BR112018007151B1 - Ração para aves - Google Patents

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Abstract

RAÇÃO PARA AVES. A invenção se refere à ração para aves que compreende capsaicinoides sintéticos para uso profilático ou tratamento de infecção por Salmonella.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO E TÉCNICA ANTERIOR RELACIONADA
[001] A invenção se refere a ração para aves e, em particular, ração para galináceos compreendendo derivados de capsaicinoide sintético e tal ração para uso profilático ou tratamento de infecção por Salmonella em frangos para produção de carne.
[002] A aXichem é uma fornecedora mundial de compostos industriais análogos naturais e sua missão é desenvolver, patentear e comercializar substâncias análogas naturais. A aXichem foca em fenilcapsaicina, análogo da capsaicina natural e derivados deste. Como a fenilcapsaicina é produzida sinteticamente, a substância oferece uma ampla gama de benefícios em comparação à capsaicina natural, que é extraída de pimentas malaguetas e, portanto, possui uma qualidade variante. Os capsaicinoides sintéticos podem ser preparados com pureza elevada e em bons rendimentos e quantidade, e a um custo razoável. Além disso, as quantidades disponíveis de capsaicina de ocorrência natural são limitadas. O extrato de capsaicina natural padronizada contém pelo menos 3 isômeros, os quais todos possuem diferentes propriedades químicas, mas que são difíceis de diferenciar entre si. Portanto, pode ser difícil obter extratos de capsaicina que possuem pureza e composição uniformes suficientemente para o uso pretendido.
[003] Fenilcapsaicina não é prejudicial ao meio ambiente e, assim, é uma alternativa viável com uma ampla gama de aplicações em uma variedade de áreas. A aXichem detém as patentes europeia (EP1670310) e norte-americana (US7446226) sobre seus produtos sintéticos, suas sínteses e uso como um agente antivegetativo (WO2005025314).
[004] A colonização intestinal de bactérias Salmonella em galináceos é uma grande preocupação para a segurança alimentar em humanos. A disseminação de Salmonella em um bando ocorre por meio da excreção de Salmonella nas fezes. Crhanova M, et.al.: Immune response of chicken gut to natural colonization by gut microflora and to Salmonella enterica serovar enteritidis infection. Infect Immun 2011, 79(7):2755-2763.
[005] Em relação à segurança alimentar, o controle da Salmonella durante a produção de produtos animais é uma questão importante. Os galináceos constituem um reservatório de Salmonella e diversas ocorrências de salmonelose estão associadas ao consumo de produtos galináceos. A Salmonella é capaz de se colonizar na plantação e no trato intestinal dos galináceos. A fim de reduzir os problemas decorrentes da Salmonella em relação à segurança alimentar, há um interesse crescente em reduzir a colonização de Salmonella no trato digestivo de galináceos e a disseminação de Salmonella por meio dos excrementos através de modificações da dieta ou por meio de suplementações da água de consumo.
[006] Os galináceos infectados por Salmonella, além do envenenamento alimentar direto, causam contaminação durante o transporte e armazenamento em abatedouros, em restaurantes, cozinhas e supermercados. A descontaminação é muito cara e há um grande benefício se evitada.
[007] A infecção por Salmonella representa um problema grave para a indústria de galináceos mundial. A infecção leva a grandes perdas econômicas para toda a indústria e também causa uma variação de outras consequências negativas.
[008] Atualmente, há três tecnologias diferentes que são usadas para combater a infecção por Salmonella: antibióticos, adição de ácidos orgânicos (principalmente ácido lático) à água de consumo e tratamentos enzimáticos. Uma variedade de problemas está associada a todos estes tratamentos; principalmente o desenvolvimento de resistência ao antibiótico, que é um problema grave, em segundo lugar, descobriu-se que os tratamentos com enzima e ácido possuem efeitos altamente limitados. Também pode-se observar que o tratamento com ácido lático pode causar problemas de corrosão nos sistemas de água de consumo, e também afetam a aceitação dos alimentos pelas aves e a qualidade em geral.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[009] O presente pedido se refere à ração para aves que compreende pelo menos um composto químico com a fórmula geral (I) na reivindicação 1, em que R é um substituinte selecionado dentre o grupo de C1-C18 alquila, trifluorometil, C3-C12 cicloalquila, fenil, fenoxi, feniltio, halógeno; ou tautômeros ou sais deste.
