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Abstract

processo de produção de produto da proteína de soja solúvel (“s704”) um produto de proteína de soja é obtido pela extração de uma fonte de material de proteína de soja com uma solução de sal de cálcio aquosa para formar uma solução de proteína de soja aquosa e ajustar o ph de uma mistura da solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual para um ph de cerca de 1,5 a cerca de 4,4. a solução da proteína de soja acidificada é então separada da fonte de proteína de soja residual. a solução da proteína de soja acidificada pode ser seca, após a concentração e diafiltração opcionais, para fornecer o produto de proteína de soja.

Description

REFERÊNCIA REMISSIVA A PEDIDOS CORRELATOS
Este pedido reivindica a prioridade sob 35 USC 119 (e)
dos Pedidos de Patente Provisórios US Nos. 61/457.721
depositado em 19 de maio e 61/457.815 depositado em 9 de
junho de 2011. CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção é direcionada à produção de produtos de proteína de soja.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
Nos pedidos de Patente US Nos. 12/603.087 (7865-415) depositado em 21 de outubro de 2009 (Publicação de Patente US 2010-0098818) e 12/923.897 (7865-454) depositado em 13 de outubro de 2010 (Publicação de Patente US. 2011-0038993), atribuído ao cessionário desta e às divulgações que são incorporadas aqui por referência, é descrita a preparação de um produto de proteína de soja, preferencialmente um isolado da proteína de soja, que é completamente solúvel e é capaz de fornecer soluções transparentes e estáveis no calor em valores de pH baixos. Este produto de proteína pode ser usado para a fortificação de proteína, em particular, refrigerantes e bebidas desportivas, bem como outros sistemas aquosos ácidos, sem a precipitação de proteína. O produto de proteína de soja é produzido através da extração de uma fonte de proteína de soja com uma solução aquosa de cloreto de cálcio ao pH natural, opcionalmente diluindo a solução aquosa de proteína de soja resultante, ajustandoo pH da solução aquosa de proteína de soja a um pH de cercade
1,5 a cerca de 4,4, de preferência cerca de 2,0 a cercade
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4,0, para produzir uma solução de proteína de soja acidificada clara, que pode ser opcionalmente concentrada e diafiltrada antes da secagem.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Descobriu-se agora que os produtos da proteína de soja de propriedades similares àqueles produzidos de acordo com as aplicações acima observadas podem ser preparados se as etapas opcionais de diluição e de acidificação fossem efetuadas antes da separação da solução da proteína de soja do material de fonte residual da proteína de soja.
Entretanto, ao contrário do produto da proteína de soja produzido como descrito nas aplicações acima mencionadas, o produto produzido de acordo com a invenção atual tem um teor ácido fítico notável que pode ser responsável pelas propriedades um tanto inferiores da solução exibidas pelo produto da proteína de soja produzido aqui em comparação ao produto da proteína de soja produzido nas aplicações acima mencionadas.
De acordo com um aspecto da presente invenção, é fornecido um processo de produção de um produto de proteína de soja tendo um teor de proteína de soja de pelo menos cerca de 60 % em peso (N x 6.25) em uma base de peso seco, o qual compreende:
(a) extrair uma fonte de proteína de soja com uma solução de cloreto de cálcio aquosa para causar a solubilização da proteína de soja a partir da fonte de proteína e para formar uma solução de proteína de soja aquosa, (b) opcionalmente diluir a mistura da solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual, (c) ajustar o pH de uma mistura da solução de proteína
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3/29 de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual para um pH de cerca de 1,5 a cerca de 4,4, de preferência aproximadamente 2 a cerca de 4, (d) separar a solução de proteína de soja aquosa acidificada da fonte de proteína de soja residual, (e) opcionalmente concentrar a solução de proteína de soja aquosa acidificada enquanto mantém a força iônica substancialmente constante usando uma técnica de membrana seletiva, (f) opcionalmente diafiltrar a solução da proteína de soja concentrada, e (g) opcionalmente secar a solução da proteína de soja concentrada.
O produto de proteína de soja de preferência é um isolado tendo um teor de proteína de pelo menos cerca de 90 % em peso, de preferência pelo menos cerca de 100 % em peso, (N x 6.25) d.b.
A presente invenção fornece ainda um produto de proteína de soja, de preferência um isolado de proteína de soja, que é solúvel em água e forma soluções estáveis no calor em valores de pH ácidos e é útil para a fortificação de proteína de sistemas aquosos, incluindo refrigerantes e bebidas desportivas. A proteína de soja no produto não é hidrolisada.
O produto de proteína de soja fornecido aqui pode ser fornecido como uma solução aquosa do mesmo tendo um grau aceitável de claridade em valores de pH ácidos e que é estável ao calor nestes valores de pH.
O produto de proteína de soja pode misturado com bebidas em pó para a formação de refrigerantes ou bebidas desportivas aquosas pela dissolução da mesma em água. Tal mistura pode
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4/29 ser uma bebida em pó.
Enquanto a presente invenção refere-se principalmente à produção do isolado da proteína de soja, contempla-se que os produtos da proteína de soja de pouca pureza podem ser fornecidos tendo propriedades similares ao isolado da proteína de soja. Tais produtos de pureza inferior podem ter uma concentração da proteína de pelo menos aproximadamente 60% por peso (N x 6.25) d.b.
Em outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma solução aquosa do produto de soja fornecido aqui que é o estável ao calor no pH baixo. A solução aquosa pode ser uma bebida.
O produto da proteína de soja produzido de acordo com o processo aqui não tem a característica de sabor de feijão dos produtos da proteína de soja e é apropriado, não somente para a fortificação da proteína de meios ácidos, mas pode ser usado em uma variedade larga de aplicações convencionais de produtos da proteína, incluindo, mas ser limitado a fortificação da proteína dos alimentos e das bebidas processados, emulsificação de óleos, como um corpo anterior em produtos assados e no agente de espumação que aprisionam gases. Além disso, o produto da proteína de soja pode ser formado nas fibras de proteína, úteis em análogos de carne e pode ser usado como um substituto ou um extensor do branco do ovo nos produtos de alimento onde o branco do ovo é usado como um aglutinante. O produto da proteína de soja também pode ser usado em suplementos nutricionais. O produto da proteína de soja também pode ser usado nos produtos análogos diários ou nos produtos que são misturas de diários/soja. Outros usos do produto da proteína de soja estão em alimentos
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5/29 de animal de estimação, alimentação animal e em aplicações industriais e cosméticas e em produtos de cuidados pessoais.
