BR112020007272A2 - composição probiótica, ração para aves, método para aumentar as respostas imunes em aves de capoeira e uso de uma composição - Google Patents
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Abstract
É fornecida uma composição probiótica compreendendo Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus. A composição probiótica estimula a resposta imune de galinhas sem afetar negativamente o desempenho do crescimento. A composição probiótica pode ser adicionada à ração das aves para melhorar a saúde e o desempenho das galinhas e pode ser usada como substituto da suplementação com antibióticos.
Description
USO DE UMA COMPOSIÇÃO Referência cruzada a pedidos relacionados
[01] Este pedido reivindica prioridade do pedido provisório de patente sul-africano número 2017/06932 depositado em 13 de outubro de 2017, que é incorporado por referência neste documento.
Campo da invenção
[02] A presente invenção refere-se a uma composição probiótica e, em particular, a uma composição probiótica para aves domésticas.
Antecedentes da invenção
[03] A indústria avícola comercial está classificada entre as maiores fontes de proteína animal. Um problema significativo na indústria é que, apesar dos avanços em abrigo e alimentação, as infecções por bactérias e fungos causam perdas financeiras substanciais. Essas infecções resultam em perda de peso, má qualidade da carne e frequentemente morte. De todos os patógenos bacterianos, Salmonella, Campylobacter e Clostridium spp. são responsáveis pela maioria das infecções e, se não forem controladas, podem representar um risco para a saúde de outros animais e humanos.
[04] Os avicultores comerciais, portanto, costumam usar antibióticos como aditivos alimentares para controlar patógenos bacterianos em suas aves. Isso levou a um aumento no desenvolvimento da resistência a antibióticos, e o uso de antibióticos na produção de alimentos agora foi proibido em algumas regiões, incluindo Estados Unidos e Europa. Há também uma demanda crescente por parte dos consumidores por produtos alimentares livres de antibióticos. Como resultado, é necessário um tratamento alternativo aos antibióticos, que possa melhorar a saúde de aves e outras aves de criação e também diminuir a proliferação de patógenos de origem alimentar.
[05] Probióticos, prebióticos, simbióticos, enzimas, ácidos orgânicos e ervas têm sido considerados como alternativas aos antibióticos (Huyghebaert et al., 2011 ; Gadde et al., 2017; Alagawany et al., 2018; Baldwin et al., 2018). Os probióticos são bactérias benéficas para a promoção da saúde que ocorrem naturalmente no trato gastrointestinal (GIT), formando uma relação simbiótica com o hospedeiro. Em alguns animais, eles demonstraram proteger os hospedeiros contra a colonização por patógenos, melhorar a digestão, aumentar o crescimento e melhorar o sistema imunológico.
[06] No entanto, os probióticos não parecem ser eficazes em todos os animais. Pesquisas têm mostrado que a eficácia das bactérias probióticas e os benefícios à saúde gerados por essas bactérias geralmente são específicos do hospedeiro. Por exemplo, os probióticos bacterianos demonstraram ser eficazes em suínos, bovinos e bezerros pré-ruminantes, mas há resultados contraditórios sobre se o desempenho de crescimento de aves de capoeira é melhorado pelos probióticos (Arslan C., Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences, 2004, Vol. 28, páginas 887-891; Gri L.R. et al., Arch. Geflugelk, 2008, Vol. 72(3), páginas 136-139; Iji P.A., Australian Journal of Experimental Agriculture, 2008, Vol. 48, páginas 1280-1283). Isso pode ser devido a diferenças nas espécies microbianas, preparação incorreta dos probióticos, baixa adesão à parede intestinal e mucosa, fatores ambientais ou manejo inadequado.
[07] Existe, portanto, a necessidade de um probiótico adequado para aves de criação que seja capaz de melhorar a saúde ou o crescimento do hospedeiro e/ ou reduzir a contaminação da carne de aves.
Descrição resumida da invenção
[08] De acordo com uma primeira forma de realização da invenção, é fornecida uma composição probiótica compreendendo Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
[09] A composição probiótica também pode incluir outras espécies de bactérias, microorganismos probióticos e/ ou aditivos.
[010] A composição probiótica pode ser para administração em aves de capoeira e, em particular, em galinhas.
[011] A composição probiótica pode ser formulada para administração oral, por exemplo, em combinação com ração para aves.
[012] A composição probiótica pode ser formulada em um aditivo ou suplemento alimentar.
[013] A composição probiótica pode ser utilizada para melhorar o sistema imune, a digestão, o crescimento e/ ou a saúde ou para reduzir as taxas de mortalidade de aves que se alimentam na composição. A composição também pode ser usada para inibir a colonização de bactérias patogênicas, como Salmonella enterica, Escherichia coli e Listeria monocytogenes, na carne das aves de capoeira.
[014] A cepa de Bacillus amyloliquefaciens pode ser a cepa designada como DPN123, a cepa de Enterococcus faecalis pode ser a cepa designada como DPN94, a cepa de Lactobacillus salivarius pode ser a cepa designada como DPN181, a cepa de Lactobacillus johnsonii pode ser a cepa designada como DPN184, a cepa de Lactobacillus gallinarum pode ser a cepa designada como DPN164 e/ ou o Lactobacillus crispatus pode ser a cepa designada como DPN167.
[015] De acordo com uma segunda forma de realização da invenção, é fornecido o uso de uma composição como descrita acima na fabricação de um profiláctico para prevenir uma infecção em aves de capoeira.
[016] De acordo com uma terceira forma de realização da invenção, é fornecido o uso de uma composição tal como descrita acima na fabricação de um profiláctico para melhorar o sistema imune, a digestão, o crescimento e/ ou saúde das aves de capoeira ou para reduzir as taxas de mortalidade de aves de capoeira.
[017] De acordo com uma quarta forma de realização da invenção, é fornecido o uso de uma composição como descrita acima na fabricação de um profiláctico para prevenir ou reduzir a presença de bactérias patogênicas na carne de aves.
[018] De acordo com uma quinta forma de realização da invenção, é fornecido o uso de uma composição tal como descrita acima na fabricação de um medicamento para a manutenção da saúde de aves de capoeira.
[019] De acordo com uma sexta forma de realização da invenção, é fornecida uma ração para aves que compreende Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
[020] De acordo com uma sétima forma de realização da invenção, é fornecido um método para aumentar as respostas imunes em aves de capoeira, o método compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de uma composição probiótica como descrita acima para aves de capoeira.
[021] A composição probiótica pode ser administrada em conjunto com, ou como parte da alimentação das aves de capoeira.
[022] A composição probiótica pode ser administrada na ausência de suplementação com antibióticos.
[023] A composição probiótica pode ser administrada em cerca de 107 a cerca de 109 UFC por dia, por exemplo, de cerca de 1 x 108 a cerca de 4,1 x 108 UFC de probiótico por dia. Breve descrição das figuras
[024] A Figura 1 mostra as contagens de bioluminescência (p S-
1 cm-1 sr-1) para os diferentes compartimentos gastrointestinais (duodeno, jejuno, íleo, ceco e cólon) de frangos de corte dos diferentes grupos de tratamento (probiótico com multiespécies, combinação de antibióticos e controle) em (a) 2 e (b) 3,5 horas após a administração de L. monocytogenes EGDe. * Indica diferenças significativas (p < 0,05; teste não paramétrico de Kruskal-Wallis). As barras de erro indicam desvios padrão (n = 12).
