BR112021008896A2 - tratamento e inibição da fibrose em pacientes com doença hepática gordurosa não-alcoólica. - Google Patents

Abstract

tratamento e inibição da fibrose em pacientes com doença hepática gordurosa não-alcoólica. a invenção se refere ao tratamento, inibição e redução da fibrose, incluindo fibrose hepática. mais especificamente, a invenção fornece composições e métodos úteis para o tratamento e inibição de distúrbios fibróticos, condições hepato-fibróticas associadas com doença hepática gordurosa não alcoólica (dhgna) e esteato-hepatite não alcoólica (ehna), empregando o uso de ácido 3beta-araquidilamido-7alfa,12alfa-dihidroxi-5beta-colan-24-oico (aramchol) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em uma dose com uma exposição sistêmica vantajosa.

Description

TRATAMENTO E INIBIÇÃO DA FIBROSE EM PACIENTES COM DOENÇA HEPÁTICA GORDUROSA NÃO-ALCOÓLICA CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção se refere a formas de dosagem unitárias de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α- dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) e uso do mesmo no tratamento e / ou inibição da fibrose.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] O Aramchol™ é uma amida conjugada de ácido araquídico e ácido 3-aminocólico, eficaz na redução do teor de gordura hepática, bem como na melhora dos parâmetros metabólicos associados à doença hepática gordurosa. É um conjugado de ácido graxo-ácido biliar direcionado para o fígado, oral, que regula negativamente a desaturase estearoil CoA tipo 1. Pertence a uma família de conjugados de ácidos graxos / ácidos biliares sintéticos (FABACs) e está sendo desenvolvido como um tratamento potencialmente modificador da doença hepática gordurosa e esteato hepatite não alcoólica (EHNA).

[0003] O Aramchol™ é quimicamente denominado ácido 3β- araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (ou ácido (4R)-4-((3S,5S,7R,10S,12S,13R,17R)-7,12-dihidroxi-3- icosanamido-10,13-dimetil hexadecahidro-1H-ciclopenta[a] fenantren-17-il) pentanoico, (nome IUPAC)), e é representado pela estrutura química a seguir:

[0004] O Aramchol™, processos para a sua preparação, e uso do mesmo estão divulgados em U.S. 6,384,024; U.S. 6,395,722; U.S. 6,589,946; U.S. 7,501,403; U.S. 8,110,564; U.S. 2012/0214872; e WO 2009/060452. Fibrose

[0005] A formação de tecido conjuntivo fibroso faz parte do processo normal de cicatrização após a lesão tecidual por lesão ou inflamação. Durante este processo, células imunes ativadas incluindo macrófagos estimulam a proliferação e ativação de fibroblastos, que por sua vez depositam tecido conjuntivo. No entanto, a produção anormal ou excessiva de tecido conjuntivo pode levar ao acúmulo de material fibroso o qual interfere no funcionamento normal do tecido. O crescimento fibrótico pode proliferar e invadir o tecido saudável circundante, mesmo após a cicatrização da lesão original. Essa formação anormal de tecido conjuntivo excessivo, ocorrendo em um processo reparador ou reativo, é referida como fibrose.

[0006] Fisiologicamente, a fibrose atua para depositar tecido conjuntivo, o qual pode obliterar a arquitetura e função do órgão ou tecido subjacente. Definido pelo acúmulo patológico de proteínas da matriz extracelular (ECM), a fibrose resulta em cicatrização e espessamento do tecido afetado, o que interfere no funcionamento normal dos órgãos. Em diversas condições, a formação de tecido fibrótico é caracterizada pela deposição de quantidades anormalmente elevadas de colágeno. A síntese de colágeno também está envolvida em uma série de outras condições patológicas. Por exemplo, condições clínicas e distúrbios associadas com fibrose primária ou secundária, tais como esclerose sistêmica, doença do enxerto contra hospedeiro (DECH), distúrbios de fibrose pulmonar e autoimune, distinguem-se pela produção excessiva de tecido conjuntivo, que resulta na destruição da arquitetura e função do tecido normal. Essas doenças podem ser melhor interpretadas em termos de perturbações nas funções celulares, uma das principais manifestações das quais é a síntese e deposição excessiva de colágeno. O papel do colágeno na fibrose tem motivado tentativas de desenvolver fármacos que inibem seu acúmulo. Fibrose hepática

[0007] A fibrose do fígado, também aqui referida como fibrose hepática, pode ser causada por vários tipos de lesão hepática crônica, especialmente se um componente inflamatório estiver envolvido. A lesão hepática aguda autolimitada (por exemplo, hepatite A viral aguda), mesmo quando fulminante, não necessariamente distorce a arquitetura do scaffold e, portanto, normalmente não causa fibrose, apesar da perda de hepatócitos. No entanto, fatores tais como alcoolismo crônico, desnutrição, hemocromatose, e a exposição a venenos, toxinas ou fármacos, pode levar a lesão hepática crônica e fibrose hepática devido à exposição a substâncias químicas hepatotóxicas. Cicatrizes hepáticas, causadas por cirurgia ou outras formas de lesão associadas com obstrução biliar mecânica, também podem resultar em fibrose.

[0008] A fibrose em si não é necessariamente sintomática, no entanto ela pode levar ao desenvolvimento de hipertensão portal, na qual a cicatriz distorce o fluxo sanguíneo através do fígado, ou cirrose, na qual a cicatriz resulta na interrupção da arquitetura hepática normal e disfunção hepática. A extensão de cada uma dessas patologias determina a manifestação clínica de distúrbios hepato fibróticos. Por exemplo, a fibrose hepática congênita afeta ramos da veia porta, poupando amplamente o parênquima. O resultado é hipertensão portal com preservação da função hepatocelular. Tratamento

[0009] Tentativas de desenvolver agentes anti- fibróticos para o tratamento de diversos distúrbios têm sido reportadas. No entanto, o tratamento da fibrose estabelecida, formada após meses ou anos de lesão crônica ou repetida, continua sendo um desafio. Em seus estágios iniciais, a fibrose hepática pode regredir se a causa for reversível (por exemplo com depuração viral). Assim, a maioria das opções de tratamento disponíveis são destinadas a remover a base da lesão hepática, tais como pela eliminação do vírus da hepatite B ou do vírus da hepatite C na hepatite viral crônica, abstinência de álcool na doença hepática alcoólica, remoção de metais pesados tais como ferro em hemocromatose ou cobre na doença de Wilson, e descompressão das vias biliares na obstrução biliar.

[0010] Tratamentos destinadas a reverter a fibrose são geralmente muito tóxicas para uso a longo prazo (por exemplo, corticosteroides, penicilamina) ou não têm eficácia comprovada (por exemplo, colchicina). A silimarina, presente no cardo leiteiro, é um remédio alternativo popular para o tratamento da fibrose hepática, parece ser seguro, mas carece de eficácia. Potenciais agentes terapêuticos

[0011] Tentativas de desenvolver agentes anti- fibróticos específicos para o tratamento doenças hepáticas têm sido reportados. Por exemplo, a patente norte-americana no. US 8,729,046 se refere um métodos para o tratamento da fibrose de um tecido, incluindo fibrose do fígado, usando combinações de ácidos nucleicos ou análogos de ácidos nucleicos. Especificamente, os ácidos nucleicos ou análogos dos mesmos são direcionados para microRNAs do grupo miR23b. O US 6,562,829 divulga composições para o tratamento de fibrose hepática e métodos de uso e manufatura da composição, a composição compreendendo um derivado de quinazolinona, preferencialmente halofuginona. O US 8,858,954 é direcionado para uma composição farmacêutica para a prevenção e tratamento de fibrose hepática ou doença do fígado gorduroso não alcoólico, compreendendo 50 a 90 % em peso de pó de micélio de Cordyceps sinensis, e 10 a 50 % em peso de pó de astrágalo condensado.

[0012] A publicação no. U.S. 2015/359805 se refere aos moduladores do receptor farnesoide X (FXR) os quais podem ser usados para o tratamento de distúrbios colestáticos, em particular a derivados de ácido biliar em que o C6 contém um etil e o grupo carboxi C24 é transformado em um grupo sulfato.

Entre os distúrbios sugeridos a serem tratados estão a doença hepática alcoólica, doença hepática de doador vivo, regeneração, fibrose hepática congênita, coledocolitíase e doença hepática granulomatosa. O U.S. 2014/187633 é direcionado um métodos de tratamento e / ou prevenção de esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e / ou cirrose biliar primária compreendendo administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma composição farmacêutica compreendendo ácido eicosapentaenoico ou um derivado do mesmo. O agonista de FXR, ácido obeticólico, o qual é um ácido biliar modificado, está em ensaios clínicos de fase III para cirrose biliar primária. Foi relatado que o uso deste fármaco é comumente associado com efeitos colaterais como prurido.

[0013] O ácido ursodeoxicólico (UDCA, Ursodiol) é o tratamento mais utilizado para a cirrose biliar primária. É um dos ácidos biliares secundários, que são subprodutos metabólicos das bactérias intestinais. O fármaco é considerado para auxiliar na redução da colestase e melhora os resultados do exame de sangue (testes de função hepática). No entanto, ele tem um efeito mínimo sobre os sintomas e a melhora do prognóstico é controversa. Para aliviar a coceira causada pelos ácidos biliares em circulação, que normalmente seriam removidos pelo fígado, a colestiramina (um sequestrante de ácido biliar) pode ser prescrita para pacientes com cirrose biliar primária. O agente pode auxiliar na absorção de ácidos biliares no intestino a serem eliminados, em vez de entrar novamente na corrente sanguínea. Agentes alternativos incluem estanozolol, naltrexona e rifampicina.

[0014] O ácido obeticólico (OCA, Ocaliva) é um análogo semissintético do ácido biliar em desenvolvimento nos estudos de fase 2 e 3 para condições específicas do fígado e gastrointestinais. O FDA concedeu aprovação acelerada para Ocaliva em 27 de maio de 2016 para o tratamento da colangite biliar primária (CBP) em combinação com ácido ursodeoxicólico (UDCA) em adultos com uma resposta inadequada ao UDCA, ou como terapia única em adultos incapazes de tolerar UDCA. Em adição, um ensaio de fase 2 em pacientes com EHNA mostrou que a administração de OCA reduziu os marcadores de inflamação hepática e fibrose e aumentou a sensibilidade à insulina.

[0015] Os WO 2014/197738 e WO 2016/094570 referem-se a compostos de pequenas moléculas, revelados como inibidores da trans diferenciação e ativação de mio fibroblastos. Os fármacos e combinações sugeridas para o tratamento de fígado gorduroso, inter alia, foi divulgado, por exemplo, no WO 2016/112305 e EP2632925 (inibidores da acetil-CoA carboxilase) bem como WO 2016/154258 (agonistas duplos da PPAR delta / gama). Alguns dos compostos divulgados foram sugeridos para serem usados em combinação com vários outros fármacos.

[0016] Muitos pacientes não respondem aos tratamentos disponíveis para os distúrbios fibróticos, e o tratamento a longo prazo está limitado pela toxicidade e efeitos colaterais. Portanto, permanece a necessidade de desenvolver modalidades terapêuticas destinadas a reduzir a fibrose, especialmente a fibrose hepática. O desenvolvimento de tratamentos seguros e eficazes para cirrose estabelecida e hipertensão portal e para atenuar a fibrose seria altamente benéfico.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO Conjugados de ácidos graxos biliares

[0017] Os conjugados de ácidos graxos e sais biliares, também referidos como conjugados de ácidos graxos e ácidos biliares (FABACs), são uma família de moléculas sintéticas que podem ser utilizadas para melhorar as condições relacionadas aos ácidos biliares ou o metabolismo do colesterol. Acredita- se que os FABACs diminuem a concentração do colesterol no sangue, reduzem os níveis de gordura hepática e dissolvem os cálculos biliares (Gilat et al., Hepatology 2003; 38: 436 - 442; e Gilat et al., Hepatology 2002; 35: 597 - 600). Os FABAC incluem o ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan- 24-oico, também conhecido como Aramchol™.

[0018] As patentes norte-americanas nos. US 6,384,024, 6,395,722, 6,589,946 divulgam determinados FABACs e seu uso na dissolução de cálculos biliares de colesterol na bile e tratamento da arteriosclerose. Esses e FABACs adicionais foram divulgados nas patentes norte-americanas nos. US 7,501,403, 8,975,246 e 8,110,564 para uso no tratamento do fígado gorduroso, na redução dos níveis de colesterol no sangue e no tratamento da hiperglicemia, diabetes, resistência à insulina e obesidade. Outras utilizações terapêuticas dos FABACs são divulgadas em Safadi et al. (Clin Gastroenterol Hepatol. 2014 Dec; 12 (12): 2085 - 91) e nos WO 2015/019358 e WO 2015/019359. Sais de amina de determinados FABACs são divulgados em WO 2015/083164.

[0019] A invenção se refere ao tratamento, inibição e redução da fibrose, incluindo fibrose hepática. Mais especificamente, modalidades da invenção fornecem composições e métodos úteis para o tratamento e a inibição de distúrbios fibróticos, condições hepato-fibróticas associadas com a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e a esteato- hepatite não alcoólica (EHNA), empregando o uso de ácido 3β- araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em outras modalidades, o tratamento e inibição das condições hepato- fibróticas causada pelo contato com substâncias químicas hepatotóxicas ou por obstrução mecânica são contempladas.A invenção fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a ASC0-12 média está entre cerca de 40,000 a cerca de 90,000 ng / ml.

[0021] Em algumas modalidades, a ASC0-12 média é de cerca de 55,000 ng / ml.

[0022] A invenção ainda fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi- 5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a ASC0-24 média está entre cerca de 80,000 a cerca de 180,000 ng / ml.

[0023] Em algumas modalidades, a ASC0-24 média é de cerca de 110,000 ng / ml.

[0024] A invenção ainda fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi- 5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a Cavg por 24h está entre cerca de 3000 a cerca de 7000 ng / ml.

[0025] Em algumas modalidades, a referida Cavg por 24h é de cerca de 4500 ng / ml.

[0026] Em uma modalidade, esta invenção fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar ao indivíduo uma dose diária de entre 400 mg e 900 mg de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a referida dose é administrada em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo. Em outra modalidade, a quantidade da dose diária é de 600 mg ou 800 mg. Em outra modalidade, cada dose administrada é de 300 mg ou 400 mg. Em outra modalidade, a dose diária do Aramchol™ é de 600 mg e ele é administrado duas vezes ao dia em que cada dose administrada é de 300 mg. Em outra modalidade, 300 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo a cada 12 horas. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA).

Em outra modalidade, o indivíduo humano apresentar uma pontuação de balonização de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de inflamação de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresentar uma pontuação de balonização de pelo menos 1, uma pontuação de inflamação de pelo menos 1 e uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com Diabetes Mellitus do tipo II ou pré-diabetes. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Em outra modalidade, o indivíduo humano não é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA).

[0027] Em outra modalidade, o método compreende ainda falta de piora da DHGNA do indivíduo conforme definido pela pontuação da atividade (NAS). Em outra modalidade, o método compreende ainda falta de piora da esteatose do indivíduo, atividade, e pontuação da atividade da fibrose (SAF). Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução da gordura do fígado no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a melhora na esteatose do indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a melhora no balonização do indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a resolução da DHGNA. Em outra modalidade, o método compreende ainda a resolução da DHGNA sem piora da fibrose. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução da fibrose sem piora da DHGNA. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de HbAlc no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda falta de progressão do indivíduo para a cirrose. Em outra modalidade, o método compreende ainda a inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e / ou esteato- hepatite não alcoólica (EHNA). Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o método compreende ainda a inibição da progressão da EHNA no referido indivíduo. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o método compreende ainda a resolução da EHNA no indivíduo.

[0028] Em uma modalidade, esta invenção fornece um método para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo uma dose diária de entre 400 mg e 900 mg de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi- 5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a referida dose é administrada em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo. Em outra modalidade, a quantidade da dose diária é de 600 mg ou 800 mg. Em outra modalidade, cada dose administrada é de 300 mg ou 400 mg. Em outra modalidade, a dose diária do Aramchol™ é de 600 mg e ele é administrado duas vezes ao dia em que cada dose administrada é de 300 mg. em outra modalidade, 300 mg de

Aramchol™ é administrado ao indivíduo a cada 12 horas. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 4, pelo menos 5, pelo menos 6, ou pelo menos 7. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresentar uma pontuação de balonização de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de inflamação de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de balonização de pelo menos 1, uma pontuação de inflamação de pelo menos 1, e uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com Diabetes Mellitus do tipo II ou pré-diabetes. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Em outra modalidade, o indivíduo humano não é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA).

[0029] Em outra modalidade, o método compreende ainda falta de piora da DHGNA do indivíduo conforme definido pela pontuação da atividade (NAS). Em outra modalidade, o método compreende ainda falta de piora da esteatose do indivíduo, atividade, e Pontuação da atividade da fibrose (SAF). Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução da gordura do fígado no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda melhora na esteatose do indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda melhora no balonização do indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a resolução da DHGNA. Em outra modalidade, o método compreende ainda a resolução da DHGNA sem piora da fibrose. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução da fibrose sem piora da DHGNA. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a redução nos níveis de HbAlc no referido indivíduo. Em outra modalidade, o método compreende ainda a falta de progressão do indivíduo para a cirrose. Em outra modalidade, o método compreende ainda a inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e / ou esteato-hepatite não alcoólica (EHNA). Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o método compreende ainda a inibição da progressão da EHNA no referido indivíduo. Em outra modalidade, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o método compreende ainda a resolução da EHNA no indivíduo.

[0030] Em uma modalidade, esta invenção fornece um método para o tratamento de fibrose além da fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose compreendendo administrar ao indivíduo uma dose diária de entre 400 mg e 900 mg de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24- oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a referida dose é administrada em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia, assim tratando a fibrose no referido indivíduo, em que a referida fibrose está sendo causada por um fator selecionado a partir do grupo que consiste em fibrose pulmonar, fibrose cardíaca, fibrose renal, fibrose dérmica, fibrose ocular, fibrose da mucosa, fibrose do sistema nervoso central, fibrose óssea ou na medula óssea, fibrose em um órgão endócrino, fibrose no sistema gastrointestinal, fibrose mediastinal, fibrose pós-fibrinosa, fibrose proliferativa, fibrose retroperitoneal, fibrose pancreática, ou fibrose associadas com uma doença autoimune.

[0031] Em outra modalidade, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição farmacêutica compreendendo pelo menos um composto selecionado a partir do grupo que consiste em: a) eicosapentanoato de etila (EPA-E), ácido eicosapentaenoico (EPA) e seus amidos, sais, ésteres e fosfolipídios farmaceuticamente aceitáveis; b) um inibidor de Acetil-CoA carboxilase (ACC) isolado, ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais; c) cloridrato de pioglitazona ou uma pioglitazona enriquecida com deutério enantiopura; d) agonistas duplos delta e gama de um receptor ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR); e e) antagonistas do receptor da angiotensina II, inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ACE), inibidores da caspase, inibidores da catepsina B, antagonistas da quimiocina CCR2, antagonistas da quimiocina CCR5, estimuladores dos canais de cloreto, solubilizantes do colesterol, inibidores da diacilglicerol 0-aciltransferase 1 (DGAT1) , inibidores da dipeptidil peptidase IV (DPPIV), agonistas do receptor farnesoide X (FXR) tais como ácido obeticólico e Px-104, agonistas duplos FXR / TGR5, inibidores da galectina-3 tais como LIPC-1010 e GR-MD-02, agonistas de peptídeo semelhante ao glucagon (GLPI), precursores da glutationa, inibidores de protease NS3 do vírus da hepatite C, inibidores da HMG CoA redutase, inibidores da II-hidroxi esteroide desidrogenase (II-HSD I), antagonistas IL-1, antagonistas IL-6, agonistas IL-10, antagonistas IL-17, inibidores do cotransportador de ácido biliar de sódio ileal, análogos de leptina, inibidores da 5-lipoxigenase, estimuladores do gene LPL, inibidores da lisil oxidase homóloga 2 (LOXL2), inibidores da PDE3, inibidores da PDE4, inibidores da fosfolipase C (PLC), agonistas da PPARa, agonistas da PPAR gama tais como rosiglitazona e pioglitazona, metformina, pentoxifilina, vitamina E, selênio, ácidos graxos ômega-3 e betaína, agonistas da PPAR8, inibidores da proteína quinase 2 associada a Rho (ROCK2), inibidores do transportador-2 da glicose de sódio (SGLT2), inibidores de estearoil CoA desaturase I, agonistas do receptor do hormônio da tireoide, inibidores do ligante do fator de necrose tumoral a (TNFa), inibidores da transglutaminase, precursores de inibidores da transglutaminase, inibidores da PTPib, inibidores da ASKI, e inibidores da proteína-1 de adesão vascular tais como PXS4728A, metformina, GR-MD-02, bitartarato de cisteamina, simtuzumab, emricasan, GFT-505, CER-002, KD3010, KD3020, MBX8025, LUM002, RP-103, e cenicriviroc.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0032] Figura 1. demonstra o efeito do Aramchol™ na cirrose hepática por avaliação macroscópica. Figura 1A –

controle salino; Figura 1B – tratamento com TAA (20 mg / 100 gr de peso corporal) duas vezes por semana durante 10 semanas; Figura 1C - tratamento com TAA e Aramchol™ 1 mg / kg; Figura 1D - tratamento com TAA e Aramchol™ 5 mg / kg.

