BR112021007968A2 - Combinação farmacêutica de anticorpos anti-ceacam6 e tim3 - Google Patents

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Abstract

combinação farmacêutica de anticorpos anti-ceacam6 e tim3. a presente invenção refere-se a combinações de pelo menos dois componentes, componente a e componente b, o componente a sendo anticorpo de anti-ceacam6 tpp-3310 e o componente b sendo um anticorpo de anti-tim-3, de preferência cobolimab, mbg-453, bms-986258, sym-023, ly-3321367 ou incagn-2390.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMBINAÇÃO FARMACÊUTICA DE ANTICORPOS ANTI- CEACAM6 E TIM3".
[001] A presente invenção refere-se a combinações de pelo menos dois componentes, o componente A e o componente B, o componente A sendo um anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 e o componente B sendo um anticorpo de anti-TIM-3, de preferência cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
[002] Um outro aspecto da presente invenção refere-se ao uso de tais combinações como descrito aqui para a preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de câncer.
[003] Ainda um outro aspecto da presente invenção refere-se a métodos de tratamento ou profilaxia de um câncer em um indivíduo, compreendendo a administração ao dito indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação como descrita aqui.
[004] Além disso, a presente invenção refere-se a um kit compreendendo uma combinação de: - alguns componentes A, sendo anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310; - um componente B, sendo de preferência cobolimab, MBG- 453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390, e opcionalmente - um ou mais agentes farmacêuticos C; em que opcionalmente qualquer um dos ou ambos os ditos componentes A e B estão na forma de uma formulação farmacêutica que está pronta para o uso para ser administrada simultaneamente, concorrentemente, separadamente ou sequencialmente.
[005] O Componente A e B de preferência são administrados pela rota intravenosa.
[006] Em algumas concretizações o câncer é um câncer de pulmão, em particular câncer de pulmão de célula não pequena (NSCLC), câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de colorretal, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de bexiga, câncer de duto biliar, câncer de mama, câncer de cervical, câncer esofageano. Fundamentos da Invenção
[007] Câncer é a segunda causa mais prevalente de morte nos Estados Unidos, causando 450.000 mortes por ano. Embora um progresso substancial tenha sido feito na identificação de algumas das prováveis causas ambientais e hereditárias de câncer, há uma necessidade de modalidades terapêuticas adicionais que direcionam câncer e doenças relacionadas. Em particular há uma necessidade de métodos terapêuticos para o tratamento de doenças associadas a crescimento/proliferação desregulado.
[008] Câncer é uma doença complexa que surge depois de um processo de seleção para células com capacidades funcionais adquiridas como resistência/sobrevivência aumentada em relação a apoptose e um potencial proliferativo ilimitado. Assim, é preferido desenvolver fármacos para terapia de câncer que levem em conta características distintas de tumores estabelecidos.
[009] Respostas de célula T contra antígenos associados a tumor foram descritas em muitos tumores e frequentemente causam um acúmulo de células T de memória específica de tumor nos órgãos linfóides ou no sangue. No entanto, a capacidade de células T de reagir contra células de tumor autólogo é em geral baixa. Muitos tumores têm a capacidade de bloquear funções efetoras de células T que contribui para a atividade limitada de imunoterapia de tumor. Não responsividade de célula T contra células de tumor foi demonstrada para uma ampla variedade de cânceres.
[0010] O sistema imune depende de múltiplos pontos de checagem ou "freios imunológicos" para evitar ultra-ativação do sistema imune sobre célula saudáveis. Células de tumor frequentemente tomam a vantagem destes pontos de checagem para escapar a detecção pelo sistema imune. CTLA-4 e PD-1 são pontos de checagem que foram estudados como alvos para terapia de câncer.
[0011] Proteínas de ponto de checagem regulam ativação ou função de célula T. Numerosas proteínas de ponto de checagem são conhecidas, tais como CTLA-4 e seus ligantes CD80 e CD86; e PD-1 com seus ligantes PD-L1 e PD-L2. Novas proteínas de ponto de checagem descritas são TIM-3, LAG-3 e outras. Estas proteínas são responsáveis por interações co-estimulatórias ou inibitórias de Respostas de célula T. Proteínas de ponto de checagem imunes regulam e mantem auto-tolerância e a duração de amplitude de respostas imunes fisiológicas. Inibidores de ponto de checagem imunes incluem anticorpos ou são derivados de anticorpos. Atualmente, diferentes abordagens imunoterapêuticas estão repousando sua base como estratégias de tratamento poderosas para uma ampla faixa de doenças malignas.
[0012] Um exemplo muito proeminente e recente de um sucesso relevante de imunoterapia de câncer envolve terapia de bloqueio de ponto de checagem imune pelos anticorpos monoclonais (mAb) que direcionam moléculas inibitórias sobre células T efetoras imunes ou antígeno que apresenta células incluindo células de tumor. Interferência com co-inibidores foi mostrado desencadear uma poderosa resposta de célula T de antitumor (Pardoll: The blockade of immune checkpoints in cancer immunotherapy. Nat Rev Cancer 12: (2012) 252–264).
[0013] CTLA-4 demonstrou ser anomalamente regulada para cima e presente sobre a superfície das células T em certos cânceres, que amortece a ativação da célula T em resposta a células de tumor. PD-1 é um outro ponto de checagem imunológico que demonstrou ser regulado para cima em certos tumores; inibe função de célula T que contribui para a capacidade do tumor de evadir o sistema imune.
[0014] Bloqueio de anticorpo de moléculas de ponto de checagem imunes para a ativação de célula imune é uma abordagem clinicamente validada. Em 2011 o anticorpo de bloqueio CTLA-4 Ipilimumab foi aprovado pela FDA para a segunda terapia de linha de melanoma metastático (Yervoy). Um outro exemplo é o bloqueio do eixo de PD- 1/PD-L1 para os quais vários fármacos são ou aprovados atualmente sob desenvolvimento clínico e para o qual respostas clínicas impressivas foram relatadas em melanoma, câncer de pulmão, RCC, câncer de bexiga e outros (Shen e Zhao: Eficácia de inibidores de PD-1 e PD-L1 e estado de expressão de PD-L1 em câncer: meta-análise. BMJ2018;362:k3529).
[0015] Em 2013, uma combinação de tratamento de anti-CTLA4 e de anti-PD1 mAb foi relatado como agindo sinergicamente no aumento de sobrevivência e regressão de tumor em pacientes com melanoma avançado (Wolchok e outros: Nivolumab mais ipilimumab em melanoma avançado. N Engl J Med 369: (2013) 122– 133).
[0016] Anticorpos monoclonais Anti-TIM-3 estão na fase II e no desenvolvimento clínico na fase I (clinicaltrials.gov). Sua relevância e potencial clínico são descritos, por exemplo, em Marin-Acevedo e outros "Next generation of immune checkpoint therapy in cancer: new developments e challenges", 2018 Journal of Hematology & Oncology 11:39 e Buruguru e outros, "Emerging targets in cancer immunotherapy", Seminars in Cancer Biology 52 (2018): 39-52.
[0017] CEACAM6 contribui para a regulação de resposta de célula T CD8+ T também. Em mieloma múltiplo que expressa vários membros de família de CEACAM, tratamento com anti-CEACAM6 mAbs ou CEACAM6 silenciador de siRNA reintegrou reatividade de células T contra células malignas de plasma, indicando um papel para regulação de resposta de célula T CD8+ T (Witzens-Harig e outros, Blood 2013
May 30;121(22):4493-503). Anticorpos muito potentes anti-CECAM6 para a imunoterapia de câncer incluindo TPP-3310 foram descritos na WO 2016/150899 A2. Definições
[0018] A não ser que de outra maneira definido, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o significado comumente entendido por aquele de habilidade comum ao qual esta invenção pertence. As seguintes referências, no entanto, podem prover um de habilidade da técnica ao qual esta invenção pertence com a definição geral de muitos termos usados nesta invenção, e podem ser referenciados e usados contanto que tais definições sejam consistentes com o significado comumente entendido na técnica. Tais referências incluem, mas não são limitadas a, Singleton e outros, Dictionary of Microbiology e Molecular Biology (2nd ed. 1994); The Cambridge Dictionary of Science e Technology (Walker ed., 1988); Hale & Marham, The Harper Collins Dictionary of Biology (1991); e Lackie e outros, The Dictionary of Cell & Molecular Biology (3d ed. 1999); e Cellular e Molecular Immunology, Eds. Abbas, Lichtman e Pober, 2nd Edition, W.B. Saunders Company. Qualquer recurso técnico adicional disponível pela pessoa de habilidade comum na técnica provendo definições dos termos usados aqui tendo o significado comumente entendido na técnica pode ser consultado. Para as finalidades da presente invenção, os seguintes termos são ulteriormente definidos. Termos adicionais são definidos em outro lugar na descrição. Como usado aqui e nas reivindicações anexas, as formas singular "um," "uma", "o" e "a" incluem referências plural a não ser que de outra maneira o contexto claramente dite. Assim, por exemplo, referência a "um gene" é uma referência a um ou mais genes e incluem seus equivalentes conhecidos por aqueles versados na técnica, e assim por diante.
[0019] Os termos "polipeptídeo" e "proteína" são usados intercambeavelmente aqui para referir-se a um polímero de resíduos de aminoácidos. Os termos se aplicam a polímeros de aminoácido em que um ou mais resíduos de aminoácidos é um mimético químico artificial de um aminoácido de ocorrência natural correspondente, bem como para polímeros de aminoácido de ocorrência natural e polímero de aminoácido de ocorrência não natural. A não ser que de outra maneira indicado, uma sequência de polipeptídeos particular também implicitamente inclui suas variantes conservativamente modificadas.
[0020] Aminoácidos podem ser mencionados aqui por seus símbolos de três letras comumente conhecidas recomendadas pela Comissão de Nomeclatura IUPAC-IUB Biochemical. Nucletotídeos, do mesmo modo, podem ser mencionados por seu código de uma letra comumente aceita.
[0021] De acordo com a presente invenção, o termo "anticorpo" deve ser entendido em seu significado mais amplo e compreende moléculas de imunoglobulina, por exemplo, anticorpos monoclonais intactos ou modificados, anticorpos policlonais ou anticorpos multiespecíficos (por exemplo anticorpos biespecíficos). Uma molécula de imunoglobulina de preferência constituída de quatro cadeias de polipeptídeo, duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) que estão tipicamente interligadas por ligações de dissulfeto. Cada cadeia pesada é constituída de uma região variável de cadeia pesada (abreviada aqui como VH) e uma região constante de cadeia pesada. A região constante de cadeia pesada pode compreender, por exemplo, três domínios CH1, CH2 e CH3. Cada cadeia leve é constituída de uma região variável de cadeia leve (abreviada aqui como VL) e uma região constante de cadeia leve. A região constante de cadeia leve é constituída de um domínio (CL). As regiões de VH e VL podem ser ulteriormente subdivididas em regiões de hipervariabilidade, chamadas de regiões de determinação de complementaridade (CDR), intercaladas com regiões que são mais conservadas, chamadas de regiões de estrutura {regiões de estrutura (FR)}. Cada VH e VL é tipicamente composta de três CDRs e até quatro FRs dispostas desde terminal amino até terminal carbóxi, por exemplo, na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
[0022] Como usado aqui, o termo "Regiões Determinantes de Complementaridade" (CDRs; por exemplo, CDR1, CDR2, e CDR3) refere-se aos resíduos de aminoácidos de um domínio de anticorpo variável cujas presenças são necessárias para ligação de antígeno. Cada domínio variável tipicamente tem três regiões CDR identificadas como CDR1, CDR2 e CDR3. Cada região de determinação de complementaridade pode compreender resíduos de aminoácidos de uma "região de determinação de complementaridade" como definido por Kabat (por exemplo, a cerca de resíduos 24-34 (L-CDR1), 50-56 (L- CDR2) e 89-97 (L-CDR3) no domínio variável de cadeia leve e 31-35 (H-CDR1), 50-65 (H-CDR2) e 95-102 (H-CDR3) no domínio variável de cadeia pesada; (Kabat e outros, Sequências de Proteins of Immulological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)) e / ou aqueles resíduos de um "ciclo hipervariável" (por exemplo, a cerca de resíduos 26-32 (L-CDR1), 50-52 (L-CDR2) e 91-96 (L-CDR3) no domínio variável de cadeia leve e 26- 32 (H-CDR1), 53-55 (H-CDR2) e 96-101 (H-CDR3) no domínio variável de cadeia pesada (Chothia e Lesk; J Mol Biol 196: 901-917 (1987)). Em alguns casos, uma região de determinação de complementaridade pode incluir aminoácidos tanto de uma região CDR definida de acordo com Kabat quanto de um ciclo hipervariável.
