BR112021000676A2

BR112021000676A2 - Uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada

Info

Publication number: BR112021000676A2
Application number: BR112021000676-1A
Authority: BR
Inventors: John Henry Doelman; Javier Martín-Tereso López
Original assignee: Nutreco Ip Assets B.V.
Priority date: 2018-07-17
Filing date: 2019-07-17
Publication date: 2021-04-13
Also published as: WO2020016272A1; CA3106755A1; MX2021000636A; AU2019306282A1; CL2021000103A1; EP3823462A1; US20210137863A1; CN112739215A

Abstract

uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada campo da invenção. a presente invenção está no campo de ração para animais, suplemento para ração, pré-misturas e aditivos para ração, mais particularmente para ruminantes, ainda mais particularmente para a melhora do metabolismo e saúde geral, bem-estar e longevidade de um animal ruminante. são providos métodos para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue, para diminuir beta-hidroxibutirato circulante, para reduzir o risco de cetose e para prevenir inflamação em um ruminante.

Description

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USO DE UMA COMPOSIÇÃO COMPREENDENDO UM ÁCIDO GLUCÔNICO E/OU UM OU MAIS DERIVADOS DO MESMO E UM AGENTE DE LIBERAÇÃO CONTROLADA CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção está no campo de ração para animais, suplemento para ração, pré-misturas e aditivos para ração, mais particularmente para ruminantes, ainda mais particularmente para a melhora do metabolismo e saúde geral, bem-estar e longevidade de um animal ruminante.

[002] São providos métodos para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue, para diminuir beta-hidroxibutirato circulante, para reduzir o risco de cetose e para prevenir a inflamação em um ruminante, tal como um ruminante lactante.

[003] Nas vacas leiteiras é particularmente vantajosa a aplicação durante o final da gestação e início da lactação.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[004] Os produtos derivados de ruminantes, tais como produtos lácteos, compõem uma grande porção da dieta ocidentalizada e a demanda para estes produtos está cada vez maior. Esforços de pesquisa substanciais foram empenhados no desenvolvimento de rações e suplemento para ração para ruminantes lactantes (leiteiros), mas também para outros ruminantes, que que não apenas promovam saúde e crescimento, mas também levem à qualidade melhorada dos produtos derivados de ruminantes e práticas de criação econômicas.

[005] A transição suave da prenhez para a lactação é importante para o alto desempenho produtivo e reprodutivo durante o período pós-parto nas vacas leiteiras. Especificamente, a saúde ótima durante o período de transição é um determinante importante da lactação e desempenho reprodutivo subsequentes dos animais. Durante o final da prenhez, o consumo de alimento

2 / 24 frequentemente declina durante os primeiros dias após o parto, ao passo que a demanda quanto aos nutrientes requeridos para o desenvolvimento da glândula mamária e a síntese de colostro e leite aumenta. Consequentemente, as vacas na transição passam por um período de equilíbrio energético negativo (NEB) e deficiências de micronutrientes. O NEB estimula as vacas a mobilizar a gordura corporal na forma de ácidos graxos não esterificados (NEFA), que são subsequentemente convertidos para beta-hidroxibutirato (BHB) por intermédio da beta-oxidação hepática incompleta. Embora estas mudanças sejam processos adaptativos normais nos animais, as vacas de produção particularmente alta, falham na adaptação a estes desafios metabólicos podendo resultar em diversas doenças metabólicas e infecciosas, inflamação e podendo afetar a eficiência produtiva e reprodutiva além do período de transição.

[006] Particularmente, BHB sanguíneo excessivo foi associado com complicações durante o período do periparto tal como supressão de ingestão de matéria seca, imunossupressão, risco aumentado de cetose, febre do leite, recuperação demorada, fertilidade comprometida e produção de leite diminuída. O risco inerente e adquirido de inflamação durante a transição foi descrito extensivamente (Sordillo et al., 2009; Bradford et al., 2015; Abuajameih et al., 2016; Mann et al., 2016; McGrath et al., 2018) enquanto a inflamação no meio da lactação também foi identificada como um fator para o desempenho subótimo (O’Boyle et al., 2006; Garcia et al., 2015). O manejo e as práticas nutricionais também são os maiores fatores contribuintes para a incidência de inflamação e saúde precária neste estágio. Por exemplo, a incidência de acidose subaguda ruminal pode ser de até 26% nas vacas leiteiras no meio da lactação (Plaizier et al., 2009) e é um forte fator de risco na incidência de acidose do intestino grosso posterior durante a alimentação altamente concentrada (Khafipour et al., 2009). Esta doença compromete a saúde e tem um impacto negativo sobre o desempenho de lactação.

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[007] É um objetivo da presente invenção prover uma ração, suplemento de ração, pré-mistura ou aditivos para ração para ruminantes, particularmente ruminantes adultos, ainda mais particularmente ruminantes para corte ou leiteiros, particularmente para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue, para diminuir beta-hidroxibutirato circulante, para reduzir o risco de cetose e/ou para prevenir inflamação em tal ruminante.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[008] Foi surpreendentemente verificado que quando a composição descrita na WO2016/055651 foi alimentada, os níveis de glicose circulantes no sangue aumentaram, o beta-hidroxibutirato circulante diminuiu, a incidência de cetose diminuiu e a inflamação foi prevenida em ruminantes, comparados a um controle alimentado na mesma dieta, mas sem a dita composição, sem nenhuma mudança no consumo de alimento. Em uma modalidade, a alimentação da composição aqui descrita é iniciada já durante a fase de transição de animais lactantes. Durante esta fase os riscos para a saúde são altos devido ao fato de que muitas mudanças metabólicas ocorrem quando a fase de lactação é preparada no animal.

[009] Sem desejar ser limitado pela teoria, é hipotetizado que a administração pós-ruminal de gluconato realça a oxidação completa de NEFA resultando na diminuição de BHB circulante. No período de transição, os níveis de NEFA são geralmente altos. É acreditado que a composição aqui descrita permite uma oxidação melhorada de NEFA e como tal em uma incidência mais baixa de cetose.

