BRPI0621777A2 - derivados de flavona enantiomericamente puros para o tratamento de distérbios proliferativos e processos para sua preparaÇço - Google Patents

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BRPI0621777A2
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methylpyrrolidin
dihydroxy
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BRPI0621777-0A
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Meenakshi Sivakumar
Malcolm Mascarenhas
Ankush Sarde
Pramod Kumar Jadhav
Manoj Shukla
Kalpana Joshi
Maggie Rathos
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Piramal Life Sciences Ltd
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Abstract

Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação. onde a presente invenção refere-se a um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de um composto representado pela fórmula (I) a seguir: onde R~ 1~, R~ 2~, R~ 3~, R~ 4~ e R~ 9~ são como definidos no relatório descritivo; intermediários enantiomericamente puros do mesmo, a processos para a preparação do composto enantiomericamente puro e seus intermediários, e a uma composição farmacêutica compreendendo o composto enantiomericamente puro. O composto de fórmula (I) é útil para o tratamento de doenças ou distúrbios mediados pela inibição da quinase ciclina-dependente, tais como câncer.

Description

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Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" Campo da Invenção A presente invenção refere-se ao enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de pirrolidinas substituídas com flavonas representado pela fórmula (I), a intermediários enantiomericamente puros do mesmo, a processos para sua respetiva preparação, ao seu uso como componentes ativos em fármacos, particularmente no tratamento de distúrbios proliferativos tais como câncer, e a composições farmacêuticas compreendendo os mesmos. Fundamentos da Invenção
Reguladores do ciclo celular vêm ganhando larga importância em doenças proliferativas. As quinases ciclina-dependentes (CDKs) constituem uma família de enzimas que ficam ativas em fases específicas do ciclo celular.
Uma grande variedade de doenças caracterizam-se pela proliferação celular descontrolada que resulta de alguma falha nas vias reguladoras no ciclo celular [por exemplo superexpressão de ciclinas ou deleções de genes que codificam as CKIs (proteínas inibitórias de CDK)]. A superexpressão da ciclina Dl leva à desregulação da atividade de quinase CDK4-D1 e assim contribui para a proliferação celular descontrolada. Conhecendo-se o papel das CDKs na regulação do ciclo celular e com a descoberta de que aproximadamente 90% de todas as neoplasias estão associadas à hiperativação de CDKs que leva à inativação da via de Rb, as CDKs são alvos atraentes para o desenvolvimento de drogas antitumorais. O proeminente papel dos complexos CDK/ciclina quinase, em particular os complexos CDK4/ciclina Dl quinase, na indução de proliferação celular e sua desregulação em tumores, faz com que eles sejam alvos ideais para o
desenvolvimento de agentes antiproliferativos altamente específicos.
Flavopiridol e seus análogos são bastante conhecidos como inibidores eficazes de CDK e oferecem uma abordagem em potencial para terapia antiproliferativa.
O pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado e copendente da requerente descreve novos compostos úteis na inibição de CDKs e com boa seletividade e citotoxicidade contra várias linhagens celulares proliferativas. Esse pedido de patente está aqui incorporado em sua integridade a título de referência. Os novos compostos apresentados no pedido de patente acima mencionado possuem dois centros quirais e portanto podem existir como quatro enantiômeros, i.e., (+)-trans, (-)-trans, e (-)-cis.
Bem se sabe na literatura que os enantiômeros de um dado composto químico, apesar de compartilhar composição química idêntica, têm ações muito diferentes quando colocados em sistemas biológicos. Freqüentemente é o caso de um enantiômero proporcionar os efeitos benéficos enquanto que o enantiômero oposto pode ser prejudicial ou inerte. Portanto, as vantagens associadas à administração da mistura racêmica podem ser retidas usando-se um único enantiômero do composto sem os efeitos colaterais adversos associados.
Os estudos estabelecem especificamente que a atividade inibitória de CDK e a atividade antiproliferativa se devem ao enantiômero (+)-trans de pirrolidinas substituídas com flavonas representado pela fórmula (I) e não pelo enantiômero (-)-trans. Seria desejável que o enantiômero {+)-trans de pirrolidinas substituídas com flavonas, os compostos de fórmula (I), estivessem disponíveis em uma forma substancialmente livre de seu enantiômero (-)-trans para proporcionar um método seguro e eficaz para o tratamento de doenças ou distúrbios mediados pela inibição de
quinases ciclina-dependantes (CDKs) e também para o tratamento de doenças associadas à proliferação celular excessiva tal como câncer.
Tendo em vista esta descoberta, os presentes inventores desenvolveram um novo processo para a preparação e um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de pirrolidinas substituídas com flavonas representado pela fórmula (I). Sumário da Invenção A presente invenção refere-se a um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de pirrolidinas substituídas com flavonas representado pela fórmula (I) a seguir (doravante denominado compostos de fórmula (I)) e a um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo do mesmo:
(!)
onde as definições de R1, R2, R3, R4 e R9 estão dadas mais abaixo na descrição detalhada a seguir. Esta invenção também se refere a um processo para a preparação do composto enantiomericamente puro de fórmula (I), ou um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável ou solvato
farmaceuticamente aceitável do mesmo. O processo produz o enantiômero (+)-trans com alta pureza química e enantiomérica e com alto rendimento. Esta invenção também se refere a intermediários usados no processo para a preparação do composto enantiomericamente puro de fórmula (I). JlI
r
Esta invenção refere-se ainda a um processo para a resolução de um composto de fórmula (VIA) e seus derivados, composto este que é um intermediário essencial para a preparação do composto enantiomericamente puro de fórmula (I). Esta invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica para o tratamento de uma doença ou um distúrbio em um mamífero, mediada pela inibição de CDKs, que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto enantiomericamente puro de fórmula (I) ou de um sal, solvato ou pró-droga do mesmo, como o componente ativo, e um carreador farmaceuticamente aceitável.
Esta invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica para o tratamento de uma doença ou um distúrbio em um mamífero, associada à proliferação celular excessiva, que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto enantiomericamente puro de fórmula (I) ou de um sal, solvato ou pró-droga do mesmo como o componente ativo, e um carreador farmaceuticamente aceitável.
Esta invenção refere-se ainda a um método para o tratamento de uma doença ou um distúrbio mediada pela inibição de CDK em um mamífero com necessidade do mesmo, que compreende administrar ao referido mamífero uma quantidade eficaz do enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de um composto de fórmula (I) ou um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo do mesmo. Esta invenção refere-se ainda a um método para o tratamento de uma doença ou um distúrbio em um mamífero, associada à proliferação celular excessiva, que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto enantiomericamente puro de fórmula (I) ou um sal, solvato, ou pró-droga do mesmo como o componente ativo, e um carreador farmaceuticamente aceitável. Breve Descrição das Figuras:
Figura 1: HPLC quiral (coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm)) de (-)-íra«5-[l-metil-3-(2,4,64rimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]- metanol obtido da maneira descrita no Exemplo 5.
Figura 2: HPLC quiral (coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm)) de (-)-^ara-[l-metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]- metanol obtido da maneira descrita no Exemplo 98 (método da técnica anterior).
Figura 3: HPLC quiral (coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm)) de cloridrato de (+)-ír<ms-2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona obtido da maneira descrita no Exemplo 10. Descrição Detalhada da Invenção Os compostos de fórmula (I) da presente invenção são úteis na inibição de CDKs, particularmente de complexos CDK4/ciclinaDl e têm utilidade em terapias antiproliferativas para doenças que se caracterizam por crescimento celular excessivo tais como cânceres, anomalias cardiovasculares, inflamação e artrite, distúrbios nefrológicos, parasitologia, psoríase, mal de Alzheimer, distúrbios imunológicos envolvendo proliferação indesejada de leucócitos, restenose e outros distúrbios proliferativos dos músculos lisos, infecções virais, e infecções micóticas.
A presente invenção refere-se especificamente a um composto enantiomericamente puro de fórmula (I) e a um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo do mesmo. Como mencionado acima os compostos apresentados no pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado e copendente da requerente possui dois centros quirais e portanto podem existir como quatro enantiômeros, a saber, (+)-trans, (-)-trans, (+)-cis e (-)- eis. Mais particularmente, a presente invenção refere-se a um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de pirrolidinas substituídas com flavonas representado nesta invenção pela fórmula (I).
A eficácia do composto racêmico apresentado no i pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado e seus enantiômeros separados foi bastante estudada pelos presentes inventores. Foi observado que somente o enantiômero (+)-trans é ativo. A presente invenção tornou possível fornecer um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro representado nesta invenção pela fórmula (I) dessa forma possibilitando uma possível redução da dose requerida da droga e seus efeitos colaterais.
Abaixo estão apresentadas as definições de vários termos usados para descrever os compostos da presente invenção. Estas definições aplicam-se aos termos que são usados em todo o relatório descritivo (a menos que de alguma forma limitado em casos específicos) seja individualmente ou como parte de um grupo maior. Eles não devem ser interpretados no sentido literal. Eles não constituem definições genéricas e são relevantes apenas para este pedido.
Os termos "flavona" ou "cromona" ou seus análogos significam compostos que podem ser representados pela estrutura básica a seguir:
o
Conforme usado neste relatório, o termo "alquil" refere-se ao radical de grupos alifáticos saturados, incluindo grupos alquil de cadeia reta e grupos alquil de cadeia ramificada. Ademais, a menos que de outra forma especificado, o termo "alquil" inclui grupos alquil não-substituído assim como grupos alquil que são substituídos com um ou mais substituintes diferentes. Exemplos de resíduos alquil contendo de 1 a 20 átomos de carbono são: metil, etil, propil, butil, pentil, hexil, heptil, octil, nonil, decil, undecil, dodecil, tetradecil, hexadecil, octadecil e eicosil, os n-isômeros de todos estes resíduos, isopropil, isobutil, 1-metilbutil, isopentil, neopentil, 2,2-dimetilbutil, 2-metilpentil, 3- metilpentil, isohexil, 2,3,4-ípmetilhexil, isodecil, sec-butil, ou ter- butil.
O termo "alcóxi" conforme usado neste relatório refere-se a um grupo alquil, como definido acima, tendo um radical oxigênio preso ao mesmo. Grupos alcoxil representativos incluem metóxi, etóxi, propóxi, í-butóxi entre outros.
O termo "alquenil" refere-se a grupos alifáticos insaturados de análogos em termos de comprimento e de substituição possível às alquilas descritas acima, mas que contêm pelo menos uma ligação dupla, por exemplo 1, 2 ou 3 ligações duplas, contanto que as ligações duplas não estejam localizadas em um grupo alquil cíclico de maneira a resultar em um sistema aromático. Exemplos de grupos alquenil incluem vinil, 1-propenil, 2-propenil, 2-butenil, 2- metil-l-propenil ou 3-metil-2-butenil. Ademais, a menos que de outra forma especificado, os termos "alquenil" incluem grupos alquenil não- substituídos e substituídos.
O termo "aril" conforme usado neste relatório refere-se a grupos hidrocarboneto monocíclicos ou policíclicos tendo até 14 átomos de carbono no anel onde está presente pelo menos um anel carbocíclico que tem um sistema de elétrons pi conjugado. Exemplos de resíduos (C6-Ci4)- aril são fenil, naftil, bifenil, fluorenil ou antracenil. Exemplos de resíduos (C6-C]0)-aril são fenil ou naftil. A menos que de outra forma especificado, e independente de quaisquer substituintes específicos ligados a grupos aril que estão indicados na definição dos compostos de fórmula (I), os resíduos aril, por exemplo fenil, naftil ou fluorenil, podem em geral ser não-substituídos ou substituídos com um ou mais, por exemplo 1, 2, 3, 4 ou 5, JS substituintes iguais ou diferentes. A menos que de outra forma especificado, os substituintes que podem estar presentes em grupos aril substituído são: halogênio, alquil, alquenil, alquinil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, hidroxil, arilóxi, amino, ciano, nitro, tiol, imina, amida ou carbonil (tal como carboxil, formiato, carbamida, um éster, cetona ou aldeído), sulfidril, silil éter, tiocarbonil (tal como tioéster, tioacetato ou tioformiato), sulfonil, éster de aminoácido, ou um heterociclo que é saturado, parcialmente insaturado ou aromático. Os resíduos aril podem ser ligados via qualquer posição desejada, e nos resíduos aril substituído os substituintes podem ser localizados em qualquer posição desejada. O termo "heterociclo" refere-se a um anel saturado, parcialmente insaturado ou aromático contendo cinco ou seis átomos no anel dos quais 1, 2 ou 3 são heteroátomos iguais ou diferentes selecionados de: nitrogênio, oxigênio e enxofre, e onde o heterociclo é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, SR7j CrC4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, Cr C4-alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil , CrC4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6.
O termo "heteroátomo" conforme usado neste relatório significa um átomo de qualquer elemento que não seja carbono ou hidrogênio. Os heteroátomos preferidos são nitrogênio, oxigênio, enxofre e fósforo. Halogênio é flúor, cloro, bromo ou iodo, de preferência flúor, cloro ou bromo.
Fica entendido que "substituição" ou "substituído com" inclui a condição implícita de que tal substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e do substituinte, bem como representa um composto estável, que não sofre transformação com facilidade tal tf
como por rearranjo, ciclização, eliminação etc. Deve ser observado que se presume que qualquer heteroátomo com valências insatisfeitas possuem o átomo de hidrogênio para satisfazer as valências.
O termo "racêmico" ou "racemato", e outros termos semelhantes refere-se a proporções geralmente equimolares de um enantiômero (+) e de um enantiômero (-) de um composto em uma composição. O termo "enantiomericamente puro" refere-se a um composto ou compostos que está ou estão presentes em um excesso enantiomérico maior que 95%. De preferência, o excesso enantiomérico é maior que 97%. Mais preferivelmente, o excesso enantiomérico é maior que 99%.
O termo "excesso enantiomérico" refere-se a uma diferença entre a quantidade de um enantiômero e a quantidade do outro enantiômero que está presente na mistura de produtos. Assim por exemplo, um excesso enantiomérico de 96% refere-se a uma mistura de produtos tendo 98% de um enantiômero e 2% do outro enantiômero.
O termo "substancialmente livre" significa que a quantidade do enantiômero (+)-trans predomina na composição em relação enantiômero (-)-trans do composto de fórmula (I). Mais especificamente, isto significa que a quantidade do enantiômero (+)-trans em relação ao enantiômero (-)-trans em peso é pelo menos cerca de 95%, mais preferivelmente maior que 97%. Conforme usado neste relatório, o termo "pró-drogas" refere-se a formas do composto que são transformadas in vivo no composto primitivo de acordo com a invenção, por exemplo, por hidrólise no sangue. Dessa forma, pró- drogas são compostos contendo grupos que são removidos por biotransformação antes de apresentarem sua ação farmacológica. Tais grupos incluem porções que são facilmente clivadas in vivo a partir do composto que as contém, composto este que depois da clivagem fica ou se 0W $
torna farmacologicamente ativo. Tais grupos cliváveis metabolicamente constituem uma classe bastante conhecida pelos especialistas na técnica. O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis", conforme usado neste relatório, a menos que de outra forma indicado, inclui sais de grupos básicos ou ácidos do composto da invenção, grupos estes que são capazes de formar sais. No caso de os compostos de acordo com a fórmula (I) conterem um ou mais grupos ácidos ou básicos, a invenção também compreende seus sais farmaceuticamente ou toxicologicamente aceitáveis correspondentes. Os compostos de fórmula (I) que contêm um ou mais grupos básicos, i.e., grupos que podem ser protonados e que podem ser usados de acordo com a invenção na forma de seus sais de adição com ácidos inorgânicos ou orgânicos atóxicos. Exemplos de ácidos inorgânicos adequados incluem: ácido bórico, ácido perclórico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido enxofréico, ácido sulfâmico, ácido fosfórico, ácido nítrico e outros ácidos inorgânicos conhecidos pelo especialista na técnica. Exemplos de ácidos orgânicos adequados incluem: ácido acético, ácido propiônico, ácido succínico, ácido glicólico, ácido glicônico, ácido esteárico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido pamóico, ácido maléico, ácido hidroximaléico, ácido fenilacético, ácido glutâmico, ácido benzóico, ácido salicílico, ácido sulfanílico, ácido 2- acetoxibenzóico, ácido fumárico, ácido toluenossulfônico, ácido 2-acetoxibenzóico, ácido fumárico, ácido toluenossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido oxálico, ácido isetiônico, ácido cetoglutárico, ácido benzenossulfônico, ácido glicerofosfórico e outros ácidos orgânicos conhecidos pelo especialista na técnica. Os compostos de fórmula (I) que contêm grupos ácidos podem ser usados de acordo com a invenção, por exemplo, como sais de metal alcalino tais como sais de lítio (Li), sódio (Na), e potássio (K). Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto em questão que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente os sais são preparados por contato da base ou ácido livre com quantidades estequiométricas ou com um excesso do ácido ou base inorgânica ou orgânica formadora de sal desejada em um solvente ou dispersante adequado ou por troca aniônica ou troca catiônica com outros sais. Solventes adequados são, por exemplo, etil acetato, éter, álcoois, acetona, THF, dioxano ou misturas destes solventes. A presente invenção inclui ainda todos os solvatos dos compostos de fórmula (I), por exemplo hidratos ou adutos com álcoois e também derivados e pró-drogas dos compostos de fórmula (I) que contêm grupos fisiologicamente toleráveis e cliváveis, por exemplo ésteres e amidas. Vários polimorfos dos compostos de fórmula (I) que fazem parte desta invenção podem ser preparados por cristalização dos compostos de fórmula (I) em diferentes condições. Por exemplo, usando solventes comumente usados diferentes ou suas misturas para cristalização; cristalização em diferentes temperaturas; vários modos de resfriamento, variando de resfriamento muito rápido a resfriamento muito lento durante as cristalizações. Os polimorfos também podem ser obtidos ou aquecimento ou fusão do composto seguida de resfriamento gradual ou rápido. A presença de polimorfos pode ser determinada por espectroscopia do IR, espectroscopia de NMR com sonda sólida, calorimetria por varredura diferencial, difração de raios X de pó entre outras técnicas. Onde a estereoquímica está representada nas estruturas ela representa uma configuração relativa e não uma
configuração absoluta.
A presente invenção refere-se a um composto enantiomericamente puro de fórmula (I), a um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo do mesmo.
O
onde,
Ri é fenil, que é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, CrC4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, C1-C4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil, C1-C4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6, SR7; ou é um heterociclo, que é um anel saturado, parcialmente insaturado ou aromático contendo cinco ou seis átomos no anel dos quais 1, 2 ou 3 são heteroátomos iguais ou diferentes selecionados de: nitrogênio, oxigênio e enxofre, e onde o heterociclo é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, CrC4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, C1-C4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil, C1-C4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6 e SR7;
onde R5 e R6 são cada um independentemente selecionados de : hidrogênio, CrC4-alquil, C1-C4- alcoxicarbonil, CrC4-alquilcarbonil, aril; ou R5e R6 junto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados podem formar um anel de cinco ou seis membros que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional; e R7 pode ser selecionado de hidrogênio, CrC4-alquil, aril, âò V
SR ίο onde R10 pode ser selecionado de Ci-C4-alquil ou aril;
R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8; onde R8 é CrCi0-alquil substituído ou não-substituído, Ci-C4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído;
R4 é CrC4.alquilenohidroxil; e R9 é hidrogênio ou Ci-C4 -alquil.