[0023] Dependendo da sequência de aminoácidos do domínio constante de suas cadeias pesadas, anticorpos intactos podem ser designados a diferentes "classes". Há cinco classes principais de anticorpos intactos: IgA, IgD, IgE, IgG, e IgM, e diversas dessas podem ser ainda divididas em "subclasses" (isótipos), por exemplo, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, e IgA2. Uma classe preferida de imunoglobulinas para o uso na presente invenção é IgG.
[0024] Os domínios constantes de cadeia pesada que correspondam ás diferentes classes de anticorpos são chamados [alfa], [delta], [épsilon], [gama], e [mu], respectivamente. As estruturas de subunidade e configurações tridimensionais de diferentes classes de imunoglobulinas são conhecidas. Como usado aqui anticorpos são anticorpos convencionalmente conhecidos e seus fragmentos funcionais.
[0025] Um anticorpo de "antígeno" refere-se a um anticorpo que se liga especificamente ao antígeno. Por exemplo, um anticorpo anti-PD-1 se se liga especificamente a PD-1, um anticorpo anti-CECAM6 se liga especificamente a CECAM6, e um anticorpo de anti-TIM-3 se liga especificamente a TIM-3.
[0026] O termo "ligação específica" ou "liga especificamente" refere-se a um anticorpo ou um aglutinante que se liga a uma molécula- alvo/antígeno predeterminado. Ligação específica de um anticorpo ou um aglutinante tipicamente descreve um anticorpo ou aglutinante tendo uma afinidade de pelo menos 10-7 M (como valor de Kd; isto é, de preferência aqueles com valores de Kd menores do que 10-7 M), com o anticorpo ou o aglutinante tendo uma pelo menos duas vezes de afinidade mais alta para a molécula-alvo/antígeno predeterminado do que para uma molécula-alvo/antígeno não específico (por exemplo, albumina de soro bovino, ou caseína) que não é a molécula- alvo/antígeno predeterminado ou uma molécula-alvo/antígeno proximamente relacionado. Ligação específica de um anticorpo ou aglutinante não exclui o corpo ou aglutinante que se liga a uma pluralidade de moléculas alvo/antígeno (por exemplo, ortólogos e diferentes espécies). Os anticorpos de preferência têm uma afinidade de pelo menos 10-7 M (como o valor de Kd; em outras palavras de preferência aqueles com valores de Kd menores do que 10-7 M), de preferência de pelo menos 10-8 M, mais de preferência na faixa de 10-9 M a 10-11 M. Os valores de Kd podem ser determinados, por exemplo, por meio de espectroscopia de ressonância de plasmônio de superfície.
[0027] "Fragmentos funcionais", "fragmentos de anticorpo de ligação a antígeno", ou "fragmentos de anticorpo" referem-se a um ou mais fragmentos de um anticorpo que retêm a capacidade de se ligar especificamente ao antígeno ligado pelo anticorpo inteiro. "Fragmentos funcionais", "fragmentos de anticorpo de ligação a antígeno", ou "fragmentos de anticorpo" da invenção incluem mas não são limitados a fragmentos Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, e Fv; diacorpos; anticorpos de domínio simples (DAbs), anticorpos lineares; moléculas de anticorpo de cadeia simples (scFv); e multiespecífico, tais como bi- e tri- específico, anticorpos formados a partir de fragmentos de anticorpo (C. A. K Borrebaeck, editor (1995) Antibody Engineering (Breakthroughs in Molecular Biology), Oxford University Press; R. Kontermann & S. Duebel, editores (2001) Anticorpo Engineering (Springer Laboratory Manual), Springer Verlag).
[0028] O termo "imunoterapia" refere-se ao tratamento de um indivíduo afligido com, ou em risco de contração ou que sofre de uma recorrência de, uma doença por um método compreendendo indução, melhoramento, supressão ou de outra maneira modificação de uma resposta imune.
[0029] "Tratamento" ou "terapia" de um indivíduo refere-se a qualquer tipo de intervenção ou processo realizado, ou na administração de um agente ativo ao indivíduo com o objetivo de reversão, alívio, melhoramento, inibição, diminuição ou prevenção do início, progressão, desenvolvimento, severidade ou recorrência de um sintoma, complicação ou condição, ou indícios bioquímicos l associados a uma doença.
[0030] Como usado aqui "CEACAM6" designa a molécula de adesão de célula relacionada a antígeno carcinoembriônico 6", também conhecida como "CD66c" (Cluster de Diferenciação 66c), ou antígeno de reticulação não específico, ou NCA, ou NCA-50/90. CEACAM6 é uma proteína de superfície de célula ligada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) envolvida na adesão de célula - célula. O termo "CEACAM6" como usado aqui inclui CEACAM6 (hCEACAM6), variantes, isoformas, e homólogos de hCEACAM6 de ser humano, e análogos tendo pelo menos um epítopo comum com hCEACAM6. Uma sequência de referência para CEACAM6 ser humano está disponível da base de dados UniProtKB/Swiss-Prot sob o número de acesso P40199.3.
[0031] "Morte programada-1 (PD-1)" refere-se a um receptor imunoinibitório que pertence à família CD28. PD-1 é expresso predominantemente sobre as células T anteriormente ativadas in vivo e se liga a dois ligantes, PD-L1 e PD-L2. O termo "PD-1" como usado aqui inclui PD-1 (hPD-1), variantes, isoformas, e homólogos de espécie de hPD-1 de ser humano, e análogos tendo pelo menos um epítopo comum com hPD-1. A sequência de hPD-1 completa pode ser encontrada sob o número U64863 no GenBank.
[0032] "Ligante de morte programada -1 (PD-L1)" é um de dois ligantes de glicoproteína de superfície de célula para PD-1 (o outro sendo PD-L2) que regulam para baixo de ativação de célula e secreção de citocina que se liga a PD-1. O termo "PD-L1" como usado aqui inclui PD-L1 (hPDL1), variantes, isoformas, e homólogos de espécie de hPD- L1 de ser humano, e análogos tendo pelo menos one common epítopo com hPD-L1. A sequência de hPD-L1 completa pode ser encontrado no GenBank sob o no. de acesso Q9NZQ7.
[0033] Como usado aqui "TIM-3" designa "Domínio de imunoglobulina de célula T e domínio de mucina 3" (também conhecido como HAVCAR2) um membro da família TIM. TIM-3 é uma membrana de transmembrane sobre a superfície de célula. Foi descrito como uma molécula inibitória induzida por ativação envolvida na tolerância e mostrada para induzir exaustão de célula T. O termo "TIM-3" como usado aqui inclui TIM-3 (hTIM-3), variantes, isoformas, e homólogos de espécie de hTIM-3 de ser humano, e análogos tendo pelo menos um epítopo comum com hTIM-3. Uma sequência de referência para TIM-3 de ser humano está disponível de base de dados UniProtKB/Swiss-Prot sob o número de acesso UniProtKB Q8TDQ0 (HAVR2_HUMANO) e base de dados NCBI, sequência de referência de NCBI: NP_116171.3.
[0034] Como usado aqui, os termos "paciente" ou "indivíduo" são usados intercambeavelmente e significam um mamífero, incluindo, mas não limitado a, um ser humano ou um mamífero não humano, tais como bovino, equino, canino, ovino, ou felino. De preferência, o paciente é um ser humano. Descrição da Invenção
[0035] Supreendentemente foi observado que uma combinação de um inibidor de ponto de checagem imune de TIM-3 e anti- anticorpo CECAM6 TPP-3310 age muito mais do que aditivo em um ensaio in vitro realizado para avaliar o potencial terapêutico de combinações de fármacos para a regressão de tumor. Este efeito foi surpreedentemente ainda mais forte do que a combinação de um inibidor de ponto de checagem imune de PD-1 ou PD-L1 com o anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310.
[0036] Portanto a presente invenção provê combinações de pelo menos dois componentes, o componente A e o componente B, o componente A sendo anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 e o componente B sendo um anticorpo de anti-TIM-3, de preferência cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
[0037] As combinações compreendendo pelo menos dois componentes A e B, como descritos e definidos aqui também chamadas de "combinações da presente invenção".
[0038] Além do mais, a presente invenção refere-se a um kit compreendendo: uma combinação de: - um componente A, sendo um anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310; - um componente B, sendo um anticorpo de anti-TIM-3, de preferência cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390., e opcionalmente - um ou mais agentes farmacêuticos C ; em que opcionalmente qualquer dos ou ambos dos ditos componentes A e B estão na forma de uma formulação farmacêutica que está pronta para o uso para ser administrada simultaneamente, concorrentemente, separadamente ou sequencialmente.
[0039] A invenção ulteriormente provê um anticorpo de anti- CEACAM6 (componente A) para o uso em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que o anticorpo de anti-CEACAM6 compreende o H-CDR1, H-CDR2, ,H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2, e L- CDR3 de anticorpo TPP-3310.
[0040] A invenção ulteriormente provê um anticorpo de anti- CEACAM6 (componente A) para o uso em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que o anticorpo de anti-CEACAM6 compreende a sequência de cadeia pesada variável e sequências de cadeia leve variável de anticorpo TPP-3310.
[0041] A invenção ulteriormente provê um anticorpo de anti- CEACAM6 (componente A) para o uso em combinação simultânea,
separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que o anticorpo de anti-CEACAM6 compreende a região de cadeia pesada e a região de cadeia leve de anticorpo TPP-3310.
[0042] A invenção ulteriormente provê o anticorpo de anti- CEACAM6 TPP-3310 (componente A) para o uso em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que o anticorpo de anti- TIM-3 é cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
[0043] A invenção ulteriormente provê o anticorpo de anti- CEACAM6 TPP-3310 (componente A) para o uso em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que o câncer é câncer de pulmão, em particular câncer de pulmão de célula não pequena, câncer ovariano, mesotelioma, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de colorretal, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de bexiga, bile câncer de duto biliar, câncer de mama, câncer de cervical, ou câncer esofageano.
[0044] A invenção ulteriormente provê o anticorpo de anti- CEACAM6 TPP-3310 (componente A) para o uso em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B) no tratamento de câncer, em que pelo menos um do anticorpo de anti-CEACAM6 ou o anticorpo de anti-TIM-3 é administrado em combinação simultânea, separada ou sequencial com um ou mais agentes farmacêuticos (agentes C).
[0045] A invenção ulteriormente provê um método de tratamento de câncer compreendendo administração a um paciente que necessita de uma quantidade eficaz de anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 (componente A) em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B).
[0046] A invenção ulteriormente provê um método de tratamento de câncer compreendendo administração a um paciente que necessita de uma quantidade eficaz de anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 (componente A) em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B), em que o anticorpo de anti-TIM-3 é cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
[0047] A invenção ulteriormente provê o uso de anticorpo de anti- CEACAM6 TPP-3310 (componente A) para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B).
[0048] A invenção ulteriormente provê o uso de anticorpo de anti- CEACAM6 TPP-3310 (componente A) para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer em combinação simultânea, separada ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 (componente B), em que o anticorpo de anti-TIM-3 is cobolimab, MBG-453, BMS- 986258, Sym-023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
[0049] Os componentes podem ser administrados uns dos outros pela rota oral, intravenosa, tópica, instalações locais, intraperitoneal ou nasal.
[0050] De acordo com um outro aspecto, a presente invenção cobre as combinações como descritas supra para o tratamento ou profilaxia de câncer.
[0051] De acordo com um outro aspecto, a presente invenção cobre o uso de tais combinações como descritas supra para a preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de câncer. Componente A da Combinação
[0052] O Componente A é o anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 que foi descrito na WO 2016/150899 A2. Outros anticorpos anti- CECAM6 descritos na WO 2016150899 A2 são, por exemplo, TPP- 3714, TPP-3820, TPP-3821, TPP-3707, e TPP-3705. Estes anticorpos são anticorpos humanos ou humanizados que ligam CEACAM6 de ser humano com alta afinidade, são reação cruzada para macaco CEACAM6, não se ligam a quaisquer parálogos, especialmente CEACAM1, CEACAM3, e CEACAM5, e são capazes de aliviar a imunossupressão mediada por CEACAM6.