[0033] Figura 2. demonstra o efeito do Aramchol™ na fibrose hepática por avaliação microscópica (após coloração de Masson Goldner). Figura 2A – pontuação fibrótica média (TAA – preto, Aramchol™ – branco, OCA – cinza); Figura 2B – amostras representativas (apenas TAA – esquerda; TAA e Aramchol™ 1 mg / kg – meio; TAA e Aramchol™ 5 mg / kg – direita).

[0034] Figura 3. mostra o efeito do Aramchol™ na expressão de COL1A1 em células estreladas hepáticas humanas LX-2. “Controle S1, S2 e S3” representa o controle (células tratadas com solução salina) em três experimentos separados; “A S1, S2 e S3” representam o resultado das células tratadas com Aramchol™ nestes experimentos.

[0035] Figura 4. mostra o efeito do Aramchol™ na expressão de PPAR-γ em células estreladas hepáticas humanas LX-2. “Controle S1, S2 e S3” representa o controle (células tratadas com solução salina) em três experimentos separados; “A S1, S2 e S3” representam o resultado das células tratadas com Aramchol™ nestes experimentos.

[0036] Figura 5. mostra o efeito do Aramchol™ na produção de colágeno de células estreladas hepáticas humanas LX-2 quando comparado com um controle de DMSO.

[0037] Figura 6. mostra o efeito do Aramchol™ na esteatose hepática na dieta de 0.1 MCD. Figura 6A - coloração histológica usando Sudan III; Figura 6B – quantificação de células coradas com Sudan III.

[0038] Figura 7. mostra o efeito do Aramchol™ na ativação de macrófagos e infiltração na dieta de 0.1 MCD. Figura 7A - coloração histológica - F4/80 e CD64; Figura 7B – quantificação de células F4/80 e CD64 positivas.

[0039] Figura 8. mostra o efeito do Aramchol™ na fibrose em dieta de 0.1 MCD (histologia – sirius red). Figura 8A - coloração histológica usando sirius red; Figura 8B – quantificação de células coradas com sirius red.

[0040] Figura 9. mostra o efeito do Aramchol™ na produção de colágeno usando extrato de fígado de camundongos

0.1 MCD.

[0041] Figuras 10A e 10B mostram os efeitos do Aramchol™ na bioquímica do fígado em camundongos 0.1 MCD. Figura 10A – quantificação de metabólitos no fígado de controle (cinza) e camundongos 0.1 MCD tratados com Aramchol™ (preto); Figura 10B – esquemático da via bioquímica hepática relevante.

[0042] Figura 11 mostra a biodisponibilidade de doses de 100 mg, 300 mg e 900 mg, em relação às doses de 30 mg em voluntários saudáveis. Biodisponibilidade oral relativa em voluntários saudáveis diminui com aumento da dose ao longo da faixa de 30 - 900 mg.

[0043] Figuras 12A e 12B mostram as ASC vs. dose (Figura 12A) e ASC / dose vs. dose (Figura 12B) agrupadas pelo estudo. A ASC para o estudo de fase IIb em círculos é estimado a partir da Cmin observado em D84*24h.

[0044] Figura 13A mostra a concentração prevista versus observada (linha reta representa o nível de dose e estudo). A Figura 13B mostra a concentração - tempo prevista versus observada após dose (círculos = observada, linhas sólidas = modelo). A Figura 13C mostra os dados e parâmetros do modelo.

[0045] A Figura 14A é a exposição plasmática simulada de uma dose de 300 mg BID usando os parâmetros do modelo (Figura 14B) ajustados aos dados observados em pacientes 300 mg QD (Tlag é o atraso na absorção; V/F é o volume do compartimento central dividido pela biodisponibilidade; Cl/F é a depuração do compartimento dividido pela biodisponibilidade; e Ka é a taxa de absorção no compartimento).

[0046] Figuras 15A e 15B apresentam a exposição plasmática simulada de uma dose de 600 mg QD (Figura 15A) usando os parâmetros do modelo (Figura 15B) ajustados aos dados observados em pacientes 300 mg QD com biodisponibilidade 75 % menor estimada a partir da exposição não linear em voluntários saudáveis entre 300 e 900 mg (resultando em V/F e Cl/F mais altos), (Tlag é o atraso na absorção; V/F é o volume do compartimento central dividido pela biodisponibilidade; Cl/F é a depuração do compartimento dividido pela biodisponibilidade; e Ka é a taxa de absorção no compartimento).

[0047] Figuras 16A e 16B mostram a redução na gordura hepática em indivíduos humanos que receberam doses de 400 mg, 600 mg de Aramchol™ e placebo. A Figura 16A é a mudança média absoluta a partir da linha de base na gordura hepática; a Figura 16B é a análise de respondentes à MRI: redução ≥ 5 % na mudança absoluta a partir da linha de linha de base. A função hepática foi significativamente reduzida vs. placebo, redução de ≥ 5 % mudança absoluta exibe um padrão de resposta à dose.

[0048] Figuras 17A e 17B mostram a redução na balonização em indivíduos humanos que recebem doses de 400 mg, 600 mg de Aramchol™ e placebo. A Figura 17A é a melhora na balonização (≥ 1 ponto); e a Figura 17B é a balonização 0 no final do estudo. Um efeito estatisticamente significativo na balonização foi demonstrado com Aramchol™ 600 mg.

[0049] Figuras 18A e 18B mostram a resolução do EHNA sem piora da fibrose demonstrada em indivíduos humanos que receberam doses de 400 mg, 600 mg de Aramchol™ e placebo. Figura 18A é a resolução do EHNA sem piora da fibrose; e Figura 18B é a resolução do EHNA. Significativamente mais pacientes tratados com Aramchol™ 600 mg mostraram a resolução do EHNA sem piora da fibrose com um padrão de resposta à dose.

[0050] Figuras 19A e 19B mostram a melhora na fibrose e a progressão para cirrose tal como demonstrada em indivíduos humanos que recebem doses de 400 mg, 600 mg de Aramchol™ e placebo. A Figura 19A mostra a melhora na fibrose(estágio ≥ 1) sem piora da EHNA; e a Figura 19B mostra a progressão para cirrose. Mais pacientes mostraram a melhora na fibrose sem piora da EHNA com um padrão de resposta à dose. Menos pacientes progrediram para cirrose com o Aramchol™ 600 mg.

[0051] Figuras 20A e 20B mostram o efeito do Aramchol™ nos níveis ALT e AST tal como demonstrado nos indivíduos humanos que recebem doses de 400 mg, 600 mg de Aramchol™ e placebo. A Figura 20A mostra a mudança a partir da linha de base nos níveis de ALT (U / L) ; e a Figura 20B mostra a mudança a partir da linha de base em níveis de AST (U / L). Ambas as doses de 400 mg e 600 mg significativamente reduziram os níveis de ALT, AST em indivíduos vs. placebo em uma forma de resposta à dose.

[0052] Figuras 21A e 21B mostram como o Aramchol™ regula negativamente mRNA e genes fibrogênicos de SCD-1 e regula positivamente PPAR ɣ mRNA em HSCs. Baseado em RT-PCR (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0053] Figuras 22A e 22B mostram como o Aramchol™ regula negativamente SCD-1 em HSCs. A Figura 22A e a Figura 22B mostram respectivamente o Western Blot e a densitometria da proteína SCD-1 regulada negativamente em HSCs tratados com Aramchol™ por 24 ou 48 hrs. (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001

[0054] Figura 23 mostra a confirmação por RNASeq para a regulação negativa de genes fibrogênicos e mRNA de SCD-1, e a regulação positiva de PPAR ɣ mRNA após 48 hrs de tratamento com Aramchol™. A proteína reguladora de efluxo de colesterol, ABCA1, também é regulada positivamente.

[0055] Figura 24 mostra que o Aramchol™ não afeta a expressão de PPAR ɣ mRNA em hepatócitos primários de camundongo após 48 horas de tratamento. (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0056] Figuras 25A e 25B mostram como o Aramchol™ regula negativamente a biossíntese de colesterol e formação de colágeno em HSCs. Análise de enriquecimento de conjunto de genes de células LX-2 após 24 (Figura 25A) ou 48 (Figura 25B) horas de tratamento.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Conjugado de ácido graxo e ácido biliar (FABAC)

[0057] De acordo com uma modalidade da invenção, as combinações, composições, métodos e embalagens da invenção podem compreender Aramchol™ em sua forma de ácido livre. De acordo com uma modalidade da invenção, o Aramchol™ está em sua forma de sal. O sal pode ser um sal à base de amina. O sal à base de amina pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em sais de meglumina, lisina e trometamina.

[0058] Outras modalidades da invenção se referem a composições, métodos e embalagens empregando o uso de um conjugado de ácido graxo e ácido biliar (FABAC) ou sais dos mesmos. De acordo com algumas modalidade, o FABAC é de Fórmula I: W - X - G (I) em que G representa um ácido biliar ou um radical de sal biliar do mesmo; W representa um ou dois radicais de ácido graxo com 6-22 átomos de carbono; e X representa um membro de ligação selecionado do grupo que consiste em: um heteroátomo, uma ligação C-C direta e uma ligação C=C; cada possibilidade representa uma modalidade separada da presente invenção.

[0059] De acordo com algumas modalidade, o membro de ligação é selecionado a partir do grupo que consiste em: NH, P, S, O e uma ligação direta C-C ou C=C; cada possibilidade representa uma modalidade separada da presente invenção. De acordo com algumas modalidade, o membro de ligação é NH.

[0060] De acordo com algumas modalidade, cada um dos referidos um ou dois radicais de ácido graxo é um radical de um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em: ácido araquidílico, ácido esteárico, ácido beênico, ácido palmítico, ácido araquidônico, ácido eicosapentaenoico e ácido oleico; cada possibilidade representa uma modalidade separada da presente invenção. De acordo com algumas modalidade, o referido um ou dois radicais de ácido graxo são radicais de ácido araquidílico; cada possibilidade representa uma modalidade separada da presente invenção.

[0061] De acordo com algumas modalidade, W representa dois radicais de ácido graxo, cada independentemente compreende 6-22 átomos de carbono; e em que cada um dos referidos radicais de ácido graxo está independentemente ligado a um membro de ligação X selecionado do grupo que consiste em: um heteroátomo, uma ligação C-C direta e uma ligação C=C. De acordo com algumas modalidades, W representa um único radical de ácido graxo.

[0062] De acordo com algumas modalidade, o ácido biliar é selecionado a partir do grupo que consiste em: ácido cólico, ácido ursodeoxicólico, ácido quenodeoxicólico, ácido desoxicólico, ácido litocólico e derivados dos mesmos; cada possibilidade representa uma modalidade separada da presente invenção. Em outra modalidade o ácido biliar é ácido cólico, ácido quenodeoxicólico, ou ácido desoxicólico. Em outra modalidade o ácido biliar é diferente de ácido ursodeoxicólico e ácido litocólico. De acordo com algumas modalidade, o ácido biliar é o ácido cólico. Indicações

[0063] A invenção baseia-se, em parte, na descoberta surpreendente de que o Aramchol™ exerce um potente efeito antifibrótico, independentemente de suas atividades relatadas no fígado gorduroso e esteatose, e reduz e inibe o desenvolvimento de fibrose em vários modelos experimentais. Especificamente, o tratamento com Aramchol™ (5 mg / kg) inibiu significativamente o desenvolvimento de cirrose, necrose e fibrose hepática induzida por toxinas em modelo in vivo de tioacetamida (TAA). o Aramchol™ também se revelou inesperadamente superior ao ácido obaticólico (OCA), o qual não induziu redução estatisticamente significativa nestes parâmetros sob as condições experimentais testadas. Em adição, o Aramchol™ reduziu significativamente a expressão de COL1A1 em células estreladas hepáticas humanas LX-2 por meio da regulação positiva da PPARγ. O Aramchol™ foi considerado surpreendentemente eficaz na reversão da fibrose estabelecida, e na redução da produção de colágeno especificamente em células estreladas.

[0064] Assim, independentemente das suas atividades reportadas no metabolismo do fígado em indivíduos com DHGNA, o Aramchol™ é surpreendentemente aqui encontrado para ser eficaz no tratamento de novas populações de paciente e subpopulações de paciente, tais como no tratamento de pacientes com DHGNA ou EHNA os quais ainda não desenvolveram a fibrose. Em adição, o Aramchol™ mostrou-se eficaz no tratamento de fibrose não hepática e diversas condições caracterizadas por fibrose de etiologia ambiental e / ou imune, fibrose hepática em pacientes com DHGNA ou EHNA, tratamento de fibrose hepática em pacientes com DHGNA ou EHNA e fibrose avançada (isto é, fibrose em estágio 2 ou em estágio 3), tratamento de fibrose hepática em paciente com DHGNA ou EHNA o qual apresentou cirrose (isto é, fibrose em estágio 4), tratamento de fibrose hepática causada pelo contato com fármacos, toxinas ou cirurgia, e especificamente no alívio de cirrose hepática, tratamento de fibrose sem piora da DHGNA ou EHNA, tratamento de fibrose sem progressão para cirrose. A invenção vantajosamente fornece para o tratamento destas novas populações de paciente com eficácia e / ou segurança melhorada e efeitos colaterais minimizados.

[0065] Em diversas modalidades, a fibrose pode ser fibrose pulmonar (por exemplo fibrose pulmonar idiopática, fibrose pulmonar difusa intersticial, fibrose pleural e fibrose associadas com asma, displasia fibrosa, fibrose cística), fibrose cardíaca (por exemplo fibrose do endo miocárdio e fibrose associadas com doença cardiovascular), fibrose renal (por exemplo associadas a insuficiência renal), fibrose dérmica (por exemplo queloide), fibrose ocular, fibrose da mucosa, fibrose do sistema nervoso central, fibrose óssea ou na medula óssea, fibrose em um órgão endócrino (por exemplo pâncreas), fibrose no sistema gastrointestinal, fibrose mediastinal, fibrose pós-fibrinosa, fibrose proliferativa, fibrose retroperitoneal, fibrose pancreática, fibrose associadas com uma doença autoimune (por exemplo lúpus eritematoso sistêmico (LES), síndrome de Sjögren, ou esclerose sistêmica difusa com esclerodermia).

[0066] Por exemplo, a fibrose endo miocárdica é um tipo idiopático de miocardiopatia endêmica em várias partes da África e raramente em outras áreas, caracterizada por cardiomegalia, espessamento acentuado do endocárdio com tecido fibroso branco denso que pode se estender para envolver o miocárdio interno, e por insuficiência cardíaca congestiva.

[0067] A fibrose pulmonar idiopática (por exemplo fibrose intersticial difusa idiopática, fibrose pulmonar difusa intersticial) é a fibrose inflamatória crônica progressiva das paredes alveolares pulmonares, com dispneia progressiva constante, resultando em morte por falta de oxigênio ou insuficiência cardíaca direita. A maioria dos casos é de origem desconhecida, embora alguns sejam considerados como resultado de pneumoconiose, pneumonite com hipersensibilidade, esclerodermia, e outras doenças.

[0068] A fibrose mediastinal é caracterizada pelo desenvolvimento de tecido fibroso branco duro na porção superior do mediastino, por vezes obstruindo as passagens de ar e grandes vasos sanguíneos; também chamada de fibrose ou mediastinite fibrosa.

[0069] A fibrose pleural é caracterizada por fibrose da pleura visceral de forma que parte de um pulmão fica coberto por uma placa ou uma espessa camada de tecido fibroso não expansível. A forma mais extensa é chamada de fibrotórax.

[0070] A fibrose pós-fibrinosa ocorre em tecidos nos quais a fibrina foi depositada.

[0071] A fibrose proliferativa se refere a uma condição na qual os elementos fibrosos continuam a se proliferar após o fator causal original ter deixado de operar.

[0072] A fibrose retroperitoneal (doença de Ormond, fibrose periureteral) é caracterizada pela deposição de tecido fibroso no espaço retroperitoneal, produzindo vago desconforto abdominal, e muitas vezes causando bloqueio dos ureteres, com resultante hidronefrose e função renal prejudicada, que pode resultar em insuficiência renal.

[0073] Em diversas modalidades, esta invenção fornece um método para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero, compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de Aramchol™, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo. Em diversas modalidades, o indivíduo humano a ser tratado é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em algumas modalidades, cada Dose de Aramchol™ administrada ao indivíduo é de 300, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850 ou 900 mg uma vez, duas vezes ou três vezes ao dia; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, duas vezes por dia, em doses de 300 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, três vezes ao dia, em doses de 300 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, duas vezes por dia, em doses de 400 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, três vezes ao dia, em doses de 400 mg cada.

[0074] Esta invenção também fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de Aramchol™, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo. Em uma modalidade o indivíduo humano a ser tratado é afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Em uma modalidade o indivíduo humano a ser tratado é afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) Em uma modalidade o indivíduo humano a ser tratado é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em algumas modalidades, cada dose de Aramchol™ administrada ao indivíduo é de 300, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850 ou 900 mg uma vez, duas vezes ou três vezes ao dia; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, duas vezes por dia, em doses de 300 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, três vezes ao dia, em doses de 300 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, duas vezes por dia, em doses de 400 mg cada. Em uma modalidade, o Aramchol™ é administrado ao indivíduo, três vezes ao dia, em doses de 400 mg cada.

[0075] Em diversas modalidades esta invenção fornece um método para o tratamento de fibrose em um indivíduo.

[0076] Em diversas modalidades, a fibrose é outra que não a fibrose hepática.

[0077] Esta invenção também fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α- dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo.

[0078] A exposição e absorção de um fármaco está limitada pela sua biodisponibilidade, a qual geralmente é determinada pela solubilidade e permeabilidade do fármaco. É aqui demonstrado, com base em modelagem e simulações, que um regime de duas doses (BID) de Aramchol™, isto é, a administração de uma determinada quantidade de Aramchol™ (por exemplo, 600 mg) em duas doses (isto é, 300 mg cada), duas vezes por dia, em vez de uma dose (isto é, 600 mg), uma vez por dia, espera-se que aumente o biodisponibilidade do fármaco e consequentemente a sua exposição. Portanto, é sugerido que dividir a dose de Aramchol™ será benéfico para o indivíduo. Sendo assim, de acordo com esta invenção, a quantidade diária de Aramchol™ é administrada a um indivíduo em uma regime de dosagem dividido, incluindo porém não limitado a: um regime de duas doses (duas vezes por dia, BID), um regime de três doses (três vezes ao dia, TID), um regime de quatro doses, ou um regime de cinco doses.

[0079] De acordo com isto, esta invenção fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar ao indivíduo uma dose diária de 100, 300, 400, 600, ou 900 mg de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em algumas modalidades, cada dose de Aramchol™ administrada ao indivíduo é de 300, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850 ou 900 mg uma vez, duas vezes ou três (3) vezes ao dia; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Ainda em outra modalidade, uma dose de 300 mg de Aramchol™ é administrada duas vezes por dia. Ainda em outra modalidade, uma dose de 400 mg de Aramchol™ é administrada duas vezes ao dia. Ainda em outra modalidade, uma dose de 300 mg de Aramchol™ é administrada três vezes ao dia.

[0080] Em diversas modalidades, o indivíduo humano a ser tratado é afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA).

[0081] Em diversas modalidades, o indivíduo humano a ser tratado é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA).

