu Gln Lys Glu Val Ala Cys His Arg Leu Gly Asn Gln Asp Ala 515 520 525
Ala Gln Thr Ile Ala Lys Leu Gln Ala Glu Ile Arg Glu Met Arg Thr 530 535 540
Val Lys Pro Ser Ala Met Leu Lys Glu Val Gly Asp Val Ile Ala Pro 545 550 555 560
Asn Lys Ser Val Ser Ala Asn Leu Lys Glu Glu Ile Thr Arg Leu His 565 570 575 Ser Gln Gly Ser Thr Ile Ala Asn Leu Glu Glu Gln Leu Glu Ser Val 580 585 590
Gln Lys Ser Ile Asp Lys Leu Val Met Ser Leu Pro Ser Asn Ile Ser 595 600 605
Ala Gly Asp Glu Thr Pro Lys Thr Lys Asn His His His Gln Ser Lys
610 615 620
Lys Lys Lys Leu Leu Pro Leu Thr Pro Ser Ser Ala Ser Asn Arg Gln 625 630 635 640
Asn Phe Leu Lys Ser Pro Cys Ser Pro Leu Ser Ala Ser Arg Gln Val 645 650 655
Leu Asp Cys Asp Ala Glu Asn Lys Ala Pro Gln Glu Asn Asn Ser Ser 660 665 670
Ala Ala Arg Gly Ala Thr Thr Pro Gln Gly Ser Glu Lys Glu Thr Pro 675 680 685
Gln Lys Gly Glu Glu Ser Gly Asp Val Ser Ser Arg Glu Gly Thr Pro 690 695 700
Gly Tyr Arg Arg Ser Ser Ser Val Asn Met Lys Lys Met Gln Gln Met 705 710 715 720
Phe Gln Asn Ala Ala Glu Glu Asn Val Arg Ser Ile Arg Ala Tyr Val 725 730 735
Thr Glu Leu Lys Glu Arg Val Ala Lys Leu Gln Tyr Gln Lys Gln Leu 740 745 750
Leu Val Cys Gln Val Leu Glu Leu Glu Ala Asn Asp Gly Ala Gly Tyr 755 760 765
Ser Val Glu Asn Glu Glu Asn Thr Ile Met Glu Asp Glu Glu Gln Asn
770 775 780
Gln Val Ala Trp His Ile Thr Phe Ile Glu Glu Arg Gln Gln Ile Ile 785 790 795 800
Glu Leu Trp His Val Cys His Val Ser Ile Ile His Arg Thr Gln Phe 805 810 815
Tyr Leu Leu Phe Lys Gly Asp Gln Ala Asp Gln Ile Tyr Met Glu Val 820 825 830
Glu Leu Arg Arg Leu Thr Trp Leu Glu Gln His Leu Ala Glu Val Gly 835 840 845 Asn Ala Thr Pro Ala Arg Asn Cys Asp Glu Ser Val Val Ser Leu Ser
Ser Ser Ile Lys Ala Leu Arg Arg Glu Arg Glu Phe Leu Ala Lys Arg
Val Asn Ser Arg Leu Thr Pro Glu Glu Arg Glu Glu Leu Tyr Met Lys
Trp Asp Val Pro Leu Glu Gly Lys Gln Arg Lys Leu Gln Phe Val Asn
Lys Leu Trp Thr Asp Pro Tyr Asp Ser Arg His Val Gln Glu Ser Ala
Glu Ile Val Ala Lys Leu Val Gly Phe Cys Glu Ser Gly Asn Ile Ser
Lys Glu Met Phe Glu Leu Asn Phe Ala Val Pro Ser Asp Lys Arg Gln
Trp Asn Ile Gly Trp Asp Asn Ile Ser Asn Leu Leu His Leu
<210> 29
<211> 753
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 29
atgtccatct tttttttctt catcagcttc gtcgtcttct ccgtcgctga cctcccgtcg 60
tgcttctcag ccgatcaaca gtacgaggag tgtcgctcac gtaatctgac atgtggatct 120
ggacacaggg tattcgagag taccacgtat ccgttctggg gtggattcaa taaacccaaa 180
ttctgcggtc attcgtcatt caaactctcc tgcgagggtg atcaaaacct aaccctagcg 240
atcgggaaca tcactcttcg cgttgtttct gcgaatctgg aggatcataa aatttccgtt 300
gccgatgata gtctactaga cggaggttgc ctaaacattt ggaacttcaa cgggaagaat 360
cagttcacat tagactccaa caccgagacg atcgatgtat tcgtcaactg ttccggcgta 420
gctccgttgc agatttcttg cgaagaaagc tacgaggatc cggtgacata tcatgtcttg 480
cgatcgtcgg attctgacga aggttgtatg aaatatgcag aaattccgat gctgaggtct 540
gctaaggacg agcttcaacg gtccgaacta acttttgtgg aagctttgag aaaaggattc 600
gatttgaggt acatcatgga agacaaagct tgccggagat gcattgattc cggtgggatt 660
tgtggttcgg cgttagattc ggagagtttc cggtgtctat gtgcggacag acctcacaac 720
tcctcctgcg acgataacac taaccaaggt tag 753 <210> 30
<211> 250
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 30
Met Ser Ile Phe Phe Phe Phe Ile Ser Phe Val Val Phe Ser Val Ala 15 10 15
Asp Leu Pro Ser Cys Phe Ser Ala Asp Gln Gln Tyr Glu Glu Cys Arg 20 25 30
Ser Arg Asn Leu Thr Cys Gly Ser Gly His Arg Val Phe Glu Ser Thr 35 40 45
Thr Tyr Pro Phe Trp Gly Gly Phe Asn Lys Pro Lys Phe Cys Gly His 50 55 60
Ser Ser Phe Lys Leu Ser Cys Glu Gly Asp Gln Asn Leu Thr Leu Ala 65 70 75 80
Ile Gly Asn Ile Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Asn Leu Glu Asp His 85 90 95
Lys Ile Ser Val Ala Asp Asp Ser Leu Leu Asp Gly Gly Cys Leu Asn 100 105 no
Ile Trp Asn Phe Asn Gly Lys Asn Gln Phe Thr Leu Asp Ser Asn Thr 115 120 125
Glu Thr Ile Asp Val Phe Val Asn Cys Ser Gly Val Ala Pro Leu Gln 130 135 140
Ile Ser Cys Glu Glu Ser Tyr Glu Asp Pro Val Thr Tyr His Val Leu 145 150 155 160
Arg Ser Ser Asp Ser Asp Glu Gly Cys Met Lys Tyr Ala Glu Ile Pro 165 170 175
Met Leu Arg Ser Ala Lys Asp Glu Leu Gln Arg Ser Glu Leu Thr Phe 180 185 190
Val Glu Ala Leu Arg Lys Gly Phe Asp Leu Arg Tyr Ile Met Glu Asp 195 200 205
Lys Ala Cys Arg Arg Cys Ile Asp Ser Gly Gly Ile Cys Gly Ser Ala 210 215 220
Leu Asp Ser Glu Ser Phe Arg Cys Leu Cys Ala Asp Arg Pro His Asn Ser Ser Cys Asp Asp Asn Thr Asn Gln Gly
<210> 31 <211> 1818 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 31
atgaatcctt caactccaag tttactctac acatccatct tcttctactt cacaataata 60
gcaactcaaa ccctctctct tgatccaaag ttcaaggctt gtgagccgaa atcatgcggc 120
aaaggtcccc agatctccta tccattttat ctatctggaa agcaagaatc tttttgtggt 180
tatccaagtt ttgaactcac ttgtgatgat gaagaaaagc tccctgttct cgggatctcc 240
ggtgaggaat atgtcatcaa gaacatatct tacttaacac agtcgtttca ggtcgtgaac 300
tcaaaggctt ctcatgatcc atgtcccaga ccgctgaaca atcttaccct ccataggact 360
cctttctttg tgaacccttc tcatatcaac ttcactatac tttacaattg ttccgatcac 420
ctgctggagg attttaggac ataccctctt acttgtgctc gaaacacgag tcttcttcga 480
tcttttgggg tctttgacag aaagaaactt ggaaaagaga aacaaattgc atccatgtcg 540
tgccagaaac tagtggatgt tcctgtttta gctagtaatg agtctgatgt gatgggtatg 600
acttatgttg agattttgaa gaggggtttt gttctgaatt ggactgcaaa cagttgcttc 660
cgctgcatca ccagcggcgg gagatgtgga actgatcaac aagaattcgt atgcttgtgt 720
cctgatggac ctaaacttca tgatacttgc acgaatgcat tgcttccaag aaacatctca 780
tcagatccat ctgcaaagtc ttttgacatc gagaaagcag aggaattatt agtcggagtt 840
catattttct cttacgaaga acttgaagaa gccactaata acttcgaccc atctaaagaa 900
ctcggtgatg gaggctttgg tactgtctat tacggtaagc ttaaagatgg acgaagcgta 960
gccgttaaac ggttatacga taacaacttc aaaagagcag agcaattcag gaatgaagtt 1020
gagatcttaa cgggtttacg ccatccaaac ctcgtggctc tctttggatg ctcctcaaaa 1080
cagagccggg acttactgct agtgtatgag tatgttgcaa acggcacgtt agctgatcat 1140
ctacatggtc cacaggcaaa ccctagctca cttccttggt ctattcggct caaaatcgct 1200
gttgaaactg cctctgcctt gaagtatctc cacgcctcca agatcatcca ccgtgatgtt 1260
aaatccaaca acatccttct cgaccaaaac ttcaatgtca aggttgcgga ttttggactc 1320
tctagactgt ttcctatgga taaaacgcac gtatctaccg ctccacaagg aactccggga 1380
tatgtcgacc cggattacca cttatgctat caactctcaa acaaaagcga cgtgtacagc 1440
tttgcggtag tgttaatgga gcttatctct tcacttccag cagtcgacat cacaagaccg 1500
cgccaagaga tcaacctctc gaacatggca gtcgttaaaa tccagaacca cgagctccgc 1560 gacatggtgg atccgtcact tgggtttgac acggatacaa gagtgagaca gacggtgatc 1620
gctgtcgctg agctggcgtt ccaatgcttg cagtcggata aagatcttag gccatgtatg 1680
tcgcacgtgc aggatacgtt gacgaggata cagaacaatg gatttggttc ggaaatggat 1740
gttgtagatg tgaacaagag tggaccgttg gttgcacagt ctccagatag tgtcattgtg 1800
aaatgggaca gtaagtaa 1818
<210> 32 <211> 605 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 32
Met Asn Pro Ser Thr Pro Ser Leu Leu Tyr Thr Ser Ile Phe Phe Tyr
15 ίο 15
Phe Thr Ile Ile Ala Thr Gln Thr Leu Ser Leu Asp Pro Lys Phe Lys 20 25 30
Ala Cys Glu Pro Lys Ser Cys Gly Lys Gly Pro Gln Ile Ser Tyr Pro 35 40 45
Phe Tyr Leu Ser Gly Lys Gln Glu Ser Phe Cys Gly Tyr Pro Ser Phe 50 55 60
Glu Leu Thr Cys Asp Asp Glu Glu Lys Leu Pro Val Leu Gly Ile Ser 65 70 75 80
Gly Glu Glu Tyr Val Ile Lys Asn Ile Ser Tyr Leu Thr Gln Ser Phe 85 90 95
Gln Val Val Asn Ser Lys Ala Ser His Asp Pro Cys Pro Arg Pro Leu 100 105 HO
Asn Asn Leu Thr Leu His Arg Thr Pro Phe Phe Val Asn Pro Ser His 115 120 125
Ile Asn Phe Thr Ile Leu Tyr Asn Cys Ser Asp His Leu Leu Glu Asp 130 135 140
Phe Arg Thr Tyr Pro Leu Thr Cys Ala Arg Asn Thr Ser Leu Leu Arg 145 150 155 160
Ser Phe Gly Val Phe Asp Arg Lys Lys Leu Gly Lys Glu Lys Gln Ile 165 170 175
Ala Ser Met Ser Cys Gln Lys Leu Val Asp Val Pro Val Leu Ala Ser 180 185 190 Asn Glu Ser Asp Val Met Gly Met Thr Tyr Val Glu Ile Leu Lys Arg 195 200 205
Gly Phe Val Leu Asn Trp Thr Ala Asn Ser Cys Phe Arg Cys Ile Thr 210 215 220
Ser Gly Gly Arg Cys Gly Thr Asp Gln Gln Glu Phe Val Cys Leu Cys 22S 230 235 240
Pro Asp Gly Pro Lys Leu His Asp Thr Cys Thr Asn Ala Leu Leu Pro 245 250 255
Arg Asn Ile Ser Ser Asp Pro Ser Ala Lys Ser Phe Asp Ile Glu Lys 260 265 270
Ala Glu Glu Leu Leu Val Gly Val His Ile Phe Ser Tyr Glu Glu Leu 275 280 285
Glu Glu Ala Thr Asn Asn Phe Asp Pro Ser Lys Glu Leu Gly Asp Gly 290 295 300
Gly Phe Gly Thr Val Tyr Tyr Gly Lys Leu Lys Asp Gly Arg Ser Val 305 310 315 320
Ala Val Lys Arg Leu Tyr Asp Asn Asn Phe Lys Arg Ala Glu Gln Phe 325 330 335
Arg Asn Glu Val Glu Ile Leu Thr Gly Leu Arg His Pro Asn Leu Val 340 345 350
Ala Leu Phe Gly Cys Ser Ser Lys Gln Ser Arg Asp Leu Leu Leu Val 355 360 365
Tyr Glu Tyr Val Ala Asn Gly Thr Leu Ala Asp His Leu His Gly Pro 370 375 380
Gln Ala Asn Pro Ser Ser Leu Pro Trp Ser Ile Arg Leu Lys Ile Ala 385 390 395 400
Val Glu Thr Ala Ser Ala Leu Lys Tyr Leu His Ala Ser Lys Ile Ile 405 410 415
His Arg Asp Val Lys Ser Asn Asn Ile Leu Leu Asp Gln Asn Phe Asn 420 425 430
Val Lys Val Ala Asp Phe Gly Leu Ser Arg Leu Phe Pro Met Asp Lys 435 440 445
Thr His Val Ser Thr Ala Pro Gln Gly Thr Pro Gly Tyr Val Asp Pro 450 455 460 Asp Tyr His Leu Cys Tyr Gln Leu Ser Asn Lys Ser Asp Val Tyr Ser
Phe Ala Val Val Leu Met Glu Leu Ile Ser Ser Leu Pro Ala Val Asp
Ile Thr Arg Pro Arg Gln Glu Ile Asn Leu Ser Asn Met Ala Val Val
Lys Ile Gln Asn His Glu Leu Arg Asp Met Val Asp Pro Ser Leu Gly
Phe Asp Thr Asp Thr Arg Val Arg Gln Thr Val Ile Ala Val Ala Glu
Leu Ala Phe Gln Cys Leu Gln Ser Asp Lys Asp Leu Arg Pro Cys Met
Ser His Val Gln Asp Thr Leu Thr Arg Ile Gln Asn Asn Gly Phe Gly
Ser Glu Met Asp Val Val Asp Val Asn Lys Ser Gly Pro Leu Val Ala
Gln Ser Pro Asp Ser Val Ile Val Lys Trp Asp Ser Lys
<210> 33 <211> 1016 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 33
aaagaagttg tcagaaaaaa aaaaaaaaaa aagtgtcaag aagatcatat ctcaattcat 60
tatattatgg caaatttcga gaatctttct tctgattttc agacaatagc catggatata 120
tattcttcca taactcaagc tgcagatcta aacaacaaca acagtaacct tcattttcaa 180
acatttcatc cttcctctac ttctctcgaa tcgctcttcc ttcatcatca tcaacaacaa 240
ttacttcact ttcccggaaa ctctccagac agtagtaaca atttctcttc aacttcaagt 300
ttcctccata gtgatcacaa catcgtcgat gagaccaaga agagaaaagc tttgttacct 3 60
actttgtctt catcagagac tagcggcgtc tccgataata cgaatgttat tgccactgaa 420
acaggttctt tgagaagagg taagaggttg aagaagaaga aggaagaaga agacgagaaa 480
gagagagaag ttgttcatgt gagagccaga agaggccaag ccactgatag ccacagctta 540
gcagaacggg ttcggcgagg gaaaataaac gagagattaa gatgcttgca agatatggtg 600
cccggatgtt ataaggctat gggaatggct acgatgcttg acgagataat taattatgtc 660 cagtctctac agaatcaagt cgagttcctc tcgatgaaac tcactgcagc aagttcgttt 720 tatgacttta actcagagac agatgcagtt gattccatgc agagagcaaa ggcacgtgag 780 acagtggaga tggggagaca aacaagagat gggagtcctg tcttccattt atcaacatgg 840 tccctttgac ttttgttttc tcttttctct tttccttctt ttttattgtt ttcgaaatta 900 ttcttctatt tatttggatg cgatatgtca tatatacgac ccaacttggg ataatatttg 960 taatctgtat acttgtaatt tcgacgatat aaatttattg gtgacttata attgtc 1016
<210> 34 <211> 260 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 34
Met Ala Asn Phe Glu Asn Leu Ser Ser Asp Phe Gln Thr Ile Ala Met 1 5 10 15
Asp Ile Tyr Ser Ser Ile Thr Gln Ala Ala Asp Leu Asn Asn Asn Asn 20 25 30
Ser Asn Leu His Phe Gln Thr Phe His Pro Ser Ser Thr Ser Leu Glu 35 40 45
Ser Leu Phe Leu His His His Gln Gln Gln Leu Leu His Phe Pro Gly 50 55 60
Asn Ser Pro Asp Ser Ser Asn Asn Phe Ser Ser Thr Ser Ser Phe Leu 65 70 75 80
His Ser Asp His Asn Ile Val Asp Glu Thr Lys Lys Arg Lys Ala Leu 85 90 95
Leu Pro Thr Leu Ser Ser Ser Glu Thr Ser Gly Val Ser Asp Asn Thr 100 105 HO
Asn Val Ile Ala Thr Glu Thr Gly Ser Leu Arg Arg Gly Lys Arg Leu 115 120 125
Lys Lys Lys Lys Glu Glu Glu Asp Glu Lys Glu Arg Glu Val Val His 130 135 140
Val Arg Ala Arg Arg Gly Gln Ala Thr Asp Ser His Ser Leu Ala Glu 145 150 155 160
Arg Val Arg Arg Gly Lys Ile Asn Glu Arg Leu Arg Cys Leu Gln Asp 165 170 175 Met Val Pro Gly Cys Tyr Lys Ala Met Gly Met Ala Thr Met Leu Asp
Glu Ile Ile Asn Tyr Val Gln Ser Leu Gln Asn Gln Val Glu Phe Leu
Ser Met Lys Leu Thr Ala Ala Ser Ser Phe Tyr Asp Phe Asn Ser Glu
Thr Asp Ala Val Asp Ser Met Gln Arg Ala Lys Ala Arg Glu Thr Val
Glu Met Gly Arg Gln Thr Arg Asp Gly Ser Pro Val Phe His Leu Ser
Thr Trp Ser Leu 260
<210> 35 <211> 2352 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 35
atgtggaaca acctgactgg gcgtattccg ttggagatag gaagaatttc ttccttgaaa 60
ctcctactgt tgaatgggaa caagttcacg ggtagtttac cccctgaact tggtaacctt 120
caaaacctaa acaggcttca agtagatgag aataacataa caggttcagt tccattttca 180
tttggaaact tgagaagcat aaaacatctc cacttaaaca ataacacgat aagtggagaa 240
attcctgttg agctatccaa attgcccaag cttgttcaca tgatactgga caacaataac 300
ttgactggga cattgccgct agagttagct caattgccat ccttgaccat acttcagctg 360
gataacaaca acttcgaagg ttcaactatt ccagaggctt acggacactt ttctagatta 420
gtaaaattaa gtttaaggaa ctgtggactg caaggatcta ttcctgattt aagcaggata 480
gaaaatctta gctatctaga cctaagttgg aaccacctca caggcactat accagaatcc 540
aagctttctg acaatatgac aacaattgaa ctatcttata accacctaac tggatctata 600
ccacaaagtt tctcagattt gaactctctt caattactgt cacttgagaa caacagttta 660
tctggttctg tcccaacaga aatttggcag gacaagtctt tcgagaataa caagctgcaa 720
gttgatctca ggaacaacaa cttctctgat gccacaggaa acctgagaac accagacaat 780
aatgtgaaag tatccccagg aatctgcttg tgcacagcac ctctttcgat tgattatagg 840