[0053] O termo "anticorpo de anti-CEACAM6" refere-se a um anticorpo que especificamente liga a molécula-alvo de câncer CEACAM6, de preferência com uma afinidade que é suficiente para uma aplicação de diagnóstico e/ou terapêutico. Em certas concretizações, o anticorpo de anti-CEACAM6 se liga a um epítopo que é conservado entre diferentes espécies.
[0054] TPP-3310 é um anticorpo que compreende H-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, H- CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, H-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, L-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6, L-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, e L-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8.
[0055] De preferência TPP-3310 é um anticorpo que compreende uma sequência de cadeia pesada variável (VH) de SEQ ID NO:1 e sequências de cadeia leve variável (VL) de SEQ ID NO:5.
[0056] Altamente preferido, TPP-3310 é um anticorpo que compreende uma região de cadeia pesada (HC) de SEQ ID NO: 9 e uma região de cadeia leve (LC) de SEQ ID NO: 10. Componente B da Combinação
[0057] O Componente B é um anticorpo ou uma sua porção de ligação de antígeno que se liga especificamente a um receptor TIM-3 e inibe atividade de TIM-3 ("anticorpo de anti-TIM-3"). Anticorpo Anti-TIM-3
[0058] Em certas concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é cobolimab (TSR-022, Tesaro), ou tem as mesmas regiões CDR como cobolimab. Cobolimab é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos conhecidos ligantes TIM-3 (HMGB1, Galectin-9, Fosfatidilserina (PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor. Cobolimab é descrito, por exemplo, na WO 2016161270 A1 e WO 2018129553 A1. Cobolimab é atualmente em experiências clínicas; ClinicalTrials.gov Identifier: NCT02817633 e NCT03680508.
[0059] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é MBG-453 (Novartis) ou tem as mesmas regiões CDR como MBG-453. MBG-453 é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos ligantes TIM-3 conhecidos (HMGB1, Galectin- 9, Fosfatidilserina (PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor . MBG-453 é descrito, por exemplo, na WO 2015117002 A1. MBG-453 é registrado sob CAS No: 2128742- 61-8. MBG-453 está atualmente nas experiências clínicas; ClinicalTrials.gov Identifier: NCT02608268 e NCT03066648.
[0060] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é BMS-986258 (Bristol-Myers Squibb, Five Prime), ou tem as mesmas regiões CDR as BMS-986258. BMS-986258 é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos ligantes TIM-3 conhecidos (HMGB1, Galectin-9, Fosfatidilserina(PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor. BMS-986258 está atualmente em experiências clínicas; ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03446040. BMS-986258 é descrito, por exemplo, na WO 2018013818 A2.
[0061] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é Sym-023 (Symphogen), ou tem as mesmas regiões CDR como Sym-023. Sym-023, é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos ligantes TIM-3 conhecidos (HMGB1, Galectin- 9, Fosfatidilserina (PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor. Sym-023 está atualmente em experiências clínicas; ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03489343. Sym- 023 é descrito, por exemplo, na WO 2017178493 A1.
[0062] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é LY-3321367 (Eli Lilly), ou tem as mesmas regiões CDR como LY-3321367. LY-3321367 é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos ligantes TIM-3 conhecidos (HMGB1, Galectin-9, Fosfatidilserina (PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor. LY-3321367 is atualmente em experiências clínicas; ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03099109. LY-3321367 é descrito, por exemplo, in WO 2018039020 A1.
[0063] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é INCAGN-2390 (Agenus), ou tem as mesmas regiões CDR como INCAGN-2390. INCAGN-2390 é um anticorpo de inibidor de ponto de checagem imune TIM-3 que seletivamente previne interação com alguns dos ligantes TIM-3 conhecidos (HMGB1, Galectin-9, Fosfatidilserina (PS), desse modo bloqueando a regulação para baixo de funções de célula T de antitumor. INCAGN-2390 está atualmente em experiências clínicas;
ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03652077. INCAGN-2390 é descrito, por exemplo, in WO 2017205721 A1.
[0064] Em outras concretizações o anticorpo de anti-TIM-3 ou uma sua porção de ligação de antígeno é MAB2365 da R&D Jackson Immunoresearch, ou tem as mesmas regiões CDR como MAB2365. MAB2365 é um anticorpo rIgG2.
[0065] Em certas concretizações, o anticorpo de anti-TIM-3 compreende: (i) H-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 12, H-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, H-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 14, L-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, L-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 17, e L-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 18.
[0066] Em certas concretizações, o anticorpo de anti-TIM-3 compreende: (i) uma sequência de cadeia pesada variável (VH) de SEQ ID NO:11 e sequências de cadeia leve variável (VL) de SEQ ID NO:15.
[0067] Em certas concretizações, o anticorpo de anti-TIM-3 compreende: (i) uma região de cadeia pesada (HC) de SEQ ID NO: 19 e uma região de cadeia leve (LC) de SEQ ID NO: 20. Produção de anticorpos
[0068] Anticorpos ou fragmentos de anticorpo de ligação a antígeno que ligam moléculas alvo podem ser preparados por uma pessoa de habilidade comum na técnica usando processos conhecidos, tal como, por exemplo, síntese química ou expressão recombinante. Aglutinantes para moléculas alvo de câncer podem ser adquiridos comercialmente ou podem ser preparados por uma pessoa de habilidade comum na técnica usando processos conhecidos, tal como, por exemplo, síntese química ou expressão recombinante.
Outros processos para a preparação de anticorpos ou fragmentos de anticorpo de ligação a antígeno são descritos na WO 2007/070538 (vide a pág. 22 "Anticorpos"). A pessoa versada na técnica sabe como processos tais como bibliotecas de exibição de fago (por exemplo, Morphosys HuCAL Gold) podem ser compilados e usados para descrição de anticorpos ou fragmentos de anticorpo de ligação a antígeno (vide a WO 2007/070538, pág. 24 ff e AK Exemplo 1 na pág. 70, AK Exemplo 2 na pág. 72). Outros processos para a preparação de anticorpos que usam bibliotecas de DNA a partir de células B são descritos por exemplo na pág. 26 (WO 2007/070538). Processos para anticorpos humanizantes são descritos nas pág. 30-32 de WO 2007070538 e em detalhes em Queen, e outros, Pros.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 8610029-10033,1989 ou na WO 90/0786. Além do mais, processos para expressão recombinante de proteínas em geral e de anticorpos em particular são conhecidos pela pessoa versada na técnica (vide, por exemplo, em Berger e Kimmel (Guide to Molecular Cloning Techniques, Methods in Enzymology, Vol. 152, Academic Press, Inc.); Sambrook, e outros, (Molecular Cloning A Laboratory Manual, (Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Cold Spring Harbor, N.Y.; 1989) Vol. 1-3); Current Protocols in Molecular Biology, (F.
M.
Ausabel e outros [Eds.], Current Protocols, Green Publishing Associates, Inc. / John Wiley & Sons, Inc.); Harlow e outros, (Anticorpos monoclonais A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press (19881, Paul [Ed.]); Fundamental Immunology, (Lippincott Williams & Wilkins (1998)); e Harlow, e outros, (Usando Anticorpos A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1998)). A pessoa versada na técnica conhece os vetores, promotores e peptídeos de sinal correspondentes que são necessários para a expressão de uma proteína/anticorpo.
Processos comuns são também descritos na WO 2007/070538 on págs. 41–45. Processos para a preparação de um anticorpo de IgG1 são descritos, por exemplo, na WO 2007/070538 no Exemplo 6 na pág. 74 ff. Processos que permitem a determinação da internalização de um anticorpo depois que se liga a seu antígeno são conhecidos pela pessoa versada e são descritos por exemplo na WO 2007/070538 na pág. 80. A pessoa versada na técnica é capaz de usar os processos descritos na WO 2007/070538 que foram usados para a preparação de anticorpos de carboanidrase IX (Mn) em analogia para a preparação de anticorpos com diferente especificidade de molécula-alvo. Expressão Bacteriana
[0069] A pessoa versada na técnica está ciente do modo em que anticorpos, seus fragmentos ligados a antígeno ou suas variantes podem ser produzidas com o auxílio da expressão bacteriana.
[0070] Vetores de expressão adequados para a expressão bacteriana de proteínas desejadas são construídos por inserção de uma sequência de DNA que codifica a proteína desejada dentro do quadro de leitura funcional juntamente com sinais de terminação de tradução e iniciação de tradução adequada e com um promotor funcional. O vetor vector compreende um ou mais marcadores fenotipicamente selecionáveis e uma origem de replicação a fim de permitir a retenção do vetor e, de desejado, a sua ampliação dentro do hospedeiro. Hospedeiros procarióticos adequados para a transformação incluem mas não são limitados a E. coli, Bacillus subtilis, Salmonella typhimurium e várias espécies oriundas do gênero Pseudomonas, Streptomyces, e Staphylococcus. Vetores bacterianos podem ser com base, por exemplo, nos bacteriófagos, plasmídios, ou fagemídeos. Estes vetores podem conter marcadores selecionáveis e uma origem de replicação bacteriana, que são derivados de plasmídios comercialmente disponíveis. Muitos plasmídios comericalmente disponíveis tipicamente contêm elementos do vetor de clonagem bem conhecido pBR322 (ATCC 37017). Em sistemas bacterianos, numerosos vetores de expressão vantajosos podem ser selecionados com base no uso pretendido da proteína a ser usado.
[0071] Depois da transformação de uma cepa hospedeira adequada e crescimento da cepa hospedeira para uma densidade de célula apropriada, o promotor selecionado é desreprimido/induzido por meio adequado (por exemplo, uma mudança na temperatura ou indução química), e as células são cultivadas por um período adicional. As células são tipicamente coletadas por centrifugação e se necessário digeridas de um modo físico ou por meio químico, e o extrato bruto resultante é retido para outra purificação. Expressão de célula mamífera
[0072] A pessoa versada na técnica está ciente do modo em que anticorpos, seus fragmentos ligados a antígeno ou suas variantes podem ser produzidos com auxílio de expressão de célula de mamífero.
[0073] Sequências reguladoras preferidas para a expressão em hospedeiros de célula de mamíferos incluem elementos virais levam a alta expressão nas células de mamíferos, tais como promotores e/ou ampliadores de expressão derivados de citomegalovírus (CMV) (tais como o promotor/melhorador de CMV), vírus símio 40 (SV40) (tais como promotor/melhorador de SV40), oriundo de adenovírus, (por exemplo o principal promotor tardio de adenovírus (AdMLP)) e oriundo de polioma. A expressão dos anticorpos pode ser constitutiva ou regulada (por exemplo, induzida por adição ou remoção de indutores de molécula pequena tal como tetraciclina em combinação com o sistema Tet).
[0074] Para outra descrição de elementos reguladores virais e suas sequências, referência é feita, por exemplo, pela patente U.S. 5.168.062 por Stinski, pela patente U.S. 4.510.245 por Bell e outros e pela patente U.S. 4.968.615 por Schaffner e outros Os vetores de expressão recombinantes podem, do mesmo modo, incluir uma origem de replicação e marcadores selecionáveis (vide, por exemplo, as patentes U.S. nos. 4.399.216, 4.634.665 e 5.179.017). Marcadores selecionáveis adequados incluem genes que provêem resistência a substâncias tais como G418, puromicina, higromicina, blasticidina, zeocina/bleomicina, ou metotrexato, ou marcadores selecionáveis que levam a auxotrofia de uma célula hospedeira, tal como sintetase de glutamina (Bebbington e outros, Biotechnology (N Y). 1992 Feb;10(2):169-75), quando o vetor foi introduzido para dentro da célula.
[0075] Por exemplo, o gene de reductase de diidrofolato (DHFR) provê resistência a metotrexato, o gene neo provê resistência a G418, o gene bsd oriundo de Aspergillus terreus provê resistência a blasticidina, puromicin N-acetiltransferase provê resistência a puromicina, o produto de gene Sh ble provê resistência a zeocina, e resistência a higromicina é provida pelo gene de resistência a higromicina de E. coli (hyg ou hph). Marcadores selecionáveis tal como sintetase de glutamina ou DHFR ou são também úteis para técnicas de ampliação em combinação com MTX e MSX.
[0076] A transfecção de um vetor de expressão em uma célula hospedeira pode ser executada com o auxílio de técnicas padrão, incluindo por eletroporação, nucleofecção, precipitação de fosfato de cálcio, lipofecção, transfecção com base em policátion tais como transfecção de polietilenoimina (PEI) e transfecção de DEAE-dextrano.