[0082] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com DHGNA porém não é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 4. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 5, pelo menos 6, ou pelo menos 7. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de balonização de pelo menos 1, uma pontuação de inflamação de pelo menos 1, e uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta balonização. Em outras modalidades, o indivíduo humano apresenta altos níveis de ALT, AST, HbAlc ou qualquer combinação dos mesmos. Em outras modalidades, o indivíduo humano afligido com fibrose progrediu para cirrose.

[0083] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com (EHNA). Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 4. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 5, pelo menos 6, ou pelo menos 7. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma pontuação de balonização de pelo menos 1, uma pontuação de inflamação de pelo menos 1, e uma pontuação de esteatose de pelo menos 1. Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta balonização. Em outras modalidades, o indivíduo humano apresenta altos níveis de ALT, AST, HbAlc ou qualquer combinação dos mesmos. Em outras modalidades, o indivíduo humano afligido com fibrose progrediu para cirrose.

[0084] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com DHGNA porém não é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA).

[0085] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com Diabetes Mellitus do tipo II ou pré-diabetes. Um dos 3 critérios a seguir é necessário para pré-diabetes: Glicose plasmática em jejum > 100 mg / dl (5.5 mmol / l) ou 2hPG após 75g OGTT > 140 (7.8 mmol / l) mg / dl ou HbA1c > 5.7

%. HbA1c pode ser repetido a critério do investigador.

[0086] Em diversas modalidades, a fibrose hepática do indivíduo é fibrose em estágio 2, 3, ou 4. Em diversas modalidades, a fibrose hepática do indivíduo é fibrose em estágio 1. Em diversas modalidades, a fibrose hepática do indivíduo é fibrose em estágio 1a, em estágio 1b, ou em estágio 1c.

[0087] Em diversas modalidades, o indivíduo humano apresenta uma dieta que é rica em gorduras e calorias. Tal como aqui utilizado, uma dieta rica em gorduras e calorias contém pelo menos 4000 calorias por dia, das quais aproximadamente 50 % vem da gordura. Em diversas modalidades, o indivíduo humano é resistente à intervenção no estilo de vida. Em diversas modalidades, o indivíduo humano é resistente à intervenção na dieta. Em diversas modalidades, o indivíduo humano é naive para naive para o tratamento com Aramchol™. Em diversas modalidades, o indivíduo é naive para o tratamento de DHGNA.

[0088] A invenção ainda se refere ao tratamento e redução da fibrose, especificamente fibrose hepática. A invenção fornece composições e métodos úteis para o tratamento de cirrose hepática, hipertensão portal, e condições hepato- fibróticas causada pelo contato com substâncias químicas hepatotóxicas ou por obstrução mecânica. Composições e métodos de acordo com a invenção empregam o uso de ácido 3β- araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0089] Em um aspecto, é fornecido um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo em necessidade do mesmo, a fibrose hepática sendo causada pelo contato com uma substância química hepatotóxica ou por obstrução mecânica, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo.

[0090] Em outro aspecto, é fornecido um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com a condição de que a fibrose está associada a um disfunção que não a doença hepática não alcoólica e a esteato- hepatite não alcoólica.

[0091] Em outro aspecto, é fornecido um método para o tratamento de ou inibir uma disfunção selecionada do grupo que consiste em cirrose hepática e hipertensão portal em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0092] Em outro aspecto, é fornecido um método de tratar ou inibir uma doença ou condição fibrótica em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando ou inibindo a doença ou condição no indivíduo, em que a referida doença ou condição é selecionado a partir do grupo que consiste em: doença hepática alcoólica, hepatite viral, hepatite parasitária, hepatite induzida por fármaco, hepatite induzida por toxinas, cirrose biliar primária e fibrose hepática congênita.

[0093] As indicações conhecidas sugeridas para o tratamento com FABAC incluem aquelas divulgadas nas patentes norte americanas nos. US 6,384,024, 6,395,722, 6,589,946, 7,501,403, 8,110,564 e 8,975,246, tal como aqui detalhado, e são explicitamente excluídas em uma modalidade. Em algumas modalidades, o indivíduo a ser tratado pelos métodos da invenção não é afligido com uma condição médica adicional.

[0094] Ainda, de acordo com um aspecto da presente invenção, é fornecido um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo em necessidade do mesmo, a fibrose hepática sendo causada pelo contato com uma substância química hepatotóxica ou por obstrução mecânica, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo.

[0095] De acordo com as modalidades da presente invenção, a fibrose hepática é causada por um fator selecionado a partir do grupo que consiste em alcoolismo crônico, desnutrição, hemocromatose, congestão passiva, exposição a venenos ou toxinas, exposição a fármacos, reações imunológicas, sensibilidades geneticamente determinadas a uma determinada substância e infecções.

[0096] Em outras modalidades, a fibrose hepática é causada por um fator selecionado a partir do grupo que consiste em hepatite viral, sífilis e uma infecção parasitária. Numa modalidade particular, a referida infecção parasitária é selecionada do grupo que consiste em Schistosomiasis mansoni e

S. japonica. Em outra modalidade particular, a hepatite viral está associada com infecção crônica por hepatite C.

[0097] De acordo com outra modalidade da presente invenção, é fornecido um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com a condição de que a fibrose está associada com uma disfunção que não doença hepática não alcoólica e esteato-hepatite não alcoólica.

[0098] Em diversas modalidades, o indivíduo não é diagnosticado com fígado gorduroso. Em determinadas modalidades, a fibrose está associada com uma disfunção selecionada a partir do grupo que consiste em hepatite autoimune, distúrbios hepáticos de armazenamento ou metabolismo, fibrose hepática congênita, infecção, cirrose biliar primária e colangite esclerosante primária; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção. Em uma modalidade particular, a fibrose está associada com fibrose hepática congênita, um distúrbio do desenvolvimento do fígado, caracterizado pela formação de faixas largas irregulares de tecido fibroso contendo vários cistos formados por dutos biliares terminais desordenados, resultando em constrição vascular e hipertensão portal.

[0099] Exemplos não limitativos das doenças associadas com anormalidades de armazenamento ou metabolismo que são caracterizadas por fibrose hepática (distúrbios hepáticos de armazenamento ou metabolismo) incluem deficiência de α1- antitripsina, doenças de armazenamento de cobre (por exemplo,

doença de Wilson), fructosemia, galactosemia, doenças de armazenamento de glicogênio (especialmente os tipos III, IV, VI, IX e X), síndromes de sobrecarga de ferro (hemocromatose), anormalidades lipídicas (por exemplo, doença de Gaucher), distúrbios peroxissomais (por exemplo, síndrome de Zellweger), e tirosinemia; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção.

[0100] Exemplos não limitativos de infecções caracterizada por fibrose hepática inclui infecções bacterianas (por exemplo, brucelose), infecções parasitárias (por exemplo, equinococose), e infecções virais (por exemplo, hepatite viral incluindo, porém não limitado a hepatite B ou C crônica); cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção. Em uma modalidade particular, a infecção é infecção crônica por hepatite C.

[0101] Ainda de acordo com modalidades adicionais, a fibrose está associada com o contato com uma substância química hepatotóxica, incluindo, porém não limitada a álcool, amiodarona, clorpromazina, isoniazida, metotrexato, metildopa, oxifenisatina e tolbutamida; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção. Em uma modalidade particular, a referida substância é o álcool.

[0102] De acordo com modalidades adicionais, a fibrose está associada com obstrução mecânica, por exemplo cicatrizes devido a cirurgia hepática anterior.

[0103] Em outra modalidade a disfunção está associada com desregulação de COL1A1 e / ou PPAR-γ em células estreladas hepáticas. Em uma modalidade particular, a referida disfunção está associada com a regulação positiva COL1A1 e regulação negativa de PPAR-γ em células estreladas hepáticas do referido indivíduo.

[0104] Em outro aspecto, é fornecido um método para o tratamento de ou inibição de uma disfunção selecionada a partir do grupo que consiste em cirrose hepática e hipertensão portal em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0105] Em outra modalidade, a referida fibrose é manifestada por hipertensão portal e / ou cirrose hepática. Em uma modalidade particular, a referida fibrose é manifestada por cirrose hepática.

[0106] Em uma modalidade, a disfunção é cirrose hepática. Em outra modalidade, a referida disfunção é hipertensão portal. De acordo com algumas modalidade, os métodos da invenção vantajosamente fornecem para o tratamento de uma condição existente de cirrose hepática e / ou hipertensão portal. Então, de acordo com algumas modalidade, o método compreende determinar se o referido indivíduo é afligido com cirrose hepática e / ou hipertensão portal, e administrar o referido Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um indivíduo afligido com cirrose hepática e / ou hipertensão portal. De acordo com outras modalidades, a referida cirrose hepática e / ou hipertensão portal está associada com uma disfunção tal como aqui descrita; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção.

[0107] Em outras modalidades, o método é usado para inibir ou prevenir um sintoma da cirrose hepática e / ou hipertensão portal. De acordo com diversas modalidades específicas, o método é usado para inibir ou prevenir um sintoma de hipertensão portal, incluindo, porém não limitada a sangramento de varizes, ascite, encefalopatia portossistêmica. Em outras modalidades particulares, o método é usado para inibir ou prevenir um sintoma da cirrose hepática, incluindo, porém não limitada uma insuficiência hepática e insuficiência hepática fatal; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção.

[0108] Em diversas modalidades, a invenção fornece um método de tratamento ou inibição de uma doença ou condição fibrótica em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando ou inibindo a doença ou condição no indivíduo, em que a referida doença ou condição é selecionada a partir do grupo que consistem em: doença hepática alcoólica, hepatite viral, hepatite parasitária, hepatite induzida por fármaco, hepatite induzida por toxinas, cirrose biliar primária e fibrose hepática congênita. Em outra modalidade, a referida doença ou condição é selecionada a partir do grupo que consiste em: hepatite alcoólica, hepatite parasitária, hepatite induzida por fármaco e hepatite induzida por toxinas; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção. Em outra modalidade, a referida doença ou condição é crônica. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em algumas modalidades, cada dose de Aramchol™ administrada ao indivíduo é de 300, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850 ou 900 mg uma, duas ou três (3) vezes ao dia; cada representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção.

1.1. Administração e forma de dosagem

[0109] De acordo com algumas modalidades, o composto a ser administrado (por exemplo Aramchol™) está na forma de uma composição (referida como a composição da invenção) compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um do referido composto. Tal como aqui utilizado, o termo “quantidade eficaz” significa uma quantidade de composto que é capaz de reduzir e / ou atenuar um distúrbio ou sintoma como aqui descrito. A dose específica de um composto administrado de acordo com esta invenção será, claro, determinada pelas circunstâncias particulares que envolvem o caso incluindo, por exemplo, o composto administrado, a via de administração, o estado fisiológico do indivíduo, e a gravidade da condição a ser tratada.

[0110] Esta invenção fornece um medicamento compreendendo mais do que 300 mg de ácido 3β-araquidilamido- 7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) para uso na administração a um indivíduo humano, incluindo qualquer um dos indivíduos humanos recitados acima.

[0111] Em diversas modalidades, o medicamento compreende mais do que 350 mg de Aramchol™. Em diversas modalidades, o medicamento compreende entre 350 mg e 1200 mg de Aramchol™. Em diversas modalidades, o medicamento compreende 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, ou 1200 mg de Aramchol™. Em diversas modalidades, o medicamento compreende entre 400 mg e 1100 mg, ou entre 500 mg e 1000 mg, ou entre 600 mg e 900 mg de Aramchol™. Em diversas modalidades, o medicamento compreende 400 mg ou 600 mg de Aramchol™.

[0112] Em diversas modalidades, o medicamento deve ser administrado diariamente. Em algumas modalidades, a dose diária do medicamento está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o medicamento é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o medicamento deve ser administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes ao dia (TID), em uma dose de 100, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800 ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, o medicamento deve ser administrado uma vez ao dia (QD). Em outras modalidades, o medicamento deve ser administrado duas vezes ao dia (BID). Em diversas modalidades, o medicamento deve ser administrado três vezes ao dia (TID).

[0113] Esta invenção também fornece ácido 3β- araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) para uso na administração a um indivíduo humano em uma dose diária de mais do que 300 mg. Em algumas modalidades, a dose diária do medicamento está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o medicamento é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o medicamento é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) ao dia em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o medicamento é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 900 mg e o medicamento é administrado três vezes ao dia (TID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o medicamento é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 400 mg cada dose. Em diversas modalidades, o indivíduo humano é qualquer um dos indivíduos humanos recitados acima.

[0114] Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é mais do que 350 mg. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre 350 mg e 1200 mg. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, ou 1200 mg; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre 400 mg e 1100 mg, ou entre 500 mg e 1000 mg, ou entre 600 mg e 900 mg. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 400 mg ou 600 mg por dia. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 600 mg, administrado em duas doses de 300 mg cada. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 600 mg, administrado em três doses de 200 mg cada. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 900 mg, administrado em três doses de 300 mg cada. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 800 mg, administrado em duas doses de 400 mg cada. Em diversas modalidades, a dose diária de Aramchol™ é de 600 mg, administrado em duas doses de 300 mg cada, uma de manhã e uma à noite.

[0115] Qualquer via adequada pode ser usada para administrar o medicamento ou Aramchol™ da invenção a um indivíduo.

[0116] De acordo com algumas modalidade, vias de administração adequadas podem ser vias sistêmicas. De acordo com algumas modalidade, administrar é administrar sistemicamente. De acordo com algumas modalidade, a composição é formulada para administração sistêmica.

[0117] De acordo com outra modalidade, a administração sistemicamente é por via enteral. De acordo com outra modalidade, a administração através de uma via enteral é a administração oral. De acordo com algumas modalidade, a composição é formulada para administração oral.

[0118] Então, a invenção fornece um método para o tratamento de indivíduos recitados neste pedido pela administração de Aramchol™ ao indivíduo, em que pelo menos 350 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo por dia. Em diversas modalidades, entre 350 mg e 1200 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo por dia. Em diversas modalidades, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, ou 1200 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo por dia. Em diversas modalidades, entre 400 mg e 1100 mg, ou entre 500 mg e 1000 mg, ou entre 600 mg e 900 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo por dia. Em diversas modalidades, 400 mg ou 600 mg de Aramchol™ é administrado ao indivíduo por dia. Em diversas modalidades, o método compreende administrar Aramchol™ em uma quantidade de cerca de 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600 mg uma, duas ou três vezes por dia; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o método compreende administrar Aramchol™ em uma quantidade de cerca de 150 a cerca de 600 mg duas vezes ao dia. Em diversas modalidades, o método compreende administrar Aramchol™ em uma quantidade de cerca de 200 a cerca de 450 mg duas vezes ao dia. Em diversas modalidades, o método compreende administrar Aramchol™ em uma quantidade de 300 mg duas vezes ao dia. Em diversas modalidades, 600 mg por dia é administrado ao indivíduo em duas doses de 300 mg cada. Em diversas modalidades, 600 mg por dia é administrado ao indivíduo em três doses de 200 mg cada. Em diversas modalidades, 600 mg por dia é administrado ao indivíduo em duas doses de 300 mg cada, uma dose a cada 12 horas.

[0119] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado na manhã, na tarde, ou na noite. Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado na manhã e na noite. Em diversas modalidades, o medicamento ou

Aramchol™ é administrado a cada 12 horas. Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado a cada 8 horas.

[0120] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado ao mesmo tempo com, ou dentro de 30 minutos de uma refeição.

[0121] Em diversas modalidades, a refeição é café da manhã, almoço ou jantar. Em diversas modalidades, a refeição é café da manhã e jantar. Em diversas modalidades, a refeição é café da manhã, almoço e jantar.

[0122] Em diversas modalidades, a refeição é uma refeição rica em gordura. Uma refeição rica em gordura é uma refeição em que cerca de 500 a 600 calorias são calorias de gordura.

[0123] Em diversas modalidades, a refeição é uma refeição de alto teor calórico. Uma refeição de alto teor calórico é uma refeição de aproximadamente 800 a 1000 calorias.

[0124] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado com água. Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é administrado com pelo menos 100 ou pelo menos 200 mL de água.

[0125] Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado ao longo de pelo menos 52 semanas, pelo menos 72 semanas, pelo menos 96 semanas, pelo menos 2 anos, pelo menos 3 anos, ou pelo menos 4 anos.

[0126] A invenção ainda se refere a uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 3β-araquidilamido- 7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) ao dia em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 900 mg e o Aramchol™ é administrado três vezes ao dia (TID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 400 mg cada dose.

[0127] A invenção ainda fornece ácido 3β- araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim, para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24- oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo.

Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg.

Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia.

Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) ao dia em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção.

Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose.

Em diversas modalidades, a dose diária é de 900 mg e o Aramchol™ é administrado três vezes ao dia (TID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose.

Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 400 mg cada dose.

[0128] A invenção ainda fornece um medicamento compreendendo ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β- colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α 12-dihidroxi-5β- colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim para inibir o desenvolvimento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α- dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo.

Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg.

Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia.

Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) ao dia em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção.

Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose.

Em diversas modalidades, a dose diária é de

900 mg e o Aramchol™ é administrado três vezes ao dia (TID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 400 mg cada dose.

[0129] A invenção fornece uma embalagem farmacêutica compreendendo a) ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β- colan-24-oico (Aramchol™), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e b) instruções para uso na inibição do desenvolvimento da fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica e apresentando uma pontuação da fibrose de zero compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) , ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibindo assim o desenvolvimento de fibrose hepática no referido indivíduo. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dosagem de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) ao dia em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada uma representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 900 mg e o Aramchol™ é administrado três vezes ao dia (TID) em quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em quantidade de dose de 400 mg cada dose.

[0130] De acordo com algumas modalidade, a administração oral está na forma de cápsulas de gelatina dura ou mole, comprimidos, cápsulas, comprimidos, incluindo comprimidos revestidos, drágeas, elixires, suspensões, líquidos, géis, pastas ou xaropes e formas de liberação controlada dos mesmosEntão, a invenção fornece um método de administrar Aramchol™ na forma de um comprimido, uma cápsula, ou em um líquido.

[0131] Carreadores adequados para a administração oral são bem conhecidos na técnica. Composições para uso oral podem ser feitas utilizando um excipiente sólido, opcionalmente triturando a mistura resultante, e processando a mistura de grânulos, após a adição de auxiliares adequados conforme desejado, para obtenção de comprimidos ou núcleos. Exemplos não limitativos de excipientes adequados incluem enchimentos tais como açúcares, incluindo lactose, sacarose, manitol, ou sorbitol, preparações de celulose tais como amido de milho, amido de trigo, amido de arroz, amido de batata, gelatina, goma tragacanto, metil celulose, hidroxipropilmetil celulose, e carbometil celulose de sódio, e / ou polímeros fisiologicamente aceitáveis tais como polivinilpirrolidona (PVP).

[0132] Se desejado, agentes desintegrantes, tais como polivinilpirrolidona reticulada, ágar, ou ácido algínico ou um sal do mesmos, tal como alginato de sódio, podem ser adicionados. Cápsulas e cartuchos de, por exemplo, gelatina para uso em um dispensador podem ser formulados contendo uma mistura de pó do composto e uma base em pó adequada, tais como lactose ou amido.

[0133] As formas de dosagem sólidas para administração oral incluem, sem limitação, cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Nessas formas de dosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um veículo inerte farmaceuticamente aceitável, tal como sacarose, lactose ou amido. As referidas formas de dosagem também podem compreender, como é prática normal, substâncias adicionais diferentes dos diluentes inertes, por exemplo, agentes lubrificantes. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, as formas de dosagem também podem compreender agentes tamponantes. Comprimidos e pílulas também podem ser preparados com revestimentos entéricos. O termo “revestimento entérico”, tal como aqui utilizado, se refere a um revestimento o qual controla a localização da absorção da composição dentro do sistema digestivo. Exemplos não limitativos para materiais usados para revestimento entérico são ácidos graxos, ceras, fibras vegetais ou plásticos.

[0134] As formas de dosagem líquidas para administração oral podem conter ainda adjuvantes, tais como agentes umectantes, agentes emulsificantes e de suspensão, e adoçantes, aromatizantes e perfumantes.

