BR102022017061A2 - Coletor de amostras - Google Patents
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Abstract
A presente invenção fornece uma aplicação de uma espuma de melamina na coleta ou processamento de amostras. Uma cabeça de amostragem, um bloco de amostragem ou uma membrana filtrante preparada pelo uso da espuma de melamina é usada para coletar ou processar uma amostra, que pode reduzir significativamente a absorção de um determinante do alvo ou pode melhorar significativamente um efeito de eluição do determinando do alvo para restaurar a autenticidade da amostra, melhorando assim a sensibilidade de detecção do determinando do alvo e evitando a ocorrência de falsa detecção ou detecção ausente.
Description
[001] A presente invenção reivindica a prioridade do pedido de patente chinesa com o número de pedido de 202210594528.0 depositado em 27 de maio de 2022, e o pedido US anterior com o número de pedido de 63/350.572 depositado em 9 de junho de 2022, e o relatório descritivo, reivindicações e desenhos do mesmo são citados pela referência como uma parte da presente invenção.
[002] A presente invenção diz respeito ao campo técnico de diagnóstico in- vitro, especificamente, diz respeito a uma aplicação inovadora de uma espuma de melamina no diagnóstico in-vitro, especificamente a uma aplicação de uma espuma de melamina na coleta ou processamento de amostras.
[003] A coleta ou processamento de amostras é uma etapa principal no processo de diagnóstico in-vitro, e está diretamente relacionada à precisão e sensibilidade dos resultados diagnósticos. A coleta ou processamento de amostras existentes geralmente usa um bloco de esponja para processar a amostra, ou usa uma membrana filtrante para filtração da amostra, mas como o bloco de esponja ou a membrana filtrante possui um efeito de absorção em um determinante alvo em uma amostra, especialmente em marcadores de detecção de baixo teor ou de fácil absorção, as substâncias de detecção do alvo são difíceis de serem detectadas, resultando em falsa detecção ou detecção ausente, e resultados diagnósticos de falso negativo ou falso positivo. Portanto, é urgente descobrir um dispositivo que consiga reduzir significativamente a absorção do determinando alvo durante a coleta e processamento da amostra, ou que consiga melhorar significativamente um efeito de eluição do determinante do alvo para restaurar a autenticidade das amostras e melhorar a sensibilidade de detecção do produto.
[004] Com o objetivo de solucionar deficiências na técnica anterior, a presente invenção fornece uma aplicação de uma espuma de melamina na coleta ou processamento de amostras. Um bloco de esponja, um bloco de amostragem ou uma membrana filtrante preparada pelo uso da espuma de melamina é usada para coletar ou processar uma amostra, que pode reduzir significativamente a absorção de um determinante do alvo ou pode melhorar significativamente um efeito de eluição do determinando alvo, melhorando assim a sensibilidade de detecção do determinando alvo e evitando a ocorrência de falsa detecção ou detecção ausente.
[005] Uma espuma de melamina, também conhecida como uma nanoesponja e uma esponja de tripolicianamida, é um material esponjoso que absorve água, elástico e flexível, com uma estrutura de poros abertos feitos de tripolicianamida como matéria-prima principal através de polimerização, espumação e outros processos. Suas características são refletidas em sua estrutura peneirada fina tridimensional, possuindo excelentes propriedades abrangentes, tais como absorção de sons, retardância de chama, isolamento térmico, estabilidade na resistência contra umidade e calor, segurança higiênica e bom processamento secundário. Essas características tornam o produto amplamente utilizado nas áreas de navegação e aeroespacial, área de produtos eletrônicos, área de limpeza diária e outros campos.
[006] Assim, por um lado, a presente invenção fornece um dispositivo para coletar uma amostra, em que o dispositivo inclui um material de melamina para absorver a amostra. Em algumas modalidades, o material de melamina inclui um material poroso de melamina. O material poroso de melamina inclui uma espuma de melamina.
[007] Em algumas modalidades, a espuma de melamina possui uma estrutura semelhante à película plana ou uma estrutura semelhante a um bloco tridimensional.
[008] Em algumas modalidades, a estrutura semelhante à película plana é uma membrana filtrante em qualquer círculo, quadrado, elipse e polígono; e a estrutura semelhante a um bloco é um cilindro, um cuboide, um cubo, um cone ou qualquer outro corpo tridimensional, ou é qualquer um dentre uma cabeça de esponja, um bloco de esponja e uma tira esponjosa com uma estrutura semelhante a um bloco.