[010] Especificamente, os capsaicinoides sintéticos neste pedido se referem a derivados de alcino, em que o grupo R é conforme o definido na reivindicação 1.
[011] O pedido também se refere à ração para aves conforme definido acima para uso profilático ou terapêutico para resistência a ou tratamento de infecção por Salmonella em aves.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[012] O presente pedido se refere à ração para aves que compreende pelo menos um composto químico com a fórmula geral (I) na reivindicação 1, em que R é um substituinte selecionado dentre o grupo de C1-C18 alquila, trifluorometil, C3-C12 cicloalquila, fenil, fenoxi, feniltio, halógeno; ou tautômeros ou sais deste.
[013] Preferencialmente, a ração para aves, de acordo com a reivindicação 1, compreende fenilcapsaicina.
[014] Preferencialmente, a ração para aves compreende 5 a 40 mg/kg de um composto de fórmula I, ainda mais preferencialmente, 20 mg/kg.
[015] O pedido também se refere a ração para aves, conforme definido acima, para uso profilático ou terapêutico para resistência a ou tratamento de infecção por Salmonella em aves.
[016] As aves são selecionadas dentre o grupo que consiste de galináceos, em particular, frangos para produção de carne; aves para produção de ovos, em particular, galinhas; peru; avestruz; codorna; tetraz; patos; ganso; aves silvestres; aves domésticas e aves procriadoras.
[017] A ração é selecionada dentre um ou mais do grupo que consiste de sementes, milho, minhocas, milheto, aveia, amendoins e na forma de péletes, pasta, água de consumo e emulsões.
[018] A infecção por Salmonella é selecionada dentre o grupo causado por Salmonella mongori; Salmonella hadar; Salmonella montevideo; Salmonella epinay e Salmonella enterica a partir das subespécies enterica, salamae, arizonae, diazonae, houtenase e indica.
[019] Preferencialmente, a infecção por Salmonella é causada por Salmonella enteritidis, em particular, Salmonella enteritidis PT4.
[020] Fenilcapsaicina oferece um tratamento profilático contra a Salmonella e a disseminação de Salmonella em unidades de produção de galináceos. O princípio básico é simples: fenilcapsaicina - após a fórmula 1 - é adicionada em pequenas quantidades, normalmente 5 a 20 ppm, à ração para aves ou à água de consumo das aves. Isto resulta em uma redução de ocorrência de Salmonella no sistema digestivo das aves individuais, e assim também uma disseminação reduzida de infecção entre as aves por meio das fezes.
[021] O mecanismo de ação exato ainda é desconhecido. No entanto, acredita-se que o mecanismo possa ser aquele de que a fenilcapsaicina possui um efeito antibacteriano direto nas aves expostas à invenção e, assim, reduz diretamente o crescimento bacteriano. Este mecanismo atualmente está em investigação.
[022] O outro mecanismo de ação proposto é o de que a fenilcapsaicina contribua para alterar a microbiota das aves de forma favorável. Esta explicação proposta significa que a infecção por Salmonella seja combatida nas aves indiretamente, uma vez que a fenilcapsaicina afeta os processos microbióticos endógenos e, portanto, reduz o número de bactérias de Salmonella no sistema digestivo das aves.
[023] O número reduzido de bactérias de Salmonella no Sistema digestivo naturalmente leva à redução de excreção de bactérias nas fezes, a qual é a via de contaminação primária entre as aves.
[024] Portanto, alimentar as aves de produção com ração enriquecida com fenilcapsaicina combaterá a disseminação de Salmonella nas aves individuais, bem como evitará a infecção entre as aves.
[025] Outro uso de compostos relacionados de capsaicina é como agentes repelentes de roedores (mamíferos) na alimentação externa de aves e demais animais. Os derivados sintéticos produzidos em alta pureza e alta qualidade e a um custo razoável serão superiores aos extratos de pimentas neste uso.
