BR112016006934B1 - uso de uma composição de éster de glicerol para prevenção e/ou alívio de enterite necrótica no trato gástrico de aves do clado galloanserae - Google Patents
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Abstract
USO DE UMA COMPOSIÇÃO DE ESTER DE GLICEROL PARA PREVENÇÃO E/OU ALÍVIO DE ENTERITE NECRÓTICA NO TRATO GÁSTRICO DE AVES DO GLACO GALLOANSELRAE. A presente invenção refere-se ao uso de uma composição de éster de glice-rol de ao menos um ácido graxo de cadeia curta para prevenir e/ou aliviar a enterite necrótica no trato gástrico de aves do ciado Galloanserae. A composição de éster de glicerol compreende ao menos 75% em peso de tributirato de glicerila, menos de 25% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 8% em peso de monobutirato de glicerila. A presente invenção também se refere ao uso da referida composição para modular a flora intestinal de aves do ciado Galloanserae.
Description
[001]A presente invenção refere-se ao uso de uma composição de éster de glicerol de ao menos um ácido graxo de cadeia curta para prevenir e/ou aliviar a enterite necrótica no trato gástrico de aves do ciado Galloanserae. A composição de éster de glicerol compreende ao menos 75% em peso de tributirato de glicerila, menos de 25% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 8% em peso de monobuti- rato de glicerila. A presente invenção também se refere ao uso da referida composição para modular a flora intestinal de aves do ciado Galloanserae.
[002]A enterite necrótica é uma infecção aguda que afeta aves do ciado Galloanserae. O ciado Galloanserae é dividido nos subgrupos Galliformes (aves ter-restres) como galinha, peru, lagópode e faisão e Anseriformes (aves aquáticas) como pato, ganso e cisne. A enterite necrótica tem se tornado um problema crescente, especialmente entre as aves domésticas, e é caracterizada por necroses graves da mucosa intestinal. Sua evolução clínica é normalmente muito curta e muitas vezes os únicos sinais da doença são um aumento súbito na mortalidade. No entanto, aves com depressão, penas eriçadas e diarreia podem também ser vistas. As lesões ma-croscópicas são encontradas primariamente no intestino delgado (jejuno), que podem ser balonadas, friáveis e conter um líquido marrom de odor desagradável.
[003]O agente causador é a bactéria gram-positiva, anaeróbica em forma de bastonete Clostridium perfringens. Há dois tipos primários de C. perfringens, A e C, associados com a enterite necrótica em aves do ciado Galloanserae. As toxinas pro-duzidas pelas bactérias não só causam danos ao intestino delgado, mas também provocam lesões no fígado e mortalidade.
[004]0 C perfringensé uma bactéria quase que onipresente e encontrado facilmente no solo, poeira, fezes, rações e em camas usadas de aviários. É também um habitante normal dos intestinos de aves do ciado Galloanserae. O desenvolvimento da enterite necrótica depende da presença de fatores predisponentes, tais como dano na mucosa causado por patógenos coccídeos e rações contendo níveis elevados de proteínas.
[005] Em vista da presença quase que generalizada do C. perfringens, é im-portante prevenir a coccidiose, bem como mudanças na microflora intestinal que promoveriam o seu crescimento. Anteriormente, atingia-se a esse objetivo pela adição rotineira de antibióticos à ração. Contudo, desde o banimento de antibióticos promotores do crescimento na União Europeia em 2006, a enterite necrótica tem se tornado uma doença crescente entre, por exemplo, as aves domésticas. Há uma grande necessidade de métodos alternativos para neutralizar essa doença ou dis-função.