ctaaagagcc ctagcttctt tttctttact ccatatattg aacgccaatt cagggagtat 900
attacctcgt ccctccaact ggagactcat caactagcga ttgatagact tgtcgatgag 960
aacaggctgc gtccaagaat gtacttaaag ctagtcccca aaggcagaat aacatttaac 1020
aagagtgaag tcatacgtat acgggacagg tttatgtcat ggagttttaa taaaactgac 1080 ttttttggac catatgagct gctggacttc cctcttcaag gaccgtatgg ctctgtcgtc 1140
gctgccactg ttttatcagt gactgcaaca cttctatatg ttaggaaacg tcgtgaaaac 12 00
tcacatacgc tcaccaaaaa acgtgttttc agaacaatat ctcgggaaat caaaggggtg 1260
aagaagttca gttttgtaga actgtcggat gcaactaatg gttttgacag ctccacactg 1320
attggtagag gtagctatgg aaaggtctac aaaggcattt tgtcaaataa aaccgaagtt 1380
gccatcaaac gaggagaaga aacttctctg cagagcgaaa aagagtttct gaatgagatc 1440
gatctacttt cgaggttaca tcaccggaat cttgtgtcgc ttattggcta cagtagtgac 1500
atcggggaac agatgctggt atatgagtat atgcctaatg gaaatgtgcg tgattggctt 1560
tcagtggttt tacattgtca cgcagctaat gctgcagaca cattgagctt tagcatgagg 1620
tcacatgtgg cgttaggttc agctaaaggg attcCttacc ttcacactga agcaaatccg 1680
ccagttattc accgcgatat caaaaccagc aacatactct tggactgtca gcttcatgct 1740
aaggttgctg attttggatt gtcacggttg gctcctgctt ttggggaggg agatggtgag 1800
cccgcccatg tatcaacagt agtaagagga acaccgggat atctggatcc agagtatttc 1860
atgactcagc aattgacggt gagaagtgat gtgtacagct ttggagtagt gttgcttgag 1920
cttttgactg gaatgcaccc attctttgag ggtacacata ttatccgcga ggtacttttc 1980
ttgactgagc tcccacgtag atctgataat ggagtagcta aatctgtgag gaccgcgaat 2040
gaatgtggaa cggttttgtc agtggcggat agtcggatgg gacaatgttc gcccgataaa 2100
gtgaagaagt tggcggaatt agctttatgg tgttgtgaag atagaccaga gacgagacca 2160
ccaatgtcaa aagtggtgaa agaacttgaa ggtatttgcc aatctgtgcg agaacccgaa 2220
atgttctcag aaacaacgaa attactctgc tccaaaacat cgccgtcatc ttcttctgta 2280
ccctcgccat tgtctttact tcctggaagt aacttggaca gtggcttttt ccacgctgta 2340
aaacctcgtt ga 2352
<210> 36 <211> 783 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 36
Met Trp Asn Asn Leu Thr Gly Arg Ile Pro Leu Glu Ile Gly Arg Ile 15 10 15
Ser Ser Leu Lys Leu Leu Leu Leu Asn Gly Asn Lys Phe Thr Gly Ser
20 25 30
Leu Pro Pro Glu Leu Gly Asn Leu Gln Asn Leu Asn Arg Leu Gln Val 35 40 45 Asp Glu Asn Asn Ile Thr Gly Ser Val Pro Phe Ser Phe Gly Asn Leu 50 55 60
Arg Ser Ile Lys His Leu His Leu Asn Asn Asn Thr Ile Ser Gly Glu 65 70 75 80
Ile Pro Val Glu Leu Ser Lys Leu Pro Lys Leu Val His Met Ile Leu 85 90 95
Asp Asn Asn Asn Leu Thr Gly Thr Leu Pro Leu Glu Leu Ala Gln Leu 100 105 110
Pro Ser Leu Thr Ile Leu Gln Leu Asp Asn Asn Asn Phe Glu Gly Ser 115 120 125
Thr Ile Pro Glu Ala Tyr Gly His Phe Ser Arg Leu Val Lys Leu Ser 130 135 140
Leu Arg Asn Cys Gly Leu Gln Gly Ser Ile Pro Asp Leu Ser Arg Ile 145 150 155 160
Glu Asn Leu Ser Tyr Leu Asp Leu Ser Trp Asn His Leu Thr Gly Thr 165 170 175
Ile Pro Glu Ser Lys Leu Ser Asp Asn Met Thr Thr Ile Glu Leu Ser 180 185 190
Tyr Asn His Leu Thr Gly Ser Ile Pro Gln Ser Phe Ser Asp Leu Asn 195 200 205
Ser Leu Gln Leu Leu Ser Leu Glu Asn Asn Ser Leu Ser Gly Ser Val 210 215 220
Pro Thr Glu Ile Trp Gln Asp Lys Ser Phe Glu Asn Asn Lys Leu Gln 225 230 235 240
Val Asp Leu Arg Asn Asn Asn Phe Ser Asp Ala Thr Gly Asn Leu Arg 245 250 255
Thr Pro Asp Asn Asn Val Lys Val Ser Pro Gly Ile Cys Leu Cys Thr 260 265 270
Ala Pro Leu Ser Ile Asp Tyr Arg Leu Lys Ser Pro Ser Phe Phe Phe 275 280 285
Phe Thr Pro Tyr Ile Glu Arg Gln Phe Arg Glu Tyr Ile Thr Ser Ser 290 295 300
Leu Gln Leu Glu Thr His Gln Leu Ala Ile Asp Arg Leu Val Asp Glu 305 310 315 320 Asn Arg Leu Arg Pro Arg Met Tyr Leu Lys Leu Val Pro Lys Gly Arg 325 330 335
Ile Thr Phe Asn Lys Ser Glu Val Ile Arg Ile Arg Asp Arg Phe Met 34O 345 350
Ser Trp Ser Phe Asn Lys Thr Asp Phe Phe Gly Pro Tyr Glu Leu Leu 355 360 365
Asp Phe Pro Leu Gln Gly Pro Tyr Gly Ser Val Val Ala Ala Thr Val 37O 375 380
Leu Ser Val Thr Ala Thr Leu Leu Tyr Val Arg Lys Arg Arg Glu Asn 385 390 395 400
Ser His Thr Leu Thr Lys Lys Arg Val Phe Arg Thr Ile Ser Arg Glu 405 410 415
Ile Lys Gly Val Lys Lys Phe Ser Phe Val Glu Leu Ser Asp Ala Thr 420 42 5 430
Asn Gly Phe Asp Ser Ser Thr Leu Ile Gly Arg Gly Ser Tyr Gly Lys 435 440 445
Val Tyr Lys Gly Ile Leu Ser Asn Lys Thr Glu Val Ala Ile Lys Arg 45O 455 460
Gly Glu Glu Thr Ser Leu Gln Ser Glu Lys Glu Phe Leu Asn Glu Ile 465 470 475 480
Asp Leu Leu Ser Arg Leu His His Arg Asn Leu Val Ser Leu Ile Gly 485 490 495
Tyr Ser Ser Asp Ile Gly Glu Gln Met Leu Val Tyr Glu Tyr Met Pro 500 505 510
Asn Gly Asn Val Arg Asp Trp Leu Ser Val Val Leu His Cys His Ala 515 520 525
Ala Asn Ala Ala Asp Thr Leu Ser Phe Ser Met Arg Ser His Val Ala 530 535 540
Leu Gly Ser Ala Lys Gly Ile Leu Tyr Leu His Thr Glu Ala Asn Pro 545 550 555 560
Pro Val Ile His Arg Asp Ile Lys Thr Ser Asn Ile Leu Leu Asp Cys 565 570 575
Gln Leu His Ala Lys Val Ala Asp Phe Gly Leu Ser Arg Leu Ala Pro 580 585 590 Ala Phe Gly Glu Gly Asp Gly Glu Pro Ala His Val Ser Thr Val Val 595 600 605
Arg Gly Thr Pro Gly Tyr Leu Asp Pro Glu Tyr Phe Met Thr Gln Gln 610 615 620
Leu Thr Val Arg Ser Asp Val Tyr Ser Phe Gly Val Val Leu Leu Glu 625 630 635 640
Leu Leu Thr Gly Met His Pro Phe Phe Glu Gly Thr His Ile Ile Arg 645 650 655
Glu Val Leu Phe Leu Thr Glu Leu Pro Arg Arg Ser Asp Asn Gly Val 660 665 670
Ala Lys Ser Val Arg Thr Ala Asn Glu Cys Gly Thr Val Leu Ser Val 675 680 685
Ala Asp Ser Arg Met Gly Gln Cys Ser Pro Asp Lys Val Lys Lys Leu 690 695 700
Ala Glu Leu Ala Leu Trp Cys Cys Glu Asp Arg Pro Glu Thr Arg Pro 705 710 715 720
Pro Met Ser Lys Val Val Lys Glu Leu Glu Gly Ile Cys Gln Ser Val 725 730 735
Arg Glu Pro Glu Met Phe Ser Glu Thr Thr Lys Leu Leu Cys Ser Lys 740 745 750
Thr Ser Pro Ser Ser Ser Ser Val Pro Ser Pro Leu Ser Leu Leu Pro 755 760 765
Gly Ser Asn Leu Asp Ser Gly Phe Phe His Ala Val Lys Pro Arg 770 775 780
<210> 37 <211> 528 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 37
atgaagagag accggtccga ttacgaagaa tccatgaagc atatagacat agtagaaagt 60
ctaatgatgt tatctcgaag tttcgtggtc aaacaaatcg atgtaaagca atctaccgga 120 agcaaaacga accataataa ccacttcgaa tgcaaaacgt gtaaccggaa atttgattcc 180 ttccaagctc ttggaggtca tagagctagc cacaagaaac ctaagctgat cgttgaccaa 240 gaacaggtga agcatcgtaa caaagaaaat gatatgcata agtgtacaat ttgcgatcaa 3 00 atgtttggga ccggtcaagc tctaggcggt cacatgagaa agcataggac gagcatgata 3 60
accgagcaat cgattgtccc ttctgtggtt tattccagac cggtttttaa tcgttgcagt 420
agcagcaagg agatcttgga cttaaatcta actccattgg aaaatgatct tgtgttaatc 480
tttgggaaga atttggttcc acaaattgat ttgaagtttg tgaattag 528
<210> 38
<211> 175
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 38
Met Lys Arg Asp Arg Ser Asp Tyr Glu Glu Ser Met Lys His Ile Asp 1 5 10 15
Ile Val Glu Ser Leu Met Met Leu Ser Arg Ser Phe Val Val Lys Gln 20 25 30
Ile Asp Val Lys Gln Ser Thr Gly Ser Lys Thr Asn His Asn Asn His 35 40 45
Phe Glu Cys Lys Thr Cys Asn Arg Lys Phe Asp Ser Phe Gln Ala Leu 50 55 60
Gly Gly His Arg Ala Ser His Lys Lys Pro Lys Leu Ile Val Asp Gln 65 70 75 80
Glu Gln Val Lys His Arg Asn Lys Glu Asn Asp Met His Lys Cys Thr 85 90 95
Ile Cys Asp Gln Met Phe Gly Thr Gly Gln Ala Leu Gly Gly His Met 100 105 HO
Arg Lys His Arg Thr Ser Met Ile Thr Glu Gln Ser Ile Val Pro Ser 115 120 125
Val Val Tyr Ser Arg Pro Val Phe Asn Arg Cys Ser Ser Ser Lys Glu 130 135 140
Ile Leu Asp Leu Asn Leu Thr Pro Leu Glu Asn Asp Leu Val Leu Ile 145 150 155 160
Phe Gly Lys Asn Leu Val Pro Gln Ile Asp Leu Lys Phe Val Asn 165 170 175
<210> 39 <211> 1019 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana <400> 39
ctggttactg tcttgcttgc ttccgacgat ctatcttccc cgagtagatt tggtacttcc 60
ttctttcgat ttttagaaat ggctgctcct cctgctagag ctcgtgctga ttacgattac 120
ctcattaaac ttctgctgat cggagacagc ggtgttggta agagttgcct tctcttacgt 180
ttctcagatg gctcgtttac caccagtttc attacaacta ttgggattga ttttaagata 240
cggactattg agctcgatgg gaagagaatt aagctgcaaa tctgggatac tgccggacag 3 00
gagcggttcc gcacaatcac aactgcgtac taccgtggag ccatggggat tttgcttgtg 360
tatgatgtga ctgatgaatc atctttcaac aacatcagga attggatccg taacattgag 420
cagcatgctt ctgatagtgt caacaagatt ctagttggga acaaagcaga tatggatgaa 480
agcaaaagag ctgtgccaaa atctaagggc caagctcttg cagatgaata tggaatgaag 540
tttttcgaga ctagtgccaa gactaactta aacgttgagg aagttttctt ctctattgct 600
aaagacatta agcaaagact tgcagatacc gatgcacgag ctgagccgca aacaatcaaa 660
atcaaccaat ccgaccaagg tgcgggaaca tctcaagcta ctcagaaatc agcatgttgc 720
ggcacataaa aattgggtcc acgacgcctg tcaaaggaga gaatctggct agtgaaagag 780
aaatggtatt tggaaagaaa aaatgaaaaa ggaaatcaat cttcttttgc ttttcttcta 840
tatgagatgg tgtttctacg tattctttta agattctctc tttccctaat ggtatagtgt 900
gactgtgaag gacacaattc gtattccata tttctggaat ggattctctg acatcagatt 960
atgacttatg ataatatcag tttatctcac tcacacacca atgatattgg attctatgt 1019
<210> 40 <211> 216 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 40
Met Ala Ala Pro Pro Ala Arg Ala Arg Ala Asp Tyr Asp Tyr beu Ile
Lys Leu Leu Leu Ile Gly Asp Ser Gly Val Gly Lys Ser Cys Leu Leu 20 25 30
Leu Arg Phe Ser Asp Gly Ser Phe Thr Thr Ser Phe Ile Thr Thr Ile 35 40 45
Gly Ile Asp Phe Lys Ile Arg Thr Ile Glu Leu Asp Gly Lys Arg Ile
Lys Leu Gln Ile Trp Asp Thr Ala Gly Gln Glu Arg Phe Arg Thr Ile 65 70 75 80 Thr Thr Ala Tyr Tyr Arg Gly Ala Met Gly Ile Leu Leu Val Tyr Asp
Val Thr Asp Glu Ser Ser Phe Asn Asn Ile Arg Asn Trp Ile Arg Asn
Ile Glu Gln His Ala Ser Asp Ser Val Asn Lys Ile Leu Val Gly Asn
Lys Ala Asp Met Asp Glu Ser Lys Arg Ala Val Pro Lys Ser Lys Gly
Gln Ala Leu Ala Asp Glu Tyr Gly Met Lys Phe Phe Glu Thr Ser Ala
Lys Thr Asn Leu Asn Val Glu Glu Val Phe Phe Ser Ile Ala Lys Asp
Ile Lys Gln Arg Leu Ala Asp Thr Asp Ala Arg Ala Glu Pro Gln Thr
Ile Lys Ile Asn Gln Ser Asp Gln Gly Ala Gly Thr Ser Gln Ala Thr
Gln Lys Ser Ala Cys Cys Gly Thr
<210> 41
<211> 1056
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 41
aaaaaaactt ctgaatctcc gaaaaaagcc aatcggggga agaaaaaaat tcaacggccg 60
tctggttact gtcttgcttg cttccgacga tctatcttcc ccgagtagat ttgaaatggc 120
tgctcctcct gctagagctc gtgctgatta cgattacctc attaaacttc tgctgatcgg 180
agacagcggt gttggtaaga gttgccttct cttacgtttc tcagatggct cgtttaccac 240
cagtttcatt acaactattg ggattgattt taagatacgg actattgagc tcgatgggaa 300
gagaattaag ctgcaaatct gggatactgc cggacaggag cggttccgca caatcacaac 360
tgcgtactac cgtggagcca tggggatttt gcttgtgtat gatgtgactg atgaatcatc 420
tttcaacaac atcaggaatt ggatccgtaa cattgagcag catgcttctg atagtgtcaa 480
caagattcta gttgggaaca aagcagatat ggatgaaagc aaaagagctg tgccaaaatc 540
taagggccaa gctcttgcag atgaatatgg aatgaagttt ttcgagacta gtgccaagac 600
taacttaaac gttgaggaag ttttcttctc tattgctaaa gacattaagc aaagacttgc 660
agataccgat gcacgagctg agccgcaaac aatcaaaatc aaccaatccg accaaggtgc 720 gggaacatct caagctactc agaaatcagc atgttgcggc acataaaaat tgggtccacg 780 acgcctgtca aaggagagaa tctggctagt gaaagagaaa tggtatttgg aaagaaaaaa 840 tgaaaaagga aatcaatctt cttttgcttt tcttctatat gagatggtgt ttctacgtat 900 tcttttaaga ttctctcttt ccctaatggt atagtgtgac tgtgaaggac acaattcgta 960 ttccatattt ctggaatgga ttctctgaca tcagattatg acttatgata atatcagttt 1020 atctcactca cacaccaatg atattggatt ctatgt 1056
<210> 42
<211> 216
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 42
Met Ala Ala Pro Pro Ala Arg Ala Arg Ala Asp Tyr Asp Tyr Leu Ile 15 10 15
Lys Leu Leu Leu Ile Gly Asp Ser Gly Val Gly Lys Ser Cys Leu Leu
20 25 30
Leu Arg Phe Ser Asp Gly Ser Phe Thr Thr Ser Phe Ile Thr Thr Ile 35 40 45
Gly Ile Asp Phe Lys Ile Arg Thr Ile Glu Leu Asp Gly Lys Arg Ile 50 55 60
Lys Leu Gln Ile Trp Asp Thr Ala Gly Gln Glu Arg Phe Arg Thr Ile 65 70 75 80
Thr Thr Ala Tyr Tyr Arg Gly Ala Met Gly Ile Leu Leu Val Tyr Asp 85 90 95
Val Thr Asp Glu Ser Ser Phe Asn Asn Ile Arg Asn Trp Ile Arg Asn 100 105 110
Ile Glu Gln His Ala Ser Asp Ser Val Asn Lys Ile Leu Val Gly Asn 115 120 125
Lys Ala Asp Met Asp Glu Ser Lys Arg Ala Val Pro Lys Ser Lys Gly 130 135 140
Gln Ala Leu Ala Asp Glu Tyr Gly Met Lys Phe Phe Glu Thr Ser Ala 145 150 155 160
Lys Thr Asn Leu Asn Val Glu Glu Val Phe Phe Ser Ile Ala Lys Asp 165 170 175 Ile Lys Gln Arg Leu Ala Asp Thr Asp Ala Arg Ala Glu Pro Gln Thr
Ile Lys Ile Asn Gln Ser Asp Gln Gly Ala Gly Thr Ser Gln Ala Thr
Gln Lys Ser Ala Cys Cys Gly Thr
<210> 43 <211> 1294 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 43
atattccaaa attaaagaga atttaattta ttgttttcct tccagaaaaa tattaatatt 60
ctttctaaac taaaaaatgg agtcttcaaa tagcacagaa gcagagacat agagcgggaa 120
cgcgtttagt cacagctttc ttctccttta gcttttctct ctacacttgc ttctctctct 180
ctctcctttg ggttatcctt cttgagatct gtgcttgcgt ttcttcttca ttcgacgaca 240
ctttatctcg ggagatttca gatttgtcga tttgttcagc aatggcgcca ccgattgagg 300
tttctaccaa aagctacgtt gagaaacatg tttcacttcc tactcttaat gagaggatac 360
tttcgtccat gagtcacaga tcagtagctg cacacccatg gcatgatctc gagataggac 420
ctgaagcccc aattatcttc aattgtgtgg ttgagatagg aaaagggagc aaggtgaaat 480
atgaactcga caaaactacg ggtctcatta aggtcgaccg tattctttac tcatctgtcg 540
tatacccaca caactatggg ttcattccgc gtaccctttg tgaggacagt gaccctattg 600
atgttcttgt cattatgcag gaaccggtga tcccaggatg ctttcttcgg gccaaagcta 660
ttggtctgat gccaatgatt gatcagggtg agaaagacga caagatcatt gctgtctgcg 720
ctgacgatcc agagtatcgc cattacaacg acatcagtga gcttccgcct catcgtatgg 780
ctgagatccg ccgtttcttt gaagactata agaaaaacga gaacaaggaa gtagccgtta 840
acgacttcct tccggcaact gcagcctacg acgcagttca gcattccatg gatctctatg 900
cagactacgt cgtggagaac ctaagacgtt gaatcaccac ctcaagcaat ggaatgaaag 960