[026] Os capsaicinoides sintéticos são bem adequados a uma variedade de aplicações, inclusive tintas antivegetativas marítimas, controle de pragas na floresta e agricultura e determinadas aplicações farmacêuticas. A fenilcapsaicina também demonstrou possíveis propriedades como antimicrobiano e promotor de crescimento na ração para a produção comercial de galináceos.
FIGURAS
[027] Figura 1- Número de classificação de valores UFC/g do controle (pontos azuis) e do tratamento com 20 mg/kg de fenilcapsaicina (pontos vermelhos) (eixo x) representados contra as contagens de UFC/g (eixo y) no dia 20 (a) e no dia 29 (b).
EXPERIMENTO
[028] Foi conduzido um experimento no qual o efeito de fenilcapsaicina, suplementado em diferentes níveis de dose para ração para frangos destinados à produção de carne, em oposição à colonização e translocação de Salmonella. Além do efeito contra a infecção por Salmonella, foi estudado o efeito de fenilcapsaicina sobre o desempenho de crescimento.
[029] O estudo visou avaliar os efeitos da inclusão alimentar em diferentes níveis de dose de fenilcapsaicina, análogo de capsaicina natural (1% de solução e óleo de soja) sobre a colonização intestinal e translocação de Salmonella enteritidis e desempenho de crescimento de frangos destinados a produção de carne desafiados com Salmonella. O experimento foi realizado com 308 frangos destinados à produção de carne 420 Ross e durou 30 dias. As aves foram alojadas em trinta gaiolas em bateria de três camadas (14 aves por gaiola no início).
[030] Cinco tratamentos experimentais foram avaliados, cada um replicado seis vezes. O desenho do experimento está destacado na Tabela 1. O Tratamento I consistiu de aves que não foram desafiadas com Salmonella enteritidis e receberam a dieta controle. As aves dos tratamentos II, III, IV e V foram todas desafiadas com Salmonella enteritidis PT4 e receberam uma dieta controle ou a dieta controle com 20 mg/kg, 28 mg/kg ou 36 mg/kg de fenilcapsaicina, respectivamente. A dieta controle usada é encontrada na Tabela 2.TABELA 1 . DESENHO DO EXPERIMENTO - FRANGOS DESTINADOS À PRODUÇÃO DE CARNE DESAFIADOS COM SALMONELLA
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Figure img0002
TABELA 2. DIETA CONTROLE USADA - FRANGOS DESTINADOS À PRODUÇÃO DE CARNE DESAFIADOS COM SALMONELLA
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[031] Os frangos destinados à produção de carne foram inoculados na cultura nos dias 15 e 16 de idade com média de 3,7 x 108 UFC de Salmonella enteritidis PT4 resistente a ácido nalidíxico. Com base na necropsia de cinco aves por gaiola nos dias 20 e 29 de idade, as contagens de Salmonella enteritidis nos líquidos cecais (colonização intestinal) e do baço (translocação) foram determinadas. O desempenho de crescimento das aves (ganho de peso corporal, ingestão alimentar e taxa de conversão alimentar) foi determinado em 15 e 30 dias de idade.
MEDIÇÕES PRODUTO TESTE
[032] O óleo de soja com 1% de solução de fenilcapsaicina foi analisado quanto à dose de fenilcapsaicina.
DIETAS EXPERIMENTAIS
[033] As amostras de cada dieta experimental (4 dietas iniciadoras e 4 cultivadoras) foram analisadas no nível de inclusão de fenilcapsaicina.
[034] As amostras de cada dieta experimental (4 dietas iniciadoras e 4 cultivadoras) foram analisadas quanto à matéria seca, cinzas, proteína bruta, gordura bruta (HCL), fibra bruta, cálcio e fósforo.
EXCREMENTOS
[035] Aos 13 dias de idade (antes da inoculação), os excrementos foram amostrados e agrupados por gaiola para determinar a situação inicial da Salmonella enteritidis. Os excrementos por gaiola foram coletados ao longo de um período de 2h em papel limpo sob cada gaiola.
