BR112021001707B1 - Composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se aos novos compostos que são capazes de inibir certas enzimas amina-oxidases. Estes compostos são úteis para o tratamento de uma variedade de indicações, por exemplo, fibrose, câncer e/ou angiogênese em indivíduos humanos e também em animais de estimação e em animais de fazenda. Além disso, a presente invenção refere-se às composições farmacêuticas contendo estes compostos, e também aos vários usos dos mesmos.

Description

CAMPO TÉCNICO

[001] A presente invenção refere-se aos novos compostos que são capazes de inibir certas enzimas amina-oxidases. Estes compostos são úteis para o tratamento de uma variedade de indicações, por exemplo, fibrose, câncer e/ou angiogênese em indivíduos humanos e também em animais de estimação e em animais de fazenda. Em adição, a presente invenção refere-se às composições farmacêuticas contendo estes compostos, e também aos vários usos dos mesmos.

FUNDAMENTOS

[002] As enzimas são lisil-oxidase (LOX), o primeiro membro da família a ser descrito e LOX-like1 (LOXL1), LOXL2, LOXL3, e LOXL4 (J. Cell Biochem. 2003; 88: 660-672). As isoenzimas lisil-oxidases são amina- oxidases dependentes de cobre que iniciam a ligação cruzada covalente de colágeno e elastina. Uma função principal de isoenzimas lisil-oxidases é a facilitação da ligação cruzada de colágeno e elastina pela desaminação oxidativa de cadeias laterais de aminoácidos lisina e hidroxilisina para aldeídos que espontaneamente reagem com resíduos adjacentes. As fitas de ligação cruzada resultantes contribuem para a estabilidade da matriz extracelular (ECM) e a tornam menos suscetível à degradação proteolítica por enzimas como metaloproteases de matriz (MMPs). A atividade de enzimas lisil-oxidases é crucial para a manutenção das características elásticas e tracionais de tecido conjuntivo de muitos sistemas de órgãos do corpo.

[003] As isoenzimas lisil-oxidases pertencem a um grupo maior de amina-oxidases que incluem oxidases dependentes de flavina e dependentes de cobre que são descritas pela natureza do cofator catalítico. As enzimas dependentes de flavina incluem monoamina-oxidase-A (MAO-A), monoamina-oxidase-B (MAO-B), poliamina-oxidase e lisina-desmetilase (LSD1), e as enzimas dependentes de cobre que incluem amina-oxidase sensível à semicarbazida (SSAO/VAP-1, proteína de adesão vascular-1), amina-oxidase retinal, diamina-oxidase e as isoenzimas lisil-oxidase. As amina-oxidases dependentes de cobre têm um segundo cofator que varia muito pouco de enzima para enzima. Em SSAO/VAP-1 ele é um resíduo de tirosina oxidado (TPQ, oxidado para uma quinona), enquanto que nas isoenzimas lisil-oxidases o TPQ é adicionalmente processado pela adição de um resíduo de lisina adjacente (para formar LTQ) (J. Cell Biochem. 2003; 88: 660-672).

[004] As isoenzimas lisil-oxidases apresentam diferentes padrões de expressão in vivo, o que sugere que as isoenzimas específicas terão funções biológicas específicas. As formas cataliticamente ativas de LOX têm sido identificadas nos compartimentos citosólico e nuclear e pesquisa está em progresso para definir as funções delas nestes comportamentos. A própria LOX, por exemplo, desempenha uma função importante na transição epitelial para mesenquimal (EMT), migração celular, adesão celular, transformação celular e regulação gênica. Diferentes padrões de expressão/atividade de LOX têm sido associados aos diferentes processos patológicos que incluem doenças fibróticas, doença de Alzheimer e outros processos neurodegenerativos, e também progressão e metástase tumorais (Am. J. Surg. 2005; 189: 297-301).

[005] A substituição direta de células mortas ou danificadas por tecido conjuntivo após lesão representa um mecanismo de sobrevivência que é conservado ao longo da evolução e parece ser mais pronunciado em humanos, que serve como uma função valiosa após lesão traumática, infecção ou doenças. A cicatrização progressiva pode ocorrer após lesões mais crônicas e/ou repetidas que causa função comprometida em partes do ou no órgão inteiro afetado. Uma variedade de causas, como infecções crônicas, exposição crônica ao álcool e a outras toxinas, reações autoimunes e alérgicas ou cirurgia, radioterapia e quimioterapia, podem, todas, resultar em fibrose. Este processo patológico, portanto, pode ocorrer em quase qualquer órgão ou tecido do corpo e, tipicamente, resulta de situações que persistem durante várias semanas ou vários meses nas quais ocorrem simultaneamente inflamação, destruição e reparo teciduais. Neste âmbito, a fibrose afeta mais frequentemente os pulmões, o fígado, a pele, os rins e o sistema cardiovascular.

[006] A fibrose de fígado, por exemplo, pode ocorrer como uma complicação de hemocromatose, doença de Wilson, alcoolismo, esquistossomíase, hepatite viral, obstrução de ducto biliar, exposição a toxinas e distúrbios metabólicos. A fibrose de fígado é distinguida pela acumulação de matriz extracelular que pode ser qualitativamente distinguida daquela em fígado normal. Esta fibrose pode progredir para cirrose, insuficiência hepática, câncer e finalmente morte (Pathology - Research and Practice 1994; 190:910-919).

[007] Os tecidos fibróticos podem se acumular no coração e nos vasos sanguíneos como um resultado de hipertensão, doença cardíaca hipertensiva, aterosclerose e infarto do miocárdio onde a acumulação de matriz extracelular ou a deposição fibrótica resulta em enrijecimento da vasculatura e enrijecimento do próprio tecido cardíaco (Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2010;299:H1-H9).

[008] A hipertensão arterial pulmonar (PAH) é uma condição rara e rapidamente letal distinguida por pressão arterial pulmonar elevada e causada por resistência vascular pulmonar aumentada. Embora uma condição heterogênea com uma ampla variedade de causas, há o reconhecimento crescente de que a PAH está associada a outras doenças como doença do tecido conjuntivo e escleroderma. As características patológicas distintivas de PAH incluem remodelagem da parede vascular com ligação cruzada e deposição excessivas da matriz extracelular (ECM). As lisil-oxidases são desreguladas em vasculatura pulmonar de pacientes com hipertensão arterial pulmonar idiopática (IPAH) e contribuem para a persistência de componentes da ECM e remodelagem imprópria de colágeno e de elastina mediante ligação cruzada (Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2014; 34: 1446 - 1458). O prognóstico para pacientes com PAH é desfavorável. Alvejar as lisil-oxidases farmacologicamente poderia prover intervenção terapêutica onde atualmente existe pouca ou nenhuma.

[009] Tem sido demonstrada uma forte associação entre fibrose e atividade aumentada de lisil-oxidase. Por exemplo, em fibrose hepática experimental em rato (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1978; 75: 2945-2949), em modelos de fibrose pulmonar (J. Pharmacol Exp. Ther. 1981; 219: 675-678), em fibrose arterial (Arteriosclerosis 1981; 1: 287-291.), em fibrose dérmica (Br. J. Dermatol. 1995; 133: 710-715) e em fibrose renal induzida por adriamicina em rato (Nephron 1997; 76: 192-200). Destes modelos experimentais de doença humana, os aumentos mais notáveis em atividade enzimática foram vistos no modelo em rato de fibrose hepática induzida por CCl4. Nestes estudos, o baixo nível de atividade enzimática no fígado saudável aumentou de 15 para 30 vezes em fígados fibróticos.

[0010] Em humanos, há também uma associação significativa entre a atividade de lisil-oxidase medida no plasma e a progressão de fibrose de fígado. O nível de atividade de lisil-oxidase é normalmente baixo no soro de indivíduos saudáveis, mas significativamente aumentou em hepatite ativa crônica e ainda mais em cirrose. Portanto, a lisil-oxidase poderia servir como um marcador de fibrose interna.

[0011] As isoenzimas lisil-oxidases são elevadamente reguladas pelos Fator 1α Induzível por Hipoxia (HIF-1α) e TGF-β, os dois fatores de crescimento mais importantes que causam fibrose (Cell Biol. 2009; 29: 44674483). A ligação cruzada de colágeno ocorre em cada tipo de fibrose, consequentemente um inibidor de enzima lisil-oxidase poderia ser usado em fibrose pulmonar idiopática, escleroderma, fibrose renal ou fibrose hepática.

[0012] Em cura normal de ferimento, a formação de tecido de granulação é um processo de pouca duração, que provê o arcabouço para a reepitelização e o reparo. Subsequentemente, o tecido é remodelado e uma cicatriz normotrófica é formada. Contudo, após uma lesão, os humanos não podem regenerar a pele normal. Ao contrário, o processo de reparo (ou cura) resulta em formação de cicatriz (cicatrização). As cicatrizes são tanto esteticamente quanto funcionalmente inferiores à pele. As cicatrizes são um problema crônico e a formação de cicatriz excessiva ou hipertrófica e suas sequelas estéticas, funcionais e psicológicas concomitantes permanecem como desafios muito importantes para o tratamento de queimaduras e lesões profundas da pele. Um fator muito importante nas aparência e flexibilidade desfavoráveis das cicatrizes, em particular das cicatrizes hipertróficas, é as alterações no colágeno na camada dérmica. Em tecido cicatricial, o colágeno (predominantemente o Colágeno I) está mais densamente empacotado e estreitamente alinhado em feixes paralelos. Em pele normal, o colágeno não está densamente empacotado e é mais uma estrutura ‘de entrançado de cesta’. Estas alterações, tanto na estrutura quanto na quantidade de colágeno, causam predominantemente a aparência desfavorável da cicatriz e resultam em perda de flexibilidade, e problemas funcionais e de desconforto.

[0013] A fibrose dérmica, ou a formação de cicatriz excessiva da pele, é uma consequência da resposta de cura exagerada e é distinguida pelas desproporcionadas formação de fibroblastos e produção de matriz extracelular (ECM) na derme. Clinicamente, a fibrose dérmica manifesta-se como áreas espessadas, contraídas e endurecidas da pele. O espectro de distúrbios fibróticos da pele é amplo, incluindo, mas não se limitando a: a formação de cicatriz hipertrófica, queloides, escleroderma (subtipos difuso e limitado), escleroderma (doença de Buschke), amiloidose sistêmica, lipodermatoesclerose, distúrbios progeroides, síndrome da pele rígida, contratura de Dupuytren, dermopatia fibrosante nefrogênica (NFD), doença mista do tecido conjuntivo, escleromixedema, doença enxerto-versus- hospedeiro (GVHD) e fascite eosinofílica. Embora cada um destes distúrbios tenha suas próprias etiologia e características clínicas, todos envolvem a excessiva produção de colágeno, e a alterada remodelagem de colágeno. Um possível mecanismo para a alterada remodelagem de ECM é mediante a ligação cruzada covalente. Esta diretamente implica a família LOX de enzimas na patogênese de fibrose cutânea (Laboratory Investigation 2019; 99: 514 - 527). A expressão de LOX e de LOXL1-4 é elevada em fibroblastos cicatriciais comparados com os fibroblastos de pele normal, com LOX e LOXL1 sendo as isoformas dominantes verificadas em tecido da pele.

[0014] Estudos que envolvem dois modelos semelhantes à pele in- vitro, favoráveis - tecidos semelhantes à pele humana (hSEs), e tecidos estromais automontáveis - identificaram LOXL4 como a isoforma muito importante na mediação de fenótipos fibróticos induzidos por TGF-beta (Lab. Invest. 2019; 99: 514 - 527).

[0015] Os processos de formação de cicatriz são um problema e um desafio consideráveis no olho e nas estruturas circundantes. A formação de cicatriz ocular desempenha uma função importante em quer doença primária (por exemplo, formação de cicatrizes corneana e conjuntival) quer falha do tratamento (por exemplo, trabeculectomia pós-operatória) (Ocular Surgery News U. S. Edition, October 1, 2002).

[0016] O glaucoma é uma doença na qual o nervo óptico está sendo danificado, resultando em perda de visão progressiva e irreversível. A pressão intraocular (PIO) elevada é um dos principais fatores de risco para o desenvolvimento e a progressão de glaucoma. A maioria dos tratamentos para glaucoma são direcionados para abaixar a pressão intraocular, quer por decréscimo da formação de fluido aquoso no olho, quer, como no caso de cirurgia de filtração de glaucoma, pelo aumento da efusão de fluido do olho. A trabeculectomia - o padrão ouro atual para o controle da PIO - é uma cirurgia de filtração na qual um óstio é criado para dentro da câmara anterior a partir do lado inferior de um retalho escleral de espessura parcial para permitir fluxo aquoso para fora do olho. A formação de cicatriz pós-operatória é a causa principal de falha do tratamento. Os antimetabólitos mitomicina-C (MMC) e 5-fluorouracila (5-FU) são usados na prática clínica atual para ajudar a limitar a formação de tecido cicatricial ocular pós-operatória. Embora tenha sido mostrado que estes agentes melhoram a evolução da PIO da cirurgia de filtração, eles realizam isso em uma maneira não seletiva e estão associados aos efeitos colaterais significativos (Arch. Ophthalmol. 2002; 120: 297 - 300). São necessários agentes antifibróticos mais seguros, mais seletivos.

[0017] A fibromatose gengival é um grupo raro e heterogêneo de distúrbios que se desenvolvem como aumentos fibrosos, progressivos lentos, locais ou difusos de gengiva queratinizada (aumento ou crescimento gengival excessivo). Em casos graves, o tecido excessivo pode cobrir as coroas dos dentes, causando, dessa forma, problemas mastigatórios, estéticos, fonéticos, funcionais e periodontais. O crescimento gengival excessivo pode ser hereditário, de origem idiopática, associado às doenças inflamatórias da cavidade oral, ou associado às outras doenças sistêmicas. Contudo, a maioria dos casos são devido aos efeitos colaterais de medicações sistêmicas como o fármaco anticonvulsivo fenitoína, o imunossupressor ciclosporina-A, e certos bloqueadores-de-canal-de-cálcio di-hidropiridínicos anti-hipertensivos, em particular nifedipina (Crit. Rev. Oral Biol. 2004; 15: 165 - 175). A manifestação patológica de crescimento gengival excessivo compreende a acumulação excessiva de proteínas da matriz extracelular, das quais o Colágeno I é o mais predominante. Um conceito reconhecido do mecanismo para o crescimento gengival excessivo induzido por fármaco é EMT, um processo no qual a interação de células gengivais e a matriz extracelular é enfraquecida porque as células epiteliais se transdiferenciam em células fibroblásticas fibrogênicas (AJP 2010; 177: 208 - 218). O epitélio danificado, a membrana basal danificada, e o estroma subjacente danificado resultam em estimulação por TGF-Ü da atividade de enzima lisil-oxidase e contribuem para a fibrose de tecido conjuntivo (Lab. Invest. 1999; 79: 1655 - 1667).

[0018] A análise racional da inibição consistente e forte de fibrose pelos bloqueadores de isoenzima lisil-oxidase é que a falta de atividade de ligação cruzada torna o colágeno suscetível à degradação pelas enzimas proteolíticas como MMPs. Consequentemente, qualquer tipo de fibrose deve ser regredido pelo tratamento com inibidores de isoenzima lisil-oxidase. Dado o envolvimento variado de todas as isoenzimas lisil-oxidases em fibrose, um inibidor que demonstra inibição prolongada, forte, de todas as isoenzimas lisil-oxidase, isto é, um pan-inibidor de LOX, deve ser mais eficaz.

[0019] A Artrite Reumatoide (RA) é um distúrbio autoimune sistêmico distinguido por inflamação crônica, dolorosa do revestimento das articulações. Em algumas pessoas, contudo, a condição pode progredir para envolver inchação e inflamação dolorosas do tecido circundante, e de outros sistemas do corpo, incluindo a pele, os olhos, os pulmões, o coração e os vasos sanguíneos. A artrite reumatoide é, dessa forma, uma doença dolorosa e debilitante que pode resultar em perda substancial de função e de mobilidade nas mãos, nos pulsos e nos pés. A artrite reumatoide ativa provém de umas poucas articulações, mas pode subsequentemente progredir para afetar múltiplas articulações. A hiperplasia sinovial, que envolve células imunes infiltradas e fibroblastos sinoviais (SFs) residentes, é uma característica típica de RA. Os fibroblastos sinoviais da artrite reumatoide (RASFs) são o tipo de célula mais comum nos sítios de invasão e são o culpado principal na destruição das articulações. Os RASFs ativados são capazes de se transmigrarem e, como tais, têm estado implicados na disseminação de artrite entre as articulações. As citocinas das células imunes infiltradas induzem a ativação e a proliferação de fibroblastos sinoviais. Estes SFs ativados, por sua vez, geram o estroma patogênico para perpetuar a inflamação crônica, e finalmente resultar em destruição da cartilagem e do osso. Pela implantação de RASFs juntos com cartilagem humana para dentro de camundongos imunodeficientes combinados graves, tem sido demonstrado que os RASFs ativados migram in vivo, disseminando a doença para sítios de cartilagem humana implantada. Além disso, embora os RASFs ativamente degradem a cartilagem, os controles implantados com fibroblastos sinoviais de pacientes com osteoartrite (OA) e fibroblastos cutâneos de doadores saudáveis não degradam a cartilagem (Nat. Med. 2009; 15: 1414 - 1420). Os RASFs diferem dos fibroblastos saudáveis, não ativados, pelas morfologia e expressão gênica deles. Os RASFs são distinguidos pela expressão de protooncogenes, antiapoptóticos e falta de expressão de genes supressores de tumor. A produção de citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias pelos RASFs permite, adicionalmente, a atração de células imunes na sinóvia. Além disso, a produção de enzimas metaloprotease de matriz (MMP) promove a invasão para dentro da cartilagem e a destruição da cartilagem.

[0020] O modelo de artrite induzida por colágeno (CIA) de tipo II é o modelo animal comumente usado para RA porque ele recapitula bem as apresentações imunológicas, patológicas e artríticas inconfundíveis observadas em RA em humanos. Em ratos com CIA, têm sido demonstrados altos níveis de expressão de LOX nas membranas sinoviais, no fluido sinovial e no soro. A inibição de LOX com beta-aminopropionitrila (BAPN; um pan- inibidor de LOX) foi verificado que atenua a inflamação, a hiperplasia sinovial, a angiogênese e a expressão de MMP-2 e de MMP-9, indicando que a LOX promove a hiperplasia sinovial e a angiogênese em ratos com CIA. Além disso, a atenuação de genes codificantes de LOXL2, e os anticorpos contra LOXL2, atenuaram a deposição, proliferação e invasão de RASF em colágeno (Mol. Med. Rep. 2017: 6736 - 6742).

[0021] Embora não haja cura para a RA, há numerosos tratamentos disponíveis que aliviam os sintomas e modificam a progressão da doença. Contudo, tais tratamentos apresentam efeitos colaterais associados, em parte, à supressão do sistema imune. Fármacos seletivos que se direcionam para RASF representariam terapia mais útil para RA.

[0022] A osteoartrite (OA) é uma doença distinguida pela degeneração da cartilagem da articulação e do osso subjacente. Predominantemente resultante de ‘erosão e rasgo’, a OA causa dor e enrijecimento da articulação. As articulações mais comumente afetadas são aquelas dos dedos, dos joelhos, das costas e dos quadris. Diferente de outras formas de artrite (como RA), a osteoartrite apenas afeta as articulações. Com frequência, as articulações em um lado do corpo são afetadas mais do que aquelas no outro lado do corpo. A OA é uma doença progressiva e debilitante que pode ter uma influência significativa sobre as atividades diárias laborais e normais.

[0023] A fibrose sinovial é um contribuinte muito importante para a OA, e é uma manifestação de proliferação de fibroblasto e um desequilíbrio na síntese de colágeno e na degradação de colágeno. Este desequilíbrio resulta em deposição excessiva de colágeno na matriz extracelular (ECM) e resulta em espessamento e enrijecimento da membrana sinovial.

[0024] Tem sido mostrado que os genes que codificam numerosas enzimas da família de lisil-oxidases incluindo LOX, LOXL2, LOXL3 e LOXL4, são elevadamente expressados em camundongos com OA experimental, e em humanos com OA em estágio final (Arthritis and Rheumatology 2014; 66: 647 - 656).

[0025] Dada a contribuição variada de muitos dos membros da família de enzimas lisil-oxidases para o desenvolvimento tanto da artrite reumatoide quanto da osteoartrite, um pan-inibidor de LOX pode prover uma terapia potencialmente mais eficaz.

[0026] A BAPN é um inibidor de lisil-oxidase irreversível, baseado em mecanismo não seletivo, amplamente usado. Desde os anos 1960s, a BAPN tem sido usada em estudos animais (predominantemente rato, camundongo e hamster) e tem sido eficaz na redução do teor de colágeno em vários modelos (por exemplo, CCl4, bleomicina, quartzo, câncer) e tecidos (por exemplo, fígado, pulmão e derme) (J. Cell Biochem. 2003; 88: 660-672). Contudo, os estudos em pacientes humanos com escleroderma, verificaram que a BAPN é muito pouco tolerada e enfatizam a necessidade de alternativas mais seguras (Clin. Pharmacol. Ther. 1967: 593 - 602).

[0027] A ligação cruzada de colágeno catalisada por lisil-oxidase pode ser procedida via duas rotas: a rota de alisina e a rota de hidroxialisina. Na rota de hidroxialisina, primeiro são formadas ligações cruzadas divalentes imaturas, que incluem desidro-di-hidroxilisinonorleucina (deH-DHLNL) e desidro-hidroxilisinonorleucina (deH-HLNL), e então adicionalmente progride (via reações independentes de lisil-oxidase) para ligações cruzadas trivalentes maduras, entre as três moléculas de colágeno para formar desoxipiridinolina (DPD) e piridinolina (PYD). Estas ligações cruzadas imaturas e maduras podem ser medidas por CL-EM/EM (Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa/Espectrometria de Massa) (PLoS One 2014; 9 (11), e112391).

[0028] As isoenzimas lisil-oxidases não estão apenas envolvidas na formação de ligação cruzada de elastina e colágeno durante a cura de ferimento e fibrose, mas também regulam a movimento de células e a transdução de sinal. Sua função intracelular e intranuclear está associada à regulação gênica e pode resultar em tumorigênese e progressão de tumor (Inflammapharmacol. 2011; 19: 117-129). Têm sido descritas tanto a infrarregulação quanto a suprarregulação de isoenzimas lisil-oxidases em tecidos tumorais e linhagens de células cancerosas, sugerindo uma função dual para as isoenzimas lisil-oxidases e o pró-peptídeo de LOX como um gene promotor de metástase e também um gene supressor de tumor.

[0029] Em adição à sua função em remodelagem tecidual, as isoenzimas LOX também desempenham uma função crítica em câncer primário e metástase. O crescimento de tumor está associado a um estroma reativo, que é predominantemente composto de fibroblastos; chamados de fibroblastos associados a câncer (CAFs). É sabido que camundongos subcutaneamente inoculados com uma mistura de quantidades iguais de células tumorais e células CAFs têm uma velocidade de crescimento mais rápida e uma incidência mais alta de metástases (Trends Mol. Med. 2013;19(8): 447-453). Os modelos de inativação de CAF têm mostrado que são pró-tumorigênicos, contudo este é um cenário bastante abstrato quando comparado com um microambiente tumoral de paciente. Tem sido mostrado que os CAFs têm uma expressão aumentada de LOXs comparados com os fibroblastos normais (Dis. Model Mech. 2018; 11 (4)). A utilização de um inibidor de LOX em um ambiente de câncer potencialmente afetará tanto o tumor quanto o compartimento estromal para ajudar no decréscimo de crescimento de tumor e de metástase.

[0030] Evidência emergente sugere uma associação entre a fibrose pulmonar e o câncer pulmonar, contudo, são necessários mais estudos. Fibrose induzida por agente químico ou irradiação em ambos modelos pulmonar e hepático em camundongo causa um aumento em alfa-actina de músculo liso (um marcador de fibroblastos), expressão de LOX e crescimento de tumor metastásico, que é regredido por um anticorpo anti-LOX (Cancer Res. 2013; 73 (6): 1721-1732).

[0031] Até agora, um aumento em mRNA de isoenzimas lisil- oxidases e/ou em proteína de isoenzimas lisil-oxidases tem sido observado em amostras de pacientes com carcinoma de mama, linhagens de células de câncer do SNC (Sistema Nervoso Central), carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, carcinoma esofágico, carcinoma renal, carcinoma pulmonar, carcinoma prostático, carcinoma renal de células claras, carcinoma ovariano, carcinoma uterino, melanoma e osteossarcoma do “The Cancer Genome Atlas” (TCGA). São mostrados na Tabela 1 os dados do TCGA da expressão gênica de pacientes para a família de LOX. Um símbolo positivo (+) indica expressão gênica mais alta que a expressão gênica média dentro deste conjunto de dados. Tabela 1 Dados do TCGA da expressão gênica de pacientes para a família de LOX

[0032] Correlações clínicas estatisticamente significativas entre a expressão de isoenzimas lisil-oxidases e a progressão de tumor têm sido observadas em carcinoma de mama, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, mielofibrose, carcinoma prostático, carcinoma pancreático, carcinoma ovariano, e carcinoma renal de células claras. A função das isoenzimas lisil-oxidases em progressão de tumor tem sido mais extensivamente estudada em câncer de mama usando modelos in vitro de migração/invasão e modelos in vivo de tumorigênese e de metástase em camundongo (Nature. 2006; 440 (7088): 1222-1226). A expressão aumentada de isoenzimas lisil-oxidases foi verificada em pacientes hipóxicos, e esteve associada ao status negativo de receptor de estrogênio (ER-), sobrevida total decrescida em pacientes linfonodo-negativos que não receberam tratamento sistêmico adjuvante, e também sobrevida mais curta isenta de metástase óssea em pacientes ER- e pacientes linfonodo-negativos; os modelos in vivo demonstraram que os inibidores de LOX têm potencial em pacientes com câncer de mama com metástase óssea, pela modulação de homeostasia óssea independente de RANKL (Nature. 2015; 522 (7554): 106-110). Foi demonstrado que o mRNA de isoenzimas lisil-oxidases está suprarregulado em linhagens celulares invasivas e metastásicas (MDA-MB-231 e Hs578T), e também em linhagens celulares de câncer de mama mais agressivas e tecidos metastásicos distantes comparados com os tecidos de câncer primário (Cancer Res. 2002; 62 (15): 4478-4483).

[0033] Os processos patogênicos em mielofibrose primária envolvem uma mieloproliferação clonal sobrecarregada com megacariócitos primários e reação estromal paraneoplásica que inclui fibrose da medula óssea, osteoesclerose, angiogênese, e hematopoiese extramedular. A reação da medula óssea inclui deposição excessiva de proteínas da matriz extracelular como colágeno fibrilar, hipocelularidade, ativação e recrutamento de fibroblastos da medula óssea, produção excessiva de citocinas e de fatores de crescimento, e outras alterações que resultam em uma redução na capacidade hematopoiética. A mielofibrose secundária pode resultar da policitemia rubra vera ou da trombocitose essencial. Em mielofibrose, a progressão da doença correlaciona-se com números aumentados de megacariócitos, que superexpressam LOX. Em um modelo de mielofibrose em camundongo “GATA1-low” [camundongo contendo expressão reduzida de proteína GATA1], a progressão da doença (incluindo aumento em número de megacariócitos, fibrose e tamanho do baço), foi significativamente atenuada por um pan-inibidor de LOX (J. Biol. Chem. 2011; 286(31): 27630-27638).

[0034] Na maioria dos tipos de tumores, a primeira linha de tratamento é a ressecção cirúrgica. Uma resposta de cura de ferimento é iniciada pela cirurgia e pode correlacionar-se com um aumento em disseminação metastática. Modelos de câncer de mama têm mostrado que a cirurgia abdominal aumenta a metástase pulmonar. Além disso, foi mostrado que é causada por LOX sistêmica. Injeção de plasma, coletado de camundongos submetidos à cirurgia abdominal (que continha LOX), para dentro de camundongos possuindo tumor resultou em um aumento em metástase pulmonar. A LOX sistêmica induzida por cirurgia foi bloqueada pela BAPN, reduzindo a metástase e aumentando a sobrevida (Cell Rep. 2017; 19 (4): 774-784).

[0035] Em modelos de câncer de cólon, câncer de mama e melanoma, tem sido mostrado que as células endoteliais associadas ao tumor têm uma expressão aumentada de LOX, que estimula angiogênese e crescimento de tumor (Cancer Res. 2015; 73(2): 583-594).

[0036] Em pacientes com câncer pancreático, câncer de mama, câncer de pulmão e câncer de cólon, alto teor de colágeno tem sido correlacionado com alta expressão gênica de LOX, resistência à quimioterapia e sobrevida significativamente decrescida (Oncogene. 2018; 37(36) 4921-4940, EMBO Mol Med. 2015; 7(8) 1063-1076, Oncotarget. 2016; 7(22) 32100-32112). Os inibidores de LOX (tanto BAPN quanto um anticorpo anti-LOX) e padrão de quimioterapias de cuidado foram combinados em modelos de tumor desmoplásico em camundongo para abaixar a pressão intersticial tumoral causando a expansão de vasos (Oncotarget. 2016; 7(22) 32100-32112). O fluxo vascular aumentado aumenta a concentração do agente quimioterapêutico no sítio do tumor primário, o que resulta em uma carga metastásica mais baixa e sobrevida aumentada (Oncotarget. 2016 May 31; 7(22) 32100-32112).

[0037] Em carcinomas de células escamosas de cabeça e pescoço, expressão aumentada de isoenzima lisil-oxidase foi verificada em associação ao CA-IX, um marcador de hipóxia, e esteve associada à sobrevida específica ao câncer decrescida, sobrevida total decrescida e sobrevida mais curta isenta de metástase (Oncotarget. 2016; 7(31): 50781-50804). Em carcinoma de células escamosas orais, a expressão de mRNA de isoenzima lisil-oxidase estava suprarregulada comparada com a mucosa normal.

[0038] O perfilamento de expressão gênica de gliomas identificou isoenzima lisil-oxidase superexpressada como parte de uma assinatura molecular indicativa de invasão, e associada a tumores de grau mais alto que estão fortemente correlacionados com sobrevida desfavorável de paciente (PloS ONE. 2015 Mar 19; 10(3) e0119781). A expressão de isoenzima lisil- oxidase foi aumentada em tecidos de glioblastoma e de astrocitoma, e em células de astrocitoma cultivadas U343 e U251 invasivas.

