BR112022025466B1 - ANTICORPOS DE LIGAÇÃO A PROTOFIBRILA DE a-SINUCLEÍNA, ÁCIDOS NUCLEICOS, VETORES E COMPOSIÇÃO COMPREENDENDO OS REFERIDOS ANTICORPOS - Google Patents

Abstract

ANTICORPOS DE LIGAÇÃO A PROTOFIBRILA DE a-SINUCLEÍNA. A presente invenção é baseada, em parte, na descoberta de anticorpos que alvejam seletivamente agregados de a-sinucleína humana, tais como oligômeros/protofibrilas, tais como BAN0805. BAN0805 tem uma menor tendência para se ligar ao alvo monomérico de a-sinucleína indesejado em comparação com o anticorpo monoclonal de camundongo mAb47.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório norte- americano de N° 63/044881, depositado em 26 de junho de 2020, e do Pedido Provisório dos EUA de N° 63/071150, depositado em 27 de agosto de 2020, cujo conteúdo é incorporado por referência na presente invenção em sua totalidade.

REFERÊNCIA À LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS

[002] Incorporada neste documento por referência em sua totalidade está uma Listagem de Sequências intitulada Sequence_Listing_AVR-71925_ST25.txt, compreendendo a SEQ ID NO: 1 até SEQ ID NO: 20, que incluem as sequências de ácido nucleico e aminoácidos reveladas na presente invenção. A Listagem de Sequências foi submetida eletronicamente em formato de texto ASCII via EFS. A Listagem de Sequências foi criada pela primeira vez em 17 de junho de 2021 e tem 18.417 bytes de tamanho.

ANTECEDENTES TÉCNICOS

[003] O Pedido de Patente Internacional N° WO2011/104696 Al (que é incorporado neste documento por referência) revela um anticorpo IgG monoclonal murino mAb47, que se liga a formas protofibrilares de a-sinucleína. Permanece a necessidade de anticorpos que se liguem seletivamente a formas protofibrilares de a-sinucleína que sejam adequadas para uso em humanos.

SUMÁRIO

[004] A presente invenção está relacionada a anticorpos com alta afinidade por protofibrilas de a-sinucleína humana e baixa afinidade por monômeros de a-sinucleína. Em algumas modalidades, os anticorpos descritos na presente invenção alvejam seletivamente agregados de a-sinucleína humana, tal como oligômeros/protofibrilas, ou seja, com uma ligação muito mais forte a protofibrilas de α-sinucleina em comparação com o monômero. Em algumas modalidades, os anticorpos descritos na presente invenção têm melhor seletividade do que mAb47, ao se comparar as razões de ligação de protofibrila de α-sinucleina versus monômero. Em algumas modalidades, os anticorpos descritos na presente invenção são anticorpos anti-a-sinucleína.

[005] Em um aspecto, a presente invenção está relacionada ao BAN0805, um anticorpo monoclonal compreendendo uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos estabelecida em SEQ ID NO:3 e uma cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos estabelecida em SEQ ID NO:4 que seletivamente têm como alvo agregados de a-sinucleína humana, tais como oligômeros/protofibrilas com alta afinidade por protofibrilas de a-sinucleína humana e baixa afinidade por monômeros de a-sinucleína. Interessantemente, BAN0805 também exibe menor ligação de monômero de a-sinucleína do que mAb47, resultando em melhor seletividade para BAN0805 do que para mAb47 ao comparar as razões de ligação de protofibrila de a-sinucleína versus monômero. Adicionalmente, a ligação ao monômero de β e Y-sinucleína ou protofibrilas Aβ não foi detectada para BAN0805.

[006] A presente invenção está relacionada, adicionalmente, a anticorpos para melhorias no tratamento de distúrbios neurodegenerativos com patologia de a-sinucleína, incluindo, mas não se limitando a, doença de Parkinson (PD).

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[007] O arquivo do pedido ou patente contém pelo menos um desenho executado em cores. Cópias desta publicação de pedido de patente ou patente com desenho(s) em cores serão fornecidas pelo Escritório mediante solicitação e pagamento da taxa necessária.

[008] A FIG. 1 mostra dados de estresse térmico para BAN0805. As amostras dos anticorpos candidatos purificados a 1 mg/mL foram expostas a temperaturas de a) 4°C, b) 25°C, c) 37°C e d) 50°C durante duas semanas. As amostras foram então analisadas por SEC-MALS para verificar a agregação. Os dados sugerem que não há preocupações de agregação para BAN0805 devido ao estresse térmico.

[009] A FIG. 2 mostra o ELISA de inibição com valores de IC50 para BAN0805 quando ligado a monômeros de a-sinucleína e protofibrilas (PF). BAN0805 tem uma seletividade 910 vezes melhor para a forma protofibrilar de a-sinucleína em comparação com o mAb47, que tem apenas uma seletividade de 340 vezes (não mostrada). O nível de protofibrilas foi expresso como equivalente ao nível de monômero em concentração, e o tamanho das protofibrilas não foi considerado. A seletividade em vezes foi calculada dividindo o valor de IC50 para a ligação do monômero com o valor de IC50 para a ligação de PF.

