BR122024007163A2 - Uso de cbd ou uma composição do mesmo - Google Patents

Abstract

A presente invenção está direcionada ao uso de canabidiol e composições do mesmo como um agente antibacteriano contra bactérias resistentes a multi-fármacos, tais como Pseudomonas aeruginosa.

Description

Campo da invenção

[001] A presente invenção refere-se ao campo de agentes antibacterianos. Em particular, a invenção refere-se ao uso de composições de canabinoide como agente bacteriano contra bactérias resistentes a múltiplos fármacos.

Fundamentos da invenção

[002] A biopelícula é uma comunidade microbiana estruturada que é uma forma de ocorrência natural de desenvolvimento de muitos microorganismos. A formação de biopelícula é frequentemente um processo muito rápido, que inclui diversas fases e envolve o condicionamento da superfície do carregador para permitir a ligação inicial das células à superfície de carregador através da interação físico-química, produção de moléculas de ligação (por exemplo, substâncias poliméricas extracelulares, adesinas) para ancorar irreversivelmente as células na superfície de carregador, organizar a comunidade celular na forma de microcolônias e formação e maturação da arquitetura de biopelícula (Masák et al., 2014, FEMS Microbiol. Ecol., 89: 1-14). Aquelas etapas implicam mudanças significantes na fisiologia das células que, frequentemente, levam às mudanças no fenótipo celular, o desenvolvimento de novos caminhos metabólicos e a expressão de fatores de virulência. O desenvolvimento de tais mudanças de uma maneira unificada e coordenada entre as células dentro da colônia é atingido através de caminhos de sinalização entre as células. Nas pseudomonas, e, em particular, um patogênio humano de bactéria gram-negativa humana, Pseudomonas aeruginosa, que está envolvido em infecções nosocomiais e que ameaçam a vida de pacientes imunossuprimidos, esta comunicação célula a célula é realizada através de um sistema de comunicação quimicamente fundamentado denominado Sensibilização de Quórum (QS). QS foi mostrado ser essencial para controlar a defesa de hospedeiro inicial e o lançamento da ofensiva virulenta do hospedeiro através da coordenação da expressão oportuna de uma bateria de fatores de virulência com o desenvolvimento da colônia e, portanto, desenvolvimento da colônia e, portanto, com a formação de processo de biopelícula (Masák et al., 2014, supra; Juhas et al., 2005, Environmental Microbiology, 7(4): 459-471). Além disso, na espécie de Pseudomonas, o desenvolvimento de biopelícula, geralmente, aumenta sua resistência a várias influências ambientais negativas, visto que é menos ativa dentro da biopelícula e, em consequência, me nos receptiva a agentes antimicrobianos e interrupções ambientais. Além disso, as biopelículas formam uma barreira física contra a entrada de agentes antimicrobianos. Portanto, esta resistência aumentada permite-os habitar uma faixa ampla de nichos e colonizar a matriz de solo e tecido vegetal, etc. (Masák et al., 2014, supra; Rybtke et al., 2015, J. Mol. Biol. 427: 3628-3645).

[003] As infecções causadas por biopelículas bacterianas de bactérias resistentes a multi-fármacos (MDR), também denominadas infecções nosocomiais, têm se tornado preocupação principal para a maioria dos hospitais e instalações de cuidado com a saúde, visto que estas contribuem para um aumento na morbidez e mortalidade em comparação com doenças subjacentes sozinhas e impactam a duração de permanência dos pacientes e custos de cuidados com a saúde relacionados.

[004] As biopelículas foram mostradas ser a causa subjacente de muitas infecções associadas cm tecido e infecções associadas com implante (Rybtke et al., 2015, supra), tais como infecções dentais e bucais, tais como cáries dentais, periodontite, infecções otorrinolaringológicas, tais como otite, em particular, otite crônica média (COM) e sinusite crônica, infecções respiratórias, tais como fibrose cística (CF) e pneumonia, especialmente pneumonia em pacientes mecanicamente ventilados, infecção de pele, tais como infecções crônicas por ferimento, infecções musculoesqueletais, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecção do trato biliar, endocardite de válvula natural, infecções oportunistas em pacientes imunossuprimidos, tais como pacientes com câncer (Markou et al., 2014, Frontiers in Cellular and infection microbiology, 3(115), 1-5) e uma faixa de infecções relacionadas com dispositivo médico. O tratamento de infecções produzidas por P. aeruginosaé complicado pelo perfil de resistência do organismo e pode levar à falha do tratamento e/ou exposição dos pacientes a efeitos adversos de regimes de fármaco antibiótico. As medicações correntes para prevenir e tratar aquelas infecções nosocomiais são antibioterapia extensiva que, entretanto, desenvolvem-se frequentemente em infecções letais devido à alta resistência alta das bactérias a muitos antibióticos e sua proteção por biopelículas que as protegem da ação tanto dos fármacos quanto do sistema imune. Especificamente, as infecções fulminantes agudas, tais como pneumonia bacteriêmica, septicemia, queimaduras, infecções por ferimento e meningite estão associadas com mortalidade extremamente alta.

[005] Além disso, a formação bacteriana de biopelícula constitui um problema na contaminação de alimentos e de formulação cosmética (Wong et al., 2000, Journal of Food Protection, 8, 1015-1153), degradação de obra de arte, contaminação de água (Barbeau et al., 1996, Appl. Environ. Microbiol., 62(11), 3954-3959) e contaminação de dispositivos médicos (File et al., 1995, 16(7), 417-418).

[006] Vários métodos oram desenvolvidos para regular/suprimir a biopelícula de Pseudomonas e formação da mesma, que pode ou pode não incluir a interferência com os mecanismos reguladores de formação de biopelícula. A sensibilização de quórum, devido a seu envolvimento na expressão de diversos fatores de virulência e formação de biopelícula em P. aeruginosa foi um alvo atrativo para o projeto de novos fármacos para o tratamento de infecções por P. aeruginosa (Juhas et al., 2005, supra). Algumas substâncias foram apresentadas como sendo capazes de interferir com o mecanismo de sensibilização de quórum (QS) tais como extratos aquosos de ruibarbo, Fructus Gardeniae e Andrographis paniculata,ácido cis-2-Dodecenóico, alho, outros extratos aquosos de frutos comuns, ervas e especiarias, resveratrol, eritromicina, azitromicina, claritromicina e espiramicina (Masák et al., 2014, supra). Entretanto, nenhum dos inibidores de sensibilização de quórum correntemente desenvolvidos em uma utilização universal e pode requerer um método apropriado dependendo do local onde a biopelícula é formada (Masák et al., 2014, supra).

[007] O canabidiol (CBD) é um tipo de canabinoide observado como um constituinte principal da planta canabis, especialmente Canabis sativa (Asthton, 2001, British Journal of Psychiatry, 178, 101-106). O CBD foi descrito como uma substância não psicoativa tendo aplicações médicas potenciais no tratamento de distúrbios, tais como epilepsia, espasmos de esclerose múltipla, distúrbios de ansiedade, esquizofrenia, náusea, convulsão e inflamação, bem como inibição do desenvolvimento de célula cancerígena. CBD, pré-CBD bem como o CBD anormal sintético (abn-CBD) foi descrito como tendo atividade contra uma variedade de cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (MRSA) (Appendino et al., 2008, J. Nat. Prod., 71: 1427-1430).