[0039] Em tecidos, o mRNA de isoenzima lisil-oxidase esteve suprarregulado em câncer de próstata comparado com hipertrofia prostática benigna, correlacionado com o escore de Gleason, e associado a ambos grau alto e tempo curto para recorrência (Oncol. Rep. 2008; 20: 1561-1567).

[0040] Em RCC (carcinoma de células renais) de células claras, a ação de fumar esteve associada aos desequilíbrios alélicos no cromossomo 5q23.1, onde o gene LOX está localizado, e pode envolver duplicação do gene (Cancer Genet. Cytogenet. 2005; 163(1)7: 7-11).

[0041] Células de câncer cervical SiHa demonstraram invasão aumentada in vitro sob condições hipóxicas/anóxicas; isto foi reprimido pela inibição da atividade de lisil-oxigenase cataliticamente ativa da matriz celular pelo tratamento com BAPN e também com oligos antissenso de LOX, anticorpo anti-LOX, shRNA de LOX ou um agente quelante de cobre extracelular (Oncol. Rep. 2013; 29 (2), 541-548).

[0042] Em modelos de câncer ovariano em camundongo geneticamente modificado (com inativação de gene codificante de ApoE- apolipoproteína-E), é formado um tumor desmoplásico com expressão de gene de LOX aumentada. O tratamento com BAPN significativamente aumentou a sobrevida e decresceu a metástase pulmonar (J. Exp. Clin. Cancer Res. 2018; 37: 32). Certos tumores de pacientes com câncer ovariano têm um polimorfismo de nucleotídeo único do gene de LOX, G473A. Dois estudos independentes têm mostrado que pessoas com o polimorfismo G473A expressado têm alterações aumentadas de câncer ovariano desenvolvente (J. Int. Med. Res. 2012; 40(3): 917-923; Genet. Test Mol. Biomarkers. 2012; 16 (8): 915-919).

[0043] Em carcinoma primário de células escamosas orais humanas (OSCC), os níveis de enzima lisil-oxidase (em particular de LOX e de LOXL2) e de expressão de lisil-hidroxilase estão significativamente aumentados, e notavelmente elevados em tumores positivos para metástase de linfonodo regional (RLNM), em estádio tardio. Ambas ligações cruzadas reduzíveis, ou imaturas (deH-DHLNL e deH-HLNL) e ligações cruzadas não reduzíveis, ou maduras (DPD e PYD) estão significativamente aumentadas em OSCCs comparados com tecidos normais (J. Dent. Res. 2019; 98(5): 517 - 525).

[0044] As verificações aqui descritas, proveem uma forte análise racional para terapias de combinação que envolvem inibidores de isoenzima LOX e terapia antitumoral em pacientes.

[0045] Mais recentemente, CCT365623, um pan-inibidor de LOX reversível tem sido utilizado em um modelo de câncer de mama (MMTV- PyMT) para reduzir a metástase e aumentar a sobrevida (Nat. Commun. 2017; 18 (8): 14909).

[0046] A literatura científica e de patente descreve inibidores moleculares pequenos de isoenzimas lisil-oxidases e anticorpos anti-LOX e anti-LOXL2 com efeitos terapêuticos em modelos animais de fibrose e de metástase de câncer. É também relatado que alguns conhecidos inibidores de MAO inibem a isoenzima lisil-oxidase (por exemplo, o inibidor de MAO-B, Mofegilina ilustrado abaixo). O inibidor é um membro da família de inibidores de MAO derivados de haloalilamina; o halogênio em Mofegilina é flúor. Inibidores derivados de fluoroalilamina são descritos na Patente Norte- Americana n° 4.454.158. Há patentes concedidas que reivindicam fluoroalilaminas e cloroalilaminas, por exemplo MDL72274 (ilustrada abaixo) como inibidores de lisil-oxidase (Patentes Norte-Americanas n°s 4.943.593; 4.965.288; 5.021.456; 5.059.714; 5.182.297; 5.252.608). Muitos dos compostos reivindicados nestas patentes são também relatados como sendo potentes inibidores de MAO-B e de SSAO/VAP-1.

[0047] Inibidores derivados de fluoroalilamina adicionais são descritos em Patente Norte-Americana n° 4.699.928. Outros exemplos estruturalmente relacionados à Mofegilina podem ser verificados no documento WO 2007/120528.

[0048] O documento WO 2009/066152 descreve uma família de 3- substituídas-3-haloalilaminas que são inibidores de SSAO/VAP-1 úteis como tratamento para uma variedade de indicações, incluindo doença inflamatória. Nenhum destes documentos especificamente descreve os compostos de fluoroalilamina de fórmula (I) de acordo com a presente invenção.

[0049] Anticorpos anti-LOX e anti-LOXL2 têm sido descritos no documento US 2009/0053224 com métodos para aplicações diagnósticas e terapêuticas. Anticorpos anti-LOX e anti-LOXL2 podem ser usados para identificar e tratar condições como condição fibrótica, angiogênese, ou para prevenir uma transição de um estado de célula epitelial para um estado de célula mesenquimal: US 2011/0044907.

[0050] Os documentos WO 2017/136871 e WO 2017/136870 descrevem inibidores de lisil-oxidases derivados de haloalilamina-indol e de haloalilamina-azaindol e usos dos mesmos.

[0051] O documento WO 2018/157190 descreve inibidores de lisil- oxidases derivados de haloalilamina-pirazol e usos dos mesmos.

[0052] Os documentos WO 2017/141049 e WO 2019/073251 descrevem famílias de derivados de metilamina e de derivados de homopiperazina ligados por ponte, respectivamente, como inibidores de lisil- oxidase e o uso deles no tratamento de câncer e de doenças associadas à fibrose.

[0053] Os documentos WO 2003/097612, WO 2006/053555, e US 2008/0293936 descrevem outra classe de inibidores de lisil-oxidase.

[0054] Os documentos WO 2018/048930, WO 2017/015221, WO 2017/003862, WO 2016/144702 e WO 2016/144703 descrevem outros inibidores de LOXL2.

SUMÁRIO

[0055] A presente invenção provê compostos de fluoroalilamina substituídos que inibem lisil-oxidase (LOX), lisil-oxidase-like2 (LOXL2) e outras isoenzimas lisil-oxidase. Surpreendentemente, a modificação de estruturas de 3-substituída-3-fluoroalil-amina previamente descritas tem resultado na verificação de novos compostos que são inibidores potentes das isoenzimas humanas LOX e LOXL. Além disso, certos destes compostos novos também inibem seletivamente certas isoenzimas LOX e LOXL com respeito às outras enzimas na família de amina-oxidases.

[0056] Um primeiro aspecto da invenção provê um composto de Fórmula I: Fórmula I ou um estereoisômero, sal farmaceuticamente aceitável, forma polimórfica, solvato, hidrato ou forma tautomérica do mesmo; em que: A é arila ou heteroarila; cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, deutério, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, 45 6 8 9 8 9 -S(O)2NR R , -S(O)2R , -NR C(O)R , e -NR S(O)2R ; em que cada C1- 6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, - CH2CF3 e -O-CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CH2O, CH2S(O)2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1-4alquila, -O-C1- 4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O-CF3; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1- 6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, - SO2CH3, -Ci-4alquila, -CKWquila, -CF3,-CH2CF3 e -O-CF3; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, OH, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, - 4 6 45 4 6 6 NR C(O)R , -S(O)2NR R , -NR S(O)2R e -S(O)2R ; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6.

[0057] Um segundo aspecto da invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com o primeiro aspecto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, e pelo menos um excipiente, carreador ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[0058] Um terceiro aspecto da invenção provê um método para inibir a atividade de amina-oxidase de qualquer uma de LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4 em um indivíduo que necessita da mesma, compreendendo administrar ao indivíduo eficaz de um composto de acordo com o primeiro aspecto da invenção, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou de um solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica de acordo com o segundo aspecto da invenção.

[0059] Um quarto aspecto da invenção provê um método para tratar uma condição associada a qualquer de uma proteína LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4, compreendendo administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto de acordo com o primeiro aspecto da invenção, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou de um solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica de acordo com o segundo aspecto da invenção.

[0060] Um quinto aspecto da invenção provê o uso de um composto de acordo com o primeiro aspecto da invenção, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou de um solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição associada a qualquer de uma proteína LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4.

[0061] Um sexto aspecto da invenção provê um composto de acordo com o primeiro aspecto da invenção, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de uma condição associada a qualquer de uma proteína LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4.

[0062] Em uma modalidade dos métodos e usos da presente invenção a condição é selecionada de fibrose, câncer e angiogênese.

[0063] É aqui considerada terapia de combinação na qual os métodos compreendem adicionalmente a coadministração de agentes terapêuticos adicionais que são usados para o tratamento de câncer, fibrose, angiogênese, inflamação, hipertensão, imunossupressão e condições metabólicas.

DEFINIÇÕES

[0064] As seguintes são algumas definições que podem ser úteis no entendimento da descrição da presente invenção. Estas são pretendidas como definições gerais e em nenhuma maneira não devem limitar o escopo da presente invenção àqueles termos apenas, mas são apresentadas para um melhor entendimento da seguinte descrição.

[0065] A não ser que o contexto exija de outro modo ou especificamente declare ao contrário, os números inteiros, etapas, ou elementos da invenção aqui citados(as) como números inteiros no singular, etapas no singular ou elementos no singular, evidentemente abrangem ambas as formas no singular e no plural dos números inteiros, etapas ou elementos citados(as).

[0066] Em todo este relatório descritivo, a não ser que o contexto exija de outro modo, a palavra “compreendem”, ou variações como “compreende” ou “compreendendo”, será(ão) entendida(s) para implicar a inclusão de uma etapa, elemento ou número inteiro citado(a) ou um grupo de etapas ou elementos ou números inteiros citado, mas não a exclusão de qualquer outra(o) etapa ou elemento ou número inteiro ou grupo de elementos ou números inteiros. Portanto, no contexto deste relatório descritivo, o termo “compreendendo” significa “incluindo principalmente, mas não necessariamente somente”.

[0067] Os versados na técnica reconhecerão que a invenção aqui descrita é suscetível a variações e modificações diferentes daquelas especificamente descritas. Deve ser entendido que a invenção inclui todas tais variações e modificações. A invenção também inclui todas as etapas, recursos, composições e compostos mencionados(as) ou indicados(as) neste relatório descritivo, individualmente ou coletivamente, e qualquer uma e todas as combinações ou quaisquer duas (dois) ou mais de ditas(os) etapas ou recursos.

[0068] Conforme aqui usado, o termo “alquila” inclui, dentro de seu significado, radicais hidrocarbonetos saturados de cadeia linear ou de cadeia ramificada monovalentes (“alquila”) e “divalentes” (“alquileno”) tendo de 1 a 6 átomos de carbono, por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. O grupo alquila de cadeia linear ou ramificada é ligado a qualquer ponto disponível para produzir um composto estável. Por exemplo, o termo alquila inclui, mas não se limita a, metila, etila, 1-propila, isopropila, 1-butila, 2- butila, isobutila, terc-butila, amila, 1,2-dimetilpropila, 1,1-dimetilpropila, pentila, isopentila, hexila, 4-metilpentila, 1-metilpentila, 2-metilpentila, 3- metilpentila, 2,2-dimetilbutila, 3,3-dimetilbutila, 1,2-dimetilbutila, 1,3- dimetilbutila, 1,2,2-trimetilpropila, 1,1,2-trimetilpropila, e similares.

[0069] O termo “alcoxila” ou “alquiloxila”, conforme aqui usado, refere-se aos grupos alquiloxila (isto é, O-alquila) de cadeia linear ou ramificada, em que a alquila é conforme definida acima. Exemplos de grupos alcoxilas incluem metoxila, etoxila, n-propoxila, e isopropoxila.

[0070] O termo “cicloalquila”, conforme aqui usado, inclui dentro de seu significado, análogos monocíclicos, bicíclicos, policíclicos ou fundidos saturados monovalentes (“cicloalquila”) e divalentes (“cicloalquileno”). No contexto da presente descrição o grupo cicloalquila pode ter de 3 a 10 átomos de carbono. Um análogo fundido de uma cicloalquila significa um anel monocíclico fundido em um grupo arila ou heteroarila no qual o ponto de ligação está na porção não aromática. Exemplos de cicloalquila e análogos fundidos da mesma incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo- hexila, ciclo-heptila, tetra-hidronaftila, deca-hidronaftila, indanila, adamantila e similares.

[0071] O termo “arila” ou variante como “arileno”, conforme aqui usado, refere-se aos análogos mononucleares, polinucleares, conjugados ou fundidos monovalentes (“arila”) e divalentes (“arileno”) de hidrocarbonetos aromáticos tendo de 6 a 10 átomos de carbono. Um análogo fundido de arila significa um grupo arila fundido em um grupo cicloalquila monocíclica ou heterociclila monocíclica no qual o ponto de ligação está na porção aromática. Exemplos de arila e análogos fundidos da mesma incluem fenila, naftila, indanila, indenila, tetra-hidronaftila, 2,3-di-hidrobenzofuranila, tetra- hidrobenzopiranila, 1,4-benzodioxanila, e similares. Uma “arila substituída” é uma arila que está independentemente substituída, com um ou mais, preferivelmente 1, 2 ou 3 substituintes, ligados a qualquer átomo disponível para produzir um composto estável.

[0072] O termo “alquilarila”, conforme aqui usado, inclui dentro de seu significado, radicais hidrocarbonetos mononucleares, polinucleares, conjugados e fundidos monovalentes (“arila”) e divalentes (“arileno”) ligados aos radicais alquilenos de cadeia linear ou ramificada, saturados, divalentes. Exemplos de grupos alquilarila incluem benzila.

[0073] O termo “heteroarila” e variantes como “grupo heteroaromático” ou “heteroarileno”, conforme aqui usado, inclui, dentro de seu significado, radicais heteroaromáticos mononucleares, polinucleares, conjugados e fundidos monovalentes (“heteroarila”) e divalentes (“heteroarileno”), tendo de 5 a 10 átomos, em que 1 a 4 átomos no anel, ou 1 a 2 átomos no anel, são heteroátomos independentemente selecionados de O, N, NH e S. Heteroarila é também pretendida para incluir S ou N oxidado, como sulfinila, sulfonila e N-óxido de um nitrogênio terciário de anel. Um átomo de carbono ou de nitrogênio é o ponto de ligação da estrutura de anel heteroarila de modo que um composto estável seja produzido. O grupo heteroaromático pode ser heteroaromático C1-9. Um análogo fundido de heteroarila significa um grupo heteroarila fundido em um grupo cicloalquila monocíclica ou heterociclila monocíclica no qual o ponto de ligação está na porção aromática. Exemplos de grupos heteroarilas e de análogos fundidos dos mesmos incluem pirazolila, piridila, oxazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, tetrazolila, triazinila, tienila, benzoxazolila, benzotiazolila, benzimidazolila, benzofuranila, benzotiofenila, furo(2,3-b)piridila, indolila, isoquinolila, imidazopiridila, pirimidinila, piridazinila, pirazinila, piridonila, fenantrolinila, quinolila, isoquinolinila, imidazolinila, tiazolinila, pirrolila, furanila, tiofenila, oxazolila, isoxazolila, isotiazolila, triazolila, e similares. “Heteroarila contendo nitrogênio” refere-se à heteroarila em que quaisquer heteroátomos são N. Uma “heteroarila substituída” é uma heteroarila que está independentemente substituída, com um ou mais, preferivelmente 1, 2 ou 3 substituintes, ligados a qualquer átomo disponível para produzir um composto estável.

[0074] O termo “heterociclila” e variantes como “heterocicloalquila”, conforme aqui usado, inclui dentro de seu significado, radicais hidrocarbonetos monocíclicos, bicíclicos, policíclicos ou fundidos monovalentes (“heterociclila”) e divalentes (“heterociclileno”), saturados ou parcialmente saturados (não aromáticos) tendo de 3 a 10 átomos no anel, em que de 1 a 4, ou de 1 a 2, átomos no anel são heteroátomos independentemente selecionados de O, N, NH, ou S, SO ou SO2, em que o ponto de ligação pode ser carbono ou nitrogênio. Um análogo fundido de heterociclila significa um heterociclo monocíclico fundido em um grupo arila ou heteroarila em que o ponto de ligação é na porção não aromática. O grupo heterociclila pode ser heterociclila C3-8. O grupo heterocicloalquila pode ser heterociclila C3-6. O grupo heterociclila pode ser heterociclila C3-5. Exemplos de grupos heterociclilas e análogo fundidos dos mesmos incluem pirrolidinila, tiazolidinila, piperidinila, piperazinila, imidazolidinila, 2,3-di-hidrofuro(2,3- b)piridila, benzoxazinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, di- hidroindolila, quinuclidinila, azetidinila, morfolinila, tetra-hidrotiofenila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, e similares. O termo também inclui anéis monocíclicos parcialmente insaturados que são não aromáticos, como 2- ou 4-piridonas ligadas mediante o nitrogênio ou as uracilas N-substituídas.

[0075] O termo “halogênio” ou variantes como “haleto” ou “halo”, conforme aqui usado, refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo.

[0076] O termo “heteroátomos” ou variantes como “hetero-” ou “heterogrupo”, conforme aqui usado, refere-se a O, N, NH e S.

[0077] Em geral, “substituído” refere-se a um grupo orgânico, conforme aqui definido (por exemplo, um grupo alquila) em que uma ou mais ligações a um átomo de hidrogênio contido no mesmo estão substituídas por uma ligação a átomos de não hidrogênio ou de não carbono. Os grupos substituídos também incluem grupos em que uma ou mais ligações a um átomo de carbono(s) ou de hidrogênio(s) estão substituídas por uma ou mais ligações, incluindo ligações duplas ou triplas, a um heteroátomo. Portanto, um grupo substituído estará substituído com um ou mais substituintes, a não ser que seja especificado de outro modo. Em algumas modalidades, um grupo substituído está substituído com 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 substituintes.

[0078] O termo “opcionalmente substituído”, conforme aqui usado, significa que o grupo ao qual este termo se refere pode estar não substituído, ou pode estar substituído com um ou mais grupos independentemente selecionados de alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, heterocicloalquila, halo, haloalquila, hidroxila, hidroxialquila, alcoxila, tioalcoxila, alqueniloxila, haloalcoxila, NO2, NH(alquila), N(alquila)2, alquilamino, dialquilamino, acila, alquenoíla, alquinoíla, acilamino, diacilamino, aciloxila, alquilsulfonila, alquilsulfoniloxila, sulfonamido, heterocicloxila, heterocicloamino, halo-heterocicloalquila, alquilsulfenila, alquilcarboniloxila, grupos contendo fósforo como fosfono e fosfinila, arila, heteroarila, alquilarila, aralquila, alquil-heteroarila, ciano, CO2H, CO2alquila, C(O)NH2, -C(O)NH(alquila), e -C(O)N(alquila)2. Os substituintes preferidos incluem halogênio, C1-C6alquila, C1-C6haloalquila, C1-C6alcoxila, hidroxi(C1- 6)alquila, C3-C6cicloalquila, C(O)OH, NHC(O)C1-C4alquila, C(O)C1-C4alquila, NH2, NHC1-C4alquila, N(C1-C4alquila)2, SO2(C1- C4alquila), OH e CN. Os substituintes particularmente preferidos incluem C1- 4alquila, C1-4alcoxila, SO2(C1-C4alquila), halogênio, OH, hidroxi(C1-3)alquila (por exemplo C(CH3)2OH), e C1-3haloalquila (por exemplo CF3, CH2CF3).

[0079] A presente invenção inclui em seu escopo todas as formas estereoisoméricas e isoméricas dos compostos aqui descritos, incluindo todos os isômeros diastereoméricos, racematos, enantiômeros e misturas dos mesmos. Também deve ser entendido que os compostos descritos pela Fórmula I podem estar presentes como isômeros E e Z, também conhecidos como isômeros cis e trans. Portanto, a presente descrição deve ser entendida para incluir, por exemplo as formas E, Z, cis, trans, (R), (S), (L), (D), (+), e/ou (-) dos compostos, conforme apropriado em cada caso. Se uma estrutura não tiver estereoisomerismo específico indicado, deve ser entendido que qualquer um dos e todos os isômeros possíveis são abrangidos. Os compostos da presente invenção abrangem todos os isômeros conformacionais. Os compostos da presente invenção podem também existir em uma ou mais formas tautoméricas, incluindo tanto tautômeros individuais quanto misturas de tautômeros. Também estão incluídos no escopo da presente invenção todos os polimorfos e formas cristalinas dos compostos aqui descritos.

[0080] A presente invenção inclui em seu escopo isótopos de átomos diferentes. Qualquer átomo não especificamente designado como um isótopo específico quer dizer que representa qualquer isótopo estável daquele átomo. Portanto, a presente descrição deve ser entendida para incluir os isótipos deutério e trítio de hidrogênio.

[0081] Todas as referências citadas neste pedido são especificamente incorporadas como referências cruzadas em suas totalidades. Referência a qualquer um de tais documentos não deve ser interpretada como uma admissão de que o documento forma parte do conhecimento geral comum ou é a técnica anterior.

[0082] No contexto deste relatório descritivo, o termo “administrar” e variações deste termo incluindo “administrado” e “administração”, inclui contatar, aplicar, distribuir ou prover um composto ou uma composição da invenção a um organismo, ou a uma superfície por um meio apropriado. No contexto deste relatório descritivo, o termo “tratamento”, refere-se a cada um e todos usos que remediam um estado de doença ou sintomas, previnem o estabelecimento de doença, ou diferentemente previnem, impedem, retardam, ou revertem a progressão de doença ou de outros sintomas indesejáveis em qualquer maneira seja ela qual for.

[0083] No contexto deste relatório descritivo, o termo “administração tópica” ou variações deste termo incluindo “aplicação tópica”, inclui em seu significado aplicar, contatar, distribuir ou prover um composto ou uma composição da invenção na pele, ou em regiões localizadas do corpo.

[0084] No contexto deste relatório descritivo, o termo “administração local” ou variações deste termo incluindo “aplicação local”, inclui em seu significado aplicar, contatar, distribuir ou prover um composto ou uma composição da invenção na pele, ou em regiões localizadas do corpo.

[0085] No contexto deste relatório descritivo, o termo “quantidade eficaz” inclui no seu significado uma quantidade suficiente, mas não tóxica de um composto ou de uma composição da invenção para prover um efeito desejado. Portanto, o termo “quantidade terapeuticamente eficaz” inclui no seu significado uma quantidade suficiente, mas não tóxica de um composto ou de uma composição da invenção para prover um efeito desejado. A quantidade exata exigida variará de indivíduo para indivíduo dependendo de fatores como a espécie sendo tratada, o sexo, a idade e a condição geral do indivíduo, a gravidade da condição sendo tratada, o agente específico sendo administrado, o modo de administração, e assim por diante. Portanto, não é possível especificar uma “quantidade eficaz” exata. Contudo, para qualquer dado caso, uma “quantidade eficaz” apropriada pode ser determinada por uma pessoa comumente versada na técnica usando apenas experimentação rotineira.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0086] Figuras 1(a) e 1(b) Representam curvas de sobrevida que comparam expressões gênicas altas e baixas em pacientes com adenocarcinoma pancreático baseado no conjunto de dados do TCGA. A. Expressão de gene de LOX. B. Expressão de gene de LOXL2.

[0087] Figuras 2(a-c) Representam bloqueio dependente de dose da atividade enzimática de lisil-oxidase pelos Compostos 1 e 33. A medição de atividade de lisil-oxidase comparada com o controle não tratado em tecidos de rato (a) orelha (24 horas após dose oral única a 10 e 30 mg/kg, de Composto 1); (b) orelha (4, 24, 48 e 120 horas após dose oral única de 30 mg/kg, de Composto 33) e; (c) aorta (dose oral única a 5, 10 ou 30 mg/kg, de Composto 33).

[0088] Figura 3(a) Mostra a redução em colágeno em tecido cicatricial de camundongo após lesão quando tratada com Composto 1 tópico.

[0089] Figura 3(b) Histologia mostra feixes de colágeno paralelos espessos em tecido cicatricial de controle.

[0090] Figura 3(c) Tecido tratado com o Composto 1 mostra densidade decrescida de feixes e estrutura mais ‘normal’ de colágeno.

[0091] Figuras 4(a-b) Mostram redução na atividade de LOX e redução de colágeno total após tratamento tópico diário durante 4 semanas com solução 3% de Composto 1 em comparação com o controle.

[0092] Figuras 4(c-f) Morfologia macroscópica mostra ferimentos similares no momento da lesão (c, controle; d, tratado) e no momento da eutanásia os ferimentos tratados parecem mais curados (e, controle, f tratado).

[0093] Figuras 4(g-h) Histologia mostra bandas de colágeno espessas em tecido cicatricial não tratado (destacado por setas, g). Isto parece estar reduzido em tecido tratado (h).

[0094] Figuras 5(a-e) Dados de crescimento de tumor do modelo de xenoenxerto ortotópico de câncer pancreático humano: Dados de eficiência. A. Diagrama do crescimento e da estratégia de tratamento. B. Monitoração in vivo de crescimento de tumor por imageamento bioluminescente. C. Sinal bioluminescente ex vivo da carga tumoral total. D. Sinal bioluminescente ex vivo do tumor primário. E. Sinal bioluminescente ex vivo da carga metastásica.

[0095] Figuras 6(a-c) Análise histológica de modelo de esclerose em pele de camundongo com tratamento tópico com o Composto 1. A. Escore de pele compósita. B. Escore médio de colágeno. C. Escore médio de LOX.

[0096] Figuras 7(a-e) Análise do baço de modelo de mielofibrose primária em camundongo (“GATA1-low”) tratado com o Composto 19. A. Coloração prata Gomori de baço. B. Peso de baço. C. Quantificação de fibrose de reticulina de baço. D. Imagem de coloração com H&E de baço. E. Quantificação dos megacariócitos no baço.

[0097] Figuras 8(a-d) Análise da medula óssea de modelo de mielofibrose primária em camundongo (“GATA1-low”) tratado com o Composto 19. A. Coloração de prata Gomori de medula óssea. B. Quantificação de fibrose de reticulina de medula óssea. C. Imagem de coloração com H&E da medula óssea. D. Quantificação dos megacariócitos na medula óssea.

[0098] Figura 9 Representa as alterações na área de fibrose em um modelo de OUU em camundongo.

[0099] Figura 10 Representa a capacidade do Composto 33 para reduzir a fibrose pulmonar induzida por bleomicina (escore de Ashcroft) e ganho de peso.

[00100] Figuras 11(a-d) Representam a capacidade do Composto 33 para reduzir a metástase associada à fibrose em um modelo de fibrose de fígado induzida por CCl4 em camundongo com linhagem de célula de câncer de mama ortotopicamente injetada (4t). (a) Esquema do planejamento do estudo; (b) Medição clínica de fibrose de fígado; (c) Concentração de ligações cruzadas no fígado; (d) Medição de metástase de fígado.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[00101] A presente invenção refere-se aos derivados de fluoroalilamina substituídos que podem inibir lisil-oxidase (LOX), lisil-oxidase-like2 (LOXL2) e outras isoenzimas lisil-oxidase. Em particular a presente invenção refere-se aos derivados de fluoroalilamina substituídos contendo um grupo conector sulfona.

[00102] Em particular a presente invenção refere-se aos compostos de Fórmula I: ou um estereoisômero, sal farmaceuticamente aceitável, forma polimórfica, solvato, hidrato ou forma tautomérica do mesmo; em que: A é arila ou heteroarila; cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, deutério, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, 45 6 8 9 8 9 -S(O)2NR R , -S(O)2R , -NR C(O)R , e -NR S(O)2R ; em que cada C1- 6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, - CH2CF3 e -O-CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CH2O, CH2S(O)2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado do selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3- 7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1- 4alquila, -CKWquila, -CF3, -CH2CF3 e -O-CF3; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1- 6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -CH, - SC2CH3, -Ci-4alquila, -C-Ci-4alquila, -CF3,-CH2CF3 e -C-CF3; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -CH, -C1-4alquila, -C-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -C-CF3; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, - CH, C1-6alquila, C-C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(C)CR3, -C(C)NR4R5, - 4 6 45 4 6 6 NR C(C)R , -S(C)2NR R , -NR S(C)2R e -S(C)2R ; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -CH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -CH, -C1-4alquila, -C-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -C-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6.

[00103] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, A é selecionado de arila e heteroarila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, A é selecionado a partir do grupo consistindo em fenila, naftila, piridinila, quinolinila, benzotiazolila e indolila. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, A é selecionado a partir do grupo consistindo em. Em ainda uma outra modalidade de compostos da presente invenção, A é selecionado a partir do grupo consistindo em Em uma outra modalidade, A é selecionado a partir do grupo consistindo em Em ainda uma outra modalidade, A é Em outra modalidade, A é fenila. Em uma outra modalidade, A é heteroarila.

[00104] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, deutério, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, -S(O)2R6, - NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, - SO2CH3, -Ci-4alquila, -CKWquila, -CF3, -CH2CF3 e -O-CF3. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em -X-R2, Ci-6alquila, Ci- 6haloalquila, -C(C)CR3, -C(C)NR4R5, -S(C)2NR4R5, -S(C)2R6. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, cada Ri é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, Ci-6alquila, Ci-6haloalquila, e -S(C)2R6. Em uma modalidade de compostos da presente invenção, pelo menos um de Ri é X-R2. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, um de Ri é X-R2.

[00105] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em C, CH2, CCH2, CH2C, CH2S(C)2, CCNH e NHCC. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em C, CH2, CCH2, CCNH e NHCC. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em C, CCH2 e CCNH. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em C, CH2 e CCH2. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em CCNH e NHCC. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, X é C. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, X é CCH2. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, X é CCNH.

[00106] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila onde cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em arila e cicloalquila onde cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 é cicloalquila onde cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 é arila opcionalmente substituída com um ou mais R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 é fenila substituída com um R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 é adamantila ou fenila onde cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7. Em outra modalidade, R2 é adamantila ou fenila opcionalmente substituída com -S(O)2NR4R5. Em uma outra modalidade R2 é adamantila. Em outra modalidade, R2 é fenila opcionalmente substituída com -S(O)2NR4R5.

