BRPI0706519A2 - ligantes de receptores nicotìnicos neuronais e seu uso - Google Patents

Abstract

LICANTES DE RECEPTORES NICOTINICOS NEURONAIS E SEU USO. A invençào refere-se aos ligantes de receptores nicotínicos neuronais, aos métodos de identificar tais ligantes para a modulação do receptor nicotínico neuronal, particularmente tais ligantes que demonstrem tolerabilidade benéfica aos efeitos colaterais, e aos métodos de utilizar tais ligantes de receptores nicotínicos neuronais para proporcionar composições e produtos farmacêuticos.

Description

"LIGANTES DE RECEPTORES NICOTÍNICOS NEURONAIS ESEU USO"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Este pedido reivindica o beneficio do Pedido dePatente U.S. N2 60/759.314, depositado em 17 de janeiro de2006, que é incorporado neste documento por referência emsua totalidade.

Campo Técnico

A invenção refere-se aos ligantes de receptoresnicotinicos neuronais, aos métodos de identificar tais li-gantes para a modulação do receptor nicotinico neuronal, eaos métodos de utilizar tais ligantes de receptores nicoti-nicos neuronais.

Descrição da Tecnologia Relacionada

Os receptores nicotinicos de acetilcolina (nAChRs)estão amplamente distribuídos por todos os sistemas nervososcentrais (SNC) e periféricos (SNP). Tais receptores desempe-nham uma função importante na regulação do SNC, particular-mente por modulação da liberação de uma ampla faixa de neu-rotransmissores, incluindo, porém não necessariamente limi-tados à acetilcolina, norepinefrina, dopamina, serotonina eGABA. Consequentemente, os receptores nicotinicos mediam umafaixa muito ampla de efeitos fisiológicos, e têm sido alve-jados para tratamento terapêutico de distúrbios relacionadosà função cognitiva, aprendizado e memória, neurodegeneração,dor e inflamação, psicose e bloqueio sensório, humor e emo-ção, entre outros.

Existem muitos subtipos do nAChR no SNC e perife-ria.

Cada subtipo tem um efeito diferente sobre a regulaçãoda função fisiológica global. Tipicamente, os nAChRs são ca-nais iônicos que são construídos a partir de um agrupamentopentamérico de proteínas de subunidades. Pelo menos 12 pro-teínas de subunidades, α2-α10 e β2-β4, foram identificadasno tecido neuronal. Estas subunidades proporcionam uma gran-de variedade de combinações homoméricas e heteroméricas quesão responsáveis pelos diversos subtipos de receptores. Porexemplo, o receptor predominante que é responsável pela li-gação com alta afinidade de nicotina no tecido cerebral tema composição (α4)2(β2)3 (o subtipo α4β2). Desse modo, diver-sos compostos demonstrando atividade na modulação do recep-tor nicotínico neuronal (NNR) foram verificados serem úteispara tratar diversos distúrbios nos quais esteja implicado osistema nicotínico-colinérgico, por exemplo, os distúrbiosou as condições relacionadas aos distúrbios cognitivos.

Embora tais ligantes do NNR tenham sido verifica-dos serem efetivos, a sua atividade terapêutica pode estarlimitada devido aos efeitos colaterais mediados pelo NNR.Como a nicotina alcalóide da planta, certos compostos podeminteragir com diversos subtipos dos nAChRs. Embora tais com-postos possam demonstrar muitas propriedades terapêuticasbenéficas, nem todos os efeitos mediados por certos ligantesdo NNR são desejáveis. Por exemplo, a nicotina exerce efei-tos colaterais gastrointestinais e cardiovasculares que in-terferem nas doses terapêuticas, e a sua natureza aditiva ea toxicidade aguda são bastante conhecidas. Os ligantes quesão seletivos para interação com somente certos subtipos donAChR oferecem potencial para atingir efeitos terapêuticosbenéficos com uma margem melhorada para segurança.

Embora existam diversas classes de compostos quedemonstrem atividade moduladora do nAChR, seria benéficoproporcionar compostos adicionais que demonstrassem as pro-priedades terapêuticas benéficas do nAChR, e particularmentedos ligantes do NNR, sem o risco dos efeitos colaterais me-diados pelo NNR. Em particular, seria benéfico proporcionarum método para identificar os ligantes do NNR associados comuma baixa incidência de efeitos colaterais, particularmentede efeitos colaterais mediados pelo NNR, por exemplo, as ir-regularidades cardiovasculares ou gastrointestinais.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A invenção refere-se a um método de identificar osligantes dos receptores nicotinicos neuronais, e particular-mente os ligantes do NNR, com uma probabilidade significati-va de demonstrar baixa incidência de efeitos colaterais me-diados pelo NNR ou efeitos colaterais bem tolerados. 0 méto-do compreende a etapa de proporcionar um composto demons-trando seletividade pelo subtipo de NNR α4β2, tal compostotambém demonstrando fraca atividade agonista nos NNRs ex-pressos in vitro. Os compostos que demonstram tais proprie-dades exibem uma probabilidade significativa de demonstrarefeitos cognitivos benéficos associados com as atividadesmediadas pelo NNR, tais como efeitos positivos sobre a cog-nição. Por exemplo, tais compostos podem demonstrar efeitoterapêutico benéfico sobre condições e distúrbios caracteri-zados por disfunção neuropsicológica e cognitiva, por exem-pio, na doença de Alzheimer, distúrbio bipolar, esquizofre-nia, distúrbio esquizoafetivo, e outros distúrbios relacio-nados, caracterizados por disfunção neuropsicológica e cog-nitiva.

Além disso, tais compostos possuem uma probabili-dade significativa de conservar os efeitos benéficos media-dos pelo NNR, por exemplo, os efeitos benéficos sobre o sis-tema neuropsicológico e a cognição, ao mesmo tempo demons-trando um risco reduzido por efeitos colaterais mediados pe-lo NNR quando comparados com os ligantes do NNR que não de-monstram seletividade pelo subtipo de NNR α4β2 e fraca ati-vidade agonista nos NNRs expressos in vitro. Como tais, oscompostos identificados pelo método da invenção podem serassociados com uma baixa incidência de efeitos colateraiscardiovasculares e gastrointestinais, os quais tenham sidoconfirmados pelo menos em modelos de animais, por exemplo,modelos de animais mamíferos, tais como modelos de rodentese primatas, e, podem ser adicionalmente confirmados em sereshumanos, conforme demonstrado pelos resultados de estudospara um ligante do NNR particular, como descrito no Anexo A,que é incorporado neste documento por referência em sua to-talidade.

Além disso, um composto que demonstre seletividadepelo subtipo de NNR α4β2 e fraca atividade agonista nos NNRs,conforme pode ser demonstrada por avaliação da atividade a-gonista em NNRs expressos in vitro, pode ser administrado aum mamífero, ou paciente, suscetível a, ou tendo, uma condi-ção ou distúrbio onde a modulação da atividade do receptornicotínico seja de beneficio terapêutico para proporcionarum composto ou composição farmacêutica demonstrando tal be-neficio terapêutico. Em um estudo clinico, tal composto oucomposição pode ser administrada a um paciente para demons-trar o beneficio terapêutico para uma condição ou distúrbioonde a modulação da atividade do receptor nicotinico sejabenéfica. Os dados podem ser obtidos do paciente e avaliadospara proporcionar suporte estatístico para o efeito terapêu-tico. Tais dados obtidos podem ser apresentados a uma agên-cia reguladora tendo autoridade para avaliar e regular oscompostos ou os produtos farmacêuticos, para obter aprovaçãopara fabricar ou comercializar um composto farmacêutico de-sejado.

Os compostos, as composições, os métodos de iden-tificar tais compostos, e os métodos para utilizar os com-postos, as composições, ou os dados obtidos a partir da ad-ministração de tais compostos ou composições a um mamífero,ou paciente, são adicionalmente descritos neste documento,por exemplo, na Descrição Detalhada abaixo.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Métodos da Invenção

Um método da invenção refere-se a um método de i-dentificar os ligantes dos receptores nicotínicos neuronais,particularmente os agonistas nicotínicos neuronais que de-monstrem ligação seletiva pelo subtipo de receptor nicotíni-co neuronal α4β2 e também que demonstrem fraca atividade a-gonista nos receptores nicotínicos neuronais expressos invitro. O método compreende as etapas de: 1) avaliar um com-posto quanto à ligação seletiva ao subtipo de receptor nico-tínico neuronal α4β2; 2) avaliar um composto quanto à capa-cidade de estimular o fluxo de canal iônico para uma célulaexpressando os subtipos de receptor nicotinico neuronal α4β2,α3β4, ou α3β2; 3) e identificar um composto que ligue sele-tivamente o subtipo de receptor nicotinico neuronal α4β2 edemonstre fraca capacidade de estimular o fluxo de canal iô-nico para a célula expressando os subtipos de receptor nico-tinico neuronal α4β2, α3β4, ou α3β2.

O composto pode ser avaliado quanto à ligação aosubtipo de NNR α4β2 usando diversos métodos. Entende-se natécnica que alguém versado na técnica de desenvolver ligan-tes de receptores nicotinicos neuronais, particularmente pa-ra produtos farmacêuticos, seria capaz de avaliar a ligaçãoseletiva ao subtipo de NNR α4β2 em uma variedade de métodosadequados para determinar se um composto se liga ao α4β2 emum modo seletivo.

Um método para avaliar a ligação seletiva ao sub-tipo de NNR α4β2 ín vitro é via avaliação da capacidade deum composto de deslocar a [3H]-citisina de uma preparação demembrana de cérebro de rato. O método pode ser efetuado sobquaisquer condições de ligação adequadas. Os exemplos decondições de ligação adequadas para a ligação da [3H]-citisina foram descritos na técnica, por exemplo, pelo menosnas Patentes U.S. N— 5.948.793; 5.914.328; e 6.809.105, cu-jos procedimentos são incorporados neste documento por refe-rência em sua totalidade. Os valores de IC50 e Ki podem serdeterminados a partir dos dados obtidos no ensaio de ligaçãoda [3H]-citisina. De preferência, um composto para o métododemonstra menos do que 30 nM de afinidade de ligação, e maispreferivelmente menos do que 15 nM de afinidade de ligação,no sitio de ligação da [3H]-citisina.

Alternativamente, podem ser usados outros métodosadequados para avaliar a ligação seletiva de um composto pe-lo α4β2. Tais métodos podem variar nas quantidades de afini-dade de ligação preferidas, como determinadas pelo ensaio.

Entretanto, alguém com habilidade na técnica seria capaz dedeterminar os niveis preferidos para qualquer ensaio de li-gação seletiva ao α4β2 particular de interesse, levando-seem consideração o efeito dos compostos selecionados em mode-los in vitro ou de animais adequados, para avaliar o efeitointensificador cognitivo de um composto ou outros benefíciosterapêuticos mediados pelo NNR e os efeitos colaterais de-monstrados pelo uso do composto.

0 composto pode ser avaliado quanto à capacidadede estimular o fluxo de canal iônico para uma célula expres-sando os subtipos de receptor nicotínico neuronal α4β2, α3β4,ou α3β2, usando diversos métodos. Entende-se na técnica quealguém versado na técnica de desenvolver ligantes de recep-tores nicotínicos neuronais, particularmente para os produ-tos farmacêuticos, seria capaz de avaliar a capacidade de umcomposto de estimular o fluxo de canal iônico para uma célu-la expressando os subtipos de receptor nicotínico neuronalα4β2, α3β4, ou α3β2 em uma variedade de métodos adequadospara determinar o fluxo de canal iônico.