DESCRIÇÃO GERAL DA INVENÇÃO
A etapa inicial do processo de fornecer o produto da proteína de soja envolve solubilizar a proteína de soja de uma fonte da proteína de soja. A fonte de proteína de soja pode ser feijões de soja, ou qualquer outro produto ou
subproduto derivado do processamento de grãos de soja,
incluindo, mas não limitado a farinha de soja, flocos de
soja, grãos de soja e farinha de soja. A fonte de proteína
de soja pode ser utilizada sob a forma de gordura total, forma parcialmente desengordurada ou forma totalmente desengordurada. Quando a fonte de proteína de soja contém uma quantidade apreciável de matéria gorda, uma etapa de remoção de óleo, geralmente é necessária durante o processo.
A proteína de soja recuperada a partir da fonte de proteína de soja pode ser a proteína de ocorrência natural em plantas de soja ou o material proteico pode ser uma proteína modificada por manipulação genética, mas possuindo as propriedades hidrofóbicas e polares características da proteína natural.
A solubilização de proteína a partir do material fonte de proteína de soja é efetuada mais convenientemente usando uma solução de cloreto de cálcio, embora as soluções de outros sais de cálcio possam ser utilizadas. Além disso, podem ser utilizados outros compostos de metais alcalinoterrosos, tais como sais de magnésio. Além disso, a extração da proteína de soja a partir da fonte de proteína de soja pode ser efetuada utilizando uma solução de sal de cálcio, em combinação com outra solução de um sal, tal como cloreto
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6/29 de sódio. Além disso, a extração da proteína de soja a partir da fonte de proteína de soja pode ser efetuada usando água ou outra solução de sal, tal como cloreto de sódio, em seguida com o sal de cálcio ser adicionada à solução aquosa de proteína de soja produzida na etapa de extração. O precipitado formado após a adição do sal de cálcio é removido antes do processamento subsequente.
Na medida em que a concentração da solução de sal de cálcio aumenta, o grau de solubilização da proteína a partir da fonte de proteína de soja aumenta inicialmente até um valor máximo ser alcançado. Qualquer aumento na concentração de sal não aumenta a proteína total solubilizada. A concentração da solução de sal de cálcio, que provoca a solubilização máxima de proteína varia dependendo do sal em questão. É geralmente preferido utilizar um valor de concentração inferior a cerca de 1,0 M, e mais preferencialmente um valor de cerca de 0,10 a cerca de 0,15 M.
Em um processo descontínuo, a solubilização de sal da proteína é efetuada a uma temperatura de cerca de 1°C a cerca de 100°C, de preferência cerca de 15° até cerca de 65°C, mais preferencialmente cerca de 50°C até cerca de 60°C, preferencialmente acompanhada por agitação para diminuir o tempo de solubilização, que é usualmente de cerca de 1 a cerca de 60 minutos. Prefere-se efetuar a solubilização para extrair substancialmente a quantidade de proteína a partir da fonte de proteína de soja quanto for praticável, de modo a proporcionar um elevado rendimento global do produto.
Em um processo contínuo, a extração da proteína de soja a partir da fonte de proteína de soja é realizada de qualquer
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7/29 modo consistente com efetuar uma extração contínua de proteína de soja a partir da fonte de proteína de soja. Em uma modalidade, a fonte de proteína de soja é continuamente misturada com a solução de sal de cálcio e a mistura é transportada através de um tubo ou conduto com um comprimento e com uma vazão para um tempo de residência suficiente para efetuar a extração desejada de acordo com os parâmetros descritos aqui. Em tal procedimento contínuo, a etapa de solubilização de sal é efetuada em um tempo de cerca de 1 a cerca de 60 minutos, preferencialmente para efetuar a solubilização para extrair substancialmente a quantidade de proteína a partir da fonte de proteína de soja como é praticável. A solubilização do processo contínuo é efetuada a temperaturas entre cerca de 1°C e cerca de 100°C, de preferência cerca de 15° até cerca de 65°C, mais preferencialmente entre cerca de 50°C e cerca de 60°C.
A extração é geralmente conduzida a um pH de cerca de 4,5 a cerca de 11, de preferência cerca de 5 a cerca de 7. O pH do sistema de extração (fonte de proteína de soja e solução de sal de cálcio) pode ser ajustado a qualquer valor desejado dentro do intervalo de cerca de 4,5 a cerca de 11 para utilização na etapa de extração pela utilização de qualquer ácido de grau alimentar conveniente, usualmente ácido clorídrico ou ácido fosfórico ou alcalino de qualidade alimentar, usualmente hidróxido de sódio, conforme requerido.
A concentração da fonte de proteína de soja na solução de sal de cálcio durante a etapa de solubilização pode variar amplamente. Os valores de concentração típicos são cerca de 5 a cerca de 15% p/v.
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A etapa de extração de proteína com a solução aquosa de sal tem o efeito adicional de solubilizar gorduras que podem estar presentes na fonte de proteína de soja, o que resulta nas gorduras que estão presentes na fase aquosa.
A solução de proteína resultante da etapa de extração tem geralmente uma concentração de proteína de cerca de 5 a cerca de 50 g/L, de preferência cerca de 10 a cerca de 50 g/L.
A solução aquosa de sal de cálcio pode conter um antioxidante. O antioxidante pode ser qualquer antioxidante adequado, tal como sulfito de sódio ou ácido ascórbico. A quantidade de antioxidante empregada pode variar de cerca de 0,01 a cerca de 1 % em peso da solução, de preferência cerca de 0,05 % em peso. O antioxidante serve para inibir a oxidação de compostos fenólicos em qualquer solução de proteína.
A mistura de uma solução aquosa de proteína de soja e proteína de soja residual de fonte pode ser diluída, geralmente com cerca de 0,5 a cerca de 10 volumes, preferencialmente cerca de 0,5 a cerca de 2 volumes de diluente aquoso, de modo a diminuir a condutividade da mistura para um valor de geralmente abaixo de cerca de 90 mS, preferencialmente cerca de 2 a cerca de 18 mS. Esta diluição é normalmente efetuada utilizando água, apesar de uma solução diluída de sal, tal como cloreto de sódio ou cloreto de cálcio, tendo uma condutividade superior a cerca de 3 mS possa ser usada.