ctcacaactg cattattcac aaatataaat atacatataa atgtcaggct tctcaaagga 1020
tatatttgtt gtgtatgtcc tctgatgaat ccggtagatg atgccgataa ttcttttttt 1080
tttttgtcgt atgaaaccga taatcaaaga ctaaaacagg gatttttctc atttgtggtc 1140
atcacttttt aaattttggt gtcatttctc atcttaatca atttgttttt gagttttatt 1200
cttctattag atcttttata catcaaagaa tagatgaaga ttcctcccta aaaccttata 1260
gtatgtcatt tattcacaat atgttatacg tgtt 1294
<210> 44 <211> 216 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 44
Met Ala Pro Pro Ile Glu Val Ser Thr Lys Ser Tyr Val Glu Lys His 15 10 15
Val Ser Leu Pro Thr Leu Asn Glu Arg Ile Leu Ser Ser Met Ser His 20 25 30
Arg Ser Val Ala Ala His Pro Trp His Asp Leu Glu Ile Gly Pro Glu 35 40 45
Ala Pro Ile Ile Phe Asn Cys Val Val Glu Ile Gly Lys Gly Ser Lys 50 55 60
Val Lys Tyr Glu Leu Asp Lys Thr Thr Gly Leu Ile Lys Val Asp Arg 65 70 75 80
Ile Leu Tyr Ser Ser Val Val Tyr Pro His Asn Tyr Gly Phe Ile Pro 85 90 95
Arg Thr Leu Cys Glu Asp Ser Asp Pro Ile Asp Val Leu Val Ile Met 100 105 110
Gln Glu Pro Val Ile Pro Gly Cys Phe Leu Arg Ala Lys Ala Ile Gly 115 120 125
Leu Met Pro Met Ile Asp Gln Gly Glu Lys Asp Asp Lys Ile Ile Ala 130 135 140
Val Cys Ala Asp Asp Pro Glu Tyr Arg His Tyr Αεη Asp Ile Ser Glu 145 150 155 160
Leu Pro Pro His Arg Met Ala Glu Ile Arg Arg Phe Phe Glu Asp Tyr 165 170 175
Lys Lys Asn Glu Αεη Lys Glu Val Ala Val Αεη Asp Phe Leu Pro Ala 180 185 190
Thr Ala Ala Tyr Αερ Ala Val Gln Ηίε Ser Met Αερ Leu Tyr Ala Asp 195 200 205
Tyr Val Val Glu Αεη Leu Arg Arg 210 215
<210> 45
<211> 1006
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 45
ctttcctatc cctaaaaccc gagagagcat cttcttctcc tcttagggta gaagaaggac 60
gaaaatcgga ggaggaagaa gaagatcgat tcgatttgtg atcaacgatg agctccttca 120
atggaaacag caacatcgac aacctcctaa tccaaaccct acttggacgt ctccaaattc 180
gtccccctaa ctctcatttc ctctctcaat ccctagacga cctcctcttc aaatccgacg 240
acagcgacgg cgatgatgac ggagaaggtc agaccagtct cgacagagaa gaagctaggc 300
ttgagaaaga gctaatccga gtcatcgtct ctggtcgaag cgattctctc aagccgaatt 360
caggtcaagc cgtgacagtc aacgaacacc acatctgcgt tgggtttcat gaggatgagg 420
aatcggatta tcgtgtttgg gagtggcatg gtcatatcat gttgtttgat gaagagaatg 480
ggtacacgcc tgagtatatc tacgggaatt acttcgagag gttgcctgtg aagcttccta 540
ataaccgccg tgtggagaag gagaagaaga aggagatgaa agaagaggag gtggagaatt 600
tggggcttag agagttgatc gatggtggtg acgctgctcc tggtaggatt cttcatagga 660
acaacatcaa catcggttcc tcaagggtct aagttcctaa gagcgtcttg gtagggagag 720
gtcacattgt tcgggaagat ttcagatgtg tgaacaactc gcgacaacaa aacataaggt 780
gctggtgggt ctacgggttc tattccgttt tatttaaacc gggaaatcca tgggtgaatc 840
tgttttcttt aagaaattca tctgaagttg tttctgaacc aaatttacaa tacatgttaa 900
tgaagagaga aaagattaca atgcatggtc atcgaactcg gaagctttca agtttcccca 960
tgtttgttta ttttgtgttc ttaaatcaga atcatatgtt ttgctc 1006
<210> 46 <211> 194 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 46
Met Ser Ser Phe Asn Gly Asn Ser Asn Ile Asp Asn Leu Leu Ile Gln
Leu Lys Pro Asn Ser Gly Gln Ala Val Thr Val Asn Glu His His Ile
Thr Leu Leu Gly Arg Leu Gln Ile Arg Pro Pro Asn Ser His Phe Leu 20 25 30
Ser Gln Ser Leu Asp Asp Leu Leu Phe Lys Ser Asp Asp Ser Αερ Gly 35 40 45
Asp Asp Asp Gly Glu Gly Gln Thr Ser Leu Asp Arg Glu Glu Ala Arg 50 55 60
Leu Glu Lys Glu Leu Ile Arg Val Ile Val Ser Gly Arg Ser Asp Ser 85 90 95
Cys Val Gly Phe His Glu Asp Glu Glu Ser Asp Tyr Arg Val Trp Glu 100 105 110
Trp His Gly His Ile Met Leu Phe Asp Glu Glu Asn Gly Tyr Thr Pro 115 120 125
Glu Tyr Ile Tyr Gly Asn Tyr Phe Glu Arg Leu Pro Val Lys Leu Pro 130 135 140
Asn Asn Arg Arg Val Glu Lys Glu Lys Lys Lys Glu Met Lys Glu Glu 145 150 155 160
Glu Val Glu Asn Leu Gly Leu Arg Glu Leu Ile Asp Gly Gly Asp Ala 165 170 175
Ala Pro Gly Arg Ile Leu His Arg Asn Asn Ile Asn Ile Gly Ser Ser 180 185 190
Arg Val
<210> 47 <211> 1929 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 47
atggtgagcg ataagatagt agaatcaagc tccgacgaag tcgttaaatc ttccaagcgg agtcatcatc ttgatgagga cggcaatgaa ggtaacgatg gtgaacttga tttggaggaa gatagagaaa gcaatagaga caactacaga agtagtagag agactgggag ggagaatgaa agaggaagaa gagaagacca gagtgatcag ggggaagtta ggcatgatgc agaagatgac ggtgaaactc agggcaacgt tgaaaggtct gttgtttggg gagttgaaga acaagaagct aggattacgc aagccatatt ggagaaatat gcagatgttc aagctaaagc tgggttggat ctatcttcag cagttgggga aacacctgca ctagcttccg caggcagccc aaagagtgac
caccgcaaac accgtaggtc gtattctcct 60
cacaagcacc atcatcacaa gcatcgacac 120
aagaatgttt atccattttt ggggaatcct 180
ggggagaatt tgaagaagaa gggaagcatt 240
ggtaggagta gtagagataa agctaggtct 3 00
agagagagac gtaaggatca agatagggat 360
gagatctata aaagtggtgg tgatggatat 420
ttagattctt taaaaagcca taaacctaac 480
gaagttgata atgatgatga cggtgaagat 540
gcagagatga aaagaatcga ggaaagcaag 600
aagaaaaagt tggagcagtc ctctactgtg 660
actgaggccg tagatggtga agtcgccaag 720
cggcttgtga tatcagactc agatatgaca 780
atgttcagtg atgatatctt tggggagtct 840 cctctagctg atggtactcg gaaagggaat gcacttgttc cttttgtaag gagtggactc 900
aatgataatt gggatgatgc agaaggttat tacagttatc agcttggtga actacttgat 960
gatagatatg aaatcatggc tactcatggg aaaggtgtat tctctaccgt ggtgcgtgca 1020
aaagacacaa aacctgagct aggtgaacct gaggaagtgg ctataaaaat tattcggaaa 1080
aatgagacaa tgcataaggc tggccaggct gagattcgga tattgaagaa gctagtttgc 1140
tctgacccag agaataagca ccactgcgtc cgtcttcttt caacttttga atataggaac 1200
cacctttgct tggtgtttga gtctcttcat ctgaatctcc gtgaagttgt gaagaagatt 1260
ggtgtcaaca ttggtctaaa actatatgat gttagagtgt atgctgagca gttattcata 1320
tcccttaaac atctcaagaa ctgtggggtt cttcactgcg atataaagcc tgataacata 1380
ctaatgaatg agggaagaaa catgttaaag ctttgtgatt ttggtagtgc aatgtttgct 1440
ggtgaaaacc aagttacacc atatcttgtt agtcgtttct acagagctcc agaaatcatt 1500
cttggactac cctacgacca tccgttagat atttggtcag ttggttgttg tctgtatgag 1560
ctttatagcg ggaaaattat gttccctggc tccacaaaca atgatatgtt acgcctgcat 1620
atggaactga aaggtccctt ccctaaaaag atgcttcgca aaggagcatt tatcgatcaa 1680
cactttgata aggacttatg cttctatgct acagaggagg atagtgttac tggaaagaca 1740
ataaggagaa taatggtcaa cgtaaagcca aaagatttag gttcagtaat tagacgacgt 1800
tatgaggatg aagatcccaa ggtgttggtt catttcagga atcttttgga caaaattttc 1860
acacttgatc ctcaaaagag acttacagtg tcacaggcat tagctcaccc attcatcacg 1920
ggcaagtga 192 9
<210> 48 <211> 642 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 48
Met Val Ser Asp Lys Ile Val Glu Ser Ser His Arg Lys His Arg Arg
Ser Tyr Ser Pro Ser Asp Glu Val Val Lys Ser Ser Lys Arg His Lys 20 25 30
His His His His Lys His Arg His Ser His His Leu Asp Glu Asp Gly 35 40 45
Asn Glu Lys Asn Val Tyr Pro Phe Leu Gly Asn Pro Gly Asn Asp Gly
Glu Leu Asp Leu Glu Glu Gly Glu Asn Leu Lys Lys Lys Gly Ser Ile 65 70 75 80 Asp Arg Glu Ser Asn Arg Asp Asn Tyr Arg Gly Arg Ser Ser Arg Asp 85 90 95
Lys Ala Arg Ser Ser Ser Arg Glu Thr Gly Arg Glu Asn Glu Arg Glu 100 105 110
Arg Arg Lys Asp Gln Asp Arg Asp Arg Gly Arg Arg Glu Asp Gln Ser 115 120 125
Asp Gln Glu Ile Tyr Lys Ser Gly Gly Asp Gly Tyr Gly Glu Val Arg 130 135 140
His Asp Ala Glu Asp Asp Leu Asp Ser Leu Lys Ser His Lys Pro Asn 145 150 155 160
Gly Glu Thr Gln Gly Asn Val Glu Arg Ser Glu Val Asp Asn Asp Asp 165 170 175
Asp Gly Glu Asp Val Val Trp Gly Val Glu Glu Gln Glu Ala Ala Glu 180 185 190
Met Lys Arg Ile Glu Glu Ser Lys Arg Ile Thr Gln Ala Ile Leu Glu 195 200 205
Lys Tyr Lys Lys Lys Leu Glu Gln Ser Ser Thr Val Ala Asp Val Gln 210 215 220
Ala Lys Ala Gly Leu Asp Thr Glu Ala Val Asp Gly Glu Val Ala Lys 225 230 235 240
Leu Ser Ser Ala Val Gly Glu Thr Pro Ala Arg Leu Val Ile Ser Asp 245 250 255
Ser Asp Met Thr Leu Ala Ser Ala Gly Ser Pro Lys Ser Asp Met Phe 260 265 270
Ser Asp Asp Ile Phe Gly Glu Ser Pro Leu Ala Asp Gly Thr Arg Lys 275 280 285
Gly Asn Ala Leu Val Pro Phe Val Arg Ser Gly Leu Asn Asp Asn Trp 290 295 300
Asp Asp Ala Glu Gly Tyr Tyr Ser Tyr Gln Leu Gly Glu Leu Leu Asp 305 310 315 320
Asp Arg Tyr Glu Ile Met Ala Thr His Gly Lys Gly Val Phe Ser Thr 325 330 335
Val Val Arg Ala Lys Asp Thr Lys Pro Glu Leu Gly Glu Pro Glu Glu 340 345 350 Val Ala Ile Lys Ile Ile Arg Lys Asn Glu Thr Met His Lys Ala Gly 355 360 365
Gln Ala Glu Ile Arg Ile Leu Lys Lys Leu Val Cys Ser Asp Pro Glu 370 375 380
Asn Lys His His Cys Val Arg Leu Leu Ser Thr Phe Glu Tyr Arg Asn 385 390 395 400
His Leu Cys Leu Val Phe Glu Ser Leu His Leu Asn Leu Arg Glu Val 405 410 415
Val Lys Lys Ile Gly Val Asn Ile Gly Leu Lys Leu Tyr Asp Val Arg 420 425 430
Val Tyr Ala Glu Gln Leu Phe Ile Ser Leu Lys His Leu Lys Asn Cys 435 440 445
Gly Val Leu His Cys Asp Ile Lys Pro Asp Asn Ile Leu Met Asn Glu 450 455 460
Gly Arg Asn Met Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Met Phe Ala 465 470 475 480
Gly Glu Asn Gln Val Thr Pro Tyr Leu Val Ser Arg Phe Tyr Arg Ala 485 490 495
Pro Glu Ile Ile Leu Gly Leu Pro Tyr Asp His Pro Leu Asp Ile Trp 500 505 510
Ser Val Gly Cys Cys Leu Tyr Glu Leu Tyr Ser Gly Lys Ile Met Phe 515 520 525
Pro Gly Ser Thr Asn Asn Asp Met Leu Arg Leu His Met Glu Leu Lys 530 535 540
Gly Pro Phe Pro Lys Lys Met Leu Arg Lys Gly Ala Phe Ile Asp Gln 545 550 555 560
His Phe Asp Lys Asp Leu Cys Phe Tyr Ala Thr Glu Glu Asp Ser Val 565 570 575
Thr Gly Lys Thr Ile Arg Arg Ile Met Val Asn Val Lys Pro Lys Asp 580 585 590
Leu Gly Ser Val Ile Arg Arg Arg Tyr Glu Asp Glu Asp Pro Lys Val 595 600 605
Leu Val His Phe Arg Asn Leu Leu Asp Lys Ile Phe Thr Leu Asp Pro 610 615 620
Gln Lys Arg Leu Thr Val Ser Gln Ala Leu Ala His Pro Phe Ile Thr 625 630 635 640
Gly Lys
<210> 49 <211> 417 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 49
atggctccga aagcggcaga gaagaaaccg gctgggaaga agccagcaga aaaagctccg 60
gcagagaaat taccaaaggc ggagaagaag atcaccaagg aaggtggaag cgaaaagaag 12 0 aagaagaaat cgaagaagaa catcgagacg tacaagatct acatcttcaa ggttctgaaa 180 caagttcatc ctgatatcgg aatctccggg aaagcgatgg ggatcatgaa cagtttcatc 240 aacgacatct tcgagaaact agctcaggaa tcatcgcgat tggctaggta caacaagaaa 300 ccgacgatca cttctcggga aattcagacg gcggtgagac ttgtgttgcc tggagagctc 360 tcgaaacacg ctgtttctga aggcactaag gcggttacta aattcactag ctcgtag 417
<210> 50 <211> 138 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 50
Met Ala Pro Lys Ala Ala Glu Lys Lys Pro Ala Gly Lys Lys Pro Ala 15 10 15
Glu Lys Ala Pro Ala Glu Lys Leu Pro Lys Ala Glu Lys Lys Ile Thr 20 25 30
Lys Glu Gly Gly Ser Glu Lys Lys Lys Lys Lys Ser Lys Lys Asn Ile 35 40 45
Glu Thr Tyr Lys Ile Tyr Ile Phe Lys Val Leu Lys Gln Val His Pro 50 55 60
Asp Ile Gly Ile Ser Gly Lys Ala Met Gly Ile Met Asn Ser Phe Ile 65 70 75 80
Asn Asp Ile Phe Glu Lys Leu Ala Gln Glu Ser Ser Arg Leu Ala Arg 85 90 95 Tyr Asn Lys Lys Pro Thr Ile Thr Ser Arg Glu Ile Gln Thr Ala Val
Arg Leu Val Leu Pro Gly Glu Leu Ser Lys His Ala Val Ser Glu Gly
Thr Lys Ala Val Thr Lys Phe Thr Ser Ser
<210> 51
<211> 2205 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <4 00> 51
atggctgcga ttgaattaca caagccggag atcaacgccg atgacgacga tgacgaatcc 60
ccggtggagc aggttcgtct cactgtatcg aaccacgacg atccttctct accagtgtgg 120
acgtttcgga tgtggttttt agggcttctc tcttgtattc tcctctcgtt tctcaacact 180
ttcttcggat acagaactca gcctctgatg atcactatga tctctgttca agttgttacg 240
ttgcctttag ggaagcttat ggctagggtt ttgcctgaga ccaagtataa gattggttcg 300
tgggagtttt cttttaatcc gggtcccttt aacgtcaagg aacatgtgtt gatctctatg 360
tttgctaatg ctggtgctgg atttggatct ggtactgctt acgctgttgg tattgttgat 420
atcatcatgg ctttttataa aaggaagatt agtttcttgg ctagttggat tcttgtcatc 480
actactcaga ttcttgggta tggttgggct ggtatcatga gaaagttagt tgttgatcct 540
gcacagatgt ggtggcctac gagtgttctt caagtctctc tgtttcgtgc tcttcatgag 600
aaggacaatg caagaatgtc acgaggaaag ttctttgtga ttgcgtttgt ttgtagcttc 660
gcgtggtaca tattcccagc ttatttgttc ttgaccttat catcaatatc ttgggtttgt 720
tgggcattcc cgaagtctat cacagctcag cagttaggat ctggaatgtc aggacttggg 780
attggtgcat ttgctcttga ttggtctgtt atagcttctt accttggaag ccctcttgtg 840
actcctttct ttgcaattgt caatgtcctt gttggttacg ttttggtcat gtatatggtt 900
ataccaatat catattgggg catgaatgtg tatgaagcaa acaagtttcc aattttctcc 960
tctgatctgt ttgataagca agggcaactt tacaatatct ccaccattgt caacaacaag 1020
tttgaattgg acatggagaa ttatcaacaa caaggtcggg tttatctcag tacgttcttt 1080
gctatcagtt acgggattgg tttcgcagca atcgtttcca cactgactca tgttgctctc 1140
ttcaatggaa agggaatttg gcaacaagta cgagcttcaa ctaaagctaa aatggacata 12 00
cacacaaggt tgatgaagaa gtacaaagac ataccaggtt ggtggtttta cagtctgctt 1260
gcgatctcat tggtgctatc tcttgtcctc tgcattttca tgaaagacga gatccaaatg 1320
ccttggtggg gactccttct agcatcattc atggccctta cattcactgt accagtcagc 1380
attatcacag ctactactaa tcagactcca ggtctgaaca ttatcacaga atatctcatg 1440 ggtgtgttgt taccggggag accaatagct aacgtctgct tcaaaactta tgggtacata 1500
agcatgtcac aagctatatc attccttaac gacttcaagc taggccatta catgaagata 1560
ccaccaagat cgatgttctt agtccagttc ataggaacgg tgatagcagg aacagtgaat 162 0
atatcagtgg catggtactt gctgacatca gtagaaaaca tctgccagaa ggagttgctt 1680
cctccaaaca gtccatggac atgtccaagt gacagagttt tcttcgacgc atcagtgatt 1740
tggggattag taggacccaa gagaatcttt ggtcggctag gaaactaccc tgcactaaac 1800
tggttcttct taggtggact aataggaccg gtcctcgtgt ggcttctcca aaaagccttc 1860
ccaacgaaaa catggatctc gcagatcaat ctcccagttc ttttaggagc aacagcagca 1920
atgccgccag cgacaagcgt gaacttcaac tgctggatca tagtaggagt gatattcaat 1980
tactttgtgt tcaagtactg caaaaagtgg tggcagaggt ataactacgt gctatcggca 2040
gctttggatg cgggattggc gttcatggga gtgttgttat actttagttt gacgatgaat 2100