[006]Uma alternativa à neutralização de bactérias nocivas, como C. perfrin-gens, por meio de antibióticos é tentar equilibrar ou normalizar a flora intestinal. A flora intestinal consiste em um complexo formado por espécies de microrganismos que vivem no trato digestivo. Neste contexto, intestino é sinônimo de intestinal e flora de microbiotae microflora.Os microrganismos realizam funções úteis no hospedeiro, tais como fermentar substratos energéticos não utilizados, servir de treinamento para o sistema imune, impedir o crescimento de bactérias nocivas, patogênicas, regular o desenvolvimento do intestino, produzir vitaminas para o hospedeiro e produzir hor-mônios que direcionem o hospedeiro para o armazenamento de gorduras. No entanto, em certas condições, acredita-se que algumas espécies sejam capazes de provocar doenças ou disfunção pela infecção produzida ou ao aumentarem o risco de câncer do hospedeiro.
[007]A presente invenção descreve o uso de uma composição de éster de glicerol para prevenir e/ou aliviar a enterite necrótica no trato intestinal de aves do ciado Galloanserae, como galinhas e perus. O uso da referida composição para modular a flora intestinal de aves do ciado Galloanserae é também descrito. O uso da composição de acordo com a invenção equilibra ou normaliza a flora intestinal de aves do ciado Galloanserae de tal maneira que o crescimento de espécies patogênicas seja inibido e que doenças como a enterite necrótica sejam evitadas. Atualmente, acredita-se que um mecanismo atrás desse efeito seja o crescimento favorecido de bactérias úteis e que isso impede o crescimento de espécies patogênicas em vista da competição por locais de nutrição e fixação ao epitélio do cólon.
[008]Os efeitos positivos do ácido butírico sobre a saúde intestinal em aves domésticas e outros animais são conhecidos há muito tempo. Formas diferentes de distribuição do ácido butírico foram também exploradas, entre estas, distribuir ácido butírico na forma de ésteres de glicerol. Nos últimos anos, bastante interesse foi di-recionado ao uso de monobutirato de glicerila como aditivo de rações para promover a saúde intestinal de animais.
[009]O uso de uma composição de éster de glicerol, compreendendo princi-palmente tributirato de glicerila, demonstrou surpreendentemente agora ser uma maneira mais eficiente para prevenir a enterite necrótica em aves do ciado Galloan-serae, tais como frango de corte, quando comparada a fornecer ácido butírico aos animais na forma de monobutirato de glicerila.
[010]A presente invenção refere-se ao uso de uma composição de éster de glicerol, compreendendo um ácido graxo de cadeia curta, que comprovou ser uma maneira eficiente para prevenir a enterite necrótica em aves do ciado Galloanserae, tais como frango de corte. A composição de éster de glicerol compreende ao menos 75% em peso de tributirato de glicerila, menos de 25% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 8% em peso de monobutirato de glicerila. O ácido butírico é co- hecido por ter um efeito positivo sobre a saúde intestinal em aves do ciado Gallo- anserae. k presente invenção mostra que distribuir o ácido butírico principalmente como tributirato de glicerila é uma maneira eficiente de prevenir a entente necrótica em aves do ciado Galloanserae, tais como frango de corte, e demonstrou ser mais eficiente do que distribuir ácido butírico principalmente na forma de monobutirato de glicerila.
[011]De acordo com uma modalidade da presente invenção, a composição de éster de glicerol compreende ao menos 80% em peso de tributirato de glicerila, menos de 20% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 5% em peso de monobutirato de glicerila.
[012]De acordo com uma modalidade preferida da presente invenção, a composição de éster de glicerol compreende ao menos 85% em peso de tributirato de glicerila, menos de 15% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 4% em peso de monobutirato de glicerila.
[013]De acordo com uma modalidade mais preferida da presente invenção, a composição de éster de glicerol compreende ao menos 90% em peso de tributirato de glicerila, menos de 10% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 2,5% em peso de monobutirato de glicerila.