[025] A Figura 2 mostra famílias bacterianas do ceco, isto é, (a) Clostridiales não classificadas, (b) Brucellaceae, (c) Synergistaceae, (d) Erysipelotrichaceae, (e) Coriobacteriaceae e (f) Enterobacteriaceae cuja abundância significativamente difere entre os diferentes grupos de tratamento, ou seja probiótico com multiespécies, combinação de antibióticos e não tratado (significância de ANOVA, * indica p < 0,05 e ** p < 0,001). As barras de erro indicam desvios padrão (n = 6).
[026] A Figura 3 mostra citotoxicidade de células bacterianas em relação às células Caco-2 em diferentes níveis de multiplicidade de infecção (MOI). SE147- S. enteritidis 147, DPN167- L. crispatus, DPN164- L. gallinarum, DPN123- B. amyloliquefaciens, DPN184- L. johnsonii, DPN94- E. faecalis e DPN181- L. salivarius. As barras de erro indicam desvios padrão e as barras com diferentes sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente (p < 0,05).
[027] A Figura 4 mostra a eficácia da invasão de Salmonella enteritidis 147 após exposição a metabólitos bacterianos originários do controle (células de S. enteritidis 147 não tratadas), DPN167- L. crispatus, DPN164- L.
gallinarum, DPN123- B. amyloliquefaciens, DPN184- L. johnsonii, DPN94- E.
faecalis e DPN181- L. salivarius. As barras de erro indicam desvios padrão e as barras com diferentes sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente (p < 0,05).
[028] A Figura 5 mostra a atividade bactericida do soro de frangos de corte dos diferentes grupos de tratamento, ou seja, grupo 1 (frangos infectados com Salmonella recebendo probióticos como tratamento), grupo 2 (frangos infectados com Salmonella recebendo oxitetraciclina como tratamento), grupo 3 (frangos infectados com Salmonella que não recebem nenhum de tratamento) e grupo 4 (frangos não infectados que não recebem nenhum tratamento) contra (uma E. coli DH5α e (b) S. enterica Enteritidis A9 nos dias 11 (dpi 1), 14 (dpi 4), 20 (dpi 10), 24 (dpi 14) e 29 (dpi 19). As barras de erro indicam desvios padrão e as barras com diferentes sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente (p < 0,05).
[029] A Figura 6 mostra as concentrações de lisozima no soro de frangos de corte dos diferentes grupos de tratamento, ou seja, grupo 1 (frangos infectados com Salmonella recebendo probióticos como tratamento), grupo 2 (frangos infectados com Salmonella recebendo oxitetraciclina como tratamento), grupo 3 (frangos infectados com Salmonella que não receberam tratamento) e grupo 4 (frangos não infectados que não receberam tratamento) nos dias 11 (dpi 1), 14 (dpi 4), 20 (dpi 10) e 29 (dpi 19). As barras de erro indicam desvios padrão e as barras com diferentes sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente (p < 0,05).
[030] A Figura 7 mostra capacidade de resposta de células T imune de frangos de corte de diferentes grupos de tratamento, isto é, o grupo 1 (frangos infectados com Salmonella recebendo probióticos como tratamento), grupo 2 (frangos infectados com Salmonella recebendo oxitetraciclina como tratamento), grupo 3 (frangos infectados com Salmonella que não receberam tratamento) e grupo 4 (frangos não infectados que não receberam tratamento) no dia 17 (dpi 7). As barras de erro indicam desvios padrão e as barras com diferentes sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente (p < 0,05).
Descrição detalhada da invenção
[031] É descrita uma composição compreendendo Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
[032] A composição pode ser administrada a aves de capoeira como um probiótico, tal como em combinação com ou como um complemento ou aditivo à alimentação de aves de capoeira. As aves de capoeira podem ser galinhas, patos, gansos, perus, codornas, ganhinhas d’Angola, faisões, avestruzes ou pombos. Em particular, a composição destina-se a ser administrada a galinhas (Gallus gallus domesticus) e, mais particularmente, a frangos de corte.
[033] As 6 espécies de bactérias podem ser liofilizadas e combinadas para se obter uma contagem de células totais de cerca de 2,8 x 108 UFC/ g de composição probiótica. Esta pode compreender cerca de 2,6 x 107 UFC de L. crispatus, cerca de 3,6 x 107 UFC de L. salivarius, cerca de 1,3 x 108 UFC de L. gallinarum, cerca de 1,9 x 107 UFC de L. johnsonii, cerca de 5,1 × 107 UFC de E. faecalis e cerca de 1,9 x 107 UFC de B. amyloliquefaciens. A composição probiótica será tipicamente administrada em cerca de 107 a cerca de 109 UFC por dia, por exemplo entre cerca de 1 x 10 8 a cerca de 4,1 x 108 UFC da composição probiótica por dia.
[034] Pelo menos algumas das bactérias na composição produzem fitase e amilase, que degradam ácido fítico e amido, respectivamente. A produção dessas enzimas pelas bactérias deve auxiliar na digestão das aves e utilização em alimentos, aumentando assim o seu crescimento.
[035] As bactérias também produzem altas concentrações de ácido láctico e peróxido de hidrogênio, que demonstraram inibir o crescimento de patógenos de origem alimentar, como Salmonella enterica, Escherichia coli e Listeria monocytogenes in vitro. Além disso, o Bacillus amyloliquefaciens DPN123 produz um composto antimicrobiano que demonstrou ser ativo contra patógenos de origem alimentar Gram-positivos e Gram-negativos in vitro. A hidrolase do sal biliar também é produzida.
[036] Cada uma das cepas isoladas mostra uma alta tolerância a ambientes ácidos e altas concentrações de sal biliar in vitro, sugerindo que elas têm uma alta probabilidade de sobreviver ao ambiente do estômago e preencher as paredes do GIT após administração oral. As cepas também possuem habilidades agregativas, o que é uma indicação de sua capacidade de formar biofilmes e se ligar a células epiteliais, impedindo assim a adesão e o estabelecimento bem-sucedido de cepas patogênicas no GIT. As células bacterianas ainda produzem exopolissacarídeos (EPS) como proteção contra o estresse ambiental e agem como prebióticos, conferindo benefícios adicionais à saúde do hospedeiro.
[037] Em uma forma de realização da invenção, a B.
amyloliquefaciens é uma cepa que foi designada DPN123. Na mesma ou diferente forma de realização da invenção, a E. faecalis é uma cepa que foi designada DPN94. Em ambas as formas de realização anteriores, ou uma forma de realização diferente da invenção, a L. salivarius é uma cepa que foi designada DPN181. Em qualquer das formas de realização anteriores, ou uma forma de realização diferente da invenção, a L. johnsonii é uma cepa que foi designada DPN184. Em qualquer das formas de realização anteriores, ou uma forma de realização diferente da invenção, a L. gallinarum é uma cepa que foi designada DPN164. Em qualquer das formas de realização anteriores, ou uma forma de realização diferente da invenção, a L. crispatus é uma cepa que foi designada DPN167.
[038] É previsto que as bactérias na composição revestam a totalidade ou parte significativa do GIT das aves e confiram proteção contra pelo menos alguns patógenos, além de estimular o sistema imunológico das aves e/ ou melhorar a digestão. Assim, a saúde das aves deve melhorar, levando, esperançosamente, a um aumento na massa das aves e uma diminuição na mortalidade das aves. Por sua vez, isso deve resultar em um ganho financeiro para os avicultores. A carne das galinhas também tem menor probabilidade de conter patógenos de origem alimentar, melhorando assim a segurança alimentar dos consumidores.