O diluente com o qual a solução de proteína de soja residual combinada e fonte de proteína de soja é misturado, em geral, tem a mesma temperatura que a mistura da solução
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9/29 de proteína de soja e fonte de proteína de soja residual, mas o diluente pode ter uma temperatura de cerca de 1°C a cerca 100°C, de preferência cerca de 15° até cerca de 65°C, mais preferencialmente cerca de 50° a cerca de 60°C.
A mistura opcionalmente diluída da solução de proteína de soja e fonte de proteína de soja residual é então ajustada no pH para um valor de cerca de 1,5 a cerca de 4,4, de preferência cerca de 2 a cerca de 4, pela adição de qualquer ácido de grau alimentar adequado. A mistura acidificada tem uma condutividade de geralmente abaixo de cerca de 95 mS para uma mistura diluída, ou, geralmente inferior a cerca de 115 mS para uma mistura não diluída, em ambos os casos, de preferência cerca de 2 a cerca de 23 mS.
A solução de proteína aquosa acidificada é então separada a partir da fonte de proteína de soja residual, de qualquer maneira conveniente, tal como pelo emprego de um decantador centrífugo ou qualquer peneira adequada, seguida por centrifugação de disco e/ou filtragem para remover o material da a fonte de proteína de soja residual. A etapa de separação é geralmente conduzida a uma temperatura de opcionalmente diluída, a mistura de pH ajustado da solução de proteína de soja e proteína de soja, o material residual, mas pode ser conduzida a qualquer temperatura dentro do intervalo de cerca de 1° a cerca de 100°C, de preferência cerca de 15° a cerca de 65°C, mais preferencialmente cerca de 50°C até cerca de 60°C. A fonte de proteína de soja residual separada pode ser seca para descarte. Alternativamente, a fonte de proteína de soja residual separada pode ser processada para recuperar um pouco de proteína residual. A fonte de proteína de soja residual separada pode ser processada por um procedimento de
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10/29 precipitação isoelétrico convencional ou de qualquer outro procedimento conveniente para recuperar a proteína residual.
Onde a fonte de proteína de soja contém quantidades significativas de gordura, como descrito nas Patentes US N°s 5.844.086 e 6.005.076, atribuídas ao presente cessionário e cujas divulgações são aqui incorporadas por referência, então as etapas de desengorduramento aqui descritas podem ser efetuadas na solução aquosa da proteína. Alternativamente, o desengorduramento da solução aquosa da proteína separada pode ser conseguido por qualquer outro processo conveniente.
A solução aquosa de proteína de soja acidificada pode ser submetida a um tratamento térmico para inativar fatores lábeis com o calor anti-nutricionais, tais como inibidores de tripsina, presente em tal solução, como resultado de uma extração a partir do material fonte de proteína de soja durante a fase de extração. Tal etapa de aquecimento também proporciona o benefício adicional de reduzir a carga microbiana. Geralmente, a solução de proteína é aquecida até uma temperatura de cerca de 70° a cerca de 160°C, durante cerca de 10 segundos a cerca de 60 minutos, de preferência cerca de 80° e cerca de 120°C durante cerca de 10 segundos a cerca de 5 minutos, mais preferencialmente cerca 85° até cerca de 95°C, durante cerca de 30 segundos a cerca de 5 minutos. A solução da proteína de soja acidificada tratada com calor pode ser então resfriada para posterior processamento como descrito abaixo, a uma temperatura de cerca de 2°C a cerca de 65°C, de preferência cerca de 50°C até cerca de 60°C.
Em alternativa, esta etapa de tratamento térmico pode
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11/29 ser realizada antes da separação da solução de proteína aquosa acidificada a partir da fonte de proteína de soja residual descrita acima.
A solução de proteína de soja aquosa acidificada pode ser tratada com um adsorvente, tal como carbono ativado em pó ou carbono ativado granulado, para remover compostos de cor e/ou odor. Tal tratamento adsorvente pode ser efetuado sob quaisquer condições convenientes, geralmente à temperatura ambiente da solução de proteína aquosa separada. Para carbono ativado em pó, em uma quantidade de cerca de 0,025 % a cerca de 5% p/v, de preferência cerca de 0,05 % a cerca de 2% p/v, é empregado. O agente adsorvente pode ser removido a partir da solução de soja por quaisquer meios convenientes, tais como por filtragem.
A solução de proteína de soja aquosa acidificada opcionalmente desengordurada, facultativamente tratada com calor e opcionalmente termicamente tratada com adsorvente pode, opcionalmente, ser polida por quaisquer meios convenientes, tais como por filtragem, para remover quaisquer partículas residuais.
A solução de proteína de soja acidificada aquosa resultante pode ser diretamente seca para se produzir um produto de proteína de soja. A fim de proporcionar um produto de proteína de soja que tem uma diminuição do teor de impurezas e um reduzido teor de sal, tal como uma proteína isolada de soja, a solução aquosa de proteína de soja acidificada pode ser processada antes da secagem.
A solução de proteína de soja aquosa acidificada pode ser concentrada para aumentar a concentração de proteína da mesma, mantendo a força iônica da mesma praticamente
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12/29 constante. Esta concentração é geralmente efetuada para proporcionar uma solução concentrada de proteína de soja que tem uma concentração de proteína de cerca de 50 a cerca de 300 g/L, de preferência cerca de 100 a cerca de 200 g/L.
A etapa de concentração pode ser efetuada de qualquer modo conveniente consistente com a operação em lotes ou contínua, tal como pelo emprego de qualquer técnica de membrana seletiva conveniente, tal como ultrafiltragem ou diafiltração, utilizando membranas, tais como membranas de fibra oca ou membranas em espiral, com um peso molecular de corte adequado, tal como cerca de 3.000 até cerca de 1.000.000 Daltons, de preferência de cerca de 5.000 a cerca de 100.000 Daltons, tendo em conta diferentes materiais de membrana e configurações, e, para um funcionamento contínuo, dimensionada para permitir o grau desejado de concentração, tal como a solução aquosa de proteína passa através das membranas.
Como é bem conhecido, a ultrafiltragem e técnicas de membrana seletiva similares permitem que espécies de baixo peso molecular passem através da mesma, evitando que a espécie de maior peso molecular faça isso. As espécies de baixo peso molecular incluem não apenas as espécies iônicas do sal de grau alimentar, mas também materiais de baixo peso molecular extraídos do material fonte, tais como carboidratos, pigmentos, proteínas de baixo peso molecular e fatores anti-nutricionais, tais como inibidores de tripsina, que são elas próprias proteínas de baixo peso molecular. O peso molecular de corte da membrana é usualmente escolhido para assegurar a retenção de uma proporção significativa da proteína na solução, permitindo ao mesmo
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13/29 tempo a passagem de contaminantes tendo em conta os diferentes materiais de membrana e configurações.