Em modalidades preferidas alternativas dos compostos enantiomericamente puros de fórmula (I), os grupos R1-R3 e R9, independentemente um do outro, têm os significados preferidos dados abaixo:
Ri é fenil, que é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano; CrC4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, CrC4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil , CrC4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6eSR7;
R2 e R3 são OR8, onde R8 é como definido e é igual ou diferente para R2 e R3 ; R9 é CrC4 -alquil;
ou um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo das modalidades preferidas. De acordo com a presente invenção, o composto enatiomericamente puro de fórmula (I) mais preferido, ou um sal ou pró-droga do mesmo, é selecionado de: (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3- il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; âM (+)-írara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil- l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-/rara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
(+)-íram-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra«5-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
metano sulfonato de (+)-íra«s-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-íra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil- l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írtíf^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írú:^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
metano sulfonato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; citrato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; tartarato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
maleato de (+)-íra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; acetato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; sulfato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3 -il)-cromen-4-ona; nitrato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-írúTA7ly-2-(2,4-Diclorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra«j-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-^r(3^-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi- 8-(2-hidroximetil-1-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
(+)-rr<3^7>s'-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra«s-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-^^-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-íra^^-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona;
(+)-/ra^^-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-ír««j-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-írflf«j-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-
cromen-4-ona;
(+)-íra/75-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra/7^-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-^^-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-hidroximetil-1 - metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra«j-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona;
gliconato de (+)-íra^-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2- Sé
hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona;
(+)-/ra«j-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de {+)-trans-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-írtffts-2-(4-Amino-2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra«5-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-/rara-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3 -il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra«5,-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-íra^-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-/r<ms-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-1 -il-fenil)-8-(2-hidroximetil-1 - metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-/r«/75-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-íra«^-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-ír«^-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)-8-(2- hidroximetil-1-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona; (+)-ír«/75-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)-5,7-
dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-írúí^-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroxi-metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-ír«/75-2-(2,4-Dibromofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-/rtííw^-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-íra«^-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-/ra^-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-/r<3^^-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l -metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona;
(+)-/ra^-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-ír<ms-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona; gliconato de (+Hr<ms-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3 -il)-7-metoxi-cromen-4-ona;
(+)-trans -2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil)-1 -metil- pirrolidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)-cromen-4-ona; gliconato de {+)-trans -2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil)-l-metil-pirrolidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)- cromen-4-ona;
cloridrato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; citrato de (+)-/rara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; tartarato de (+)-íra«5-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; glutamato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; maleato de (+)-íra^-2-(2-Cloro-fenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; nitrato de (+)-ίΓα^-2-(2-01θΓθίεηΐ1)-8-(2-Ηί(ΐΓθχ^6ίΐ1-1 -metil-
pinOlidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona;
acetato de (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l -metil-
pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona;
gliconato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; 3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l-metil- pirrolidin-2-il metil éster do ácido (+^nms-acético; cloridrato de 3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen- 8-il]-1 -metil-pirrolidin-2-il metil éster do ácido (+)-fr\ms-acético; 8-(2-acetoximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro-fenil)-5-hidroxi-4-oxo- 4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-/r<ms--acético; 8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)-5-hidroxi-4- oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-fr-<ms-benzóico; cloridrato de 8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)- 5-hidroxi-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-trans- benzóico;
2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-8-(l-metil-2-octanoiloximetil-pirrolidin-
3-il)-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-/nms-octanóico;
3-[2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-7-metoxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-/r<ms-acético; e 3-[2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-7-(2-metóxi etoximetoxi)-4-oxo-4H- cromen-8-il]-l-metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-trans- acético.
De acordo com uma outra modalidade da presente invenção, é fornecido um processo para a preparação de um composto enantiomericamente puro de fórmula (I). Uma abordagem conhecida na técnica fornece um único enantiômero por separação de uma mistura racêmica do composto ao final da seqüência reacional. A presente abordagem constitui em separar os enantiômeros várias etapas antes na seqüência e dessa forma proporcionar um processo eficiente. Os presentes inventores identificaram um composto racêmico representado pela fórmula (VIA) abaixo como sendo ideal para a separação. 3Α
f
\
R9
(±)-VIA
onde R2, R3, R4 e R9 são como definidos, ou a sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. O processo de resolução da presente invenção compreende reagir um composto racêmico representado pela fórmula ((±)-VlA) com um auxiliar quiral na presença de um solvente simples para obter a mistura correspondente de sais diastereoméricos dos enantiômeros (+)- e (-) de um composto da fórmula (VIA), separar os respectivos sais diastereoméricos e tratar o sal diastereomérico do enantiômero (-) com uma base para obter a base livre do enantiômero (-) desejado do composto representado pela fórmula a seguir.
VIA
((-)-enantiomer)
No processo de resolução de acordo com a presente invenção, o auxiliar quiral é selecionado de: ácido (-)- dibenzoil tartárico ((-)-DBTA), ácido (+)-dibutil tartárico, ácido (-)-dibutil tartárico, ácido (+)-cetopínico, ácido (-)- cetopínico, ácido (+)-cânfora-10-sulfônico, ácido (-)- cânfora-10-sulfônico, ácido (+)canfórico e ácido (-)- canfórico. O auxiliar quiral mais preferido é o ácido (-)- dibenzoil tartárico ((-)-DBTA).
O solvente simples usado na etapa de resolução pode ser selecionado de: metanol, isopropanol, diisopropil éter, etil acetato de e clorofórmio. O solvente mais preferido é BO 20
metanol.
A base pode ser selecionada de: bicarbonato de sódio, carbonato de sódio e carbonato de potássio. A base mais preferida é carbonato de sódio.
Mais particularmente, é fornecido um processo para a resolução de um composto racêmico de fórmula (VIA), onde R2 e R3 são metóxi, R9 é metil e R4 é hidroximetil, o composto sendo quimicamente conhecido como (±)- ír<3fW5-[l-metil-3-(2,4,6-trimetoxi-fenil)-pirrolidin-2- il]metanol (neste relatório designado como Composto A). Um processo para a resolução do composto A está descrito no pedido de Patente US N0 No. 2004/010658 publicado e copendente da requerente. Este processo envolve numerosas etapas de cristalização e recristalização. O composto resolvido {-)-trans-[\-mQÜ\- 3-(2,4,6-trimetoxi-fenil)-pirrolidin-2-il]-metanol (neste relatório designado como Composto B) foi obtido com um rendimento de 22-30% e a resolução ótica reportada foi -17.7° (c = 1.1, metanol). Em uma modalidade preferida da presente invenção, um processo envolvendo a resolução do composto intermediário de fórmula (VIA), especificamente o composto A, compreende reagir o composto A com (-)- DBTA (ácido (-)-dibenzoil tartárico) como um auxiliar quiral metanol para dar os sais de dibenzoil tartarato cristalizados de (+)- e (-)-^^-[l-metil-3-(2,4,6- trimetoxi-fenil)-pirrolidin-2-il]-metanol. O sal de (-)- dibenzoil tartarato do composto B é então convertido em sua base livre por tratamento do sal diastereomérico com carbonato de sódio.
A pureza enantiomérica do composto B obtido pelo processo da presente invenção foi avaliada e comparada com aquela obtida usando o processo de resolução descrito no Pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado acima mencionado usando HPLC quiral. Ficou estabelecido que o composto B obtido de acordo $
com o processo da presente invenção é um isômero simples com 100% e.e. enquanto que o composto foi obtido em 88,3% e.e quando preparado de acordo com o processo descrito no Pedido de Patente US N0 2004/0106581.
Assim sendo, não só os enantiômeros simples obtidos pelo processo de acordo com a presente invenção têm maior pureza enantiomérica em comparação com os enantiômeros simples obtidos pelos processos conhecidos, como também o processo de acordo com a presente invenção é mais simples e mais econômico do que os processos conhecidos uma vez que ele envolve uma reação de uma única etapa para obter o sal diastereomérico, a saber, o sal de dibenzoil tartarato. O presente processo envolve cristalização simples. O uso do auxiliar quiral (-)-DBTA tem a vantagem adicional de que ele comparativamente mais barato que o (+)-DBTA, que é usado no processo descrito no Pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado, dessa forma reduzindo o custo global de produção. O composto racêmico de fórmula (VIA), um intermediário essencial na preparação do composto de fórmula (I), pode ser preparado da maneira representada no esquema reacional 1.
Il
χ
Il
"N-
ι
Iil
IV
V
<ÍVV1A
i whereri R1 ε QHpHI
ESQUEMA-1 SSl
As etapas de preparação do composto de fórmula (V) partindo do composto de fórmula (II) estão descritas no documento US-A-4 900 727, que está aqui incorporado a título de referência. Na conversão do composto de fórmula (V) no composto de fórmula (VIA) no esquema acima, a função hidroxil no anel piperidina pode ser convertida em um grupo deslocável tal como tosil, mesil, triflato ou halogeneto por tratamento com um reagente apropriado tal como cloreto de p-toluenossulfonil, cloreto de metanossulfinil, anidrido tríflico ou pentacloreto de fósforo na presença de nucleófilos de oxigênio tais como trietilamina, piridina, carbonato de potássio ou carbonato de sódio, seguido de contração de anel na presença de nucleófilos de oxigênio tais como acetato de sódio ou acetato de potássio em um solvente alcoólico tal como isopropanol, etanol ou propanol. A contração de anel envolvida nesta etapa pode ser efetuada antes da formação de flavona como representado no esquema acima ou ela pode ser feita depois da construção de flavona com as substituições desejadas. Constitui uma modalidade da presente invenção um enantiômero (-)-trans enantiomericamente puro de um composto da fórmula (VIA) como definido acima, onde a pureza enantiomérica é como definido. Constitui uma outra modalidade da presente invenção o uso do enantiômero (-)-trans enantiomericamente puro de um composto intermediário da fórmula (VIA) como definido, para a preparação de um composto enantiomericamente puro da fórmula (1) como definido. Usando um intermediário com uma pureza enantiomérica alta como um composto de partida no processo, o enantiômero (+)-trans resultante de pirrolidinas substituídas com flavona representado pela fórmula (I) produzido pelo processo tem uma pureza enantiomérica correspondentemente alta.
De acordo com uma modalidade preferida da presente invenção, é fornecido um processo para a preparação de um enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a partir do enantiômero (-)-trans enantiomericamente puro resolvido do composto intermediário de fórmula (VIA), processo este que compreende:
(a) tratar o enantiômero (-)-trans enantiomericamente puro resolvido do composto intermediário de fórmula (VIA),
R3 γ Och3 R4
nR9
VIA
onde R2, R3, R4 e R9 são como definidos, com anidrido acético na presença de um catalisador do tipo ácido de Lewis para obter um composto acetilado resolvido de fórmula (VIIA),
VIIA
onde R2, R3 e R9 são como definidos e R4 é CH2OC(O)CH3; (b) reagir o composto acetilado resolvido de fórmula (VIIA) com um ácido de fórmula R1COOH ou um cloreto de ácido de fórmula RiCOCl ou um anidrido de ácido de fórmula (RiCO)2O ou um éster de fórmula RiCOOCH3, onde Ri é como definido acima, na presença de uma base e um solvente para obter a composto resolvido de fórmula (VIIIA); 5q
VIIIA
onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima e R4 é CH2OC(O)CH3 ;
(c) tratar o composto resolvido de fórmula (VIIIA) com uma base em um solvente adequado para obter o composto de β-dicetona resolvido correspondente de fórmula (IXA);
IXA
onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima e R4 é CH2OC(O)CH3 ;
(d) tratar o composto de β-dicetona resolvido de fórmula (IXA) com um ácido tal como ácido clorídrico para obter o composto ciclizado correspondente de fórmula (XA),
XA
onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima, R4 é CH2OH;
(e) submeter o composto de fórmula (XA) à desalquilação por aquecimento do mesmo com um agente desalquilante a uma temperatura variando de 120-180 0C para obter o 36
enantiômero (+)-trans do composto de fórmula (I) (onde R2 e R3 representam hidróxi ) e, opcionalmente, converter o composto em questão em seu sal farmaceuticamente aceitável.
O catalisador do tipo ácido de Lewis utilizado na etapa (a) acima pode ser selecionado de: BF3. Et2O, cloreto de zinco, cloreto de alumínio e cloreto de titânio. A base utilizada na etapa processual (b) pode ser selecionada de trietilamina, piridina e uma combinação de DCC-DMAP.
Será evidente para os especialistas na técnica, o rearranjo do composto de fórmula (VIIIA) para dar o composto de β-dicetona correspondente de fórmula (IXA) é conhecido como um rearranjo de Baker-Venkataraman (J. Chem. Soc., 1381 (1933) e Curr. Sci., 4, 214 (1933)).
A base usada na etapa processual (c) pode ser selecionada de: hexametildissilazida de lítio, hexametildissilazida de sódio, hexametildissilazida de potássio, hidreto de sódio e hidreto de potássio. A base mais preferida é a hexametildissilazida de lítio.
O agente desalquilante usado na etapa processual (e) para a desalquilação do composto de fórmula (IXA) pode ser selecionada de: cloridrato de piridina, tribrometo de boro, eterato de trifluoreto de boro e tricloreto de alumínio. O agente desalquilante mais preferido é o cloridrato de piridina.
Um processo alternativo para a preparação do composto de fórmula (I) compreende as etapas de: (i) hidrolisar o composto acetilado resolvido de fórmula (VIIA) (obtido na etapa (A) do processo descrito acima) com uma base na presença de um solvente para obter o álcool resolvido correspondente de fórmula (XIA); XIA
onde R2, R3 e R9 são como definidos acima; (ii) tratar o composto resolvido de fórmula XIA com um ácido de fórmula R1COOH ou um cloreto de ácido de fórmula R1COCl ou um anidrido de ácido de fórmula (R1CO)2O, ou um éster de formula R1COOCH3, onde R1 é como definido acima, na presença de uma base e um solvente adequado em uma atmosfera de nitrogênio, seguido de ciclização catalisada com ácido para obter um composto de fórmula (XA); (iii) submeter o composto resolvido de fórmula (XA) à desalquilação por aquecimento do mesmo com um agente desalquilante a uma temperatura variando de 120-180 0C para obter o enantiômero (+) resolvido do composto de fórmula (I) (onde R2 e R3 representam um grupo hidroxil) e opcionalmente, opcionalmente o composto resultante em seu sal farmaceuticamente aceitável.
Na etapa (i) do processo alternativo, a base pode ser selecionada de hidróxido de sódio e hidróxido de potássio e o solvente pode ser selecionado de: metanol e etanol. Na etapa (ii) do processo alternativo, a base pode ser selecionada de hidreto de sódio e hidreto de potássio e o solvente pode ser selecionado de: dimetilformamida, tetrahidrofurano e 1,4-dioxano.
A presente invenção também se refere a todos os intermediários resolvidos que são críticos para a síntese do enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de um composto de fórmula geral (I).
Mais particularmente os intermediários r
enantiomericamente puros que estão incluídos no escopo da presente invenção são compostos de fórmula (VIA), (VIIA), (VIIIA),.(IXA), (XA) e (XIA):
i Γ M R2 O R3 ι T N^OH A=A O A-R4 — N \ R9 R9 V R9 VIA VIIA VlllA R2 O O R2 O R2 O ítS jfl^ ^R1 R3^yOH R4 R9 R9 R9 IXA XA XIA
Nos compostos de fórmula (VIA), (VIIA), (VIIIA), (IXA), (XA) e (XIA) os substituintes R1, R2, R3, R4 e Rç são como definidos acima.
Em uma modalidade específica da presente invenção, a desmetilação seletiva do composto de fórmula (XA) [onde R1 é fenil substituído com R10 e R11 onde R10 e R11 independentemente representam um grupo selecionado de: halogênio, nitro, ciano, C1- C4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, CrC4-alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil , CrC4-alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6, SR7; e R4 é CH2OH] é realizada da maneira representada no esquema 2 a seguir.
Η''
X Λ
1.1 .,IJt
χ: ia
í ' OH
N
\ XA
R O
X A
í I l 5" " I I." A -
XllA
OH O
1 Λ K
njvl: } u Tl
r VV
XIIIA
ESQUEMA-2 Como ilustrado no esquema 2 acima, o grupo hidróxi no composto de fórmula (XA) é protegido com um grupo protetor adequado tal como um grupo acetil por tratamento do composto de fórmula (XA) com um reagente apropriado tal como cloreto de acetil ou anidrido acético na presença de a base selecionado de: hidreto de sódio, hidreto de potássio, piridina, trietilamina e dimetilaminopiridina (DMAP) para obter o composto acetilado de fórmula XIIA . O composto de fórmula XIIA é então tratado com um agente desmetilante tal como eterato de trifluoreto de boro para obter o composto de fórmula XIIIA.
Esta invenção também abrange pró-drogas dos compostos enantiomericamente puros de fórmula (I) e composições farmacêuticas contendo os mesmos e métodos de tratamento através da administração de tais pró-drogas. Constitui um outro aspecto da presente invenção fornecer um processo para a preparação de uma pró-droga de um composto resolvido de fórmula (I), processo este que compreende, tratar o composto resolvido de fórmula (I), onde R2 e R3 são hidroxil, com um ácido ou cloreto de ácido na presença de uma base para dar uma pró-droga do composto resolvido de fórmula (1), onde R2 é hidróxi, R3 é hidróxi, OCOR ou OR, e R4 é alquilenoOH ou alquilenoOC(0)R; onde R é alquil ou aril. Uma pró-droga deste tipo é um composto da fórmula (XIVA).
Um exemplo da preparação de uma pró-droga do composto enantiomericamente puro de fórmula (I) está representado no esquema 3 a seguir
OH O
OH O
XIVA
ESQUEMAS
O processo compreende reagir o composto enantiomericamente puro de fórmula (I), onde, R2 e R3 são grupos hidróxi, com um ácido ou um cloreto de ácido na presença de uma base selecionada de: hidreto de sódio, hidreto de potássio, piridina, trimetilamina e DMAP para dar a pró-droga de enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro de fórmula (XIVA), onde R2 é hidróxi, R3 é OC(O)R, R4 é alquilenoOC(O) R; onde R é alquil ou aril. Nos compostos de fórmula XIVA e I, Ri0 e R11 são como definidos acima.
De acordo com a presente invenção, os compostos da fórmula geral (I) são inibidores de CDKs, particularmente dos complexos CDK/ciclina e são úteis em terapias antiproliferativas para doenças caracterizadas por crescimento celular excessivo tais como cânceres, anomalias cardiovasculares, distúrbios nefrológicos, psoríase, parasitologia, mal de Alzheimer, inflamação e artrite, distúrbios imunológicos envolvendo proliferação indesejada de leucócitos, restenose e outros distúrbios proliferativos dos músculos lisos, infecções virais, e infecções micóticas.
A presente invenção refere-se ainda aos compostos enantiomericamente puros da fórmula (I), e/ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou suas pró-drogas para uso como fármacos (ou medicamentos), ao uso dos compostos enantiomericamente puros da fórmula (I) e/ou seus sais físiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas para a produção de fármacos para inibição de proliferação celular ou para a terapia ou a profilaxia das doenças mencionadas acima, por exemplo para a produção de fármacos para a terapia e a profilaxia de câncer, inflamação e artrite, psoríase, doenças óasseas, infecções micóticas ou virais, distúrbios cardiovasculares, mal de Alzheimer etc., e a métodos de tratamento voltados para tais finalidades incluindo métodos para as referidas terapias e profilaxias. A presente invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas que contêm uma quantidade eficaz de pelo menos um composto HO enantiomericamente puro da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas além de um carreador farmaceuticamente aceitável usual, opcionalmente, com outros agentes antiproliferativos ativos, e a um processo para a produção de um fármaco, que compreende colocar pelo menos um composto enantiomericamente puro de fórmula (I) em uma forma de administração adequada usando um carreador farmaceuticamente adequado e fisiologicamente aceitável e, se apropriado, outros compostos ativos adequados e/ou aditivos. Estas composições podem ser preparadas aplicando-se técnicas conhecidas na literatura tais como aquelas ensinadas em iiRemingtonlS Pharmaceutical Sciencespublicado por Mack Publishing Co. ou "Pharmaceutical Dosage Form and Drug Delivery Systems" (Sixth Edition), publicado por Williams & Wilkins, (1995), cada uma delas aqui incorporada a título de referência.