[039] A administração da composição probiótica da invenção em aves de criação também ajudará, esperançosamente, os agricultores a criar com sucesso as aves sem o uso de antibióticos.
[040] A invenção será agora descrita em mais detalhes por meio do seguinte exemplo não limitativo.
Seleção de bactérias para uma forma de realização de ums composição probiótica multi-espécies
[041] Bactérias de diferentes segmentos do trato gastrointestinal (GIT) de 25 frangos saudáveis criados livres foram isoladas. As bactérias probióticas precisam ser tolerantes a condições ácidas e sais biliares para sobreviver ao trânsito no GIT. As cepas isoladas foram, portanto, avaliadas quanto à tolerância in vitro em relação às condições simuladas do trato gastrointestinal. Os isolados de cada seção do GIT também foram pesquisados quanto às propriedades probióticas, como a produção de enzimas digestivas (por exemplo, amilase, fitase e hidrolase de sal biliar), peróxido de hidrogênio, exopolissacarídeos e compostos antimicrobianos, capacidade de agregar e formar biofilmes e hidrofobicidade celular. Além disso, as cepas probióticas identificadas foram rastreadas quanto à presença de fatores de virulência.
[042] As cepas foram pesquisadas quanto à produção de hidrolase de sal biliar (BSH) de acordo com o método utilizado por Franz et al.
(2001). BSH fornece cepas com resistência a sais biliares, e efetua a hidrólise de sais biliares para formar glicina ou taurina, e um núcleo de esteróide. Os sais biliares hidrolisados, em comparação com os não hidrolisados, são menos absorvidos no intestino, deixando mais ácidos biliares livres a serem excretados pelas fezes. O aumento das excreções de sais biliares diminui a quantidade total de sais biliares disponíveis. Os sais biliares perdidos podem ser reabastecidos através da síntese do colesterol, o que posteriormente leva a uma redução nos níveis séricos de colesterol.
[043] A atividade da amilase foi determinada usando um ensaio de placa de ágar de hidrólise de amido como descrito anteriormente por Deb et al. (2013). A amilase é capaz de hidrolisar ligações α-1,4-glicosídicas em polissacarídeos contendo três ou mais unidades de glicose ligadas a 1,4-α e tem especificidade em relação a amidos, glicogênio e oligossacarídeos. Foi demonstrado que a suplementação de amilase na alimentação melhora significativamente a digestibilidade dos nutrientes e melhora o desempenho do crescimento de frangos de corte (Onderci et al., 2006; Tang et al., 2013).
[044] As cepas produtoras de fitase foram determinadas utilizando um ensaio em placa de ágar como anteriormente descrito por Bae et al. (1999). A produção de fitase é benéfica, pois libera energia do ácido fítico anti-nutritivo, levando a um melhor crescimento das aves (Askelson et al., 2014). Além disso, as fitases reduzem o efeito antinutricional do ácido fítico, melhorando a biodisponibilidade de fósforo, cálcio, magnésio, ferro e zinco.
[045] As bactérias empregam numerosos mecanismos para tolerar condições ambientais adversas. Isso inclui envolver suas membranas externas com exopolissacarídeos (EPS). Além disso, o EPS também modula a composição do microbioma promovendo seletivamente o crescimento de bactérias benéficas. As produtoras de EPS foram identificadas usando um ensaio em placa de ágar como descrito anteriormente por Stingele et al.
(1996).
[046] Os isolados que produzem peróxido de hidrogênio foram identificados usando um ensaio de placa de ágar (Müller, 1984; Rabe e Hillier, 2003). O peróxido de hidrogênio inibe o crescimento de patógenos como
Staphylococcus aureus, Salmonella Typhimurium e Listeria monocytogenes.
[047] Os isolados que produziram compostos antimicrobianos foram identificados usando o ensaio de difusão em poço de ágar (Van Staden, 2015). As bactérias que produzem compostos antimicrobianos podem modular a composição do microbioma do GIT impedindo a colonização de bactérias patogênicas que induzem a disbiose do microbioma.
[048] Os fatores de virulência facilitam a colonização no GIT, e a citolisina tem uma função dupla como toxina hemolítica e bacteriocina. A presença de cyla, cylB e cylM, gelE, cpd, asp1, cob, cad, EF3314, asa1, efaA e ace no genoma de cepas de Enterococcus foi, por conseguinte, determinada por PCR e hibridização de Southern. Além disso, a produção de gelatinase foi determinada pela inoculação de culturas por picada em caldo MRS ou BHI (suplementado com gelatina a 3%, p/ v) e incubada sob condições aeróbias e anaeróbias a 37 °C por 5 dias. Após a incubação, as culturas foram resfriadas a 4 °C por 5 horas e, posteriormente, inspecionadas quanto à fluidez, indicativas de hidrólise de gelatina. A hibridação por Southern confirmou a ausência dos genes.
[049] A capacidade das cepas de se agregarem e formarem biofilmes em discos de vidro foi determinada por microscopia de força atômica (AFM) e microscopia confocal.
[050] Outra característica foi considerada para a seleção das espécies probióticas é a inibição de patógenos como Clostridium perfringens, Salmonella enterica e Campylobacter jejeni. Infecção das aves de capoeira por C. perfringens pode danificar a mucosa intestinal (enterite necrótica), levando à diminuição da absorção de nutrientes e, posteriormente, à diminuição do desempenho do crescimento. Ela também aumenta a taxa de mortalidade, e transmissão de aves de capoeira para humanos levando a doenças de origem alimentar. Infecções por S. entérica e C. jejeni causam diarreia, assim,
diminuindo a absorção de alimentos e subsequentemente diminuindo o desempenho de crescimento, e a transmissão aos seres humanos leva a doenças de origem alimentar, tais como a salmonelose e campylobacteriose.
[051] Uma composição probiótica multi-espécies foi projetada para incluir linhagens de todas as seções do trato gastrointestinal (GIT), de modo a buscar a colonização completa do GIT em aves nas quais a composição é administrada. A maioria dos probióticos disponíveis comercialmente para frangos de corte contém uma ou duas espécies, a maioria das quais não foi isolada do GIT de galinhas. A partir dos 609 bactérias iniciais isoladas a partir de frangos de corte saudáveis, 6 cepas que toleravam condições ácidas (pH 2 a 3), eram resistentes a sais biliares (0,2 a 2,0% w/ v), produziram exopolissacarídeos e possuíam características desejáveis, tais como as discutidas acima, foram selecionadas para inclusão na composição probiótica. Essas cepas foram DPN184, DPN164, DPN167, DPN181, DPN94 e DPN123: - A DPN123 foi isolada a partir do duodeno e produziu amilase extracelular, fitase e lipopeptídeos antimicrobianos (surfactina e iturina A1).
- A DPN94 foi isolada a partir do jejuno e íleo e produziu fitase e hidrolase do sal biliar. O genoma da DPN94 continha vários genes que podem codificar a virulência, mas não a produção de citolisina.
- A DPN184 foi isolada a partir do ceco e produziu peróxido de hidrogênio.