Um método para avaliar o fluxo de canal iônico évia ativação do fluxo de ions para uma célula expressa comos subtipos de NNR α4β2, α3β4, ou α3β2 recombinantes. Alter-nativamente, uma linhagem celular nativa que expresse os NN-Rs também pode ser adequada. O método pode ser efetuado sobquaisquer condições de ligação adequadas. Os exemplos decondições de ligação adequadas para a ligação da [3H]-citisina foram descritos na técnica, por exemplo, pelo menosnas Patentes U.S. N— 6.403.575 e 6.133.253, cujos procedi-mentos são incorporados neste documento por referência emsua totalidade. Os dados obtidos a partir de tais ensaios defluxos de canais iônicos podem ser avaliados para determinara porcentagem de resposta nicotinica máxima (%), que direta-mente correlaciona-se com a porcentagem de eficácia agonistamáxima. De preferência, um composto para o método demonstramenos do que 40% de eficácia agonista máxima.

Podem ser usados outros métodos para avaliar o fluxo de canal iônico. Tais métodos podem variar na porcen-tagem de eficácia agonista máxima conforme determinada peloensaio. Entretanto, alguém com habilidade na técnica seriacapaz de determinar os níveis preferidos para a porcentagemde eficácia agonista máxima de qualquer ensaio de fluxo decanal iônico particular de interesse, levando-se em conside-ração o efeito dos compostos selecionados em modelos ín vi-tro ou de animais adequados, para avaliar o efeito intensi-ficador cognitivo de um composto ou outros benefícios tera-pêuticos mediados pelo NNR e os efeitos colaterais demons-trados pelo uso do composto.

Um ligante do receptor nicotínico neuronal que de-monstre ligação seletiva pelo subtipo de receptor nicotiniconeuronal α4β2 e também que demonstre fraca atividade agonis-ta nos receptores nicotinicos neuronais in vitro pode seridentificado considerando os métodos anteriormente descritosde ligação seletiva ao α4β2 e de fluxo de canal iônico.

Os compostos que demonstram tais propriedades exi-bem uma probabilidade significativa de demonstrar efeitoscognitivos benéficos associados com as atividades mediadaspelo NNR, tais como efeitos positivos sobre a cognição, in-cluindo, porém não limitados ao efeito terapêutico benéficosobre condições e distúrbios caracterizados por disfunçãoneuropsicológica e cognitiva, por exemplo, na doença de Al-zheimer, distúrbio bipolar, esquizofrenia, distúrbio esqui-zoafetivo, e outros distúrbios relacionados, caracterizadospor disfunção neuropsicológica e cognitiva.

Além disso, tais compostos demonstram uma probabi-lidade reduzida por efeitos colaterais mediados pelo NNR,quando comparados com os ligantes do NNR que não demonstramseletividade pelo subtipo de NNR α4β2 e fraca atividade ago-nista nos NNRs expressos in vitro. Como tais, os compostosidentificados pelo método da invenção podem ser associadoscom uma baixa incidência de efeitos colaterais cardiovascu-lares e gastrointestinais. Tais compostos podem ser adminis-trados a um mamífero, ou paciente, suscetível a, ou tendo,uma condição ou distúrbio onde a modulação da atividade doreceptor nicotinico seja de benefício terapêutico para pro-porcionar um composto ou composição farmacêutica que demons-tre tal benefício terapêutico, por exemplo, em um estudoclinico. Tal composto ou composição pode ser administrada aum paciente para demonstrar o beneficio terapêutico para umacondição ou distúrbio onde a modulação da atividade do re-ceptor nicotinico seja benéfica. Os dados podem ser obtidosdo paciente e avaliados para proporcionar suporte estatísti-co para o efeito terapêutico. Tais dados obtidos podem serapresentados a uma agência reguladora tendo autoridade paraavaliar e regular os compostos ou os produtos farmacêuticos,para obter aprovação para fabricar ou comercializar um com-posto farmacêutico desejado. Um composto farmacêutico ade-quado pode ser obtido por incorporação do composto em um ve-ículo farmaceuticamente aceitável.

Os níveis de dosagens reais do composto, ou do in-grediente ativo, em uma composição farmacêutica da invençãopodem ser variados de modo a obter uma quantidade do(s) com-posto (s) ativo(s) que seja efetiva para atingir a respostaterapêutica desejada para um paciente, composições e o modode administração particulares. 0 nível de dosagem seleciona-do dependerá da atividade do composto particular, da rota deadministração, da gravidade da condição que está sendo tra-tada e da condição e da história médica anterior do pacienteque está sendo tratado. Entretanto, está dentro da habilida-de da técnica iniciar as doses do composto em níveis menoresdo que requeridos para atingir o efeito terapêutico desejadoe aumentar gradualmente a dosagem até que o efeito desejadoseja atingido.

Quando usada no acima descrito ou em outros trata-mentos, uma quantidade terapeuticamente efetiva de um doscompostos da invenção pode ser empregada na forma pura ou,onde existirem tais formas, na forma de sal, éster, amida oupró-medicamento farmaceuticamente aceitável. Alternativamen-te, o composto pode ser administrado como uma composiçãofarmacêutica contendo o composto de interesse em combinaçãocom um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis. A ex-pressão "quantidade terapeuticamente efetiva" do composto dainvenção significa uma quantidade suficiente do composto pa-ra tratar distúrbios, em uma razão razoável entre benefí-cio/risco aplicável a qualquer tratamento médico. Será en-tendido, entretanto, que o uso diário total dos compostos edas composições da invenção será decidido pelo médico assis-tente dentro do escopo do julgamento médico correto. O nívelespecífico de dose terapeuticamente efetiva para qualquerpaciente particular dependerá de uma variedade de fatores,incluindo o distúrbio que está sendo tratado e a gravidadedo distúrbio; a atividade do composto específico empregado;a composição específica empregada; a idade, o peso do corpo,a saúde geral, o sexo e a dieta do paciente; o tempo de ad-ministração, a rota de administração, e a taxa de excreçãodo composto específico empregado; a duração do tratamento;os fármacos usados em combinação ou coincidentes com o com-posto específico empregado; e fatores similares, bastanteconhecidos nas técnicas médicas. Por exemplo, está bastantedentro da habilidade da técnica iniciar as doses do compostoem níveis menores do que requeridos para atingir o efeitoterapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até que o efeito desejado seja atingido.A dose diária total dos compostos desta invenção,administrados a um ser humano ou animal inferior, variam decerca de 0,001 mg/kg de peso do corpo a cerca de 1 g/kg depeso do corpo. As doses mais preferíveis podem estar na fai-xa de cerca de 0,10 mg/kg de peso do corpo a cerca de 100mg/kg de peso do corpo, e mais preferivelmente 1 mg/kg depeso do corpo a cerca de 20 mg/kg de peso do corpo, e aindamais preferivelmente 0,05 mg/kg de peso do corpo a cerca de0,5 mg/kg de peso do corpo. Se desejado, a dose diária efe-tiva pode ser dividida em doses múltiplas, para propósitosde administração. Consequentemente, as composições de dosesindividuais podem conter tais quantidades ou seus submúlti-plos para constituir a dose diária.

Compostos da Invenção

Os compostos adequados para a invenção podem serqualquer composto que demonstre ligação seletiva pelo subti-po de receptor nicotinico neuronal α4β2 e também demonstrefraca atividade agonista em receptores nicotínicos neuronaisexpressos in vitro, a não ser que o composto seja um antago-nista do receptor nicotinico neuronal, por exemplo, o bromi-drato de diidro-p-eritroidina (DHBE). Os exemplos de compos-tos adequados são, por exemplo, o ABT-089, que é a 2-metil-3-(2-(S)-pirrolidinilmetóxi)piridina, tendo a estrutura:

<formula>formula see original document page 13</formula>

e demonstrando uma afinidade de ligação de Ki de14 nM, que é adicionalmente descrito na Patente U.S. N25.948.793, que é incorporada neste documento por referênciaem sua totalidade.

Um outro composto adequado para o método é, porexemplo, o composto (R,R)-1-(piridin-3-il)-octaidro-pirrolo[3,4-b]pirol, tendo a estrutura:

<formula>formula see original document page 14</formula>

e demonstrando uma afinidade de ligação de Ki de8,0 nM, que é adicionalmente descrito na Patente U.S. N26.809.105, que é incorporada neste documento por referênciaem sua totalidade.

Ainda um outro composto adequado para o método é,por exemplo, o composto tendo a estrutura:

<formula>formula see original document page 14</formula>

e demonstrando uma afinidade de ligação de Ki de0,04 nM, que é adicionalmente descrito na Patente U.S. N26.127.386, que é incorporada neste documento por referênciaem sua totalidade.

Um outro composto adequado para o método é, porexemplo, o composto tendo a estrutura:<formula>formula see original document page 48</formula>

e demonstrando a afinidade de ligação de Ki de 1,5nM, que é adicionalmente descrito na Patente U.S. N26.809.105, que é incorporada neste documento por referênciaem sua totalidade.

Tais compostos demonstraram ligação seletiva pelosubtipo de receptor nicotinico neuronal α4β2 e uma fraca ca-pacidade de estimular o fluxo de canal iônico em células ex-pressando os subtipos de NNR α4β2, α3β4, ou α3β2. Cada umdos compostos exibe eficácia em níveis livres de concentra-ção no plasma dentro de dez vezes da ligação nicotínica neu-ronal Ki. Desse modo, também é contemplado como parte da in-venção definir os níveis-alvo de concentração no plasma paraa administração de tal composto. Como tal, a invenção pro-porciona um método para identificar e utilizar os compostospara proporcionar a eficácia máxima.

Além disso, conforme demonstrado nos resultadosdos estudos vinculados nos Exemplos, particularmente o Exem-plo 3, o composto ABT-089 demonstrou eficácia em estudosclínicos com seres humanos, conforme avaliada utilizando aEscala de Classificação do ADHD em Adulto de Connor (CAARS),e foi bem tolerado. Os métodos e os materiais para avaliar aeficácia do ABT-089, um composto que demonstra ligação sele-tiva pelo subtipo de receptor nicotinico neuronal α4β2 efraca atividade agonista para os receptores nicotinicos neu-ronais expressos in vitro, são descritos aqui nos Exemplos.

Tal dado clinico humano pode ser fornecido parauma autoridade reguladora, para obter autorização reguladora.

0 dado pode ser fornecido para uma agência reguladora tendoautoridade para avaliar ou regular, ou ambos, os compostosou os produtos farmacêuticos, ou ambos, para obter aprovaçãoda agência reguladora para fabricar ou comercializar um com-posto farmacêutico desejado. Tal dado pode ser particular-mente útil onde estiver relacionado ao dado clinico humanodo ABT-089, e mais particularmente onde o dado clinico huma-no estiver relacionado a um estudo de doses múltiplas con-trolado por placebo, duplo cego, aleatorizado. Ademais, taldado clinico humano pode ser usado para proporcionar um pro-duto farmacêutico relacionado à aprovação para fabricar oucomercializar um composto farmacêutico desejado, obtido daagência reguladora. Tal dado é particularmente útil onde oproduto farmacêutico for útil para tratar um mamífero tendouma condição onde a modulação da atividade do receptor nico-tínico de acetilcolina for de benefício terapêutico, onde acondição é a doença de Alzheimer, o distúrbio bipolar, a es-quizofrenia, ou o distúrbio esquizoafetivo.

Composições da Invenção

A invenção também proporciona composições farma-cêuticas compreendendo uma quantidade terapeuticamente efe-tiva de um composto desejado em combinação com um veículofarmaceuticamente aceitável. As composições compreendem oscompostos da invenção formulados juntos com um ou mais veí-culos não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis. As composi-ções farmacêuticas podem ser formuladas para a administraçãooral na forma sólida ou liquida, para a injeção parenteralou para a administração retal.