[0010] Em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere ao uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada para diminuir os níveis plasmáticos de beta-hidroxibutirato no sangue de um ruminante.

[0011] Em um aspecto adicional, a presente invenção se refere ao uso de uma composição como aqui descrita para reduzir o risco de cetose em um

4 / 24 ruminante.

[0012] Em um outro aspecto, a presente invenção se refere ao uso de uma composição como aqui descrita para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue de um ruminante.

[0013] Em um outro aspecto, a presente invenção se refere ao uso de uma composição como aqui descrita para prevenir a inflamação em um ruminante.

[0014] Em uma modalidade, os derivados do ácido glucônico são selecionados a partir de sais de gluconato e ésteres de gluconato.

[0015] Em uma modalidade, o um ou mais sais de gluconato podem ser selecionados a partir de gluconato de cálcio, gluconato de sódio, gluconato de quinino, gluconato ferroso, gluconato de potássio, gluconato de zinco, gluconato de cobre, gluconato de cobalto, gluconato de bário, gluconato de lítio, gluconato de magnésio e gluconato cúprico, preferivelmente é gluconato de cálcio e/ou gluconato de sódio, mais preferivelmente é gluconato de cálcio.

[0016] O agente de liberação controlada pode ser selecionado do grupo consistindo de ácidos graxos, óleos animais, óleos vegetais e misturas dos mesmos. O agente de liberação controlada pode ser um óleo vegetal. O óleo vegetal pode ser selecionado de óleo de palma, óleo de soja, óleo de semente de colza, óleo de semente de algodão, óleo de mamona e misturas dos mesmos.

[0017] Em uma modalidade, o óleo vegetal é óleo de palma.

[0018] O óleo vegetal pode ser parcialmente hidrogenado, preferivelmente totalmente hidrogenado.

[0019] Em uma modalidade, a razão da porcentagem em peso do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo para o agente de liberação controlada pode variar de cerca de 20:80 a cerca de 65:35 por cento em peso ou pode ser de pelo menos cerca de 40:60 por cento em peso, preferivelmente 50:50 por cento em peso.

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[0020] Em uma modalidade, a composição pode ser administrada no período entre cerca de 30 dias pré-parto e cerca de 300 dias pós-parto. Em uma outra modalidade, a composição pode ser administrada no período entre cerca de 21 dias pré-parto e cerca de 21 dias pós-parto.

[0021] O ruminante pode ser selecionado do grupo consistindo de vacas, gado, ovelha, cabras, bisão, búfalo, alces, antas, girafas, iaques, cervídeos, camelos, antílopes, preferivelmente vacas.

[0022] A composição pode ser administrada oralmente.

DEFINIÇÕES GERAIS

[0023] Na seguinte descrição e exemplos, vários termos são usados. De modo a prover um entendimento claro e consistente do relatório descritivo e reivindicações, incluindo o escopo a ser dado para tais termos, as seguintes definições são providas. A menos que de outro modo aqui definido, todos os termos técnicos e científicos usados têm o mesmo significado como habitualmente entendido por uma pessoa versada na técnica à qual essa invenção pertence. As descrições de todas as publicações, pedidos de patente, patentes e outras referências são aqui incorporadas na sua totalidade por referência.

[0024] O termo ‘ácido glucônico’ como aqui usado se refere a um composto orgânico com fórmula molecular C6H12O7 e fórmula estrutural condensada HOCH2(CHOH)4COOH. O mesmo é um dos 16 estereoisômeros do ácido 2,3,4,5,6-pentahidroxihexanóico. O termo ‘derivado(s) do ácido glucônico’ como aqui usado se refere ao(s) composto(s) derivado do ácido glucônico e inclui sais de gluconato e ésteres de gluconato. O termo ‘sais de gluconato’ como aqui usado se refere a quaisquer sais derivados do ácido glucônico. Os sais dos ácidos glucônicos também são conhecidos como “gluconatos”. Os exemplos não limitantes de sais de gluconato incluem gluconato de cálcio, gluconato de sódio, gluconato ferroso, gluconato de potássio, gluconato de zinco, gluconato de cobre, gluconato de cobalto,

6 / 24 gluconato de bário, gluconato de lítio, gluconato de magnésio, gluconato de manganês, gluconato cúprico e os semelhantes. Os exemplos não limitantes de ésteres de gluconato incluem ésteres cíclicos do ácido glucônico com ácido bórico, gluconato de quinino, glucono-delta-lactona e os semelhantes.

[0025] Os termos ‘ruminantes’ ou ‘animais ruminantes’ como aqui usados se referem aos mamíferos que são capazes de adquirir nutrientes a partir de alimento com base em planta através da fermentação em uma câmara estomacal especializada antes da digestão, principalmente através das ações microbianas. O processo tipicamente requer regurgitação da ingestão fermentada (conhecida como rumina) e mastigação da mesma mais uma vez. O processo de remastigação da rumina para decompor adicionalmente a matéria de planta e estimular a digestão é chamada de “ruminação”. A diferença primária entre animais ruminantes e animais não ruminantes é que os animais ruminantes têm um estômago de quatro câmaras.

[0026] No rúmen a maior parte da fermentação de material de alimentação ocorre. O rúmen é povoado por diversos filos de microrganismos, que resultam na fermentação de alimentos de animais. No retículo funções de fermentação similares são realizadas. O rúmen e o retículo são frequentemente aludidos como o ‘retículo-rúmen’, que essencialmente consiste de uma “câmara de fermentação” contendo microrganismos que convertem carboidrato de planta complexos para ácidos graxos voláteis (principalmente acetato, propionato e butirato), lactato, dióxido de carbono, metano e hidrogênio. O omaso serve como uma porta de entrada para o abomaso permitindo a absorção de ácidos graxos voláteis e água para reduzir o volume de digesta atingindo o abomaso. O abomaso é frequentemente aludido como o equivalente direto do estômago monogástrico e é frequentemente chamado de ‘estômago verdadeiro’ devido à sua capacidade para digerir e degradar materiais de alimentação em um ambiente ácido e enzimático. O material digerido no abomaso (também chamado de digesta)

7 / 24 transita dentro do intestino grosso delgado, onde a digestão adicional e a absorção de nutrientes ocorrem.