ggaatatcga taaatcattg gtggggtgct aagggtgaga attgtcctct tgcttcttgt 2160
cctactgctc ctggtgttct agttgatggt tgtcctgttt tttaa 2205
<210> 52 <211> 734 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 52
Met Ala Ala Ile Glu Leu His Lys Pro Glu Ile Asn Ala Asp Asp Asp
15 10 15
Asp Asp Glu Ser Pro Val Glu Gln Val Arg Leu Thr Val Ser Asn His 20 25 30
Asp Asp Pro Ser Leu Pro Val Trp Thr Phe Arg Met Trp Phe Leu Gly 35 40 45
Leu Leu Ser Cys Ile Leu Leu Ser Phe Leu Asn Thr Phe Phe Gly Tyr 50 55 60
Arg Thr Gln Pro Leu Met Ile Thr Met Ile Ser Val Gln Val Val Thr 65 70 75 80
Leu Pro Leu Gly Lys Leu Met Ala Arg Val Leu Pro Glu Thr Lys Tyr 85 90 95
Lys Ile Gly Ser Trp Glu Phe Ser Phe Asn Pro Gly Pro Phe Asn Val 100 105 110
Lys Glu His Val Leu Ile Ser Met Phe Ala Asn Ala Gly Ala Gly Phe 115 120 125 Gly Ser Gly Thr Ala Tyr Ala Val Gly Ile Val Asp Ile Ile Met Ala 130 135 140
Phe Tyr Lys Arg Lys Ile Ser Phe Leu Ala Ser Trp Ile Leu Val Ile 145 150 155 160
Thr Thr Gln Ile Leu Gly Tyr Gly Trp Ala Gly Ile Met Arg Lys Leu 165 170 175
Val Val Asp Pro Ala Gln Met Trp Trp Pro Thr Ser Val Leu Gln Val 180 185 190
Ser Leu Phe Arg Ala Leu His Glu Lys Asp Asn Ala Arg Met Ser Arg 195 200 205
Gly Lys Phe Phe Val Ile Ala Phe Val Cys Ser Phe Ala Trp Tyr Ile 210 215 220
Phe Pro Ala Tyr Leu Phe Leu Thr Leu Ser Ser Ile Ser Trp Val Cys 225 230 235 240
Trp Ala Phe Pro Lys Ser Ile Thr Ala Gln Gln Leu Gly Ser Gly Met 245 250 255
Ser Gly Leu Gly Ile Gly Ala Phe Ala Leu Asp Trp Ser Val Ile Ala 260 265 270
Ser Tyr Leu Gly Ser Pro Leu Val Thr Pro Phe Phe Ala Ile Val Asn 275 280 285
Val Leu Val Gly Tyr Val Leu Val Met Tyr Met Val Ile Pro Ile Ser 290 295 300
Tyr Trp Gly Met Asn Val Tyr Glu Ala Asn Lys Phe Pro Ile Phe Ser 305 310 315 320
Ser Asp Leu Phe Asp Lys Gln Gly Gln Leu Tyr Asn Ile Ser Thr Ile 325 330 335
Val Asn Asn Lys Phe Glu Leu Asp Met Glu Asn Tyr Gln Gln Gln Gly 340 345 350
Arg Val Tyr Leu Ser Thr Phe Phe Ala Ile Ser Tyr Gly Ile Gly Phe 355 360 365
Ala Ala Ile Val Ser Thr Leu Thr His Val Ala Leu Phe Asn Gly Lys 370 375 380
Gly Ile Trp Gln Gln Val Arg Ala Ser Thr Lys Ala Lys Met Asp Ile 385 390 395 400 His Thr Arg Leu Met Lys Lys Tyr Lys Asp Xle Pro Gly Trp Trp Phe 405 410 415
Tyr Ser Leu Leu Ala Ile Ser Leu Val Leu Ser Leu Val Leu Cys Ile 420 425 430
Phe Met Lys Asp Glu Ile Gln Met Pro Trp Trp Gly Leu Leu Leu Ala 435 440 445
Ser Phe Met Ala Leu Thr Phe Thr Val Pro Val Ser Ile Ile Thr Ala 450 455 460
Thr Thr Asn Gln Thr Pro Gly Leu Asn Ile Ile Thr Glu Tyr Leu Met 465 470 475 480
Gly Val Leu Leu Pro Gly Arg Pro Ile Ala Asn Val Cys Phe Lys Thr 485 490 495
Tyr Gly Tyr Ile Ser Met Ser Gln Ala Ile Ser Phe Leu Asn Asp Phe 500 505 510
Lys Leu Gly His Tyr Met Lys Ile Pro Pro Arg Ser Met Phe Leu Val 515 520 525
Gln Phe Ile Gly Thr Val Ile Ala Gly Thr Val Asn Ile Ser Val Ala 530 535 540
Trp Tyr Leu Leu Thr Ser Val Glu Asn Ile Cys Gln Lys Glu Leu Leu 545 550 555 560
Pro Pro Asn Ser Pro Trp Thr Cys Pro Ser Asp Arg Val Phe Phe Asp 565 570 575
Ala Ser Val Ile Trp Gly Leu Val Gly Pro Lys Arg Ile Phe Gly Arg 580 585 590
Leu Gly Asn Tyr Pro Ala Leu Asn Trp Phe Phe Leu Gly Gly Leu Ile 595 600 605
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Trp Ile Ser Gln Ile Asn Leu Pro Val Leu Leu Gly Ala Thr Ala Ala 625 630 635 640
Met Pro Pro Ala Thr Ser Val Asn Phe Asn Cys Trp Ile Ile Val Gly 645 650 655
Val Ile Phe Asn Tyr Phe Val Phe Lys Tyr Cys Lys Lys Trp Trp Gln Arg Tyr Asn Tyr Val Leu Ser Ala Ala Leu Asp Ala Gly Leu Ala Phe
Met Gly Val Leu Leu Tyr Phe Ser Leu Thr Met Asn Gly Ile Ser Ile
Asn His Trp Trp Gly Ala Lys Gly Glu Asn Cys Pro Leu Ala Ser Cys
Pro Thr Ala Pro Gly Val Leu Val Asp Gly Cys Pro Val Phe
<210> 53
<211> 1127
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 53
gaagaagaga agaagaagaa ccttacaatt gcttttgtaa atattgtagg tagtttaagg 60
acgtcactac ctacatacat ggatttatgt ggaactcaga tgctgcgcct ctcatcgcct 120
catttcaaaa cccttcattt ggtgaggcat gcacaaggag tccacaatat agcattagaa 180
gagaagggag agaaacctga atcagaaaag ctttttgacg cccacctttc tccaaagggt 2 40
ttgcaacagg tttcggaaag gcgcaaccaa atccttgaat caggattact taacactgtc 3 00
gagttagtga taacctctcc gctgtgcaga gcaatggaaa cttcaatagg aatatttagg 360
ggacaaggat atgtaaatat atccgaagac tttgcaaaag ctaacaactt ccctccaatt 420
gtagcacttg agatctgtag agaacgcatg ggactctatc catgtgatcg tagagcaagt 480
ataagtactc gccgcacttt ttttcctgag atcgacttta caatgataga gagtgatgaa 540
gacgctctat ggcaagacaa ggaaagggaa aaattagaag atgttgctac tagaggtctt 600
cactttgtta aatggttatg ggagagacca gaaaaagaga tagcaattgt aagccacggg 660
attttcttgc aacaaacact ttgtgcgctg catggaaaag ttggcatacc tcttgaagat 720
agtctcctta caaggtttgc caattgtgaa ctccggtcga ttcggataga gaagagtgac 780
atggaagcgg atacattaat gacttgtaac tgtagaaatt acgttactcc accttcaact 840
tccttccatt cacacgcttg aatagaaggc atgcatatgt tatatatgaa ctgtgttttc 900
ttttccaagc cacactcatg gatcggagtt tcagaaccaa ggaaaatcga agctactatt 960
cccatttgcc attaccaagc taccagcacc aatacattgt aatcaatcac tagtaacaaa 1020
aaaatctata atttcaaaga tacgtttaca tcgaaaaaaa gaaagataac gtttgcaaat 1080
gatataaaag cttttccttt tttttttttt taattattat gaaaaaa 1127
<210> 54 <211> 260 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 54
Met Asp Leu Cys Gly Thr Gln Met Leu Arg Leu Ser Ser Pro His Phe 15 10 15
Lys Thr Leu His Leu Val Arg His Ala Gln Gly Val His Asn Ile Ala 20 25 30
Leu Glu Glu Lys Gly Glu Lys Pro Glu Ser Glu Lys Leu Phe Asp Ala 35 40 45
His Leu Ser Pro Lys Gly Leu Gln Gln Val Ser Glu Arg Arg Asn Gln 50 55 60
Ile Leu Glu Ser Gly Leu Leu Asn Thr Val Glu Leu Val Ile Thr Ser 65 70 75 80
Pro Leu Cys Arg Ala Met Glu Thr Ser Ile Gly Ile Phe Arg Gly Gln 85 90 95
Gly Tyr Val Asn Ile Ser Glu Asp Phe Ala Lys Ala Asn Asn Phe Pro 100 105 110
Pro Ile Val Ala Leu Glu Ile Cys Arg Glu Arg Met Gly Leu Tyr Pro 115 120 125
Cys Asp Arg Arg Ala Ser Ile Ser Thr Arg Arg Thr Phe Phe Pro Glu 130 135 140
Ile Asp Phe Thr Met Ile Glu Ser Asp Glu Asp Ala Leu Trp Gln Asp 145 150 155 160
Lys Glu Arg Glu Lys Leu Glu Asp Val Ala Thr Arg Gly Leu His Phe 165 170 175
Val Lys Trp Leu Trp Glu Arg Pro Glu Lys Glu Ile Ala Ile Val Ser 180 185 190
His Gly Ile Phe Leu Gln Gln Thr Leu Cys Ala Leu His Gly Lys Val 195 200 205
Gly Ile Pro Leu Glu Asp Ser Leu Leu Thr Arg Phe Ala Asn Cys Glu 210 215 220
Leu Arg Ser Ile Arg Ile Glu Lys Ser Asp Met Glu Ala Asp Thr Leu 225 230 235 240 Met Thr Cys Asn Cys Arg Asn Tyr Val Thr Pro Pro Ser Thr Ser Phe 245 250 255
His Ser His Ala 260
<210> 55
<211> 696
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 55 atggatgcaa gattcttgta ccccttggag agctgtaaaa tcattcactt gttgcgacat ggacaagcgt tgcacaatgt agaagctgag aaagatagaa atgcgttgtt gtctcctcat ctttttgatg ctccgcttac cgatcatggt caccaacagg ttgagaatct ccgcgaacga gttgtttcaa gcgggctact aaagagggtt gagctagttg taacttctcc gttgtttaga actatgcaaa ccgcagttgg tgtttttgga aatgaataca aacaatcgag tatgacaagt agccctccca ttttggcact tgaggttgct cgagaccgta atggagtccg tcctcctgac atgagaagaa acgttagcga gtatcaaact cttttcccca ccatcgattt ctctcagatt gaaagtgaag aggacaacct atggagaccg gatgttaggg agtccgaaga ggagattttg gcgagagggt tagagttcat gaaatggtta tggaagaggc cagagaagga ggtcgcagtt gttagccatg gaatagtttt gcagcatatg ttgtatgtgt ttgcaaacga ttgtgacctg tcaattagac atgaactttg caagaggttt gccaattgcg aaattcgtac tgtcgtgatt gtagacaaag gcatggcttc atctacggag aattga
<210> 56 <211> 231 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 56
Met Asp Ala Arg Phe Leu Tyr Pro Leu Glu Ser Cys Lys Ile Xle His 1 5 10 15
Leu Leu Arg His Gly Gln Ala Leu His Asn Val Glu Ala Glu Lys Asp 20 25 30
Arg Asn Ala Leu Leu Ser Pro His Leu Phe Asp Ala Pro Leu Thr Asp 35 40 45
His Gly His Gln Gln Val Glu Asn Leu Arg Glu Arg Val Val Ser Ser 50 55 60
Gly Leu Leu Lys Arg Val Glu Leu Val Val Thr Ser Pro Leu Phe Arg
60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 696 65 70 75 80
Thr Met Gln Thr Ala Val Gly Val Phe Gly Asn Glu Tyr Lys Gln Ser 85 90 95
Ser Met Thr Ser Ser Pro Pro Ile Leu Ala Leu Glu Val Ala Arg Asp 100 105 110
Arg Asn Gly Val Arg Pro Pro Asp Met Arg Arg Asn Val Ser Glu Tyr 115 120 125
Gln Thr Leu Phe Pro Thr Ile Asp Phe Ser Gln Ile Glu Ser Glu Glu 130 135 140
Asp Asn Leu Trp Arg Pro Asp Val Arg Glu Ser Glu Glu Glu Ile Leu 145 150 155 160
Ala Arg Gly Leu Glu Phe Met Lys Trp Leu Trp Lys Arg Pro Glu Lys 165 170 175
Glu Val Ala Val Val Ser His Gly Ile Val Leu Gln His Met Leu Tyr 180 185 190
Val Phe Ala Asn Asp Cys Asp Leu Ser Ile Arg His Glu Leu Cys Lys 195 200 205
Arg Phe Ala Asn Cys Glu Ile Arg Thr Val Val Ile Val Asp Lys Gly 210 215 220
Met Ala Ser Ser Thr Glu Asn 225 230
<210> 57 <211> 2114 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 57
agaatttttc cgtccaaatt gtttttggtc aaagcctcaa tggtcttgaa ttgacctgtt 60
cttaaaaccc gacccggatc cacctgcttc tttcaactaa cacacgctcc tgatccaaac 120 cattttttca tttttcaaat cattatcaac tctctcgctt cttcaacgat cgcataaatt 180 ccctctttgt ctgctcgatt cctgatctct agggtttggg ttccggagac gaagggggtg 240 tttcgtgtgt aattgagata ttgagattat tgctttgtaa aactcaaaat ctatggcggt 300 ttctagcgcc ttcgttgtta caccgaagct ggagaagctg ttagcgaatc accataatcc 3 60 aacgtattct tcttctccgg ccccgttgga tgtaattggg atacgtgctc ttccgatgaa 420 caataggaac aagcgaggtc tgatccagag agcgcgttgc gagatttctc cgtctaataa 480 ggcagctagc atctcagctc tcgagcagct caagacttct gctattgacc gatacactaa 540
ggaaagaagc agcattgtgg tgattgggct tagcattcac acagctcctg ttgagatgcg 600
tgagaagctt gccattccag aagctgaatg gccacgagct attgctgaat tgtgtggttt 660
gaatcatatt gaagaagctg ctgtactcag tacctgcaac cgaatggaga tttatgtttt 720
ggctctatct cagcatcgtg gagtcaaaga agtgactgag tggatgtcta agacaagtgg 780
aatcccggtt tcagaaatct gtcagcatcg ttttctattg tacaacaagg atgtcacgca 840
acatatattt gaagtctcag ctggtctaga ctctcttgtc ctaggtgaag gtcagatact 900
tgcacaggtt aaacaagttg ttaaagtagg tcaaggagtc aatggttttg ggaggaatat 960
cagtgggcta tttaaacacg caatcacagt tggaaagcgt gtcagaacag agacaaatat 102 0
cgctgctggg gctgtttccg ttagctcggc tgcagttgaa cttgctctca tgaagcttcc 1080
cgaatcttct catgcatcat ctgctaggat gttggtagtt ggtgctggaa agatggggaa 1140
gcttgtaatc aagcacttgg ttgctaaagg ttgcaccaaa atggtggttg tgaatcgaag 1200
cgaagagaaa gttgcagctg tccgcaatga gatgccgcct ggcgttgaga ttatttataa 1260
accccttgat gagatgctgt cttgtgctgc agaagctgat gtagtcttta ctagcacagc 1320
atctgagaca ccattattct tgaaggagca agtagagact ctccctcctg ttagagatgc 1380
gaggctcttt gttgatatct ctgttcctag aaatgtcggg tcctgcgtcg ctgaaataga 1440
cggtacacgg gttttcaacg tggatgacct caaggaagtc gttgctgcga ataaagaaga 1500
cagggtgagg aaagcaatgg acgctcaggc tataattaca gatgaatcaa aacactttga 1560
agcgtggagg gactcgttgg agacggttcc aacaatcaag aaattaaggg gatatacaga 1620
gagaattata gctgcagaga ttgagaaatc cttgcccaaa atgggcattg acatgaacaa 1680
gaagatgagg aaaacagtag atgatctaat ccgaggtata gtgaacaagc tcctgcacgg 1740
tccaatgcag catttgagat gcgatgggaa cgatagcaga acgctgagtg agacactaga 1800
taacatgcag gctctgaaca ggatgtatgg acttgatgca gagatactcg aggagaagat 1860
tagagcaaag gtggaaaaaa agtagagaga agagagcctt tgtttcatcc attttttagg 1920
ttcgtagagg ttaaaaaccg gcacctttgt aatatacaca cttgagtaga gggtgaagac 1980
agcctctggg gaagatgatc ttctggttca tgcccttgat gggaagcata ccataattgt 2040
tttattgcgt tcttttgtta aagttaaaag tttaaaactt tgtacacata atatatatac 2100
attttttttt ccct 2114
<210> 58 <211> 530 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 58
Met Ala Val Ser Ser Ala Phe Val Val Thr Pro Lys Leu Glu Lys Leu 10 15
Leu Ala Asn His His Asn Pro Thr Tyr Ser Ser Ser Pro Ala Pro Leu 20 25 30
Asp Val Ile Gly Ile Arg Ala Leu Pro Met Asn Asn Arg Asn Lys Arg 35 40 45
Gly Leu Ile Gln Arg Ala Arg Cys Glu Ile Ser Pro Ser Asn Lys Ala 50 55 60
Ala Ser Ile Ser Ala Leu Glu Gln Leu Lys Thr Ser Ala Ile Asp Arg 65 70 75 80
Tyr Thr Lys Glu Arg Ser Ser Ile Val Val Ile Gly Leu Ser Ile His 85 90 95
Thr Ala Pro Val Glu Met Arg Glu Lys Leu Ala Ile Pro Glu Ala Glu 100 105 110
Trp Pro Arg Ala Ile Ala Glu Leu Cys Gly Leu Asn His Ile Glu Glu 115 120 125
Ala Ala Val Leu Ser Thr Cys Asn Arg Met Glu Ile Tyr Val Leu Ala 130 135 140
Leu Ser Gln His Arg Gly Val Lys Glu Val Thr Glu Trp Met Ser Lys 145 150 155 160
Thr Ser Gly Ile Pro Val Ser Glu Ile Cys Gln His Arg Phe Leu Leu 165 170 175
Tyr Asn Lys Asp Val Thr Gln His Ile Phe Glu Val Ser Ala Gly Leu 180 185 190
Asp Ser Leu Val Leu Gly Glu Gly Gln Ile Leu Ala Gln Val Lys Gln 195 200 205
Val Val Lys Val Gly Gln Gly Val Asn Gly Phe Gly Arg Asn Ile Ser 210 215 220
Gly Leu Phe Lys His Ala Ile Thr Val Gly Lys Arg Val Arg Thr Glu 225 230 235 240
Thr Asn Ile Ala Ala Gly Ala Val Ser Val Ser Ser Ala Ala Val Glu 245 250 255
Leu Ala Leu Met Lys Leu Pro Glu Ser Ser His Ala Ser Ser Ala Arg 260 265 270 Met Leu Val Val Gly Ala Gly Lys Met Gly Lys Leu Val Ile Lys His 275 280 285
Leu Val Ala Lys Gly Cys Thr Lys Met Val Val Val Asn Arg Ser Glu 290 295 300
Glu Lys Val Ala Ala Val Arg Asn Glu Met Pro Pro Gly Val Glu Ile 305 310 315 320
Ile Tyr Lys Pro Leu Asp Glu Met Leu Ser Cys Ala Ala Glu Ala Asp 325 330 335
Val Val Phe Thr Ser Thr Ala Ser Glu Thr Pro Leu Phe Leu Lys Glu 340 345 350
Gln Val Glu Thr Leu Pro Pro Val Arg Asp Ala Arg Leu Phe Val Asp 355 360 365
Ile Ser Val Pro Arg Asn Val Gly Ser Cys Val Ala Glu Ile Asp Gly 370 375 380
Thr Arg Val Phe Asn Val Asp Asp Leu Lys Glu Val Val Ala Ala Asn 385 390 395 400