A presente invenção também se refere a um método para a preparação de um medicamento para o tratamento ou a prevenção de distúrbios associados à proliferação celular excessiva, caracterizado pelo fato de pelo menos composto enantiomericamente puro da fórmula geral (I) ser usado como a substância farmaceuticamente ativa. As composições farmacêuticas normalmente contêm cerca de 1 a 99%, de preferência cerca de 5 a 70%, mais preferivelmente de cerca de 10 a cerca de 30% em peso dos compostos enantiomericamente puros da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró- drogas. A quantidade do componente ativo do composto enantiomericamente puro da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas nas composições farmacêuticas normalmente varia de cerca de a 500 mg. A dose dos compostos enantiomericamente puros desta invenção, que deve ser administrada, pode cobrir uma faixa ampla. A fose a ser administrada diariamente deve ser selecionado para se adequar ao efeito desejado. Cerca de 20 a 1.000 mg são de preferência administrados diariamente por paciente. Se necessário, doses diárias mais altas ou mais baixas também podem ser administradas. Os níveis de dosagem efetivos dos componentes ativos nas composições farmacêuticas desta invenção podem ser variados para que seja obtida uma quantidade do componente ativo que é eficaz para obter a resposta terapêutica desejada para um paciente específico, uma composição, e modo de administração sem que seja tóxica para o paciente.
O nível de dosagem selecionado vai depender de vários fatores que incluem a atividade do composto particular da presente invenção empregado, ou do éster, sal ou amida do mesmo, da via de administração, do tempo de administração, da taxa de excreção do composto particular sendo empregado, da duração do tratamento, de outras drogas, compostos e/ou materiais utilizados em combinação com os compostos particulares empregados, da idade, do sexo, do peso, da condição, do estado geral de saúde e do histórico médico do paciente sendo tratamento, e outros fatores bastante conhecidos na literatura médica.
Os fármacos podem ser administrados por via ora, inclusive a via sublingual, por exemplo na forma de pílulas, comprimidos, comprimidos revestidos, cápsulas, grânulos, pós, xaropes ou elixires. A administração, no entanto, também pode ser feita: por via retal ou vaginal, por exemplo na forma de supositórios; por via parenteral, por exemplo por via intravenosa, intramuscular ou subcutânea, inclusive pelo uso de técnicas de infusão, na forma de soluções ou suspensões estéreis injetáveis; por via tópica, por exemplo na forma de cremes, pomadas, loções, espumas, géis, emulsões, soluções, tinturas, magmas ou emplastros transdérmicos; ou por outras vias, por exemplo por via oftálmica, ótica, nasal, ou em outras formas, por exemplo, aerosóis, inalantes ou sprays nasais.
As composições farmacêuticas de acordo com a invenção são preparadas de maneira conhecida per se e familiares ao especialista na técnica. Carreadores e/ou aditivos inorgânicos e/ou orgânicos inertes farmaceuticamente aceitáveis podem ser usados além do(s) composto(s) da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas. Para a produção de pílulas, comprimidos, comprimidos revestidos e cápsulas de gelatina dura é possível usar, por exemplo, lactose, amido de milho ou seus derivados, goma arábica, magnésia ou glicose etc. Carreadores para cápsulas de gelatina mole e supositórios são, por exemplo, gorduras, ceras, óleos naturais ou endurecidos etc. Carreadores adequados para a produção de soluções, por exemplo soluções injetáveis, ou de emulsões ou xaropes são, por exemplo, água, solução fisiológica de cloreto de sódio ou álcoois, por exemplo, etanol, propanol ou glicerol, soluções de açúcar, tais como soluções de glicose ou soluções de manitol, ou uma mistura dos vários solventes que foram mencionados. Aditivos que podem ser usados são, por exemplo, cargas, antioxidantes, dispersantes, emulsificantes,
antiespumantes, corretores de sabor, preservativos, solubilizantes ou corantes.
Carreadores e aditivos farmaceuticamente aceitáveis comumente usados que podem ser usados como apropriados para formular a composição para a via de administração desejada são bastante conhecidos na literatura e incluem os carreadores e aditivos descritos no pedido de patente US n° 2004/0106581 publicado da requerente.
As composições farmacêuticas também podem conter dois ou mais compostos enantiomericamente puros da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas. Ademais, além de pelo menos um composto enantiomericamente puro da fórmula (I) e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e/ou suas pró-drogas, as composições farmacêuticas também podem conter um ou
mais outros componentes terapeuticamente ou profilaticamente ativos. Portanto, os compostos da presente invenção podem ser usados como drogas no tratamento de distúrbios proliferativos seja isolados ou como parte de terapias combinadas. Por exemplo, os compostos enantiomericamente puros da presente invenção podem ser usados em combinação com agentes anticâncer, agentes citostáticos e agentes citotóxicos. Se formulados como uma dose fixa, os produtos da combinação empregam os compostos da presente invenção dentro da faixa de dosagem descrita acima e o outro agente farmaceuticamente ativo dentro de sua faixa de dosagem aprovada. Por exemplo, o inibidor de CDK olomucina mostrou agir sinergicamente com agentes citotóxicos conhecidos na indução de apoptose (J. Cell Sci., 1995, 108, 2897). Os compostos enantiomericamente puros da fórmula geral (I) podem ser usados em seqüência com drogas conhecidas tais como agentes anticâncer ou agentes citotóxicos quando uma formulação combinada não é adequada.
Agentes antiproliferativos opcionais que podem ser adicionados à composição incluem porém sem limitação os compostos listados nos sistemas de drogas para quimioterapia de câncer na 13â Edição do Merck Index, (1996) ("NB Year" ou edição requer correção), que está aqui incorporado a título de referência, tais como asparaginase, bleomicina, carboplatina, carmustina, clorambucil, cisplatina, colaspase, ciclophosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, etoposida, fluoruracil, hexametilmelamina, hidroxiuréia, ifosfamida, leucovorina, lomustina, meclorethamina, 6-mercaptopurina, mesna, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, prednisolona, prednisona, procarbazina, streptozocina, tamoxifeno, tioguanina, vimblastina, vincristina, vindesina.
Outros agentes antiproliferativos adequados para uso com a
composição da invenção incluem porém sem limitação os compostos recohecidos para serem usados no tratamento de doenças neoplásicas em in Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeuties (Ninth Edition), editor Molinoff et ai., publicado por McGraw-Hill, páginas 1225-1287, (1996), que está aqui incorporado a título de referência tais como aminoglutetimida, L-asparaginase, azatioprina, 5-azacitidina cladribina, busulfan, dietilstilbestrol, 2', 2'-difluordesoxicitidina, docetaxel, eritrohidroxinoniladenina, etinil estradiol, 5- fluordeoxiuridina monofosfato de, 5-fluordeoxiuridina, fosfato de fludarabina, fluoximesterona, flutamida, caproato de hidroxiprogesterona, idarubicina, interferon, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, melfalano, mitotano, paclitaxel, pentostatina, N-fosfonoacetil-L-aspartato (PALA), plicamicina, semustina, teniposida, propionato de testosterona, tiotepa, trimetilmelamina, uridina, vinorelbina. Agentes inibidores de quinases ciclina-dependentes (CDK) opcionais que podem ser adicionados à composição incluem porém sem limitação alsterpaulona, butirolactona I, inibidor de CDK2, peptídio I inibidor de CDK2/Ciclina, peptídio II inibidor de CDK2/Ciclina, 2-(2-hidroxietilamino)-6-(3-cloroanilino)-9- isopropilpurina, indirubin-3'-monoxima, kenpaulona, olomucina, iso-olomucina, N9-isopropil-olomucina, purvalanol A, roscovitina, roscovitina isômero (S) e WHI-P180 [4-(3'-hidroxifenil)amino- 6,7-dimetoxiquinazolina] (do Calbiochem Signal Transduction Catalog & Technical Resource 2001).
Fica entendido que modificações que não afetam significativamente a atividade das várias modalidades desta invenção estão incluídas na invenção apresentada neste relatório. Por conseguinte, os exemplos a seguir destinam-se a ilustrar e não a limitar a presente invenção. Exemplos
As seguintes abreviações são usadas neste relatório: BF3 : dietil eterato de trifluoreto de boro Conc.: Concentrado q6
THF: Tetrahidrofurano EtOAc: Etil acetato MeOH: Metanol IPA: Isopropanol DBTA: ácido dibenzoil tartárico DMF: N,N-Dimetil formamida DCC: N,N -diciclohexilcarbodiimida DMAP: (N,N-dimetilamino)piridina HCl: ácido clorídrico NaBH4: borohidreto de sódio NaOH : hidróxido de sódio Na2CO3 : carbonato de sódio Exemplo 1:
l-Metil-4-(2,4,6-trimetoxifenil)-l,2,3,6-tetrahidropiridina l-metil-4-piperidona (340 g, 3,0 mol) foi adicionada lentamente a uma solução de 1,3,5-trimetoxibenzeno (500 g, 2,97 mol) em ácido acético glacial (600 mL), mantendo a temperatura da mistura reacional abaixo de 40 °C. HCl concentrado (450 mL) foi adicionado durante 20 minutos. A temperatura foi aumentada até 85-90 0C e a mistura reacional foi agitada por 3,5 horas. Ela foi deixada esfriar para 40 °C, despejada sobre gelo moído (4 kg) e agitada por 20 minutos. O precipitado de 1,3,5-trimetoxibenzeno não reagido foi removido por filtração. O filtrado foi basificado, abaixo de 10 °C, até pH 11-12 usando uma solução aquosa de NaOH a 50%. O sólido esbranquiçado obtido foi filtrado, lavado com água e secado para obter o composto, l-metil-4-(2,4,6-trimetoxi-fenil)-l,2,3,6-
tetrahidropiridina. Rendimento: 580 g (74 %); p.f.: 112-114 °C;
IR (KBr): 3045, 2900, 2837, 1600, 1585 cm"1; 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 6,15 (s, 2H), 5,55 (s, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,75 (s, 6H), 3,10 (d, 2H), 2,55 (t, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,35 (m, 2H); MS (EI): m/z 263 (M+). Exemplo 2:
(±)-trans-1 -Metil-4-(2,4,6-trimetoxifenil)-piperidin-3-ol Dietil eterato de trifluoreto de boro (300 mL, 2,36 mol) foi adicionado lentamente com agitação, em uma atmosfera de nitrogênio, a 0 °C, a uma solução do composto do exemplo (1) (300 g, 1,14 mol) e NaBH4 (75 g, 1,97 mol) em THF seco (2,25 L). a temperatura da mistura reacional foi lentamente aumentada até
r
55 0C e agitada por 1,5 hora. Ela foi resfriada para 30 °C. Agua gelada (100 mL) foi lentamente adicionada seguida de acidificação com HCl concentrado (375 mL). A mistura reacional foi agitada por 1 hora a 50-55 °C. Ela foi resfriada para 30 0C e basificada usando uma solução aquosa de NaOH a 50% até pH 11-12. Peróxido de hidrogênio (30 %, 225 mL) foi adicionado durante 0,5 hora. A mistura reacional foi agitada a 55-60 0C por 1,5 hora. Ela foi resfriada para 30 0C e água suficiente foi adicionada para dissolver os sais precipitados. A camada orgânica foi separada e a porção aquosa foi extraída com etil acetato (2 χ 1L). os extratos orgânicos foram secados (Na2SO4 anidro) e concentrados. O óleo castanho viscoso bruto obtido foi tratado com HCl 4 N (1,2 L) e extraído com etil acetato (2 χ 500 mL). A porção aquosa foi resfriada, basificada com solução aquosa de hidróxido de sódio a 50% e extraída usando etil acetato (2 χ 1L). O extrato orgânico foi secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para dar o composto, (±)- trans-1 -metil-4-(2,4,6-trimetoxi-fenil)-piperidin-3-ol. Rendimento: 210 g (65,6 %); p.f.: 96 - 97 °C;
IR (KBr): 3582, 3374, 3017 cm"1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 6,15 (s, 2H), 4,40 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,74 (s, 6H), 3,20 (dd, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,90 (t, 1H), 1,52 (m, 1H); MS (Cl): m/z 282 (M+l). Exemplo 3:
-l-metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il metil éster do ácido (±)-trans-acético (tl· Cloreto de metanossulfonil (30,27 mL, 44,8 g, 0,4 mol) foi adicionado em gotas a uma solução fria e agitada do composto do exemplo (2) (100 g, 0,35 mol) e trietilamina (71,88 g, 0,7 mol) em THF seco (1,0 L). A mistura reacional foi ainda agitada por 45 minutos a 0 °C. O precipitado de trietilamina HCl foi filtrado e lavado com THF seco (2 χ 100 mL). O filtrado foi adicionado em gotas a uma suspensão em refluxo de acetato de sódio (115 g, 1,40 mol) em 2-propanol (1,0 L). A mistura reacional foi refluxada por mais 15 minutos, diluída com EtOAc (1,0 L) e os sais foram filtrados. A mistura de sais foi lavada com EtOAc (2 χ 100 mL). O filtrado combinado foi concentrado para dar uma goma. Água (50 mL) foi adicionada à goma com agitação para obter um sólido que foi filtrado e secado para dar o composto, l-metil-3-(2,4,6- trimetoxi-fenil)-pirrolidin-2-il metil éster do ácido (±)-trans- acético.
Rendimento: 90 g (81 %); p.f.: 74-77 °C;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 6,13 (s, 2H), 4,00 (m, 2H), 3,81 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,76 (s, 6H), 3,20 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,00 (m, 2H), 1,99 (s, 3H). Exemplo 4:
(±)-írara-[l-Metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]-metanol Uma solução aquosa de NaOH a 10 % (596 mL) foi adicionada a uma solução do composto do exemplo (3) (241 g, 0,75 mol) em metanol (596 mL). A mistura reacional foi agitada a 50 0C por 45 minutos. Ela foi concentrada até dar uma goma e em seguida despejada em água gelada (2 L). O sólido resultante foi filtrado para obter o composto, (±)-^a?w-[l-metil-3-(2,4,6-trimetoxi- fenil)-pirrolidin-2-il]-metanol. Rendimento: 198 g (94 %); p.f.: 82-85 °C;
IR (KBr): 3421, 3009, 1607 cm'1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 6,15 (s, 2H), 3,92 (m, 1H), 3,80 (s, 9H), 3,60 (dd, 1H), 3,45 (d, 1H), 3,20 (m, 1H), X
2,78 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,92 (m, 1H);
MS (ES+): m/z 282 (M+l). Exemplo 5:
(-)-/ra^-[l-Metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]-metanol (-)-DBTA (321,7 g, 897,7 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (4) (250 g, 889,6 mmol) seguido da adição de metanol (1715 mL). A mistura foi refluxada por minutos, agitada lentamente à temperatura ambiente por 3 horas, e o sal cristalizado foi filtrado e secado. Rendimento: 185 g (30 %); p.f.: 102-105 °C;
[a]d25 = -82,66° (c = 0,7, metanol).
O sal foi agitada com solução aquosa a 10% de Na2CO3 (765 mL) e EtOAc (200 χ 3 mL) para obter a base livre na camada de EtOAc. A camada de EtOAc foi concentrada para obter o composto, (-)-írara-[l-metil-3-(2,4,6-trimetoxi-fenil)-pirrolidin-2- il]-metanol.
Rendimento: 80 g (98,3 %); [a]D25 = -20,0° (c = 0,7, metanol);
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 6,13 (s, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,79 (s, 9H), 3,57 (dd, 1H), 3,38 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,93 (m, 1H). Este composto foi submetido à HPLC quiral. HPLC quiral foi feita usando a coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm) e o sistema solvente haxano:etanol (92:08) com TFA (0,4%). Os resultados foram registrados a 264nm com uma taxa de fluxo de solvente de lmL/min. Como representado na figura 1, a HPLC quiral mostrou 100% e.e do composto, (-)-ínms-[l-Metil-3-(2,4,6-trimetoxi- fenil)-pirrolidin-2-il]-metanol. Exemplo 6:
-3-(3-acetil-2-hidroxi-4,6-dimetoxifenil)-l-metil- pirrolidin-2-il metil éster do ácido (-)-trans-acético BF 3-eterato (25,2 g, 178 mmol) foi adicionado em gotas, com agitação, a 0 0C, em uma atmosfera de N2 a uma ijq 39
solução do composto do exemplo (5) (10 g, 35,58 mmol) em anidrido acético (19,48 mL, 176 mmol). A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Ela foi despejada sobre gelo moído (1 kg), basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3 e extraída usando EtOAc (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com salmoura, secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para obter o composto, 3-(3-acetil-2-hidroxi- 4,6-dimetoxi-fenil)-l-metil-pirrolidin-2-il metil éster do ácido (-)-trans-âcético. Rendimento: 10 g (83 %);
1H NMR (CDCl3,300MHz): δ 14,20 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,10 (d, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 3,85 (m, 1H), 3,26 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 2,74 (m, 1H), 2,66 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 2,21 (m, 2H), 2,10 (s,3H). Exemplo 7:
{-)-trans-1 -[2-Hidroxi-3-(2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)- 4,6-dimetoxifenil)-etanona
A uma solução do composto do exemplo (6) (10 g, 28,4 mmol) em metanol (25 mL) foi adicionada com agitação, à temperatura ambiente, uma solução aquosa de NaOH a 10 % (25 mL). A temperatura da mistura reacional foi aumentada até 50 0C por 45 minutos. Ela foi resfriada para a temperatura ambiente, acidificada usando HCl concentrado e concentrada para remover o metanol. Ela foi basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. O composto, (-)-trans-1 -[2-hidroxi-3-(2-hidroximetil-1 - metil-pirrolidin-3 -il)-4,6-dimetoxi-fenil)-etanona, foi filtrado, lavado com água e secado. Rendimento: 7,14 g (82 %); IR (KBr): 3400, 3121, 3001, 1629, 1590 cm"1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 5,96 (s, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,90 (s 3H), 3,88 (s, 3H), 3,59 (dd, 1H), 3,37 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,00 (m, 2H); MS (ES+): m/z 310 (M+l). Exemplo 8: (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3- il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona
Hidreto de sódio (50 %, 0,54 g, 11,25 mmol) foi adicionado aos poucos a uma solução do composto do exemplo (7) (0,7 g., 2,2 mmol) em DMF seca (15 mL) a 0 °C, em uma atmosfera de nitrogênio e com agitação. Depois de 10 minutos, metil 2- clorobenzoato (1,15 g., 6,75mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada a 25 0C por 2 horas. Metanol foi adicionado com cautela abaixo de 20 °C. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g), acidificada com 1:1 HCl (pH 2) e extraída usando EtOAc (2 χ 100 mL). A camada aquosa foi basificada usando Na2CO3 saturado (pH 10) e extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4 anidro) e concentrada. Ao resíduo, HCl concentrado (25 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g) e basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A mistura foi extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com água, secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para obter o composto, (+)-trans-2-(2-cloro-fenil)-8- (2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4- ona.