[014]Ácido butírico livre pode ter um cheiro muito desagradável, o que causa problemas durante o manuseio. Esses problemas podem ser evitados distribuindo o ácido butírico na forma de ésteres de glicerol. De acordo com uma modalidade da presente invenção, a quantidade de ácido butírico livre na composição de éster de glicerol é abaixo de 1%, de preferência abaixo de 0,5% e mais preferivelmente abaixo de 0,2% em peso. A quantidade mantida baixa de ácido butírico livre também assegura que o pH na composição de éster de glicerol seja mantido a um nível em que o éster de glicerol não venha a sofrer hidrólise em glicerol e ácido livre, consequentemente, o produto é mantido estável.
[015]De acordo com uma modalidade da presente invenção, a composição de éster de glicerol é adsorvida em um veículo inerte, tal um veículo de sílica, assim permitindo que composição seja distribuída como um produto seco. Tal veículo de sílica compreende de preferência partículas porosas de sílica com tamanho médio de partículas de 20-70 pm. De acordo com uma modalidade da presente invenção, a composição de éster de glicerol é adsorvida em partículas de sílica em razão mássi- ca de 50-80% de éster de glicerol e 20-50% de partículas de sílica.
[016]A composição de éster de glicerol de acordo com a presente invenção pode ser adicionada a quaisquer rações disponíveis comercialmente para aves do ciado Galloanserae. A composição de éster de glicerol pode ser incorporada direta-mente em rações disponíveis comercialmente ou como suplemento alimentar a rações disponíveis comercialmente.
[017]De acordo com uma modalidade da presente invenção, a quantidade de composição de éster de glicerol alimentada a aves do ciado Galloanserae é de 0,05 a 1,5% em peso, de preferência de 0,1 a 1,0% em peso da ração diária para alimentação de aves do ciado Galloanserae.
[018]De acordo com outra modalidade da presente invenção, a quantidade da referida composição de éster de glicerol é administrada em intervalos de tempo de 5-10 dias e é diminuída durante um período de 1-5 semanas.
[019]De acordo com ainda outra modalidade da presente invenção, a dimi-nuição da referida quantidade representa 20-50% da quantidade fornecida durante o período anterior. EXEMPLO DE MODALIDADE Estudo in vivo sobre a eficácia de butiratos de glicerila para controlar a enterite necrótica induzida por Clostridium perfringens em frangos de corte Cepas bacterianas e vacinas
[020]A cepa utilizada no desafio para os estudos in vivo, cepa 56 de C. per- fringens, foi isolada do intestino de um frango de corte com lesões necróticas de um lote com problemas de ganho do peso e demonstrado ser altamente virulenta em estudos in vivo anteriores. A cepa foi classificada como do tipo A (netB positiva, be- ta-2 e enterotoxina negativa) e produz quantidades moderadas de alfa toxina in vitro (Gholamiandehkordi et ai., 2006).
[021]Para a inoculação, a cepa foi cultivada por 24 horas em caldo de infusão cérebro-coração (BHI, Oxoid, Basingstoke, Inglaterra).
[022]Uma dose dez vezes superior da vacina Paracox® - 8 contra a coccidi- ose de aves (Schering-Plough Animal Health, Bruxelas, Bélgica), contendo oócitos vivos atenuados de Eimeria (E.) acervulina (duas linhagens), E. brunetti, E. maxima, E. necatrix, E. praecox, E. mitis e E. tenella foi utilizada nesse estudo.
[023]A vacina Nobilis Gumboro D 78 (Schering-Plough Animal Health, Bruxe-las, Bélgica) foi fornecida na água para consumo. Animais e alojamento
[024]Neste experimento, utilizou-se 114 frangos de corte de ambos os sexos. Os animais foram obtidos com 1 dia de vida de um centro de incubação comercial. Antes do estudo, todas as salas foram descontaminados com Metatectyl® (Clim’oMedic) e com um desinfetante comercial contra a coccidiose (Bi-OO-cyst®; Biolink Ltd, York, Reino Unido). As aves foram divididas em 4 gaiolas de 1,5 m2, sobre raspas de madeira, e receberam água e ração à vontade. Aplicou-se um programa de 23 horas de luz/1 hora de escuro.