Lys Glu Asp Arg Val Arg Lys Ala Met Asp Ala Gln Ala Ile Ile Thr 405 410 415
Asp Glu Ser Lys His Phe Glu Ala Trp Arg Asp Ser Leu Glu Thr Val 420 425 430
Pro Thr Ile Lys Lys Leu Arg Gly Tyr Thr Glu Arg Ile Ile Ala Ala 435 440 445
Glu Ile Glu Lys Ser Leu Pro Lys Met Gly Ile Asp Met Asn Lys Lys 450 455 460
Met Arg Lys Thr Val Asp Asp Leu Ile Arg Gly Ile Val Asn Lys Leu 465 470 475 480
Leu His Gly Pro Met Gln His Leu Arg Cys Asp Gly Asn Asp Ser Arg 485 490 495
Thr Leu Ser Glu Thr Leu Asp Asn Met Gln Ala Leu Asn Arg Met Tyr 500 505 510
Gly Leu Asp Ala Glu Ile Leu Glu Glu Lys Ile Arg Ala Lys Val Glu 515 520 525
Lys Lys 530 <210> 59
<211> 969
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 59
acttacttag tgagtactcc aaacataaga aacatgccaa acactagcag ctctcaaagc 60 ttcactatct tcgttgatgg ttggttaatc cgtcacaggt atttcgttga acagcttatg 120 tgtgcttctt ccttggatga aactaatcgt atctctctcg aagaacaaca atctctcgtg 180 gcccagtttc tatctcactg tcttcaatac taccaagaga aattcgcctc cgtttccctc 240 gccggggaca acgttttcac tttcttctgc ccaccgtggt ttaactccta cgctaaactt 300 attttatggg tcggcgattt caagccttct Cttgtgttta aactcaccga ggtctccgtg 360 gccgacctca cgcgccacca gaaagaccgg atctcgagtc ttaagtcgga gactaggagg 420 aaagagagag aagttatgcg agatttcgcc ctcgtgcaac aaagcgtggc ggatccgccg 480 gtgatgctcg cggcgaggcg cgtgggagcg gtgggaatgg tggacggaga agaaacggat 540 ttggaggagg cgatggaggt gcttaaagct gggatggcgg cagcgatgaa caacgctgat 600 cagctacggt gttcgacggt ggggaaagtg gtggagattc ttactccgcc gcaagcgatt 660 aaagtgttga ggacaatcgg acagcttcac ctccgtctga gagacagaga ccaagaaaga 720 gcttaaaaaa aaagatactt aatttgcttt gctctgcttc ttcaacaacg atggagtcat 780 cactaatttt tgtttttcgg gctcaaccac ttgatcctga gatttagatt tccttttggt 840 gatttatgat ttttaaaaga tttgagaatt gggctttttt gtttgtagtg atatgatgtc 900 atgtttttta tttttggctt ctcgtttctt ccttaaatca gttcttacta aatctcatca 960 gttactttt 969
<210> 60 <211> 230 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 60
Met Pro Asn Thr Ser Ser Ser Gln Ser Phe Thr Ile Phe Val Asp Gly 15 10 15
Trp Leu Ile Arg His Arg Tyr Phe Val Glu Gln Leu Met Cys Ala Ser 20 25 30
Ser Leu Asp Glu Thr Asn Arg Ile Ser Leu Glu Glu Gln Gln Ser Leu 35 40 45
Val Ala Gln Phe Leu Ser His Cys Leu Gln Tyr Tyr Gln Glu Lys Phe 50 55 60 Ala Ser Val Ser Leu Ala Gly Asp Asn Val Phe Thr Phe Phe Cys Pro 65 70 75 80
Pro Trp Phe Asn Ser Tyr Ala Lys Leu Ile Leu Trp Val Gly Asp Phe 85 90 95
Lys Pro Ser Leu Val Phe Lys Leu Thr Glu Val Ser Val Ala Asp Leu 100 105 110
Thr Arg His Gln Lys Asp Arg Ile Ser Ser Leu Lys Ser Glu Thr Arg 115 120 125
Arg Lys Glu Arg Glu Val Met Arg Asp Phe Ala Leu Val Gln Gln Ser 130 135 140
Val Ala Asp Pro Pro Val Met Leu Ala Ala Arg Arg Val Gly Ala Val 145 150 155 160
Gly Met Val Asp Gly Glu Glu Thr Asp Leu Glu Glu Ala Met Glu Val 165 170 175
Leu Lys Ala Gly Met Ala Ala Ala Met Asn Asn Ala Asp Gln Leu Arg 180 185 190
Cys Ser Thr Val Gly Lys Val Val Glu Ile Leu Thr Pro Pro Gln Ala 195 200 205
Ile Lys Val Leu Arg Thr Ile Gly Gln Leu His Leu Arg Leu Arg Asp 210 215 220
Arg Asp Gln Glu Arg Ala 225 230
<210> 61
<211> 1974
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 61 aagctttttc actctctcta cgccacgacg actgtgaagc gagaaatggc tacttccgat 60 caagatcgcc gtcacagagt cactcgcaac cgtccaccaa tagctcgacc ctctacttct 120 tcatctcgtc ccgttgtatc tcctcctaga tcaaaagttt cgaagcgtgt gcttctccgt 180 gtagcttccg tcgcatgcgg gattcaattc ggatgggctc ttcagctttc tctcctcaca 240 ccttacgttc aagagctggg gatcccacac gcttgggcta gtgtgatttg gctttgcggt 300 cctctctctg gtttgttcgt gcaaccgctc gttgggcata gtagcgatag gtgtactagt 360 aagtacggtc gtcggagacc gtttattgtc gccggagctg tggcgatttc tatctctgtt 420 atggttattg gtcatgcggc ggatattgga tgggcatttg gggatagaga agggaagatt 480
aagccgaggg cgattgttgc ttttgtttta gggttttgga ttcttgatgt tgctaataat 540
atgactcaag gtccttgtag agctctcctt gctgatctta ctgagaatga taatcgcaga 600
acccgagttg caaatggcta cttctctctc tttatggctg ttggcaatgt tcttggctat 660
gctactggat catacaatgg ttggtacaag atcttcactt ttacgaagac agttgcatgt 720
aatgtggaat gtgccaatct caagtctgcc ttctacatag atgttgtctt tattgcaata 780
actacgatcc taagcgtctc agcggctcat gaggtgccac ttgcttcatt ggcttctgaa 840
gcacatgggc aaaccagtgg aacagacgaa gcttttcttt ctgagatatt tggaactttc 900
agatattttc caggaaatgt ttggataatc ttgcttgtta cagcattgac atggattggt 960
tggtttccat ttattctgtt tgatactgat tggatgggtc gagagatcta tggcggtgaa 1020
ccgaacatag ggacttcata tagtgctggg gtcagtatgg gtgcacttgg tttgatgttg 1080
aattctgttt ttcttggaat cacttctgtg ctcatggaga aactttgcag aaagtggggg 1140
gctggttttg tttggggaat atcaaatatc ttaatggcta tttgctttct tggaatgata 1200
atcacctcat ttgttgcgtc tcaccttggc tacattggcc atgaacaacc tcctgccagc 1260
atcgtgtttg ctgctgtgtt aatctttaca attctgggca ttccattggc gataacttac 1320
agcgtcccat atgcgttgat ttccatacgt attgaatccc tgggcttagg tcaaggctta 1380
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ggcccatggg atcaactgtt tggaggtggg aattcaccgg cacttgcagt aggagcagct 1500
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cccatccctc tcccatgaga ttctctcttt tgttatataa gatgagtgtc aagcgaggaa 1620
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cctctacttt ggggactatg atccttgtat acacgaggca ccatagaacc aatgaaaata 1800
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atcttctctg ttttttttgt tgttgttgta aattaatgta aaaacctgtg tacaacagag 1920
tgtttgtaag ggcccctgag ttctgtaact gtttataaag ttcattttct ttag 1974
<210> 62 <211> 510 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 62
Met Ala Thr Ser Asp Gln Asp Arg Arg His Arg Val Thr Arg Asn Arg
Pro Pro Ile Ala Arg Pro Ser Thr Ser Ser Ser Arg Pro Val Val Ser 20 25 30
Pro Pro Arg Ser Lys Val Ser Lys Arg Val Leu Leu Arg Val Ala Ser 35 40 45
Val Ala Cys Gly Ile Gln Phe Gly Trp Ala Leu Gln Leu Ser Leu Leu 50 55 60
Thr Pro Tyr Val Gln Glu Leu Gly Ile Pro His Ala Trp Ala Ser Val 65 70 75 80
Ile Trp Leu Cys Gly Pro Leu Ser Gly Leu Phe Val Gln Pro Leu Val 85 90 95
Gly His Ser Ser Asp Arg Cys Thr Ser Lys Tyr Gly Arg Arg Arg Pro 100 105 110
Phe Ile Val Ala Gly Ala Val Ala Ile Ser Ile Ser Val Met Val Ile 115 120 125
Gly His Ala Ala Asp Ile Gly Trp Ala Phe Gly Asp Arg Glu Gly Lys 130 135 140
Ile Lys Pro Arg Ala Ile Val Ala Phe Val Leu Gly Phe Trp Ile Leu 145 150 155 160
Asp Val Ala Asn Asn Met Thr Gln Gly Pro Cys Arg Ala Leu Leu Ala 165 170 175
Asp Leu Thr Glu Asn Asp Asn Arg Arg Thr Arg Val Ala Asn Gly Tyr 180 185 190
Phe Ser Leu Phe Met Ala Val Gly Asn Val Leu Gly Tyr Ala Thr Gly 195 200 205
Ser Tyr Asn Gly Trp Tyr Lys Ile Phe Thr Phe Thr Lys Thr Val Ala 210 215 220
Cys Asn Val Glu Cys Ala Asn Leu Lys Ser Ala Phe Tyr Ile Asp Val 225 230 235 240
Val Phe Ile Ala Ile Thr Thr Ile Leu Ser Val Ser Ala Ala His Glu 245 250 255
Val Pro Leu Ala Ser Leu Ala Ser Glu Ala His Gly Gln Thr Ser Gly 260 265 270
Thr Asp Glu Ala Phe Leu Ser Glu Ile Phe Gly Thr Phe Arg Tyr Phe
275 280 285 Pro Gly Asn Val Trp Ile Ile Leu Leu Val Thr Ala Leu Thr Trp Ile 290 295 300
Gly Trp Phe Pro Phe Ile Leu Phe Asp Thr Asp Trp Met Gly Arg Glu 305 310 315 320
Ile Tyr Gly Gly Glu Pro Asn Ile Gly Thr Ser Tyr Ser Ala Gly Val 325 330 335
Ser Met Gly Ala Leu Gly Leu Met Leu Asn Ser Val Phe Leu Gly Ile 340 345 350
Thr Ser Val Leu Met Glu Lys Leu Cys Arg Lys Trp Gly Ala Gly Phe 355 360 365
Val Trp Gly Ile Ser Asn Ile Leu Met Ala Ile Cys Phe Leu Gly Met 370 375 380
Ile Ile Thr Ser Phe Val Ala Ser His Leu Gly Tyr Ile Gly His Glu 385 390 395 400
Gln Pro Pro Ala Ser Ile Val Phe Ala Ala Val Leu Ile Phe Thr Ile 405 410 415
Leu Gly Ile Pro Leu Ala Ile Thr Tyr Ser Val Pro Tyr Ala Leu Ile 420 425 430
Ser Ile Arg Ile Glu Ser Leu Gly Leu Gly Gln Gly Leu Ser Leu Gly 435 440 445
Val Leu Asn Leu Ala Ile Val Ile Pro Gln Val Ile Val Ser Val Gly 450 455 460
Ser Gly Pro Trp Asp Gln Leu Phe Gly Gly Gly Asn Ser Pro Ala Leu 465 470 475 480
Ala Val Gly Ala Ala Thr Gly Phe Ile Gly Gly Ile Val Ala Ile Leu 485 490 495
Ala Leu Pro Arg Thr Arg Ile Gln Lys Pro Ile Pro Leu Pro 500 505 510
<210> 63
<211> 381
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 63
atggcgtcaa actcaagaag ttcaatctca ccatggacgt ttagtcaaaa caagatgttc 60
gagagggcct tggcagttta cgacaaggac acacccgacc gatggcacaa tgtggcaaaa 120 gctgtcggag ggaaaactgt agaagaagtg aagcgccact atgacattct cgtcgaggat 180 ctcatcaaca tcgagactgg tcgtgtccct ttgcccaatt acaagacctt cgaatctaac 240 tcaagaagca tcaatgactt tgacacaagg tatataacta aatatctata tatgatgctc 300 tcgatatatt ttgataatca ttctagtgat tttgagaaat tctctcaaaa agttcttgta 360 agttatattt Ctttggttta a 381
<210> 64 <211> 126 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 64
Met Ala Ser Asn Ser Arg Ser Ser Ile Ser Pro Trp Thr Phe Ser Gln 1 5 10 15
Asn Lys Met Phe Glu Arg Ala Leu Ala Val Tyr Asp Lys Asp Thr Pro 20 25 30
Asp Arg Trp His Asn Val Ala Lys Ala Val Gly Gly Lys Thr Val Glu 35 40 45
Glu Val Lys Arg His Tyr Asp Ile Leu Val Glu Asp Leu Ile Asn Ile 50 55 60
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Lys Phe Ser Gln Lys Val Leu Val Ser Tyr Ile Ser Leu Val 115 120 125
<210> 65 <211> 1778 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 65
atttatttct ctacttgtcc acttttctac aaccgcatca tccttctccc ttgtgcgata 60 tcgtttgcgt gagatttgtc tgaaaagtag ctaaccatgg gtaaagagaa gtttcacatc 120 aacattgtgg tcattggcca cgtcgattct gaaaagtcga caaccactgg acacttgatc 180 tacaagttgg gtggtattga caagcgtgtg atcgagaggt tcgagaagga ggctgctgag 240 atgaacaaga ggtccttcaa gtacgcatgg gtgttggaca aacttaaggc tgagcgtgag 300
cgtggtatca ccattgacat tgctctctgg aagttcgaga ccaccaagta ctactgcact 3 60
gtcattgatg ctcctggtca tcgtgatttc atcaagaaca tgatcactgg tacctcccag 420
gctgattgtg ctgtccttat cattgactcc accactggtg gttttgaggc tggtatctcc 480
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gaaatcatca aggaggtgtc ttcctacttg aagaaggttg gttacaaccc cgacaaaatc 660
ccatttgtgc ccatctctgg atttgagggt gacaacatga ttgagaggtc caccaacctt 720
gactggtaca agggaccaac tctccttgag gctcttgacc agatcaacga gcccaagagg 780
ccgtcagaca agccccttcg tctcccactt caggatgtct acaagattgg tggtattgga 840
acggtgccag tgggacgtgt tgagactggt atgatcaagc ctggtatggt tgtgaccttt 900
gctcccacag gattgaccac tgaggtcaag tctgttgaga tgcaccacga gtctcttctt 960
gaggcacttc caggtgacaa cgttgggttc aatgttaaga atgttgccgt gaaggatctt 1020
aagagagggt acgtcgcctc caactccaag gatgaccctg ccaagggtgc tgctaacttc 1080
acctcccagg tcatcatcat gaaccaccct ggtcagattg gtaacggtta cgccccagtc 1140
ttggattgcc acacctctca cattgcagtc aagttctctg agatcttgac caagattgac 1200
aggcgttctg gtaaggagat tgagaaggag cccaaattct tgaagaatgg tgatgctggt 1260
atggtgaaga tgactccaac caagcccatg gttgtggaga ccttctctga gtacccacca 1320
cttggacgtt tcgctgttag ggacatgagg cagactgttg cagtcggtgt tatcaagagt 1380
gttgacaaga aggacccaac cggagccaag gttaccaagg ctgcagttaa gaagggtgca 1440
aagtgaactc gaatcctcaa aactctatcc gcagatgaat caaaaaacaa tattagtttc 1500
tttactttag tttggtattt ggtcgcgtgt tatagcttcg tttcttctcc atcggaactc 1560
tgttcccgga actgggttct tgatcggagg tggcggagct actttgcacc tattttgctt 1620
ttgaattgtt atcaattttg aacctatttg gagattcggt tatatgatgt gattttccga 1680
ggatattctc tctttttttg ttgcgtgtat cacattcgaa ttcagtctct tggataactt 1740
gtggaaaaac ttataacttc aagaaaaacc ttataaac 177 8
<210> 66 <211> 449 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 66
Met Gly Lys Glu Lys Phe His Ile Asn Ile Val Val Ile Gly His Val 15 10 15 Asp Ser Gly Lys Ser Thr Thr Thr Gly His Leu Ile Tyr Lys Leu Gly 20 25 30
Gly Ile Asp Lys Arg Val Ile Glu Arg Phe Glu Lys Glu Ala Ala Glu 35 40 45
Met Asn Lys Arg Ser Phe Lys Tyr Ala Trp Val Leu Asp Lys Leu Lys 50 55 60
Ala Glu Arg Glu Arg Gly Ile Thr Ile Asp Ile Ala Leu Trp Lys Phe 65 70 75 80
Glu Thr Thr Lys Tyr Tyr Cys Thr Val Ile Asp Ala Pro Gly His Arg 85 90 95
Asp Phe Ile Lys Asn Met Ile Thr Gly Thr Ser Gln Ala Asp Cys Ala 100 105 110
Val Leu Ile Ile Asp Ser Thr Thr Gly Gly Phe Glu Ala Gly Ile Ser 115 120 125
Lys Asp Gly Gln Thr Arg Glu His Ala Leu Leu Ala Phe Thr Leu Gly 130 135 140
Val Lys Gln Met Ile Cys Cys Cys Asn Lys Met Asp Ala Thr Thr Pro 145 150 155 160
Lys Tyr Ser Lys Ala Arg Tyr Asp Glu Ile Ile Lys Glu Val Ser Ser 165 170 175
Tyr Leu Lys Lys Val Gly Tyr Asn Pro Asp Lys Ile Pro Phe Val Pro 180 185 190
Ile Ser Gly Phe Glu Gly Asp Asn Met Ile Glu Arg Ser Thr Asn Leu 195 200 205
Asp Trp Tyr Lys Gly Pro Thr Leu Leu Glu Ala Leu Asp Gln Ile Asn 210 215 220
Glu Pro Lys Arg Pro Ser Asp Lys Pro Leu Arg Leu Pro Leu Gln Asp 225 230 235 240
Val Tyr Lys Ile Gly Gly Ile Gly Thr Val Pro Val Gly Arg Val Glu 245 250 255
Thr Gly Met Ile Lys Pro Gly Met Val Val Thr Phe Ala Pro Thr Gly
260 265 270
Leu Thr Thr Glu Val Lys Ser Val Glu Met His His Glu Ser Leu Leu 275 280 285 Glu Ala Leu Pro Gly Asp Asn Val Gly Phe Asn Val Lys Asn Val Ala 290 295 300
Val Lys Asp Leu Lys Arg Gly Tyr Val Ala Ser Asn Ser Lys Asp Asp 305 310 315 320
Pro Ala Lys Gly Ala Ala Asn Phe Thr Ser Gln Val Ile Ile Met Asn 325 330 335
His Pro Gly Gln Ile Gly Asn Gly Tyr Ala Pro Val Leu Asp Cys His 340 345 350
Thr Ser His Ile Ala Val Lys Phe Ser Glu Ile Leu Thr Lys Ile Asp 355 360 365
Arg Arg Ser Gly Lys Glu Ile Glu Lys Glu Pro Lys Phe Leu Lys Asn 370 375 380
Gly Asp Ala Gly Met Val Lys Met Thr Pro Thr Lys Pro Met Val Val 385 390 395 400
Glu Thr Phe Ser Glu Tyr Pro Pro Leu Gly Arg Phe Ala Val Arg Asp 405 410 415
Met Arg Gln Thr Val Ala Val Gly Val Ile Lys Ser Val Asp Lys Lys 420 425 430