A solução concentrada de proteína de soja, em seguida, pode ser submetida a uma etapa de diafiltração usando água ou uma solução salina diluída. A solução de diafiltração pode estar no seu pH natural, ou em um pH igual ao da solução de proteína a ser diafiltrada ou a qualquer valor de pH no meio. Tal diafiltração pode ser efetuada utilizando cerca de 1 a cerca de 40 volumes de solução de diafiltração, preferencialmente cerca de 2 a cerca de 25 volumes de solução de diafiltração. Na operação de diafiltração, novas quantidades de contaminantes são removidas a partir da solução aquosa de proteína de soja por meio de passagem através da membrana com o permeato. Isto purifica a solução aquosa de proteína e pode também reduzir a sua viscosidade. A operação de diafiltração pode ser efetuada até que nenhuma quantidade significativa de contaminantes ou de cores visíveis esteja presente no permeato ou até que o material retido tenha sido suficientemente purificado, de modo que, quando seco, forneça um isolado de proteína de soja com um teor em proteína de pelo menos cerca de 90 % em peso (N χ 6,25) db. Tal diafiltração pode ser efetuada utilizando a mesma membrana, como para a etapa de concentração. No entanto, se desejado, a etapa de diafiltração pode ser efetuada utilizando uma membrana separada com um corte de peso molecular diferente, tal como uma membrana com um peso molecular de corte no intervalo de cerca de 3.000 a cerca de 1.000.000 Daltons, de preferência de cerca de 5.000 a aproximadamente 100.000 Daltons, tendo em conta diferentes materiais de membrana e configuração.
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Alternativamente, a etapa de diafiltração pode ser aplicada a uma solução de proteína aquosa acidificada antes da concentração ou para a solução de proteína aquosa parcialmente concentrada acidificada. A diafiltração também pode ser aplicada em vários pontos durante o processo de concentração. Quando a diafiltração é aplicada antes da concentração ou à solução parcialmente concentrada, a solução diafiltrada resultante pode então ser adicionalmente concentrada. A redução da viscosidade conseguida pelos vários tempos de diafiltração na medida em que a solução de proteína é concentrada pode permitir uma concentração de proteína mais alta final, completamente concentrada seja conseguida. Isto reduz o volume do material a ser seco.
A etapa de concentração e a etapa de diafiltração podem ser aqui efetuadas de um modo tal que o produto de proteína de soja subsequentemente recuperado contenha menos do que cerca de 90 % em peso de proteína (N x 6,25) db, tal como pelo menos cerca de 60 % em peso de proteína (N x 6,25) db. Parcialmente por concentração e/ou parcialmente por diafiltração da solução aquosa de proteína de soja, é possível retirar apenas parcialmente os contaminantes. Esta solução de proteína pode então ser seca para fornecer um produto de proteína de soja com níveis de pureza mais baixos. O produto de proteína de soja é ainda capaz de produzir soluções de proteínas estáveis ao calor sob condições ácidas.
Um antioxidante pode estar presente no meio de diafiltração durante pelo menos parte da etapa de diafiltração. O antioxidante pode ser qualquer antioxidante adequado, tal como sulfito de sódio ou ácido ascórbico. A quantidade de antioxidante empregada no meio de diafiltração
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15/29 depende dos materiais empregados e pode variar de cerca de
0,01 a cerca de 1 % em peso, de preferência cerca de 0,05 %
em peso. O antioxidante serve para inibir a oxidação de
compostos fenólicos presentes em qualquer solução de
proteína de soja.
A etapa de concentração e a etapa de diafiltração
opcional podem ser efetuadas a qualquer temperatura
conveniente, geralmente de cerca de 2°C a cerca de 65°C, de
preferência cerca de 50° até cerca de 60°C, e durante o período de tempo para efetuar o grau desejado de concentração e diafiltração. A temperatura e outras condições utilizadas até certo grau dependem do equipamento de membrana utilizado para efetuar o processamento da membrana, a concentração de proteína desejada da solução, e a eficiência da remoção dos contaminantes para o permeato.
Existem dois principais inibidores de tripsina da soja, ou seja, o inibidor de tipo Kunitz, que é uma molécula lábil ao calor, com um peso molecular de aproximadamente 21.000 daltons, e o inibidor de Bowman-Birk, uma molécula mais estável ao calor com um peso molecular de cerca de 8.000 Daltons. O nível de atividade do inibidor de tripsina no produto fina da proteína de soja pode ser controlado por manipulação de várias variáveis do processo.
Como mencionado acima, o tratamento térmico da solução aquosa de proteína de soja acidificada pode ser utilizada para inativar os inibidores de tripsina, termolábeis. A solução de proteína de soja aquosa concentrada parcialmente ou totalmente concentrada acidificada pode também ser tratada termicamente para inativar os inibidores de tripsina, lábeis ao calor. Quando o tratamento térmico é
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16/29 aplicado à solução de proteína de soja aquosa acidificada concentrada parcialmente, a solução é tratada com calor resultante pode então ser adicionalmente concentrada.
Além disso, as etapas de concentração e/ou de diafiltração podem ser operadas de uma maneira favorável para a remoção de inibidores de tripsina no permeato, juntamente com os outros contaminantes. A remoção do inibidor de tripsina é promovida usando uma membrana de tamanho de poro maior, tal como cerca de 30.000 a cerca de 1.000.000 Da, operando a membrana a temperaturas elevadas, tais como cerca de 30° até cerca de 65°C, preferencialmente 50°C a cerca 60°C e empregando um volume maior de meio de diafiltração, como por exemplo cerca de 10 a cerca de 40 volumes.
A preparação e processamento da solução de proteína de membrana a um pH inferior a cerca de 1,5 a cerca de 3 pode reduzir a atividade do inibidor de tripsina em relação à preparação e processamento da solução a um pH mais elevado de cerca de 3 até cerca de 4,4. Quando a solução de proteína é concentrada e diafiltrada na extremidade baixa da faixa de pH, pode ser desejável elevar o pH do retido antes da secagem. O pH da solução de proteína concentrada e diafiltrada pode ser aumentado para o valor desejado, por exemplo de pH 3, por adição de qualquer alcalino de qualidade alimentar conveniente, tal como hidróxido de sódio.
