BR112015011379B1 - Composição de gel aquoso, uso da mesma, e formulação farmacêutica - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÃO DE GEL AQUOSO, USO DA REFERIDA COMPOSIÇÃO E FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA. A presente invenção fornece métodos de regulação de parâmetros fisiológicos e metabólicos e de tratamento de doenças através da administração de Metadichol ® para um assunto que esteja em necessidade de regulação e/ou tratamento.

Description

[0001] Este pedido reivindica prioridade para o Pedido de Patente dos Estados Unidos N° 61/794.490, depositado em 15 de março de 2013, cujo conteúdo é incorporado por referência, em sua totalidade e para todos os efeitos.

CAMPO DA INVENÇÃO

[0002] A presente invenção se refere a uma nova formulação de Metadichol ®, um Nanoparticulado em formulação oral líquida e em em gel Nano polimérico. A formulação de Metadichol® (descrita previamente no Pedido de Patente dos EUA (12/691.706)) se comporta como um agonista inverso contra o receptor de vitamina D (VDR). Este pedido se refere aos métodos de tratamento e prevenção de doenças e estende os efeitos terapêuticos além daqueles que são observados com 1,25-dihidroxi- vitamina D3 (Calcitriol), a forma ativa de vitamina D no corpo humano.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[0003] A Vitamina D, adquirida de fontes alimentares ou através de irradiação ultravioleta do 7-dehidrocolesterol na epiderme, é metabolizada em sua forma hormonal. Os queratinócitos da pele são únicos, pois além de ser a principal fonte de vitamina D para o corpo, possuem também a maquinaria enzimática para metabolizar a vitamina D em metabólitos ativos. Muitas funções da pele são regulamentadas pela vitamina D e/ou seu receptor: Estes incluem a inibição da proliferação, estimulação da diferenciação, incluindo a formação da barreira de permeabilidade, promoção da imunidade inata, regulação do ciclo do folículo piloso e supressão de tumores.

[0004] Quando expostos à radiação ultravioleta, as células da epiderme convertem esteroide relacionado ao colesterol em vitamina D, ou colecalciferol. A vitamina D é essencial para um bom desenvolvimento dos ossos. A radiação ultravioleta necessária para a síntese de vitamina D (especificamente, UV-B) somente atinge a superfície da Terra em muita abundância por algumas horas por dia, quando o sol está alto. Muito menos desta atinge a superfície da terra em latitudes mais altas do que em baixas latitudes, e muito pouco atinge a superfície da terra em dias nublados ou durante o inverno. Mesmo assim, a pessoa de pele clara mediana pode produzir e armazenar a quantidade relativa à vários dias de vitamina D com apenas de uma hora de exposição ao sol do meio-dia. Pessoas de pele escura, e que vivem em altas latitudes, são muito mais propensas a sofrer de deficiência de vitamina D do que as pessoas de pele clara.

[0005] A fonte de vitamina D mais importante é através da ação do sol sobre o colesterol na pele. A vitamina D modula as respostas das células T e tem propriedades anti-inflamatórias, e impulsiona as respostas imunes inatas por indução do gene humano da cathelicidina. Cathelicidina e defensinas são pequenos peptídeos com estruturas anfifílicas que permitem que eles interrompam a integridade da membrana celular do patógeno, resultando em sua morte. A maioria das células do sistema imunológico ou das células epiteliais que estão em contato com o meio ambiente expressam estas proteínas. A deficiência nestes peptídeos resulta em aumento da susceptibilidade à infecção.

[0006] A vitamina D entra em circulação e é transportada para o fígado, onde é hidroxilada para formar 25-hidroxivitamina D3 (calcidiol; principal forma circulante de vitamina D). Nos rins, a enzima 25- hidroxivitamina D3-1-hidroxilase catalisa uma segunda hidroxilação da 25- hidroxivitamina D, resultando na formação de 1,25-dihidroxivitamina D3 (calcitriol, 1 alfa, 25-dihidroxivitamina D]—a forma mais potente de vitamina D. A maioria dos efeitos fisiológicos da vitamina D no organismo estão relacionados à atividade da 1,25-dihidroxivitamina D. Os queratinócitos na epiderme possuem enzimas hidroxilase que convertem localmente a vitamina D em 1,25 dihidroxivitamina D3, (Bikle, et al. 1986, Biochemistry.25 (7): 1545-15480), a forma que regula a proliferação e diferenciação epidérmica. Na pele, o receptor de vitamina D (VDR) parece ter outras funções que são independentes de sua associação com 1,25 dihidroxivitamina D3. Por exemplo, o VDR é importante na regulação do ciclo de crescimento de folículos maduros. (Bikie, et al., J. Bone. Miner. Metab, (2010) 28:117-130). Certas mutações no VDR levam a uma expressão de gene desregulada que resulta em ciclo aberrante do folículo piloso e alopecia (queda de cabelo) em camundongos (28, 29) e em seres humanos (30). O VDR também funciona como um supressor de tumor na pele. O VDR é um dos vários fatores que controlam essas duas funções diversas. Além disso, a 1,25-dihidroxivitamina D3 é um modulador imunológico potente na pele.

Funções na Pele Saudável

[0007] Fotoproteção fotodano refere-se aos danos à pele induzidos pela luz ultravioleta (UV). Dependendo da dose, a luz UV pode causar danos no DNA , respostas inflamatória, apoptose da célula da pele (morte celular programada), envelhecimento da pele e câncer de pele. Alguns estudos, principalmente estudos in vitro (cultura celular) (Dixon, KM, et al. 2005, J Steroid Biochem Mol Biol, 97(1-2): 137-143) e estudos em camundongo nos quais foi topicamente aplicado 1,25-dihidroxivitamina D3 na pele antes ou imediatamente após a irradiação, descobriram que a vitamina D apresenta efeitos fotoprotetores (Gupta,et al., 2007, J Invest Dermatol. 127(3):707-715). Efeitos documentados nas células da pele incluem diminuição de danos ao DNA, apoptose reduzida, aumento da sobrevivência de célula e diminuição de eritema. Os mecanismos para obter estes efeitos não são conhecidos, mas um estudo em camundongos encontrou descobriu que 1,25-dihidroxivitamina D3 induziu a expressão da metalotioneína (uma proteína que protege contra os radicais livres e os dano oxidativos) no estrato basal. Pressupõem-se também que as ações não-genômica da vitamina D contribuam para a fotoproteção; tais efeitos da vitamina D envolvem cascatas de sinalização celular que abrem canais de cálcio. A 1,25-dihidroxivitamina D3 regula a expressão de cathelicidina (LL- 37/hCAP18) (40, 41), uma proteína antimicrobiana que aparentemente media a imunidade inata na pele, promovendo a cura de feridas e reparação dos tecidos. Um estudo em humano descobriu que a expressão de cathelicidina é regulada positivamente durante as fases iniciais do ciclo normal de cura de feridas (Gombart AF, Faseb J., 2005, 19(9): 1067-1077). Outros estudos têm mostrado que a cathelicidina modula a inflamação na pele, Kratz, G, et al., 2003, J Invest Dermatol. 120(3): 379-389), induz a angiogênese (Kupatt C, et al. , J Clin Invest. 2003, 111(11): 1665-1672)e melhora a re-epitelização (o processo de restauração da barreira epidérmica de para re-estabelecer uma barreira funcional que protege as células subjacentes de exposições ambientais). A forma ativa da vitamina D e seus análogos apresentaram uma expressão de cathelicidina regulada positivamente em queratinócitos cultivados (Sthale M, 2005, J Invest Dermatol. 124(5): 1080-1082).

[0008] Doenças, como rosácea, podem exigir níveis mais baixos de vitamina D ou mesmo inibidores ativos localmente de serina proteases e antagonistas de vitamina D para prevenir danos. Na rosácea, os pacientes podem se beneficiar de terapias que bloqueiam a expressão e processamento de cathelicidina. Polimorfismos no gene do receptor da vitamina D tem sido descritos em pacientes com rosácea grave indicando que a sinalização de vitamina D3 está envolvida na patogênese (Jansen T, et. al, J Dermatol 2004; 31:244-246). Bloquear a expressão de cathelicidina pelo direcionamento da via de de vitamina D3 pode representar uma nova abordagem terapêutica para rosácea. Como exemplo, análogos da vitamina D3 sem atividade intrínseca no receptor de vitamina D apresentaram inibição da cathelicidina induzida por 1.25D3 em queratinócitos in vitro (Liu P.T., et. al, Science 2006; 311:1770-1773).

[0009] Na psoríase, o bloqueio do peptídeo cathelicidina podería quebrar o ciclo vicioso da expressão aumentada de LL-37, ativação de células dendríticas e inflamação cutânea. Novamente, as estratégias para diminuir a cathelicidina nos queratinócitos poderia direcionar a sinalização da vitamina D3. Paradoxalmente, por um longo tempo, os análogos de vitamina D3 têm sido utilizados no tratamento de psoríase. Os análogos da vitamina D3 se ligam e ativam o receptor de vitamina D e deveriam, portanto, aumentar a cathelicidina nos queratinócitos, presumivelmente agravando a inflamação na psoríase. No entanto, o oposto é verdadeiro: análogos da vitamina D se assemelham a um dos pilares do tratamento tópico da psoríase. Eles amenizam a inflamação cutânea e revertem as alterações morfológicas dentro das lesões de pele. (Lebwohl M, et.al, J Am Acad Dermatol 2004; 50:416-430). Entender os efeitos moleculares dos análogos de vitamina D3 na função imune inata cutânea irá, eventualmente, leva a um tratamento melhor. Em resumo, influenciando a via de expressão da cathelicidina, a sinalização da vitamina D3 pode oferecer uma nova perspectiva de tratamento na terapia de doenças de pele muito comuns. No entanto, até que a "vitamina do sol' possa ser direcionada, trabalhos experimentais e estudos clínicos adicionais devem ser realizados para comprovar sua segurança e seus benefícios. De forma geral, os dados atuais apontam esmagadoramente a importância dos AMPs para uma pele humana saudável, mas as principais etapas para colocar estas informações em uso terapêutico ainda estão em curso.

[0010] Eczema (Bjorn Hartmann, et. al, Journal of Investigative Dermatology (2012), Volume 132) é uma doença de pele inflamatória crônica que alcançou proporções quase epidêmicas na infância. Além disso, é uma doença de difícil controle e, com seu início na infância, é muitas vezes a primeira manifestação de atrofia. As características clínicas do eczema incluem pele vermelha com coceira, acompanhada de ressecamento e liquenificação. No passado, as opções de tratamento consistiam principalmente de evitar água e sabão. Estas opções têm melhorado consideravelmente com abordagens não-farmacológicas e farmacológicas. No entanto, o eczema é ainda um desafio para tratamento. Parte do problema no desenvolvimento de novas opções de tratamento tem sido o relativo fracasso em verter as informações da ciência básica em uma aplicação clínica. Espera-se que os produtos biológicos mais recentes ajudem a preencher esta lacuna e obter maiores taxas de sucesso.

[0011] A dermatite atópica (AD) é uma doença de pele inflamatória crônica comum que tem aumentado em prevalência ao longo das últimas décadas em países industrializados. A AD é uma doença multifatorial, heterogênea, com uma variedade de defeitos no sistema imunológico, nos mecanismos de defesa antimicrobianos e na integridade da barreira epidérmica, que coletivamente contribuem para o risco e a severidade de desenvolvimento AD. (J Innate Immun 2011; 3:131-141).

[0012] Os corticosteroides tópicos têm sido o padrão-ouro para o tratamento da dermatite atópica por muitas décadas. O surgimento das drogas imuno-moduladora Tacrolimus e Picrolimus representou o primeiro grande avanço no tratamento dessa doença em 40 anos. Inúmeras outras modalidades terapêuticas têm sido estudadas e embora alguns tenham apresentado efeitos benéficos, nenhum excedeu a eficácia dos corticosteroides tópicos. Formas menos graves de eczema geralmente são tratadas com sucesso com os esteróides tópicos ou drogas imuno- moduladoras, no entanto,

[0013] Eczema resistente a esteróides representa um problema porque a maioria dos outros tratamentos adjuvantes não resolve completamente a condição.

[0014] As verrugas são uma proliferação benigna da pele e mucosa, causada pela infecção por papilomavírus humano (HPV). O HPV é onipresente, e pacientes transplantados renais (RTRs) talvez nunca fiquem completamente livres de infecções por HPV, que são as infecções mais frequentemente recorrentes. Esta infecção é importante por causa de sua ligação com o desenvolvimento de certos cânceres de pele, em particular, carcinoma de células escamosas. Vigilância regular, evitar o sol e educar os pacientes são aspectos importantes da estratégia de administração. As verrugas são geralmente tratadas pela modalidades destrutivas tradicionais como a crioterapia com nitrogênio líquido, injeção local de bleomicina, eletrocoagulação, aplicação tópica de glutaraldeido e terapia local e sistêmica por interferon-β [S. Gibbs, et. al, British Medical Journal, Vol. 325, No. 7362, pp. 461—464, 2002. No entanto, a tolerância dos pacientes a essas modalidades de tratamento é pobre, porque muitas vezes causam dor, especialmente em crianças e às vezes cicatrizes ou pigmentação após o tratamento. Nenhum tratamento tem sido uniformemente eficaz, e as verrugas são muitas vezes refratárias, especialmente em pacientes imunocomprometidos, onde sua qualidade de vida está comprometida. Os pesquisadores relataram um RTR com uma verruga do dedo indicador direito, que foi tratada com sucesso com uma vitamina D ativada em uso tópico. (Luciano Moscarelli, et. al, Case Reports in Transplantation Volume 2011, Article ID 368623).

[0015] A perda de cabelo (alopecia) é um efeito colateral muito temido de muitos protocolos de quimioterapia e é um dos aspectos mais psicologicamente devastadores da terapia contra o câncer. Até agora, nenhuma estratégia satisfatória para suprimir a alopécia induzida por quimioterapia está disponível. Durante a última década foram alcançados alguns progressos na compreensão de mecanismos moleculares da perda de cabelo induzida por quimioterapia usando modelos de roedores. No entanto, a patobiologia da resposta do folículo de cabelo humano à quimioterapia permanece desconhecido. (Vladimir A Botchkarev, Journal of Investigative Dermatology Symposium Proceedings (2003) 8, 72-75).

[0016] A alopecia androgenética é o distúrbio mais comum de perda de cabelo nos homens e é principalmente determinada por fatores genéticos e a ação periférica de andrógenos. Outros mecanismos, tais como inflamação crônica e vários hormônios ou vitaminas como a aldosterona, insulina ou vitamina D têm sido implicados na patogênese da alopecia androgenética. O diagnóstico de alopecia androgenética é feito pelo histórico clínico e exame clínico. Minoxidil e a finasterida são as principais drogas aprovadas para o tratamento de alopecia androgenética. A alopecia androgenética tem sido associada com fatores de risco cardiovascular e hiperplasia benigna da próstata. A alopecia é uma característica das mutações do receptor de vitamina D (VDR) em humanos e em camundongos com VDR nulos. Esta alopecia resulta de uma incapacidade de iniciar a fase anágena do ciclo do cabelo após a conclusão da morfogênese do folículo.

[0017] Assim, uma vez que o cabelo inicial cai, este não volta a crescer. Expressão de VDR no componente epidérmico do folículo piloso, o queratinócito, é fundamental para a manutenção do ciclo do cabelo. Para determinar quais domínios funcionais do VDR são necessários para o ciclo do cabelo, transgenes mutantes do VDR foram direcionados para os queratinócitos dos camundongos nulos VDR. Expressão específica de queratinócito de um transgene de VDR, com uma mutação no domínio de ligação do hormônio que abole a ligação do ligante, restaura o ciclo normal dos cabelos em camundongos com VDR nulos, embora um transgene de VDR com uma mutação no domínio 2 da função de ativação que prejudica o recrutamento de co ativador do receptor nuclear resulta em um resgate parcial. As mutações do co-repressor do receptor nuclear Sem cabelo também estão associados com a alopecia em humanos e camundongos. Sem cabelos liga o VDR, resultando em repressão transcricional. Nem a mutação VDR afeta as interações Sem cabelos ou sua capacidade de reprimir a transcrição. Estes estudos demonstram que os efeitos do VDR no folículo piloso são independentes do ligante e apontam para novas ações moleculares e celulares deste receptor nuclear (Kristi Skorija, et. al, Molecular Endocrinology 19: 855-862, 2005).

[0018] Os relatórios anteriores descreveram os efeitos da vitamina D nos folículos pilosos. O pré-tratamento tópico de VD3 aumento o recrescimento do cabelo em um modelo de camundongo com alopecia induzida por quimioterapia (Paus R, et. al, Cancer Res 1996; 56:44384443). Camundongos mutantes com receptor de nuclear vitamina D (VDR) nulo foram relatados desenvolvendo alopecia e bigodes fracos, embora eles tivessem cabelo normal até o desmame após o nascimento (Li YC, et.al, Proc Natl Accad Sei USA 1997; 94: 9831-9835). Isto sugere que esses camundongos podem desenvolver um primeiro revestimento normal do cabelo, mas não podem regular os ciclos do cabelo pós-nascimento. Em humanos, as mutações no gene de codificação de VDR são conhecidas por causar raquitismo hereditário resistente a vitamina D com alopecia (J Miller, et. al, J Invest Dermatol 2001; 117:612- 617: Zhou Y, et. al, J Bone Miner Res 2009; 24: 643-651). Além disso, foi demonstrado que o VDR mantém a homeostase do folículo piloso que é independente do ligante e sugere que o recrutamento dos novos co-moduladores do receptor nuclear pelo VDR é necessário para a manutenção da homeostase do folículo piloso (K. Skorija, et. al, Mol. Endocrinol. 19 (4) (2005) 855-862).

[0019] A fase experimental de 14 pacientes que não conseguiram mostrar eficácia para calcitriol tópica na prevenção da Alopécia induzida por quimioterapia (Hidalgo M, et. al, et. al: Anticancer Drugs 10:393-395, 1999. A Fase I testou o topitriol tópico (calcitriol, 1, 25-dihidroxivitamina D3) para impedir a alopécia induzida por quimioterapia. Isto apontou que a resistência a vitamina D3 também pode desempenhar um papel na alopecia. (Hochberg Z, et.al, Am J Med 77:805-811, 1984)

[0020] O Estudo do Global Burden of Disease (GBD) em 2010 ((Roderick J Hay, ET. AL., Journal of Investigative Dermatology (28 de outubro de 2013) estimou que o GBD é atribuível a 15 categorias de doenças de pele, de 1990 a 2010 por 187 países. A nível global, as condições da pele foram a quarta causa principal de carga da doença não- fatal. Usando mais dados do que foram usado anteriormente, a carga devido a estas doenças é enorme em ambos os países de renda alta e baixa. Estes resultados argumentam fortemente para incluir a prevenção de doenças de pele e tratamento em estratégias futuras de saúde global como uma questão de urgência.

[0021] 1,25 dihidroxi D3 circulante, ligado por DBP (proteína de ligação D), podem ser entregues de forma sistêmica para vitamina D nas células-alvo que retêm o hormônio através da expressão do receptor de vitamina D (VDR) nuclear. As células epiteliais intestinais e osteoblastos representam os principais sites de expressão do VDR (Receptor da vitamina D), onde o receptor medeia as ações de 1,25 dihidroxi D3 para promover cálcio intestinal e a absorção de fosfato e a remodelação óssea mineral, respectivamente (Haussler, et al., 2013, Calcif Tissue Int, 92:7798). Quando ocupado por 1, 25D, o VDR interage com o receptor de retinóide X (RXR), para formar um heterodímero que se liga a elementos responsivos de vitamina D na região de genes diretamente controlado por 1, 25D. Através do recrutamento de complexos de co-ativadores ou co- repressores, VDR-RXR ativado por ligante modula a transcrição de genes que codificam proteínas que promulgar as funções tradicionais de vitamina D, incluindo a sinalização de cálcio intestinal e a absorção de fosfato para efeito esquelético e homeostase de cálcio. Os alvos de doença, previstos para análogos de vitamina D, apropriadamente, incluem osteoporose pela mobilização de mineral ósseo, hiperparatireoidismo secundário para reduzir a transcrição do gene de PTH e bloqueio de hiperplasia celular chefe, doenças auto-imunes, tais como a asma e psoríase, rejeição ao transplante de órgão, controle involuntário da bexiga, hiperplasia benigna da próstata, controle da pressão arterial pela supressão da biossíntese de renina, diabetes tipo 1 e a secreção de insulina por afetar a função celular pancreática, eventos anti-inflamatórios através da inibição da ciclo- oxigenase-2 (COX-2) e o câncer via os efeitos anti proliferativa e pro diferenciativos estabelecidos em uma variedade de linhas de celulares, tais como a mama, próstata e cólon. (Pike, et al., 2012, Rev Endocr Metab Disord, 13:45-55).

[0022] Desta forma, 1,25 dihidroxi D3 provoca suas duas principais funções de prevenir o raquitismo nas crianças e osteomalacia em adultos, bem como fortalecer o osso através de remodelação. Assim, embora a vitamina D não tem nenhum papel direto na calcificação do osso é responsável pelo fornecimento de quantidades adequadas de minerais cálcio e fósforo.

[0023] 1,25 dihidroxi vitamina D3 extra renal também podem ser produzidos localmente em um número de tipos de células que expressam o VDR, nomeadamente a pele, as células do sistema imunológico, cólon, pâncreas e o sistema vascular. A importância dos efeitos locais de 1,25 dihidroxi D3- VDR não está totalmente definida, mas parece que vitamina D provavelmente coopera com outros reguladores, exerce imuno regulação, defesa antimicrobiana, desintoxicação de xenobióticas, ações anti-câncer, controle da secreção de insulina e benefícios cardiovasculares. (Hussler, et al. 2013, Calcif Tissue Int, 92:77-98).

[0024] 1,25-dihidroxicolecalciferol, ou seja, calcitriol, a forma biologicamente ativa da vitamina D, é um secosteroide que atua por meio de ligação do VDR no interior das células. Os VDR têm sido sugeridos para residir no citoplasma e no núcleo sem hormônio em um estado desacoplado. O VDR vincula várias formas de colecalciferol; no entanto, sua afinidade para 1,25-dihidroxicolecalciferol é aproximadamente 1.000 vezes do 25-hidroxicolecalciferol. (Hewisson, et al., 2012, Pios One, Volume 7, Issue 1, e30773).

[0025] O Calcitriol, a forma hormonal ativa da vitamina D, também atua através do VDR para regular funções importantes, tais como a proliferação e diferenciação celular e funções imunológicas. Calcitriol tem bifásico efeitos sobre o crescimento da célula, onde doses fisiológicas estimulam a proliferação celular, e altas doses farmacológicas inibem o crescimento celular. Calcitriol e seus derivados são pensados para ter utilidade no tratamento de cânceres, retardando o crescimento do tumor, induzindo a apoptose, e estimulando a diferenciação de células malignas. Atual calcitriol derivados são administrados em grandes doses para inibir o crescimento do câncer. Infelizmente, essas grandes doses resultam em níveis tóxicos de cálcio do soro.

[0026] Além disso, as possibilidades terapêuticas de 1,25- dihidroxicolecalciferol são severamente limitadas pelo potente efeito desta hormônio no metabolismo de cálcio, desde que os efeitos secundários graves devido à hipercalcemia resulta da alta doses necessárias para obter um efeito terapêutico sobre, por exemplo, psoríase, câncer ou desordens imunológicas. Para inibir o crescimento de células, metodologias atuais utilizam combinações de terapias que especificamente aliviar calcemia toxicidades incorridas por tais altas doses farmacológicas e derivados de vitamina D.

[0027] A vitamina D e seus análogos, embora potencialmente útil em retardar o crescimento celular anormal da proliferação ou tumor, tem a desvantagem de ser potentes agentes calcêmicos que causam os níveis de cálcio do sangue elevada por estimular reabsorção de cálcio intestinal absorção e osso cálcio. Nesse sentido, há uma necessidade para uma modificação molecular seletiva de vitamina D para equilibrar a função potencial como um agonista do receptor nuclear ou reversa agonista, antagonista e ao mesmo tempo manter a especificidade de tecido e estabilidade metabólica suficiente com uma constante procura de hipercalcemia e hipofosfatemia. Portanto, o foco atual é dirigido em direção a novos derivados de vitamina D ou análogos com efeitos de calcemia fracos e uma ampla janela terapêutica. Este e outros objetos e vantagens, bem como recursos adicionais inventivos, serão evidente a partir da descrição detalhada apresentada neste documento para aqueles versados na técnica.