[0027] Os exemplos não limitantes de ruminantes incluem animais bovinos tais como gado leiteiro, gado de corte, ovelhas, cabras, búfalos, alces, antas, bisões, girafas, iaque, cervídeos, camelos, antílopes e os semelhantes.

[0028] Os termos ‘animais bovinos’ ou ‘bovino’ como aqui usados se referem a uma variedade de animais bovinos incluindo vacas, touros, novilhas, novilho, veados, corças, bodes, boi, bezerros e os semelhantes.

[0029] O termo ‘ruminante lactante’ como aqui usado se refere a um animal ruminante que é capaz de produzir leite após o parto.

[0030] O termo ‘ruminante leiteiro’ como aqui usado se refere a um animal ruminante, cujo leite é usado para propósitos comerciais.

[0031] O termo ‘desvio ruminal’ ou ‘desvio de rúmen’ se refere a um ‘escape’ parcial ou completo de digestão ou degradação pelos microrganismos populando o rúmen. Para desviar o rúmen de ruminantes pode-se usar um chamado ‘agente de liberação controlada’ (também frequentemente aludido como ‘agente de desvio ruminal’ ou ‘agente protetivo’). O termo ‘agente de liberação controlada’ como aqui usado se refere a quaisquer compostos, composição ou mistura de compostos ou composições capazes de controlar a liberação de um ou mais ingredientes (por exemplo, um composto ativo tal como um sal de gluconato). O agente de liberação controlada compreendido na composição aqui descrita preferivelmente permite que o(s) dito(s) ingrediente(s) ativo(s) desvie(m) parcial ou substancialmente o rúmen enquanto, preferivelmente, permite(m) que o(s) dito(s) ingrediente(s) ativo(s) seja(m) parcial ou substancialmente digeridos e/ou parcial ou substancialmente absorvido(s) no intestino grosso dos ruminantes (isto é, intestino delgado). Em outras palavras, os agentes de liberação controlada utilizados nas composições aqui descritas são preferivelmente definidos em que eles permitem desvio substancial do rúmen

8 / 24 e são substancialmente degradados no abomaso e/ou regiões subsequentes do trato digestivo, particularmente o intestino grosso de animais ruminantes.

[0032] O termo ‘período de transição’ se refere a um período exigente e vulnerável para o ruminante leiteiro quando as necessidades metabólicas aumentam dramaticamente e o animal é mais sensível às doenças. A transição tipicamente se refere a um período antes e depois do parto. O mesmo pode ser convencionalmente descrito como cerca de 21 dias antes até cerca de 21 dias depois do parto. Durante este período, que é a transição do final da gestação até a fase de lactação, o animal passa pela adaptação metabólica, mamogênese, colostrogênese e lactogênese para preparar para o período de lactação. Na prática a duração, o início e/ou o final do período de transição podem diferir de animal para animal. O período de transição pode iniciar por exemplo a cerca de 28 dias, cerca de 21 dias, cerca de 14 dias ou cerca de 7 dias ou qualquer número de dias entre estes, antes do parto e o período de transição pode terminar por exemplo a cerca de 7 dias, cerca de 14 dias, cerca de 21 dias ou cerca de 28 dias depois do parto. O período de transição pode ser o período entre cerca de 28 dias antes e cerca de 28 dias depois do parto; ou entre cerca de 21 dias antes e cerca de 21 dias depois do parto; ou entre cerca de 14 dias antes e cerca de 14 dias depois do parto; ou entre cerca de 7 dias antes e cerca de 7 dias depois do parto.

[0033] O termo ‘período seco’ se refere ao período de tempo entre duas fases de lactação durante o último trimestre de gestação. Isto tipicamente abrange o intervalo de tempo de cerca de 6 a 8 semanas antes da lactação (período pré-parto) até a lactação. O mesmo também é definido como o período de não lactação e reestruturação da glândula mamária antes do parto e é uma fase de preparação para a lactação seguinte, necessária para produção ideal de leite durante a lactação seguinte. Na prática, frequentemente durante cerca dos últimos 21 dias do período seco uma transição para a fase de lactação começará. Esta parte do período seco é o início da chamada fase de

9 / 24 transição para a lactação e é convencionalmente descrita como os 21 dias antes e depois do parto.

[0034] Os termos ‘fase de lactação’ ou ‘período de lactação’ se referem ao período de tempo que o animal secreta leite a partir das glândulas mamárias. A fase de lactação pode tipicamente ser dividida em lactação inicial, intermediária e final. A mesma segue o ‘período seco’ no evento do parto e termina quando a remoção do leite é interrompida na secura. O processo de secura é quando a lactogênese cessa porque o leite não é mais produzido e/ou coletado a partir das glândulas ou o animal é tratado com um agente farmacêutico para parar o processo de lactação. Para um ruminante leiteiro lactante o período de lactação é tipicamente de cerca de 305 dias (Nutrient Requirements of Dairy Cattle (NRC), 2001). O período também pode ser mais longo, por exemplo, 320, 340 ou 360 dias. Na prática, a fase de transição da prenhez e parto para a lactação pode ser finalizada em aproximadamente 21 dias após o parto.

[0035] O termo ‘cetose’ como aqui usado se refere a um estado metabólico no qual um pouco do suprimento de energia do corpo vem dos corpos cetônicos no sangue. Geralmente, a cetose ocorre quando o corpo está oxidando gordura em uma alta taxa e convertendo ácidos graxos em cetonas quando a gordura não é completamente oxidada. A cetose é uma doença comum do gado adulto. A mesma tipicamente ocorre nas vacas leiteiras durante a transição e é mais consistentemente definida pela anorexia e depressão parciais. Além da inapetência, sinais de disfunção nervosa, incluindo pica, lambeção anormal, descoordenação e marcha anormal, mugido e agressão, são ocasionalmente observados. A condição é mundial na distribuição, mas é mais comum onde vacas leiteiras são criadas e manejadas para alta produção. A cetose requer a combinação de mobilização de gordura intensa e uma alta demanda de glicose. Ambas destas condições estão presentes durante a transição, tempo no qual o equilíbrio energético negativo

10 / 24 leva à mobilização de gordura e a síntese de leite cria uma alta demanda de glicose.