[009] Em algumas modalidades, a amostra é qualquer uma dentre um fluido corporal, cabelo, músculos tecidos e órgãos retirados de um organismo.
[010] Em algumas modalidades, o fluido corporal é qualquer um dentre saliva, urina, sangue, escarro, linfa, plasma, sêmen, aspirados pulmonares e um fluido cérebro-espinhal.
[011] Em algumas modalidades, um determinante na amostra é qualquer um dentre drogas de moléculas pequenas do abuso de drogas, células, ácidos nucleicos, proteínas e aminoácidos.
[012] Em algumas modalidades, as moléculas pequenas do abuso de drogas incluem tetrahidrocanabinol (THC) ou suas substâncias similares. Em algumas modalidades, o THC inclui Δ9-THC, também conhecido como tetrahidrocanabinol, Δ9-tetrahidrocanabinol, Δ1 -THC (conforme a antiga nomenclatura) e dronabinol (uma droga quimicamente sintetizada). Em algumas modalidades, as moléculas pequenas do abuso de drogas incluem Δ9-THC-COOH ou Δ9-THC.
[013] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um dispositivo para coletar uma amostra, incluindo uma haste cuja extremidade está coberta com um preenchedor fibroso hidrofílico, de modo a absorver a amostra, em que o preenchedor fibroso é sequencialmente depositado na extremidade de um campo eletrostático de acordo com uma determinada direção para formar uma camada em formato de escova para cobrar a extremidade da haste, o preenchedor fibroso é perpendicular a uma superfície da haste, e as fibras são fibras de melamina.
[014] Em algumas modalidades, a camada em formato de escova possui a mesma espessura para absorver a amostra por um efeito capilar.
[015] Em algumas modalidades, uma espessura do preenchedor fibroso está em um intervalo de 0,5 a 3 mm, e um peso do preenchedor fibroso está em um intervalo de 1,0 a 22,0 dtex.
[016] Em algumas modalidades, uma geometria da extremidade é um círculo.
[017] Em algumas modalidades, uma geometria da extremidade é um arco circular apontado.
[018] Em algumas modalidades, o dispositivo é usado para melhorar a coleta de amostras líquidas ou amostras compostas de células.
[019] Por outro lado, a presente invenção fornece um método para preparar um dispositivo para coletar uma amostra, incluindo as etapas a seguir: usar um adesivo para unir as camadas de fibras em uma extremidade de uma haste; colocar um preenchedor fibroso em um campo eletrostático e, sequencialmente, depositar o preenchedor fibroso na extremidade de uma determinada direção para formar uma camada em formato de escova, em que as fibras são fibras de melamina.
[020] Um método para processar uma amostra inclui colocar a amostra em contato com um material absorvente, o material absorvente incluindo um material de melamina.
[021] Em algumas modalidades, o material absorvente consegue absorver a amostra. A amostra é um fluido ou amostra líquida.
[022] Em algumas modalidades, a amostra é uma ou mais dentre saliva, urina e sangue.
[023] Em algumas modalidades, após o material absorvente conseguir absorver a amostra, uma parte da amostra é liberada do material absorvente, em seguida, uma amostra liberada é usada para detecção de um analito.
[024] Em algumas modalidades, a liberação inclui espremer o material absorvente ou eluir o material absorvente com um líquido de tratamento para dissolver a amostra.
[025] Em algumas modalidades, a detecção inclui detecção da amostra liberada usando um elemento de teste.
[026] Em algumas modalidades, o elemento de teste inclui uma tira de teste imunológico para detecção.
[027] Em algumas modalidades, o analito inclui THC ou substâncias semelhantes a ele.
[028] Por outro lado, a presente invenção fornece uso, incluindo uso de um material de melamina para coletar e/ou processar amostras. Em algumas modalidades, o material de melamina inclui um material poroso de melamina. Em algumas modalidades, o material de melamina inclui um material que absorve água poroso de melamina.
[029] Em algumas modalidades, a espuma de melamina possui uma estrutura semelhante à película plana ou uma estrutura semelhante a um bloco tridimensional.