[00107] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R2 está substituído com um R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 está substituído com dois R7. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 está substituído com três R7. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R2 está substituído com quatro ou cinco R7.

[00108] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3- 7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3,- CH2CF3 e -O-CF3. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é hidrogênio. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é C1-6alquila ou C3-7cicloalquila. Em ainda uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é hidrogênio ou C1- 6alquila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é C1- 6alquila. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é metila ou etila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, metila e etila.

[00109] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3- 7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1- 4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3,-CH2CF3 e -O-CF3. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C1-6alquila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são hidrogênio. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são C1- 6alquila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são ambos metila. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são ambos isopropila. Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R4 é hidrogênio e R5 é isopropila. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C3-7cicloalquila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 é hidrogênio e R5 é C1-6alquila. Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R4 é hidrogênio e R5 é metila. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R4 é hidrogênio e R5 é C3-7cicloalquila.

[00110] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membros do anel. Em uma outra modalidade, R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo 1 heteroátomo adicional como membros do anel. Em outra modalidade, R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo 0 heteroátomo adicional como membros do anel.

[00111] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3. Em outra modalidade, R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila. Em outra modalidade, R6 é C1-6alquila. Em uma outra modalidade, R6 é C3-7cicloalquila.

[00112] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, C1-6alquila, O- C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -NR4C(O)R6, -S(O)2NR4R5, -NR4S(O)2R6 e -S(O)2R6; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5 e -S(O)2R6. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5 e - S(O)2R6. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R7 é -S(O)2NR4R5. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R7 é -S(O)2N(CH3)2.

[00113] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R8 hidrogênio ou C1-6alquila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R8 é hidrogênio. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, R8 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, metila e etila. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, R8 é hidrogênio ou metila.

[00114] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3. Em outra modalidade, R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila. Em outra modalidade, R9 é C1-6alquila. Em uma outra modalidade, R9 é C3-7cicloalquila.

[00115] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel. Em uma outra modalidade, R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo 1 heteroátomo adicional como membro do anel. Em outra modalidade, R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo 0 heteroátomo adicional como membro do anel.

[00116] Em uma modalidade de compostos da presente invenção, n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 0. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 0, 1 ou 2. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 1, 2 ou 3. Em outra modalidade de compostos da presente invenção n é 1 ou 2. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 1. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 2. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 3. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 4. Em uma outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 5. Em outra modalidade de compostos da presente invenção, n é 6.

[00117] Em uma modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Ia: ou um estereoisômero, sal farmaceuticamente aceitável, forma polimórfica, solvato, hidrato ou forma tautomérica do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila e cicloalquila, heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CH2O, CH2S(O)2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a i heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, Ci-6alquila, O-Ci-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, - NR4C(O)R6, -S(O)2NR4R5, -NR4S(O)2R6 e -S(O)2R6; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1, 2 ou 3.

[00118] Em uma modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Ib: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CH2O, CH2S(O)2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, - 4 6 45 4 6 6 NR C(O)R , -S(O)2NR R , -NR S(O)2R e -S(O)2R ; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1 ou 2.

[00119] Em uma modalidade de compostos de Fórmula Ib da invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, OCH2 e CONH; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em adamantila e fenila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C1-6alquila; R7 é -S(O)2NR4R5; e n é 0.

[00120] Em outra modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Ic: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, -O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CH2O, CH2S(O)2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, - 4 6 45 4 6 6 NR C(O)R , -S(O)2NR R , -NR S(O)2R e -S(O)2R ; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1 ou 2.

[00121] Em uma modalidade de compostos de Fórmula Ic da invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em OCH2 e CONH; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em adamantila e fenila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C1-6alquila; R7 é -S(O)2NR4R5; e n é 0.

[00122] Em outra modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Id: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, CH2, OCH2, CONH e NHCO; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a i heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R7 é selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, - OH, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C3-7cicloalquila, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, - 4 6 45 4 6 6 NR C(O)R , -S(O)2NR R , -NR S(O)2R e -S(O)2R ; em que cada C1-6alquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio e -OH; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1 ou 2.

[00123] Em uma modalidade de compostos de Fórmula Id da invenção, X é selecionado a partir do grupo consistindo em OCH2 e CONH; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em adamantila e fenila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C1-6alquila; R7 é -S(O)2NR4R5; e n é 0.

[00124] Em outra modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Ie: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a i heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R8 é hidrogênio ou Ci-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada Ci-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a i heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, i ou 2.

[00125] Em outra modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula If: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a i heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; R8 é hidrogênio ou Ci-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em Ci-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada Ci-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; n é 0, i ou 2.

[00126] Em outra modalidade, a presente invenção também se refere aos compostos de Fórmula Ig: ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, -CN, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)2NR4R5, - S(O)2R6, -NR8C(O)R9, e -NR8S(O)2R9; em que cada C1-6alquila, arila, heteroarila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -SO2CH3, -Ci-4alquila, -O-Ci-4alquila, -CF3, -CH2CF3 e -O- CF3; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila e C3-7cicloalquila; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; R8 é hidrogênio ou C1-6alquila; R9 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila e C3-7cicloalquila; em que cada C1-6alquila e C3-7cicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, -OH, -C1-4alquila, -O-C1-4alquila, -CF3, -CH2CF3, e -O-CF3; ou R8 e R9 são combinados para formar um anel de 5 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; e n é 0, 1 ou 2: Em outra modalidade de compostos de Fórmula Ie, If e Ig da invenção, cada R1 é uma C1-6alquila e n é 0 ou 1.

[00127] Em outra modalidade de compostos de Fórmula I da invenção, cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, C1-6haloalquila, C1-6alquiloxila, C1-6haloalcoxila, -CN, 3 45 4 6 45 4 6 -C(O)OR , -C(O)NR R , -NR C(O)R , -S(O)2NR R , -NR S(O)2R e - S(O)2R6; R3 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1- 6alquila opcionalmente substituída e C3-7cicloalquila opcionalmente substituída; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, C1-6alquila opcionalmente substituída e C3- 7cicloalquila opcionalmente substituída; ou R4 e R5 quando ligados ao mesmo átomo de nitrogênio são combinados para formar um anel de 4 a 7 membros tendo de 0 a 1 heteroátomo adicional como membro do anel; R6 é selecionado a partir do grupo consistindo em C1-6alquila opcionalmente substituída, C3- 7cicloalquila opcionalmente substituída e C1-6haloalquila opcionalmente substituída; e n é 0, 1, 2 ou 3.

[00128] Em outra modalidade de compostos de Fórmula I da invenção, cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, C1-6haloalquila, e -S(O)2R6; R6 é C1-6alquila; e n é 0, 1 ou 2.

[00129] Em outra modalidade de compostos de Fórmula I da invenção, cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em cloro, flúor, metila, isopropila, OCH3, fenila e SO2CH3; e n é 1 ou 2.

[00130] Em uma outra modalidade de compostos de Fórmula I da rx invenção, A é e n é 0.

[00131] No contexto da presentedescrição, qualquer um(a) ou mais aspecto(s) ou modalidade(s) pode(m) ser combinados(as) com quaisquer outros(as) aspecto(s) ou modalidade(s).

[00132] Compostos exemplificadores de acordo com a presente invenção incluem os compostos apresentados na Tabela 2: Tabela 2

[00133] Em uma modalidade, o composto da presente invenção é selecionado a partir do grupo consistindo em e , ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em outra modalidade, o composto da presente invenção é ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma outra modalidade, o composto da presente invenção é ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00134] Em uma modalidade, o composto da presente invenção é selecionado a partir do grupo consistindo em e , ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em outra modalidade, o composto da presente invenção é ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma outra modalidade, o composto da presente invenção é ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Preparação de compostos de fórmula I

[00135] Os compostos de Fórmula I podem ser facilmente preparados por versados na técnica usando métodos e materiais conhecidos na técnica e com referência a livros-texto padrão, como “Advanced Organic Chemistry” por Jerry March (third edition, 1985, John Wiley and Sons) ou “Comprehensive Organic Transformations” por Richard C. Larock (1989, VCH Publishers).

[00136] Os Compostos de Fórmula I podem ser sintetizados conforme descrito abaixo. Os seguintes esquemas proveem uma visão geral de modalidades representativas não limitadoras da invenção. Os versados na técnica reconhecerão que análogos de Fórmula I, incluindo formas isoméricas diferentes, podem também ser preparados a partir de materiais de partida análogos.

Esquema 1:

[00137] A preparação de compostos descritos pela Fórmula Ib em que X é -OCH2- é descrita no Esquema 1 abaixo. O versado na técnica reconhecerá que os compostos descritos pelas Fórmulas Ic, Id, Ie, If e Ig podem ser preparados pela utilização de metodologias de síntese análogas com materiais de partida adequados. Esquema 1

[00138] P1 é um grupo funcional usado para proteger uma funcionalidade nitrogenada. Exemplos de P1 são grupos formadores de carbamato como o grupo terc-butiloxicarbonila (BOC), o grupo 9- fluorenilmetiloxi-carbonila (FMOC), e o grupo benziloxicarbonila (CBZ).

[00139] No Esquema 1 geral, o material de partida hidroxitiofenol substituído com R1 descrito pela Fórmula II pode ser obtido de fornecedores comerciais ou pode ser preparado por muitos métodos bem conhecidos na técnica. Embora haja muitas maneiras para realizar a reação descrita pelo Método A, um protocolo conveniente envolve a reação de compostos descritos pelas Fórmulas II e III com uma base como carbonato de potássio em um solvente como N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente durante várias horas. Após os métodos de extração e purificação padrão o produto produzido pela Fórmula IV pode ser obtido com bom rendimento e boa pureza.

[00140] Embora haja muitas maneiras para realizar a reação descrita pelo Método B, um protocolo conveniente envolve a reação de compostos descritos pelas Fórmulas IV e V (em que Y é um grupo de saída apropriado, como Br, I, OTs e OMs) com uma base como carbonato de potássio em um solvente como N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente durante várias horas. O produto descrito pela Fórmula VI pode ser recuperado por procedimentos de separação e purificação padrão.

[00141] Um protocolo conveniente para a conversão de compostos descritos pela Fórmula VI naqueles descritos pela Fórmula VII é o Método C que envolve o tratamento de uma solução de um composto descrito pela Fórmula VI e uma base como hidrogenocarbonato de sódio em um solvente como diclorometano com um agente oxidante como mCPBA (ácido 3- cloroperoxibenzoico) às temperaturas entre 0°C e a temperatura ambiente durante várias horas. O produto descrito pela Fórmula VII pode ser recuperado por procedimentos de separação e purificação padrão.

[00142] Há muitos procedimentos químicos, bem comprovados, para a desproteção dos compostos descritos pela Fórmula VII para os compostos descritos pela Fórmula Ib (Método D). Por exemplo se P1 é um grupo protetor BOC, os compostos descritos pela Fórmula VII podem ser tratados com uma substância ácida como cloreto de hidrogênio em um solvente como éter dietílico para fornecer os compostos descritos pela Fórmula Ib como os sais de cloridrato. Em geral, os compostos contendo grupo amino livre são convertidos em sais de adição de ácido para facilidade de manuseio e para estabilidade química aprimorada. Exemplos de sais de adição de ácido incluem mas não se limitam a sais de cloridrato, bromidrato, 2,2,2- trifluoroacetato e metanossulfonato. Esquema 2:

[00143] A preparação de compostos descritos pela Fórmula Ib em que X é -CONH- é descrita no Esquema 2 abaixo. O versado na técnica reconhecerá que os compostos descritos pelas Fórmulas Ic, Id, Ie, If e Ig podem ser preparados pela utilização de metodologias de síntese análogas com materiais de partida adequados. Esquema 2

[00144] No Esquema 2 geral, o material de partida ácido mercaptobenzoico substituído com R1 pode ser obtido de fornecedores comerciais ou pode ser preparado por muitos métodos bem conhecidos na técnica.

[00145] Os compostos descritos pela Fórmula XI podem ser preparados pela reação de um composto de ácido benzoico apropriadamente substituído (descrito pela Fórmula IX) com um composto de amina (Fórmula X) na presença de um agente de acoplamento adequado (como HATU) e uma base (como trietilamina) em um solvente como N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente durante várias horas (Método E). O produto descrito pela Fórmula XI pode ser recuperado por procedimentos de separação e purificação padrão. Esquema 3:

[00146] A preparação de compostos descritos pela Fórmula Ib em que X é -O- é descrita no Esquema 3 abaixo. O versado na técnica reconhecerá que os compostos descritos pelas Fórmulas Ic, Id, Ie, If e Ig podem ser preparados pela utilização de metodologias de síntese análogas com materiais de partida adequados. Esquema 3

[00147] No Esquema 3 geral, o material de partida hidroxitiofenol substituído com R1 pode ser obtido de fornecedores comerciais ou pode ser preparado por muitos métodos bem conhecidos na técnica.

[00148] Uma modificação da reação de Ullmann catalisada por cobre pode ser utilizada para acoplar os compostos descritos pelas Fórmulas IV e XIII (Método F). Há numerosas variantes deste tipo de reação descritas na literatura, como um exemplo sendo a modificação de Chan-Evans-Lam. Os compostos descritos pelas Fórmulas IV e XIII, na presença de piridina, podem ser dissolvidos em um solvente como diclorometano e então tratados com acetato de cobre (II) à temperatura ambiente durante várias horas. Após os métodos de extração e purificação padrão, o produto acoplado descrito pela Fórmula XIV pode ser obtido com bom rendimento e boa pureza. Esquema 4:

[00149] A preparação de compostos descritos pela Fórmula Ia é descrita no Esquema 4 abaixo. Esquema 4

[00150] No Esquema 4 geral, o material de partida tiol substituído com R1 pode ser obtido de fornecedores comerciais ou pode ser preparado por muitos métodos bem conhecidos pela pessoas versadas na técnica. Esquema 5:

[00151] A preparação de compostos descritos pela Fórmula Ia é descrita no Esquema 5 abaixo. Esquema 5

[00152] No Esquema 5 geral, o material de partida arilsulfinato substituído com R1 descrito pela Fórmula XVIII pode ser obtido de fornecedores comerciais ou pode ser preparado por muitos métodos bem conhecidos pelas pessoas versadas na técnica. Um protocolo conveniente para realizar a conversão descrita pelo Método E envolve a reação de compostos descritos pelas Fórmulas XVIII e III com uma base como carbonato de potássio em um solvente como N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente durante várias horas. Após os métodos de extração e purificação padrão o produto produzido pela Fórmula XVII pode ser obtido com bom rendimento e boa pureza

[00153] O versado na técnica reconhecerá que os compostos de Fórmula I onde A é uma heteroarila podem ser preparados por procedimentos análogos àqueles descritos acima.

[00154] Os isômeros cis/trans (E/Z) podem ser separados por técnicas convencionais bem conhecidas por versados na técnica, por exemplo, cromatografia e cristalização fracionada.

Usos terapêuticos e formulações terapêuticas

[00155] Outro aspecto da presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou estereoisômero do mesmo, junto com um diluente, excipiente ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.

[00156] A presente invenção também se refere ao uso dos compostos de Fórmula I em terapia, em particular para inibir os membros da família de lisil-oxidases, LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4. Em uma modalidade, a invenção provê a inibição seletiva de isoenzimas lisil-oxidases específicas. Em outra modalidade, a invenção provê a inibição simultânea de 2, 3 ou 4 isoenzimas LOX. As potências inibitórias relativas dos compostos podem ser determinadas pela quantidade necessária para inibir a atividade de amina-oxidases LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4 em uma variedade de maneiras, por exemplo, em um ensaio in vitro com proteína humana purificada ou recombinante ou com enzima não humana purificada ou recombinante, em ensaios de células que expressam a enzima normal de roedor, em ensaios de células que têm sido transfectadas com proteína humana, em testes in vivo em roedor e em outras espécies de mamíferos, e similares.

[00157] Em uma modalidade, os compostos da presente invenção são inibidores de longa duração dos membros da família de lisil-oxidases LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4. Em uma modalidade, os compostos da presente invenção são inibidores de longa duração da enzima LOX ou das enzimas LOX1-4 se a inibição continua a ser maior que 50% da atividade da enzima LOX ou da atividade das enzimas LOX1-4 após a concentração do composto ter sido reduzida para abaixo da CI50. Em uma modalidade, os compostos da presente invenção mostram inibição prolongada da enzima LOX ou das enzimas LOX1-4 durante um período de 24 horas. Em uma modalidade, os compostos da presente invenção são inibidores irreversíveis dos membros da família de lisil-oxidases LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4.

[00158] Consequentemente, um outro aspecto da invenção é direcionado para um método para inibir a atividade de amina-oxidase de qualquer uma de LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4 em um indivíduo que necessita da mesma, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, ou de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica do mesmo.

[00159] Em uma modalidade, a presente invenção é direcionada para um método para inibir a atividade de amina-oxidase de LOXL2. Em outra modalidade, a presente invenção é direcionada para a inibição da atividade de amina-oxidase de LOX e LOXL2. Em uma outra modalidade, a presente invenção é direcionada para um método para inibir a atividade de amina- oxidase de LOX.

[00160] Conforme previamente discutido, as enzimas LOX e LOXL1-4 são membros de uma grande família de amina-oxidases dependentes de flavina e dependentes de cobre, que inclui SSAO/VAP-1, monoamina- oxidase-B (MAO-B) e diamina-oxidase (DAO). Em uma modalidade, os compostos da presente invenção seletivamente inibem os membros da família de isoenzimas lisil-oxidases com respeito a SSAO/VAP-1, MAO-B, DAO e a outros membros da família de amina-oxidases.

[00161] A presente invenção também descreve métodos para usar os compostos descritos pela Fórmula I para inibir uma ou mais isoenzimas lisil- oxidases (LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4) em pacientes que sofrem de uma doença fibrótica, e métodos para tratar doenças fibróticas. Além disso, a presente invenção descreve métodos para usar os compostos descritos pela Fórmula I para inibir uma ou mais isoenzimas lisil-oxidases (LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4) em pacientes que sofrem de câncer, incluindo câncer metastásico, e métodos para tratar câncer e câncer metastásico.

[00162] Em um outro aspecto da invenção é provido um método para tratar uma condição associada a qualquer de uma proteína LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4, compreendendo administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto of Fórmula I, ou de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica do mesmo.

[00163] Em outro aspecto é provido um método para tratar uma condição modulada por qualquer uma de LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4, compreendendo administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto de Fórmula I, ou de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica do mesmo.

[00164] Em uma modalidade, dos métodos da presente invenção, a condição é selecionada do grupo consistindo em fibrose, câncer e angiogênese.

[00165] Em outro aspecto, a presente invenção provê um método para decréscimo da formação de matriz extracelular pelo tratamento de indivíduos humanos, animais de estimação e animais de fazenda com inibidores de isoenzimas lisil-oxidases derivados de fluoroalilamina de Fórmula I conforme aqui descrita.

[00166] Os métodos descritos acima são aplicáveis onde a condição é fibrose. Conforme aqui usada, “fibrose” inclui tais doenças como fibrose cística, fibrose pulmonar idiopática, fibrose de fígado, fibrose de rim, escleroderma, fibrose induzida por radiação, doença de Peyronie, formação de cicatriz e outras doenças onde a fibrose excessiva contribui para a patologia da doença.

[00167] Em uma modalidade, a fibrose é selecionada a partir do grupo consistindo em fibrose mediastinal, mielofibrose, fibrose retroperitoneal, fibrose massiva progressiva, fibrose sistêmica nefrogênica, Doença de Crohn, queloide, esclerose sistêmica, artrofibrose, contratura de Dupuytren, capsulite adesiva, fibrose do pâncreas, fibrose do intestino, fibrose de fígado, fibrose de pulmão, fibrose de rim, fibrose cardíaca, fibroestenose, fibrose cística, fibrose pulmonar idiopática, fibrose induzida por radiação, doença de Peyronie e escleroderma ou está associada à doença respiratória, cura e reparo de ferimento anormais, formação de cicatriz, formação de cicatriz hipertrófica/queloides, formação de cicatriz após cirurgia, parada cardíaca e todas as condições nas quais deposição excessiva ou aberrante de material fibroso está associada à doença, lesão, implantes ou cirurgia. Em outra modalidade, a fibrose é selecionada do grupo consistindo em fibrose de fígado, fibrose de pulmão, fibrose de rim, fibrose cardíaca, formação de cicatriz e escleroderma. Em uma outra modalidade a fibrose é selecionada do grupo consistindo em mielofibrose, esclerose sistêmica, fibrose de fígado, fibrose de pulmão, fibrose de rim, fibrose cardíaca e fibrose induzida por radiação.

[00168] Em uma modalidade, fibrose de rim inclui, mas não se limita a, neuropatia diabética, refluxo vesicoureteral, fibrose renal tubulointersticial, glomerulonefrite ou nefrite glomerular, incluindo glomerulosclerose segmentar focal e glomerulonefrite membranosa, nefropatia por IgA e glomerulonefrite mesangiocapilar. Em uma modalidade, fibrose de fígado resulta em cirrose, e inclui condições associadas à hepatite viral crônica, doença de fígado gorduroso não alcoólica (NAFLD), esteato-hepatite alcoólica (ASH), esteato-hepatite não alcoólica (NASH), cirrose biliar primária (PBC), cirrose biliar, e hepatite autoimune.

[00169] Em uma modalidade, a fibrose é selecionada de queloide, formação de cicatriz, formação de cicatriz ocular, formação de cicatriz hipertrófica, escleroderma, contratura de Dupuytren e doença de Peyronie. Em uma modalidade, a formação de cicatriz hipertrófica resulta de uma queimadura. Em uma modalidade, a formação de cicatriz hipertrófica é causada por lesões externas. Em outra modalidade, a formação de cicatriz hipertrófica é causada por procedimentos cirúrgicos. Em uma modalidade, o queloide é causado por lesões externas. Em outra modalidade, o queloide é causado por procedimentos cirúrgicos. Em uma outra modalidade, o queloide é um resultado de uma lesão na pele causada por acne, queimaduras, varicela, perfuração de orelha, arranhaduras, cortes cirúrgicos ou sítios de vacinação.

[00170] Os métodos descritos acima são também aplicáveis onde a condição é uma doença proliferativa por exemplo câncer. Em uma modalidade, o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de pulmão; câncer de mama; câncer colorretal; câncer anal; câncer pancreático; câncer de próstata; carcinoma ovariano; carcinoma hepático e de ducto biliar; carcinoma esofágico; mesotelioma, linfoma de não Hodgkin; carcinoma de bexiga; carcinoma do útero; glioma, glioblastoma, meduloblastoma, e outros tumores do cérebro; mielofibrose, câncer de rim; câncer da cabeça e do pescoço; câncer do estômago; mieloma múltiplo; câncer testicular; tumor de célula germinativa; tumor neuroendócrino; câncer cervical; câncer oral, carcinoides do trato gastrointestinal, da mama e de outros órgãos; carcinoma de células em anel de sinete; tumores mesenquimais incluindo sarcomas, fibrossarcomas, hemangioma, angiomatose, hemangiopericitoma, hiperplasia estromal pseudoangiomatosa, miofibroblastoma, fibromatose, tumor miofibroblástico inflamatório, lipoma, angiolipoma, tumor de célula granular, neurofibroma, schwannoma, angiossarcoma, lipossarcoma, rabdomiossarcoma, osteossarcoma, leiomioma ou um leiomiossarcoma.

[00171] Em uma modalidade, o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de mama, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, câncer de cérebro, câncer de próstata, carcinoma de célula renal, câncer de fígado, câncer de pulmão, câncer oral, cervical câncer e metástase tumoral.

[00172] Em uma modalidade, o câncer de pulmão inclui adenocarcinoma de pulmão, carcinoma de células escamosas, carcinoma de células grandes, carcinoma broncoalveolar, carcinoma de células não pequenas, carcinoma de células pequenas e mesotelioma. Em uma modalidade, câncer de mama inclui carcinoma ductal, carcinoma lobular, câncer de mama inflamatório, carcinoma de células claras, e carcinoma mucinoso. Em uma modalidade, câncer colorretal inclui câncer de cólon e câncer retal. Em uma modalidade, câncer pancreático inclui adenocarcinoma pancreático, carcinoma das células das ilhotas e tumores neuroendócrinos.

[00173] Em uma modalidade, carcinoma ovariano inclui carcinoma epitelial ovariano ou tumor epitelial-estromal de superfície incluindo tumor seroso, tumor endometrioide e cistadenocarcinoma mucinoso, e tumor estromal do cordão sexual. Em uma modalidade carcinoma hepático e de ducto biliar inclui carcinoma hepatocelular, colangiocarcinoma e hemangioma. Em uma modalidade, o carcinoma esofágico inclui adenocarcinoma esofágico e carcinoma de células escamosas. Em uma modalidade, o carcinoma do útero inclui adenocarcinoma endometrial, carcinoma seroso papilar uterino, carcinoma uterino de células claras, sarcomas e leiomiossarcomas uterinos e tumores Müllerianos mistos. Em uma modalidade, o câncer de rim inclui carcinoma de célula renal, carcinoma de células claras e tumor de Wilm. Em uma modalidade, o câncer da cabeça e do pescoço inclui carcinomas de células escamosas. Em uma modalidade, o câncer do estômago inclui adenocarcinoma de estômago e tumor estromal gastrointestinal.

[00174] Em uma modalidade, o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de cólon, câncer ovariano, câncer de pulmão, carcinoma esofágico, câncer de mama e câncer de próstata. Em uma modalidade, o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer pancreático, câncer de fígado, câncer de mama, mielofibrose e mesotelioma.

[00175] Em uma modalidade, os compostos da invenção podem ser para uso no tratamento de um câncer não metastásico. Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser para uso no tratamento de câncer metastásico. Em uma outra modalidade, os compostos da presente invenção podem ser para uso na prevenção ou no tratamento de metástase tumoral.

[00176] Os métodos descritos acima são aplicáveis em que a condição é angiogênese.

[00177] Em uma modalidade dos métodos da presente invenção, o indivíduo é selecionado a partir do grupo consistindo em humanos, animais de estimação e animais de fazenda. Em outra modalidade dos métodos da presente invenção, o indivíduo é um humano.

[00178] Um aspecto adicional da invenção provê o uso um composto de Fórmula I, ou de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição associada a qualquer de uma proteína LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4.

[00179] Outro aspecto da invenção provê o uso de um composto de Fórmula I, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou de um solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição mediada por qualquer uma de LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4.

Formulações farmacêuticas e/ou terapêuticas

[00180] Em outra modalidade da presente invenção, são providas composições compreendendo um composto tendo Fórmula I e pelo menos um excipiente, carreador ou diluente farmaceuticamente aceitável do mesmo. O(s) composto(s) de Fórmula I pode(m) também estar presente(s) como sais adequados, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis.

[00181] A frase “carreador farmaceuticamente aceitável” refere-se a qualquer carreador conhecido por versados na técnica como sendo adequado para o modo específico de administração. Em adição, os compostos podem ser formulados como o ingrediente farmaceuticamente ativo único na composição ou podem ser combinados com outros ingredientes ativos.

[00182] A frase “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se a qualquer sal que é apropriado para uso em uma aplicação farmacêutica. Por sal farmaceuticamente aceitável quer-se dizer aqueles sais que, no escopo do julgamento médico sensato, são adequados para uso em contato com os tecidos de humanos e de animais inferiores sem toxicidade, irritação, resposta alérgica indevidas e similares, e são proporcionais a uma relação de benefício/risco razoável. Os sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica e incluem sais de adição de ácido e sais de adição de base. Hemissais de ácidos e bases podem também ser formados. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de amina de ácidos minerais (por exemplo, cloridratos, bromidratos, sulfatos, e similares); e sais de amina de ácidos orgânicos (por exemplo, formiatos, acetatos, lactatos, malatos, tartaratos, citratos, ascorbatos, succinatos, maleatos, butiratos, valeratos, fumaratos, e similares).

[00183] Para os compostos de fórmula (I) tendo um sítio básico, os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados podem ser sais de adição de ácido. Por exemplo, os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados de tais compostos podem ser preparados por misturação de um ácido farmaceuticamente aceitável como ácido clorídrico, ácido metanossulfônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido benzoico, ácido fosfórico, ácido acético, ácido oxálico, ácido carbônico, ácido tartárico, ou ácido cítrico com os compostos da invenção.

[00184] S. M. Berge et al. descrevem em detalhe sais farmaceuticamente aceitáveis em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66:1-19. Os sais podem ser preparados in situ durante o isolamento final e a purificação final dos compostos da invenção, ou separadamente pela reação da função base livre com um ácido orgânico adequado. Os sais de adição de ácidos reativos incluem sais de acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, canforossulfonato, citrato, digliconato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, etanossulfonato, fumarato, glico-heptonato, glicerofosfato, hemissulfato, heptonato, hexanoato, bromidrato, cloridrato, 2-hidroxi- etanossulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, toluenossulfonato, undecanoato, valerato, e similares. Os sais de adição de base adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos. Exemplos incluem os sais de arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e zinco. Os sais de metais alcalinos ou de metais alcalinoterrosos representativos incluem de sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio, e similares, e também cátions não tóxicos de amônio, amônio quaternário, e amina, incluindo, mas não se limitando a, amônio, tetrametilamônio, tetraetilamônio, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina, trietanolamina e similares.

[00185] Os sais farmaceuticamente aceitáveis de compostos de fórmula I podem ser preparados por métodos bem conhecidos por versados na técnica, incluindo por exemplo: (i) pela reação do composto de fórmula I com o ácido desejado ou a base desejada; (ii) pela remoção de um grupo protetor, lábil a ácido ou à base, de um precursor adequado do composto de fórmula I ou pela abertura de anel de um precursor cíclico adequado, por exemplo, uma lactona ou lactama, usando o ácido desejado ou a base desejada; ou (iii) pela conversão de um sal do composto de fórmula I em outro composto pela reação com um ácido apropriado ou uma base apropriada ou por meio de uma coluna de troca iônica adequada.

[00186] As reações (i)-(iii) acima são tipicamente realizadas em solução. O sal resultante pode precipitar e ser coletado por filtração ou pode ser recuperado por evaporação do solvente. O grau de isolamento no sal resultante pode variar de completamente ionizado a quase não ionizado.