[0036] O termo ‘níveis de glicose circulantes’ como aqui usado se refere à concentração de glicose na circulação do sangue e disponível para o animal.

[0037] O termo ‘níveis circulantes de beta-hidroxibutirato’ como aqui usado se refere à concentração de beta-hidroxibutirato na circulação de sangue e disponível para o animal. O beta-hidroxibutirato é um corpo cetônico gerado a partir da oxidação incompleta de reservas lipídicas endógenas e usado para o diagnóstico de cetose na vaca leiteira lactante.

[0038] O termo ‘inflamação’ como aqui usado se refere a uma resposta biológica dos tecidos corporais aos estímulos nocivos, como patógenos, micróbios ou irritantes e é uma resposta protetiva envolvendo células imunes, vasos sanguíneos e mediadores moleculares. A função da inflamação é eliminar a causa inicial da lesão celular, depurar células necróticas e tecidos danificados do insulto original e do processo inflamatório e iniciar o reparo tecidual. Além da função de combater doenças, a inflamação também está ligada à produção de leite diminuída, fertilidade reduzida e distúrbios e problemas metabólicos.

[0039] Os termos ‘intestino grosso’ ou ‘intestino posterior’ como aqui usado se referem à seção pós-abomasal do trato digestivo de ruminantes e inclui o intestino delgado e suas subseções (isto é, duodeno, jejuno e íleo), assim como o ceco e o intestino grosso e suas subseções (isto é, cólon e reto).

[0040] Os termos ‘melhorar’ ou ‘melhorando’ como aqui usados se referem à capacidade de se aproximar de um estado ou condição significantemente mais desejável. Alguém ou alguma coisa poderia por exemplo se tornar significantemente melhor ou poderia obter propriedades ou qualidades significantemente melhores. A capacidade para fazer coisas melhores também é abrangida em um sentido da capacidade para melhorar,

11 / 24 como melhorar uma situação ou qualidade ruim ou reparar propriedades ruins ou não funcionais.

[0041] Os termos ‘aumentar’ e ‘nível aumentado’ e os termos ‘diminuir’ e ‘nível diminuído’ se referem à capacidade para aumentar ou diminuir uma quantidade particular. Um nível em uma amostra de teste pode ser aumentado ou diminuído quando o mesmo é pelo menos 5%, tal como 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50% mais alto ou mais baixo, respectivamente, do que o nível correspondente em uma amostra de controle ou amostra de referência. Alternativamente, um nível em uma amostra de teste pode ser aumentado ou diminuído quando o mesmo é de modo estatisticamente significante aumentado ou diminuído. Em uma modalidade, a amostra de controle ou amostra de referência é de um ruminante lactante, preferivelmente do mesmo gênero e/ou espécie como o ruminante lactante de teste, não alimentado com a composição aqui descrita.

[0042] O termo ‘cerca de’, como aqui usado indica uma faixa de tolerância normal na técnica, por exemplo dentro de 2 desvios padrão da média. O termo “cerca de” pode ser entendido como abrangendo valores que desviam no máximo 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05% ou 0,01% do valor indicado.

[0043] Os termos “compreendendo” ou “compreender” e suas conjugações, como aqui usados, se referem a uma situação na qual os ditos termos são usados no seu sentido não limitante para significar que os itens seguintes à palavra são incluídos, mas itens não especificamente mencionados não são excluídos. Os mesmos também abrangem os verbos mais limitantes “consistir essencialmente de” e “consistir de”.

[0044] Referência a um elemento pelo artigo indefinido “um” ou “uma” não exclui a possibilidade que mais do que um dos elementos está presente, a menos que o contexto claramente requeira que haja um e apenas um dos elementos. O artigo indefinido “um” ou “uma” assim usualmente

12 / 24 significa “pelo menos um”.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0045] Os presentes inventores surpreendentemente verificaram que administração de uma composição compreendendo ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do ácido glucônico (por exemplo um ou mais derivados do mesmo, tais como gluconato de cálcio) no abomaso e no intestino grosso de ruminantes, em particular usando um sal de gluconato protegido por gordura, resultou em uma diminuição de beta-hidroxibutirato circulante, uma redução do risco de cetose, um aumento dos níveis de glicose circulantes no sangue e prevenção ou redução de inflamação em um ruminante.

[0046] Em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere ao uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada para diminuir os níveis de BHB circulantes no sangue, para reduzir o risco de cetose, para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue e/ou para prevenir ou reduzir a inflamação em um ruminante lactante.

[0047] É conhecido pela pessoa versada na técnica que os parâmetros associados com inflamação podem ser medidos pela análise metabólica. A resposta inflamatória resulta em maior produção de leucócitos. Os leucócitos são usuários obrigatórios de glicose e a inflamação resulta em oxidação extensiva de glicose, reduzindo deste modo os níveis de glicose circulantes no sangue. Foi verificado que os níveis de glicose circulantes no sangue aumentaram em resposta ao tratamento com a composição aqui descrita, mais provavelmente indicando que a inflamação foi reduzida. Adicionalmente, os níveis de BHB no sangue também foram reduzidos e a incidência de cetose foi reduzida no tratamento com a composição aqui descrita. Visto que os níveis de BHB contribuem altamente para a incidência de cetose, estas verificações se correlacionam bem.

[0048] A composição pode compreender um ou mais derivados de

13 / 24 ácido glucônico, por exemplo, um sal de gluconato ou um éster de gluconato.