Além disso, a redução da atividade do inibidor de tripsina pode ser conseguida através da exposição de materiais de soja aos agentes que interrompem ou reorganizam as ligações de dissulfureto dos inibidores de redução. Agentes redutores adequados incluem sulfito de sódio,
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17/29 cisteína e N-acetilcisteína.
A adição de tais agentes de redução pode ser efetuada em várias etapas do processo global. O agente redutor pode ser adicionado com o material de fonte de proteína de soja na etapa de extração, pode ser adicionado à solução aquosa de proteína de soja após a remoção do material da fonte de proteína de soja residual, pode ser adicionado à solução concentrada de proteína, antes ou após a diafiltração ou pode ser misturado a seco com o produto de proteína de soja seca. A adição do agente redutor pode ser combinada com uma fase de tratamento térmico e as etapas de processamento da membrana, como descrito acima.
Se for desejado reter inibidores de tripsina ativos na solução concentrada de proteína, isto pode ser conseguido através da eliminação ou redução da intensidade da etapa de tratamento térmico, não utilizando agentes redutores, operando as etapas de concentração e diafiltração na extremidade superior da faixa de pH, tal como o pH de 3 a cerca de 4,4, utilizando-se uma operação de concentração e membrana de diafiltração com um menor tamanho de poro, da membrana operando a temperaturas mais baixas e empregando menos volumes de meio de diafiltração.
A solução de proteína concentrada e opcionalmente diafiltrada pode ser submetida a uma operação de desengorduramento adicional, se requerido, conforme descrito nas Patentes US N°s 5.844.086 e 6.005.076. Alternativamente, o desengorduramento da solução concentrada de proteína e opcionalmente diafiltrada pode ser conseguido por qualquer outro processo conveniente.
A solução de proteína de soja aquosa concentrada e
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18/29 opcionalmente diafiltrada pode ser tratada com um adsorvente, tal como carbono ativado em pó ou carbono ativado granulado, para remover compostos de cor e/ou odor. Tal tratamento adsorvente pode ser efetuado sob quaisquer condições convenientes, geralmente à temperatura ambiente, a solução de proteína concentrada. Para carbono ativado em pó, em uma quantidade de cerca de 0,025 % a cerca de 5% w/v, de preferência cerca de 0,05 % a cerca de 2% p/v, é empregada. O adsorvente pode ser removido a partir da solução de proteína de soja por quaisquer meios convenientes, tais como por filtragem.
A solução de proteína de soja aquosa concentrada e opcionalmente diafiltrada pode ser seca por qualquer técnica conveniente, tal como secagem por pulverização ou liofilização. Uma etapa de pasteurização pode ser efetuada na solução de proteína de soja antes da secagem. Essa pasteurização pode ser efetuada sob quaisquer condições de pasteurização desejadas. Geralmente, a solução de proteína de soja concentrada e opcionalmente diafiltrada é aquecida a uma temperatura de cerca de 55° até cerca de 70°C, de preferência cerca de 60° até cerca de 65°C, durante cerca de 30 segundos a cerca de 60 minutos, de preferência cerca de 10 minutos até cerca 15 minutos. A solução concentrada de proteína de soja, em seguida pasteurizada pode ser resfriada para a secagem, de preferência a uma temperatura de cerca de 25° até cerca de 40°C.
O produto seco de proteína de soja tem um teor de proteína em excesso de cerca de 60 % em peso (N χ 6,25) db. De preferência, o produto de proteína de soja seco é um isolado com um alto teor de proteína, em excesso de cerca de
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19/29 % em peso de proteína, de preferência pelo menos cerca de 100 % em peso (N x 6,25) db.
O produto de proteína de soja produzido aqui é solúvel em um meio aquoso ácido, fazendo com que o produto ideal para a incorporação em bebidas tanto carbonatadas quanto sem gás, proporcione a fortificação da mesma proteína. Tais bebidas têm uma ampla gama de valores de pH ácido, que vão desde cerca de 2,5 a cerca de 5. O produto de proteína de soja aqui proporcionado pode ser adicionado a tais bebidas, em qualquer quantidade conveniente para proporcionar fortificação da proteína para tais bebidas, por exemplo, pelo menos cerca de 5 g de proteína de soja por dose. O produto de proteína de soja adicionada se dissolve na bebida e permanece dissolvido, após o processamento térmico. O produto de proteína de soja pode ser misturado com a bebida seca antes da reconstituição da bebida, após dissolução em água. Em alguns casos, a modificação para a formulação normal das bebidas para tolerar a composição da invenção pode ser necessário quando os componentes presentes na bebida podem afetar adversamente a capacidade da composição da presente invenção permanecer dissolvida na bebida.
EXEMPLOS
Exemplo 1:
Este exemplo ilustra a produção de um novo isolado de proteína de soja, segundo o método da invenção.
kg de floco branco de soja desengordurado foi adicionada a 300 L de solução de CaCl2 a 0,15 M à temperatura ambiente e agitado durante 30 minutos para proporcionar uma solução aquosa de proteína. 300 L da água purificada por osmose reversa (OR) foram adicionados e o pH do sistema
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20/29 reduzido para cerca de 3 com uma solução de HCl. O floco branco residual de soja foi então removido e a solução de proteína resultante clarificada por centrifugação e filtragem, para proporcionar 520 L da solução de proteína acidificada tendo um teor de proteína de 1,63 % em peso. A solução acidificada foi tratada pelo calor a 90°C durante 30 segundos e depois resfriada a 30°C para posterior processamento.
A solução de proteína acidificada tratada com calor foi reduzida em volume a partir de 520 L a 141 L da concentração em uma membrana de polietersulfona, tendo um corte de peso molecular de 100.000 Daltons, operado a uma temperatura de aproximadamente 30°C. Neste ponto, a solução de proteína, com um teor de proteína de 5,02 % em peso, foi diafiltrado com 212 L de água RO, com a operação de diafiltração conduzida a aproximadamente 30°C. A solução diafiltrada foi então ainda concentrada até um volume de 71 L. Uma alíquota de 31 L da solução de proteína concentrada foi diafiltrada com um adicional de 225 L de água RO, com a operação de diafiltração realizada a aproximadamente 29°C. Após esta segunda diafiltração, a solução de proteína foi concentrada a partir de um teor de proteína de 10,12 %, em peso, até um teor de proteína de 12,05 %, em peso, em seguida, diluiu-se até um teor de proteína de 6,04 %, em peso, com água, para facilitar a secagem por pulverização. A solução de proteína antes da secagem por pulverização foi recuperada com um rendimento de 38,6 % em peso da solução inicial de proteína filtrada. A solução de proteína diafiltrada, concentrada e diluída foi, em seguida, seca para se obter um produto que pode ter um teor de proteína de 97,40 % (N x 6,25) d.b. Ao
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21/29 produto foi dada a designação S017-D12-10A S704H.
