BR112014022847B1 - Lipídios aminoácidos, composição vesicular, e kit - Google Patents
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Abstract
LIPÍDIOS AMINOÁCIDOS. A presente invenção refere-se a uma nova classe de lipídios, mais especificamente a éteres lipídicos tendo um grupo polar dianteiro, bem como a vesículas compreendendo esses lipídios, métodos de seu preparo assim como o seu uso em aplicações médicas, em que os éteres lipídicos são representados pela fórmula geral (I); em que Y representa O, N, S ou uma ligação covalente; P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativador de Y ou um grupo espaçador; P2, P3 representam, independentemente um do outro, H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual se encontram ligados, uma estrutura de anel; L é um grupo da Fórmula (a).
Description
[001] A presente invenção se refere a uma classe de lipídios, mais especificamente éteres lipídicos tendo um grupo polar dianteiro, e a vesículas compreendendo esses lipídios, a seus métodos de preparo, bem como a seu uso em aplicações médicas.
[002] O reconhecimento molecular, tal como entre receptor- ligante, antígeno-anticorpo, DNA-proteína, açúcar-lectina, RNA-ribos- somo, etc., é um princípio importante subjacente a muitos sistemas biológicos e é aplicado a muitos sistemas biológicos criados artificialmente para uso em aplicações médicas, como sistemas particulados artificiais (micro ou nano), incluindo microesferas poliméricas, lipídios de estrutura vesicular, microemulsões e similares.
[003] Um exemplo importante de aplicação com base no reco nhecimento molecular é o uso para liberação direcionada de compostos diagnósticos ou terapêuticos, tais como agentes antivirais, quimio- terápicos ou de imagem, a sítios específicos, que permite superar as limitações associadas com a liberação não específica (como tempo de depuração in vivo, toxicidade potencial, problemas associados com o transporte na membrana de um agente e os semelhantes) e assim aumenta em grande medida a eficácia dos agentes. Várias estratégias à base do reconhecimento têm sido empregadas para melhorar a liberação de compostos no meio intracelular (ou seja, compartimentos celulares específicos) de uma célula-alvo e exercer sua atividade biológica, especialmente a liberação mediante transportadores específicos, como vetores virais, polímeros catiônicos, como polilisina, poliarginina e similares (ver, por exemplo, WO 79/00515, WO 98/52614), carreado- res lipídicos e vários outros sistemas de conjugados.
[004] Uma abordagem amplamente utilizada envolve o uso de vesículas lipídicas como carreadores artificiais, por exemplo, liposso- mos, micelas, nanopartículas, e que foram extensamente desenvolvidas e analisadas como veículos para liberação de fármacos em decorrência de sua habilidade para reduzir a exposição sistêmica de um agente biologicamente ativo, desse modo, superando problemas associados com degradação, solubilidade, etc., e permitindo aumentar o tempo de permanência na circulação sanguínea. A liberação direcionada ativamente envolve a derivação dos lipídios da vesícula lipídica (seja antes ou depois da formação da vesícula) com um ligante de direcionamento que tem como função direcionar (ou apontar para o alvo) a vesícula para tipos celulares específicos, células cancerosas ou células específicas a determinados tecidos e órgãos, como hepatócitos, após a administração in vivo (ver, por exemplo, US 6 316 024 e US 6 214 388; Allen et al., Biochim. Biophys. Acta, 1237:99-108 (1995); Blume et al., Biochim. Biophys. Acta, 1149:180-184 (1993)). Isso pode ser conseguido utilizando receptores que são superexpressos em tipos celulares específicos, os quais incluem, por exemplo, receptor do ácido fólico (superexpressão em uma variedade de tecidos neoplásicos, incluindo tumores de mama, ovariano, cervical, colorretal, renal e na- sofaríngeo), receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) (su- perexpressão no carcinoma anaplásico de tireoide e em tumores de mama e pulmão), receptor da metastina (superexpresso no carcinoma papilar de tireoide), receptor de tirosinas quinases da família ErbB (su- perexpresso em um subgrupo significativo de cânceres de mama), receptor do fator de crescimento epidérmico 2 (Her2/neu) (superexpres- so em cânceres de mama), receptor tirosina quinase 18 (c-Kit) (supe- rexpresso em carcinomas renais sarcomatoides), receptor c-Met de HGF (superexpresso no adenocarcinoma esofágico), CXCR4 e CCR7 (superexpressos no câncer de mama), receptor da endotelina-A (supe- rexpresso no câncer de próstata), receptor delta ativado por prolifera- dor de peroxissoma (PPAR-delta) (superexpresso na maioria dos carcinomas ovarianos), BAG-1 (superexpresso em vários cânceres de pulmão), receptor solúvel tipo II de TGF beta (superexpresso no câncer pancreático), receptor de asialoglicoproteínas (superexpresso em hepatócitos), receptor da αvβ3 integrina (superexpresso na vasculatura tumoral em crescimento), etc.
[005] Qualquer agente que se liga seletivamente a tal receptor específico de célula ou tecido a ser tratado ou analisado pode ser anexado a uma vesícula lipídica e atuar como ligante de direcionamento ou do receptor. Tipicamente, tais ligantes de direcionamento têm sido anexados a um lipídio ou superfície de vesícula lipídica por meio de um ligante de cadeia longa (por exemplo, polimérico). Por exemplo, conjugados à base de ácido fólico foram utilizados em uma abordagem para a liberação direcionada de um composto terapêutico útil para o tratamento e/ou diagnóstico de uma doença, permitindo reduzir a dose exigida de compostos terapêuticos (ver, por exemplo, WO 02/094185, US 6 335 434, WO 99/66063, US 5 416 016). Do mesmo modo, o uso de conjugados à base de galactose e galactosamina para transportar compostos exógenos através de membranas celulares pode propiciar uma abordagem para liberação direcionada ao tratamento de doenças hepáticas como infecção pelo HBV e HCV ou carcinoma hepatocelular carcinoma, ao mesmo tempo em que permite uma redução na dose exigida de compostos terapêuticos necessários para o tratamento (ver, por exemplo, US 6 030 954).
[006] Outro exemplo importante de aplicação com base no reco nhecimento molecular é o uso de sistemas de apresentação de antí- genos que envolvem a apresentação de proteínas (antígenos) "pró-prias" e "estranhas" ao sistema imune para gerar ativação, modulação ou tolerância de célula T. As interações entre receptor e ligante em sistemas de apresentação de antígenos que contribuem para a res-posta imune desejada, ou a sua ausência, são complexas e difíceis de avaliar, sendo influenciadas por vários parâmetros tais como densidades do ligante, presença de correceptores, afinidades entre receptor e ligante e condições em suas superfícies. Assim, uma abordagem amplamente empregada envolvia o uso de células humanas naturais (ou partes destas) cuja função primária é a apresentação e o processamento de antígenos. Porém, embora possam ser ótimos para mimeti- zar a interação célula-célula e alcançar a indução necessária de tolerância ou da resposta imune, os sistemas com base em células vivas são dependentes de uma expressão regulada das moléculas de superfície, inclusive a possível expressão de moléculas adicionais "coesti- mulatórias" e/ou de adesão sobre sua superfície em nível terapêutico suficiente. Os sistemas artificiais atualmente conhecidos variam de vesículas construídas por engenharia genética para apresentação de an- tígenos subcelulares, as quais carregam as moléculas necessárias para a apresentação do antígeno e a ativação ou inibição de linfócitos T na sua superfície (WO 03/039594) a sistemas de apresentação de an- tígenos à base de microesferas biodegradáveis de tamanho celular (WO 07/087341).
[007] Nitidamente, há ainda desvantagens às tecnologias prece dentes com base no reconhecimento molecular e continua havendo necessidade na técnica de um sistema carreador artificial versátil e eficiente para uso em aplicações com base no reconhecimento molecular, tais como liberação direcionada ou apresentação de antígenos, inclusive de métodos simples e econômicos para o seu preparo.
[008] O presente pedido de patente provê uma nova classe de lipídios e vesículas que compreendem esses lipídios para uso como sistema carreador ou de exibição, o qual permite superar as limitações descritas acima.
[009] A presente invenção é direcionada a uma nova classe de lipídios e vesículas compreendendo esses lipídios para uso em várias aplicações médicas. Mais especificamente, a presente invenção é direcionada a compostos lipídios-éter que são caracterizados por pelo menos duas cadeias de hidrocarbonetos ligados por éter e um grupo dianteiro compreendendo um aminoácido curto de cadeia linear tendo até 6 átomos de carbono, em forma livre, protegida ou ativada ou, opcionalmente, seu derivado com pelo menos um grupo espaçador.
[0010] Especificamente, em uma concretização, a presente inven ção se refere a um composto da Fórmula Geral I:
[0011] em que:
[0012] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[0013] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativa- dor de Y ou um grupo espaçador,
[0014] P2, P3 representam, independentemente um do outro, H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[0015] L é um grupo da Fórmula (a):
[0016] em que a linha tracejada representa a ligação ao N,
[0017] R1 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb1,
[0018] R1’ representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb2,
[0019] R2 representa H ou um grupo da fórmula -CH2-ORc,
[0020] R2’ representa H ou um grupo da fórmula -ORd ou -CH2- ORd,
[0021] R3 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou - (CH2)3-ORe,
[0022] Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd e Re representam independentemente um do outro, uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada,
[0023] m é 1, 2 ou 3,
[0024] com a condição de que pelo menos um de R1, R1’, R2, R2’, R3 é diferente de H.
[0025] Os compostos da invenção incluem todos os possíveis es- tereoisômeros dos compostos, tais como isômeros geométricos, por exemplo, isômeros Z e E (isômeros cis e trans) e isômeros ópticos, por exemplo, diastereoisômeros e enantiômeros, seja em forma pura ou em misturas destes.
[0026] Em uma concretização, a invenção é direcionada para com postos lipídicos não derivados, em que nenhum P1, P2, P3 é um grupo espaçador. Mais especificamente, os compostos lipídicos não derivados incluem (i) compostos lipídicos em forma livre, em que nenhum de P1, P2, P3 é um grupo ativador ou protetor, (ii) compostos lipídicos protegidos, em que pelo menos um de P1, P2, P3 é um grupo protetor, e (iii) compostos lipídicos ativados, em que P1 é um grupo ativador.
[0027] Em outra concretização, a invenção é direcionada para de rivados de lipídios com espaçador, em que pelo menos um de P1, P2, P3 é um grupo espaçador.
[0028] Os compostos da presente invenção compreendem todas as possíveis permutações de grupos R1, R1’, R2, R2’, R3 e as subestru- turas Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re destes.
[0029] Em uma primeira concretização de um composto da Fórmu la I, o grupo R3 é H. Mais especificamente, qualquer um de (i) R3 é H e tanto R1 como R1’ são H, ou (ii) R3 é H e ambos, R2 e R2’, são H. Assim, a invenção é direcionada para compostos da Fórmula Ia,
[0030] em que L é um grupo da Fórmula (a):
[0031] e em que P1, P2, P3, Y, R1, R1', R2, R2’, Ra, e m são defini- dos como acima para um composto da Fórmula I.
[0032] Mais especificamente, a invenção é direcionada para com postos da Fórmula Ia, na qual L é um grupo das Fórmulas (b) ou (c):
[0033] em que P1, P2, P3, Y, R1, R1’, R2, R2’, Ra, e m são definidos como acima, com a condição de que, na Fórmula (b), um de R2 e R2’ é diferente de H e, na Fórmula (c), um de R1 e R1’ é diferente de H.
[0034] Em uma segunda concretização, R1, R1’, R2, R2’ são H e R3 é um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou -(CH2)3-ORe. Assim, a invenção é direcionada para compostos da Fórmula Ib,
[0035] em que R3 é um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou -(CH2)3- ORe e
[0036] P1, P2, P3, Y, Ra, Re e m são definidos como acima para um grupo da Fórmula I.
[0037] Em outro aspecto, a presente invenção é direcionada para composições na forma de vesículas (presentes composições), por exemplo, lipossomos, micelas, nanopartículas e similares. As vesículas da invenção compreendem pelo menos um composto da invenção ou uma mistura de vários compostos da invenção, opcionalmente em mistura com um ou mais outros compostos formadores de vesícula.