[0077] Células hospedeiras de mamíferos adequadas para a expressão de anticorpos, seus fragmentos ligados a antígeno, ou suas variantes incluem células de ovários de hamster Chinês (CHO) tais como CHO-K1, CHO-S, CHO-K1SV [incluindo células de DHFR-CHO, descritas em Urlaub e Chasina, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220 e Urlaub e outros, Cell. 1983 Jun;33(2):405-12, usadas com um marcador selecionável de DHFR, como descrito em R. J.
Kaufman e P. A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621, e outras células de inativação, como detalhadas em Fan e outros, Biotechnol Bioeng. 2012 Apr;109(4):1007-15), células de mieloma de NS0, células de COS, células de HEK293, células de HKB11, células de BHK21, células de CAP, células de EB66, e células de SP2.
[0078] A expressão de anticorpos, seus fragmentos ligados a antígeno, ou suas variantes podem também ser efetuados de um modo transitório ou semi-estável os sistemas de expressão tais como células de HEK293, HEK293T, HEK293-EBNA, HEK293E, HEK293-6E, HEK293 Freestyle, HKB11, Expi293F, 293EBNALT75, CHO Freestyle, CHO-S, CHO-K1, CHO-K1SV, CHOEBNALT85, CHOS-XE, CHO-3E7 ou CAP-T (por exemplo como Durocher e outros, Nucleic Acids Res. 2002 Jan 15;30(2):E9).
[0079] Em algumas concretizações, o vetor de expressão é construído de tal modo que a proteína a ser expressa é secretada no meio de cultura de células em que as células hospedeiras estão se desenvolvendo. Os anticorpos, os seus fragmentos ligados a antígeno, ou as suas variantes podem ser obtidos a partir do meio de cultura de células com o auxílio dos métodos de purificação de proteína conhecidos por aqueles versados na técnica. Purificação
[0080] Os anticorpos, os seus fragmentos ligados a antígeno, ou as suas variantes podem ser obtidos e purificados a partir das culturas de células recombinantes com o auxílio de métodos bem conhecidos, exemplos dos quais incluem sulfato de amônio ou precipitação de etanol, extração de ácido, cromatografia de proteína A, cromatografia de proteína G, cromatografia de troca de ânions ou cátions, cromatografia de fosfocelulose, cromatografia de interação hidrofóbica (HIC), cromatografia por afinidade, cromatografia de hidroxiapatita e cromatografia de lectina. Cromatografia de líquida de alto desempenho
("HPLC") pode, do mesmo modo, ser empregada para purificação. Vide, por exemplo, Colligan, Current Protocols in Immunology, ou Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, N.Y., (1997-2001), por exemplo, Chapters 1, 4, 6, 8, 9, 10.
[0081] Anticorpos da presente invenção ou seus fragmentos ligados a antígeno, ou suas variantes incluem produtos naturalmente purificados, produtos oriundos dos métodos de síntese química e produtos que são produzidos com o auxílio de técnicas recombinantes em células hospedeiras procarióticas ou eucarióticas. Hospedeiros eucarióticos incluem, por exemplo, células de levedura, células de planta superior e células de mamífero. Dependendo da célula hospedeira escolhida para a expressão recombinante, a proteína expressa pode estar na forma glicosilada ou não glicosilada.
[0082] Em uma concretização preferida, o anticorpo é purificado (1) em uma extensão de mais do que 95% em peso, medida, por exemplo, pelo método de Lowry, por espectroscopia de UV-vis ou por eletroforese de gel de capilar SDS (por exemplo com um instrumento Caliper LabChip GXII, GX 90 ou Biorad Bioanalyzer), e em concretizações mais preferidas mais do que 99% em peso, (2) a um grau adequado para a determinação de pelo menos 15 resíduos da sequência de aminoácidos N-terminal ou interno, ou (3) a homogeneicidade determinada por SDS- PAG, sob condições de redução ou não redução com o auxílio de Coomassie blue ou de preferência manchamento com prata.
[0083] Usualmente, um anticorpo isolado é obtido com o auxílio de pelo menos uma etapa de purificação de proteína. Tabela 1: Sequências de proteínas de anticorpos preferidos c cadeia pesada de IgG eavy cadeia leve de IgG proteína de VH SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: SEQ ID NO: Proteína VL H-CDR1 H-CDR2 H-CDR3 L-CDR1 L-CDR2 L-CDR3 Anticorpo TPP-ID [Nome] TPP- aCECAM6 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3310 TPP- Cobolimab 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 18285 (TSR-022) Tabela 2: Sequências de anticorpos preferidos "TPP- Anticorpo Região SEQ ID Sequência ID" [Nome] TPP- aCECAM6 VH SEQ ID QVTLRESGPALVKPTQTLTLTCTFSGFS 3310 NO:1 LSTYGIGVGWIRQPPGKALEWLAHIWW
NDNKYYSTSLKTRLTISKDTSKNQVVLT MTNMDPVDTATYYCARISLPYFDYWGQ
GTTLTVSS TPP- aCECAM6 HCDR1 SEQ ID TYGIGVG 3310 NO:2 TPP- aCECAM6 HCDR2 SEQ ID HIWWNDNKYYSTSLKT 3310 NO:3 TPP- aCECAM6 HCDR3 SEQ ID ISLPYFDY 3310 NO:4 TPP- aCECAM6 VL SEQ ID DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQN 3310 NO:5 VGTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASNRY
TGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDF
ATYYCQQYSSYPLTFGGGTKVEIK TPP- aCECAM6 LCDR1 SEQ ID KASQNVGTAVA 3310 NO:6 TPP- aCECAM6 LCDR2 SEQ ID SASNRYT 3310 NO:7 TPP- aCECAM6 LCDR3 SEQ ID QQYSSYPLT 3310 NO:8
TPP- aCECAM6 Cadeia SEQ ID QVTLRESGPALVKPTQTLTLTCTFSGFS 3310 pesada NO:9 LSTYGIGVGWIRQPPGKALEWLAHIWW
NDNKYYSTSLKTRLTISKDTSKNQVVLT MTNMDPVDTATYYCARISLPYFDYWGQ GTTLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSE STAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSN FGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKC CVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTL MISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWY VDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSV LTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPI EKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTK NQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKS RWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSL
SLSPG TPP- aCECAM6 Cadeia SEQ ID DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCKASQN 3310 leve NO:10 VGTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASNRY
TGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDF ATYYCQQYSSYPLTFGGGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF YPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTE QDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYA
CEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC TPP- Cobolimab VH SEQ ID EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAASG 18285 (TSR-022) NO:11 FTFSSYDMSWVRQAPGKGLDWVSTISG
GGTYTYYQDSVKGRFTISRDNSKNTLYL QMNSLRAEDTAVYYCASMDYWGQGTT
VTVSS TPP- Cobolimab HCDR1 SEQ ID SYDMS 18285 (TSR-022) NO:12 TPP- Cobolimab HCDR2 SEQ ID TISGGGTYTYYQDSVKG 18285 (TSR-022) NO:13 TPP- Cobolimab HCDR3 SEQ ID MDY 18285 (TSR-022) NO:14
TPP- Cobolimab VL SEQ ID DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQS 18285 (TSR-022) NO:15 IRRYLNWYHQKPGKAPKLLIYGASTLQS
GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFA
VYYCQQSHSAPLTFGGGTKVEIK TPP- Cobolimab LCDR1 SEQ ID RASQSIRRYLN 18285 (TSR-022) NO:16 TPP- Cobolimab LCDR2 SEQ ID GASTLQS 18285 (TSR-022) NO:17 TPP- Cobolimab LCDR3 SEQ ID QQSHSAPLT 18285 (TSR-022) NO:18 TPP- Cobolimab Cadeia SEQ ID EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAASG 18285 (TSR-022) pesada NO:19 FTFSSYDMSWVRQAPGKGLDWVSTISG
GGTYTYYQDSVKGRFTISRDNSKNTLYL QMNSLRAEDTAVYYCASMDYWGQGTT VTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGT KTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPP CPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMI SRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLT VLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEK TISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKN QVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSR WQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSL
SLGK TPP- Cobolimab Cadeia SEQ ID DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQS 18285 (TSR-022) leve NO:20 IRRYLNWYHQKPGKAPKLLIYGASTLQS
GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFA VYYCQQSHSAPLTFGGGTKVEIKRTVAA PSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFY PREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQ DSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYAC
EVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Método de Tratamento de Câncer
[0084] Dentro do contexto da presente invenção, o termo "câncer"
inclui, mas não é limitado a, cânceres da mama, pulmão, cérebro, órgãos reprodutores, trato digestivo, trato urinário, fígado, olho, pele, cabeça e pescoço, tiróide, paratiróide e suas metástases distantes. Aquelas desordens também incluem mieloma múltiplo, linfomas, sarcomas, e leucemias.
[0085] Exemplos of câncer de mama incluem, mas não são limitados a ductal carcinoma dutal invasivo, carcinoma lobular invasivo, ductal carcinoma in situ, e lobular carcinoma in situ.
[0086] Exemplos de cânceres do trato respiratório incluem, mas não são limitados a câncer de pulmão, particularmente carcinoma de pulmão de célula não pequena e de célula pequena, bem como adenoma bronquial e blastoma pleuropulmonar.
[0087] Exemplos de cérebro cânceres incluem, mas não são limitados a tronco cerebral e glioma hipotalâmico, astrocitoma cerebelar e cerebral, meduloblastoma, ependimoma, bem como tumor neuroectodermal e pineal.
[0088] Tumores dos órgãos reprodutores masculinos incluem, mas não são limitados a próstata e câncer testicular. Tumores dos órgãos reprodutores femininos incluem, mas não são limitados a câncer endometrial, cervical, ovariano, vaginal, e vulvar, bem como sarcoma do útero.
[0089] Tumores do trato digestivo incluem, mas não são limitados a cânceres anal, cólon, colorretal, esofageano, vesícula biliar, gástrico, pancreático, retal, intestino delgado, e glândula salivar.
[0090] Tumores do trato urinário incluem, mas não são limitados a cânceres de bexiga, peniano, rim, pelve renal, ureter, uretral e renal papilar humano.
[0091] Cânceres oculares incluem, mas não são limitados a melanoma intraocular e retinoblastoma.
[0092] Exemplos de cânceres de fígado incluem, mas não são limitados a carcinoma hepatocelular (carcinomas de célula de fígado com ou sem variante fibrolamelar), colangiocarcinoma (carcinoma de duto biliar intraepático), e colangiocarcinoma hepatocelular misto.
[0093] Cânceres de pele incluem, mas não são limitados a carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, melanoma, particularmente melanoma maligno, câncer de pele de célula Merkel, e câncer de pele de não melanoma.
[0094] Cânceres de cabeça e de pescoço incluem, mas não são limitados a câncer de laringe, de hipofaringe, de nasofaringe, de orofaringe, câncer de lábio e cavidade oral e célula escamosa.
[0095] Linfomas incluem, mas não são limitados a linfoma relacionado a AIDS, linfoma de não Hodgkina, linfoma de célula T cutânea, linfoma de Burkitt, doença de Hodgkina, e linfoma do sistema nervoso central.
[0096] Sarcomas incluem, mas não são limitados a sarcoma do tecido mol, osteossarcoma, histiocitoma fibroso maligno, linfossarcoma, e rabdomiossarcoma.
[0097] Leucemias incluem, mas não são limitados a leucemia mieloide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica e leucemia de célula cabeludas.
[0098] A presente invenção refere-se a um método para o uso das combinações de a presente invenção, no tratamento ou profilaxia de um câncer, particularmente (mas não limitado a) câncer de colorretal, câncer de pulmão, câncer pancreático, câncer de mama, câncer de próstata, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de fígado, câncer de cérebro, melanoma, câncer endometrial, linfoma, leucemia, etc.. Combinações podem ser utilizadas para inibir, bloquear, reduzir, diminuir, etc., proliferação de células e/ou divisão de células, e/ou produzem apoptose, no tratamento ou na profilaxia de câncer, em particular (mas não limitado a) câncer de colorretal, câncer de pulmão, câncer de mama, câncer de próstata, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de fígado, câncer de cérebro, melanoma, câncer endometrial, linfoma, leucemia, etc.. Este método compreende administração a um mamífero que necessita do mesmo, incluindo um ser humano, uma quantidade de uma combinação desta invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, isômero, polimorfo, metabolito, hidrato, solvato ou seu éster; etc. que é eficaz para o tratamento ou profilaxia de câncer, em particular (mas não limitado a) câncer de colorretal, câncer de pulmão, câncer pancreático, câncer de mama, câncer de próstata, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de fígado, câncer de cérebro, melanoma, câncer endometrial, linfoma, leucemia, etc..