AMOSTRAGEM DE LÍQUIDOS CECAIS E DO BAÇO
[036] A concentração de Salmonella enteritidis nos líquidos cecais e do baço foi medida para determinar a colonização intestinal e translocação, respectivamente, ao sacrificar aleatoriamente cinco aves por gaiola aos 20/21 e 29/30 dias de idade. Para esta finalidade, as aves foram submetidas à eutanásia. Durante a inoculação no dia 15/16, em cada gaiola, cinco aves foram marcadas de forma aleatória com um identificador de asa verde e cinco aves escolhidas de forma aleatória foram marcadas com um identificador de asa azul. Aos 20/21 dias, as aves com o identificador de asa verde foram sacrificadas e aos 29/30 dias de idade, as aves com identificador de asa azul foram submetidas à eutanásia. As aves foram primeiro anestesiadas com uma mistura de Sedamun e Cetamina (5:3) por meio de injeção no músculo peitoral (dosagem: 1 mL/kg de peso corporal) e, subsequentemente, submetidas à eutanásia por uma injeção intravenosa de T61 (uma solução aquosa que contém (em mg por mL) embutramida, 200; iodeto de mebezônio, 50; cloridrato de tetracaína, 5). Após a eutanásia, as aves foram pesadas e, consequentemente, os líquidos cecais e do baço foram coletados. Após a coleta, as amostras foram imediatamente resfriadas a 2 a 8 oC antes das análises quanto à Salmonella enteritidis PT4 resistente a ácido nalidíxico.
[037] A concentração de Salmonella enteritidis PT4 nos líquidos cecais e do baço foi determinada após diluições decimais das amostras em uma solução de peptona tamponada. As amostras diluídas foram inoculadas em lâminas Ágar Verde Brilhante contendo 100 μg/L de ácido nalidíxico. As lâminas foram incubadas durante 24h a 37 °C. As colônias típicas de Salmonella enteritidis PT4 foram contabilizadas e a concentração de Salmonella enteritidis PT4 (UFC/g) nas amostras originais foi calculada de acordo com os procedimentos padrão.
DESEMPENHO DE CRESCIMENTO
[038] Todos os frangos destinados à produção de carne foram pesados por gaiola aos 0, 15 e 30 dias de idade para determinar o peso corporal (BW).
[039] A ingestão alimentar (FI) foi registrada por gaiola no dia 15 e 24 de idade.
[040] A mortalidade por gaiola foi registrada diariamente.
[041] O peso corporal, ganho de peso corporal (BWG), ingestão alimentar, taxa de conversão alimentar (FCR) e mortalidade foram calculados ao longo dos seguintes períodos: 0 a 15 dias, 15 a 30 dias e todo o período experimental (0 a 30 dias de idade).
OBSERVAÇÕES DA SAÚDE DO ANIMAL
[042] A saúde das aves foi verificada diariamente e as anomalias foram registradas, bem como provável causa de morte para as aves mortas ou abatidas. A temperatura e umidade no ambiente do animal foram registradas.
ANÁLISES ESTATÍSTICAS DESEMPENHO DE CRESCIMENTO E PESO DO BAÇO
[043] As análises estatísticas sobre os dados do desempenho de crescimento e peso do baço foram realizadas nos tratamentos “desafiados para Salmonella” (tratamentos II a V). Os parâmetros de resposta foram analisados estatisticamente por ANOVA usando o software estatístico GenStat (17a edição, VSN International Ltd., Hemel Hempstead, Reino Unido), usando linha/camada como fator de bloco e a dieta como a variável explicativa de acordo com o modelo estatístico fornecido abaixo:
[044] Y = μ + linhai/camadaj + dietak + eijkl
[045] Onde:
[046] Y = Parâmetro de resposta
[047] μ = Média geral
[048] linha/camada = linha de gaiolas em bateria (i=1,2) como bloco e dentro da linha camada (j=1,2,3) como sub-bloco
[049] dieta = Efeito da dieta (k=1 ...4)
[050] e = Termo de erro
[051] O valor P do efeito de tratamento e a LSD (diferença menos significativa (P=0,05)) foram providas por parâmetro de resposta. Os efeitos do tratamento com um valor P <0,05 foram considerados estatisticamente significativos.