[0038] Em outro aspecto, a presente invenção é direcionada a um método para preparar um composto e uma composição da invenção.
[0039] Outro aspecto da presente invenção se refere a um kit que compreende um composto ou uma composição da invenção, de prefe-rência em forma liofilizada.
[0040] Os compostos e as composições da presente invenção en contram utilidade como veículo de liberação, por exemplo, para a libe-ração direcionada de um ou mais agentes bioativos ou para uso em um sistema de exibição de antígenos. Este aspecto dos presentes compostos e composições faz parte de um pedido de patente interna- cional depositado simultaneamente, o qual é aqui incorporado em sua totalidade por referência neste pedido de patente.
[0041] Estes e outros aspectos da invenção se tornarão mais evi dentes a partir do relatório descritivo a seguir e das reivindicações.
[0042] Tal como empregado acima e por todo este relatório descri tivo, certos termos, a menos que indicado de outra forma, serão en-tendidos por terem os seguintes significativos:
[0043] O termo "composto" neste relatório descritivo (isoladamente ou combinado com "presente" ou "da invenção" ou "lipídico") se refere a um composto da invenção e compreende um aminoácido linear, bi- funcional no grupo dianteiro, mais especificamente um ácido 2-amino- alcano-dioco (tendo até seis átomos de carbono), como ácido aspárti- co, ácido glutâmico e os semelhantes. Os compostos da invenção incluem compostos "(lipídicos) não derivados", os quais estão em forma livre ("composto (lipídico) livre"), em forma de protegido ("composto (lipídico) protegido") ou em forma de ativado ("composto (lipídico) ativado") e, deste modo, não contêm grupos espaçadores anexados co- valentemente, bem como "compostos (lipídicos) derivados" (ou "derivado de lipídio com espaçador"), os quais são conjugados de compostos (lipídicos) não derivados com um ou mais grupos espaçadores.
[0044] Um composto (lipídico) protegido ou ativado se refere a um composto da invenção que foi modificado em um sítio especificamente para conter um grupo protetor ou ativador, respectivamente. A modifi-cação acontece no grupo dianteiro, mais especificamente nos sítios reativos do ácido amino, mais preferivelmente nos grupos N e/ou Y com grupos protetores ou ativadores adequados (por exemplo, na forma de PI, P2, P3), respectivamente, conhecidos na técnica.
[0045] Um "derivado de lipídio com espaçador" se refere a um composto da invenção que foi modificado em um sítio especificamente para conter um grupo espaçador A modificação acontece no grupo di-anteiro, mais especificamente nos sítios reativos do ácido amino, mais preferivelmente nos grupos N e/ou Y (ou grupo CO se Y for uma ligação covalente) com grupos espaçadores adequados (por exemplo, na forma de PI, P2, P3) conhecidos no campo utilizando técnicas conhecidas de acoplamento.
[0046] O termo "composição" ou "presente composição" se refere a uma composição que compreende pelo menos um composto da in-venção. As composições exemplares incluem vesículas ou composições vesiculares, as quais em sua interpretação mais ampla incluem qualquer associação de pelo menos um composto lipídico da invenção com outros materiais ou estruturas. Deste modo, as composições vesiculares adequadas incluem, entre outros, lipossomos, micelas, mi- croesferas, nanopartículas e similares. Em uma concretização específica, uma composição vesicular se refere a uma entidade esférica tendo um espaço interno vazio ou um núcleo sólido. As vesículas podem ser formuladas a partir de lipídios sintéticos ou naturais, incluindo um ou mais compostos da presente invenção, e misturas destes. Em qualquer dada vesícula, os lipídios podem estar na forma de monoca- mada ou de bicamada. No caso de mais de uma monocamada ou bi- camada, as monocamadas ou bicamadas são geralmente concêntricas. As vesículas de lipídio incluem tais entidades comumente chamadas de lipossomos (ou seja, uma vesicular incluindo uma ou mais bi- camadas lipídicas com um espaço interno vazio), micelas (ou seja, uma vesícula incluindo uma única monocamada lipídica com um espaço interno vazio), nanoesferas e similares. Assim, os lipídios podem ser usados para formar uma vesícula unilamelar (constituída por uma monocamada ou bicamada), uma vesícula oligolamelar (constituída por aproximadamente duas ou aproximadamente três monocamadas ou bicamadas) ou uma vesícula multilamelar (constituída por mais de aproximadamente três monocamadas ou bicamadas). Alternativamente, os lipídios podem ser usados para revestir uma vesícula já existente, tal como uma nanopartícula, por exemplo, uma nanoesfera. Um espaço interno vazio das vesículas pode ser preenchido por um líquido, incluindo, por exemplo, um líquido aquoso, um gás, um precursor gasoso e/ou um material sólido, incluindo, por exemplo, um ou mais agentes biologicamente ativos. Em outra concretização específica, uma composição vesicular se refere a composições em forma de agregados, tubos e similares.
[0047] As composições da invenção podem compreender um ou mais agentes biologicamente ativos, os quais são nelas incorporados ou inseridos ou a elas anexados (de modo covalente e não covalente). Mais especificamente, as composições vesiculares da invenção podem compreender no espaço interno vazio um ou mais agentes biologica-mente ativos (para funções de liberação) e/ou podem ser derivadas na sua superfície com um ou mais agentes biologicamente ativos (para funções de direcionamento ou exibição). Essa parte integra um pedido de patente depositado simultaneamente, cujo conteúdo é aqui incorporado, em sua totalidade, por referência neste pedido de patente.
[0048] O termo "colipídio" ou "(co-)lipídio formador de vesícula" neste relatório descritivo se refere a lipídios que podem estar opcio-nalmente presentes como lipídios adicionais nas composições lipídicas da invenção e podem incluir lipídios acíclicos ou cíclicos, saturados ou insaturados de origem natural ou sintética. Neste relatório descritivo, um colipídio pode ser um lipídio neutro, um lipídio catiônico ou um lipídio aniônico. Um lipídio catiônico possui carga positiva final e pode incluir lipídios tais como sais de amônio de N-[1-(2,3-dioleoilóxi)propil]- N,N,N-trimetila, por exemplo, o metilsulfato (DOTAP), DDAB, brometo de dimetildioctadecil amônio; 1,2-diacilóxi-3-trimetilamônio propanos, (inclusive, entre outros: dioleoíla, dimiristoíla, dilauroíla, dipalmitoíla e diestearoíla; além disso, duas cadeias diferentes de acila podem ser ligadas ao esqueleto de glicerol); N-[1-(2,3-dioloilóxi)propil]-N,N-dime- tilamina (DODAP); 1,2-diacilóxi-3-dimetilamônio propanos, (inclusive, entre outros: dioleoíla, dimiristoíla, dilauroíla, dipalmitoíla e diestearoí- la; além disso, duas cadeias diferentes de acila podem ser ligadas ao esqueleto de glicerol); cloreto de N-[1-(2,3-dioleilóxi)propil]-N,N,N- trimetilamônio (DOTMA); 1,2-dialquilóxi-3-dimetilamônio propanos, (in-clusive, entre outros: dioleíla, dimiristila, dilaurila, dipalmitila e dieste- arila; além disso, duas cadeias diferentes de alquila podem ser ligadas ao esqueleto de glicerol); dioctadecilamidoglicilespermina (DOGS); 3β- [N-(N',N'-dimetilamino-etano)carbamoil]colesterol (DC-Chol); trifluoro- acetato de 2,3-dioleoilóxi-N-(2-(esperminacarboxamido)-etil)-N,N-di- metil-1-propanamínio (DOSPA); β-alanil colesterol; brometo de cetil- trimetil-amônio (CTAB); diC14-amidina; N-tert-butil-N'-tetradecil-3-te- tradecilamino-propionamidina; 14Dea2; cloreto de N-(alfa-trimetilamô- nio-acetil)didodecil-D-glutamato (TMAG); cloreto de O,O'-ditetradeca- noil-N-(trimetilamônio-acetil)dietanolamina; 1,3-dioleoilóxi-2-(6-carbóxi- espermil)-propilamida (DOSPER); iodeto de N,N,N',N'-tetrametil-N,N'- bis(2-hidroxiletil)-2,3-dioleoilóxi-1,4-butan-ediamônio; derivados de clo-reto de 1-[2-(acilóxi)etil]2-alquil(alquenil)-3-(2-hidroxietil)-imidazolínio (como descritos por Solodin et al. (1995) Biochem. 43:13537-13544), tais como cloreto de 1-[2-(9(Z)-octadecenoilóxi)etil]-2-(8(Z)-heptade- cenil-3-(2-hidroxietil) imidazolínio (DOTIM), cloreto de 1-[2-(hexadeca- noilóxi)etil]-2-pentadecil-3-(2-hidroxietil)imidazolínio (DPTIM), derivados de compostos 2,3-dialquiloxipropila de amônio quaternário, contendo uma porção hidroxialquila na amina quaternária (ver, por exemplo, Felgner et al. J. Biol. Chem. 1994, 269, 2550-2561), tais como: brometo de 1,2-dioleoil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DORI), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DORIE), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxipropil amônio (DORIE-HP), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxibutil amônio (DORIE-HB), brometo de 1,2-dioleiloxipropil-3-dimetil-hidroxipentil amônio (DORIE- Hpe), brometo de 1,2-dimiristiloxipropil-3-dimetil-hidroxiletil amônio (DMRIE), brometo de 1,2-dipalmitiloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DPRIE), brometo de 1,2-diesteriloxipropil-3-dimetil-hidroxietil amônio (DSRIE); ésteres catiônicos de acil carnitinas (como relatados por San- taniello et al. Patente U.S. No 5 498 633); triésteres catiônicos de fosfa- tidilcolina, ou seja, 1,2-diacil-sn-glicerol-3-etilfosfocolinas, nas quais as cadeias de hidrocarbonetos podem ser saturadas ou insaturadas e ramificadas ou não ramificadas com comprimento da cadeia de C12 a C24, as duas cadeias de acila não sendo necessariamente idênticas. Os lipídios neutros ou aniônicos possuem carga neutra ou aniônica final. Estes podem ser selecionados a partir de esteróis ou lipídios tais como colesterol, fosfolipídios, lisolipídios, lisofosfolipídios, esfingolipí- dios ou lipídios peguilhados com carga neutra ou negativa final. Os lipídios neutros ou aniônicos úteis assim incluem: fosfatidilserina, fos- fatidilglicerol, fosfatidilinositol (não limitado por um açúcar específico), ácidos graxos, esteróis contendo um grupo ácido carboxílico, por exemplo, colesterol, sulfato de colesterol e hemissuccinato de colesterol, 1,2-diacil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, inclusive, entre outros, DOPE, 1,2-diacil-glicero-3-fosfocolinas e esfingomielina. Os ácidos graxos ligados ao esqueleto de glicerol não se limitam por um comprimento ou número específico de ligações duplas. Os fosfolipídios podem também ter dois ácidos graxos diferentes.
[0049] A presente invenção é direcionada a uma nova classe de lipídios e vesículas compreendendo esses lipídios para uso em várias aplicações médicas. Mais especificamente, a presente invenção é di-recionada a compostos éter-lipídios H-L, em que L é um grupo lipídico compreendendo pelo menos duas cadeias de hidrocarbonetos ligadas por um éter e H é um grupo dianteiro compreendendo um ácido amino curto de cadeia linear (ácido ®-amino) tendo até 6 átomos de carbono e derivados destes.
[0050] Mais especificamente, a presente invenção diz respeito a um composto da Fórmula Geral I:
[0051] em que:
[0052] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[0053] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativa- dor de Y ou um grupo espaçador,
[0054] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[0055] L é um grupo da Fórmula (a)
[0056] em que a linha tracejada representa uma ligação ao N,
[0057] R1 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb1,
[0058] R1’ representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb2,
[0059] R2 representa H ou um grupo da fórmula -CH2-ORc,
[0060] R2’ representa H ou um grupo da fórmula -ORd ou -CH2- ORd,
[0061] R3 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou - (CH2)3-ORe,
[0062] Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd e Re representam independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada,
[0063] m é 1, 2 ou 3,
[0064] com a condição de que pelo menos um de R1, R1’, R2, R2’, R3 é diferente de H.