Rendimento: 0,67 g (64 %); p.f.: 91- 93°C; [a]D25 = + 5,8° (c = 0,7, metanol);
IR (KBr): 3431, 1648, 1598, 1571 cm"1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,70 (dd, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 6,50 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,64 (dd, 1H), 3,40 (d, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,74 (d, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,00 (m, 2H); MS (ES+): m/z 430 (M+l). Exemplo 9:
(+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3 -il)-cromen-4-ona Cloridrato de piridina derretido (4,1 g, 35,6 mmol) foi adicionado 6\ r
ao composto do exemplo (8) (0,4 g, 0,9 mmol) e aquecido a 180 0C por 1,5 hora. A mistura reacional foi resfriada para 25°C, diluída com MeOH (10 mL) e basificada usando Na2CO3 até pH 10. A mistura foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi suspendido em água (5 mL), agitado por 30 minutos, filtrado e secado para obter o composto, (+)-/ra^-2-(2-cloro- fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 0,25 g (70 %); IR(KBr): 3422, 3135, 1664, 1623, 1559 cm"1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,56 (d, 1H), 7,36 (m, 3H), 6,36 (s, 1H), 6,20 (s, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,70 (m, 2H), 3,15 (m, 2H), 2,88 (m, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,35 (m, 1H), 1,88 (m, 1H); MS (ES+): m/z 402 (M+l); Análise: C2iH2oClN05 C, 62,24 (62,71); H, 5,07 (4,97); N, 3,60 (3,48); Cl, 9,01 (8,83). Exemplo 10:
cloridrato de (+)-íA2fts-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto do exemplo (9) (0,2 g, 0,48 mmol) foi suspendido em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL) foi adicionado. A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto, cloridrato de (+)-trans-2- (2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,21 g (97 %); p.f.: 188 - 192 0C ; [a]D25 = +21,3° (c = 0. 2, metanol); 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,80 (d, 1H), 7,60 (m, 3H), 6,53 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,89 (m, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,59 (dd, 1H), 3,38 (m, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,45 (m, 1H), 2,35 (m, 1H); MS (ES+): m/z 402 (M+l)(base livre). Este composto foi submetido à HPLC quiral. HPLC quiral 6*-
foi feita usando a coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm) e o sistema solvente haxano:etanol (92:08) com TFA (0,4%). Os resultados foram registrados a 264nm com uma taxa de fluxo de solvente de lmL/min. Como representado na figura 3, a HPLC quiral mostrou 100% e.e do composto, cloridrato de (+)-trans-2-(2-cloro-fenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Exemplo 11:
(+)-íra/?.s'-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona Hidreto de sódio (50 %, 0,776 g, 16 mmol) foi adicionado aos poucos a uma solução do composto do exemplo (7) (1,0 g, 3,2 mmol) em DMF seca (25 mL) a 0 °C, em uma atmosfera de nitrogênio e com agitação. Depois de 10 minutos, metil 2-cloro-5- fluorbenzoato (1,22 g, 6,4 mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada a 25 0C por 2 horas. Metanol foi adicionado com cautela abaixo de 20 °C. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g), acidificada com 1:1 HCl (pH 2) e extraída usando EtOAc (2 χ 100 mL). A camada aquosa foi basificada usando Na2CO3 saturado (pH 10) e extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4 anidro) e concentrado. Ao resíduo, HCl concentrado (25 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g) e basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A mistura foi extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com água, secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para obter o composto, (+)-íra«,s-2-(2-cloro-5-fluor- fenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona. Rendimento: 0,9 g (63 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,57 (m, 1H), 7,46 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,45 (s 1H), 4,15 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,63 (dd, 1H), 3,32 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 63 $
2,53 (m, 1Η), 2,29 (s, 3Η), 2,00 (m, 2H); MS (Cl): m/z 448 (M+l). Exemplo 12:
(+)-írara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil- 1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
Cloridrato de piridina derretido (8,0 g, 69,5 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (11) (0,8 g, 1,78 mmol) e aquecido a 180 0C por 1,5 hora. A mistura reacional foi resfriada para 25 °C, diluída com MeOH (10 mL) e basificada usando Na2CO3 até pH 10. A mistura foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi suspendido em água (10 mL), agitado por 30 minutos, filtrado e secado para obter o composto, (+)-trans-2-(2- cloro-5-fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,45 g (60 %); p.f.: 253-254 °C; IR (KBr): 3450, 1665 cm1;
1H NMR (DMSO d6, 300MHz): δ 12,70 (s, 1H), 7,75 (m, 2H), 7,54 (m, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,14 (s, 1H), 3,80 (m, 1H), 3,51 (m, 3H), 2,94 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,15 (m, 1H), 1,86 (m, 1H); MS (ES+): m/z 420 (M+l);
Análise: C2iH19C1FN05 C, 60,2 (60,08); H, 4,53 (4,56); N, 3,86 (3,34); Cl, 8,17(8,44). Exemplo 13:
cloridrato de (+)-íram-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto do exemplo (12) (0,1 g, 0,244 mmol) foi suspendido em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL) foi adicionado. A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto, cloridrato de (+)-íra^-2-(2-cloro-5-fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,108 g (100 %); [a]D25 = +18,05° (c = 0,7, metanol); 1H NMR (CD3OD5 300ΜΗζ): δ 7,67 (m, 2Η), 7,37 (m, 1Η), 6,60 (s, 1Η), 6,37 (s, 1Η), 4,25 (m, 1Η), 3,90 (m, 2Η), 3,69 (m, 1Η), 3,60 (dd, 1Η), 3,45 (m, 1Η), 2,98 (s, 3Η), 2,52 (m, 1Η), 2,29 (m, 1H);
MS (ES+): m/z 420 (Μ - 36,5). Exemplo 14:
(+)-íra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (7) (6 g, 19,42 mmol) em DMF seca (60 mL) foi reagido com metil 2-bromo-5-fluorbenzoato (6,7 g, 28,75 mmol) na presença de NaH (50 %, 3,88 g, 80,8 mmol) a 0 °C, em uma atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi agitada a 25 0C por 2 horas. Metanol foi adicionado com cautela abaixo de 20 °C. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g), acidificada com 1:1 HCl (pH 2) e extraída usando EtOAc (2 χ 100 mL). A camada aquosa foi basificada usando Na2CO3 saturado (pH 10) e extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4 anidro) e concentrado. Ao resíduo, HCl concentrado (25 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g) e basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A mistura foi extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com água, secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para obter o composto, (+)-írara-2-(2-bromo-5-fluor- fenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona.
Rendimento: 3,94 g (41,2 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,65 (m, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 6,47 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,64 (dd, 1H), 3,35 (d, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,00 (m, 2H); MS (ES+): m/z 493 (M+l). Exemplo 15:
(+)-írara-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona ói
Cloridrato de piridina derretido (39 g, 339 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (14) (3,9 g, 7,92 mmol) e aquecido a 180 0C por 1,5 hora. A mistura reacional foi resfriada para 25 °C, diluída com MeOH (10 mL) e basificada usando Na2CO3 até pH 10. A mistura foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi suspendido em água (40 mL), agitado por 30 minutos, filtrado e secado para obter o composto, (+)-írara-2-(2-bromo-5- fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3- il)-cromen-4-ona. Rendimento: l,4g (38,14 %); p.f.: 145 - 147 °C; IR(KBr): 3650, 1640 cm'1;
1H NMR (CDCl3 + TFA, 300MHz): δ 12,40 (s, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,00 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 3,98 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 3,15 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,30 (m, 1H), 2,08 (m, 1H); MS (ES+): m/z 465 (M+l). Exemplo 16:
cloridrato de (+)-/ra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-l -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
O composto do exemplo (15) (1,0 g) foi convertido em seu sal de cloridrato por suspensão em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL). A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto, cloridrato de (+)-írara-2-(2-bromo-5-fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroxi- metil-1 -metil-pirrolidin-3 -il)-cromen-4-ona. Rendimento: 1,0 g (93 %); MS (ES+): m/z 465 (M +1) (base livre). Exemplo 17:
metano sulfonato de (+)-íra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto do exemplo (15) (1,97 g, 4,25 mmol) em metanol (5 mL) foi tratado com solução de ácido metanossulfônico em metanol (0,408 g, 4,25 mmol). A solução límpida obtida foi concentrada para obter o composto título, metano sulfonato de (+)- ÓG
Κ
írara-2-(2-bromo-5-fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-
metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona.
Rendimento: 2,3 g (96,63 %);
1H NMR (D2O, 300MHz): δ 7,58 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,11 (m, 1H), 6,30 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 3,45 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,70 (s, 3H), 2,20 (m, 2H);
Análise: C22H23BrNFO8S-H2O, C, 46,08 (45,68); H, 4,61 (4,35); N, 2,63 (2,42), Br, 14,73 (13,81); S, 4,99 (5,54); MS (ES+): m/z 465 (M +1), base livre. Exemplo 18:
(+)-íra«^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil- l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (7) (0,8 g, 2,58 mmol) em DMF seca (10 mL) foi reagido com cloreto de 2,4-dicloro-5-fluor-benzoil (0,887 g, 3,9 mmol) na presença de NaH (50 %, 0,62 g, 12,9 mmol) a 0 °C, em uma atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi agitada a 25 0C por 2 horas. Metanol foi adicionado com cautela abaixo de 20 °C. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (100 g), acidificada com 1:1 HCl (pH 2) e extraída usando EtOAc (2 χ 50 mL). A camada aquosa foi basificada usando Na2CO3 saturado (pH 10) e extraída usando CHCl3 (3 χ 100 mL). A camada orgânica foi secada (anidro Na2SO4) e concentrada. Ao resíduo, HCl concentrado (10 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (100 g) e basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A mistura foi extraída usando CHCl3 (3 χ 100 mL). O extrato orgânico foi lavado com água, secado (anidro Na2SO4) e concentrado para obter o composto título, (+)-/ra^-2-(2,4-dicloro-5-fluor-fenil)-8-(2-hidroximetil-1 - metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 0,54 g (43,4 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,75 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 4,20 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,65 (dd, 1H), 3,36 (d, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,65
(m, 2Η), 2,38 (s, 3Η), 2,10 (m, 2H); MS (ES+): m/z 482 (M+l). Exemplo 19:
(+)-íra«5,-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
Cloridrato de piridina derretido (5,5 g, 47,6 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (18) (0,53 g, 1,1 mmol) e aquecido a 180 0C por 1,5 hora. A mistura reacional foi resfriada para 25 °C, diluída com MeOH (10 mL) e basificada usando Na2CO3 até pH 10. A mistura foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi suspendido em água (5 mL), agitado por 30 minutos, filtrado e secado para obter o composto, {+)-trans-2-(2,4- dicloro-5-fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l - metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,29 g (58 %); IR(KBr): 3422, 1664, 1618, 1401 cm'1;
1H NMR (CDCl3 + DMSO d6, 300MHz): δ 7,50 (m, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,71 (m, 2H), 3,16 (m, 2H), 2,88 (m, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,36 (m, 1H), 1,92 (m, 1H); MS (ES+): m/z 454 (M+l). Exemplo 20:
cloridrato de (+)-/rtf77s-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
O composto do exemplo (19) (0,89 g, 1,96 mmol) foi convertido em seu sal de cloridrato por suspensão em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL). A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto, cloridrato de (+)-ínm?-2-(2,4-dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,91 g (92 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,86 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 4,26 (q, 1H), 3,87 (m, 2H), 3,71 (m, 1H), 3,60 (dd, 1H), 3,56 (q, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,28 (m, 1H); IR (KBr): 68
3386, 1657 cm"1.
MS (ES+): m/z 454 (M- 36,5);
Análise: C2IH19Cl3FNO5, C, 51,08 (51,35); H, 4,26 (3,87); N, 3,13 (2,85), Cl, 21,99 (21,70). Exemplo 21:
metano sulfonato de (+)-ínms-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Ácido metanossulfônico (0,012 g, 0,125 mmol) foi adicionado à suspensão do composto do exemplo (19) (0,05 g, 0,11 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 5 minutos a 25 0C para obter uma solução límpida. O solvente foi removido à pressão reduzida para obter um resíduo. O resíduo foi lavado duas vezes com éter seco (2 χ 5 mL) e secado em alto vácuo (0,1 mm) para obter o composto, metano sulfonato de (+)-íra«s-2-(2,4-dicloro- 5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidróxi metil-1-
metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,054 g (90 %);
Análise: C22H22Cl2FNO8S,2,5 H2O C, 44,26 (44,34); H, 4,42 (4,53); N, 2,58 (2,35); Cl, 12,11 (11,92). Exemplo 22:
citrato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Monohidrato de ácido cítrico (0,023 g, 0,11 mmol) foi adicionado à suspensão do composto do exemplo (19) (0,05 g, 0,11 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 10 minutos a 50-55 °C. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto, citrato de (+)-írara-2-(2,4-dicloro-5-fluor-fenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Rendimento: 0,065 g (91,5 %);
Análise: C27H26Cl2FNO12 C, 49,75 (50,17); H, 4,25 (4,05); N, 2,60 (2,17); Cl, 10,69 (10,97). Exemplo 23:
tartarato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-l -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona F
Acido tartárico (0,016 g, 0,11 mmol) foi adicionado à suspensão do composto do exemplo (19) (0,05 g, 0,11 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 10 minutos a 50-55 °C. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto, tartarato de (+)-írara-2-(2,4-dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,06 g (90,19 %);
Análise: C25H24Cl2FNOii,2,0 H2O C, 47,43 (46,84); H, 4,13 (4,37); N, 2,40 (2,18); Cl, 10,77 (11,08). Exemplo 24:
maleato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
r
Acido maléico (0,0127 g, 0,11 mmol) foi adicionado à suspensão do composto do exemplo (19) (0,05 g, 0,11 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 5 minutos a 50 0C para dar uma solução límpida. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto, maleato de {+)-trans-2-(2,4-dicloro-5- fluor-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 0,059 g (90,19 %);
Análise: C25H22Cl2FNO9,1,5 H2O C, 50,54 (50,23); H, 4,08 (4,18); N, 2,31 (2,34); Cl, 11,83 (11,88). Exemplo 25:
acetato de (+)-íra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
r
Acido acético (0,0065 mL, 0,0068 g, 0,11 mmol) foi adicionado à suspensão do composto do exemplo (19) (0,05 g, 0,11 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 5 minutos a 50-55 0C para dar uma solução límpida. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto título. Rendimento: 0,05 g (88,33 %);
Análise: C23H22Cl2FNO9 C, 53,67 (53,71); H, 4,63 (4,31); N, 3,08 (2,72); Cl, 13,93 (13,79). Exemplo 26:
sulfato de (+)-íra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpinOlidin-3-il)-cromen-4-ona Solução de H2SO4 (solução metanólica a 5 %, 60 μΐ,, 0,055 mmol) foi adicionada à suspensão do composto do exemplo (19) (0,025 g, 0,055 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 5 minutos a 50-55 °C. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto, sulfato de {+)-trans-2-(2,4-dicloro- 5-fluor fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3- il)-cromen-4-ona.
Rendimento: 0,025 g (82,24 %); MS (ES-): m/z 550 (M-l). Exemplo 27:
nitrato de (+)-/ra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Solução de HNO3 (solução metanólica a 5 %, 70 μΙ., 0,055 mmol) foi adicionada à suspensão do composto do exemplo (19) (0,025 g, 0,055 mmol) em metanol (2 mL). Ela foi agitada por 5 minutos a 50-55 0C para dar uma solução límpida. A mistura reacional foi concentrada e o sólido foi secado para obter o composto, nitrato de (+)-/ra^-2-(2,4-dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,025 g (87,81 %); MS (ES-): m/z 515 (M-l). Exemplo 28:
2-(2-acetoximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxi-fenil éster do ácido (+)-trans-2,A-á\c\oxo- benzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6) (3 g, 8,9 mmol), ácido 2,4-diclorobenzóico (1,79 g, 9,3 mmol), DCC (3,87g, 18,7 mmol) e DMAP (1,148 g, 9,3 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (50 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional foi resfriada para 0 0C. A diciclohexiluréia precipitada foi filtrada, a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para dar o 61
composto, 2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6- acetil-3,5-dimetoxi-fenil éster do ácido (+)-trans-2,4- dicloro-benzóico, que foi usado em outra reação sem caracterização.
Rendimento: 4,48 g (100 %) Exemplo 29:
(+)-íra/w-2-(2,4-Diclorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de ^z-BuLi (1,6 M em hexano, 10,67 mL, 17 mmol) in THF (25 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (3,56 mL, 17 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (28)(4,48 g, 8,5 mmol) em THF (25 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 - 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2,4-diclorofenil)-3-oxopropionil]-2-hidroxi- 4,6-dimetoxifenil}-l-metil pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (4,6 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (50 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8-9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (50 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como
eluente para dar o composto, {+)-trans-2-(2,4- diclorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7- dimetoxi-cromen-4-ona como um sólido amarelo. Rendimento: 3,2 g (81 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,74 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,42 (dd, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 4,2 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,99 (s, 3H), 3,68 (dd, 1H), 3,39 (dd, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,07 (m, 2H); MS (ES+): m/z 464 (M+l). Exemplo 30:
(+)-íra^-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (29)(3,2 g, 7,35 mmol), cloridrato de piridina (3,2 g, 6,91 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,01 % amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2,4- diclorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo. Rendimento: 0,98 g (30 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,5 (s, 1H), 7,54 (m, 2H), 7,40 (m, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,08 (m, 1H), 3,89 (m, 2H), 3,28 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (m, 1H), 1,95 (m, 1H); MS (ES+): m/z 436 (M+l). Exemplo 31:
cloridrato de (+)-írtífts-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi- 8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto do exemplo (30) (0,4 g, 0,9 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e 63 tf
o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, cloridrato de (+)-/ra^5-2-(2,4-dicloro-fenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona.
Rendimento: 0,4 g (92 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,80 (d, 1H), 7,30 (d, 1H), 7,54 (dd, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,59 (m, 2H), 3,41 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,52 (m, 1H), 2,29 (m, 1H); MS (ES-): m/z 470 (M-l). Exemplo 32:
2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido {+)-trans-4-Bromo-2- clorobenzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6)(1,95 g, 5,5 mmol), ácido 4-bromo-2-clorobenzóico (1,44 g, 6,1 mmol), DCC (2,29 g, 11 mmol) e DMAP (0,68 g, 5,5 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (50 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional foi resfriada para 0°C, a diciclohexiluréia precipitada foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para dar o composto, 2-(2- acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5-
dimetoxi-fenil éster do ácido (+)-trans-4-bromo-2- clorobenzóico Rendimento: 2,8 g (88,7 %); MS (ES+): m/z 569 (M+l). Exemplo 33:
(+)-/trúf^5-2-(4-Bromo-2-cloro-fenil)-8-(2-hidroximetil-l - metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de n-BuLi (solução 15% em hexano, 4,23 mL, 10 mmol) em THF (25 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (2,1 mL, 10 6*4
mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (32)(2,8 g, 5 mmol) em THF (25 raL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 - 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(4-bromo-2-cloro-fenil)-3-oxo-propionil]-2- hidroxi-4,6-dimetoxi-fenil}-l-metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (2,65 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (20 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 -9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (50 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(4- bromo-2-cloro-fenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin- 3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona, como um sólido amarelo.
Rendimento: 1,4 g (59 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,69 (d, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,55 (dd, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 4,19 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 3,66 (dd, 1H), 3,38 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,10 (m, 2H); MS (ES+): m/z 509 (M+l). Exemplo 34:
(+)-ír^s-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (33)(1,4 g, 2,75 mmol), cloridrato de piridina (1,4 g, 12 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180°C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,01 % amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(4-bromo- 2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo. Rendimento: 0,88 g (60,6 %) ;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,91 (m, 1H), 7,87 (m, 1H), 7,69 (m, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,77 (dd, 1H), 3,66 (dd, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,33 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,76 (s, 3H), 2,24 (m, 2H); MS (ES+): m/z 481 (M+l). Exemplo 35:
cloridrato de (+)-íra^^-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
O composto do exemplo (34) (0,48 g, 1,0 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, cloridrato de (+)-írarcs-2-(4-bromo-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 0,4 g (93 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,87 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 2,99 (s, (qS f
3H), 2,58 (m, 1H), 2,28 (m, 1H); MS (ES-): m/z 515 (M-l). Exemplo 36:
2-(2-acetoximetil-l-metilpirrol-idin-3-il)-6-acetil-3,5-
dimetoxi-fenil éster do ácido (+)-írúws-2-Cloro-4-ciano- benzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6)(3,84 g, 10 mmol), ácido 2-cloro-4-ciano-benzóico (2,48 g, 13 mmol), DCC (4,51 g, 21 mmol) e DMAP (1,34 g, 10 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (50 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional é resfriada para 0 °C, a diciclohexiluréia precipitada foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para dar o composto, 2-(2-acetoximetil-l-metilpirrolidin-
3-il)-6-acetil-3,5-dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2- cloro-4-cianobenzóico.