[0099] O termo "tratando" ou "tratamento" como afirmado através de todo este documento usado convencionalmente, por exemplo, o gerenciamento ou cuidado de um indivíduo para a finalidade do combate, suavização, redução, alívio, melhoramento da condição de, etc., de uma doença ou uma desordem, tal como carcinoma.
[00100] Em concretizações preferidas, o câncer é câncer de pulmão, em particular câncer de pulmão de célula não pequena (NSCLC), câncer ovariano, mesotelioma, câncer pancreático, ou câncer gástrico, câncer de colorretal , câncer de cabeça e de pescoço, câncer de vesícula biliar, bile câncer de duto biliar, câncer de mama, câncer de cervical, câncer esofageano. Dose e Administração
[00101] Com base nas técnicas de laboratório padrão conhecidas para avaliar compostos úteis para o tratamento ou a profilaxia de câncer, em particular (mas não limitado a) câncer de colorretal, câncer de pulmão, câncer pancreático, câncer de mama, câncer de próstata, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de fígado, câncer de cérebro, melanoma, câncer endometrial, linfoma, leucemia, etc., por teste de toxicidade padrão e por ensaios farmacológicos padrão para a determinação de tratamento das condições identificadas acima em mamíferos, e por comparação destes resultados com os resultados de medicamentos conhecidos que são usados para tratar estas condições, a dosagem eficaz das combinações desta invenção pode prontamente ser determinada para o tratamento da indicação. A quantidade do ingrediente ativo para ser administrada no tratamento das condições pode variar amplamente de acordo com tais considerações como a combinação particular e unidade de dosagem empregada, o modo de administração, o período de tratamento, a idade, peso e sexo do paciente tratado, e a natureza e extensão da condição tratada.
[00102] A quantidade total do ingrediente ativo a ser administrada em geral variará de cerca 0,001 mg/kg a cerca de 200 mg/kg de peso de corpo por dia, e de preferência de cerca de 0.,01 mg/kg a cerca de 30 mg/kg de peso de corpo por dia. Escalas de administração dosada clinicamente úteis variarão de um a três vezes por dia, administração dosada a uma vez a cada quatro semanas. Além disso, "férias de fármaco" em que a um paciente não é administrado dosadamente com um fármaco por um certo período de tempo, pode ser benéfico ao equilíbrio total entre o efeito farmacológico e tolerabilidade. Uma dosage unitária pode conter de cerca de 0,5 mg a cerca de 2,500 mg de ingrediente ativo, e pode ser administrada uma ou mais vezes por dia ou menos do que uma vez por dia. A dosage media para a administração por injeção, incluindo injeções intravenosa, intramuscular, subcutânea e parenteral, e usam técnicas de infusão deveriam de preferência ser de 0,01 a 200 mg/kg de peso de corpo total.
[00103] Naturalmente o regime de dosage inicial específico e contínuo para cada paciente variará de acordo com a natureza e severidade da condição como determinadas pelo diagnosticador atendente, a atividade da combinação específica empregada, a idade, peso e condição geral do paciente, tempo de administração, rota de administração, taxa de excreção do fármaco, combinações de fármacos, e semelhantes. O modo desejado de tratamento e número de doses de uma combinação da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster ou sua composição pode ser determinado por aqueles versados na técnica usando testes de tratamento convencionais. Terapias usando combinações de componente A como descritas supra, componente B como descrito supra, e componente C: um ou mais outros agentes farmacêuticos.
[00104] As combinações de componente A e componente B desta invenção podem ser administradas como um agente farmacêutico sozinho ou em combinação com um ou mais outros agentes farmacêuticos onde a combinação resultante dos componentes A, B e C causa nenhum efeito adverso inaceitável. Por exemplo, as combinações de componentes A e B desta invenção podem ser combinadas com o componente C, isto é, um ou mais outros agentes farmacêuticos, tais como agentes anti-angiogênese, anti-hiper- proliferativa, anti-inflamatória, analgésica, imunorreguladora, diurética, anti-arrítmica, anti-hipercolesterolemia, anti-dislipidemia, anti-diabética ou antivirais, e semelhantes, bem como com misturas e suas combinações.
[00105] Componente C, pode ser um ou mais agentes farmacêuticos such as 131I-chTNT, abarelix, abiraterona, aclarubicina, adalimumab, ado-trastuzumab emtansina, afatinib, aflibercept, aldesleucina, alectinib, alemtuzumab, ácido alendrônico, alitretinoina, altretamins, amifostina, aminoglutetimida, hexil aminolevulinato, amrrubicina, amsacrina, anastrozol, ancestim, anetol ditioletiona, anetumab ravtansina,
angiotensina II, antitrombina III, aprepitant, arcitumomab, arglabina, trióxide de arsênico, asparaginase, atezolizumab, axitinib, azacitidina, basiliximab, belotecan, bendamustina, besilesomab, belinostat, bevacizumab, bexaroteno, bicalutamida, bisantreno, bleomicina, blinatumomab, bortezomib, buserelina, bosutinib, brentuximab vedotina, busulfan, cabazitaxel, cabozantinib, calcitonina, folinato de cálcio, levofolinato de cálcio, capecitabina, capromab, carbamazepina carboplatina, carboquona, carfilzomib, carmofur, carmustina, catumaxomab, celecoxib, celmoleucina, ceritinib, cetuximab, clorambucila, clormadinona, clormetina, cidofovir, cinacalcet, cisplatina, cladribina, ácido clodrônico, clofarabina, cobimetinib, copanlisib, crisantaspase, crizotinib, ciclofosfamida, ciproterona, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daratumumab, darbepoetina alfa, dabrafenib, dasatinib, daunorrubicina, decitabina, degarelix, denileucina diftitox, denosumab, depreotida, deslorelina, dianidrogalactitol, dexrazoxano, cloreto de dibrospídio, dianidrogalactitol, diclofenac, dinutuximab, docetaxel, dolasetron, doxiflurridina, doxorubicina, doxorubicin + estrona, dronabinol, eculizumab, edrecolomab, acetato de eliptínio, elotuzumab, eltrombopag, endostatina, enocitabina, enzalutamida, epirrubicina, epitiostanol, epoetina alfa, epoetina beta, epoetina zeta, eptaplatina, eribulina, erlotinib, esomeprazol, estradiol, estramustina, etinilestradiol, etoposide, everolimus, exemestano, fadrozol, fentanyl, filgrastim, fluoximesterona, floxuridina, fludarabina, fluorouracila, flutamida, ácido folínico, formestano, fosaprepitant, fotemustina, fulvestrant, gadobutrol, gadoteridol, ácido gadotérico, meglumins, gadoversetamida, ácido gadoxético, nitrato de gálio, ganirelix, gefitinib, gencitabina, gentuzumab, Glucarpidase, glutoxim, GM-CSF, goserelina, granisetron, granulocita fator estimulatório de colônia, dicloridrato de histamins, histrelina, hidroxicarbamida, sementes de I-125, lansoprazol, ácido ibandrônico, ibritumomab tiuxetan, ibrutinib, idarubicina, ifosfamida, imatinib, imiquimod, improsulfan, indisetron, ácido incadrônico, ingenol mebutato, interferon alfa, interferon beta, interferon gama, iobitridol, iobenguana (123I), iomeprol, ipilimumab, irinotecan, Itraconazol, ixabepilona, ixazomib, lanreotida, lansoprazol, lapatinib, Iasocholina, lenalidomida, lenvatinib, lenograstim, lentinan, letrozol, leuprorelina, levamisol, levonorgestrel, levotiroxina sódico, lisurida, lobaplatina, lomustina, lonidamins, masoprocol, medroxiprogesterona, megestrol, melarsoprol, melfalan, mepitiostano, mercaptopurina, mesna, metadona, metotrexato, metoxsalen, metilaminolevulinato, metilprednisolona, metiltestosterona, metirosina, mifamurtida, miltefosina, miriplatina, mitobronitol, mitoguazona, mitolactol, mitomicina, mitotano, mitoxantrona, mogamulizumab, molgramostim, mopidamol, cloridrato de morfina, morfina sulfato, nabilona, nabiximols, nafarelina, naloxona + pentazocina, naltrexona, nartograstim, necitumumab, nedaplatina, nelarabina, ácido neridrônico, netupitant/palonosetron, nivolumab, pentetreotida, nilotinib, nilutamida, nimorazol, nimotuzumab, nimustina, nintedanib, nitracrina, nivolumab, obinutuzumab, octreotida, ofatumumab, olaparib, olaratumab, omacetaxina mepesuccinato, omeprazol, ondansetron, oprelvequina, orgoteína, orilotimod, osimertinib, oxaliplatina, oxicodona, oximetolona, ozogamicina, terapia genética p53, paclitaxel, palbociclib, palifermins, semente de paládio- 103, palonosetron, ácido pamidrônico, panitumumab, panobinostat, pantoprazol, pazopanib, pegaspargase, PEG-epoetina beta (metóxi PEG-epoetin beta), pembrolizumab, pegfilgrastim, peginterferon alfa-2b, pembrolizumab, pemetrexed, pentazocina, pentostatina, peplomicina, Perflubutano, perfosfamida, Pertuzumab, picibanila, pilocarpina, pirarubicina, pixantrona, plerixafor, plicamicina, poliglusam, poliestradiol fosfato, polivinilpirrolidona + hialuronato de sódio, polissacarídeo-K, pomalidomida, ponatinib, porfímero sódico, pralatrexato, prednimustina,
prednisona, procarbazina, procodazol, propranolol, quinagolida, rabeprazol, racotumomab, cloreto de rádio-223, radotinib, raloxifeno, raltitrexed, ramosetron, ramucirumab, ranimustina, rasburicase, razoxano, refametinib, regorafenib, ácido risedrônico, rênio-186 etidronato, rituximab, rolapitant, romidepsina, romiplostim, romurtida, roniciclib, rucaparib, samarium (153Sm) lexidronam, sargramostim, satumomab, secretina, siltuximab, sipuleucel-T, sizofiran, sobuzoxano, glicididazol de sódio, sonidegib, sorafenib, stanozolol, streptozocina, sunitinib, talaporfina, talimogene laerparepvec, tamibaroteno, tamoxifen, tapentadol, tasonermins, teceleukina, technetium (99mTc) nofetumomab merpentano, 99mTc-HYNIC-[Tyr3]-octreotida, tegafur, tegafur + gimeracila + oteracila, temoporfina, temozolomida, temsirolimus, teniposida, testosterona, tetrofosmins, talidomida, tiotepa, timalfasina, tirotropin alfa, tioguanina, tocilizumab, topotecan, toremifeno, tositumomab, trabectedina, trametinib, tramadol, trastuzumab, trastuzumab emtansina, treosulfano, tretinoina, trifluridina + tipiracila, trilostano, triptorelina, trametinib, trofosfamida, trombopoietina, triptofano, ubenimex, valatinib, valrubicina, vandetanib, vapreotida, vemurafenib, vinblastina, vincristina, vindesina, vinflunina, vinorelbina, vismodegib, vorinostat, vorozol, ítrio-90 glass microesferas, zinostatina, zinostatin stimalamer, ácido zoledrônico, zorrubicina.