[0065] Em uma primeira concretização de um composto da Fórmu la I, o grupo R3 é H. Mais especificamente, ou (i) R3 é H e R1 e R1’ são H, ou (ii) R3 é H e R2 e R2’ são H.
[0066] Dessa forma, nesta primeira concretização, a invenção é direcionada para compostos da Fórmula Ia:
[0067] em que L é um grupo da Fórmula (a):
[0068] e em que P1, P2, P3, Y, R1, R1', R2, R2’, Ra e m são definidos como acima para um composto da Fórmula I.
[0069] Mais especificamente, a invenção é direcionada para com postos da Fórmula Ia, em que L é um grupo das Fórmulas (b) ou (c):
[0070] em que P1, P2, P3, Y, R1, R1’, R2, R2', Ra são definidos como acima, com a condição de que, na Fórmula (b), um de R2 e R2’ é diferente de H e, na Fórmula (c), um de R1 e R1’ é diferente de H.
[0071] Em uma concretização preferida do grupo (b), R2 é H e R2’ é -ORd ou -CH2-ORd. Em outra concretização preferida do grupo (b), R2 é -CH2-ORc e R2’ é -ORd ou R2’ é -CH2-ORd.
[0072] Assim, a invenção é de preferência direcionada para com postos da Fórmula Ia, em que L é um grupo da Fórmula (b1), (b2), (b3) ou (b4):
[0073] em que a linha tracejada representa a ligação ao N e
[0074] em que Ra, Rc e Rd são independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insa- turada.
[0075] Em uma concretização preferida do grupo (c), um de R1 e R1’ é H. Em outra concretização preferida do grupo (c), nenhum de R1 e R1’ é H.
[0076] Assim, a invenção é de preferência também direcionada para compostos em que L é um grupo da Fórmula (c1) ou (c2):
[0077] em que Ra, Rb1, Rb2 são definidos como acima.
[0078] Em uma segunda concretização de um composto da Fór mula I, os grupos R1, R1’, R2, R2’ são H e R3 é um grupo da fórmula - (CH2)2-ORe ou -(CH2)3-ORe.
[0079] Assim, nesta segunda concretização, a invenção é direcio nada para compostos da Fórmula Ib,
[0080] em que R3 é um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou -(CH2)3- ORe e
[0081] P1, P2, P3, Y, Ra, Re e m são definidos como acima para um grupo da Fórmula I.
[0082] As concretizações preferidas da invenção são, portanto, compostos da Fórmula I (ou Fórmula Ia) representados por compostos das Fórmulas II ou III:
[0083] em que:
[0084] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[0085] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ati- vador de Y ou um grupo espaçador,
[0086] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[0087] R1 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb1,
[0088] R1’ representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb2,
[0089] R2 representa H ou um grupo da fórmula -CH2-ORc,
[0090] R2’ representa H ou um grupo da fórmula -ORd ou -CH2- ORd,
[0091] Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd representam independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada,
[0092] m é 1, 2 ou 3,
[0093] com a condição de que, na Fórmula II, um de R2 e R2’ é di ferente de H e, na Fórmula III, um de R1 e R1’ é diferente de H.
[0094] Concretizações mais específicas de compostos da Fórmula II são os compostos da Fórmula IIa, IIb, IIc ou IId,
[0095] em que:
[0096] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[0097] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativador de Y ou um grupo espaçador,
[0098] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[0099] Ra, Rc, Rd representam independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insa- turada,
[00100] m é 1, 2 ou 3.
[00101] Concretizações mais específicas de compostos da Fórmula III são os compostos da Fórmula IIIa ou IIIb,
[00102] em que:
[00103] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[00104] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ati- vador de Y ou um grupo espaçador,
[00105] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[00106] Ra, Rb1, Rb2 representam independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insa- turada,
[00107] m é 1, 2 ou 3.
[00108] Outras concretizações preferidas de compostos da Fórmula I (ou Fórmula Ib) são representadas pelos compostos das Fórmulas IVa e IVb,
[00109] em que:
[00110] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[00111] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ati- vador de Y ou um grupo espaçador,
[00112] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[00113] Ra, Re representam independentemente um do outro uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada e
[00114] m é 1, 2 ou 3.
[00115] O versado na técnica reconhecerá que os compostos da presente invenção contêm um ou mais centros quirais e/ou ligações du-plas e que, portanto, podem existir como estereoisômeros, tais como isômeros de ligação dupla (ou seja, isômeros geométricos, por exemplo, isômeros Z/E ou isômeros cis/trans), enantiômeros ou diastereoisôme- ros. Dessa forma, quando a estereoquímica em centros quirais não for especificada, as estruturas químicas aqui retratadas abrangem todas as possíveis configurações naqueles centros quirais, incluindo a forma es- tereoisomericamente pura (por exemplo, geometricamente pura, enanti- omericamente pura ou diastereoisomericamente pura), a forma enrique-cida (por exemplo, geometricamente enriquecida, enantiomericamente enriquecida ou diastereoisomericamente enriquecida) e misturas enan- tioméricas e estereoisoméricas. Os isômeros individuais podem ser ob-tidos utilizando as formas isoméricas correspondentes do material de partida. Alternativamente, misturas enantioméricas e estereoisoméricas podem ser resolvidas em seus enantiômeros ou estereoisômeros com-ponentes utilizando técnicas de separação ou técnicas de síntese quiral bem conhecidas pelo versado na técnica. Os compostos da invenção aqui descritos podem também existir em diversas formas tautoméricas, incluindo a forma enol, a forma ceto e suas misturas. Dessa forma, as estruturas aqui retratadas abrangem todas as possíveis formas tauto- méricas dos compostos ilustrados.
[00116] O termo "cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada", neste relatório descritivo, se refere a uma ca- deia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada tendo de 6 a 30, de preferência de 10 a 22 átomos de carbono.
[00117] O termo "saturado" combinado com cadeia de hidrocarbo- neto se refere a uma cadeia de alquila linear ou ramificada, contendo de 6 a 30, de preferência de 10 a 22 átomos de carbono. Os exemplos incluem, entre outros, caprila (decila), undecila, laurila (dodedecila), miristila (tetradecila), cetila (hexadecila), estearila (octadecila), nonadecila, araquidila (eicosila), heneicosila, behenila (docosila), tricosila, tetracosila, pentacosila, incluindo seus isômeros ramificados, por exemplo, isolaurila, anteisolaurila, isomiristila, anteisomiristila, isopal- mitila, anteisopalmitila, isostearila, anteisoestearila ou fitanil (3,7,11,15- tetrametil-hexadecanila).
[00118] O termo "insaturado" combinado com cadeia de hidrocar- boneto indica que menos do que o número máximo possível de hidro- gênios estão ligados a cada carbono na cadeia, dando origem a uma ou mais ligações duplas ou ligações triplas carbono-carbono. Em concretizações preferidas, o número de ligações insaturadas em uma cadeia de hidrocarboneto insaturada é 1, 2, 3 ou 4, de preferência 1 ou 2.
[00119] Os exemplos de grupo alquenila incluem, entre outros, al- quenilas monoinsaturadas, como decenila, undecenila, dodecenila, palmitoleíla, heptadecenila, octadecenila (elaidila, oleíla, ricinolenila), nonadecenila, eicosenila, heneicosenila, docosenila (erucila), tricoseni- la, tetracosenila, pentacosenila, e os seus isômeros de cadeias ramificadas, bem como alquenilas poli-insaturadas, tais como octadec-9,12- dienila (linoleíla, elaidolinoleíla), octadec-9,12,15-trienila (linolenila, elaidolinolenila), 9(Z),11(E),13(E)-octadecatrienila (eleostearila) e ei- cos-5,8,11,14-tetraenila.
[00120] Os exemplos de grupos alquinila incluem, entre outros, he- xadec-7-inila e octadec-9-inila.
[00121] O termo "ramificado" combinado com hidrocarboneto se re- fere a uma cadeia de hidrocarboneto tendo uma série linear de átomos de carbono, como cadeia principal, com pelo menos um substituinte de um ou mais átomos de carbono como cadeia subordinada (ou grupos ramificadores). Os exemplos de cadeias subordinadas incluem um ou mais grupos (C1-6)alquila, tais como grupo metila, etila, propila, isopro- pila, n-butila, sec-butila, terc-butila, pentila, hexila e similares, um ou mais grupos (C1-6)alquenila, tais como vinila, allila, propenila, isoprope- nila, 2-butenila e similares, ou um ou mais grupos (C1-6) alquinila, como etinila, propinila, butinila e similares. As cadeias subordinadas preferidas são grupos (C1-6)alquila, sendo os mais preferidos metila e etila.
[00122] Os compostos da invenção compreendem de preferência pelo menos duas cadeias de hidrocarbonetos, preferivelmente 2, 3, 4, 5 ou 6 cadeias de hidrocarbonetos, mais preferivelmente 2 ou 3 cadeias de hidrocarbonetos, em que as cadeias principais das cadeias de hidrocarbonetos são iguais ou diferentes, de preferência iguais, e são selecionadas a partir de cadeia de alquila, cadeia de alquenila e cadeia de alquinila, de preferência cadeia alquila e cadeia alquenila. Em uma concretização preferida, os compostos da invenção contêm duas cadeias de alquila, os quais podem ser iguais ou diferentes, de preferência iguais.
[00123] Em uma concretização específica de um composto da invenção, as cadeias de hidrocarbonetos de Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd e Re são preferivelmente selecionadas a partir de miristila, palmitila, estearila, oleíla, linoleíla e fitanoíla.
[00124] Os termos "alquila", "alcóxi", "alquenila", "alquinila", neste relatório descritivo, com referência aos grupos P1, P2, P3, possuem os significados seguintes:
[00125] O termo "alquila" se refere a uma cadeia de alquila linear ou ramificada, contendo 1 a 12, de preferência 1 to 8 átomos de carbono. Os exemplos de grupos alquila incluem, entre outros, metila, etila, n- propila, i-propila, n-butila, i-butila e t-butila. O termo "alcóxi" se refere a um radical -O-alquila. Os exemplos de grupos alcóxi incluem, entre outros, metóxi, etóxi e butóxi. O termo "alquenila" se refere a um grupo alquila insaturado linear ou ramificado tendo uma ou mais ligações duplas carbono-carbono. Os grupos alquila, alquenila e alcóxi acima podem ser opcionalmente substituídos com mais grupos. Os exemplos de substituintes incluem, entre outros, halo, hidroxila, amino, ciano, nitro, mercapto, alcoxicarbonila, amido, carbóxi, alquilsulfonila, alquil- carbonila, carbamido, carbamila, carboxila, tioureído, tiocianato, sulfo- namido, arila, heteroarila, ciclila e heterociclila.
[00126] O termo "arila" se refere a um radical carbocíclico aromático contendo de aproximadamente 6 a aproximadamente 10, de preferência 5 a 7 átomos de carbono. O grupo arila pode ser opcionalmente substituído com um ou mais substituintes para grupo arila, os quais podem ser iguais ou diferentes, em que o "substituinte para grupo arila" inclui alquila, alquenila, alquinila, arila, arilalquila, hidróxi, alcóxi, arilóxi, arilalcóxi, car- bóxi, aroíla, halo, nitro, trialometila, ciano, alcoxicarbonila, ariloxicarbonila, arilalcoxicarbonila, acilóxi, acilamino, aroilamino, carbamoíla, alquilcar- bamoíla, dialquilcarbamoíla, ariltio, alquiltio, alquileno e -NRR', em que R e R' são cada um independentemente hidrogênio, alquila, arila e arilalqui- la. Os grupos arila exemplares incluem fenila, naftila, pirenila, antrila e fenantrila substituídos ou não substituídos.
[00127] O termo "heteroarila" se refere a uma porção arila, como definida acima, tendo ao menos um heteroátomo (por exemplo, N, O ou S). Os exemplos de uma porção heteroarila incluem furila, furileno, fluorenila, pirrolila, tienila, oxazolila, imidazolila, tiazolila, piridila, pirimi- dinila, quinazolinila, quinolila, isoquinolila e indolila.