O termo "veiculo farmaceuticamente aceitável",conforme usado neste documento, significa uma carga, diluen-te, material de encapsulação ou auxiliar de formulação dequalquer tipo, sólido, semi-sólido ou liquido, inerte, nãotóxico. Alguns exemplos de materiais que podem servir comoveículos farmaceuticamente aceitáveis são os açúcares, taiscomo a lactose, a glicose e a sacarose; os amidos, tais comoo amido de milho e o amido de batata; a celulose e os seusderivados, tais como a carboximetil celulose sódica, a etilcelulose e o acetato de celulose; o tragacanto em pó; o mal-te; a gelatina; o talco; a manteiga de cacau e as ceras desupositórios; os óleos, tais como o óleo de amendoim, o óleode caroço de algodão, o óleo de açafroa, o óleo de gergelim,o azeite de oliva, o óleo de milho e o óleo de soja; os gli-cóis, tais como o propileno glicol; os ésteres, tais como ooleato de etila e o laurato de etila; o ágar; os agentes detamponamento, tais como o hidróxido de magnésio e o hidróxi-do de alumínio; o ácido algínico; a água sem pirogênio; asolução salina isotônica; a solução de Ringer; o álcool etí-lico, e as soluções de tampão de fosfato, bem como outroslubrificantes não tóxicos, compatíveis, tais como o laurilsulfato de sódio e o estearato de magnésio, bem como os a-gentes corantes, os agentes de liberação, os agentes de re-vestimento, os agentes adoçantes, aromatizantes e perfuman-tes, os conservantes e os antioxidantes podem também estarpresentes na composição, de acordo com o julgamento de al-guém versado na técnica de formulações.

As composições farmacêuticas desta invenção podemser administradas aos seres humanos e outros mamíferos demodo oral, retal, parenteral, intracisternal, intravaginal,intraperitoneal, tópico (como por pós, ungüentos ou gotas),bucal ou como um spray oral ou nasal. O termo "de modo pa-renteral", conforme usado neste documento, refere-se aos mo-dos de administração, que incluem a injeção e a infusão in-travenosas, intramusculares, intraperitoneais, intra-esternais, subcutâneas, intra-articulares.

As composições farmacêuticas para a injeção paren-teral compreendem as soluções, as dispersões, as suspensõesou as emulsões aquosas ou não aquosas, estéreis, farmaceuti-camente aceitáveis, e os pós estéreis para a reconstituiçãoem soluções ou dispersões injetáveis estéreis. Os exemplosde carreadores, diluentes, solventes ou veículos aquosos enão aquosos, adequados, incluem a água, o etanol, os polióis(o propileno glicol, o polietileno glicol, o glicerol, e si-milar, e as suas misturas adequadas), os óleos vegetais(tais como o azeite de oliva) e os ésteres orgânicos injetá-veis, tais como o oleato de etila, ou as suas misturas ade-quadas. A fluidez adequada da composição pode ser mantida,por exemplo, através do uso de um revestimento, tal como alecitina, pela manutenção do tamanho de partícula requerido,no caso das dispersões, e pelo uso de tensoativos.

Estas composições podem também conter adjuvantes,tais como agentes conservantes, agentes molhantes, agentesemulsificantes, e agentes dispersantes. A prevenção da açãode microorganismos pode ser assegurada por diversos agentesantibacterianos e antifúngicos, por exemplo, os parabenos, oclorobutanol, o fenol, o ácido sórbico, e similares. Podetambém ser desejável incluir agentes isotônicos, por exemplo,os açúcares, o cloreto de sódio e similares. A absorção pro-longada da forma farmacêutica injetável pode ser efetuadapelo uso de agentes que retardem a absorção, por exemplo, omonoestearato de alumínio e a gelatina.

Em alguns casos, para prolongar o efeito de umfármaco, é freqüentemente desejável tornar lenta a absorçãodo fármaco a partir da injeção subcutânea ou intramuscular.Isto pode ser efetuado pelo uso de uma suspensão líquida dematerial cristalino ou amorfo com solubilidade em água insa-tisfatória. A taxa de absorção do fármaco pode depender desua taxa de dissolução, que, por sua vez, pode depender dotamanho do cristal e da forma cristalina. Alternativamente,uma forma de fármaco parenteralmente administrada pode seradministrada por dissolução ou suspensão do fármaco em umveículo de óleo.

As suspensões, além dos compostos ativos, podemconter agentes de suspensão, por exemplo, álcoois isoestea-rílicos etoxilados, polioxietileno sorbitol e ésteres desorbitan, celulose microcristalina, metaidróxido de alumínio,bentonita, ágar-ágar, tragacanto, e suas misturas.

Se desejado, e para a distribuição mais efetiva,os compostos da invenção podem ser incorporados em sistemasde liberação lenta ou de distribuição alvejada, tais como asmatrizes poliméricas, os lipossomos, e as microesferas. Elespodem ser esterilizados, por exemplo, por filtração atravésde um filtro retentor de bactérias ou por incorporação deagentes esterilizantes na forma de composições sólidas esté-reis, que podem ser dissolvidas em água estéril ou algum ou-tro meio injetável estéril, imediatamente antes do uso.

As formas injetáveis de depósito são preparadasformando-se matrizes microencapsuladas do fármaco em políme-ros biodegradáveis, tais como polilactídeo-poliglicolídeo.Dependendo da razão de fármaco para polímero e da naturezado polímero particular empregado, a taxa de liberação defármaco pode ser controlada. Os exemplos de outros polímerosbiodegradáveis incluem os poli(ortoésteres) e os po-li (anidridos ). As formulações injetáveis de depósito tambémsão preparadas capturando-se o fármaco em lipossomos ou mi-croemulsões que sejam compatíveis com os tecidos corpóreos.

As formulações injetáveis podem ser esterilizadas,por exemplo, por filtração através de um filtro retentor debactérias ou por incorporação de agentes esterilizantes naforma de composições sólidas estéreis, que podem ser dissol-vidas ou dispersas em água estéril ou outro meio injetávelestéril, exatamente antes do uso.

As preparações injetáveis, por exemplo, as suspen-sões aquosas ou oleaginosas injetáveis, estéreis, podem serformuladas de acordo com a técnica conhecida, usando agentesde dispersão ou molhantes e agentes de suspensão adequados.

A preparação injetável estéril também pode ser uma solução,suspensão ou emulsão injetável estéril, em um diluente ousolvente não tóxico, parenteralmente aceitável, tal como umasolução de 1,3-butanodiol. Entre os veículos e os solventesaceitáveis que podem ser empregados estão a água, a soluçãode Ringer, a solução de cloreto de sódio U.S.P. e isotônica.Além disso, os óleos fixos, estéreis, são convencionalmenteempregados como um meio solvente ou de suspensão. Para estepropósito, qualquer óleo fixo suave pode ser empregado, in-cluindo os mono- ou os diglicerídeos. Ademais, os ácidosgraxos, tais como o ácido oléico, são usados na preparaçãode injetáveis.

As formas de dosagens sólidas para a administraçãooral incluem as cápsulas, os comprimidos, as pílulas, os pós,e os grânulos. Em tais formas de dosagens sólidas, um oumais compostos da invenção são misturados com pelo menos umveículo farmaceuticamente aceitável, inerte, tal como o ci-trato de sódio ou o fosfato de dicálcio e/ou a) cargas ouextensores, tais como os amidos, a lactose, a sacarose, aglicose, o manitol, e o ácido salicílico; b) aglutinantes,tais como a carboximetilcelulose, os alginatos, a gelatina,a polivinilpirrolidinona, a sacarose, e a acácia; c) umec-tantes, tais como o glicerol; d) agentes desintegrantes,tais como ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata outapioca, ácido algínico, certos silicatos, e carbonato desódio; e) agentes retardadores de solução, tais como a para-fina; f) aceleradores da absorção, tais como os compostos deamônio quaternário; g) agentes molhantes, tais como o álcoolcetílico e o monoestearato de glicerol; h) absorventes, taiscomo caulim e argila bentonita; e i) lubrificantes, tais co-mo talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polie-tileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio, e suas mis-turas. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a formade dosagem pode também compreender agentes de tamponamento.

As composições sólidas de um tipo similar podemtambém ser empregadas como cargas em cápsulas gelatinosas derecheio mole ou duro usando lactose ou leite em pó, bem comopolietileno glicóis de altos pesos moleculares.

As formas de dosagens sólidas de comprimidos, drá-geas, cápsulas, pílulas, e grânulos podem ser preparadas comrevestimentos e coberturas externas, tais como os revesti-mentos entéricos e outros revestimentos bastante conhecidosna técnica de formulação farmacêutica. Elas podem opcional-mente conter agentes de opacificação e podem também ser deuma composição que elas liberem o(s) ingrediente(s) ativo(s)somente, ou preferencialmente, em uma certa parte do tratointestinal, em um modo retardado. Os exemplos de materiaisúteis para retardar a liberação do agente ativo podem inclu-ir as substâncias poliméricas e as ceras.

As formas de dosagens líquidas para a administra-ção oral incluem as emulsões, as microemulsões, as soluções,as suspensões, os xaropes e os elixires farmaceuticamenteaceitáveis. Além dos compostos ativos, as formas de dosagenslíquidas podem conter diluentes inertes comumente usados natécnica, tais como, por exemplo, água ou outros solventes,agentes solubilizantes e emulsificantes, tais como álcooletílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato deetila, álcool benzilico, benzoato de benzila, propileno gli-col, 1,3-butileno glicol, dimetilformamida, óleos (em parti-cular, óleos de caroço de algodão, amendoim, milho, germe,oliva, mamona, e gergelim), glicerol, álcool tetraidrofurfu-rilico, polietileno glicóis e ésteres de ácidos graxos desorbitan, e suas misturas.

Além dos diluentes inertes, as composições oraispodem também incluir adjuvantes, tais como agentes molhantes,agentes emulsificantes e de suspensão, agentes adoçantes,aromatizantes, e perfumantes.

Os compostos da invenção também podem ser adminis-trados na forma de lipossomos. Conforme é sabido na técnica,os lipossomos são geralmente derivados de fosfolipidios oude outras substâncias lipidicas. Os lipossomos são formadospor cristais líquidos hidratados mono- ou muItilamelares,que estão dispersos em um meio aquoso. Pode ser usado qual-quer lipidio não tóxico, fisiologicamente aceitável e meta-bolizável, capaz de formar lipossomos. As presentes composi-ções na forma de lipossomos podem conter, além dos compostosda invenção, estabilizantes, conservantes, e similares. Oslipidios preferidos são os fosfolipídios e as fosfatidil co-linas naturais e sintéticos (Iecitinas), usados separadamen-te ou juntos.

Os métodos para formar os lipossomos são conheci-dos na técnica. Ver, por exemplo, Prescott, Ed., Methods inCell Biology, Volume XIV, Academic Press, Nova York, N. Y.,(1976), pág. 33 et seq.

Os compostos da invenção podem ser usados na formade sais, ésteres, ou amidas farmaceuticamente aceitáveis,derivados de ácidos inorgânicos ou orgânicos. 0 termo "sais,ésteres e amidas farmaceuticamente aceitáveis", conforme u-sado neste documento, inclui os sais, os zwitterions, os és-teres e as amidas dos compostos da invenção, os quais são,dentro do escopo do julgamento médico correto, adequados pa-ra uso em contato com os tecidos de seres humanos e animaisinferiores, sem toxicidade, irritação, resposta alérgica, esimilar, indevidas, são comensuráveis com uma razão razoávelentre beneficio/risco, e são efetivos para o seu uso preten-dido.

O termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se àqueles sais que são, dentro do escopo de julgamento mé-dico correto, adequados para uso em contato com os tecidosde seres humanos e animais inferiores, sem toxicidade, irri-tação, resposta alérgica, e similar, indevidas, e são comen-suráveis com uma razão razoável entre beneficio/risco. Ossais farmaceuticamente aceitáveis são bastante conhecidos natécnica. Os sais podem ser preparados in situ, durante o i-solamento e a purificação finais dos compostos da invenção,ou separadamente por reação de uma função de base livre comum ácido orgânico adequado.