CONTAGENS DE SALMONELLA ENTERITIDIS PT4
[052] Para examinar as diferenças em números (UFC/g) de Salmonella nos líquidos cecais dos frangos alimentados com dieta contendo 20, 28 ou 36 mg/kg de fenilcapsaicina e comparação a um grupo controle em uma dieta sem fenilcapsaicina. Primeiro foi realizado um teste de qui- quadrado de Pearson nos valores de concentração classificados (baixo a elevado) entre o grupo controle e de tratamento alimentado com 20 mg/kg. Devido aos valores ausentes, esta análise não pôde ser realizada nos tratamentos com 28 e 36 mg/kg. Como os frangos destinados à produção de carne foram mantidos em gaiolas diferentes, as gaiolas foram primeiro tratadas como fatores de efeito aleatório usando um modelo de efeitos misto linear generalizado (GLMM), aplicando a função glmmPQL a partir da biblioteca MASS de R, assumindo a distribuição de Poisson devido aos dados da contagem. Em segundo lugar, os dados foram analisados excluindo-se o efeito de gaiolas por um modelo linear generalizado aplicando a função glm a partir da biblioteca MASS de R, assumindo novamente a distribuição de Poisson. As análises foram realizadas nos dados de ambos os dias de amostra (dia 20 e dia 29; no geral), e nos dados do dia 20 e 29, separadamente. No dia 20, o valor controle mais elevado (1,3 x 107 UFC/g) e os dois valores mais elevados no grupo de tratamento com 28 mg/kg (1,3 x 107 e 1,2 x 107 UFC/g) são consideravelmente mais elevados que o próximo valor mais elevado (1,1 x 106 e 4,0 x 106 UFC/g) para os grupos controle e de tratamento com 28 mg/kg, respectivamente, e foram, portanto, considerados atípicos. As análises foram então realizadas nos dados restantes após a exclusão destes pontos de dados.
RESULTADOS
[053] O peso do baço nos frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella aos 20 e 29 dias de idade foi numericamente mais elevado que o peso do baço nos frangos destinados à produção de carne sem inoculação com Salmonella, o que implica uma infecção por Salmonella bem- sucedida. A suplementação alimentar de fenilcapsaicina em 20, 28 e 36 mg/kg não afetou o peso do baço aos 20 e 29 dias de idade dos frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella.
[054] Os frangos destinados à produção de carne alimentados com dietas contendo 20 mg/kg de fenilcapsaicina apresentaram numericamente contagens de Salmonella menores que os frangos controles em uma dieta sem fenilcapsaicina (valores P de 0,15 para ambos os dias (20 e 29 dias de idade) e 0,13 para o dia 29). Os resultados estão resumidos na Tabela 3. As diferenças nos números classificados como altamente significativos entre o grupo controle e de tratamento com 20 mg/kg, com o grupo de 20 mg/kg tendo de forma consistente contagens de Salmonella menores que o grupo controle no dia 20 e no dia 29. Os resultados são encontrados na Tabela 4 e na Figura 1. A colonização cecal de Salmonella enteritidis PT4 não foi afetada pela inclusão alimentar de 28 e 36 mg/kg de fenilcapsaicina. Estes resultados implicam que mais provavelmente a dose eficaz esteja na faixa de até 20 mg/kg de fenilcapsaicina, em vez de níveis de dose de fenilcapsaicina acima de 20 mg/kg.TABELA 3
[055] Estatísticas resumidas a partir do modelo misto linear generalizado (onde a gaiola foi tratada como fator de efeito aleatório usando um modelo de efeitos mistos lineares generalizados (GLMM), que aplica a função glmmPQL a partir da biblioteca MASS de R) e o modelo linear generalizado (sem o controle para o efeito aleatório de gaiola, que aplica a função glm a partir da biblioteca MASS de R) usado para examinar as diferenças nas contagens de UFC/g entre os frangos alimentados com uma dieta contendo 20 mg/kg de fenilcapsaicina e frangos alimentados com dietas controle sem fenilcapsaicina. Os valores atípicos são definidos como valores > 1,0 x 107 UFC/g.