[00128] O termo "(hetero)arilóxi" se refere a um grupo (hetero)aril- O, em que o grupo (hetero)arila é como previamente descrito. Os grupos arilóxi exemplares incluem fenóxi e naftóxi. O termo "(hete ro)arilalquila" se refere a um grupo (hetero)aril-alquila, em que (hete- ro)arila e alquila são como previamente descritos. Os grupos arilalquila exemplares incluem benzila, feniletila e naftilmetila. O termo "(hete- ro)arilalquilóxi" se refere a um grupo (hetero)aralquil-O, em que o grupo (hetero)arilalquila é como previamente descrito. Um grupo arilalqui- lóxi exemplar é benzilóxi.
[00129] O termo "cicloalquila" se refere a uma porção de hidrocar- boneto cíclico saturado ou insaturado, não aromático tendo de 6 a 10 átomos de carbono, como ciclo-hexila ou ciclo-hexen-3-ila. O termo "heterocicloalquila" se refere a um cicloalquila, como aqui definido, tendo pelo menos um heteroátomo no anel (por exemplo, N, O ou S), como 4-tetra-hidropiranila ou 4-piranila.
[00130] A arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila como aqui mencionadas incluem porções substituídas e não substituídas, a menos que especificado de outra forma. Os possíveis substituintes em cicloalquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila incluem (C1-C10) al-quila, (C2-C10)alquenila, (C2-C10)alquinila, (C3-C8)cicloalquila, (C5C8) cicloalquenila, (C1-C10)alcóxi, arila, arilóxi, heteroarila, heteroari- lóxi, amino, (C1-C10)alquilamino, (C1-C20)dialquilamino, arilamino, diarilamino, hidroxila, halogênio, tio, (C1-C10)alquiltio, ariltio, (C1-C10) alquilsulfonila, arilsulfonila, acilamino, aminoacila, amidino, guanidina, ureído, ciano, nitro, acila, acilóxi, carboxila e éster carboxílico. O ciclo- alquila, heterocicloalquila, arila e heteroarila podem também ser fundidos um com o outro.
[00131] O grupo Y é O, N, S ou uma ligação covalente, de preferência O ou N, mais preferivelmente N. Entende-se que se o grupo Y for uma ligação covalente, -S1-X1 está diretamente ligado ao grupo CO.
[00132] Um "grupo protetor" é uma porção que pode ser seletivamente anexada e removida de um determinado grupo funcional quimicamente reativo em uma molécula para impedir que esta participe em reações químicas indesejadas. O grupo protetor variará dependendo do tipo de grupo quimicamente reativo que está sendo protegido, bem como das condições de reação a serem empregadas e da presença de grupos reativos ou protetores adicionais na molécula. Entende-se que o termo "grupo protetor", se usado em relação a um grupo N (tal como P1 quando Y é N, P2 ou P3) em um dos compostos, é um grupo protetor de amino, se usado em relação a um grupo COO (tal como P1 quando Y é O) em um dos compostos, é um grupo protetor de carboxi- la, se usado em relação a um grupo CO (tal como P1 quando Y é uma ligação covalente) em um dos compostos, é um grupo protetor de carbonila, e se usado em relação a um grupo S (tal como P1 quando Y é S) em um dos compostos, é um grupo protetor de enxofre.
[00133] Grupos protetores representativos para vários grupos funcionais tais como, por exemplo, grupos de ácido carboxílicos, grupos amino, grupos hidroxila, grupos tiol, grupos carbonila e similares, são bem conhecidos pelos versados na técnica e estão descritos, por exemplo, em T. W. Greene e G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, terceira edição, Wiley, N.Y., 1999, e referências ali citadas.
[00134] Para os compostos da presente invenção, um "grupo protetor de carboxila" (por exemplo, grupo P1 quando Y é O) inclui, entre outros, benzidrila, ésteres benzílicos, como éster benzílico e o- ou p- nitrobenzílico, p-metoxibenzílico, ésteres alquílicos, como éster metíli- co, t-butílico, 4-piridilmetílico, 2-naftilmetílico, 2,2-tricloroetílico, ésteres de silila, como 2-trimetilsilila, t-butildimetilsilila, t-butildifenilsilila, 2- (trimetilsilil)etila; ortoésteres, como trimetil- ou trietil ortoacetato; oxazolina, alila, 2-cloroalila, fenacila, acetonila, p-metoxifenila. Os grupos preferidos incluem benzila, t-butila.
[00135] Um grupo protetor de amida (por exemplo, grupo P1 quando Y é N) inclui, entre outros, um grupo protetor ftalimida ou trifluoroace- tamida.
[00136] Um "grupo protetor de amino" inclui tanto grupos protetores acíclicos como cíclicos (P2 e P3), por exemplo, cada um dos grupos P2 e P3 podem representar um grupo protetor que pode ser igual ou diferente, ou P2 e P3 formam juntamente com o N ao qual estão ligados um grupo protetor cíclico. Os grupos típicos incluem, entre outros, carbama- tos, como Boc (t-butiloxicarbonila, Cbz (carboxibenzila), Fmoc (fluore- nilmetiloxicarbonila), aloc (aliloxicarbonila), metil e etil carbamatos; tritila, benzila, benzilideno, tosila e similares; derivados cíclicos de imida, como succinimida e ftalimida; amidas, como formila, acetila (não) substituído e benzoíla; e grupos trialquil silila, como t-butildimetilsilila e triisopro- pilsilila. Os grupos protetores preferidos de amino incluem Boc, Cbz, Fmoc, benzila, acetila, benzoíla, tritila e similares.
[00137] Os termos "ativados" ou "ativador", por exemplo, quando usado com relação a qualquer um dos termos "grupo", "grupo amina", "grupo carboxila", "grupo espaçador", se referem a uma porção química que torna uma funcionalidade química mais sensível à modificação sob certas condições de reação, de tal modo que a funcionalidade química ativada possa reagir sob as condições apropriadas com um segundo grupo químico, assim formando uma ligação covalente.
[00138] Por exemplo, um grupo ativador pode converter um grupo de partida ruim em um grupo de partida bom ou aumentar (ou diminuir) a suscetibilidade a ataque nucleofílico ou a outras transformações químicas.
[00139] Dessa forma, um "grupo ativador de carboxila", neste relatório descritivo, significa uma porção que substitui o hidrogênio ou a hidroxila de um grupo carboxila, assim alterando as propriedades químicas e eletrônicas do grupo carboxila, de tal modo que o grupo car- boxila seja mais suscetível ao ataque nucleofílico ou à substituição.
[00140] Em concretizações nas quais o hidrogênio do grupo carbo- xila é substituído, os grupos ativadores exemplares de carboxila inclu- em, por exemplo, alquila, arila, arilalquila, heteroarila, heterociclila, al- quilcarbonila, arilcarbonila, arilalquilcarbonila, heteroarilcarbonila, hete- rociclilcarbonila, C(S)O-arila, C(S)O-alquila, silila ou alquilcarbonila substituído. Um exemplo de grupo ativador de aril carboxila é pentaha- lofenila, como pentafluorofenila; e um exemplo do grupo ativador de alquilcarbonilcarboxila é acetila ou trifluoroacetila. Os grupos ativado- res de carboxila podem opcionalmente ser substituídos. Um exemplo de um grupo ativador substituído de carboxila é alquilcarbonila substituída, por exemplo, alquilcarbonila substituída por carboxila, tal como succinil (3-carboxilpropionila).
[00141] A ativação de carboxila na qual o hidrogênio do grupo - C(=O)-OH é substituído pode também envolver o uso de agentes de acoplamento, os quais são porções que promovem reações de adição nucleofílica, ou seja, substituintes que possuem um efeito final de reti-rada de elétron no carbonila. Tais grupos atuam auxiliando ou promo-vendo o acoplamento, ou melhorando a taxa de acoplamento de grupos carboxilato com compostos tendo funcionalidades reativas, por exemplo, nucleófilos, incluindo grupos amino, tais como na formação da funcionalidade amino. Agentes de acoplamento são bem conhecidos por qualquer versado na técnica e estão descritos, por exemplo, em Larock, R. C., Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., NY (1989), e Carey, F. A. e Sundberg, R. J., Advanced Organic Chemistry, 3a edição, Plenum Press, NY (1990), cujos conteúdos são aqui incorporados, em sua totalidade, por referência neste pedido de patente.
[00142] A ativação de carboxila, na qual o grupo hidroxila do grupo - C(=O)-OH é substituído, inclui, por exemplo, substituir a hidroxila por uma porção como um grupo halo, tal como flúor, cloro, bromo ou iodo, resultando em um haleto de ácido carboxílico, que é mais suscetível ao ataque nucleofílico ou à substituição.
[00143] Portanto, os típicos grupos ativadores ou de acoplamento incluem, entre outros, ésteres e amidas tais como hidroxibenzotriazol, imidazol, nitrofenol, pentaclorofenol, N-hidroxissuccinimida, diciclo- hexilcarbodiimida, N-hidróxi-N-metoxiamina e similares; anidridos de ácidos, tais como o anidrido de ácido acético, fórmico, sulfônico, meta- nossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfônico ou p-tolilsulfônico e similares; e haletos ácidos tais como cloreto, brometo ou iodeto ácido.
[00144] O composto com carbonila ativado é obtido reagindo uma porção reativa de escolha com o composto carbonila, utilizando procedimentos padrão. O composto com carbonila ativado por ser gerado in situ, ou pode ser provido em forma isolada, conforme apropriado. Porções reativas exemplares para obter os compostos ativados acima incluem os respectivos grupos contendo isotiocianato, isocianato, mono- clorotriazina, diclorotriazina, piridina mono ou dissubstituída com halo- gênio, diazina mono ou di-halo substituída, maleimida, aziridina, haleto de sulfonila, haleto ácido, éster de hidroxissuccinimida, éster de hidro- xisulfossuccinimida, éster de imido, hidrazina, azidonitrofenila, azida, 3-(2-piridil-ditio)proprionamida, glioxal e aldeído.
[00145] O termo "espaçador" ou "grupo espaçador" em conjunto com os grupos P1, P2, P3 é usado neste relatório descritivo para se referir a um grupo químico bivalente ramificado ou não ramificado que permite ligar o composto da invenção a uma porção mais, ou se, um grupo bioativo em distância suficiente para eliminar qualquer interação entre o composto e outra porção e/ou para reduzir qualquer impedimento estérico (causado pelo próprio composto ou por quaisquer outras moléculas vizinhas) que possa ter impacto sobre a atividade biológica da outra porção (tal como a afinidade de ligação de ligantes a seu receptor). Dependendo do uso pretendido de um conjugado de éter-lipídio e ligante bioativo, os grupos espaçadores podem ser de diferente comprimento e podem ser estáveis (em termos hidrolíticos, enzimáticos ou químicos) ou podem incluir uma ligação passível de clivagem. As ligações passíveis de clivagem da invenção podem ser selecionadas para serem clivadas mediante qualquer química de cli-vagem, por exemplo, química, enzimática, hidrolítica e similares. Os ligantes cliváveis exemplares incluem, entre outros, ligantes peptídicos passiveis de clivagem por proteases, ligados de ácidos nucleicos sen-síveis a nucleases, ligantes lipídicos sensíveis a lipases, ligantes car-boidratos sensíveis a glicosidases, ligantes sensíveis ao pH, ligantes sensíveis à hipóxia, ligantes fotocliváveis, ligantes lábeis ao calor, li- gantes cliváveis por enzimas, ligantes sensíveis ao ultrassom, ligantes cliváveis por raios-X, etc.
[00146] Os grupos P1, P2, P3 podem representam independentemente um do outro H, um grupo protetor ou um grupo espaçador. Mais especificamente P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativador de Y ou um grupo espaçador S1; P2 representa H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador S2; e P3 representa H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador S3; ou P2 e P3 formam juntamente com o N ao qual estão ligados uma estrutura em anel.
[00147] Entende-se que os espaçadores podem ou não ser um grupo final ativado para permitir a ligação do composto modificado pelo espa- çador da invenção a uma porção mais, tal como um grupo bioativo.