Asp Pro Thr Gly Ala Lys Val Thr Lys Ala Ala Val Lys Lys Gly Ala 435 440 445
Lys
<210> 67 <211> 731 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 67
gcgtctctcc tctctctgtt tcttttcttt ttgtttcatt ttcttatctc ctcacactct 60
tcgaacaagg aagaacccta atctcaagat gaatagggag aagttgatga agatggctaa 120
taccgtccgc actggcggaa agggtactgt cagaagaaag aagaaggctg tgcacaagac 180
caatacaact gatgacaaga ggcttcaaag cactcttaag agaattggag ttaactccat 240
tcccgctatt gaagaagtta acatctttaa ggatgatgtt gttattcagt tcatcaaccc 300
taaggttcaa gcttcaattg ctgcaaacac atgggttgtt agcggttctc ctcagaccaa 360
aaaattgcaa gatatccttc ctcagatcat cagccaactt ggaccagaca acatggacaa 42 0 cctgaagaag ctagcagaac agttccagaa acaggcttct ggtgaaggta atgccgcctc 480
agcaaccata caagaagagg atgatgacga tgtcccagag cttgttggag agacattcga 540
aactgctgct gaagagaaag caccagctgc tgctgcttct tcttagagag aaaagagcga 600
gaccacatcc aaaaaaaaac cgcactttga tttttacata tctttataat atgtttgttc 660
gctcgatcct ttttgtagtt Cccgaccaga atcttgtttt ccatctaatg acttaaggtt 720
tttatccaat t 731
<210> 68
<211> 165
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 68
Met Asn Arg Glu Lys Leu Met Lys Met Ala Asn Thr Val Arg Thr Gly 15 10 15
Gly Lys Gly Thr Val Arg Arg Lys Lys Lys Ala Val His Lys Thr Asn 20 25 30
Thr Thr Asp Asp Lys Arg Leu Gln Ser Thr Leu Lys Arg Ile Gly Val 35 40 45
Asn Ser Ile Pro Ala Ile Glu Glu Val Asn Ile Phe Lys Asp Asp Val 50 55 60
Val Ile Gln Phe Ile Asn Pro Lys Val Gln Ala Ser Ile Ala Ala Asn 65 70 75 80
Thr Trp Val Val Ser Gly Ser Pro Gln Thr Lys Lys Leu Gln Asp Ile 85 90 95
Leu Pro Gln Ile Ile Ser Gln Leu Gly Pro Asp Asn Met Asp Asn Leu 100 105 110
Lys Lys Leu Ala Glu Gln Phe Gln Lys Gln Ala Ser Gly Glu Gly Asn 115 120 125
Ala Ala Ser Ala Thr Ile Gln Glu Glu Asp Asp Asp Asp Val Pro Glu 130 135 140
Leu Val Gly Glu Thr Phe Glu Thr Ala Ala Glu Glu Lys Ala Pro Ala 145 150 155 160
Ala Ala Ala Ser Ser 165
<210> 69 <211> 452 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 69
agattcgata ccgtctgcaa ctctcagcta ctttttcccc aattttgagc tcaacatcga 60
accctagctc aacgaaccaa tcatgtcttc caagcaagga ggaaaggcga aacctttgaa 120
gcagcctaaa gctgataaga aggaatacga cgagactgac ttagctaaca ttcagaagaa 180
gaaagatgag gaaaaggccc ttaaagagct tagagccaag gcatcgcaga agggatcctt 240
tggaggttct ggacttaaga agagtggcaa gaaatgatcc gttttatcca tgaagtgtgt 300
tttaaaatgc aaatttatca agtgaaaaaa acagataatc ctgtgttgat gtaacttttt 360
atcataattc gagaagagta acttcgcttc tccatacata tgtttgcttt ctccattttt 420
tcatgaaaaa gaaaagtggt atctacccta aa 452
<210> 70
<211> 64
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 70
Met Ser Ser Lys Gln Gly Gly Lys Ala Lys Pro Leu Lys Gln Pro Lys
Ala Asp Lys Lys Glu Tyr Asp Glu Thr Asp Leu Ala Asn Ile Gln Lys
Lys Lys Asp Glu Glu Lys Ala Leu Lys Glu Leu Arg Ala Lys Ala Ser
Gln Lys Gly Ser Phe Gly Gly Ser Gly Leu Lys Lys Ser Gly Lys Lys
<210> 71 <211> 1297 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 71
actctcaaaa tcatcttctt cacccaaaaa cccctaaaag ccttatccct tcttcttccc 60
atggctgctt cagcttcgtc tctcgctctc tcttccttca accctaaatc tcttcctttc 120 ggcgtctcca gacctgcctc cgtttccctc ttatctcctt ccctctcctt Caaactcaat 180 tccgactccg tttccttctc catcgccgcc aaatggaact ctcccgcttc tcgcttcgcc 240 cgtaacgttg cgattacctc agagttcgag gtggaagaag atggtttcgc tgacgtcgct 300 ccgccaaaag agcaatcttt ctctgctgac cttaaactct tcgttggtaa ccttcctttc 360 aacgttgaca gtgctcagct cgctcagctc tttgagagtg ccggaaatgt tgagatggtt 420
gaggtaatct atgacaaaat tacaggaaga agcagaggtt ttggattcgt gactatgtct 480
tcagtttctg aagttgaggc agctgctcag cagttcaatg gctatgagtt ggatggtaga 540
cctttgagag tcaatgctgg tcccccacca ccaaagaggg aagatggttt ctccagagga 600
cctaggagca gctttggaag ctcaggttct ggatatggag gaggtggtgg ttctggtgct 660
ggttcaggaa accgtgttta tgtgggtaac ctctcttggg gagttgatga catggctctt 720
gagagtttgt tctcggagca aggaaaggtt gttgaggcca gagtcatcta cgacagggac 780
agtggtcgat ccaagggttt tggatttgtg acatacgact cttctcaaga ggtccaaaat 840
gccatcaagt ccttggatgg tgctgatttg gacggtagac aaattagagt ctcggaagct 900
gaggctaggc ctccaaggcg ccaatattga gcaccaatct atgacttcct attctcaaaa 960
acgcatattc tggagggcgc ttcgaagtaa agagggtttg tgagatgatg gcagtttcag 1020
acggtactaa gctcttagct tcgcctatgt ttgttgcctt ggatgcaaga aggtcgtaaa 1080
ggaatggtct tttttttttt gagaaacgta taattaagat agaaactgga gagaccatgt 1140
tcttgtctgt ctgaatgctg ccattgactg cttcgctttg gttttgattc aatttttttt 1200
tctctctata tcgtggtctc ttcttcctaa tgcttctctg tttatttgat cctctgctca 1260
aatgaatatg aacacacttg aaaaccggtt aaaactc 1297
<210> 72 <211> 289 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 72
Met Ala Ala Ser Ala Ser Ser Leu Ala Leu Ser Ser Phe Asn Pro Lys
Asn Leu Pro Phe Asn Val Asp Ser Ala Gln Leu Ala Gln Leu Phe Glu
Pro Pro Lys Glu Gln Ser Phe Ser Ala Asp Leu Lys Leu Phe Val Gly
Ser Leu Pro Phe Gly Val Ser Arg Pro Ala Ser Val Ser Leu Leu Ser
20 25 30
Pro Ser Leu Ser Phe Lys Leu Asn Ser Asp Ser Val Ser Phe Ser Ile
35 40 45
Ala Ala Lys Trp Asn Ser Pro Ala Ser Arg Phe Ala Arg Asn Val Ala
50 55 60
Ile Thr Ser Glu Phe Glu Val Glu Glu Asp Gly Phe Ala Asp Val Ala 100 105 110
Ser Ala Gly Asn Val Glu Met Val Glu Val Ile Tyr Asp Lys Ile Thr 115 120 125
Gly Arg Ser Arg Gly Phe Gly Phe Val Thr Met Ser Ser Val Ser Glu 130 135 140
Val Glu Ala Ala Ala Gln Gln Phe Asn Gly Tyr Glu Leu Asp Gly Arg 145 150 155 160
Pro Leu Arg Val Asn Ala Gly Pro Pro Pro Pro Lys Arg Glu Asp Gly 165 170 175
Phe Ser Arg Gly Pro Arg Ser Ser Phe Gly Ser Ser Gly Ser Gly Tyr 180 185 190
Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ala Gly Ser Gly Asn Arg Val Tyr Val 195 200 205
Gly Asn Leu Ser Trp Gly Val Asp Asp Met Ala Leu Glu Ser Leu Phe 210 215 220
Ser Glu Gln Gly Lys Val Val Glu Ala Arg Val Ile Tyr Asp Arg Asp 225 230 235 240
Ser Gly Arg Ser Lys Gly Phe Gly Phe Val Thr Tyr Asp Ser Ser Gln 245 250 255
Glu Val Gln Asn Ala Ile Lys Ser Leu Asp Gly Ala Asp Leu Asp Gly 260 265 270
Arg Gln Ile Arg Val Ser Glu Ala Glu Ala Arg Pro Pro Arg Arg Gln 275 280 285
Tyr
<210> 73
<211> 937
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 73
atttgtgcct actcatttcc tccaaacgtc aaacatagca gcagccatgg ctgccaccaa 60
cacaatcctc gcattctcat ctccttctcg tcttctcatt cctccttcct ccaatccttc 120 aactctccgt tcctctttcc gcggcgtctc tctcaacaac aacaatctcc accgtctcca 180 atctgtttcc ttcgccgtta aagctccgtc gaaagcgttg acagttgttt ccgcggcgaa 240 gaaggctgtt gcagtgctta aaggtacttc tgatgtcgaa ggagttgtta ctttgaccca 3 00 agatgactca ggtcctacaa ctgtgaatgt tcgtatcact ggtctcactc cagggcctca 360
tggatttcat ctccatgagt ttggtgatac aactaatgga tgtatctcaa caggaccaca 420
tttcaaccct aacaacatga cacacggagc tccagaagat gagtgccgtc atgcgggtga 480
cctgggaaac ataaatgcca atgccgatgg cgtggcagaa acaacaatag tggacaatca 540
gattcctctg actggtccta attctgttgt tggaagagcc tttgtggttc acgagcttaa 600
ggatgacctc ggaaagggtg gccatgagct tagtctgacc actggaaacg caggcgggag 660
attggcatgt ggtgtgattg gcttgacgcc gctctaagtc agaggctaag caagtactct 720
tatgtctact gtgttgatct tgtctgtttg aacagatgta agaatcttag caaataatgt 780
ttggcttaat aaactttgat gtttatgttc attgcatcaa tttttctctt tttgaatttg 840
tgacagtgat gtgtttactt ttgatacaac tttgtgtttg atcgtttaag tacattttgg 900
tttatttagc atccttttta ttcagttcaa gattgtg 937
<210> 74
<211> 216
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 74
Met Ala Ala Thr Asn Thr Ile Leu Ala Phe Ser Ser Pro Ser Arg Leu
Gly Asp Thr Thr Asn Gly Cys Ile Ser Thr Gly Pro His Phe Asn Pro
Ile Thr Gly Leu Thr Pro Gly Pro His Gly Phe His Leu His Glu Phe
Leu Ile Pro Pro Ser Ser Asn Pro Ser Thr Leu Arg Ser Ser Phe Arg 20 25 30
Gly Val Ser Leu Asn Asn Asn Asn Leu His Arg Leu Gln Ser Val Ser
35 40 45
Phe Ala Val Lys Ala Pro Ser Lys Ala Leu Thr Val Val Ser Ala Ala
50 55 60
Lys Lys Ala Val Ala Val Leu Lys Gly Thr Ser Asp Val Glu Gly Val 65 70 75 80
Val Thr Leu Thr Gln Asp Asp Ser Gly Pro Thr Thr Val Asn Val Arg
Asn Asn Met Thr His Gly Ala Pro Glu Asp Glu Cys Arg His Ala Gly 130 135 140 Asp Leu Gly Asn Ile Asn Ala Asn Ala Asp Gly Val Ala Glu Thr Thr
Ile Val Asp Asn Gln Ile Pro Leu Thr Gly Pro Asn Ser Val Val Gly
Arg Ala Phe Val Val His Glu Leu Lys Asp Asp Leu Gly Lys Gly Gly
His Glu Leu Ser Leu Thr Thr Gly Asn Ala Gly Gly Arg Leu Ala Cys
Gly Val Ile Gly Leu Thr Pro Leu
<210> 75 <211> 2150 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 75
gtgcgataat ggccatggca gagctctcaa cccccaaaac gacgtcgcct tttctcaact 60
cttcgtctcg gcttcgtctc tcttcaaaat tgcacctttc aaaccacttt cgccatcttc 120
ttcttccacc tctccacaca acaactccca actccaaaat ctcttgctcc gtttctcaaa 180
agtaaccaag ctcctgttgc tgtgcaagaa aatggattgg tgaagacgaa gaaagagtgt 240
tatggagtgt tctgcctcac ctatgatctt aaagctgaag aagagacaag atcatggaag 300
aagttaatta atattgcagt ttcaggtgct gcaggaatga tttctaacca tcttctcttc 360
aaacttgctt caggggaagt atttggtcca gatcaaccca ttgcattgaa actgctagga 420
tcagagagat caattcaagc tcttgaaggt gttgcaatgg aactggagga ttcattgttc 480
ccattgttga gagaagttga tataggaaca gatccaaatg aagtgttcca agatgtggag 540
tgggctattc tgattggagc aaaacctcga ggccctggaa tggaacgtgc tgacttgttg 600
gacatcaatg gccaaatctt tgctgagcag ggcaaagctc tgaacaaagc tgcctctcct 660
aacgtcaagg ttcttgtagt gggaaaccct tgcaacacca atgccttgat ttgtcttaaa 72 0
aatgctccca acattcctgc aaagaacttc catgccctca cgaggttaga cgaaaatcgt 780
gccaaatgcc agcttgctct taaagccggt gttttctatg acaaagtgtc taatatgacc 840
atatggggaa atcactccac gactcaggtg ccagacttct taaatgccag aattaatggc 900
ctgcctgtga aggaggttat tacagatcac aaatggttag aagagggatt cactgagagt 960
gtgcagaaga gaggtgggtt attaattcag aaatggggtc gatcttctgc tgcttctact 1020
gctgtttcca ttgttgatgc tataaagtct cttgtaactc ctactcctga gggtgattgg 1080
ttttcgactg gggtgtacac ggatggaaat ccttatggta ttgaagaggg ccttgtcttc 1140 agtatgccat gatgactacc tgtgttgcac atgcttcctg tccgggttgt aaaatgaaac tccaaaagtc gtttcagaac ttcttttcca ttacaaagag ggtggatgcc gaaaaacaga ctctgcttct cttccaagtc catctccctt tcctcttcta gcttccagct
gccggtcgaa ttcgccaacg acctcactgg gggaagtttg tagctgtaca tcttatttct atatacagta tcaaactaga caaaccaatc tatatactgt ctgaaaaggc gctgtcttat ccacctcctt gacttatctc tctctacctt ttttctcatt ctttgaattg
gggagatgga aatcgccaag agagggcatt atttttgcag gagcacagcc tatttacatg gtatttgtaa taatgcatag tcaaaacagc acacaagaat tatgcgtagt cacttccctc ctccatctcc cgactctagc ttccagtgtc gttcaccttt gtcatcccgg
gattatgaac tcggaagcgg gcctactgtg gacgttgaac acattactta catctgtatg acacttgaaa ctaatatcaa tccctatatg taagaagcaa ctcttgtatt ttctcttctg atagtcctat tcactcacct agcacctcga cttctctcat tgtatttttt
ttgtcaagga aactgttggc atcttggtcc atctcaagta tgattattgt tgatttttct cgtttctatg acacaaatct tgaaagtatc gaatggatga cgtctctgga ctacttcttc cgtctctcgc ttctgcttaa tttcgctctt cttcaagata cttccaacag
tgtagaaatt tgagaagaga ggtagatact agcattctct tcagaataag tgagcaatgc ctttattcca tatgagcttt accaacaaag tggtcttgtt gtagtctagt tagttccctc ttttatttca cgtctctatg cagcttttcc acgcacattg
1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2150
<210> 76
<211> 334
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 76
Met Ile Ser Asn His Leu Leu Phe Lys Leu Ala Ser Gly Glu Val Phe 15 10 15
Gly Pro Asp Gln Pro Ile Ala Leu Lys Leu Leu Gly Ser Glu Arg Ser 20 25 30
Ile Gln Ala Leu Glu Gly Val Ala Met Glu Leu Glu Asp Ser Leu Phe 35 40 45
Pro Leu Leu Arg Glu Val Asp Ile Gly Thr Asp Pro Asn Glu Val Phe 50 55 60
Gln Asp Val Glu Trp Ala Ile Leu Ile Gly Ala Lys Pro Arg Gly Pro
65 70 75 80
Gly Met Glu Arg Ala Asp Leu Leu Asp Ile Asn Gly Gln Ile Phe Ala 85 90 95 Glu Gln Gly Lys Ala Leu Asn Lys Ala Ala Ser Pro Asn Val Lys Val 100 105 110
Leu Val Val Gly Asn Pro Cys Asn Thr Asn Ala Leu Ile Cys Leu Lys 115 120 125
Asn Ala Pro Asn Ile Pro Ala Lys Asn Phe His Ala Leu Thr Arg Leu 130 135 140
Asp Glu Asn Arg Ala Lys Cys Gln Leu Ala Leu Lys Ala Gly Val Phe I45 150 155 160
Tyr Asp Lys Val Ser Asn Met Thr Ile Trp Gly Asn His Ser Thr Thr 165 170 175
Gln Val Pro Asp Phe Leu Asn Ala Arg Ile Asn Gly Leu Pro Val Lys 180 185 190
Glu Val Ile Thr Asp His Lys Trp Leu Glu Glu Gly Phe Thr Glu Ser 195 200 205
Val Gln Lys Arg Gly Gly Leu Leu Ile Gln Lys Trp Gly Arg Ser Ser 210 215 220
Ala Ala Ser Thr Ala Val Ser Ile Val Asp Ala Ile Lys Ser Leu Val 225 230 235 240
Thr Pro Thr Pro Glu Gly Asp Trp Phe Ser Thr Gly Val Tyr Thr Asp 245 250 255
Gly Asn Pro Tyr Gly Ile Glu Glu Gly Leu Val Phe Ser Met Pro Cys 260 265 270
Arg Ser Lys Gly Asp Gly Asp Tyr Glu Leu Val Lys Asp Val Glu Ile 275 280 285
Asp Asp Tyr Leu Arg Gln Arg Ile Ala Lys Ser Glu Ala Glu Leu Leu 290 295 300
Ala Glu Lys Arg Cys Val Ala His Leu Thr Gly Glu Gly Ile Ala Tyr 305 310 315 320
Cys Asp Leu Gly Pro Val Asp Thr Met Leu Pro Gly Glu Val 325 330
<210> 77
<211> 2175