[010] A FIG. 3 mostra ligação e seletividade para BAN0805 em comparação com mAb47 usando SPR Biacore. Os valores KD para protofibrila de a-sinucleína foram semelhantes para mAb47 e BAN0805, mostrando que a modificação do mAb47 não afetou a forte ligação a protofibrila de a-sinucleína, confirmando os resultados do ELISA de inibição. Os valores KD medidos com SPR resultaram em uma seletividade de 110.000 vezes e 18.000 vezes para PF vs monômero para BAN0805 e mAb47, respectivamente. Sensorgramas representativos de medições de mAb47 e BAN0805 SPR em Biacore 8K são mostrados.

[011] A FIG. 4 mostra reatividade cruzada de BAN0805, aqui referido como hu47-IgG4 para monômero de a-sinucleína, monômero de e-sinucleína, monômero de Y-sinucleína e Aβ-protofibrila usando ELISA de inibição. O resultado não mostrou ligação detectável ao monômero β ou Y-sinucleína ou Aβ- protofibrila.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[012] A presente invenção está relacionada a anticorpos com alta afinidade por protofibrilas de a-sinucleína humana e baixa afinidade por monômeros de a-sinucleína.

[013] Conforme revelado na presente invenção, a presente invenção está relacionada às seguintes modalidades.

[014] Modalidade 1. Um anticorpo compreendendo uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 2.

[015] Modalidade 2. O anticorpo da modalidade 1, em que o anticorpo é do isotipo IgG.

[016] Modalidade 3. O anticorpo da modalidade 1, em que o anticorpo é do isotipo IgG4.

[017] Modalidade 4. O anticorpo de qualquer uma das modalidades 1 a 3, em que o anticorpo tem um valor KD para ligar a forma protofibrilar de a- sinucleína pelo menos 110.000 vezes menor do que o valor KD para ligar a forma monomérica de a-sinucleína.

[018] Modalidade 5. O anticorpo de qualquer uma das modalidades 1 a 3, em que o anticorpo tem um valor KD para ligar a forma protofibrilar de a- sinucleína de no máximo 18 pM e um valor KD para ligar a forma monomérica de a-sinucleína de pelo menos 2200 nM.

[019] Modalidade 6. O anticorpo de qualquer modalidade 4 ou 5, em que o KD do referido anticorpo para ligar a forma protofibrilar de a-sinucleína e o KD do referido anticorpo para ligar a forma monomérica de a-sinucleína são medidos por SPR.

[020] Modalidade 7. Um anticorpo compreendendo uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 3 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 4.

[021] Modalidade 8. O anticorpo da modalidade 7, em que o anticorpo compreende duas cadeias pesadas e duas cadeias leves.

[022] Modalidade 9. Um ácido nucleico codificando um polipeptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1 a 4.

[023] Modalidade 10. O ácido nucleico da modalidade 9, compreendendo uma sequência selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 11 a 14 e 17 a 20.

[024] Modalidade 11. Um ou mais ácidos nucleicos codificando o anticorpo de qualquer uma das modalidades 1 a 8.

[025] Modalidade 12. O um ou mais ácidos nucleicos da modalidade 11, em que: (a) o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 11 e 12, (b) o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 13 e 14, (c) um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 17 e 18, ou (d) o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 19 e 20.

[026] Modalidade 13. Um ou mais vetor(es) compreendendo o(s) ácido(s) nucleico(s) de qualquer uma das modalidades 9, 10, 11 ou 12.

[027] Modalidade 14. Uma célula hospedeira compreendendo o(s) ácido(s) nucleico(s) de qualquer uma das modalidades 9 a 12.

[028] Modalidade 15. Uma célula hospedeira compreendendo um ou mais vetor(es) da modalidade 13.

[029] Modalidade 16. Uma célula hospedeira expressando o anticorpo de qualquer uma das modalidades 1 a 8.

[030] Modalidade 17. Uma composição compreendendo pelo menos o anticorpo de qualquer uma das modalidades 1 a 8 e um carreador farmaceuticamente aceitável.

[031] Em um aspecto, a presente invenção está relacionada a um anticorpo com alta afinidade por protofibrilas de a-sinucleína humana e baixa afinidade por monômeros de a-sinucleína e compreendendo uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2.

[032] Em uma modalidade, os anticorpos fornecidos na presente invenção compreendem uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 2.

[033] Em uma modalidade, os anticorpos fornecidos na presente invenção compreendem uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO:3 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO:4. Em algumas modalidades, os anticorpos fornecidos na presente invenção compreendem duas cadeias pesadas e duas cadeias leves.

[034] Em uma modalidade, o anticorpo descrito na presente invenção é do isotipo IgG, em particular o isotipo IgG humano. Em outra modalidade, o anticorpo é do isotipo IgG4.