[0135] De acordo com algumas modalidade, o tratamento concomitante com ácidos graxos tais como eicosapentanoato de etila, ácido eicosapentaenoico, e suas amidas, sais e fosfolipídios são explicitamente excluídos. Em outra modalidade, o tratamento concomitante com ácidos biliares tais como ácido ursodeoxicólico e ácido litocólico está excluído. Em outras modalidades, o tratamento concomitante com agonistas do receptor de vitamina D, inibidores da acetil-CoA carboxilase, agonistas duplos PPAR delta / gama, e inibidores da trans diferenciação e ativação dos miofibroblastos estão excluídos. De acordo com modalidades vantajosas, o Aramchol™ ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é usado como um único ingrediente ativo.

[0136] De acordo com algumas modalidade, a composição é administrada em várias dosagens por períodos prolongados até que uma resposta suficiente seja alcançada.

[0137] Tal como aqui descrito, o Aramchol™ foi considerado um agente terapêutico inesperadamente potente, capaz de reverter a fibrose estabelecida e de inibir o desenvolvimento da fibrose, e reduzindo a cirrose e a síntese de colágeno em células estreladas, mesmo quando usado como um único agente terapêutico, na ausência de terapia adjuvante. Logo, de acordo com uma modalidade vantajosa dos métodos da invenção, o Aramchol™ ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é administrado como único ingrediente ativo. Em outra modalidade, o indivíduo é humano.

[0138] Em outra modalidade dos métodos da invenção, o Aramchol™ é administrado oralmente. Em outra modalidade dos métodos da invenção, o Aramchol™ está na forma de ácido livre de Aramchol™. Em outra modalidade dos métodos da invenção, o Aramchol™ está na forma de um sal à base de amina. Em determinadas modalidades particulares, o sal é um sal de meglumina, lisina ou trometamina de Aramchol™; cada possibilidade representa uma modalidade separada da invenção.

1.2. Resultados do Paciente

[0139] De acordo com diversas modalidades, esta invenção fornece um método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática compreendendo administrar ao indivíduo mais do que 300 mg por dia de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24- oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, assim tratando a fibrose hepática no referido indivíduo. Em algumas modalidades, a dose diária de Aramchol™ está entre cerca de 400 mg e 900 mg. Em algumas modalidades, o Aramchol™ é administrado em um regime de dose de pelo menos duas vezes por dia. Em diversas modalidades, o Aramchol™ é administrado uma vez (QD), duas vezes (BID) ou três vezes (TID) diariamente em doses de 100, 150, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, ou 900 mg cada; cada representa uma modalidade separada de acordo com esta invenção. Em diversas modalidades, a dose diária é de 600 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em uma quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 900 mg e o Aramchol™ é administrado três vezes ao dia (TID) em uma quantidade de dose de 300 mg cada dose. Em diversas modalidades, a dose diária é de 800 mg e o Aramchol™ é administrado duas vezes ao dia (BID) em uma quantidade de dose de 400 mg cada dose.

[0140] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda uma redução na gordura hepática no referido indivíduo.

[0141] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a melhora na esteatose do indivíduo.

[0142] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda uma redução no balonização do indivíduo.

[0143] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a resolução da DHGNA no referido indivíduo. Em outras modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a resolução da EHNA no referido indivíduo.

[0144] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a resolução da DHGNA sem piora da fibrose. Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a redução da fibrose sem piora da DHGNA. Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a resolução do EHNA sem piora da fibrose. Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a redução da fibrose sem piora da EHNA.

[0145] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo.

[0146] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a redução nos níveis de ALT no referido indivíduo.

[0147] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a redução nos níveis de HbAlc no referido indivíduo.

[0148] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a falta de progressão do indivíduo para a cirrose.

[0149] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda a inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e / ou esteato-hepatite não alcoólica (EHNA).

[0150] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda qualquer combinação das indicações acima mencionadas e / ou sintomas.

[0151] Em diversas modalidades, tratar o indivíduo compreende a falta de piora da pontuação de atividade DHGNA (NAS) do indivíduo.

[0152] Em uma modalidade, tratar o indivíduo compreende a falta de piora de esteatose do indivíduo, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF).

[0153] Em diversas modalidades, tratar o indivíduo compreende a falta de piora da pontuação da fibrose do indivíduo.

[0154] Em diversas modalidades, a falta de piora é a falta de piora em 52, 65, 72 ou 96 semanas a partir do início da administração do Aramchol™.

[0155] Em diversas modalidades, a falta de piora é a falta de piora em 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

[0156] Em diversas modalidades, tratar o indivíduo compreende uma melhora da pontuação de atividade DHGNA (NAS) do indivíduo.

[0157] Em diversas modalidades, a pontuação NAS do indivíduo é de pelo menos 4 no início da administração do Aramchol™ e a melhora da pontuação NAS do indivíduo é uma melhora de pelo menos 2 pontos.

[0158] Em diversas modalidades, tratar o indivíduo compreende uma melhora do esteatose do indivíduo, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF).

[0159] Em diversas modalidades, a pontuação da atividade SAF do indivíduo é de pelo menos 4 no início da administração do Aramchol™ e a melhora da pontuação da atividade SAF do indivíduo é uma melhora de pelo menos 2 pontos.

[0160] Em diversas modalidades, tratar o indivíduo compreende uma melhora do pontuação da fibrose do indivíduo.

[0161] Em diversas modalidades, a melhora da pontuação da fibrose do indivíduo é uma melhora de 1 grau, ou mais do que 1 grau.Em diversas modalidades, a melhora é uma melhora em 52, 65, 72, ou 96 semanas a partir do início da administração do Aramchol™.

[0163] Em diversas modalidades, a melhora é uma melhora em 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

[0164] Em diversas modalidades, tratar a fibrose compreende a inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Em diversas modalidades, inibir a fibrose compreende a inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA).

[0165] Em diversas modalidades, a inibição da progressão da DHGNA compreende a prevenção da progressão, ou progressão reduzida em relação a um paciente não tratado com Aramchol™.

[0166] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o tratamento compreende a inibição da progressão da EHNA.

[0167] Em diversas modalidades, a inibição da progressão da EHNA compreende a prevenção da progressão, ou progressão reduzida em relação a um paciente não tratado com Aramchol™.

[0168] Em diversas modalidades, o tratamento compreende a prevenção da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) para EHNA.

[0169] Em diversas modalidades, a melhora da progressão é progressão em 2, 4, 8, 24, 40, 52, 65, 72, ou 96 semanas a partir do início da administração do Aramchol™.

[0170] Em diversas modalidades, a melhora da progressão é progressão em 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

[0171] Em diversas modalidades, o indivíduo humano é afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o tratamento compreende a resolução da EHNA no indivíduo.

[0172] Em diversas modalidades, a resolução do EHNA compreende o indivíduo humano apresentando uma pontuação de balonização de 0 e uma pontuação de inflamação de 0 ou 1.

[0173] Em diversas modalidades, o tratamento compreende a resolução da EHNA no indivíduo em 52, 72, ou 96 semanas a partir do início da administração do Aramchol™.

[0174] Em diversas modalidades, o tratamento compreende a resolução da EHNA no indivíduo em 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

[0175] Em diversas modalidades, o tratamento compreende uma redução no nível de triglicerídeos hepáticos no indivíduo em relação ao nível no início da administração do Aramchol™.

[0176] Em diversas modalidades, o tratamento compreende uma redução na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em relação à proporção no início da administração do Aramchol™.

[0177] Em diversas modalidades, existe uma redução de mais do que 10 % na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água.

[0178] Em diversas modalidades, existe uma redução de 10 % a 40 % na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água.

[0179] Em diversas modalidades, existe uma redução de 15 % a 35 % na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água.

[0180] Em diversas modalidades, existe uma redução de 20 % a 30 % na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água.

[0181] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem: a. uma redução no nível de hemoglobina A1C ou HOMA-IR;

b. uma redução no nível de fibrinogênio, CK-18, proteína reativa C (CRP), TNFα, IL 6 e testes de fibrose (NFS); c. uma redução na proporção de leptina para a adinopectina; ou d. um aumento no nível de adinopectina; no indivíduo em relação ao nível ou proporção no início da administração do Aramchol™.

[0182] Em diversas modalidades, os métodos de acordo com esta invenção compreendem ainda: a. uma redução no peso corporal do indivíduo humano em relação ao peso corporal do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™; b. uma redução no circunferência da cintura do indivíduo humano em relação à circunferência da cintura do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™; ou c. uma redução no índice de gordura hepática do indivíduo humano em relação ao índice de gordura hepática do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™.

[0183] Em diversas modalidades, a redução ou aumento é uma redução ou aumento em 2, 4, 8, 24, 40, 52, 65, 72, ou 96 semanas a partir do início da administração do Aramchol™.

[0184] Em diversas modalidades, a redução ou aumento é uma redução ou aumento em 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

[0185] Em outra modalidade, a administração do Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com os métodos da invenção inibe a síntese de colágeno (por exemplo, expressão de COL1A1) em células estreladas hepáticas. Em outra modalidade, a administração de Aramchol™ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com os métodos da invenção melhora a expressão de PPAR-γ em células estreladas hepáticas.

[0186] A presente invenção também fornece um medicamento ou Aramchol™ da invenção em que o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para prevenir a piora da EHNA no indivíduo.

[0187] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para prevenir a piora da fibrose no indivíduo.

[0188] A presente invenção também fornece um medicamento ou Aramchol™ da invenção em que o indivíduo humano a ser administrado com o medicamento ou Aramchol™ é afligido com fibrose e em que o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para melhorar a pontuação da fibrose do indivíduo humano.

[0189] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para melhorar o a pontuação de atividade DHGNA (NAS) do indivíduo humano.

[0190] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para melhorar a pontuação de atividade DHGNA (NAS) do indivíduo humano em pelo menos 2 pontos.

[0191] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para melhorar a esteatose do indivíduo humano, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF).

[0192] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para melhorar a esteatose do indivíduo humano, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF) em pelo menos 2 pontos.

[0193] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para resolver a EHNA no indivíduo humano.

[0194] Em diversas modalidades, resolver a EHNA compreende reduzir a balonização para uma pontuação de 0 e reduzir a inflamação para uma pontuação de 0 ou 1.

[0195] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz em 2, 4, 8, 24, 40, 52, 65, 72, ou 96 semanas, ou 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração.

[0196] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir o nível de triglicerídeos hepáticos no indivíduo em relação ao nível no início da administração.

[0197] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir a proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em relação à proporção no início da administração.

[0198] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir a proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em pelo menos 10 % em relação à proporção no início da administração.

[0199] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir a proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em entre 10 % e 40 % em relação à proporção no início da administração.

[0200] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir a proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em entre 15 % e 35 % em relação à proporção no início da administração.

[0201] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para reduzir a proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em entre 20 % e 30 % em relação à proporção no início da administração.

[0202] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para: a. reduzir o nível de hemoglobina A1C ou HOMA-IR; b. reduzir o nível de fibrinogênio, CK-18, proteína reativa C (CRP), TNFα, IL 6 e testes de fibrose (NFS); c. reduzir a proporção de leptina para a adinopectina; ou d. aumentar o nível de adinopectina; no indivíduo em relação ao nível ou proporção no início da administração.

[0203] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz para: a. reduzir o peso corporal do indivíduo humano em relação ao peso corporal do indivíduo humano no início da administração; b. reduzir a circunferência da cintura do indivíduo humano em relação à circunferência da cintura do indivíduo humano no início da administração; ou c. reduzir o índice de gordura hepática do indivíduo humano em relação ao índice de gordura hepática do indivíduo humano no início da administração.

[0204] Em diversas modalidades, o medicamento ou Aramchol™ é eficaz em 2, 4, 8, 24, 40, 52, 65, 72, ou 96 semanas, ou 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração.

[0205] A invenção se refere a uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α- dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o tratamento e inibição de distúrbios fibróticos, condições hepato-fibróticas associadas com a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e esteato-hepatite não alcoólica (EHNA).

[0206] A invenção fornece ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o tratamento e inibição de distúrbios fibróticos, condições hepato-fibróticas associadas com a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e esteato-hepatite não alcoólica (EHNA).

[0207] A invenção fornece um medicamento compreendendo ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o tratamento e inibição de distúrbios fibróticos, condições hepato-fibróticas associadas com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e Esteato-hepatite não alcoólica (EHNA).

[0208] A invenção fornece uma embalagem farmacêutica compreendendo a) ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β- colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e b) instruções para o uso do Aramchol™ no tratamento e inibição dos distúrbios fibróticos, das condições hepato-fibróticas associadas com a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e esteato-hepatite não alcoólica (EHNA). Terapia de combinação

[0209] O receptor CCR5 da quimiocina C-C motif está envolvido no processo pelo qual o HIV, o vírus que causa a AIDS, entra nas células. Os antagonistas do receptor CCR5 são uma classe de pequenas moléculas que antagonizam o receptor CCR5. Assim, antagonistas desse receptor são inibidores de entrada e têm potenciais aplicações terapêuticas no tratamento de infecções do HIV. O receptor da quimiocina C-C do tipo 2 (CCR2) é uma proteína que em humanos é codificada pelo gene CCR2. Este gene codifica duas isoformas de um receptor para a proteína-1 quimioatraente de monócitos (CCL2), uma quimiocina a qual media especificamente a quimiotaxia de células tais como monócitos e macrófagos. O Cenicriviroc ((S,E)-8-(4-(2-butoxi etoxi) fenil) -1-isobutil-N-(4-(((1-propil-1H-imidazol-5-il) metil) sulfinil) fenil) -1,2,3,4-tetrahidrobenzo [b] azocina- 5-carboxamida, CAS No. 497223-25-3) é um inibidor de ambos os receptores CCR2 e CCR5.

[0210] Em diversas modalidades da invenção, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo um antagonista do receptor de quimiocina C-C do tipo 2 (CCR2), um antagonista do receptor de quimiocina C-C do tipo 5 (CCR5), um antagonista duplo de CCR2 / CCR5, ou uma combinação ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0211] Em diversas modalidades, o antagonista de CCR2 é selecionado a partir do grupo que consiste em: um RNA de fita dupla, um composto que antagoniza a ligação de CCR2 ao seu ligante, um anticorpo neutralizante para CCR2, um ligante correspondente a um anticorpo neutralizante para CCR2, um peptídeo isolado derivado de sequências de CCR2 ou seus análogos capazes de inibir CCR2, um ácido nucleico antisense, um microRNA antagonista e uma molécula de RNA enzimática.

[0212] Em diversas modalidades, os métodos compreendem ainda administrar ao indivíduo um antagonista de CCR5 e um antagonista de CCR2, ou um antagonista duplo de CCR2 / CCR5.

[0213] Em diversas modalidades, o antagonista duplo de CCR2 / CCR5 é (S,E)-8-(4-(2-butoxi etoxi) fenil)-1-isobutil-N- (4-(((1-propil-1H-imidazol-5-il) metil) sulfinil) fenil)- 1,2,3,4 -tetrahidrobenzo [b] azocina-5-carboxamida (Cenicriviroc) ou mesilato de Cenicriviroc.

[0214] Em diversas modalidades, os métodos compreendem administrar uma dose diária de 50 a 500 mg de Cenicriviroc. Em determinadas modalidades, o método descrito acima compreende administrar uma dose diária de 10 a 200 mg de Cenicriviroc. Em determinadas modalidades, o método compreende administrar uma dose diária de 50 a 500 mg, 50 a 400 mg, 50 a 300 mg, 50 a 200 mg, ou 100 a 200 mg de Cenicriviroc. Em determinadas modalidades, o método descrito acima compreende administrar uma dose diária de 100 - 200 mg de Cenicriviroc. Em diversas modalidades, o método compreende administrar uma dose diária de 100 ou 200 mg de Cenicriviroc.

[0215] Em algumas modalidades, os métodos compreendem ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição farmacêutica compreendendo pelo menos um composto selecionado a partir do grupo que consiste em eicosapentanoato de etila (EPA-E), ácido eicosapentaenoico (EPA) e seus amidos, sais, ésteres e fosfolipídios farmaceuticamente aceitáveis.

[0216] Em algumas modalidades, o EPA-E ou EPA pode ser pelo menos 40 % em peso no total de ácidos graxos e seus derivados.

[0217] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende Epadel® (Machida Pharmaceutical Co., Ltd., Tóquio, Japão), Lovaza™ (GlaxoSmithKline, Flórida, Estados Unidos), Omacor™ (Pronova Biopharma ASA, Oslo, Noruega), Lotriga™(Takeda Pharmaceutical Co., Ltd., Osaka, Japão), Vascepa™ (Amarin Pharma Inc., Nova Jérsei, Estados Unidos), Epanova™ (Astra Zeneca Pharmaceuticals LP, Wilmington, Alemanha) ou Omtryg™ (Trygg Pharma Inc., VA, Estados Unidos).

[0218] Lovaza™, ésteres etílicos de ácido ômega-3, predominantemente uma combinação de ésteres etílicos de ácido eicosapentaenoico (EPA - aproximadamente 465 mg) e ácido docosahexaenoico (DHA - aproximadamente 375 mg), é indicado como um coadjuvante da dieta para reduzir os níveis de triglicerídeos (TG) em pacientes adultos com hipertrigliceridemia grave (≥ 500 mg / dL) (Lovaza, Rotulagem Aprovada pela Administração de Alimentos e Fármacos (Id. De Referência: 3371921) [online], GlaxoSmithKline, 2013).

[0219] A dose recomendada e cronograma para Lovaza™ é de 4 g por dia. A dose diária pode ser tomada como uma dose única de 4 gramas (4 cápsulas) ou como duas doses de 2 gramas (2 cápsulas administradas duas vezes por dia).

[0220] Em algumas modalidades, a administração de Lovaza™ compreende 4.0 g por dia, 3.5 g por dia, 3.0 g por dia,

2.5 g por dia, 2.0 g por dia, 1.5 g por dia, 1.0 g por dia ou menos de Lovaza™.

[0221] Omacor™, ésteres etílicos de ácido ômega-3, predominantemente uma combinação de ésteres etílicos de ácido eicosapentaenoico (EPA - aproximadamente 465 mg) e ácido docosahexaenoico (DHA - aproximadamente 375 mg), é um agente regulador de lipídios. (Id. De Referência: ”FPL para NDA 21- 654 aprovado”) [online], Abbott Laboratories).

[0222] A dose recomendada e cronograma para Omacor™ é de 4 g por dia. A dose diária pode ser tomada como uma dose única de 4 gramas (4 cápsulas) ou como duas doses de 2 gramas (2 cápsulas administradas duas vezes por dia).

[0223] Em algumas modalidades, a administração de Omacor™ compreende 4.0 g por dia, 3.5 g por dia, 3.0 g por dia,

2.5 g por dia, 2.0 g por dia, 1.5 g por dia, 1.0 g por dia ou menos de Omacor™.

[0224] Vascepa™, contendo 1 grama de icosapentetil, um éster etílico do ácido graxo ômega-3 do ácido eicosapentaenoico (EPA), é um agente regulador de lipídios indicado como adjuvante da dieta para reduzir os níveis de triglicerídeos (TG) em pacientes adultos com hipertrigliceridemia grave (≥ 500 mg / dL) (Vascepa™, Rotulagem Aprovada pela Administração de Alimentos e Fármacos (Id. De Referência: 3783357) [online], Amarin Pharmaceuticals, 2012).

[0225] A dose recomendada e cronograma para Vascepa™ é de 4 gramas por dia administradas como 2 cápsulas duas vezes por dia com alimentos.

[0226] Em algumas modalidades, a administração de Vascepa™ compreende 4.0 g por dia, 3.5 g por dia, 3.0 g por dia, 2.5 g por dia, 2.0 g por dia, 1.5 g por dia, 1.0 g por dia ou menos de Vascepa™.

[0227] Epanova™, contendo 1 grama de ácidos graxos livres derivados de óleo de peixe, designados “ácidos graxos ômega-3-carboxílicos”, com pelo menos 850 mg de ácidos graxos poli-insaturados, incluindo múltiplos ácidos graxos ômega-3 (ácido eicosapentaenoico [EPA] e ácido docosahexaenoico [DHA] sendo o mais abundante), é um agente regulador de lipídios indicado como adjuvante da dieta para reduzir os níveis de triglicerídeos (TG) em pacientes adultos com hipertrigliceridemia grave (> 500 mg / dL) (Epanova™, Rotulagem Aprovada pela Administração de Alimentos e Fármacos (Id. De Referência: 3501113) [online], AstraZeneca Pharmaceuticals, 2014).