[0028] Os compostos que têm atividade semelhante a VDR são conhecidos na técnica e são descritos em numerosas patentes dos Estados Unidos e em publicações científicas como agonistas e antagonistas; A patentes citadas incluem como Agonistas (Patente U.S. N° 6.689.922, Patente U.S. N° 7.101.865, Patente U.S. N° 7.595.345, Patente U.S. N° 7.566.803, Patente U.S. N° 7.659.296, Patente U.S. N° 7.750.184) e como Antagonistas o Pedido de Pat. U.S. N° 10/481.052, Patente U.S. N° 7.361.664, Patente U.S. N° 7.915.242, Pedido de Pat. U.S. N° 12/266.513, Pedido de Pat. U.S. N° 10/774.843). É geralmente conhecido e aceito na arte do VDR como atividade é útil no tratamento de mamíferos, incluindo seres humanos, para curar ou aliviar os sintomas associado a várias doenças e condições.

[0029] Ligantes de VDR (vitamina D e seus derivados) são conhecidos por terem atividades amplas, incluindo efeitos na proliferação celular e diferenciação, em uma variedade de sistemas biológicos. Esta atividade produz derivados de vitamina D úteis no tratamento de uma variedade de doenças, incluindo câncer e doenças dermatológicas. O estado da técnica tem desenvolvido um grande número de compostos químicos que têm atividade biológica semelhante à da vitamina D, e volumosa literatura de patente e química existe descrevendo tais compostos. (Schrager, et al. 2009, JABFM, 9, Vol. 22, N°. 6).

[0030] A importância do VDR tem sido demonstrada por Ramagopalan et al. (2010: Genome Research, 20:1351) pelo isolamento dos fragmentos de DNA genômico ligado ao VDR antes e após o tratamento das células com calcitriol e então sequencia-se os fragmentos de DNA. Mapeando as sequências de volta para o genoma, identificaram mais de 2.700 sites de ligação VDR, um número que mostra o quão importante a vitamina D é para seres humanos e a grande variedade de vias biológicas que vitamina D desempenha um papel.

[0031] Enquanto a descoberta do agonista ou mesmo a atividade "super agonista" é conhecida, íigantes que seletivamente estabilizar uma conformação antagônica do VDR LBD dentro construção de VDR-RXR- DVRE, para evitar a indução do transativação, também são de valor potencial terapêutico. O grau de afinidade de um análogo de vitamina D para o VDR parece ser de menor importância do que seu alinhamento com os locais de contato específicas no domínio de ligação do ligante para produzir diferentes conformações de VDR com consequências transcriptional modificadas. Há um relatado 3000 vitamina D relacionados com compostos que já foram sintetizados, com o objetivo de minimizar ou eliminar os efeitos colaterais de hipercalcemia mantendo níveis plasmáticos sustentado, potencial de transativação desejado e especificidades da célula. Muitos análogos de vitamina D que delimitam a afinidade obrigatória e determinar a sua função como agonista ou antagonista, modificando o potencial e, eventualmente, o valor clínico inerente a doença.

[0032] Infelizmente, compostos com vitamina D como atividade (por exemplo; calcitriol) também causam um número de indesejáveis efeitos colaterais com doses terapêuticas, incluindo hipercalcemia. Estes efeitos colaterais limitam-se a aceitabilidade e a utilidade da vitamina D no tratamento de doenças. Não há nenhum conhecido agonista inverso de VDR e Metadichol ® é o primeiro de seu tipo.

RESUMO DA INVENÇÃO

[0033] Os compostos da presente invenção são útil para evitar indesejáveis efeitos colaterais de vitamina D, que são administrados para o tratamento ou prevenção de certas doenças ou condições.

[0034] A presente invenção refere-se adicionalmente ao uso de vitamina D (VDR) inversa receptor em ligação a sítios receptores em sistemas biológicos, incluindo mamíferos, para manter um nível basal de atividade na disse locais do receptor.

[0035] Em um aspecto particular da presente invenção, é fornecido um método de tratamento de uma condição patológica em humanos. As condições tratadas estão associadas com a atividade do receptor VDR. Este método envolve a administrar aos seres humanos uma agonista inversa VDR, capaz de se ligar a um receptor VDR ou seus subtipos: O agonista inverso é administrado em quantidade farmacêutica mente eficaz para fornecer um benefício terapêutico contra a condição patológica no mamífero.

[0036] O agonista inverso VDR pode ser administrado aos seres humanos internamente, ou seja, intubação intragástrica ou adição de água ou comida, ou paternalmente, por exemplo, intra-peritoneal, intra-muscular, por via subcutânea e além disso como um gel que pode ser aplicado topicamente para tratar várias doenças de pele e doenças.

[0037] Em um aspecto particular da invenção para aplicações tópicas tornou-se um gel claro, tratando Metadichol® com qualquer um de um do comercial disponível como, o polímero de Carbopol® (marca registada da Lubrizol) polietileno óxido (PEO) (polivinil pirollidona (PVP)), ácido polilático (PLA), ácido poliacrílico (PAA) ácido termopolimerizáveis (PMA) polietileno glicol (PEG) ou biopolímeros naturais, tais como alginato, quitosana, carragenina, ácido hialurônico e carboximetilcelulose (CMC).

[0038] O gel em suas aplicações e este exemplo foi feito por rápida mexendo e misturando a 30-35 ° C, 0,5% -1% da partícula líquida Nano descrita anteriormente (pedido de patente dos EUA 12/691706) com 0,5% a 1% em peso de Carbopol ® um (Boletim da Lubrizol Corporation Pharmaceutical. 22 0 edição: 31 de maio de 2011) e resultou em um gel transparente contendo 0,5-1% de partículas Nano ativas prontas para uso tópico.

[0039] O único requisito para a via de administração é que deve permitir a distribuição do agonista para o tecido-alvo por meio Oral ou topicamente, usando o gel. O agonista inverso VDR é formulado em combinação com excipientes.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0040] A FIGURA 1 mostra os resultados do ensaio de transativação de VDR do composto de teste em relação a todas as 1,25 dihidroxi vitamina D3 (o agonista natural) e Vitamina D para certos composto de exemplo da invenção.

[0041] A FIGURA 2 mostra os resultados do ensaio de malária.

[0042] A FIGURA 3 mostra os resultados do tratamento com gel de tratamento em um paciente com acne.

[0043] A FIGURA 4 mostra que os resultados do tratamento de um paciente de eczema com Metadichol em gel. O eczema é na cabeça do paciente. O número na imagem mostra a condição da pele no referido dia ou semana.

[0044] A FIGURA 5 mostra que os resultados do tratamento de um paciente de eczema com Metadichol em gel. O eczema é no braço do paciente. O número na imagem mostra a condição da pele no referido dia ou semana.

[0045] A FIGURA 6 mostra os resultados do tratamento com Gel de paciente com gânglio

[0046] A FIGURA 7 mostra os resultados do tratamento de gel na perna de um paciente com um surto de erupções de etiologia desconhecida.

[0047] A FIGURA 8 mostra o tratamento com gel em um cão com lipoma que desenvolveu uma infecção de tumor de pele aberta.

[0048] A FIGURA 9 mostra o tratamento de uma infecção do dedo de um paciente infectado com MRSA tratado com Gel de Metadichol.

[0049] A FIGURA 10 mostra o tratamento da pele de um paciente com gel sob pálpebras e rosto.

[0050] A FIGURA 11 mostra o tratamento com gel de Metadichol de um paciente com um ferimento profundo na mão.

[0051] A FIGURA 12 mostra o tratamento com gel de Metadichol de um paciente que sofre de uma infecção fúngica da língua.

[0052] A FIGURA 13 mostra o tratamento com gel de Metadichol de uma patente com psoríase.

[0053] A FIGURA 14 mostra a aplicação de gel de Metadichol em um paciente com uma erupção de pele.

[0054] A FIGURA 15 mostra a aplicação de gel de Metadichol sobre uma pessoa careca e o crescimento capilar por 4 meses.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO E MODALIDADES PREFERENCIAIS Introdução

[0055] A presente invenção fornece Metadichol ®, um novo agonista inverso de VDR. Este tipo de receptor é um dos alvos mais importantes da indústria farmacêutica, e muitas das drogas com ação terapêutica significativa foram mostradas como sendo agonistas inversos. Os agonistas inversos de VDR aqui fornecidos demonstraram se ligar ao VDR com boa afinidade. Além disso, os agonistas inversos podem, pela ligação com receptores de vitamina D, regular crescimento de célula e a transcrição do gene.

[0056] Metadichol® é um agonista proteico mais provável com base nos resultados que descrevemos. A palavra protean é derivada do Proteas o grego que podia mudar de forma. Este conceito foi proposto por Kenakin, et.al, (FASEB J. 2001, Mar: 15(3): 598-611) e foi demonstrado por Gbahou. Et. al, (Proc. Natl. Acad. Sei. (USA) 2003, 100, 11086-11091) com receptores de H3 histamínicos. De acordo com este conceito GPCRs são proteínas alostéricos que adotam conformações ativas e inativas. Em equilíbrio, a forma ativa do receptor pode ocorrer espontaneamente, levando a atividade constitutiva. Um agonista pode também promovê-lo. Agonistas inversos promovem forma inativa de receptores e diminuem a atividade constitutiva. A lógica por trás de genealogia protean é que se um agonista produz um estado ativo de baixa eficácia do que é constitutivamente formada, o ligante agiria como um agonista inverso. No entanto, na ausência de atividade constitutiva, o ligante seria convertido para um agonista.

[0057] No estado não-ligado, um receptor está funcionalmente em silêncio, e isso é verdade na maioria dos casos. No entanto, alguns sistemas de receptores exibem atividade constitutiva, ou experimentalmente como resultado de mais de expressão ou como resultado de mutação. Estes receptores estão ativos na ausência do agonista. Um agonista inverso iria inibir esta atividade constitutiva. Estudos recentes têm demonstrado ações intrigantes de agonistas inversos. (Ijzerman, et al., 2000, British Journal of Pharmacology, 130:1-12). Eles se mostraram não só bloquear respostas constitutivas de receptores, mas também para ativar e regular o receptor de membrana do sete-trans sinalização e tráfico. (Dupré, et al., 2004, Biochem. Cell Biol., 82(6): 676- 680. Um receptor é considerado como ativo constitutivo, se o receptor ativa e funciona por si só, sem um ligante.

[0058] A sinalização de receptor basal denota um estado de constante atividade de baixo nível de um receptor. É visto principalmente no caso de receptores que permitem a sobrevivência. Por exemplo, o receptor do hormônio do crescimento tem um nível basal de atividade que depende da presença de um baixo nível de ligante, como o hormônio do crescimento e insulina como hormônios de crescimento, no sangue. A remoção desta atividade provoca a morte celular. Assim, deve haver um nível basal de atividade do receptor das células para sobreviver. A vantagem da atividade basal do receptor e constitutivas é que o controle de célula tendo tais receptores pode ser mais preciso.

[0059] Por exemplo, se a função de uma célula tem de ser reduzida, o corpo pode secretar um agonista inverso, no caso de receptor constitutivamente ativo, ou diminuir a produção do ligante para receptores basalmente ativos. Porque os receptores estão basalmente ativos, o controle pode ser negativo ou positivo, ou seja, em ambas as direções.(Ijzerman, 2006, Trends Pharmacol Sei, 27:92-6).

[0060] Estes agonistas inversos podem ser usadas para o tratamento de crescimento de células anormais, tais como câncer e a prevenção de cânceres recorrentes. Uma modalidade preferencial da invenção utiliza o agonista inverso VDR para o tratamento terapêutico de níveis elevados de PSA, na redução dos níveis de ferritina, na redução da largura de distribuição de eritrócitos RDW, no aumento da Apo (a) e redução dos níveis de APO b proteína para hiperlipidemia, tratamento de pacientes MDS (síndrome de mielodisplasia), aumento de hemoglobina e contagem de plaquetas e normalizando os neutrófilos, linfócitos e monócitos e na redução de ácido úrico e níveis de lipoproteína (a) e reduzindo os níveis de TSH (hormônio estimulador da tireóide) (e anticorpos de tireoide globulina (TgAb) e níveis de anticorpos (TPOAb) de peroxidase da tiróide que são vistos em doenças Graves e Hashimoto e outras doenças auto-imunes) e alta reduzir níveis elevados de bilirrubina e na regulação de níveis de cálcio e fósforo e potássio paratormônio e normalizando em pacientes renais. As agonistas VDR inversas da invenção podem também ser usadas para o tratamento terapêutico e/ou profilática prevenção de outros tipos de condições ou doenças, tais como, mas não limitado a, artrite reumatóide, doença de medula óssea, câncer de próstata, câncer colorretal, leucemia, câncer no cérebro, melanoma primário ou metastático, glioma, hiperparatiroidismo primário, psoríase, pedras nos rins e doenças de infecções (por exemplo, malária). Além disso, uma vez que esses derivados inibem a secreção de paratormônio, eles são contemplados para ser eficaz para o tratamento de hiperparatireoidismo secundário que provoca doença óssea e calcificação vascular em pacientes que sofrem de insuficiência renal.

Definições

[0061] Salvo definição em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados neste documento geralmente têm o mesmo significado como comumente compreendido por um indivíduo versado na técnica à qual pertence esta invenção,

[0062] Os métodos e as formulações podem ser utilizadas para fins terapêuticos ou profiláticos. Em algumas modalidades, os termos "tratar" ou "o tratamento" de qualquer doença ou distúrbio refere-se à melhora da doença ou distúrbio (ou seja, detenção ou redução do desenvolvimento da doença, ou pelo menos um dos seus sintomas clínicos). Em outras modalidades, "tratar" ou "tratamento" refere-se a atenuar pelo menos um parâmetro físico, que pode ou não ser perceptível pelo sujeito. Em ainda outras modalidades, "tratar" ou "tratamento" refere-se a inibir a doença ou distúrbio, seja fisicamente, (por exemplo, a estabilização ou erradicação de um sintoma aparente), fisiologicamente, (por exemplo, a estabilização ou erradicação de um parâmetro físico), ou ambos. Em ainda outras modalidades, "tratar" ou "tratamento" refere-se a retardar o surgimento da doença ou distúrbio.

[0063] "Quantidade terapeuticamente eficaz de" é usada permutavelmente aqui com "uma quantidade eficaz de" quando se refere a um método da invenção. Quando usado em referência a uma dosagem de Metadichol ®, estes termos se referem a uma dosagem que fornece a resposta farmacológica específica para a qual o policosanol é administrado em um número significativo de indivíduos que necessitam de tal tratamento. É ressaltado que "quantidade terapeuticamente eficaz" é administrada para um determinado sujeito em uma instância determinada pode não ser 100% eficaz para pacientes tratados para um doenças específica, e nem sempre serão eficazes no tratamento das doenças descritas neste documento, mesmo que tal dosagem seja considerada como uma "quantidade terapeuticamente eficaz por" aqueles versados na técnica. Deve ser entendido adicionalmente que dosagens de policosanol são, em casos particulares, medidas como dosagens orais, ou com referência a níveis de droga, medidas no sangue. Como usado aqui, os termos "indivíduo", "sujeito" e "paciente", são usados indistintamente para se referir a um animal, por exemplo, um mamífero, por exemplo, um ser humano.

As Composições Metadichol® Nano gel

[0064] O envelhecimento da população no mundo em desenvolvimento tem levado ao aumento de doenças músculo- esqueléticas, tais como osteoporose e osso metástases. Esquerda não tratada, muitas doenças ósseas causam dor debilitante e no caso do câncer, morte. Muitas drogas potenciais são eficazes no tratamento de doenças, mas o resultado em efeitos colaterais, impedindo a sua eficácia na clínica. Ossos e pele, no entanto, fornece um ambiente único de sólidos inorgânicos, que pode ser explorada para efetivamente alvo drogas para tecido doente. Pela integração do osso direcionamento metades para transporte de drogas de polímeros solúveis em água, a carga a área doente pode ser aumentada enquanto efeitos colaterais diminuiu.

[0065] dimensão nanométrica poliméricos hidrogel, géis de Nano e hidrogel Nano partículas (NPs; tamanho de 1 a 1000 nm) são inchadas redes compostas anfifílica ou polímeros iônicos hidrofílicos poli, naturais ou sintéticos. Nano geles são promissores multifuncional polimérico NPs com potencial como sistemas de entrega devido a suas propriedades únicas. Estes incluem sintonizável química e estruturas físicas, flexível tamanho Nano, grande área de superfície para conjugação multivalentes, alto teor de água, biocompatibilidade, carregamento capacidade, estabilidade, capacidade de direcionar a células específicas e compartimentos celulares específicos, Propriedades moduladora imunológica e capacidade de resposta a fatores ambientais. (Oh JK, et al., Prog Polym Sei, 2009, 34:1261-82; Oh JK. et al. 2010, Can J Chem, 88:173-84; Hubbell JA, et al., Nature, 2009, 462:449-60).

[0066] Nano como transportadoras devem ser entregues a locais específicos sobre injeção em fluidos corporais, a possibilidade de modular as propriedades químicas e físicas do NPs pode ser mais útil na superação de barreiras biológicas principais tais como o sistema reticuloendotelial, apuramento através do glomérulo renal e acumulação inespecífica em diferentes órgãos. Gel nano ainda é um grupo novo e rápido desenvolvimento de materiais, ganhando ampla aplicação em muitas áreas, especialmente, farmácia, medicina e agricultura. Um exemplar hidrogel é um material feito quando um polímero insolúvel em água absorve uma grande quantidade de água, ou é simplesmente uma rede de água-inchado do polímero.

[0067] Os termos géis e hidrogel é usados alternadamente por comida e cientistas de biomateriais para descrever polímeros reticulados estruturas de rede. Embora o teor de água em hidrogel pode ser tão pouco como alguns por cento a mais de 99%, hidrogel mantém as propriedades de sólidos (Truong N., et al., 2002, Biomateriais, 23:4307, Glyn O Phillips, et al., 2011, Hydrogels: Methods of Preparation, Characterization and Applications, Progress in Molecular and Environmental Bioengineering - From Analysis and Modeling to Technology Applications, Angelo Carpi (Ed.), ISBN: 978-953-307-268-5, InTech).

[0068] Devido à sua capacidade de absorção de água de alta e biocompatibilidade que esses géis têm sido utilizados no curativo, entrega da droga, agricultura, absorventes higiênicos, bem como sistemas de trans- dérmica, materiais dentários, implantes, sistemas poliméricos injetáveis, aplicações oftálmicas, órgãos tipo híbrido (células vivas encapsulado (Tabela 1 abaixo) são usados no cuidado da ferida, na entrega da droga, materiais dentários, implantes de engenharia de tecidos e sistemas poliméricos injetáveis, para citar alguns. (Vinogradov SV, et al., 2009, Angew. Chem. Intern. Ed., 48:5418-5429).Tabela 1

[0069] Nanogéis encontraram aplicações em vários campos, tais como diagnósticos de sensoriamento e bioengenharia, mas seu maior impacto foi na área de administração de medicamentos. Nanogéis e outros sistemas de entrega distribuição droga de tamanho nano têm várias vantagens sobre aqueles de tamanho macro. Nanogéis também podem ser inerentemente úteis em sistemas que exijam uma liberação abrupta (burst release). Sistemas nano, ao contrário dos sistemas de distribuição de droga em massa, podem inserir células para distribuir drogas e podem ser projetados para responder a sinais intracelulares. (S. Thayumanavan, et al. 2912, Advanced Drug Delivery Reviews, 64, 836-851).

[0070] As tabelas abaixo mostram algumas aplicações de hidrogel em terapêuticos. (Kohli, et al., Scientific Research and Essay, 2009, 3(11): 1175-1183).

[0071] Dispersas em meio aquoso, redes de nanogel inchadas são moles e podem encapsular um volume considerável de água. Drogas e agentes biológicos podem ser carregadas em Nano géis através de um processo espontâneo, incluindo interações entre o agente e a matriz de polímero, formando partículas hidrofílicas com estabilidade de alta dispersão. Nanogéis são capazes de proteger fisicamente moléculas biológicas de degradação in vivo e foram investigados pré-clinicamente para a muitos tipos de moléculas ativas, variando de pequenas drogas a bio-macromoléculas. A capacidade de retenção de água e permeabilidade são as características mais importantes de um hidrogel (S.Vinogradov, et al., Nanomedicine, 2010, 166, 5(2)).

[0072] Nesse sentido, a presente invenção fornece um composto ou fórmula, conforme descrito em no pedido de patente US 12/691.706, publicado em 26 de agosto de 2010, e como uma formulação de hidrogel polimérica para a pele e aplicações tópicas. São descritas aqui as composições e os métodos para prevenção e/ou tratamento de doenças de pele incluindo, mas não se limitando a, infecções por MRSA psoríase e dermatite atópica, bem como fornecimento de benefícios antienvelhecimento que resultam na redução do aparecimento de rugas e pele envelhecida, cor de pele melhorada, tratamento da pele fotodanificada, crescimento de cabelo, melhora na luminosidade e clareza e acabamento da pele e uma aparência em geral saudável e jovem da pele, envolvendo a angiogênese aberrante e hiperplasia empregando a referida formulação.

Atividade Biológica, Modos de Administração

[0073] Como indicado acima, os compostos da presente invenção são agonistas inversos do receptor VDR. Isto significa que os compostos da invenção se ligam para o mesmo sítio que o receptor natural 1,25 dihidroxi vitamina D3. Dependendo do local e da natureza de efeitos colaterais indesejáveis, que são idealmente suprimidos ou amenizados, os compostos utilizados em conformidade com a invenção podem ser agonistas inversos do receptor VDR.

[0074] Um composto não deve causar ativação significativa de um gene repórter, através de um receptor VDR no ensaio de transativação para se qualificar como um agonista inverso de VDR com utilidade na presente invenção. Por último, mas não menos importante, um composto deve se ligar a subtipos de receptores VDR no ensaio de ligação do ligante a fim de ser capaz de funcionar como um agonista inverso do subtipo do receptor ligado, desde que o mesmo receptor não seja significativamente ativado pelo composto.

Ensaio de transativação de VDR

[0075] O ensaio de VDR foi realizado conforme descrito no kit de ensaio de VDR fornecido pela Indigo Biosciences Inc. College Town PA). Foram utilizados todos os controles e normas conforme especificado pelo kit do fabricante. Os procedimentos são descritos por Vanden Heuve, et al., PPAR F?es,2006, 69612; Vanden Heuve, Toxicol Sei, 92:476-489.

[0076] A atividade antimalárica foi realizada usando uma adaptação dos procedimentos descritos por Desjardins et al. (Antimicrob. Agents Chemother. 16, 710-718, 1979); Matile e Pink (Em: Lefkovits, I. e Pernis, B. (Eds.) Immunological Methods Vol. IV, Academic Press, San Diego, pp. 221-234, 1990).

[0077] A FIGURA 1 mostra os resultados do ensaio de transativação de VDR do composto de teste em relação a todas as 1,25 dihidroxi vitamina D3 (o agonista natural) e Vitamina D para certos composto de exemplo da invenção. A FIGURA 2 mostra os resultados de ensaio in vitro de Metadichol® contra cepa A de P. falciparum usada neste experimento, que o ensaio de transativação de VDR em NF54 sensível à droga (uma cepa de aeroporto de origem desconhecida).

Procedimento

[0078] Plasmídeos. O domínio de ligação ao ligante dos receptores nucleares foi fundido ao domínio de ligação a DNA do fator de transcrição de levedura Gal4 sob o controle do promotor de SV40. Um plasmídeo repórter codifica o gene da luciferase de vaga-lume sob o controle do elemento de resposta de DNA de Gal4 (UAS). Um vetor de controle de eficiência de transfecção está incluído na maioria dos ensaios (pRL- luciferase, Promega, Madison, Wl). Todos os plasmídeos foram verificados por sequenciamento e através de exame de controles positivos. (Tien, et al., 2006; Vanden Heuvel, et al., 2006) Completo.