[008] Devido à gravidade de infecções e contaminações devido às bactérias Gram-negativas, tais como P. aeruginosa, a resistência crescente daquelas bactérias às medicações antibióticas correntes e o risco de alguns pacientes pegarem tais infecções, deve ser altamente desejável ter novos métodos para evitar e tratar infecções relacionadas com bactérias Gram- negativas, tais como infecções nosocomiais.

Sumário da invenção

[009] A presente invenção refere-se à descoberta inesperada que o canabidiol (CBD) é ativo contra bactérias resistentes a fármacos múltiplos bactérias Gram-negativas, bactérias P. aeruginosa e, desta maneira, podem ser úteis para prevenir ou diminuir a extensão da virulência destas bactérias, por exemplo, pela inibição da formação de biopelícula e pela produção de fatores de virulência. Portanto, o CBD pode prover um agente efetivo para a prevenção e/ou tratamento de infecções ou contaminações causadas por bactérias resistentes a fármacos múltiplos que formam biopelícula bacteriana.

[0010] Um aspecto da invenção provê CBD ou uma composição do mesmo para o uso como um agente antibacteriano seletivo contra P. aeruginosa, em particular como um inibidor de formação de biopelícula pelas ditas bactérias.

[0011] Um outro aspecto da invenção refere-se ao CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento de uma doença causada por bactérias P. aeruginosa, em particular na prevenção e/ou tratamento de uma doença ou distúrbio selecionados do grupo que consiste em infecção contraída no hospital, infecções do trato respiratório, infecções de pele e de tecido mole, infecções por ferimento, infecções dentais e bucais, infecções otorrinolaringológicas, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecções gastrointestinais, infecção do trato biliar, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite.

[0012] Um aspecto da invenção provê um uso de CBD ou uma composição do mesmo para a preparação de uma preparação farmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de uma doença causada por bactérias P. aeruginosa, em particular na prevenção e/ou tratamento de uma doença ou distúrbio selecionados do grupo que consiste em infecção contraída em hospital, infecções do trato respiratório, infecções de pele e de tecido mole, infecções por ferimento, infecções dentais e bucais, infecções otorrinolaringológicas, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecções gastrointestinais, infecção do trato biliar, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite.

[0013] Um outro aspecto da invenção refere-se ao uso de CBD ou uma composição do mesmo como um agente de esterilização e/ou descontaminação, em particular como um agente de esterilização e/ou descontaminação para material médico, salas pretendidas para prática médica, estética ou higiênica ou para preparações pretendidas para uso humano ou veterinário.

[0014] Em uma modalidade particular, é provido um uso de CBD ou uma composição do mesmo para a conservação de obra de arte.

[0015] Um outro aspecto da invenção refere-se a uma composição descontaminante compreendendo CBD, em particular compreendendo CBD em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL, por exemplo, de cerca de 0,1 μg/mL a 1 mg/mL, em particular de 0,1 μg/mL a 50 μg/mL, mais particularmente de 1 μg/mL a 50 μg/mL e um carregador, diluente ou excipiente fisiologicamente aceitáveis adicionais.

[0016] Um outro aspecto da invenção refere-se a uma composição esterilizante compreendendo CBD, em particular compreendendo CBD em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL, por exemplo, de cerca de 0,1 μg/mL a 1 mg/mL, em particular de 0,1 μg/mL a 50 μg/mL, mais particularmente de 1 μg/mL a 50 μg/mL e um carregador, diluente ou excipiente fisiologicamente aceitáveis adicionais.

[0017] Um outro aspecto da invenção refere-se a alimentos, bebida ou uma preparação cosmética compreendendo CBD ou uma composição descontaminante de acordo com a invenção.

[0018] Um outro aspecto da invenção refere-se um artigo revestido com CBD ou uma composição do mesmo, em particular um artigo para o uso na prática médica, estética ou higiênica ou em contato com preparações pretendidas para uso humano ou veterinário.

[0019] De acordo com um outro aspecto da invenção, é provido um kit para a descontaminação (por exemplo, de superfícies de material ou soluções) ou esterilização compreendendo CBD, uma composição do mesmo de acordo com a invenção e opcionalmente instruções para o uso.

[0020] Um outro aspecto da invenção refere-se a um método de esterilização e/ou descontaminação de material médico, salas pretendidas para prática médica, estética ou higiênica ou preparações pretendidas para uso humano ou veterinário compreendendo a etapa de contatar o dito material, salas ou preparações com CBD ou uma composição do mesmo, em particular com CBD ou uma composição do mesmo, em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL.

[0021] De acordo com um outro aspecto, é provido um método de prevenir ou inibir a virulência de P. aeruginosa ou a formação de uma biopelícula da mesma, o dito método compreendendo contatar uma superfície ou um tecido suscetível de ser contaminado por bactérias P. aeruginosa com CBD ou uma composição do mesmo, em particular com CBD ou uma composição do mesmo, em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL.

[0022] De acordo com um outro aspecto, é provido um método de inibir a virulência de bactérias P. aeruginosa e/ou formação de biopelícula pelas ditas bactérias, em particular um método ex vivo, o dito método compreendendo a etapa de contatar um material ou uma solução contendo as ditas bactérias e/ou biopelícula do mesmo com CBD ou uma composição do mesmo.

[0023] Um outro aspecto da invenção refere-se um método para a prevenção e/ou tratamento de uma doença causada por bactérias P. aeruginosa, em particular uma doença ou distúrbio selecionados do grupo que consiste em infecção contraída no hospital, infecções do trato respiratório, infecções de pele e de tecido mole, infecções por ferimento, infecções dentais e bucais, infecções otorrinolaringológicas, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecções gastrointestinais, infecção do trato biliar, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite, o dito método compreendendo administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de CBD ou uma composição do mesmo de acordo com a invenção, a um indivíduo em necessidade destas, em particular onde CBD ou uma composição do mesmo é em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL, por exemplo, de cerca de 0,1 μg/mL a 1 mg/mL, em particular de 0,1 μg/mL a 50 μg/mL, mais particularmente de 1 μg/mL a 50 μg/mL.

[0024] Um outro aspecto da invenção refere-se a um método para a conservação de obra de arte, tais como pinturas e manuscritos antigos, compreendendo a etapa de contatar a dita obra de arte com CBD ou uma composição do mesmo.

Descrição das figuras

[0025] A Figura 1 mostra a atividade enzimática de elastase reativa de eleastase produzida por P. aeruginosa PAOW1(PT5) (wt) incubada na presença de CBD em 500 μg/ml como descrito no Exemplo 2 em comparação com a atividade enzimática de elastase do wt ou do wt ou de P. aeruginosa ΔlasIΔrhllmutante na ausência de CBD.

[0026] A Figura 2 mostra uma indução de dobra (FI) da expressão de genes que são relacionadas com o sistema de sensibilização de quórum de P. aeruginosa na presença de CBD como descrito no Exemplo 3.

Descrição detalhada da invenção

[0027] O termo “infecção contraída no hospital (HAI)” ou “infecção nosocomial” refere-se a uma infecção que é contraída do ambiente ou pessoal de uma instalação de cuidado com a saúde (por exemplo, hospital, casa de repouso, instalação de reabilitação, clínicas). As vias principais de disseminação de infecção compreendem transmissões por contato (por exemplo, durante as atividades de cuidado com o paciente requerendo contado direto com o pessoal, instrumentos contaminados, agulhas, luvas ou curativos), transmissões por gotículas ou carregadas pelo ar, transmissão por veículo comum (por exemplo, alimentos contaminados, água, medicações, dispositivos e equipamentos). Em alguns casos, o microorganismo origina-se da pele do próprio paciente ou microbiota dos intestinos, tornando-se oportunista após cirurgia ou outros procedimentos que compreendem a pele protetora ou barreira intestinal e embora o paciente possa ter contraído a infecção de sua própria pele, a infecção é considerada nosocomial quando se desenvolve no ambiente de cuidado com a saúde.