Uma solução de S017-D12-10A S704H foi preparada por dissolução de pó de proteína suficiente para fornecer 0,48 g de proteínas em 15 ml de água purificada por osmose inversa e a cor e clareza avaliada usando um instrumento ColorQuest XE HunterLab operado em modo de transmissão. O pH da solução foi medido com um medidor de pH.
Os valores de pH, cor e clareza são apresentados na Tabela 1 a seguir :
Tabela 1 - pH e leituras de HunterLab para a solução de proteína a 3,2% de S017-D12-10A S704H
Amostra pH L* a* b* Névoa (%)
S017-D12-10A S704H 3,25 89,24 0,58 16,27 27,9
Como pode ser visto a partir da Tabela 1, a solução de
S017-D12-10A S704H em água, foi semi-transparente, não transparente.
A cor do pó seco também foi avaliada com o instrumento HunterLab ColorQuest XE no modo de reflectância. Os valores de cor são apresentados na Tabela 2 a seguir:
Tabela 2 - Pontuações de Hunterlab para pó seco de S017D12-10A S704H
Amostra L* a* b*
S017-D12-10A S704H 88,74 -0,29 8,38
Como pode ser visto a partir da Tabela 2, o produto seco era de cor muito clara.
Exemplo 2:
Este exemplo contém uma avaliação da estabilidade térmica em água do isolado da proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1.
Uma solução de S017-D12-10A S704H foi preparada por
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22/29 dissolução proteína em pó suficiente para fornecer 1,6 g de proteínas em 80 ml de água purificada por osmose inversa. O pH da solução foi determinado sendo 3,37. A amostra foi dividida em duas porções e o pH de uma porção foi reduzido para 3,00 com solução de HCl. A clareza do controle e as soluções de pH ajustado foram avaliadas por medição de neblina com o instrumento ColorQuest XE HunterLab. As soluções foram, em seguida, aquecidas a 95°C, mantidas a esta temperatura durante 30 segundos e depois resfriadas imediatamente até a temperatura ambiente em um banho de gelo. A clareza das soluções tratadas termicamente foi medida novamente.
A clareza das soluções de proteína antes e após o aquecimento é apresentada na seguinte Tabela 3:
Tabela 3 - Efeito do tratamento térmico na clareza das soluções de S017-D12-10A S704H
Amostra Névoa antes do Névoa após o
aquecimento (%) aquecimento (%)
pH 3,37 55,5 25,2
pH 3,00 38,5 16,9
Como pode ser visto a partir dos resultados da Tabela 3, verificou-se que as soluções iniciais de S017-D12-10A S704H estavam bastante obscuras, particularmente a um pH natural. No entanto, as soluções eram estáveis ao calor, com o nível de névoa na verdade um pouco reduzido pelo tratamento térmico.
Exemplo 3:
Este exemplo contém uma avaliação da solubilidade em água do isolado da proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1. A solubilidade foi testada com base na
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23/29 solubilidade da proteína (chamado método de proteína, uma versão modificada do procedimento de Morr et al, J. Food Sci. 50: 1715-1718) e na solubilidade do produto total (chamado método de pélete).
Pó de proteína suficiente para fornecer 0,5 g de proteína foi pesado em um recipiente e, em seguida, foi adicionada uma pequena quantidade de água purificada por osmose reversa (OR) e a mistura agitada até uma pasta macia ser formada. A água adicional foi então adicionada para levar o volume até cerca de 45 ml. O conteúdo do recipiente foi então agitado lentamente durante 60 minutos, utilizando um agitador magnético. O pH foi determinado imediatamente depois da dispersão da proteína e foi ajustado ao nível apropriado (2, 3, 4, 5, 6 ou 7) com NaOH ou HCl diluído. Uma amostra também foi preparada a um pH natural. Para as amostras de pH ajustado, o pH foi medido e corrigido periodicamente durante os 60 minutos de agitação. Após os 60 minutos de agitação, as amostras foram feitas a 50 ml de volume total, com água RO, obtendo-se uma dispersão de proteína de 1% p/v. O teor de proteína das dispersões foi medido utilizando um Leco TruSpec N Azoto Determinator. Alíquotas (20 ml) das dispersões foram então transferidas para tubos de centrífuga previamente pesados que foram secos durante a noite em uma estufa a 100°C, em seguida, resfriado em um dessecador e os tubos tapados. As amostras foram centrifugadas a 7800 g durante 10 minutos, o que sedimentou o material insolúvel e produziu um sobrenadante límpido. O teor da proteína do sobrenadante foi medido por análise de Leco e então o sobrenadante e as tampas dos tubos foram descartadas e o material de pélete seco durante a noite em um forno regulado
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24/29 a 100°C. Na manhã seguinte, os tubos foram transferidos para um dessecador e deixados resfriar. O peso do material de pélete seco foi registrado. O peso seco da proteína em pó inicial foi calculado multiplicando o peso do pó utilizado por um fator de ((100 - teor de umidade do pó (%))/100). A solubilidade do produto foi então calculada de duas formas diferentes:
1) Solubilidade (método de proteína) (%) = (% de proteína no sobrenadante/% de proteína em dispersão inicial) x 100
2) Solubilidade (método de pélete) (%) = (1 - (peso seco de material de pélete insolúvel /((peso de 20 ml de dispersão/peso de 50 ml de dispersão) x peso inicial do pó seco de proteína))) x 100
O valor do pH natural do isolado da proteína produzida no Exemplo 1 em água (1 % de proteína) é mostrado na Tabela 4:
Tabela 4 - pH natural da solução de S017-D12-10A S704H preparada em água a 1% de proteína
Lote Produto pH Natural
S017-D12-10a S704H 3,43
Os resultados da solubilidade obtidos são apresentados nas seguintes Tabelas 5 e 6:
Tabela 5 - Solubilidade de S017-D12-10A S704H a diferentes valores de pH com base no método de proteínas
Solubilidade (método de proteína) (%)
Lote Produto pH 2 pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 pH 7 pH natural
S017- D12-10A S704H 98,6 99,5 53,5 2,6 12,5 74,5 85,4
Tabela 6 - A solubilidade do S017-D12-10A S704H em
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25/29 valores de pH diferentes com base no método de pélete
Solubilidade (método de proteína) (%)
Lote Produto pH 2 pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 pH 7 pH natural
S017- D12-10A S704H 98,6 93,2 60,4 2,4 21,5 68,4 79,8
Como pode ser visto a partir dos resultados das Tabelas 5 e 6, o produto S704H foi extremamente solúvel no pH 2 e também muito solúvel em um pH de 3. O produto não foi tão solúvel a valores de pH mais elevados.