[030] Em algumas modalidades, a estrutura semelhante à película plana é uma membrana filtrante em qualquer círculo, quadrado, elipse e polígono; e a estrutura semelhante a um bloco é um cilindro, um cuboide, um cubo, um cone ou qualquer outro corpo tridimensional, ou é qualquer um dentre uma cabeça de esponja, um bloco de esponja e uma tira esponjosa com uma estrutura semelhante a um bloco.
[031] Em algumas modalidades, a amostra é qualquer uma dentre um fluido corporal, cabelo, músculos tecidos e órgãos retirados de um organismo.
[032] Em algumas modalidades, o fluido corporal é qualquer um dentre saliva, urina, sangue, escarro, linfa, plasma, sêmen, aspirados pulmonares e um fluido cérebro-espinhal.
[033] Em algumas modalidades, um determinante na amostra é qualquer um dentre drogas de moléculas pequenas do abuso de drogas, células, ácidos nucleicos, proteínas e aminoácidos.
[034] Em algumas modalidades, as moléculas pequenas do abuso de drogas incluem tetrahidrocanabinol (THC) ou suas substâncias similares. Em algumas modalidades, o THC inclui Δ9-THC, também conhecido como tetrahidrocanabinol, Δ9-tetrahidrocanabinol, Δ1 -THC (conforme a antiga nomenclatura) e dronabinol (uma droga quimicamente sintetizada). Em algumas modalidades, as moléculas pequenas do abuso de drogas incluem Δ9-THC-COOH ou Δ9-THC.
[035] Por outro lado, a presente invenção fornece um uso novo de um material de melamina, que pode reduzir a absorção de THC ou substâncias semelhantes. Em algumas modalidades, o material de melamina é usado para coletar amostras e reduzir a absorção de THC ou substâncias semelhantes nas amostras.
[036] Em algumas modalidades, o material de melamina inclui um material poroso de melamina. Em algumas modalidades, o material de melamina inclui uma espuma de melamina.
[037] Em algumas modalidades, a amostra é saliva, urina e sangue.
[038] Ainda assim, por outro lado, a presente invenção fornece um dispositivo de detecção, incluindo uma espuma de melamina para colocar uma amostra líquida em contato com o elemento de teste contendo uma área de teste, em que a espuma de melamina está localizada a montante da área de teste.
[039] A presente invenção possui os seguintes efeitos benéficos: descobriu- se que uma espuma de melamina pode ser aplicada para coleta e processamento de amostras de diagnóstico em processos de pesquisa, desenvolvimento e produção de reagentes de diagnóstico in-vitro, que podem reduzir significativamente a absorção de marcadores de detecção em processos de coleta e processamento de amostras para restaurar a autenticidade das amostras e melhorar a sensibilidade de detecção do produto.
[040] A Figura 1 é uma vista de topo estrutural de uma tira de teste em uma modalidade específica.
[041] A Figura 2 é um diagrama esquemático de uma estrutura tridimensional de uma tira de teste em uma modalidade específica.
[042] A Figura 3 é um cartão colorimétrico (padrão) para detecção de abuso de drogas da presente invenção.
[043] A Figura 4 mostra valores de leitura fluorescente (X1/X2) em uma área de detecção em uma tira de teste após padrões com THC de 20 ng/mL serem absorvidos por diferentes materiais e espremidos (Modalidade 2.3) (n° 1 a 3 são espumas de melamina e n° 4 a 6 são polipropileno).
[044] A Figura 5A é uma imagem de resultados de detecção e resultados de teste de controle de amostras liberadas por compressão após os padrões de urina de 20 ng/mL serem absorvidos por diferentes materiais.
[045] A Figura 5B é uma imagem de resultados de detecção e resultados de teste de controle de amostras liberadas por compressão após os padrões de urina de 30 ng/mL serem absorvidos por diferentes materiais.
[046] A Figura 6A é um gráfico de valor de pico de uma solução padrão de 100 ng/ml de tetrahidrocanabinol Δ9-THC (um volume de injeção de 10 μl).
[047] A Figura 6B é um gráfico de valor de pico de HLPC com um volume de injeção de 10 μl de amostras após 500 μl de 100 ng/ml Δ9-THC serem absorvidos por um bloco de amostragem preparado por uma espuma de melamina.