- A DPN181 foi isolada a partir do cólon e produziu peróxido de hidrogênio e altos níveis de ácido láctico.
- A DPN167 foi isolada a partir do papo, proventrículo e ventrículo, e produziu peróxido de hidrogênio e hidrolase de sal biliar. - A DPN164 foi isolada a partir do jejuno e íleo.
[052] O 16S DNAr, genes recA e gyrB destes isolados foram amplificados e as suas sequências foram comparadas com aquelas listadas no GenBank para atribuir a identidade da espécie para os isolados.
- DPN184 isolada foi identificada como Lactobacillus johnsonii (DNAr 16S com 100% de similaridade de sequência com L. johnsonii N6.2, gene recA com 98,1% de similaridade de sequência com L. johnsonii FI9785 e gene gyrB com 99,5% de semelhança com L. johnsonii FI9785).
- DPN181 isolada foi identificada como Lactobacillus salivarius (DNAr 16S com 99,7% de similaridade de sequência com L. salivarius JCM1046, gene recA com 99,4% de similaridade de sequência com L.
salivarius UCC118 e gene gyrB com 98,1% de similaridade com L. salivarius Ren).
- DPN164 isolada foi identificada como Lactobacillus gallinarum (DNAr 16S com 99,7% de similaridade de sequência com L. gallinarum I26, gene recA com 100% de similaridade de sequência com L. gallinarum LMG 9435T e gene gyrB com 99% de similaridade com L. gallinarum BCRC 17266).
- DPN167 isolada foi identificada como Lactobacillus crispatus (DNAr 16S com 99,9% de similaridade de sequência com L. crispatus ST1, gene recA com 99,6% de similaridade de sequência com L. crispatus LMG 11415 e gene gyrB com 99,7% de similaridade com L. crispatus ST1).
- DPN123 isolada foi identificada como Bacillus amyloliquefaciens (DNAr 16S com 99,7% de similaridade de sequência com B. amyloliquefaciens L-S60, gene recA com 99,2% semelhança de sequência com B.
amyloliquefaciens BCRC 17266 e gene gyrB com 99,7% de similaridade com B. amyloliquefaciens chenj).
- DPN94 isolada foi identificada como Enterococcus faecalis (DNAr 16S com 99,7% de similaridade de sequência com E. faecalis ATCC 29212, gene recA com 99,8% de similaridade de sequência com E. faecalis ATCC 29212 e gene gyrB 100% de semelhança com E. faecalis DENG1).
[053] A amilase extracelular (que poderia aumentar a degradação do amido, melhorando o desempenho do crescimento) foi assim produzida por Bacillus amyloliquefaciens DPN123. Peróxido de hidrogênio (o que poderia ajudar as células a inibirem a colonização de bactérias patogênicas sensíveis) foi produzido por L. johnsonii DPN184, L. salivarius DPN181 e L. crispatus DPN167. As enzimas fitase (que podem aumentar a disponibilidade de nutrientes em alimentos para animais, melhorando o desempenho do crescimento) foram produzidas por B. amyloliquefaciens DPN123 e E. faecalis DPN94. Lipopeptídeos antimicrobianos surfactina e iturina A1 foram produzidos por B. amyloliquefaciens DPN123 e mostraram atividade anti-microbiana em relação a M. luteus ATCC 4698, L.
monocytogenes EDGE, E. coli ATCC 43892 e S. enterica serovar Enteritidis A9 enteroinvasivas. A hidrolase do sal biliar (que pode indiretamente levar à diminuição dos efeitos de colesterol) foi produzida por E. faecalis DPN94 e L.
crispatus DPN167. O genoma de E. faecalis DPN94 codificou para os genes de virulência cad, ace, slyA, asa1, EF3314, EF0109, cob, asp1, efaA, gelE e cpd, mas não codificou para citolisina (cylA, cylB e cylM).
Avaliação de aditivo de ração probiótico
[054] Os efeitos e segurança da composição probiótica multi- espécie compreendendo L. johnsonii DPN184, L. salivarius DPN164, L.
crispatus DPN167, L. gallinarum DPN164, E. faecalis DPN94 e B.
amyloliquefaciens DPN123 como aditivo em ração de frangos de corte foram avaliados.
[055] Frangos de corte incubados foram divididos aleatoriamente em três grupos com 100 aves por grupo. O probiótico multi-espécies foi adicionado à ração de frangos de corte no primeiro grupo e os seus efeitos no desempenho do crescimento, no tamanho dos órgãos linfóides, massa da moela, conteúdo mineral dos ossos da tíbia e os parâmetros de células vermelhas do sangue foram avaliados nos dias 19 e 29. O segundo grupo de frangos foi administrado uma combinação de antibióticos de sulfadiazina, colistina e trimetoprims através da sua ração e submetidas aos mesmos testes.
O terceiro grupo de aves recebeu ração padrão sem aditivos e serviu como controle.
Preparação da composição probiótica
[056] As cepas foram cultivadas em meio de melaço, composto por 5,0% (p/ v) de melaço, 0,3% (p/ v) de extrato de levedura, 0,2% (p/ v) de peptona, 0,004% (p/ v) de MnSO4, 0,001% (w/ v) de citrato de Na, 0,4% (w/ v) de K2HPO4 e 0,02% (v/ v) Tween80. O meio foi esterilizado a 121 °C por 15 min, resfriado a 25 °C, a fase superior removida do sedimento e novamente autoclavada. Tioglicolato (0,15%, p/ v) foi adicionado ao meio de crescimento de L. crispatus DPN167 e L. johnsonii DPN184 para criar um ambiente anaeróbico. A incubação foi realizada por 3 a 4 dias a 37 °C. As células foram colhidas (8000 × g, 10 minutos, 4 °C), lavadas com PBS estéril (0,8%, p/ v de NaCl; 0,02%, p/ v de KCl; 0,142%, p/ v de Na2HPO4; 0,024%, p/ v de KH2PO4, pH 7,5) e ressuspensas em crioprotetor estéril (10%, p/ v de lactose e 10,0%, p/ v de sacarose, autoclavadas a 121 °C durante 10 minutos e resfriadas a 4 °C). O número de células viáveis por grama de cultura liofilizada foi determinado por plaqueamento em MRS Agar (Biolab) ou BHI Agar (Biolab). As placas foram incubadas a 37 °C por 24 horas em condições aeróbicas e anaeróbicas. As cepas foram combinadas para se obter uma contagem de células total de 2,8 x 108 UFC/ g de pó liofilizado, consistindo em 2,6 x 107 UFC de L. crispatus DPN167, 3,6 x 107 UFC de L. salivarius DPN181, 1,3 x 108 UFC de L. gallinarum DPN164, 1,9 x 107 UFC de L. johnsonii DPN184, 5,1 x 107 UFC de E. faecalis DPN94 e 1,9 x 107 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123. Ensaios de alimentação
[057] Os alimentos continham milho, bagaço de soja, bagaço de girassol, bagaço de canola, trigo, farelo, fosfato de Ca, calcário, sal, lisina, metionina e treonina. O pré-iniciador foi fornecido a 178 g por ave (por 7 dias).