Rendimento: 3,5 g (62 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,19 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,69 (d, 1H), 6,45 (s, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,48 (m, 2H), 3,11 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,10 (m, 1H), 1,92 (m, 2H), 1,74 (s, 3H); MS (ES+): m/z 515 (M+l). Exemplo 37:
(+)-írafts-2-(2-Cloro-4-ciano-fenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de n-BuLi (solução 1,6 M em hexano, 17 mL, 27 mmol) em THF (50 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (5,7 mL, 27 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (36)(5,6 g, 10 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0°C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 -9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 75 mL). A camada orgânica foi lavada com água (50 mL), salmoura (50 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4- ciano-fenil)-3-oxo-propionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxi- fenil}-l-metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um óleo (6,1 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (60 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 -9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (50 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para dar o composto, (+)-ír««5-2-(2-cloro-4-ciano-fenil)- 8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona, como um sólido amarelo. Rendimento: 0,75 g (15 %); IR (KBr): 3431, 2233, 1648, 1599 cm"1; 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,20 (d, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,88 (d, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,46 (s, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,99 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,10 (m, 2H); MS (ES+): m/z 455 (M+l). Exemplo 38:
cloridrato de (+)-ínmy-2-(2-Cloro-4-ciano-fenil)-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona
O composto do exemplo (37) (20 mg, 0,046 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o composto, cloridrato de (+)-trans-2-(2-cloro-4-ciano-fenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona.
Rendimento: 20 mg (98 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,08 (m, 1H), 7,97 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 3,84 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,41 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,31 (m, 1H); MS (ES-): m/z 489 (M-I)' Exemplo 39:
(+)-ír«/7^-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (37)(0,25 g, 0,55 mmol), cloridrato de piridina (0,25 g, 2,2 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,01 % amônia e 4,5 % metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2-cloro-4- cianofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo. Rendimento: 0,11 g (49,5 %); IR (KBr): 3396, 2234, 1656, 1615 cm"1; 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,05 (s, 1H), 7,90 (m, 2H), 6,45 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,75 (dd, 2H), 3,49 (m, 2H), 3,21 (m, 1H), 2,76 (s, 3H), 2,23 (m, 2H); MS(ES+): m/z 427 (M+l)· Exemplo 40:
cloridrato de (+)-íra^5-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona ϋ-Q
r
O composto do exemplo (39)(0,1 g, 0,23 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, cloridrato de (+)-íra>«-2-(2-cloro-4-cianofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 0,1 g (92,6 %); MS (ES-): m/z 461 (M-l). Exemplo 41:
2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-Cloro-4- trifluormetilbenzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6) (1,16 g, 3,2 mmol), ácido 2-cloro-4-trifluormetilbenzóico (0,88 g, 4 mmol), DCC (1,35 g, 6,5 mmol) e DMAP (0,4 g, 3,27 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (50 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional é resfriada para 0 0C, a diciclohexiluréia precipitada foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % metanol em clorofórmio e 0,01 % amônia como eluente para obter o composto, 2-(2- acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-cloro-4- trifluormetilbenzóico.
Rendimento: 1,44 g (78,8 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,19 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,69 (d, 1H), 6,45 (s, 1H), 4,14 (m, 1H), 3,93 (s, 6H), 3,52 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,15 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,62 (m,2H); MS (ES+): m/z 558 (M+l)· Exemplo 42:
(+)-íra«5,-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- 4-ona
A uma solução de n-BuLi (solução a 15% em hexano, 2,2 mL, 5 mmol) em THF (10 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (1,08 mL, 5,1 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (41)(1,44 g, 2,5 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 25 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4-triflurometil-fenil)-3-oxo-
propionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxi-fenil}-l-metil- pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um óleo (1,3 g, 90,2 %). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (10 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (25 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2-cloro-4- trifluormetilfenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3- il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona como um sólido amarelo. Rendimento: 0,56 g (48,2 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,95 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,69 (d, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,46 (s, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,01 (s, 3Η), 3,93 (s, 3Η), 3,71 (dd, 1Η), 3,41 (d, 1H), 3,26 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,10 (m, 2H); MS (ES+): m/z 497 (M+l)· Exemplo 43:
(+)-írúf^-2-(2-Cloro-4-trifluormetil-fenil)-5,7-dihidroxi- 8-(2-hidroxi- metil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (42) (0,25 g, 0,5 mmol), cloridrato de piridina (0,25 g, 2,16 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (25 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 4,5 % metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, {+)-trans-2-(2-cloro-4- trifluormetilfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-1- metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo.
Rendimento: 0,15 g (63,7 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,99 (m, 2H), 7,83 (d, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,41 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,54 (m, 1H), 2,28 (m, 1H); MS (ES+): m/z 470 (M+l)· Exemplo 44:
cloridrato de (+)-frarcs-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroxi- metil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
O composto do exemplo (43) (0,1 g, 0,2 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o composto, cloridrato de (+)-ír«^^-2-(2-cloro-4-trifluormetil-fenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 0,lg (92,8 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,02 (d, 2H), 7,83 (d, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,73 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,54 (m, 1H), 2,31 (m, 1H). Exemplo 45:
2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-Cloro-4-nitro- benzóico
r
Acido 2-Cloro-4-nitro-benzóieo (13 g, 64 mmol) e cloreto de tionil (40 mL) foram juntos aquecidos a 85 0C por 3 horas. O excesso de cloreto de tionil foi evaporado à pressão reduzida e o resíduo foi secado a vácuo e dissolvido em THF (100 mL). Este foi adicionado em gotas a uma solução do composto do exemplo (6)(15 g, 42 mmol) e trietilamina (29,5 mL, 213 mmol) em THF (100 mL) mantida a 15 - 20 °C. A mistura reacional foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e foi agitada por 12 horas. Ao final de 12 horas, a mistura reacional foi concentrada para remover o THF, acidificada com HCl diluído, basificada com solução de NaHCO3 a 10 % até pH 10, extraída com EtOAc (3 χ IOOmL), lavada com água (50 mL), salmoura (50 mL) e a camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida para obter o composto, 2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6- acetil-3,5-dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-cloro- 4-nitro-benzóico,
como um óleo que foi utilizado como tal para outra reação sem purificação.
Rendimento: 24,8 g (71,7 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,35 (s, 1H), 8,25 (m, 2H), 6,47 (s, 1H), 4,17 (m, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,59 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,49 (s, 6H), 2,46 (m, 2H), 2,17 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,83 (s, 3H); t
MS (ES+): m/z 535 (M+l). Exemplo 46:
(+)-íra«5-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona Uma solução do composto do exemplo (45)(20 g, 37,5 mmol) em dioxano (150 mL) foi adicionada em gotas a uma suspensão de hidreto de sódio (dispersão a 60 %, 5,68 g, 142 mmol) em dioxano (50 mL) e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional foi resfriada bruscamente com a adição em gotas de metanol e os solventes foram evaporados à pressão reduzida. O resíduo foi acidificado com HCl diluído, basificado com solução deNaHC03 a 10 % até pH 8 a 9 e extraído com EtOAc (3 χ 250 mL). A camada orgânica foi lavada com água (50 mL), salmoura (50 mL), secada em Na2SO4 anidro e concentrada à pressão reduzida para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4-nitrofenil)-
3-oxopropionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxifenil}-l-metil- pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um óleo
(18,2 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (50 mL) e agitado à temperatura ambiente por 3 horas. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 250 mL) e lavada com água (50 mL) e salmoura (50 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto {+)-trans-2-(2-cloro-4-nitrofenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-
4-ona como um sólido amarelo pálido. Rendimento: 9,5 g (53,5 %);
IR (KBr): 3447, 1648, 1600, 1570 cm1; 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,37 (d, 1H), 8,26 (dd, 1H), 8,09 (d, HM $
1Η), 6,67 (s, 1Η), 6,46 (s, 1Η), 4,18 (m, 1Η), 4,01 (s, 3Η), 3,98 (s, 3Η), 3,67 (m, 1Η), 3,32 (m, 1Η), 3,19 (m, 1Η), 2,62 (m, 2Η), 2,36 (s, 3Η), 2,04 (m, 2H); MS (ES+): m/z 475 (M+l> Exemplo 47:
cloridrato de (+)-írawj-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-
cromen-4-ona
O composto do exemplo (46) (0,05 g, 0,105 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, cloridrato de (+)-ír<2Jw-2-(2-cloro-4-nitrofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona.
Rendimento: 0,05 g (53,7 %); 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,50 (d, 1H), 8,27 (dd, 1H), 8,09 (d, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,11 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 3,88 (m, 2H), 3,72 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 2,99(s, 3H), 2,49 (m, 1H), 2,26 (m, 1H); MS (ES+): m/z 511 (M+l).
Exemplo 48:
gliconato de (+)-íra«s-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-
cromen-4-ona
O composto do exemplo (46) (6,4 g, 13,4 mmol) foi suspendido em metanol (300 mL) e tratado com ácido glicônico (2,63 g, 13,4 mmol) e o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, gliconato de (+)-trans- 2-(2-cloro-4-nitro fenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil-
pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 8,5 g (93,9 %); p.f.: 137 -140 °C;
IR (KBr): 3404, 1648, 1601, 1524 cm'1; 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,50 (d, 1H), 8,33 (dd, 1H), 8,09 (d, 1H), 6,78 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 4,31 (m, &6
1Η), 4,15 (s, 3Η), 4,01 (s, 3Η), 3,72 (m, 11Η), 2,95 (s, 3Η), 2,4 (m, 1Η), 2,30 (m, 1H); [ot]D25: +1 1,76 ° ( c = 0,76, MeOH);
MS (ES+): m/z 475 (M+l), Base livre.
Exemplo 49:
(+)-írfl/w-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (46) (4,2 g, 8,8 mmol), cloridrato de piridina (4,2 g, 36 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2 horas. A mistura reacional foi resfriada e diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, {+)-trans-2-(2-cloro-4- nitro-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 - metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona como um sólido amarelo.
Rendimento: 2,8 g (70,88 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,48 (d, 1H), 8,34 (dd, 1H), 8,02 (d, 1H), 6,48 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,74 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,22 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 2,22 (m, 2H); MS (ES+): m/z 447(M+1)' Exemplo 50:
cloridrato de (+)-ír<2«s-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-
dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
O composto do exemplo (49) (2,8 g, 6,2 mmol) foi suspendido em metanol (10 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o composto, cloridrato de (+)-íra«5-2-(2-cloro-4-nitrofenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. W6
r
Rendimento: 2,7 g (92,5 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,51 (d, 1H), 8,36 (dd, 1H), 8,09 (d, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,32 (m, 1H);
MS (ES+): m/z 483 (M+l); [a]d25: +13,0 ° ( c = 0,2, metanol). Exemplo 51:
(+)-írfl/?^-2-(4-Amino-2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona
O composto do exemplo (46) (1,0 g, 2,1 mmol), cloreto estanoso (1,9 g, 8,4 mmol) e EtOAc (5 mL) foram juntos agitados à temperatura ambiente por 12 horas. Ao final de 12 horas, a mistura reacional foi basificada com solução de NaOH a 10 % até pH 10 e extraída com EtOAc (3x10 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água (10 mL), salmoura (10 mL), secadas em Na2S04 anidro e concentradas à pressão reduzida para dar o composto, (+)-írafts-2-(4-amino-2-clorofenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona, como um sólido. Rendimento: 0,74 g (79 %); MS (ES+): 445 (M+l). Exemplo 52:
(+)-^a^-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (composto-1)
(+)-írtíf/7^-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-l -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (composto-2)
Uma mistura do composto do exemplo (51)(0,7 g, 1,57 mmol), cloridrato de piridina (0,7 g, 6 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi resfriada e diluída com metanol (25 mL) e basificada com Χ* &
Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o compostos, {+)-trans-2-(4-amino- 2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (composto-1) e (+)- írúr^-2-(2-cloro-4-metilaminofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (composto-2) como sólidos amarelos.
Composto-1: Rendimento: 0,25 g (38 %); MS (ES+): 417 (M+l)
Composto-2:Rendimento: 0,13 g (19 %); MS (ES+): 431 (M+l). Exemplo 53:
cloridrato de (+)-ír<3^5-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7-
dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
O composto (+)-írtf/w-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona (0,25 g, 0,6 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o composto, cloridrato de (+)-^Yms-2-(4-amino-2-cloro fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,26 g (96 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,78 (d, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,13 (dd, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,36 (s, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,80 (m, 1H), 3,60 (dd, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,52 (m, 1H), 2,29 (m, 1H);
MS (ES+): 417 (M+l), base livre; MS (ES-): 451 (M-I)" Exemplo 54:
cloridrato de (+Hrara-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil -l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto, (+)-^^-2-(2-Cloro-4-metilamino-fenil)- 68
5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona (0,13 g, 0,3 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o sal, cloridrato de (+)- /rtí^s-2-(2-cloro-4-metilaminofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,13 g (96 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,67 (d, 1H), 6,86 (d, 1H), 6,80 (dd, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,34 (s, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,94 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,58 (dd, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,53 (m, 1H), 2,33 (m, 1H); MS (ES+): 431 (M+l), base livre ; MS(ES-): 465 (M-l). Exemplo 55:
2-(2-acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-Cloro-4- pirrolidin-l-il-benzóico
r
Acido 2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-benzóico (1,0 g, 4,4 mmol), cloreto de tionil (0,35 mL, 4,8 mmol), N- metilpirrolidin-2-ona (0,1 mL) e diclorometano (20 mL) foram juntos agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A esta solução, o composto do exemplo (6)(0,86 g, 2,4 mmol) foi adicionado e a mistura foi resfriada para 0 - 5 °C. Depois de esfriar, trietilamina (1,7 mL, 12,7 mmol) foi adicionada e a mistura reacional foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 4 horas. A mistura foi diluída com clorofórmio (25 mL), lavada com NaHCO3 a 10 % (10 mL), água (10 mL), salmoura (10 mL) e a camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida para dar o composto, 2-(2-acetoximetil- l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5-dimetoxifenil éster do ácido (+)-/rafts-2-cloro-4-pirrolidin-l-ilbenzóico como um sólido que foi utilizado como tal para outra reação sem purificação. Rendimento: 1,37 g (100 %); m MS(ES+): 559 (M+l). Exemplo 56:
(+)-íra«j-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona
A uma solução de rc-BuLi (1,6 M em hexano, 3 mL, 4,8 mmol) em THF (10 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (1 mL, 4,75 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (55)(1,37 g, 2,45 mmol) em THF (5 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a mistura reacional foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 - 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)-3-oxo-
propionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxi-fenil}-l-metil- pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (0,97 g, 70,8 %). Este éster foi dissolvido em 5 mL de HCl concentrado e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 25 mL) e lavada com água (10 mL) e salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, (+)-íra«j-2-(2-cloro-4-pirrolidin-l- il-fenil)-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7- dimetoxi-cromen-4-ona como um sólido castanho. Rendimento: 0,4 g (46,5 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,62 (d, 1H), 6,58 (m, 2H), 6,50 (m, 1H), 6,42 (s, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 3,68 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,32 (m, 5H), 2,88 (m, 1H), 2,77 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,05 (m, 6H); MS (ES+): 499 (M+l). Exemplo 57:
(+)-írúf«^-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidróxi metil-l-metilpirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
Uma mistura do composto do exemplo (56)(0,4 g, 0,8 mmol), cloridrato de piridina (0,4 g, 3,46 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, {+)-trans-2-(2-cloro-4- pirrolidin-l-il-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona como um sólido amarelo. Rendimento: 23 mg (6,6 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,82 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 6,62 (d, 1H), 6,52 (dd, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 4,2 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 3,34 (m, 5H), 2,96 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,40 (m, 1H), 2,09 (m, 6H); MS (ES+): 471 (M+l). Exemplo 58:
cloridrato de (+)-írarcs-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidróxi metil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
O composto do exemplo (57) (23 mg, 0,049 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para obter o sal, cloridrato de (+)-/r««5-2-(2-cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona.
Rendimento: 23 mg (92,8 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,66 (d, 1H), 6,69 (d, 1H), 6,62 (dd, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,36 (s, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,71 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,37 (m, 4H), 3,06 (s, 3H), 2,54 (m, 1H), 2,29 (m, IH)), 2,06 (m, 4H); MS (ES-): 505 (M-l).
Exemplo 59:
2-(2-acetoximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-Cloro-4- isopropilaminobenzóico
r
Acido 2-Cloro-4-isopropilaminobenzóico (1,0 g, 4,6 mmol), cloreto de tionil (0,38 mL, 5,1 mmol), N-metilpirrolidin-2-ona (0,1 mL) e diclorometano (20 mL) foram juntos agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A esta solução, o composto do exemplo (6)(0,91 g, 2,5 mmol) foi adicionado e a mistura foi resfriada para 0 - 5 °C. Depois de esfriar, trietilamina (1,7 mL, 12 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 4 horas. A mistura reacional foi filtrada para remover o cloridrato de trietilamina precipitado e a camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida para dar o composto título como um sólido que foi utilizado como tal para outra reação sem purificação.
Rendimento: 0,95 g (67 %); MS (ES+): 547 (M+l)· Exemplo 60:
(+)-írtffts-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)-8-(2-
hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- 4-ona
A uma solução de rc-BuLi (1,6 M em hexano, 2,22 mL, 3,56 mmol) em THF (10 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (0,74 mL, 3,56 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (59)(0,95 g, 1,78 mmol) em THF (5 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C.
Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 - 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4-isopropilamino-fenil)-3-oxo-
propionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxi-fenil}-l-metil- pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (0,95 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (5 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 - 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 25 mL) e lavada com água (10 mL) e salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar o composto, (+)-írafts-2-(2-cloro-4-isopropilaminofenil)-8-(2-hidróxi metil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona, como um sólido castanho que foi usado sem purificação posterior.
Rendimento: 0,7 g (92,5 %) Exemplo 61:
(+)-íraws-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)-5,7-
dihidroxi-8-(2-hidróxi metil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
Uma mistura do composto do exemplo (60)(0,7 g, 1,4 mmol), cloridrato de piridina (0,7 g, 6 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (25 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2-cloro-4- isopropilamino-fenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin -3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo.
Rendimento: 20 mg (3 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,38 (d, 1H), 6,63 (d, 1H), 6,51 (dd, 1H), 6,39 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,94 (m, 2H), 3,67 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 2,9 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,43 (m, 2H), 1,25 (d, 6H); MS (ES+): 459 (M+l). Exemplo 62:
cloridrato de (+)-^úf«ís,-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidróxi metil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
O composto do exemplo (61) (20 mg, 0,043 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal, cloridrato de (+)-írafts-2-(2-cloro-4-isopropilaminofenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 20 mg (95 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,72 (d, 1H), 7,04 (d, 1H), 6,92 (dd, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,8 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,65 (dd, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,0 (s, 3H), 2,53 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,29 (d, 6H); MS (ES-): 493 (M-l). Exemplo 63:
2-(2-acetoximetil-l -metilpirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- £
dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2,4- Dibromobenzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6)(0,84 g, 2,3 mmol), ácido 2,4-dibromobenzóico (0,8 g, 2,8 mmol), DCC (0,98 g, 4,7 mmol) e DMAP (0,3 g, 2,3 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (25 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional é resfriada para 0 °C, a diciclohexiluréia precipitada foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, 2-(2-acetoximetil-l-metilpirrolidin- 3-il)-6-acetil-3,5-dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans- 2,4-dibromo benzóico. Rendimento: 1,14 g (78 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,19 (s, 1H), 7,55 (m, 2H), 6,44 (s, 1H), 4,2 (m, 2H), 3,91 (s, 6H), 3,60 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 2,60 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,13 (m, 1H), 1,94 (m, 2H), 1,80 (s, 3H); MS (ES+): 614 (M+l). Exemplo 64:
(+)-írtíf«5-2-(2,4-Dibromofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin.-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de n-BuLi (15 % em hexano, 2,38 mL, 5,6 mmol) em THF (10 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (1,67 mL, 8 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo g, 1,8 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0°C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 25 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2,4-dibromofenil)-3-oxopropionil]-2-hidroxi- 4,6-dimetoxifenil}-l-metil pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (1,2 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (10 mL ) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 10. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (25 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em anidro Na2SO4j concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2,4- dibromofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- 5,7-dimetoxi-cromen-4-ona como um sólido amarelo. Rendimento: 0,6 g (58 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,81 (s, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,51 (dd, 1H), 6,48 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 3,73 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,33 (m, 1H), 2,99 (m, 1H), 2,66 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,15 (m, 2H); MS (ES+): 554 (M+l). Exemplo 65:
(+)-írúí^-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (64) (0,6 g, 1,08 mmol), cloridrato de piridina (0,6 g, 5,19 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna £6 ê
usando 0,1 % de amônia e % metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto título como um sólido amarelo.