[00148] Em concretizações específicas, um "grupo espaçador" (também denominado grupos S1, S2, S3) representa um grupo espaça- dor curto ou um grupo espaçador de cadeia longa, selecionado a partir de uma cadeia de alquileno opcionalmente compreendendo um ou mais dos grupos selecionados a partir das funções cetona, éster, éter, amino, amida, amidina, imida, carbamato ou tiocarbamato, glicerol, ureia, tioureia, ligações duplas ou anéis aromáticos.
[00149] Mais especificamente, um grupo espaçador curto (ou grupos S1, S2, S3) pode ser selecionado a partir de (C1-C12)alquila, (C2- C12)alquenila, arila, arilalquila, heteroarila.
[00150] Um grupo espaçador de cadeia longa (ou grupos S1, S2, S3) pode ser selecionado a partir de radicais poliméricos da fórmula -W- (CH2-)k-W-, em que k é um número inteiro entre 13 e 3000 e W e W‘ são grupos reativos capazes de reagir com grupos amino, carboxila, hidróxi ou tio, e em que um ou mais dos grupos CH2 não adjacentes podem ser independentemente substituídos por arila, heteroarila, - CH=CH-, -C^C- ou um grupo hidrofílico (ou polar) selecionado a partir de -O-, -CO-, -CO-O-,-O-CO-, -NR’-, -NR’-CO-, -CO-NR’-, -NR’-CO-O-, -O-CO-NR’-, -NR’-CO-NR’- e -O-CO-O-, em que R’ representa hidrogênio ou (C1-C12)alquila. Entende-se que substituir mais de um grupo CH2 não adjacente pelo mesmo grupo pode produzir uma cadeia po- limérica com uma unidade específica de repetição (por exemplo, um poliéster, poliéter, poli-imida, etc.).
[00151] Os grupos espaçadores preferidos incluem radicais polimé- ricos hidrofílicos (com afinidade aumentada por soluções aquosas), ou seja, polímeros um ou mais dos grupos hidrofílicos (ou polares) acima em seu esqueleto de alquileno. Os exemplos típicos de radicais poli- méricos hidrofílicos incluem polióxi(C2-C3)alquilenos (por exemplo, po- lietilenoglicol (PEG) ou polipropilenoglicol (PPG)), polissacarídeos (por exemplo, dextrano, pululano, quitosano, ácido hialurônico), poliamidas (por exemplo, poliaminoácidos, peptídeos semissintéticos e polinucleo- tídeos); ácido polisiálico, poliésteres (por exemplo, polilactídeo (PLA), polilactídeo-co-glicolídeo (PLGA)), policarbonatos, polietilenoiminas (PEI), poli-imidas, acetato de polivinila (PVA).
[00152] Um espaçador preferido é "PEG" ou "polietilenoglicol", que abrange qualquer poli(óxido de etileno) solúvel em água. Tipicamente, "PEG" significa um polímero que contém uma maioria, por exemplo, > 50%, de subunidades que são —CH2CH2O—. Formas diferentes de PEG podem diferir em massas moleculares, estruturas ou geometrias (por exemplo, PEGs ramificados, lineares, em forquilha, multifuncionais e similares). Os PEGs para uso na presente invenção podem de preferência compreender uma das duas seguintes estruturas: "- O(CH2CH2O)m-" ou "-CH2CH2O(CH2CH2O)m-CH2CH2-," em que m é 3 a 3000, e os grupos terminais e a arquitetura do PEG global podem variar. Como indicado acima, dependendo de seu uso, o PEG pode estar na forma com segmentos terminais (end-capped). Quando o PEG é definido como "-O(CH2CH2O)m-", o grupo terminal é geralmente um grupo contendo carbono, tipicamente constituído por 1-20 carbonos, é preferivelmente alquila (por exemplo, metila, etila ou benzila), embora suas formas saturadas e insaturadas, bem como arila, heteroarila, ci- clila, heterociclila e formas substituídas de qualquer um dos precedentes sejam também previstas. Quando o PEG é definido como "- CH2CH2O(CH2CH2O)m-CH2CH2-", o grupo terminal é em geral um grupo contendo carbono, tipicamente constituído por 1-20 átomos de carbono e um átomo de oxigênio que está ligado covalentemente ao grupo e disponível para ligação covalente com uma terminação do PEG. Neste caso, o grupo é tipicamente alcóxi (por exemplo, metóxi, etóxi ou benzilóxi) e com respeito ao grupo contendo carbono, este pode opcionalmente ser saturado e insaturado, bem como arila, heteroarila, ciclila, heterociclila e formas substituídas de qualquer um dos prece-dentes. A outra terminação ("sem segmento terminal") é tipicamente uma hidroxila, amina ou um grupo ativado que pode ser submetido à modificação química adicional quando o PEG é definido como "- CH2CH2O(CH2CH2O)m-CH2CH2-". Adicionalmente, o grupo terminal pode também ser um silano.
[00153] Uma revisão para o prepare de PEG com vários grupos terminais funcionados ou ativados é conhecida na técnica (ver, por exemplo, Zalipsky S., Bioconjug. Chem., 6, 150-165 (1995)).
[00154] Em concretizações preferidas, a invenção é direcionada a compostos das Fórmulas V, VI e VII seguintes:
[00155] em que:
[00156] Y representa O, N, S ou uma ligação covalente,
[00157] P1 representa H, um grupo protetor de Y ou um grupo ativa- dor de Y ou um grupo espaçador,
[00158] P2, P3 representam independentemente um do outro H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3 formam, juntamente com o N ao qual estão ligados, uma estrutura em anel,
[00159] p1, q1, p2, q2, p3, q3 são independentemente um do outro 1 a 23, com a condição de que a soma de p1 e q1, p2 e q2, p3 e q3 seja de 12 a 24.
[00160] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um método para preparar um composto da invenção.
[00161] Os compostos da invenção são especialmente adequados para uso no prepare de composições vesiculares, tais como liposso- mos, micelas e nanopartículas (revestidas com lipídios).
[00162] Consequentemente, em outro aspecto, a presente invenção é direcionada para composições vesiculares que são formadas por pelo menos um composto da invenção. Tais vesículas compreendem compostos não derivados ou compostos derivados compreendendo um grupo espaçador ou suas misturas. Opcionalmente, as composições vesiculares podem compreender um ou mais lipídios formadores de vesícula.
[00163] Em uma concretização, uma vesícula pode compreender derivados de lipídios com espaçadores da invenção e outros lipídios formadores de vesícula (colipídios), de preferência em uma razão de 1:200 a 200:1.
[00164] Tal como os versados na técnica reconhecerão, uma vez de posse da presente invenção, composições vesiculares, em forma de nanopartículas revestidas com lipídios, lipossomos, micelas ou outras vesículas, podem ser rapidamente preparadas a partir de compostos da invenção utilizando condições padrões conhecidas na técnica.
[00165] Dependendo das propriedades físicas desejadas, as com-posições vesiculares podem ser preparadas a partir de compostos da invenção, opcionalmente combinados com um ou mais colipídios, in-cluindo lipídios estabilizantes. Os compostos estabilizantes específicos que são no final combinados com os presentes compostos podem ser selecionados como desejado para otimizar as propriedades da compo-sição resultante (e são rapidamente identificáveis pelo versado na téc-nica sem a indevida experimentação).
[00166] As composições vesiculares da invenção são especialmente eficazes como carreadores para a liberação de agentes bioativos ou como carreadores para apresentação de antígenos.
[00167] O termo "agente bioativo" neste relatório descritivo se refere a qualquer composto sintético ou natural (em forma livre, em forma de sal ou forma solvatada ou hidratada) que tenha uma atividade biológica, tal como um agente de direcionamento, um agente antigênico, um agente terapêutico ou um agente diagnóstico.
[00168] O termo "sistema de apresentação de antígeno" (também denominado "sistema de exibição de antígeno"), neste relatório descri-tivo, se refere a um sistema natural o sintético, que (i) pode apresentar pelo menos um antígeno (ou parte deste) em tal maneira que o pelo menos um antígeno (ou parte deste) pode ser reconhecido ou ligado por uma molécula imune efetora, por exemplo, um receptor de antíge- no de células T na superfície de uma célula T, ou (ii) é capaz de apresentar pelo menos um antígeno (ou parte deste) na forma de um complexo antígeno-MHC reconhecível por células efetoras específicas do sistema imune, e assim induzir uma resposta celular imune eficaz contra o antígeno (ou parte deste) que é apresentado.
[00169] As composições vesiculares micelares de acordo com a invenção podem ser preparadas usando qualquer um de uma variedade de métodos preparatórios convencionais de micelas, os quais serão evidentes para os versados na técnica. Estes métodos tipicamente en-volvem suspensão do composto lipídico em um solvente orgânico, evaporação do solvente, ressuspensão em um meio aquoso, sonica- ção e centrifugação. Os métodos precedentes, bem como outros, são discutidos, por exemplo, em Canfield et al., Methods in Enzymology, Vol. 189, pág. 418-422 (1990); El-Gorab et al, Biochem. Biophys. Acta, Vol. 306, pág. 58-66 (1973); Colloidal Surfactant, Shinoda, et al, Academic Press, N.Y. (1963) (especialmente "The Formation of Micelles", Shinoda, capítulo 1, pág. 1-88); Catalysis in Micellar and Macromolecular Systems, Fendler and Fendler, Academic Press, N.Y. (1975). Os conteúdos de cada uma das publicações precedentes são aqui in- corporados, em sua totalidade, por referência neste pedido de patente.
[00170] Os materiais estabilizantes opcionais a serem combinados com os compostos da invenção para estabilizar as composições mice- lares produzidas a partir dos compostos incluem brometo de lauriltri- metilamônio, brometo de cetiltrimetilamônio, brometo de miristiltrimeti- lamônio, cloreto de (C12-C16)alquildimetilbenzilamônio, brometo e cloreto de cetilpiridínio, lauril sulfato e os semelhantes. Outros materiais para estabilizar as composições micelares, além daqueles exemplificados acima, seriam evidentes para o versado na técnica com na presente invenção.
[00171] As composições vesiculares lipossomais podem compreender um ou mais compostos não derivados e/ou um ou mais compostos derivados (contendo um grupo espaçador), opcionalmente combinados com um ou mais colipídeos e/ou um ou mais compostos estabilizantes adicionais. O(s) presente(s) composto(s) (opcionalmente combinado(s) com os colipídios) pode(m) estar na forma de monocamada ou de bi- camada. No caso de mais de uma monocamada ou bicamada, as mo- nocamadas ou bicamadas são geralmente concêntricas. Assim, os presentes compostos (e opcionalmente colipídeos) podem ser usados para formar um lipossomo unilamelar (constituído por uma monoca- mada ou bicamada), um lipossomo oligolamelar (constituído por duas ou três monocamadas ou bicamadas) ou um lipossomo multilamelar (constituído por mais de três monocamadas ou bicamadas).
[00172] Os (co-)lipídeos, que podem ser usados em combinação com os presentes compostos e na formação de composições vesiculares lipossomais da invenção incluem preferivelmente lipídios catiôni- cos, fosfatidilcolina (PC), fosfatidil-DL-glicerol (PG), L-α-fosfatidile- tanolamina (PE), colesterol, sal do hemissucinato de tricolesterila (CHEMS), 1,2-dioleoil-3-trimetilamônio-propano (DOTAP)
[00173] Outros materiais para uso no prepare de composições vesi- culares lipossomais da invenção, além daqueles exemplificados acima, seriam evidentes para o versado na técnica com base neste relatório descritivo.
[00174] A quantidade de material estabilizante, tal como, por exemplo, composto anfipático adicional, que é combinada com os presentes compostos pode variar dependendo de uma gama de fatores, incluindo a estrutura específica do(s) presente(s) composto(s) selecionado(s) da invenção, o(s) material(is) estabilizante(s) específico(s) selecionado(s), o uso específico para qual este é empregado, o modo de liberação e fatores semelhantes. A quantidade de material estabilizante a ser combinada com os presentes compostos e a razão de material estabi- lizante para composto variarão, e estas podem ser rapidamente de-terminadas pelo versado na técnica com base neste relatório descritivo. Tipicamente, as razões superiores a aproximadamente 4:1, 3:1 ou 2:1, do presente composto para o lipídio estabilizante, são preferidas.