[035] Dentro da presente invenção, alta afinidade para protofibrilas de a- sinucleína humana refere-se a uma constante de dissociação KD inferior a 10-7M para protofibrilas de a-sinucleína humana. Por conseguinte, em uma modalidade, os anticorpos descritos na presente invenção têm um KD inferior a 10-8,10-9,10-10, 10-11 M, ou 10-12M para protofibrilas de a-sinucleína humana. Em modalidades específicas, os anticorpos compreendem uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 2, e tem um KD de 11,2 a 25,8 μM para protofibrilas de α-sinucleina humana.

[036] Em outra modalidade, os anticorpos compreendem uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 2 e têm baixa afinidade para monômero de α-sinucleina humana. Por exemplo, o KD dos anticorpos descritos na presente invenção para ligação à forma monomérica de α-s^ucle^a é de pelo menos 1500 nM, pelo menos 1600 nM, pelo menos 1700 nM, pelo menos 1800 nM, pelo menos 1900 nM, pelo menos 2000 nM, pelo menos 2100 nM, pelo menos 2200 nM, pelo menos 2300 nM, pelo menos 2400 nM, pelo menos 2500 nM, pelo menos 2600 nM, pelo menos 2700 nM, pelo menos 2800 nM, pelo menos 2900 nM ou pelo menos 3000 nM. Em modalidades específicas, os anticorpos compreendem uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 2 e têm um KD de 1650 nM a 2730 nM para o monômero de α-s^ucle^a humana.

[037] Em uma modalidade, os anticorpos compreendem uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 2 e têm mais de 80.000 vezes, mais de 90.000 vezes, mais de 100.000 vezes, mais de 110.000 vezes ou mais de 120.000 vezes de seletividade para α-s^ucle^a protofibrilar humana versus α-s^ucle^a monomérica. Em modalidades específicas, os anticorpos compreendem uma cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 2 e têm uma seletividade de 64.000 a 244.000 vezes para protofibrila de a-sinucleína humana versus α-sinucleina monomérica.

[038] Em uma modalidade, essas afinidades de ligação são medidas usando ELISA de inibição, por exemplo, conforme descrito no exemplo 3. Em outra modalidade, essas afinidades de ligação são medidas por Ressonância de Plasmon de Superfície (SPR), por exemplo, conforme descrito no exemplo 3.

[039] Em outro aspecto, são fornecidos na presente invenção ácidos nucleicos que codificam pelo menos um polipeptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1 a 4. O ácido nucleico pode ser DNA ou RNA. O ácido nucleico pode compreender uma sequência selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 11 a 14 e 17 a 20.

[040] Em outro aspecto, são fornecidos na presente invenção um ou mais ácidos nucleicos que codificam um anticorpo da invenção. Em uma modalidade, o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID Nos: 11 e 12. Em outra modalidade, o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 13 e 14. Em uma modalidade, o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 17 e 18. Em uma modalidade, o um ou mais ácidos nucleicos compreendem as sequências de SEQ ID NOs: 19 e 20.

[041] Em outro aspecto, são fornecidos na presente invenção vetores compreendendo ácidos nucleicos que codificam pelo menos um polipeptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em SEQ ID NOs: 1 a 4. Tais vetores incluem, mas não estão limitados a vetores de clonagem ou vetores de expressão. Em um aspecto, um ou mais vetores estão fornecendo a codificação de um anticorpo da invenção. Em uma modalidade, o um ou mais vetores compreendem as sequências de SEQ ID Nos: 11 e 12. Em outra modalidade, o um ou mais vetores compreendem as sequências de SEQ ID Nos: 13 e 14. Em uma modalidade, o um ou mais vetores compreendem as sequências de SEQ ID Nos: 17 e 18. Em uma modalidade, o um ou mais vetores compreendem as sequências de SEQ ID Nos: 19 e 20.

[042] Em outro aspecto, são fornecidas na presente invenção células hospedeiras compreendendo ácidos nucleicos que codificam pelo menos um polipeptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1 a 4. Em uma modalidade, as células hospedeiras compreendem ácido(s) nucleico(s) que codifica(m) um anticorpo da invenção. As células hospedeiras descritas na presente invenção podem ser células de mamífero, tais como células B, hibridomas ou células CHO. Em uma modalidade, as células hospedeiras descritas na presente invenção são células humanas.

[043] Em outro aspecto, fornecida na presente invenção está uma composição compreendendo um anticorpo da invenção e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

EXEMPLOS Exemplo 1 - Geração de Candidatos a Anticorpos

[044] As variantes iniciais de mAb47 foram geradas por enxerto direto de CDRs de mAb47 em sequências estruturais humanas e fazendo mutações reversas nos resíduos de camundongo em várias posições. Nenhuma das variantes iniciais mostrou propriedades de ligação desejadas para a-sinucleína. Portanto, um novo modelo foi construído e analisado para buscar mais mutações possíveis para gerar novas variantes.