[0079] Sistema de Comprimento. O cDNA de comprimento total do receptor nuclear está sob o controle do promotor de SV40. Um plasmídeo repórter codifica o repórter da luciferase sob o controle do elemento de resposta de MMTV. Todos os plasmídeos foram verificados por sequenciamento e através de exame de controles positivos.

Cultura de Células e Ensaios de Transativação

[0080] Fibroblastos de HEK 293-T (ATCC, Manassas, VA) foram cultivados em Meio Eagle modificado por.Dulbecco (DMEM) alta concentração de glicose suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS, Sigma), 0,2 mg/ml de estreptomicina e 200 U/ml de penicilina (Gibco, Grand Island, NY). Para ensaios de repórter de transfecção transiente, células HEK 293-T foram transfectadas com DNA plasmidial utilizando reagente Lipofectamina (Invitrogen, Carlsbad, CA) e seguindo os procedimentos recomendados pelo fabricante, usando células HEK 293-T em aproximadamente 80% de confluência em placas de cultura de 10 cm. Após 6 h, o complexo DNA-Lipofectamine foi removido após a cultura durante a noite, o meio foi substituído 4 h após a repetição com DMEM (10% de FBS) contendo compostos de teste em DMSO (concentração final de 0,1%). As concentrações das substâncias químicas são dadas nas lendas da figura. Dezesseis horas após o tratamento, as células foram lisadas com tampão de lise passiva (Promega, Madison, Wl) por 30 min; a atividade de luciferase foi medida utilizando o kit de ensaio Dual Luciferase Reporter (Promega, Madison, Wl) e um Tecan GeniosPro (Research Triangle Park, NC) e os procedimentos recomendados pelo fabricante. A indução de dobra da atividade de luciferase normalizada foi calculada em relação às células tratadas com veículo e representa a média das três amostras independentes por grupo de tratamento.

Malária: procedimento de triagem in vitro

[0081] Culturas de parasita; Cepa A de P. falciparum usada neste experimento é o NF54 sensível à droga (uma cepa de aeroporto de origem desconhecida). As cepas são mantidas em meio RPMI 1640 com 0,36 mM de hipoxantina, suplementado com 25 mM de ácido N-2- hidroxietilpiperazina-N’-2-etano-sulfônico (HEPES), 25 mM de NaHCO3, neomicina (100 U/ml) e 5 g/l de AlbumaxR II (albumina de soro bovino rica em lipídios, GIBCO, Grand Island, NY, EUA), juntamente com 5% de eritrócitos humanos A+ lavados. Todas as culturas e os ensaios são realizados em 37 °C, sob uma atmosfera de 4% de CO2, 3% de 02 e 93% de N2. As culturas são mantidas em câmaras de incubação preenchidas com a mistura de gás. Subcultures são diluídas a uma parasitemia de entre 0,1 e 0,5% e a média é alterada diariamente.

Ensaios de sensibilidade à droga

[0082] A atividade antimalárica é avaliada usando uma adaptação dos procedimentos descritos por Desjardins et al. (Antimicrob. Agents Chemother. 16, 710-718, 1979), e Matile e Pink (Em: Lefkovits, I. e Pernis, B. (Eds. ) Immunological Methods Vol. IV, Academic Press, San Diego, pp. 221-234, 1990).

[0083] Soluções estoques de drogas são preparadas em 100% de dimetilsulfóxido (DMSO) (salvo sugestão em contrário do fornecedor) e 10 mg/ml e aquecidas ou sonicadas, se necessário, para dissolver a amostra. Após o uso, as soluções estoques são mantidas a -20 °C. Para os ensaios, o composto é adicionalmente diluído em meio de cultura livre de soro e, finalmente, na concentração apropriada em meio completo sem hipoxantina. A concentração de DMSO em poços com a concentração mais alta da droga não excede 1%.

[0084] São realizados ensaios em placas de microtitulação de 96 poços estéreis, cada poço contendo 200 μl de cultura parasita (0,15% de parasitemia, 2,5% de hematócrito) com ou sem soluções seriais de drogas. São usadas sete diluições em duas vezes, cobrindo uma faixa de 5 μg/ml a 0,078 μg/ml. Para compostos ativos, a maior concentração é reduzida (por exemplo, para 100 ng/ml); para extratos vegetais, a maior concentração é aumentada para 50 μg/ml. Cada droga é testada em duplicado, e o ensaio é repetido para compostos ativos, mostrando um IC50 abaixo de 1,0 μg/ml. Após 48 horas de incubação a 37 °C, 0,5 μCi de 3H-Hipoxantina é adicionado a cada poço. Culturas são incubadas por mais 24 h antes de serem colhidas em filtros de fibra de vidro e lavadas com água destilada. A radioatividade é contada usando um contador de cintilação em líquido BetaplateTM (Wallac, Zurique, Suíça). Os resultados são registrados como contagens por minuto por poço em cada concentração de droga e expressos em percentagem dos controles não tratados. Valores de IC50 são calculados a partir das curvas de inibição sigmoidal usando o Microsoft EXCEL).

As Composições

[0085] Em várias modalidades, a invenção fornece Metadichol® como um líquido ou um gel que é uma formulação Nano de Policosanol descrita no Pedido de Patente US 12/691.706.

Composição do gel

[0086] O polímero utilizado é derivado de uma das seguintes opções: Polímero Carbopol® (marca registrada da Lubrizol) óxido de polietileno (PEO) (polivinilpirrolidona (PVP)), ácido polilático (PLA) (ácido poliacrílico (PAA), polimetacrilato (PMA) polietileno glicol (PEG) (Singh et al.), ou biopolímeros naturais, tais como alginato, ágar, quitosana, carragenina, hialuronano e carboximetil celulose (CMC).

[0087J Em uma modalidade de exemplo, a formulação de gel de dosagem unitária é uma formulação de Nano partículas contendo Metadichol® e uma fração de estabilização, e a formulação de dosagem unitária inclui cerca de 10 mg a cerca de 100 mg, por exemplo, de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg por ml_ ou cerca de 10 mg a cerca de 30 mg por ml_. Em várias modalidades, a dosagem unitária é uma dose diária. Um indivíduo versado na técnica apreciará que a quantidade terapeuticamente eficaz de Metadichol® gel pode ser determinada empiricamente e pode ser empregada na forma pura ou, sempre que existam tais formas, em forma de sal, éster ou pró-droga farmaceuticamente aceitável. Níveis de dosagem real de Metadichol® nas composições de Nano partículas da invenção podem ser variados para obter uma quantidade de Metadichol® que seja eficaz na obtenção de uma resposta terapêutica desejada para uma determinada composição e método de administração. O nível de dosagem selecionado, portanto, depende do efeito terapêutico desejado, da via de administração, da potência do policosanol administrado, do tempo de duração desejado de tratamento e de outros fatores.

[0088] Composições de unidade de dosagem podem conter tais quantidades de tais submúltiplos das mesmas conforme possam ser usados para formar a dose diária. Entretanto, entende-se que o nível específico de dose para qualquer paciente em particular dependerá de uma variedade de fatores: o tipo e o grau da resposta fisiológica a ser alcançado; a atividade do agente específico ou da composição utilizados; os agentes específicos e a composição utilizados; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração; a via de administração; a taxa de excreção do agente; a duração do tratamento; drogas utilizadas em combinação ou coincidentes com o agente específico; e fatores semelhantes bem conhecidos na técnica médica.

Os Métodos

[0089] A presente invenção fornece métodos de usar essas Nano partículas de Metadichol® em forma líquida ou gel e de prevenir a doença e para regular o metabolismo. Em várias modalidades, as Nano partículas da invenção em forma líquida são úteis para regular, os níveis de proteína Lp (a), Apo (a) e Apo (b), ácido úrico, os níveis de paratormônio, diminuindo as proporções de bun em pacientes renais, os níveis de regulação de fósforo e cálcio, os níveis de potássio em pacientes com hipertensão arterial, níveis de ferritina, níveis de TSH, neutropenia, modular níveis de aspartato aminotransferase (AST) ou transaminase glutâmico-oxalacética sérica [SGOT]), alanina aminotransferase (ALT) ou glutamato piruvato transaminase sérica [SGPT]), modular as proporções absolutas de linfócitos e neutrófilos e modular a albumina em pacientes com hiperlipidemia.

[0090] As formulações de Metadichol® gel são usadas topicamente no tratamento de várias doenças de de pele como a acne, infecções por MRSA, Eczema, Psoríase e na prevenção e/ou no tratamento de doenças de pele, incluindo, entre outras, psoríase e dermatite atópica, bem como fornecimento de benefícios antienvelhecimento que resultam na redução do aparecimento de rugas e pele envelhecida, cor de pele melhorada, tratamento da pele fotodanificada, melhora na luminosidade e clareza e acabamento da pele e uma aparência em geral saudável e jovem da pele, envolvendo a angiogênese aberrante e hiperplasia.

[0091] Em uma modalidade de exemplo, as formulações são administradas em uma quantidade terapeuticamente eficaz a um sujeito para tratar uma determinada doença ou distúrbio, e em que o sujeito é não precisa, de outra forma, de tratamento com Metadichol®. Em várias modalidades, o Metadichol® é administrado para tratar uma doença única ou regular um único fator metabólico. Assim, em uma modalidade exemplar, a invenção fornece um método para tratar a Lipoproteína (a) em um sujeito que não precisa de tratamento para hiperlipidemia, hipercolesterolemia, hipertensão, etc. Em uma modalidade exemplar, a invenção fornece um método para regular os níveis de hormônios da paratireoide em um sujeito que não precisa de tratamento para doença renal, hiperlipidemia, hipercolesterolemia, etc. Em várias modalidades, a invenção fornece um método de tratamento de níveis de potássio em um sujeito que não precisa de tratamento para hipertensão, diabetes, etc. Em várias modalidades, a invenção fornece um método para diminuir ou evitar a neutropenia em um sujeito que não precisa de tratamento para doenças renais, inflamação etc,. Em uma modalidade exemplar, a invenção fornece um método para aumentar os níveis da proteína Apo (a) em um sujeito que não precisa de tratamento para hiperlipidemia, hipercolesterolemia, etc. Em outras modalidades, a invenção fornece um método de modulação de níveis de AST e ALT em um sujeito que não precisa de tratamento para hiperlipidemia, hipercolesterolemia, etc.

[0092] Em várias modalidades, Metadichol® gel é usado em Eczema, psoríase, tumores Lipoma, na remoção de rugas e verrugas e em MRSA e outras infecções de pele.

[0093] Exemplos não limitantes dos métodos da invenção são definidos abaixo:

ÁCIDO ÚRICO

[0094] A invenção fornece um método para reduzir os níveis de ácido úrico em um sujeito e, consequentemente, reduzir as consequências deletérias desta oxidação. O método inclui a administração em um sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de Metadichol® para diminuir a oxidação de proteínas em um sujeito.

[0095] O ácido úrico está presente em pequenas quantidades no corpo de todo mundo e é feito a partir da quebra de purinas, que são liberadas como parte do funcionamento normal do corpo e podem ser absorvidas pelo organismo a partir de certos tipos de alimentos (tais como carne ou frutos do mar). Além disso, um número de estudos epidemiológicos relatou uma relação entre os níveis de ácido úrico no soro e uma grande variedade de condições cardiovasculares, incluindo hipertensão, (Acosta, et al. 2005, J Am Soc Nephrol, 16,909-1919; Heinig M, et al. 2006, Cleveland Clinic Journal of Medicine, 73(12): 1059-64).

[0096] O ácido úrico pode desempenhar um papel na síndrome metabólica. Historicamente, o nível elevado de ácido úrico observado na síndrome metabólica foi atribuído à hiperinsulinemia, já que a insulina reduz a excreção renal de ácido úrico. A hiperuricemia, no entanto, muitas vezes precede o desenvolvimento da hiperinsulinemia, obesidade e diabetes. A hiperuricemia pode também estar presente na síndrome metabólica em pessoas que não estão com sobrepeso ou obesidade. (Tyagi, et al., Nutrition & Metabolism, 2004, 1:10). A hiperuricemia é fortemente associada à doença vascular periférica, carotídea e coronária, com o desenvolvimento de acidente vascular cerebral, com pré-eclâmpsia e com demência vascular. A relação de ácido úrico com eventos cardiovasculares é particularmente forte, especialmente em pacientes com alto risco de doença cardíaca e em mulheres. Na doença arterial coronariana, (Viazzi, et al., 2006, The Journal of Clinical Hypertension, 8(7):: 510).

[0097] O ácido úrico no soro é um forte preditor de acidente vascular cerebral em pacientes com diabetes mellitus não insulino-dependente e doença cerebrovascular , (Puig,de et.al. 2007, Nutrition, Metabolism & Cardiovascular Diseases, 17, 409e414).

[0098] A gota é um tipo de artrite causada pelo acúmulo de ácido úrico nas articulações (os lugares onde se juntam dois ou mais ossos). Quando os níveis de ácido úrico no corpo são elevados (denominado hiperuricemia), cristais de ácido úrico podem se formar no fluido em torno das articulações. Se houver excesso de ácido úrico em torno das articulações, pode ocorrer inflamação (uma condição na qual uma parte do seu corpo pode se tornar avermelhada, inchada e dolorida), o que pode causar um ataque de gota (Tausche AK, et al., 2006, Der Internist, 47(5):: 509-20).

Síndrome de Lesch-Nyhan

[0099] A síndrome de Lesch-Nyhan, um distúrbio hereditário extremamente raro, também está associada com níveis muito elevados de ácido úrico no soro. A espasticidade, movimentos involuntários e retardo cognitivo, bem como manifestações da gota, são vistos em casos desta síndrome. (Nyhan W.L, 2005, Journal of the History of the Neurosciences, 14(1): 1-10).

Formação de pedra de ácido úrico.

[00100] Níveis de saturação de ácido úrico no sangue podem resultar em uma forma de pedras nos rins quando o urato se cristaliza no rim. Pedras de ácido úrico, que se formam na ausência de causas secundárias, tais como como diarreia crônica, exercício vigoroso, desidratação e carga de proteínas animais, são consideradas secundária à obesidade e resistência à insulina vista na síndrome metabólica. Aumento de ácido na alimentação leva a um aumento na produção endógena do ácido no fígado e músculos, o que, por sua vez, leva a um aumento da carga de ácido para os rins. Esta carga é administrada de forma pior por causa infiltração de gordura renal e resistência à insulina, que são consideradas prejudiciais à excreção de amónia (um tampão). A urina é, portanto, bastante ácida, e o ácido úrico se torna insolúvel, cristaliza e são formadas pedras. Além disso, promotores e fatores de inibição naturalmente presentes podem ser afetados. Isto explica a alta prevalência de pedras de ácido úrico e urina anormalmente ácida vistos em pacientes com diabetes tipo 2. Cristais de ácido úrico também podem promover a formação de pedras de oxalato de cálcio, atuando como "cristais de semente" (nucleação heterogênea). (Pak C.Y, et al. 2008; The Journal of Urology, 180(3): 813-9).

[00101] Foi mostrado que a hiperuricemia está associada à lesão hepática histológica em pacientes com doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Sua relevância clínica decorre do fato de que uma proporção considerável de sujeitos (20 - 30%) desenvolve uma condição, nomeadamente uma esteatohepatite não alcoólica (NASH), que é uma doença hepática potencialmente progressiva, levando à doença hepática de fase final e carcinoma hepatocelular. Além disso, a NAFLD é considerada a manifestação hepática da resistência à insulina (IR) e, portanto, é fortemente associada com a síndrome metabólica, obesidade, diabetes tipo II, dislipidemia e hipertensão arterial, representando também, juntamente com as condições citadas acima, um fator de risco cardiovascular independente. Nesses pacientes. (Doença hepática não alcoólica (DHGNA) é uma das principais causas de doença hepática crônica no mundo. (S. Petta, etal., Aliment Pharmacol Ther, 2011, 34:757-766).

Ácido Úrico e a Doença de Parkinson (DP)

[00102] A DP é a segunda condição neurodegenerativa relacionada à idade mais comum nos Estados Unidos, afetando aproximadamente 1% da população com idade superior a 65 na América do Norte e Europa. Os sintomas da DP são caracterizados pela perda de neurônios dopaminérgicos na substância negra. Embora seja considerado que a causa desta perda é multifatorial, há evidências que apontam o estresse oxidativo como um fator na neurodegeneração. Pesquisadores sugeriram que níveis elevados de ácido úrico produzem um efeito protetor contra o desenvolvimento e progressão da DP com base nestes princípios. Há também evidências que apontam a associação entre dieta com alto índice de urato e uma diminuição da incidência de DP. Deve notar-se que existem inúmeros riscos associados a dietas de hiperuricemia, tais como a gota, derrame e hipertensão. Neste ponto, os dados que temos sugerem uma associação, mas não uma relação causal, entre urato sérico baixo e a incidência da DP. Esta associação é intrigante, já que há a possibilidade de que, no futuro, os médicos possam modificar o risco do paciente para DP, sugerindo mudanças na dieta ou usando suplemento farmacológico. Em geral, pesquisas recentes apontam uma relação inversa entre os níveis de urato sérico e a incidência da DP em homens. (Mandei, et al., 2009, Practical Neurology, p21).

Ferritina

[00103] A ferritina é uma proteína onipresente e especializada envolvida no armazenamento intracelular de ferro; ela também está presente no soro e outros fluidos biológicos, apesar de seus processos de secreção ainda não serem claros. Ferritina é abordagem conservada e única da natureza ao uso seguro e controlado de ferro e oxigênio, com a síntese de proteína em animais ajustada por sequências genéticas de DNA e mRNA duplas que respondem seletivamente a ferro ou oxidantes e ligam a ferritina a proteínas do metabolismo do ferro, oxigênio e antioxidante. (Cairo, et al. 2008, Journal of Autoimmunity 30, 84-89).

[00104] A ferritina é uma proteína chave do metabolismo de ferro que é capaz de sequestrar grandes quantidades de ferro e, portanto, tem a dupla função de desintoxicação de ferro e de armazenamento de ferro. A importância destas funções é sublinhada por sua distribuição ubíqua em muitas espécies de vida. As propriedades estruturais das ferritinas são, em grande parte, conservadas de bactérias para o homem, apesar de seu papel na regulação do tráfego de ferro variar substancialmente.

[00105] A síntese de ferritina é regulada por citocinas (TNFα e IL-1 a) em vários níveis (transcricional pós-transcricional e traducionais) durante o desenvolvimento, diferenciação celular, proliferação e inflamação. A resposta celular à infecção por citocinas estimula a expressão de genes de ferritina. (Hintze KJ, et al., 2006, Cell Mol Life Sci; 63:591-600).

[00106] Foi relatado que a ferritina apresenta diferentes atividades imunológicas, incluindo a ligação a linfócitos T, supressão do tipo retardado de hipersensibilidade, supressão da produção de anticorpos pelos linfócitos B e diminuição da fagocitose de granulócitos (Marikina, K, et al., 999, Blood, 4 83:737—43).

[00107] A ferritina e a homeostase de ferro foram implicadas na patogênese de muitas doenças, incluindo doenças envolvidas na aquisição, transporte e armazenamento (hemocromatose primária) de ferro, bem como na aterosclerose, doença de Parkinson, doença de Alzheimer e síndrome das pernas inquietas. (Zandman, et al., 2007, Autoimmunity Reviews, 6:457-463).

[00108] Mutações no gene da ferritina causam a síndrome de hiperferritinemia-catarata hereditária e neuroferritinopatia. A hiperferritinemia está associado com inflamação, infecções e neoplasias malignas. Hormônio da tireóide, insulina e fator de crescimento semelhante à insulina 1 também foram implicados na regulação da ferritina no nível de mRNA (Beaumont C, et al., 1995, NatGenet, 11:444-6; Nishiya K, et al.,, 1997, Clin Exp Rheumatol, 15:39^14).

[00109] Algumas evidências apontam para a importância da hiperferritinemia em RA, MS, e tireoidite, ferritina e homeostase de ferro foram implicadas na patogênese de muitas doenças, incluindo doenças envolvidas na aquisição, transporte e armazenamento de ferro (hemocromatose primária), bem como na aterosclerose (You S.A, et al., 2005, Clin Chim Acta, 357:1-16). Mutações genéticas da região de IRE de ferritina, bem como nas regiões de codificação de ferritina, causam algumas doenças humanas hereditárias. Mutações de IRE de ferritina causam a síndrome de hiperferritinemia-catarata hereditária (Beaumont C, et al., 1997; Nat Genet, 11:444-446), que é uma doença autossômica dominante caracterizada por níveis elevados de ferritina e catarata bilateral de início precoce.

[00110] a neuroferritinopatia, um distúrbio de movimento predominantemente hereditário caracterizado por diminuição dos níveis de ferritina e deposição anormal de ferritina e ferro no cérebro, é causada por uma mutação no terminal C do gene L da ferritina (Curtis ARJ, et al., 2001, Nat Gene/,28:350-4). Foi demonstrado que descobriu-se que a concentração de ferritina sérica está relacionada com a dislipidemia, a hipertensão e a adiposidade abdominal. A ferritina também é conhecida por ser um marcador de inflamação e aumento de doença cardiovascular, e foi sugerido que os níveis de ferritina sérica podem ser usados como um marcador de risco para doença aterosclerótica (Faruk, et al. 2006; Endocrine Abstracts, 11 P323).

[00111] A talassemia continuará sendo um dos principais problema de saúde pelo menos pelas próximas décadas, particularmente nos países em desenvolvimento. Embora a sobrevivência dos talassêmicos esteja aumentando constantemente, a prevalência de complicações devido a ferritina sérica estar alta. Essa sobrecarga é a complicação limitadora de vida comumente encontrada em talassêmicos (Wangruangsattit S, et al.„ 1999, J. Med Assoc Thai, 82(1):: 74 -76). O ferro que excede a capacidade de ligação do ferro da transferrina aparece no plasma como ferro não ligado à transferrina, que é altamente tóxico para os tecidos. O acúmulo de ferro resulta em disfunção progressiva do coração, fígado e glândulas endócrinas (Hathirat P., et al., 1001, Hematol, 2001,38:360-366).

[00112] A ferritina pode atuar como um regulador imune por ligação a subconjuntos de linfócitos e contrastes de células mieloides com sua função bem conhecida como uma proteína de armazenamento intracelular de ferro. Ferritina, que, por conseguinte, pode ser não somente a proteína de armazenamento de ferro principal, mas também um regulador importante do sistema imunológico, desempenha um possível papel em doenças autoimunes. (Recalcati, etal., 2008, Journal of Autoimmunity, 30:84-89).

[00113] A ferritina foi sugerida como um antígeno circulante associado ao tumor na doença de Hodgkin, Bieber, C. P., et al., 1973, Nat. Cancer Inst. Monogr. 36:147-157; Jones, P. A, et al. (1973, Brit. J. Cancer 27, 212217).

[00114] Embora a ferritina intracelular ocorra em uma ampla variedade de tecidos e o seu nível no soro de humanos saudáveis seja baixo, ela foi encontrada em quantidades elevadas no soro de pacientes com doença de Hodgkin, bem como em outras neoplasias malignas e doenças com envolvimento hepático (Aungst, C. W., 1968, J.Lab. Clin. Med., 71:517-522; Reissman, K. R., 1956, J. Clin. Invest. 35:588-595).

[00115] Antígenos, que existem em alta frequência nos tecidos tumorais dos pacientes com doença de Hodgkin, foram obtidos de forma relativamente concentrada por procedimentos de cromatografia de gel. Purificação e análise adicionais desses antígenos (Eshhar, et al., 1974, Proc. Nat. Acad. Sei. EUA, 71(10):3956-3960), demonstraram que o antígeno da mobilidade eletroforética rápido (antígeno F) é ferritina de tecido normal.