[00175] A seleção de colipídios e compostos estabilizantes adequados no preparo de composições vesiculares lipossomais da invenção será evidente para o versado na técnica, e esta poderá ser conseguida sem a indevida experimentação, com base no presente relatório descritivo.
[00176] Há disponível uma ampla variedade de métodos com relação ao preparo de composições vesiculares lipossomais da invenção. Dessa forma, os lipossomos podem ser preparados utilizando qualquer uma de uma variedade de técnicas preparatórias convencionais de lipossomos, as quais serão evidentes para os versados na técnica. Essas técnicas incluem injeção de etanol, técnica da película fina, homogeneização, diálise do solvente, hidratação forçada, evaporação em fase reversa, microemulsificação e congelamento-descongelamento simples, utilizando, por exemplo, equipamento convencional de mi- croemulsificação. Métodos adicionais para preparar as composições vesiculares lipossomais da invenção a partir dos compostos da presente invenção incluem, por exemplo, sonicação, diálise de quelato, homogeneização, infusão de solvente, formação espontânea, vaporização do solvente, diálise controlada com detergente e outros, cada um envolvendo o preparo de lipossomos de várias maneiras. Tipicamente, os métodos que envolvem injeção de etanol, técnica da película fina, homogeneização e extrusão são preferidos com relação ao preparo de composições lipossomais da invenção a partir dos compostos da presente invenção.
[00177] O tamanho dos lipossomos pode ser ajustado, se desejado, por uma variedade de técnicas, incluindo extrusão, filtração, sonicação e homogeneização. Outros métodos para ajustar o tamanho dos lipos- somos e para modular a biodistribuição lipossomal resultante e a de-puração dos lipossomos seriam evidentes para o versado na técnica com base neste relatório descritivo. De preferência, o tamanho dos lipossomos é ajustado por extrusão sob pressão através de poros com tamanho definido. As composições lipossomais da invenção podem ser de qualquer tamanho, de preferência com diâmetro externo inferior a cerca de 200 nanômetros (nm).
[00178] As composições vesiculares nanoparticuladas ou nanopar- tículas são tipicamente partículas pequenas com diâmetro tipicamente inferior a 1 mícron, de preferência na faixa de aproximadamente 251000 nm, mais preferivelmente na faixa de aproximadamente 50- 300nm, mais preferivelmente na faixa de aproximadamente 60-200 nm. Uma nanopartículas pode ter qualquer forma e qualquer morfologia. Os exemplos de nanopartículas incluem nanopós, nanoagregados, nanocristais, nanoesferas, nanofibras e outras geometrias. Nanopolí- mero se refere a um polímero que, quando da polimerização, se monta e forma uma nanopartículas, tal como, por exemplo, nanobastonete, nanofibra ou nanoesfera. Nanoesfera se refere a um tipo de nanopartí- culas cuja forma é aproximadamente esférica e cujo núcleo pode ser vazio ou sólido.
[00179] Em uma concretização, as nanopartículas possuem uma estrutura de núcleo com matriz, a qual pode ser formada usando todos os tipos de materiais e estruturas, incluindo materiais inorgânicos, como metais, e materiais orgânicos, como polímeros, inclusive polímeros fisiologicamente aceitáveis. Exemplos não limitantes de tais polímeros incluem, por exemplo, poliésteres (como poli(ácido láctico), poli(L- lisina), poli(ácido glicólico) e poli(ácido láctico-co-glicólico)), poli(ácido láctico-colisina), poli(ácido láctico-enxerto-lisina), polianidridos (como poli(dímero de ácidos graxos), poli(ácido fumárico), poli(ácido sebáci- co), poli(carboxifenóxi propano), poli(carboxifenóxi hexano), copolíme- ros destes monômeros e similares), poli(anidridos-co-imidas), po- li(amidas), poli(ortoésteres), poli(iminocarbonatos), poli(uretanos), po- li(organofosfazenos), poli(fosfatos), poli(acetato de vinil etileno) e outros acetatos de celulose acil substituídos e seus derivados, po- li(caprolactona), poli(carbonatos), poli(aminoácidos), poli(acrilatos), poliacetais, poli(cianoacrilatos), poli(estirenos), poli(cloreto de vinila), poli(fluoreto de vinila), poli(vinil imidazol), poliolefinas clorosulfonadas, óxido de polietileno, copolímeros, poliesterino e blendas ou copolíme- ros destes. As nanopartículas podem também incluir hidroxipropilcelu- lose (HPC), N-isopropilacrilamida (NIPA), polietilenoglicol, álcool poli- vinílico (PVA), polietilenimina, quitosano, quitina, sulfato de dextrana, heparina, sulfato de condroitina, gelatina, etc., bem como seus derivados, copolímeros e misturas destes. Um método não limitante para criar nanopartículas é descrito, por exemplo, na Publicação U.S. 2003/0138490. Em outra concretização, o material do núcleo pode ser selecionado a partir de metais, ligas, metaloides, compostos metálicos tais como óxidos de metais, compostos inorgânicos e materiais à base de carbono, especialmente nanotubos de carbono, nanopartículas uni- dimensionais de fulereno C6o e nanopartículas tridimensionais de fule- reno C70.
[00180] Os exemplos adequados de metais incluem, entre outros, metais nobres ou de platina, como Ag, Au, Pd, Pt, Rh, Ir, Ru e Os, metais de transição como Ti, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Zr, Nb, Mo, Ta, W, Re, e metais do grupo principal como Al, Ga, In, Si, Ge, Sn, Sb, Bi, Te. Deverá ser reconhecido que alguns dos metais do grupo principal, especialmente Si e Ge, são também comumente chamados de meta- loides. Os exemplos adequados de ligas incluem, entre outros, ligas de metais nobres ou de platina e de metais de transição, especialmente ligas de prata e metais de transição como Ag/Ni, Ag/Cu, Ag/Co, e platina e metais de transição como Pt/Cu, ou ligas de metais nobres ou platina como Ru/Pt. Exemplos não limitantes de compostos inorgânicos incluem, entre outros, SiO2, compostos metálicos, especialmente, óxidos de metais, como TiO2 e óxidos de ferro.
[00181] O versado na técnica saberá que a escolha do material depende do uso pretendido para a nanopartículas.
[00182] As nanopartículas opcionalmente incluem um grupo funcional como, por exemplo, um grupo carboxila, sulfidrila, hidroxila ou amino, para ligar covalentemente outros compostos, tais como ligantes, à superfície de uma nanopartícula. Em outras concretizações, os com-postos, tais como ligantes, podem ser associados a uma nanopartícula por meio de forças intermoleculares, como as forças de Van-der- Waals, interações iônicas, interações hidrofóbicas.
[00183] Em certas concretizações, as nanopartículas podem ser associadas com um agente bioativo (por exemplo, entrelaçado, encai-xado, incorporado, encapsulado, ligado à superfície ou de outra forma associado com a nanopartícula). De preferência, tal agente bioativo é associado a uma nanopartícula através de um composto da invenção que atua como ligante entre o agente bioativo e a nanopartícula. Estes aspectos dos presentes compostos e de suas composições integram um pedido de patente internacional depositado simultaneamente, cujo conteúdo e aqui incorporado, em sua totalidade, por referência neste pedido de patente.
[00184] As nanopartículas podem também se agrupar (opcionalmente com um agente dispersante) e formar um nanoagregado. A formulação independente de cada tipo de nanopartícula antes da formação do agregado e um arranjo especial de nanopartículas no agregado podem permitir controlar a duração e a concentração de um ingrediente bioativo.
[00185] Em uma concretização da presente invenção, um ou mais compostos não derivados ou derivados da invenção podem ser incor-porados, anexados ou adsorvidos a uma nanopartícula. De preferência, nanopartículas revestidas com lipídios (LCN) podem ser formadas a partir de partículas manométricas com núcleo e um ou mais compostos da presente invenção e, opcionalmente um ou mais colipídios. Em qualquer dada nanopartícula revestida com lipídios, os lipídios podem estar na forma de monocamada ou de bicamada. No caso de mais de uma monocamada ou bicamada, as monocamadas ou bicamadas são geralmente concêntricas. O revestimento das nanopartículas é preferi-velmente realizado em uma solução compreendendo os compostos da invenção e concedendo tempo suficiente para permitir que os compostos recubram as nanopartículas (utilizando técnicas conhecidas no campo, ver, por exemplo, Journal of Controlled Release, Vol. 137(1), 69-77, 2009). Em qualquer dada nanopartícula revestida com lipídios, os lipídios podem estar na forma de monocamada ou de bicamada. No caso de mais de uma monocamada ou bicamada, as monocamadas ou bicamadas são geralmente concêntricas.
[00186] Vários métodos podem ser empregados para fabricar na- nopartículas do tamanho adequado. Esses métodos incluem métodos de vaporização (por exemplo, expansão livre de jato, vaporização a laser, erosão a fio, eletroexplosão e deposição química de vapor), métodos físicos envolvendo desgaste mecânico por arrastamento (por exemplo, a tecnologia Pearlmilling (moagem perolizante), Elan Nanosystems, Irlanda) e a deposição interfacial após o deslocamento do solvente.
[00187] Tal como os versados na técnica reconhecerão, qualquer um dos presentes compostos e composições vesiculares contendo os compostos da invenção, com ou sem agentes bioativos, podem ser liofilizados para estocagem e reconstituídos em, por exemplo, um meio aquoso (como água estéril ou solução com tampão fosfato ou solução salina aquosa), de preferência sob agitação vigorosa. Se necessário, aditivos podem ser incluídos para evitar a aglutinação ou fusão dos lipídios como resultado da liofilização. Os aditivos úteis incluem, entre outros, sorbitol, manitol, cloreto de sódio, glicose, trealose, polivinilpir- rolidona e poli(etilenoglicol), por exemplo, PEG 400.
[00188] Como indicado acima, os presentes compostos e em particular as composições lipossomais da presente invenção são especialmente adequados para uso como carreadores para liberação direcionada de agentes bioativos ou para uso como sistemas de exibição de antígenos. Dessa forma, os compostos da presente invenção são especialmente aplicáveis ao uso em métodos in vitro e/ou in vivo para o tratamento de doenças, para as quais uma liberação direcionada de um ou mais agentes biologicamente ativos específicos é desejável ou necessária, bem como ao uso em métodos in vitro/in vivo para aplicações diagnósticas. Esses aspectos dos presentes compostos e de suas composições integram um pedido de patente internacional depositado simultaneamente, cujo conteúdo é aqui incorporado, em sua totalidade, por referência neste pedido de patente.
[00189] Em mais um aspecto, a presente invenção diz respeito a um kit constituído por um recipiente que é dividido em compartimentos para conter os vários elementos do kit. Um compartimento pode conter uma quantidade predeterminada de um composto da presente invenção ou de uma composição vesicular deste. Em caso de composições vesiculares, estas podem ser acompanhadas ou não por um tampão de pH para ajustar o pH da composição à faixa fisiológica de aproximadamente 7 a aproximadamente 8, ou então em forma liofilizada ou seca por conge-lamento para reconstituição no momento do uso. Além disso, dentro do kit, serão incluídos outros reagentes e instruções para uso.
[00190] A presente invenção é descrita mais detalhadamente nos exemplos a seguir.
[00191] Materiais: Colesterol e POPC são adquiridos da Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL). Todos os aminoácidos protegidos são obtidos da Novabiochem. A resina D-2230 de difenildiazometano é obtida da Bachem AG. Todas as outras substâncias químicas e os solventes são de grau A.R. ou acima.
[00192] 2,3-Bis(tetradecilóxi)propan-1-amina é sintetizada de acor do com Kokotos et al. Chemistry - A European Journal, 2000, vol. 6, no 22, 4211-4217. De maneira análoga, bis(3-((Z)-octadec-9- enilóxi)propil)amina é obtida a partir de metanossulfatonato de oleíla e bis(3-hidroxipropil)amina (ver MaGee et al., J. Journal of Organic Chemistry, 2000, vol. 65, no 24, 8367-8371).