[045] Na segunda tentativa de melhorar o mAb47, foram verificados resíduos menos prováveis que interagem com o alvo e os resíduos a 4Â das CDRs determinadas. Uma variante de anticorpo com uma sequência de cadeia pesada estabelecida na SEQ ID NO: 3 e uma cadeia leve estabelecida na SEQ ID NO: 4 foram geradas e nomeadas como BAN0805. Verificou-se que as mutações de volta V71K e R94K, enquanto simultaneamente presentes em BAN0805, são cruciais para a capacidade de ligação desses anticorpos, pois sua remoção nas outras variantes resultou em perda de ligação.

[046] Como o BAN0805 tem uma mutação reversa a menos do que uma variante comparável e mostrou ligação e seletividade para protofibrilas acima das espécies de monômeros, o BAN0805 foi escolhido como o principal candidato.

Exemplo 2 - Caracterização de Candidatos a Anticorpos

[047] Para determinar estabilidade térmica, os anticorpos foram submetidos a temperaturas mais altas por 10 minutos, resfriados a 4°C e usados em um ensaio ELISA na concentração de EC80 de cada candidato (geralmente 5 a 50 ng/mL). BAN0805 foi estável, mantendo sua capacidade de ligação à α- sinucleína até os 75°C, quando começou a diminuir, enquanto a ligação do anticorpo quimérico de camundongo c47 ou cmAb47 (a quimera que combina IgG4 humana e a região variável de mAb47) caiu drasticamente em torno de 5°C mais cedo.

[048] A fim de determinar a temperatura de fusão dos anticorpos, cmAb47 foi testado contra BAN0805 em um ensaio de deslocamento térmico. Os dados de temperatura de fusão indicam que a Tm para BAN0805 foi calculada em 65 a 65,4°C, inferior à quimérica a 70°C.

[049] Adicionalmente, amostras purificadas a 1 mg/mL foram injetadas a 0,4 mL/min em uma coluna de exclusão de tamanho em um sistema de HPLC e analisadas por dispersão de luz multiângulo para determinar as massas molares absolutas e verificar a agregação. Os dados sugerem que não houve preocupações de agregação para BAN0805. BAN0805 foi monodisperso (Mw/Mn < 1,05). A recuperação de massa foi de 100% (massa calculada sobre massa injetada), o que indica uma boa recuperação de proteína.

[050] A Cromatografia de Interação Cruzada usando IgG policlonal humana purificada em massa é uma técnica para monitorar interações proteína-proteína não específicas e pode ser usada para discriminar entre anticorpos solúveis e insolúveis. Um índice de retenção elevado (k') indica uma propensão de autointeração e uma baixa solubilidade. BAN0805 apresentou um Índice de Retenção de 0,025 que está abaixo de 0,035 do cmAb47, indicando uma baixa propensão para interações não específicas e boa solubilidade.

[051] Para análise de estresse de congelamento/descongelamento, amostras dos anticorpos candidatos purificados a 1 mg/mL foram submetidas a 10 ciclos de 15 minutos a -80°C, seguidos de descongelamento por 15 minutos à temperatura ambiente. Para análise de estresse induzido pelo calor, amostras dos anticorpos candidatos purificados a 1 mg/mL foram expostas a temperaturas de a) 4°C, b) 25°C, c) 37°C e d) 50°C por duas semanas. As amostras foram então analisadas por SEC-MALS para verificar a agregação. Os dados sugerem que os ciclos de congelamento/degelo e estresse térmico não causaram agregação em BAN0805. Ver FIG. 1.

[052] BAN0805 foi analisado e comparado com a linhagem germinativa mais próxima (IGVH4-59*03/IGHJ3*01 para HK e IGVK2-28*01/IGKJ2*02 para KA) seguindo as definições IMGT CDR e a ferramenta DomainGapAlign. A identidade geral com a linhagem germinativa humana foi de 86,5% para a cadeia leve, acima do ponto de corte de 85% para ser considerada humanizada para esta análise. Para a cadeia pesada, após o enxerto de CDRs e a introdução de duas mutações reversas de camundongo, a porcentagem de identidade com a linhagem germinativa humana caiu para pouco menos de 81%. Isso pode ser explicado pelo fato de o IMGT CDR2 ser significativamente menor do que a definição de Kabat usada aqui, o que ocasionou a inserção de um número maior de resíduos de camundongo no início do framework 3.

Exemplo 3 - Ligação Seletiva de BAN0805 a Protofibrilas de a-sinucleína Humana

[053] A seletividade de ligação de BAN0805 a protofibrilas de a-sinucleína humana foi medida tanto pelo ELISA de inibição quanto pela Ressonância de Plasmon de Superfície (SPR).