[00106] Em geral, o uso de componente C em combinação com uma combinação de componentes A e B da presente invenção servirão para: (1) fornecer melhor eficácia na redução do crescimento de um tumor ou mesmo eliminar o tumor quando comparada com administração de qualquer agente sozinho, (2) prover a administração de menos quantidades dos agentes quimioterapêuticos, (3) prover um tratamento quimioterapêutico que é bem tolerado no paciente com menos complicações farmacológicas nocivas do que observadas com uma quimioterapias de agentes simples e certas outras terapias combinadas, (4) prover o tratamento de um espectro mais amplo de diferentes tipos de câncer em mamíferos, especialmente ser humano, (5) prover uma taxa de resposta mais alta entre pacientes tratados, (6) prover um tempo de sobrevivência mais longo entre pacientes tratados em comparação com standard tratamentos de quimioterapia padrão, (7) prover um tempo mais longo para progressão, e/ou (8) fornecer os resultados de eficácia e tolerabilidade pelo menos tão bons quanto dos agentes usados sozinho, em comparação com exemplos conhecidos onde quaisquer combinações de agentes de câncer produzem efeitos antagonísticos. Exemplos
[00107] Os seguintes exemplos descrevem a possibilidade da presente invenção, mas não restringindo a invenção para apenas estes Exemplos. Exemplo 1: Efeito de tratamento de combinação de TPP-3310 um anticorpo contra CEACAM6 humano com anticorpos dirigido contra PD-L1 ou PD-1 na ativação de células T específicos de peptídeo de vírus PD-1 positivo
[00108] Uma vez que CEACAM6 não é expresso no roedor (nenhum ortólogo roedor) estudos eficazes in vivo não são possíveis e nenhum estudo de combinação in vivo pré-clínico pode ser realizado para avaliar o potencial terapêutico de combinações de fármaco.
[00109] Alternativamente um sistema de ensaio de célula in vitro foi estabelecido para testar combinações de anticorpos contra CEACAM6 e PD-1 ou PD-L1 quanto a sua eficácia in vitro e potencial terapêutico.
[00110] Neste Sistema de ensaio de célula PD-1 de células T específicas de peptídeo de vírus FluM1 positivo fossem usadas como células T efetoras. Elas foram cocultivadas com PD-L1 e CEACAM6 positivos e células de câncer carregadas com peptídeo de FLuM1 HCC2935 na presença de anticorpo inibitório de ponto de checagem contra CEACAM6, PD-1 ou PD-L1 ou agentes simples ou suas combinações por 24 h-48 h. Indução de citocinas pró-inflamatórias (IFNg) é medida como leitura de eficácia. Anticorpos
[00111] Anticorpos usados eram TPP-3310 (anti-CEACAM6) que é um anticorpo huIgG2 contra molécula de ponto de checagem imune CEACAM6 que é ultra-expressa sobre células de câncer e células mielóides, TPP-3615 que é um anticorpo nti-PD-L1 huIgG2 e que foi clonado usando os domínios variáveis de domínios de Atezolizumab e TPP-2596 que é um anticorpo anti-PD-1 HuIgG4 Pro que foi clonado usando os domínios variáveis de Nivolumab. TPP-1238 (huIgG2) e TPP1240 (huIgG4) foram usados como anticorpos de controle de isótipo. Cultura e linhas de células
[00112] Células de câncer HCC2935 (ATCC-CRL-2869, adenocarcinoma de pulmão) foram cultivadas em RPMI-1640, 10% de FCS, 5% de CO2. Expressão de CEACAM6 e PD-L1 foi confirmada por análise FACS. Para ensaios de cocultura com células T específicas de peptídeo de vírus, as células de câncer foram pulsados com um peptídeo de FluM1 viral a 0,2 µg/ml ou como indicado. Geração de cultura de células de células T específicas de peptídeo de vírus de FluM1
[00113] Células T específicas de peptídeo de vírus (influenza) de expressão de PD-1 foram geradas a partir de PBMCs nativos oriundos de doadores saudáveis de HLA-A*0201+ que foram obtidos por centrifugação de densidade de Ficoll de revestimentos leuco- plaquetários (Deutsches Rotes Kreuz, Mannheim). Células T de CD8+ T foram enriquecidas com kit de seleção negativa de MACS (Miltenyi, 130- 096-495) de acordo com o protocolo do fabricante. Células negativas CD8 foram irradiadas (35 Gy) e foram pulsadas com 1 µg/ml do epítopo de HLA-A*0201 de influenza GILGFVFTL (ProImmune) no meio X-Vivo- 20 (Chemically Defined, Serum-free Hematopoietic Cell Medium, Lonza, #BE04-448Q) a 37° C por 1,5 h e foram lavadas depois disso. As células foram reestimuladas com células T2 irradiadas e foram pulsadas com 1 µg/ml de seu peptídeo GILGFVFTL associado no dia 7. No dia 14, alíquotas foram congeladas. As amostras foram descongeladas e foram lavadas imediatamente antes delas fossem usadas em ensaios funcionais. A adequabilidade das células T específicas de peptídeo de vírus foi confirmada com manchamento de tetrâmero (F391-4A-E, ProImmune) e análise de FACS antes da experiências de cocultura no dia 14. Ensaio in vitro: análise de eficácia de anticorpo combinado em cocultura de células T e células de câncer
[00114] Para a cocultura, células de câncer foram separadas não enzimaticamente com PBS-EDTA por 5-15 mins, foram centrifugadas a
1.400 rpm por 5 mins, foram lavadas e foram contadas. Células de câncer foram diluídas em X-Vivo-20 (Lonza, #BE04-448Q) a 1 x 105 células/ml, foram pré-tratadas com TPP-3310, aPD-L1 e/ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. Depois da incubação,
10.000 células de câncer-alvo foram semeadas em triplicados para placas U de ELISA de 96 cavidades.
[00115] Células T específicas de peptídeo de vírus foram coletadas, foram lavadas com X-Vivo-20, foram diluídas em X-Vivo-20 em 2 x 105 células/ml e foram pré-tratadas com anti-PD-1 ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. Todos os anticorpos foram aplicados a uma concentração final de 30 µg/ml. Para os tratamentos de combinação, TPP-3310 foi aplicado aproximadamente em sua concentração eficaz semi-máxima (EC50) de 1 µg/ml para garantir os efeitos de outros anticorpos na ativação de Células T. As Células T foram pré-tratadas foram semeadas a 20.000 células/cavidade sobre as células de câncer-alvo.
[00116] A cocultura de células de câncer e Células T efetoras com os anticorpos foi incubada a 37 C, 5% CO2 por cerca de 20 h.
[00117] Então os sobrenadantes foram coletados e por centrifugação das placas de cocultura a 1.400 rpm por 3 min. Os níveis de IFN- em sobrenadantes foram medidos por ELISA (IFN--ELISA Set Humano, BD, #555142) de acordo com as instruções do fabricante. Densidade ótica de placas de ELISA foi medida com uma leitora de placa Tecan Infinite M200.
[00118] Dados foram estatisticamente analisados com teste t de Student de duas caudas, emparelhado ou não emparelhado, usando-se Microsoft Excel 2010 e GraphPad Prisma 6. Os resultados com p<0,05 foram considerados significativos. Concentrações de citocina foram calculadas por curvas padrão. Fatores ou razões foram calculados por divisão de valores de TPP-3310 ou combinações dadas por valores dos controles de isótipo respectivos. Resultados
[00119] Nas pré-experiências de células de câncer HCC2935 carregadas com peptídeo FLuM1 foram co-incubadas com células T específicas de peptídeo de vírus FluM1. Apenas na presença da secreção de IFN-γ de peptídeo de vírus cognato das Células T foi aumentada. Este aumento foi dependente de dose. Secreção de IFN-γ (p<0.05 a 0,0001) da cocultura foi ulteriormente melhorada na presença do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310, o anticorpo anti-PD-L1 TPP- 3615 ou na presença do anticorpo anti-PD-1 TPP-2596. Todos dados como agentes simples. Estes dados confirmaram que o sistema de ensaio de célula precocemente estabelecido que consiste de células T específicas de peptídeo de vírus FluM1 positivo de PD-1 e células de câncer HCC2935 carregadas de peptídeo são adequados para a testagem da eficácia de anticorpos anti-CEACAM6, anti-PD-1 e anti-PD- L1 nas experiências de combinação e de marcação de nível.
Tabela 3: Especificidade de peptídeo de ativação de célula T específica de peptídeo de vírus medida por secreção de IFNg em experiências de cocultura com células de câncer HCC2935 carregadas de peptídeo de vírus com ou sem anticorpos de bloqueamento de ponto de checagem imune contra CEACAM6, PD-1 ou PD-L1. IFNg [pg/ml]
Amostra Média Desvio Erro padrão padrão da média TC apenas 3,5 0,5 0,3 TC+HCC nenhum peptídeo 0,1 0,1 0,06 TC+HCC/1 µg/ml de FLU de pep 792,0 29,7 17,1 TC+HCC/1 µg/ml de FLU de pep + 30 µg/ml de 787,3 18,8 10,9 TPP-1238 TC+HCC/1 µg/ml de FLU de pep + 30 µg/ml de 1143,7 104,5 60,3 aCEACAM6 (TPP-3310) TC+HCC/1 µg/ml de FLU de pep + 30 µg/ml de 887,7 35,5 20,5 aPD-L1 (TPP-3615) TC+HCC/1 µg/ml de FLU de pep + 30 µg/ml de 811,2 55,5 32,0 TPP-1240 TC+HCC/1 µg/ml FLU de pep + 30 µg/ml aPD- 972,1 76,2 44,0 1 (TPP-2596) TC+HCC/10 µg/ml de FLU de peptídeo 818,8 3,5 2,0 TC+HCC/1 µg/ml de FLU de peptídeo 915,0 29,2 16,9 TC+HCC/0,1 µg/ml de FLU de peptídeo 478,1 32,9 19,0 TC+HCC/ 0,01 µg/ml de FLU de peptídeo 56,6 52,5 30,3 TC+HCC/ 0,001 µg/ml de FLU de peptídeo 5,5 0,9 0,5 TC+HCC 0,0001 µg/ml FLU de peptídeo 2,9 0,5 0,3 Tabela de descrição: Células T específicas de peptídeo de vírus (TC) foram estimuladas com células de câncer de pulmão HCC2935 (HCC) foram pulsadas com diluições em série do polipeptídeo viral.
Anticorpos foram adicionados a 30 µg/ml.
Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA. Dados são quantidade absoluta de IFN- em pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6; TPP-3615, aPD-L1; TPP-2596, aPD1; TPP-1238, controle de isótipo para TPP-3310 e TPP3615, aPD-1; TPP- 1240, controle de isótipo para TPP-2596.
[00120] O efeito da combinação do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 com anticorpos dirigidos para PD-L1 foi determinado totalmente em 7 experiências de coculturas independentes (n=7). Na presença dos anticorpos viu-se consistentemente um aumento de secreção de IFNg (valores médios absoluto) quando dados como agentes simples ou em combinação. Na presença do IFNg total de anticorpo PD-L1 foi aumentada por 39,6 pg/ml, na presença do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 por 196,6 pg/ml e quando dada em combinação por 279,9 pg/ml. Este resultado mostra que secreção de IFNg é ulteriormente melhorada na combinação do anticorpo PD-L1 com o anticorpo CEACAM6 e que o efeito na secreção de IFNg é mais do que aditivo. Tabela 4: Secreção de IFNg total nas experiências de cocultura (n=7) de células T específicas de peptídeo de vírus FluM1 e células HCC2935 carregadas de peptídeo FluM1 na presença de anticorpo anti- CEACAM6 e anti-PD-L1 como agentes simples ou em combinação IFNg [pg/ml] experiência Erro Anticorpos Desvio padrão Média 1 2 3 4 5 6 7 padrão de média aPD-L1 70,7 42,0 41,9 26,3 46,8 76,1 -26,3 39,6 33,9 12,8 (TPP-3615) aCEACAM6 192,4 39,3 76,5 232,5 162,3 205,8 467,5 196,6 138,5 52,4 (TPP-3310) aPD-L1 + aCEACAM6 (TPP-3615 363,8 156,0 121,9 416,7 305,5 343,0 252,5 279,9 52,4 41,3 + TPP- 3310) Tabela de descrição: as células de câncer de pulmão HCC2935 (HCC)
foram pulsadas com o peptídeo FluM1 a 0,2 g/ml para estimular as células T específicas de peptídeo de vírus (TC) na cocultura. Anticorpos foram aplicados a 30 µg/ml. Para os tratamentos de combinação (n=7), TPP-3310 foi adicionado a 1 µg/ml. Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA e dados são isótipos de valores corrigidos e são dados como pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6; TPP-3615, aPD-L1; Teste T de valores médios, valor p (<0,15): aPD-L1 vs CEACAM6, p=0,1439; aPD-L1 vs Combinação, p=0,101; aCEACAM6 vs Combinação, p=0,16
[00121] Em um outro estudo, determinou-se o efeito da combinação do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 com anticorpos dirigidos contra PD-1 em 7 experiências de coculturas independentes totais (n=7). Na presença dos anticorpos viu-se consistentemente um aumento de secreção de IFNg (valores médios absoluto) quando dados como agentes simples ou em combinação.