[00193] Exemplo 1: Síntese de a-terc-butiléster-Y-2,3-bis(tetrade- cilóxi)propil-amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)metóxi) carboni-lamino)-glutâmico
[00194] 15 g de Fmoc-Glu(OSu)OtBu (éster de α-terc-butiléster y-N- hidroxissuccinimida de ácido ((2S)-Nα-(9-fluorenilmetiloxicarbonil)-glu- tâmico) são dissolvidos em diclorometano à temperatura ambiente. Depois da adição de 15,3 g de 2,3-bis(tetradecilóxi)propan-1-amina, a mistura é agitada por 17 horas e evaporada até a dessecação completa. O resíduo é dissolvido em uma quantidade mínima de diclorometa- no e purificado por cromatografia em coluna usando SiO2, como fase sólida, e éter metil terc-butílico/hexano/7:3 como eluente. Após a evaporação de frações do produto, 25,5 g de a-terc-butiléster-Y—2,3- bis(tetradecilóxi)propil-amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)me- tóxi)carbonilamino)-glutâmico são obtidos em forma de sólido incolor. 1H-RMN em CDCl3 (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 7,76 (d, 2H, Fmoc), 7,61 (d, 2H, Fmoc), 7,25-7,43 (m, 4H, Fmoc), 6,13 (bs, NH, 1H), 5,60 (bs, NH, 1H), 4,39; 4,18-4,25 (d e m, 4H), 3,213,62 (m, 9H), 1,97-2,23 (m, 4 H), 1,51-1,60 (m, 4H), 1,47 (s, 9 H), 1,25 (m, 44H, CH2), 0,84-0,91 (m, 6H, 2x alquila-CH3).
[00195] Exemplo 2: Síntese de Y-2,3-bis(tetradecilóxi)propil-amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-glutâmico
[00196] 4,6 g (5,1 mmols) de a-terc-butiléster-Y-2,3-bis(tetradecilóxi) propil-amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)- glutâmico - são dissolvidos em 25 mL de diclorometano em um balão de 100 mL e tratados com 25 mL de ácido trifluoroacético. Depois de 1 hora, o grupo éster é completamente clivado e a solução é despejada em 50 mL de água fria. A camada orgânica é extraída, lavada para pH neutro com água e seca com Na2SO4. A camada orgânica é separada por fil-tração e o solvente, evaporado para fornecer 4,2 g do produto desejado (5,0 mmol, 98% de rendimento, TLC: MtBE/hexano 7:3; Rf = 0,43).
[00197] Exemplo 3: Síntese de ácido-Y-(2,3-bis(tetradecilóxi) pro- pil)amida (2S)-glutâmico
[00198] 5 g de a-terc-butiléster-Y-2,3-bis(tetradecilóxi)propil-amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-glutâmico são adicionados a 85 mL de N,N-dimetilformamida. 2,6 mL de piperidina são adicionados à mistura. A mistura é agitada por três horas à temperatura ambiente e depois evaporada até a dessecação completa sob vácuo para fornecer 5,2 g de Y-(2,3-bis(tetradecilóxi)propil)amida de ácido (2S)-glutâmico em forma de sólido incolor, o qual pode ser usado para preparar vesículas lipídicas ou para derivação prévia com um agente ativo ou um grupo espaçador.
[00199] Exemplo 4: Síntese de (R)-2-amino-N1-(2-(4-metoxibenza- mido)betil)-N4,N4-bis(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)succinamida
[00200] Síntese de N-(2-aminoetil)-4-metoxibenzamida
[00201] 3,0 g de cloreto de 4-metoxibenzoíla são adicionados a 30 mL de 1,2-diaminoetano em diclorometano a -78°C e subsequentemente deixado aquecer para 23°C. Um tratamento (workup) aquoso ácido-base e a evaporação até a dessecação completa sob vácuo fornecem 1,65 g de N-(2-aminoetil)-4-metoxibenzamida, um óleo amarelo claro. 1H-RMN em CDCl3 (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 8,53 (t, 1H, NH), 7,91 (d, 2H, Benz), 6,99 (d, 2H, Benz), 4,75 (bs, 2H, NH2), 3,81 (s, 3H, CH3), 3,39, (dd, 2H, CH2), 2,82 (t, 2H, CH2).
[00202] (b) Síntese de 3-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-4- (2-(4-metoxibenzamido)etilamino)-4-oxobutanoato de (R)-terc-butila
[00203] 3,0 g 2 N-(2-aminoetil)-4-metoxibenzamida (obtido na etapa (a)) e 1,70 mL de N-metilmorfolina em DMF (0°C) são adicionados a uma solução com 6,35 g de Fmoc-Asp(OtBu)-OH, 1,70 mL de N- metilmorfolina e 2,00 mL de isobutilcloroformato em acetato de etila (-12°C) e agitados por 3 horas enquanto deixando aquecer para 23°C. A diluição da suspensão resultante com acetato de etila, seguida por um tratamento aquoso ácido-base e a evaporação até a dessecação com-pleta sob vácuo produziram 9,55 g de 3-(((9H-fluoren-9-il)metóxi) car- bonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido)etilamino)-4-oxobutanoato de (R)-terc-butila. Esse material bruto é suspenso em éter isopropílico por 23 horas, depois separado por filtração e seco para fornecer 4,47 g de 3-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido) eti- lamino)-4-oxobutanoato de (R)-terc-butila em cristais brancos. 1H-RMN em CDCl3 (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 8,28 (t, 1H, NH), 8,07 (t, 1H, NH), 7,89 (d, 2H, Fmoc), 7,81 (d, 2H, Benz), 7,71-7,60 (m, 2H, Fmoc e 1H, NH), 7,46-7,27 (m, 4H, Fmoc), 6,96 (d, 2H, Benz), 4,35-4,20 (m, 3H, Fmoc, e 1H CH), 3,78 (s, 3H, CH3), 3,403,20, (m, 4H, 2xCH2), 2,69 (dd, 1H, CH2), 2,46 (dd, 1H, CH2), 1,37 (s, 9H, 3xCH3).
[00204] (c) Síntese de acetato de sódio (R)-3-(((9H-fluoren-9-il) me- tóxi)carbonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido)etilamino)-4- oxobutanoico
[00205] 30,0 mL de ácido trifluoroacético são adicionados a 3,0 g de 3-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido) etilamino)-4-oxobutanoato de (R)-terc-butila (obtido na etapa (b)) em diclorometano a 23°C. Quando concluída a reação, NaHCO3 aquoso é adicionado para fornecer um precipitado branco que é lavado com di- clorometano e seco para produzir 2,55 g de acetato de sódio (R)-3- (((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido) eti- lamino)-4-oxobutanoico em pó branco. 1H-RMN em SO(CD3)/CD3OD, 1:1, (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 7,85-7,79 (m, 2H, Fmoc e 2H, Benz), 7,68 (d, 2H, Fmoc), 7,45-7,29 (m, 4H, Fmoc), 6,93 (d, 2H, Benz), 4,51-4,17 (m, 3H, Fmoc e 1H, CH), 3,78 (s, 3H, CH3), 3,47-3,34, (m, 4H, 2xCH2), 2,82 (dd, 1H, CH2), 2,63 (dd, 1H, CH2).
[00206] (d) Síntese de carbamato de (9H-fluoren-9-il)metil (R,Z)-1- (4-metoxifenil)-10-(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)-1,6,9-trioxo-14-oxa- 2,5,10-triazadotriacont-23-en-7-ila
[00207] 0,48 g de acetato de sódio (R)-3-(((9H-fluoren-9-il) metó- xi)carbonilamino)-4-(2-(4-metoxibenzamido)etilamino)-4-oxobutanoico (obtido na etapa (c)) em dimetilformamida são resfriados para 10°C e depois 0,46 g de bis(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)amina, 0,37 g de COMU e 0,20 g de DIPEA são adicionados subsequentemente. Após agitação a 23°C por 20 horas, a solução é filtrada através de uma al-mofada de Alox e esta é enxaguada com um pouco de dimetilformami- da. O filtrado é diluído com acetato de etila, lavado com água e evapo-rado até a dessecação completa sob vácuo para fornecer 1,12 g de óleo de cor laranja que é purificado por cromatografia em coluna para produzir 0,41 g de (R,Z)-1-(4-metoxifenil)-10-(3-((Z)-octadec-9-eni- lóxi)propil)-1,6,9-trioxo-14-oxa-2,5,10-triazadotriacont-23-en-7-il-carba- mato de (9H-fluoren-9-il)metila. 1H-RMN em CDCl3 (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 7,86 (d, 2H, Benz), 7,69 (d, 2H, Fmoc), 7,55 (d, 2H, Fmoc), 7,42-7,23 (m, 4H, Fmoc e 1H, NH), 6,88 (d, 2H, Benz e 1H, NH), 6,12 (bd, 1H, NH), 5,41-5,26 (m, 4H, 4xCH), 4,604,33 (m, 3H, Fmoc), 4,17 (t, 1H, CH), 3,82 (s, 3H, CH3), 3,62-3,23, (m, 16H, 8xCH2 e 1H, CH2), 2,73 (dd, 1H, CH2), 2,05-1,95 (m, 8H, 4xCH2), 1,85-1,65 (m, 4H, 2xCH2), 1,57-1,45 (m, 4H, 2xCH2), 1,24 (bs, 44H, 22xCH2), 0,88 (t, 6H, 2xCH3),
[00208] (e) Síntese de (R)-2-amino-N1-(2-(4-metoxibenzamido)etil)- N4,N4-bis(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)succinamida
[00209] 0,75 g de dietilamina é adicionado a 2,12 g de (R,Z)-1-(4- metoxifenil)-10-(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)-1,6,9-trioxo-14-oxa- 2,5,10-triazadotriacont-23-en-7-il-carbamato de (9H-fluoren-9-il)metila (obtido na etapa (d)) em dicloroetano, agitados por 24 horas, seguido por evaporação até a dessecação completa sob vácuo para fornecer 1,90 g de material bruto que é purificado por adsorção a 20 g de Do- wex Monosphere e subsequente dessorção por amônia em etanol para produzir 1,09 g de (R)-2-amino-N1-(2-(4-metoxibenzamido)etil)-N4,N4- bis(3-((Z)-octadec-9-enilóxi)propil)succinamida. 1H-RMN em CDCl3 (TMS como padrão interno), desvio químico em ppm: 7,88 (d, 2H, Benz e 1H, NH), 7,64 (t, 1H, NH), 6,89 (d, 2H, Benz), 5,42-5,26 (m, 4H, 4xCH), 3,82 (s, 3H, CH3), 3,65-3,49, (m, 4H, 2xCH2), 3,42-3,28 (m, 12H, 6xCH2 e 1H, CH), 2,99 (dd, 1H, CH2), 2,71 (dd, 1H, CH2), 2,101,92 (m, 8H, 4xCH2 e 2H, NH2), 1,85-1,67 (m, 4H, 2xCH2), 1,60-1,47 (m, 4H, 2xCH2), 1,28 (bs, 44H, 22xCH2), 0,90 (t, 6H, 2xCH3), MS: 947,9 [M+Na]+,
[00210] Exemplo 5: Síntese de ácido (41S)-1-amino-41-(3-((2,3- bis(tetradecilóxi)propil)amino)-3-oxopropil)-39-oxo-3,6,9,12,15,18,21, 24,27,30,33,36-dodecaoxa-40-azadotetracontan-42-oico
[00211] Síntese de resina de Fmoc-Glu(DMA)-OtBu:
[00212] 3,85 g de resina de difenildiazometano (3,3 mmols) são la vados duas vezes com 30 mL de DCM em um reator SPPS de 100 mL e tratados com uma solução de 4,2 g de Y-2,3-bis(tetradecilóxi)propil- amida de ácido (2S)-2-(((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonilamino)-glutâmi- co (ver o Exemplo 2, 1,5 eq., 5,0 mmol) em 30 mL de DCM durante a noite. A solução é separada por filtração e a resina é lavada quatro vezes com DCM. Para destruir o difenildiazometano não reagido no final, a resina é tratada com 125 μL de ácido acético (0,5 eq., 2,2 mmol) em 30 mL de DCM por 15 minutos e lavada depois três vezes, alternadamente, com 30 mL de dimetilformamida e isopropanol. A re- sina é lavada duas vezes com éter di-isopropílico e seca durante a noite a vácuo. 6,7 g do produto desejado são obtidos (> 100% em teoria, rendimento em teoria 6,5 g). A carga da resina é determinada em 0,49 mmol/g por medição UV do produto da clivagem de Fmoc a 304 nm (carga máxima em teoria 0,51 mmol/g).