A dieta inicial foi fornecida a 354 g por ave (por 7 dias), a dieta de crescimento a 1596 g por ave (por 7 dias) e a dieta final a 1883 g por ave (por 11 dias). A ração de frangos de corte do grupo de tratamento probiótico foi suplementada com o probiótico multi-espécies da seguinte forma: o pré-iniciador foi suplementado com 24 mg de células probióticas secas por grama de ração para produzir 6,7 × 106 UFC/ grama de ração, consistindo em 6,1 × 105 UFC de L. crispatus DPN167, 8,4 × 105 UFC de L. salivarius DPN181, 3,1 x 106 UFC de L. gallinarum DPN164, 4,4 x 105 UFC de L. johnsonii DPN184, 1,2 x 106 UFC de E. faecalis DPN94 e 4,4 x 105 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123. A ração de partida foi suplementada com 12 mg de pó probiótico por grama de ração (3,3 x 106 UFC/ grama de ração, consistindo em 3,1 x 105 UFC de L. crispatus DPN167, 4,2 x 105 UFC de L. salivarius DPN181, 1,6 x 106 UFC de L.
gallinarum DPN164, 2,2 x 105 UFC de L. johnsonii DPN184, 6,1 x 106 UFC de E. faecalis DPN94 e 2,2 x 105 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123). A ração de crescimento foi suplementada com 5,4 mg de pó probiótico por grama de ração (1,5 x 106 UFC/ grama de ração, consistindo em 1,4 x 105 UFC de L.
crispatus DPN167, 1,9 x 105 UFC de L. salivarius DPN181, 7,0 x 105 UFC de L.
gallinarum DPN164, 1,0 x 105 UFC de L. johnsonii DPN184, 2,8 x 105 UFC de E. faecalis DPN94 e 1,0 x 105 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123). A ração de finalização foi suplementada com 3,5 mg de pó probiótico por grama de ração (9,9 x 105 UFC/ grama de ração, consistindo em 9,0 x 104 UFC de L.
crispatus DPN167, 1,3 x 105 UFC de L. salivarius DPN181, 4,4 x 105 UFC de L.
gallinarum DPN164, 6,2 x 104 UFC de L. johnsonii DPN184, 1,8 x 105 UFC de E. faecalis DPN94 e 6,5 x 104 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123). Frangos de corte do grupo de tratamento probiótico receberam entre 1,0 e 4,1 × 108 UFC diariamente do probiótico multi-espécies que consistia em Lactobacillus crispatus DPN167 (9,3 × 106 a 3,8 × 107 UFC), Lactobacillus salivarius DPN181 (1,3 × 107 a 5,3 × 107 UFC), Lactobacillus gallinarum DPN164 (4,6 × 107 a 1,9 × 108 UFC), Lactobacillus johnsonii DPN184 (6,8 × 106 a 2,8 × 107 UFC), Enterococcus faecalis DPN94 (1,8 × 107 a 7,5 × 107 UFC) e Bacillus amyloliquefaciens DPN123 (6,8 x 106 para 2,8 x 107 UFC).
[058] Frangos de corte no grupo de tratamento com antibióticos (10 gaiolas) receberam a mesma ração nos quatro ciclos de alimentação, mas a ração foi suplementada com uma combinação de sulfadiazina (0,375 ppm/ grama de ração), colistina (0,128 ppm/ grama de ração) e trimetoprima (0,075 ppm/ grama de ração) e não continha probióticos. Os frangos de corte do grupo de tratamento com antibióticos receberam em média entre 7,5 a 61,1 ppm de sulfadiazina, 2,6 a 20,9 ppm de colistina e 1,5 a 12,2 ppm de trimetoprima diariamente por 29 dias. Os três antibióticos foram selecionados por serem frequentemente incluídos como aditivos alimentares. Frangos de corte no grupo não tratado (10 gaiolas) serviram como controle e receberam ração sem antibióticos e probióticos. Adicionou-se lactose e sacarose à ração usada em cada ciclo de alimentação dos grupos de tratamento com antibióticos e controle para produzir concentrações idênticas às rações administradas ao grupo de tratamento com probióticos.
Desempenho na saúde e no crescimento
[059] A saúde visual e o desempenho do crescimento das aves foram avaliados com base no consumo diário de ração e alterações na massa corporal. O peso semanal e o consumo de ração por recinto foram registrados e os pesos individuais foram calculados como uma média do peso do recinto. A taxa média de conversão alimentar (FCR) calculada a partir da ingestão de alimentos (FI) e ganho de peso corporal (BWG). Todas as aves foram pesadas e a mudança na massa corporal de cada gaiola foi calculada relevante para a massa registrada no dia 1.
Hematologia, peso de órgãos e histologia
[060] Nos dias 19 e 29, vinte aves por tratamento foram selecionadas aleatoriamente, sacrificadas por deslocamento cervical e sangue coletado em tubos K2-EDTA por exsanguinação. Esses dois dias foram selecionados com base no estágio de desenvolvimento do GIT. Estudos anteriores (Leeson e Summers, 2009) mostraram que no dia 19 o GIT não está totalmente desenvolvido, enquanto 10 dias depois, no dia 29, o GIT é considerado maduro. O baço e a bolsa Fabricius de vinte aves por tratamento nos dias 19 e 29 e as moela no dia 29 foram excisadas e pesadas. O duodeno de 20 frangos por tratamento nos dias 19 e 29 foi coletado e dissecado longitudinalmente.
Inibição in vivo de L. monocitogenes
[061] A capacidade dos aditivos para ração de antibióticos e probióticos em inibir a colonização e proliferação de L. monocytogenes in vivo foi avaliada. No dia 14, doze frangos de corte por grupo de tratamento foram colocados em gaiolas separadas. Água e ração foram fornecidas ad libitum. No dia 15, a ração foi retirada 2 horas antes da administração de L.
monocytogenes EGDe, uma cepa bioluminescente obtida da Caliper Life Sciences (Massachusetts, EUA). A cepa EGDe contém o plasmídeo PL2lux com o operon luxABCDE de luminescência Photorhabdus. Cada uma das aves foi administrada com 100 μl (4,28 x 108 UFC) de L. monocytogenes EGDe por sonda esofágica intragástrica. Os frangos de corte do grupo de tratamento com probiótico foram administrados com 100 μl dos probiótico multi-espécies (8,34 x 108 UFC) por sonda esofágica intragástrica, 2 horas antes da administração de L. monocytogenes EGDe.
[062] A preparação de probiótico foi preparada como se segue: L. crispatus DPN167, L. salivarius DPN181, L. gallinarum DPN164, L. johnsonii DPN184 e E. faecalis DPEC94 foram cultivadas em caldo MRS por 12 horas a
37 °C sob condições anaeróbicas. O Bacillus amyloliquefaciens DPN123 foi cultivado em caldo BHI por 12 horas a 37 °C sob condições aeróbias usando um agitador orbital a 100 rpm. As células foram colhidas (8000 x g, 3 minutos, 25 °C), lavadas com dois volumes de PBS estéril e ressuspensas em 100 μl de tampão de sonda esofágica (0,2 M de tampão NaHCO3 contendo 1%, p/ v de glucose, pH 8) para rendimento de 8,3 x 108 UFC (5,2 x 107 UFC de L. crispatus DPN167, 6,2 x 107 UFC de L. salivarius DPN181, 1,2 x 108 UFC de L.
gallinarum DPN164, 1,3 x 108 UFC de L. johnsonii DPN184, 2,3 × 108 UFC de E. faecalis DPN94 e 2,4 x 108 UFC de B. amyloliquefaciens DPN123). A Listeria monocytogenes EGDe foi cultivada em caldo BHI (suplementado com 7,5 μg/ ml de cloranfenicol) em condições aeróbias, utilizando um agitador orbital a 100 rpm por 6 horas a 37 °C. As células foram colhidas (8000 x g, 3 minutos, 25 °C), lavadas com dois volumes de PBS estéril e ressuspensas em tampão de sonda gástrica, para se obter 4,2 x 108 UFC por 100 μl.