[0028] O termo “fatores de virulência” são moléculas produzidas por bactérias que contribuem com a patogenicidade das mesmas, tais como adesinas, invasinas e fatores antiagocíticos para a colonização do hospedeiro e toxinas, hemolisinas e proteases, com dano ao hospedeiro.

[0029] O termo "biopelícula", como usado aqui, refere-se a um grupo estruturado de microorganismos em que as células aderem umas às outras e frequentemente estas células aderem à superfície. P. aeruginosa, como algumas outras bactérias gram-negativas, desenvolve-se na forma de agregados denominados biopelículas estruturadas em que as células são revestidas com uma matriz complexa composta de polímeros extracelulares.

[0030] O termo “sensibilização de quórum (QS)” refere-se a um mecanismo que leva à regulação da expressão genética em resposta às flutuações na densidade da população celular. As bactérias de sensibilização de quórum produzem e liberam moléculas de sinal químico (auto-indutores) que aumentam em concentração como uma função de densidade celular e uma detecção de uma limiar de concentração estimuladora de um auto-indutor leva a uma alteração na expressão genética. Uma variedade de moléculas diferentes pode ser observada como sinais e incluem oligopeptídeos N-Acil Homosserine Lactonas (AHL) e uma família de autoindutores conhecidos como autoindutor-2 (AI-2) m bactérias gram-negativas. A sensibilização de quórum pode ocorrer dentro de uma espécie bacteriana simples bem como entre diversas espécies. As bactérias usam circuitos de comunicação de sensibilização de quórum para regular uma série diversas de atividades fisiológicas de atividades fisiológicas e estas incluem simbiose, virulência, competência, conjugação, produção antibiótica, motilidade, esporulação e formação de biopelícula. Pseudomonas aeruginosa possui dois sistemas de sensibilização de quórum conhecidos com base em moléculas de acil homosserina lactona (AHL) que são o sistema las e o sistema rhl e um sistema com base em quinolona. O sistema las consiste do ativador transcricional LasR e a AHL sintase LasI, que direciona a síntese de N-3-oxo- dodecanoil-homosserina lactona (3-oxo-C12-HSL). O sistema rhl consiste do regulador transcricional RhlR e a AHL sintase RhlI, que direciona a síntese de N-butanoil-homosserina lactona (C4-HSL). O sistema lasé considerado como um fator chave na maturação e diferenciação de biopelícula e o sistema rhlé responsável pela produção de biotensoativos (ramnolipídeos) que são necessários para manter um sistema de canal aberto em biopelícula de Pseudomonas. Além disso, o sistema com base de quinolona é fundamentado em uma molécula sinalizadora 2-heptil-3-hidróxi-4-(1H)-quinolona (referida como sinal de quinolona de Pseudomonas) (Juhas et al., 2005, supra; Masák et al., 2014, supra).

[0031] O termo “inibição da sensibilização de quórum” refere-se à inibição ou atenuação do processo de sensibilização de quórum. A atividade inibidora de agentes da virulência de bactérias por intermédio de uma ação no mecanismo de sensibilização de quórum pode ser, por exemplo, estimada indiretamente por seu efeito na formação de biopelícula (por exemplo, pela leitura de medição fora da massa de biopelícula, tais como tingimento, microscopia de varredura de laser confocal por quantificação de DNA para analisar a morfologia da biopelícula) ou mais diretamente nos componentes de sinalização de sensibilização de quórum, tal como por quantificação de níveis de mRNA de genes envolvidos na sinalização de sensibilização de quórum e produção de fatores de virulência (por exemplo, ensaios para AHL (N-Acil Homosserina Lactonas), atividade de gene QS, produção do fator de virulência (Las A, LasB, e pioverdina) e estudos de curva de desenvolvimento e ensaio de Bradford).

[0032] Os exemplos de substância que atuam como um inibidor de sensibilização de quórum incluem agentes que diminuem a produção de moléculas de sinalização ou receptores de inibição das mesmas.

[0033] O termo “composto antisséptico” refere-se a uma substância que inibe o crescimento e o desenvolvimento de microorganismos.

[0034] O termo “esterilização” refere-se ao processo de eliminação de organismos microbiológicos para atingir assepsia (um ambiente microbiano estéril).

[0035] O termo “descontaminação” refere-se ao processo de limpar um objeto ou substância para remover os contaminantes compreendendo bactérias a fim de evitar a disseminação das bactérias.

[0036] O termo “contaminação” de um material de superfície, uma superfície de ambiente (por exemplo, paredes, piso ou mobília da sala) ou preparação de amostra (por exemplo, meio de cultura, soluções de tampão, meio de solubilização, cosmético, preparações industriais farmacêuticas ou alimentícias), referência à presença de bactérias naquelas superfícies ou dentro daquelas preparações em um nível que é considerado em um nível que é considerado ser nocivo para o usuário de tal material ou preparação de amostra por contato tópico, intubação ou ingestão. As preparações alimentícias ou de refeições, preparação cosmética ou água podem ser contaminadas com Pseudomonas aeruginosa que podem se desenvolver rapidamente dentro de ambiente de nutrição (48h) e causa, por exemplo, degradação aeróbica de alimento.

[0037] O termo “material médico”, como definido aqui, é qualquer material ou parte de equipamento usado no cuidado com a saúde, tal como em cirurgia ou cuidado intensivo (tal como para cuidado com a saúde, tinta em local de cuidado com a saúde, tubulações etc...) parte de equipamento projetado para auxiliar no diagnóstico, material de monitoramento ou tratamento de condições médicas. Isto inclui cateteres (tais como cateteres de diálise peritoneal e cateteres intravenosos), implantes de corpo estranho (tais como válvulas cardíacas protéticas, marca-passos cardíacos, próteses de junta total, desvios de diálise renal), máquinas de formação de imagem médicas (tais como máquinas de ultrassom e MRI, scanners PET e CT e máquinas de raios X), equipamento de tratamento (tais como bombas de infusão, lasers médicos, máquinas cirúrgicas), equipamento de suporte à vida (tais como ventiladores médicos, máquinas anestésicas, máquinas cardíaco-pulmonares, ECMO e máquinas de diálise), monitores médicos (tais como mostradores de ECG, EEG e pressão sanguínea), equipamento de laboratório médico (tais como para a análise de sangue, urina, genes e gases dissolvidos no sangue), equipamento de diagnóstico, equipamento terapêutico (tais como máquinas de terapia física), equipamento dental (tais como, brocas dentárias) e lentes de contato.

[0038] O termo “sala destinada à prática médica, estética ou higiênica” abrange qualquer sala onde uma ação médica, estética ou higiênica seja realizada em um indivíduo ou em uma preparação de amostra ou material e onde um certo grau de assepsia ou higiene é necessário. Estas salas abrangem salas limpas (por exemplo, salas de fármacos, cosméticos ou de condicionamento de alimentos), consultórios, salas de parto, salas de emergência, unidades de terapia intensiva, maternidades, berçários, enfermarias, celas acolchoadas, salas de tratamento dentário e salas cirúrgicas, estúdios de estética, salões de bronzeamento e semelhantes.