Lipoproteína A (Lp (a))

[00116] Descrita pela primeira vez em 1963 (Berg , 1963, Acta Pathol Microbiol Scand,59:369-82), que a Lp(a) é uma partícula de LDL modificada. Berg e seus colegas na Suécia mais tarde determinaram que indivíduos com altos níveis de Lp(a) tinham incidência significativamente maior de ataques cardíacos do que uma população com baixa Lp(a). Estudos que detectaram a Lp(a) em lesões ateroscleróticas e enxertos de veia forneceram a evidência mais forte de um envolvimento direto de Lp(a) no local da lesão (Walton, KW, et al.,, 1981, Atherosclerosis, 20:323-46).

[00117] Um estudo seminal (Rath et al., Arteriosclerosis, 1989, 9:579592) mostra que a Lp(a) se acumula na parede arterial, em parte sob a forma de partículas semelhante à lipoproteína, contribuindo, portanto, para a formação de placa bacteriana e doença coronariana. Outros pesquisadores verificaram os resultados (Metso, et al.,, 1990, European Heart Journal, 11 (Supplement E), 190-195). Esta observação foi fortemente apoiada e ao longo dos anos foi ampliada para incluir a maior incidência de infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral e oclusão da artéria retiniana.

[00118] A Lp(a) consiste em uma fração semelhante à lipoproteína de baixa densidade (LDL) e uma glicoproteína exclusiva, lipoproteína Apo A1 (Apo A1)), que é ligada covalentemente ao componente apolipoproteína B- 100 (ApoB-100) de LDL por uma ligação dissulfeto simples. Muitos estudos sugerem um papel para a Lp(a) no processo de disfunção endotelial. Com efeito, mostrou-se que a Lp(a) aumenta tanto a expressão de moléculas de adesão em células endoteliais (CE), como a atividade quimiotáctica de monócitos e leucócitos nestas células.

[00119] A Lp(a) é estruturalmente semelhante à LDL na composição de proteínas e de lipídios, mas é distinguível de LDL pela presença da fração de glicoproteína xclusiva chamada lipoproteína Apo (Apo A). Foi determinado que as partículas de Lp(a) contêm Apo (a) e lipoproteína Apo B-100 (apo B), na razão molar de 1:1 (Albers, et al., 1996, J Lipid Res,37:192-6). Na partícula de Lp(a), Apo (a) está ligada covalentemente a Apo (b) por uma ponte dissulfeto simples. Identificaram-se os resíduos de cisteína em cada molécula que estão envolvidos na ligação dissulfeto (Callow MJ, et al., 1995, J Biol Chem,270:23914-7).

[00120] Lp(a) só está presente nos seres humanos, macacos do velho mundo e o porco-espinho (Lawn RM, et al., 1996, Clin Genet, 49:167-74). O nível de Lp(a) é determinado geneticamente e, quando elevado, não pode ser reduzido por alterações na ingestão de alimentos ou pela maioria dos agentes redutores de colesterol. (Kostner GM, et al., 1989, Circulation, 8:1313-9).

[00121] Pacientes diabéticos têm valores mais elevados de Lp(a) do que pessoas não diabéticas (HaffnerSM, et al., 1992, 49:116-20). Mostrou- se que a Lp(a) está inversamente associada ao risco de diabetes tipo II, independente de outros fatores de risco, incluindo o IMC, HbA1c ou triglicerideos. (Samia Mora, et al., 2010, Clinical Chemistry, 56:8 12521260).

[00122] Não só a Lp(a) pode ser depositada na parede arterial, mas uma das possibilidades mais atraentes apoiadas por evidência experimental é que a Lp(a) interfere com a fibrinólise de coágulos de sangue. A evidência para a última ideia vem de observações de que a Lp(a) é capaz de competir com o plasminogênio por locais de ligação em fibrina. (Rahman MN, et al., 2002, Biochemistry, 41:1149-55). Ao fazê-lo, a Lp(a) concebivelmente poderia aumentar o tempo de sobrevida de um coágulo em uma ferida e contribuir para o espessamento da artéria afetada. Enquanto anexados à matriz extracelular, os restos do coágulo podem atrair macrófagos, que são conhecidos por serem uma fonte de fatores que sinalizam células arteriais para crescer e se dividir, em essência, promovendo o processo aterosclerótico. Além destas ideias, a Lp(a) pode ser considerada um doador muito eficaz de colesterol para as células, talvez superior a LDL e, portanto, capaz de acelerar a formação de células espumosas no local da lesão.

[00123] Apesar do seu reconhecimento como um fator de risco para doença vascular, o papel da Lp(a) em aterogênese permanece mal compreendido. Foi postulado que, devido à sua dualidade de estrutura, a Lp(a) pode fornecer uma ligação funcional entre os processos de aterosclerose e trombose. Neste modelo, a Lp(a) provavelmente possui propriedades ateroscleróticas (devido à sua semelhança com LDL) e pró- trombóticas (baseadas na homologia entre Apo (A) e plasminogênio). Claramente, a Apo (A) possui propriedades únicas que contribuem para o processo de aterogênese que são independentes de sua semelhança com o plasminogênio (Koschinsky, ML, et al.,, 2004, Curr Opin üpidol, 15:16774).

[00124] A Lp(a) está associada ao aumento do risco de doenças cardiovasculares (DCV), incluindo doença cardíaca coronariana (CHD) e aterosclerose (Anuurad, E, et al., 2006, Clin Lab Med., 26:751 - 772). Além disso, como com a maioria dos fatores de risco genéticos que iniciam o risco ao nascimento, é um fator de risco de DCV mais forte em pacientes jovens (menos de 60 anos de idade) e naqueles com níveis muito elevados de Lp(a) e com fatores adicionais de risco aterogênico, particularmente LDL colesterol elevado (Tsimikas, S., et al.,, 2005, N Engl J Med., 353:46 - 57). A Lp(a) está presente na parede arterial nos locais das lesões ateroscleróticas e que se acumula nesses locais até certo ponto que é proporcional aos níveis de Lp(a) de plasma. A Lp(a) é preferencialmente retida neste meio, provavelmente em virtude da sua capacidade de se ligar a um número de componentes da parede arterial, incluindo o fibrinogênio/fibrina, fibronectina e glicosaminoglicano (Koschinsky ML, et al.,, 2004, Curr OpinLipidol, 15:167-74). A localização da Lp(a) dentro da parede arterial sugere um papel causai direto da Lp(a) na iniciação e/ou progressão da aterosclerose.

[00125] A Lp(a) foi implicada na regulação da expressão de 1-inibidor de ativador de plasminogênio em células endoteliais e foi mostrado que ela inibe a fibrinólise de superfície de células endoteliais para atenuar a ligação do plasminogênio a plaquetas e para se ligar aos componentes de matriz de placa. Estudos de autópsia em humanos documentaram a presença de Lp(a) em placas ateroscleróticas da aorta e coronárias e uma localização aparente com fibrinogênio (Hoefler G, 1998, Arteriosclerosis, 8(4):: 398- 401).

[00126] Níveis de Lp(a) são frequentemente elevados em pacientes que recebem tratamento de hemodiálise crônica do estágio final da doença renal (Quashing T, et al.,,2001, Am J Kid Dis, 38, suppl 1, 514-9). Foi sugerido que o rim tem um papel importante no metabolismo de Lp(a). Na insuficiência renal, há uma diminuição no catabolismo de Lp(a) ou aumento da produção de Lp(a) pelo fígado. Em pacientes em hemodiálise, foi mostrado que a Lp(a) têm as características de um reagente de fase aguda (Maeda S, et al., 1989, Atherosclerosis, 78:145-50). Pacientes com doença arterial periférica (PAD) mostraram concentrações de soro medianas significativamente mais elevadas de Lp(a) do que controles (Dieplinger, et al. 2007, Clinical Chemistry, 53:7 1298-1305).

[00127] Concentração de Lp(a) e razão entre Apo B e ApoAI em 55 sujeitos do Sul da Ásia com acidente vascular cerebral isquêmico e 85 controles. A análise dos dados mostrou que ambos os parâmetros foram associados com acidente vascular cerebral isquêmico (Sharobeem, K. M, et al.,, 2007, Int. J.Clin. Pract, 61(11): 1824-1828).

[00128] Níveis de Lp(a) em 100 pacientes com acidente vascular cerebral isquêmico agudo e 100 sujeitos saudáveis foram comparados, e observou-se que até mesmo uma ligeira elevação na concentração plasmática de Lp(a) foi fortemente e independentemente associada com acidente vascular cerebral isquêmico em homens, mas não em mulheres. (Rigal, M, et al., 2007, J. Neurol. Sei., 252(1 ):39-44).

[00129] O papel da Lp(a) no infarto cerebral silencioso (SCI) foi investigado em pacientes com insuficiência renal crônica que foram mantidos em hemodiálise. Encontrou-se que a Lp(a) estava significativamente associada à presença de SCI (Fukunaga, N, et al., 2008, Metabolism, 57(10): 1323-1327).

[00130] Em um estudo de homocisteína e Lp(a) no acidente vascular cerebral isquêmico, foi analisada a concentração plasmática de Lp(a) em pacientes com acidente vascular cerebral isquêmico e controles, e encontrou-se que esses dois parâmetros são independentemente associados com o acidente vascular cerebral isquêmico com uma correlação positiva significativa entre eles (Dhamija, R. K, et al., 2009, J. Neurol. Sei., 281(1-2):64-68). Níveis aumentados de Lp(a) em fases agudas, tais como após cirurgia, inflamação, gravidez, infarto do miocárdio, psoríase, gota e outros, foram relatados. A Lp(a) foi mostrada como sendo um potente quimioatrativo para monócitos periféricos humanos. (Syrovets, et al., 1997, Blood, 90:2027-2036).

[00131] Pacientes com hipotireoidismo têm níveis plasmáticos de Lp(a) aumentados, enquanto pacientes com hipertireoidismo os têm diminuídos, em comparação aos controles com eutireoidismo. O hormônio do crescimento humano aumenta drasticamente o Lp(a) em até 120% (Laron Z, et al., 1997, J Pediatr Endocr Met, 10:143-149).

[00132] Pacientes com muitas formas de doença renal exibem elevações impressionantes dos níveis plasmáticos de Lp(a). Em pacientes com fenótipo de doença renal em estágio final (ESRD), Lp(a) e de Apo(a) são preditores do grau de aterosclerose pré-clínica e eventos ateroscleróticos. As elevações de Lp(a) em ESRD e síndrome nefrótica não são apenas devidas à superprodução de Lp(a) pelo fígado, mas também à excreção diminuída de fragmentos de Apo(a) na urina (Kostner e Kostner, 2002, CurrOpin Lipidol, 13:391-396).

[00133] Há uma associação altamente significativa entre Lp(a) e a presença de progressão do câncer de mama, e a determinação de Lp(a) sérico pode proporcionar uma ajuda nos pacientes com câncer de mama para fins diagnósticos e acompanhamento da doença (Kõkoglu E, et al., 1994, Cancer Biochem Biophys., 1994, 4(2): 133-6.)

[00134] Estudos recentes sugeriram uma ligaram entre Lp(a) e fosfolipídios oxidados. Especificamente, foi mostrado que no plasma humano, os fosfolipídios oxidados são preferencialmente associados ao Lp(a) em comparação ao LDL livre (Tsimikas S, et al., 2003, J Am Coll Cardiol, 41:360-70).

[00135] A maioria dos pacientes com síndrome nefrótica têm concentrações de Lp(a) que são substancialmente elevadas em comparação aos controles da mesma isoforma da Apo(a). Devido ao fato de as concentrações de Lp(a) serem substancialmente reduzidas quando é induzida a remissão da síndrome nefrótica, é provável que a síndrome nefrótica resulte diretamente na elevação de Lp(a) por um mecanismo ainda não conhecido. Os altos níveis de Lp(a) na síndrome nefrótica provocariam lesão glomerular, bem como aumentariam o risco de aterosclerose e eventos trombóticos associados a este distúrbio (Wanner. L, et al., 1993, Ann Intern Med, 119:263-269).

[00136] Lp(a)é comumente relatado como estando significativamente aumentado em pacientes com câncer em comparação aos controles saudáveis, independentemente da fonte e grau de malignidade do tumor. Pacientes que sofrem de câncer de locais e origem diferentes exibem concentrações plasmáticas de Lp(a) até duas vezes mais elevadas. Ps pacientes com leucemia mieloide aguda têm níveis de Lp(a) muito altos (Wright, et al., 1989, IntJ Cancer, 43:241-244).

[00137] Atualmente, o único método, embora caro e invasivo, de valor comprovado é a LDL-aférese (Armstrong VW, et al., 1989, Eur. J. Clin. Invest., 19:235-40), assemelhando-se à diálise, para eliminar a lipoproteína de baixa densidade de partícula contendo colesterol (LDL) da corrente sanguínea. O que deve ser reservado para indivíduos com elevações extremas de Lp(a). O procedimento leva de 2-4 horas e deve ser repetido todas as semanas para evitar que os níveis de LDL se acumulem e causem doença cardiovascular. É um procedimento caro, limitando seu uso para casos graves de hiperlipidemia. Infelizmente, não há terapia com drogas que esteja atualmente disponível para diminuir especificamente os níveis de Lp(a) sem afetar outras lipoproteínas.

APO A-1 e APO B

[00138] Embora pense-se que o colesterol LDL (LDL-C) esteja associado a um maior risco de doença coronariana, outras lipoproteínas e seus constituintes, Apo lipoproteínas, podem desempenhar um papel importante na aterosclerose.

[00139] Níveis elevados de Apo lipoproteína (Apo) B, um constituinte das lipoproteínas aterogênicas, e níveis reduzidos de Apo A-1, um componente do HDL anti-aterogênico, estão associados ao aumento de eventos cardíacos. Apo B, Apo A-1 e a razão Apo B/Apo A-l foram relatadas como melhores preditores de eventos cardiovasculares do que o LDL-C e eles retêm ainda seu poder preditivo em pacientes que recebem a terapia modificadora de lipídios. A medição dessas Apo lipoproteínas melhoraria a predição do risco cardiovascular. (Jungner, et al., Journal of Internal Medicine, 2004, 255:188-205).

[00140] Os níveis de Apo A-1 estão fortemente correlacionados àqueles do HDL-C, e a expressão de Apo A-1 pode ser grandemente responsável pela determinação do nível plasmático de HDL (XV International Symposium on Atherosclerosis, 14 - 18 de junho, 2009, Boston, MA, EUA). A Apo A-1 também atua como um cofator para a lecitina colesterol acil transferase (LCAT) [Phillips MC, et.al (1998; Atherosclerosis 137(Suppl): S13-7), que é importante na remoção do excesso de colesterol dos tecidos e na incorporação deste no HDL para o transporte inverso para o fígado. Além disso, a Apo A-1 é o ligante para a proteína cassette de ligação ao ATP (ABC), ABCA1, e, consequentemente, está envolvida no procedimento de encurtamento pelo qual o excesso de colesterol nas células periféricas é externalizado para o HDL. (Oram JF, et al., 2000, J Biol Chem, 275 34508-11), para inverter ainda mais o transporte de colesterol tanto direta quanto indiretamente através do LDL de volta para o fígado (Tailleux A, et al., 2002, Atherosclerosis, 164: 1-13).

[00141] O estudo Prospective Epidemiological Study of Myocardial Infarction (PRIME) examinou a associação entre a incidência de CHD e vários parâmetros relacionado ao HDL, incluindo o HDL-C em si, Apo A-1, HDL A-1 e HDL A-1: A-11 (Luc G, et al., 2002, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 22:1155-61). Todos os quatro parâmetros estiveram relacionados ao risco de CHD; no entanto, a Apo A-1 foi o preditor mais forte. Além disso, o uso de Apo- A-1 para prever CAD foi confirmado por outros estudos (Garfagnini A, et al., 1995, Eur Heart J, 16:465-70).

Lipoproteína APO-B

[143] A lipoproteína Apo-B existe em duas formas: Apo B-48 e Apo B-100. A Apo B-48 é sintetizada no intestino, onde é complexos com triglicerídios dietários e colesterol livre absorvido a partir do lúmen intestinal para formar partículas de quilomícron. Estas são metabolizadas na circulação e no fígado. A Apo B-100 é sintetizada no fígado e está presente em partículas LDL, IDL e VLDL. Apenas uma molécula de Apo B está presente em cada uma destas partículas de lipoproteína (Elovson J, et al., 1998, J LipidRes, 29:1461-73). O valor total da Apo-B indica o número total de lipoproteínas potencialmente aterogênicas (Walldius G, et al., 2001, Lancet, 2001, 358:2026-33). A Apo-B é essencial na ligação das partículas LDL ao receptor LDL, permitindo que as células internalizem o LDL absorvam assim o colesterol. Um excesso de partículas com Apo-B é um gatilho primordial no processo aterogênico.

[144] A concentração de partículas Apo-B de plasma é altamente correlacioada ao nível de colesterol não-HDL (C-não-HDL), definido como TC menos HDL-C (BalIantyneCM, et al., 2001, Am J Cardiol, 88:265-9). Como o HDL exerce, segundo se sabe, função protetora contra riscos cardiovasculares, o C-não-HDL reflete a fração de colesterol sanguíneo que não está contida em lipoproteínas ateroprotetoras. Portanto, o C-não-HDL já foi reconhecido pelas diretrizes do Conselho Nacional de Tratamento Adulto e Programa Educativo do Colesterol (NCEP ATP III) como um alvo para terapia hipolipemiantes (Circulation, 2002, 106:3143-421). Já constatou-se que o C-não-HDL prevê infarto do miocárdio não-fatal (Ml) e angina pectoris. No entanto, descobriu-se que a Apo-B oferece previsão de risco melhor que o C-não-HDL (Sniderman AD, et al., 2003, Lancet, 361:777-80). O uso de Apo-B e Apo A-l, expresso como a razão Apo-B/Apo A-1, parece uma maneira muito eficaz de caracterizar risco cardiovascular em quaisquer pacientes, independentemente de suas anormalidades lipoproteicas.

[145] Pacientes com diabetes ou síndrome metabólica podem ter níveis normais de LDL-C, mas possuírem aspectos do perfil liídico aterogênico (Sniderman AD, et al., 1001, Ann Intern Med, 135:447-59), e tais indivíduos frequentemente apresentam elevada razão Apo-B/Apo A-l, o que é um forte indicador de risco cardiovascular (Walldius G, et al, 2002, Diabetes, 51(Suppl.):A20).

Hormônio da Paratireoide (PTH)

[146] Doenças Renais Crônicas (DRC) são um problema de saúde significativo e crescente caracterizado pela perda gradual da função renal e as muitas complicações subsequentes. Como resultado da perda das funções excretora, reguladora e endócrina do rim, pacientes que sofrem de DRC experimentam múltiplas complicações médicas tais como anormalidade eletrolíticas, anemia, hiperparatireoidismo secundário (SHPT) e osteodistrofia renal. Além disso, estes pacientes têm, tipicamente, outras complicações médicas sérias, tais como calcificação vascular e do tecido mole, doenças cardiovasculares, infecção e desnutrição. (Horl WH, 2004, Nephrol Dial Transplant, 19 suppl 5, V2-V8.) Como resultado, pacientes com DRC encontram-se em risco de maior morbidade e mortalidade. A mortalidade cardiovascular é 15 vezes maior em pacientes que se tratam com diálise que na população em geral. (Sarnak, MJ, 2000, Am J Kidney Dis, 35(suppl 1 ):S117-S131).

[147] As DRC são definidas tanto como lesão renal como taxa de filtração glomerular (TFG) <60 mL/min/1.73 m2) por > 3 meses; lesão renal é definida como anormalidades patológicas ou marcadores de danos, incluindo anormalidades em exames de sangue ou urina ou estudos de imagem (National guidelines, 2002, Am JKidney Dis, 39, (suppl 1): S1- S266).

[148] SHPT (hipotireoidismo secundário) ocorre mais comumente nas DRC, como resultado de metabolismo mineral alterado, caracterizado por hiperfosfatemia, deficiência de vitamina D e hipocalcemia. Estas anormalidades minerais começam a se tornar evidentes nos estágios iniciais das DRC, uma vez que a taxa de filtração glomerular (TFG) se encontre abaixo de 60 mL/min/1.73 m2 (DRC estágio 3) e continuajm a progredir conforme declina a função renal. O SHPT também pode resultar de causas não-renais de deficiência de vitamina D, tais como pouca exposição ao sol, diminuição da ingestão alimentar, má absorção e idade avançada (Tomasello, S, 2008, Diabetes Spectrum, 21(1):19). Estes pacientes com SHPT podem sentir dormência, formigamento, cãibras, convulsões por conta de resultante hipocalcemia e hipofosfatemia, o que geralmente resulta na produção de PTH, para restaurar a homeostase destes minerais.

[149] O paratormônio (PTH) é um polipeptídeo contendo 84 aminoácidos que é secretado pelas glândulas paratireoides, após a clivagem do hormônio pre-pro-paratireoide (115 aminoácidos) para pro- paratormônio (90 aminoácidos) até o hormônio maduro. Os principais órgãos alvejados pela ação do paratormônio (PTH) são os rins, intestino e sistema esquelético.

[150] A reposta primária, por parte do rim, ao paratormônio (PTH) é aumentar a reabsorção renal do cálcio a e excreção de fosfato. No rim, o paratormônio (PTH) bloqueia a reabsorção de fosfato no túbulo proximal ao mesmo tempo em que promove a reabsorção do cálcio.

[151] Uma importante função do paratormônio (PTH) é a conversão da 25-hidroxivitamina D para seu metabólito mais ativo, 1,25- diidroxivitamina D3, mediante a ativação da enzima 1-hidroxilase nos túbulos proximais do rim (Haussler, MR., 1998, J Bone Min Res, 13:325349).

[152] A inibição da liberação de paratormônio (PTH) ocorre principalmente por efeito direto do cálcio a nível da glândula paratireoide. Embora ainda não suficientemente esclarecido, a 1,25-(OH)diidroxivitamina D3 parece também exercer um leve efeito inibitório sobre a glândula paratireoide. A função renal declinante conduz a uma deficiência de vitamina D ativada e aumento na excreção de fósforo. Ambas as mudanças estimulam um aumento na síntese de PTH e na secreção.

[153] A vitamina D3 desempenha um papel vital na regulação da liberação e síntese de PTH. Mediante a estimulação de VDR paratireoide, ela regula para baixo a produção de PTH. A vitamina D3 também diminui o PTH indiretamente estimulando VDRs nos intestinos, aumentando assim a absorção de cálcio e cálcio sérico ((Brown AJ, 1999, Am J Physiol, 277:157-175; Tomasello, S, 2008, Diabetes Spectrum, 21:1:19).

[154] Conforme declina a função renal, há diminuição de atividade renal da 1a-hidroxilase responsável pela reação de hidroxilação final na síntese de calcitriol. Em caso de agravamento das DRC, o rim tonar-se menor capaz de desempenhar 1a-hidroxilação e, consequentemente, níveis de vitamina D3 ativos tornam-se deficientes e aumentam concentrações de PTH (Malluche, HH, 2002, Kidney Int, 62:367- 374).

[155] A severidade do hiperparatireoidismo em insuficiência renal crônica é dependente de GFR, raça, e associada a doenças cardiovasculares (De Boer IH, et al., 2002, J Am Soc Nephrol, 13:27622769). Concentrações de paratormônio (PTH) começam a aumentar em pacientes no estágio 2 e tornam-se elevadas em muitos pacientes no estágio 3, bem como na maioria dos pacientes nas fases 4 e 5 que não estão recebendo tratamento. As alterações histológicas são observadas em biópsias ósseas, mesmo entre pacientes do estágio 3 e 4 com modesta elevação de PTH. Em pacientes tratados com diálise, SHPT e enfermidade óssea agravam-se e tornam-se mais difíceis de tratar conforme aumenta a duração da diálise.

[156] Nível de fosfato elevado é comum em pacientes com DRC devido à sua habilidade comprometida de excretar fósforo por via renal. Retenção de fósforo e o resultante aumento das concentrações de fósforo sérico suprimem diretamente a produção de calcitrol. Além disso, a retração em massa renal resulta em ativação reduzida de vitamina D para calcitriol. A absorção de cálcio a partir do trato gastrointestinal (TGI) é reduzida, resultando em hipocalcemia. Tais desarranjos são inter-relacionados e podem, ou individual ou simultaneamente, estimular a síntese e/ou secreção de PTH pela glândula paratireoide. A produção continuamente aumentada de PTH conduz, subsequentemente, à hiperplasia da glândula paratireoide. Eventualmente, a glândula pode tornar-se autônoma na secreção de PTH e menos propensa a responder à terapia.