[025]Nos primeiros 7 dias, os frangos foram alimentados com uma dieta inicial e, do Dia 8 ao Dia 15, com uma dieta de crescimento, as duas dietas, inicial e de crescimento, eram uma dieta à base de trigo/centeio (43%/7,5%), com farinha de soja como a fonte de proteínas. Do Dia 17 em diante, foi utilizada a mesma dieta com a exceção de farinha de peixe (30%) como uma fonte proteica. A ração foi for- HAG necida pelo Institute for Agricultural and Fisheries Research (ILVO). Os produtos tes-tados foram misturados na ração. A vacina contra a doença de Gumboro foi fornecida na água de consumo no Dia 16 para todos os grupos. Todos os grupos foram expostos uma vez ao dia por via oral ao desafio com aproximadamente 4,108 cfu da cepa 56 de C. perfringens nos Dias 17, 18, 19 e 20. No Dia 18, todas as aves foram inoculadas por via oral com uma dose dez vezes superior de Paracox-8™. Nos Dias 21, 22 e 23, 9 animais de cada grupo foram sacrificados por injeção intravenosa de pentobarbital sódico. Modelo Tabela 1. Cronograma para o estudo in vivo Produtos testados
[026]* Baia 1: controle positivo
[027]* Baia 2: monobutirato de glicerila (adsorvido em veículo de sílica), adi-cionado à ração a uma concentração mais baixa
[028]* Baia 3: monobutirato de glicerila (adsorvido em veículo de sílica), adi-cionado à ração a uma concentração mais alta
[029]» Baia 4: tributirato de glicerila (adsorvido em veículo de sílica)
[030]Os produtos foram adicionados à ração nas concentrações mostradas na Tabela 2 abaixo:
Tabela 2. Concentrações de produtos adicionados à ração (kg/ton.)
[031]As lesões intestinais no intestino delgado (duodeno ao íleo) foram pon-tuadas de modo cego como segue: 0: ausência de lesões macroscópicas 1: congestão da mucosa intestinal 2: pequena necrose ou ulceração focal (1-5 focos) 3: necrose ou ulceração focal (5-16 focos) 4: necrose ou ulceração focal (16 focos ou mais) 5: placas de necrose com 2-3 cm de comprimento 6: necrose difusa típica de casos em campo
[032]As lesões com pontuação igual ou superior a 2 foram classificadas como positivas para enterite necrótica. Análise estatística
[033]O programa GraphPad Prism Software, Inc foi utilizado para determinar se havia diferenças significantes entre os grupos. A significância estatística foi de-terminada a um valor P <0,05.
[034]Não houve observações clínicas anormais. 3 frangos morreram durante o estudo.
[035]-1 frango morreu na baia 1;
[036]- 2 frangos morreram na baia 3.
[037]A Tabela 3 mostra o número de aves com lesões de enterite necrótica para cada grupo, no Dia 21, Dia 22 e no Dia 23. Além disso, o número total de aves com lesões por grupo é também mostrado.
[038]Tabela 3. Número de aves com lesões macroscópicas de enterite ne- crótica nos três dias de amostragem
[039]A porcentagem de frangos positivos (com pontuação de lesões macros cópicas = 2) é mostrada na Figura 1. Figura 1: Porcentagem de frangos positivos (com pontuação de lesões ma-croscópicas £2).
[040]Os resultados na Figura 1 afirmam que adicionar tributirato de glicerila à ração fornece um resultado significativamente melhor, no que diz respeito a prevenir a enterite necrótica induzida por Clostridium perfringens em frangos de corte, do que adicionar monobutirato de glicerila em qualquer uma das duas concentrações testa-das.
[041]Se a adição de monobutirato de glicerila na concentração mais alta é comparada à adição de tributirato de glicerila, o peso de ácido butírico adicionado é aproximadamente o mesmo (partindo do pressuposto que glicerol e ácido butírico possuem aproximadamente a mesma massa molar). Apesar desse fato, o tributirato de glicerila fornece um resultado muito melhor (24% de frangos positivos no total para tributirato de glicerila, em comparação a 46% de frangos positivos no total para monobutirato de glicerila na concentração mais alta).