Os sais de adição ácidos representativos incluem,porém não estão limitados ao acetato, adipato, alginato, ci-trato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato,butirato, canforato, canforassulfonato, digliconato, glice-rofosfato, hemi-sulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato,cloridrato, bromidrato, iodidrato, 2-hidroxietanossulfonato(isetionato), lactato, maleato, metanossulfonato, nicotinato,2-naftalenossulfonato, oxalato, pamoato, pectinato, persul-fato, 3-fenilpropionato,

picrato, pivalato, propionato, succinato, tartara-to, tiocianato, fosfato, glutamato, bicarbonato, p-toluenossulfonato e undecanoato.

Também, os grupos básicos contendo nitrogênio po-dem ser quaternizados com tais agentes como os halogenetosde alquila inferior, tais como os cloretos, os brometos e osiodetos de metila, etila, propila, e butila; os sulfatos dedialquila, tais como os sulfatos de dimetila, dietila, dibu-tila e diamila; os halogenetos de cadeias longas, tais comoos cloretos, os brometos e os iodetos de decila, laurila,miristila e estearila; os halogenetos de arilalquila, taiscomo os brometos de benzila e fenetila e outros. Desse modo,obtêm-se produtos solúveis em água ou óleo ou dispersáveis.

Os exemplos de ácidos que podem ser empregados pa-ra formar os sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitá-veis incluem tais ácidos inorgânicos como o ácido clorídrico,o ácido bromídrico, o ácido sulfúrico e o ácido fosfórico, etais ácidos orgânicos como o ácido oxálico, o ácido maléico,o ácido succínico, e o ácido cítrico.

Os sais de adição básicos podem ser preparados insitu, durante.o isolamento e a purificação finais dos com-postos desta invenção, por reação de uma porção contendo á-cido carboxílico com uma base adequada, tal como o hidróxido,o carbonato ou o bicarbonato de um cátion de metal farmaceu-ticamente aceitável ou com amônia ou uma amina primária, se-cundária ou terciária orgânica. Os sais farmaceuticamenteaceitáveis incluem, porém não estão limitados aos cátionsbaseados em metais alcalinos ou metais alcalino-terrosos,tais como os sais de litio, sódio, potássio, cálcio, magné-sio, e alumínio, e similares, e aos cátions de amônia e ami-na quaternários não tóxicos, incluindo o amônio, o tetrame-tilamônio, o tetraetilamônio, a metilamina, a dimetilamina,a trimetilamina, a trietilamina, a dietilamina, a etilaminae similares.

As outras aminas orgânicas representativas, ú-teis para a formação dos sais de adição de bases, incluem aetilenodiamina, a etanolamina, a dietanolamina, a piperidina,e a piperazina.

0 termo "éster farmaceuticamente aceitável", con-forme usado neste documento, refere-se aos ésteres dos com-postos da invenção que hidrolisam in vivo e incluem aquelesque se decompõem prontamente no corpo humano para deixar ocomposto de origem ou um sal dele. Os exemplos de ésteresnão tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis, da invenção in-cluem os ésteres de alquila de Ci a C6 e os ésteres de ci-cloalqula de C5 a C7, embora os ésteres de alquila de Ci a C4sejam preferidos. Os ésteres dos compostos da invenção podemser preparados de acordo com os métodos convencionais. Osésteres farmaceuticamente aceitáveis podem ser unidos aosgrupos hidróxi por reação do composto que contém o grupo hi-dróxi com ácido e um ácido alquilcarboxílico, tal como o á-cido acético, ou com ácido e um ácido arilcarboxílico, talcomo o ácido benzóico. No caso de compostos contendo gruposácido carboxílico, os ésteres farmaceuticamente aceitáveissão preparados a partir de compostos contendo os grupos áci-do carboxilico por reação do composto com uma base, tal comoa trietilamina, e um halogeneto de alquila, trifilato de al-quila, por exemplo, com o iodeto de metila, o iodeto de ben-zila, o iodeto de ciclopentila. Eles podem também ser prepa-rados por reação do composto com um ácido, tal como o ácidoclorídrico, e um ácido alquilcarboxilico, tal como o ácidoacético, ou com ácido e um ácido arilcarboxílico, tal como oácido benzóico.

O termo "amida farmaceuticamente aceitável", con-forme usado neste documento, refere-se às amidas não tóxicasda invenção, derivadas de amônia, alquila aminas de Ci a Cgprimárias e dialquil aminas de Ci a Ce secundárias. No casode aminas secundárias, a amina pode também estar na forma deum heterociclo de 5 ou 6 elementos, contendo um átomo de ni-trogênio.

As amidas derivadas de amônia, alquil amidas de Cia C3 primárias e dialquil amidas de Ci a C2 secundárias sãopreferidas. As amidas dos compostos da invenção podem serpreparadas de acordo com os métodos convencionais. As amidasfarmaceuticamente aceitáveis podem ser preparadas a partirde compostos contendo grupos amina primária ou secundáriapor reação do composto que contém o grupo amino com um al-quil anidrido, aril anidrido, halogeneto de acila, ou halo-geneto de aroíla. No caso de compostos contendo grupos ácidocarboxilico, os ésteres farmaceuticamente aceitáveis sãopreparados a partir de compostos contendo os grupos ácidocarboxilico por reação do composto com uma base, tal como atrietilamina, um agente desidratante, tal como a dicicloexilcarbodiimida ou o carbonil diimidazol, e uma alquil amina,dialquilamina, por exemplo, com a metilamina, a dietilamina,a piperidina. Eles podem também ser preparados por reação docomposto com um ácido, tal como o ácido sulfúrico, e um áci-do alquilcarboxilico, tal como o ácido acético, ou com ácidoe um ácido arilcarboxilico, tal como o ácido benzóico, sobcondições de desidratação, como com peneiras moleculares a-dicionadas. A composição pode conter um composto da invençãona forma de um pró-medicamento farmaceuticamente aceitável.

O termo "pró-medicamento farmaceuticamente aceitá-vel" ou "pró-medicamento", conforme usado neste documento,representa aqueles pró-medicamentos dos compostos da inven-ção que são, dentro do escopo de julgamento médico correto,adequados para uso em contato com os tecidos de seres huma-nos e animais inferiores, sem toxicidade, irritação, respos-ta alérgica, e similares, indevidas, comensuráveis com umarazão razoável entre beneficio/risco, e efetivos para o seuuso pretendido. Os pró-medicamentos da invenção podem serrapidamente transformados in vivo em um composto de origemda invenção, por exemplo, através de hidrólise no sangue.Uma discussão completa é proporcionada em T. Higuchi e V.Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, V. 14 da A.C.S.Symposium Series, e em Edward B. Roche, ed., BioreversibleCarriers in Drug Design, American Pharmaceutical Associationand Pergamon Press (1987).

A invenção contempla os compostos farmaceuticamen-te ativos quimicamente sintetizados ou formados por bio-transformação in vivo em compostos.Os compostos, as composições, e os métodos da in-venção serão mais bem entendidos por referência aos exemplose exemplos de referência a seguir, que são pretendidos comouma ilustração do, e não uma limitação sobre o, escopo dainvenção.

EXEMPLOS

DETERMINAÇÃO DAS POTÊNCIAS DE LIGAÇÃO AO RECEPTORNICOTÍNICO DO CANAL DE ACETILCOLINA

Exemplo 1: Ensaio de Ligação da [3HJ-Citisina

As condições de ligação foram modificadas a partirdos procedimentos descritos em Pabreza LA, Dhawan, S, KellarKJ, [3HJ-Citisine Binding to Nicotinic Cholinergic Receptorsin Brain, Mol. Pharm. 39: 9-12, 1991. As frações enriqueci-das com membranas de cérebro de ratos sem cerebelo (ABS Inc.,Wilmington, DE) foram lentamente descongeladas a 4 °C, lava-das e suspensas novamente em 30 volumes de tampão de BSS-Tris (NaCl a 120 mM/KCl a 5 mM/CaCl2 a 2 mM/MgCl2 a 2mM/Tris-Cl a 50 mM, pH 7,4, 4 °C). As amostras contendo 100-200 μg de proteína e [3H]-citisina a 0,75 nM (30 Ci/mmol;Perkin Elmer/NEN Life Science Products, Boston, MA) foramincubadas em um volume final de 500 μL, por 75 minutos, a 4°C. Sete concentrações em diluição Iog de cada composto fo-ram testadas em duplicata. A ligação não específica foi de-terminada na presença de (-)-nicotina a 10 μΜ. A radioativi-dade ligada foi isolada por filtração a vácuo sobre placasde filtro de fibra de vidro pré-umedecidas (Millipore, Bed-ford, MA) usando um aparelho de filtração de 96 poços (Pac-kard Instruments, Meriden, CT) , e foram então rapidamenteenxaguadas com 2 mL de tampão de BSS gelado (NaCl a 120mM/KCl a 5 mM/CaCl2 a 2 mM/MgCl2 a 2 mM). O coquetel de cin-tilação MicroScint-20® da Packard (40 μΐι) foi adicionado acada poço e a radioatividade determinada usando um instru-mento TopCount® da Packard. Os valores de IC50 foram determi-nados por regressão não-linear no software Excel® da Micro-soft. Os valores de Ki foram calculados a partir das IC50Susando a equação - de Cheng-Prusoff, onde Ki =IC5o/l+ [Ligante] /KD].

DETERMINAÇÃO DO FLUXO DE CANAL IÔNICO PELORECEPTOR NIC0TÍNIC0 DO CANAL DE ACETILCOLINA

Exemplo 2: Ensaio de IMR-32

As células da linhagem celular clonal de neuro-blastoma humano IMR-32 (ATCC, Rockville, Maryland, EUA) fo-ram mantidas em uma fase Iog de crescimento, de acordo comos procedimentos estabelecidos. As células experimentais fo-ram semeadas em uma densidade de 500.000 células/mL para umaplaca de cultura de tecido de 24 poços. As células prepara-das nas placas foram deixadas proliferar-se por pelo menos48 horas, antes da carga com · 2 μΟι/πΛ de 86Rb+ (35 Ci/mmol) ,durante a noite, a 37°C. Os ensaios de efluxo de 86Rb+ foramefetuados de acordo com protocolos previamente publicados(Lukas, R.J., J. Pharmacol. Exp. Ther., 265, 294-32, 1993),exceto que o meio de Eagle Modificado da Dulbecco sem sorofoi usado durante as etapas de carga de 86Rb+, enxágüe, e e-fluxo induzido por agonista. Os dados refletem a ativação dofluxo de 86Rb"1" em uma concentração de 1 μΜ, e refletem a res-posta como uma porcentagem da resposta máxima produzida pela(S)-nicotina. Os dados são interpretados de modo tal quequanto maior a resposta, mais potente é a ativação dos re-ceptores gangliônicos periféricos, o que é adicionalmenteinterpretado sugerir que, in vivo, ocorrerá uma contribuiçãomais potente para os efeitos indesejados, por exemplo, sobreos sistemas cardiovasculares ou gastrointestinais, ou ambos.