Exemplo 4:
Este exemplo contém uma avaliação da claridade em água do isolado da proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1.
A clareza das soluções de proteína a 1% p/v, preparadas como descrito no Exemplo 3 foi avaliada através da medição da absorvância a 600 nm (branco de água), com uma pontuação inferior a absorvância, indicando uma maior clareza. A análise das amostras em um instrumento HunterLab ColorQuest XE em modo de transmissão também forneceu uma leitura de neblina percentual, uma outra medida de clareza.
Os resultados da clareza são apresentados nas seguintes Tabelas 7 e 8:
Tabela 7 - Clareza da solução de S017-D12-10A S704H a diferentes valores de pH, tal como avaliado por A600
A600
Lote
Produto pH 2 pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 pH 7
S017D12-10A
S704H 0,119
0,140 1,172 2,810 2,391 0,327 pH natural
0,211
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Tabela 8 - Clareza da solução de S017-D12-10A S704H a diferentes valores de pH, tal como avaliado por análise de HunterLab
Leitura de névoa HunterLab (%)
Lote Produto pH 2 pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 pH 7 pH natural
S017- D12- 10A S704H 22,2 27,3 94,3 97,3 97,4 71,6 43,5
Como pode ser visto a partir dos resultados das Tabelas 7 e 8, as soluções de S704H estavam turva no pH 2 a 3 e mais turvas a valores de pH mais elevados, em particular na gama de 4 a 6.
Exemplo 5:
Este exemplo contém uma avaliação da solubilidade de um refrigerante (Sprite) e bebida desportiva (Gatorade de Laranja) do isolado de proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1. A solubilidade foi determinada com a proteína adicionada às bebidas com qualquer correção de pH e novamente com o pH das bebidas fortificadas de proteína ajustada ao nível das bebidas originais.
Quando a solubilidade foi avaliada sem a correção do pH, uma quantidade suficiente de proteína em pó para fornecer 1 g de proteína foi pesada para um copo e uma pequena quantidade de bebida e agitada até que uma pasta macia fosse formada. A bebida adicional foi adicionada para levar o volume até 50 ml, e, em seguida, as soluções foram agitadas lentamente em um agitador magnético durante 60 minutos para se obter uma dispersão de proteína de 2% p/v. O teor de proteína das amostras foi analisado utilizando um Leco
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TruSpec N Nitrogen Determinator então uma alíquota da bebida contendo proteína foi centrifugada a 7800 g durante 10 minutos e o teor de proteína do sobrenadante medido.
Solubilidade (%) = (% de proteína no sobrenadante/% de proteína na dispersão inicial) x 100
Quando a solubilidade foi avaliada com correção de pH, o pH do refrigerante (Sprite) (3,43) e bebida esportiva (Gatorade de Laranja) (3,09), sem proteína foi medida. Uma quantidade suficiente de proteína em pó para fornecer 1 g de proteína foi pesada para um copo e uma pequena quantidade de bebida e agitada até que uma pasta macia fosse formada. A bebida adicional foi adicionada para levar o volume até cerca de 45 ml, e, em seguida, as soluções foram agitadas lentamente com um agitador magnético durante 60 minutos. O pH das bebidas contendo proteína foi determinado imediatamente após a dispersão da proteína e foi ajustada para o pH sem proteína original com HCl ou NaOH conforme necessário. O pH foi medido e corrigido periodicamente durante os 60 minutos de agitação. Após os 60 minutos de agitação, o volume total de cada solução foi levado a 50 ml com bebida adicional, obtendo-se uma dispersão de proteína de 2% p/v. O teor de proteína das amostras foi analisado utilizando um Leco TruSpec N Nitrogen Determinator então uma alíquota das bebidas contendo proteína foi centrifugado a 7800 g durante 10 minutos e o teor de proteína do sobrenadante medido.
Solubilidade (%) = (% de proteína no sobrenadante/% de proteína em dispersão inicial) x 100
Os resultados obtidos são indicados na Tabela 9 a seguir
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Tabela 9 - A solubilidade do S017-D12-10A S704H no Sprite e Gatorade de Laranja
Sem correção de pH Correção de pH
Lote Produto Solubili- Solubili- Solubili- Solubili-
dade (%) dade (%) no dade (%) dade (%) no
no Sprite Gatorade de no Sprite Gatorade de
laranja laranja
S017- S704H 73,3 80,7 87,2 84,1
D12-10A
Como pode ser visto a partir dos resultados da Tabela 9, o S704H foi bastante solúvel no Sprite e Gatorade de laranja.
A solubilidade foi um pouco melhorada através da redução do pH da amostra de proteína fortificada para aquela da bebida original sem proteína.
Exemplo 6:
Este exemplo contém uma avaliação da claridade em um refrigerante e bebida desportiva do isolado de proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1.
A clareza das dispersões de proteína a 2 % p/v preparadas em refrigerante (Sprite) e bebidas esportivas (Gatorade de Laranja) no Exemplo 5 foram avaliadas pelo método de neblina 15 HunterLab descrito no Exemplo 4.
Os resultados obtidos são indicados na Tabela 10 a seguir:
Tabela 10 - Leituras de neblina de Hunterlab para S017D12-10A S704H no Sprite e Gatorade de Laranja
Sem correção de pH Correção de pH
Lote Produto Solubili- Solubili- Solubili- Solubili-
dade (%) dade (%) no dade (%) dade (%) no
no Sprite Gatorade de no Sprite Gatorade de
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laranja laranja
Sem 0,0 76,6 0,0 76,6
proteína
S017- S704H 75,9 89,8 81,8 87,9
D12-10A
Como pode ser visto a partir dos resultados da Tabela
10, as soluções de proteína fortificadas do Sprite e Gatorade de laranja estavam bastante turvas.
Exemplo 7:
Este exemplo contém uma avaliação do conteúdo de ácido fítico do isolado da proteína de soja produzido pelo método do Exemplo 1.