[048] A Figura 6C é um gráfico de valor de pico de HLPC com um volume de injeção de 10 μl de amostras após 500 μl de 100 ng/ml Δ9-THC serem absorvidos por um bloco de esponja (esponja de polipropileno) preparada a partir de polipropileno, comprimida e liberada.
[049] A Figura 7 é um cromatograma de análise de varredura por luz infravermelha de uma espuma de melamina.
[050] A Figura 8 é um cromatograma de análise de varredura por luz infravermelha de uma espuma de polipropileno.
[051] A estrutura envolvida na presente invenção ou os termos técnicos uados são descritos adicionalmente abaixo. Se não houver indicação especial, elas devem ser entendidas e interpretadas de acordo com os termos gerais comumente usados na técnica.
[052] Detecção
[053] Detecção significa avaliar ou testar a presença ou ausência de uma substância ou material, tal como, mas não limitado a produtos químicos, compostos orgânicos, compostos inorgânicos, metabólitos, drogas ou metabólitos de drogas, tecido orgânico ou seus metabólitos, ácidos nucleicos, proteínas ou polímeros. Além disso, detecção significa testar a quantidade de substâncias ou materiais. Adicionalmente, avaliar também significa imunodetecção, detecção química, detecção enzimática, cromatografia de gás, espectrometria de massa, amplificação de ácidos nucleicos e semelhantes. Qualquer ferramenta de detecção, qualquer método e qualquer dispositivo que consiga detectar analitos em amostras pode ser usado na presente invenção para detectar os analitos nas amostras. Apenas essas amostras são processadas por espumas de melamina ou materiais de melamina da presente invenção e filtradas para detecção.
[054] Amostras ou exemplares
[055] Amostras coletadas ou processadas por espumas de melamina da presente invenção incluem fluidos biológicos (por exemplo, fluidos de processo ou amostras clínicas). Amostras ou exemplares neste são termos alternativos e podem significar a mesma coisa. Amostras líquidas ou amostras de fluido podem ser derivadas de amostras sólidas, semissólidas, excrementos, tecido biológico e amostras de alimentos. As amostras sólidas ou semissólidas podem ser convertidas em amostras líquidas por qualquer método adequado, tal como mistura, amassamento, maceração, incubação, dissolução ou uso de enzimólise em uma solução adequada (por exemplo, água, uma solução de fosfato ou outras soluções tamponantes) para digerir amostras sólidas. “Amostras biológicas” incluem amostras derivadas de animais, plantas e alimentos, tais como urina, saliva, sangue e seus componentes, fluido cefalorraquidiano, secreções vaginais, espermas, fezes, suor, secreções, tecido, órgãos, tumores, tecido e culturas de órgãos, culturas celulares e mídia derivada de humanos ou animais. Uma amostra biológica preferencial é urina, preferencialmente, uma amostra biológica é saliva. Amostras de sangue incluem substâncias de processamento de alimentos, produtos finais, carne, queijo, vinho, leite e água potável. Amostras de plantas incluem tecido de planta, culturas celulares de plantas e mídia derivada de qualquer planta. “Amostras ambientais” são derivadas do meio ambiente (por exemplo, amostras líquidas derivadas de lagos e outros corpos d’água, amostras de esgoto, amostras do solo, água subterrânea, água residual e amostras líquidas de resíduos). As amostras ambientais também podem incluir esgoto ou outra água residual.
[056] Ao usar uma espuma de melamina adequada da presente invenção, qualquer amostra pode ser coletada e processada para reduzir a absorção dos analitos. Preferencialmente, moléculas pequenas de drogas na saliva e urina são coletadas usando a espuma de melamina da presente invenção. Obviamente, as amostras coletadas ou processadas usando a espuma de melamina da presente invenção podem ser amostras de qualquer uma dentre as formas acima, inicialmente sólidas ou líquidas, desde que esses líquidos ou amostras líquidas possam ser absorvidas pela espuma de melamina.