ESTUDO PILOTO DE UM AGONISTA PARCIAL DO RECEPTORNICOTÍNICO NEURONAL PARA 0 TRATAMENTO DE ADHD EM ADULTOS

Exemplo 3: Um estudo piloto foi projetado para avaliar o ABT-089, um agonista parcial do receptor nicotiniconeuronal (NNR), como tratamento para o distúrbio de déficitde atenção hiperatividade (ADHD) em adultos. Método: Os a-dultos com ADHD receberam placebo, 2 mg, 4 mg, ou 20 mg deABT-089 por duas semanas, cada, em um projeto de quadradolatino 4x4 controlado com placebo, duplo-cego, aleatorizado,por um total de 8 semanas. Além do resultado primário, a Es-cala de Classificação do ADHD em Adultos de Conner (CAARS),escalas de classificação secundárias, avaliações neuropsico-lógicas, e de segurança, foram completadas. Resultados: Umtotal de 11 adultos com ADHD bem caracterizado completou es-te estudo de cruzamento. 0 ABT-089 foi superior ao placebopara o Escore de Sintomas Totais da CAARS, que foi o pontofinal primário (placebo: 38,0 ± -1,9; 2 mg bid: 32,2 ± -1,9,ρ = 0,021 de uma extremidade; 4 mg bid: 33,2 ± -1,9, ρ =0,047; 20 mg bid: 33,5 ± -1,9, ρ = 0,056). 0 ABT-089 foi su-perior também ao placebo para o índice de ADHD e os escoresde Hiperativo/Impulsivo da CAARS e o escore de ImpressãoGlobal Clínica da Gravidade do ADHD. Nos pontos finais daeficácia clinica, o Escore dos Sintomas Totais da CAARS e oescore de Hiperativo/Impulsivo da CAARS, observou-se umacurva de resposta à dose no formato de V invertido superfi-cial. Entretanto, a curva de resposta à dose para os efeitosde atenção e memória, como medidos por teste cognitivo com-putadorizado, pareceu linear na dose. Nenhuma verificaçãoclinicamente significativa nas avaliações de segurança ou noperfil de efeito colateral foi observado. Conclusões: Os da-dos a partir deste estudo piloto sugerem que o ABT-089 podeser efetivo no tratamento de ADHD em adultos e é bem tolera-do. Com base nestes resultados promissores, justificam-seestudos com o ABT-089 de grupos paralelos maiores, de dura-ção mais longa.

Introdução

0 distúrbio de déficit de atenção-hiperatividade(ADHD) é caracterizado por sintomas básicos de hiperativida-de, desatenção, e impulsividade. A sua predominância em cri-anças na idade escolar é estimada em 6-8% mundialmente (Fa-raone e col, 2003), com sintomas que persistem na fase adul-ta em aproximadamente 50% dos indivíduos com início na in-fância (Barkley e col., 2002; Wilens e col., 2004). O dadoepidemiológico recente sugere que o ADHD ocorre em aproxima-damente 4,7% dos adultos nos EUA (Kessler e col., na prensa).

Os dados agregados também suportam que o ADHD em adultoscompartilha muitas similaridades fenotípicas e genotípicascom a forma do distúrbio na infância (Faraone e col., 2005;Spencer, 2004). Além disso, por causa da similaridade farma-cológica na resposta através do período de vida (Spencer,2004) e de considerações éticas de expor o jovem a novoscompostos, os adultos com ADHD têm sido usados cada vez maispara os ensaios farmacológicos de fase inicial.

O ADHD em adultos está associado com dificuldadesacadêmicas, de trabalho, e maritais, bem como distúrbiospsiquiátricos co-mórbidos, tais como abuso de substâncias,depressão, ansiedade, e distúrbios de personalidade (Barkley,2002; Biederman, 2004; Wilens e col., 1995). Além disso, odado de custo da doença em adultos com ADHD não tratadosvastamente excede aquele em adultos com ADHD comparados -ambos quanto às despesas médicas e sociais (Secnik e col.,2005). Dado o alto nivel de deficiência no funcionamento edisfunção na qualidade de vida, os adultos com ADHD requeremtratamento para o seu ADHD.

Atualmente, o tratamento de ADHD em adultos é lar-gamente baseado no uso de medicações tanto estimulantesquanto não estimulantes, bem como em psicoterapias estrutu-radas adjuntivas (Saften e col., 2004). Apesar da disponibi-lidade para o ADHD tanto dos aprovados pela Food and DrugAdministration (FDA) quanto de outros, agentes, diversos in-divíduos não podem tolerar, ou não respondem aos compostosexistentes, necessitando do desenvolvimento de agentes al-ternativos com novos mecanismos de ação.

O interesse crescente tem sido concentrado na fun-ção do sistema nicotínico-colinérgico nos distúrbios cogni-tivos, incluindo o ADHD. Além do fumo de cigarro estar sendosuper-representado em adolescentes e adultos com ADHS, a ni-cotina e os análogos relacionados têm sido mostrados teremeficácia no tratamento de ADHD (Conners, 1996; Levin e col.,1996; Wilens e col., 1999).

Por exemplo, o ABT-418, um agonista do receptornicotinico neuronal (NNR), administrado de modo transdérmico,foi anteriormente mostrado, em um ensaio clinico controladoem 32 adultos, ser efetivo no tratamento de ADHD em geral, ede déficits de atenção/cognitivos em particular (Wilens ecol., 1999). Mais recentemente, uma forma oral de um agonis-ta parcial do NNR, o ABT-089, tornou-se disponível para oteste em humanos. 0 ABT-089 liga-se muito seletivamente aosNNRs α4β2 humanos in vitro e tem fraca atividade agonista emNNRs expressos in vitro.

0 ABT-089 foi mostrado, em modelosde animais rodentes e primatas, melhorar a atenção, o apren-dizado, e os déficits de memória. A curva de resposta à doseera no formato de U, com eficácia associada com os níveisplasmáticos de 5-15 ng/mL (Rueter e col., 2004). Foram ob-servadas considerações similares em um estudo com seres hu-manos de doses múltiplas, de Fase 1. Neste estudo de dosesmúltiplas, o Tempo de Reação Simples, uma medida da atenção,foi significativamente melhorado com o ABT-089 sobre umafaixa de 5 a 40 mg duas vezes diariamente, em comparação como placebo [M02-411, dados no arquivo no Abbott Laboratories].

0 ABT-089 foi bem tolerado sobre esta faixa de doses. Dadosos efeitos deste análogo nicotinico sobre as deficiências decognição, e dados os altos graus de disfunção cognitiva noADHD (particularmente adolescentes e adultos) (Biederman ecol., 2000; Millistein e col., 1997), o uso de ABT-089 tera-peuticamente para o ADHD é imprescindível.São descritos neste documento os resultados de um estudo piloto de cruzamento, controlado com placebo, duplo-cego, aleatorizado, do ABT-089 no tratamento de adultos comADHD. Nosso objetivo era comparar a segurança e a eficáciade 2 mg, 4 mg, e 20 mg de ABT-08 9 duas vezes diariamente como placebo em adultos com ADHD. Nós formulamos a hipótese queas fases do estudo com ABT-089, em comparação com a condiçãodo placebo, estariam associadas com a melhora nos sintomasbásicos do ADHD.

Este estudo foi projetado como um estudo de Faselia, de detecção de sinal, exploratório, para proporcionarprova de conceito para este novo composto, antes do iniciode um programa de Fase IIb de escala maior. Como tal, o pro-jeto de custo eficiente foi selecionado, em que um númerorelativamente pequeno de pacientes seria estudado, em um nú-mero pequeno de locais de estudo altamente experientes. Ummétodo escolhido para manter o número de pacientes pequeno,sem perda de potência estatística, foi empregar um teste comuma extremidade para testar a hipótese que o fármaco é me-lhor do que o placebo, assim reduzindo o número de pacientesem 20%. Além disso, um projeto de cruzamento foi selecionadoem vez de um projeto, de grupos paralelos, assim reduzindomais o número de pacientes a ser estudado aproximadamentedez vezes, em comparação com um estudo de variação da doseparalelo de 4 braços convencional de potência estatísticasimilar com teste com duas extremidades. Os pacientes rece-beram placebo e três doses de ABT-089. Uma ampla faixa dedoses foi selecionada para maximizar a probabilidade da de-tecção de sinal. Um início relativamente rápido do efeitoera esperado (~l-2 horas, dados no arquivo na Abbott), assima duração da dosagem foi limitada a duas semanas por trata-mento; entretanto, o projeto assegurou que cada paciente re-cebesse exposição ininterrupta ao fármaco sob estudo porquatro a seis semanas.

0 estudo foi interrompido antes que todos os paci-entes completassem o ensaio. Um total de 61 pacientes foiarrolado e 11 completaram o estudo. Esta publicação concen-tra-se nos resultados dos 11 pacientes que completaram o en-saio inteiro de cruzamento. Os 50 pacientes restantes tive-ram somente dados parciais, a maior parte confinada às pri-meiras duas semanas do estudo.

Métodos e Materiais

Pacientes - Os pacientes entre 18 e 60 anos de i-dade, que atenderam os critérios de DSM-IV-TR para ADHD,conforme avaliados por entrevista clínica e confirmados pe-los critérios diagnósticos para o ADHD do Kiddie Schedulefor Affective Disorders and Schizophrenia ("Programa da Cri-ança para Distúrbios Afetivos e Esquizofrenia") da Universi-dade de Washington em St. Louis (WASH-U-KSADS) (Orvaschel,1985) (Geller e col., 1998), foram qualificados para a in-clusão no estudo. Além disso, foram requeridos um escore de> 2 em pelo menos seis de nove itens em pelo menos uma dassub-escalas da Escala de Classificação do ADHD em Adultos deConner (CTVARS) (Conners e col., 1999), na triagem e no Dia 1,e um escore de > 4 (í.e., gravidade pelo menos moderada) noteste de Impressões Globais Clínicas da Gravidade do ADHD-(CGI-ADHD-S) (Guy, 1976), na triagem. Os critérios de exclu-são consistiam em: fumante ou usuário de produto(s) de nico-tina nos três meses antes do protocolo; condições médicascrônicas clinicamente significativas; diagnóstico ou histó-ria atual de distúrbio esquizoafetivo ou bipolar, distúrbioobsessivo-compulsivo, esquizofrenia, ou outro distúrbio psi-cótico; depressão atual requerendo tratamento; concepção deidéias homicidas ou suicidas sérias; valores de laboratóriode linhas de base anormais; abuso/dependência de drogas ouálcool dentro dos últimos três meses; uso atual de psicotró-picos ou estimulantes; e mulheres grávidas ou amamentando.Os seguintes conselhos institucionais de revisão no QuorumIRB em Seattle, WA, The Human Research Committee no LawrenceHouse em Boston, MA, o Institutional Board of ResearchAssociates na NYU School of Medicine em Nova York, NY, o NewYork Campus, VA NY Harbor Healthcare Systems Subcommitteefor human subjects, research and development subcommittee,and research safety subcommittee em Nova York, NY, oUniversity of Vermont Committee on Human Research emBurlington, VT, o Scientific Advisory Committee ofBurlington, VT, e a University of Chicago Hospitais IRB emChicago, IL, aprovaram o protocolo de estudo, e todos os pa-cientes proporcionaram consentimento escrito, informado.

Projeto - Seguindo um período inicial de duas se-manas de depuração total e triagem da medicação, os pacien-tes entraram em um período de tratamento duplo-cego, de oitosemanas. Os pacientes qualificados foram aleatorizados (deacordo com um programa de randomização gerado por computadorcentral) para uma de quatro seqüências de tratamento, em queeles receberam 2 mg, 4 mg, e 20 mg de ABT-089, bem como pla-cebo correspondente, cada um duas vezes diariamente (30 mi-nutos antes do café da manhã e oito horas posteriormente)por duas semanas, sem nenhuma depuração total entre os tra-tamentos. Um projeto de estudo esquemático é proporcionadoabaixo, na Tabela 1.