[00187] Dessa forma, por exemplo, os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos de acordo com a presente invenção podem ser preparados por misturação de um ácido farmaceuticamente aceitável como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido benzoico, ácido fosfórico, ácido acético, ácido carbônico, ácido tartárico, ou ácido cítrico com os compostos da invenção. Os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos da presente invenção por conseguinte incluem sais de adição de ácido.

[00188] Os compostos da invenção podem existir em ambas formas solvatadas e não solvatadas. O termo ‘solvato’ é aqui usado para descrever um complexo molecular compreendendo o composto da invenção e uma quantidade estequiométrica de uma ou mais moléculas de solvente farmaceuticamente aceitável, por exemplo, etanol. O termo ‘hidrato’ é utilizado quando o solvente é água.

[00189] Em uma modalidade, os compostos de Fórmula I podem ser administrados na forma de um “pró-fármaco”. A frase “pró-fármaco” refere- se a um composto que, após administração in vivo, é metabolizado por um(a) ou mais etapas ou processos ou diferentemente convertido na forma biologicamente, farmaceuticamente ou terapeuticamente ativa do composto. Os pró-fármacos podem ser preparados pela modificação de grupos funcionais presentes no composto em uma tal maneira que as modificações são clivadas, quer em manipulação rotineira quer in vivo, para um composto aqui descrito. Por exemplo, os pró-fármacos incluem os compostos da presente invenção nos quais um grupo hidroxila, amino, ou carboidrato está ligado a qualquer grupo que, quando administrado a um indivíduo mamífero, pode ser clivado para formar um grupo hidroxila livre, amino livre, ou ácido carboxílico livre, respectivamente. Os pró-fármacos representativos incluem, por exemplo, amidas, ésteres, enol-éteres, enol-ésteres, acetatos, formiatos, derivados de benzoato, e similares de grupos funcionais álcool e amina nos compostos da presente invenção. A forma de pró-fármaco pode ser selecionada de tais grupos funcionais como -C(O)alquila, -C(O)cicloalquila, - C(O)arila, -C(O)-arilalquila, C(O)heteroarila, -C(O)-heteroarilalquila, ou similares. Devido ao conhecimento de processos farmacodinâmicos e de metabolismo de fármaco in vivo, versados na técnica, logo que um composto farmaceuticamente ativo é conhecido, podem planejar pró-fármacos do composto (consulte, por exemplo, Nogrady (1985) Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, New York, páginas 388392).

[00190] As composições aqui compreendem um ou mais compostos aqui providos. Os compostos são, em uma modalidade, formulados em preparações farmacêuticas adequadas como soluções, suspensões, comprimidos, cremes, géis, comprimidos dispersáveis, pílulas, cápsulas, pós, formulações de liberação prolongada ou elixires, para administração oral ou em soluções ou suspensão estéreis para administração parenteral, e também como preparação de emplastro transdérmico e inaladores de pó seco. Em uma modalidade, os compostos descritos acima são formulados em composições farmacêuticas usando técnicas e procedimentos bem conhecidos na técnica (consulte, por exemplo, Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Fourth Edition 1985, 126).

[00191] Nas composições, as quantidades eficazes de um ou mais compostos ou de derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos é (são) misturado(s) com um carreador farmacêutico adequado. Os compostos podem ser derivados como os sais, ésteres, enol-éteres ou enol-ésteres, acetais, cetais, ortoésteres, hemiacetais, ácidos, bases, solvatos, hidratos ou pró-fármacos correspondentes antes da formulação, conforme descrito acima. As concentrações dos compostos nas composições são eficazes para distribuição de uma quantidade, após administração, que trata, previne, ou atenua um ou mais dos sintomas de doenças ou distúrbios a serem tratados(as).

[00192] Em uma modalidade, as composições são formuladas para administração de dosagem única. Para formular uma composição, a fração em peso de composto é dissolvida, suspensa, dispersa ou diferentemente misturada em um carreador selecionado em uma concentração eficaz de modo que a condição tratada seja aliviada, prevenida, ou um ou mais sintomas sejam atenuados.

[00193] O composto ativo é incluído no carreador farmaceuticamente aceitável em uma quantidade suficiente para exercer um efeito terapeuticamente útil na ausência de efeitos colaterais indesejáveis no paciente tratado. A concentração terapeuticamente eficaz pode ser determinada empiricamente por teste dos compostos em sistemas in vitro e in vivo aqui descritos e então extrapolada a partir do mesmo para dosagens para humanos.

[00194] A concentração de composto ativo na composição farmacêutica dependerá das taxas de absorção, distribuição, inativação e eliminação do composto ativo, das características físico-químicas do composto, do cronograma de dosagem, e da quantidade administrada e também de outros fatores conhecidos por versados na técnica.

[00195] Em uma modalidade, uma dosagem terapeuticamente eficaz deve produzir uma concentração sérica de ingrediente ativo de cerca de 0,1 ng/mL a cerca de 50 a 100 μg/mL. As composições farmacêuticas, em outra modalidade, devem prover uma dosagem de cerca de 0,001mg a cerca de 2000 mg de composto por quilograma de peso corporal por dia. As formas de dosagem farmacêuticas são preparadas para proverem de cerca de 0,01 mg, 0,1 mg ou 1 mg a cerca de 500 mg, 1000 mg ou 2000 mg, e em uma modalidade de cerca de 10 mg a cerca de 500 mg do ingrediente ativo ou de uma combinação de ingredientes essenciais por forma de dose unitária.

[00196] A dosagem pode ocorrer em intervalos de minutos, horas, dias, semanas, meses ou anos ou continuamente durante qualquer um destes períodos. As dosagens adequadas estão dentro da faixa de cerca de 0,1 ng por kg de peso corporal a 0,1 g por kg de peso corporal por dosagem. A dosagem está preferivelmente na faixa de 10 μg a 0,1 g por kg de peso corporal por dosagem, como está na faixa de 0,1 mg a 0,01g por kg de peso corporal por dosagem. Adequadamente, a dosagem está na faixa de 10 μg a 50 mg por kg de peso corporal por dosagem, como de 10 μg a 20 mg por kg de peso corporal por dosagem, ou de 10 μg a 10 mg por kg de peso corporal por dosagem. Outras dosagens adequadas podem estar na faixa de 0,1 mg a 25 mg por kg de peso corporal, incluindo de 0,1 mg a 10, 20, 50 ou 100 mg por kg de peso corporal por dosagem.

[00197] Alternativamente, uma dosagem eficaz pode ser de até cerca de 10 mg/cm2, ou ela pode ser de até cerca de 1 mg/cm2, cerca de 0,5 mg/cm2, cerca de 0,2 mg/cm2, cerca de 0,1 mg/cm2, cerca de 0,05 mg/cm2, cerca de 0,02 mg/cm2, ou cerca de 0,01 mg/cm2. Ela pode estar, por exemplo, na faixa de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 0,1 mg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 0,01 mg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 500 μg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 200 μg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 100 μg/cm2, de cerca de 10 μg/cm2 a cerca de 50 μg/cm2, de cerca de 20 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 50 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 100 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 200 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 500 μg/cm2 a cerca de 1 mg/cm2, de cerca de 50 μg/cm2 a cerca de 500 μg/cm2, de cerca de 50 μg/cm2 a cerca de 200 μg/cm2, de cerca de 100 μg/cm2 a cerca de 500 μg/cm2, ou de cerca de 200 μg/cm2 a cerca de 500 μg/cm2.

[00198] As quantidades de dosagem adequadas e os regimes de dosagem adequados podem ser determinados pelo médico clínico atendente e podem depender da condição específica sendo tratada, da gravidade da condição, e também da saúde geral, da idade e do peso do indivíduo.

[00199] Em casos nos quais os compostos apresentam solubilidade insuficiente, métodos para solubilização dos compostos podem ser usados. Tais métodos são conhecidos por versados na técnica, e incluem, mas não se limitam a, uso de cossolventes, como sulfóxido de dimetila (DMSO), uso de tensoativos como TWEEN®, dissolução em solução aquosa de bicarbonato de sódio, formulação dos compostos de interesse como nanopartículas, e similares. Derivados dos compostos, como os pró-fármacos dos compostos, podem também ser usados na formulação de composições farmacêuticas eficazes.

[00200] Após misturação ou adição do(s) composto(s), a mistura resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsão ou similares. A forma da mistura resultante depende de numerosos fatores, incluindo o modo pretendido de administração e a solubilidade do composto no carreador ou veículo selecionado. A concentração eficaz é suficiente para atenuar os sintomas da doença, do distúrbio ou da condição tratado(a) e pode ser empiricamente determinada.

[00201] As composições farmacêuticas são providas para administração a humanos e animais em formas de dosagem unitárias, como comprimidos, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, soluções ou suspensão parenterais estéreis, emulsões de óleo em água contendo quantidades adequadas dos compostos ou dos derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Os compostos farmaceuticamente terapeuticamente ativos e derivados dos mesmos são, em uma modalidade, formulados e administrados em formas de dosagem unitárias. O ingrediente ativo pode ser administrado uma vez, ou pode ser dividido em numerosas doses menores a serem administradas em intervalos de tempo. As formas de dose unitárias, conforme aqui usadas, referem-se às unidades fisicamente separadas adequadas para indivíduos humanos e animais e embaladas individualmente conforme é conhecido na técnica. Cada dose unitária contém uma quantidade predeterminada do composto terapeuticamente ativo suficiente para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação ao carreador, veículo ou diluente farmacêutico necessário. Exemplos de formas de dose unitárias incluem ampolas e seringas e comprimidos ou cápsulas individualmente embalados(as). As formas de dose unitárias podem ser administradas em frações ou múltiplos das mesmas. Uma forma de dose múltipla é uma pluralidade de formas de dosagem unitárias idênticas embaladas em um único recipiente a serem administradas em forma de dose unitária segregada. Exemplos de formas de dose múltiplas incluem frascos, garrafas de comprimidos ou cápsulas ou garrafas de quartilhos ou galões. Consequentemente, a forma de dose múltipla é um múltiplo de doses unitárias que não são segregadas em embalagem.

[00202] Métodos reais de preparação de tais formas de dosagem são conhecidos, ou serão evidentes, para versados na técnica, por exemplo, consulte “Remington's Pharmaceutical Sciences”, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 15th Edition, 1975.

[00203] Podem ser preparadas as formas de dosagem ou composições contendo o ingrediente ativo na faixa de 0,005% a 100% (% em peso) com o restante composto de carreador não tóxico. Os métodos para a preparação destas composições são conhecidos por versados na técnica. As composições consideradas podem conter 0,001% a 100% (% em peso) de ingrediente ativo, em uma modalidade 0,1 a 95% (% em peso), em outra modalidade 75 a 85% (% em peso).

Modos de administração

[00204] Modos convenientes de administração incluem injeção (subcutânea, intravenosa, etc.), administração oral, inalação, aplicação transdérmica, cremes ou géis ou pós tópicos, administração vaginal ou retal. Dependendo da rota de administração, a formulação e/ou o composto pode estar revestido(a) com um material para proteger o composto da ação de enzimas, ácidos e outras condições naturais que podem inativar a atividade terapêutica do composto. O composto pode também ser administrado parenteralmente ou intraperitonealmente.

Composições para administração oral

[00205] As formas de dosagem farmacêuticas orais são quer sólidas, géis quer líquidas. As formas de dosagem sólidas são comprimidos, cápsulas, grânulos, e pós a granel. Os tipos de comprimidos orais incluem comprimidos e pastilhas losângicas compactados(as), mastigáveis, que podem conter revestimento entérico, revestimento de açúcar ou revestimento de película. As cápsulas podem ser cápsulas de gelatina dura ou mole, enquanto que os grânulos e os pós podem ser providos na forma efervescente e não efervescente com a combinação de outros ingredientes conhecidos por versados na técnica.

Composições sólidas para administração oral

[00206] Em certas modalidades, as formulações são formas de dosagem sólidas, em uma modalidade, cápsulas ou comprimidos. Os comprimidos, as pílulas, as cápsulas, os trociscos e similares podem conter um ou mais dos seguintes ingredientes, ou compostos de uma natureza similar: um aglutinante; um lubrificante; um diluente; um agente de fluidez; um agente desintegrante; um agente colorante; um agente adoçante; um agente flavorizante; um agente umectante; um revestimento emético; e um revestimento de película. Exemplos de aglutinantes incluem celulose microcristalina, goma de tragacanto, solução de glicose, mucilagem de acácia, solução de gelatina, melaço, polivinilpirrolidina, povidona, crospovidonas, sacarose e pasta de amido. Os lubrificantes incluem talco, amido, estearato de magnésio ou estearato de cálcio, licopódio e ácido esteárico. Os diluentes incluem, por exemplo, lactose, sacarose, amido, caulim, sal, manitol e fosfato de dicálcio. Os agentes de fluidez incluem, mas não se limitam a, dióxido de silício coloidal. Os agentes desintegrantes incluem croscarmelose sódica, amidoglicolato de sódio, ácido algínico, amido de milho, amido de batata, bentonita, metilcelulose, ágar e carboximetilcelulose. Os agentes colorantes incluem, por exemplo, qualquer um dos corantes FD e C solúveis em água certificados aprovados, misturas dos mesmos; e corantes FD e C insolúveis em água suspensos sobre alumina hidrato. Os agentes adoçantes incluem sacarose, lactose, manitol e agentes adoçantes artificiais como sacarina, e qualquer um de numerosos agentes adoçantes secos por atomização. Os agentes flavorizantes incluem flavorizantes naturais de plantas como de frutas e blendas sintéticas de compostos que produzem uma sensação agradável, como, mas não limitados a hortelã-pimenta e salicilato de metila. Os agentes umectantes incluem monoestearato de propilenoglicol, mono-oleato de sorbitano, monolaurato de glicol dietilênico e éter laurílico de polioxietileno. Os revestimentos eméticos incluem ácidos graxos, gorduras, ceras, goma-laca, goma-laca amoniacal e acetatos ftalatos de celulose. Os revestimentos de película incluem hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose sódica, polietilenoglicol 4000 e acetato ftalato de celulose.

[00207] O composto, ou o derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, poderia ser provido em uma composição que o protege do ambiente ácido do estômago. Por exemplo, a composição pode ser formulada em um revestimento entérico que mantém sua integridade no estômago e libera o composto ativo no intestino. A composição pode também ser formulada em combinação com um antiácido ou outro tal ingrediente.

[00208] Quando a forma de dosagem unitária é uma cápsula, ela pode conter, em adição ao material do tipo acima, um carreador líquido como um óleo graxo. Em adição, as formas de dosagem unitárias podem conter vários outros materiais que modificam a forma física da unidade de dosagem, por exemplo, revestimentos de açúcar e outros agentes entéricos. Os compostos podem também ser administrados como um componente de um elixir, uma suspensão, um xarope, uma bolacha, umgranulado, uma goma de mascar ou similares. Um xarope pode conter, em adição aos compostos ativos, sacarose como um agente adoçante e certos conservantes, corantes e colorantes e flavorizantes.

[00209] Os materiais ativos podem também ser misturados com outros materiais ativos que não prejudicam a ação desejada, ou com materiais que suplementam a ação desejada, como antiácidos, bloqueadores H2, e diuréticos. O ingrediente ativo é um composto ou derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo conforme aqui descrito. Podem ser incluídas concentrações mais altas, até cerca de 98% em peso do ingrediente ativo.

[00210] Em todas modalidades, as formulações como comprimidos e cápsulas podem estar revestidas conforme é conhecido por versados na técnica com o propósito de modificar ou prolongar a dissolução do ingrediente ativo. Dessa forma, por exemplo, elas podem estar revestidas com um revestimento entericamente digerível convencional, como salicilato de fenila, ceras e acetato ftalato de celulose.

Composições líquidas para administração oral

[00211] As formas de dosagem orais líquidas incluem soluções aquosas, emulsões aquosas, suspensões aquosas, soluções e/ou suspensões reconstituídas a partir de grânulos não efervescentes e preparações efervescentes reconstituídas a partir de grânulos efervescentes. As soluções aquosas incluem, por exemplo, elixires e xaropes. As emulsões são quer de óleo em água quer de água em óleo.

[00212] As composições líquidas farmaceuticamente administráveis podem, por exemplo, ser preparadas por dissolução, dispersão, ou de outra forma por misturação de um composto ativo, conforme definido acima, e adjuvantes farmacêuticos opcionais em um carreador, como, por exemplo, água, solução salina, solução aquosa de dextrose, glicerol, glicóis, etanol, e similares, para assim formar uma solução ou suspensão. Se desejado, a composição farmacêutica a ser administrada pode também conter quantidades pequenas de substâncias auxiliares como agentes umectantes, agentes emulsificantes, agentes solubilizantes, agentes tamponantes de pH e similares, por exemplo, acetato, citrato de sódio, derivados de ciclodextrina, monolaurato de sorbitano, trietanolamina, acetato de sódio, oleato de trietanolamina, e outros tais agentes.

[00213] Os elixires são preparações hidroalcoólicas, adoçadas, transparentes. Os carreadores farmaceuticamente adequados usados em elixires incluem solventes. Os xaropes são soluções aquosas concentradas de um açúcar, por exemplo, sacarose, e podem conter um conservante. Uma emulsão é um sistema de duas fases no qual um líquido é disperso na forma de glóbulos pequenos em todo o outro líquido. Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis usados em emulsões são líquidos não aquosos, agentes emulsificantes e conservantes. As suspensões usam conservantes e agentes suspensores farmaceuticamente aceitáveis. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis usadas em grânulos não efervescentes, a serem reconstituídos em uma forma de dosagem oral líquida, incluem diluentes, adoçantes e agentes umectantes. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis usadas em grânulos efervescentes, a serem reconstituídos em uma forma de dosagem oral líquida, incluem ácidos orgânicos e uma fonte de dióxido de carbono. Agentes colorantes e flavorizantes são usados em todas as formas de dosagem acima.

[00214] Os solventes incluem glicerina, sorbitol, álcool etílico e xarope. Exemplos de conservantes incluem glicerina, metilparabeno e propilparabeno, ácido benzoico, benzoato de sódio e etanol. Exemplos de líquidos não aquosos utilizados em emulsões incluem óleo mineral e óleo de semente de algodoeiro. Exemplos de agentes emulsificantes incluem gelatina, acácia, tragacanto, bentonita, e tensoativos como mono-oleato de polioxietileno-sorbitano. Os agentes suspensores incluem carboximetilcelulose sódica, pectina, tragacanto, Veegum® e acácia. Os agentes adoçantes incluem sacarose, xaropes, glicerina e agentes adoçantes artificiais como sacarina. Os agentes umectantes incluem monoestearato de propilenoglicol, monolaurato de glicol dietilênico e éter laurílico de polioxietileno. Os ácidos orgânicos incluem ácido cítrico e ácido tartárico. As fontes de dióxido de carbono incluem bicarbonato de sódio e carbonato de sódio. Os agentes colorantes incluem qualquer um dos corantes FD e C solúveis em água certificados aprovados, e misturas dos mesmos. Os agentes flavorizantes incluem flavorizantes naturais extraídos de plantas como frutas, e blendas sintéticas de compostos que produzem sensação de sabor agradável.

[00215] Para uma forma de dosagem sólida, a solução ou suspensão, em, por exemplo, carbonato de propileno, óleos vegetais ou triglicerídeos, é, em uma modalidade, encapsulada em uma cápsula de gelatina. Para uma forma de dosagem líquida, a solução, por exemplo, por exemplo, em um polietilenoglicol, pode ser diluída com uma quantidade suficiente de um carreador líquido farmaceuticamente aceitável, por exemplo, água, para ser facilmente medida para administração.

[00216] Alternativamente, formulações orais líquidas ou semissólidas podem ser preparadas por dissolução ou dispersão do composto ativo ou do sal em óleos vegetais, glicóis, triglicerídeos, ésteres de propilenoglicol (por exemplo, carbonato de propileno) e outros tais carreadores, e encapsulação destas soluções ou suspensões em cascas de cápsula de gelatina dura ou mole. Outras formulações úteis incluem aquelas apresentadas nas Patentes Norte- Americanas n°s RE28.819 e 4.358.603. Resumidamente, tais formulações incluem, mas não se limitam, àquelas contendo um composto aqui provido, um mono(glicol alquilênico) dialquilado ou poli(glicol alquilênico) dialquilado, incluindo, mas não se limitando a, 1,2-dimetoximetano, diglima, triglima, tetraglima, éter dimetílico de polietilenoglicol-350, éter dimetílico de polietilenoglicol-550, éter dimetílico de polietilenoglicol-750 nos quais 350, 550 e 750 referem-se ao peso molecular médio aproximado do polietilenoglicol, e um ou mais antioxidantes, como hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisol butilado (BHA), galato de propila, vitamina E, hidroquinona, hidroxicumarinas, etanolamina, lecitina, cefalina, ácido ascórbico, ácido málico, sorbitol, ácido fosfórico, ácido tiodipropiônico e seus ésteres, e ditiocarbamatos.

[00217] Outras formulações incluem, mas não se limitam a, soluções alcoólicas aquosas incluindo um acetal farmaceuticamente aceitável. Os álcoois usados nestas formulações são quaisquer solventes miscíveis em água farmaceuticamente aceitáveis tendo um ou mais grupos hidroxila, incluindo, mas não se limitando a, propilenoglicol e etanol. Os acetais incluem, mas não se limitam a, acetais di(alquílicos inferiores) de aldeídos alquílicos inferiores como acetal dietílico de acetaldeído.

Injetáveis, Soluções e Emulsões

[00218] A administração parenteral, em uma modalidade distinguida por injeção, quer subcutaneamente, intramuscularmente quer intravenosamente é também aqui considerada. Os injetáveis podem ser preparados em formas convencionais, quer como soluções líquidas ou suspensões líquidas, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão em líquido antes da injeção, quer como emulsões. Os injetáveis, as soluções e as emulsões também contêm um ou mais excipientes. Os excipientes adequados são, por exemplo, água, solução salina, dextrose, glicerol ou etanol. Em adição, se desejado, as composições farmacêuticas a serem administradas podem também conter quantidades pequenas de substâncias auxiliares não tóxicas como agentes umectantes ou emulsificantes, agentes tamponantes de pH, estabilizantes, agentes intensificadores de solubilidade, e outros tais agentes, como por exemplo, acetato de sódio, monolaurato de sorbitano, oleato de trietanolamina e ciclodextrinas.

[00219] A implantação de um sistema de liberação lenta ou de liberação prolongada, de modo que um nível constante de dosagem seja mantido é também aqui considerada. Resumidamente, um composto aqui provido é dispersado em uma matriz interna sólida, por exemplo, poli(metacrilato de metila), poli(metacrilato de butila), poli(cloreto de vinila) plasticizado ou não plasticizado, náilon plasticizado, poli(tereftalato de etileno) plasticizado, borracha natural, poli-isopreno, poli-isobutileno, polibutadieno, polietileno, copolímeros de etileno-acetato de vinila, borrachas de silicone, polidimetilsiloxanos, copolímeros de carbonato de silicone, polímeros hidrofílicos como hidrogéis de ésteres de ácido acrílico e ácido metacrílico, colágeno, poli(álcool vinílico) reticulado e poli(acetato de vinila) reticulado parcialmente hidrolisado, que é circundado por uma membrana polimérica externa, por exemplo, polietileno, polipropileno, copolímeros de etileno/propileno, copolímeros de etileno/acrilato de etila, copolímeros de etileno/acetato de vinila, borrachas de silicone, polidimetilsiloxanos, borracha de neoprene, polietileno clorado, poli(cloreto de vinila), copolímeros de cloreto de vinila com acetato de vinila, cloreto de vinilideno, etileno e propileno, poli(tereftalato de etileno) ionomérico, borracha butílica, borrachas de epicloridrina, copolímero de etileno/álcool vinílico, terpolímero de etileno/acetato de vinila/álcool vinílico, e copolímero de etileno/viniloxietanol, que é insolúvel em fluidos corporais. O composto se difunde através da membrana polimérica externa em uma etapa de controle de taxa de liberação. A percentagem de composto ativo contida em tais composições parenterais é elevadamente dependente da natureza específica do mesmo, e também da atividade do composto e das necessidades do indivíduo.

[00220] A administração parenteral das composições inclui administrações intravenosa, subcutânea e intramuscular. As preparações para a administração parenteral incluem soluções estéreis prontas para injeção, produtos solúveis secos estéreis, como pós liofilizados, prontos para serem combinados com um solvente imediatamente antes do uso, incluindo comprimidos hipodérmicos, suspensões estéreis prontas para injeção, produtos insolúveis secos estéreis prontos para serem combinados com um veículo antes do uso e emulsões estéreis. As soluções podem ser quer aquosas quer não aquosas.

[00221] Se administrados intravenosamente, os carreadores adequados incluem solução salina fisiológica ou solução salina tamponada com fosfato (PBS), e soluções contendo agentes espessantes e solubilizantes, como glicose, polietilenoglicol, poli(propilenoglicol) e misturas dos mesmos.

[00222] Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis usados em preparações parenterais incluem veículos aquosos, veículos não aquosos, agentes antimicrobianos, agentes isotônicos, agentes tamponantes, antioxidantes, anestésicos locais, agentes suspensores e dispersantes, agentes emulsificantes, agentes sequestrantes ou quelantes e outras substâncias farmaceuticamente aceitáveis.

[00223] Exemplos de veículos aquosos incluem Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção Isotônica de Dextrose, Injeção de Água Estéril, Injeção de Lactato de Ringer e Dextrose. Veículos parenterais não aquosos incluem óleos fixos de origem vegetal, azeite, óleo de semente de algodoeiro, óleo de milho, óleo de gergelim e óleo de amendoim. Agentes antimicrobianos em concentrações bacteriostáticas e fungistáticas, que precisam ser adicionados em preparações parenterais embaladas em recipientes de doses múltiplas, incluem fenóis ou cresóis, mercuriais, álcool benzílico, clorobutanol, ésteres metílico e propílico de ácido p-hidroxibenzoico, timerosal, cloreto de benzalcônio e cloreto de benzetônio. Os agentes isotônicos incluem cloreto de sódio e dextrose. Os agentes tamponantes incluem fosfato e citrato. Os antioxidantes incluem bissulfato de sódio. Os anestésicos locais incluem cloridrato de procaína. Os agentes suspensores e dispersantes incluem carboximetilcelulose sódica, hidroxipropilmetilcelulose e polivinilpirrolidona. Os agentes emulsificantes incluem Polissorbato80 (TWEEN®80). Um agente sequestrante ou quelante de íons metálicos inclui EDTA. Os carreadores farmacêuticos podem também incluir álcool etílico, polietilenoglicol e propilenoglicol para veículos miscíveis em água; e hidróxido de sódio, ácido clorídrico, ácido cítrico ou ácido láctico para ajuste de pH.

[00224] A concentração do composto farmaceuticamente ativo é ajustada de modo que uma injeção proveja uma quantidade eficaz para produzir o efeito farmacológico desejado. A dose exata depende da idade, do peso e da condição do paciente ou do animal conforme é conhecido na técnica.

[00225] As preparações parenterais de dose unitária são embaladas em uma ampola, um frasco ou uma seringa com uma agulha. Todas as preparações para administração parenteral precisam ser estéreis, conforme é conhecido e praticado na técnica.

[00226] Ilustrativamente, infusão intravenosa ou intra-arterial de uma solução aquosa estéril contendo um composto ativo é um modo eficaz de administração. Outra modalidade é uma solução ou suspensão aquosa ou oleosa estéril contendo um material ativo injetada conforme a necessidade para produzir o efeito farmacológico desejado.

[00227] Os injetáveis são planejados para administrações local e sistêmica. Em uma modalidade, uma dosagem terapeuticamente eficaz é formulada para obter uma concentração de pelo menos cerca de 0,1% p/p até cerca de 90% p/p ou mais, em certas modalidades maior que 1% p/p de composto ativo no(s) tecido(s) tratado(s).

[00228] O composto pode ser suspenso em forma micronizada ou outra forma adequada ou pode ser derivado para produzir um produto ativo mais solúvel ou para produzir um pró-fármaco. A forma da mistura resultante depende de numerosos fatores, incluindo o modo pretendido de administração e a solubilidade do composto no carreador ou veículo selecionado. A concentração eficaz é suficiente para atenuar os sintomas da condição e pode ser empiricamente determinada.

Pós liofilizados

[00229] De interesse aqui são também os pós liofilizados, que podem ser reconstituídos para a administração como soluções, emulsões e outras misturas. Eles também podem ser reconstituídos e formulados como sólidos ou géis.

[00230] O pó liofilizado, estéril é preparado por dissolução de um composto aqui provido, ou de um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em um solvente adequado. O solvente pode conter um excipiente que aprimora a estabilidade ou outro componente farmacológico do pó ou solução reconstituída, preparada a partir do pó. Os excipientes que podem ser usados incluem, mas não se limitam a, dextrose, sorbitol, frutose, xarope de milho, xilitol, glicerina, glicose, sacarose ou outro agente adequado. O solvente também pode conter um agente tamponante, como citrato, fosfato de sódio ou de potássio ou outro tal agente tamponante conhecido por versados na técnica, em uma modalidade, cerca de pH neutro. Filtração estéril subsequente da solução seguida por liofilização sob condições padrão conhecidas por versados na técnica provê a formulação desejada. Em uma modalidade, a solução resultante será dividida em partes proporcionais em frascos para liofilização. Cada frasco conterá uma dosagem única ou dosagens múltiplas do composto. O pó liofilizado pode ser armazenado sob condições apropriadas, como a cerca de 4°C até a temperatura ambiente.

[00231] A reconstituição deste pó liofilizado com água para injeção provê uma formulação para uso em administração parenteral. Para a reconstituição, o pó liofilizado é adicionado à água estéril ou a outro carreador estéril adequado. A quantidade exata depende do composto selecionado. Tal quantidade pode ser empiricamente determinada.

Administração tópica

[00232] As misturas tópicas são preparadas conforme descrito para as administrações local e sistêmica. A mistura resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsões ou similares e são formuladas como cremes, géis, pomadas, emulsões, soluções, elixires, loções, suspensão, tinturas, pastas, espumas, aerossóis, irrigações, borrifos, supositórios, bandagens, emplastros dérmicos ou quaisquer outras formulações adequadas para administração tópica.

[00233] Os compostos ou os derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser formulados como aerossóis para aplicação tópica, como por inalação. Estas formulações para administração ao trato respiratório podem estar na forma de um aerossol ou uma solução para um nebulizador, ou como um pó microfino para insuflação, sozinho ou em combinação com um carreador inerte como lactose. Em um tal caso, as partículas da formulação terão, em uma modalidade, diâmetros menores que 50 mícrones, em uma modalidade, menores que 10 mícrones.