Rendimento: 0,2 g (22 %); MS(ES+): 526 (M+l).
Exemplo 66:
cloridrato de (+)-íra«s-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
O composto do exemplo (65) (25 mg, 0,047 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal, cloridrato de (+)-ír<2^5-2-(2,4-dibromofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona. Rendimento: 25 mg (93,5 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,95 (m, 1H), 7,73 (m, 2H), 6,52 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 3,60 (m, 2H), 3,4 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,53 (m, 1H), 2,28 (m, 1H); MS (ES-): 560 (M-l)+ Exemplo 67:
2-(2-acetoximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxifenil éster do ácido (+)-trans-2-Bromo-4- clorobenzóico
Uma mistura do composto do exemplo (6)( 1,12 g, 3,2 mmol), ácido 2-bromo-4-clorobenzóico (0,9 g, 3,8 mmol), DCC (1,32 g, 6,4 mmol) e DMAP (0,4 g, 3,2 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (25 mL) e agitados à temperatura ambiente por 12 horas. A mistura reacional foi resfriada para 0 0C, a diciclohexiluréia precipitada foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 1 % metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto título, (+)-2-(2-acetoximetil-l-metil- pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5-dimetoxi-fenil éster do ácido
trans-2-bromo-4-c\oro-bQnzóico. Rendimento: 0,6 g (33 %); MS(ES+): 569 (M+l). Exemplo 68:
(+)-^tfrcs-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de n-BuLi (15 % em hexano, 0,9 mL, 2 mmol) em THF (10 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (0,44 mL, 2 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução do composto do exemplo (67) (0,6 g, 1 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 25 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL) e secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-bromo-4- clorofenil)-3-oxopropionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxifenil}- l-metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido castanho (1,2 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (10 mL) e agitado por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (25 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2-bromo-4- cloro fenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7- dimetoxi-cromen-4-ona como um sólido amarelo. Rendimento: 0,3 g (53,6 %); MS (ES+): 509 (M+l). Exemplo 69:
(+)-írfl/7^-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona Uma mistura do composto do exemplo (68)(0,3 g, 0,59 mmol), cloridrato de piridina (0,3 g, 2,6 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (25 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto, (+)-trans-2-(2-bxomo- 4-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona, como um sólido amarelo. Rendimento: 0,04 g (14 %); MS(ES+): 481 (M+l). Exemplo 70:
cloridrato de (+)-/rflfts-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7-
dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
O composto do exemplo (69) (34 mg, 0,07 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal, cloridrato de (+)-írú;^^-2-(2-bromo-4-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona.
Rendimento: 34 mg (93 %);
1HNMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,98 (m, 1H), 7,8 (m, 2H), 6,5 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,17 (m, 1H), 3,88 (m, 2H), 3,59 (m, 2H), 3,43 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,49 (m, 1H), 2,28 (m, 1H); MS (ES-): 515 (M-l). Exemplo 71:
(±)-trans-8-(2-Hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7- dimetoxi-2-(2-metoxifenil)-cromen-4-ona A uma suspensão de hidreto de sódio a 50 % em óleo mineral (1,39 g, 29,1 mmol) em N,N- dimetilformamida (60 mL) mantida em uma atmosfera de nitrogênio e resfriada para 0 °C, (±)-trans- l-[2-hidroxi-3-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-4,6-dimetoxifenil]- etanona (3 g, 9,7 mmol) foi adicionada aos poucos e agitada por 15 minutos. Ao final de 15 minutos, 2-metóxi metilbenzoato (4,8 g, 29 mmol) foi adicionado em gotas e a reação foi agitada a 0°C por 1 hora. O excesso de hidreto de sódio foi destruído pela adição cautelosa de metanol. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, e basificada com bicarbonato de sódio a 10% até pH 9. A mistura reacional foi concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo para dar l-[2-hidroxi-3-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-4,6-dimetoxifenil]-3- (2-metoxifenil)-propano-l,3-diona como um óleo (1,4 g). Esta β-dicetona foi dissolvida em HCl concentrado (50 mL) e agitada por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 10. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (50 χ 3 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, (±)-trans-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-2-(2- metoxifenil)-cromen-4-ona. Rendimento: 1,4 g (34 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,97 (d, 1H), 7,44 (t, 1H), 7,09 (t, 1H), 7,01 (d, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,43 (s, 1H), 4,27 QO t
(m, 1Η), 4,00 (s, 3Η), 3,96 (s, 3Η), 3,90 (s, 3Η), 3,70 (dd, 1Η), 3,42 (d, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,72 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,08 (m, 2H); MS (ES+): 426 (M+l).
Exemplo 72:
(±)-írtffls-5,7-Dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-
metilpirrolidin-3-il)-2-(2-hidroxifenil)-cromen-4-ona
(composto-1)
(±)-íra/?s-5,7-Dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-2-(2-metoxifenil)-cromen-4-ona (composto-2)
(±)-ír««^-5-Hidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3- il)-7-metoxi-2-(2-metoxifenil)-cromen-4-ona (composto-
3)
Uma mistura do composto do exemplo (71)(70 mg, 0,165 mmol), cloridrato de piridina (700 mg, 6,09 mmol) foi aquecida a 180 0C por um período de 2,5 horas. A mistura reacional foi diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar os compostos, (±)- írarcs-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3- il)-2-(2-hidroxifenil)-cromen-4-ona (composto-1), (±)-/ra^-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-2-(2-metoxifenil)-cromen-4-ona (composto-2), e (±)-ír««5-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-2-(2-metoxifenil)-cromen- 4-ona (composto-3).
(composto-1): Rendimento: 17 mg (27 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,90 (dd, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,96 (m, 2H), 6,18 (s, 1H), 4,20 (m, 1H), 3,79 (dd, 1H), 3,65 (dd, lh), 3,55 (m, lh), 3,45 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,34 (m, 2H); Ψ
MS (ES+): 384 (M+l). (composto-2): Rendimento: 20 mg (30 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): 012,77 (s, 1H), 7,82 (dd, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,88 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,20 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,80 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,67 (s, 3H), 2,50 (m, 1H), 2,12 (m, 1H); MS (ES+): 398 (M+l). (composto- 3): Rendimento: 12 mg ( 18 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 13,12 (s, 1H), 8,03 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,11 (m, 1H), 7,02 (m, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,42 (s, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 3,58 (m, 2H), 3,11 (m, 1H), 2,70 (m, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,05 (m, 2H); MS(ES+): 412 (M+l). Exemplo 73:
cloridrato de (±)-rr<3fls-5,7-Dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-2-(2-hidroxifenil)-cromen-4-ona O composto 1 do exemplo 72 (15 mg, 0,039 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal, cloridrato de (±)-trans-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-2-(2-hidroxifenil)-cromen-4-ona. Rendimento: 14 mg (85 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,97 (dd, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,00 (m, 2H), 6,34 (s, 1H), 4,42 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,79 (m, 1H), 3,63 (dd, 1H), 3,49 (m, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,58 (m, 1H), 2,36 (m, 1H); MS(ES+): 420 (M+l)+ Exemplo 74:
3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+) acético
O composto do exemplo (9) (2 g, 5 mmol) foi agitado em diclorometano seco (40 mL) com anidrido acético (2,50 mL, 26,4 mmol) e uma quantidade catalítica de dimetilaminopiridina a 25 °C. Depois de 1 hora, solução saturada de carbonato de sódio (30 mL) foi adicionada à mistura reacional e agitada por 15 minutos. <90, &
A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com CHCl3 (3 χ 50 mL). A camada orgânica combinada foi concentrada e o produto obtido foi purificado usando uma coluna de sílica gel e 3 % de metanol em CHCl3 + 1 % de NH3 licor como eluente para obter o composto, 3-[2-(2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-1 -metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+) acético Rendimento: 1,3 g (60 %); IR (KBr): 3421, 3069, 2953, 1742, 1659 cm"1; 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,60 (s, 1H), 7,54 (m, 2H), 7,45 (m, 2H), 6,44 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,42 (t, 1H), 3,32 (t, 1H), 2,77 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,00 (m, 1H), 1,90 (s, 3H). Exemplo 75:
cloridrato de 3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen- 8-il]-l-metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+) acético O composto do exemplo (74) (0,2 g, 0,38 mmol) foi suspendido em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL) foi adicionado. A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto título, cloridrato de 3-[2- (2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+) acético Rendimento: 1,00 g (93 %); MS (ES+): m/z 444 (M+l), base livre. Exemplo 76:
8-(2-acetoximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-4-oxo- 4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-trans-acético Uma solução do composto do exemplo (10) (10 g, 22 mmol) em piridina (100 mL) foi resfriada para 0 °C. Cloreto de acetil (5,7 mL, 80 mmol) foi adicionado em gotas e a mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente seguida de aquecimento ao refluxo por 12 horas. A mistura foi concentrada à pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 5 93
% metanol em clorofórmio como o eluente para dar o composto título, 8-(2-acetoximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi- 4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-trans-acético. .Rendimento: 5 g (45 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,54 (d, 1H), 7,44 (m, 3H), 6,53 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,17 (m, 2H), 3,48 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,44 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 1,92 (m, 1H), 2,0 (s, 3H); MS (ES+): m/z 486 (M+l). Exemplo 77:
8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)-5-hidroxi-4- oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-/ra«s-benzóico Uma solução do composto do exemplo (10)(0,5 g, 1,1 mmol) em piridina (3 mL) foi resfriada para 0 °C. Cloreto de benzoil (1 mL, 8,62 mmol) foi adicionado em gotas e a mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente seguida de aquecimento ao refluxo por 12 horas. A mistura foi concentrado à pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 5 % metanol em clorofórmio como o eluente para dar o composto, 8- (2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-4- oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-/ram-benzóico. Rendimento: 0,2 g (28 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,25 (m, 1H), 8,09 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,50 (m, 11 H), 6,68 (s, 1H), 6,34 (s, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,32 (dd, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,58 (m, 1H), 2,12 (m, 1H); MS (ES+): m/z 610 (M+l). Exemplo 78:
cloridrato de 8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)- 5-hidroxi-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido {+)-trans-benzóico O composto do exemplo (77) (0,2 g, 0,328 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal, cloridrato de 8-(2-benzoiloximetil pirrolidin-3-il)-2-(2- clorofenil)-5-hidroxi-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do (+)- qy t
trans-benzóico. Rendimento: 0,2 g (94,5 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,2 (m, 1H), 8,02 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,49 (m, 11H), 6,85 (s, 1H), 6,29 (s, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,5 (m, 3H), 3,89 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 2,48 (m, 1H); MS (ES+):m/z 610 (M+l), base livre. Exemplo 79:
2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-8-(l-metil-2-octanoiloximetilpirrolidin- 3-il)-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-/nms-octanóico
Uma solução do composto (10)(0,5 g, 1,2 mmol) em piridina (3 mL) foi resfriada para 0 °C. Cloreto de octanoil, preparado refluxando ácido octanóico (0,41 mL, 3,12 mmol) em cloreto de tionil (1 mL) por 30 minutos seguido de evaporação até a secura, foi adicionado em gotas e a mistura reacional foi aquecida até a temperatura ambiente seguida de aquecimento ao refluxo por 12 horas. A mistura foi concentrada à pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 5 % de metanol em clorofórmio como o eluente para dar o composto título.
Rendimento: 0,2 g (30,5 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,60 (s, 1H), 7,55 (m, 4H), 6,44 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 2,76 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,45 (m, 1H), 2,34 (t, 2H), 2,17 (m, 2H), 1,95 (m, 1H), 1,63 (m, 2H), 1,48 (m, 2H), 1,27 (m, 16H), 0,86 (m, 6H). Exemplo 80:
3-[2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-7-metoxi^-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-trans-acético
A uma solução de o composto do exemplo (8)(2,0 g, 4,65 mmol) e dimetilaminopiridina (10 mg) em diclorometano (20 mL), anidrido acético (0,48 mL, 5,07 mmol) foi adicionado em gotas e a mistura reacional foi agitada por 15 minutos. Ao final de 15 minutos, a mistura reacional foi diluída com clorofórmio (20 mL), a camada QÓ
r
orgânica foi lavada com NaHCO3 a 10 %, água (10 mL) e salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro e concentrada à pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (20 mL), seguido da adição de dietil eterato de trifluoreto de boro (1,72 mL, 13,9 mmol) e dimetil sulfeto (1,1 mL, 14 mmol) e agitado à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura reacional foi despejada em, basificada com Na2CO3 a 10 % e extraída com clorofórmio (2 χ 50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água (10 mL), salmoura (10 mL), secadas em Na2SO4 anidro e concentradas à pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 20 % de éter de petróleo em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto, 3-[2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-7- metoxi^l-oxo-4H-cromen-8-il]-l-metilpinOlidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-íram-acético. Rendimento: 1,22 g (58 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,88 (s, 1H), 7,50 (m, 4H), 6,47 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,04 (m, 2H), 3,95 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,13 (m, 1H), 2,74 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,13 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,72 (s, 3H); MS (ES+): m/z 458 (M+l). Exemplo 81:
(+)-rra«^-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona Método A
O composto do exemplo (80) (1,4 g, 3,0 mmol) foi dissolvido em metanol (6 mL) ao qual uma solução aquosa de NaOH a 2% (6 mL) foi adicionada e a mistura foi aquecida com agitação a 50 - 60 0C por 1 hora. Ao final deste período, a mistura foi acidificada com HCl diluído seguida de basificação com solução de Na2CO3 a % até pH 9. A mistura foi extraída com EtOAc (3 χ 25 mL) e as camadas orgânicas foram lavadas com água (10 mL), salmoura (10 mL), secadas em Na2SO4 anidro, concentradas à pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 1 % de /so-propanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como <?6 Φ
eluente para dar o composto, (+)-/1ra^-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi- 8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 1,2 g (97 %); IR (KBr): 3446, 1656, 1608 cm"1;
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,90 (s, 1H), 7,74 (m, 1H), 7,48 (m, 3H), 6,57 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,63 (dd, 1H), 3,36 (d, 1H), 3,14 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,01 (m, 2H);
MS (ES+): m/z 416 (M+l)+. Método B
O composto do exemplo (8) (0,1 g, 0,23 mmol) foi tratado com HBr (5 mL, 47 %) a 100 0C por 3,5 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo, basificada com
solução de Na2CO3 (10 %, 40 mL), extraída com etil acetato e concentrada. O produto obtido foi purificado por cromatografia em coluna e 5% de metanol + 1% de NH3 licor em CHCl3 como eluente para obter o composto título.
Rendimento: 0,085 g (84 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,90 (s, 1H), 7,74 (m, 1H), 7,48 (m, 3H), 6,57 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,11 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,63 (dd, 1H), 3,36 (d, 1H), 3,14 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,01 (m, 2H); MS (ES+): m/z 416 (M+l).
Exemplo 82:
cloridrato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-
hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (81) (50 mg, 0,11 mol) foi suspendido em metanol (2 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi
evaporado para dar o sal, cloridrato de (+)-trans-2-(2- clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-7- metoxi-cromen-4-ona. .Rendimento: 53 mg (100 %); IR (KBr): 3297, 1663, 1608, 1581 cm"1;
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,12 (d, 1H), 7,91 (m, 9$
3Η), 6,96 (s, 1Η), 6,89 (s, 1Η), 4,62 (m, 1Η), 4,34 (s, 3Η), 4,17 (m, 2Η), 4,03 (m, 1Η), 3,90 (m, 1Η), 3,71 (m, 1Η), 3,31 (s, 3Η), 2,75 (m, 1Η), 2,62 (m, 1H); MS (ES+): m/z 416 (M-36,5);
[a]D25: +15,32° (c = 0,27, metanol). Exemplo 83:
gliconato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (81) (50 mg, 0,12 mmol) foi suspendido em metanol (1 mL) e água (1 mL) e a mistura foi agitada. A esta mistura, ácido glicônico (24 mg, 0,12 mmol) foi adicionado, agitado e a solução foi evaporada até a secura para dar o sal, gliconato de (+)-írara-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil pirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 74 mg (100 %); IR (KBr): 3445, 1654, 1609 cm"1; 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,80 (d, 1H), 7,59 (m, 3H), 6,64 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 4,27 (m, 1H), 4,07 (m, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,76 (m, 7H), 2,92 (s, 3H), 2,33 (m, 2H); [ot]D25: +18,17° (c = 0,73, metanol) Exemplo 84:
-3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-trans-acético A uma solução do composto do exemplo (10)(1 g, 2,28 mmol) e trietilamina (1,6 mL, 11,4 mmol) em cloreto de metileno (10 mL), anidrido acético (0,7 mL, 7,4 mmol) foi adicionado e agitado por minutos à temperatura ambiente. A mistura reacional foi resfriada bruscamente com solução saturada de carbonato de sódio (10 mL) e agitada por 30 minutos. A camada orgânica foi separada, lavada com carbonato de sódio aquoso (10 mL), água (10 mL), secada em sulfato de sódio anidro e evaporada à pressão reduzida para dar o composto, -3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4- oxo-4H-cromen-8-il]-l-metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)- trans-acético, que foi usado como tal sem purificação posterior. Rendimento: 1,1 g (99 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 12,59 (s, 1H), 7,45 (m, 4H), as 6,44 (s, 1Η), 6,31 (s, 1Η), 4,32 (m, 1Η), 4,19 (m, 1Η), 4,05 (m, 1Η), 3,44 (m, 1Η), 3,30 (m, 1Η), 2,79 (m, 1Η), 2,62 (s, 3Η), 2,42 (m, 1Η), 1,98 (m, 1Η), 1,92 (s, 3H); MS (ES+): 444 (M+l). Exemplo 85:
3-[2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-7-(2-metoxietóxi metoxi)-4-oxo-4H- cromen-8-il]-l-metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-trans- acético
O composto do exemplo (84)( (1,11 g, 2,50 mmol) foi dissolvido em DMF seca (15 mL) em uma atmosfera de nitrogênio e resfriado para 0 °C. Hidreto de sódio (50 %, 0,14 g, 2,9 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por 30 minutos. Uma solução de cloreto de 2-metoxietoximetil (0,33 mL, 2,9 mmol) em DMF seca foi adicionada em gotas e a reação foi mantida a 10 0C por uma noite. A reação foi despejada em água gelada (10 mL), acidificada com ácido acético até pH 5, basificada com Na2CO3 aquoso (pH 9), e extraída com etil acetato (2 χ 25 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com água (15 mL), salmoura (15 mL), secada em sulfato de sódio anidro e concentrada à pressão reduzida até a secura para dar o composto, -3-[2-(2-clorofenil)-5- hidroxi-7-(2-metoxietoximetoxi)-4-oxo-4H-cromen-8-il]-1 -metil pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido {+)-trans-acético. Rendimento: 1,1 g (92 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,78 (s, 1H), 7,56 (m, 4H), 6,68 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,20 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 3,83 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,38 (s, 3H), 2,56 (m, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), 1,62 (m, 2H); MS (ES+): 532 (M+l). Exemplo 86:
(+)-írara-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil)-1 -metil pirrolidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)-cromen-4-ona O composto do exemplo (85) (1,1 g, 2,07 mmol) foi dissolvido em mL de solução a 1 % de hidróxido de sódio em uma mistura 1:1 de metanol-água e agitado à temperatura ambiente por 1 hora. Ao final de 1 hora, a mistura reacional foi diluída com água gelada, acidificada com ácido acético (pH 5), basificada com Na2CO3 aquoso (pH 9), e extraída com etil acetato (2 χ 25 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com água (15 mL), salmoura (15 mL), secada em sulfato de sódio anidro e concentrada à pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 1 % de isopropanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como o eluente para dar o composto título, (+)-trans -2-(2-cloro fenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil)-l-metilpirrolidin-3-il)-7-(2- metóxi etoximetoxi)-cromen-4-ona. Rendimento: 0,43 g (38,7 %);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 12,84 (s, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,50 (m, 3H), 6,62 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,30 (q, 1H), 3,85 (m, 3H), 3,59 (m, 4H), 3,37 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 2,96 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,39 (m, 1H), 2,24 (m, 1H); MS (ES+): 490 (M+l). Exemplo 87:
gliconato de (+)-íra«5-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil)-1 -metilpinOlidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)- cromen-4-ona
A uma solução do composto do exemplo (86)(0,55 g, 1,12 mmol) em metanol (5 mL), ácido (+)-glicônico (0,22 g, 1,12 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. O solvente foi removido à pressão reduzida para dar o sal, gliconato de (+)-írara-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil)-1 -metilpirrolidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)- cromen-4-ona.