[063] Após 2 horas e novamente 3,5 horas de administração de L. monocytogenes EGDe, seis frangos de corte por grupo de tratamento foram sacrificados por deslocamento cervical. O trato gastrointestinal (GIT) de cada ave foi dissecado longitudinalmente e rastreado para a emissão de bioluminescência a partir de células de L. monocytogenes EGDe usando o sistema de imagem in vivo Caliper (IVIS® 100, Caliper Life Sciences). O IVIS foi equipado com uma câmera com dispositivo de acoplamento de carga resfriado, montada em uma câmara de amostra estanque à luz. A exposição foi de 3 minutos. Os fótons emitidos a 620 nm foram calculados usando a versão 3 do software Caliper Life Sciences. Os valores obtidos foram expressos como fótons por segundo por cm2 por esterorradiano (p. S-1. cm -1. sr-1). As regiões de interesse (ROI) foram selecionadas manualmente. A bioluminescência de fundo foi corrigida pela sobreposição de imagens de intestinos com bactérias não bioluminescentes. O GIT de cada ave foi então dissecado para separar o duodeno, jejuno, íleo, ceca e cólon. Cada seção foi pesada, homogeneizada em PBS estéril, diluída em série e plaqueada em ágar BHI suplementado com 7,5 μg/ ml de cloranfenicol. As placas foram incubadas a 37 °C por 24 horas e o número de células viáveis expressas como UFC/ grama de intestino.
Resultados e discussão
[064] A suplementação de ração para frangos de corte com a combinação de antibióticos ou probióticos multi-espécies não teve efeito no ganho de peso, consumo de ração, razão de conversão alimentar, peso relativo de órgãos linfóides, pesos relativos de moela, parâmetros ósseos da tíbia e parâmetros hematológicos. Os frangos de corte do grupo de tratamento com antibióticos apresentaram níveis mais altos de contagem de linfócitos e basófilos, e o grupo controle possuía área de vilosidades maiores, mas esses efeitos foram transitórios e estatisticamente significativos apenas no dia 19. A bioluminescência reduzida de L. monocytogenes foi observada no íleo de frangos de corte que receberam o probiótico multi-espécies 3,5 horas após a administração do patógeno, indicando que o probiótico pode diminuir a atividade metabólica do patógeno (Figura 1). O microbioma de frangos de corte do grupo de tratamento com antibióticos apresentou níveis mais baixos significativos de Enterobacteriaceae e níveis mais altos de Clostridiales, Brucellaceae, Synergistaceae, Erysipelotrichaceae e Coriobacteriaceae não classificados, no ceco no dia 29 (Figura 2).
Interação de bactérias patogênicas e probióticas com células epiteliais
[065] O efeito do probiótico multi-espécie nas células epiteliais de Caco-2 foi estudado monitorando citotoxicidade, adesão e invasão e efeito nas junções estreitas de claudina-3 entre as células. Alterações no proteoma das células epiteliais do íleo de frangos de corte foram registradas quando expostas a bactérias patogênicas e probióticas, respectivamente. A cepa patogênica de Salmonella enterica Enteritidis (cepa 147) era citotóxica e invadiu as células Caco-2. Além disso, a cepa 147 destruiu as junções apertadas de claudina-3 entre as células Caco-2, resultando na ruptura da monocamada. A interação de S. enteritidis com células epiteliais de frangos de corte levou à regulação positiva da lisozima C e G, catelicidina 2 e 3, proteína mielóide 1, inibidor CITI-1 de tripsina, gallicina-2 e modificador de dobra de ubiquitina 1 e a regulação negativa da glutaredoxina-1, gallicina-7 e vigilina. As proteínas reguladas positivamente agiam como compostos quimiotáticos, inibidores de enzimas microbianas e desempenhavam papéis críticos durante o estresse. As proteínas reguladas negativamente ativaram células natural killers e apoptose regulada e sistemas de defesa antimicrobiana.
[066] As células viáveis de Lactobacillus salivarius DPN181, Lactobacillus crispatus DPN167, Lactobacillus gallinarum DPN164, Lactobacillus johnsonii DPN184, Enterococcus faecalis DPN94 e Bacillus amyloliquefaciens DPN123, por outro lado, não eram citotóxicas para células Caco-2 (Figura 3). As bactérias probióticas aderiram às células Caco-2, mas não as invadiram, e diminuíram as junções estreitas da claudina-3, mas não perturbaram a monocamada. Os probióticos diminuíram as junções estreitas da claudina-3 produzindo ácidos graxos de cadeia curta, peróxido de hidrogênio e lipopeptídeos antimicrobianos. Em frangos de corte administrados com probiótico multi-espécies, a transgelina 2/3, o fator de alongamento-1 beta e o gradiente anterior 2 foram regulados positivamente, mas a carnitina O- acetiltransferase, a adenilato quinase 2, a superóxido dismutase Cu-Zn e a proteína SET foram reguladas negativamente. As proteínas reguladas positivamente estavam envolvidas na proliferação, migração e cicatrização das células e na regulação do citoesqueleto, enquanto as proteínas reguladas negativamente foram importantes no transporte de ácidos graxos, homeostase energética, metabolismo de nucleotídeos, eliminação de radicais livres e transdução de sinal. Conclui-se a partir desses estudos, que o probiótico multi-
espécies não era tóxico e interagiu com células epiteliais de maneira simbiótica.
[067] Embora o probiótico multi-espécie não fosse citotóxico, os produtos finais metabólicos eram. A capacidade de metabolitos probióticos em inibir a invasão de S. enteritidis é mostrada na Figura 4. Eficiência de invasão de S. enteritidis 147 diminuiu significativamente após exposição ao metabolitos proveniente de L. johnsonii DPN184, L. salivarius DPN181, L. gallinarum DPN164, E. faecalis DPN94 e B. amyloliquefaciens DPN123.
Controle da colonização de Salmonella em frangos de corte com antibióticos e aditivos probióticos na ração
[068] A Salmonela é um habitante natural do GIT de frangos de corte e raramente causa mortalidades, mas representa uma ameaça como patógeno de origem alimentar para humanos. O alto número de células intestinais pode levar à carne contaminada e ao surto de salmonelose.
Portanto, vários aditivos alimentares são usados para controlar o número de células de Salmonella em frangos de corte.
[069] A capacidade do probiótico multi-espécies na inibição da colonização por Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis A9 em comparação com um antibiótico (oxitetraciclina) foi avaliada in vivo. A capacidade desses tratamentos em inibir a colonização de Salmonella foi avaliada após a colonização de Salmonella no ceco, determinando o efeito no desempenho do crescimento, parâmetros hematológicos, atividade bactericida e lisozima sérica, pesos de órgãos imunes e taxas de resposta de linfócitos T.