[0039] O termo “infecções do trato respiratório (ou doenças)” são geralmente definidos aqui como doenças infecciosas causadas por bactérias e, em particular, uma biopelícula de bactérias, que envolvem o trato respiratório e podem ser classificadas como infecção do trato respiratório superior (URI) ou infecção do trato respiratório inferior (LRI). Os exemplos não limitantes de infecções do trato respiratório que podem ser causados por Pseudomonas aeruginosa incluem pneumonia, pneumonia bilateral com presença de micro- abcessos e necrose de tecido. O termo inclui todas as infecções do trato respiratório que podem ocorrer em pacientes com fibrose cística, pacientes onde o tratamento com antibiótico de amplo espectro foi usado anteriormente, pacientes onde o equipamento de suporte de ventilação é/foi utilizado (como intubação), pacientes imunocomprometidos, condições prévias como doença pulmonar crônica, AIDS ou câncer no sangue (pacientes com câncer no sangue desenvolvem principalmente infecções do trato respiratório após receberem fármacos), pacientes com falha de funcionamento da bomba cardíaca.

[0040] O termo “infecções de pele e de tecido mole” (ou doenças) é geralmente definido aqui como infecções ou doenças que envolvem invasão bacteriana da pele e tecidos moles subjacentes. Os exemplos de infecções de pele ou doenças por P. aeruginosa incluem pioderma, pioderma de bebês e crianças, gangrena (tais como gangrena das extremidades, períneo, face e parte superior da faringe), erupções cutâneas difusas acompanhadas de vesículas ou pápulas e éctima gangrenosa (EG). O termo inclui todas as infecções cutâneas em indivíduos com queimaduras graves, levando à necrose de tecido, em indivíduos após trauma, após abrasão da pele (como arranhão e depilação), após contato com água contaminada (como em salas de vapor, banheiras de hidromassagem e piscinas), em indivíduos acamados e inflamação da pele devido à infecção da pele (dermatite infecciosa). Os fatores de predisposição para a infecção da pele incluem trauma, doença de pele pré-existente, higiene deficiente, imunidade ao hospedeiro prejudicada (tal como a leucopenia) e tratamento prévio com antibiótico de amplo espectro.

[0041] O termo “infecções por ferimento” e “infecção por ferimento crônico” inclui infecções, tais como infecção por ferimento cirúrgico, pé de atleta, foliculite gram negativa, paroníquia crônica (síndrome da unha verde), foliculite de piscina de estação de água e éctima gangrenosa.

[0042] O termo “infecções do caminho urológico e/ou prostático” incluem infecções do trato urinário, tais como éctima e prostatite bacteriana crônica. Aquelas podem ocorrer em indivíduos após a cirurgia, por exemplo, em pacientes comum cateter urinário ou com um distúrbio da próstata ou com qualquer obstrução de trato urinário ou com um defeito anatômico do trato urinário e em pacientes paraplégicos.

[0043] O termo “infecções dentais e bucais” incluem cáries dentárias e periodontite.

[0044] O termo “infecções otorrinolaringológicas” inclui infecções de ouvido, tais como otite externa, que envolve o ouvido externo e canal do ouvido, otite média, que envolve o ouvido médio e otite interna (otite labirintite) e sinusite crônica. Fatores de predisposição ao desenvolvimento de otite externa incluem diabetes e idade avançada.

[0045] O termo “infecções oculares (ou doenças)” incluem infecções após trauma ocular ou após contato ocular com água contaminada ou lentes de contato.

[0046] O termo “infecções gastrointestinais” inclui infecção do trato biliar.

[0047] O termo “bacteriemia” refere-se à presença de bactérias viáveis na corrente sanguínea e pode ocorrer em indivíduos com neutropenia, diabetes, queimaduras, doenças hematológicas malignas e éctima gangrenosa.

[0048] O termo “septicemia” refere-se à complicação de uma infecção que é uma condição médica potencialmente séria caracterizada por um estado inflamatório de corpo total (denominada uma síndrome de resposta inflamatória sistêmica ou SIRS) e a presença de uma infecção comprovada (na base de amostragem ou radiologia) ou provável (considerando a apresentação clínica do paciente, contagem glóbulos brancos, CRP, radiologia). O termo septicemia resume os quadros clínicos, para os quais, como uma regra, febre, leucocitose, mudanças de consciência, uma circulação hiperdinâmica ("choque quente") e um estado hiper-metabólico, principalmente como uma consequência da invasão do tecido normalmente estéril por microorganismos, são observados. O termo septicemia corresponde à definição de septicemia como definido nas "Definitions for Sepsis and Organ Failure and Guidelines for the use of Innovative Therapies in Sepsis" from the ACCP/SCCM consensus conference committee (Bone et al., Chest 1992, 101, 1644-1655).

[0049] O termo “infecções (ou doenças) do sistema nervoso central (CNS)” inclui todas as infecções do SNC que podem ocorrer em indivíduos após trauma na cabeça, cirurgia e procedimentos envolvendo acesso ao CNS, como punção lombar ou raquianestesia. Fatores de predisposição para o desenvolvimento de infecções do CNS incluem infecção preexistente, doença preexistente (tais como câncer de cabeça e pescoço), sistema imunológico debilitado e idade avançada.

[0050] O termo “endocardite” ou “endocardite infecciosa (IC)” refere- se a uma inflamação da camada interna do coração, o endocárdio, que também pode envolver as válvulas cardíacas, o septo interventricular, as cordas tendíneas, o endocárdio mural ou as superfícies de dispositivos intracardíacos.

[0051] O termo “indivíduo”, como usado aqui, refere-se a mamíferos. Por exemplo, os mamíferos considerados pela presente invenção incluem humanos, primatas, animais domesticados tais como cães, gatos, gado, ovelhas, porcos, cavalos, roedores de laboratório e semelhantes.

[0052] Como usado aqui, "tratamento" e "tratar" e semelhantes significam geralmente a obtenção de um efeito farmacológico e fisiológico desejados. O efeito pode ser profilático em termos de prevenir ou prevenir parcialmente uma infecção bacteriana ou uma doença, sintoma ou condição da mesma e/ou pode ser terapêutico em termos de uma cura parcial ou completa de uma infecção bacteriana, uma doença, condição, sintoma ou efeito atribuído à infecção bacteriana.

[0053] O termo “eficácia” de um tratamento ou método de acordo com a invenção pode ser medido com base em mudanças no curso da infecção, doença ou condição em resposta a um uso de um composto ou um método de acordo com a invenção. Por exemplo, a eficácia de um tratamento ou método de acordo com a invenção pode ser medida por seu impacto nos sinais ou sintomas de infecção. Uma resposta é atingida quando o paciente experimenta alívio parcial ou total ou reduz os sintomas indesejados da infecção.

[0054] De acordo com um aspecto, a eficácia de um tratamento de acordo com a invenção pode ser estimada pelo efeito de uma quantidade efetiva de CBD na virulência de P. aeruginosa, como um efeito de virulência na produção de biopelícula e/ou o sistema de sensibilização de quórum das bactérias. De acordo com um aspecto particular, a eficácia de um tratamento de acordo com a invenção pode ser estimada pelo efeito (inibição/diminuição) da cascata de sensibilização de quórum das bactérias, necessariamente, sem matá-las.

[0055] O termo "quantidade eficaz", como usado aqui, refere-se a uma quantidade de CBD ou uma formulação do mesmo, provocando uma redução detectável dos sintomas da doença em um indivíduo que está sendo administrado com o dito composto ou formulação.