[0228] A dose recomendada e cronograma para Epanova™ é de 4 gramas por dia administradas como 2 gramas (2 cápsulas) duas vezes por dia, ou 4 gramas (4 cápsulas) uma vez por dia.

[0229] Em algumas modalidades, a administração de Epanova™ compreende 4.0 g por dia, 3.5 g por dia, 3.0 g por dia, 2.5 g por dia, 2.0 g por dia, 1.5 g por dia, 1.0 g por dia ou menos de Epanova™.

[0230] Omtryg™, uma combinação de ésteres etílicos de ómega-3 ácidos graxos predominantemente uma combinação de ésteres etílicos de ácido eicosapentaenoico (EPA - aproximadamente 465 mg) e ácido docosahexaenoico (DHA - aproximadamente 375 mg), é um agente regulador de lipídios, indicado como coadjuvante da dieta para reduzir os níveis de triglicerídeos (TG) em pacientes adultos com hipertrigliceridemia grave (≥ 500 mg / dL) (Omtryg™, Rotulagem Aprovada pela Administração de Alimentos e Fármacos (Id. De Referência: 3494935) [online], Trygg Pharma Inc., 2014).

[0231] A dose recomendada e cronograma para Omtryg™ é de 4 gramas por dia administradas como 2 gramas (2 cápsulas) duas vezes por dia, ou 4 gramas (4 cápsulas) uma vez por dia.

[0232] Em algumas modalidades, a administração de Omtryg™ compreende 4.0 g por dia, 3.5 g por dia, 3.0 g por dia,

2.5 g por dia, 2.0 g por dia, 1.5 g por dia, 1.0 g por dia ou menos de Omtryg™.

[0233] As composições recitadas acima são descritas na publicação do pedido de patente norte-americano no. US 2016/0213639, cujo conteúdo completo é incorporado por referência.

[0234] Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um inibidor de Acetil-CoA carboxilase (ACC) isolado, ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais.

[0235] Tal como aqui utilizado geralmente, o “inibidor de ACC” significa qualquer agente terapêutico que reduz a atividade de uma enzima acetil CoA carboxilase.

[0236] Inibidores de ACC adequados incluem aqueles descritos em WO 2013/071169Al, WO 2014/182943Al, WO 2014/182945Al, WO 2014/182950Al e WO 2014/182951Al, a totalidade de cada uma das quais é aqui incorporada por referência.

[0237] Em algumas modalidades, o inibidor da ACC é soraphen A.

[0238] Em algumas modalidades, agentes terapêuticos adicionais são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em antagonistas do receptor de angiotensina II, inibidores da enzima de conversão de angiotensina (ACE), inibidores da caspase, inibidores da catepsina B, antagonistas da quimiocina CCR2, antagonistas da quimiocina CCR5, estimuladores dos canais de cloreto, solubilizantes do colesterol, inibidores da diacilglicerol 0-aciltransferase 1 (DGAT1) , inibidores da dipeptidil peptidase IV (DPPIV), agonistas do receptor farnesoide X (FXR), agonistas duplos FXR / TGR5, inibidores da galectina-3, agonistas de peptídeo semelhante ao glucagon (GLPI), precursores da glutationa, inibidores de protease NS3 do vírus da hepatite C, inibidores da HMG CoA redutase, inibidores da II-hidroxi esteroide desidrogenase (II-HSD I), antagonistas IL-1, antagonistas IL- 6, agonistas IL-10, antagonistas IL-17, inibidores do cotransportador de ácido biliar de sódio ileal, análogos de leptina, inibidores da 5-lipoxigenase, estimuladores do gene LPL, inibidores da lisil oxidase homóloga 2 (LOXL2), inibidores da PDE3, inibidores da PDE4, inibidores da fosfolipase C (PLC), agonistas da PPARa, agonistas da PPARy, agonistas da PPAR8, inibidores da proteína quinase 2 associada a Rho (ROCK2), inibidores do transportador-2 da glicose de sódio (SGLT2), inibidores de estearoil CoA desaturase I, agonistas do receptor do hormônio da tireoide, inibidores do ligante do fator de necrose tumoral a (TNFa), inibidores da transglutaminase, precursores de inibidores da transglutaminase, inibidores da PTPib, e inibidores da ASKI.

[0239] As composições recitadas acima são descritas na publicação do Pedido Internacional PCT no. WO 2016/112305, cujo conteúdo completo é incorporado por referência.

[0240] Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de Cloridrato de pioglitazona (Actos®) ou uma pioglitazona enriquecida com deutério enantiopura.

[0241] Tal como aqui utilizado, a pioglitazona deuterada contém enriquecimento de deutério no centro quiral da pioglitazona e, opcionalmente, em outros locais do composto. Além disso, a pioglitazona enriquecida com deutério é fornecida na forma enantiomericamente pura.

[0242] Em algumas modalidades, o composto enriquecido com deutério apresenta uma pureza óptica de pelo menos 75 % de excesso enantiomérico.

[0243] O cloridrato de pioglitazona, o ingrediente ativo de Actos®, é uma tiazolidinediona e um agonista do receptor ativado pelo proliferador de peroxissoma (PPAR) gama indicado como um complemento à dieta e exercícios para melhorar o controle glicêmico em adultos com diabetes mellitus tipo 2 em vários contextos clínicos (Actos®, Rotulagem Aprovada pela Administração de Alimentos e Fármacos (Id. De Referência: 2983732) [online], Takeda Pharmaceuticals, 2009-2011).

[0244] A dose recomendada e cronograma para Actos® é de 15 mg ou 30 mg de dose inicial uma vez por dia. Se houver controle glicêmico inadequado, a dose pode ser aumentada em incrementos de 15 mg até um máximo de 45 mg uma vez por dia.

[0245] Em algumas modalidades, a administração do

Actos® compreende 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, ou 45 mg ou menos de Actos®.

[0246] As composições recitadas acima são descritas na publicação do Pedido Internacional PCT no. WO 2016/153948, cujo conteúdo completo é incorporado por referência.

[0247] Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um agonista duplo delta e gama receptor ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR).

[0248] Em algumas modalidades, a atividade delta +e maior do que a atividade gama, e a atividade gama é maior do que a atividade alfa.

[0249] Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ácido indano acético e seus derivados, os quais são agonistas duplos PPAR delta e gama.

[0250] Exemplos de agentes terapêuticos adicionais podem incluir, porém não estão limitados a combinação com: agonistas do receptor farnesoide X tais como ácido obeticólico e Px-104, GR-MD-02, bitartarato de cisteamina, simtuzumab, emricasan, GFT-505, CER-002, KD3010, KD3020, MBX8025, LUM002, RP-103, bloqueadores de galectina-3 tais como LIPC-1010 e GR- MD-02, cenicriviroc, inibidores da proteína-1 de adesão vascular tais como PXS4728A, metformina, agonistas da PPAR gama tais como rosiglitazona e pioglitazona, metformina, pentoxifilina, vitamina E, selênio, ácidos graxos ômega-3 e betaína.

[0251] As composições citadas aqui acima são descritas na publicação do pedido internacional PCT no. WO 2016/154258, cujo conteúdo completo é incorporado por referência.

[0252] As modalidades acima referidas se referem a diversos fármacos sendo substancialmente eficazes no corpo ao mesmo tempo. Diversos fármacos podem ser administrados substancialmente ao mesmo tempo, ou podem ser administrados em momentos diferentes, mas têm efeito no corpo ao mesmo tempo. Por exemplo, isso inclui a administração de Aramchol™ antes ou posteriormente, enquanto o funcionamento do Aramchol™ no corpo é substancialmente existente.

[0253] Então em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo pelo menos um composto selecionado a partir do grupo que consiste em: eicosapentanoato de etila (EPA-E), ácido eicosapentaenoico (EPA) e seus amidos, sais, ésteres e fosfolipídios farmaceuticamente aceitáveis; um inibidor de Acetil-CoA carboxilase (ACC) isolado, ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais; cloridrato de pioglitazona ou uma pioglitazona enriquecida com deutério enantiopura; e um agonista duplo delta e gama do receptor ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR).

[0254] Em algumas modalidades, agentes terapêuticos adicionais são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em antagonistas do receptor de angiotensina II, inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ACE),

inibidores da caspase, inibidores da catepsina B, antagonistas da quimiocina CCR2, antagonistas da quimiocina CCR5, estimuladores dos canais de cloreto, solubilizantes do colesterol, inibidores da diacilglicerol 0-aciltransferase 1 (DGAT1), inibidores da dipeptidil peptidase IV (DPPIV), agonistas do receptor farnesoide X (FXR) tais como ácido obeticólico e Px-104, agonistas duplos FXR / TGR5, inibidores da galectina-3 tais como LIPC-1010 e GR-MD-02, agonistas de peptídeo semelhante ao glucagon (GLPI), precursores da glutationa, inibidores de protease NS3 do vírus da hepatite C, inibidores da HMG CoA redutase, inibidores da II-hidroxi esteroide desidrogenase (II-HSD I), antagonistas IL-1, antagonistas IL-6, agonistas IL-10, antagonistas IL-17, inibidores do cotransportador de ácido biliar de sódio ileal, análogos de leptina, inibidores da 5-lipoxigenase, estimuladores do gene LPL, inibidores da lisil oxidase homóloga 2 (LOXL2), inibidores da PDE3, inibidores da PDE4, inibidores da fosfolipase C (PLC), agonistas da PPARa, agonistas da PPAR gama tais como rosiglitazona e pioglitazona, metformina, pentoxifilina, vitamina E, selênio, ácidos graxos ômega-3 e betaína, agonistas da PPAR8, inibidores da proteína quinase 2 associada a Rho (ROCK2), inibidores do transportador-2 da glicose de sódio (SGLT2), inibidores de estearoil CoA desaturase I, agonistas do receptor do hormônio da tireoide, inibidores do ligante do fator de necrose tumoral a (TNFa), inibidores da transglutaminase, precursores de inibidores da transglutaminase, inibidores da PTPib, inibidores da ASKI, e inibidores da proteína-1 de adesão vascular tais como PXS4728A,

metformina, GR-MD-02, bitartarato de cisteamina, simtuzumab, emricasan, GFT-505, CER-002, KD3010, KD3020, MBX8025, LUM002, RP-103, e cenicriviroc.

[0255] A administração de dois fármacos para tratar uma determinada condição, tal como doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA), levanta uma série de problemas potenciais. Interações in vivo entre dois fármacos são complexas. Os efeitos de qualquer fármaco único está relacionado à sua absorção, distribuição e eliminação. Quando dois fármacos são introduzidos no corpo, cada fármaco pode afetar a absorção, distribuição e eliminação do outro e consequentemente, alterar os efeitos do outro. Por exemplo, um fármaco pode inibir, ativar ou induzir a produção de enzimas envolvidas em uma rota metabólica de eliminação do outro fármaco. (Guia para a Indústria, 1999). Logo, quando dois fármacos são administrados para tratar a mesma condição, é imprevisível se cada um irá complementar, não terá efeito ou irá interferir na atividade terapêutica do outro em um indivíduo humano.

[0256] Não apenas a interação entre dois fármacos pode afetar a atividade terapêutica pretendida de cada fármaco, mas a interação pode aumentar os níveis de metabólitos tóxicos (Guia para a Indústria, 1999). A interação também pode potencializar ou diminuir os efeitos colaterais de cada fármaco. Portanto, na administração de dois fármacos para tratar uma doença, é imprevisível qual alteração ocorrerá no perfil de efeitos colaterais negativos de cada fármaco.

[0257] Além disso, é difícil prever com precisão quando os efeitos da interação entre os dois fármacos se tornará manifesto. Por exemplo, interações metabólicas entre fármacos pode se tornar aparente na administração inicial do segundo fármaco, após os dois alcançarem uma concentração no estado estacionário ou após a descontinuação de um dos fármacos. (Guia para a Indústria, 1999).

[0258] É entendido que, onde uma faixa de parâmetro é fornecida, todos os números inteiros dentro dessa faixa, e décimos deles, também são fornecidos pela invenção. Por exemplo, “0.2 - 5 mg / kg / dia” é uma divulgação de 0.2 mg / kg / dia, 0.3 mg / kg / dia, 0.4 mg / kg / dia, 0.5 mg / kg / dia, 0.6 mg / kg / dia etc. até 5.0 mg / kg / dia.

[0259] Cada modalidade aqui divulgada é contemplada como sendo aplicável a cada uma das outras modalidades divulgadas. Logo, todas as combinações dos vários elementos aqui descritos estão dentro do escopo de a invenção.

[0260] Os exemplos a seguir são apresentados a fim de ilustrar mais completamente algumas modalidades da invenção. Não devem, de forma alguma, ser interpretados, no entanto, como limitando o amplo escopo da invenção.

EXEMPLOS

[0261] Os exemplos são fornecidos abaixo para facilitar um entendimento mais completo da invenção. Os exemplos a seguir ilustram os modos exemplares de fazer e praticar a invenção. No entanto, o escopo da invenção não se limita a modalidades específicas divulgadas nestes Exemplos, que são apenas para fins de ilustração. Exemplo 1 – Fibrose induzida por tioacetamida (TAA) -

modelo para cirrose hepática

[0262] A fibrose hepática foi induzida em ratos Wistar por injeções intraperitoneais de TAA (20 mg / 100 gr de peso corporal) duas vezes por semana durante 10 semanas. A aplicação intraperitoneal de TAA resulta em necrose hepática centro lobular, atividade elevada de transaminase e fibrose hepática robusta. Os grupos de tratamento ainda incluíram a coadministração de Aramchol™ (1 ou 5 mg / kg oralmente) ou ácido obeticólico (OCA, 5 mg / kg). Um grupo controle de ratos tratados com solução salina (na ausência de administração de TAA) foi ainda incluído. Os ratos foram então sacrificados, e os fígados foram observados macroscopicamente quanto a sinais de cirrose e lesões necróticas, e microscopicamente, após a coloração de Masson Goldner. A pontuação da fibrose, calculada em uma escala de 0 - 4, foi determinada para cada amostra, em que 0 indica ausência de fibrose e 4 indica fibrose avançada e cirrose.

[0263] Como pode ser observado nas Figuras 1 - 2, o tratamento com Aramchol™ (5 mg / kg) preveniu significativamente a fibrose induzida por TAA. O tratamento reduziu significativamente o desenvolvimento de necrose e cirrose (Figura 1), bem como a pontuação fibrótica e a distribuição do colágeno no tecido (Figura 2), de forma dependente da dose. Em contraste, o OCA não induziu a redução estatisticamente significativa desses parâmetros.

[0264] Logo, o Aramchol™ foi surpreendentemente descoberto ser um potente agente antifibrótico e anticirrótico. O Aramchol™ também mostrou ser inesperadamente superior ao OCA e fornece tratamento melhorado e eficaz para fibrose hepática.

[0265] A cirrose e hipertensão portal a partir da intoxicação com TAA pode eventualmente levar ao desenvolvimento de insuficiência hepática aguda e condições associadas tais como encefalopatia hepática, e o modelo de TAA também é usado na avaliação desses fenômenos. De acordo com isto, como divulgado aqui, o Aramchol™ também pode ser usado em algumas modalidades para a prevenção de insuficiência hepática aguda ou fatal e / ou encefalopatia hepática ou portossistêmica, por exemplo, insuficiência hepática induzida por toxina e / ou encefalopatia hepática. Exemplo 2 - Inibição da síntese de colágeno em células estreladas

[0266] Células LX2 (150.000 células por poço) foram semeadas em meio DMEM contendo antibióticos, glutamina e soro fetal bovino. Após 24 horas de incubação, o meio foi trocado para 0 % de soro e incubado por um período adicional de 16 horas. Em seguida, foi adicionado o Aramchol™ (10 mM) e 24 horas depois o RNA foi extraído com Trizol.

[0267] Surpreendentemente, como pode ser observado nas Figuras 3 e 4, a expressão de COL1A1 em células estreladas hepáticas humanas LX-2 foi reduzida pelo Aramchol™ por meio da regulação positiva de PPARγ.

[0268] De forma consistente, o Aramchol™ regula significativamente negativamente a produção de colágeno em células estreladas hepáticas humanas LX-2 em relação ao controle de DMSO (Figura 5). De novo, o Aramchol™ foi surpreendentemente considerado eficaz na redução da produção de colágeno, especificamente em células estreladas. Exemplo 3 – o Aramchol™ reduz a fibrose estabelecida em um modelo animal de dieta MCD

[0269] O estudo descrito abaixo investiga o mecanismo de ação do Aramchol™ e seu efeito potencial na fibrose usando o modelo de camundongo com dieta deficiente em metionina e colina 0.1 % (0.1 MCD) de EHNA.

[0270] Os C57Bl/6 foram alimentados com dieta deficiente em metionina e colina (MCD) e dieta controle e foram sacrificados após 4 semanas. A dieta de MCD induz a elevação das aminotransferases e alterações nas características histológicas hepáticas, caracterizadas por esteatose, inflamação local, necrose de hepatócitos e fibrose. Essas mudanças ocorrem rapidamente e são morfologicamente semelhantes às observadas na EHNA humano. Neste estudo, a dieta de MCD continha 0.1 % de metionina para minimizar e estabilizar a perda de peso. No final da segunda semana, após a verificação do EHNA estabelecido, os camundongos alimentados com 0.1 MCD foram tratados por via oral por gavagem com Aramchol™ (5 mg / kg / dia) ou veículo (n = 10, cada condição). Os camundongos controle alimentados com dieta alimentar também foram tratados com veículo para a mesma duração (n = 10). Ao final do experimento, foram obtidas amostras de sangue e fígado. Um diagrama do projeto experimental é mostrado abaixo: Dieta de 0.1 MCD + AramcholTM Dieta de 0.1 MCD 5 mg / kg 14 dias 14 dias 28 dias

[0271] Resultados do estudo mostraram: 1) tratamento com Aramchol™ regula negativamente significativamente esteatose no fígado (Figura 6); 2) tratamento com Aramchol™ regula negativamente significativamente / normaliza a infiltração e o estado de ativação de macrófagos no fígado (Figura 7); 3) tratamento com Aramchol™ regula negativamente significativamente / normaliza a fibrose no fígado (Figura 8); 4) Aramchol™ regula negativamente significativamente o colágeno no fígado (Figura 9); e 5) Aramchol™ regula positivamente significativamente glutationa e eleva a proporção de GSH / GSSG em camundongos 0.1 % MCD (Figura 10).

[0272] Adicionalmente, o tratamento com Aramchol™ ainda reduziu a atividade da SCD1, a qual foi evidenciada por uma diminuição acentuada na expressão de SCD1, na proporção FA(16:1) / FA(16:0) e no conteúdo total de AG monoinsaturados (MUFA), o que levou a uma redução no conteúdo hepático de diglicerídeos (DG) e TG. O tratamento com Aramchol™ melhorou o estresse oxidativo, conforme demonstrado pela normalização da proporção GSH / GSSG, um biomarcador do potencial redox celular, e uma redução acentuada no teor de oxFA total incluindo oxLA, que foi associado à lesão hepática em EHNA humano.

[0273] A descrição anterior das modalidades específicas revelará tão completamente a natureza geral da invenção que outros podem, aplicando o conhecimento atual, prontamente modificar e / ou adaptar para várias aplicações as referidas modalidades específicas sem experimentação indevida e sem se afastar do conceito genérico, e, portanto, as referidas adaptações e modificações devem ser destinadas a estar compreendidas dentro do significado e faixa de equivalentes das modalidades divulgadas. Deve ser entendido que a fraseologia ou terminologia aqui empregada tem o propósito de descrição e não de limitação. Os meios, materiais e etapas para realizar várias funções divulgadas podem assumir uma variedade de formas alternativas sem se afastar de a invenção. Exemplo 4 (a) Breve sumário

[0274] Este é um estudo multicêntrico, de Fase IIb, randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, desenvolvido para avaliar a eficácia e segurança de duas doses de Aramchol™ em indivíduos que tem de 18 a 75 anos de idade, com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) confirmada por biópsia do fígado realizada em um período de 6 meses antes de entrar no estudo, com sobrepeso ou obesidade e os quais são pré-diabéticos ou diabéticos tipo II. (b) Intervenção

[0275] Fármaco: Aramchol™

[0276] Indivíduos serão administrados com Aramchol™ como segue: a. Um comprimido de Aramchol™ de 400 mg e um comprimido de correspondência de placebo para Aramchol™. b. Um comprimido de Aramchol™ de 400 mg e um comprimido de Aramchol™ de 200 mg. c. Dois comprimidos de correspondência de placebo para Aramchol™. Os comprimidos devem ser tomados por via oral pela manhã dentro de 30 min após o café da manhã com um copo de água (250 ml).