[0049] Em uma modalidade, a composição compreende um sal de gluconato, preferivelmente selecionado do grupo consistindo de gluconato de cálcio, gluconato de sódio, gluconato de quinino, gluconato ferroso, gluconato de potássio, gluconato de zinco, gluconato de cobre, gluconato de cobalto, gluconato de bário, gluconato de lítio, gluconato de magnésio e gluconato cúprico, mais preferivelmente gluconato de cálcio e/ou gluconato de sódio, mais preferivelmente gluconato de cálcio.

[0050] Qualquer agente de liberação controlada que seja adequado para permitir desvio ruminal pelo menos parcial, preferivelmente substancial ou substancialmente completo pode ser usado nas composições como aqui descritas. O desvio ruminal parcial, como aqui usado, pode se referir às frações de desvio ruminal acima de 20%, 25% ou 30%, tal como acima de 35%, 40% ou 45%, preferivelmente como medido usando o método da simulação de rúmen in vitro aqui ensinado. O desvio ruminal substancial, como aqui usado, pode se referir às frações de desvio ruminal acima de 50%, tal como acima de 55%, 60%, 65%, 70% ou 75% ou mais, preferivelmente como medido usando o método da simulação de rúmen in vitro aqui ensinado. Os desvios ruminal substancialmente completo como aqui usado se refere às frações de desvio ruminal acima de 80%, 85%, 90%, 95% ou mais, preferivelmente como medido usando o método in vitro aqui ensinado. Os agentes de liberação controlada que são adequados para permitir desvio ruminal parcial, substancial ou substancialmente completo em ruminantes assim como métodos para produzir e usar os mesmos para o propósito de desviar parcialmente, substancialmente ou completamente o rúmen são bem conhecidos e comercialmente disponíveis. A pessoa versada sabe como preparar um agente de liberação controlada eficaz que seja adequado para permitir o desvio ruminal parcial, substancial ou substancialmente completo e que seja adequado para a distribuição de ácido glucônico e/ou mais ou mais

14 / 24 derivados do ácido glucônico (por exemplo gluconato de cálcio) para o abomaso e intestino grosso de ruminantes.

[0051] Em uma modalidade, o agente de liberação controlada é adicionalmente adequado para permitir digestibilidade intestinal pelo menos parcial, preferivelmente substancial, mais preferivelmente substancialmente completa. Digestibilidade intestinal parcial como aqui usada se refere às frações de digestibilidade intestinal acima de 20% ou 25%, tal como acima de 30%, 35%, 40% ou 45%, preferivelmente como medido usando o método da simulação intestinal in vitro aqui ensinado. Digestibilidade intestinal substancial como aqui usada se refere à fração de digestibilidade intestinal acima de 50%, tal como acima de 55%, 60%, 65%, 70%, 75% ou mais, preferivelmente como medido usando o método da simulação intestinal in vitro aqui ensinado. Digestibilidade intestinal substancialmente completa como aqui usada se refere às frações de digestibilidade intestinal acima de 80%, 85%, 90%, tal como acima de 95% ou mais, preferivelmente como medido usando o método da simulação intestinal in vitro aqui ensinado.

[0052] Os exemplos representativos não limitantes de agentes de liberação controlada adequados para o uso na composição aqui descrita incluem ácidos graxos (por exemplo ácido graxo saturado ou insaturado, ácidos graxos essenciais, ácidos graxos de cadeia curta, ácidos graxos de cadeia média, ácidos graxos de cadeia longa, ácidos graxos de cadeia muito longa ou mistura dos mesmos), óleos animais parcialmente ou totalmente hidrogenados (ou endurecidos) (sebo de boi, graxa amarela, sebo de ovelha, gordura de porco e outros ou mistura dos mesmos), óleos vegetais parcialmente ou totalmente hidrogenados (ou endurecidos) (por exemplo óleo de palma, óleo de soja, óleo de semente de colza, óleo de semente de algodão, óleo de mamona e outros ou mistura dos mesmos), ceras, sabões e uma mistura dos mesmos.

[0053] Os exemplos não limitantes de agentes de liberação controlada

15 / 24 adequados para o uso na composição como aqui descrita são descritos, por exemplo, nas patentes US 3.541.204, US 3.959.493, US, 5.496.571, JP60- 168351, JP 61-195653, JP 63-317053, pedido de patente WO 96/08168 e outros.

[0054] Outros exemplos não limitantes de agentes de liberação controlada adequado para o uso na composição aqui descrita incluem agentes de liberação controlada que são sensíveis ao pH, isto é, que decompor-se-ão dependendo do ambiente do pH. As composições de desvio ruminal pertencentes a esta categoria são escolhidos porque eles são parcialmente, substancialmente ou de modo substancialmente completo estáveis ou insolúveis no ambiente de pH do rúmen (ambiente de pH variando dentre 5,5 e 7,0) e parcialmente, substancialmente ou completamente solúvel no ambiente de pH do abomaso (ambiente de pH variando de 2 a 4). Os exemplos não limitantes representativos de agentes de liberação controlada sensíveis ao pH adequados para o uso nas composições aqui descritas incluem lipossomas, membranas, hidrogéis, polímeros ou copolímeros acrílicos, um polissacarídeo, polímeros ou copolímeros de vinila, aminoácidos e misturas dos mesmos. Os exemplos de desvios ruminais que são pelo menos parcialmente, de modo preferivelmente substancial ou de modo substancialmente completo sensíveis ao ambiente de pH são descritos por exemplo na US 4.713.245, US 4.808.412, US 4.832.967, US 4.876.097 e US

5.227.166.

[0055] Em uma modalidade, o agente de liberação controlada pode ser revestido sobre o ácido glucônico e/ou um mais derivados do ácido glucônico. Em uma outra modalidade, o ácido glucônico e/ou derivados do ácido glucônico podem ser incorporados ou encapsulados dentro de uma matriz composta de um agente de liberação controlada como aqui ensinado.

[0056] O agente de liberação controlada adequado para permitir desvio do rúmen parcial, substancial ou substancialmente completo pode ser

16 / 24 vantajosamente selecionado do grupo consistindo de ácidos graxos, óleos animais, óleos vegetais e misturas dos mesmos.