Compostos de acordo com a invenção

[0056] O termo “canabidiol (CBD)” refere-se a um tipo de canabinoide que pode ser encontrado na planta cannabis tendo a seguinte estrutura química: 2-[(1R,6R)-6-isopropenil-3-metilciclo-hex-2-en-1-il]-5- pentilbenzeno-1,3-diol, também denominado s Δ2-canabidiol.

[0057] É um constituinte principal da planta Cannabis, secundário ao THC e representa até 40% em seus extratos. Em comparação com o THC tem uma afinidade muito baixa para os receptores CB1 e CB2 que resultam nesta substância sendo não psicoativa. CBD pode ser extraído de várias espécies de plantas Cannabis incluindo Cannabis sativa, indica e ruderalis. Em particular, o CBD pode ser extraído como um composto puro a partir da planta cannabis geneticamente modificada que está produzindo níveis aumentados de CBD em comparação com as plantas de ocorrência natural.

[0058] De acordo com uma modalidade, é provido um CBD de uma origem natural, que é extraído de uma variedade de cepas de Cannabis.

[0059] De acordo com uma outra modalidade, um CBD pode ser isolado por métodos padrão conhecidos pela pessoa versada, por exemplo, compreendendo coleta do material vegetal e extração e purificação.

[0060] Alternativamente, o CBD pode ser preparado pelos métodos sintéticos.

Métodos e usos de acordo com a invenção

[0061] De acordo com uma modalidade particular, são providos CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento de uma doença causada por bactérias P. aeruginosa.

[0062] Em uma modalidade particular, o CBD provido ou composições do mesmo são úteis como um inibidor de bactérias Pseudomonas aeruginosa.

[0063] Em uma modalidade particular, o CBD provido ou composições do mesmo são úteis como um inibidor de formação de biopelícula por bactérias Pseudomonas aeruginosa.

[0064] Em uma modalidade mais particular, o CBD provido ou composições do mesmo podem ser úteis na inibição ou diminuição da virulência de bactérias Pseudomonas aeruginosa.

[0065] Em uma outra modalidade particular, o CBD provido ou composições do mesmo podem ser úteis como inibidores de sentido de quórum, em particular da produção de fatores de virulência.

[0066] Uma outra modalidade particular provê CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento da infecção contraída no hospital causada por P. aeruginosa.

[0067] Uma outra modalidade provê CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento de uma infecção do trato respiratório causada por P. aeruginosa em pacientes com fibrose cística.

[0068] Uma outra modalidade provê CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento de infecções causadas por P. aeruginosa em pacientes com queimaduras.

[0069] Uma outra modalidade provê CBD ou uma composição do mesmo para o uso na invenção e/ou tratamento de infecções causadas por P. aeruginosa em pacientes com ferimentos crônicos.

[0070] Em uma modalidade particular, é provido um uso de CBD ou uma composição do mesmo para a conservação de obra de arte, tais como pinturas e manuscritos antigos.

[0071] Em uma modalidade particular, é provido um uso de CBD ou uma composição do mesmo para a prevenção de contaminação com Pseudomonas aeruginosa em preparações pretendidas para uso humano ou veterinário, tais como cosméticos, alimentos, bebidas ou preparações farmacêuticas ou para a descontaminação destes. Em uma modalidade mais particular, é provido um uso de CBD ou uma composição do mesmo como um agente esterilizante e/ou descontaminante.

[0072] Em uma modalidade particular, é provido um uso de CBD ou uma composição do mesmo para esterilizar e/ou descontaminar material médico, salas pretendidas para prática médica, estética ou higiênica ou preparações pretendidas para uso humano ou veterinário, em particular para descontaminar ou prevenir o dito material médico ou preparações de contaminação por P. aeruginosa.

[0073] Em uma modalidade particular, o CBD ou uma composição do mesmo é usado no contexto de prevenção de contaminação de alimentos ou descontaminação de alimentos.

[0074] Em uma modalidade particular, o CBD ou uma composição do mesmo são usados no contexto de prevenção de contaminação de água ou descontaminação de água.

[0075] Em uma modalidade particular, o CBD ou uma composição do mesmo é usado no contexto de prevenção de contaminação ou para a descontaminação de material médico e/ou uma sala pretendida para a prática médica, estética ou higiênica, tais como salas médicas/hospitalares e/ou salas limpas.

[0076] Em uma modalidade particular, o CBD ou composições do mesmo ou kits de acordo com a invenção são úteis em um método de acordo com a invenção, em particular um método de inibir a virulência de uma bactéria e/ou um método de inibir a formação de biopelícula e/ou um método para a prevenção e/ou tratamento de uma doença causada por Pseudomonas aeruginosa selecionados do grupo que consiste em infecção contraída no hospital, infecções do trato respiratório, infecções ou doenças de pele e de tecido mole, infecção por ferimento crônico, infecção por ferimento crônico, infecções do trato urinário, infecções de ouvido, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite, o dito método compreendendo administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de CBD ou uma composição do mesmo, a um indivíduo em necessidade destas.

[0077] Em uma modalidade particular, é provido um método para a conservação de obra de arte, tais como pinturas e manuscritos antigos, compreendendo a etapa de contatar a dita obra de arte com CBD ou uma composição do mesmo.

[0078] Em uma modalidade particular, é provido um método de prevenção de contaminação com Pseudomonas aeruginosa/preservação de preparações pretendidas para uso humano ou veterinário, tal como preparações alimentícias, bebidas, cultura ou meios de solubilização, preparações cosméticas ou farmacêuticas ou de descontaminação daquelas ditas preparações compreendendo uma etapa de contatar tais preparações CBD ou uma composição do mesmo, em particular com CBD ou uma composição do mesmo, em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL, por exemplo, de cerca de 0,1 μg/mL a 1 mg/mL, em particular de 0,1 μg/mL a 50 μg/mL, mais particularmente de 1 μg/mL a 50 μg/mL.

[0079] Em uma modalidade particular, é provido um método de preservação ou descontaminação de preparação alimentícia ou de refeição.

[0080] Em uma modalidade particular, é provido um método de preservação ou descontaminação de bebidas ou água.

[0081] Em uma modalidade particular, é provido um método de prevenção de contaminação com Pseudomonas aeruginosa de material ou salas pretendias para o uso humano ou veterinário, tal como material médico ou de descontaminação/esterilização daqueles, o dito método compreendendo uma etapa de contatar as ditas preparações com CBD ou uma composição do mesmo, em particular com CBD ou uma composição do mesmo, em uma concentração entre cerca de 0,1 μg/mL a 200 mg/mL, por exemplo, de cerca de 0,1 μg/mL a 1 mg/mL, em particular de 0,1 μg/mL a 50 μg/mL, mais particularmente de 1 μg/mL a 50 μg/mL.

[0082] De acordo com uma modalidade particular, CBD ou uma composição do mesmo são particularmente adequados para a esterilização e/ou descontaminação de material médico de acordo com um método da invenção include.

[0083] De acordo com uma modalidade particular, CBD ou uma composição do mesmo são particularmente adequados para a esterilização e/ou descontaminação de salas pretendidas para prática médica, estética ou higiênica tais como salas médicas/hospitalares e/ou salas limpas.

Composições de acordo com a invenção

[0084] As composições ou formulações de acordo com a invenção podem ser administradas como uma formulação farmacêutica.