Metabolismo Fosfórico

[157] Conforme a taxa de filtração glomerular (TFG) declina a < 60 ml / min/1,73 m2, altera-se a excreção de fósforo no néfron. Embora metade dos néfrons não esteja empenhada em excretar fósforo, os néfrons restantes compensam mediante hiper-excreção da carga diária de fósforo para manter concentrações normais de fósforo sérico. A compensação geralmente pode continuar até que a TGF declina a < 25-40 ml/min/1.73 m2. Com DRC progressivas, quando os néfrons restantes já não conseguem excretar a carga fosfórica, resulta hiperfosfatemia.

[158] Cálcio, um cátion divalente, e fósforo, um ânion monovalente, têm alta afinidade de ligação um com o outro. No soro, conforme aumenta a concentração de um ou ambos os íons, há um risco elevado de formação de ligações iônicas, criando um complexo insolúvel Este processo pode conduzir à calcificação esquelética extra e, potencialmente, a calcifilaxia ou doença cardíaca ((Ketteler, et al., Pediatr Nephrol, 2011, 26:7-18). Além disso, a precipitação pode diminuir as concentrações de cálcio sérico, estimulando ainda mais a secreção de PTH. De fato, a produção e a secreção de PTH podem ser estimuladas por hipocalcemia, hiperfosfatemia e deficiência de vitamina D. (Friedman EA, 2005, Kidney Int, 65(Suppl.):): S1-S7).

[159] Porque o PTH é majoritariamente responsável pela prevenção de hipocalcemia, ele estimula osteoclastas a lisar ossos, liberando assim cálcio no soro. Sob condições normais, há homeostase envolvendo atividades osteoclásticas e atividades osteoblásticas sintéticas. O SHPT produz um desequilíbrio dessas atividades, levando à desagregação óssea intensificada que dá ensejo à osteodistrofia renal (Tomasello, S, 2008, Diabetes Spectrum, 21:1:19).

Calcificação

[160] Além de defeitos e doenças minerais ósseas, alterações no cálcio, fósforo, vitamina D e PTH causam outras consequências deletérias em pacientes com DRC. Calcificação esquelética extra (principalmente calcificação cardiovascular) tem sido documentada em pacientes com DRC (GoodmanWG, 2000, N Engl J Med, 342:1478-1483) e está diretamente correlacionada a um aumento em mortalidade e morbidade cardiovascular. Pacientes com DRC, especialmente em estágio final da doença renal (EFDR), têm um risco aumentado de de morbidade e mortalidade cardiovasculares

[161] Pesquisas já mostraram que a causa principal de morte em pacientes com doenças renais em estágio final (EFDR) são doenças cardiovasculares (U.S. RenalData System: USRDS 2006 Annual Data Report NIDDK 2006). Através de um estudo de pacientes em hemodiálise, descobriu-se que mesmo quando estratificados segundo variáveis como sexo, raça e presença de diabetes, pacientes tratados com diálise ainda tinham uma taxa de mortalidade cardiovascular quase 30 vezes maior do que a população em geral (Block, GA, 2004, J Am SocNephrol, 15:2208- 2218).

[162] O equilíbrio de cálcio, fósforo, vitamina D e PTH intacto (l-PTH) é complexo e inter-relacionado. Os pacientes devem aderir às restrições alimentares, terapias de diálise e complicados regimes medicamentosos. Esses fatores criam barreiras para o alcance e a manutenção do controle de SHPT. Um estudo de cerca de 200 pacientes crônicos tratados em ambulatório revelou que < 10% dos pacientes podiam ser simultaneamente mantidos dentro do intervalo-alvo dos parâmetros acima. (Tomasello, S, 2004, Dialysis Transplant, 33:236-242).

eTFG

[163] A taxa de filtração glomerular (TFG, também referida como “e- TFG” or “eTFG") é considerada por profissionais como a melhor medida de função renal. Conhecer a TGF de um indivíduo auxilia o profissional médico a entender o estágio da doença renal. Médicos usarão esta informação para planejar o tratamento de seus pacientes.

[164] A variação proporcional na TGF é maior em populações com a doença (por um fator de cerca de 10, de 6 a 60 ml por minuto por 1.73 mls/min/1.73m2) do que em populações sem a doença (por um fator de cerca de 3, de 60 a 180 ml por minuto por 1.73 mls/min/1.73m2). Como resultado, maior proporção da variação nos níveis de creatinina sérica entre pacientes com a doença resulta da variação na TFG, não de uma variação nos outros determinantes, em comparação a pessoas saudáveis.

[165] A TGF avalia a função excretora dos rins e é considerada como padrão-ouro na avaliação da função renal. Segundo as diretrizes da National Kidney Foundation (Fundação Nacional do Rim) para doença renal crônica, uma TFG excedendo 90 mL/min/1.73m2is considerada normal; uma TFG de 60 a 89 é ligeiramente diminuída; uma TFG de 30 a 59 é moderadamente diminuída e pode significar "insuficiência renal"; uma TFG de 15 a 29ml_/min/1,73m2 é considerada como severamente diminuída e uma TFG de menos de 15 é considerada como disfunção renal. Função renal diminuída é associada a muitas complicações, tais como hipertensão, anemia, desnutrição, doença óssea e uma diminuição da qualidade de vida (National KidneyFoundation, 2000, Am J Kidney Dis,2:39, (suppl 1):: SI- 266).

Antígeno Prostático Específico (PSA)

[166] O câncer de próstata é o câncer mais comumente diagnosticado em homens e uma das principais causas de morte por câncer nos Estados Unidos e na Europa (Boyle P, et al.,2005, Ann Oncol, 16:481- 488).

[167] O antígeno prostático específico (PSA) é uma proteína produzida pelas células da glândula prostática. O exame de PSA mede o nível de PSA no sangue. É normal que homens tenham baixos níveis de PSA em seu sangue; no entanto, câncer de próstata ou condições benignas (não cancerosas) podem aumentar níveis de PSA. Conforme envelhecem os homens, tornam-se mais frequentes tanto condições benignas de próstata como câncer de próstata. As condições benignas de próstata mais comuns são a prostatite (inflamação da próstata) e hiperplasia prostática benigna (HPB) (aumento da próstata). Não há provas de que a prostatite ou a HPB causem câncer, mas é possível que um homem padeça de uma destas condições, ou de ambas, e desenvolva em seguida câncer de próstata também. Um nível de PSA de 4.0 ng/mL é tido como um corte adequado para seleção de homens para biópsia prostática (Catalona WJ, 1994, JUrol; 152: 2037- 42). Um relatório recente da Prostate Cancer Prevention Trial revelou que o câncer de próstata ocorre em homens com baixos níveis de PSA (Thompson IM, et al., 2004, N Engl J Med, 350:223946), sugerindo que não há PSA "normal" e sim um continuum de risco de câncer de próstata baseado no nível de PSA de um indivíduo (Thompson IM, 2005, JAMA, 294:66 - 70).

[168] A expressão do receptor de Vitamina é inversamente associada à progressão do câncer de próstata: níveis de VDT em tecido de tumor podem influir no prognóstico de câncer de próstata (Nutrition and Health: Vitamin D Edited by: M.F. Holick, 2010, PP 797; Springer ScienceBusiness Media, LLC).

[169] Muitos estudos epidemiológicos indicam que a deficiência de vitamina D aumenta o risco de câncer de próstata e que níveis mais elevados de vitamina D estão associados a melhor prognóstico e resultados melhorados (Young, et al., 2011, Advances inPreventive Medicine-, Volume, Article ID 281863). O resultado dos ensaios clínicos utilizando a vitamina D, calcitriol ou vários análogos de vitamina D em homens com câncer de próstata têm sido, até o presente momento, decepcionantes.

Enzimas hepáticas (AST, ALP, ALP e Bilirrubina)

[170] Anormalidades em exames de função hepática são níveis elevados de exames bioquímicos, incluindo aspartato aminotransferase (AST) ou soro glutâmico oxalacetato-transaminase [SGOT]), alanina aminotransferase (ALT) ou soro glutâmico pirúvico transaminase [SGPT]), fosfatase alcalina, bilirrubina e albumina.

[171] Lesões celulares no fígado causam liberação de AST e ALT. A ALT é uma indicação mais específica de doença hepática, ao passo que elevações de AST podem ser secundárias a danos em outros órgãos (coração, rim, cérebro, intestino, placenta).

[172] A ALT pode ser encontrada no citosol do fígado, ao passo que duas isoenzimas de AST encontram-se localizadas no citosol e na mitocôndria, respectivamente. Ambas as enzimas são liberadas no sangue em quantidades crescentes quando a membrana da célula hepática é danificada. Não é necessária necrose das células hepáticas para a liberação da aminotransferase. Com efeito, há uma correlação pobre entre o grau de dano de célula hepática e o nível de aminotransferase. A ALT é encontrada em baixas concentrações em tecidos outros que não o fígado, de modo que é frequentemente tida como específica para ferimento hepatocelular. No entanto, essa especificidade não é absoluta, porque as elevações de ALT em soro podem ocorrer em condições não-hepáticas, como doenças miopáticas. Necrose de células hepáticas é indicada por níveis de ALT muito elevados (Tung, BY, 1999, ClinLiver Dis, 3:585-601).

[173] A AST é também abundantemente expressa em diversos tecidos não-hepáticos incluindo o coração, o músculo esqueletal e o sangue. No entanto, tanto a razão e a absoluta elevação da AST e da ALT podem fornecer importantes informações acerca da extensão e etiologia da doença hepática.

[174] Embora nenhum exame bioquímico de função hepática seja específico o suficiente para permitir um diagnóstico definitivo em pacientes com doenças hepáticas, vem nos impressionando a consistência com que a atividade do soro glutâmico oxalacetato-transaminase (SGOT) excede a atividade do soro glutâmico pirúvico transaminase (SGPT) em pacientes com doenças hepáticas alcoólicas.

[175] Doenças hepáticas gordurosas não alcoólicas (NAFLD) referem-se a um vasto leque de doenças hepáticas variando do simples fígado gorduroso (esteatose), a esteatopatitie não alcoólica (NASH) à cirrose (dano avançado e irreversível do fígado). Todas as etapas de NAFLD têm em comum o acúmulo de gordura (infiltração gordurosa) nas células hepáticas (hepatócitos). Em caso de NASH, o acúmulo de gordura está associado a cambiantes graus de inflamação (hepatite) e dano (fibrose) do fígado.

[176] Demonstrou-se (Cohen et al., 1979, Digestive Diseases and Sciences, 24(11) que a razão SGOT/SGPT é significativamente elevada em pacientes com hepatite alcoólica e cirrose (2.85 +- 0.2) comparados a pacientes com cirrose pós-necrótica (1.74 + or - 0.2), hepatite crônica (1.3 + or - 0.17), icterícia obstrutiva (0.81 + or - 0.06) e hepatite virai (0.74 + or - 0.07). Uma razão SGOT/SGPT maior que 2 é altamente indicativa de hepatite alcoólica e cirrose. Ela ocorre em 70 % destes pacientes quando comparados a 26 % de pacientes com cirrose pós-necrótica, 8 % com hepatite crônica, 4 % com hepatite virai e nenhum com icterícia obstrutiva. (Sorbi, et al., 1999, Am J Gastroenterol, 94:1018 -1022).

[177] Relatou-se já que a razão AST/ALT é um parâmetro útil para sustentar um diagnóstico de hepatite alcoólica (Finlayson, et al., 1993, Bailliere’s ClinGastroenterol, 7:627- 640; 40: Harrison, DJ, et al., Bailliere’s Clin Gastroenterol, 1993,7:641-62).

[178] Um nível AST mais de duas vezes maior que o nível de ALT já foi relatado em 83 % de pacientes hospitalizados por hepatite alcoólica (Pinto, HC, et al., 1996, Dig Dis Sci, 1996, 41:172-9; Bird GLA, et a/.,1993, Bailliere’s Clin Gastroenterol,1997, 663-82).

[179] A razão AST para ALT parece ser um indicativo útil para a distinção entre esteato-hepatite não-alcoólica (NASH) e doenças hepáticas alcoólicas. Análises de subconjuntos de pacientes com NASH revelaram razões AST/ALT médias de 0.7, 0.9 e 1.4 para indivíduos sem fibrose, com ligeira fibrose ou cirrose, respectivamente (Sorbii. D, et.al., 1999, The American Journal of Gastroenterology, 94(4)).

Fosfatase Alcalina

[180] A fosfatase alcalina (FAL) está associada às membranas celulares, e níveis elevados podem ser causados por lesão no fígado, ossos, rins, intestino, placenta ou leucócitos. No fígado, a enzima está localizada nos canalículos biliares. Obstrução biliar induz a síntese aumentada de fosfatase alcalina e derramamentos na circulação. Elevações nos níveis de FAL sérica originam predominantemente de duas fontes: fígado e osso. Ele também está presente nos rins, intestino delgado e placenta. Os níveis variam com a idade. Adolescentes de rápido crescimento podem ter níveis séricos de FAL duas vezes maior que os de adultos saudáveis como resultado de desgaste ósseo. Igualmente, os níveis séricos de FAL normalmente aumentam gradualmente entre os 40 e 65 anos de idade, particularmente em mulheres. Mulheres no terceiro trimestre de gravidez apresentam nível sérico de FAL elevado por conta do influxo de FAL placental em seu sangue. Em indivíduos com tipo sanguíneo O ou B, níveis séricos FAL podem aumentar após a ingestão de uma refeição gordurosa; por conta de um influxo de FAL intestinal existem também relatórios de uma elevação benigna familiar em níveis de FAL sérica por conta dos níveis aumentados de FAL intestinal (Wolf PL, 1978, Arch. Pathol. Lab. Med, 102:497-501).

Bilirrubina

[181] O corpo humano produz cerca de 4 mg / kg de bilirrubina por dia a partir do metabolismo do heme. Cerca de 80 % da unidade de heme deriva do catabolismo de hemácias, os 20 % resultando de eritropoiese ineficaz e destruição de mioglobina muscular e citocromos. A bilirrubina é transportada do plasma para o fígado para conjugação e excreção.

[182] Hiperbilirrubinemia pode significar doença hepatobiliar ou hemólise. Graus suaves de hiperbilirrubinemia indireta podem ser encontrados em até 10% dos pacientes assintomáticos com a síndrome de Gilbert (Lidofsky, SD,Jaundice, In: Feldman M, et al., Sleisenger and Fordtran's Gastrointestinal and Liver Disease, 8th ed. Philadelphia, Pa.: Saunders Elsevier, 2006).

[183] Antes da idade de 30, hepatite provoca 75% de hiperbilirrubinemia. Após os 60 anos de idade, a obstrução hepática extra causa 50% de hiperbilirrubinemia (por exemplo, os cálculos biliares ou câncer de pâncreas).

[184] Disfunções intra-hepáticas podem conduzir à hiperbilirrubinemia não-conjugada ou conjugada. O nível de bilirrubina conjugada (direta) é frequentemente elevado pelo álcool, pela hepatite infecciosa, reações medicamentosas ou doenças autoimunes. Disfunções pós-hepáticas podem também causar hiperbilirrubinemia conjugada. Formação de cálculo renal é o processo pós-hepático mais comum e benigno a causar icterícia; no entanto, o diagnóstico diferencial pode também incluir sérias condições tais como infeção do trato biliar, pancreatite e formações malignas (S.P.Roche, et al., 2004, AmFam Physician, 2004, 69:299-304). Obstrução biliar é uma condição em que aumentam os níveis sanguíneos de bilirrubina conjugada.

[185] Sintomas de anemia hemolítica são similares a outras formas de anemia (exaustão e falta de fôlego), mas, além disso, a decomposição de hemácias conduz à icterícia e aumenta o risco de complicações particulares a longo prazo, tais como cálculos renais e hipertensão pulmonar.

[186] Icterícia hemolítica pode conduzir a uma produção aumentada de bilirrubina. Neste caso, a bilirrubina é conjugada e excretada normalmente, mas o mecanismo de conjugação torna-se sobrecarregado, e uma quantidade anormalmente alta de bilirrubina não-conjugada é encontrada no sangue.

[187] A síndrome de Gilbert é um distúrbio comum, benigno,hereditário que afeta aproximadamente 5 por cento da população dos EUA. (Schreiber R.A., et al., 2001, Pediatr Rev, 22:219-26). Normalmente, a doença resulta em uma ligeira diminuição da atividade da enzima glucuronosiltransferase, causando um aumento na fração indireta da bilirrubina sérica. Síndrome de Gilbert é geralmente um achado acidental que ocorre durante exames rotineiros de fígado, quando o nível de bilirrubina encontra-se ligeiramente aumentado e todos os outros valores de função hepática encontram-se dentro de limites normais. Icterícia e elevação adicional do nível de bilirrubina podem ocorrer durante períodos de estresse, jejum ou doença.

[188] A Síndrome Crigler-Najjar, ou SCN, é um distúrbio raro que afeta o metabolismo da bilirrubina, uma substância química formada a partir da destruição do sangue. A disfunção resulta em uma forma hereditária de icterícia não-hemolítica, que resulta em níveis elevados de bilirrubina não- conjugada e sempre conduz a dano cerebral em crianças. Esta síndrome é dividida em tipo I e tipo II, sendo este último, por vezes, referido como Síndrome de Arias. Estes dois tipos, juntamente com a síndrome Dubin- Johnson e a síndrome de Rotor, compõem os cinco defeitos hereditários conhecidos no metabolismo da bilirrubina. Ao contrário da síndrome de Gilbert, apenas algumas centenas de casos de SCN são conhecidas (Jansen PL, et al., 1999, European Journal of Pediatrics, 158, Suppl 2, S89-S94, 0154).

[189] A síndrome de Dubin-Johnson é um distúrbio recessivo autossômico que provoca um aumento da bilirrubina conjugada no soro sem elevação de enzimas hepáticas (ALT, AST). Esta condição está associada com um defeito na capacidade dos hepatócitos de secretar bilirrubina conjugada na bile, e é semelhante à síndrome de Rotor. É geralmente assintomática, mas pode ser diagnosticada na infância precoce, com base em exames laboratoriais.

[190] (Síndrome de Rotor, também chamada de hiperbilirrubinemia do tipo Rotor, é um distúrbio autossômico recessivo da bilirrubina raro, relativamente benigno e de origem desconhecida. Trata-se de uma desordem distinta; no entanto, bem como a Síndrome de Dubin-Johnson, ambas as doenças causam um aumento na bilirrubina conjugada (Wolkoff, AW, et al., 1976, The American Journal of Medicine,60(2):173-179).

Doenças da Tireoide

[191] De acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS), distúrbios da tireoide têm a segunda maior prevalência entre todas as disfunções endócrinas, logo atrás da diabete mellitus. Mais de 665 milhões de pessoas sofrem de bócio endêmico ou outras doenças da tireoide em todo o mundo; 1,5 bilhões de pessoas encontram-se em risco de desenvolver uma condição de deficiência de iodo. Dados estatísticos mostram que o incremento anual no número de casos de doença da tireoide é de 5%. Hipotireoidismo é um distúrbio endócrino comum resultante da deficiência de hormônio da tireoide. Em todo o mundo, a deficiência de iodo segue sendo a principal causa de hipotiroidismo. Nos Estados Unidos e em outras áreas de ingestão de iodo adequada, a doença autoimune da tireoide (doença de Hashimoto) é a causa mais comum de hipotireoidismo; no mundo todo, a deficiência de iodo continua sendo a principal causa. Entre todos os métodos disponíveis de tratamento de doenças da glândula tireoide (tireoide), a preferência é dada para a terapia de reposição hormonal (TRH), tratamento com drogas antitireoidianas, intervenção cirúrgica (tireoidectomia) e terapia de iodo radioativo. Estima-se que cerca de 20 milhões de Americanos tenham alguma espécie de disfunção da tireoide, de acordo com a American Thyroid Association. Uma em cada oito mulheres irá desenvolver um distúrbio da tireoide ao longo da vida. Levotiroxina, uma forma sintética do hormônio tireoidiano, é a 4a droga mais vendida nos EUA. 13 dos 50 medicamentos mais vendidos estão direta ou indiretamente relacionados ao hipotireoidismo.

[192] Todos estes padrões de tratamento têm, caracteristicamente, um número considerável de defeitos e contraindicações. Em particular, a terapia de reposição hormonal exige administração vitalícia de preparações do hormônio da tireoide e, como resultado, a própria tireoide do paciente eventualmente para de funcionar, tornando o paciente "cliente vitalício" das companhias farmacêuticas. Além disso, a administração de preparações de hormônio tireoidiano tem uma série de contraindicações, e múltiplos efeitos adversos, incluindo taquicardia, arritmia cardíaca, reações alérgicas, excitação, insônia, etc. acompanham este tratamento.

[193] O objetivo da terapia antitireoidina praticada hoje é a supressão completa ou parcial da função tireoidiana do próprio paciente, após o que o paciente é colocado em terapia de reposição hormonal. Os efeitos adversos da terapia tirostática incluem a inibição de hematopoiese, náusea, vômitos, danificação da função hepática, reações alérgicas, etc.

[194] A intervenção cirúrgica é, quase sempre, acompanhada por complicações responsáveis por uma taxa de desabilidade de quase 10 %. Outras desvantagens significativas da ablação da tireoide (ou remoção de uma parte da tireoide) incluem a administração vitalícia de hormônios e um alto risco de danos às glândulas paratireoides durante a cirurgia. A medicina de hoje é incapaz de oferecer quaisquer alternativas a pacientes que sofrem de distúrbios da tireoide, e prefere ignorar as desvantagens das normas e regimes de tratamento correntes.

Regulamento da tireoide

[195] A tireoide é um órgão em forma de borboleta situado no pescoço, logo abaixo do pomo de Adão. Composta de pequenos sacos, esta glândula é preenchida com uma proteína rica em iodo chamada tiroglobulina, juntamente com os hormônios tireóideos tiroxina (T4) e pequenas quantidades de triiodotironina (T3).

[196] A principal função desses dois hormônios é regular o metabolismo, controlando a a velocidade em que o corpo converte oxigênio e calorias em energia. Em verdade, a velocidade metabólica de cada célula de cada célula do corpo é regulada pelos hormônios tireoides, principalmente T3.(Videla LA, Fernandez V,Tapia G, Varela P. Thyroid hormonecalorigenesis and mitochondrial redoxsignaling: up regulation of gene expression. Front Biosci. 2007 Jan 1; 12:1220-8).

[197] Em indivíduos saudáveis, a glândula é imperceptível ao toque. Uma glândula tireoide visivelmente expandida é designada como um bócio. Historicamente, bócios foram causados com mais frequência por falta de iodo na alimentação. No entanto, em países onde o sal é iodado, bócios derivados de deficiência de iodo são raros.

[198] A produção de T4 e T3 na glândula tireoide é regulada pelo hipotálamo e pela glândula pituitária. Para assegurar níveis estáveis de hormônios da tireoide, o hipotálamos monitora níveis de hormônios tireoides circulantes e responde a níveis baixos liberando hormônios liberados tirotropina (TRH). Este TRH então estimula a pituitária a liberar hormônios estimulantes da tireoide (TSH). (Segerson TP, et.al, Science. 1987 Oct 2; 238(4823): 78-80; Dyess EM, et.al, Endocrinology. 1988 Nov; 123(5): 2291-7).

[199] Quando os níveis de hormônio da tireoide aumentam, a produção de TSH diminui, o que, por sua vez, ralenta a liberação de novos hormônios da glândula tireoide. Temperaturas frias também podem aumentar os níveis de TRH. Pensa-se que isto é um mecanismo intrínseca que ajuda a nos aquecer em temperaturas frias.

[200] Níveis elevados de cortisol, tais como os vistos durante estresse e em condições tais como a síndrome de Cushing, abaixam os níveis de TRH, TSH e também de hormônios da tireoide. (Roelfsema F, et.al, Eur J Endocrinol. 2009 Nov; 161(5): 695-703.