[00122] Na presença do PD-1, IFNg total médio foi aumentado por
76.1 pg/ml, na presença do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 por 166,8 pg/ml e quando dada em combinação por 317,9 pg/ml. Este resultado mostra que a secreção de IFNg é ulteriormente melhorada na combinação do anticorpo PD-1 com p anticorpo CEACMA6 e que o efeito na secreção de IFNg é mais do que aditivo. Tabela 5: Secreção de IFNg total nas experiências de cocultura (n=7) de células T específicas de peptídeo de vírus FluM1 e células HCC2935 carregadas de peptídeo FluM1 na presença de anticorpo anti- CEACAM6 e anti-PD-1 como agentes simples ou em combinação IFNg [pg/ml] experiência Erro Anticorpos Desvio padrão Média 1 2 3 4 5 6 7 padrão de média aPD-1 57,9 50,2 29,9 29,3 40,5 95,5 229,1 76,1 71,2 26,9 (TPP-2596)
aCEACAM6 238,7 94,8 44,3 354,6 173,2 136,1 125,9 166,8 102,7 38,8 (TPP-3310) aPD-1 + aCEACAM6 388,7 195,2 88,6 495,8 343,4 326,6 386,9 317,9 135,3 51,1 (TPP-2596 + TPP-3310) Tabela de descrição: as células de câncer de pulmão HCC2935 (HCC) foram pulsadas com o peptídeo FluM1 a 0,2 g/ml para estimular the células T específicas de peptídeo de vírus (TC) na cocultura. Anticorpos foram aplicados a 30 µg/ml. Para os tratamentos de combinação (n=7), TPP-3310 foi adicionado a 1 µg/ml. Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA e dados são isótipos de valores corrigidos e são dados como pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6; TPP-2596, aPD-1. Teste T de valores médios, valor p (<0,15): aPD-1 vs CEACAM6, p=0.13; aPD-L1 vs Combination, p=0,1034; aCEACAM6 vs Combinação, p=0,1011 Exemplo 2: Efeito de combinação tratamento de TPP-3310 um anticorpo contra CEACAM6 de ser humano com anticorpos dirigidos contra TIM-3 na ativação de Células T específicas de peptídeo de vírus TIM-3 e PD-1 positivo
[00123] A combinação de anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 com um anticorpo anti-TIM3 foi testado também no sistema de ensaio de cocultura in vitro com células T específicas de peptídeo de vírus e células de câncer carregadas de peptídeo.
[00124] Neste sistema de ensaio de PD1 e TIM3 de células T específicas de antígeno de vírus FluM1 positivo foram usadas como células T efetoras. Elas foram cocultivadas com PD-L1 e CEACAM6 positivo e células de câncer carregadas de peptídeo HCC2935 FLuM1 na presença de anticorpo inibitório de ponto de checagem contra CEACAM6 e TIM3 ou como agentes simples ou suas combinações por 24 h-48 h. Indução de citocinas pró-inflamatórias (IFNg) foi medida como leitura de eficácia. Anticorpos
[00125] Anticorpos usados foram TPP-3310 (anti-CEACAM6) que é um anticorpo huIgG2 contra a molécula de ponto de checagem imune CEACAM6 que é ultra-expressa sobre as células de câncer e célualas mielóide e MAB2365 (rIgG2, R&D Jackson immunoresearch) que é um anticorpo anti-TIM3. TPP-1238 (huIgG2) e MAB006 (rIgG2; R&D), foram usados como anticorpos de controle de isótipo. Cultura e linhas de células
[00126] Células de câncer HCC2935 (ATCC-CRL-2869, adenocarcinoma de pulmão) foram cultivadas em RPMI-1640, 10% de FCS, 5% de CO2. Expressão de CEACAM6 e PD-L1 e TIM-3 foi confirmada por análise de FACS. Para os ensaios de cocultura com células T específicas de peptídeo de vírus, as células de câncer foram pulsadas com um peptídeo FluM1 viral a 0,2 µg/ml ou como indicado. Geração e cultura de células de células T específicas de peptídeo de vírus FluM1
[00127] Células T específicas de peptídeo de vírus (influenza) de expressão de PD-1 foram geradas a partir de PBMCs nativos oriundos de doadores saudáveis de HLA-A*0201+ que foram obtidos por centrifugação de densidade de Ficoll de revestimentos leuco- plaquetários (Deutsches Rotes Kreuz, Mannheim). Células T CD8+ foram enriquecidas com kit de seleção negativa de MACS (Miltenyi, 130- 096-495) de acordo com o protocolo do fabricante. Células negativas CD8 foram irradiadas (35 Gy) e foram pulsadas com 1 µg/ml do epítopo HLA-A*0201 influenza GILGFVFTL (ProImmune) no meio X-Vivo-20 (Chemically Defined, Serum-free Hematopoietic Cell Medium, Lonza, #BE04-448Q) a 37° C por 1,5 h e foram lavadas depois disso. As células foram reestimuladas com células T2 irradiadas e foram puladas com 1 µg/ml de seu peptídeo GILGFVFTL associado no dia 7. No dia 14,
alíquotas foram congeladas. As amostras foram descongeladas e foram lavadas imediatamente antes que elas fossem usadas em ensaios funcionais. A adequabilidade das células T específicas de peptídeo de vírus foi confirmada com manchamento de tetrâmero (F391-4A-E, ProImmune) e análise de FACS antes da experiências de cocultura no dia 14. Ensaio in vitro: análise de eficácia de anticorpo combinado na cocultura de células T e células de câncer
[00128] Para a cocultura, células de câncer foram separadas não enzimaticamente com PBS-EDTA por 5-15 mins, foram centrifugadas a
1.400 rpm por 5 mins, foram lavadas e foram contadas. Células de câncer foram diluídas em X-Vivo-20 (Lonza, #BE04-448Q) a 1 x 105 células/ml, foram pré-tratadas com TPP-3310 e/ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. Depois da incubação, 10.000 células de câncer-alvo foram semeadas em triplicados para placas U de ELISA de 96 cavidades.
[00129] Células T específicas de peptídeo de vírus foram coletadas, foram lavadas com X-Vivo-20, foram diluídas em X-Vivo-20 a 2 x 105 células/ml e foram pré-tratadas com anti-TIM3 ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. Todos os anticorpos foram aplicados a uma concentração final de 30 µg/ml, exceto o anticorpo anti-TIM3 que foi usada a 50 µg/ml. Para os tratamentos de combinação, TPP-3310 foi aplicado aproximadamente em sua concentração eficaz semi-máxima (EC50) de 1 µg/ml para garantir os efeitos de outros anticorpos na ativação de Células T. As células T foram pré-tratadas foram semeadas a 20.000 células/cavidade sobre as células de câncer-alvo.
[00130] A cocultura de células de câncer e células T efetoras com os anticorpos foi incubada a 37°C, 5% CO2 por cerca de 20 h.
[00131] Então os sobrenadantes foram coletados por centrifugação das placas de cocultura a 1.400 rpm por 3 min. Os níveis de IFN- em sobrenadantes foram medidos por ELISA (Human IFN--ELISA Set, BD, #555142) de acordo com as instruções do fabricante. Densidade ótica de placas de ELISA foi medida com uma leitora de placa Tecan Infinite M200.
[00132] Dados foram estatisticamente analisados com teste t de Student, de duas caudas, emparelhado ou não emparelhado, usando- se Microsoft Excel 2010 e GraphPad Prism 6. Os resultados com p<0,15 foram considerados significativos. Concentrações de citocina foram calculadas por curvas padrão. Fatores ou razões foram calculados por divisão de valores de TPP-3310 ou combinações dadas por valores dos controles de isótipo respectivos. Resultados
[00133] Nas pré-experiências de células de câncer HCC2935 carregadas com peptídeo FLuM1 foram co-incubadas com células T específicas de peptídeo de vírus FluM1. Apenas na presença da secreção de IFN-γ peptídeo de vírus cognato das células T foi aumentada. Este aumento foi dependente de dose. Secreção de IFN-γ (p<0,15 a 0,1001) da cocultura foi ulteriormente melhorada na presença do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 ou na presença do anticorpo anti-TIM3 MAB2365. Todas foram dadas como agentes simples. Estes dados confirmaram que o sistema de ensaio de célula precocemente estabelecido que consiste de células T específicas de vírus positivo de TIM-3 e PD-1 e células HCC2935 carregadas de peptídeo são adequadas para a testagem da eficácia de anti-CEACAM6 e anti-TIM3 mAbs nas experiências de combinação e de marcação de nível. Tabela 6: Especificidade de peptídeo de ativação de célula T específica de vírus medida por secreção de IFNg nas experiências de cocultura com HCC2935 carregado de peptídeo de vírus com ou com anticorpos de bloqueamento de ponto de checagem imune contra CEACAM6 e TIM3.
Amostra Média Desvio Erro padrão padrão de média TC apenas 0 0 0 TC+HCC nenhum peptídeo 0 0 0 TC+HCC+0,5 µg/ml de FLU de pep 778,4 34,0 19,7 TC+HCC+0,5 µg/ml de FLU de pep + 1131,1 26,2 15,1 30 µg/ml de aCEACAM6 (TPP-3310) TC+HCC+0,5 µg/ml de FLU de pep + 925,3 46,2 26,7 50 µg/ml aTIM-3 (MAB2365) TC+HCC+0,5 µg/ml de FLU de pep + 735,0 11,8 6,8 50 µg/ml de isótipo (Mab006) TC+HCC 10 µg/ml de FLU de peptídeo 843,0 17,7 10,2 TC+HCC 1 µg/ml de FLU de peptídeo 804,3 50 28,9 TC+HCC 0,1 µg/ml de FLU de peptídeo 359,9 3,8 2,2 TC+HCC 0,01 µg/ml de FLU de peptídeo 49,7 46,5 26,8 TC+HCC 0,001 µg/ml de FLU de peptídeo 0 0 0 TC+HCC 0,0001 µg/ml de FLU de peptídeo 0 0 0 Tabela de descrição: Células T (TC) específicas de vírus foram estimuladas com células de câncer de pulmão HCC2935 (HCC) foram pulsadas com diluições em série do polipeptídeo viral. Anticorpos foram adicionados a 30 µg/ml e exceto anti-TIM3 mAb que foi usado a 50 µg/ml. Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA. Dados são quantidades absolutas de IFN- em pg/ml. Controle de Isótipo de TPP-3310, aCEACAM6; MAB2365, aTIM3; TPP-1238, huIgG2; controle de Isótipo de MAB006, rIgG2.