[0085] De acordo com uma outra modalidade, as composições ou formulação de acordo com a invenção são composições de descontaminação compreendendo CBD e pelo menos um carregador, diluente ou excipiente fisiologicamente aceitáveis adicionais.

[0086] As composições farmacêuticas desta invenção ainda podem compreender um ou mais ingredientes adicionais farmaceuticamente aceitáveis, tais como alume, estabilizantes, agentes microbianos, tampões, agentes corantes, agentes flavorizantes, adjuvantes e semelhantes.

[0087] As composições da invenção e dosagens únicas dos mesmos e em tal forma podem ser utilizadas como sólidos, tais como tabletes ou cápsulas preenchidas ou líquidos, tais como soluções, suspensões, emulsões, elixires ou cápsulas preenchidas com os mesmos, todas para o uso oral ou na forma de soluções injetáveis estéreis para o uso parenteral (incluindo subcutâneo). Tais composições farmacêuticas e formas de dosagem unitárias das mesmas podem compreender ingredientes em proporções convencionais, com ou sem compostos ou princípios ativos adicionais e tais formas de dosagem unitária podem conter qualquer quantidade efetiva adequada do ingrediente ativo proporcionada com a faixa de dose diária pretendida a ser utilizada. De acordo com um aspecto, as composições de acordo com a invenção são pulverizáveis ou inaláveis em caso de infecções respiratórias e soluções topicamente aplicáveis no caso de infecções urinárias.

[0088] As composições desta invenção também podem ser formulações líquidas incluindo, mas não limitando-se às suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões, xaropes e elixires. As formas líquidas adequadas para a administração oral podem incluir um veículo aquoso ou não aquoso adequado com tampões, agentes de suspensão e dispensa, corantes, sabores e semelhantes. As composições também podem ser formuladas como um produto seco para a reconstituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Tais preparações líquidas podem conter aditivos incluindo, mas não limitando-se a agentes de suspensão, agentes emulsificantes, veículos não aquosos e preservantes. O agente de suspensão inclui, mas não limita-se a, xarope de sorbitol, metil celulose, xarope de glicose/açúcar, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetil celulose, gel de estearato de alumínio e gorduras comestíveis hidrogenadas. Os agentes emulsificantes incluem, mas não se limitam a, lecitina, monooleato de sorbitano e acácia. Os veículos não aquosos incluem, mas não se limitam a, óleos comestíveis, óleo de amêndoa, óleo de coco fracionado, ésteres oleosos, propileno glicol e álcool etílico. Os preservantes incluem, mas não se limitam a, p-hidroxibenzoato de metila ou propila e ácido sórbico.

[0089] As composições sólidas desta invenção podem estar na forma de tabletes ou losangos formulados de uma maneira convencional. Por exemplo, tabletes e cápsulas para a administração oral podem conter excipientes convencionais incluindo, mas não limitando-se a agentes de ligação, enchedores, lubrificantes, desintegrantes e agentes umectantes. Os agentes de ligação incluem, mas não são limitados a, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanto, mucilagem de amido e polivinilpirrolidona. Os enchedores incluem, mas não são limitados a, lactose, açúcar, celulose microcristalina, amido de milho, fosfato de cálcio e sorbitol. Os lubrificantes incluem, mas não são limitados a, estearato de magnésio, ácido esteárico, talco, polietileno glicol e sílica. Os desintegrantes incluem, mas não se limitam a, glicolato de amido de batata e amido de sódio. Os agentes umectantes incluem, mas não se limitam a, lauril sulfato de sódio. Os tabletes podem ser revestidos de acordo com os métodos bem conhecidos na técnica.

[0090] As composições injetáveis são tipicamente fundamentadas em solução salina estéril injetável ou solução salina tamponada por fosfato ou outros carregadores injetáveis conhecidos na técnica.

[0091] As composições desta invenção também podem ser formuladas como supositórios, que podem conter bases de supositório incluindo, mas não limitando-se à manteiga de cacau ou glicerídeos. As composições desta invenção também podem ser formuladas para inalação, que podem estar em uma forma incluindo, mas não limitando-se à solução, suspensão ou emulsão que podem ser administradas como um pó seco ou na forma de um aerossol usando-se um propelente, tal como diclorodifluorometano ou triclorofluorometano. As composições desta invenção também podem ser formuladas como formulações transdérmicas compreendendo veículos aquosos ou não aquosos incluindo, mas não limitando-se a cremes, unguentos, loções, pastas, gesso medicado, emplastro ou membrana.

[0092] As composições desta invenção também podem ser formuladas para a administração parenteral incluindo, mas não limitando-se à injeção ou infusão contínua. As formulações para a injeção podem estar na forma de suspensões, soluções ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos e podem conter agentes de formulação incluindo, mas não limitando-se a agentes de suspensão, estabilizantes e dispersantes. A composição também pode ser provida em uma forma em pó para a reconstituição com um veículo adequado incluindo, mas não limitando-se à água isenta de pirogênio estéril.

[0093] As composições desta invenção também podem ser formuladas como uma preparação de depósito, que pode ser administrada por implantação ou por injeção intramuscular. As composições podem ser formuladas com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (como uma emulsão em um óleo aceitável, for exemplo), resinas trocadoras de íon ou como derivados moderadamente solúveis (como um sal moderadamente solúvel, por exemplo).

[0094] As composições desta invenção também podem ser formuladas como uma preparação de lipossoma. A preparação de lipossoma pode compreender lipossomas que penetram nas células de interesse ou no estrato córneo e fundem com a membrana celular, resultando na liberação dos conteúdos da lipossoma na célula. Outras formulações adequadas podem utilizar niossomas. Niossomas são vesículas de lipídeo similares às lipossomas, com membranas consistindo grandemente de lipídeos não iônicos, algumas formas que são efetivas para o transporte de compostos através do estrato córneo.

[0095] Os compostos desta invenção também podem ser administrados em formas de liberação sustentadas ou de sistemas de liberação de fármaco de liberação sustentada. Uma descrição de materiais de liberação sustentada representativa também pode ser encontrada nos materiais incorporados em Remington’s Pharmaceutical Sciences.

[0096] Alternativamente, as composições desta invenção também podem ser formuladas como uma solução aerossolizáveis ou uma composição inalável farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, adequadas para a prevenção e/ou tratamento de infecções bacterianas pulmonares causadas por bactérias gram-negativas. Em uma tal formulação, o CBD é preparado, por exemplo, como um pó seco inalável ou como uma solução aerossolizável.

[0097] As composições de acordo com a invenção, juntas com um adjuvante, carregador, diluente ou excipiente convencionalmente utilizados podem ser colocados na forma de composições farmacêuticas e unidades de dosagens das mesmas e, em al forma, podem ser utilizadas como sólidos, tais como tabletes ou cápsulas preenchidas ou líquidos, tais como soluções, suspensões, emulsões, elixires ou cápsulas preenchidas com as mesmas, todos para o uso oral ou na forma de soluções injetáveis estéreis para o uso parenteral por injeção ou infusão contínua ou na forma de creme, unguento, gel, pasta ou pó para o uso típico.

[0098] De acordo com uma modalidade particular, as composições da invenção são composições veterinárias.

[0099] De acordo com uma modalidade particular, as composições da invenção são soluções de lavagem para as mãos, em particular, soluções de lavagem para as mãos para o pessoal médico.

[00100] De acordo com um aspecto da invenção, as formulações de acordo com a invenção podem estar associadas ou integradas dentro de um artigo, notavelmente onde a liberação por tempo e/ou a liberação por mecanismo das composições é atingida, quando o artigo é colocado em uma parte corporal apropriada ou em uma cavidade corporal apropriada.