[00234] Os compostos podem ser formulados para administração local ou tópica na pele e membranas mucosas, como no olho, na forma de géis, cremes, loções e para a aplicação no olho ou para aplicação intracisternal ou intraespinhal. A administração tópica é considerada para distribuição transdérmica e também para administração nos olhos ou na mucosa, ou para terapias de inalação. Soluções nasais do composto ativo sozinho ou em combinação com outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem também ser administradas.

[00235] Estas soluções, particularmente aquelas pretendidas para uso oftálmico, podem ser formuladas como soluções isotônicas 0,01% a 10% (% em volume), pH de cerca de 5 a 7, com sais apropriados.

Composições para outras rotas de administração

[00236] Outras rotas de administração, como emplastros transdérmicos, incluindo dispositivos iontoforéticos e eletroforéticos, administrações vaginal e retal, são também aqui consideradas.

[00237] Emplastos transdérmicos, incluindo dispositivos iontoforéticos e eletroforéticos, são bem conhecidos por versados na técnica. Por exemplo, formas de dosagem farmacêuticas para administração retal são supositórios retais, cápsulas e comprimidos para efeito sistêmico. Os supositórios retais conforme aqui usados significam corpos sólidos para inserção dentro do reto que se dissolvem ou amolecem à temperatura corporal liberando um ou mais ingredientes farmacologicamente ou farmaceuticamente ativos. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis utilizadas em supositórios retais são bases ou veículos e agentes para aumentar o ponto de dissolução. Exemplos de bases incluem manteiga de cacau (óleo de theobroma), glicerina-gelatina, carbowax® (polioxietilenoglicol) e misturas apropriadas de monoglicerídeos, diglicerídeos e triglicerídeos de ácidos graxos. Combinações das várias bases podem ser usadas. Os agentes para aumentar o ponto de dissolução de supositórios incluem espermacete e cera. Os supositórios retais podem ser preparados quer pelo método de compressão quer por moldagem. O peso de um supositório retal, em uma modalidade, é cerca de 2 a 3 gramas.

[00238] Os comprimidos e as cápsulas para administração retal são fabricados usando a mesma substância farmaceuticamente aceitável e pelo mesmo método como para as formulações para administração oral.

Formulações alvejadas

[00239] Os compostos aqui providos, ou os derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem também ser formulados para serem direcionados para um tecido específico, receptor específico, ou outra área específica do corpo do indivíduo a ser tratado. Muitos tais métodos de direcionamento são bem conhecidos por versados na técnica. Todos tais métodos de direcionamento são considerados para uso nas presentes composições.

[00240] Em uma modalidade, suspensões lipossomais, incluindo lipossomas direcionados para tecido, como lipossomas direcionados para tumor, podem também ser adequadas como carreadores farmaceuticamente aceitáveis. Estas podem ser preparadas de acordo com métodos bem conhecidos por versados na técnica. Por exemplo, formulações lipossomais podem ser preparadas conforme descrito na Patente Norte-Americana n° 4.522.811. Resumidamente, lipossomas como vesículas multilamelares (MLV's) podem ser formados pela secagem de fosfatidil-colina de ovo e fosfatidil-serina de cérebro (razão molar de 7:3) dentro de um frasco. Uma solução de um composto aqui provido em solução salina tamponada com fosfato (PBS) isenta de cátions divalentes é adicionada e o frasco é agitado até que a película lipídica seja dispersada. As vesículas resultantes são lavadas para remover o composto não encapsulado, peletizadas por centrifugação, e então suspensas em PBS.

Coadministração com outros fármacos

[00241] De acordo com outro aspecto da presente invenção, é considerado que os compostos de Fórmula I, conforme aqui descritos, podem ser administrados a um indivíduo, que necessita dos mesmos, em combinação com medicação considerada por versados na técnica como padrão vigente de cuidado para a condição de interesse. Tais combinações proveem uma ou mais vantagens ao indivíduo, por exemplo, que exigem dosagens reduzidas para alcançar benefício similar, obter o efeito paliativo desejado em menos tempo, e similares.

[00242] Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados como parte de um regime terapêutico com outros fármacos. Pode ser desejável administrar uma combinação de compostos ativos, por exemplo, para o propósito de tratamento de uma doença ou condição específica. Consequentemente, está dentro do escopo da presente invenção que duas ou mais composições farmacêuticas, pelo menos uma das quais contém um composto de Fórmula (I) de acordo com a presente invenção, podem ser combinadas na forma de um kit adequado para coadministração das composições.

[00243] Em uma modalidade dos métodos da presente invenção, um composto de Fórmula I pode ser administrado com um segundo agente terapêutico. Em uma modalidade, o segundo agente terapêutico pode ser selecionado de uma ou mais das seguintes categorias: (i) Agentes anticâncer como cis-platina, oxaliplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda de nitrogênio, mostarda de uracila, bendamustina, melfalana, clorambucil, clormetina, busulfano, temozolomida, nitrosoureias, ifosamida, pipobromana, trietileno-melamina, trietileno- tiofosforamina, carmustina, lomustina, estroptozocina e dacarbazina, gencitabina, fosgencitabina-palabenamida, 5-fluorouracila, tegafur, raltitrexede, metotrexato, pemetrexede, leucovorina, citosina-arabinosídeo, floxuridina, citarabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, pentostatina, hidroxiureia, trifluridina, trifluracila, adriamicina, bleomicina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina- C, dactinomicina, mitramicina, vincristina, vimblastina, vindesina e vinorelbina, taxol, taxotere, eribulina, carfilzomibe, bortezomibe, etoposídeo, teniposídeo, ansacrina, topotecano, irinotecano, mitoxantrona, camptotecina, dactinomicina, daunorubicina, aldoxorubicina, epirubicina, idarubicina, ara-C, paclitaxel (Taxol™), nabpaclitaxel, docetaxel, desoxicoformicina, L- asparaginase, IFN-alfa, azacitidina, decitabina, vorinostate, MS-275, panobinostate, romidepsina, ácido valproico, mocetinostate, pracinostate, belinostate, irabectedina, tamoxifeno, fulvestrante, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, iodoxifeno, bicalutamida, flutamida, nilutamida, acetato de ciproterona, goserelina, leuprorelina, buserelina, progestogênios, acetato de megestrol, anastrozol, letrozol, vorazol, exemestano, finasterida, navelbeno, capecitabina, e droloxafina; e abiraterona, enzalutamida, lanreotida, dasatinibe, bosutinibe, trastuzumabe, pertuzumabe, panitumumabe, cetuximabe, gefitinibe, erlotinibe, afatinibe, vandetanibe, osimertinibe, rociletinibe, lapatinibe, imatinibe, nilotinibe, sorafenibe, tipifarnibe e lonafarnibe, vemurafenibe, dabrafenibe, trametinibe, cobimetinibe, ponatinibe, palbociclibe, everolimo, ruxolitinibe, pacritinibe, jaktinibe, imetelstate, plitidepsina, pevonedistate, ibrutinibe, ceritinibe, crizotinibe, ectinibe, cabozantirsibe, vismodegibe, sonidegibe, regorafenibe, vandetanibe, vatalanibe, sunitinibe, axitinibe, pazopanibe, lenvatinibe, talimogene laerparepveque, denosumabe, obinuluzumabe, blinatomumabe, dinutuximabe, idarucizumabe, daratumumabe, necitumumabe, elotuzumabe, olaratumabe, alemtuzumabe, rituximabe, ibritumomabe-tiuxetana, ofatumumabe, peginterferon-alfa-2b, aldesleucina, Gardasil, Cervarix, Oncophage, Sipuleucel-T, nivolumabe, pembrolizumabe, atezolizumabe, indoximode, nivolumabe, ipilumumabe, brentuximabe-vedotina, irastuzumabe-entansina, fludaribina, cladribina, pentostatina, idelalisibe, perifosina, birinapanto, bortezomibe, ixazomibe, carfilzomibe, marizomibe, olaparibe, rucaparibe, venetoclax, navitoclax, obatoclax, glasdegibe, pacrinostate, buparlisibe, momelotinibe, itacitinibe, umbralisibe, gusacitinibe, tagraxofuspe, ribociclibe, abemaciclibe, niraparibe, trabectedina, pofimer, vinflunina, napabucasina, lurbinectedina, tazemetostate, acalabrutinibe, levatinibe, neratinibe, pamiparibe, epacadostate, enzastaurina, selinexor, masitinibe, evofosfamida, glufosfamida, roxadustate, estreptozocina, devimistate, galunisertibe, binimetinibe, veliparibe, entinostate, pexidartinibe, talazoparibe, entrectinibe.

[00244] (ii) Agentes anti-inflamatórios como meloxicam, feoprofeno, oxaprozina, salsalato, etoricoxibe, tenoxicam, aspirina, nabumetona, flurbiprofeno, ácido mefenâmico, fenilbutazona, lornoxicam, indometacina, etodolaco, diflunisal, cetoprofeno, valdecoxibo, ácido tolfenâmico, piroxicam, sulindaco, tolmetina, cetorolaco, loxoprofeno, acetaminofeno, bronfenaco, diclofenaco, ibuprofeno, meclofenamato, nabumetona, naproxeno, nepafenaco, celecoxibe, triamcinolona-acetonida, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, metilprednisolonae, dipropionato de aclometasona, emricasan, BI 1467335, namodenosona, GLPG-1690, tergurida.

[00245] (iii) Agente anti-hipertensivo como hidroclorotiazida, clortalidona, furosemida, espironolactona, triantereno, amilorida, benazepril, captopril, lisinopril, enalapril, ramipril, fosinopril, moexipril, perindopril, quinapril, trandolapril, losartana, candesartana, valsartana, telmisartana, clonidina, metildopa, propranolol, nadolol, timolol, pindolol, labetolol, metoprolol, atenolol, esmolol, betaxolol, carvedilol, prazosina, terazosina, doxazosina, fenoxibenzamina, fentolamina, verapamil, diltiazem, nifedipina, felodipina, anlodipino, nimodipino, diazóxido, minoxidil, pinacidil, nicorandil, hidralazina, nitroprusseto de sódio, bosentana, epoprostenol, iloprosta, beraprosta, esuberaprosta, ralinepague, macitentana, sitaxentana, ambrisentana, riociguate, treprostinil, ubenimex, selexipague, levosimendana, udenafil, tadalafil e sildenafil.

[00246] (iv) Agente antifibrótico como pirfenidona, nintedanibe, cenicriviroque, selonsertibe, lanifibranor, nimacimabe, nitrazoxanide, NGM282, apararenona, tipelucaste, Actimmune, ponatinibe, lenvatinibe, dovitinibe, lucitanibe, danusertinibe, brivatinibe, erdafitinibe, belapectina, PD173074, PD166866, AZD4547, BGJ398, LY2874455, TAS-120, ARQ087, BLU9931, FGF401, BAY-1163877, ENMD-2076, IMCA1, FGF401, DEBIO1347, FIIN-2, GP-369, PRO-001, H3B-6527, BAY1187982, MFGR1877S, FP-1039, BLU554, PRN1371, S49076, SU6668, SU5416, PBI- 4050, KD-025.

[00247] (v) Agente antiangiogênese como axitinibe, bevacizumabe, cabozantinibe, lenalidomide, lenvatinibe, pazopanibe, ramucirumabe, vandetanibe, vatalanibe, sunitinibe, ziv-aflibercepte, talidomida, pomalidomida, lenalidomida.

[00248] (vi) Agente imunosupressor como prednisona, budesonida, prednisolona, tofacitinibe, ciclosporina, tacrolimo, sirolimo, everolimo, azatioprina, leflunomida, micofenolato, abataceptr, adalimumabe, anacinra, certolizumabe, etanercepte, golimumabe, infliximabe, ixequizumabe, natalizumabe, rituximabe, secuquinumabe, tocilizumabe, ustequinumabe, vedolizumabe, basiliximabe, daclizumabe, fumarato de dimetila, micofenolato de mofetila.

[00249] (vii) Agente metabólico como ácido obeticólico, elafibranor, Aramchol™, seladelpar, MGL-3196, tropifexor, MSDC-0602K, BMS- 986036, semaglutide, EDP-305, gemcabene, PF-05221304, PF-06865571, PF-06835919, LIK066, LMB763, vitamina E, acarbose, miglitol, pranlintida, alogliptan, linagliptan, saxagliptina, sitagliptina, albiglutida, dulaglutida, exenatida, liraglutida, lixisenatida, insulina, nateglinida, repaglinida, Metformina, canagliflozina, dapagliflozina, empagliflozina, clorpropamida, glimepirida, glipizida, gliburida, tolazamida, tolbutamida, rosiglitazona, pioglitazona, atorvastatina, anlodipino, sinvastatina, ezetimibe, lovastatina, sitagliptina, colestiramina, colesevelam, colestipol, fenofibrato, genfibrozil, ácido fenofíbrico, niacina, icosapente, mipomerseno, lomitapida, evolocumabe, alirocumabe, fluvastatina, pravastatina, rosuvastatina, pitavastatina, sinvastatina, cerivastatina, alopurinol, lesinurade, pegloticase, febuxostate, rasburicase, ivacaftor, alfa-velaglucerase, imiglucerase, alfa- alglicosidase, laronidase, alfa-cerliponase, alglucerase, idursulfase, alfa- taliglucerase, beta-agalsidase, alfa-sebelipase, alfa-vestronidase, galsulfase, alfa-elosulfase, eliglustate, burosumabe, migalastate, sapropterina, metreleptina, nitisinona, pegvaliase, alfa-asfotase, inotersen, miglustate, orlistate, fenilbutirato de sódio, fenilbutirato de glicerol.

[00250] Em uma modalidade, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com outros tratamentos terapêuticos. Por exemplo, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com radioterapia ou quimioterapia. Em uma modalidade, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes antitumorais adicionais e/ou radioterapia para o tratamento de um câncer.

[00251] Quando dois ou mais ingredientes ativos são coadministrados, os ingredientes ativos podem ser administrados simultaneamente, sequencialmente ou separadamente. Em uma modalidade, o composto de Fórmula I é coadministrado simultaneamente com um segundo agente terapêutico. Em outra modalidade, o composto de Fórmula I e o segundo agente terapêutico são administrados sequencialmente. Em uma modalidade adicional, o composto de Fórmula I e o segundo agente terapêutico são administrados separadamente.

[00252] A invenção será agora descrita em maiores detalhes, apenas à guisa de ilustração, com referência aos seguintes exemplos não limitadores. Os exemplos são pretendidos para servirem para ilustrarem a invenção e não devem ser interpretados como limitadores da generalidade da descrição da descrição em todo este relatório descritivo.

Experimentos: Métodos gerais

[00253] Solventes e reagentes comercialmente disponíveis foram usados conforme recebidos. Onde apropriado, as reações foram realizadas sob uma atmosfera de argônio. As reações foram monitoradas quer por Cromatografia em Camada Fina (CCF) analítica quer por Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (CL-EM) analítica () registrada quer em um instrumento Shimadzu LCMS 2020 quer em um instrumento Agilent LC/MSD 1200 usando condições de fase reversa. A purificação de intermediários e de compostos finais foi conduzida, onde necessário, usando cromatografia em coluna ou Cromatografia Líquida de Alta Eficiência Preparativa (CLAE preparativa). Cromatografia em coluna de fase normal foi conduzida sob pressão média quer em gel de sílica quer em cartuchos de gel de sílica pré-empacotados usando um sistema de cromatografia flash (CombiFlash Rf200, Teledyne Isco systems, EUA). Cromatografia em coluna de fase reversa foi conduzida sob pressão baixa em cartuchos C18 pré- empacotados usando sistema de cromatografia flash (Reveleris® X2). Eluentes foram monitorados por luz UV (X =254/280 nm). Espectros de 1H- NMR e de 19F-NMR foram registrados usando quer um espectrômetro de RMN Bruker 300 MHz, um espectrômetro de RMN Bruker Avance III plus 400 MHz quer um espectrômetro Varian III plus 300 MHz. Deslocamentos químicos (δ) são relatados como partes por milhão (ppm) relativas ao tetrametilsilano (TMS; padrão interno). As seguintes abreviações são usadas para as multiplicidades: s = singleto; br s = singleto largo; d = dubleto; t = tripleto; q = quarteto; m = multipleto; e br m = multipleto largo. Espectros de massa (EM) de baixa resolução foram obtidos como espectros de massa com ionização à pressão atmosférica por eletrospray (IPA-ES), que foram registrados quer em um instrumento Shimadzu LCMS 2020 quer em um instrumento Agilent LC/MSD 1200 usando condições de fase reversa. Todos os experimentos em animais foram conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais e a aprovação dos comitês de ética locais. EXEMPLO 1

[00249] Preparação de (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila. Procedimento A: Preparação de 2-oxoetilcarbamato de terc-butila

[00250] A uma solução agitada de 3-amino-1,2-propanodiol (20,0 g, 0,22 mol) em água (200 mL) a 0-5°C foi adicionado dicarbonato de di-terc- butila (55,5 mL, 0,24 mol). Após o ajuste da alcalinidade da solução para pH~9 pela adição de NaOH aq. (6 N), a mistura foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 18h. A mistura de reação foi esfriada para 0-5°C e então foi acidificada para pH~6 antes da adição de metaperiodato de sódio (56,3 g, 0,26 mol). A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. A mistura foi filtrada para remover todos os sólidos e o filtrado foi transferido para um funil de separação e extraído com acetato de etila (200 mL). Cloreto de sódio foi adicionado à camada aquosa até que fosse obtida uma solução saturada. A camada aquosa foi então adicionalmente extraída com acetato de etila (100 mL). As fases orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 e então evaporadas sob vácuo para fornecer 2- oxoetilcarbamato de terc-butila bruto (45,7 g) como uma goma amarela. O material bruto foi usado na etapa subsequente sem purificação. Procedimento B: Preparação de (E)-4-(terc-butoxicarbonilamino)-2- fluorobut-2-enoato de etila e de (Z)-4-(terc-butoxicarbonilamino)-2-fluorobut- 2-enoato de etila

[00251] A uma suspensão agitada de 2-oxoetilcarbamato de terc-butila bruto (43,7 g, 0,22 mol) e sulfato de magnésio (32,0 g) em acetonitrila (200 mL) a 0°C sob N2 foram adicionados sequencialmente 2-fluorofosfonoacetato de etila (55,7 mL, 0,27 mol) e 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (32,8 mL, 0,22 mol). A mistura de reação foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e a agitação foi continuada durante 3h. Após a remoção do solvente sob pressão reduzida o resíduo foi coletado em acetato de etila (200 mL) e então transferido para um funil de separação. Os extratos orgânicos foram lavados sucessivamente com HCl aq. (2 M; 100 mL x 2), NaOH aq. (2 M; 100 mL x 2) e salmoura (100 mL). Após a secagem com MgSO4, os extratos orgânicos foram concentrados sob vácuo para fornecer o produto desejado, bruto como uma mistura de isômeros E/Z (2:3; 57,0 g). Este material bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação. Procedimento C: Preparação de (E)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila e de (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila

[00252] A uma solução agitada de E/Z-4-(terc-butoxicarbonilamino)-2- fluorobut-2-enoato de etila bruto (18,0 g, 72,8 mmol) em THF (150 mL) a 0°C sob N2 foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (1 M em tolueno, 182 mL, 182 mmol) por gotejamento durante 45 min. Após a adição completa, a mistura foi deixada agitar a 0°C durante 3h. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação e adicionada por gotejamento a uma mistura agitada de gelo (100 g) e NaOH aq. (2 M; 200 mL). Após a adição, a mistura foi agitada durante 2h. A mistura de reação inativada foi extraída com éter dietílico (100 mL x 2) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 mL). Após a secagem com MgSO4 os extratos orgânicos foram concentrados sob vácuo para fornecer o álcool bruto como uma mistura de isômeros E/Z. Esta mistura foi purificada em gel de sílica (135 g), eluindo com acetato de etila 25% em n-hexano para fornecer (Z)-3-fluoro-4- hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila (6,20 g, 30% relativo a três etapas) e (E)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila (1,85 g, 8,9% relativo a três etapas). (E)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc- butila: 1H-NMR (200 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,43 (9H, s), 3,72 (2H, dd, J 7,5, 5,4 Hz), 4,25 (2H, d, J 21,5 Hz), 4,85 (1H, br. s), 5,18 (1H, dt, J 19,2, 8,5 Hz). (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila: 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,46 (9H, s), 3,84 (2H, dd, J 6,2, 6,2 Hz), 4,13 (2H, d, J 13,9 Hz), 4,68 (1H, br. s), 5,03 (1H, dt, J 36,0, 7,1 Hz). Procedimento D: Preparação de (Z)-4-bromo-3-fluorobut-2-enilcarbamato de terc-butila

[00253] A uma solução agitada de (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2- enilcarbamato de terc-butila (6,20 g, 30,2 mmol) e trietilamina (6,32 mL, 45,3 mmol) em acetona (100 mL) a 0°C foi adicionado cloreto de metano ssulfonila (2,81 mL, 36,3 mmol) por gotejamento. Após a adição completa a mistura foi deixada agitar a 0°C durante 30 min. Após este tempo, brometo de lítio (13,1 g, 0,15 mol) foi adicionado como porções e a suspensão resultante foi agitada durante um tempo adicional de 2h. A mistura de reação foi filtrada para remover todos os sólidos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi particionado entre água (50 mL) e CH2Cl2 (50 mL) e a camada aquosa foi extraída com mais CH2Cl2 (50 mL x 2). As fases orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo bruto foi purificado em gel de sílica (100 g) eluindo com n-hexano seguido por acetato de etila 25% em n-hexano para fornecer (Z)-4-bromo-3-fluorobut- 2-enilcarbamato de terc-butila (7,00 g, 86%) como um sólido incolor. 1H- NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,46 (9H, s), 3,85 (2H, dd, J 6,2, 6,2 Hz), 3,93 (2H, d, J 19,5 Hz), 4,66 (1H, br. s), 5,16 (1H, dt, J 34,0, 6,5 Hz). EXEMPLO 2

[00254] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos E, F, G, H e I.

[00255] Preparação de cloridrato de (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut-2- en-1-il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-di-isopropilbenzenossulfonamida (Composto 11). Procedimento E: Preparação de 4-(bromometil)-N,N-di isopropilbenzenossulfonamida

[00256] A uma solução agitada de cloreto de 4- (bromometil)benzenossulfonila (500 mg, 1,86 mmol) em CH2Cl2 (10 mL) a 0°C foi adicionada di-isopropilamina (0,65 mL, 4,63 mmol) por gotejamento. Após a adição a mistura resultante foi deixada agitar nesta temperatura durante 30 min antes de permitir um aquecimento para a temperatura ambiente e uma agitação durante um tempo adicional de 48h. A mistura de reação foi particionada entre HCl aq. (1 M, 20 mL) e CH2Cl2 (20 mL). A camada orgânica foi lavada com HCl aq. (1 M; 20 mL) e água (20 mL), secada com Na2SO4 e concentrada sob vácuo para fornecer o composto do título (óleo amarelo, 190 mg) como uma mistura com 4-(clorometil)-N,N-di- isopropilbenzenossulfonamida, que foi usada como tal na etapa seguinte. Procedimento F: Preparação de (Z)-(3-fluoro-4-((2-hidroxifeml)tio)but-2-en- 1-il)carbamato de terc-butila

[00257] A uma solução de 2-mercaptofenol (235 mg, 1,86 mmol) e (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (500 mg, 1,86 mmol) em acetona (3 mL) à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (387 mg, 2,70 mmol) e a solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 16h. A mistura de reação foi então particionada entre EtOAc (20 mL) e água (20 mL) e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (20 mL x 2) e as fases orgânicas foram então combinadas e lavadas (salmoura; 20 mL), secadas (Na2SO4) e concentradas sob vácuo para fornecer (Z)-(3-fluoro-4-((2-hidroxifenil)tio)but-2-en-1- il)carbamato de terc-butila (580 mg, 99%) como um sólido amarelo claro. 1H- NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,45 (9H, s), 3,31 (2H, d, J = 19,7 Hz), 3,69 (2H, app. t, J = 6,7 Hz), 4,47 (1H, dt, J = 34,6, 7,2 Hz), 4,49 (1H, br. s), 6,67 (1H, s), 6,90 (1H, ddd, J = 7,6, 7,6 1,3 Hz), 7,02 (1H, dd, J = 8,2, 1,2 Hz), 7,31 (1H, ddd, J = 8,2, 7,3, 1,6 Hz), 7,45 (1H, dd, J = 7,7, 1,7 Hz). Procedimento G:Preparação de(Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en- 1-il)carbamato de terc-butila

[00258] A uma solução agitada de (Z)-(3-fluoro-4-((2- hidroxifenil)tio)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (100 mg, 0,32 mmol) e 4-(bromometil)-N,N-di-isopropilbenzenossulfonamida (107 mg, 0,32 mmol) em DMF (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (66 mg, 0,48 mmol). A suspensão resultante foi agitada à esta temperatura durante 16h. A mistura de reação foi então particionada entre EtOAc (10 mL) e água (10 mL) e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (10 mL x 2) e as fases orgânicas foram então combinadas e lavadas (solução sat. aq. de NH4Cl então salmoura), secadas (Na2SO4) e concentradas sob vácuo para fornecer (Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (180 mg, 99%) como uma goma amarela que foi usado na etapa subsequente sem purificação. Procedimento H:Preparação de(Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)sulfoml)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila

[00259] A uma suspensão agitada de (4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (180 mg, 0,32 mmol) e hidrogenocarbonato de sódio (133 mg, 1,59 mmol) em CH2CI2 (2 mL) e água (2 mL) a 0°C foi adicionado ácido 3- cloroperoxibenzoico (178 mg, 0,79 mmol) como três porções durante 5 min. A suspensão resultante foi agitada a 0°C durante 2 horas antes de ser diluída com solução sat. aq. de NaHCO3 (15 ml) e extraída com CH2Cl2 (10 mL). A fase aquosa foi adicionalmente extraída com CH2Cl2 (10 mL x 2) e as fases orgânicas foram combinadas, secadas (Na2SO4) e concentradas sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com EtOAc 40%/hexano então com MeOH 2% em EtOAc 50%/hexano para fornecer (Z)- (4-((2-((4-(N,N-di-isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)sulfonil)-3-fluorobut-2- en-1-il)carbamato de terc-butila (160 mg, 84%) como um sólido branco. 1H- NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,29 (12 H, d, J = 6,8 Hz), 1,43 (9H, s), 3,67-3,80 (3H, m), 4,15 (2H, d, J = 18,9 Hz), 4,52 (1H, br. s), 4,93 (1H, dt, J = 34,4, 6,9 Hz), 5,33 (2H, s), 7,09 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,18 (1H, ddd, J = 8,3, 7,8, 0,8 Hz), 7,63 (1H, ddd, J = 8,4, 7,6, 1,7 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,4), 7,93 (2H, d, J = 8,5 Hz), 7,99 (1H, dd, J = 7,9, 1,7 Hz). Como uma modificação deste procedimento para a preparação de outros compostos, a oxidação foi realizada por adição lenta de uma solução aquosa de OXONE® (4 eq. em 1,2 mL de H2O por mmol de OXONE®) a uma solução de material de partida de éter sulfanílico em MeOH:THF (1:1, ca. 3 mL de cada por mmol de éter sulfanílico) à temperatura ambiente e permitida reagir até que o controle por CL-EM indicasse um alto grau de conversão para o produto de sulfona desejado. A mistura foi então particionada entre solução aquosa saturada de metabissulfito de sódio em excesso e EtOAc, lavada com salmoura, secada (Na2SO4), concentrada sob vácuo e purificada por cromatografia em coluna. Procedimento I: Preparação de cloridrato de (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut- 2-en-1-il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-di-isopropilbenzenossulfonamida (Composto 11)

[00260] A uma solução agitada de (Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)benzil)oxi)fenil)sulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (160 mg, 0,27 mmol) em MeOH (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HCl etéreo (2 M; 4,00 mL, 8,00 mmol) e a mistura resultante foi deixada agitar durante 1h. Após este tempo um precipitado sólido branco foi coletado por filtração e secado sob alto vácuo para fornecer cloridrato de (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1-il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-di- isopropilbenzeno-sulfonamida (79 mg, 55%). Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 222-224°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 1,27 (12H, d, J = 6,8 Hz), 3,59 (2H, dd, J = 7,4, 1,8 Hz), 3,79 (2H, hept, J = 6,8 Hz), 4,45 (2H, d, J = 19,2 Hz), 5,16 (1H, dt, J = 32,8, 7,4 Hz), 5,46 (2H, s), 7,23 (1H, ddd, J = 7,4, 7,4, 0,9 Hz), 7,38 (1H , d J = 7,9 Hz), 7,74 (1H, ddd, J = 8,5, 7,5, 1,7 Hz), 7,79 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,91-7,95 (3H, m). EXEMPLO 3

[00261] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos E-I usando o material de partida de tiol apropriadamente funcionalizado. (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-dimetilbenzenossulfonamida (Composto 5)

[00262] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 235-236°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 2,72 (6H, s), 3,60 (2H, dd, J = 7,4, 1,7 Hz), 4,47 (2H, d, J = 19,2 Hz), 5,18 (1H, dt, J = 32,9, 7,4 Hz), 5,49 (2H, s), 7,24 (1H, ddd, J = 7,9, 7,9, 0,9 Hz), 7,39 (1H, dd, J = 8,5, 0,7 Hz), 7,76 (1H, ddd, J = 8,4, 7,4, 1,7 Hz), 7,86 (4H, br. s), 7,95 (1H, dd, J = 7,9, 1,8 Hz). Cloridrato de (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)metil)benzenossulfonamida (Composto 8)

[00263] Sólido quase branco; p.f. (ponto de fusão) 233-235°C; 1H- NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 3,59 (2H, dd, J = 7,4, 1,6 Hz), 4,44 (2H, d, J = 19,2 Hz), 5,14 (1H, dt, J = 32,8, 7,4 Hz), 5,45 (2H, s), 7,23 (1H, dd, J = 7,3, 7,3 Hz), 7,38 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,74 (1H, ddd, J = 8,6, 8,6, 1,7 Hz), 7,78 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,94 (1H, dd, J = 8,1, 1,6 Hz), 7,97 (2H, d, J = 8,5 (Z)-4-((3-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-dimetilbenzenossulfonamida (Composto 9)