[0277] Os indivíduos estão autorizados a omitir os fármacos do estudo até 3 dias consecutivos durante o estudo.

[0278] Outro nome: Placebo (c) Grupos de estudo

[0279] Experimental: Aramchol™ 600 mg a. Um comprimido de Aramchol™ de 400 mg e um comprimido de Aramchol™ de 200 mg. b. Intervenção: Fármaco: Aramchol™

[0280] Experimental: Aramchol™ de 400 mg a. Um comprimido de Aramchol™ de 400 mg e um comprimido de correspondência de placebo para Aramchol™. b. Intervenção: Fármaco: Aramchol™

[0281] Comparador do Placebo: Placebo a. Dois comprimidos de correspondência de placebo para Aramchol™. b. Intervenção: Fármaco: Aramchol™ (d) Inscrição estimada

[0282] 240 (e) Critérios de inclusão

[0283] Homens ou mulheres com idade de 18 a 75 anos.

[0284] BMI entre 25 kg / m2 a 40 kg / m2 ou circunferência da cintura entre 88 cm a 200 cm para as mulheres, e entre 102 cm a 200 cm para os homens. Se houver desvio acima do limite superior, consulte o centro de ressonância magnética, para garantir que a máquina é adequada para o paciente.

[0285] Diabetes Mellitus tipo II ou pré-diabetes conhecida de acordo com a Associação Americana de Diabetes. Um dos 3 critérios a seguir é necessário para pré-diabetes: glicose plasmática de jejum > 100 mg / dl (5,5 mmol / l) ou 2hPG após 75g OGTT > 140 (7,8 mmol / l) mg / dl ou HbA1c > 5.7 %. A HbA1c pode ser repetida a critério do investigador.

[0286] Esteato hepatite histologicamente comprovada em biópsia diagnóstica do fígado realizada durante triagem ou 6 meses antes da visita de triagem, confirmada por leitura laboratorial central das lâminas. (Esteatose ≥ 1 + inflamação ≥ 1 + balonização ≥ 1). Pontuação total da atividade NAS de 4 ou mais.

[0287] Concentração da gordura hepática no fígado de

5.5 % ou mais tal como medido por NMRS.

[0288] Biópsias com pontuação de atividade NAS de 4 ou mais.

[0289] Função hepática sintética normal (albumina sérica > 3,2g / dl, INR 0,8 - 1,2, bilirrubina conjugada < 35 µmol / L).

[0290] Entendimento da natureza do estudo e assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido.

[0291] Teste de gravidez negativo na entrada do estudo para mulheres com potencial para engravidar.

[0292] As mulheres com potencial para engravidar praticando contracepção confiável durante todo o período de estudo (incluindo contraceptivos orais), bem como teste de gravidez negativo na entrada do estudo.

[0293] Os pacientes hipertensos devem ser bem controlados por uma dose estável de medicamento anti-

hipertensivo por pelo menos 2 meses antes da triagem.

[0294] Os pacientes previamente tratados com vitamina E (> 400UI / dia), ácido graxo poli-insaturado (> 2g / dia) ou ácido ursodeoxicólico ou óleo de peixe podem ser incluídos se interrompidos ou pelo menos mantidos em dose estável pelo menos 3 meses antes do diagnóstico de biópsia do fígado (e não são iniciados durante o teste). Esses tratamentos - dosagens são permitidos desde que estejam estáveis por pelo menos 12 meses antes da biópsia e possam permanecer estáveis durante todo o estudo. (Dosagens menores do que as quantidades declaradas acima são permitidas sem restrições de período estável ou de retirada).

[0295] Para pacientes com Diabetes tipo II, a glicemia deve ser controlada (hemoglobina glicosilada A1c ≤ 9 %), enquanto qualquer alteração de HbA1c não deve exceder 1.5 % durante 6 meses antes da inscrição). Os tratamentos com medicamentos antidiabéticos (exceto aqueles mencionados na Exclusão 16) são permitidos se a glicemia for auto monitorada pelo paciente. A HbA1c pode ser repetida a critério do investigador. Critérios de exclusão

[0296] Critérios de exclusão:

[0297] Pacientes com outras doenças hepáticas ativas (aguda ou crônica) além da EHNA (por exemplo hepatite viral, a menos que erradicada pelo menos 3 anos antes da triagem; hemocromatose genética; doença de Wilson; deficiência de alfa 1-antitripsina; alcoolismo hepático; doença hepática induzida por fármaco) no momento da randomização.

[0298] Pacientes com cirrose hepática clinicamente ou histologicamente documentada.

[0299] Abuso ou dependência de álcool e / ou qualquer outro fármaco conhecido nos últimos cinco anos.

[0300] Histórico conhecido ou presença de doenças cardiovasculares, gastrointestinais, metabólicas clinicamente significativas, exceto Diabetes Mellitus, doenças neurológicas, pulmonares, endócrinas, psiquiátricas, neoplásicas ou síndrome nefrótica, que, na opinião do investigador, justificam a exclusão do estudo.

[0301] Pacientes com hipertrigliceridemia familiar (isto é, genética) e hipercolesterolemia familiar (isto é, genética).

[0302] Histórico ou presença de qualquer doença ou condição conhecida por interferir na absorção, distribuição, metabolismo ou excreção de fármacos incluindo metabólitos de sais biliares (por exemplo, doença inflamatória intestinal (IBD)), operação intestinal anterior (ileal ou colônica), pancreatite crônica, doença celíaca ou vagotomia anterior. Constipação crônica contínua

[0303] Pacientes com marca-passo cardíaco ou cerebral (isto é, dispositivos neurológicos implantáveis).

[0304] Cirurgia durante os últimos três meses antes da triagem que envolveu o implante de stent de dispositivos de metal (por exemplo, joelho, quadril etc.)

[0305] Perda de peso de mais de 5 % dentro de 6 meses antes da randomização.

[0306] Histórico de cirurgia bariátrica dentro de 5 anos da biópsia do fígado.

[0307] Hipertensão arterial não controlada.

[0308] Mulheres grávidas e amamentando.

[0309] Diabetes Mellitus diferente do tipo II (tipo I, endocrinopatia, síndromes genéticas, etc.).

[0310] Pacientes com infecção por HIV.

[0311] Ingestão diária de álcool > 20 g / dia para mulheres e > 30 g / dia para homens (em média por dia) de acordo com o histórico médico.

[0312] Tratamento com outros medicamentos antidiabéticos: agonistas do receptor GLP-1 e tiazolidinedionas (TZDs), a menos que iniciado pelo menos 12 meses antes da biópsia e em dose estável por 6 meses. Em caso de interrupção dos agonistas do receptor de GLP-1, deve ser pelo menos 6 meses antes da biópsia conforme histórico médico.

[0313] Inibidores da SGLT-2, metformina, fibratos, estatinas, insulina, inibidores da DPP-4 e sulfonilureia, a menos que a dose prescrita tenha permanecido estável nos últimos 6 meses antes da biópsia.

[0314] Tratamento com ácido valproico, tamoxifeno, metotrexato, amiodarona ou tratamento crônico com anticolinérgicos, corticosteroides, altas doses de estrogênio e tetraciclina 12 meses antes da consulta de triagem.

[0315] Tratamento crônico com antibióticos (por exemplo rifaximina).

[0316] Tratamentos homeopáticos e / ou alternativos. Qualquer tratamento deve ser interrompido durante o período de triagem pelo menos 48 horas antes da randomização.

[0317] Hipotireoidismo não controlado definido como hormônio estimulador da tireoide > 2 vezes o limite superior do normal (LSN). Disfunção tireoidiana controlada por pelo menos 6 meses antes da triagem é permitida.

[0318] Pacientes com disfunção renal eGFR < 40.

[0319] Creatina fosfoquinase sérica inexplicada (CPK) > 3x o limite superior do normal (UNL). Pacientes com um motivo para elevação de CPK podem ter a medição repetida antes da randomização; um reteste CPK > 3x ULN leva à exclusão.

[0320] Pacientes com condição(ões) que os torna inadequados para realizar o NMRS (conforme determinado pelo investigador principal ou pela instalação de ressonância magnética).

[0321] Hipersensibilidade ao Aramchol™ ou a qualquer um dos excipientes nos comprimidos

[0322] Hipersensibilidade a ácido cólico ou sequestrantes de ácido biliar. Descrição Detalhada

[0323] Este é um estudo multicêntrico, de Fase IIb, randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, desenvolvido para avaliar a eficácia e a segurança de duas doses de Aramchol™ em pessoas de 18 a 75 anos de idade, com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) confirmada por biópsia do fígado realizada em um período de 6 meses antes de entrar no estudo, com sobrepeso ou obesidade e os quais são pré-diabéticos ou diabéticos tipo II.

[0324] Os indivíduos elegíveis serão inscritos em três grupos de tratamento: comprimidos de Aramchol™ 400 e 600 mg e comprimidos placebo na proporção 2:2:1.

[0325] Os indivíduos serão avaliados nos locais de estudo para 11 visitas agendadas: na triagem (visita 1 (semanas -4 - 0)), linha de base (visita 2 (dia 0)), visita 3 (semana 2), visita 4 (semana 4), visita 5 (semana 8), visita 6 (semana 12), visita 7 (semana 24), visita 8 (semana 32), visita 9 (semana 40) e visita 10 (semana 52 – visita de fim do tratamento / término antecipado)). Após o final do período de tratamento do estudo, os indivíduos serão acompanhados por um período adicional de 13 semanas sem medicação do estudo (até a visita 11 (semana 65)).

[0326] Durante o período de triagem, a gravidade da doença será avaliada com exames de sangue, biópsia do fígado e NMRS.

[0327] Durante o estudo, as seguintes avaliações serão realizadas: a. Sinais vitais serão medidos em cada visita de estudo. b. Um exame físico será realizado na visita de triagem, 24 semanas, visita de fim do tratamento / término antecipado e semana 65.

[0328] Os seguintes exames de sangue serão realizados: hemograma completo (CBC), química sorológica (incluindo eletrólitos, enzimas hepáticas, bilirrubina direta e total, glicose, perfil lipídico que inclui triglicerídeos, colesterol, HDL, LDL e VLDL, CPK, creatinina, ureia, albumina, fosfatase alcalina), ESR e análise da urina durante a visita de triagem, na linha de base, visitas nas semanas 2, 4, 8, 24, 40, 52 e 65 (fim do acompanhamento). A sorologia (HBV, HCV e

HIV) será realizada durante a visita de triagem. A coagulação (fibrinogênio, PT / INR, aPTT) será medida nas visitas de triagem e linha de base, semana 24, fim do tratamento / término antecipado e semana 65. A insulina (HOMA) será medida nas visitas de triagem, semana 24 e fim do tratamento / término antecipado. HbA1C será medida nas visitas de triagem, semana 8, 24, 40 e fim do tratamento / término antecipado. Proteína C reativa, leptina, adiponectina, CK-18 (M30 e M65), ferritina, PAI-1, IL-6, TNF-alfa, FGF-19, C4 (7-alfa-hidroxi-4-colesten- 3-ona), grupo de ácidos biliares séricos, B-hidroxibutirato e ácidos graxos livres serão medidos na visita da linha de base e no fim do tratamento. As amostras de sangue colhidas nessas visitas, serão testadas para possíveis biomarcadores, incluindo, porém não limitada a, fetuína A e GDF15. TSH, T3 e T4 serão medidos durante a visita de triagem. O beta-hCG em mulheres com potencial para engravidar será realizado durante a visita de triagem. Uma amostra de soro será coletada e mantida congelada até o final do estudo, caso uma investigação especial precise ser realizada. Esta amostra será coletada durante a visita de triagem e visita 10 / término antecipado.

[0329] O peso corporal e a circunferência da cintura serão medidos nas visitas de triagem, linha de base, semana 24, fim do tratamento e semana 65. A altura será medida durante a visita de triagem.

[0330] O ECG será realizado durante a visita de triagem, visita 7 (semana 24) e visita de fim do tratamento.

[0331] Todos os indivíduos passarão por dois exames NMRS, nas visitas de triagem e fim do tratamento.

[0332] O teste FibroMax será realizado apenas se o investigador achar que é necessário.

[0333] A biópsia do fígado será realizada durante a triagem e na visita de fim de tratamento. A biópsia na visita de triagem será realizada apenas se não tiver sido realizada nos 6 meses anteriores a esta visita.

[0334] O exame de sangue metabolômico será realizado na triagem, na visita 7 e nas visitas de fim de tratamento / término antecipado. De alguns pacientes consentidos (cerca de 15) uma amostra da biópsia do fígado será retirada para análise.

[0335] A função endotelial será realizada em locais selecionados. O teste será realizado durante a visita na linha de base antes do tratamento do estudo ser fornecido e no fim do tratamento / visita de término

[0336] Uma amostra de sangue para o nível de Aramchol™ será coletada (pré-dose) de pacientes em Israel na linha de base (visita 2) semana 4 (visita 4), semana 12 (visita 6), semana 24 (visita 7), semana 40 (visita 9), final do tratamento (visita 10) e acompanhamento (visita 11). Em locais selecionados no México, EUA e Hong Kong será coletada uma amostra de sangue (pré-dose) na visita 4 (até 10 indivíduos por país) para testar as diferenças de nível sanguíneo de Aramchol™ entre populações (por exemplo, afro-americano, asiático, hispânico, etc.).

[0337] Amostra de sangue para análise genética será coletada de todos os pacientes consentidos durante a visita à linha de base, será mantida congelada e analisada somente no final do estudo.

[0338] O questionário de estilo de vida será preenchido em todas as visitas.

[0339] Os eventos adversos serão monitorados durante todo o estudo.

[0340] As medicações concomitantes serão monitoradas durante todo o estudo.

[0341] Os contatos telefônicos serão realizados nas semanas 16, 20, 28, 36, 44 e 48. Uma análise de segurança interina será realizada assim que 120 indivíduos completarem o período de acompanhamento de 24 semanas sob o tratamento do estudo. Uma DSMB independente analisará os dados de segurança e recomendará um curso de ação continuado. Todos os pacientes continuarão a ser tratados sob o protocolo do estudo até que a conclusão da análise seja conhecida

[0342] A avaliação da Segurança incluirá a frequência e gravidade dos EAs emergentes do tratamento, anormalidades laboratoriais clinicamente significativas, alterações de ECG e achados do exame físico. Resultados (i) Medidas de resultados primário e secundário (grupo de 400 mg)

[0343] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ reduz significativamente a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS).

[0344] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 10 – 40 %.

[0345] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 15 % - 35 %.

[0346] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 20 % - 30 %.

[0347] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0348] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. A proporção da melhora é de pelo menos 2 quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0349] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0350] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0351] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. (ii) Medidas de resultados exploratórios (grupo de 400 mg)

[0352] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ inibe a piora da pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0353] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0354] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1a melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0355] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1b melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0356] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1c melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0357] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 2 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0358] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 3 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0359] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 4 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0360] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática melhora a pontuação SAF do indivíduo mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0361] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0362] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto), quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0363] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0364] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. A proporção da melhora é de pelo menos 2 quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0365] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0366] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0367] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0368] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0369] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0370] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0371] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0372] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0373] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0374] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0375] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0376] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0377] O tratamento com 400 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo. (iii) Medidas de resultados primário e secundário (grupo de 600 mg)

[0378] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ reduz significativamente a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS).

[0379] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 10 – 40 %.

[0380] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 15 % - 35 %.

[0381] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ reduz a proporção de triglicerídeos hepáticos tal como medido por Espectroscopia de Ressonância Magnética (MRS) em 20 % - 30 %.

[0382] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0383] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. A proporção da melhora é de pelo menos 2 quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0384] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0385] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo.

[0386] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. (iv) Medidas de resultados exploratórios (grupo de 600 mg)

[0387] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ inibe a piora da pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0388] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0389] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1a melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0390] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1b melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0391] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 1c melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0392] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 2 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0393] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 3 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0394] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática de estágio 4 melhora a pontuação da fibrose do indivíduo significativamente mais do que o efeito que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0395] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática melhora a pontuação SAF do indivíduo mais do que seria esperado com base no efeito do Aramchol™ nos triglicerídeos hepáticos do indivíduo.

[0396] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0397] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto), quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0398] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0399] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos que apresentam melhora na fibrose(isto é, diminuição > ou = a 1 ponto) sem uma piora da EHNA, quando comparada com indivíduos tratados com um placebo. A proporção da melhora é de pelo menos 2 quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0400] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0401] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0402] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0403] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0404] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0405] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com indivíduos afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0406] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0407] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0408] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora na pontuação NAS (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0409] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0410] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com melhora da pontuação da atividade SAF (isto é, melhora de pelo menos 2 pontos) sem piora da pontuação da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0411] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo.

[0412] O tratamento com 600 mg de Aramchol™ para os indivíduos não afligidos com fibrose hepática resulta em uma proporção significativamente mais alta de indivíduos com a resolução do EHNA (balonização de 0, inflamação de 0 ou 1) sem piora da fibrose, quando comparada com os indivíduos não afligidos com fibrose hepática tratados com um placebo. Discussão

[0413] Com base nos estudos aqui descritos, o Aramchol™ é surpreendentemente considerado um potente agente anti- fibrótico e anti-cirrótico. O Aramchol™ é também considerado inesperadamente superior ao OCA e fornece um tratamento melhorado e eficaz para a fibrose hepática. De acordo com isto, o Aramchol™ pode ser usado para prevenir a insuficiência hepática aguda ou fatal e / ou a encefalopatia hepática ou portossistêmica, por exemplo insuficiência hepática induzida por toxinas e / ou encefalopatia hepática.

[0414] Além disto, o Aramchol™ também é surpreendentemente eficaz na reversão da fibrose estabelecida. O tratamento com Aramchol™ melhora a histologia hepática conforme determinado por uma redução do acúmulo de lipídios (coloração sudan vermelha), fibrose (coloração Sirius red e SMA) e inflamação (coloração F4 / 80 e CD64). De fato, o Aramchol™ apresenta um efeito sobre a fibrose em adição às principais patologias da EHNA, a saber, a esteatose e inflamação.

[0415] Os resultados aqui apresentados mostram que o Aramchol™ regula negativamente a produção de colágeno a partir de células estreladas humanas, os efeitos do Aramchol™ são mediados pela regulação negativa do SCD 1 e pela regulação positiva da produção de glutationa, e o efeito do Aramchol™ na fibrose é mediado pela regulação negativa da esteatose e inflamação, bem como diretamente pela regulação negativa da produção de colágeno a partir de células estreladas. Em conjunto, as informações aqui contidas apoiam os efeitos do Aramchol™ em pacientes humanos tal como indicado nas reivindicações.

[0416] Os resultados análogos àqueles do Exemplo 4 para doses de 400 mg ou 600 mg são esperados para doses mais altas de Aramchol™ que são aqui recitadas. Exemplo 5: Estudos in vivo com Aramchol™, um inibidora da estearoil CoA desaturase, em indivíduos humanos com EHNA. Resultados de um ano do ensaio ARREST controlado por placebo randomizado de fase 2b global.

[0417] Em um estudo de 3 meses com DHGNA humano de fase 2a, o Aramchol™ reduziu a gordura hepática. Ele também apresentou efeitos antifibróticos em modelos pré-clínicos.

[0418] Os resultados finais do estudo ARREST de fase 2b global que avaliou um tratamento de 1 ano com Aramchol™ em pacientes (pts) com EHNA é aqui reportado. Métodos

[0419] Pacientes com sobrepeso / obesos com pré- diabetes ou diabetes e EHNA comprovada por biópsia (com NAS ≥ 4; F < 4) foram incluídos. A biópsia do fígado e a medição da gordura hepática por espectroscopia MR (LF-MRS) foram realizadas na linha de base e na semana 52. Ambos lidos centralmente. O ponto final primário foi a mudança absoluta da linha de base em LF-MRS (600 mg vs. placebo, PLB; modelo misto de medidas repetidas). Pontos finais chave secundários incluíram: a resolução do EHNA sem piora da fibrose, redução da fibrose de estágio ≥ 1 sem piora da EHNA e redução da ALT.