Rendimento: 0,77 g (100 %); IR (KBr): 3385, 1656, 1606 cm
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,62 (d, 1H), 7,54 (m, 3H), 6,74 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,29 (m, 1H), 4,07 (s, 2H), 3,76 (m, 13 H), 3,34 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 2,38 (m, 2H); MS (ES+): 490 (M+l)+, base livre; [oc]D25: +15,33° (c = 0,6, metanol). Exemplo 88:
cloridrato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e agitado. A esta mistura HCl etéreo foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal, cloridrato de {+)-trans-2-(2- clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7- dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 50 mg (93 %); IR (KBr): 3421, 1647, 1599, 1471 cm'1;
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,95 (d, 1H), 7,56 (m, 3H), 6,76 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 4,36 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,82 (m, 2H), 3,68 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,36 (m, 2H); MS (ES+): m/z 430 (M+l), base livre; [a]D25: +3,76° (c = 0,28, metanol) Exemplo 89:
citrato de (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol ( 2 mL) e agitado. A esta mistura ácido cítrico (23 mg, 0,12 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal título, citrato de (+)-írafts-2-(2-cloro-fenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 73 mg (100 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,79 (d, 1H), 7,57 (m, 3H), 6,77 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 3,98 (m, 2H), 3,69 (m, 2H), 3,31 (m, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,76 (m, 4H), 2,29 (m, 2H). Exemplo 90:
tartarato de (+)-íra^5-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e agitado. A esta mistura ácido tartárico (17 mg, 0,113 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal, tartarato de (+)-/raw^-2-(2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-
metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 7 mg (100 %); 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,76 (d, 1H), 7,57 (m, 3H), 6,75 (s, 1H), 6,46 (s, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,08 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 3,77 (m, 1H), 3,49 (m, 3H), 3,31 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,78 (s, 3H), 2,26 (m, 2H);
MS (ES+): m/z 430 (M), base livre; [oc]D25: +5,35° (c = 0,21, metanol) Exemplo 91:
glutamato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol ( 2 mL) e agitado. A esta mistura ácido glutâmico (17 mg, 0,115 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal, glutamato de (+)-/ra^-2-(2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-
metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 67 mg (100 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,79 (d, 1H), 7,57 (m, 3H), 6,77 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,41 (m, 4H), 4,10 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 3,98 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 3,69 (m, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,38 (m, 2H). Exemplo 92:
maleato de (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol ( 2 mL) e agitado. A esta mistura ácido maléico (14 mg, 0,116 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal, maleato de (+)-íra«s-2-(2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 5 mg (78 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,78 (d, 1H), 7,62 (d, 1H), 7,56 (t, 1H), 7,49 (t, 1H), 6,76 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 6,25 (s, 2H), 4,35 (m, JOH
1Η), 4,09 (s, 3Η), 4,01 (s, 3Η), 3,83 (m, 2Η), 3,69 (m, 1Η), 3,56 (m, 1Η), 3,32 (m, 1Η), 2,95 (s, 3Η), 2,41 (m, 1Η), 2,28 (m, 1Η). Exemplo 93:
nitrato de (+)-írawj-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona
O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol ( 2 mL) e agitado. A esta mistura ácido nítrico (7,1 mg, 0,113 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal título, nitrato de (+)-trans-2-(2- 1 o clorofenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona. Rendimento: 57 mg (99 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,79 (d, 1H), 7,53 (m, 3H), 6,77 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 3,86 (m, 2H), 3,74 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,32 (m, 1H). Exemplo 94:
acetato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol (2 mL) e agitado. A esta mistura ácido acético (7 mg, 0,11 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal título, acetato de (+)-írara-2-(2-clorofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 56 mg (100 %);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,79 (d, 1H), 7,57 (m, 3H), 6,77 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,17 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 3,98 (m, 1H), 3,86 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,31 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,30 (m, 1H); [a]D25: +2,85° (c = 0,14, metanol). Exemplo 95:
gliconato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona O composto do exemplo (8) (50 mg, 0,116 mmol) foi suspendido em metanol (2mL) e agitado. A esta mistura ácido glicônico (21 ;ο3
r
mg, 0,11 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada e evaporada para dar o sal, gliconato de (+Hr<ms-2-(2-clorofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metilpiirolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona. Rendimento: 71 mg (100 %); IR (KBr): 3445,1648, 1560 cm-1;
1H NMR (CD3OD5 300MHz): δ 7,61 (d, 1H), 7,59 (m, 3H), 6,76 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 4,75 (m, 2H), 4,09 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,70 (m, 9H), 3,30 (m, 1H), 2,89 (s, 3H), 2,34 (m, 2H); MS(ES+): m/z 430 (M+l), base livre; [a]D25: +2,85° (c = 0,14, metanol);
Análise: (C29H36ClN12O-H2O) C 54,31 (54,08), H 5,90 (5,94), N 2,49 (2,17), Cl 5,62 (5,34), Água 3,30 (2,79). Exemplo 96:
cloridrato de (-)-íra^-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (Este composto é o enantiômero (-)-trans do composto ilustrado no exemplo 10. O enantiômero (-)-trans foi preparado para comparar sua atividade com aquela de seu enantiômero (+)-trans correspondente.)
(A) (+)-trans-[\ -Metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]- metanol
(+)-DBTA (112,7 g, 314,0 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (4) (88,5 g, 314 mmol) seguido da adição de metanol (600 mL). A mistura foi refluxada por minutos, agitada lentamente à temperatura ambiente por 3 horas, o sal cristalizado foi filtrado e secado. Rendimento: 80,5 g (40 %); [a]D25 = +82,1 Io (c = 0,7, metanol). O sal foi agitado com solução aquosa a 10 % de Na2CO3 (255 mL) e EtOAc (200 χ 3 mL) para obter a base livre na camada de EtOAc. A camada de EtOAc foi concentrada para obter o composto título.
Rendimento: 30 g (98,5 %); [a]D25 = +20,2° (c = 0,7, metanol); 1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 6,13 (s, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,79 (s, 9H), 3,57 (dd, 1H), 3,38 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,47 tch f
(m, 1Η), 2,34 (s, 3Η), 2,00 (m, 1Η), 1,93 (m, 1Η).
(B) 3-(3-acetil-2-hidroxi-4,6-dimetoxifenil)-1 -metil pirrolidin-2-il metil éster do ácido (+)-trans-acético
BF3-eterato (36,8 g, 259 mmol) foi adicionado em gotas, com agitação, a 0 °C, em uma atmosfera de N2 a uma solução do composto do exemplo ((96-(A))(14,6 g, 51,9 mmol) em anidrido acético (24,26 mL, 26,2 g, 256 mmol). A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. Ela foi despejada sobre gelo moído (1 kg), basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3 e extraída usando EtOAc (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com salmoura, secado (anidro Na2SO4) e concentrado para dar o composto título. Rendimento: 17,8 g (98 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 6,1 (s, 1H), 4,22 (m, 2H), 4,15 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,82 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 2,28 (m, 2H), 2,01 (s, 3H).
(C) (+)-trans-\ -[2-Hidroxi-3-(2-hidroximetil-l -metilpirrolidin-3- il)-4,6-dimetoxifenil)etanona
A uma solução do composto do exemplo (96-(B)) (17,8 g, 50,7 mmol) em metanol (40 mL) foi adicionada com agitação, à temperatura ambiente, uma solução aquosa a 10 % de NaOH (40 mL). A temperatura da mistura reacional foi aumentada até 50 0C por 45 minutos. Ela foi resfriada para a temperatura ambiente, acidificada usando HCl concentrado e concentrada para remover o metanol. Ela foi basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. O composto título precipitado foi filtrado, lavado com água e secado.
Rendimento: 10,2 g (65 %); p.f.: 173-174 °C; [a]D25 = + 4,12° (c = 0,7, metanol);
1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 5,96 (s, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,91 (s 3H), 3,90 (s, 3H), 3,58 (dd, 1H), 3,42 (d, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,62 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,00 (m, 2H); MS (ES+): m/z 310 (M+l). (D) (-)-íra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin- iOÓ
3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona
Hidreto de sódio (50 %, 0,54 g, 11,25 mmol) foi adicionado aos poucos a uma solução do composto do exemplo (96-(C )) (0,7g, 2,2 mmol) em DMF seca (15 mL) a 0 °C, em uma atmosfera de nitrogênio e com agitação. Depois de 10 minutos, metil 2- clorobenzoato (1,15 g, 6,75 mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada a 25 0C por 2 horas. Metanol foi adicionado com cautela abaixo de 20 °C. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g), acidificada com 1:1 HCl (pH 2) e extraída usando EtOAc (2 χ 100 mL). A camada aquosa foi basificada usando Na2CO3 saturado (pH 10) e extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). A camada orgânica foi secada (Na2SO4 anidro) e concentrada. Ao resíduo, HCl concentrado (25 mL) foi adicionado e agitado à temperatura ambiente por 2 horas. A mistura reacional foi despejada sobre gelo moído (300 g) e basificada usando uma solução aquosa saturada de Na2CO3. A mistura foi extraída usando CHCl3 (3 χ 200 mL). O extrato orgânico foi lavado com água, secado (Na2SO4 anidro) e concentrado para obter o composto título. Rendimento: 0,625 g (65%); p.f.: 95 - 97 °C; IR (KBr): 3431, 1648, 1598,1571 cm"1; [a]D25 = - 4,95° (c = 0,7, metanol); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 7,70 (dd, 1H), 7,68 (m, 3H), 6,50 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 3,66 (dd, 1H), 3,37 (d, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,77 (d, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,05 (m, 2H); MS (ES+): m/z 430 (M+l). (E) (-)-írara-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 - metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
Cloridrato de piridina derretido (2 g, 17,3 mmol) foi adicionado ao composto do exemplo (96-(D)) (0,2 g, 0,46 mmol) e aquecido a 180 0C por 1,5 hora. A mistura reacional foi resfriada para 25 °C, diluída com MeOH (10 mL) e basificada usando Na2CO3 até pH 10. A mistura foi filtrada e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi suspendido em água (5 mL), agitado por 30 minutos, filtrado e secado para obter o composto título. Rendimento: 0,125 g (67,6 %); p.f.: 228 - 230 °C; IR (KBr): 3422, 3135, 1664, 1623, 1559 cm"1; MS (ES+): m/z 402 (M+l); Análise: C2iH2oClN05,0,5 H2O C, 61,81 (61,33); H, 4,62 (5,00); N, 3,75 (3,33); Cl, 8,47 (8,45). (F) cloridrato de (-)-^ara-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona O composto do exemplo (96-(E)) (4,09 g, 10,18 mmol) foi suspendido em IPA (5 mL) e HCl a 3,5 % (25 mL) foi adicionado. A suspensão foi aquecida para obter uma solução límpida. A solução foi resfriada e o sólido foi filtrado para obter o composto título. Rendimento: 4,47g (99 %); p.f.: 180 - 184 °C; [a]D25 - -20,2° (c = 0,4, metanol);
1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 7,80 (d, 1H), 7,60 (m, 3H), 6,54 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,89 (m, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,59 (dd, 1H), 3,38 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,51 (m, 1H), 2,30 (m, 1H); MS (ES+): m/z 402 (M - 36,5); Análise: C2IH2ICl2NO5 C, 57,2 (57,55); H, 4,92 (4,83); N, 2,98 (3,20); Cl, 15,74 (16,18). Exemplo 97:
cloridrato de (-)-trans-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-
cromen-4-ona
(Este composto é o enantiômero (-)-trans do composto ilustrado no exemplo 50. O enantiômero (-)-trans foi preparado para comparar sua atividade com aquela de seu enantiômero {+)-trans correspondente)
(A). 2-(2-acetoximetil-l -metil pirrolidin-3-il)-6-acetil- 3,5-dimetoxifenil éster do ácido {-)-trans-2-C\oxo-^-mivo- benzóico
r
Acido 2-Cloro-4-nitrobenzóico (3,55 g, 17 mmol) e cloreto de tionil (2 mL) foram juntos aquecidos a 85 0C por 3 horas. O excesso de cloreto de tionil foi evaporado à pressão reduzida e o resíduo foi secado a vácuo e dissolvido em THF (50 mL). Este foi adicionado em gotas a uma solução do composto do exemplo (96- (B))(4 g, 11 mmol) e trietilamina (15 mL, 108 mmol) em THF jdf
Ψ
(100 mL) mantida a 15 - 20 °C. A mistura reacional foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e foi agitada por 12 horas. Ao final de 12 horas, a mistura reacional foi concentrada para remover o THF, acidificada com HCl diluído, basificada com solução a 10 % de NaHCO3 até pH 10, extraída com EtOAc (3 χ IOOmL), lavada com água (50 mL), salmoura (50 mL) e a camada orgânica foi secada em anidro Na2SO4. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida para dar o composto título como um óleo que foi utilizado como tal para outra reação sem purificação.
Rendimento: 1,62 g (25 %); 1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8,35 (d, 1H), 8,25 (m, 2H), 6,45 (s, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,94 (s, 6H), 3,59 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,46 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,17 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,83 (s, 3H); MS (ES+): m/z 535 (M+l). (B). (-)-íra^^-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-hidroximetil- l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona A uma solução de n-BuLi (15 % em hexano, 2,54 mL, 5,8mmol) em THF (25 mL), mantida a 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio, hexametildissilazano (1,25 mL, 5,8 mmol) foi adicionado em gotas e agitado por 15 minutos. A esta mistura, uma solução de 2-(2- acetoximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-6-acetil-3,5- dimetoxi-fenil éster do ácido (-)-trans-2-cloro-4-nitro- benzóico (1,6 g, 3 mmol) em THF (25 mL) foi adicionada em gotas, mantendo a temperatura a 0 °C. Depois da adição, a reação foi deixada esquentar até a temperatura ambiente e agitada por 2,5 horas. A mistura reacional foi acidificada com HCl diluído, basificada com solução a 10 % de NaHCO3 até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (25 mL), salmoura (25 mL), secada em Na2SO4 anidro. A camada orgânica foi concentrada à pressão reduzida e a vácuo para dar 3-{3-[3-(2-cloro-4- nitro fenil)-3-oxopropionil]-2-hidroxi-4,6-dimetoxifenil}- l-metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido acético como um sólido amarelo (1,6 g). Este éster foi dissolvido em HCl concentrado (16 mL) e agitado à temperatura ambiente por 3 horas para efetuar a ciclização. Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi basificada com NaHCO3 sólido até pH 8 a 9. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (3 χ 50 mL) e lavada com água (25 mL) e salmoura (25 mL). A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, concentrada à pressão reduzida e secada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com 3 % de metanol em clorofórmio e 0,1 % de amônia como eluente para dar o composto título como um sólido amarelo.
Rendimento: 0,71 g (50 %); IR (KBr): 3447, 1648, 1600, 1570 cm' 1J 1H NMR (CDCl3): δ 8,37 (d, 1H), 8,26 (dd, 1H), 8,09 (d, 1H), 6,67 (s, 1H), 6,46 (s, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 2,62 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,04 (m, 2H); MS (ES+): m/z 475 (M+l).
(C) (-)-írflr«j-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona
Uma mistura de (-)-íra^5-2-(2-cloro-4-nitrofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- 4-ona (0,4 g, 0,8 mmol), cloridrato de piridina (0,48 g, 4,1 mmol) e uma quantidade catalítica de quinolina foi aquecida a 180 0C por um período de 2 horas. A mistura reacional foi resfriada e diluída com metanol (50 mL) e basificada com Na2CO3 sólido até pH 10. A mistura reacional foi filtrada, e lavada com metanol. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna usando 0,1 % de amônia e 3 % de metanol em clorofórmio como eluente para dar o composto título como um sólido amarelo. Rendimento: 0,24 g (65 %); MS (ES+): m/z 447 (M+l)
(D), cloridrato de (-)-íraws-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona
(-)-^"5-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona (0,2 g, 0,4 mmol) foi suspendido em metanol (10 mL) e tratado com HCl etéreo e o solvente orgânico foi evaporado para dar o sal título.
Rendimento: 0,18 g (85 %); 1H NMR (CD3OD, 300MHz): δ 8,51 (d, 1H), 8,36 (dd, 1H), 8,09 (d, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,32 (m, 1H); MS (ES+): m/z 483 (M+l).
Exemplo 98: (exemplo comparativo: preparado da maneira descrita para o método apresentado no Pedido de Patente US N0 2004/0106581 publicado) (-)-trans-[ 1 -Metil-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirrolidin-2-il]-metanol O composto do exemplo 4 (27,3 g, 97,1 mmol), foi dissolvido em metanol (100 mL) e aquecido até 70 °C. A esta solução quente foi adicionado (+) DBTA (36,51 g, 101,9 mmol) e o aquecimento continuou por 10 minutos. Ela foi concentrada para dar um sólido (63,81 g), que foi cristalizado usando metanol (45 mL) e isopropanol (319 mL). Filtração e uma lavagem com isopropanol com subsequente secagem deu o sal de tartarato cristalino (13,14 g), IXId25 = +55,34°(c = 1,14, metanol). Este produto foi então recristalizado usando metanol (10 mL) e isopropanol (40 mL). Ele foi isolado da maneira descrita acima, rendimento: 9,04 g, [a]D25 = +49,67° (c = 1,248, metanol). A base livre foi obtida a partir deste produto da seguinte maneira.
O sal (9 g) foi suspendido em etil acetato (100 mL). A esta suspensão uma solução aquosa a 5% de NaHCO3 (100 mL) foi adicionada e a mistura foi agitada por 30 minutos. A porção orgânica foi separada e a porção aquosa foi ainda extraída usando etil acetato (2 χ 50 mL). As porções orgânicas foram combinadas e concentradas para obter o composto, (-)-/r<ms-[l-Metil-3-(2,4,6- trimetoxifenil)pirrolidin-2-il]metanol Rendimento: 3,6g (26,3 %). JJO
T
[a]D25 = -17,6° (c = 1,1, metanol).
1H NMR (CDCl3): δ 6,13 (s, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,79 (s, 9H), 3,51 (dd, 1H), 3,38 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,93 (m, 1H). MS (ES+): m/z 282 (M+l).
Este composto foi submetido à HPLC quiral. HPLC quiral foi feita usando a coluna Chiralcel OD-H (250 χ 4,6 mm) e o sistema solvente haxano:etanol (92:08) com TFA (0,4%). Os resultados foram registrados a 264nm com uma taxa de fluxo de solvente de lmL/min. Como representado na figura 2, a HPLC quiral mostrou 88,3% e.e do composto, (-)-/rara-[l-Metil-3-(2,4,6- trimetoxifenil)pirrolidin-2-il]-metanol. Testes biológicos:
A eficácia dos enantiômeros (+)-trans dos compostos de fórmula I na inibição da atividade das quinases ciclina-dependentes pode ser determinada por inúmeros ensaios farmacológicos bastante conhecidos na literatura, tais como os descritos abaixo ou, por exemplo, em Losiewics, M. D., et al. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1994, 201, 589. As quinases, ciclinas, e substratos usados no ensaio de quinase in vitro podem ser proteínas isoladas de células de mamíferos, ou alternativamente, eles podem ser proteínas produzidas de forma recombinante. Os ensaios farmacológicos exemplificados descritos abaixo neste relatório foram efetuados com os compostos da presente invenção e seus sais.