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana ctgaaatctc : actttcacag tttgtgtctg tgcgataatg gccatggcag agctctcaac 60 ccccaaaacg ■ acgtcgcctt ttctcaactc ttcgtctcgg cttcgtctct cttcaaaatt 120 gcacctttca aaccactttc gccatcttct tcttccacct ctccacacaa caactcccaa 180 ctccaaaatc tcttgctccg tttctcaaaa ccaagctcct gttgctgtgc aagaaaatgg 240 attggtgaag acgaagaaag agtgttatgg agtgttctgc ctcacctatg atcttaaagc 300 tgaagaagag acaagatcat ggaagaagtt aattaatatt gcagtttcag gtgctgcagg 360 aatgatttct aaccatcttc tcttcaaact tgcttcaggg gaagtatttg gtccagatca 420 acccattgca ttgaaactgc taggatcaga gagatcaatt caagctcttg aaggtgttgc 480 aatggaactg gaggattcat tgttcccatt gttgagagaa gttgatatag gaacagatcc 540 aaatgaagtg ttccaagatg tggagtgggc tattctgatt ggagcaaaac ctcgaggccc 600 tggaatggaa cgtgctgact tgttggacat caatggccaa atctttgctg agcagggcaa 660 agctctgaac aaagctgcct ctcctaacgt caaggttctt gtagtgggaa acccttgcaa 720 caccaatgcc ttgatttgtc ttaaaaatgc tcccaacatt cctgcaaaga acttccatgc 780 cctcacgagg ttagacgaaa atcgtgccaa atgccagctt gctcttaaag ccggtgtttt 840 ctatgacaaa gtgtctaata tgaccatatg gggaaatcac tccacgactc aggtgccaga 900 cttcttaaat gccagaatta atggcctgcc tgtgaaggag gttattacag atcacaaatg 960 gttagaagag ggattcactg agagtgtgca gaagagaggt gggttattaa ttcagaaatg 1020 gggtcgatct tctgctgctt ctactgctgt ttccattgtt gatgctataa agtctcttgt 1080 aactcctact cctgagggtg attggttttc gactggggtg tacacggatg gaaatcctta 1140 tggtattgaa gagggccttg tcttcagtat gccatgccgg tcgaagggag atggagatta 1200 tgaacttgtc aaggatgtag aaattgatga ctaccttcgc caacgaatcg ccaagtcgga 1260 agcggaactg ttggctgaga agagatgtgt tgcacacctc actggagagg gcattgccta 1320 ctgtgatctt ggtccggtag atactatgct tcctggggaa gtttgatttt tgcaggacgt 1380 tgaacatctc aagtaagcat tctcttccgg gttgttagct gtacagagca cagccacatt 1440 acttatgatt attgttcaga ataagaaaat gaaactctta tttcttattt acatgcatct 1500 gtatgtgatt tttcttgagc aatgctccaa aagtcatata cagtagtatt tgtaaacact 1560 tgaaacgttt ctatgcttta ttccagtttc agaactcaaa ctagataatg catagctaat 1620 atcaaacaca aatcttatga gctttttctt ttccacaaac caatctcaaa acagctccct 1680 atatgtgaaa gtatcaccaa caaagttaca aagagtatat actgtacaca agaattaaga 1740 agcaagaatg gatgatggtc ttgttggtgg atgccctgaa aaggctatgc gtagtctctt 1800 gtattcgtct ctggagtagt ctagtgaaaa acagagctgt cttatcactt ccctcttctc 1860 ttctgctact tcttctagtt ccctcctctg cttctccacc tccttctcca tctccatagt 1920 cctatcgtct ctcgctttta tttcacttcc aagtcgactt atctccgact ctagctcact 1980 cacctttctg cttaacgtct ctatgcatct CCCtttCtCt accttttcca gtgtcagcac 2040 ctcgatttcg ctcttcagct tttcctcctc ttctattttc tcattgttca CCtttCttCt 2100 ctcatcttca agataacgca cattggcttc cagctctttg aattggtcat cccggtgtat 2160 tttttcttcc aacag 2175
<210> 78 <211> 442 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 78
Met Ala Met Ala Glu Leu Ser Thr Pro Lys Thr Thr Ser Pro Phe Leu !5 10 15
Asn Ser Ser Ser Arg Leu Arg Leu Ser Ser Lys Leu His Leu Ser Asn 20 25 30
His Phe Arg His Leu Leu Leu Pro Pro Leu His Thr Thr Thr Pro Asn 35 40 45
Ser Lys Ile Ser Cys Ser Val Ser Gln Asn Gln Ala Pro Val Ala Val 50 55 60
Gln Glu Asn Gly Leu Val Lys Thr Lys Lys Glu Cys Tyr Gly Val Phe 65 70 75 80
Cys Leu Thr Tyr Asp Leu Lys Ala Glu Glu Glu Thr Arg Ser Trp Lys 85 90 95
Lys Leu Ile Asn Ile Ala Val Ser Gly Ala Ala Gly Met Ile Ser Asn 100 105 110
His Leu Leu Phe Lys Leu Ala Ser Gly Glu Val Phe Gly Pro Asp Gln 115 120 125
Pro Ile Ala Leu Lys Leu Leu Gly Ser Glu Arg Ser Ile Gln Ala Leu 130 135 140
Glu Gly Val Ala Met Glu Leu Glu Asp Ser Leu Phe Pro Leu Leu Arg 145 150 155 160
Glu Val Asp Ile Gly Thr Asp Pro Asn Glu Val Phe Gln Asp Val Glu 165 170 175
Trp Ala Ile Leu Ile Gly Ala Lys Pro Arg Gly Pro Gly Met Glu Arg 180 185 190 Ala Asp Leu Leu Asp Ile Asn Gly Gln Ile Phe Ala Glu Gln Gly Lys 195 200 205
Ala Leu Asn Lys Ala Ala Ser Pro Asn Val Lys Val Leu Val Val Gly 210 215 220
Asn Pro Cys Asn Thr Asn Ala Leu Ile Cys Leu Lys Asn Ala Pro Asn 22S 230 235 240
Ile Pro Ala Lys Asn Phe His Ala Leu Thr Arg Leu Asp Glu Asn Arg 245 250 255
Ala Lys Cys Gln Leu Ala Leu Lys Ala Gly Val Phe Tyr Asp Lys Val 260 265 270
Ser Asn Met Thr Ile Trp Gly Asn His Ser Thr Thr Gln Val Pro Asp 275 280 285
Phe Leu Asn Ala Arg Ile Asn Gly Leu Pro Val Lys Glu Val Ile Thr 290 295 300
Asp His Lys Trp Leu Glu Glu Gly Phe Thr Glu Ser Val Gln Lys Arg 305 310 315 320
Gly Gly Leu Leu Ile Gln Lys Trp Gly Arg Ser Ser Ala Ala Ser Thr 325 330 335
Ala Val Ser Ile Val Asp Ala Ile Lys Ser Leu Val Thr Pro Thr Pro 340 345 350
Glu Gly Asp Trp Phe Ser Thr Gly Val Tyr Thr Asp Gly Asn Pro Tyr 355 360 365
Gly Ile Glu Glu Gly Leu Val Phe Ser Met Pro Cys Arg Ser Lys Gly 370 375 380
Asp Gly Asp Tyr Glu Leu Val Lys Asp Val Glu Ile Asp Asp Tyr Leu 385 390 395 400
Arg Gln Arg Ile Ala Lys Ser Glu Ala Glu Leu Leu Ala Glu Lys Arg 405 410 415
Cys Val Ala His Leu Thr Gly Glu Gly Ile Ala Tyr Cys Asp Leu Gly 420 425 430
Pro Val Asp Thr Met Leu Pro Gly Glu Val 435 440
<210> 79 <211> 2235
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 79
caatcctctt tcttactact ctgtcgcttg gcgcgctctc tctccatagt tccagttctg 60 aaatctcact ttcacagttt gtgtctgtgc gataatggcc atggcagagc tctcaacccc 120 caaaacgacg tcgccttttc tcaactcttc gtctcggctt cgtctctctt caaaattgca 180 cctttcaaac cactttcgcc atcttcttct tccacctctc cacacaacaa ctcccaactc 240 caaaatctct tgctccgttt ctcaaaatag ccaagctcct gttgctgtgc aagaaaatgg 300 attggtgaag acgaagaaag agtgttatgg agtgttctgc ctcacctatg atcttaaagc 360 tgaagaagag acaagatcat ggaagaagtt aattaatatt gcagtttcag gtgctgcagg 420 aatgatttct aaccatcttc tcttcaaact tgcttcaggg gaagtatttg gtccagatca 480 acccattgca ttgaaactgc taggatcaga gagatcaatt caagctcttg aaggtgttgc 540 aatggaactg gaggattcat tgttcccatt gttgagagaa gttgatatag gaacagatcc 600 aaatgaagtg ttccaagatg tggagtgggc tattctgatt ggagcaaaac ctcgaggccc 660 tggaatggaa cgtgctgact tgttggacat caatggccaa atctttgctg agcagggcaa 720 agctctgaac aaagctgcct ctcctaacgt caaggttctt gtagtgggaa acccttgcaa 780 caccaatgcc ttgatttgtc ttaaaaatgc tcccaacatt cctgcaaaga acttccatgc 840 cctcacgagg ttagacgaaa atcgtgccaa atgccagctt gctcttaaag ccggtgtttt 900 ctatgacaaa gtgtctaata tgaccatatg gggaaatcac tccacgactc aggtgccaga 960 cttcttaaat gccagaatta atggcctgcc tgtgaaggag gttattacag atcacaaatg 1020 gttagaagag ggattcactg agagtgtgca gaagagaggt gggttattaa ttcagaaatg 1080 gggtcgatct tctgctgctt ctactgctgt ttccattgtt gatgctataa agtctcttgt 1140 aactcctact cctgagggtg attggttttc gactggggtg tacacggatg gaaatcctta 1200 tggtattgaa Qagggccttg tcttcagtat gccatgccgg tcgaagggag atggagatta 1260 tgaacttgtc aaggatgtag aaattgatga ctaccttcgc caacgaatcg ccaagtcgga 1320 agcggaactg ttggctgaga agagatgtgt tgcacacctc actggagagg gcattgccta 1380 ctgtgatctt ggtccggtag atactatgct tcctggggaa gtttgatttt tgcaggacgt 1440 tgaacatctc aagtaagcat tctcttccgg gttgttagct gtacagagca cagccacatt 1500 acttatgatt attgttcaga ataagaaaat gaaactctta tttcttattt acatgcatct 1560 gtatgtgatt tttcttgagc aatgctccaa aagtcatata cagtagtatt tgtaaacact 1620 tgaaacgttt ctatgcttta ttccagtttc agaactcaaa ctagataatg catagctaat 1680 atcaaacaca aatcttatga gctttttctt ttccacaaac caatctcaaa acagctccct 1740 atatgtgaaa gtatcaccaa caaagttaca aagagtatat actgtacaca agaattaaga 1800 agcaagaatg gatgatggtc ttgttggtgg atgccctgaa aaggctatgc gtagtctctt 1860 gtattcgtct ctggagtagt ctagtgaaaa acagagctgt cttatcactt ccctcttctc 1920
ttctgctact tcttctagtt ccctcctctg cttctccacc tccttctcca tctccatagt 1980
cctatcgtct ctcgctttta tttcacttcc aagtcgactt atctccgact ctagctcact 2040
cacctttctg cttaacgtct ctatgcatct ccctttctct accttttcca gtgtcagcac 2100
ctcgatttcg ctcttcagct tttcctcctc ttctattttc tcattgttca cctttcttct 2160
ctcatcttca agataacgca cattggcttc cagctctttg aattggtcat cccggtgtat 2220
tttttcttcc aacag 2235
<210> 80 <211> 443 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 80
Met Ala Met Ala Glu Leu Ser Thr Pro Lys Thr Thr Ser Pro Phe Leu .1 5 10 15
Asn Ser Ser Ser Arg Leu Arg Leu Ser Ser Lys Leu His Leu Ser Asn 20 25 30
His Phe Arg His Leu Leu Leu Pro Pro Leu His Thr Thr Thr Pro Asn 35 40 45
Ser Lys Ile Ser Cys Ser Val Ser Gln Asn Ser Gln Ala Pro Val Ala 50 55 60
Val Gln Glu Asn Gly Leu Val Lys Thr Lys Lys Glu Cys Tyr Gly Val .65 70 75 80
Phe Cys Leu Thr Tyr Asp Leu Lys Ala Glu Glu Glu Thr Arg Ser Trp 85 90 95
Lys Lys Leu Ile Asn Ile Ala Val Ser Gly Ala Ala Gly Met Ile Ser 100 105 110
Asn His Leu Leu Phe Lys Leu Ala Ser Gly Glu Val Phe Gly Pro Asp 115 120 125
Gln Pro Ile Ala Leu Lys Leu Leu Gly Ser Glu Arg Ser Ile Gln Ala 130 135 140
Leu Glu Gly Val Ala Met Glu Leu Glu Asp Ser Leu Phe Pro Leu Leu .145 150 155 160
Arg Glu Val Asp Ile Gly Thr Asp Pro Asn Glu Val Phe Gln Asp Val 165 170 175 Glu Trp Ala Ile Leu Ile Gly Ala Lys Pro Arg Gly Pro Gly Met Glu 180 185 190
Arg Ala Asp Leu Leu Asp Ile Asn Gly Gln Ile Phe Ala Glu Gln Gly 195 200 205
Lys Ala Leu Asn Lys Ala Ala Ser Pro Asn Val Lys Val Leu Val Val 210 215 220
Gly Asn Pro Cys Asn Thr Asn Ala Leu Ile Cys Leu Lys Asn Ala Pro 225 230 235 240
Asn Ile Pro Ala Lys Asn Phe His Ala Leu Thr Arg Leu Asp Glu Asn 245 250 255
Arg Ala Lys Cys Gln Leu Ala Leu Lys Ala Gly Val Phe Tyr Asp Lys 260 265 270
Val Ser Asn Met Thr Ile Trp Gly Asn His Ser Thr Thr Gln Val Pro 275 280 285
Asp Phe Leu Asn Ala Arg Ile Asn Gly Leu Pro Val Lys Glu Val Ile 290 295 300
Thr Asp His Lys Trp Leu Glu Glu Gly Phe Thr Glu Ser Val Gln Lys 305 310 315 320
Arg Gly Gly Leu Leu Ile Gln Lys Trp Gly Arg Ser Ser Ala Ala Ser 325 330 335
Thr Ala Val Ser Ile Val Asp Ala Ile Lys Ser Leu Val Thr Pro Thr 340 345 350
Pro Glu Gly Asp Trp Phe Ser Thr Gly Val Tyr Thr Asp Gly Asn Pro 355 360 365
Tyr Gly Ile Glu Glu Gly Leu Val Phe Ser Met Pro Cys Arg Ser Lys 370 375 380
Gly Asp Gly Asp Tyr Glu Leu Val Lys Asp Val Glu Ile Asp Asp Tyr 385 390 395 400
Leu Arg Gln Arg Ile Ala Lys Ser Glu Ala Glu Leu Leu Ala Glu Lys 405 410 415
Arg Cys Val Ala His Leu Thr Gly Glu Gly Ile Ala Tyr Cys Asp Leu 420 425 430
Gly Pro Val Asp Thr Met Leu Pro Gly Glu Val <210> 81 <211> 1208 <212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana <400> 81
acatcagcat ccacaaccaa tcagaggaca gaatcatatt tcacattttc aatccagacc 60
aatcaaaatc ctgaacgaat cctactctcc accttatagg agcagtttcg tctcttcctc 120
cttctttcac ttagctcttc ctagtgttaa accagagtaa agcttgaaac tttggactaa 180
aagaatggcg tctttgggtg tgtcggaaat gcttggtact ccccttaact tcagggcagt 240
ttcaagatcg tctgctccgt tggcatcaag cccatccacg ttcaagactg ttgctctctt 300
ctctaagaaa aagccagctc ctgctaagtc caaggctgtc tctgagacta gcgatgagct 360
cgccaagtgg tatggtcctg acaggagaat tttcttgcct gatggtcttt tggatagatc 420
agagatccca gagtacttaa acggtgaagt tgctggagat tatggttatg acccatttgg 480
tcttggaaag aagcctgaga actttgctaa ataccaagct tttgaattga tccatgcgag 540
atgggctatg ttaggagcag ctggtttcat cattcctgaa gctttaaaca aatatggcgc 600
taactgtggc cctgaagctg tctggtttaa gactggtgct ttgcttcttg atggaaacac 660
attgaactac tttggcaaga acatccctat caaccttgtt ctcgccgtag ttgctgaggt 720
tgttctcctc ggtggagccg agtactacag aatcaccaac ggattggatt tcgaggacaa 780
gctacaccca ggaggtccat ttgatcctct aggccttgct aaggaccctg agcaaggagc 840
tcttctcaaa gtcaaagaga tcaagaacgg gagattagcc atgtttgcga tgctcggttt 900
ctttatccaa gcgtatgtta ccggagaagg tcctgttgag aaccttgcaa agcatctcag 960
tgatcctttt ggaaacaact tgcttaccgt catcgctgga actgccgaga gagctcccac 1020
tctctaagcc atttctactt tttttaagag cttccaaaat gtacactttg ttcgattgga 1080
actccttttg acaatgttaa aaaaacttcc atctgaatct tcttgatata tttcaaattt 1140
tcaatggtgc tttatcatgc ttctaaggat atacatagtc acccattggt ttaatatttg 1200
ttgttacc 1208
<210> 82 <211> 280 <212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana <400> 82
Met Ala Ser Leu Gly Val Ser Glu Met Leu Gly Thr Pro Leu Asn Phe
Arg Ala Val Ser Arg Ser Ser Ala Pro Leu Ala Ser Ser Pro Ser Thr 20 25 30
Phe Lys Thr Val Ala Leu Phe Ser Lys Lys Lys Pro Ala Pro Ala Lys 35 40 45
Ser Lys Ala Val Ser Glu Thr Ser Asp Glu Leu Ala Lys Trp Tyr Gly 50 55 60
Pro Asp Arg Arg Ile Phe Leu Pro Asp Gly Leu Leu Asp Arg Ser Glu 65 70 75 80
Ile Pro Glu Tyr Leu Asn Gly Glu Val Ala Gly Asp Tyr Gly Tyr Asp 85 90 95
Pro Phe Gly Leu Gly Lys Lys Pro Glu Asn Phe Ala Lys Tyr Gln Ala 100 105 HO
Phe Glu Leu Ile His Ala Arg Trp Ala Met Leu Gly Ala Ala Gly Phe 115 120 125
Ile Ile Pro Glu Ala Leu Asn Lys Tyr Gly Ala Asn Cys Gly Pro Glu 130 135 140
Ala Val Trp Phe Lys Thr Gly Ala Leu Leu Leu Asp Gly Asn Thr Leu 145 150 155 160
Asn Tyr Phe Gly Lys Asn Ile Pro Ile Asn Leu Val Leu Ala Val Val
165 170 175
Ala Glu Val Val Leu Leu Gly Gly Ala Glu Tyr Tyr Arg Ile Thr Asn
180 185 190
Gly Leu Asp Phe Glu Asp Lys Leu His Pro Gly Gly Pro Phe Asp Pro 195 200 205
Leu Gly Leu Ala Lys Asp Pro Glu Gln Gly Ala Leu Leu Lys Val Lys 210 215 220
Glu Ile Lys Asn Gly Arg Leu Ala Met Phe Ala Met Leu Gly Phe Phe 225 230 235 240
Ile Gln Ala Tyr Val Thr Gly Glu Gly Pro Val Glu Asn Leu Ala Lys 245 250 255
His Leu Ser Asp Pro Phe Gly Asn Asn Leu Leu Thr Val Ile Ala Gly 260 265 270
Thr Ala Glu Arg Ala Pro Thr Leu 275 280 <210> 83
<211> 1990
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 83