Resultados

[0420] 247 pacientes de 11 países (Estados Unidos, Europa, América Latina) foram randomizados 2:2:1 para Aramchol™ de 400 mg QD (N = 101), 600 mg QD (N = 98) ou PLB (N = 48). Na linha de base: 65 % mulheres, idade média 54.4 anos, BMI 32.7 kg / m2, HbAlc 6.6% ± 1.0 % (média ± DP), LF-MRS 28.5 % ± 11.7 % (média ± DP); 60 % fibrose de estágio 2 - 3 e NAS 5.12 ± 1.00 (média ± DP). 89 % dos pacientes completaram o estudo. Os resultados do estudo estão resumidos nas Figuras 16 - 20.

[0421] O LF-MRS foi significativamente reduzido vs PLB em 400 mg (p = 0.045) e 600 mg (p < 0.066). Uma redução absoluta de ≥ 5 % estatisticamente significativa na gordura hepática foi observada em 47 % dos pacientes em 600 mg vs 24 % em PLB (p < 0.028) e 37 % em 400 mg sugerindo uma resposta à dose (Figura 16B). Os pacientes no grupo de 600 mg apresentaram a resolução do EHNA sem piora da fibrose mais frequentemente do que PLB: 16.7 % vs. 5.0 % respectivamente, (OR = 4.74, IC de 95 %: 0.99 - 22.66, p = 0.051)(Figura 18A). Uma redução da fibrose de estágio ≥ 1 sem piora da EHNA ocorreu em 29.5 % do grupo de 600 mg vs 17.5 % do grupo PLB (p = 0.21)(Figura 19A). Um (1.3 %) paciente progrediu para cirrose no grupo de 600 mg vs 6 (7.5 %) no grupo de 400 mg e 3 (7.5 %) no grupo de PLB (Figura 19B). Ambas as doses reduziram significativamente a ALT (p < 0.001)(Figura 20A), AST (p = 0.002)(Figura 20B) e HbA1c (p < 0.007) vs PLB em uma forma de resposta à dose. Parâmetros de lipídios séricos e peso corporal não mudaram. A descontinuação devido a eventos adversos (AE) foi < 5 % e AE sérios ocorreram em 10 % dos pacientes sem uma diferença entre os grupos. Conclusão

[0422] Em um ano, no ensaio de fase 2b em pacientes com EHNA controlado por PLB, o Aramchol™ reduziu significativamente a gordura hepática, melhorou a histologia, a bioquímica hepática e o controle glicêmico com excelente segurança e tolerabilidade. A potência terapêutica do Aramchol™ para a EHNA deve ser testado em um estudo maior de fase 3. Exemplo 6: Estudos in vivo com Aramchol™, em indivíduos humanos com EHNA. Modelagem e simulação de doses de 300 mg BID e 600 mg QD de ARAMCHOL™ nos pacientes.

[0423] A Tabela 1 resume a exposição de plasma reportada de três estudos - Fase I de dose única em voluntários saudáveis (30 - 900 mg, ASC = ASCinf); estudo de fase II de ARAMCHOL™ 003 em dose repetida (ASC em D84 de 100 & 300 mg QD), fase IIb de Cmin em D84 (400 e 600 mg QD).

Tabela 1. Sumário dos dados de exposição em voluntários saudáveis e pacientes.

Biodisponibilidade SS Cmin ASC ASC / dose (ng Dose relativa (ASC / dose Estudo (ng / (ng / / ml.h / (mg / (mg) normalizada para ml) ml.h) kg)) dados de 30 mg HV) Fase 1 de 30 11919 397 1 voluntários 100 25698 257 0.65 saudáveis em dose 300 64285 214 0.54 única 900 86943 97 0.24 ARAMCHOL™ 003 de 100 19738 197 0.50 Fase 2 300 32992 110 0.28 Fase 2b (Relatório 400 2859 68616* 172 0.43 referente ao Resumo através de concentrações de 600 3611 86664* 144 0.36 ARAMCHOL™ 081320180536)

[0424] A exposição em voluntários saudáveis é sub- proporcional com uma diminuição de aproximadamente quatro vezes na ASC / dose em toda a faixa de dosagem 30 - 900 mg (397 - 97 ng / ml.h / (mg / kg)). A biodisponibilidade em relação a 30 mg / kg foi calculada como (ASC / dose) / (ASC / 30 mg) e é traçada para este grupo na Figura 11.

[0425] A exposição em pacientes é também sub- proporcional de 100 a 300 mg. Observa-se que a ASC no estado estacionário médio neste estudo a 300 mg (32992 ng / ml.h) é aproximadamente 2 vezes menor do que a ASCinf a partir da dose única em voluntários saudáveis (64285 ng / ml.h). Isso pode ser devido ao uso de uma formulação de comprimido no paciente estudo versus o pó / suspensão em voluntários saudáveis ou pode simplesmente refletir um alto grau de variabilidade interindividual (tipicamente a exposição do CV é > 50 % dentro de um grupo de estudo).

[0426] A Cmin no estado estacionário (dia 84) em pacientes a 400 mg e 600 mg foi medida. Embora a ASC neste estudo não tenha sido calculada, pois a meia-vida é relativamente longa (> 24h), espera-se que a Cmin, Cmax e Cavg seja similar e então a ASC pode ser aproximada por Cmin*24 para permitir a comparação com outros estudos (espera-se que o valor verdadeiro seja ligeiramente superior). Isso indica que a exposição a 400 mg (68616 ng / ml.h) é super proporcional em relação ao 300 mg em pacientes (32992 ng / ml.h) o que vai contra a tendência geral de que a ASC / dose diminui com a dose. Novamente, isso pode refletir na variabilidade interindividual ou uma diferença nos excipientes usados nos comprimidos.

[0427] Gráficos de ASC v dose e ASC / dose v dose são mostrados nas Figuras 12A e 12B. Modelagem e simulação

[0428] Dada a exposição sub-proporcional geralmente observada, dividir a mesma dose total diária em duas doses BID provavelmente aumentará a ASC plasmática. O objetivo desta análise foi modelar este comportamento.

[0429] Os dados de 300 mg no dia 1 e dia 84 em pacientes (fase 2 do ARAMCHOL™ 003) foram modelados em Phoenix 64® assumindo farmacocinética de compartimento único (parametrizado para Cl e V) e absorção de primeira ordem a uma taxa Ka com um atraso, Tlag. Todos os parâmetros do modelo apresentam um CV < 25 % e os dados de concentração previstos capturar razoavelmente os dados observados tal como mostrado na Figura 13A - C.

[0430] Estes parâmetros do modelo foram usados para simular a exposição a 300 mg BID tal como mostrado na Figura

14. A Cmin do estado estacionário prevista usando este modelo é de 2630 ng / ml com uma ASC de 65500 ng / ml.h.

[0431] Para prever a exposição a 600 mg, uma correção para a farmacocinética sub-proporcional (biodisponibilidade menor em dose mais alta) foi feita assumindo a mesma não linearidade observada nos voluntários saudáveis. Com base na Figura 13A - C, a biodisponibilidade relativa será de aproximadamente 0.75 vezes menor em 600 mg (ca. 0.4) quando comparada com 300 mg (0.53) e os parâmetros do modelo V / F e Cl / F a partir dos dados de 300 mg foram ajustados de acordo com isto.

[0432] A exposição simulada de uma dose de 600 mg QD é mostrada na Figura 15 com uma Cmin prevista de 1820 ng / ml e uma ASC de 49100 ng / ml.h.

[0433] Dada a variabilidade na exposição entre os indivíduos e entre os estudos, os valores absolutos de ASC e Cmin são provavelmente diferentes daqueles previstos, mas uma dose 300 mg BID é prevista, em média, para fornecer uma Cmin de aproximadamente 1.4 vezes mais alta do que 600 mg QD e uma ASC

1.3 vezes mais alta. Em suma:

[0434] A exposição do fármaco é expressa pela área sob a curva (ASC, o perfil integrado de concentração - tempo) e é frequentemente linear com a dose. Sob essas circunstâncias, espera-se que uma dose de 900 mg de Aramchol™ forneça três vezes a exposição (ASC) da dose de 300 mg. No entanto, foi observado que doses mais altas resultam em um aumento menor do que o linear na exposição. De acordo com isto, uma única dose de 900 mg apresenta uma exposição apenas 1.35 vezes mais alta (ASC = 86943 ng / ml.h) do que uma única dose de 300 mg (ASC = 64285 ng / ml.h) em voluntários saudáveis, apesar da dose 3 vezes maior. Isto é provavelmente devido à absorção incompleta de Aramchol no nível de dose mais alto. Com base neste relacionamento, espera-se que duas doses de 300 mg, por exemplo, com um intervalo de dose de 12h forneça uma exposição mais alta do que uma dose diária única de 600 mg por um fator de aproximadamente 1.4. Exemplo 7: Estudos mecanísticos com Aramchol™: Aramchol™ regula negativamente a SCD1 e induz PPAR em células estreladas hepáticas para atenuar a ativação e fibrogênese celular. Antecedentes:

[0435] A ativação das células estreladas hepáticas (HSCs) impulsiona a fibrose hepática através de um processo que é inibido pela sinalização da PPAR. O Aramchol™ (ácido araquidil amido colanoico) é um conjugado de ácido graxo-ácido biliar que reduz o teor de gordura hepática na doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e melhora a esteato hepatite não alcoólica (EHNA) sem piora da fibrose em um estudo de Fase 2b. O Aramchol™ atenua a fibrose em dois modelos distintos (dieta MCD e tioacetamida). Em camundongos, o Aramchol™ reduz a gordura hepática ao regular negativamente a enzima sintética de ácido graxo estearoil Co-A desaturase 1 (SCD-1) em hepatócitos. O mecanismo para o efeito antifibrótico do Aramchol™ não é conhecido; ainda, embora as HSCs também armazenem lipídios como ésteres de retinil. O papel da SCD-1 nas HSCs e o impacto do Aramchol™ na atividade das SCD-1 são desconhecidos. Objetivo:

[0436] Para investigar o efeito antifibrótico direto do Aramchol™ em HSCs usando LX-2, uma linha de células estreladas hepáticas humanas, e para definir o mecanismo dos efeitos de Aramchol™ em HSCs. Métodos:

[0437] Células LX2 privadas de soro foram tratadas com Aramchol™ (10 µM) por 24 ou 48 horas. A expressão do gene fibrogênico e a expressão da proteína SCD-1 foram medidas por qPCR e Western, respectivamente. RNAseq foi realizada em 24 e 48 h em duplicado. A expressão diferencial do gene foi avaliada com DSeq2, enquanto a análise de enriquecimento do conjunto de genes (GSEA) e as análises de ontologia de genes (GO) avaliaram a funcionalidade das mudanças da expressão gênica. Hepatócitos primários de camundongos C57BL/6 foram coletados por perfusão e tratados com Aramchol™ (10 µM) por 48 horas em cultura. A expressão de PPAR ɣ mRNA foi medida por qPCR. Resultados:

[0438] Os resultados são mostrados nas Figuras 21 -

25.

[0439] As Figuras 21A e 21B mostram como o Aramchol™ regula negativamente o mRNA e genes fibrogênicos da SCD-1 e regula positivamente PPAR ɣ mRNA em HSCs. Baseado no RT-PCR (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0440] As Figuras 22A e 22B mostram como o Aramchol™ regula negativamente a SCD-1 em HSCs. A Figura 22A e a Figura 22B mostram o Western Blot e a densitometria respectivamente de proteína SCD-1 regulada negativamente em HSCs tratadas com Aramchol™ por 24 ou 48 horas. (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0441] A Figura 23 mostra a confirmação por RNASeq para regulação negativa de genes fibrogênicos e mRNA de SCD-1, e a regulação positiva de PPAR ɣ mRNA após 48 horas de tratamento com Aramchol™. A proteína reguladora de efluxo de colesterol, ABCA1, é também regulada positivamente.

[0442] A Figura 24 mostra que o Aramchol™ não afeta a expressão de PPAR ɣ mRNA em hepatócitos primários de camundongo após 48 horas de tratamento. (N = 3) *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0443] As Figuras 25A e 25B mostram como o Aramchol™ regula negativamente a biossíntese do colesterol e a formação de colágeno em HSCs. Análise de enriquecimento de conjunto de genes de células LX-2 após 24 (Figura 25A) ou 48 (Figura 25B) horas de tratamento. Conclusões:

[0444] O Aramchol™ eleva PPAR ɣ mRNA e regula negativamente o mRNA da SCD-1 e proteína e em células estreladas hepáticas. Por RNAseq e análise da via, o Aramchol™ regula negativamente os genes fibrogênicos que fazem parte de uma assinatura de ativação das HSC clinicamente validada, incluindo COL1A1 e αSMA, bem como as vias envolvidas na biossíntese e homeostase do colesterol e na formação de colágeno. O Aramchol™ regula positivamente PPAR ɣ mRNA seletivamente em HSCs e não em hepatócitos. Concentrações plasmáticas de Aramchol após doseamento oral para o estado estacionário com regimes de 300 mg Q12h e 600 mg Q24h

[0445] Este foi um estudo cruzado, randomizado, de centro único, aberto, de 2 períodos, no qual indivíduos receberam doses orais de Aramchol 300 mg duas vezes por dia (Q12 h) por 9 dias em um período, com uma dose única na manhã do Dia 10, e 600 mg uma vez por dia (Q24 h) por 10 dias no outro período. Um perfil farmacocinético (PK) foi obtido durante o intervalo de dosagem no estado estacionário no Dia 10 de cada período. Os indivíduos comeram uma refeição leve dentro de 30 minutos antes de cada dose de Aramchol.

[0446] Os indivíduos foram randomizados 1:1 de modo que 8 receberam cada regime no primeiro período e o regime alternativo no segundo período tal como mostrado abaixo: Sequência do Período 1 Período 2 tratamento Grupo A (n = 8) 300 mg Q12h 600 mg Q24h Grupo B (n = 8) 600 mg Q24h 300 mg Q12h População do estudo

[0447] Dezesseis homens ou mulheres saudáveis com idade entre 18 - 45 anos. Critérios principais de inclusão: idade entre 18 – 45 anos no momento do consentimento; índice de massa corporal na faixa de 18.0 - 30.9 kg / m2, inclusive; capacidade de compreender a natureza do ensaio e cumprir seus requisitos; considerada saudável com base no histórico clínico, exame físico, ECG, sinais vitais e exames laboratoriais clínicos; capaz e disposto a dar consentimento por escrito totalmente informado; concordar em usar anticoncepcionais confiáveis; concordar em não doar sangue ou hemoderivados durante o estudo e por 3 meses após; disposto a dar consentimento por escrito para que os dados sejam inseridos no Sistema de Prevenção de Voluntariado (em inglês, The Over- volunteering Prevention System - TOPS). Medicação do estudo

[0448] A medicação do estudo, Aramchol, foi embalada e etiquetada pelo patrocinador e HMR Pharmacy, de acordo com as Regras que regem os produtos medicinais na União Europeia, Volume 4: Boas Práticas de Fabricação (GMP), e com a

Autorização de fabricação para medicamentos em investigação da HMR (em inglês, Investigational Medicinal Products - IMPs). Os rótulos das IMP incluía todas as informações exigidas pelo anexo 13 do Volume 4: GMP. O IMP foi armazenado e contabilizado de acordo com os Procedimentos Operacionais Padrão GMP e HMR. Os registros de responsabilidade do IMP foram mantidos no local a partir do recebimento do IMP. Os suprimentos de IMP foram mantidos em uma área de armazenamento segura, de acesso limitado e com temperatura controlada entre 15 e 25 °C. Os registros das leituras de temperatura para a área de armazenamento do IMP foram mantidos ao longo da duração do estudo. No final do teste, todos os suprimentos de IMP não utilizados foram devolvidos ao patrocinador. Apenas pessoal autorizado teve acesso ao IMP. Cronograma e Procedimentos

[0449] Cronograma de procedimentos clínicos: os indivíduos foram rastreados dentro de 21 dias antes da primeira dose do medicamento do estudo. Em cada período eles permaneceram residentes na enfermaria do Dia -1 até a manhã do Dia 11. Um intervalo de pelo menos 7 dias entre a última dose no Período 1 e a primeira dose no Período 2 foi especificado no protocolo. O intervalo real foi de 30 dias. Os indivíduos realizaram uma consulta de acompanhamento 14 dias (± 2 dias) após o término do segundo período. O final do estudo foi definido como a visita de acompanhamento final pelo último indivíduo. Uma amostra de linha de base foi coletada antes da dose matinal no Dia 1, apenas no Período 1. Em ambos os períodos de tratamento, as amostras de sangue para dosagem plasmática de Aramchol foram coletadas antes das doses matinais nos Dias 7, 8, 9 e 10 e em 1, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 h pós-dose para o regime de duas vezes ao dia de dosagem no Dia 10 com amostras adicionais para o regime de uma vez ao dia em 16, 20 e 24 h pós-dose. A segurança e tolerância incluindo sinais vitais, ECGs de segurança de 12 derivações, exame físico, testes de segurança laboratorial e eventos adversos foram avaliados frequentemente ao longo do estudo até a última visita do indivíduo.

[0450] Bioanálise e Análises Farmacocinéticas: o Aramchol em plasma humano coletado em tubos contendo o anticoagulante K2EDTA foram dosados após precipitação da proteína seguida de extração líquido-líquido por detecção por LC / MS / MS. O limite inferior de quantificação foi 50 ng / ml. Os seguintes parâmetros farmacocinéticos dos plasma foram calculados para cada indivíduo no Dia 10 dos Períodos 1 e 2: área sob a curva concentração – tempo após a dose final (ASCtau) durante um intervalo de dosagem (tau) a partir do tempo zero (pré-dose) ao tempo tau calculado usando o método trapezoidal (especificado) com dobra do valor (ASC12h) para o regime de 300 mg Q12h para obter o valor para 24 h; Concentração plasmática média ao longo do intervalo de dosagem Cavg calculado por ASCtau; Concentração no final do intervalo de dosagem Ctau obtido a partir da concentração observada.

[0451] Estatística: para o ponto final primário as hipóteses a serem testadas foram: Hipótese nula: não existe diferença significativa em ASCtau entre os dois intervalos de dosagem (Q12h e Q24h) Hipótese alternativa: existe uma diferença significativa em ASCtau entre os dois intervalos de dosagem (Q12h e Q24h). Os dados farmacocinéticos foram submetidos a uma análise linear de efeitos mistos com período, tratamento, e sequência como efeitos fixos e submetido dentro da sequência como um efeito aleatório. A proporção da média geométrica e intervalos de confiança de 90 % associados foram calculadas. Resultados

[0452] População: dezesseis indivíduos foram registrados, 3 mulheres e 13 homens. Doze indivíduos eram caucasianos (brancos), dois eram negros, um era de herança mista caucasiana e negra e um era asiático (Leste Asiático excluído). Sua idade média era 34.3 (faixa de 22 a 43) anos.