[0057] Preferivelmente, o dito agente de liberação controlada compreende um óleo vegetal, preferivelmente selecionado do grupo consistindo de óleo de palma, óleo de soja, óleo de semente de colza, óleo de semente de algodão e óleo de mamona ou misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o dito agente de liberação controlada compreende ou consiste de óleo de palma.

[0058] Em uma modalidade, o óleo vegetal é pelo menos parcialmente hidrogenado, preferivelmente totalmente hidrogenado.

[0059] A composição como aqui descrita pode ser fabricada por qualquer método conhecido por uma pessoa versada na técnica. Por exemplo, o ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo pode(m) ser apresentados na forma de um núcleo e pode(m) ser revestido(s) com um agente de liberação controlada ou o ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo pode(m) ser incorporada(s) em uma matriz de um agente de liberação controlada.

[0060] Em uma modalidade, a composição como aqui descrita é preparada pela incorporação do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo em uma matriz de um agente de liberação controlada, por exemplo, um óleo vegetal, por exemplo, um óleo vegetal pelo menos parcialmente hidrogenado, por exemplo, um óleo vegetal hidrogenado. O óleo vegetal pode ser qualquer óleo vegetal, mas é preferivelmente selecionado do grupo consistindo de óleo de palma, óleo de soja, óleo de semente de colza, óleo de semente de algodão e óleo de mamona ou misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida, preferivelmente o dito agente de liberação controlada compreende ou consiste de óleo de palma.

[0061] A incorporação de um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo em uma matriz de um agente de liberação controlada

17 / 24 pode ser feita por qualquer técnica adequada para fabricar partículas de uns poucos mícrons a diversos milímetros conhecida por uma pessoa versada na técnica. Uma técnica exemplar não limitante, mas altamente adequada é o arrefecimento por pulverização, também aludido como resfriamento por pulverização, congelamento por pulverização ou granulação. Arrefecimento por pulverização é um sistema com base em lipídeo onde o ingrediente ativo (por exemplo, ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo) é misturado dentro de uma matriz fundida (por exemplo, uma matriz fundida do agente de liberação controlada, tal como óleo vegetal hidrogenado), mistura esta que é subsequentemente alimentada através de um bocal, por exemplo, um bocal atomizador, para produzir gotículas da mistura. As gotículas são deixadas solidificar, por exemplo, contatando-as com ar resfriado em uma temperatura abaixo do ponto de fusão do agente de liberação controlada resultando na formação de partículas. Em uma modalidade, a composição aqui descrita é obtenível por tal método.

[0062] Em uma modalidade, a composição aqui descrita tem uma distribuição do tamanho de partícula médio entre cerca de 150 e 3000 μm, tal como entre cerca de 300 e 2000 μm ou entre cerca de 500 e 1500 μm, preferivelmente entre de 650 e 1250 μm, mais preferivelmente entre cerca de 800 e 1000 μm. A distribuição do tamanho de partícula pode ser medida usando-se a análise de peneira padrão (por exemplo, usando um Retsch Sieve Shaker AS 200), por exemplo como ensinado na ASTM C136. Referência aqui ao tamanho de partícula médio é ao diâmetro de partícula médio.

[0063] Em uma modalidade, a razão da porcentagem em peso do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo para o agente de liberação controlada varia de cerca de 20:80 a cerca de 65:35 por cento em peso ou é pelo menos de cerca de 40:60 por cento em peso, preferivelmente de cerca de 50:50 por cento em peso da composição aqui descrita.

[0064] O grau de desvio de rúmen de uma dada composição pode ser

18 / 24 determinado usando uma técnica de simulação de rúmen in vitro. Um exemplo de uma tal técnica in vitro é a incubação in vitro usando fluido de simulação de rúmen. Um fluido de simulação de rúmen exemplar adequado compreende ou consiste de 50 mM de fosfato e 20 mM de cloreto de cálcio ajustados ao pH 6,5 usando NaOH. A liberação in vitro de ácido glucônico em uma composição como aqui descrita pode ser determinada como segue: 500 mg da composição aqui descrita pode ser incubada em 150 mL de fluido de simulação de rúmen como aqui ensinado em um banho de água agitado a 39°C por dezesseis horas. Uma amostra pode ser recolhida da mistura, que pode ser centrifugada para coletar o sobrenadante para análise adicional, por exemplo, usando LC-MS. Opcionalmente, o sobrenadante pode ser armazenado a -20°C antes da análise. Em uma modalidade, uma composição como aqui descrita pode ser considerada desviar o rúmen quando acima de 20%, tal como acima de 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou mais, do ácido glucônico e/ou um ou mais derivado(s) do mesmo não é/são liberados durante o método da simulação de rúmen in vitro como aqui ensinado; isto é, acima de 20%, tal como acima de 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou mais do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo permanecem presentes na composição como aqui descrita, preferivelmente como medido usando o método da simulação de rúmen in vitro aqui descrita.

[0065] Em uma modalidade, a composição como aqui descrita tem uma liberação pós-ruminal acima de 20%, tal como acima de 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou mais do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados, preferivelmente como medido usando um método da simulação de liberação pós-ruminal in vitro como aqui descrita.

[0066] A liberação pós-ruminal in vitro pode subsequentemente ser

19 / 24 simulada usando uma fase gástrica in vitro, seguido por uma fase intestinal in vitro. Para esta finalidade, a suspensão permanece depois a técnica de simulação de rúmen pode ser ajustada ao pH 2 usando HCl a 37% e pepsina (1 g/L), preferivelmente da mucosa gástrica porcina (por exemplo, Sigma P7000) é adicionada. A mistura é preferivelmente incubada por mais duas horas a 39°C. Depois, o pH pode ser elevado para 6,8 usando NaOH, pancreatina e extrato de bile (ambos a 3 g/L), preferivelmente pancreatina do pâncreas porcino (por exemplo, Sigma P7545) e extrato de bile porcina (por exemplo, Sigma B8631), podem ser adicionados e a suspensão é incubada por mais cinco horas a 39°C. Uma amostra pode ser recolhida da mistura, que pode ser centrifugada para coletar o sobrenadante para análise adicional, por exemplo, usando LC-MS. Opcionalmente, o sobrenadante pode ser armazenado a -20°C antes da análise.