[070] Um primeiro grupo de frangos de corte (119 aves) foi administrado por via oral através de ração com 2 a 8,9 x 107 UFC de probiótico multi-espécies por dia, desde o dia 1, durante 29 dias. Um segundo grupo (119 frangos de corte) recebeu por via oral 4 a 31 mg de oxitetraciclina por dia, durante o mesmo período. Os frangos de corte do grupo 3 (119 aves) atuaram como controle positivo (infectados por Salmonella) e os do grupo 4 (119 aves) atuaram como controle negativo (não infectados). Aves dos grupos 3 e 4 não foram tratadas com probiótico ou oxitetraciclina. Nos dias 9 e 10, os frangos de corte do grupo 1, 2 e 3 foram infectados com 9 x 107 UFC de S. enteritidis A9.
Os frangos de corte do grupo 4 não foram infectados com Salmonella.
[071] A administração de Salmonella enteritidis A9 não alterou o desempenho do crescimento de frangos de corte, pesos dos órgãos imunes, parâmetros hematológicos, níveis séricos de interfon gama e os níveis de atividade bactericida no soro contra E. coli. Nos primeiros dias após a infecção (dias 11-14), os números de células fecais de S. enteritidis A9 de frangos de corte tratados com oxitetraciclina (grupo 2) diminuíram de 7,954 para 0,857 (Log UFC) e permaneceram nesse nível por 4 dias. No entanto, o número de células aumentou a partir do dia 19 para níveis equivalentes aos registrados para frangos de corte nos grupos de tratamento probiótico e controle positivo (grupos 1 e 3, respectivamente). O aumento no número de células pode ser devido a antibióticos que perturbam o microbioma no GIT, favorecendo indiretamente a colonização de Salmonella. Os frangos que receberam o probiótico multi-espécies (grupo 1) apresentaram níveis semelhantes de Salmonella em seu ceco que os frangos infectados não tratados (grupo 3). No entanto, o número de células viáveis de Salmonella diminuiu no dia 29 para níveis registrados em frangos de corte não infectados (grupo 4). O tratamento com probiótico multi-espécies e oxitetraciclina aumentou a atividade bactericida de Salmonella no soro e as respostas de linfócitos T em frangos de corte infectados com Salmonella (Figura 5). Além disso, o uso de probióticos aumentou os níveis séricos de lisozima (Figura 6). Assim, concluiu-se que os aditivos para antibióticos e probióticos aumentaram as respostas imunes dos frangos de corte em resposta à infecção por Salmonella (Figura 7).
[072] A composição de probiótico multi-espécies se compara bem com benefícios relatados de probióticos comerciais PoultryStar™ de Biomin (E. faecium, P. acidilactici, B. animalis, L. salivarius, e L. Reuteri frutooligossacarídeos prebióticos) (Sterzo et al., 2007 ; Ghareeb et al, 2012), CLOSTAT™ da Kemin Industries (B. subtilis) (Teo e Tan, 2007; Melegy et al, 2011;. Lourenço et al, 2012;. Abudabos et al., 2013) e Flora Max™ da Novozymes (L. salivarius e P. parvulus) (Gutierrez-Fuentes et al, 2013;. Prado- Rebolledo et al., 2017).
[073] O probiótico multi-espécies projetado possuía inúmeras características benéficas e seu uso diário como aditivo alimentar foi considerado seguro, pois o uso de probióticos não afetou negativamente o desempenho de aves saudáveis. As cepas probióticas aderidas às células epiteliais intestinais e a crosstalk entre essas células não induziram alterações proteômicas negativas. O probiótico multi-espécies também aumentou as respostas imunes aos frangos durante a infecção por Salmonella, o que sugere que as linhagens podem ser usadas como um aditivo alternativo de ração para melhorar a saúde e o desempenho dos frangos de corte.
[074] A descrição acima é apenas a título de exemplo e deve ser apreciado que várias modificações podem ser feitas na composição sem se afastar do escopo da invenção. Deveria, por exemplo, ser imediatamente aparente que a composição não está limitada às cepas bacterianas específicas mencionadas no exemplo, mas pode incluir outras cepas bacterianas da mesma espécie com características iguais ou semelhantes. A composição probiótica também pode incluir componentes adicionais, aditivos e excipientes.
[075] Em todo o relatório descritivo, a menos que o conteúdo exija de outra forma, a palavra ‘compreender’ ou variações como ‘compreende’ ou ‘compreendendo’ devem ser entendidas como implicando a inclusão de um número inteiro ou grupo de números inteiros, mas não a exclusão de qualquer outro número inteiro ou grupo de números inteiros.
Referências
[076] Abudabos, AM, Alyemni, AH, Al Marshad, MBA (2013).
Bacillus subtilis PB6 based probiotic (CloSTAT™) improves intestinal morphological and microbiological status of broiler chickens under Clostridium perfringens challenge. Int. J. Agri. Biol. 15 (5), p. 978-982.
[077] Alagawany, M., Abd El-Hack, M.E., Farag, M.R., Sachan, S., Karthik, K., Dhama, K. (2018). The use of probiotics as eco-friendly alternatives for antibiotics in poultry nutrition. Environ. Sci. Pollut. Res. In Press, DOI: 10.1007/s11356-018-1687-x.
[078] Arslan, C. (2004). Effect of dietary probiotic supplementation in growth performance in the rock partridge (Alectoris graeca).
Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences 28, 887-891.
[079] Askelson, T.E., Campasino, A., Lee, J.T., Duong, T. (2014).
Evaluation of phytate-degrading Lactobacillus culture administration to broiler chickens. Appl. Environ. Microbiol. 80(3), 943-950, DOI: 10.1128/AEM.03155-
13.
[080] Bae, H.D., Yanke, L.J., Cheng, K.J., Selinger, L.B. (1999).
A novel staining method for detecting phytase activity. J. Microbiol. Methods 39(1), p 17-22, DOI: 10.1016/S0167-7012(99)00096-2.
[081] Baldwin, S., Hughes, R.J., Thu Hao Van, T., Moore, R.J., Stanley, D. (2018). At-hatch administration of probiotic to chickens can introduce beneficial changes in gut microbiota. PLoSONE 13(3), e0194825, DOI: 10.1371/journal.pone.0194825.
[082] Deb, P., Talukdar, S.A., Mohsina, K., Sarker, P.K., Sayen, S.M.A. (2013). Production and partial characterization of extracellular amylase enzyme from Bacillus amyloliquefaciens P-001. SpringerPlus 2(154), p 1-12, DOI: 10.1186/2193-1801-2-154.
[083] Franz, C.M., Specht, I., Haberer, P., Holzapfel, W.H.
(2001). Bile salt hydrolase activity of Enterococci isolated from food: screening and quantitative determination. J. Food. Prot. 64(5), p 725-729, DOI;
10.4315/0362-028X-64.5.725.
[084] Gadde, U., Oh, S.T., Lee, Y.S., Davis, E., Zimmerman, N., Rehberger, T., Lillehoj, H.S. (2017). The effects of direct-fed microbial supplementation, as an alternative to antibiotics, on growth performance, intestinal immune status, and epithelial barrier gene expression in broiler chickens. ProbioticsAntimicro. Prot. 9, p 397-405, DOI: 10.1007/s12602-017- 9275-9.
[085] Ghareeb, K., Awad, W.A., Mohnl, M., Porta, R., Biarnés, M., Böhm, J., Schatzmayr, G. (2012). Evaluating the efficacy of an avian- specific probiotic to reduce the colonisation of Campylobacter jejuni in broiler chickens. Poult. Sci. 91(8), p 1825-1832, DOI: 10.3382/ps.2012-02168.