[00264] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 211-213°C; 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 2,63 (6H, s), 3,48 (2H, br. s), 4,65 (2H, d, J = 19,6 Hz), 5,17 (1H, dt, J = 34,6, 7,2 Hz), 5,36 (2H, s), 7,45 (1H, ddd, J = 8,1, 2,5, 1,0 Hz), 7,52-7,57 (2H, m), 7,63 (1H, dd, J = 8,1, 8,1 Hz), 7,75 (2H, d, J = 8,5 Hz), 7,81 (2H, d, J = 8,6 Hz), 8,11 (3H, br. s). Cloridrato de (Z)-4-((4-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)metil)-N,N-dimetilbenzenossulfonamida (Composto 10)

[00265] Sólido branco; p.f (ponto de fusão) 216-218°C; 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 2,63 (6H, s), 3,48 (2H, br. s), 4,55 (2H, d, J = 19,7 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 34,8, 7,1 Hz), 5,38 (2H, s), 7,29 (2H, dd, J = 9,0, 1,9 Hz), 7,74 (2H, dd, J = 8,5, 1,8 Hz), 7,81 (2H, dd, J = 8,5, 1,9 Hz), 7,88 (2H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz), 8,03 (3H, br. s). Cloridrato de (Z)-4-((2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)metil)-N-isopropilbenzenossulfonamida (Composto 14)

[00266] Sólido branco; p.f (ponto de fusão) 248-250°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 1,05 (6H, d, J = 6,6 Hz), 3,40 (1H, hept, J = 6,6 Hz), 3,59 (2H, app. d, J = 7,3 Hz), 4,45 (2H, d, J = 19,1 Hz), 5,16 (1H, dt, J = 33,0, 7,4 Hz), 5,46 (2H, s), 7,23 (1H, ddd, J = 8,0, 8,0, 1,0 Hz), 7,38 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,74 (1H, ddd, J = 8,4, 7,4, 1,8 Hz), 7,80 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,917,95 (3H, m). EXEMPLO 4

[00267] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos F - I usando o material de partida de tiol apropriado. Cloridrato de (Z)-4-((2-(benziloxi)fenil)sulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 7)

[00268] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 205-207°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 3,57 (2H, app. d, J = 7,0 Hz), 4,44 (2H, d, J = 19,1 Hz), 5,14 (1H, dt, J = 32,8, 7,3 Hz), 5,36 (2H, s), 7,20 (1H, dd, J = 7,4, 0,9 Hz), 7,35-7,46 (4H, m), 7,55-7,60 (2H, m), 7,73 (1H, ddd, J = 8,5, 7,4, 1,7 Hz), 7,92 (1H, dd, J = 7,9, 1,7 Hz). EXEMPLO 5

[00269] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos F, H e I usando o material de partida de tiol apropriadamente funcionalizado. Cloridrato de (Z)-4-((3,5-bis(trifluorometil)fenil)sulfonil)-3-fluorobut-2-en-1- amina (Composto 2)

[00270] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 217-220°C; 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 3,48 (2H. app. d, J = 7,1 Hz), 4,96 (2H, d, J = 19,6 Hz), 5,19 (1H, dt, J = 34,8, 7,2 Hz), 8,10 (3H, br. s), 8,55 (2H, s), 8,67 (1H, s). Cloridrato de (Z)-4-(bifenil-2-ilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 20)

[00271] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 170°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,18 (dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,81 (td, J = 7,5, 1,4 Hz, 1H), 7,68 (td, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,52 - 7,44 (m, 6H), 5,03 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 18,9 Hz, 2H), 3,56 (dd, J = 7,4, 1,3 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-isopropilfenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 21)

[00272] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 205-215°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,00 - 7,95 (m, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 2H), 7,48 - 7,41 (m, 1H), 5,25 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 19,2 Hz, 2H), 3,88 (hept, J = 6,9 Hz, 1H), 3,63 (dd, J = 7,5, 1,9 Hz, 2H), 1,36 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-metoxifenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 22)

[00273] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 228-221°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,89 (dd, J = 7,9, 1,7 Hz, 1H), 7,75 (ddd, J = 8,4, 7,4, 1,8 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 8,5, 0,9 Hz, 1H), 7,19 (td, J = 7,6, 1,0 Hz, 1H), 5,23 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 5,17 (t, J = 7,4 Hz, 0H), 4,48 (d, J = 19,3 Hz, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,61 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(naftalen-1-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 23)

[00274] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 230-240°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,76 (ddd, J = 8,7, 1,2, 0,6 Hz, 1H), 8,33 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,13 (ddd, J = 8,2, 1,5, 0,8 Hz, 1H), 7,81 (ddd, J = 8,6, 6,9, 1,5 Hz, 1H), 7,72 (td, J = 8,0, 1,9 Hz, 2H), 5,13 (dt, J = 32,7, 7,4 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 19,2 Hz, 2H), 3,57 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(naftalen-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 24)

[00275] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 215-220°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,60 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 8,18 - 8,11 (m, 2H), 8,06 (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,95 (dd, J = 8,7, 1,9 Hz, 1H), 7,81 - 7,68 (m, 2H), 5,19 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,46 (d, J = 19,2 Hz, 2H), 3,63 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-4-(2,4-diclorofenilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 25)

[00276] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 220°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,10 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 5,28 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,63 (ddd, J = 7,4, 2,0, 0,6 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-4-(3-clorofenilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 26)

[00277] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 225-235°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,00 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 7,92 (ddd, J = 7,8, 1,8, 1,1 Hz, 1H), 7,82 (ddd, J = 8,1, 2,1, 1,1 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,22 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-4-(4-clorofenilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 27)

[00278] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 240°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,96 (dt, J = 8,8, 2,3 Hz, 2H), 7,71 (dt, J = 8,3, 1,9 Hz, 2H), 5,20 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-4-(3,5-diclorofenilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 28)

[00279] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 250°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,97 (d, J = 1,8 Hz, 2H), 7,93 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 5,27 (dt, J = 33,0, 7,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,67 (dd, J = 7,4, 2,0 Hz, 2H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(piridin-4-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 29)

[00280] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 162-164°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,07 (dd, J = 4,9, 1,7 Hz, 2H), 8,22 (dd, J = 4,6, 1,6 Hz, 2H), 5,31 (dt, J = 33,1, 7,4 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,67 (d, J = 7,4 Hz, 2H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(quinolin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 32)

[00281] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 203-205°C; 1H NMR (300 MHz, d6 DMSO) δ ppm: 8,82 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,29 - 8,20 (m, 2H), 8,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,12 - 7,93 (m, 3H), 7,92 - 7,83 (m, 1H), 5,26 (dt, J = 34,8, 7,2 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 19,6 Hz, 2H), 3,48 (s, 2H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(quinolin-8-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 33)

[00282] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 150-153°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,18 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 8,70 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1H), 8,57 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,99 - 7,68 (m, 2H), 5,22 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 5,00 (d, J = 19,4 Hz, 2H), 3,60 (d, J = 7,7 Hz, 2H); LC-MS: para C13H13FN2O2S calculado 280,1, verificado 281,1 [M+1]+. Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-fluorofenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 37)

[00283] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,01 - 7,90 (m, 1H), 7,89 - 7,77 (m, 1H), 7,53 - 7,39 (m, 2H), 5,29 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,63 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(3-fluorofenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 38)

[00284] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,83 (ddd, J = 7,8, 1,7, 1,1 Hz, 1H), 7,81 - 7,66 (m, 2H), 7,56 (tdd, J = 8,4, 2,6, 1,1 Hz, 1H), 5,23 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(4-fluorofenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 39)

[00285] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,13 - 7,99 (m, 2H), 7,51 - 7,34 (m, 2H), 5,19 (dt, J = 32,8, 7,5 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,62 (ddt, J = 7,4, 1,9, 0,6 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(o-tolilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 40)

[00286] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,99 (dd, J = 7,6, 1,1 Hz, 1H), 7,71 - 7,59 (m, 1H), 7,53 - 7,39 (m, 2H), 5,22 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 19,3, 0,5 Hz, 2H), 3,63 (ddt, J = 7,4, 2,0, 0,6 Hz, 2H), 2,73 (s, 3H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(m-tolilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 41)

[00287] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,84 - 7,72 (m, 2H), 7,67 - 7,49 (m, 2H), 5,44 - 5,08 (m, 1H), 4,35 (dq, J = 19,1, 0,5 Hz, 2H), 3,64 (ddt, J = 7,4, 2,0, 0,6 Hz, 2H), 2,56 - 2,38 (m, 3H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(p-tolilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 42)

[00288] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,88 - 7,82 (m, 2H), 7,54 - 7,45 (m, 2H), 5,17 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 19,2, 0,5 Hz, 2H), 3,64 (ddt, J = 7,4, 2,0, 0,6 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-((3-fluoroquinolin-8-il)sulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 51)

[00289] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,09 (dd, J = 2,9, 0,6 Hz, 1H), 8,49 (ddd, J = 7,4, 1,4, 0,4 Hz, 1H), 8,38 (ddd, J = 8,3, 1,4, 0,4 Hz, 1H), 8,31 (dd, J = 8,8, 2,9 Hz, 1H), 7,87 (ddd, J = 8,3, 7,3, 0,8 Hz, 1H), 5,20 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 19,3 Hz, 2H), 3,59 (d, J = 7,4 Hz, 2H). EXEMPLO 6

[00290] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos F, J, H e I usando o material de partida de tiol apropriadamente funcionalizado. Procedimento J Preparação de(Z)-(3-fluoro-4-((4- (metilsulfonil)fenil)sulfonil)but-2-en-1 -il)carbamato de terc-butila

[00291] A uma suspensão agitada de (metiltio)fenil)tio)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (120 mg, 0,35 mmol) e hidrogenocarbonato de sódio (150 mg, 1,79 mmol) em CH2Cl2 (4 mL) e água (2 mL) a 0°C foi adicionado ácido 3-cloroperoxibenzoico (378 mg, 2,19 mmol) como três porções durante 5 min. A suspensão resultante foi agitada a 0°C durante 1,5 horas antes de ser diluída com NaOH aq. (2 M; 1 ml), água (10 mL) e CH2Cl2. As fases foram então separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (10 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, secadas (Na2SO4) e concentradas sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com EtOAc 30%/hexano para fornecer (Z)-(3-fluoro-4- ((4-(metilsulfonil)fenil)sulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (17 mg, 12%) como um sólido branco. 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 1,37 (9H, s), 3,33 (3H, s), 3,54 (2H, app. t, J = 5,6 Hz), 4,62 (2H, d, J = 19,4 Hz), 4,93 (1H, dt, J = 36,4, 6,8 Hz), 7,05 (1H, t, J = 5,8 Hz), 8,15 (2H, dd, J = 8,7, 2,1 Hz), 8,21 (2H, dd, J = 8,7, 2,1 Hz). Trifluoroacetato de (Z)-4-((3,5-bis(trifluorometil)fenil)sulfonil)-3-fluorobut- 2-en-1-amina (Composto 3)

[00292] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 155-157°C; 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 3,35 (3H, s), 3,50 (2H, app. d, J = 6,7 Hz), 4,80 (2H, d, J = 19,7 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 34,7, 7,3 Hz), 7,88 (3H, br. s), 8,19 (2H, dd, J = 8,8, 2,5 Hz), 8,24 (2H, dd, J = 8,9, 2,4 Hz). EXEMPLO 7

[00293] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos K, L e M então F, N, H e I. Preparação de cloridrato de (Z)-4-(2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)fenoxi)-N,N-dimetilbenzeno-sulfonamida (Composto 6) Procedimento K: Preparação de 4-bromo-N,N-dimetilbenzenossulfonamida

[00294] A uma solução agitada de dimetilamina (12 mL, solução aquosa 40% p/p) em THF (20 mL) a 5°C foi adicionada uma solução de cloreto de 4-bromobenzenossulfonila (5,00 g, 19,6 mmol) em THF (10 mL) durante 5 min. Após a adição, a mistura foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi então evaporada sob vácuo e o resíduo resultante foi particionado entre água (25 mL) e CH2Cl2 (20 mL) e a camada aquosa foi extraída com mais CH2Cl2 (20 mL x 2). As fases orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 e concentradas sob vácuo para fornecer 4-bromo-N,N-dimetilbenzenossulfonamida (4,83 g, 93%) como um sólido branco. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 2,74 (6H, s), 7,64-7,73 (4H, m). Procedimento L: Preparação de NN-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzenossulfonamida

[00295] Uma solução agitada de 4-bromo-N,N-dimetil- benzenossulfonamida (1,00 g, 3,79 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (1,15 g, 4,54 mmol) e acetato de potássio (1,11 g, 11,4 mmol) em 1,4-dioxano (25 mL) foi submetida ao fluxo de nitrogênio durante 15 min antes da adição de complexo de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio (II) - diclorometano (155 mg, 0,19 mmol). A suspensão resultante foi aquecida a 80°C sob nitrogênio durante 16 horas. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente, particionada entre EtOAc (40 mL) e água (30 mL) e filtrada através de Celite. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com mais EtOAc (20 mL x 2). Os extratos orgânicos combinados foram então lavados com salmoura, secados (Na2SO4) e concentrados sob vácuo para fornecer N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzenossulfonamida (1,60 g, 68%) como um sólido cinza. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,38 (12H, s), 2,71 (6H, s), 7,77 (2H, dd, J = 8,4, 1,0 Hz), 7,98 (2H, dd, J = 8,4, 0,9 Hz). Procedimento M:Preparação de ácido(4-(NN- dimetilsulfamoil)fenil)borônico

[00296] A uma solução agitada de N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzenossulfonamida (1,00 g, 2,25 mmol) em THF (20 mL) e água (5 mL) a 0°C foi adicionado periodato de sódio (2,06 g, 9,64 mmol). A mistura foi agitada durante 5 min à esta temperatura e então foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante um tempo adicional de 30 min. HCl aquoso (1 M; 1,57 mL, 1,57 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambientedurante um tempo adicional de 1h. A mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram então combinadas e lavadas (salmoura), secadas (Na2SO4) e concentradas sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com EtOAc 50%/hexano seguido por MeOH 10% em EtOAc 50%/hexano para fornecer ácido (4-(N,N- dimetilsulfamoil)fenil)borônico (470 mg, 91%) como um sólido castanho. 1H- NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 2,69 (6H, s), 7,75 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,887,98 (2H, m). Procedimento N:Preparação de(Z)-(4-((2-(4-(N,N- dimetilsulfamoil)fenoxi)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc- butila

[00297] A uma solução agitada de (Z)-(3-fluoro-4-((2- hidroxifenil)tio)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (150 mg, 0,48 mmol), ácido (4-(N,N-dimetilsulfamoil)fenil)borônico (219 mg, 0,96 mmol) e piridina (0,19 mL, 2,39 mmol) em CH2Cl2 (6 mL) à temperatura ambientefoi adicionado acetato de cobre (II) (87 mg, 0,48 mmol) como uma porção. A mistura resultante foi agitada à esta temperatura durante 16h. Após este tempo a mistura de reação foi diluída pela adição de CH2Cl2 (30 mL), filtrada através de Celite e lavada com HCl aq. (1 M; 20 mL) seguida por solução sat. aq. de NaHCO3 (20 mL) e salmoura (20 mL). A fase orgânica foi então secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com EtOAc 25%/hexano para fornecer (Z)-(4-((2-(4-(N,N- dimetilsulfamoil)fenoxi)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc- butila (80 mg, 34%) como um óleo amarelo. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,45 (9H, s), 2,73 (6H, s), 3,55 (2H, d, J = 17,1 Hz), 3,73 (2H, app. t, J = 5,6 Hz), 4,46 (1H, br. s), 4,80 (1H, dt, J = 34,8, 6,8 Hz), 7,02 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,06 (1H, dd, J = 8,2, 1,0 Hz), 7,24 (1H, ddd, J = 7,5, 7,5, 1,1 Hz), 7,35 (1H, ddd, J = 7,6, 7,6, 1,6 Hz), 7,52 (1H, dd, J = 7,7, 1,5 Hz), 7,75 (2H, d, J = 8,6 Hz). Cloridrato de (Z)-4-(2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1-il)sulfonil)fenoxi)-N,N- dimetilbenzenossulfonamida (Composto 6)

[00298] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 153-156°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 2,73 (6H, s), 3,64 (2H, app. d, J = 6,9 Hz), 4,57 (2H, d, J = 19,1 Hz), 5,30 (1H, dt, J = 32,8, 7,3 Hz), 7,25 (1H, dd, J = 8,3, 0,7 Hz), 7,30 (2H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz), 7,49 (1H, ddd, J = 7,9, 7,9, 1,0 Hz), 7,81 (1H, ddd, J = 7,8, 8,3, 1,7 Hz), 7,86 (2H, dd, J = 8,6, 2,0 Hz), 8,07 (1H, dd, J = 7,9, 1,6 Hz). EXEMPLO 8

[00299] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos K, L, M, N, H e I. Cloridrato de (Z)-4-(3-(4-amino-2-fluorobut-2-enilsulfonil)fenoxi)-N,N- dimetilbenzenossulfonamida (Composto 16)

[00300] Sólido branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,89 - 7,82 (m, 3H), 7,76 (td, J = 8,0, 0,5 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 2,4, 1,7 Hz, 1H), 7,53 (ddd, J = 8,1, 2,5, 1,1 Hz, 1H), 7,29 - 7,22 (m, 2H), 5,28 (dt, J = 33,2, 7,4 Hz, 1H), 4,90 (s, 6H), 4,43 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-(3-(4-amino-2-fluorobut-2-enilsulfonil)fenoxi)-N,N- dimetilbenzenossulfonamida (Composto 17)

[00301] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 220°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 7,81 (ddd, J = 7,8, 1,7, 1,2 Hz, 1H), 7,77 - 7,69 (m, 2H), 7,66 - 7,59 (m, 2H), 7,50 (ddd, J = 8,0, 2,5, 1,2 Hz, 1H), 7,46 - 7,38 (m, 2H), 5,24 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,90 (s, 6H), 4,41 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). Cloridrato de (Z)-3-(2-(4-amino-2-fluorobut-2-enilsulfonil)fenoxi)-N,N- dimetilbenzenossulfonamida (Composto 18)

[00302] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 205°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,06 (ddd, J = 7,9, 1,7, 0,3 Hz, 1H), 7,83 - 7,73 (m, 1H), 7,70 (dd, J = 7,7, 0,7 Hz, 1H), 7,65 (dt, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 7,51 - 7,42 (m, 3H), 7,20 (dd, J = 8,3, 1,0 Hz, 1H), 5,31 (dt, J = 33,0, 7,4 Hz, 1H), 4,90 (s, 6H), 4,60 (d, J = 19,2 Hz, 2H), 3,64 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H). EXEMPLO 9

[00303] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos O e P então F, Q, H e I. Preparação de cloridrato de (Z)-2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1-il)sulfonil)-N- (4-(N,N-di-isopropilsulfamoil)-fenil)benzamida (Composto 15) Procedimento O: Preparação de NN-di-isopropiM-nitrobenzenossulfonamida

[00304] A uma solução agitada de di-isopropilamina (3,16 mL, 22,6 mmol) em THF (10 mL) a 0-5°C foi adicionada uma solução de cloreto de 4- nitrobenzenossulfonila (2,00 g, 9,02 mmol) em THF (5 mL) durante 5 min. Após a adição, a mistura foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi então evaporada sob vácuo e o resíduo resultante foi particionado entre água (25 mL) e CH2Cl2 (20 mL). As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com mais CH2Cl2 (20 mL x 2). Os extratos orgânicos combinados foram secados com Na2SO4 e concentrados sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com hexano para fornecer N,N-di-isopropil-4- nitrobenzenossulfonamida (285 mg, 11% de rendimento) como um sólido amarelo. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,30 (12H, d, J = 6,7 Hz), 3,79 (1H, hept, J = 6,9 Hz), 8,07 (2H, dd, J = 9,2, 2,2 Hz), 8,35 (2H, dd, J = 8,9, 1,9 Hz). Procedimento P Preparação de 4-amino-N,N-di- isopropilbenzenossulfonamida

[00305] A uma solução agitada de N,N-di-isopropil-4- nitrobenzenossulfonamida (260 mg, 0,91 mmol) em metanol (10 mL) à temperatura ambiente foi adicionada uma pasta fluida de paládio sobre carbono (10% p/p; 50 mg) em água (50 μL) sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante 3h. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada sob vácuo para fornecer 4-amino-N,N-di-isopropilbenzenossulfonamida (200 mg, 86%) como um sólido castanho. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,27 (12H, d, J = 6,8 Hz), 3,66 (2H, hept, J = 6,8 Hz), 4,04 (2H, br. s), 6,67 (2H, dd, J = 8,7, 2,1 Hz), 7,65 (2H, dd, J = 8,6, 1,9 Hz). Procedimento Q:Preparação de(Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)feml)-carbamoil)feml)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila

[00306] A uma solução agitada de ácido (Z)-2-((4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-fluorobut-2-en-1-il)tio)benzoico (180 mg, 0,53 mmol), 4-amino-N,N-di-isopropilbenzenossulfonamida (203 mg, 0,79 mmol) e trietilamina (0,26 mL, 1,85 mmol) em DMF (0,8 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HATU (301mg, 0,79 mmol) e a solução resultante foi agitada à esta temperatura durante 16h. A mistura de reação foi então particionada entre água (10 mL) e EtOAc (10 mL) e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída de novo com EtOAc e as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com HCl (1 M; 20 mL) seguido por água (20 mL x 3) e salmoura (20 mL). A fase orgânica foi secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo. O material bruto foi purificado por coluna flash, eluindo com EtOAc 50-100%/hexano para fornecer (Z)-(4-((2-((4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)fenil)carbamoil)fenil)tio)-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (93 mg, 30%) como um óleo lilás pálido. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,31 (12H, d, J = 6,7 Hz), 1,44 (9H, s), 3,57 (2H, d, J = 18,5 Hz), 3,63 (2H, app. t, J = 5,6 Hz), 3,74 (2H, hept, J = 6,7 Hz), 4,40 (1H, dt, J = 34,8, 6,9 Hz), 4,75 (1H, br. s), 7,41 (1H, dd, J = 7,1, 7,1 Hz), 7,47 (1H, ddd, J = 7,8, 7,8, 1,8 Hz), 7,62 (1H, dd, J = 7,8, 1,2 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 7,3 Hz), 7,88 (4H, br. s). Cloridrato de (Z)-2-((4-amino-2-fluorobut-2-en-1-il)sulfonil)-N-(4-(N,N-di- isopropilsulfamoil)fenil)benzamida (Composto 15)

[00307] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 248-250°C; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 1,29 (12H, d, J = 6,9 Hz), 3,64 (2H, dd, J = 7,4, 1,5 Hz), 3,78 (2H, hept, J = 6,7 Hz), 4,69 (2H, d, J = 19,2 Hz), 5,23 (1H, dt, J = 32,4, 7,4 Hz), 7,76-7,82 (2H, m), 7,85-7,93 (5H, m), 8,10-8,13 (1H, m). EXEMPLO 10

[00308] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos Q, H e I usando os materiais de partida de tiol e amina apropriados. Cloridrato de N-(adamantan-1-il)-4-(((Z)-4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)benzamida (Composto 4)

[00309] Sólido quase branco; p.f. (ponto de fusão) 231-233°C; 1H- NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 1,67 (6H, br. s), 2,08 (9H, br. s), 3,46 (2H, br. s), 4,67 (2H, d, J = 19,7 Hz), 5,10 (1H, dt, J = 34,6, 7,1 Hz), 7,97 (2H, dd, J = 8,6, 1,5 Hz), 8,00 (2H, dd, J = 8,8, 1,4 Hz), 8,06 (3H, br. s). Cloridrato de N-(adamantan-1-il)-2-(((Z)-4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)benzamida (Composto 12)

[00310] Sólido branco; 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 1,77-1,80 (6H, m), 2,09-2,15 (3H, m), 2,16-2,21 (6H, m), 3,61 (2H, app. d, J = 7,2 Hz), 4,62 (2H, d, J = 19,5 Hz), 5,16 (1H, dt, J = 32,6, 7,4 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 7,5, 1,0 Hz), 7,67 (1H, ddd, J = 7,7, 7,7, 1,2 Hz), 7,78 (1H, ddd, J = 7,5, 7,5, 1,1 Hz), 8,01 (1H, dd, J = 7,8, 1,0 Hz). Cloridrato de N-(adamantan-1-il)-3-(((Z)-4-amino-2-fluorobut-2-en-1- il)sulfonil)benzamida (Composto 13)

[00311] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 230-232°C; 1H-NMR (300 MHz; d6-DMSO) δ ppm: 1,68 (6H, br. s), 2,05-2,12 (9H, m), 3,49 (2H, br. s), 4,68 (2H, d, J 19,8 Hz), 5,12 (1H, dt, J 34,7, 7,0 Hz), 7,73 (1H, dd, J 7,7, 7,7 Hz), 7,98 (3H, br. s), 8,03 (1H, ddd, J 7,8, 1,7, 0,9 Hz), 8,16 (1H, ddd, J 7,8, 1,4, 1,0 Hz), 8,28 (1H, dd, J 1,6, 1,1 Hz). EXEMPLO 11

[00312] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos R e I. Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 1) Procedimento R: Preparação de (Z)-(3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1- il)carbamato de terc-butila

[00313] A uma solução agitada de (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1- il)carbamato de terc-butila (60,0 g, 224 mmol) em DMF (300 mL) foi adicionado benzenossulfinato de sódio (44,1 g, 269 mmol) como porções à temperatura ambiente durante 15 minutos. A mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. A mistura de reação foi diluída com água (2,7 L) e a agitação foi continuada à temperatura ambiente durante um tempo adicional de 15 minutos. O sólido precipitado, resultante foi filtrado, lavado com água (50 mL x 2) e então secado em um forno a 60°C para fornecer (Z)-(3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc- butila (74,0 g, 100%) como um sólido branco que foi usado como tal na etapa seguinte. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm: 7,98 - 7,91 (m, 2H), 7,76 - 7,67 (m, 1H), 7,61 (ddt, J = 8,3, 6,6, 1,3 Hz, 2H), 4,94 (dt, J = 34,3, 7,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 3,94 (d, J = 18,4 Hz, 2H), 3,79 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 1)

[00314] Sólido quase branco; p.f. (ponto de fusão) 209-211°C; 1H- NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 3,64 (2H, dd, J = 7,3, 1,2 Hz), 4,36 (2H, d, J = 19,1 Hz), 5,18 (1H, dt, J = 32,7, 7,4 Hz), 7,65-7,71 (2H, m), 7,79 (1H, tt, J = 7,4, 1,2 Hz), 7,96-8,00 (2H, m); LC-MS: para C10H12FNO2S calculado 229,1, verificado 230,1 [M+1]+. EXEMPLO 12

[00315] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos R e I. Cloridrato de (Z)-4-(2-clorofenilsulfonil)-3-fluorobut-2-en-1-amina (Composto 19)

[00316] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 205-207°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,13 (ddd, J = 7,9, 1,5, 0,6 Hz, 1H), 7,81 - 7,69 (m, 2H), 7,62 (ddd, J = 7,9, 6,4, 2,2 Hz, 1H), 5,27 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,62 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H); LC-MS: para C10H11ClFNO2S calculado 263,0, verificado 264,0 [M+1]+. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(piridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 30)

[00317] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 153-155°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,88 - 8,73 (m, 1H), 8,25 - 8,10 (m, 2H), 7,77 (ddd, J = 6,8, 4,7, 1,9 Hz, 1H), 5,26 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,63 (dd, J = 7,3, 1,8 Hz, 2H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(piridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 31)

[00318] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 168-170°C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,23 (dd, J = 2,3, 0,8 Hz, 1H), 9,04 (dd, J = 5,2, 1,5 Hz, 1H), 8,64 (dt, J = 8,2, 1,9 Hz, 1H), 7,94 (ddd, J = 8,2, 5,2, 0,8 Hz, 1H), 5,30 (dt, J = 33,1, 7,4 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,68 (d, J = 7,4 Hz, 2H). EXEMPLO 13

[00319] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos S, F, H e I. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(3-metilpiridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 43) Procedimento S: Preparação de 3-metilpiridina-2-tiol

[00320] 2-Cloro-3-metilpiridina (500 mg, 3,93 mmol) e hidrossulfeto de sódio hidrato (2,21 g, 39,36 mmol) foram adicionados em DMF (2,0 mL). A mistura resultante foi aquecida a 120°C durante 12h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (20 mL), acidificada (pH = 5) pela adição de ácido acético e extraída com EtOAc (20 mL x 3). O extrato orgânico combinado foi secado com Na2SO4 e concentrado sob pressão reduzida para fornecer 3-metilpiridina-2-tiol (1,50 g, 50,5%). 1H NMR (600 MHz, d6- DMSO) δ ppm: 13,5-13,3 (m, 1H), 7,6-7,58 (m, 1H), 7,51 (d, J = 6 Hz, 1H). 2,21 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(3-metilpiridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 43)

[00321] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,53 (dd, J = 4,7, 1,3 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 7,8, 4,5 Hz, 1H), 5,37 (dt, J = 32,9, 7,2 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,67 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H). EXEMPLO 14

[00322] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos S, F, H e I. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-metilpiridin-4-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 44)

[00323] Sólido amarelo pálido; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,00 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,23 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,36 (dt, J = 33,0, 7,1 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 18,9 Hz, 2H), 3,69 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 2,90 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(5-isopropilpiridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 34)

[00324] Sólido vítreo branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,70 (t, J = 1,3 Hz, 1H), 8,12 - 7,94 (m, 2H), 5,28 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,64 (dd, J = 7,6, 1,7 Hz, 2H), 3,15 (hept, J = 6,9 Hz, 1H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(5-metilpiridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 35)

[00325] Sólido branco; p.f. (ponto de fusão) 155-157°C; 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ 8,67 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,09 (s, 3H), 7,98 (t, J = 1,4 Hz, 2H), 5,20 (dt, J = 34,8, 7,2 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 19,6 Hz, 2H), 3,46 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(6-metilpiridin-2-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 36)