[054] Os valores de IC50 para protofibrila de a-sinucleína foram muito semelhantes para mAb47 e BAN0805 (2,7 nM e 2,2 nM, respectivamente), mostrando que as características de ligação a protofibrila não mudaram após humanização. Em contraste, a ligação ao monômero de a-sinucleína mudou, resultando em uma resistência de ligação reduzida de BAN0805 ao monômero de a-sinucleína. Isso resultou em melhor seletividade para protofibrila de a- sinucleína versus monômero para BAN0805 (910 vezes) em comparação com mAb47 (340 vezes). Ver FIG. 2.

[055] No entanto, devido às limitações de detecção, não foi possível diminuir ainda mais a concentração de anticorpos para possibilitar a detecção de valores de IC50 ainda mais baixos e, portanto, aproximar-se do valor de IC50 "verdadeiro". Portanto, os valores de IC50 apresentados foram obtidos de acordo com o procedimento atual para o ELISA de inibição que foi usado para todos os lotes de mAb47 e BAN0805, com a noção de que os valores de IC50 para a protofibrila provavelmente estão superestimados (ou seja, a resistência de ligação é provavelmente subestimada). Uma ligação mais precisa e, portanto, seletividade foram obtidas usando SPR, que é descrita abaixo.

[056] A seletividade de ligação de mAb47 e BAN0805 foi confirmada por SPR usando um instrumento Biacore 8K (GE Healthcare). Devido a problemas de viabilidade causados pela complexidade do antígeno-alvo em combinação com a dependência pronunciada da avidez dos anticorpos, diferentes configurações de ensaio foram usadas para avaliar a ligação de protofibrila e monômero de α- sinucleína, respectivamente. Para medições de ligação ao monômero, o chip foi revestido com um anticorpo anticamundongo ou anti-humano para mAb47 e BAN0805, respectivamente. 0,25 a 1,5 μg/mL de mAb47 ou BAN0805 foi então capturado na superfície, seguido por uma injeção cinética de ciclo único de diluição de 5 vezes de monômero de α-sinucleina. Para medir a ligação a protofibrila (PF), o chip foi revestido com 0,5 μg/mL de PF, e uma diluição de 2 vezes de mAb47 ou BAN0805 foi injetada usando cinética de ciclo único. Sensorgramas representativos para mAb47 e BAN0805 são mostrados em FIG. 3.

[057] Os valores KD para a protofibrila de α-sinucleina foram semelhantes para mAb47 e BAN0805, mostrando que a modificação do mAb47 não afetou a forte ligação a protofibrila de α-sinucleina (Tabela 1), confirmando os resultados do ELISA de inibição. No entanto, os valores KD estavam na faixa de pM, confirmando as limitações mencionadas com o ELISA de inibição. Significativamente, foi confirmado pelo SPR que a afinidade de BAN0805 para monômero de α-sinucleina foi reduzida em comparação com mAb47. Os valores KD medidos com SPR resultaram em uma seletividade de 110.000 vezes e 18.000 vezes para PF versus monômero para BAN0805 e mAb47, respectivamente. Os valores médios KD para mAb47 e BAN0805 para monômero de α-sinucleina e protofibrila são mostrados na Tabela 1. Tabela 1. Valores KD para mAb47 e BAN0805 para ligação a protofibrila de α-sinucleina (PF) e monômero (M) por Biacore SPR. Os dados são apresentados como Média± Desvio padrão (n=Número de experimentos) KD: Constante de dissociação

[058] A reatividade cruzada de proteínas homólogas, tal como β ou y- sinucleína, e outras proteínas propensas à agregação, como Aβ, foi testada usando tanto ELISA direto (no qual o revestimento denso imita formas agregadas da proteína revestida), assim como ELISA de inibição. Aqui, a reatividade cruzada de mAb47 e BAN0805 foi analisada lado a lado por ELISA de inibição. O ELISA de inibição foi realizado com monômero β-sinucleina, monômero Y—sinucleína e Aβ- protofibrila como antígenos. O resultado indica que não houve ligação detectável de BAN0805 ao monômero β- ou Y-sinucleína ou Aβ-protofibrila. Um teste representativo de reatividade cruzada BAN0805 para β ou Y-sinucleína em ELISA de inibição é mostrado na FIG. 4. Os dados são apresentados na Tabela 2. Tabela 2. Reatividade cruzada de mAb47 e BAN0805 para monômero de β- sinucleína, monômero de Y-sinucleína e Aβ-protofibrila. n.b. = sem ligação

[059] Resultados tanto do ELISA de inibição quanto dos dados de Ressonância Plasmon de Superfície (SPR) Biacore mostraram que a afinidade de BAN0805 pelo monômero de a-sinucleína foi reduzida em comparação com mAb47, indicando uma melhor seletividade de BAN0805 em comparação com mAb47. Adicionalmente, nenhuma ligação ao monômero de β e Y-sinucleína ou Aβ-protofibrilas foi observada em concentrações testadas (até a faixa de μM) para BAN0805.

