BR112013032467A2 - método de evolução metabólica - Google Patents
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Abstract
resumo patente de invenção: "método de evolução metabólica". a presente invenção refere-se a um método para a evolução metabólica de uma variante de um produto de uma pequena molécula aromática natural de uma via metabólica, por conjunto e recombinação in vivo somática da referida via metabólica empregando um mosaico de gene de pelo menos um gene a, que compreende a) em um procedimento de única etapa (i) transformar uma célula com pelo menos um gene a possuindo uma homologia de sequência de menos do que 99,5% para outro gene a ser recombinado que é uma parte integrante do genoma da célula ou apresentado na estrutura de um construto genético, (ii) recombinar os referidos genes, (iii) gerar um mosaico de genes dos genes de um local de integração de um genoma alvo, em que o referido pelo menos um gene a tem uma única sequência de acompanhamento alvo, quer na ancoragem da extremidade 5' ou da extremidade 3' para a extremidade 5' ou 3' do referido local de integração, (iv) recombinar eventuais genes adicionais da referida via metabólica, e b) selecionar os clones que compreendem o referido mosaico de gene e os referidos genes adicionais eventuais capazes de expressar a referida variante, métodos de preparação de uma biblioteca de células produtoras de variantes naturais de produtos de pequenas moléculas aromáticas de uma via metabólica, as bibliotecas assim produzidas e utilizadas para preparar as referidas variantes.
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