[201] A glândula tireoide precisa de iodo e aminoácido L-tirosina para produzir T4 e T3. Uma dieta deficiente em iodo pode limitar quanto T4 a glândula tireoide pode produzir e levar ao hipotireoidismo. (Angermayr L, et.al, CochraneDatabase Syst Rev. 2004;(2):: CD003819).

[202] T3 é a forma biologicamente ativa do hormônio tireoidiano. A maior parte de T3 é produzida nos tecidos periféricos pela conversão de T4 ao T3 por uma enzima dependente de selênio. Vários fatores, inclusive deficiências nutritivas, drogas e toxicidade química podem interferir com a conversão de T4 em T3. (Kelly GS. Altern Med Rev. 2000 Aug; 5(4): 30633).

[203] Outra enzima relacionada converte T4 em uma forma inativa de T3 chamada T3 reversa (rT3). T3 reversa não tem atividade de hormônio tireoidiano; em vez disso, ela bloqueia os receptores de hormônio tireoidiano na célula, impedindo a ação da T3 comum. (Kõhrle J. Acta Med Austríaca. 1996; 23(1-2): 17- 30).

[204] Noventa e nove por cento dos hormônios tiroideos em circulação está destinado a transportar proteínas, tornando-as metabolicamente inativas. O hormônio tiroideo "livre" restante, a maior parte do qual é T3, vincula-se a e ativa os receptores de hormônio tireoide, exercendo atividade biológica (Nussey S, et.al, Endocrinology: An Integrated Approach. Oxford: BIOS Scientific Publishers, 2001). Mudanças muito pequenas na quantidade de proteínas transportadoras afetarão a porcentagem de hormônios não-vinculados. Contraceptives orais, gravidez e terapia de reposição hormonal feminina convencional podem aumentar níveis de proteínas transportadoras de tireoide e, portanto, diminuir a quantidade do hormônio tireóideo livre disponível. (Arafah BM., Increased need for thyroxine in women with hypothyroidism during estrogen therapy. N Engl J Med. 2001 Jun 7; 344(23): 1743-9).

[205] A glândula tireoide é a maior glândula no pescoço. A única função da tiroide é produzir o hormônio da tireoide. Hormônios da tireoide regulam o metabolismo do nosso corpo e influem em praticamente todos os sistemas de órgãos no corpo. Eles comunicam aos órgãos a velocidade em que devem trabalhar. Hormônios tireoidianos também regulam o consumo de oxigênio do corpo e a produção de calor. Problemas de tireoide, tais como um tireoide hiperativa ou pouco ativa, podem afetar severamente o metabolismo (Franklyn, et al., 2005, Journal of Endocrinology, 187:1-15).

Hipertireoidismo

[206] Excesso de hormônio tireoidítico de uma glândula tireoide hiperativa chama-se hipertireoidismo, porque acelera o metabolismo do corpo. Este desequilíbrio hormonal ocorre em cerca de 1 por cento de todas as mulheres, que desenvolvem hipertireoidismo mais frequentemente do que homens. Uma das formas mais comuns de hipertireoidismo é conhecida como doença de Graves. Porque a glândula tireoide está produzindo hormônios demais no hipertireoidismo, o corpo desenvolve um estado metabólico aumentado, com muitos sistemas de corpo desenvolvendo funções anormais (Wondisford, Clinicai Management of Thyroid Diseases, ISBN: 978-1-4160-4745-2, Copyright © 2009 by Saunders. Philadelphia).

Hipotireoidismo

[207] Escassez de hormônio tireoidiano por parte de uma glândula tireoide pouco ativa chama-se hipotireoidismo. No hipotireoidismo, o metabolismo do corpo é ralentado. Existem várias causas para essa condição, a maioria das quais afeta a glândula diretamente tireoide, prejudicando sua capacidade de produzir hormônios suficientes. Mais raramente, pode haver um tumor da glândula pituitária, que bloqueia a hipófise de produzir TSH. Como conseqüência, a tireoide não consegue produzir uma quantidade suficiente de hormônios necessários à boa saúde. Independentemente de o problema ser causado por condições tiroideas ou pela glândula pituitária, o resultado é que a tireoide está produzindo hormônios de menos, tornando lentos muitos processos físicos e mentais. O corpo consome menos oxigênio e produz menos calor corporal.

[208] O hipotireoidismo é uma condição na qual a glândula tireoide não produz suficientes hormônios tireóideos, caracterizada por uma redução na velocidade metabólica. Os principais sintomas do hrpotireoídismo são: fadiga, fraqueza, aumento da sensibilidade ao frio, constipação, ganho de peso inexplicado, pele seca, perda de cabelo ou cabelo seco e crespo, cãibras musculares e depressão. No entanto, o desenvolvimento da maior parte dos sintomas leva anos. Quanto mais lento fica o metabolismo, mais óbvios se tornarão os sinais e sintomas. Se o hipotireoidismo não for tratado, os sinais e sintomas podem se tornar graves, como inchaço da glândula tireoide(bócio), processos mentais letais ou demência (Hypothyroidism. The American Thyroid Association). Hipotireoidismo subclínico, um distúrbio da tireoide freqüentemente subdiagnosticada, manifesta-se através de elevados níveis de TSH, T4 normal e T3 normal. Indivíduos com hipotireoidismo subclínico estão em maior risco para o desenvolvimento de hipotireoidismo evidente. (Garduno- Garcia et ai. Eur J Endocrinol. 2010 Aug; 163(2): 273-8.

[209] Estima-se que cerca de 20% das mulheres acima de 60 anos sofra de hipotireoidismo subclínico. (Wilson GR, et.al, Am Fam Physician. 2005 Oct 15; 72(8): 1517-24.

[210] Há evidência de que o intervalo referencial do exame de sangue TSH padrão pode fazer com que muitos casos de hipotiroidismo passem despercebidos. A maioria dos médicos aceita um intervalo referencial para TSH entre 0,45 e 4,5 μ IU/mL como indicativo de função tireoidiana normal. Contudo, na realidade, uma leitura de TSH de mais de 2.0 pode indicar níveis de hormônio da tireoide inferiores ao ideal. Vários níveis de TSH contidos no intervalo normal são associados a resultados de saúde adversos.

[211] TSH maior que 2.0 conduz a risco aumentado de 20 anos de hipotiroidismo e risco aumentado de doenças autoimunes da tireoide. TSH entre 2.0 e 4.0: hipercolesterolemia e níveis de colesterol diminuem em resposta à terapia de T4. Níveis de TSH maiores que 4.0: riscos maiores de doença cardíaca. ((Tunbridge WM, et.al, Clin Endocrinol (Oxf). 1977 Dec; 7(6): 481-93).

Consequências do hipotireoidismo

[212] Problemas gastrointestinais. O hipotireoidismo é uma causa comum de constipação. Constipação em hipotireoidismo pode resultar de motilidade reduzida dos intestinos. Em alguns casos, isto pode conduzir à obstrução intestinal ou tumefação anormal do cólon.36 O hipotireoidismo é também associado a motilidade reduzida no esôfago, o que causa dificuldades de deglutição, azia, indigestão, náusea e vômitos. Desconforto abdominal, flatulência e distensão abdominal ocorrem em indivíduos com pequeno crescimento bacteriano, secundário à digestão pobre. Depressão e transtornos psiquiátricos. Transtornos de pânico, depressão e alterações cognitivas são frequentemente associadas a distúrbios da tireoide. Hipotireoidismo é frequentemente diagnosticado erroneamente como depressão. (Hennessey JV, et.al, J FamPract. 2007 Aug; 56(8 Suppl Hot Topics): S31-9.

[213] Declínio cognitivo. Pacientes com baixa função tireóidea podem sofrer com lentidão de raciocínio, processamento ralentado de informações, dificuldade em recordar nomes, etc. Pacientes com hipotireoidismo subclínico apresentam sinais de memória operacional reduzida, e velocidade reduzida de processamento sensório e cognitivo. Uma avaliação de hormônios da tireoide conjuntamente ao TSH pode ajudar a evitar diagnóstico errôneo de depressão. (Kritz-Silverstein D, et.al, J Nutr Health Aging. 2009 Apr; 13(4): 317-21.

[214] Hipotireoidismo e hipotireoidismo subclínico são associados ao aumento dos níveis de colesterol no sangue, aumento da pressão arterial e aumento do risco de doenças cardiovasculares. Mesmo indivíduos com hipotiroidismo subclínico mostraram-se quase 3.4 vezes menos propensos a desenvolver doenças cardiovasculares que indivíduos com função tireóidea saudável. A hipertensão é relativamente comum entre os pacientes com hipotireoidismo. (Duntas LH, et.al, Semin Thromb Hemost. 2011 Feb; 37(1): 27-34.

[215] O risco de doenças cardiovasculares aumenta proporcionalmente ao aumento do TSH, mesmo em casos de hipotireoidismo subclínico. Hipotireoidismo causado por reações autoimunes é associado ao enrijecimento das veias sanguíneas. Reposição de hormônio tireoidiano pode retardar a progressão da doença coronariana, inibindo a progressão de placas. (Perk M, et.al, Can J Cardiol. 1997 Mar; 13(3): 273-6).

[216] Hipotireoidismo, tanto subclínico quanto observável, é associado a níveis aumentados de inflamação de menor grau, conforme indicado pela elevação da proteína C-reativa (CRP). (Christ-Crain M, et.al, Atherosclerosis. 2003 Feb; 166(2): 379-86).

[217] Síndrome Metabólica. Em um estudo com mais de 1500 indivíduos, pesquisadores descobriram que aqueles com síndrome metabólica tinham níveis de TSH significativamente mais elevados do ponto de vista estatístico (seja, menos produção de hormônio tireóideo) que indivíduos-controle saudáveis. Hipotireoidismo subclínico também foi correlacionado a níveis de triglicérides elevados e aumento da pressão arterial. Ligeiros aumentos no TSH podem colocar as pessoas em maior risco de síndrome metabólica. (Lai Y,Wet.al, Endocr J. Epub 2010 Nov 30).

[218] Problemas do sistema reprodutivo. Em mulheres, o hipotireoidismo é associado a irregularidades menstruais e infertilidade. O tratamento adequado pode restaurar um ciclo menstruai normal e melhorar sua fertilidade. (Poppe K, et.al, Clin Endocrinol (Oxf). 2007 Mar; 66(3): 309- 21.

[219] Fadiga e fraqueza. Os sintomas conhecidos e comuns de hipotireoidismo, tais como friagem, ganho de peso, parestesia (sensação de formigamento ou formicação na pele) e cólicas são frequentemente ausentes em pacientes de idade avançada se comparados a pacientes mais jovens, e fadiga e fraqueza são comuns em pacientes com hipotiroidismo. Estudos mostram que 90% das pessoas com hipotireoidismo estão produzindo anticorpos contra o tecido da tireoide. Isso faz com que o sistema imunológico ataque e destrua a tireoide, o que, ao longo do tempo, provoca um declínio nos níveis de hormônio tireoidiano. (Doucet J, et.al, J Am Geriatr Soc. 1994 Sep; 42(9): 984-6).

[220] Esta forma autoimune de hipotireoidismo é chamada de doença de Hashimoto. Já faz um século desde que o Dr. Hakaru Hashimoto (1881-1934) descreveu a condição da tiroide que ainda leva seu nome. Neste ínterim, esforços consideráveis já foram feitos no sentido de compreender a patogênese desta doença comum e, desde 1956, a tiroídite Hashimoto tornou-se arquétipo de distúrbios autoimunes da tireoide e autoprodução de anticorpos. Doenças autoimunes da tiroide (DAT) são as doenças endócrinas autoimunes mais comuns. A tireoidite de Hashimoto é a causa mais comum baixa função tireóidea nos Estados Unidos. O sistema imunológico do corpo ataca erroneamente o tecido da tireoide, prejudicando a habilidade de produzir hormônios. O hipotireoidismo causado pela doença de Hashimoto é tratado com agentes de substituição de hormônio tireoidiano.

[221] A doença de Hashimoto geralmente provoca hipotireoidismo, mas também pode desencadear sintomas de hipertireoidismo. (Lorini R, et.al, Pediatr Endocrinol Rev. 2003 Dec; 1 Suppl 2:205-11; discussion 211).

[222] O hipertireoidismo é geralmente causado pela doença de Graves, na qual se produzem anticorpos que se vinculam a receptores TSH na glândula tireóidea, estimulando uma produção excedente de hormônio tireóideo. A distinção entre tireoidite de Hashimoto e doença de Graves pode não ser tão importante quanto outrora se pensou. A doença de Hashimoto e a doença de Graves são diferentes expressões de um processo autoimune fundamentalmente parecido, e a aparência clínica reflete o espectro da resposta imunológica em um determinado paciente. As duas doenças podem sobrepor-se, provocando assim tanto estimulação quanto destruição da glândula tireóidea simultânea ou sequencialmente. (McLachlan SM, et.al, Endocrinology. 2007 Dec; 148(12): 5724-33).

[223] Certos clínicos considerem as duas condições como diferentes manifestações de uma mesma doença. Cerca de 4% dos pacientes com doença de Graves apresentaram alguns sintomas de tireoidite de Hashimoto durante a infância. (Wasniewska M, et.al, Horm Res Paediatr. 2010; 73(6): 473-6).

[224] Mulheres grávidas estão especialmente em risco quando se fala em hipotireoidismo. Durante a gravidez, a glândula tireoide produz mais hormônio da tireoide do que quando uma mulher não está grávida, e a glândula pode aumentar de tamanho ligeiramente. Disfunção da tireoide não controlada durante a gravidez pode causar parto prematuro, retardo mental e hemorragia no período pós-parto. É importante trabalhar em estreita colaboração com um médico para monitorar a função da tireoide durante a gravidez. (Costeira MJ, wet.al, tireoide. Setembro de 2010; 20(9): 995-1001).

[225] Testes para diagnosticar e monitorar o hipotireoidismo incluem: Hormônio estimulante da tireoide (TSH na sigla em inglês), T4 Total, T3 Total, T4 Livre (fT4), T3 Livre (ÍT3), T3 Reverso (rT3), anticorpos de tireoide peroxidase (Tope), anticorpo Tiroglobulina (TgAb) (Huber A, et.al, Endocr Rev. 2008; 29:697 - 725), e de acordo com um estudo, doença autoimune da tireoide (DAT) são as doenças autoimunes mais comuns nos EUA; (Jacobson DL, et.al, Clin Immunol Immunopathol. 1997; 84:223-243).

[226] Hashimoto é a mais comum desordem autoimune nos Estados Unidos, afetando entre 7-8% da população. Embora nem todas as pessoas com Hashimoto tenham sintomas de hipotireoidismo, descobriu-se que anticorpos de tireoide são marcadores para futuras doenças de tireoide. Não há nenhum tratamento eficaz para doença autoimune. Eles usam esteróides e outros medicamentos para suprimir o sistema imunológico em certas condições que tenham mais efeitos potencialmente prejudiciais, tais como esclerose múltipla, artrite reumatóide e doença de Crohn.

[227] Portanto, o padrão de atendimento para um paciente com Hashimoto é simplesmente esperar até que o sistema imunológico tenha destruído suficiente tecido tireoidiano para classificá-lo como hipotireoidiano e em seguida dar-lhes reposição hormonal da tireoide. Se começarem a apresentar outros sintomas comumente associados à sua condição, como depressão ou resistência à insulina, eles recebem drogas adicionais para esses problemas. O defeito óbvio desta abordagem é que ela não aborda a causa fundamental do problema, que é o sistema imunológico atacando a glândula tireoide.

[228] Tireoidite de Hashimoto é uma doença autoimune caracterizada por hipotireoidismo e crescimento assimétrico da tireoide. Testes sorológicos positivos de anticorpos anti-tireoperoxidase (anti-TPO) e/ou de anti-tireoglobulina (anti-TG) apoiam o diagnóstico clínico. Encefalopatia de Hashimoto é um raro distúrbio responsivo ao esteroide associado á tireoidite de Hashimoto, resultando em uma variedade de manifestações clínicas que variam de alterações comportamentais e cognitivas, míoclonias, convulsões, disfunção do trato piramidal, movimentos involuntários e sinais cerebelares a psicose e coma, com evolução progressiva e recidivante (Watemberg N, et.al, J Child Neurol 2006; 21:1-5; Alink J, et.al, Acta Paediatr 2008; 97:451-3).

[229] Encefalopatia de Hashimoto deve ser considerada em qualquer paciente que apresentar encefalopatia aguda ou sub aguda inexplicável, ou em pacientes com declínio cognitivo difuso, seguido por uma evolução progressiva ou remitente-recorrente. Medição dos anticorpos antitireoidianos é essencial para fazer o diagnóstico e deve ser realizada em qualquer paciente, mesmo quando os resultados do teste padrão de função tireoidiana achados estão normais.

[230] Um dos maiores desafios para aqueles com hipotireoidismo é que o padrão de atendimento para distúrbios da tireoide na medicina convencional e alternativa é irremediavelmente inadequado.

[231] O objetivo dos pacientes com distúrbios da tireoide e os profissionais que os tratam é encontrar uma substância única que irá reverter a evolução da doença. Para médicos, essa substância é hormônio tireoidiano sintético ou bioidêntico. Para os tipos de medicina alternativa, esta substância é o iodo

[232] Infelizmente, na maioria dos casos, nenhuma abordagem é eficaz. Os pacientes podem sentir alívio por um curto período de tempo, mas inevitavelmente os sintomas retornam ou a doença progride.

[233] Disfunções autoimunes de tireoide continuam a ser uma causa comum de hipertireoidismo e hipotireoidismo em mulheres grávidas. Doença de Graves corresponde a mais de 85% dos casos de hipertireoidismo, ao passo que a tireoidite de Hashimoto é a causa mais comum de hipotireoidismo.

[234] Doença de Graves é uma doença autoimune caracterizada por hipertireoidismo devido a circulação de auto-anticorpos. Imunoglobulina estimulante da tireoide (TSI na sigla em inglês) se vincula e ativa receptores de tirotropina, fazendo com que a glândula tireoide cresça e os folículos da tireoide aumentem a síntese de hormônio da tireoide. Doença de Graves, juntamente com tireoidite de Hashimoto, é classificada como umadesordem autoimune da tireoide .

[235] Em alguns pacientes, a doença de Graves representa uma parte de processos autoimunes mais extensos, levando à disfunção de múltiplos órgãos (por exemplo, síndrome poliglandular autoimune). Doença de Graves é associada com anemia perniciosa, vitiligo, diabetes mellitus tipo 1, insuficiência adrenal autoimune , esclerose sistêmica, miastenia gravis, síndrome de Sjõgren, artrite reumatóide, e lúpus eritematoso sistêmico. (Stassi, et al., 2002, Nature Reviews Immunology, 2:196).

[236] Mal funcionamento de tireoide pode levar a doença de Hashimoto, também conhecida como tireoidite linfocítica crônica, onde o sistema imunológico ataca a glândula tireoide. A inflamação resultante conduz frequentemente a uma glândula tireoide subativa (hipotireoidismo) ( Wondisford, Clinicai Management of Thyroid Diseases, ISBN: 978-1-41604745-2, Copyright © 2009 by Saunders. Philadelphia). Hormônio tireoidiano (TH) é fundamental no amadurecimento do coração durante o desenvolvimento, tendo uma função reparativa na vida adulta (Mourouzis. I, et al., 2011, Journal of Thyroid Research, Volume 2011, Article ID 958626).

[237] Alterações em parâmetros cardíacos encontrados em hipertireoidismo resultam da atividade do hormônio da tireoide em determinadas vias moleculares no coração e na vasculatura. O principal modo de ação é um efeito direto na transcrição de genes cardíacos específicos e não específicos. A segunda é uma ação não genômica em membranas plasmáticas, mitocôndrias e no retículo sarcoplasmático (Davis PJ, et al., 1996, Thyroid, 6:497-504).

[238] Diabetes e doenças da tireoide são ambos problemas endócrinos ou hormonais. Quando a doença da tireoide ocorre em pacientes com diabetes, pode ser que seja mais difícil controlar a glicose no sangue. Foi descoberto que quase um terço das pessoas com diabetes tipo 1 têm a doença da tireoide. Isto é porque diabetes tipo 1 e os distúrbios mais comuns da tireoide são doenças autoimunes, que são doenças em que o sistema imunológico ataca uma glândula ou órgão do corpo. Pessoas com uma doença autoimune são mais prováveis de desenvolver outras doenças autoimunes do que a população geral, tais como a doença de Addison, anemia perniciosa, artrite reumatoide ou lúpus.

[239] Transtornos de tireoide também são comuns na diabetes tipo II, porque ambas as doenças tendem a ocorrer com mais frequência conforme as pessoas vão envelhecendo (Wu. P., 2000, Clinicai Diabetes, Vol. 18, n° 1).

[240] Pacientes com Estágio Final de Doença Renal (EFDR) têm várias alterações do metabolismo do hormônio da tireoide na ausência de doença da tireoide simultâneas. Pacientes com EFRD podem ter uma maior frequência de bócio, nódulos de tireoide, câncer de tireoide e hipotireoidismo (E. M. Kaptein, 1996, Endocrine Reviews, 17(1 ):45-63).

Anemia e transtornos no hemograma

[241] Anemia, comumente definida como um nível de hemoglobina de <12 g/dL, ocorre em mais de 30% dos pacientes com câncer em algum momento, e sua incidência aumenta com tratamento e progressão da doença. (Littlewood.T. 2001: J Semin Oncol. 2001, Suppl 8, 49-53). Um alto predomínio da anemia foi identificado neste grupo de pacientes diabéticos tipo 2, anteriormente apresentados como tendo um alto predomínio da síndrome metabólica. (Ezenwaka, C.E., et al. 2008: Cardiovascular Diabetology 7:25) Foi demonstrado que pacientes com anemia crônica tinham uma potência cardíaca elevada e uma resistência vascular sistêmica baixa [Anand I.S, et alAQQS, Br Heart J, 70:357-362). A longo prazo, isso pode resultar em hipertrofia ventricular esquerda (HVE), que é um conhecido fator de risco para resultados adversos cardiovasculares e uma das maiores causas de mortalidade. (Sarnak MJ, et al. 2001, J Am Coll Cardiol 2001, 38:955-962).

[242] Anemia como um fator de risco para doenças cardiovasculares e mortalidade em diabetes: Além disso, anemia tem se manifestado como um fator de risco para os resultados adversos cardiovasculares em pacientes não-diabéticos e diabéticos e com doença renal crônica. Rampersad M, 2004, Anemia in diabetes. Acta Diabetol 41,Suppl 1, S13- S17).

[243] Quimioterapia mira diretamente nas células cancerosas, também afetando nossas células do sangue no processo -- hemácias, leucócitos, neutrófilos, monócitos e plaquetas. Além disso, o tratamento leva à Anemia e baixos níveis de Hemoglobina. Estas células são fabricadas na medula óssea. Durante a quimioterapia, a atividade da medula óssea pode ser reduzida, resultando numa baixa contagem de células de sangue no corpo. Leucócitos (WBC - white blood cells na sigla em inglês) geralmente caem a seu nivel mais baixo cerca de 7 a 14 dias após um tratamento de quimioterapia. Assim, pode haver uma necessidade de atrasar o tratamento de quimioterapia ou reduzir a sua dose de quimioterapia até que o nível dos leucócitos aumente e a possibilidade de infecção seja reduzida. Além disso, muitos medicamentos podem causar Neutropenia e baixar a contagem de plaquetas e causar a queda no nível de leucócitos.

[244] Há provas demonstrando relações significativas entre medições simultâneas de nível de hemoglobina e fadiga grave em pacientes com câncer. (Lind M, 2003: Br J Cancer 86:1243-1249).

[245] Anemia é um sintoma comum e uma complicação em pacientes com tumores sólidos malignos. (Means RT., et.al 1992, Blood 80: 1639-1647). Nesses pacientes, a anemia é multifatorial e pode ocorrer ou como um efeito direto do câncer (perda de sangue, infiltração de medula óssea ou deficiências nutricionais), baixos valores de leucócitos e contagem de plaquetas em consequência do tratamento do câncer em si, ou devido a fatores químicos produzidos pelo câncer (Mercadante S, et al. 2000; Cancer Treat Rev 26:303-311, 2000). Anemia pode levar a uma ampla gama de sintomas que poderiam afetar negativamente a capacidade funcional e o estado físico do paciente e posteriormente prejudicar a sua qualidade de vida. Notáveis entre estes sintomas são fadiga, dispneia, palpitações e outras complicações cardiovasculares, disfunção cognitiva, depressão, náuseas, disfunção sexual/reprodutiva e função imune prejudicada (Ludwig H, et al. Semin Oncol 28: 7-14, 2001).