[00326] Sólido amarelo pálido; p.f. (ponto de fusão) 174-176°C; 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ 8,18 (s, 3H), 8,06 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,23 (dt, J = 34,8, 7,1 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 19,6 Hz, 2H), 3,46 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,61 (s, 3H). EXEMPLO 15

[00327] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos T, U e V então F, H e I Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(6-isopropilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 49) Procedimento T: Preparação de 3-((6-cloropiridin-3-il)tio)propanoato de metila

[00328] Em um tubo de reação de 50 mL revedável, 2-cloro-5- iodopiridina (2,50 g, 10,5 mmol) foi dissolvida em 1,4-dioxano desgaseificado (25 mL) à temperatura ambiente, sob atmosfera de nitrogênio. Pd2(dba)3 (100 mg, 0,11 mmol), Xantphos (125 mg, 0,22 mmol), 3- mercaptopropanoato de metila (1,25 g, 10,5 mmol) e DIPEA (2,50 mL, 14,4 mmol) foram sequencialmente adicionados sob atmosfera de nitrogênio. A solução foi desgaseificada por purga de gás nitrogênio durante 15 min, e então gradualmente aquecida para 70°C. A mistura de reação resultante foi agitada à esta temperatura durante 6h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água fria, e extraída com acetato de etila (3 x 30 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução de salmoura e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (de granulometria mesh de 100-200), eluindo com EtOAc 10%-hexanos para fornecer 3-((6-cloropiridin-3-il)tio)propanoato de metila (2,40 g, 99%) como um sólido quase branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 8,36 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,17 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,64 (t, J = 7,2 Hz, 2H). Procedimento U: Preparação de 3-((6-isopropilpiridin-3-il)tio)propanoato de metila

[00329] Em um frasco de fundo redondo de 1.000 mL, 3-((6- cloropiridin-3-il)tio)propanoato de metila (5,00 g, 21,6 mmol) foi dissolvido em THF anidro (200 mL) e 1-metil-2-pirrolidinona (25 mL) sob atmosfera de nitrogênio. A solução foi esfriada para -55°C, e uma solução de acetilacetonato de ferro (III) (1,70 g, 4,80 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada enquanto mantendo sob atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi agitada a -55°C durante 15 min em cujo tempo uma solução de cloreto de isopropilmagnésio em THF (2 M, 50 mL) foi adicionada por gotejamento a -55°C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação resultante foi agitada a -40°C durante um tempo adicional de 1h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi esfriada para 0°C, inativada com solução saturada de NH4Cl (50 mL), e o produto foi extraído com acetato de etila (100 mL x 3). As fases orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (de granulometria mesh de 100-200) com EtOAc 10%-hexanos para fornecer 3-((6- isopropilpiridin-3-il)tio)propanoato de metila (2,60 g, 50 %) como um líquido amarelo pálido. Procedimento V: Preparação de 6-isopropilpiridina-3-tiol

[00330] Em um frasco de fundo redondo de 100 mL, 3-((6- isopropilpiridin-3-il)tio)propanoato de metila (860 mg, 3,59 mmol) foi dissolvido em THF anidro (20 mL) e a solução foi esfriada para -78°C sob atmosfera de nitrogênio. Uma solução de terc-butóxido de potássio em THF (1,0 M, 3,5 mL, 3,59 mmol) foi adicionada à mistura acima sob atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi agitada a -78°C durante 1h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi aquecida para a temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi lavado com n-hexano para fornecer 6-isopropilpiridina-3-tiol (655 mg) como um sólido castanho claro. O composto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(6-isopropilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 49)

[00331] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,29 (dd, J = 2,1, 0,7 Hz, 1H), 9,02 (ddd, J = 8,6, 3,5, 2,1 Hz, 1H), 8,32 (dd, J = 8,6, 3,2 Hz, 1H), 5,48 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,81 - 3,65 (m, 2H), 3,55 (dq, J = 7,0, 2,2 Hz, 1H), 1,53 (dd, J = 7,0, 0,8 Hz, 6H). EXEMPLO 16

[00332] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos T, U e V então F, H e I. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-isopropilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 45)

[00333] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,95 (dd, J = 5,2, 1,7 Hz, 1H), 8,66 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H), 7,78 (dd, J = 8,0, 5,0 Hz, 1H), 5,39 (dt, J = 33,2, 7,3 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 4,08 (p, J = 6,8 Hz, 1H), 3,72 - 3,62 (m, 2H), 1,45 (d, J = 6,7 Hz, 6H). EXEMPLO 17

[00334] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos T e V então F, H e I. Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(6-metilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 46)

[00335] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,17 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,33 (dt, J = 33,0, 7,3 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,75 - 3,63 (m, 2H), 2,85 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(2-metilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 47)

[00336] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,00 (dd, J = 5,6, 1,5 Hz, 1H), 8,91 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,1, 5,6 Hz, 1H), 5,42 (dt, J = 33,2, 7,3 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,79 - 3,64 (m, 2H), 3,12 (s, 3H). Di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(4-metilpiridin-3-ilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 48)

[00337] Sólido quase branco; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,25 (s, 1H), 8,97 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,42 (dt, J = 33,2, 7,3 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 19,1 Hz, 2H), 3,70 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H), 2,99 (d, J = 0,6 Hz, 3H). Cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-((2-metilbenzo[d]tiazol-4-il)sulfonil)but-2-en-1- amina (Composto 50)

[00338] Sólido amarelo pálido; p.f. (ponto de fusão) 243 - 245 0C; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 8,37 (dd, J = 8,1, 1,2 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,7, 1,2 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 5,20 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 19,0 Hz, 2H), 3,60 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 2,97 (s, 3H). EXEMPLO 18

[00339] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos W, X, Y, Z então H e I Cloridrato de (Z)-4-((2,3-dimetil-1H-indol-7-il)sulfonil)-3-fluorobut-2-en-1- amina (Composto 52) Procedimento W: Preparação de (2-iodofenil)-hidrazina

[00340] Em um frasco de fundo redondo de 1L, solução de 2- iodoanilina (40,0 g, 0,182 mmol) em HCl conc. (250 mL) foi tratada com uma solução de NaNOi (15,1 g, 0,22 mmol) em água (40 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 2 h e tratada com SnCl2 (86,6 g, 0,46 mmol) lentamente a 0°C. A temperatura de reação foi gradualmente aumentada para a temperatura ambiente e a mistura de reação foi agitada durante um tempo adicional de 6h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi filtrada e lavada com n-pentano (50 mL) e éter dietílico (50 mL) para produzir o composto do título (42 g, 98,26%). 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ ppm: 10,2 (br. s, 2H), 7,79-7,76 (m, 1H), 7,7-7,45 (br, 1H), 7,36 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,75 (t, J = 7,8 Hz, 1H). Procedimento X: Preparação de 7-iodo-2,3-dimetil-1H-indol

[00341] Em um frasco de fundo redondo de 250 mL, uma solução de (2-iodofenil)-hidrazina (10 g, 42,73 mmol) em ácido acético (80 mL) foi gradualmente aquecida para 60°C e agitada durante 1h. 2-Butanona (6,18 g, 85,36 mmol) foi lentamente adicionada a 60°C. A mistura de reação resultante foi então aquecida para 80°C durante 5h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi diluído com água fria, e extraído com acetato de etila (100 mL x 2). O extrato orgânico combinado foi lavado com salmoura e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado em gel de sílica eluindo com EtOAc 10%-hexanos para fornecer o composto do título como um sólido quase branco (2,00 g, 18%). 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ ppm: 10,54 (s, 1H), 7,37-7,24 (m, 2H), 6,73 (t, J = 8 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). Procedimento Y: Preparação de 3-((2,3-dimetil-1H-indol-7-il)tio)propanoato de metila

[00342] Em um tubo de reação de 50 mL revedável, uma solução de 7- iodo-2,3-dimetil-1H-indol (1,60 g, 10,5 mmol) em 1, 4-dioxano (10 mL) foi desgaseificada sob atmosfera de nitrogênio. Pd2(dba)3 (50,0 mg, 0,06 mmol), Xantphos (100 mg, 0,18 mmol), 3-mercaptopropanoato de metila (0,70 g, 5,90 mmol) e DIPEA (2,00 mL, 11,80 mmol) foram adicionados sequencialmente sob atmosfera de nitrogênio. A solução foi desgaseificada por purga de gás argônio durante 15 min, gradualmente aquecida para 1100C e agitada à esta temperatura durante 12h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água fria, e extraída com EtOAc (2 x 20 mL). O extrato orgânico combinado foi lavado com salmoura, secado com Na2SO4 anidro e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado em gel de sílica eluindo com EtOAc 10%-hexanos para fornecer o composto do título como um sólido quase branco (1,50 g, 96%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 8,6 (br, 1H), 7,44 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,08 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,22 (s, 3H). Procedimento Z: Preparação de (Z)-(4-((2,3-dimetil-1H-indol-7-il)tio)-3- fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila

[00343] Em um frasco de fundo redondo de 100 mL, carbonato de césio (1,49 g, 4,56 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 3-((2,3- dimetil-1H-indol-7-il)tio)propanoato de metila (0,40 g 1,52 mmol) e (Z)-(4- bromo-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (0,41g, 1,53 mmol) em DMF (15 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 5h. Após a completitude da reação (CCF), a mistura de reação foi inativada pela adição de água gelada (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3). O extrato orgânico combinado foi secado com Na2SO4 anidro e concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado em gel de sílica, eluindo com acetato de etila 20% em hexanos para fornecer o composto do título como um líquido amarelo pálido (350 mg, 63%). 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO-) δ ppm: 10,65 (s, 1H), 7,31 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,93-6,83 (m, 2H), 4,66 (dt, J = 36,3, 7,2 Hz, 1H), 3,67 (d, J = 19,5 Hz, 2H), 3,47 (t, J = 6 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,34 (s, 9H). Cloridrato de (Z)-4-((2,3-dimetil-1H-indol-7-il)sulfonil)-3-fluorobut-2-en-1- amina (Composto 52)

[00344] 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 10,25 (s, 1H), 7,80 (dd, J = 7,8, 1,0 Hz, 1H), 7,55 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7,20 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 5,05 (dt, J = 32,7, 7,4 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 19,2 Hz, 2H), 3,55 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 2H), 2,49 - 2,39 (m, 3H), 2,26 (d, J = 0,8 Hz, 3H). EXEMPLO 19 Preparação de (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1-il)carbamato de terc-butila Procedimento AA: Preparação de 2-oxoetilcarbamato de terc-butila

[00345] Um vaso carregado com 3-amino-1,2-propanodiol (50,0 kg, 549 mol) e acetato de etila (150 L) foi esfriado para 0 - 5°C. A este foi adicionado dicarbonato de di-terc-butila (120 kg, 550 mol) como porções. A mistura resultante foi agitada a 20 - 25°C durante 12h. Após o esfriamento da mistura de reação para 0 - 5°C, periodato de sódio (120 kg, 561 mol) foi adicionado como porções. A suspensão foi agitada à esta temperatura durante 1h. A mistura de reação foi então filtrada, e a “torta” do filtro foi lavada com acetato de etila (180 L). O filtrado combinado foi lavado com solução aquosa de NaCl (10% p/p, 300 L), secado com Na2SO4 e então evaporado sob vácuo para fornecer 2-oxoetilcarbamato de terc-butila bruto (70,0 kg, 80%). O material bruto foi usado na etapa subsequente sem purificação. Procedimento AB: Preparação de (E)-4-(terc-butoxicarbonilamino)-2- fluorobut-2-enoato de etila

[00346] Um vaso carregado com 2-fluorofosfonoacetato de etila (46,0 kg, 190 mol), acetonitrila (250 L) e 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) (38,0 kg, 250 mol) foi esfriado para 0 - 10°C. A este foi adicionado 2- oxoetilcarbamato de terc-butila (68,0 kg, 427 mol) por gotejamento e a mistura resultante foi agitada a 0 - 10°C durante 4h. A mistura de reação foi diluída com éter metílico e terc-butílico (500 L) e água (500 L), e a agitação foi continuada durante 30 min. Após repouso durante um tempo adicional de 30 min, a camada aquosa foi removida. A camada orgânica foi lavada com água (250 L) e então evaporada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (56 L) e éter de petróleo (240 L) e purificado em gel de sílica (40 kg, tamanho mesh: 100 - 200), eluindo com acetato de etila em éter de petróleo (1:10) para fornecer (E)-4-(terc-butoxicarbonilamino)-2-fluorobut-2- enoato de etila bruto (90 kg). O material bruto foi usado na etapa subsequente sem purificação adicional. Procedimento AC: Preparação de (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila

[00347] A um vaso de reação carregado com (E)-4-(terc- butoxicarbonilamino)-2-fluorobut-2-enoato de etila bruto (90,0 kg, 364 mol), THF (314 L) e metanol (36 L) a 0 - 10°C foi adicionado boro-hidreto de sódio (16,6 kg, 439 mol) como porções durante 4h. Após a adição completa a mistura resultante foi agitada a 0 - 10°C durante 3h. A reação foi inativada pela adição de HCl aquoso (0,5 N, 900 L). O produto foi então extraído com acetato de etila (720 L x 2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (450 L), e concentradas sob vácuo. A água residual foi remova por coevaporação com THF (200 L x 3) para fornecer (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut- 2-enilcarbamato de terc-butila bruto (85 kg). Este material foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Procedimento AD: Preparação de 3,5-dinitrobenzoato de (Z)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-fluorobut-2-en-1 -ila

[00348] A um vaso de reação carregado com (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut- 2-enilcarbamato de terc-butila bruto (170 kg, 828 mol), THF (765 L) e trietilamina (174 L, 1245 mol) a 0 - 20°C foi adicionado cloreto de 3,5- dinitrobenzoíla (190 kg, 824 mol) como porções. A mistura resultante foi agitada a 0 - 20°C durante 2h e então diluída com água (850 L) e acetato de etila (1700 L). A camada aquosa foi removida e as camadas orgânicas foram lavadas com solução aquosa de Na2CO3 (10% p/p, 850 L x 2) e então água (850 L). Após concentração sob vácuo (para aproximadamente 190 L), acetato de etila (245 L) foi adicionado. A mistura foi agitada a 55°C até que fosse obtida uma solução transparente. A mistura foi esfriada para 10 - 20°C, n-heptano (730 L) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 6h. O sólido assim formado foi isolado por filtração e lavado com n-heptano/acetato de etila (4:1, 170 L). Análise por CLAE indicou um teor de E-isômero de 30%. O teor de E-isômero foi reduzido para 4,3% por um processo de precipitação como segue. O sólido foi dissolvido em acetato de etila (570 L). A este foi adicionado n-heptano e a pasta fluida resultante foi agitada a 20 - 30°C durante 4 - 6h. O sólido foi isolado por filtração e a “torta” do filtro foi lavada com n-heptano/acetato de etila (4:1). Este processo foi repetido mais uma vez para fornecer 3,5-dinitrobenzoato de (Z)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)-2-fluorobut-2-en-1-ila (84 kg como uma “torta” úmida). Este material foi usado na etapa seguinte. Procedimento AE: Preparação de (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila

[00349] Um vaso de reação carregado com 3,5-dinitrobenzoato de (Z)- 4-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-fluorobut-2-en-1-ila (84 kg, 210 mol), THF (187 L) e solução aquosa de NaOH (1,00 M, 420 L) foi agitado a 15 - 25°C durante 2 - 5h. O progresso da reação foi monitorado por CCF. A mistura de reação foi diluída com acetato de isopropila (966 L) e a agitação foi continuada durante 10 - 30 min. Após repouso durante 10 - 30 min e separação subsequente das camadas, a camada aquosa foi extraída com mais acetato de isopropila (483 L). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa de Na2CO3 (10% p/p, 420 L x 2), solução aquosa de NaCl (10% p/p, 420 L) e então concentrados para aproximadamente 84 L. A água residual foi removida por coevaporação com THF (468 L) para fornecer (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut-2-enilcarbamato de terc-butila (29,0 kg, 67%). A análise por CLAE indicou que o teor de E-isômero é de 3,8%. Procedimento AF: Preparação de (Z)-4-bromo-3-fluorobut-2-emlcarbamato de terc-butila

[00350] Um vaso de reação carregado com (Z)-3-fluoro-4-hidroxibut- 2-enilcarbamato de terc-butila (29,0 kg, 141 mol) THF (290 L) e di- isopropiletilamina (DIPEA) (74,0 L, 425 mol) foi esfriado para 0 - 10°C. A este foi adicionado uma solução de anidrido metanossulfônico (50,0 kg, 287 mol) em THF (145 L) por gotejamento. Após a adição completa, brometo de lítio (74,0 kg, 852 mol) foi adicionado como porções enquanto se mantinha a temperatura entre 0 e 10°C. A mistura resultante foi agitada a 0 - 10°C durante 4h. CCF após este tempo indicou o consumo completo do material de partida. A mistura de reação foi diluída com água (290 L) e o produto foi extraído com acetato de etila (290 L + 145 L). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (150 L) e então concentrados até a secura. O resíduo bruto foi recolhido em acetato de etila (67 L) e n-heptano (440 L) e purificação foi realizada em gel de sílica (40 kg; tamanho mesh:100 - 200), eluindo com acetato de etila/n-heptano (1:5). Todas as frações contendo o produto desejado foram concentradas até a secura. Acetato de etila (56 L) foi adicionado e a agitação a 40 - 50°C foi continuada até que fosse obtida uma solução transparente. A esta foi adicionado n-heptano (280 L) por gotejamento. A mistura foi esfriada para 10 - 15°C e agitada durante 8h. O sólido resultante foi coletado por filtração. Análise por CLAE indicou que o teor de E-isômero é de 0,9%. Para adicionalmente reduzir o teor de E-isômero o processo de purificação foi repetido como segue. Acetato de etila (33 L) foi adicionado e a agitação a 40 - 50°C foi continuada até que fosse obtida uma solução transparente. A esta foi adicionado n-heptano (164 L) por gotejamento. A mistura foi esfriada para 10 - 15°C e agitada durante 8h. O sólido resultante foi coletado por filtração e secado para fornecer (Z)-4- bromo-3-fluorobut-2-enilcarbamato de terc-butila (29,5 kg, 68%). Análise por CLAE indicou que o teor de E-isômero é de 0,1%. 1H-NMR (300 MHz; CDCl3) δ ppm: 1,46 (9H, s), 3,85 (2H, dd, J 6,2, 6,2 Hz), 3,93 (2H, d, J 19,5 Hz), 4,66 (1H, br. s), 5,16 (1H, dt, J = 34,0, 6,5 Hz). EXEMPLO 20

[00351] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos AG e AH. Preparação de cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 1) Procedimento AG: Preparação de (Z)-(3-fluoro-4-(fenilsulfoml)but-2-en-1- il)carbamato de terc-butila

[00352] Um vaso carregado com (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1- il)carbamato de terc-butila (2,40 kg, 8,95 mol) e DMF (12,0 L) foi esfriado para entre 15 e 20°C. A este foi adicionado benzenossulfinato de sódio (2,20 kg, 13,4 mol) e a mistura resultante foi agitada a 15 - 20°C durante 4h. A mistura de reação foi diluída com água (12,0 L) e a agitação foi continuada à temperatura ambiente durante um tempo adicional de 1h. O sólido assim formado foi isolado por filtração, e a “torta” do filtro foi lavada com mais água (6,0 L). O sólido foi então secado sob vácuo a 50 - 55°C durante 20h para fornecer (Z)-(3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc- butila (2,70 kg, 92%). Tempo de retenção (TR) = 13,75 min; Método-Agilent LC/MSD 1200 Series; coluna: ZORBAX SB-C18, ODS 2000 (50 mm x 4,6 mm, 5 μm) operando em modo de ionização ES (+) ou (-); taxa de fluxo 1,5 mL/min; Temperatura (T) = 30°C; comprimento de onda de detecção: 214 nm; fase móvel: de 5% de acetonitrila (contendo 0,05% de ácido trifluoroacético (TFA, TrifluoroAcetic Acid) e 95% de água (contendo 0,05% de TFA) para 90% de acetonitrila e 10% de água, durante 24 min. Procedimento AH: Preparação de cloridrato de (Z)-3-fluoro-4- (fenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 1)

[00353] A um vaso carregado com HCl (4,00 M em acetato de etila; 13,5 L, 54,0 mol) e esfriado para entre 10 e 20°C foi adicionada uma solução filtrada (hyflo) de (Z)-(3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (2,70 kg, 8,20 mol) em acetato de etila (27,0 L). A mistura de reação foi agitada a 10 - 20°C durante 6h. O sólido resultante foi isolado por filtração, e a “torta” do filtro foi lavada com acetato de etila (8,0 L). O sólido foi então secado sob vácuo a 50 - 55°C durante 40h para fornecer cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 1) (2,10 kg; 96%). 1H-NMR (300 MHz; CD3OD) δ ppm: 3,64 (2H, dd, J = 7,3, 1,2 Hz), 4,36 (2H, d, J = 19,1 Hz), 5,18 (1H, dt, J = 32,7, 7,4 Hz), 7,65-7,71 (2H, m), 7,79 (1H, tt, J = 7,4, 1,2 Hz), 7,96-8,00 (2H, m); LC-MS: para C10H12FNO2S calculado 229,1, verificado 230,1 [M+1]+. EXEMPLO 21

[00354] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos AI, AJ e AK. Preparação de di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(quinolin-8-ilsulfonil)but-2-en- 1-amina mono-hidrato (Composto 33) Procedimento AI: Preparação de qumolma-8-sulfínato de sódio

[00355] Um vaso carregado com Na2SO3 (6,70 kg, 53,2 mol) e água (21,0 L) foi agitado à temperatura ambiente durante 20 min. Ao vaso foi adicionado Na2CO3 (5,50 kg, 51,9 mol) e a agitação foi continuada à temperatura ambiente durante 20 min. Cloreto de quinolina-8-sulfonila (6,00 kg, 26,4 mol) foi então adicionado como porções enquanto se mantinha a temperatura abaixo de 40°C. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3h. A mistura de reação foi filtrada e a “torta” do filtro foi lavada com metanol (7,0 L). O filtrado foi concentrado até a secura sob vácuo, e ao resíduo resultante foi adicionado metanol (7,0 L). Após a agitação à temperatura ambiente durante 1h, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado até a secura. Em um segundo ciclo de lavagem, final, o resíduo foi coletado em metanol (10,0 L) e a agitação foi continuada à temperatura ambiente durante 1h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para fornecer quinolina-8-sulfinato de sódio (4,10 kg, 72%). Procedimento AJ: Preparação de (Z)-(3-fluoro-4-(qumolm-8-ilsulfonil)but-2- en-1-il)carbamato de terc-butila

[00356] Um vaso carregado com (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1- il)carbamato de terc-butila (3,50 kg, 13,1 mol), quinolina-8-sulfinato de sódio (4,20 kg, 19,5 mol) e DMF (17,5 L) foi esfriado para 15 - 20°C. A mistura resultante foi agitada à esta temperatura durante 20h. A mistura foi então diluída com acetato de etila (35,0 L) e água (35,0 L), e a agitação foi continuada durante um tempo adicional de 10 min. A camada orgânica foi então separada e lavada com água (20,0 L x 2). Após a concentração da camada orgânica para aproximadamente 20 L, n-heptano (42,0 L) foi adicionado por gotejamento. A suspensão resultante foi agitada à 20 - 30°C durante 20h. O sólido foi isolado por filtração, lavado com n-heptano e então secado sob vácuo a 50 - 55°C durante 20 h para fornecer (Z)-(3-fluoro-4- (quinolin-8-ilsulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (3,80 kg, 77%). RT = 12,97 min; Método-Agilent LC/MSD 1200 Series; coluna: ZORBAX SB-C18, ODS 2000 (50 mm x 4,6 mm, 5 μm) operando em modo de ionização ES (+) ou (-); taxa de fluxo 1,5 mL/min; Temperatura (T) = 30°C; comprimento de onda de detecção: 214 nm; fase móvel: de 5% de acetonitrila (contendo 0,05% de ácido trifluoroacético (TFA)) e 95% de água (contendo 0,05% de TFA) para 90% de acetonitrila e 10% de água, durante 24 min. Procedimento AK: Preparação de di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(quinolin-8- ilsulfonil)but-2-en-1-amina mono-hidrato (Composto 33)

[00357] A um vaso carregado com HCl (1,5 M em acetato de etila; 53 L) a 10 - 20°C foi adicionado (Z)-(3-fluoro-4-(quinolin-8-ilsulfonil)but-2-en- 1-il)carbamato de terc-butila (5,3 kg, 14 mol). A mistura foi agitada a 15°C durante 4h. O sólido resultante foi isolado por filtração e lavado com acetato de etila (20 L). A um frasco contendo o sólido foi adicionado acetato de etila (53 L). A suspensão foi então agitada a 10 - 20°C durante 2h. O sólido foi isolado por filtração e lavado com acetato de etila (20 L). O sólido foi dissolvido em metanol (53 L) e a solução foi filtrada. A esta foram então adicionados água (500 mL) e éter metílico e terc-butílico (53 L) por gotejamento e a agitação foi continuada a 15°C durante um tempo adicional de 20h. O sólido foi coletado por filtração e secado sob vácuo a 55 - 60°C para fornecer di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-(quinolin-8-ilsulfonil)but-2-en-1- amina mono-hidrato (Composto 33) (4,4 kg, 90%). 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 9,18 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 8,70 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1H), 8,57 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,99 - 7,68 (m, 2H), 5,22 (dt, J = 32,9, 7,4 Hz, 1H), 5,00 (d, J = 19,4 Hz, 2H), 3,60 (d, J = 7,7 Hz, 2H); LC- MS: para C13H13FN2O2S calculado 280,1, verificado 281,1 [M+1]+. EXEMPLO 22

[00358] O seguinte composto foi preparado de acordo com os procedimentos AL e AM. Preparação de di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-((quinolin-8-il-d6)sulfonil)but-2- en-1-amina (Composto 53) Procedimento AL: Preparação de (Z)-(3-fluoro-4-((quinolin-8-il- d6)sulfonil)but-2-en-1 -il)carbamato de terc-butila

[00359] A uma solução agitada de (Z)-(4-bromo-3-fluorobut-2-en-1- il)carbamato de terc-butila (606 mg, 2,26 mmol) em DMF (4,0 mL) foi adicionado 2,3,4,5,6,7-hexadeutérioquinolina-8-sulfinato de sódio (500 mg, 2,26 mmol) como uma porção. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. A mistura de reação foi então diluída com água (40 mL), e o produto foi extraído com acetato de etila (20 mL x 3). A camada orgânica combinada foi lavada com solução sat. aq. de NH4Cl (20 mL x 3) e salmoura (20 mL), secada com Na2SO4 e então evaporada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de fase normal (Reveleris), eluindo com 20 - 50% de acetato de etila em hexanos para fornecer (Z)-(3- fluoro-4-((quinolin-8-il-d6)sulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (470 mg, 53%) como um sólido quase branco. Procedimento AM: Preparação de di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-((quinolin- 8-il-d6)sulfonil)but-2-en-1-amina (Composto 53)

[00360] A uma solução agitada de (Z)-(3-fluoro-4-((quinolin-8-il- d6)sulfonil)but-2-en-1-il)carbamato de terc-butila (450 mg, 1,22 mmol) em metanol (1,0 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HCl (2,0 M em éter dietílico; 4,0 mL, 8,0 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1h e no decorrer deste tempo um sólido precipitou. A mistura de reação foi transferida para um frasco e centrifugada em uma centrífuga (4.000 rpm, 4 min). O sobrenadante foi cuidadosamente decantado, e a “torta” sólida restante foi secada sob alto vácuo para fornecer di-cloridrato de (Z)-3-fluoro-4-((quinolin-8-il-d6)sulfonil)but-2-en-1-amina (355 mg, 81%) como um sólido branco. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm: 5,20 (dt, J = 32,8, 7,4 Hz, 1H), 5,08 - 4,96 (m, 2H), 3,59 (d, J = 7,4 Hz, 2H).

EXEMPLO 23 Método para determinar a capacidade dos compostos da invenção para inibir LOX e LOXL1-4 de fontes diferentes

[00361] Lisil-oxidase (LOX) é uma enzima extracelular dependente de cobre que oxida resíduos de peptidil-lisina e hidroxilisina em colágeno e resíduos de lisina em elastina para produzir peptidil-alfa-aminoadípico-delta- semialdeídos. Esta reação catalítica pode ser irreversivelmente inibida por β- aminopropionitrila (BAPN) que se liga ao sítio ativo de LOX (Tang S.S., Trackman P.C. e Kagan H.M., “Reaction of aortic lysyl-oxidase with beta- aminoproprionitrile.” J. Biol. Chem. 1983; 258: 4331-4338). Há cinco membros da família LOX; estes são LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 e LOXL4. Os membros das famílias LOX e LOXL podem ser comprados como proteínas ativas recombinantes junto aos fornecedores comerciais, ou extraídos de tecidos animais como aorta bovina, tendões bovinos, pele de porco; ou preparados a partir de culturas de células. Os efeitos inibitórios dos compostos da presente invenção foram testados contra a dada preparação de LOX-LOXL usando um método baseado na detecção de peróxido de hidrogênio com um ensaio de oxidação de Vermelho Amplex (Zhou et al. “A stable nonfluorescent derivative of resorufin for the fluorometric determination of trace hydrogen peroxide: applications in detecting the activity of phagocyte NADPH oxidase and other oxidases.” Anal. Biochem. 1997; 253, 162-168). O ensaio foi desenvolvido usando placas de formato de quer 96 poços quer 384 poços. Resumidamente, em um ensaio em placa preta, de 384 poços, de fundo transparente, padrão, 25 μL de uma diluição de qualquer uma das isoenzimas e de ortólogos em solução tampão de ureia 1,2 M, borato de sódio 50 mM (pH 8,2) foram adicionados a cada poço na presença de mofegilina 1 μM e pargilina 0,5 mM (para inibir SSAO e MAO- B e MAO-A, respectivamente; não necessárias se a enzima é de um forma recombinante ou purificada). Os compostos de teste foram dissolvidos em DMSO e testados em uma Curva de Resposta à Concentração (CRC) com 11 pontos de dados, tipicamente na faixa micromolar ou nanomolar após a incubação com a enzima durante 30 min a 37°C. Vinte e cinco μL de uma mistura de reação contendo o dobro da concentração KM de putrescina (Sigma Aldrich, por exemplo 20 mM para LOX, ou 10 mM para LOXL2 e LOXL3), 120 μM de Vermelho Amplex (Sigma Aldrich) e 1,5 U/mL de peroxidase de raiz-forte (Sigma Aldrich) preparada em solução tampão de ureia 1,2 M, borato de sódio 50 mM (pH 8,2) foram então adicionados aos poços correspondentes. Os volumes acima foram duplicados no caso de placa de 96 poços. A fluorescência (UFR, Unidade de Fluorescência Relativa) foi lida a cada 2,5 min durante 30 min em uma faixa de temperaturas de 37°C, com excitação a 565nm e emissão a 590 (Optima; BMG Labtech). O coeficiente angular para a cinética de cada poço foi calculado usando programa de computador de análise de dados MARS (BMG Labtech) e este valor foi usado para deduzir o valor de CI50 (Dotmatics). A capacidade dos compostos da invenção para inibir a atividade de amina-oxidase LOX e de outros membros da família é mostrada na Tabela 3. Tabela 3 Atividades inibitórias de LOX e LOXL2 dos compostos exemplificadores da invenção.