Avaliações - Os avaliadores para a CAARS foramtreinados e certificados antes do inicio do estudo. A CAARSadministrada pelo investigador, a CGI-ADHD-S, a Escala deAnsiedade de Hamilton (HAM-A) (Hamilton, 1959), e a Escalade Depressão de Hamilton (HAM-D) (Hamilton, 1960) foram ad-ministradas aos pacientes na linha de base e no término decada período de tratamento (Dias 14, 28, 42, e 56). As clas-sificações da CAARS, da HAM-A, e da HAM-D foram baseadas nossete dias anteriores. Após serem treinados, os pacientescompletaram uma bateria de avaliações cognitivas computado-rizadas (Simpson e col., 1989), a qual foi corrigida paraincluir o Teste de Desempenho Contínuo de Conner (Conners,1995) e o "Stroop Color Word Test" (Jensen e Rohwer, 1966),na linha de base e no término de cada período de tratamento.

As tarefas de atenção (tempo de reação simples e de escolha,vigilância de algarismos), a atenção seletiva (CPT de Con-ner), as tarefas de memória de trabalho (memória de trabalhonumérica e espacial, processamento rápido de informação vi-sual) , a memória secundária episódica (lembrança imediata ouretardada da palavra, reconhecimento de palavras e fotos),as tarefas de controle motor (acompanhamento), e a funçãoexecutiva (o efeito Stroop) estavam entre os itens avaliados.

As amostras de sangue para a análise farmacocinética foram retiradas em 0, 1, 2, 4, e 8 horas no Dia 1 e emaproximadamente 2 horas após a dose no último dia de cadaperíodo de dosagem. As amostras de sangue foram imediatamen-te armazenadas a 40C ou abaixo. As amostras de sangue foramcentrifugadas dentro de uma hora da coleta, usando uma cen-trífuga refrigerada para separar o plasma. As amostras deplasma foram transferidas, usando pipetas plásticas, parafrascos pequenos plásticos. As amostras de plasma foram con-geladas a -20°C dentro de uma hora da centrifugação e perma-neceram congeladas até serem expedidas para o Abbott Labora-tories para análise.

A segurança foi avaliada por relatório espontâneode eventos adversos; além disso, os dados de laboratório(hematologia, química, urinálise), os sinais vitais, e oseletrocardiogramas (BCGs) foram completados na linha de basee no final de cada período de tratamento.

Estatística - O ponto final da eficácia primáriafoi o escore dos sintomas do ADHD totais da CAARS (soma dosescores de desatenção e Hiperatividade/Impulsividade) obtidono último dia de cada período de tratamento. As diferençasde tratamento foram avaliadas usando um modelo de análise davariância (ANOV A) , com os termos fixos adaptados para otratamento, o período, e a seqüência, e um efeito aleatóriopara os pacientes dentro da seqüência. As diferenças de tra-tamento para as medidas da eficácia secundária (índice doADHD, escore de Hiperativo/Impulsivo da CAARS, escore de de-satento da CAARS, CGI-ADHD-S, HAM-A, HAM-D), e a bateria deavaliações cognitivas computadorizadas) e os dados médios delaboratório, sinais vitais, e eletrocardiogramas (ECG) obti-dos no final de cada período de tratamento foram também ava-liados por ANOV A. Dentro do esquema do modelo de ANOV A,cada dose de ABT-08 9 foi comparada ao placebo. Não houve ne-nhuma correção para as comparações múltiplas neste estudo deprova de conceito. Os testes estatísticos da eficácia foramunilaterais; os valores de ρ < 0,050 foram considerados es-tatisticamente significativos, e aqueles entre 0,051 e 0,010indicaram uma tendência estatística.

O teste unilateral foi escolhido a priori porque aconduta de um ensaio de variação da dose de um grupo parale-lo de tamanho integral com o teste com duas extremidades se-ria baseada em pelo menos demonstrar a melhora com o ABT-089comparado ao placebo.

0 tamanho do efeito assumido de 0,37está consistente com os resultados dos ensaios de múltiploscentros com atomoxetina em adultos com ADHD após duas a dezsemanas de tratamento (Michelson e col., 2003). Uma correla-ção dentro do objeto de estudo de 0,5 foi assumida como umlimite inferior para as correlações a partir dos resultadosde confiabilidade publicada de testes/testes novamente paraa escala.

Um projeto de William, um tipo de projeto de qua-drado latino, foi adotado para este estudo (Senn, 1993). Umprojeto de William é um caso especial de um projeto de cru-zamento no qual cada tratamento antecede todos os outrostratamentos um número igual de vezes, e permite uma avalia-ção dos efeitos de sobra ("carryover") desiguais. 0 poderdeste projeto vale-se de todos os pacientes completando to-dos os quatro períodos de tratamento. Para um tamanho de e-feito de 0,37 e uma correlação dentro do objeto de estudo de0,5, um tamanho de amostra de 48 pacientes completando todosos tratamento detectaria a superioridade de uma dose de ABT-089 em relação ao placebo com 80% de potência, em um testecom uma extremidade, com alfa = 0,05. Um ensaio de variaçãoda dose de Fase IIb de grupo paralelo com teste com duas ex-tremidades requer 130 pacientes por grupo de tratamento, pa-ra um total de 520 pacientes.

Para que os pacientes não estejam sem tratamentoativo mais do que duas semanas durante o estudo (i.e., pla-cebo durante um dos quatro períodos de tratamento de estudo),e permitam o tratamento contínuo com o fármaco "ativo" porpelo menos quatro semanas, não houve nenhum intervalo de de-puração total entre as doses de períodos consecutivos. A e-fetuação de avaliações no final das duas semanas de trata-mento deve ter minimizado, se não eliminado, a sobra. Se e-xistisse uma evidência de uma sobra desigual, as seqüênciasescolhidas para o estudo teriam permitido o ajuste nas aná-lises.

Os tamanhos dos efeitos empíricos foram calculadospara o escore total da CAARS como a diferença média para ca-da dose de ABT-089 versus placebo, dividida pelo desvio pa-drão dos escores da diferença.

Resultados

Faixa Demográfica e História da Doença - Um totalde 61 pacientes foi arrolado e 11 completaram o estudo antesdele ser terminado prematuramente, pendendo dados pré-clinicos adicionais. Somente um paciente descontinuou antesdo tempo a participação no estudo devido a um evento adverso,vertigem (no Dia de Estudo 2, enquanto tomando 2 mg de ABT-089), que o investigador acreditou poder ter estar relacio-nado ao fármaco sob estudo ou ao uso concomitante de álcoole drogas ilícitas agudamente. Um paciente retirou o consen-timento durante o estudo, um paciente foi perdido para o a-companhamento, e os 47 pacientes restantes descontinuaramquando o patrocinador interrompeu o estudo antes do tempo. Amaior parte destes pacientes tinha completado somente 5 a 14dias de tratamento e, portanto, não foi incluída nas análi-ses. Dado que a potência estatística do projeto de cruzamen-to de William requer que os pacientes completem todos os pe-ríodos de tratamento, as análises da eficácia foram conduzi-das usando o grupo de dados dos 11 pacientes que completaramo estudo, que incluíam seis homens e oito caucasianos, comuma idade média (± DP) de 32,0 (10,15) anos. Cinco pacientestiveram um primeiro grau relativo com o ADHD. Três pacientestiveram pelo menos uma doença psiquiátrica co-mórbida crôni-ca, todos os três relatando depressão.

Na linha de base, seis pacientes atenderam os cri-térios de DSM-IV para o subtipo de desatento da CAARS, cincoatenderam os critérios para o subtipo combinado, e nove a-tenderam os critérios para o subtipo de Hiperativo/Impulsivoda CAARS. Na linha de base, os escores médios da CAARS foram39, 1 (8, 08) para o escore total, 22,6 (3,14) para a sub-escala de desatento e 16,5 (6,09) para a sub-escala de Hipe-rativo/Impulsivo, e 25, 4 (4, 74) para o índice do ADHD. Ospacientes não eram altamente ansiosos (HAM-A = .7,1 ± 5,15),nem depressivos (HAM-D = 5,5 ± 3,50). As características dospacientes na linha de base que completaram o ensaio são pro-porcionadas abaixo, na Tabela 2. Eles foram prejudicados emalgumas avaliações cognitivas computadorizadas em comparaçãocom os controles saudáveis, de idade correlacionada, refle-tidas nos tempos de reação prejudicados dentro das tarefasde Atenção individuais.

Efeitos do Tratamento - No último dia de tratamen-to, observou-se um efeito de tratamento estatisticamentesignificativo (vs. placebo) sobre o escore dos sintomas to-tais da CAARS para as doses tanto de 2 mg quanto de 4 mg deABT-089 duas vezes ao dia, e a resposta aproximou-se do ní-vel de significado estatístico (p = 0, 056) para 20 mg deABT-089 duas vezes ao dia, conforme descrito abaixo na Tabe-la 3. O tamanho do efeito foi 0,92, 0,76, e 0,71 para as do-ses de 2 mg, 4 mg, e 20 mg duas vezes ao dia, respectivamen-te. Quando os dados foram analisados pelas sub-escalas daCAARS, observaram-se melhoras estatisticamente significati-vas para o índice do ADHD em todos os níveis de doses, apóssomente duas semanas de tratamento (-17% de melhora vs. pla-cebo) , e o escore de Hiperativo/Impulsivo nas doses de 2 mge 4 mg de ABT-089 (-20% de melhora vs. placebo). Uma tendên-cia para a melhora foi observada no escore de Desatento daCAARS para as doses de 2 mg e 20 mg, com escores de melhoraversus placebo de aproximadamente 11 %. A curva de respostaà dose teve um formato de U invertido, superficial, similarao dados de animais, tanto para o escore dos sintomas totaisda CAARS quanto para as sub-escalas de Hiperativo/Impulsivoda CAARS. Não foi observada nenhuma resposta à dose para asub-escala de Desatento da CAARS, entretanto.

Para o ponto final primário, a resposta ao placebofoi similar através de todos os quatro períodos de tratamen-to, demonstrando ausência de efeitos de aprendizado ou efei-tos de período (Período 1: [n=3] 36,7, Período 2: [n=4] 38,5,Período 3: [n=2] 40,5, Período 4: [n=2] 35,5). Nas doses a-tivas, os efeitos do tratamento pareceram ser maiores quandoa duração do tratamento foi mais longa.

Para a CGI-ADHD-S, observou-se uma diferença detratamento favorecendo o ABT-089 sobre o placebo seguindo asdoses de 2 mg (p = 0,031) e 4 mg (p = 0,093), porém não se-guindo a dose de 20 mg (p = 0,112). 0 escore médio seguindoo tratamento com placebo foi 4,47 (0,20), comparado a 3,92(0,20) seguindo a dose de 2 mg, 4, 09 (0, 20) seguindo a dosede 4 mg, e 4,12 (0,20) seguindo a dose de 20 mg. 0 ABT-089não teve nenhum efeito sobre os escores de HAM-A ou HAM-D.

Avaliação cognitiva. Os resultados das avaliaçõescognitivas computadorizadas nesta pequena amostra indicaramque a curva de resposta à dose de ABT-08 9 para os efeitos deatenção e memória pareceu ser linear na dose. Para o índicede sensibilidade da memória de trabalho, houve uma tendênciafavorecendo 20 mg de ABT-089 (0,923 ± -0,022) comparado aoplacebo (0,882 ± -0,022; P = 0,091). Para a memória de tra-balho espacial, observou-se uma melhora estatisticamentesignificativa no índice de sensibilidade com 20 mg de ABT-089 (0,966 ± 0,031 vs. placebo: 0,892 ± 0,031, ρ = 0,021) euma tendência com 2 mg (0, 937 ± 0,031, P = 0, 074) e 4 mg(0,946 ± 0,031, ρ = 0,052). Para o processamento da informa-ção, houve uma tendência favorecendo 20 mg de ABT-089 combase na velocidade (516,3 ± 12,7 vs. placebo: 544,1 ± 12,7,ρ = 0,065), porém nenhuma diferença entre as doses para aporcentagem de alvos detectados ou número de alarmes falsos.