ctcgcacaca cttctctctc tctctctctc tgcctccttt cggattcaaa tctcagatct 60 agctcaacca tggcgttgct cgtcgagaag acctcaagtg gccgtgaata caaggtcaaa 120 gacatgtctc aagccgattt cggtcgtctc gaactcgagc tcgccgaagt tgagatgcct 180 ggactcatgg cttgtcgtac cgaattcgga ccttctcagc cattcaaagg cgctagaatc 240 accggatctc ttcacatgac catccaaacc gccgtactca tcgaaaccct aactgctctc 300 ggtgctgaag tcagatggtg ttcctgcaac atcttttcca ctcaagacca cgccgccgca 360 gccatcgctc gtgactccgc cgctgttttc gcctggaaag gtgagactct tcaggagtac 420 tggtggtgta ccgagcgtgc tctagattgg ggtccaggtg gtggtcctga tctgattgtt 480 gatgatggtg gtgacgctac tcttttgatt catgagggtg ttaaagctga ggagatcttt 540 gagaagactg gtcaagttcc tgatcctact tctactgata accctgagtt tcagatcgtg 600 ttgtctatta tcaaggaagg tcttcaagtt gatcctaaga agtaccacaa gatgaaggag 660 agacttgttg gtgtctctga ggaaactacc actggtgtta agaggcttta ccagatgcag 720 caaaatggaa ctcttttgtt ccctgccatt aacgttaacg actctgtcac caagagcaag 780 ttcgacaact tgtatggttg ccgtcactca ctccctgatg gtctcatgag ggccactaat 840 gtcatgatcg ctggaaaggt tgctgttatc tgtggatatg gtgatgttgg aaagggttgt 900 gctgctgcca tgaagactgc tggtgctaga gtcattgtga Ctgagattga tcccatctgt 960 gcccttcaag ctttgatgga aggacttcag gttcttaccc ttgaggatgt tgtctcagaa 1020 gctgatatct ttgtcaccac caccggtaac aaagacatca tcatggtcga ccacatgagg 1080 aagatgaaga acaacgctat tgtgtgcaac attggtcact ttgacaatga gattgacatg 1140 cttggacttg agacttaccc tggtgtgaag cgtatcacca tcaagccaca gactgacagg 1200 tgggtgttcc cagagaccaa ggctggaatc attgtcttgg ctgagggtcg tctgatgaac 1260 ttgggttgtg ccactggtca cccaagtttc gtgatgtctt gctctttcac caaccaggtg 1320 attgcccagc tcgagctctg gaacgagaaa gcaagcggaa agtacgagaa gaaggtgtac 1380 gttcttccca agcatttgga tgagaaggtt gcattacttc acttgggcaa gcttggagcc 1440 aggcttacaa agctgtcaaa ggaccaatct gactacgtca gcattccaat tgagggacca 1500 tacaagcctc ctcactacag gtactgagag agagagagag tcgacaaagc ggttcagatt 1560 cggatctact tgtggttttg tgttgggttg tggtgggaga gtggaacagt ttgagatatt 1620 ggtcttctga tgaagttgac caaatatcag tattaataag ggttattggc ttttgaaagt 1680 tgtgcttgtt ttctccattt ttcatgaaac ttaaattagt ttttggttta gtttccctct 1740 tgattttatt ttgtgtgttc tgtttagcgt tgtactcttc aaacaaatga gaaaccaaaa 1800 aaaaagggga aacttgtttt cggcatccca gtgttagcga cttttgttga atgaatgtct 1860
caaatgctca tctttaataa tgtgtgttag gacacgaaca acacatggtt cgattcgtgg 1920
gggattttat ggttgtagtt attatcgtac acgtttcaaa gttctcttaa gtattcaaaa 1980
aggcttttcc 1990
<210> 84 <211> 485 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana <400> 84
Met Ala 1 Leu Leu Val 5 Glu Lys Thr Ser Ser 10 Gly Arg Glu Tyr Lys 15 Val Lys Asp Met Ser 20 Gln Ala Asp Phe Gly Arg 25 Leu Glu Leu Glu 30 Leu Ala Glu Val Glu Met 35 Pro Gly Leu Met 40 Ala Cys Arg Thr Glu 45 Phe Gly Pro Ser Gln 50 Pro Phe Lys Gly Ala 55 Arg Ile Thr Gly Ser 60 Leu His Met Thr Ile Gln 65 Thr Ala Val Leu 70 Ile Glu Thr Leu Thr 75 Ala Leu Gly Ala Glu 80 Val Arg Trp' Cys Ser 85 Cys Asn Ile Phe Ser 90 Thr Gln Asp His Ala 95 Ala Ala Ala Ile Ala 100 Arg Asp Ser Ala Ala 105 Val Phe Ala Trp Lys 110 Gly Glu Thr Leu Gln Glu 115 Tyr Trp Trp Cys 120 Thr Glu Arg Ala Leu 125 Asp Trp Gly Pro Gly Gly Gly 130 Pro Asp Leu 135 Ile Val Asp Asp Gly Gly Asp 140 Ala Thr Leu Leu 145 Ile His Glu Gly Val 150 Lys Ala Glu Glu 155 Ile Phe Glu Lys Thr 160 Gly Gln Val Pro Asp 165 Pro Thr Ser Thr Asp 170 Asn Pro Glu Phe Gln 175 Ile
Val Leu Ser Xle Ile Lys Glu Gly Leu Gln Val Asp Pro Lys Lys Tyr 180 185 190 His Lys Met Lys Glu Arg Leu Val Gly Val Ser Glu Glu Thr Thr Thr 195 200 205
Gly Val Lys Arg Leu Tyr Gln Met Gln Gln Asn Gly Thr Leu Leu Phe 210 215 220
Pro Ala Ile Asn Val Asn Asp Ser Val Thr Lys Ser Lys Phe Asp Asn .225 230 235 240
Leu Tyr Gly Cys Arg His Ser Leu Pro Asp Gly Leu Met Arg Ala Thr 245 250 255
Asp Val Met Ile Ala Gly Lys Val Ala Val Ile Cys Gly Tyr Gly Asp 260 265 270
Val Gly Lys Gly Cys Ala Ala Ala Met Lys Thr Ala Gly Ala Arg Val 275 280 285
Ile Val Thr Glu Ile Asp Pro Ile Cys Ala Leu Gln Ala Leu Met Glu 290 295 300
Gly Leu Gln Val Leu Thr Leu Glu Asp Val Val Ser Glu Ala Asp Ile .305 310 315 320
Phe Val Thr Thr Thr Gly Asn Lys Asp Ile Ile Met Val Asp His Met 325 330 335
Arg Lys Met Lys Asn Asn Ala Ile Val Cys Asn Ile Gly His Phe Asp 340 345 350
Asn Glu Ile Asp Met Leu Gly Leu Glu Thr Tyr Pro Gly Val Lys Arg 355 360 365
Ile Thr Ile Lys Pro Gln Thr Asp Arg Trp Val Phe Pro Glu Thr Lys 370 375 380
Ala Gly Ile Ile Val Leu Ala Glu Gly Arg Leu Met Asn Leu Gly Cys .385 390 395 400
Ala Thr Gly His Pro Ser Phe Val Met Ser Cys Ser Phe Thr Asn Gln 405 410 415
Val Ile Ala Gln Leu Glu Leu Trp Asn Glu Lys Ala Ser Gly Lys Tyr 420 425 430
Glu Lys Lys Val Tyr Val Leu Pro Lys His Leu Asp Glu Lys Val Ala 435 440 445
Leu Leu His Leu Gly Lys Leu Gly Ala Arg Leu Thr Lys Leu Ser Lys 450 455 460 Asp Gln Ser Asp Tyr Val Ser Xle Pro Ile Glu Gly Pro Tyr Lys Pro 465 470 475 480
Pro His Tyr Arg Tyr 485
<210> 85
<211> 735
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 85 agacaaatca gaagagagag atttagatat tgtagagtga gattctaaag agagagagag 60 agagagatat ggctagtgga atcgctcgtg gtcgtttagc tgaagagagg aaatcgtgga 120 ggaagaatca tcctcatggt tttgtggcaa agccggagac ggggcaggat ggaactgtga 180 atctaatggt gtggcattgc actatacctg gtaaagctgg gactgattgg gaaggtggat 240 tctttccatt aacgatgcac ttcagtgagg attatccgag caaacctccg aaatgtaaat 300 ttccacaagg gtttttccac cctaatgtct atccatctgg aactgtctgt ctctctatcc 360 ttaacgagga ttatggatgg agaccagcca tcaccgtgaa gcagattctt gttggtattc 420 aggatttact tgacacaccg aatcccgctg accctgcaca gacagatggt tatcatctct 480 tctgtcagga tccagttgag tacaagaaaa gggtgaagct gcagtccaag cagtatcctg 540 ctcttgtcta aaacctcaaa aaagagaacg caccaaaact gatgacaagc tctgaatatt 600 ttctcgtctt gtgtcattat gtttagatgt cattgggtga ttgaaaactc ctcattttgg 660 caccttaaga cactggaatc tatttatttt cgaaaaaaaa CtCttCtttC tctatttaac 720 tgttaatatt cttgg 735
<210> 86
<211> 160
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 86
Met Ala Ser Gly Ile Ala Arg Gly Arg Leu Ala Glu Glu Arg Lys Ser 15 10 15
Trp Arg Lys Asn His Pro His Gly Phe Val Ala Lys Pro Glu Thr Gly 20 25 30
Gln Asp Gly Thr Val Asn Leu Met Val Trp His Cys Thr Ile Pro Gly 35 40 45
Lys Ala Gly Thr Asp Trp Glu Gly Gly Phe Phe Pro Leu Thr Met His 50 55 60 Phe Ser Glu Asp Tyr Pro Ser Lys Pro Pro Lys Cys Lys Phe Pro Gln 65 VO 75 80
Gly Phe Phe His Pro Asn Val Tyr Pro Ser Gly Thr Val Cys Leu Ser 85 90 95
Ile Leu Asn Glu Asp Tyr Gly Trp Arg Pro Ala Ile Thr Val Lys Gln 100 105 110
Ile Leu Val Gly Ile Gln Asp Leu Leu Asp Thr Pro Asn Pro Ala Asp 115 120 125
Pro Ala Gln Thr Asp Gly Tyr His Leu Phe Cys Gln Asp Pro Val Glu 130 135 140
Tyr Lys Lys Arg Val Lys Leu Gln Ser Lys Gln Tyr Pro Ala Leu Val 145 150 155 160
<210> 87
<211> 1526
<212> DNA
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 87
tccccaattc gtctcctcca acagttttct tcttctcttc ttctttgggt gttccttcca 60
ccaacggcag aaatcgattt ggcttaaatc tccccctcct ttcgatctct ctgatcgccg 120
ccgggaacat tcaatttccc gggagttcaa caaaaaaaaa actctccgtt tttatttttc 180
cccctttttc accggtggaa gtttccggag atggtgtcac ccgaaaacgc taattggatt 240
tgtgacttga tcgatgctga ttacggaagt ttcacaatcc aaggtcctgg tttctcttgg 300
cctgttcagc aacctattgg tgtttcttct aactccagtg ctggagttga tggctcggct 360
ggaaactcag aagctagcaa agaacctgga tccaaaaaga gggggagatg tgaatcatcc 420
tctgccacta gctcgaaagc atgtagagag aagcagcgac gggacaggtt gaatgacaag 480
tttatggaat tgggtgcaat tttggagcct ggaaatcctc ccaaaacaga caaggctgct 540
atcttggttg atgctgtccg catggtgaca cagctacggg gcgaggccca gaagctgaag 600
gactccaatt caagtcttca ggacaaaatc aaagagttaa agactgagaa aaacgagctg 660
cgagatgaga aacagaggct gaagacagag aaagaaaagc tggagcagca gctgaaagcc 720
atgaatgctc ctcaaccaag ttttttccca gccccaccta tgatgcctac tgcttttgct 780
tcagcgcaag gccaagctcc tggaaacaag atggtgccaa tcatcagtta cccaggagtt 840
gccatgtggc agttcatgcc tcctgcttca gtcgatactt ctcaggatca tgtccttcgt 900
cctcctgttg cttaatcaag aaaaatcatc aaccggtttg cttcttgctt ccgcttaaaa 960
gaaaagtctc catttgtttt gctctcctct ctttctcggc tttcttagtc ttatcctttt 1020 gctttgtcgt gttatcatcg taactgttat ctgttgaaca atgatatgac attgtaaact 1080
ccaattgctt cgcgcaatgt tatctattca catgtaaatt taagtagagt ttggcagatc 1140
gtctctcact ttatgtgttc ttacattaat acatagaatg tggttacttc ctcgccataa 1200
gagtttgaaa gtacaaaaaa ttagaaacag gagagaccgc aaaacatgat ccggtagaga 1260
agtgaaaact ccactgcaga aaagtttgct cctatatctt gatctgtgaa tctcctctct 1320
gggtgccaat gtagaaaatg gtcttggttt gtgttatcat gatgctctaa tgtgacagct 1380
cttgataaat ctgtcagaag aatcaagata cttagcccag agaggacgta gatgaggaaa 1440
tgctatatcc agccaaggct tagctcttcc attgaaatga acaacagcgg cactttcagc 1500
atcggcatag ctcgtggtct cttggt 1526
<210> 88
<211> 234
<212> PRT
<213> Arabidopsis thaliana
<400> 88
Met Val Ser Pro Glu Asn Ala Asn Trp Ile Cys Asp Leu Ile Asp Ala 1 S 10 15
Asp Tyr Gly Ser Phe Thr Ile Gln Gly Pro Gly Phe Ser Trp Pro Val 20 25 30
Gln Gln Pro Ile Gly Val Ser Ser Asn Ser Ser Ala Gly Val Asp Gly 35 40 45
Ser Ala Gly Asn Ser Glu Ala Ser Lys Glu Pro Gly Ser Lys Lys Arg 50 55 60
Gly Arg Cys Glu Ser Ser Ser Ala Thr Ser Ser Lys Ala Cys Arg Glu 65 70 75 80
Lys Gln Arg Arg Asp Arg Leu Asn Asp Lys Phe Met Glu Leu Gly Ala 85 90 95
Ile Leu Glu Pro Gly Asn Pro Pro Lys Thr Asp Lys Ala Ala Ile Leu 100 105 110
Val Asp Ala Val Arg Met Val Thr Gln Leu Arg Gly Glu Ala Gln Lys 115 120 125
Leu Lys Asp Ser Asn Ser Ser Leu Gln Asp Lys Ile Lys Glu Leu Lys 130 135 140
Thr Glu Lys Asn Glu Leu Arg Asp Glu Lys Gln Arg Leu Lys Thr Glu 145 150 155 160 Lys Glu Lys Leu Glu Gln Gln Leu Lys Ala Met Asn Ala Pro Gln Pro 165 170 175
Ser Phe Phe Pro Ala Pro Pro Met Met Pro Thr Ala Phe Ala Ser Ala 180 185 190
Gln Gly Gln Ala Pro Gly Asn Lys Met Val Pro Ile Ile Ser Tyr Pro 195 200 205
Gly Val Ala Met Trp Gln Phe Met Pro Pro Ala Ser Val Asp Thr Ser 210 215 220
Gln Asp His Val Leu Arg Pro Pro Val Ala 225 230

Claims (20)

1. Planta transgênica que apresenta estavelmente incorporada em seu genoma, um constructo de DNA que compreende uma seqüência de nucleotídeos que codifica uma proteína apresentando atividade de resistên- cia patogênica, em que a dita seqüência de nucleotídeos é selecionada do grupo que consiste em: a) uma seqüência de nucleotídeos identificada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4, ou um complemento da mesma; b) uma seqüência de nucleotídeos apresentando pelo menos 90% de identidade de seqüência a uma seqüência de nucleotídeos identifi- cada na coluna 3 das Tabelas 3 e 4, ou um complemento da mesma; c) uma seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo compreendendo uma seqüência de aminoácidos identificada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4; e, d) uma seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo apresentando pelo menos 90% de identidade de seqüência a uma seqüência de aminoácidos identificada na coluna 4 das Tabelas 3 e 4; em que a seqüência de nucleotídeos é operativamente ligada a um promotor que conduz expressão de uma seqüência codificante em uma célula vegetal.
2. Planta, de acordo com a reivindicação 1, em que a planta a- presenta aumento na resistência a pelo menos um nematódeo.
3. Planta, de acordo com a reivindicação 1, em que a planta a- presenta aumento na resistência a pelo menos uma bactéria.
4. Planta, de acordo com a reivindicação 1, em que o promotor é um promotor constitutivo.
5. Planta, de acordo com a reivindicação 1, em que a planta é selecionada do grupo que consiste em semente de colza, soja, milho, girassol, algodão, cacau, açafroa, óleo de palma, coqueiro, linho, mamona e amendoim, tomate, cenoura, alface, feijão, aspargo, couve-flor, pimenta, raiz de beterraba, repolho, berinjela, endívia, alho-poró, pepino longo, melão, ervilha, rabanete, rizoma, pepino curto (Beit alpha), abóbora, melancia, cebola branca, chicória (" witloof'), cebola amarela, brócolis, couve-de-bruxelas, cebolinha, aipo, es- pécie de planta das valerianáceas ("mache"), pepino, funcho, cabaça, abó- bora-moranga, milho verde e abobrinha.
6. Método de produção de uma planta com aumento na resis- tência patogênica, o dito método compreendendo: a) introduzir na planta ou uma célula desta, pelo menos um vetor de transformação de planta que compreende uma seqüência de nucleotí- deos que codifica ou é complementar a uma seqüência que codifica um poli- peptídeo de RMN identificado na coluna 4 das Tabelas 3 e 4, ou uma varian- te desta, e, b) cultivar a planta ou célula transformada para produzir uma planta transgênica, em que a dita planta transgênica exibe aumento na resis- tência a pelo menos um patógeno.
7. Planta obtida por um método de acordo com a reivindicação 6.
8. Parte da planta obtida de uma planta de acordo com a reivin- dicação 7.
9. Semente transformada da planta de acordo com a reivindica- ção 7.
10. Método de produção de uma planta que apresenta aumento na resistência patogênica, compreendendo identificar uma planta que apre- senta um gene de RMN alterado, e gerar progênie da planta, em que a pro- gênie apresenta aumento na resistência patogênica, e em que o gene de RMN é aquele que é identificado na coluna 4 das Tabelas 3 e 4.
11. Método de acordo com a reivindicação 10, emque a planta apresenta aumento na resistência de nematódeos.
12. Método de acordo com a reivindicação 10, em que a expres- são do gene de RMN é alterada.
13. Método de acordo com a reivindicação 10, em que o gene de RMN apresenta uma mutação.
14. Método de acordo com a reivindicação 10, em que a planta é identificada usando metodologia de gene candidato/QTL.
15. Método de acordo com a reivindicação 10, em que a planta é identificada usando metodologia de TILLING.
16. Método para identificar uma planta que apresenta aumento na resistência patogênica, compreendendo analisar pelo menos um gene de RMN da planta, e identificar uma planta com um gene de RMN alterado, em que a planta apresenta aumento na resistência patogênica.
17. Método de acordo com a reivindicação 16, em que a planta apresenta aumento na resistência de nematódeos.
18. Método de acordo com a reivindicação 16, em que expres- são do gene de RMN é alterada.
19. Método de acordo com a reivindicação 16, em que o gene de RMN apresenta uma mutação.
20. Método de acordo com a reivindicação 16, em que a planta é identificada usando metodologia de gene candidato/QTL.
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