[0067] Em uma modalidade, a composição como aqui descrita pode ser administrada como uma ração de ruminante. Em uma outra modalidade, a composição como aqui descrita pode ser um constituinte de uma composição de ração de ruminante ou pode ser administrada como uma composição de cobertura. As composições como aqui descritas podem ser administradas a um ruminante simultaneamente com outras rações e/ou suplemento para ração de ruminante convencionais (por exemplo silagem de milho, silagem de alfafa, feno misturado e os semelhantes) ou podem ser administradas separadamente, isto é, antes ou depois da alimentação de um ruminante com rações de ruminante convencionais.

[0068] Em uma modalidade, a composição aqui descrita pode ser administrada em uma quantidade entre cerca de 1 e 100 gramas/dia, preferivelmente entre cerca de 5 e 60 gramas/dia, tal como entre 7 e 50 gramas/dia, entre 10 e 45 gramas/dia ou entre 12 e 40 gramas/dia, mais preferivelmente entre cerca de 12 e 20 gramas um dia. As quantidades de ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo (como por exemplo

20 / 24 gluconato de cálcio) dispensados pós ruminalmente podem estar entre cerca de 0,01 e 35 gramas/dia, preferivelmente entre cerca de 0,1 e 20 gramas/dia, tal como entre 1 e 17 gramas/dia, entre 2 e 15 gramas/dia ou entre 3 e 12 gramas/dia, mais preferivelmente entre 3 e 7 gramas por dia.

[0069] O ruminante pode ser selecionado do grupo consistindo de vacas leiteiras, gado de corte, ovelhas, cabras, bisão, búfalo, alces, antas, bisões, girafas, iaque, cervídeos, camelos, antílopes e é preferivelmente selecionado de vacas leiteiras, ovelha e cabras. O ruminante aqui aludido pode ser um ruminante adulto. Em algumas modalidades, o ruminante preferivelmente é uma vaca leiteira. Em outras modalidades, o ruminante preferivelmente é uma vaca de corte.

[0070] A composição pode ser administrada oralmente.

[0071] Em uma modalidade, as composições como aqui descritas podem ser administradas durante o período seco do ruminante lactante. Em uma modalidade, as composições como aqui descritas podem ser administradas durante a fase de lactação do ruminante lactante. Já em uma outra modalidade, a composição como aqui descrita pode ser administrada tanto durante o período seco quanto a fase de lactação do ruminante lactante.

[0072] A presente invenção é ilustrada adicionalmente, mas não limitada, pelos seguintes exemplos. A partir do debate acima e do exemplo, uma pessoa versada na técnica pode averiguar as características essenciais da presente invenção e sem divergir dos ensinamentos e escopo da mesma, pode fazer várias mudanças e modificações da invenção para adaptá-la aos vários usos e condições. Assim, várias modificações da invenção além daquelas mostradas e descritas aqui estarão evidentes para aqueles versados na técnica a partir da descrição anterior. Tais modificações também são intencionadas a situar dentro do escopo das reivindicações anexas.

EXEMPLOS Exemplo 1. Efeitos do gluconato de cálcio protegido do rúmen sobre o

21 / 24 metabolismo nas vacas leiteiras Tratamentos

[0073] Os tratamentos foram um controle negativo (nenhum tratamento) e 16 g/d de gluconato de cálcio protegido do rúmen (RPCG) contendo 6,25 g de ingrediente ativo na forma granulada. Materiais e Métodos

[0074] Quarenta e cinco vacas leiteiras foram colocadas no tratamento aproximadamente 220 dias após o parto até 305 dias de lactação. As vacas foram alimentadas com uma ração provendo uma energia líquida estimada para lactação (NEL) de 7,2 MJ/kg de matéria seca (DM) e 16,2% de proteína bruta (CP). A ração de vaca lactante foi alimentada como um controle (nenhuma suplementação) ou tratamento (contendo 0,07% DM de RPCG [aproximadamente 16 g/d de RPCG consistindo de 9,75 g de agente de liberação controlada (óleo de palma) e 6,25 g de gluconato de cálcio]). O RPCG foi preparado usando-se a técnica de arrefecimento por pulverização. Usando este sistema com base em lipídeo, o gluconato de cálcio foi adicionado a uma matriz fundida de óleo de palma e a mistura foi alimentada através de um bocal atomizador. As gotículas solidificaram conforme elas entraram em contato com o ar resfriado em uma temperatura abaixo do ponto de fusão do carreador lipídico resultando em partículas de RPCG. Projeto Experimental

[0075] As vacas leiteiras usadas neste experimento foram alojadas em um estábulo livre na unidade de lactação no Trouw Nutrition Dairy Research Facility. As vacas foram alimentadas em uma dieta base ad libitum para a duração do experimento como pela prática de manejo corrente. Resultados Metabólitos Plasmáticos

[0076] As concentrações plasmáticas circulantes de glicose tenderam a aumentar em resposta à suplementação com RPCG (Tabela 1). Os níveis de

22 / 24 beta-hidroxibutirato no plasma diminuíram com o tratamento. Tabela 1. Resposta à concentração de metabólito plasmático nas vacas leiteiras lactantes consumindo gluconato de cálcio protegido do rúmen mmol/L CON RPCG glicose 3,69 3,76‡ beta-hidroxi butirato (BHB) 0,76 0,70* ‡ indica P ≤ 0,08 * indica P ≤ 0,05 Conclusões

[0077] Este experimento foi planejado para determinar a eficácia do gluconato de cálcio protegido do rúmen sobre os metabólitos circulantes nas vacas leiteiras lactantes. Estes resultados demonstram uma resposta positiva à provisão dietética de 16 g/d de produto protegido do rúmen. Esta resposta mostra uma situação metabólica melhorada. Exemplo 2. Efeitos de gluconato de cálcio protegido do rúmen sobre a saúde nas vacas leiteiras Tratamentos