[060] Dessa forma, a presente invenção está relacionada a um anticorpo com alta afinidade para protofibrilas de a-sinucleína e baixa afinidade para monômeros de α-sinucleina, tendo as seguintes características em comparação com mAb47 murino: (1) BAN0805 tem uma ligação muito mais forte às protofibrilas de α- sinucleína em comparação com o monômero; (2) ambos os dados de ELISA de inibição e SPR Biacore mostraram que a ligação de monômero de a-sinucleína foi mais forte para mAb47 em comparação com BAN0805, resultando em melhor seletividade para BAN0805 do que para mAb47 ao comparar as taxas de ligação de protofibrila de a-sinucleína versus monômero (ou seja, BAN0805 tem uma menor tendência para se ligar ao alvo monomérico de a-sinucleína indesejável em comparação com mAb47); e (3) nenhuma ligação ao monômero β e Y-sinucleína ou protofibrilas Aβ foi observada nas concentrações testadas (até a faixa μM) para BAN0805.

Exemplo 4 - Produção de BAN0805

[061] Para produzir BAN0805, sequências de DNA otimizadas que codificam BAN0805 VH (SEQ ID NO: 13) e VL de SEQ ID NO: 14) incluindo peptídeos de sinal foram sintetizadas e clonadas em vetores GS pXC-IgG4Pro(deltaK) e pXC-Kappa (Lonza), respectivamente. Os SGVs HC e LC resultantes foram então usados para gerar um vetor de gene duplo (DGV) contendo ambos os genes HC e LC. As sequências de DNA otimizadas que codificam a cadeia pesada (HC) e a cadeia leve (LC) de BAN0805 são estabelecidas nas SEQ ID NOs: 11 e 12, respectivamente. As sequências de DNA otimizadas que codificam a região variável de cadeia pesada (VH) e a região variável de cadeia leve (VL) de BAN0805 são estabelecidas nas SEQ ID NOs: 13 e 14, respectivamente. As SEQ ID NOs: 11 a 14 todas incluem uma sequência de nucleotídeos que codifica um peptídeo sinal (ver Tabela 3B). As sequências de nucleotídeos correspondentes às sequências de aminoácidos para BAN0805 HC, LC, VH e VL, excluindo o peptídeo sinal, são estabelecidas nas SEQ ID NOs: 17, 18, 19 e 20, respectivamente. As sequências de CDR de BAN0805 estão listadas na Tabela 3 A. As sequências de CDR de aminoácidos de cadeia pesada (VH-CDR) 1 a 3, de acordo com a nomenclatura Chothia, são estabelecidas nas SEQ ID NOs: 5, 6 e 7, respectivamente. As sequências de CDR de aminoácidos de cadeia pesada (VH- CDR) 1-3, de acordo com a nomenclatura Kabat, são estabelecidas nas SEQ ID NOs: 15,16 e 7, respectivamente. A sequência CDR de aminoácidos de cadeia pesada (VH-CDR-3), de acordo com as nomenclaturas Chothia e Kabat, é a mesma e estabelecida na SEQ ID NO: 7.

[062] As sequências de aminoácidos de CDR de cadeia leve (VL-CDR) 1 a 3, de acordo com as nomenclaturas Chothia e Kabat, são as mesmas e estabelecidas nas SEQ ID Nos: 8, 9 e 10, respectivamente.

[063] O DGV resultante, denominado pBAN0805/DGV, foi então transfectado transitoriamente para células CHOK1SV GS-KO e cultivado sob condições que resultaram na secreção do anticorpo montado. O anticorpo secretado foi então purificado por cromatografia de afinidade de Proteína A. Tabela 3. LISTA DE SEQUÊNCIAS A. BAN0805 VH: QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVHWIRQPPGKGLEWIGVIWRGGSTDY SAAFMSRLTISKDTSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKLLRSVGGFADWGQGTMVTV SS (SEQ ID NO: 1) VL: DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSOTIVHNNGNTYLEWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRF SGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFOGSHVPFTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO; 2) Cadeia Pesada QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTSYGVHWIRQPPGKGLEWIGVIWRGGSTD YSAAFMSRLTISKDTSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKLLRSVGGFADWGQGTMVT VSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVL QSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSTEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQ EEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDK SRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG (SEQ ID NO: 3) Cadeia Leve D1VMTOSPLSLPVTPGEPASISCRSSOTIVHNNGNTYLEWYLQKPGQSPOLLIYKVSNRF SGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPFTFGOGTKLEIKRTVAAPS VFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTY SLSSTLTLSKADYEKIIKVYACEVTIIQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 4) CDRs VH-CDR-1 (Chothia): GFSLTSYGVH (SEQ ID NO: 5) VH-CDR-1 (Kabat): SYGVH (SEQ ID NO: 15) VH-CDR-2 (Chothia): V1WRGGSTDYSAAF (SEQ ID NO: 6) VH-CDR-2 (Kabat): VIWRGGSTDYSAAFMS (SEQ ID NO: 16) VH-CDR-3 (Kabat/Chothia): LLRSVGGFAD (SEQ ID NO: 7) VL-CDR-1 (Kabat/Chothia): RSSQTIVHNNGNTYLE (SEQ ID NO: 8) VL-CDR-2 (Kabat/Chothia): KVSNRFS (SEQ ID NO: 9) VL-CDR-3 (Kabat/Chothia): FQGSHVPFT (SEQ ID NO: 10)