[0453] Segurança e Tolerância: Aramchol foi seguro e bem tolerado. Não houve mortes ou AEs graves e nenhum AE levou ao término antecipado. Um SAE foi relatado no Período 2 no qual o indivíduo estava tomando Aramchol 600 mg Q24h. O indivíduo relatou diplopia no Dia de Dosagem 9 do Período 2, afirmando que o sintoma havia começado 2 dias antes. A dosagem foi continuada e o indivíduo completou o estudo no dia seguinte de acordo com o protocolo. Foi diagnosticada uma paralisia do 6º nervo craniano esquerdo de etiologia desconhecida. Não houve outros achados neurológicos anormais. Nenhuma anormalidade foi demonstrada na TC de crânio e ressonância magnética. O evento ainda estava em andamento um mês após a última dose do estudo. Dos 22 EAs relatados, 12 (54.5%) foram classificados como leves e, com exceção do SAE e outro AE do Indivíduo 1006, tudo resolvido rapidamente. Um número similar de AEs reportados pelos indivíduos durante o regime de 600 mg Q24h (n = 12) e regime de 300 mg Q12h (n = 10) de Aramchol. Os AEs mais frequentes relatados foram dor de cabeça (reportada por 4 indivíduos). Todos os outros AEs foram eventos únicos. Nenhuma anormalidade clinicamente significativa foi documentada na morfologia dos sinais vitais ou eletrocardiograma (ECG) ou intervalos durante o estudo. Não houve alterações clinicamente significativas dos parâmetros de segurança laboratoriais, os quais incluíam hemogramas completos, bioquímica do plasma e análise da urina. Resultados farmacocinéticos

[0454] A ASCtau e Cavg calculados por ASCtau / t para cada indivíduo com os dois regimes de dosagem e as proporções de ASC0-24h 300 mg Q12h / 600 mg Q24h são mostrados na Tabela 1. Tabela 1. Valores individuais de ASCtau e Cavg e proporções de valores ASC0-24 Indivíduo 300 mg Q12h 600 mg Q24h Proporção

ASC ASC ASC Cav Cav ASC (0 - (0 - (0 - (24h) (24h) (0 - 24h) 12) 24)* 24) 1001 83,588 167,176 6,966 97,424 4,059 1.72 1002 53,572 107,144 4,464 39,811 1,659 2.69 1003 38,077 76,154 3,173 49,390 2,058 1.54 1004 58,312 116,624 4,859 86,004 3,583 1.36 1005 59,101 118,202 4,925 78,028 3,251 1.51 1006 37,876 75,752 3,156 40,477 1,687 1.87 1007 56,861 113,722 4,738 87,402 3,642 1.30 1008 55,180 110,361 4,598 72,292 3,012 1.53

1009 51,675 103,350 4,306 61,016 2,542 1.69 135,08 1010 72,194 144,388 6,016 5,629 1.07 5 1011 69,959 139,918 5,830 70,417 2,934 1.99 102,20 1012 62,438 124,876 5,203 4,259 1.22 8 1013 48,762 97,525 4,064 69,820 2,909 1.40 1014 37,063 74,127 3,089 55,377 2,307 1.34 1015 49,358 98,717 4,113 82,348 3,431 1.20 1016 78,230 156,461 6,519 94,602 3,942 1.65 Média 55,430 110,860 4,619 72,537 3,022 1.53 geométrica * calculado como 2 x ASC0-12

[0455] Ao longo das concentrações (antes da dose matinal) nos Dias 7, 8, 9 mostram que todos os indivíduos estavam em estado estacionário antes do Dia 10. Os valores da média ± DP nos Dias 7 e 10 no regime de 300 mg Q12h foram

4633.6 ± 1033.3 e 4526.7 ± 1180.4 ng / ml respectivamente e valores correspondentes para 600 mg Q24h foram 2948.6 ± 1008.6 e 2837.1 ± 942.8 ng / ml respectivamente. As análises estatísticas das proporções da média geométrica para ASC0-24 e Cavg ao longo do intervalo de dosagem com ICs de 90 % e coeficientes de variação (CV %) são mostrados na Tabela 4 e Tabela 5 respectivamente. A proporção dos valores de média geométrica ASC0-24 com o regime de 300 mg Q12h em relação ao regime de 600 mg Q24h foi de 1.53 (ICs de 90 % 1.38, 1.69). A concentração plasmática média no final do intervalo de dosagem Ctau foi de 4,981 ng / ml após o Aramchol 300 mg Q12h e 3031 ng

/ ml após o Aramchol 600 mg Q24h.

É aparente que a exposição média com o regime de duas vezes ao dia de dosagem foi cerca de 50 % maior do que com o regime de uma vez ao dia.

Tal como esperado, os dados também mostram menos variabilidade com o regime de dosagem Q12h do que com o regime de Q24h.

Tabela 2. Intervalo de superdosagem ASCtau ng * h / mL após a dose final

IC IC Graus de Média Tratamento N inferior superior CV %MínimoMáximo liberdade geométrica de 90 % de 90 % 300 mg 16 14 110860 97000 126701 25.1 74127 167176 Q24h 600 mg QD 16 14 72537 63468 82902 34.6 39811 135085 Proporção 1.53 1.38 1.69 22.9 1.07 2.69 Tabela 3. Intervalo de superdosagem Cavg ng / ml após a dose final

IC IC Graus de Média Tratamento N inferior superior CV %MínimoMáximo liberdade geométrica de 90 % de 90 % 300 mg 16 14 4619 4042 5279 25.1 3089 6966 Q12h 600 mg 16 14 3022 2645 3454 34.6 1659 5629 Q24h Proporção 1.53 1.38 1.69 22.9 1.07 2.69

[0456] Erro de dosagem: Na manhã do Dia 9, o penúltimo dia de dosagem do Período 2, o indivíduo 1007 deveria ter recebido Aramchol 300 mg, mas em vez disso foi administrada uma dose de Aramchol 600 mg por engano.

O indivíduo recebeu as doses corretas de 300 mg duas vezes ao dia durante os primeiros 8 dias.

O médico e patrocinador do estudo concordaram em não dosar o indivíduo naquela noite para que seu tratamento não ultrapassasse a dose total programada.

Diante desse erro, repetiu-se a análise estatística com omissão deste indivíduo.

As análises das proporções para ASC0-24 e Cavg com ICs de 90 % e CVs são apresentados na Tabela 6 e Tabela 7 respectivamente.

A proporção média dos valores da média geométrica para ASC0-24 com o regime de 300 mg Q12h em relação ao regime de 600 mg Q24h foi de 1.55 (ICs de 90 % 1.39, 1.72). A concentração plasmática média ao longo do intervalo de dosagem foi de 5011 ng / ml após o Aramchol 300 mg Q12h e 2998 ng / ml após o Aramchol 600 mg Q24h.

Tabela 4. Intervalo de super dosagem ASCtau ng.h / mL após a dose final - indivíduo 1007 excluído

IC IC Graus de Média Tratamento N inferior superior CV %MínimoMáximo liberdade geométrica de 90 % de 90 % 300 mg 15 13 111048 96226 128151 26.0 74127 167176 Q12h 600 mg 15 13 71638 62077 82672 35.5 39811 135085 Q24h Proporção 1.55 1.39 1.72 23.2 1.07 2.69 Tabela 5. Intervalo de super dosagem Cavg ng / ml após a dose final - indivíduo 1007 excluído

IC IC Graus de Média Tratamento N inferior superior CV %MínimoMáximo liberdade geométrica de 90 % de 90 % 300 mg 15 13 4627 4009 5340 26.0 3089 6966 Q12h 600 mg 15 13 2985 2587 3445 35.5 1659 5629 Q24h Proporção 1.55 1.39 1.72 23.2 1.07 2.69

[0457] Discussão e Conclusões: A administração de Aramchol em uma dose de 300 mg em 12 horas resultou em concentrações plasmáticas em 24 horas significativamente maiores do que aquelas observadas com a administração de Aramchol 600 mg uma vez a cada 24 horas.

As concentrações médias foram aproximadamente 50 % maiores e a exposição foi maior em todos os 16 indivíduos com o regime de dosagem por 12 horas.

Tal como mostrado na Tabela 3, o menor aumento foi uma proporção de 1.07 em um indivíduo que teve uma exposição relativamente alta do Aramchol 600 mg Q24h e o maior foi 2.69, isto ocorrendo em um indivíduo com a menor exposição no Período 1 ao receber Aramchol 600 mg Q24h.

A exclusão de um indivíduo o qual recebeu uma dose de Aramchol 600 mg na manhã do Dia 9 em vez da dose programada de Aramchol 300 mg fez pouca diferença para os resultados.

Foi concluído que regime de duas vezes ao dia resulta confiavelmente em uma exposição substancialmente mais alta.

Isso pode se traduzir em maior eficácia do Aramchol no tratamento de EHNA.

A maior exposição neste estudo não estava associada com qualquer detrimento da segurança.

Foi bem tolerado e todos os indivíduos completaram os períodos de dosagem de 2 x 10 dias.

Com a exceção da dor de cabeça, todos os EA foram eventos únicos e não houve AEs graves.

No entanto, houve um SAE, um caso de diplopia por paralisia do 6º nervo craniano, cuja causa é desconhecida.

O indivíduo não apresentou outros achados neurológicos ao exame e a tomografia e a ressonância magnética não mostraram alterações.

O indivíduo relatou um resfriado comum durante o período de triagem, mas até o momento não há informações que sustentem uma etiologia viral. O SAE foi relatado no Dia 9 do Período 2 (600 mg Q24h) e ainda estava em andamento um mês após a última dose do estudo. Foi considerado improvável que estivesse relacionado à administração do produto sob investigação. Em conclusão, em contraste com o aumento da dose diária única acima de 600 mg, considera-se que uma maior exposição ao Aramchol é alcançável com um regime de 300 mg duas vezes ao dia. Este regime foi bem tolerado por indivíduos saudáveis dosados por 10 dias. Não houve nenhuma preocupação de segurança em nenhum dos estudos em voluntários saudáveis até o momento ou nos estudos de fase 2 nos quais os indivíduos foram tratados por até 1 ano.

[0458] Embora determinadas características da invenção tenham sido aqui ilustradas e descritas, muitas modificações, substituições, mudanças e equivalentes ocorrerão agora para aqueles versados na técnica. É, portanto, para ser entendido que as reivindicações anexas se destinam a cobrir todas as modificações e alterações que caiam dentro do verdadeiro âmbito da invenção.

Claims (1)

1. REIVINDICAÇÕES Método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática CARACTERIZADO por compreender administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a ASC0-12 média é entre cerca de 40,000 a cerca de 90,000 ng / ml.

   Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO por a ASC0-12 média ser cerca de 55,000 ng / ml.

   Método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática CARACTERIZADO por compreender administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a ASC0-12 média é entre cerca de 80,000 a cerca de 180,000 ng / ml.

   Método, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO por a ASC0-24 ser cerca de 110,000 ng / ml.

   Método para o tratamento de fibrose hepática em um indivíduo humano afligido com fibrose hepática CARACTERIZADO por compreender administrar a um indivíduo uma dose diária de ácido 3β-araquidilamido-7α, 12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (Aramchol™) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de modo a fornecer uma exposição sistêmica do referido AramcholTM em que a Cavg por 24h é entre cerca de 3000 a cerca de 7000 ng

   / ml.

   Método, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO por a Cavg por 24h ser de cerca de 4500 ng / ml.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, CARACTERIZADO por o referido Aramchol™ ser administrado em uma dose diária de entre 400 mg e 900 mg pelo menos duas vezes por dia.

   Método, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADO por a quantidade da dose diária ser de 600 mg ou 800 mg.

   Método, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADO por cada dose administrada ser de 300 mg ou 400 mg.

   Método, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADO por o Aramchol™ ser administrado duas vezes ao dia.

   Método, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADO por a dose diária de Aramchol™ ser de 600 mg e ser administrada duas vezes ao dia em que cada dose administrada é de 300 mg.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, CARACTERIZADO por o referido indivíduo ser afligido com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA); o indivíduo humano apresentar uma pontuação de balonização de pelo menos 1, uma pontuação de inflamação de pelo menos 1, e uma pontuação de esteatose de pelo menos 1; o indivíduo humano ser afligido com Diabetes Mellitus do tipo II ou pré-diabetes; ou qualquer combinação das mesmas.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, CARACTERIZADO por o indivíduo humano ser afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 13, CARACTERIZADO por o indivíduo humano apresentar uma pontuação de atividade DHGNA (NAS) de pelo menos 4, pelo menos 5, pelo menos 6, ou pelo menos 7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, CARACTERIZADO por o indivíduo humano não ser afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA). Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 15, CARACTERIZADO por a fibrose hepática ser fibrose de estágio 1, 2, 3 ou 4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 16, CARACTERIZADO por 300 mg de Aramchol™ ser administrado ao indivíduo a cada 12 horas.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 17, CARACTERIZADO por o Aramchol™ ser administrado oralmente.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, CARACTERIZADO por o Aramchol™ ser administrado de manhã e à noite.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 19, CARACTERIZADO por o Aramchol™ ser administrado com água, ou ao mesmo tempo com, ou dentro de 30 minutos de uma refeição, preferencialmente em que a refeição é café da manhã ou jantar, mais preferencialmente em que a refeição é uma refeição rica em gordura ou uma refeição rica em calorias.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 20, CARACTERIZADO por o Aramchol™ ser administrado ao longo de pelo menos 52 semanas, pelo menos 72 semanas, pelo menos 96 semanas, pelo menos 2 anos, pelo menos 3 anos, ou pelo menos 4 anos.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 21, CARACTERIZADO por o referido método compreender ainda a falta de piora da DHGNA do indivíduo conforme definido pela pontuação da atividade (NAS), falta de piora da esteatose do indivíduo, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF), redução da gordura do fígado no referido indivíduo, melhora na esteatose do indivíduo, melhora no balonização do indivíduo, resolução da DHGNA, resolução da DHGNA sem piora da fibrose, redução da fibrose sem piora da DHGNA, redução nos níveis de ALT no referido indivíduo, redução nos níveis de ALT no referido indivíduo, redução nos níveis de HbAlc no referido indivíduo, falta de progressão do indivíduo para a cirrose, inibição da progressão da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) e / ou esteato-hepatite não alcoólica (EHNA) ou qualquer combinação das mesmas.

   Método, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO por ainda compreender uma melhora da pontuação de atividade DHGNA (NAS) do indivíduo, ou da esteatose do indivíduo, pontuação da atividade e atividade da fibrose (SAF), uma melhora da pontuação da fibrose do indivíduo, ou qualquer combinação dos mesmos.

   Método, de acordo com a reivindicação 23, CARACTERIZADO por a pontuação NAS do indivíduo ser de pelo menos 4 no início da administração do Aramchol™ e a melhora da pontuação NAS do indivíduo ser uma melhora de pelo menos 2 pontos, contribuído por mais de um parâmetro; a pontuação da atividade SAF do indivíduo ser de pelo menos 4 no início da administração do Aramchol™ e a melhora da pontuação da atividade SAF do indivíduo ser uma melhora de pelo menos 2 pontos.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 24, CARACTERIZADO por o referido método ainda reduzir gordura hepática, melhorar a histologia, a bioquímica hepática e o controle glicêmico no referido indivíduo.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 25, CARACTERIZADO por o referido método apresentar excelente segurança e tolerância.

   Método, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO por a inibição da progressão da DHGNA ou EHNA compreender a prevenção da progressão, ou progressão reduzida em relação a um paciente não tratado com Aramchol™. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 27, CARACTERIZADO por o indivíduo humano ser afligido com esteato hepatite não alcoólica (EHNA) e o método compreender ainda a inibição da progressão da EHNA, resolução da EHNA no indivíduo ou uma combinação dos mesmos.

   Método, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO por a melhora, falta de piora, ou progressão ser a melhora, falta de piora, ou progressão em 2, 4, 8, 24, 40, 52, 65, 72, ou 96 semanas; 2, 3, ou 4 anos a partir do início da administração do Aramchol™.

   Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO por a resolução do EHNA compreender o indivíduo humano apresentar uma pontuação de balonização de 0 e uma pontuação de inflamação de 0 ou 1. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 30, CARACTERIZADO por o método compreender ainda uma redução na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água no indivíduo em relação à proporção no início da administração do Aramchol™ tal como medido por MRS.

   Método, de acordo com a reivindicação 31, CARACTERIZADO por existir uma redução de 10 % a 40 % na proporção de triglicerídeos hepáticos para a água.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 32, CARACTERIZADO por o método compreender ainda: a) uma redução no nível de hemoglobina A1C ou HOMA-IR; b) uma redução no nível de fibrinogênio, CK-18, proteína reativa C (CRP), TNFα, IL 6 e Testes de fibrose (NFS); c) uma redução na proporção de leptina para a adinopectina; ou d) um aumento no nível de adinopectina no indivíduo em relação ao nível ou proporção no início da administração do Aramchol™, ou e) uma redução no peso corporal do indivíduo humano em relação ao peso corporal do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™; f) uma redução na circunferência da cintura do indivíduo humano em relação à circunferência da cintura do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™; ou g) uma redução no índice de gordura hepática do indivíduo humano em relação ao índice de gordura hepática do indivíduo humano no início da administração do Aramchol™. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 33, CARACTERIZADO por o indivíduo humano apresentar uma dieta que é rica em gorduras e calorias; e / ou ser resistente à intervenção no estilo de vida ou ser resistente à intervenção na dieta.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 34, CARACTERIZADO por ainda compreender administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo pelo menos um composto selecionado a partir do grupo que consiste em: a) eicosapentanoato de etila (EPA-E), ácido eicosapentaenoico (EPA) e seus amidos, sais, ésteres e fosfolipídios farmaceuticamente aceitáveis; b) um inibidor de Acetil-CoA carboxilase (ACC) isolado, ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais; c) cloridrato de pioglitazona ou uma pioglitazona enriquecida com deutério enantiopura; d) agonistas duplos delta e gama de um receptor ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR); e e) antagonistas do receptor da angiotensina II, inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ACE), inibidores da caspase, inibidores da catepsina B, antagonistas da quimiocina CCR2, antagonistas da quimiocina CCR5, estimuladores dos canais de cloreto, solubilizantes do colesterol, inibidores da diacilglicerol 0-aciltransferase 1 (DGAT1), inibidores da dipeptidil peptidase IV (DPPIV), agonistas do receptor farnesoide X (FXR) tais como ácido obeticólico e Px-104, agonistas duplos FXR / TGR5, inibidores da galectina-3 tais como LIPC-1010 e GR-MD-02, agonistas de peptídeo semelhante ao glucagon (GLPI), precursores da glutationa, inibidores de protease NS3 do vírus da hepatite C, inibidores da HMG CoA redutase, inibidores da II-hidroxi esteroide desidrogenase (II-HSD I), antagonistas IL-1, antagonistas IL-6, agonistas IL-10, antagonistas IL-17, inibidores do cotransportador de ácido biliar de sódio ileal, análogos de leptina, inibidores da 5-lipoxigenase, estimuladores do gene LPL, inibidores da lisil oxidase homóloga 2 (LOXL2), inibidores da PDE3, inibidores da PDE4, inibidores da fosfolipase C (PLC), agonistas da PPARa, agonistas da gama PPAR tais como rosiglitazona e pioglitazona, metformina, pentoxifilina, vitamina E, selênio, ácidos graxos ômega-3 e betaína, agonistas da PPAR8, inibidores da proteína quinase 2 associada a Rho (ROCK2), inibidores do transportador-2 da glicose de sódio (SGLT2), inibidores de estearoil CoA desaturase I, agonistas do receptor do hormônio da tireoide, inibidores do ligante do fator de necrose tumoral a (TNFa), inibidores da transglutaminase, precursores de inibidores da transglutaminase, inibidores da PTPib, inibidores da ASKI, e inibidores da proteína-1 de adesão vascular tais como PXS4728A, metformina, GR-MD-02, bitartarato de cisteamina, simtuzumab, emricasan, GFT-505, CER-002, KD3010, KD3020, MBX8025, LUM002, RP-103, e cenicriviroc.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 35, CARACTERIZADO por a fibrose hepática ser causada pelo contato com uma substância química hepatotóxica ou por obstrução mecânica, desnutrição, hemocromatose, congestão passiva, exposição a venenos ou toxinas, exposição a fármacos, reações imunológicas, sensibilidades geneticamente determinadas a uma determinada substância, infecções, infecções bacterianas, infecções virais, infecções parasitárias, hepatite viral, sífilis, hepatite autoimune, hepatite induzida por toxinas, distúrbios hepáticos de armazenamento ou de metabolismo, fibrose hepática congênita, cirrose biliar primária, hepatite induzida por fármacos, hepatite parasitária, colangite esclerosante primária, síndrome de Budd-Chiari, doença veno oclusiva hepática, trombose da veia porta, ou cicatrizes devido a cirurgia hepática anterior, preferencialmente um fibrose é manifestada por hipertensão portal e / ou cirrose hepática.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 36, CARACTERIZADO por o indivíduo ser naive para o tratamento com Aramchol™ ou naive para o tratamento da DHGNA.

   Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 37, CARACTERIZADO por a referida fibrose estar sendo causada por um fator selecionado a partir do grupo que consiste em fibrose pulmonar, fibrose cardíaca, fibrose renal, fibrose dérmica, fibrose ocular, fibrose da mucosa, fibrose do sistema nervoso central, fibrose óssea ou na medula óssea, fibrose em um órgão endócrino, fibrose no sistema gastrointestinal, fibrose mediastinal, fibrose pós-fibrinosa, fibrose proliferativa, fibrose retroperitoneal, fibrose pancreática, ou fibrose associadas com uma doença autoimune.