[246] A incidência do tumor relacionado à anemia e seu valor clínico foi investigada em várias malignidades humanas, incluindo câncer de mama e câncer ginecológico (Barrett-Lee P, et al., Oncologist 2005 10: 743-757). O tratamento de anemia relacionada à tumor ou induzida por quimioterapia através de terapia suplementar com ferro ou fator de crescimento de eritropoietina vem aumentando as tentativas de melhorar a qualidade de vida dos pacientes com câncer (GM Rodgers, 2006, 20 de oncologia: 1215).

[247] Um nível de hemoglobina baixa no pré-tratamento demonstrou influenciar negativamente o resultado no tratamento de tumores do colo do útero, bexiga, cabeça e pescoço por radioterapia (Marchai C, et al.,2005, Cancer Radiother 9: 87-95; Kummel S, et al. 2006: Anticancer Res 26: 1707-1713).

[248] Câncer de mama é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo, e também representa uma das indicações mais comuns para quimioterapia. (Jemal A, et al. (2005: 2005. CA Cancer J Clin 55: 10-30). Os resultados do estudo sugerem que níveis reduzidos de hemoglobina com mielodisplasia resultante e menor oxigenação do tumor poderiam ter relação com os complexos mecanismos de resistência à quimioterapia no câncer de mama (Boehm D.U, et al. 2007, Anti cancer research 27: 12231226).

Mielodisplasia (MDS)

[249] Síndromes mielodisplásicas (SMD) (Phillips et al., 2005, Ann.Rev Med; 56: 1-16) representam uma coleção de distúrbios de células- tronco caracterizados pela hematopoiese comprometida, resultando em contagens baixas de sangue periférico. SMD estão associadas com a diminuição da produção e função anormal de células, diminuição de plaquetas e pacientes podendo ter sintomas que parecem ser desproporcionais ao nível de citopenia. Aumento da atividade intracelular da metaloproteinase da matriz em neutrófilos pode estar associada com demora na cicatrização da infecção sem neutropenia em Síndromes Mielodisplásicas. Zeidman A, et al. 2004, Ann. Hematol. 84:383-88).

[250] A maioria dos pacientes com SMD têm sintomas relacionados a anemia. No entanto, sangramento e infecção são as causas mais comuns de morte. A média de idade de diagnóstico é 72 e a sobrevida média é de 2,5 anos.

[251] SMD é pensado para ser clonal e são caracterizadas por baixas contagens de sangue e um risco de progressão para leucemia mielóide aguda (LMA). A taxa de incidência de SMD nos Estados Unidos de 2001 a 2003 foi de 3,3/100.000, e a sobrevida de três anos foi de 45% (Rollison DE, etal., 2008, Blood 112:45-52). A incidência aumenta com a idade, e a idade média do diagnóstico é de 70-75 anos. Os homens têm uma taxa de incidência significativamente maior do que as mulheres (4.5 versus 2,7 por 100.000 por ano).

[252] A maioria dos pacientes com SMD tem anemia macrocítica com ou sem citopenias adicionais no momento do diagnóstico. Diferentes diagnósticos incluem outras causas de anemia macrocítica, tais como deficiências de ácido fólico e vitamina B12, consumo de álcool e distúrbios da tireoide. O exame inicial de laboratório inclui a contagem de células do sangue, níveis séricos de ferritina, capacidade total de ligação do ferro, nível sérico de ferro, contagem de reticulócitos e níveis de vitamina B12 e ácido fólico de hemácias, hormônio estimulante da tireoide. Citopenias persistentes inexplicadas necessitam de mais investigação através de aspiração de medula óssea e biópsia, incluindo testes citogenéticos e manchas de ferro. Porque SMD compreende um variado grupo de transtornos com hematopoiese comprometida e prognóstico variável, não há nenhum método de rotina de cuidados para todos os pacientes com SMD.

[253] A terapia medicinal disponível hoje para tratar a SMD são lenalidomida, azacitidina, e decitabina são todos agentes aprovados pela FDA para tratar a SMD; no entanto, a única cura potencial para SMD ainda é o transplante de células-tronco, que é caro e tem muitos efeitos colaterais, havendo assim a necessidade de uma droga que seja segura e tenha efeitos colaterais mínimos.

Amplitude de Distribuição das Hemácias (RDW - Red Cell Distribution Width na sigla em inglês)

[254] Hemácias são produzidas na medula óssea. A amplitude de distribuição das hemácias (RDW) é uma medida da variação do volume das hemácias que é relatado como parte de um hemograma completo padrão. Geralmente as hemácias têm um tamanho padrão de aproximadamente 6-8 μm. Certos distúrbios, no entanto, causam uma significativa variação no tamanho da célula. Valores RDW mais elevados indicam maior variação no tamanho. Variedade de referência normal em hemácias humanas é 11,514,6%.

[255] No entando, mais recentemente, estudos populacionais têm identificado RDW como um prognosticador de todas as causas (Cavusoglu E, et.al, Int JCardiol 2010; 14:141-6.and cardiac mortality. (Lippi G, et.al, Clin Chem Lab Med 2009; 47:353-357).

[256] RDW também foi associado com piora na função renal (Lippi G, et.al, Scand J Clin Lab Invest 2008; 68:745) evidência de inflamação sistêmica, (Lippi G, et.al, Arch Pathol Lab Med 2009; 133:628-32) e resultados ruins em uma variedade de distúrbios, incluindo acidente vascular cerebral (Ani C, et.al, J Neurol Sci 2009; 277:103-8), hipertensão pulmonar, (CV Hampole, et.al, Am J Cardiol 2009; 104:868-72) e insuficiência cardíaca. (Al-Najjar Y, et.al, Eur J Heart Fail 2009; 11:115562).

[257] RDW tem um efeito sobre o envelhecimento, como observado no estudo onde comprimentos menores em telômeros foram observados, associados com aumento do (RDW), (Julia Kozlitina, et.al, PLOS ONE, December 2012, Volume 7,e51046).

[258] Um grupo italiano (Fiei et.al, J Cardiovasc Pharmacol, 2013; 62:388 - 393) avaliou os efeitos do Nebivolol e Metoprolol sobre o RDW em pacientes hipertensos. Após avaliação de referência, 72 pacientes foram aleatoriamente alocados para 5 mg/d de Nebivolol (n = 37, 20 homens) ou 100 mg/dia de Metoprolol (n = 35, 18 homens) e tratados por 6 meses. As mudanças no RDW foram mínimas com Nebivolol. Mudou de 15,8 para 15 e no grupo de Metoprolol de 15,6 a 15.45.

[259] Elevado nível de circulação de amplitude de distribuição das hemácias (RDW) pode refletir numa inflamação contínua e não existe uma terapia que corrija esta condição causada por esta condição de medula óssea.

Artrite Reumatóide

[260] Junto com tuberculose, tracoma e algumas outras doenças, as doenças reumáticas estão entre as aflições mais antigas conhecidas da humanidade. Importante, no último grupo, a artrite reumatóide (AR) aparece como talvez o primeiro a ser claramente descrito e documentado por médicos.

[261] A artrite reumatóide (AR) é uma doença autoimune que onera muito a saúde pública devido à sua preponderância, despesas diretas e indiretas, a natureza debilitante da doença, e o fato de que não há nenhuma cura. É uma doença a longo prazo que causa dor, rigidez, inchaço e limitação do movimento e função de muitas articulações, levando a perda substancial da mobilidade funcional devido à dor e destruição da articulação. A causa exata da AR é desconhecida, mas acredita-se que fatores genéticos, hormonais e ambientais estão envolvidos. (DiPiro J.T, et al. Farmacoterapia: Uma Abordagem Fisiopatológica. 7a Ed. New York: McGraw-Hill Medical; 2008:section 12).

[262] Apesar da incidência e a preponderância de AR em populações terem variado ao longo do tempo e notáveis oscilações existirem entre localizações geográficas, um estudo de 2010 pelo Colégio Americano de Reumatologia (ACR - American College of Rheumatology na sigla em inglês) descobriu que cerca de 1,5 milhões de americanos foram afetados pela AR em 2005, com uma taxa de incidência global de 40,9 por 100.000 habitantes. Cerca de 75% das pessoas afetadas são mulheres, e embora AR apareça mais frequentemente em pacientes entre as idades de 40 e 60 anos, o seu aparecimento pode ocorrer em qualquer idade. (American College of Rheumatology. Rheumatoid arthritis fact sheet. Publicado em agosto de 2012.) Com o envelhecimento da população, podemos esperar crescimento contínuo na preponderância de AR.

[263] Estimativas dos gastos diretos e indiretos com AR variam e dependem em parte da gravidade da doença. Pesquisas sugerem que a despesa média médica anual ajustada com AR em 2008 foi de aproximadamente $13.000 por paciente, incluindo uma despesa média de farmácia de $5825. Enquanto estes números são significativamente maiores do que o que seria registrado em um grupo de controle não-AR, a maioria dos pacientes com AR daquela época estava sendo tratada com drogas antirreumáticas modificadoras de doença (DMARDs - diseasemodifying anti-rheumatic drugs na sigla em inglês) convencionais (não biológicas). O uso de uma DMARD biológica pode mais do que dobrar os custos com farmácia; o custo anual de terapia para aqueles pacientes que usam antagonistas do fator de necrose tumoral (TNF - tumor necrosis factor na sigla em inglês) em 2008 variou de cerca de US $10.000 para $14.000 por ano, 5 no momento em que as despesas médicas diretas totais estimadas para AR foram de US $ 73,4 bilhões. Custos indiretos da doença incluem perda de produtividade devido à incapacidade de trabalho, aumento de morbidade e diminuição da expectativa de vida. Entre 25% e 50% de todos os pacientes com AR são incapazes de trabalhar no prazo de 20 anos do primeiro diagnóstico. (Mikuls T. Arthritis Rheum. 2010; 62(6); 1565-1567).

[264] AR é considerada uma condição sistêmica progressiva crônica que afeta principalmente as articulações diartrodiais. O modo mais comum (mas nunca universal) de início da doença envolve dor e inchaço simétricos nas pequenas articulações das mãos e dos pés, e seu início pode variar amplamente entre os indivíduos. AR pode começar com sintomas sistêmicos já conhecidos, incluindo fadiga, febre e perda de peso e lentamente ao longo de semanas e meses apresentar os sintomas mais clássicos de inchaço e dor nas articulações. Algumas manifestações extra- articulares comuns da AR incluem doença pulmonar parenquimatosa, síndrome de Sjõgren secundária, vasculite cutânea e pericardite. (Turesson C„ Ann Rheum Dis. 2003; 62: 722-727).

[265] A principal estratégia terapêutica é detectar os processos sinoviais relevantes e outros processos patogênicos no início de seu desenvolvimento, tratando rapidamente e agressivamente para prevenir um dano a longo prazo na articulação. Um painel metabólico completo e hemograma completo com biomarcadores diferenciais e inflamatórios (taxa de sedimentação de eritrócitos [ESR - erythrocyte sedimentation rate na sigla em inglês] / proteína C - reativa) muitas vezes são feitos, e muitas vezes seus resultados são elevados em pacientes com AR. Dois anticorpos, o fator reumatóide (FR) e o antipeptídeo citrulinado (anti-CCP) também aparecem elevados e acompanham o protocolo de diagnóstico; no entanto FR e a numa menor extensão o anti-CCP, às vezes são vistos em outras estados de doença ou mesmo em indivíduos saudáveis, e assim, podem não servir de marcadores específicos para AR em todos os casos. (Van Venrooij WJ, Ann N Y Acad Sei. 2008; 1143:268-285; Lee um, Clin Lab Sei. 2008; 21:15-18: Renaudineau Y, Autoimmunity. 2005; 38:11-16).

[266] Patogênese de RA também inclui um significativo e importante componente autoimune das populações de células T, que reconhecem a deleção clonal do auto-tecido no timo e daí em diante estão disponíveis para reagir com auto-peptídeos na articulação de AR. As células T auto reativas são conhecidas por persistir em indivíduos normais, e sob o estímulo adequado essas células reativas auto podem iniciar reações autoimunes. (Kreuwel HT, et.al, Curr Opin Immunol. 2001; 13:639-643.) Além disso, peptídeos patogênicos que têm uma sequência e/ou estrutura similar para abrigar peptídeos podem se manifestar na sinóvia de alguns pacientes de AR, onde eles são reconhecidos por células T auto reativas. (Prakken BJ, et.al, Curr Dir Autoimmun. 2001; 03:51-63).

[267] O mau funcionamento de células B também pode produzir anticorpos direcionados contra os peptídeos do hospedeiro. Por exemplo, FR, um anticorpo direcionado contra a porção Fc de moléculas de imunoglobulina G (IgG), está presente em cerca de dois terços dos pacientes com AR. (Lee AN, et.al, Clin Lab Sei. 2008; 21:15 - 18:

[268] Apesar de a presença de FR ser usada para fins de diagnóstico, 10% dos indivíduos saudáveis e muitos pacientes com outras doenças autoimunes, incluindo a síndrome de Sjõgren, lúpus eritematoso sistêmico (LES) e doença mista do tecido conectivo, também apresentam FR. Além disso, cerca de 70% dos pacientes com doença devido ao vírus da hepatite crônica C são positivos de FR. (Newkirk MM. J Rheumatol. 2002; 29:2034-2040; U Nowak, et.al, Clin Exp Immunol. 2007; 147: 324329).

[269] O protocolo para diagnosticar AR incluiu testes laboratoriais para FR por mais de 50 anos, mas a presença de FR como um marcador para AR em pacientes é considerado não confiável devido a sua presença na população em geral e em outras doenças autoimunes e infecciosas. Declínio nos níveis de FR pode ser útil, no entanto, como um indicador de resposta de um determinado paciente ao tratamento quando várias drogas modificadoras de doenças e antirreumáticas e outros produtos biológicos, tais como o Infliximab ou Rituximab são administradas.

[270] Autoanticorpos para proteínas citrulinadas fornecem um indicador diagnóstico útil e bastante específico para AR. O anticorpo anti- CCP está presente em aproximadamente 80% dos pacientes com AR e é bastante específico no distúrbio. (Van Venrooij WJ, et.al, Anti-CCP antibody, um marcador para a detecção precoce da artrite reumatóide. Ann N Y Acad Sei. 2008; 1143:268-285.); além disso, este autoanticorpo é detectado em menos de 1% dos indivíduos saudáveis; ele pode aparecer mesmo antes que a AR seja clinicamente evidente e detectável.

[271] O tratamento de AR evoluiu dramaticamente ao longo das últimas décadas. O principal objetivo do tratamento é controlar a dor e inflamação e, finalmente, retardar a progressão da destruição das articulações, com base numa abordagem passo-a-passo de cuidados. Os pacientes são inicialmente tratados com descanso, exercício, terapia ocupacional e física e drogas não-esteroides anti-inflamatórias. Esta etapa é seguida de um tratamento mais agressivo; Colégio Americano de Reumatologia recomenda o uso de DMARDs convencionais e/ou DMARDs biológicos (biológicos) dependendo da estágio/progressão da doença, eficácia do tratamento atual e presença de outras condições co-mórbidas, entre outros fatores. (Saag KG, et al; Arthritis Rheum. 2008; 59(6): 762784). Agentes terapêuticos em uso atual para o tratamento de pacientes com AR, auranofina, azatioprina, ouro de sódio Thiomalate, hidroxicloroquina, Leflunomida e metotrexato. Produtos biológicos utilizados são o anti-TNFs Adalimumab, Anakinra, Certolizumab, Etanercept, Golimumab, Infliximab e os não-TNFs Abatacept, Rituximab e Tocilizumab.

[272] Agentes terapêuticos em uso atual para o tratamento de pacientes com AR, incluem aqueles que miram no TNFa ou seu receptor, faltando uma eficácia universal, indicando uma heterogeneidade significativa nos processos patogênicos detalhados entre esses pacientes.

Malária

[273] Malária se mantém como uma das doenças mais mortais, prevalecentes e infecciosas em toda a África, Ásia e Américas. A Organização Mundial de Saúde (OMS) estima 154-289 milhões de casos de malária em 2010, com 660.000 mortes associadas (OMS, World Malaria Report 2012) A mortalidade é duas vezes maior quando incluindo casos de malária não diagnosticada ou não tratada (Murray, C. J.; et.al, Lancet 2012, 379, 413). Oitenta por cento dos casos estimados ocorrem na África subsaariana e 86% das mortes ocorre em crianças de menos de 5 anos de idade.

[274] Diversas espécies de Plasmodium causam malária em seres humanos: Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium malariae e o Plasmodium knowlesi. As espécies mais letais são o P. falciparum, encontrado predominantemente na África (Gething, P. W. e et.al, Malar. J. 2011, 10, 378). Se não for tratado, P. falciparum causa falhas de órgão (malária severa) e se acumula nos capilares do cérebro (malária cerebral), levando ao coma e eventualmente morte.

[275] O parasita tem um complexo ciclo de vida e a fim de erradicar a doença, todas as etapas devem ser consideradas para tratamento: a. Fase do fígado. Uma vez que o mosquito inocula os parasitas (esporozoítos) na corrente sanguínea, os parasitas invadem o fígado dentro de 30 min e começam a se reproduzir lá. Drogas que se destinam às fases hepáticas são importantes para evitar que doença se desenvolva (tratamento profilático) b. Fase do sangue Depois de aproximadamente 5-10 dias, a células hepáticas se rompem e merozoítos invadem as hemácias, onde eles se proliferam rapidamente, causando febres altas sintomáticas e a patologia. Em sua fase intra-eritrocítica, os merozoítos tomam diversas formas (anéis, trofozoítos e esquizontes que se dividem e formam uma média de 20 merozoítos que são liberados na corrente sanguínea e infectam novas hemácias. Drogas que se destinam à fase de sangue são importantes para controlar os sintomas da doença e da mortalidade associada. c. Fase de transmissão. Após vários ciclos de reprodução assexuada, alguns parasitas também se diferenciam em gametócitos masculinos e femininos, que contêm apenas uma metade de um conjunto de cromossomos. d. Fase de mosquito. Quando ingeridos por mosquitos, os gametócitos masculinos e femininos se fundem no intestino para formar um zigoto que se transforma em mais esporozoítos novos e prontos para o próximo hospedeiro humano. Assim, em humanos, a parasita se reproduz rapidamente e assexuadamente apresentando erros de reprodução e um pequeno subconjunto de mutações genéticas; enquanto no mosquito, a fusão sexual dos gametócitos apresenta grandes variações genéticas e aumenta a aptidão Darwiniana do parasita antes da sua invasão em outro humano

[276] Drogas que se destinam visam às fases de transmissão e de mosquito são importantes para prevenir a infecção de outros seres humanos e seriam benéficas na erradicação da doença.

[277] Terapias de combinação à base de artemisinina (ACTs) são o padrão atual de atendimento SEM COMPLICAÇÃO, é a única droga aprovada para eliminar hipnozoítos. Quanto ao tratamento profilático, Atovaquona, Proguanil, (GlaxoSmith Kline) é geralmente preferido porque geralmente é bem tolerado, porém tem um preço mais elevado. (Dondorp, A. M, et.al, (Nat. Rev. Microbiol. 2010, 8, 272). Documentaram a resistência contra os muitos antimaláricos existentes, e especialmente preocupante é a resistência emergente à artemisinina.

[278] O desafio é que a resistência à droga não seja o único aspecto. Drogas novas e inovadoras devem também (I) ter uma atuação rápida, (II) ser seguro para crianças e gestantes, e (iii), idealmente, ser passível de uma administração de dose única. Um exemplo de como é difícil combinar todas estas características é visto em mefloquina. É o único medicamento registrado eficaz em dose única, no entanto, a resistência às drogas é problemática. Da mesma forma, a única combinação de droga anti-malária comercializada e eficaz como dose única é sulfadoxina-pirimetamina, mas esta também sofre de resistência às drogas. (Sibley, C. H., et.al. Tendências Parasitol. 2001, 17, 582.

[279] Há uma necessidade urgente para o desenvolvimento de novos medicamentos contra a malária. As novas drogas podem se direcionar à fase de sangue da doença para aliviar os sintomas, a fase do fígado para prevenir recaídas e a fase de transmissão para proteger outros seres humanos. Elas precisam ser seguros em doses altas e baixas e não desenvolverem resistência.

[280] Viall, et.al. (Molecular and Biochemical Parasitology, 5 (1982) 189-198), demonstraram que doses baixas de 25-hidroxi vitamina D3, 1- hidroxi Vitamina D-3 and 1,25 dihidroxi Vitamina D-3 e altos níveis de vitamina D-2 e D-3 são inibitórios para crescimento de P. falciparum na cultura. Os limiares para a inibição variaram por um fator 100, de 1-hidroxi Vitamina D (2.5 X10 ’6) para 5 X 10 ~6 M) para vitamina D-3 (10 to 2.5- 10' 4 M e exceto for D-2 foram sempre muito estreitas.

[281] Uma vez que o Metadichol é um agonista inverso de Vitamina D ele foi testado e verificou-se que tem atividade in vitro contra a malária com um IC 50 de 500 nm. (Figura 2).

Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRS A - Methicillin-resistant staphylococcus aureus na sigla em inglês)

[282] Staphylococcus aureus é um Gram-positivo, os cocos de coagulação positiva na família Staphylococcaceae. Cepas de S. aureus resistentes à meticilina são resistentes à meticilina e essencialmente todos os outros antibióticos beta-lactâmicos. Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é um patógeno bacteriano formidável responsável por uma variedade de infecções comumente vistas em pacientes de todas as idades (Chambers HF, et al., 2001, Emerg Infect Dis; 7:178-82;Lowy F.D., et al., N Engl J Med, 1998, 339:520-32; Frank AL, et al., Clin Infect Dis, 1999; 29: 935-6).

[283] MRSA se espalhou em todo o mundo e agora é a bactéria resistente à antibióticos mais comumente identificada em hospitais da Europa, Américas, norte da África e o médio e Extremo-Oriente. Aproximadamente 478.000 de hospitalizações nos EUA em 2005 foram associadas com infecções de S. aureus e 58% daqueles (278.000) foram causadas por MRSA. (Klein E, et al., 2007, Staphylococcus aureus, United States, 1999-2005, Emerg Infect Dis, 13:1840-1846); Kõck R, Euro Surveill., 2010, 15(41)).

[284] De acordo com vários estudos, (David MZ.de et al., 2010, Clin frações Rev, 23:616-687) aproximadamente 50% das pessoas na população em geral são portadores de S. aureus. No entanto, o CDC estima que apenas cerca de 1,5% da população são portadores de MRSA. Enquanto muitas pessoas portadoras do S. aureus são assintomáticas, elas podem passar estas bactérias a outros diretamente ou contaminar alimentos, roupas, toalhas e outras superfícies. Transporte de MRSA aumenta o risco de infecções graves que são difíceis e mais caras de se tratar. Cada vez mais infecções por MRSA são adquiridas fora de definições de saúde, um programa eficaz de controle de MRSA precisará se direcionar à prevenção de infecções que surgem na comunidade, assim como métodos para controle de infecções em hospitais. Com a evolução de cepas de CA-MRSA e cepas MRSA associadas à animais, infecções adquiridas fora de instituições de saúde, na comunidade, foram causadas por um leque mais diversificado de cepas de MRSA.

[285] Aquisição deste organismo é tipicamente associada com determinadas configurações (instituições de saúde, como hospitais e instituições de cuidados a longo prazo) e grupos de pacientes (pacientes com internação prolongada, uso de antimicrobianos, permanência de cateteres, úlceras decubitais, feridas cirúrgicas no pós-operatório e uso de drogas intravenosas) ou tratamento com nutrição enteral ou diálise (Graffunder EM.de et al., 2002, J arredondarpreparados49:999-1005).