[064] A Tabela 3A lista as sequências sublinhadas como sequências CDR de acordo com a nomenclatura Chothia e as sequências em negrito como sequências CDR de acordo com a nomenclatura Kabat. CDR1, CDR2 e CDR3 são mostrados na ordem padrão de aparecimento da esquerda (terminal-N) para a direita (terminal-C). B. Sequências de Nucleotídeos Codificando Cadeias Pesadas e Leves BAN0805 Gene BAN0805 HC com sequência de sinal (SEQ ID N°: 11) ATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCT CAGGTTCAGCTGCAAGAGTCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCTTCCGAAACACTGTCT CTGACCTGCACCGTGTCCGGCTTCTCCCTGACATCTTATGGGGTGCACTGGATCAGA CAGCCTCCAGGCAAAGGCCTGGAATGGATCGGAGTGATTTGGAGAGGCGGCTCCAC CGATTACTCCGCCGCCTTCATGTCCCGGCTGACCATCTCTAAGGACACCTCCAAGAA CCAGGTGTCCCTGAAGCTGTCCTCTGTGACCGCTGCTGATACCGCCGTGTACTACTG TGCCAAGCTGCTGAGATCTGTCGGCGGCTTTGCTGATTGGGGCCAGGGCACAATGGT CACCGTGTCTAGCGCTTCTACAAAGGGCCCAAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTC CAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCC CCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACC TTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGT GCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCA GCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCC TGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCC AAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGT GTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGC ACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTG TCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAA GGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGG GCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACC AAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCC GTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGT GCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCA GATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAAC CACTAC ACCCAGAAG AGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC TGA TGA Gene BAN0805 LC com sequência de sinal (SEQ ID NO: 12) ATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCCAGA TGÇGACATCGTGATGACCCAGTCTCCACTGAGCCTGCCTGTGACACCTGGCGAGCCT GCTTCCATCTCCTGCAGATCCTCTCAGACCATCGTGCACAACAACGGCAACACCTAC CTGGAATGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCTCCTCAGCTGCTGATCTACAAGGTG TCCAACCGGTTCTCTGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAC TTCACCCTGAAGATCTCCAGAGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTTC CAAGGCTCTCACGTGCCCTTCACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGT ACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAG CGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGG TGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCAC CGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCA AGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTG TCCAGCCCCGTGACCAAGAGCΠCAACAGGGGCGAGTGC/'G'ZΠGJ Gene BAN0805 VH com sequência de sinal (SEQ ID NO: 13) ATGGAATGGTCCTGGGTGTTCCTGTTCTTCCTGTCCGTGACCACCGGCGTGCACTCT CAGGTTCAGCTGCAAGAGTCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCTTCCGAAACACTGTCT CTGACCTGCACCGTGTCCGGCTTCTCCCTGACATCTTATGGGGTGCACTGGATCAGA CAGCCTCCAGGCAAAGGCCTGGAATGGATCGGAGTGATTTGGAGAGGCGGCTCCAC CGATTACTCCGCCGCCTTCATGTCCCGGCTGACCATCTCTAAGGACACCTCCAAGAA CCAGGTGTCCCTGAAGCTGTCCTCTGTGACCGCTGCTGATACCGCCGTGTACTACTG TGCCAAGCTGCTGAGATCTGTCGGCGGCTTTGCTGATTGGGGCCAGGGCACAATGGT CACCGTGTCTAGCGC Gene BAN0805 VL com sequência de sinal (SEQ ID NO: 14) ATGTCTGTGCCTACACAGGTTCTGGGACTGCTGCTGCTGTGGCTGACCGACGCCAGA TGÇGACATCGTGATGACCCAGTCTCCACTGAGCCTGCCTGTGACACCTGGCGAGCCT GCTTCCATCTCCTGCAGATCCTCTCAGACCATCGTGCACAACAACGGCAACACCTAC CTGGAATGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCTCCTCAGCTGCTGATCTACAAGGTG TCCAACCGGTTCTCTGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAC TTCACCCTGAAGATCTCCAGAGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTTC CAAGGCTCTCACGTGCCCTTCACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG Gene BAN0805 HC (SEQ ID NO: 17) CAGGTTCAGCTGCAAGAGTCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCTTCCGAAACACTGTCT CTGACCTGCACCGTGTCCGGCTTCTCCCTGACATCTTATGGGGTGCACTGGATCAGA CAGCCTCCAGGCAAAGGCCTGGAATGGATCGGAGTGATTTGGAGAGGCGGCTCCAC CGATTACTCCGCCGCCTTCATGTCCCGGCTGACCATCTCTAAGGACACCTCCAAGAA CCAGGTGTCCCTGAAGCTGTCCTCTGTGACCGCTGCTGATACCGCCGTGTACTACTG TGCCAAGCTGCTGAGATCTGTCGGCGGCTTTGCTGATTGGGGCCAGGGCACAATGGT CACCGTGTCTAGCGCTTCTACAAAGGGCCCAAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTC CAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCC CCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACC TTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGT GCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCA GCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCC TGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCC AAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGT GTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGC ACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTG TCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAA GGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGG GCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACC AAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCC GTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGT GCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCA GATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAAC CACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC/G/Í Gene BAN0805 LC (SEQ ID NO: 18) GACATCGTGATGACCCAGTCTCCACTGAGCCTGCCTGTGACACCTGGCGAGCCTGCT TCCATCTCCTGCAGATCCTCTCAGACCATCGTGCACAACAACGGCAACACCTACCTG GAATGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCTCCTCAGCTGCTGATCTACAAGGTGTCC AACCGGTTCTCTGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTC ACCCTGAAGATCTCCAGAGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTTCCA AGGCTCTCACGTGCCCTTCACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGTAC GGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCG GCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTG CAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCG AGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAG GCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTC CAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC7G/1 Gene BAN0805 VH (SEQ ID NO: 19) CAGGTTCAGCTGCAAGAGTCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCTTCCGAAACACTGTCT CTGACCTGCACCGTGTCCGGCTTCTCCCTGACATCTTATGGGGTGCACTGGATCAGA CAGCCTCCAGGCAAAGGCCTGGAATGGATCGGAGTGATTTGGAGAGGCGGCTCCAC CGATTACTCCGCCGCCTTCATGTCCCGGCTGACCATCTCTAAGGACACCTCCAAGAA CCAGGTGTCCCTGAAGCTGTCCTCTGTGACCGCTGCTGATACCGCCGTGTACTACTG TGCCAAGCTGCTGAGATCTGTCGGCGGCTTTGCTGATTGGGGCCAGGGCACAATGGT CACCGTGTCTAGCGC Gene BAN0805 VL (SEQ ID NO: 20) GACATCGTGATGACCCAGTCTCCACTGAGCCTGCCTGTGACACCTGGCGAGCCTGCT TCCATCTCCTGCAGATCCTCTCAGACCATCGTGCACAACAACGGCAACACCTACCTG GAATGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCTCCTCAGCTGCTGATCTACAAGGTGTCC AACCGGTTCTCTGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTC ACCCTGAAGATCTCCAGAGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTTCCA AGGCTCTCACGTGCCCTTCACCTTTGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG

[065] As sequências que codificam um peptídeo sinal estão sublinhadas. Os códons de início estão em negrito, e os códons de parada estão em itálico.

Claims (12)

1. Anticorpo, caracterizado pelo fato de que compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2.

2. Anticorpo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é do isotipo IgG.

3. Anticorpo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é do isotipo IgG4.

4. Anticorpo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo tem um valor KD para ligação à forma protofibrilar de a-sinucleína pelo menos 110.000 vezes menor do que o valor KD para ligação à forma monomérica de a-sinucleína.

5. Anticorpo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo tem um valor KD para ligação à forma protofibrilar de a-sinucleína de no máximo 18 pM e um valor KD para ligação à forma monomérica de a-sinucleína de pelo menos 2200 nM.

6. Anticorpo de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que o KD do referido anticorpo para ligação à forma protofibrilar de a- sinucleína e o KD do referido anticorpo para ligação à forma monomérica de a- sinucleína são medidos por SPR.

7. Anticorpo, caracterizado pelo fato de que compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4.

8. Anticorpo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende duas cadeias pesadas e duas cadeias leves.

9. Ácido nucleico, caracterizado pelo fato de que codifica um polipeptídeo compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nas SEQ ID NOs: 1 a 4, em que o referido ácido nucleico compreende uma sequência selecionada a partir do grupo que consiste nas SEQ ID NOs: 11 a 14 e 17 a 20.

10. Um ou mais ácidos nucleicos, caracterizado(s) pelo fato de que codifica(m) o anticorpo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em que: (a) o um ou mais ácidos nucleicos compreende(m) as sequências de SEQ ID NOs: 11 e 12, (b) o um ou mais ácidos nucleicos compreende(m) as sequências de SEQ ID NOs: 13 e 14, (c) o um ou mais ácidos nucleicos compreende(m) as sequências de SEQ ID NOs: 17 e 18, ou (d) o um ou mais ácidos nucleicos compreende(m) as sequências de SEQ ID NOs: 19 e 20.

11. Um ou mais vetores, caracterizado(s) pelo fato de que compreendem o(s) ácido(s) nucleico(s) definidos na reivindicação 9 ou 10.

12. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um anticorpo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8 e um veículo farmaceuticamente aceitável.