[00134] O efeito da combinação do anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 com o anti-TIM3 Mab 2365 foi determinado globalmente em 7 experiências de coculturas independentes (n=7). Na presença dos anticorpos viu-se consistentemente um aumento de secreção de IFNg (valores médios absolutos) quando dados como agentes simples ou em combinação. Na presença de TIM-3 o anticorpo total IFNg foi aumentado por 181,5 pg/ml, na presença do anticorpo de anti-
CEACAM6 TPP-3310 por 228,0 pg/ml e quando dados em combinação por 562,6 pg/ml. Este resultado mostra que a secreção de IFNg é ulteriormente fortemente aumentada na combinação do anticorpo TIM-3 com o anticorpo CEACAM6 e que o efeito sobre a secreção de IFNg é mais do que aditiva. Ele também mostra atividade na presença de um eixo ativo PD-L1/ PD-1 e os efeitos são mais fortes em comparação com os exemplos anteriores. Tabela 7: Secreção de IFNg total nas experiências de cocultura (n=7) de células T FluM1 específicas de peptídeo de vírus e células HCC2935 carregadas de peptídeo FluM1 na presença de anti-CEACAM6 TPP- 3310 e anticorpo de anti-TIM-3 MAB2365 como agentes simples ou em combinação. IFNg [pg/ml] experiência Erro Anticorpos Desvio Média padrão 1 2 3 4 5 6 7 padrão de média aTIM3 65 67,7 37,0 246,6 287,1 288,2 277,7 181,5 117,7 44,5 (MAB2365) - aCEACAM6 233,0 159,3 33,3 402,9 217,0 242,4 307,3 228,0 115,3 43,6 (TPP-3310) aTIM3 + aCEACAM6 544,7 212,3 141,8 1136,7 753,0 758,2 391,5 562,6 349,6 132,1 (MAB2365 + TPP-3310) Tabela de descrição: células de câncer de pulmão HCC2935 (HCC) foram pulsadas com o peptídeo FluM1 a 0,2 g/ml para estimular as células T específicas de peptídeo de vírus (TC) na cocultura. Anticorpo TIM3 foi aplicado a 50 µg/ml. Para os tratamentos de combinação (n=7), TPP-3310 foi adicionado a 1 µg/ml. Concentrações de IFN- secretado foram determinadas por ELISA. Dados são valores de isótipo corrigidos e são dados como pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6;.MAB2365, aTIM3
[00135] Teste T de valores médios, p-valor (<0,05): a-TIM3 vs CEACAM6, p=0,24; a-TIM3 vs Combinação, p=0,01; aCEACAM6 vs Combinação, p=0,016
Exemplo 3: Efeito de combinação de tratamento de TPP-3310 de um anticorpo contra CEACAM6 humana com anticorpos dirigidos contra TIM-3 na ativação de Células T específicas de peptídeo sobreviventes
[00136] Previamente foi descoberto que TPP-3310 aumentou a secreção de IFN- por Células T específicas de peptídeo sobreviventes em coculturas com células de câncer de mama, colorretal e de pulmão. Em um outro exemplo a combinação de anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 com um anticorpo MAB2365 anti-TIM3 (R&D Jackson Immunoresearch) foi testada em coculturas de Células T específicas de peptídeo sobreviventes como fonte alternativa de células T com Células HCC2935 de câncer de pulmão ou Células KS de câncer de mama. Anticorpos
[00137] Anticorpos usados eram TPP-3310 (anti-CEACAM6) que é um anticorpo huIgG2 contra a molécula de ponto de checagem imune CEACAM6 que é ultra-expressa em células de câncer e células de mieloide. MAB2365 (rIgG2, R&D Jackson Immunoresearch) que é um anticorpo anti-TIM3. TPP-1238 (huIgG2) e MAB006 (rIgG2; R&D Jackson Immunoresearch) têm sido usados como anticorpos de controle de isótipo. Cultura e linhas de células
[00138] Células de câncer HCC2935 (ATCC-CRL-2869, adenocarcinoma de pulmão) foram cultivadas em RPMI-1640, 10% FCS, 5% CO2. Células de câncer KS foram cultivadas em DMEM, 10% FCS. Expressão de CEACAM6 e PD-L1 foi confirmada por análise de FACS. Geração e cultura de Células T específicas sobreviventes:
[00139] As Células T de tumor antígeno-específicas (isto é, específicas sobreviventes de peptídeo) foram geradas a partir de células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) de doadores saudáveis como descrito na literatura (Moosmann A. Gezielte Reaktivierung spezifischer zytotoxischer T-Zellen mit Epstein-Barr- Virus-Vektoren. Dissertation, Ludwig-Maximilians-University Munich, Germany. 2002; Brackertz B, Conrad H, Daniel J, Kast B, Krönig H, Busch DH, e outros, FLT3-regulated antigens as targets for leukemia- reactive citotoxic T lymphocites. Blood Cancer Journal. 2011;1(3):e11.) Ensaio in vitro: análise de eficácia de anticorpo combinado em cocultura de Células T e células de câncer
[00140] Para a cocultura, células de câncer foram separadas não enzimaticamente com PBS-EDTA por 5-15 mins, foram centrifugadas a
1.400 rpm por 5 mins, foram lavadas e foram contadas. Células de câncer foram diluídas em X-Vivo-20 (Lonza, #BE04-448Q) a 1 x 105 células/ml, foram pré-tratadas com TPP-3310 e/ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. Depois da incubação, 10.000 células de câncer-alvo foram semeadas em triplicados para placas U de ELISA de 96 cavidades.
[00141] Células T específicas de peptídeo de survivina foram coletadas, foram lavadas com X-Vivo-20, foram diluídas em X-Vivo-20 a 2 x 105 células/ml e foram pré-tratadas com anti-TIM-3 MAB2365 ou anticorpos de controle de isótipo sobre gelo por 10 min. O anticorpo Anti- TIM-3 foi aplicado a uma concentração final de 50 µg/ml. Para os tratamentos de combinação, TPP-3310 foi aplicado aproximadamente em sua concentração eficaz semi-máxima (EC50) de 1 µg/ml para garantir efeitos de outros anticorpos na ativação de Células T. As Células T foram pré-tratadas foram semeadas a 20.000 células/cavidade sobre as células de câncer-alvo. A cocultura de células de câncer e Células T efetoras com os anticorpos foi incubada a 37 C, 5% de CO2 por cerca de 20 h. Então os sobrenadantes foram coletados por centrifugação das placas de cocultura a 1.400 rpm for 3 min. O níveis de IFN- em sobrenadantes foram medidos por ELISA (Human IFN--
ELISA Set, BD, #555142) de acordo com as instruções do fabricante. Densidade ótica de placas de ELISA foi medida com uma leitora de placa Tecan Infinite M200.
[00142] Dados foram estatisticamente analisados com teste t de Student, de duas caudas, emparelhado ou não emparelhado, usando- se Microsoft Excel 2010 e GraphPad Prism 6. Os resultados com p<0,15 foram considerados significativos. Concentrações de citocina foram calculadas por curvas padrão. Fatores ou razões foram calculados por divisão de valores of TPP-3310 ou combinações dadas por valores dos controles de isótipo respectivos.
Tabela 8: Total secreção de IFNg nas experiências de cocultura (n=1) of survivin-peptídeo específico Células T e células de pulmão HCC2935 (HCC) na presença de anticorpo anti-CEACAM6 TPP-3310 e anti-TIM- 3 MAB2365 administrados como agentes simples ou em combinação. IFNg [pg/ml] Média* Desvio padrão** Anticorpos IFNg IFNg (pg/ml) (pg/ml) aTIM-3 (MAB2365) 63,6 -0,4 aCEACAM6 (TPP-3310) 343,1 18,3 aTIM3 + aCEACAM6 722,7 31,7 (MAB2365 + TPP-3310) Tabela de descrição: O anticorpo de anti-TIM-3 MAB2365 foi aplicado at 50 µg/ml. For combinação tratamentos (n=1), TPP-3310 foi adicionado a 1 µg/ml. Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA. Dados são valores corrigidos de isótipo e são dados como pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6, MAB2365, aTIM3 *Valor médio de triplicado, isótipo corrigido **Desvio padrão calculado a partir de valores em triplicada com Excel software Tabela 9: Total secreção de IFNg em de experiências cocultura (n=1) de células T específicas de peptídeo de survivina e células de câncer de mama KS na presença de anticorpo de anti-CEACAM6 TPP-3310 e anticorpo de anti-TIM-3 MAB2365 administrados como agentes simples ou em combinação. IFNg [pg/ml] Média* Desvio padrão** Anticorpos IFNg IFNg (pg/ml) (pg/ml) aTIM3 (MAB2365) 18,3 -2,8 aCEACAM6 (TPP-3310) 38,4 6,2 aTIM3 + aCEACAM6 (MAB2365 77,5 6,5 +TPP-3310) Tabela de descrição: O anticorpo TIM3 MAB2365 foi aplicado a 50 µg/ml. Para as combinações de tratamento (n=1), TPP-3310 foi adicionado a 1 µg/ml. Concentrações de IFN- secretada foram determinadas por ELISA. Dados são valores corrigidos de isótipo e são dados como pg/ml. TPP-3310, aCEACAM6; MAB2365, aTIM3 *Valor médio de triplicado, isótipo corrigidos* **Desvio padrão calculado a partir de valores em triplicada com Excel software
[00143] Como agentes simples, TPP-3310 e o anticorpo anti-TIM-3 MAB2365 aumentou a secreção de IFN- de células T específicas de peptídeo de survivina por 343,1 pg/ml e por 63,6 pg/ml respectivamente em coculturas com linha de células HCC2935 e 38,4 pg/ml e 18,3 pg/ml em cocultura com a linha de células KS.
[00144] Quando combinado, TPP-3310 e o anticorpo anti-TIM3 MAB2365 aumentou a secreção de IFN- por 722,7 pg/ml nas células
HCC2935 e por 77,5 pg/ml em células KS.
Este resultado mostra que secreção de IFNg é ulteriormente melhorada na combinação do anticorpo TIM-3 com o anticorpo CEACAM6 e que o efeito on secreção de IFNg é claramente mais do que aditiva.

Claims (11)

REIVINDICAÇÕES
1. Anticorpo de anti-CEACAM6 para o uso em combinação simultânea, separada, ou sequencial com um anticorpo de anti-TIM-3 no tratamento de câncer, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti-CEACAM6 compreende H-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, H-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, H-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, L-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6, L-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, e L-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8.
2. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti- CEACAM6 compreende uma sequência de cadeia pesada variável de SEQ ID NO:1 e uma sequência de cadeia leve variável de SEQ ID NO:5.
3. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti- CEACAM6 compreende uma sequência de cadeia pesada de SEQ ID NO: 9 e uma sequência de cadeia leve de SEQ ID NO: 10.
4. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti-TIM-3 é cobolimab, MBG-453, BMS-986258, Sym- 023, LY-3321367 ou INCAGN-2390.
5. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti-TIM-3 compreende H-CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 12, H-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, H-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 14, L- CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 16,
L-CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 17, e L-CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 18.
6. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti-TIM-3 compreende uma sequência de cadeia pesada variável (VH) de SEQ ID NO:11 e sequências de cadeia leve variável (VL) de SEQ ID NO:15.
7. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de anti-TIM-3 compreende uma sequência de cadeia pesada (HC) de SEQ ID NO: 19 e uma região de cadeia leve (LC) de SEQ ID NO: 20.
8. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer de pulmão, em particular câncer de pulmão de célula não pequena, câncer ovariano, mesotelioma, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de colorretal, câncer de cabeça e de pescoço, câncer de vesícula biliar, câncer de duto biliar, câncer de mama, câncer de cervical, ou câncer esofageano.
9. Anticorpo de anti-CEACAM6 para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que pelo menos um do anticorpo de anti-CEACAM6 ou um anticorpo de anti- TIM-3 é administrado em combinação simultânea, separada, ou sequencial com um ou mais agentes farmacêuticos.
10. Método de tratamento de câncer, caracterizado pelo fato de que compreende a administração, a um paciente que precisa do mesmo, de uma quantidade eficaz de um anticorpo de anti-CEACAM6, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.
11. Uso de um anticorpo de anti-CEACAM6, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que é para a manufatura de um medicamento para o tratamento de câncer.
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023031366A1 (en) 2021-09-02 2023-03-09 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Anti-cecam6 antibodies with reduced side-effects

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
DE8808645U1 (pt) 1988-07-06 1988-08-25 Hofer, Daniel, 7730 Villingen-Schwenningen, De
DOP2006000277A (es) 2005-12-12 2007-08-31 Bayer Pharmaceuticals Corp Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización
US10131712B2 (en) * 2012-08-14 2018-11-20 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with T-cell redirecting bispecific antibodies and checkpoint inhibitors
CA2899577C (en) * 2013-04-03 2023-10-17 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for inducing immune response to disease
JOP20200096A1 (ar) * 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CN106132436B (zh) * 2014-02-21 2021-06-15 Ibc药品公司 通过诱导对trop-2表达细胞的免疫应答的疾病疗法
WO2016150899A2 (en) * 2015-03-23 2016-09-29 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Anti-ceacam6 antibodies and uses thereof
MA41867A (fr) 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
PE20181805A1 (es) 2016-04-12 2018-11-19 Symphogen As Composiciones y anticuerpos anti-tim-3
NZ749355A (en) 2016-05-27 2023-04-28 Agenus Inc Anti-tim-3 antibodies and methods of use thereof
WO2017210058A1 (en) * 2016-06-01 2017-12-07 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with t-cell redirecting bispecific antibodies and checkpoint inhibitors
PE20190418A1 (es) 2016-07-14 2019-03-19 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra proteina 3 que contiene el dominio de mucina e inmunoglobulina de linfocitos t (tim3) y sus usos
JOP20190013A1 (ar) 2016-08-25 2019-01-31 Lilly Co Eli أجسام مضادة لـ (تي آي ام -3)
JP7118073B2 (ja) 2017-01-09 2022-08-15 テサロ， インコーポレイテッド 抗ｔｉｍ－３抗体を用いてがんを処置する方法
SG11202105078XA (en) * 2018-11-14 2021-06-29 Bayer Ag Pharmaceutical combination of anti-ceacam6 and either anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibodies for the treatment of cancer

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