[0078] Os tratamentos foram um controle negativo (nenhum tratamento) e 0,07% da DMI (16 g/d de gluconato de cálcio protegido do rúmen contendo 6,25 g de ingrediente ativo). Com base na degradabilidade potencial do rúmen de 20%, a quantidade de alimentação proposta foi prognosticada prover 5 g/d de ingrediente ativo. Materiais e Métodos

[0079] Cinquenta e três vacas leiteiras foram colocadas no tratamento aproximadamente 21 dias pré-parto até 308 dias de lactação. Durante o período seco no final da gestação, as vacas foram alimentadas em uma ração seca comercial para vacas provendo uma energia líquida estimada para lactação (NEL) de 6,35 MJ/kg de matéria seca (DM) e 15,0% de proteína bruta (CP) para atingir 100% das exigências de energia e proteína, respectivamente. Durante o período pré-parto, a ração seca de vaca foi alimentada como controle (nenhuma suplementação) ou tratamento (contendo 0,07% da DM (16 g/dia) de gluconato de cálcio protegido do rúmen (RPCG)).

23 / 24 Depois do parto, as vacas foram alimentadas em uma ração comercial de vaca lactante para prover uma NEL estimada de 7,61 MJ/kg de DM e 16,64% de CP para atingir 100% das exigências de energia e proteína, respectivamente. A ração de vaca lactante foi alimentada como um controle (nenhuma suplementação) ou tratamento (contendo 0,07% da DM de RPCG [aproximadamente 16 g/d de RPCG consistindo de 9,75 g de agente de liberação controlada (óleo de palma) e 6,25 g de gluconato de cálcio]). O RPCG foi preparado usando-se a técnica de arrefecimento por pulverização. Usando este sistema com base em lipídeo, gluconato de cálcio foi adicionado a uma matriz fundida de óleo de palma e a mistura foi alimentada através de um bocal atomizador. As gotículas solidificadas conforme elas entram em contato com o ar resfriado em uma temperatura abaixo do ponto de fusão do carregador lipídico resultam em partículas de RPCG. Projeto Experimental

[0080] O experimento foi um projeto de estudo longitudinal consistindo de um período de amostragem de 21 dias pré-parto e um período de 308 dias de lactação, que foi dividido em onze períodos de amostragem de 28 dias pós-parto. As amostras foram coletadas no último dia de cada período de amostragem e o leite foi coletado nos últimos três dias de cada período de amostragem. As vacas leiteiras usadas neste experimento foram mantidas em currais secos durante o período pré-parto e em baias individuais na unidade de lactação na Trouw Nutrition Dairy Research Facility no período pós-parto. As vacas foram alimentadas uma dieta seca basal de vaca ad libitum durante o período pré-parto e uma dieta basal de vaca lactante ad libitum para a duração do experimento como para a prática de manejo corrente. Resultados Cetose e saúde animal

[0081] A incidência de cetose diminuiu 5,7% em resposta ao RPCG (Tabela 2).

24 / 24 Tabela 2. Registro de eventos de cetose nas vacas leiteiras consumindo gluconato de cálcio protegido do rúmen a partir de 21 dias pré-parto até 308 dias pós-parto no leite (como uma porcentagem do número total de eventos de saúde) Evento de Saúde Controle RPCG Cetose 25,4% 19,7% Conclusões

[0082] Estes resultados demonstram uma resposta positiva para a provisão dietética de 16 g/d de gluconato de cálcio protegido do rúmen em termos de incidência da doença metabólica cetose.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada, caracterizado pelo fato de ser para diminuir níveis de beta- hidroxibutirato circulante no sangue.

2. Uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada, caracterizado pelo fato de ser para reduzir o risco de cetose em um ruminante.

3. Uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada, caracterizado pelo fato de ser para aumentar os níveis de glicose circulantes no sangue de um ruminante.

4. Uso de uma composição compreendendo um ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo e um agente de liberação controlada, caracterizado pelo fato de ser para prevenir ou reduzir a inflamação em um ruminante.

5. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo são selecionados a partir de gluconato de cálcio, gluconato de sódio, gluconato de quinino, gluconato ferroso, gluconato de potássio, gluconato de zinco, gluconato de cobre, gluconato de cobalto, gluconato de bário, gluconato de lítio, gluconato de magnésio e gluconato cúprico, preferivelmente é gluconato de cálcio e/ou gluconato de sódio, mais preferivelmente é gluconato de cálcio.

6. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que o agente de liberação controlada é selecionado do grupo consistindo de ácidos graxos, óleos animais, óleos vegetais e misturas dos mesmos.

7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o agente de liberação controlada é um óleo vegetal.

8. Uso de acordo com a reivindicação 6 ou 7, caracterizado pelo fato de que o óleo vegetal é selecionado a partir de óleo de palma, óleo de soja, óleo de semente de colza, óleo de semente de algodão, óleo de mamona e misturas dos mesmos.

9. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 8, caracterizado pelo fato de que o óleo vegetal é óleo de palma.

10. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 9, caracterizado pelo fato de que o óleo vegetal é parcialmente hidrogenado, preferivelmente totalmente hidrogenado.

11. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que a razão da porcentagem em peso do ácido glucônico e/ou um ou mais derivados do mesmo para o agente de liberação controlada varia de cerca de 20:80 a cerca de 65:35 por cento em peso ou é pelo menos cerca de 40:60 por cento em peso, preferivelmente 50:50 por cento em peso.

12. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que a composição é administrada em um período antes e depois do parto.

13. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que a composição é administrada no período entre cerca de 30 dias pré-parto e cerca de 300 dias pós-parto.

14. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a composição é administrada no período entre cerca de 21 dias pré-parto e cerca de 21 dias pós-parto.

15. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que o ruminante é selecionado a partir de grupo, em que o ruminante é selecionado do grupo consistindo de gado,

ovelha, cabras, bisão, búfalo, alces, antas, girafas, iaques, cervídeos, camelos, antílopes, preferivelmente vacas.

16. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que a composição é administrada oralmente.