O conteúdo de ácido fítico de S017-D12-10A S704H foi determinado pelo procedimento de Latta e Eskin (J. Agric 10 Food Chem, 28: 1313-1315). O teor de ácido fítico do S017D12-10A S704H foi de 1,54 % em peso d.b.
SUMÁRIO DA DIVULGAÇÃO
No sumário desta divulgação, a presente invenção fornece um processo para a preparação de um produto de proteína de soja, em que o material fonte de proteína de soja não é separado a partir da solução aquosa de proteína de soja até depois da diluição e da acidificação. São possíveis modificações dentro do escopo da presente invenção.
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Claims (18)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Processo de produção de um produto de proteína de soja tendo um teor de proteína de pelo menos 60 % em peso (N x 6,25) em uma base de peso seco, caracterizado pelo fato de que compreende:
    (a) extrair uma fonte de proteína de soja com uma solução de sal de cálcio aquosa para causar a solubilização da proteína de soja a partir da fonte de proteína de soja e para formar uma mistura de solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual, (b) ajustar o pH da mistura da solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual para um pH de 1,5 a 4,4, e (c) separar a solução de proteína de soja aquosa acidificada da fonte de proteína de soja residual.
  2. 2. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o processo ainda compreende:
    diluir a mistura de solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual da etapa (a), antes da etapa (b).
  3. 3. Processo, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a referida etapa de extração é realizada usando uma solução de cloreto de cálcio aquosa tendo uma concentração de menos do que 1,0 M.
  4. 4. Processo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a solução de cloreto de cálcio tem uma concentração de 0,10 a 0,15 M.
  5. 5. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a referida etapa de extração é realizada a uma temperatura de
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    1° a 100°C, e um pH de 4,5 a 11, para fornecer a referida solução de proteína de soja aquosa tendo uma concentração de proteína de 5 a 50 g/L.
  6. 6. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que, após a referida etapa de extração e antes da referida etapa de ajuste de pH, a referida mistura de solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual é diluída para uma condutividade de menos de 90 mS, usando 0,5 a 10 volumes de diluente aquoso tendo uma temperatura de 1° a 100 °C.
  7. 7. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que o pH da referida mistura da solução de proteína de soja aquosa e fonte de proteína de soja residual é ajustada para um pH de 2 a 4.
  8. 8. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a referida mistura acidificada da solução da proteína de soja e fonte de proteína de soja residual tem uma condutividade de menos de 95 mS.
  9. 9. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que a mistura acidificada da solução da proteína de soja e fonte de proteína de soja residual, antes da referida etapa de separação, ou a solução de proteína aquosa acidificada, após a referida etapa de separação, é submetida a uma etapa de tratamento com calor para inativar inibidores de tripsina termolábeis, o referido tratamento com calor sendo realizado a uma temperatura de 70° a 160 °C por 10 segundos a 60
    Petição 870190011741, de 04/02/2019, pág. 38/47
    3/5 minutos, e a mistura acidificada tratada com calor da solução da proteína de soja e fonte de proteína de soja residual é resfriada a uma temperatura de 2° a 65 °C, para processamento adicional.
  10. 10. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que, após a referida etapa de separação, a solução de proteína de soja aquosa acidificada é tratada com um adsorvente para remover compostos de cor e/ou odor da solução da proteína de soja aquosa acidificada.
    11. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a solução de proteína de soja aquosa acidificada é submetida a uma etapa de polimento • 12. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que a
    referida solução de proteína de soja aquosa acidificada é concentrada enquanto mantém a força iônica da mesma constante pela ultrafiltração usando uma membrana tendo um corte de peso molecular de 3.000 a 1.000.000 Daltons, para produzir uma solução de proteína de soja acidificada concentrada tendo uma concentração de proteína de 50 a 300 g/L.
  11. 13. Processo, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a etapa de diafiltração é realizada utilizando de 1 a 40 volumes de água, água acidificada, solução salina diluída ou solução salina diluída acidificada na solução de proteína de soja acidificada antes ou após a etapa de concentração até que nenhuma quantidade adicional significante de contaminantes ou cor visível estejam presentes no permeato, a referida
    Petição 870190011741, de 04/02/2019, pág. 39/47
    4/5 diafiltração sendo realizada usando uma membrana tendo um corte de peso molecular de 3.000 a 1.000.000 Daltons.
  12. 14. Processo, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a referida diafiltração é realizada até que o retentato tenha sido suficientemente purificado de modo que, quando seco, forneça um isolado da proteína de soja com um teor de proteína de pelo menos 90 % em peso (N x 6.25) d.b.
  13. 15. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 14, caracterizado pelo fato de que a referida etapa de concentração e a referida etapa de diafiltração são realizadas a uma temperatura de 2° a 65° C.
  14. 16. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 15, caracterizado pelo fato de que a referida solução de proteína de soja aquosa acidificada, concentrada e diafiltrada é tratada com um adsorvente para remover os compostos de cor e/ou odor.
  15. 17. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 16, caracterizado pelo fato de que a referida solução de proteína de soja aquosa acidificada, concentrada e diafiltrada é pasteurizada antes da secagem, a referida etapa de pasteurização sendo realizada a uma temperatura de 55° a 70 °C por 30 segundos a 60 minutos.
  16. 18. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 17, caracterizado pelo fato de que a referida a solução de proteína de soja aquosa acidificada, concentrada e diafiltrada é seca para fornecer um isolado de proteína de soja tendo um teor de proteína de pelo menos 90 % em peso (N x 6,25) d.b.
  17. 19. Processo, de acordo com qualquer uma das
    Petição 870190011741, de 04/02/2019, pág. 40/47
    5/5 reivindicações 12 a 18, caracterizado pelo fato de que a etapa de concentração e/ou a etapa de diafiltração são operadas em uma maneira favorável para a remoção dos inibidores da tripsina.
  18. 20. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que um agente redutor está presente durante a etapa de extração para romper ou rearranjar as ligações de dissulfeto dos inibidores de tripsina para conseguir uma redução na atividade do inibidor de tripsina, e/ou um agente redutor está presente durante a etapa de concentração, e/ou está presente durante a etapa de diafiltração para romper ou rearranjar as ligações de dissulfeto dos inibidores de tripsina para conseguir uma redução na atividade do inibidor de tripsina, e/ou um agente redutor é adicionado à solução de proteína de soja concentrada e na presença da etapa de diafiltração, diafiltrada, antes da secagem e/ou o produto de proteína de soja seco para romper ou rearranjar as ligações de dissulfeto dos inibidores de tripsina para conseguir uma redução na atividade do inibidor de tripsina.
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