[286] Infecções por MRSA apresentam um dilema considerável para os médicos, uma vez que as opções terapêuticas são limitadas e a dosagem abaixo do ideal contribui para mortalidade elevada e o aumento do tempo de internação hospitalar ( et al. Lodise TP., 2003, Clin infectar Dis, 36:1418 - 23). Embora a alteração de Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) seja um patógeno bacteriano comum responsável para uma variedade de infecções em crianças e adultos, o tratamento de infecções causadas por este organismo é problemático devido à sua resistência a muitos medicamentos. Relatórios recentes associados à infecções de MRSA (CA-MRSA) em pacientes sem fatores de risco conhecidos têm implicações graves na saúde pública. Opções terapêuticas para estas infecções são limitadas; portanto, existe o potencial para alta morbidade e mortalidade

[287] Em pessoas, S. aureus é um oportunista. MRSA pode causar os mesmos tipos de infecções como outros isolados de S. aureus. Este organismo pode estar envolvido em uma ampla variedade de infecções na pele e em tecidos moles incluindo impetigo, foliculite, furunculose, celulite e abcessos e infecções de ferida. (Boucher H, et al. , Clin infectar dis, 2010, 51, Suppl 2, S183-97). MRSA pode também causar infecções invasivas, como pneumonia, endocardite, artrite séptica, osteomielite, meningite e septicemia. U.S. Food and Drug Administration Center for Food Safety and Applied Nutrition, Biotechnology of Food. Food borne pathogenic microorganisms and natural toxins handbook. FDA; 1992. Staphylococcus aureus. Em pessoas saudáveis, a cepa USA300 (CMRSA10) tem sido associada a casos de pneumonia necrosante após infecções por vírus de gripe. Cepas de S. aureus que carregam a exotoxina TSST-1 podem causar a síndrome do choque tóxico, uma doença fatal caracterizada por uma febre alta súbita, irritação, descamação, hipotensão e falência múltipla de órgãos (Fitzgerald JR, et al., 2001, Proc Natl Acad Sei U S A98(15): 8821- 6). Acredita-se que infecções de pele causadas por S. aureus geralmente são seguidas por colonização da pele ou narinas do hospedeiro. Infecções por MRSA comumente ocorrem onde há uma ruptura na pele (por exemplo, um corte ou ferimento), especialmente em áreas cobertas por pelos (por exemplo, a área da barba, parte de trás do pescoço, axila, virilha, pernas ou nádegas). MRSA pode ser parecido com um galo na pele que pode ser vermelho, inchado, quente ao toque, doloroso ou cheio de pus. O pus ou drenagem contém bactérias infecciosas que podem se espalhar para outros. Têm sido descritos vários casos de síndrome da pele escaldada, impetigo e impetigo bolhoso, adicionando uma nova apresentação clínica de infecção de MRSA. (Liassine N, et al. 2004, J.Clin Microbiol, 42: 825 - 28).

EXEMPLOS EXEMPLO 1

[288] Em várias modalidades, a invenção fornece Metadichol ® uma formulação Nano de Policosanol descrito na Pedido de Patente dos EUA 12/691706. Formulação líquida de Metadichol ® utilizada em estudos, conforme divulgado no pedido de patente dos EUA 12/691, 706.

Composição de Metadichol ® gel

[289] Neste exemplo, o gel foi feito por agitação rápida e mistura a 30-35 ° C, 0,5% -1% da partícula líquida Nano descrita anteriormente (Pedido de Patente dos EUA n.° 12/691.706) com 1% a 3% em peso de Carbopol conforme descrito no Boletim 22 da Lubrizol Corporation Pharmaceutical Boletim edição: 31 de maio de 2011) e resultou em um gel transparente contendo 0,1-3% de partículas Nano ativas prontas para uso tópico.

[290] A formulação de 1% de policosanol (líquido ou em gel) descrita acima foi utilizada para avaliar a eficácia e a tolerabilidade e também avaliar os biomarcadores chave.

[291] Estudos clínicos em pacientes, a formulação líquida do Metadichol ® @10 mg / ml.

EXEMPLO 1.1

[292] Mulher, 61 anos, diabetes tipo 2 e dependente de insulina com níveis elevados de ácido úrico foi tratada com 20 mg de Metadichol ®. Em 4 semanas, o ácido úrico tinha retornado aos níveis normais.Ácido úrico (mg/dl)

EXEMPLO 1.2 Ácido úrico (mg/dl)

[293] Mulher, 60 anos; diabetes tipo 2, dependente de insulina com níveis moderadamente elevados de ácido úrico tratados com 20 mg Metadichol ® por dia durante 24 semanas.

EXEMPLO 1.3 Potássio (mmol/l)

[294] Paciente homem, 66 anos, hipertenso com elevados níveis de potássio tratado com Metadichol ® @ 40 mg durante 4 semanas.

EXEMPLO 1.4

[295] Homem, 68 anos, hipertenso diagnosticado com problemas renais. Estágios iniciais de doença renal. 10 mg de Metadichol @ por dia, apenas, não usando nenhum outro tipo de medicação

EXEMPLO 1.5

[296] Paciente homem, 63 anos, em diálise renal 3 dias por semana durante 7 anos, esperando por um doador de rim e sofrendo de Diabetes e Hipertensão e com níveis elevados de PTH, Fosfato Alcalino, Ferritina. Níveis elevados de fosfato, de produto de CA-P, taxas de BUN, e de creatinina e hemoglobina. Paciente em diálise renal 3 dias por semana pelos últimos 7 anos, esperando por doador de rim. Ferritina (ng/ml)

Potássio (mmo /I)

Fosfatase Alcalina (IU/L)

Níveis de fósforo (mg/dl)

Níveis de fósforo (mg/dl

Níveis de PTH (pg /ml)

Níveis de produto CA*P. Nivel normal abaixo de 55 para pacientes de diálise e para pacientes normais 25-40.

[297] Nitrogênio Ureico no Sangue (mg/dl)

Creatinina (mg/dl)

Níveis de hemoglobina (mg/d )

EXEMPLO 1.6

[298] Mulher, 61 anos, dependente de insulina tratada com 20 mg Metadichol ® por dia durante 52 semanas. Lp(a) (mg/dl)

EXENI PLO 1.7

[299] Homem, 61 anos, diabético dependente de insulina com níveis elevados de Lp(a) tratado com 20 mg Metadichol ® durante 24 semanas Lp(a) (mg/dl)

EXEMPLO 1.8

[300] Mulher, 55 anos, dependente de insulina com diabetes tipo 2 tratada com 40 mg de Metadichol ® por dia durante 24 semanas.Lp(a) (mg/dl)

EXEMPLO 1.9

[301] Homem, 42 anos, dependente de insulina com diabetes tipo 2 com níveis elevados de Lp(a) tratado com 20 mg de Metadichol ® por dia durante 4 semanas Lp(a) (mg/dl)

EXEMPLO 2.0

[302] Ambos os pacientes eram diabéticos tipo 2 e dependentes de insulina. Tratados com @ 20 mg Metadichol ® por 24 semanas.Níveis da proteína Apo A (mg/dl)

EXEMPLO 2.1:

[303] Ambos os pacientes eram diabéticos tipo 2 e dependentes de insulina. Tratados com @ 20 mg de Metadichol ® por 24 semanas. ApoB: Taxa Apo A

EXEMPLO 2.2: Níveis de eGFR (ml/min/1.73 M2)

[304] Mulher 55 anos idade dependente de insulina com diabetes tipo 2.

EXEMPLO 2.3: (Níveis de eGFR (ml/min/1.73 M2)

[305] Homem 67 anos no estágio inicial da doença renal foi tratado com 40 mg de Metadichol ® por dia durante 24 semanas. Normal para um homem Americano não Africano é acima de 60.

EXEM PLO 2.4 (Níveis de eGFR (ml/min/1.73 M2)

[306] Homem, 68 anos, com diabetes tipo 2 não insulinodependente tratado com @ 40mg de Metadichol ® por 60 semanas.

EXEMPLO 2.5 Níveis de eGFR (ml/min/1.73 M2)

[307] Mulher, 62 anos, com diabetes tipo 2 não insulinodependente tratada com 20 mg de Metadichol ® por dia durante 60 semanas.

EXEMPLO 2.6 Níveis de eGFR (ml/min/1.73 M2)

[308] Mulher, 70 anos, com diabetes tipo 2 não insulinodependente tratada com 40 mg de Metadichol ® por dia durante 39 semanas.

EXEMPLO 2.7

[309] Paciente homem, 58 anos, sofrendo de hipertensão não controlada pelos últimos 15 anos, incapaz de controle com medicamentos que só pioraram sua condição, levando à uma hepatite crônica, com um elevadas taxas de SGOT/SGPT foi tratado com Metadichol ® por 12 semanas com 20mg por dia.Taxas SGOT / SGPT de enzimas do fígado

EXEMPLO 2.8

[310] Paciente homem, 49 anos, alcoólatra, diabético, hipertenso, obeso e hiperlipidêmico e diagnosticado como sofrendo de cirrose pós necrótica com uma elevada taxa SGOP/SGPT tratado com @ 20mg de Metadichol® por dia durante 60 semanas.Taxas SGOT / SGPT de enzimas do fígado

EXEMPLO 2.9

[311] Homem, 62 anos, tratado com estatinas por 12 anos, diagnosticados com uma taxa SGOT/SGPT moderadamente elevada, tratado com 20 mg de Metadichol ® por 48 semanas.Taxas SGOT / SGPT de enzimas do fígado

EXEMPLO 3.0

[312] Paciente homem de 84 anos com câncer de pulmão após quimioterapia tem elevada taxa SGOT/SGPT. Tratamento com Metadichol ® por 24 semanas em 40 mg por dia.Taxas SGOT / SGPT de enzimas do fígado

EXEMPLO 3.1

[313] Mulher 35, diagnosticada com síndrome de Gilbert com alto nível de bilirrubina tratada com @ 20 mg de Metadichol ® por dia. Bilirrubina total (mg/dl)

D. Bilirrubina (mg/dl)

EXEMPLO 3.2 Níveis de hemoglobina (mg/dl)

[314] Homem, 59 anos, diabético de tipo 2 dependente de insulina, com sintomas de fadiga constante com hemoglobina baixa tratado com ® 40 mg de Metadichol por 32 semanas.

EXEMPLO 3.3 Nível de hemoglobina (g/dl)

[315] Homem, 59 anos, com diabetes tipo 2 por 6 anos e cronicamente fatigado tratado com 20 mg de Metadichol ® por 24 semanas

EXEMPLO 3.4 Níveis de hemoglobina (mg/dl)

[316] Homem, 83 anos, paciente com câncer de pulmão em tratamento com quimioterapia, tratado com @40mg de Metadichol ® por dia.

EXEMPLO 3.5 Níveis de hemoglobina (mg/dl)

[317] Diabetes tipo 2 por 6 anos e cronicamente fatigado tratado com 40 mg de Metadichol ® por 24 semanas

EXEMPLO 3.6 Contagem de plaquetas

[318] Mulher, 64, com diabetes tipo 2 com uma contagem baixa de plaquetas tratado com 20mg de Metadichol ® diariamente durante 36 semanas.

EXEMPLO 3.7 Distúrbios no hemograma

[319] Homem, 69 anos, diagnosticado com Neutropenia e uma contagem extremamente baixa de monócitos, diagnosticado em estágio inicial de leucemia. Tratado com 40 mg de Metadichol ® por dia enquanto esperava por um doador compatível para transplante de medula.

EXEMPLO 3.8 Pacientes com SMD

[320] Mulher, 65 anos, com histórico de câncer de mama, agora diagnosticada com mielodisplasia (SMD). Diagnosticada com câncer de mama há 10 anos, se tratando com cirurgia, seguida de quimioterapia e radiação. Teste recente de medula óssea teve resultados de medula hipo- celular para a idade com hematopoiese progressiva com megacariócitos displásicos e aumento de mieloblastos (~ 10%), consistente com Mielodisplasia (MDS) com excesso de blastos. Diagnóstico foi que a medula óssea não é funcional e precisava de quimioterapia e transplante de medula óssea. Tratada com @ 10 mg de Metadichol ® por dia. Paciente também sofria de hipotireoidismo.

Níveis de TSH

Níveis de ferritina

EXEMP LO 3.9 Hipotireoidismo

[321] Mulher, 74 anos, diagnosticada com hipotireoidismo tratada com 20 mg de Metadichol ® por 24 semanas.TSH (mIU/L)

EXEMPLO 4.0

[322] Homem, 83 anos, paciente com Hipotiroidismo em tratamento com Quimioterapia, tratado com @ 40mg de Metadichol ® por dia. Níveis de TSH (mIU/L)

EXEMPLO 4.1 Pacientes com doença renal

[323] Homem, 62 anos, obeso, hipertenso, diabético tipo 2 e em diálise peritoneal por 1 ano com doenças renais, com sintomas de constante fadiga com hemoglobina baixa, tratado com 10 mg de Metadichol® por dia. Melhorias são indicadas abaixo.PTH (paratormônio intacto)

Amplitude de Distribuição das Hemácias (RDW - Red Cell Distribution Width na sigla em inglês)

Níveis de produto Ca X P.

Outras melhorias em biomarcadores chave

EXEMPLO 4.2

[324] Homem, 70 anos em diálise peritoneal nos últimos 2 anos, com níveis PTHi elevados, ferritina RDW, níveis de creatinina tratados com @10 mg de Metadichol por dia. Melhorias são indicadas abaixo

EXEMPLO 4.3 Doença de Hashimoto

[325] Homem, 38 anos, com casos de síncope associados à convulsão, no começo dos anos 2000(13 anos atrás, quando ele tinha 26). Testes neurológicos estavam normais. Ele tem sido em média 150-155 sistólico e 105-110 diastólico durante os últimos 12 anos. Tomava anti anticonvulsivantes durante 14 anos. Mas os casos de convulsão continuavam. Além disso, ele sofria de visão dupla, auras e tontura. A maioria dos casos ocorreu durante a noite enquanto dormia. Paciente diagnosticado com encefalopatia de Hashimoto há um ano. Tinha taxas elevadas de hormônio da tireoide (TSH) e de T4 e tiroglobulina indectável (TgAB) e altas taxas de anticorpos de tiroglobulina e anticorpos Tireoperoxidase (TPOab). Tratado com @10 mg de Metadichol ® por dia. Após 4 semanas os sintomas originais do paciente de visão dupla, aura e visão dupla e tonturas desapareceram. Suas convulsões diminuíram e geralmente após uma convulsão pós tratamento com Metadichol ® ele se recuperou em 15 minutos ao invés dos 2 dias habituais. O paciente tem conseguido deixar todas as medicações, e tem usado @ 10mg de Metadichol por dia. Paciente relata que ele se sente com muita energia, e que se sente que menos estressado mentalmente sobre sua condição. Melhorias de biomarcador chave são mostradas abaixo.Pressão sistólica e diastólica em milímetros de mercúrio

Anticorpos de tiroglobulina (TgAb) (IU/ml) e tiroglobulina (micro grama/ml)

Anticorpos Tireoperoxidase (TPOab)

Níveis de TSH (mIU/L)

Níveis de T4 livre;

EXEMPLO 4.4

[326] Homem, 56 anos, diagnosticados com níveis ligeiramente elevados de PSA tratado com 20mg de Metadichol ®.PSA (ng/ml)

EXEMPLO 4.5

[327] Homem, 59 anos, com níveis moderadamente elevados de PSA tratados com @20mg de Metadichol ® por diaPSA (ng/ml)

EXEMPLO 4.6

[328] Paciente homem, diagnosticado com artrite Reumatóide nos últimos 18 anos, em ambos os joelhos com fator elevado de AR (fator reumatóide) CRP (proteína C - reativa) e ESR elevado (taxa de sedimentação de eritrócitos). Tratados com 10mg de Metadichol ® por dia e as melhorias são mostradas abaixo. Paciente relata melhor mobilidade de ambos os joelhos.

Estudos clínicos em pacientes de Metadichol ® e doenças de pele. 1 % Metadichol ® usado.

EXEMPLO 4.7

[329] Uma mulher de 24 anos de idade, com freqüentes surtos de acne foi tratada com aplicação de gel duas vezes por dia durante 8 semanas. Figura 3 mostra melhora na sua condição de acne.

EXEMPLO 4.8

[330] Um homem de 44 anos de idade com eczema na testa e mãos foi tratado com gel durante 6 semanas (Figura 3 e Figura 4). Os resultados mostram o completo desaparecimento da infecção em sua testa em 6 semanas e suas mãos em 4 semanas.

EXEMPLO 4.9

[331] Homem, 52 anos, tem um cisto sinovial (Figura 5) pelos últimos 5 anos. Era incapaz de se livrar do cisto apesar de removê-lo cirurgicamente repetidamente. O cisto sempre voltava alguns dias após a drenagem ou remoção. Uso de Metadichol ® gel por 4 semanas suavizou o cisto e foi capaz de drenar o cisto. O cisto não cresceu de volta depois de parar o uso do gel.

EXEMPLO 4.10

[332] Mulher, 58 anos, com um surto repentino de erupção cutânea de origem desconhecida com prurido grave associado à ele (Figura 6). Tratados com aplicação de gel de Metadichol ® duas vezes por dia durante 2 semanas levando ao desaparecimento da maioria das manchas e diminuição da coceira em 10 dias.

EXEMPLO 4.11

[333] Um cão da raça Shit-Tzu de 11 anos de idade tinha lipoma (Figura 7) que tinha se tornado inchado e com uma coloração vermelho escura, e lá apareceu uma ferida exposta. Tratamento com o gel com lavagem diária da ferida e aplicação do gel Metadichol ®. Novas formações de pele foram formadas e ele agora é capaz de andar e correr normalmente. Não havia nenhum indício de uma lesão anterior no local de tratamento.

[334] Paciente homem, de 48 anos, diagnosticado no seu dedo com um CA-MRSA (comunidade Associada à meticilina-staphylococcus aureus resistente) infecção (Figura 8) aplicação de Metadichol ® gel duas vezes por dia durante 3 semanas parou a infecção e uma nova pele cresceu e não há sinal de uma infecção anterior neste ponto.

EXEMPLO 4.13

[335] Mulher, 58 anos, aplicou gel sob os olhos e o rosto e demonstrou uma melhora na cor e no tom da pele e remoção de linhas finas e rugas (Figura 9).

EXEMPLO 5.0

[336] Paciente homem, 38 anos, com um profundo corte na mão onde foram necessários 20 pontos, tratado com com aplicação de gel Metadichol ® duas vezes por dia durante 32 semanas (Figura 11).

EXEMPLO 5.1:

[337] Paciente homem, 39 anos, com uma infecção fúngica da língua tratados com gel de Metadichol ®, aplicado à áreas afetadas da língua, duas vezes por dia. Língua restaurada com uma aparência normal e saudável (Figura 12).

EXEMPLO 5.2

[338] Paciente homem, 70 anos com psortase e comichão tratado com aplicação de Metadichol ® gel por 8 semanas. Houve uma melhora considerável na condição e a coceira do paciente parou. (Figura 13)

EXEMPLO 5.3

[339] Paciente homem, 39 anos, com a súbita erupção na pele na barriga, tratado com aplicações de Metadichol ® gel sobre as áreas afetadas (Figura 14).

EXEMPLO 5.4

[340] Paciente homem, 55 anos, com calvície, com aplicação de Metadichol ® gel duas vezes por 16 semanas (Figura 15).

EXEMPLO 5.5

[341] Paciente homem, 56 anos, tinha na camada interna da pele de ambos os ouvidos uma superprodução contínua da pele, uma condição que durou nos últimos 30 anos. Aplicação do creme de cortisona tinha um sucesso temporário, mas com o tempo a superprodução de pele retornaria . Após a aplicação durante a noite por uma semana do Metadichol ® Gel a pele retornou ao estado normal sem esfoliação.

EXEMPLO 5.6

[342] Mulher de 56 anos de sofrimento velho do fasciitis plantar para os seis meses precedentes e aplicação de Metadichol® gel duas vezes um dia para uma semana conduzida para terminar o remission da dor.

EXEMPLO 5.7

[343] Mulher, 55 anos, com sintomas antigos de: dor constante no ombro (mesmo quando está descansando), incapacidade de levantar a mão esquerda além da altura dos ombros, dificuldade de colocar a mão esquerda atrás das costas. Sua condição era um problema diagnosticado (através de raios-x e ressonância magnética) como tendinopatia no manguito rotador, rasgo labral superior, estreitamento das c5-6 e c6-7 da coluna vertebral, radiculopatia cervical bilateral. Aplicação de gel Metadichol ® por 5 dias, 3 vezes ao dia. Levou a súbita diminuição do nível de dor no ombro e a flexibilidade do rotador aumentou. Pescoço - extensão da rotação melhorou

EXEMPLO 5.8

[344] Paciente homem, 40 anos, sintomas: dor aguda na parte inferior da perna esquerda durante qualquer atividade esportiva e primeira 1/2 hora todas as manhãs. Diagnosticado como tendinopatia de Aquiles.

[345] Aplicação de gel Metadichol ® por 6 semanas, duas vezes diariamente, levou a uma diminuição gradual da dor e inflamação, completa recuperação após 6 semanas com atividades diárias.

Claims (12)

1. Composição de gel aquoso tendo propriedades significativas de barreira de água, o referido gel caracterizado pelo fato de compreender: (a) um polímero solúvel em água; (b) Nanopartículas de policosanol em uma concentração terapeuticamente eficaz; e (c) água, o referido gel sendo isento de um polímero formador de membrana, gorduras oclusivas ou óleos; em que o polímero solúvel em água é Carbopol, e em que a concentração terapeuticamente eficaz de policosanol é de 10 mg/ml a 30 mg/ml.

2. Uso da composição de gel aquoso, conforme definida na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença de pele em um sujeito, o referido uso compreendendo: administração tópica do referido gel no referido sujeito em quantidades terapêuticas efetivas, em que a doença de pele referida é selecionada de um grupo composto de doenças dermatológicas inflamatórias e hiper proliferativas, manifestações cutâneas de doenças que são imunológicas em sua origem como psoríase, dermatite atópica, dermatite de contato e outras dermatites eczematoides, dermatite seborreica, neurodermatite, decúbito, líquen plano, pênfigo, penfigoide bolhoso, epidermólise bolhosa, urticária, angioedemas, vasculite, eritema, cutânea, eosinofilia, lúpus eritematoso eczema, e MRSA, carcinoma basocelular, diminuindo assim a severidade da doença.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a referida doença é uma infecção MRSA.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a doença é Eczema.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o sujeito é um ser humano.

6. Formulação farmacêutica, caracterizada pelo fato de compreender nanopartículas de policosanol para o uso no tratamento de uma doença, melhorando um parâmetro fisiológico ou metabólico em um sujeito, em que o referido uso compreende: administração no determinado sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz da referida formulação farmacêutica compreendendo nanopartículas de policosanol, em que o referido parâmetro sendo um membro selecionado dentre: aumentando os níveis de soro de proteína APO A1 no referido sujeito, reduzindo a lipoproteína (a) (Lp(a)) no referido sujeito, aumentando o nível de hemoglobina no referido sujeito, aumentando a contagem de plaquetas no referido sujeito, reduzindo o nível de ácido úrico no referido sujeito, regulando o nível de TFG no referido sujeito, regulando um membro selecionado dentre neutrófilos absolutos, monócitos absolutos e nível de glóbulos brancos no referido sujeito; redução de altas taxas AST:ALT no referido sujeito, reduzindo o nível de ferritina no referido sujeito, reduzindo o nível de bilirrubina no referido sujeito, regulando o nível de hormônio da tireoide (TSH) no referido sujeito, e reduzindo o nível de um membro selecionado de PTH, cálcio, creatinina, os níveis de Bun da fosfatase alcalina e níveis séricos de fósforo no sujeito, desse modo regulando o referido parâmetro no referido sujeito.

7. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida doença é doença renal.

8. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida doença é uma infecção MRSA.

9. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida doença é um MDS.

10. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida doença é uma doença hematológica.

11. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a referida doença é câncer de próstata.

12. Formulação farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que o sujeito é um ser humano.

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