Ensaio de CDK4/Ciclina Dl Ouinase e Ensaio de CDK2/Ciclina E Quinase
Os ensaios medem a fosforilação da proteína de retinoblastoma (Rb) por CDK4 ou CDK2 mediante ativação pela ciclina Dl ou pela ciclina E, respectivamente, através da transferência de (γ 32P)- fosfato de γ P-ATP em ensaio em uma placa-filtro de 96 compartimentos. Materiais:
CDK4 ou CDK2 foi co-expressa com ciclina Dl ou ciclina E, respectivamente, por um sistema de expressão de baculovírus em J4i
r
células de inseto. Para tanto, 1 χ 10 7 células Sf9 foram co- infectadas com baculovírus contendo genes de CDK-4 ou 2 humana e ciclina Dl ou E e depois de 72 horas as células foram lisadas em 500 μΐ de um tampão de Iise (50 mM HEPES (pH 7,5), IOmM MgCl2, ImM DTT, 5 ?g/ml de aprotinina, 5 μg/ml de leupeptina, 0,1 mM NaF, 0,2 mM fluoreto de fenilmetilsulfonil (PMSF), e ortovanadato de sódio. O lisado centrifugado foi purificado em uma coluna de GST-sepharose. A pureza das proteínas foi avaliada por SDS-PAGE seguido de análise da mancha ocidental usando anticorpos específicos (Santacruz Biotec, EUA) para CDK4 ou CDK2.
A proteína de fusão GST-retinoblastoma (Rb) (aa 776-928) é expressa em bactérias E. coli e purificada por cromatografia por afinidade de GSH-Sepharose. O GST-Rb ligado a esses glóbulos serviram de substrato no ensaio. Leitura:
A quantificação foi feita por detecção de cintilação de (32P)-GST- Rb em placas-filtro de 96 compartimentos usando o contador de cintilação de 96 compartimentos Top Count (Packard, EUA). Procedimento:
O ensaio de CDK4 ou CDK2 foi feito no formato de 96 compartimentos usando placas de filtração Millipore Multiscreen. Todas as etapas do ensaio ocorreram em uma única placa-filtro (placas Unifilter, Packard, EUA). Os compartimentos de filtração foram pré-umedecidos com tampão de quinase (100?l/compartimento) e a solução foi então removida por aplicação de vácuo, com a placa-filtro em um tubo de vácuo e o vácuo ligado. 50 μΐ de GST-Rb ligado a glóbulos de GSH- Sepharose em tampão de quinase (0,5 ?g GST-Rb/50 μΐ) foram adicionados a cada compartimento e vácuo foi aplicado para remover o tampão. Mais 25 μΐ de uma mistura reacional contendo ATP (frio + quente) e inibidores de fosfatase diluídos no tampão de quinase foram adicionados a cada compartimento, seguido da adição de composto de teste (4x concentração final tampão de quinase) ou tampão de quinase (controle) em um volume adicional q5
de 25 μΐ. Por fim 50 μΐ (100 ng) da enzima CDK-4/D1 ou CDK- 2/E humana em tampão de quinase foram adicionados a cada compartimento para dar início à reação. A reação foi incubada por minutos a 30°C. Depois de completada a reação, vácuo foi aplicado e a placa foi lavada com tampão de lavagem (tampão TNEN) três vezes. A placa-filtro foi secada ao ar e colocada em uma placa adaptadora Multiscreen. A cada compartimento foram adicionados 30 μΐ de coquetel Packard Microscint -Oea placa foi coberta com um filme Top-Seal A. A placa foi contada em um contador de cintilação Packard Top Count por 10 minutos. Flavopiridol foi usado como inibidor de referência em todas as experiências.
A concentração de composto na qual 50% da atividade de fosfoquinase da CDK4-ciclina Dl e CDK2-ciclina E foram inibidos (IC50) foi calculada para compostos representativos e seus sais farmaceuticamente aceitáveis descritos nos Exemplos. Os resultados estão indicados na Tabela 1.
Tabela 1:
Composto(s) IC50^M) CDK4-CICLINA Dl CDK2-CICLINA E O composto do exemplo 10 0,065 2,8 O composto do exemplo 96- (F) NA 21 O composto do exemplo 50 0,045 1,7 O composto do exemplo 97- (D) 1 >10 Flavopiridol 60 360
Ensaios de proliferação celular e citotoxicidade in vitro:
Foram usadas culturas em desenvolvimento exponencial de dez linhagens de células cancerosas humanas (pulmão Calul, pulmão A-549, cólon HT-29, leucemia promielocítica HL-60, próstata PC-3, pulmão H-460, mama MDA-MB-231, mama MCF-7, cérvice HeLa, cólon Colo-205, linfoma H9 (células T), linfoma histiocítico (monócitos) U-937 e cólon CaCO-2) do NCCS, Pune, índia. Os ensaios de proliferação celular in vitro (NCI, protocolo dos EUA) e citotoxicidade foram realizados usando procedimentos tradicionais, a saber, ensaio de absorção de 3H-timidina e ensaio de MTS, respectivamente (para absorção de 3H-timidina: Cell Biology, A Laboratory Handbook, 1998, Vol. 1 Ed Julio E. Celis, e para o ensaio MTS: Promega Protocol, USA, 2000). No ensaio de absorção de 3H-timidina, as células foram coletadas depois de 72 horas nas placas unifiltro GF/B (Packard, EUA) usando uma ceifadeira Packard Filtermate Universal e as placas foram contadas em um contador de cintilação líquida de 96 compartimentos Packard TopCount. A concentração do composto na qual 50% da atividade proliferativa foram inibidor (IC50) e o grau de toxicidade do composto foram calculados para compostos representativos e seus sais farmaceuticamente aceitáveis descritos nos Exemplos. Os resultados estão indicados na Tabela 2 abaixo.
Tabela 2:
Composto(s) Ensaio de timidina (IC50 μΜ) Citotoxocidade de MTS (IC50 μΜ) Calul (Pulmã o) A-549 (Pulmã o) HT-29 (Cólon) Calul (Pulmã o) A-549 (Pulmã o) HT-29 (Cólon) O composto do exemplo 10 <0,3 0,18 0,68 0,88 0,7 0,58 O composto do exemplo 96-(F) *NA 10 25 M 16,3 16 17,9 O composto do exemplo 50 <0,3 1,2 1,5 1,4 1,2 1,1 tf
O composto ND *NA 10 ND *NA *NA do exemplo 91-(O)
* Não foi observada inibição estatisticamente significativa
NA - Não ativo ND - Não realizado Os resultados indicam que o enantiômero {+)-trans dos compostos de fórmula (I) é um inibidor mais potente que seu enantiômero (-)-trans. Por conseguinte, a administração do enantiômero (+)-trans dos compostos de fórmula (I) substancialmente livres do enantiômero (-)- trans proporciona uma redução da dose requerida da droga.

Claims (18)

1. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro representado pela fórmula (I) a seguir ou um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente (D onde, Ri é fenil, que é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, CrC4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, C1-C4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil, C1-C4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6 e SR7; ou é um heterociclo, que é um anel saturado, parcialmente insaturado ou aromático contendo cinco ou seis átomos no anel dos quais 1, 2 ou 3 são heteroátomos iguais ou diferentes selecionados de: nitrogênio, oxigênio e enxofre, e onde o heterociclo é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, Ci-C4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, CrC4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil, CrC4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6eSR7; onde R5 e R6 são cada um independentemente selecionados de: hidrogênio, CrC4-alquil, CrC4-alcoxicarbonil, CrC4- alquilcarbonil, aril; ou R5 e R6 junto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados podem formar um anel de cinco ou seis membros que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional; e R7 é selecionado de hidrogênio, CrC4-alquil, aril e SR]0onde R10 é selecionado de C]-C4-alquil ou aril; R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8; onde R8 é CrCi0-alquil substituído ou não-substituído, CrC4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído; R4 é CrC4_alquilenohidroxil; e R9 é hidrogênio ou Ci-C4 -alquil.
2. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro de fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, ou um metabólito, pró-droga, sal farmaceuticamente aceitável, solvato farmaceuticamente aceitável ou polimorfo do mesmo; onde : Ri é fenil, que é não-substituído ou substituído com 1, 2, ou 3 substituintes iguais ou diferentes selecionados de: halogênio, nitro, ciano, Ci-C4-alquil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, CrC4- alcóxi, hidroxil, carbóxi, CrC4-alcoxicarbonil, CrC4- alquilenohidroxil, CONH2, CONR5R6, SO2NR5R6, cicloalquil, NR5R6 e SR7; onde R5 e R6 são cada um independentemente selecionados de: hidrogênio, C]-C4-alquil, CrC4-alcoxicarbonil, CrC4- alquilcarbonil, aril; ou R5 e R6 junto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados podem formar um anel de cinco ou seis membros que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional; e R7 é selecionado de hidrogênio, CrC4-alquil, aril e SRi0 onde R]0 é selecionado de CrC4_alquil ou aril; R2 e R3 são hidróxi ou OR8; onde R8 é igual ou diferente para R2 e R3 e é selecionado de: CrCi0-alquil substituído ou não- substituído, CrC4-alcanoil, aroil substituído ou não-substituído ; e R9 é C1-C4 -alquil.
3. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, ou a sal farmaceuticamente aceitável ou pró-droga do mesmo selecionado de: (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3- il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íraw-2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-1 - metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-/rara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil- 1 -metilpirrolidin-3 -il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-/rara-2-(2-Cloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-/rara-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil-1 -metil- pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; metano sulfonato de (+)-írara-2-(2-Bromo-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-/rúf«5-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-8-(2-hidroximetil- -1-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-ír«^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-/ra^^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; metano sulfonato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; citrato de (+)-/ra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; tartarato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; maleato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; acetato de (+)-/rara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; sulfato de (+)-íra^-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; nitrato de (+)-írara-2-(2,4-Dicloro-5-fluorfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-ír<3^^-2-(2,4-Diclorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-ír^-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írtffts-2-(2,4-Diclorofenil)-5,7-dihidroxi- -8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-^a^-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írtffts-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írtfft,s-2-(4-Bromo-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-/ra^5-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra7?s-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- -4-ona; (+)-/r«/7^-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írafts-2-(2-Cloro-4-cianofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-íra^^-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)-8-(2- hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi- cromen-4-ona; (+)-ír«/7>s'-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)-5,7-dihidroxi-8- (2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-ír<3^5-2-(2-Cloro-4-trifluormetilfenil)- -5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil-pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-íra«5-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^5-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- -4-ona; gliconato de (+)-írawj-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íra«j-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-ír<3^^-2-(2-Cloro-4-nitrofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-Z;ra^>s-2-(4-Amino-2-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-íram-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metil-pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra/M-2-(4-Amino-2-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íram-2-(2-Cloro-4-metilaminofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; (+)-íraws-2-(2-Cloro-4-pim)lidin-1 -il-fenil)-8-(2-hidroximetil-1 - metil pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írafts-2-(2-Cloro-4-pirrolidin-l-il-fenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-/raws-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)-8-(2- hidroximetil-1 -metil pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen- 4-ona; (+)-^αλ2^-2-(2-01θΓθ-4-ί8ορΓορί^ηιίηοί6ηϋ)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^^-2-(2-Cloro-4-isopropilaminofenil)- 5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-rr««5-2-(2,4-Dibromofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-írara-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l- metil pirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^-2-(2,4-Dibromofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metil pirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-íra/75-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metil-pirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; (+)-/rúf^-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-(2- hidroximetil- l-metilpirrolidin-3-il)-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írúf^.s-2-(2-Bromo-4-clorofenil)-5,7- dihidroxi-8-(2-hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)- cromen-4-ona; (+)-íra«5-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil-1 - metilpinOlidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona; cloridrato de (+)-íra^-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-1 -metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona; gliconato de (+)-íraw-2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil-l-metilpirrolidin-3-il)-7-metoxi-cromen-4-ona; (+)-trans -2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2-hidroximetil)-1 -metil- pirrolidin-3-il)-7-(2-metoxietoximetoxi)-cromen-4-ona; gliconato de (+)-trans -2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-8-(2- hidroximetil)-1 -metil pirrolidin-3-il)-7-(2-metoxi-etoximetoxi)- cromen-4-ona; cloridrato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; citrato de (+)-íram-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; tartarato de (+)-rrara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; glutamato de (+)-íraw-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; maleato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; nitrato de (+)-/ra^-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; acetato de (+)-íraw-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; gliconato de (+)-írara-2-(2-Clorofenil)-8-(2-hidroximetil-l- metilpirrolidin-3-il)-5,7-dimetoxi-cromen-4-ona; -3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]- -1-metil-pirrolidin-2-ilmetil éster do ácido {+)-trans- acético; cloridrato de 3-[2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-4-oxo-4H-cromen- -8-il]-l-metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido {+)-trans-acético; -8-(2-acetoximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-4-oxo- -4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-ír<m?-acético; -8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)-5-hidroxi-4- oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-trans-benzóico; cloridrato de 8-(2-benzoiloximetilpirrolidin-3-il)-2-(2-cloro fenil)- -5-hidroxi-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido {+)-trans- benzóico; -2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-8-(l-metil-2-octanoiloximetilpirrolidin- -3-il)-4-oxo-4H-cromen-7-il éster do ácido (+)-íra^-octanóico; -3-[2-(2-Clorofenil)-5-hidroxi-7-metoxi-4-oxo-4H-cromen-8-il]-l- metilpirrolidin-2-ilmetil éster do ácido (+)-trans-acético; e -3-[2-(2-clorofenil)-5-hidroxi-7-(2-metóxi etoximetoxi)-4-oxo-4H- acético.
4. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro resolvido representado pela fórmula (VIA), <formula>formula see original document page 113</formula> onde R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8, onde R8 é CrCi0-alquil substituído ou não-substituído, Ci-C4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído; R4 é -CrC4_alquilenohidroxil; e R9 é hidrogênio ou CrC4 -alquil.
5. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro resolvido representado pela fórmula (V1IA), <formula>formula see original document page 113</formula> onde R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8, onde R8 é CrCi0-alquil substituído ou não-substituído, Ci-C4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído; R4 é CH2OC(O)CH3; e R9 é hidrogênio ou CrC4 -alquil.
6. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro resolvido representado pela fórmula (V1IIA), <formula>formula see original document page 114</formula> onde R1 é como definido na reivindicação 1 acima; R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8, onde R8 é CrCi0-alquil substituído ou não-substituído, CrC4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído; R4 é CH2OC(O)CH3; e R9 é hidrogênio ou Ci-C4 -alquil.
7. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro resolvido representado pela fórmula (IXA), <formula>formula see original document page 114</formula> onde Ri é como definido na reivindicação 1 acima; R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8, onde R8 é CrC10-alquil substituído ou não-substituído, Ci-C4-alcanoil, aroil substituído ou não- substituído; R4 é CH2OC(O)CH3; e R9 é hidrogênio ou C1-C4 -alquil.
8. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um composto enantiomericamente puro resolvido representado pela fórmula (XA), <formula>formula see original document page 115</formula> onde Ri é como definido na reivindicação 1 acima; R2 e R3 são cada um independentemente selecionados de : halogênio, hidroxil e OR8, R8 é CrCi0-alquil substituído ou não- substituído, CrC4-alcanoil, aroil substituído ou não-substituído; R4 é CH2OH; e R9 é hidrogênio ou CrC4 -alquil.
9. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um processo para a preparação de um composto enantiomericamente puro da fórmula (VIA) de acordo com a reivindicação 4, compreendendo reagir um racemato do composto da fórmula (VIA) com um auxiliar quiral na presença de um solvente simples para obter uma mistura de sais diastereoméricos dos enantiômeros (+)- e (-)-trans de um composto da fórmula (VIA), separar os respectivos sais diastereoméricos e tratar o sal diastereomérico do enantiômero (-)-trans com uma base.
10. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação", de acordo com a reivindicação 9, caracterizado onde o auxiliar quiral é selecionado de: ácido (-)- dibenzoil tartárico ((-)-DBTA), ácido (+)-dibutil tartárico, ácido (-)-dibutil tartárico , ácido (+)-cetopínico, ácido (-)-cetopínico , ácido (+)-cânfora-10-sulfônico , ácido (-)-cânfora-lO-sulfônico , ácido (+)canfórico e ácido (-)-canfórico .
11. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação", de acordo com a reivindicação 10, caracterizado onde o auxiliar quiral é ácido (-) -dibenzoil tartárico ((-)-DBTA).
12. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação", de acordo com qualquer uma das reivindicações 9, 10 ou 11, caracterizado onde o solvente é selecionado de: metanol, isopropanol, diisopropil éter, etil acetato e clorofórmio.
13. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação", de acordo com a reivindicação 12, caracterizado onde o solvente é metanol.
14. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um processo para a preparação do enantiômero {+)-trans enantiomericamente puro de um composto de fórmula (II) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, que compreende as etapas de: (a) tratar o enantiômero (-)-trans enantiomericamente puro resolvido de um composto representado pela fórmula (VIA): <formula>formula see original document page 117</formula> onde R2, R3 R4 e R9 são como definidos na reivindicação 4, com anidrido acético na presença de um catalisador do tipo ácido de Lewis selecionado de: dietil eterato de trifluoreto de boro, cloreto de zinco, cloreto de alumínio e cloreto de titânio; para obter um composto acetilado resolvido de fórmula (VIIA), <formula>formula see original document page 117</formula> onde R2, R3 e R9 são como definidos e R4 é CH2OC(O)CH3; (b) reagir o composto acetilado resolvido de fórmula (VIIA) da etapa (a) com um ácido de fórmula RiCOOH ou um cloreto de ácido de fórmula RiCOCl ou um anidrido de ácido de fórmula (RjCO)2O ou um éster de fórmula RiCOOCH3, onde Ri é como definido acima, na presença de uma base e um solvente para obter um composto de fórmula (VIIIA); <formula>formula see original document page 117</formula> onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima e R4 é CH2OC(O)CH3 ; (c) tratar o composto resolvido de fórmula (VIIIA) com uma base selecionada de: hexametildissilazida de lítio, hexametildissilazida de sódio, hexametildissilazida de potássio, hidreto de sódio e hidreto de potássio; para obter o composto de β-dicetona resolvido correspondente de fórmula (IXA); <formula>formula see original document page 118</formula> onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima e R4 é CH2OC(O)CH3 ; (d) tratar o composto de β-dicetona de fórmula (IXA) com um ácido para obter o composto ciclizado resolvido correspondente de fórmula (XA), <formula>formula see original document page 118</formula> onde R1, R2, R3 e R9 são como definidos acima, R4 é CH2OH; (e) tratar o composto resolvido de fórmula (XA) com um agente desalquilante selecionado de: cloridrato de piridina, tribrometo de boro, eterato de trifluoreto de boro e tricloreto de alumínio para efetuar a desalquilação a uma temperatura variando de 120 -180 0C para obter o enantiômero (+)-trans enantiomericamente puro do composto de fórmula (I).
15. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser uma composição farmacêutica para o tratamento de câncer, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do enantiômero (+)-trans- de um composto de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um carreador farmaceuticamente aceitável e, opcionalmente, um aditivo.
16. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, compreendendo ainda pelo menos um outro agente antiproliferativo selecionado de agentes citotóxicos ou anticâncer.
17. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um método para o tratamento de câncer em um mamífero que compreende administrar ao referido mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz do enantiômero (+)-trans de um composto de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou a sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
18. "Derivados de Flavona Enantiomericamente Puros para o Tratamento de Distúrbios Proliferativos e Processos para sua Preparação" caracterizado por ser um método, de acordo com a reivindicação 17, onde o enantiômero (+)-trans de um composto de fórmula (I), ou a sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é administrado em seqüência ou simultaneamente com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um outro agente antiproliferativo selecionado de agentes citotóxicos ou anticâncer.
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