[00213] (b) Síntese de resina de H-Glu-OtBu-NH-PEG11-Glu(DMA)- difenilmetila:
[00214] A resina de H-Glu-OtBu-NH-PEG11-Glu(DMA)-difenilmetila é obtida por meio de síntese convencional em fase sólida pela seguinte sequência de reações:
[00215] clivagem do grupo Fmoc da resina de Fmoc-Glu(DMA)- OtBu com piperidina em DMF,
[00216] (2) condensação com Fmoc-NH-PEG11-COOH usando HTBU em DMF e DIPEA,
[00217] (3) clivagem do grupo Fmoc da resina Fmoc-NH-PEG11- Glu(DMA)-OtBu com piperidina em DMF,
[00218] (c) Clivagem e desproteção da resina de H-Glu-OtBu-NH- PEG11-Glu(DMA)-difenilmetila.
[00219] O composto desejado pode ser obtido por clivagem da resina, por exemplo, por tratamento com ácido trifluoroacético e tri- isopropilsilano.
[00220] Exemplo 6: Preparo de lipossomos decorados com amida de anis
[00221] 470 mg de POPC, 60 mg de Chol e 13,5 mg de lipídio ami- da de anis (ver o Exemplo 4) são dissolvidos em 750 μL de etanol (96%) a 55°C e injetados em 4,25 mL de PBS, pH 7,4. A razão molar dos lipídios usados é 77,99:18,83:1,02:0,27. Depois da extrusão através de membrana de policarbonato 100 nm, os lipossomos possuem tamanho médio de 110 nm com PDI de 0,068. De acordo com a análise por HPLC, o teor de lipídio amida de anis é de 72% do valor teórico.
[00222] Exemplo 7: Síntese de NH2-PEG8-PA-Glu(DMA)-amida
[00223] Síntese de resina de Fmoc-Glu(DMA)-Sieber: (ver o Exemplo 16).
[00224] Síntese de resina de NH2-PEG8-PA-Glu(DMA)-Sieber:
[00225] A resina de NH2-PEG8-PA-Glu(DMA)-Sieber é obtida por meio de síntese convencional em fase sólida pela seguinte sequência de reações:
[00226] clivagem do grupo Fmoc da resina de Fmoc-Glu(DMA)- Sieber com piperidina em DMF,
[00227] condensação com Fmoc-NH-PEG8-PA usando HBTU em DMF e DIPEA e finalmente
[00228] clivagem do grupo Fmoc da resina de Fmoc-NH-PEG8-PA- Glu(DMA)-Sieber com piperidina em DMF.
[00229] Síntese de NH2-PEG8-PA-Glu(DMA)-amida.
[00230] O produto é clivado da resina de NH2-PEG8-PA-Glu(DMA)- Sieber usando ácido trifluoroacético em diclorometano. ESI-MS: MW calc. monoisotópico = 1034,8, MW [M+H]+ = 1035,9.
Claims (15)
1. Composto caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula Geral I:
na qual Y representa O, N, S ou uma ligação covalente, P1 representa um grupo protetor Y ou um grupo ativador Y ou um grupo espaçador, sendo que que P1 representa um grupo ativa- dor Y ou um grupo espaçador quando Y é uma ligação covalente; P2, P3,independentemente um do outro, representam H, um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3, em conjunto com o N ao qual estão ligados, formam uma estrutura em anel, L é um grupo da Fórmula (a) 
na qual a linha tracejada representa a ligação ao N, Ri representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORbi, Ri’ representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb2, R2 representa H ou um grupo da fórmula -CH2-ORc, R2’ representa H ou um grupo da fórmula -ORd ou -CH2-ORd, R3 representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou -(CH2)3-ORe, Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re representam, independentemente um do outro, C(10 a 22) alquila, de cadeia linear ou ramificada, C(10 a 22) alquenila monoinsaturada ou poli-insaturada, ou C(10 a 22)monoinsaturado ou poliinsaturado)alquinila, m é 1, 2 ou 3, com a condição de que pelo menos um de R1, R1’, R2, R2’, R3 é diferente de H, e sendo que quando Y é O, o grupo protetor Y é benzidrila, benzila, o-nitrobenzil éster, p-nitrobenzil éster, p-metoxibenzilmetoxi ben-zil, metil, t-butil, 4-piridilmetil, 2-naftilmetil, 2,2-tricloroetil, 2-trimetilsilila e t- butildimetilsilila, selecionados do grupo que consiste em t-butildifenilsilila, 2-(trimetilsilil)etila, ortoacetato de trimetila, ortoacetato de trietila, oxazolinas, alila, 2-cloroalila, fenacila, acetonila e p-metoxifenila; sendo que quando Y é NH, o grupo protetor Y e o grupo protetor amino em P2, P3 são Boc(t-butiloxicarbonila), Cbz (carboxi- benzila), Fmoc (fluorenilmetiloxicarbonil), aloc (aliloxicarbonila), e é selecionado de tritila , benzila, benzilideno, tosila, succinimida, ftalimi- da, formila, acetila, benzoíla, t-butildimetilsilila e tri-isopropilsilila; sendo que os grupos de ativação de Y são alquila, arila, aral- quila, heteroarila, heterociclila, alquilcarbonila, arilcarbonila, aralquilcar- bonila, heteroarilcarbonila, heterociclilcarbonila, C(S)O-arila, C(S)O- alquila, silila, alquilcarbonila substituído; acetila, trifluoroacetila, alquilcar- bonila substituído com carboxila, flúor, cloro, bromo, iodo, hidroxibenzo- triazol, imidazol, nitrofenol, pentaclorofenol, N-hidroxisuccini mida, dici- clohexilcarbodiimida, N-hidroxi-N-metoxiamina, anidrido acético, anidrido fórmico, anidrido sulfónico, anidrido metanossulfónico, anidrido etanos- sulfónico, anidrido benzenossulfónico, anidrido de ácido p-tolilsulfônico e semelhantes; cloreto de ácido, brometo de ácido, iodeto de ácido, isotio- cianato, isocianato, monoclorotriazina, diclorotriazina, piridina substituída com monohalogênio, piridina substituída com dihalogênio, diazina substituída com monohalo, diazina substituída com dihalo, maleimida, aziridina, haleto de sulfonil, haleto de ácido, um éster de hidroxissuccinimida, um éster de hidroxisulfossuccinimida, um éster imida, uma hidrazina, um azi- donitrofenila, uma azida, uma 3-(2-piridilditio)propionamida (3-(2- piridilditio)propionamida), glioxal e um aldeído; e sendo que o grupo espaçador em P1, P2, P3 é polietilenogli- col ou polietilenoglicol terminal.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R3 é H, e L é um grupo da Fórmula (b) ou (c):
nas quais a linha tracejada representa a ligação ao N, e P1, P2, P3, Y, R1, R1’, R2, R2’ Ra e m são como definidos na reivindicação 1, com a condição de que, na Fórmula (b), um de R2 e R2’ é diferente de H, e, na Fórmula (c), um de R1 e R1’ é diferente de H.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que L é um grupo da Fórmula (b1), (b2), (b3) ou (b4):
nas quais a linha tracejada representa a ligação ao N, e Ra, Rc e Rd são, independentemente um do outro, uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que L é um grupo da Fórmula (c1) ou (c2):
nas quais a linha tracejada representa a ligação ao N, e Ra, Rb1, Rb2 são, independentemente um do outro, uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, saturada ou insaturada.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1, R1’, R2, R2’ são H, R3 é um grupo da fórmula -(CH2)2-ORe ou -(CH2)3-ORe, e P1, P2, P3, Y, Ra, Re e m são como definidos na reivindicação 1.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula II ou III:
nas quais Y representa O, N, S ou uma ligação covalente, P1 representa um grupo protetor Y ou um grupo ativador Y ou um grupo espaçador, sendo que que P1 representa um grupo ativa- dor Y ou um grupo espaçador quando Y é uma ligação covalente; P2, P3, independentemente um do outro H, representam um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3, em conjunto com o N ao qual estão ligados, formam uma estrutura em anel, Ri representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORbi, Ri’ representa H ou um grupo da fórmula -(CH2)2-ORb2, R2 representa H ou um grupo da fórmula -CH2-ORc, R2’ representa H ou um grupo da fórmula -ORd ou -CH2-ORd, Ra, Rb1, Rb2, Rc, Rd representam, independentemente um do outro, C(10 a 22) alquila, de cadeia linear ou ramificada, C(10 a 22) alquenila monoinsaturada ou poli-insaturada, ou C(10 a 22)monoinsaturado ou poliinsaturado)alquinila, m é 1, 2 ou 3, com a condição de que, na Fórmula II, um de R2 e R2’ é di-ferente de H e, na Fórmula III, um de R1 e Ri’ é diferente de H.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula IIa, IIb, IIc ou IId:
nas quais Y representa O, N, S ou uma ligação covalente, P1 representa um grupo protetor Y ou um grupo ativador Y ou um grupo espaçador, sendo que que P1 representa um grupo ativa- dor Y ou um grupo espaçador quando Y é uma ligação covalente; P2, P3, independentemente um do outro H, representam um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3, em conjunto com o N ao qual estão ligados, formam uma estrutura em anel, Ra, Rc, Rd representam, independentemente um do outro, C(10 a 22) alquila, de cadeia linear ou ramificada, C(10 a 22) alquenila monoinsaturada ou poli-insaturada, ou C(10 a 22)monoinsaturado ou poliinsaturado)alquinila, m é 1, 2 ou 3.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que apresenta as Fórmulas IIIa ou IIIb:
nas quais Y representa O, N, S ou uma ligação covalente, P1 representa um grupo protetor Y ou um grupo ativador Y ou um grupo espaçador, sendo que que P1 representa um grupo ativa- dor Y ou um grupo espaçador quando Y é uma ligação covalente; P2, P3, independentemente um do outro H, representam um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3, em conjunto com o N ao qual estão ligados, formam uma estrutura em anel, Ra, Rb1, Rb2 representam, independentemente um do outro, C(10 a 22) alquila, de cadeia linear ou ramificada, C(10 a 22) alquenila monoinsaturada ou poli-insaturada, ou C(10 a 22)monoinsaturado ou poliinsaturado)alquinila, m é 1, 2 ou 3.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula IVa ou IVb,
nas quais Y representa O, N, S ou uma ligação covalente, P1 representa um grupo protetor Y ou um grupo ativador Y ou um grupo espaçador, sendo que que P1 representa um grupo ativa- dor Y ou um grupo espaçador quando Y é uma ligação covalente; P2, P3, independentemente um do outro H, representam um grupo protetor de amino ou um grupo espaçador, ou P2 e P3, em conjunto com o N ao qual estão ligados, formam uma estrutura em anel, Ra, Re representam, independentemente um do outro, C(10 a 22) alquila, de cadeia linear ou ramificada, C(10 a 22) alquenila mo- noinsaturada ou poli-insaturada, ou C(10 a 22)monoinsaturado ou poli- insaturado)alquinila, e m é 1, 2 ou 3.
10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 9, caracterizado pelo fato de que a C(10-22)alquenila e a C(10-22)alquinila apresentam 1, 2, 3 ou 4 ligações insaturadas, de preferência 1 ou 2.
11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 10, caracterizado pelo fato de que pelo menos um de P1, P2, P3 é um grupo espaçador.
12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 11, caracterizado pelo fato de que é para uso em um sistema de liberação de fármacos ou como um sistema de exibição de antíge- nos.
13. Composição vesicular, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um composto da Fórmula I, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, opcionalmente em mistura com um ou mais outros compostos formadores de vesícula.
14. Composição vesicular, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que é um lipossomo, uma micela ou uma nanopartícula.
15. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende um com-posto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou uma composição vesicular, como definida na reivindicação 13 ou 14.
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