[086] Gri, L., Martella, M. and Navarro, J. (2008). Efficacy of probiotics in intensively reared Greater Thea (Rhea Americana) chicks. Arch.
Geflugelk, 72(3), 136-139.
[087] Gutierrez-Fuentes, C.G., Zuñiga-Orozco, L.A., Vicente, J.L., Hernandez-Velasco, X., Menconi, A., Kuttappan, V.A., Kallapura, G., Latorre, J., Layton, S., Hargis, B.M., Téllez, G. (2013). Effect of a lactic acid bacteria based probiotic, Floramax-B11®, on performance, bone qualities, and morphometric analysis of broiler chickens: An economic analysis. Biol. Syst.
2(3), 113, DOI: 10.4172/2329-6577.1000113.
[088] Huyghebaert, G., Ducatelle, R., Van Immerseel, F. (2011).
An update on alternatives to antimicrobial growth promoters for broilers. Vet. J.
187, p 182-188, DOI: 10.1016/j.tvjl.2010.03.003.
[089] Iji, P. (2008). Intestinal development and nutrient utilisation in the ostrich: a brief review. Australian Journal of Experimental Agriculture, 48, 1280-1283.
[090] Lourenco, M.C., Kuritza, L.N., Westphal, P., Muniz, E., Pickler, L., Santin, E. (2012). Effects of Bacillus subtilis in the dynamics of infiltration of immunological cells in the intestinal mucosa of chickens challenged with Salmonella Minnesota. Int. J. Poult. Sci. 11(10), p 630-634, DOI: 10.3923/ijps.2012.630.634.
[091] Melegy, T., Khaled, N.F., El-Bana, R., Abdellatif, H. (2011).
Effect of dietary supplementation of Bacillus subtilis PB6 (CLOSTAT™) on performance, immunity, gut health and carcass traits in broilers. J. Am. Sci.
7(12), p 891-898.
[092] Müller, H.E. (1984). ABTS peroxidase medium as a highly sensitive plate assay for detection of hydrogen peroxide production in bacteria.
J. Microbiological Methods 2(2), p 101-102, DOI: 10.1016/0167-7012(84)90035-
6.
[093] Onderci, M., Sahin, N., Sahin, K., Cikim, G., Aydín, A., Ozercan, I., Aydín, S. (2006). Efficacy of supplementation of α-amylase- producing bacterial culture on the performance, nutrient use, and gut morphology of broiler chickens fed a corn-based diet. Poult. Sci. 85(3), p 505-
510.
[094] Prado-Rebolledo, O.F., de Jesus Delgado-Machuca, J., Macedo-Barragan, R.J., Garcia-Márquez, L.J., Morales-Barrera, J.E., Latorre, J.D., Hernandez-Velasco, X., Tellez, G. (2017). Evaluation of a selected lactic acid bacteria-based probiotic on Salmonella enterica serovar Enteritidis colonisation and intestinal permeability in broiler chickens. Avian Pathol. 46(1), p 90-94, DOI: 10.1080/03079457.2016.1222808.
[095] Rabe, L.K., Hillier, S.L. (2003). Optimization of media for detection of hydrogen peroxide production by Lactobacillus species. J. Clin. Microbiol. 41(7), p 3260-3264, DOI: 10.1128/JCM.41.7.3260-3264.2003.
[096] Sterzo, E.V., Paiva, J.B., Mesquita, A.L., Freitas Neto,
O.C., Berchieri, S. (2007). Organic acids and/or compound with defined microorganisms to control Salmonella enterica serovar Enteritidis experimental infection in chickens. Rev. Bras. Cienc. Avic. 9(1), p 69-73, DOI:
10.1590/S1516-635X2007000100010.
[097] Stingele, F., Neeser, J.R., Mollet, B. (1996). Identification and characterization of the eps (Exopolysaccharide) gene cluster from Streptococcus thermophilus Sfi6. J. Bacteriol. 178(6), p 1680-1690.
[098] Tang, D.F., Iji, P., Choct, M., Ru, Y.J. (2013). Effect of α- amylase on performance and nutrient utilization of broilers fed diets based on cassava and soybean meal. 24th Annual Australian Poultry Science Symposium, 17-20 February 2013, p 88-91, Sydney, New South Wales, Australia.
[099] Teo, A.Y., Tan, H.M. (2007). Evaluation of the performance and intestinal gut microflora of broilers fed on corn-soy diets supplemented with Bacillus subtilis PB6 (CloSTAT). J. Appl. Poult. Res. 16(3), 296–303, DOI:
10.1093/japr/16.3.296.
[0100] Van Staden, A.D. (2015). In vitro and in vivo characterization of amyloliquecidin, a novel two-component lantibiotic produced by Bacillus amyloliquefaciens. PhD Microbiology, Stellenbosch University, Stellenbosch, South Africa.
Claims (20)
1. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA caracterizada por compreender Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
2. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que é para administração a aves de capoeira.
3. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que é para administração a galinhas.
4. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que é em uma forma para administração administração oral.
5. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que é um aditivo alimentar ou suplemento.
6. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que é para uso na melhoria do sistema imune, da digestão, do crescimento e/ ou da saúde ou para reduzir as taxas de mortalidade de aves de capoeira a qual a composição é administrada.
7. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a cepa Bacillus amyloliquefaciens é a cepa designada como DPN123.
8. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a cepa Enterococcus faecalis é a cepa designada como DPN94.
9. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que a cepa Lactobacillus salivarius é a cepa designada como DPN181.
10. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que a cepa Lactobacillus johnsonii é a cepa designada como DPN184.
11. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que a cepa Lactobacillus gallinarum é a cepa designada como DPN164.
12. COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que a cepa Lactobacillus crispatus é a cepa designada como DPN167.
13. RAÇÃO PARA AVES caracterizada pelo fato de que compreende as seguintes espécies de bactérias: Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
14. MÉTODO PARA AUMENTAR AS RESPOSTAS IMUNES EM AVES DE CAPOEIRA, caracterizada pelo fato de que o método compreende administrar às aves de capoeira uma quantidade eficaz de uma composição probiótica compreendendo as seguintes espécies de bactérias: Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus.
15. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que a composição probiótica é administrada em conjunto com, ou em uma ração para aves.
16. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 14 ou 15, caracterizada pelo fato de que é realizado sem antibióticos sendo administrados às aves de capoeira.
17. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizada pelo fato de que a composição probiótica é administrada a cerca de 107 a cerca de 109 UFC por dia.
18. USO DE UMA COMPOSIÇÃO compreendendo as seguintes espécies de bactérias: Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus caracterizado por ser na fabricação de um profiláctico para prevenir uma infecção em aves de capoeira.
19. USO DE UMA COMPOSIÇÃO compreendendo as seguintes espécies de bactérias: Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus caracterizado por ser na fabricação de um profiláctico para melhorar o sistema imunológico, digestão, crescimento e/ ou saúde de aves de capoeira ou para reduzir as taxas de mortalidade de aves de capoeira.
20. USO DE UMA COMPOSIÇÃO compreendendo as seguintes espécies de bactérias: Bacillus amyloliquefaciens, Enterococcus faecalis, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gallinarum e Lactobacillus crispatus caracterizado por ser na fabricação de um profiláctico para prevenir ou reduzir a presença de bactérias patogênicas na carne de aves de capoeira.
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