[042]É também notável que adicionar monobutirato de glicerila a uma con-centração mais baixa fornece um resultado melhor do que adicioná-lo a uma concentração mais alta (36% de frangos positivos no total para monobutirato de glicerila na concentração mais baixa em comparação a 46% de frangos positivos no total para monobutirato de glicerila na concentração mais alta).
[043]Os resultados mostram que utilizar uma composição de éster de glicerol de acordo com a presente invenção é uma maneira eficaz para prevenir a enterite necrótica induzida por Clostridium perfríngens em aves do ciado Galloanserae.
[044]O exemplo de modalidade deverá ser interpretado como ilustrativo e não limitante de maneira alguma. A composição de éster de glicerol pode, por exemplo, compreender uma mistura de ésteres de glicerol de diferentes ácidos gra- xos de cadeia curta, tais como ácido butírico, ácido propiônico e ácido valérico. Os níveis de dose deverão então ser calculados com respeito à quantidade total de ésteres de glicerol.
[045]Além do mais, pode-se provar útil alimentar a composição de éster de glicerol ao animal por um período mais curto ou mais longo de tempo e extrapolar os níveis de dose de acordo.
Claims (15)
1. Uso de pelo menos 75% em peso de tributirato de glicerila, menos de 25% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 8% em peso de monobutirato de glicerila, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a preparação de uma composição de éster de glicerol para prevenção e/ou alívio de enterite necrótica no trato gástrico de aves do ciado Galloanserae.
2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida enterite necrótica é causada por Clostridium perfringens.
3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que as referidas aves do ciado Galloanserae são Galliformes, tais como galinha, peru, lagópode ou faisão.
4. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que as referidas aves do ciado Galloanserae são Anseriformes, tais como patos, ganso ou cisne.
5. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol com-preende pelo menos 80% em peso de tributirato de glicerila, menos de 20% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 5% em peso de monobutirato de glicerila.
6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol com-preende pelo menos 85% em peso de tributirato de glicerila, menos de 15% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 4% em peso de monobutirato de glicerila.
7. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol com-preende pelo menos 90% em peso de tributirato de glicerila, menos de 10% em peso de dibutirato de glicerila e menos de 2,5% em peso de monobutirato de glicerila.
8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que a quantidade de ácido butírico livre na referida composição de éster de glicerol é abaixo de 1% em peso, preferencial mente abaixo de 0,5% em peso, e mais preferencialmente abaixo de 0,2% em peso.
9. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol é adsorvida em um veículo, tal como um veículo de sílica, permitindo assim que a refe-rida composição de éster de glicerol seja distribuída como um produto seco.
10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido veículo compreende partículas porosas de sílica com um tamanho médio de partícula de 20 a 70 pm.
11. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol é adsorvida em partículas de sílica em uma razão em peso de 50 a 80% de éster de glicerol e 20 a 50% de partículas de sílica.
12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol é alimentada às referidas aves do ciado Galloanserae em uma quantidade entre 0,05 e 1,5% em peso da razão diária para alimentação de aves do ciado Galloanserae.
13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida composição de éster de glicerol é alimentada às referidas aves do ciado Galloanserae em uma quantidade entre 0,1 e 1,0% em peso da razão diária para alimentação de aves do ciado Galloanserae.
14. Uso, de acordo com a reivindicação 12 ou 13, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida quantidade da referida composição de éster de glicerol é for-mulada para ser administrada em intervalos de tempo de 5 a 10 dias e em que a re-ferida quantidade é diminuída durante um período de 1 a 5 semanas.
15. Uso, de acordo com a reivindicação 14, CARACTERIZADO pelo fato de que a diminuição da referida quantidade representa 20 a 50% da quantidade forne-cida durante o intervalo anterior.
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