[00101] De acordo com um outro aspecto da invenção, CBD ou uma composição do mesmo são revestidos na superfície de um artigo, em particular um artigo para o uso na prática médica, estética ou higiênica ou em contato com preparações pretendidas para uso humano ou veterinário. De acordo com um outro aspecto, os usos e métodos de acordo com a invenção para prevenir infecções ou distúrbios por Pseudomonas aeruginosa, compreendem uma etapa de revestir um mecanismo e materiais usados no cuidado com a saúde e cuidado notavelmente intensivo e cirurgia (tais como têxteis, material cirúrgico, tubulações, ventiladores, etc...) por uma composição compreendendo CBD. Tipicamente, a composição compreendendo CBD é incorporada na superfície dos ditos mecanismos e materiais usados no cuidado com a saúde, em particular, cuidado intensivo e cirurgia. Os materiais adicionais, bem como técnicas de processamento de formulação e semelhantes são apresentados na Parte 5 de Remington’s “The Science and Practice of Pharmacy”, 22aEdição, 2012, University of the Sciences in Philadelphia, Lippincott Williams & Wilkins, que é aqui incorporada por referência.

Combinação

[00102] De acordo com a invenção, os compostos e composições de acordo com a invenção e as formulações farmacêuticas dos mesmos podem ser administradas sozinhas ou em combinação com pelo menos um coagente útil para a prevenção contra a contaminação ou descontaminação.

[00103] De acordo com um aspecto particular, os coagentes de acordo com a invenção incluem composto antisséptico e um antibiótico.

[00104] De acordo com a invenção, os compostos e composições de acordo com a invenção e as formulações farmacêuticas que são administradas simultaneamente com o dito coagente podem ser administradas nas mesmas composições ou diferentes e pelas mesmas vias de administração ou diferentes.

Modo de administração

[00105] As composições desta invenção podem ser administradas de qualquer maneira incluindo, mas não limitando-se à administração oral, parenteral, transdérmica, transmucósica, tópica, viainalação, via bucal ou intranasal ou intravesical ou combinações destas.

[00106] A administração parenteral inclui, mas não limita-se a, intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular e intracardíaca.

[00107] As composições desta invenção também podem ser administradas tipicamente à pele, à orelha e ao olho.

[00108] As composições da invenção podem ser administradas de maneira sistêmica ou local.

[00109] As composições de acordo com esta invenção também podem ser administradas na forma de um implante, permitindo a liberação lenta dos compostos e formulações dos mesmos bem como uma infusão i.v. controlada lenta.

[00110] As composições de acordo com a invenção podem ser administradas a um indivíduo em necessidade destas como uma administração simples ou como uma repetida.

[00111] As composições de acordo com esta invenção podem ser administradas a um indivíduo em necessidade destas antes, simultânea ou sequencialmente com outros regimes terapêuticos.

[00112] A dosagem administrada, como doses simples ou múltiplas, a um indivíduo variará dependendo de uma variedade de fatores, incluindo propriedades farmacocinéticas, condições e características do paciente (sexo, idade, peso corporal, saúde, tamanho), extensão dos sintomas, tratamentos concorrentes, frequência de tratamento e o efeito desejado.

Pacientes

[00113] Em uma modalidade, os pacientes de acordo cm a invenção são indivíduos infectados por Pseudomonas aeruginosa ou em risco de serem infectados por Pseudomonas aeruginosa.

[00114] Fatores de predisposição ao desenvolvimento de Pseudomonas aeruginosa incluem imunidade do hospedeiro prejudicada e tratamento prévio com antibiótico de espectro amplo.

[00115] Em uma modalidade, pacientes de acordo com a invenção são indivíduos com microbiota alterada.

[00116] Em uma modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são indivíduos imunossuprimidos.

[00117] Em uma outra modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são pacientes que sofrem de ou estão em risco de sofrer de uma doença selecionada do grupo que consiste em infecção contraída no hospital, infecções do trato respiratório, infecções de pele e de tecido mole, infecções por ferimento, infecções dentais e bucais, infecções otorrinolaringológicas, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecções gastrointestinais, infecção do trato biliar, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite.

[00118] Em uma modalidade preferida, os pacientes de acordo com a invenção são pacientes que sofrem de ou estão em risco de sofrer de uma infecção do trato respiratório causada por Pseudomonas aeruginosa, tais como pacientes com fibrose cística.

[00119] Em uma outra modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são pacientes com ferimentos.

[00120] Em uma outra modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são pacientes com queimaduras.

[00121] Em uma outra modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são pacientes com implantes de corpo estranho e/ou cateteres ou que passarão por um implante corporal ou cirurgia com cateter.

[00122] Em uma modalidade, os pacientes de acordo com a invenção são indivíduos em risco de infecções causadas por bactérias resistentes a antibióticos, que são usados na criação animal.

Kits

[00123] De acordo com um aspecto, a invenção refere-se a um kit para realizar um método de acordo com a invenção.

[00124] De acordo com um outro aspecto da invenção, é provido um kit para a descontaminação, em particular para a descontaminação de superfícies ou preparações de material, compreendendo CBD, uma combinação do mesmo de acordo com a invenção e opcionalmente instruções para o uso.

[00125] De acordo com uma outra modalidade adicional, um kit de acordo com a invenção ainda compreende pelo menos um composto antisséptico.

[00126] De acordo com uma outra modalidade adicional, um kit de acordo com a invenção ainda compreende pelo menos um agente de fator antivirulência.

[00127] De acordo com uma outra modalidade, um kit de acordo com a invenção compreendendo uma ou mais séries de recipientes, em que cada série de uso simples de recipientes compreende: um primeiro recipiente compreendendo CBD na forma liofilizada ou como uma formulação líquida e um segundo recipiente compreendendo ferramentas esterilizadas para descontaminação.

[00128] De acordo com um aspecto particular, as formulações, kits e métodos da invenção podem ser úteis nos campos de conservação de obra de arte, descontaminação/preservação de cosméticos, alimentos ou preparação de bebida ou material médico ou limpeza ou descontaminação de salas.

[00129] As referências citadas aqui são incorporadas por meio desta por referência em sua totalidade. A presente invenção não é limitada em escopo pelas modalidades e desenhos específicos descritos aqui, que são pretendidos como ilustrações simples de aspectos individuais da invenção e os métodos e componentes funcionalmente equivalentes estão dentro do escopo da invenção.

EXEMPLOS

[00130] As seguintes abreviações referem-se respectivamente às definições abaixo: CBD (canabidiol); CV (violeta cristalino); lasB (gene que codifica LasB Elastase); lasI (gene que codifica sintase auto-indutora de C12); OD600 (densidade ótica medida em um comprimento de onda de 600 nm); pqsH (gene envolvido em síntese auto-indutora de quinolona); rhlA (gene envolvido em síntese de ramnolipídeos); rhlI (gene que codifica sintase auto-indutora de C4); wt (tipo selvagem).

Exemplo 1: Redução da formação de biopelícula de Pseudomonas aeruginosa por CBD

[00131] Os efeitos de CBD na formação de biopelícula de P. aeruginosa foram estimados como descrito abaixo.