Em uma medida da atenção seletiva (Teste do Desempenho Con-tínuo) , observou-se uma melhora estatisticamente significa-tiva em todos os níveis de doses de ABT-089 para o número deerros de incumbência, que ocorrem quando uma resposta é fei-ta para um estímulo que não é alvo. As outras diferenças dasdoses de tratamento favorecendo o ABT-089 a partir do Testede Desempenho Contínuo incluíram: 2 mg (0,56 ± 0,27 vs. pla-cebo: -0,03 ± 0,27, ρ = 0, 066), 4 mg (0,68 ± 0,27, ρ =0,037), e 20 mg (0,69 ± 0,27, ρ = 0,035) para a Atenção. Pa-ra as medidas de atenção (tempo de reação, vigilância), me-mória secundária episódica, e função executiva (avaliada pe-lo Efeito Stroop), não houve nenhuma diferença significativaentre o ABT-08 9 e o placebo.

Farmacocinética - Devido aos pontos de tempo deamostragem farmacocinética limitados, as concentrações infe-riores e médias foram estimadas usando uma abordagem de mo-delagem farmacocinética de efeito misto, não linear, com osoftware NONMEM Versão V. Seguindo as doses de 2 e 4 mg duasvezes ao dia, os valores estavam dentro da faixa-alvo de 5-15 ng/mL, conforme mostrado na Tabela 4, abaixo.Tolerabilidade e Segurança - O ABT-089, em uma do-sagem entre 2 mg e 20 mg duas vezes ao dia, foi bem toleradopelos pacientes adultos com ADHD II que completaram este es-tudo. Não houve nenhum evento adverso sério. Não houve ne-nhuma tendência clinicamente significativa nos tipos de e-ventos adversos, nem nenhuma relação temporal ou de dose coma administração do fármaco. Os eventos mais adversos foramconsiderados de gravidade branda ou moderada. Os eventos re-lacionados ao tratamento mais comumente relatados (mais doque um paciente durante o tratamento em qualquer período)foram cefaléia, sonolência, dor (dor no braço e dor de den-tes), apetite aumentado e nervosismo, conforme mostrado naTabela 5, abaixo. Somente um paciente sentiu náusea na dosede 4' mg, o que não ocorreu em 20 mg ou 2 mg, e o mesmo paciente relatou diarréia enquanto tomando 4 mg e 20 mg.

Não houve nenhuma consideração clinicamente signi-ficativa ou tendência relacionada à dose para as verifica-ções de laboratório, os sinais vitais ou o ECG durante o es-tudo. Os resultados das avaliações de segurança para os 61pacientes que foram aleatorizados para este ensaio, e dosquais, a maior parte tinha sido tratada por entre 5 e 14 di-as, estavam consistentes com aqueles relatados para os 11que completaram.

Resumo dos Resultados

Neste estudo de prova de conceito, de cruzamento,controlado por placebo, duplo-cego, aleatorizado, piloto,pequeno, de 11 pacientes adultos com ADHD, o tratamento comABT-089 foi bem tolerado sobre uma faixa de doses de dez ve-zes. Apesar da curta duração de exposição, os resultados dosensaios produziram um sinal claro de eficácia na melhora dossintomas do ADHD, quando avaliados pela CAARS administradapelo investigador. Tanto os sintomas de hiperativo/impulsivoquanto os sintomas de desatento responderam ao ABT-089; en-tretanto, neste estudo, o efeito sobre os sintomas de hipe-rativo/impulsivo foi numericamente maior do que o efeito so-bre os sintomas de desatento. Em geral, as melhoras clinicasforam vistas nas duas doses menores (2 mg e 4 mg duas vezesao dia) nas medições dos resultados tanto primários quantosecundários.

Neste estudo, a CGI-ADHD-S mostrou melhora mo-desta, ainda assim significativa, sobre o placebo na dose de2 mg de ABT-089, suportando a verificação na CAARS da eficá-cia em doses mais baixas. Entretanto, a curva de resposta àdose para os efeitos de atenção e memória, conforme medidospor teste cognitivo computadorizado, pareceu ser linear nadose. Esta eficácia foi detectada após somente duas semanasde tratamento em cada nivel de dose, comparado ao placebo,sugerindo um inicio rápido da eficácia do ABT-089 para oADHD. De modo interessante, a resposta ao placebo foi simi-lar em todos os quatro periodos de tratamento, indicando aausência de efeitos de sobra.

Ser capaz de detectar estes resultados promissoresem tão poucos pacientes, após uma duração de tratamento re-lativamente breve, dá credibilidade para o uso de um projetode cruzamento em ADHD, especialmente para um composto cominicio de ação relativamente rápido, como o ABT-089. O pro-jeto de cruzamento é particularmente bem adequado para umestudo de prova de conceito quando os sintomas do distúrbiosob estudo forem estáveis com o tempo. Embora apropriado pa-ra estudos exploratórios, tal projeto não necessariamenteseria apropriado para um estudo confirmatório. Os projetosde cruzamento foram usados em estudos anteriores de prova deconceito de ADHD em adultos com a atomoxetina (Spencer ecol., 1998), o Adderall (Spencer e col., 2001), e o ABT-418(Wilens e col., 1999).

Um dos dilemas dos estudos de fase inicial é a de-terminação da(s) dose(s) ótima(s) para um distúrbio. As do-ses avaliadas para este estudo foram selecionadas na basedas expectativas da modelagem farmacocinética que 4 mg admi-nistrados duas vezes ao dia, dados em um intervalo de 8 ho-ras, manteriam as concentrações plasmáticas no estado esta-cionário da população na faixa de 5-15 ng/mL, ininterrupta-mente, por cerca de 20 horas após a dose da manhã, em maisdo que 70% dos pacientes. A faixa alvejada de 5-15 ng/mL foiderivada de experimentos com animais (Decker e col., 1997) eas doses de 2 mg e 20 mg duas vezes ao dia foram empregadaspara testar a eficácia abaixo e acima dos níveis plasmáticoseficazes esperados, respectivamente. Os níveis plasmáticosseguindo as duas doses menores neste estudo estavam dentroda faixa alvejada, assim confirmando nossas previsões a par-tir de modelos de animais.

Neste estudo piloto, o ABT-089 estava associadocom melhoras no ADHD em relação ao placebo. Dado que o ABT-089 tem seletividade pelo subtipo de receptor α4β2, é possí-vel que estes efeitos sejam mediados por este subtipo de NNR.Os resultados deste estudo estão consistentes com uma lite-ratura crescente suportando que o estímulo direto do NNR es-tá associado com melhoras nos déficits cognitivos do ADHD ede distúrbios relacionados (Newhouse e col., 2004). Os com-postos, tais como os NNRs, com efeitos positivos sobre acognição podem ser benéficos terapeuticamente em um grandenúmero de distúrbios caracterizados por disfunção neuropsi-cológica e cognitiva maciça, incluindo a doença de Alzheimer,o distúrbio bipolar, a esquizofrenia, o distúrbio esquizoa-fetivo, e outros distúrbios relacionados. Claramente, é ne-cessário mais trabalho que avalie a função destes agentes emum amplo espectro de distúrbios psiquiátricos com distúrbiocognitivo conhecido.

Em relação ao ADHD, os resultados atuais são simi-lares àqueles por Levin e Conners, que descreveram que umensaio muito breve de emplastro de nicotina foi efetivo emadultos com ADHD (Levin e col., 1996). Similarmente, um ago-nista nicotínico relacionado foi mostrado ser útil clinica-mente para o ADHD em adultos (Wilens e col., 1999). Estesdados agregados adicionalmente suportam uma ligação crescen-te e bem documentada entre a atividade do receptor nicotíni-co e o ADHD.

O ABT-089 foi bem tolerado. No estudo atual, não houve nenhum efeito colateral que limitasse a dose ou rela-tório de sintomatologia de abstenção. Não houve nenhuma a-normalidade cardiovascular ou outra anormalidade de labora-tório clinicamente significativa durante o estudo; mesmo as-sim, a nossa capacidade de detectar reações não freqüentes eidiossincráticas está limitada pelo pequeno número de paci-entes e pela curta duração das condições de tratamento e es-tudo global. Além disso, conforme é prática padrão em muitosensaios clínicos, o relato espontâneo de efeitos colateraisfoi usado neste estudo. 0 uso de uma escala de classificaçãodos efeitos colaterais estruturada pode ter produzido even-tos mais adversos.

Existem diversas limitações no estudo atual. Por causa da natureza do estudo, uma população de estudo homogê-nea foi selecionada que pode não generalizar para adultostípicos com ADHD. Por exemplo, os pacientes com históriasmédicas significativas e os fumantes foram excluídos. Alémdisso, havia um pequeno grupo de pacientes no estudo. 0 es-tudo era pretendido para 48 pacientes completos e, embora 61pacientes fossem aleatorizados, o estudo foi terminado antesdo tempo quando somente 11 pacientes tinham completado todosos quatro períodos de tratamento e a maioria dos outros ti-nha completado 5-14 dias de tratamento. Ademais, a maioriados pacientes neste estudo era de um dos locais de estudo,portanto, o tamanho do efeito substancial observado nesteestudo pode não repetir em um ensaio de múltiplos centros,devido à variabilidade entre os locais. Embora o projeto as-segurasse que cada paciente receberia exposição ininterruptaao fármaco sob estudo por quatro a seis semanas, uma outralimitação foi a exposição relativamente curta ao tratamentodurante cada período. Duas limitações finais do estudo foramo uso de teste unilateral para as avaliações de eficácia e aausência de ajuste para as comparações múltiplas, ambos osquais aumentaram as chances de encontrar um efeito positivodo ABT-08 9. Os testes unilaterais impediram a detecção de umefeito negativo. Entretanto, em um estudo de prova de con-ceito, uma decisão de prosseguir com o desenvolvimento re-quer que o tratamento de interesse tenha uma vantagem sobreo placebo; verificações de nenhum efeito positivo detectávelou de um efeito negativo sobre o ponto de eficácia para amesma conclusão; ausência de eficácia.

Apesar das limitações apresentadas acima, estesdados pilotos mostram que o ABT-089 parece ter eficácia notratamento de ADHD. Também, o ABT-089 pareceu ser toleradoneste número limitado de pacientes sobre uma faixa de dosesrelativamente ampla (dez vezes). Dadas as verificações posi-tivas neste pequeno grupo de pacientes, justificam-se estu-dos de variação da dose de projeto paralelo, maiores, com oABT-089, e, dado o formato em U invertido superficial dacurva de resposta à dose para os pontos finais clínicos, es-tes estudos devem concentrar-se na extremidade final da fai-xa de doses que foi explorada neste estudo.

Tabela 1 Projeto de Estudo Esquemático

<table>table see original document page 51</column></row><table><table>table see original document page 52</column></row><table>

Observação: A dosagem de fármaco de estudo foi du-as vezes ao dia

Tabela 1.Características de Linha de Base de Paci-entes Que Completaram o Ensaio

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ADHD = distúrbio de déficit de atenção hiperativi-dade; CAARS-INV = Escore dos Sintomas do ADHD Totais peloInvestigador da Escala de Classificação do ADHD em Adulto deConner; CGI-ADHD-S = Impressões Globais Clinicas da Gravida-de do ADHD; HAM-A = Escala de Ansiedade de Hamilton; HAM-D =Escala de Depressão de Hamilton

Tabela 3.Escore da Escala de Classificação do ADHDem Adulto de Conner (CAARS) pela Média dos Mínimos Quadrados(+SE) (N = 11) __

<table>table see original document page 53</column></row><table> Observação: Médias dos mínimos quadrados e valoresde P unilaterais a partir das análises de ANOVA com fatorespara seqüência de tratamento, paciente (seqüência), períodoe tratamento.