EXEMPLO 24 Compostos da presente invenção apresentam inibição prolongada de LOXL1 e de LOXL2

[00362] Para efeito farmacológico significativo na presença de alta concentração de substrato, os compostos que exercem inibição, prolongada, de longa duração de LOX e de LOXL1-4 apresentam uma forte vantagem sobre os inibidores competitivos porque o efeito farmacológico perdura mais que a presença do inibidor não ligado. Em uma modalidade preferida, os compostos da presente invenção apresentam inibição prolongada de LOX e de LOXL1-4.

Método de determinação da inibição prolongada de LOX e de LOXL1-4 pelos compostos da invenção

[00363] Experimento de “Jump Dilution” (Diluição Grande e Rápida; Diluição Infinita): O ensaio foi desenvolvido usando uma placa de formato de 96 poços e a concentração de enzima de partida foi ajustada 100 vezes mais alta que para os estudos de inibição. A enzima foi incubada durante 40 minutos a 37°C na presença de 10x ou (onde necessário para se certificar de que a concentração de inibidor ultrapassa a concentração de enzima) de 30x as concentrações CI50 do inibidor de teste. Após a incubação, a mistura foi diluída 50x em solução tampão de ensaio, seguido por uma diluição adicional de 2x em mistura de reação de Vermelho Amplex-peroxidase de raiz-forte- putrescina (a mesma para os estudos de inibição) antes da medição de fluorescência. Os resultados foram expressados em % de recuperação do sinal após um tempo especificado por comparação com os controles não inibidos. Os resultados são mostrados na Tabela 4. Tabela 4 Medição da inibição prolongada de LOXL1 e de LOXL2 pelos compostos da invenção.

EXEMPLO 25 Farmacocinética in vivo

[00364] Os compostos de teste (10 mg/kg e 30 mg/kg em PBS, p.o. n=3) foram administrados a ratos machos Wistar de 7 a 9 semanas de idade. As amostras de sangue com composto de teste foram coletadas em instantes de tempo de 0,25h a 8,00h (Composto 1); de 0,5h a 8,00h (Composto 33) após a administração, da veia da cauda.

[00365] Preparação de amostra: 20 μL de amostras de calibração (em única), amostras QC (em duplicata) e amostras de plasma de rato foram misturados com 60 μL de acetonitrila contendo padrão interno (PI; 200 ng/mL de tolbutamida e 50 ng/mL de propanolol) em tubos Eppendorf. A mistura foi submetida ao vórtice durante 1 min, então foi centrifugada durante 10 min, 50 μL de sobrenadante foram transferidos para uma placa de 96 poços com 100 μL de água. Após a agitação durante 10 min, 10 μL foram injetados no sistema de cromatografia líquida (CL) - espectrometria de massa (EM/EM) (LC-MS/MS, CL-EM/EM) para análise. Método de CL (Composto 1)

[00366] CLAE (HPLC): Agilent 1100; Espectrômetro de Massa: API 4000 Coluna: Fenomenex Gemini C18 5 μm 50 mm x 4,6 mm Fase móvel: 0,1% de ácido fórmico em água, 0,1% de ácido fórmico em acetonitrila Método de CL (Composto 33)

[00367] CLAE (HPLC): Shimadzu LC30AD; Espectrômetro de Massa: API 4000 Coluna: Agilent SB C18 1,8 μm 50 mm x 2,1 mm Fase móvel: 0,1% de ácido fórmico em água, 0,1% de ácido fórmico em acetonitrila

[00368] Para amostras de diluição: 10 μL de amostra foram adicionados a 90 μL de plasma em branco de rato. A mistura foi precipitada com 300 μL de acetonitrila contendo PI em tubos Eppendorf. A mistura foi submetida ao vórtice durante 1 min, então foi centrifugada durante 10 min, 50 μL de sobrenadante foram transferidos para uma placa de 96 poços com 100 μL de água. Após a agitação durante 10 min, 10 μL foram injetados no sistema LC-MS/MS (CL-EM/EM) para análise. As concentrações plásmicas médias, determinadas, dos Compostos 1 e 33 são mostradas na Tabela 5 e na Tabela 6 respectivamente. Tabela 5 Concentração plasmática média de Composto 1 após dosagem p.o. de 10 e 30 mg/kg Tabela 6 Concentração plasmática média de Composto 33 após dosagem p.o. de 10 e 30 mg/kg

EXEMPLO 26 Engate de alvo

[00369] Uma dose única de um inibidor baseado em mecanismo pode ser suficiente para bloquear a atividade enzimática in vivo durante um período prolongado.

Medição da atividade de lisil-oxidase - ensaio em fatia de orelha

[00370] As orelhas, coletadas imediatamente após a morte dos ratos (tratados ou não tratados com um inibidor de LOX), foram rapidamente congeladas em gelo seco para armazenamento a -80°C. Para o ensaio, amostras de 5mm x 5mm foram cortadas (ainda semidescongeladas), embebidas em gel de agarose e cortadas em seções transversais de 200 μm de espessura (Vibratome®). As seções finas foram coletadas em PBS gelado contendo inibidores de protease, e permitidas repousarem no banho durante 23 horas, para permitir que os contaminantes solúveis se difundissem para fora antes do ensaio. Para formato de placa de 96 poços: três fatias de orelha foram coletadas, cuidadosamente secadas com papel absorvente Kimwipe®, e transferidas para cada poço contendo 100 μL de solução tampão de ensaio (solução tampão de 1,2 M de ureia, 50 mM de borato de sódio, pH 8,2), durante uma pré-incubação de 30 minutos a 37°C na presença de 1 μM de mofegilina e de 500 μM de pargilina. BAPN (500 μM) havia sido adicionada a todos os poços de “controle baixo”. Um mínimo de três réplicas foi realizado para cada condição.

[00371] Após a pré-incubação, 100 μL de mistura de Vermelho Amplex-peroxidase de raiz-forte (HRP, HorseRadish Peroxidase) (120 μM de Vermelho Amplex, 1,5 U/mL de HRP, 20 mM de putrescina) foram adicionados a todos os poços, e a placa foi lida 13 vezes a 37°C a cada 2,5 minutos (excitação a 544 nm e emissão a 590 nm, em um BMG Clariostar®, no modo de leitura de topo, orbital). O coeficiente angular das curvas cinéticas, subtraído dos valores obtidos nos controles baixos (na presença de BAPN), foi considerado uma medição da atividade de lisil-oxidase específica na amostra.

EXEMPLO 27 Medição da atividade de lisil-oxidase na aorta

[00372] Preparação de amostra: Todas as preparações para atividades foram realizadas sobre gelo, com soluções tampão na presença de inibidores de proteases (PMSF: Sigma P7626, 0,25mM, Aprotinina: Sigma A6279, 1 μL por mL) (Methods in Cell Biology, 2018; 143: 147-156). A adventícia circundante e músculo/tecido adiposo da amostra de aorta congelada foram removidos em Solução Tampão de Lavagem gelada (0,15 M de NaCl, 50 mM de borato de sódio, pH=8,0, com inibidores de protease) usando fórceps fino, sob um microscópio de dissecação. A aorta foi secada com papel absorvente Kimwipe® e pesada em um tubo Eppendorf de 1,5 mL e deixada sobre gelo. Após congelamento rápido da aorta em nitrogênio líquido, um almofariz e o pilão (armazenados a -80°C) foi usado para pulverizar o tecido. O tecido pulverizado foi transferido para um tubo planejado contendo esferas metálicas, Solução Tampão de Lavagem 10 x v/p + inibidores de protease. Os tecidos foram homogeneizados durante 5 segundos usando um moinho de esferas. O homogeneizado foi centrifugado a 10.000xg durante 10 minutos a 4°C e o sobrenadante foi rejeitado. As etapas de homogeneização e de lavagem foram repetidas mais duas vezes. O pélete resultante foi ressuspenso em 3x v/p de Solução Tampão de Ureia 6 M (50 mM de borato de sódio, 6 M de ureia, pH=8,2) + inibidores de protease, e então a suspensão foi submetida ao vórtice. A amostra foi então deixada a 4°C sobre um agitador de rolo durante 3 horas para extração. Após a extração, a amostra foi centrifugada (10.000xg a 4°C durante 20 min.) e o sobrenadante foi retido. Um volume igual de todas as amostras foi transferido para dentro de um tubo novo para diluição (mínimo requerido é de 33 μL). As amostras foram diluídas para 2,4 M de ureia (a amostra neste estágio é ~ 4,5 M de ureia) com solução tampão de Borato de Na (50 mM de borato de sódio, pH 8,2) + inibidores de protease, e usadas no ensaio subsequente.

[00373] Ensaio: Pargilina (concentração final 0,5 mM) e mofegilina (concentração final 1 μM) foram adicionadas às amostras. Poços em duplicata foram configurados em placa preta de 384 poços, 25 μL por poço. Em uma duplicata foi adicionado 0,5 μL de 30 mM de BAPN (pan-inibidor de LOX); provendo o valor de fundo (controle baixo). As amostras foram então incubadas durante 30 minutos a 37°C. A Mistura de Reação (25 μL) foi adicionada a cada poço (as concentrações foram mostradas como 2x a concentração final no ensaio: 120 μM de Vermelho Amplex, 1,5 U/mL de HRP, 20 mM de putrescina). A fluorescência da placa foi então medida a cada 2,5 min (Ex: 544 nm/Em: 590 nm/ ganho: 1260; 37°C) em Fluostar™.

[00374] Ratos machos jovens Wistar receberam uma dose oral única (10 ou 30 mg/kg) de Compostos 1 ou 33 (Tabelas 5 e 6 respectivamente) e a atividade enzimática foi medida em tecidos com uma atividade basal alta nesta idade, na orelha (Figuras 2a e b; Compostos 1 e 33 respectivamente) e na aorta (Figura 3c; Composto 33 apenas). As respostas foram normalizadas para a atividade medida em animais tratados com solução salina (controle).

[00375] O Composto 1 aqui descrito exerce uma inibição de longa duração de LOX. Enquanto as concentrações plasmáticas de Composto 1 estão muito abaixo da CI50 após 8 horas (Tabela 5) no plasma de ratos, a redução prolongada, dependente de dose, na atividade de LOX é mensurável 24 horas após uma dose oral única (Figura 2a); >20 horas após as concentrações plasmáticas de Composto 1 caíram para abaixo da CI50.

[00376] Foi verificado que uma dose alta única (30 mg/kg) de Composto 33 completamente anula a atividade de lisil-oxidase. Enquanto as concentrações plasmáticas de Composto 33 estão muito abaixo da CI50 após 8 horas (Tabela 6), a meia-vida de recuperação estão entre 2 e 3 dias (orelha) e 24 horas (aorta) (Figuras 2b e 2c). Dessa forma, o Composto 33 produz inibição de longa duração que perdura mais que a presença do composto ativo no plasma.

EXEMPLO 28 Método para determinar a capacidade dos compostos de Fórmula I para inibir a SSAO/VAP-1 recombinante humana

[00377] Atividade de amina-oxidase SSAO/VAP-1 recombinante humana foi determinada usando um método colorimétrico acoplado conforme descrito para monoamina-oxidase, amina-oxidases contendo cobre e enzimas relacionadas (Holt A. e Palcic M., “A peroxidase-coupled continuous absorbance plate-reader assay for flavin monoamine oxidases, copper- containing amine oxidases and related enzymes.” Nat. Protoc. 2006; 1: 2498-2505). Resumidamente, um cDNA molde clonado correspondendo aos resíduos 34-763 de SSAO/VAP-1 humana, e incorporando uma sequência de sinal kappa (K) de Ig, tag de epítopo flag N-terminal e sítio de clivagem do vírus etch do tabaco (TEV), foi montado em um vetor de expressão em mamífero (pLO-CMV) pela Geneart AG. Este vetor contendo resíduo de SSAO/VAP-1 humana foi transfectado para dentro de linhagem celular mutante de glicosilação CHO-K1, Lec 8. Um clone estavelmente expressando SSAO/VAP-1 humana foi isolado e cultivado em grande escala. SSAO/VAP- 1 humana ativa foi purificada e recuperada usando cromatografia de imunoafinidade. Esta foi usada com a fonte de atividade de SSAO/VAP-1. Um ensaio colorimétrico de alto desempenho foi desenvolvido usando formado de placa quer de 96 poços quer de 384 poços. Resumidamente, em um ensaio em placa de 96 poços padrão, 50 μL de SSAO/VAP-1 humana purificada (0,25 μg/mL) em solução tampão de fosfato de sódio 0,1 M (pH 7,4) foram adicionados a cada poço. Os compostos de teste foram dissolvidos em DMSO e testados em uma Curva de Resposta à Concentração (CRC) com 4-11 pontos de dados, tipicamente na faixa micromolar ou nanomolar após a incubação com SSAO/VAP-1 humana durante 30 min a 37°C. Após incubação durante 30 min, 50 μL da mistura de reação contendo 600 μM de benzilamina (Sigma Aldrich), 120 μM de Vermelho Amplex (Sigma Aldrich) e 1,5 U/mL de peroxidase de raiz-forte (Sigma Aldrich) preparada em solução tampão de fosfato de sódio 0,1 M (pH 7,4) foram adicionados ao poço correspondente. A unidade de fluorescência (UFR, Unidade de Fluorescência Relativa) foi lida a cada 2,5 min durante 30 min a 37°C com excitação a 565 nm e emissão a 590 (Optima; BMG Labtech). Cada coeficiente angular da cinética para cada poço foi calculado usando o programa de computador de análise de dados MARS (BMG Labtech) e este valor foi usado para deduzir o valor de CI50 (Dotmatics). A capacidade dos compostos de Fórmula I para inibir SSAO/VAP-1 é mostrada na Tabela 7

EXEMPLO 29 Método para determinar a capacidade dos compostos de Fórmula I para inibir MAO-B recombinante humana

[00378] A especificidade dos compostos desta invenção foi testada pela determinação da capacidade deles para inibir as atividades de MAO-B in vitro. MAO-B humana recombinante (0,06 mg/mL; Sigma Aldrich) foi usada como fonte de atividades de enzima MAO-B. O ensaio foi realizado em uma maneira similar ao ensaio de SSAO/VAP-1 humana (Exemplo 28) exceto que o substrato benzilamina foi usado a 100 μM. A capacidade dos compostos de Fórmula I para inibir a MAO-B é mostrada na Tabela 7. Tabela 7 Seletividade dos compostos de Fórmula I para LOX e LOXL2 comparado com SSAO/VAP-1 e MAO-B.

[00379] As enzimas LOX e LOXL1-4 são membros de uma grande família de amina-oxidases dependentes de flavina e dependentes de cobre, que inclui SSAO/VAP-1 e monoamina-oxidase-B (MAO-B). Compostos da presente invenção seletivamente inibem os membros da família LOX de enzimas com respeito a SSAO/VAP-1, MAO-B e outro membro da família de amina-oxidases. Exemplos da magnitude de seletividade podem ser vistos na Tabela 7.

EXEMPLO 30 Modelo de lesão em roedor

[00380] Camundongos receberam lesão por excisão de tecido dérmico. No grupo de tratamento, solução de Composto 1 a 1% foi aplicada topicamente a partir de 24 horas após a lesão até 1 semana após a lesão. Os ferimentos foram então deixados curar durante uma semana adicional. Os camundongos foram eutanasiados 14 dias após a lesão e o tecido foi analisado para teor de coluna I, e alterações em morfologia e histologia macroscópicas.

[00381] A quantidade de colágeno I (medida usando LC-MS (CL-EM) e normalizada para teor de proteína) foi reduzida no tecido tratado comparado com o controle (Figura 3a). Histologia mostrou feixes de colágeno paralelos espessos em tecido cicatricial de controle. Os tecidos tratados com Composto 1 mostraram densidade decrescida de feixes, e estrutura mais ‘normal’ de colágeno (Figuras 3b e 3c).

EXEMPLO 31 Modelo de lesão de queimadura porcina

[00382] Porcos receberam lesões de queimadura dérmica profundas de 4 x 25 cm2, 2 em cada flanco. A partir do tempo de reepitelialização, em cada porco, 2 ferimentos foram tratados com creme de Composto 1 a 3% diariamente durante 4 semanas e 2 receberam creme de controle. Os porcos foram eutanasiados e o tecido foi processado para análise.

[00383] A atividade de LOX foi significativamente reduzida em tecido tratado (Figura 4a), do mesmo modo a proteína colágeno I total (Figura 4b). Morfologia macroscópica (Figuras 4c-f) e histologia macroscópica (Figuras 4g-h) confirmam a densidade reduzida de fibras de colágeno espessas em ferimentos tratados.

EXEMPLO 32 Modelo de câncer pancreático em camundongo

[00384] Camundongos fêmeas nus atímicos (4 a 5 semanas de idade) receberam inoculação de MiaPaca-2luc (linhagem celular pancreática humana) diretamente para dentro do pâncreas. A intensidade de sinal bioluminescente medida e o peso corporal medido foram utilizados para estratificar os tumores em grupos de tratamento no dia 14 após a inoculação inicial. Os grupos de tratamento incluíram 1. Veículo, i.p. 3 vezes por semana. 2. Abraxane® (10 mg/kg, i.p. 2 vezes por semana) e gencitabina (dose inicial 100 mg/kg i.p., para a segunda dose esta foi reduzida para 60 mg/kg i.p. devido à toxicidade aguda e dada duas vezes por semana). 3. Abraxane® (dosado conforme descrito acima) e gencitabina (dosada conforme descrito acima) e Composto 33 (10 mg/kg i.p. 3 vezes por semana) (Consulte a Figura 5a). Os camundongos foram eutanasiados no dia 43 após a inoculação de tumor. Os camundongos foram monitorados para alterações em condição e peso duas vezes por semana. O crescimento de tumor foi monitorado in vivo por imageamento bioluminescente durante todos os estudos (Figura 5b) e os órgãos foram monitorados ex vivo no tempo de colheita de tecido (Figuras 5c-e).

EXEMPLO 33 Modelo de esclerose em camundongo

[00385] Bleomicina subcutânea foi administrada a cada segundo dia (durante 20 dias no total) a camundongo fêmea C57BL/6 para induzir fibrose de pele como um modelo de esclerose. As lesões foram tratadas quer com Veículo, quer com 0,5%, 1% ou 3% de Composto 1. A histologia foi completada após 21dias. A análise histológica é mostrada nas Figuras 6(a-c).

EXEMPLO 34 Modelo de mielofibrose primária em camundongo

[00386] Camundongos machos e fêmeas GATA1-low de quinze a dezesseis semanas de idade foram injetados intraperitonealmente com quer veículo (azeite), quer Composto 19 a uma dose de 15 mg/kg, quatro vezes por semana durante 10 semanas. Os camundongos foram então mortos e os baços e fêmures foram colhidos para histologia e análise (Figuras 7(a-e) e Figuras 8(a-d)).

[00387] Os camundongos tratados com Composto 19 tiveram pesos de baço significativamente mais baixos ajustados para o peso corporal comparados com o grupo de veículo (242,25 mg ± 18 mg vs 305,11 ± 22,4 mg, p < 0,05). Não houve diferença nos parâmetros hematológicos de pré- tratamento, contudo, os camundongos no grupo de tratamento tiveram contagem de plaquetas significativamente mais baixas comparados com os camundongos tratados com veículo após o tratamento (77,5 ± 4,4 K/μL vs 106 ± 12, p < 0,05). Fibrose esplênica e de medula óssea (MO) foi significativamente decrescida em camundongos no grupo de tratamento comparados com os camundongos tratados com veículo. Os megacariócitos (MKs) de MO morfológicos em coloração com H&E foram contados e foram decrescidos em camundongos no grupo de tratamento comparados com os camundongos tratados com veículo (24,65 ± 0,6 por campo de 20 x vs 32,91 ± 0,71, p < 0,001).

EXEMPLO 35 Modelo de obstrução ureteral unilateral (OUU)

[00388] Um modelo de obstrução ureteral unilateral (OUU) de 14 dias de fibrose aguda de rim em camundongos foi conduzido para imitar os diferentes estádios de nefropatia obstrutiva que resulta em uma fibrose tubulointersticial em uma maneira acelerada. A cirurgia de OUU foi realizada pela ligação do ureter esquerdo e induziu decréscimo de espessura e atrofia de rim esquerdo (indicado por um decréscimo significativo em peso de rim e razão de peso de rim/peso corporal quando comparado com o lado contralateral) e também um aumento significativo em fibrose de rim. Os grupos de tratamento receberam o Composto 33 (10 mg/kg diariamente) oralmente durante o estudo. O Composto 33 aumentou o peso de rim e a espessura de rim e reduziu a área de fibrose conforme medida pelo Vermelho Picrosirius (Figura 9). Captopril (~32 mg/kg/dia em água potável) foi usado como um controle positivo.

EXEMPLO 36 Modelo de fibrose de pulmão induzida por bleomicina

[00389] Camundongos C57Bl/6 receberam quantidades de 1,5U/kg de Bleomicina clínica genérica (Blenoxane) via administração orofaríngea. O Composto 33 foi dosado diariamente via gavagem oral durante 21 dias, após cujo tempo, os tecidos foram colhidos e analisados. Conforme mostrado na Figura 10, o Composto 33 significativamente reduziu o escore de Ashcroft e o peso de pulmão. Conforme previsto para um inibidor de lisil-oxidase, o número de ligações cruzadas imaturas (DHLNL) e o número de ligações cruzadas maduras (PYD) por pulmão foram também reduzidos em 37- e 45- por cento, respectivamente.

EXEMPLO 37 Composto 33 reduz metástase associada à fibrose

[00390] Evidência de crescimento sugere que para a metástase de câncer ocorrer, um nicho pré-metastásico necessita ser estabelecido para auxiliar na hemorragia e na colonização metastásica. É considerado que um microambiente fibrótico potencializa a invasão de tumor e a metástase.

[00391] A fibrose hepática foi induzida pelos camundongos BALB/c tratados duas vezes por semana com 1 mg/kg de tetracloreto de carbono (CCl4) durante um período de 8 semanas. Em paralelo, o tratamento com o Composto 33 (20 mg/kg diariamente ip) foi provido, o qual significativamente reduziu a fibrose de fígado (Figuras 11a e b). No término da semana 4, uma linhagem de célula de câncer de mama de camundongo (4t1) foi injetada ortotopicamente (conforme indicado na Figura 11a). O tratamento com o Composto 33 significativamente reduziu a fibrose de fígado (Figura 11b), as ligações cruzadas de colágeno e a carga metastásica no fígado (Figuras 11c e 11d). Não foram observadas diferenças no crescimento de tumor primário ou nas ligações cruzadas de colágeno. EXEMPLO 38 Compostos da presente invenção têm reduzido a atividade de substrato em SSAO comparados com os equivalentes isoméricos, E-alqueno A minimização da atividade fora do alvo é uma consideração muito importante no planejamento e no desenvolvimento de compostos destinados para aplicação terapêutica. Os compostos que incluem E-1 têm sido exemplificados como inibidores de amina-oxidase sensível à semicarbazida (SSAO) [WO2009/066152]. Tem sido relatado que as moléculas deste tipo podem também ser tornadas substratos para SSAO, gerando metabólitos potencialmente tóxicos (Foot et. al., 2012). Em uma modalidade preferida, os compostos da presente invenção não são inibidores nem substratos de SSAO.

Medição de renovação de substrato por SSAO

[00392] Em resumo, o ensaio utilizado determina a propensão do substrato de um composto relativa ao solvente basal (sulfóxido de dimetila apenas). A oxidação de composto pela rhSSAO foi medida por ensaio fluorométrico (Holt e Palcic, 2006). Resumidamente, rhSSAO foi incubada durante 2 horas a 37°C em solução tampão HEPES antes da adição de um volume igual de Vermelho Amplex (20 mM), peroxidase de raiz-forte (4 U/ml), e Composto (2,5 mM) na mesma solução tampão. A cinética da formação de resorufina foi medida imediatamente usando leitor Optima (BMG Labtech GmbH, Ortenburg, Alemanha), a 37°C. Os resultados representativos são mostrados na Tabela 6. Tabela 6

Claims (14)

1. Composto isômero Z, caracterizado pelo fato de ser representado pela Fórmula I: ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo; em que: A é C6-10arila ou heteroarila de 5 a 10 membros em que 1-2 átomos do anel são heteroátomos selecionados independentemente de N e S; cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, deutério, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C6- 10arila, -C(O)NR4R5, e -S(O)2R6; em que cada C1-6alquila e C6-10arila, é opcionalmente substituída com um ou mais halogênio; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, OCH2, e CONH; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em C3- 10cicloalquila e C6-10arila; em que cada R2 está opcionalmente substituído com um ou mais R7; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio e C1-6alquila R6 é C1-6alquila; R7 é -S(O)2NR4R5; e n é 0, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que A é selecionado a partir do grupo consistindo em fenila, naftila, piridinila, quinolinila, benzotiazolila e indolila ou em que A é selecionado a partir do grupo consistindo em:

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que A é selecionado a partir do grupo consistindo em R1 é metila ou isopropila; e n é 0 ou 1.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que A é e n é 0.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser representado pela Fórmula Ia: ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo; em que: cada R1 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em X-R2, halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C6-10arila, - C(O)NR4R5, e -S(O)2R6; em que cada C1-6alquila e, C6-10arila é opcionalmente substituída com um ou mais halogênio; X é selecionado a partir do grupo consistindo em O, OCH2, e CONH; R2 é selecionado a partir do grupo consistindo em C3- 10cicloalquila, e C6-10arila; em que cada R2 é opcionalmente substituído com um ou mais R7; R4 e R5 são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidrogênio, e C1-6alquila R6 é C1-6alquila; R7 é -S(O)2NR4R5 n é 0, 1, 2 ou 3.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que n é 0.

7. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que: cada R1 ser independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em halogênio, C1-6alquila, O-C1-6alquila, C6-10arila, e -S(O)2R6; em que cada C1-6alquila está opcionalmente substituído com um ou mais halogênio; R6 é C1-6alquila; n é 1 ou 2. fato de ser selecionado a partir do grupo consistindo em: 1 0 0 F (Z)-3 -fluoro-4-(fenilsulfonil)but-2-en-1 - amina

8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo consistindo em: ou um sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo consistindo em ou um sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo consistindo em , ou um sal ou hidrato selecionado a partir do grupo consistindo em farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um excipiente, carreador ou diluente farmaceuticamente aceitável.

12. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou de um sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 11, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para inibir a atividade de amina-oxidase de qualquer uma de LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4 ou para tratar uma condição associada a qualquer uma das proteínas LOX, LOXL1, LOXL2, LOXL3 ou LOXL4, em que a condição é selecionada a partir do grupo consistindo em fibrose, câncer e angiogênese.

13. Uso de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que em um caso no qual a condição é fibrose, a fibrose é selecionada a partir do grupo consistindo em fibrose mediastinal, mielofibrose, fibrose retroperitoneal, fibrose massiva progressiva, fibrose sistêmica nefrogênica, Doença de Crohn, queloide, esclerose sistêmica, artrofibrose, contratura de Dupuytren, capsulite adesiva, fibrose do pâncreas, fibrose do intestino, fibrose de fígado, fibrose de pulmão, fibrose de rim, fibrose cardíaca, fibroestenose, fibrose cística, fibrose pulmonar idiopática, fibrose induzida por radiação, doença de Peyronie e escleroderma ou está associada à doença respiratória, cura e reparo de ferimento anormais, formação de cicatriz, formação de cicatriz hipertrófica/queloides, formação de cicatriz após cirurgia, parada cardíaca e todas as condições nas quais deposição excessiva ou aberrante de material fibroso está associada à doença, lesão, implantes ou cirurgia; preferivelmente a fibrose é selecionada a partir do grupo consistindo em mielofibrose, esclerose sistêmica, fibrose de fígado, fibrose de pulmão, fibrose de rim, fibrose cardíaca e fibrose induzida por radiação; e em um caso no qual a condição é câncer, o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de pulmão; câncer de mama; câncer colorretal; câncer anal; câncer pancreático; câncer de próstata; carcinoma ovariano; carcinoma hepático e de ducto biliar; carcinoma esofágico; mesotelioma; linfoma de não Hodgkin; carcinoma de bexiga; carcinoma do útero; glioma, glioblastoma, medulablastoma, e outros tumores do cérebro; mielofibrose, câncer de rim; câncer da cabeça e do pescoço; câncer do estômago; mieloma múltiplo; câncer testicular; tumor de célula germinativa; tumor neuroendócrino; câncer cervical; câncer oral, carcinoides do trato gastrointestinal, da mama e de outros órgãos; carcinoma de células em anel de sinete; tumores mesenquimais incluindo sarcomas, fibrossarcomas, hemangioma, angiomatose, hemangiopericitoma, hiperplasia estromal pseudoangiomatosa, miofibroblastoma, fibromatose, tumor miofibroblástico inflamatório, lipoma, angiolipoma, tumor de célula granular, neurofibroma, schwannoma, angiossarcoma, lipossarcoma, rabdomiossarcoma, osteossarcoma, leiomioma ou um leiomiossarcoma.

14. Uso de acordo com a reivindicação 12 ou 13, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente um segundo agente terapêutico, em que o segundo agente terapêutico é preferivelmente selecionado a partir do grupo consistindo em um agente anticâncer, um agente anti-inflamatório, um agente anti-hipertensivo, um agente antifibrótico, um agente antiangiogênico, um agente imunossupressor, e um agente metabólico.