[00132] Durante a noite, as pré-culturas de cepa de Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 foram diluídas a um OD600 (densidade ótica medida em um comprimento de onda de 600 nm) de 0,1 em 2 ml de meio LB (caldo de lisogenia) em tubos de polipropileno. Tubos contendo bactérias e CBD em concentrações de 1,9 μg/ml, 3,9 μg/ml, 7,8 μg/ml, 15,63 μg/ml, 31,25 μg/ml, 62,5 μg/ml e 125 μg/ml foram incubados por 12h a 37°C sem agitação. As células planctônicas foram removidas lavando-se uma vez com água destilada e as biopelículas foram tingidas com violeta cristalino (CV, 1% em água) for 30 minutos. CV foi descartado e os tubos foram enxaguados duas vezes com água para remover o excesso de pigmento. As biopelículas tingidas foram recolocadas em suspensão em ácido acético a 33% e sua densidade foi avaliada pela medição do OD600 das suspensões normalizadas quanto à densidade bacteriana.

[00133] A medição da formação de biopelícula de Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 na presença de CBD mostrou que CBD em concentrações entre 1,9 μg/mL e 31,25 μg/ml pode reduzir pelo fator em torno de 2 a formação de biopelícula em comparação com o controle sem CBD.

[00134] Em concentração mais alta de CBD, o efeito inibidor na formação de biopelícula é provavelmente reduzida devido à solubilidade reduzida de CBD no meio de cultura.

Exemplo 2: Redução induzida por CBD da produção de fatores de virulência por Pseudomonas aeruginosa

[00135] O efeito de CBD na produção de elastase por P. aeruginosa, um fator de virulência cuja expressão é diretamente regulada pelo sistema de sensibilização de quórum, foi estimado através da medição da atividade enzimática de elastase.

[00136] A produção de elastase foi medida em duas cepas bacterianas: Pseudomonas aeruginosa PAOW1(PT5) que é um tipo selvagem (wt) e Pseudomonas aeruginosa ΔlasIΔrhllque é um mutante para sinalização de sensibilização de quórum que reduziu a produção/expressão de elastase devido à inibição do sistema de sensibilização de quórum. 100 μl de sobrenadante bacteriano filtrado de culturas durante a noite (com ou sem 500 μg/ml de CBD, onde as culturas estiveram sob agitação permitindo melhor dispersão de CBD) foram adicionados a 900 μl de tampão Vermelho do Congo Elastina (ECR) (100 mM de Tris, 1 mM de CaCl2, pH 7,5 contendo 20 mg de Elastina ECR) e então incubados com agitação a 37°C por 3h. ECR insolúvel foi removido por centrifugação e a absorção do sobrenadante foi medida a 495 nm e normalizada de acordo com a densidade celular.

[00137] A atividade enzimática da elastase produzida por P. aeruginosa PAOW1(PT5) na presença de CBD mostrou que CBD em uma concentração de 500 μg/ml pode reduzir em cerca de 30% a produção de elastase em comparação com os valores de controle (Figura 1). A produção de elastase por P. aeruginosa ΔlasIΔrhllé reduzida por cerca de 93% em comparação com o controle (produção de elastase por wt).

[00138] Estes resultados indicam que CBD pode reduzir efetivamente a produção de pelo menos algum fator de virulência de P. aeruginosum envolvido no sistema de sensibilização de quórum.

Exemplo 3: Modulação induzida por CBD de expressão de genes envolvidos em sensibilização de quórum de Pseudomonas aeruginosa

[00139] Os efeitos de CBD em sistema de sensibilização de quórum de P. aeruginosa foram estimados através da expressão de genes relacionados com a sensibilização de quórum.

[00140] Durante a noite, as pré-culturas de Pseudomonas aeruginosa PAOW1(PT5) (wt) foram diluídas a um OD600 de 0,05 e desenvolvidas 6 horas a 37°C com ou sem 500 μg/ml de CBD. 0,5 ml de culturas foi adicionado a 1 ml de solução bacteriana RNA Protect e o RNA total foi isolado com colunas RNeasy (Qiagen). O DNA residual foi eliminado por tratamento com DNase usando-se 20 unidades de Dnase isenta de RQ1 RNase (promega). Após a remoção de DNase por extração e precipitação de fenol/clorofórmio, 500 ng de RNA foi transcrito reverso usando-se iniciadores de hexâmero aleatórios e transcriptase reversa Improm-II (promega). 2,5 μl de cDNA diluído 10 vezes foram quantificados por PCR em tempo real (qPCR) usando-se um Sybr Select Master Mix para CFX (4472942) (Thermofisher). Os iniciadores, iniciam no gene (bp) e tamanho de amplicon (bp) usados são listados na Tabela 1. Cada amplificação foi normalizada pelo valor de padrão interno (oprF) do cDNA correspondente (DNA complementar). Os resultados são expressados como aumento de dobra em comparação com o wt cultivado sem CBD. A seguinte expressão de gene foi medida: rhlI codificando a sintase auto-indutora de C4; rhlA que é um gene envolvido em síntese de ramnolipídeos, lasI codificando sintase auto-indutora de C12, lasB codificando LasB Elastase e pqsH que é um gene envolvido em síntese auto- indutora de quinolona. Tabela 1

[00141] A indução de dobra da expressão de genes por P. aeruginosa PAOW1(PT5) incubada na presença de CBD (500μg/ml) foi de 1,46 para rhlI, 0,72 para rhlA, 0,89 para lasI, 0,42 lasB e 0,53 para pqsH em comparação com as condições de controle (Figura 2) indicando que CBD é capaz de afetar a virulência de Pseudomonas aeruginosa por interferência com o sistema de sensibilização de quórum.

Listagem de Sequência

[00142] Sequência de ácido nucleico de iniciador rhlI 309 SEQ ID N°: 1: CTCTCTGAATCGCTGGAAGG Sequência de ácido nucleico de iniciador rhlI 310 SEQ ID N°: 2: GACGTCCTTGAGCAGGTAGG Sequência de ácido nucleico de iniciador rhlA 299 SEQ ID N°: 3: CGAGGTCAATCACCTGGTCT Sequência de ácido nucleico de iniciador rhlA 300 SEQ ID N°: 4: GACGGTCTCGTTGAGCAGAT Sequência de ácido nucleico de iniciador lasI 311 SEQ ID N°: 5: CTACAGCCTGCAGAACGACA Sequência de ácido nucleico de iniciador lasI 312 SEQ ID N°: 6: ATCTGGGTCTTGGCATTGAG Sequência de ácido nucleico de iniciador lasB 301 SEQ ID N°: 7: AAGCCATCACCGAAGTCAAG Sequência de ácido nucleico de iniciador lasB 302 SEQ ID N°: 8: GTAGACCAGTTGGGCGATGT Sequência de ácido nucleico de iniciador pqsH 303 SEQ ID N°: 9: ATGTCTACGCGACCCTGAAG Sequência de ácido nucleico de iniciador pqsH 304 SEQ ID N°: 10: AACTCCTCGAGGTCGTTGTG

Claims (2)

1. Uso de um CBD ou uma composição do mesmo, caracterizadopelo fato de ser para manufatura de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de uma doença causada por bactérias P. AERUGINOSA.

2. Uso de CBD ou uma composição do mesmo de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato da dita doença ou distúrbio ser selecionado do grupo que consiste em infecção contraída no hospital, infecções do trato respiratório, infecções de pele e de tecido mole, infecções por ferimento, infecções dentais e bucais, infecções otorrinolaringológicas, infecções do caminho urológico e/ou prostático, infecções gastrointestinais, infecção do trato biliar, infecções oculares, bacteriemia, septicemia, infecções do sistema nervoso central e endocardite.