Tabela 4.Modelo de PK de População-ConcentraçãoPlasmática Inferior (Cinferior) e Média (Cmédia) Predita no Es-tado Estacionário<table>table see original document page 54</column></row><table>

PK = Farmacocinética

Tabela 5. Eventos Adversos Relatados por pelo Me-nos Dois Pacientes Que Completaram o Ensaio (N = 11)

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Entende-se que a descrição detalhada precedente eos exemplos que acompanham são meramente ilustrativos e nãosão para serem empregados como limitações sobre o escopo dainvenção, a qual é definida somente pelas reivindicações emanexo e seus equivalentes. As diversas alterações e modifi-cações nas modalidades divulgadas serão aparentes para aque-Ies versados na técnica.Referências

As citações completas das referências mencionadasneste documento são proporcionadas abaixo. As referênciascitadas abaixo são incorporadas neste documento por referência.

Barkley R (2002): Major Iife activity and healthoutcomes associated with attention-deficit hyperactivitydisorder. J Clin Psychiatry 63: 10-15.

Barkley RA, Fischer M, Smallish L, Fletcher K(2002): The persistence of Attention-Deficity/HyperactivityDisorder Into young adulthood as a function of reportingsource and definition of disorder. J Abnorm Psychol 111:279-289.

Biederman J (2004): Impact of comorbidity inadults with attention-deficit/hyperactivity disorder. J ClinPsychiatry 65:3-7.

Biedennan J, Mick E, Faraone SV (2000): Age-dependent decline of symptoms of attention déficithyperactivity disorder: Impact of remission definition andsymptom type. Am J Psychiatry 157:816-818.

Conners C, Levin, ED, Sparron, E, Hinton, SC,Erhardt D, Meek, WH, Rose, JE, March, J (1996): Nicotine andattention déficit hyperactivity disorder (ADHD).Psychopharmocol Bull 32:67-73.

Conners CK (1995) : The Continuous Performance Test.Toronto, Canadá: Multihealth Systems.

Conners CK, Erhardt D, Sparrow E (1999): Conners'Adult ADHD Rating Seales (CAARS).North Tonawanda, NY: Multi-Health Systems.

Decker MW, Bannon A W, Curson P, Gunther KL,Brioni JD, Holladay MW, e col. (1997): ABT-089 [2-Methyl-3-(2-(S)-pyrrolidinylmethoxy) pyridine dihydrochloride]: II. ANovel Cholinergic Channel Modulator with Effects onCognitive Performance in Rats and Monkeys. J Pharmacol ExpTher 283:247-258.

Faraone SV, Pedis RH, Doyle AE, Smoller JW,Goralnick JJ, Holmgren MA, e col. (2005): Molecular geneticsof attention-deficit/hyperactivity disorder. Biol Psyehiatry57: 1313-23.

Faraone SV, Sergeant J, Gillberg C, Biederman J(2003): The Worldwide Prevalence of ADHD: Is it an AmericanCondition? World Psychiatry 2: 104-113.

Geller B,. Warner K, Williams M, Zimennan B (1998) :Prepubertal and young adolescent bipolarity versus ADHD:assessment and validity using the WASH-U-KSADS, CBCL and TRF.J Affect Disord 51:93-100.

Guy W (1976): Clinicai Global Impressions in EarlyClinicai Drug Evaluation Unit (ECDEU) Assessment Manual forPsychopharmacology, VoI DHEW Publicação N2 ADM 76-338.Rockville, MD: National Institute of Mental Health, págs.218-222.

Hamilton M (1959): The assessment of anxietystates by rating. BrJ Med Psyehol 32:50-55.

Hamilton M (1960): A rating scale for depression.J Neurol Neurosurg Psyehiatry 23:56-62.

Jensen AR, Rohwer WD (1966): The stroop color wordtest: A review. Aeta Psychol 25:36-93.

Kessler RC, Adler L, Barkley R, Biederman J,Conners CK, Dernier 0, e col. (na prensa): The prevalenceand correlates of adult ADHD in the United States: Resultsfrom the national comorbidity survey replication. Am JPsychiatry.

Levin ED, Conners C Sparrow E, Hinton SC, ErhardtD, Meek WH, e col. (1996): Nicotine effects on adults withattention-deficit/hyperactivity disorder. Psychopharmacology123:55-63.

Michelson D, Adler L, Spencer T, Reimherr FW, WestSA, Allen Al, e col. {2003) : Atomoxetine in adults withADHD: two randomized, placebo-controlled studies. BiolPsyehiatry 53: 112-20.

Millstein R, Wilens T, Biedennan J, Spencer T(1997): Presenting ADHD symptoms and subtypes in clinicallyreferred adults with ADHD. J Attent Disord 2:159-166.

Newhouse PA, Potter A, Singh A (2004): Effects ofnicotinic stimulation on cognitive performance. Curr OpinPharmacol 4:36-46.

Orvaschel H (1985): Psychiatric interviewssuitable for use in research with children and adolescents.Psyehopharmacol Bull 21 :737-745.

Rueter LE, Anderson DJ, Briggs CA, Donnelly-Roberts DL, Gintant GA, Gopalakrishnan M, e col. (2004) :ABT-089: pharmacological properties of a neuronal nicotinicacetylcholine receptor agonist for the potential treatmentof cognitive disorders. CNS Drug Rev 10: 167-82.Safren SA, Sprich S, Chulvick S, Otto MW (2004):Psychosocial treatments for adults with attention-defieit/hyperaetivity disorder. Psychiatr Clin North Am27:349-60.

Seenik K, Swensen A, Lage MJ (2005) : Comorbiditiesand costs of adult patients diagnosed with attention-deficithyperactivity disorder. Pharmacoeconomics 23:93-102.

Senn S (1993): Crossover Trials in ClinicaiResearch. Chicester, West Sussex Inglaterra: John Wiley &Sons LTD.

Simpson PM, Wesnes KA, Christmas L (1989): Acomputerized system for assessment of drug-indueedperfomranee ehanges in young, elderly or dementedpopulations. Br J Clin Pharmacol 27:7111P-712P.

Speneer T (2004) : ADHD treatment aeross the Iifecyele. J Clin Psyehiatry 65:22-2 6.

Speneer T, Blederman J, Wilens T, Faraone S,Prinee J, Gerard K, e col. (2001) : Effieaey of a MixedAmphetamine Salts Compound in Adults With Attention-Defieit/Hyperaetivity Disorder. Areh Gen Psyehiatry 58:775-782.

Speneer T, Biederman J, Wilens T, Prince J, HatehM, Jones J, e col. (1998): Effeetiveness and tolerability oftomoxetine in adults with attention déficit hyperactivitydisorder. Am J Psyehiatry 155:693-695.

Wilens T, Biederman J, Spencer T, Prince J (1995):Pharmacotherapy of adult attention déficit/hyperactivitydisorder: A review. J Clin Psychopharmacol 15:270-279.Wilens Τ, Faraone SV, Biederman J (2004):Attention-Deficit/ Hyperactivity Disorder in Adults. JAMA292:619-23.

Wilens TE, Biederman J, Speneer TJ, Bostie J,Prinee J, Monuteaux MC, e col. (1999): A pilot controlledclinicai trial of ABT-418, a cholinergic agonist, in thetreatment of adults with attention déficit hyperactivitydisorder. Am J Psychiatry 156:1931-7.

Claims (19)

1. Método de identificar um ligante de receptornicotinico neuronal, CARACTERIZADO pelo fato de que compre-ende as etapas de:(a) avaliar um composto quanto à ligação seletivaao subtipo de receptor nicotinico neuronal α4β2;(b) avaliar um composto quanto à capacidade de es-timular o fluxo de canal iônico para uma célula expressandoos subtipos de receptor nicotinico neuronal α4β2, α3β4, ouα3β2; e(c) identificar um composto selecionado para osubtipo de receptor nicotinico neuronal α4β2 que demonstrefraca capacidade de estimular o fluxo de canal iônico para acélula expressando os subtipos de receptor nicotinico neuro-nal α4β2, α3β4, ou α3β2 que não seja um antagonista de re-ceptor nicotinico neuronal.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é avaliado quantoà ligação seletiva pelo ensaio de [3H]-citisina.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto demonstra menos doque 30 nM de afinidade de ligação quando medida por ligaçãoda [3H]-citisina.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é avaliado quantoà capacidade de estimular o fluxo de canal iônico por medi-ção do fluxo de 86Rb+ para as células da linhagem celularclonal de neuroblastoma humano IMR-32.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto demonstra menos doque 40% de eficácia agonista máxima quando medindo o fluxode 86Rb+ nas células da linhagem celular clonal de neuroblas-toma humano IMR-32.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto identificado tem aestrutura:

7. Método para tratar um mamífero tendo uma condi-ção ou distúrbio onde a modulação da atividade do receptornicotínico de acetilcolina seja de benefício terapêutico, ométodo CARACTERIZADO por compreender a administração a umpaciente tendo a, ou suscetível à, dita condição ou distúr-bio com uma quantidade terapeuticamente efetiva de um com-posto que demonstre ligação seletiva pelo subtipo de recep-tor nicotinico neuronal α4β2 e fraca atividade agonista emcélulas expressando os subtipos de receptor nicotinico neu-ronal α4β2, α3β4, ou α3β2, exceto os antagonistas de recep-tor nicotinico neuronal.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é avaliado quantoà capacidade de estimular o fluxo de canal iônico por medi-ção de 86Rb"1" nas células da linhagem celular clonal de neuro-blastoma humano IMR-32.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é

10. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é:<formula>formula see original document page 63</formula>

11. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que a condição ou o distúrbio éCARACTERIZADO por disfunção neuropsicológica e cognitiva.

12. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que a condição ou o distúrbio é adoença de Alzheimer, o distúrbio bipolar, a esquizofrenia,ou o distúrbio esquizoafetivo.

13. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que a condição ou o distúrbio é adoença de Alzheimer.

14. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que o mamífero ou o paciente de-monstra baixa incidência de irregularidades cardiovascularesou gastrointestinais, ou ambas.

15. Método, de acordo com a reivindicação 7,CARACTERIZADO pelo fato de que adicionalmente compreende ad-ministrar o composto em um nível que seja dez vezes o valorde ligação nicotínica neuronal Ki obtido quando medindo aligação seletiva pelo subtipo de receptor nicotínico neuro-nal α4β2.

16. Método de utilizar dado clínico humano do ABT-- 089 para obter autorização reguladora, CARACTERIZADO pelofato de que compreende as etapas de:(a)fornecer o dado clínico humano do ABT-089 parauma agência reguladora tendo autoridade para avaliar e regu-lar, ou ambos, os compostos ou os produtos farmacêuticos, ouambos; e(b)obter aprovação da agência reguladora para fa-bricar ou comercializar um composto farmacêutico desejado.

17. Método, de acordo com a reivindicação 16,CARACTERIZADO pelo fato de que o dado clínico humano estárelacionado a um estudo de doses múltiplas, controlado porplacebo, duplo-cego, aleatorizado.

18. Método, de acordo com a reivindicação 16,CARACTERIZADO pelo fato de que adicionalmente compreende aetapa de proporcionar um produto farmacêutico relacionado àaprovação para fabricar ou comercializar um composto farma-cêutico desejado, obtido da agência reguladora.

19. Método, de acordo com a reivindicação 18,CARACTERIZADO pelo fato de que o produto farmacêutico é útilpara tratar um mamífero tendo uma condição onde a modulaçãoda atividade do receptor nicotínico de acetilcolina seja debenefício terapêutico, onde a condição é a doença de Alzhei-mer, o distúrbio bipolar, a esquizofrenia, ou o distúrbioesquizoafetivo.