Figure img0005
TABELA 4
[056] Estatísticas resumidas a partir do teste de qui-quadrado de Pearson que testa as diferenças nos números classificados de contagens de Salmonella nos líquidos cecais
Figure img0006
[057] Nas aves desafiadas com Salmonella, o peso corporal (BW) e o ganho de peso corporal (BWG) dos frangos destinados à produção de carne alimentados com dietas com 36 mg/kg de fenilcapsaicina foram significativamente menores que o peso corporal e o ganho de peso corporal de frangos destinados à produção de carne alimentados com dietas com 0, 20 ou 28 mg/kg de fenilcapsaicina. O ganho de peso corporal menor de frangos destinados à produção de carne alimentados com dietas com 36 mg/kg resultou em uma taxa de conversão alimentar mais elevada em comparação aos demais tratamentos com frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella. A inclusão alimentar de fenilcapsaicina não apresentou efeito na ingestão alimentar diária de frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella.
[058] Na fase cultivadora (15 a 30 dias), após o desafio com Salmonella, a inclusão alimentar de fenilcapsaicina em 20, 28 e 36 mg/kg não afetou a ingestão alimentar e a taxa de conversão alimentar de frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella. Observou-se uma tendência para um ganho de peso corporal menor ao aumentar o nível de dose de fenilcapsaicina (P=0,099). Os frangos destinados à produção de carne que receberam as dietas com dose mais elevada de fenilcapsaicina (36 mg/kg) apresentaram numericamente o ganho de peso corporal mais baixo e a taxa de conversão alimentar mais elevada.
[059] O peso corporal (BW) e o ganho de peso corporal (BWG) nos frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella alimentados com dietas com 36 mg/kg de fenilcapsaicina foram significativamente menores que o peso corporal e o ganho de peso corporal em frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella alimentados com dietas com 0, 20 ou 28 mg/kg de fenilcapsaicina. A inclusão alimentar de fenilcapsaicina não apresentou efeito na ingestão alimentar diária e na taxa de conversão alimentar de frangos destinados à produção de carne inoculados com Salmonella.
CONCLUSÃO
[060] A inclusão alimentar de 20 mg/kg de fenilcapsaicina resultou em diferenças estatisticamente significativas nas contagens cecais de Salmonella enteritidis PT4 classificadas individualmente em comparação ao tratamento controle. Este resultado pode ser um indicador de um efeito de redução de Salmonella da inclusão de 20 mg/kg de fenilcapsaicina nas dietas de frangos destinados à produção de carne.

Claims (6)

1. RAÇÃO PARA AVES, caracterizada por compreender pelo menos um composto químico com a fórmula geral (I)
Figure img0007
em que R é um substituinte selecionado dentre o grupo de C1-C18 alquila, trifluorometil, C3-C12 cicloalquila, fenil, fenoxi, feniltio, halógeno; ou tautômeros ou sais destes.
2. RAÇÃO PARA AVES, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R ser fenil.
3. RAÇÃO PARA AVES, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada por compreender 5 a 40 mg/kg de um composto da fórmula I.
4. RAÇÃO PARA AVES, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada por compreender 20 mg/kg de um composto da fórmula I.
5. RAÇÃO PARA AVES, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelas aves serem selecionadas dentre o grupo que consiste galináceo, em particular frangos de carne; aves produtoras de ovos, em particular galinhas; peru; avestruz; codorna; perdiz; patos; gansos; aves silvestres; aves domesticadas e aves procriadoras.
6. RAÇÃO PARA AVES, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pela ração ser selecionada de um ou mais do grupo que consiste de sementes, milho, minhocas, milheto, aveia, amendoins e na forma de péletes, polpa, água de consumo e emulsões.
BR112018007151-0A 2015-10-09 2015-10-09 Ração para aves BR112018007151B1 (pt)

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