[057] Quando um elemento de teste é usado para coleta, o elemento de teste geralmente possui uma área de aplicação de amostra. A área de aplicação de amostra neste documento é geralmente preparada um material que absorve água, e as amostras líquidas ou amostras de fluidos podem ser absorvidas através do capilar ou de outras propriedades de um material de um elemento absorvente, de modo que as amostras de fluidos fluam na mesma área de aplicação. Um material da área de aplicação da amostra para as amostras de fluido pode ser qualquer material que consegue absorver líquidos, tais como a espuma de melamina da presente invenção, ou uma esponja e papel filtrante misturados com a espuma de melamina, fibra de poliéster, gel, tecidos não tecidos, algodão, películas de poliéster, filamentos etc. A espuma de melamina pode ser misturada nos materiais que absorvem água da espuma não melamina acima, de modo que o efeito de absorção desses materiais que absorvem água nos analitos nas amostras também consiga ser reduzido. Quando a detecção é necessária, uma solução tamponante é aplicada à área de aplicação da amostra para dissolver as amostras, de modo que as amostras dissolvidas possam fluir no elemento de teste ou em um elemento de detecção.
[058] A jusante e a montante
[059] A jusante e a montante é a divisão para uma direção de fluxo de líquido, geralmente um líquido ou fluido flui de uma área a montante para uma área a jusante. A área a jusante recebe um líquido da área a montante e o líquido também consegue fluir ao longo da área a montante para a área a jusante. Isso é geralmente dividido de acordo com a direção de fluxo do líquido. Por exemplo, em alguns materiais que usam força capilar para promover o fluxo de líquido, o líquido consegue vencer a gravidade e fluir em uma direção oposta à gravidade. Nesse momento, o montante e jusante ainda são divididos de acordo com a direção de fluxo do líquido. Por exemplo, em um dispositivo de detecção da presente invenção, após um elemento de teste absorver uma amostra de fluido ou uma amostra líquida, um fluido pode fluir de uma área de aplicação de amostra 101 do elemento de teste para uma área de detecção 103 do elemento de teste 1, e nesse momento, o fluxo do líquido da área de aplicação de amostra 101 para a área de detecção 103 é de montante para jusante. No processo de circulação, o líquido passa através de uma área de teste 102, e existe uma área de detecção 105 e uma área de controle de resultados de testes 106 na área de teste. A área de teste pode ser uma película de fibra de poliéster e a área de aplicação de amostra pode ser de fibra de vidro. Nesse ponto, a área de aplicação de amostra ou área de absorção 101 está localizada a montante da área de aplicação de amostra do elemento de teste.
[060] Elementos de teste
[061] Os chamados “elementos de teste” neste documento referem-se aos elementos que conseguem detectar se as amostras ou exemplares contém analitos de interesse. Essa detecção é baseada em princípios técnicos, tais como imunologia, química, eletricidade, óptica, moléculas, ácidos nucleicos, física etc. Depois que as amostras são coletadas ou processadas usando uma espuma de melamina fornecida pela presente invenção, as amostras que passam através da espuma de melamina podem ser diretamente aplicadas nos elementos de teste para testagem e avaliação.
[062] Os elementos de teste neste documento podem ser selecionados a partir de uma tira de teste de fluxo lateral, que consegue detectar uma variedade de analitos. Obviamente, outros elementos de teste adequados também podem ser aplicados na presente invenção. Vários elementos de teste podem ser combinados para serem aplicados na presente invenção. Uma forma é o papel de teste. O papel de teste para análise de analitos (tais como drogas ou metabólitos indicativos de condições médicas) em uma amostra pode estar em várias formas, tais como formas de imuoensaio ou análise química. O papel de teste pode usar um modo de análise não competitiva ou competitiva. O papel de teste geralmente inclui um material de absorção de água com uma área de adição de amostra, uma área de reagente e uma área de teste. Uma amostra de fluido ou de líquido é adicionada na área de adição de amostra e flui para a área de reagente pela ação do capilar. Na área de reagente, a amostra se liga a um reagente, se os analitos estiverem presentes. A amostra continua então a fluir para a área de teste. Para outros reagentes, se as moléculas que se ligam especificamente aos analitos são imobilizadas na área de teste, esses reagentes reagem com os analitos (se presentes) na amostra e se ligam aos analitos nessa área, ou se ligam a um determinado reagente na área de reagente. Um rótulo usado para exibir um sinal de detecção está presente na área de reagente ou em uma área de rotulagem separada.
[063] Um modo típico de análise não competitiva se refere a um sinal que será gerado se a amostra contiver os analitos, e não será gerado nenhum sinal se a amostra não contiver os analitos. Quanto maior o número dos analitos, cuja concentração excede um limite na amostra, mais forte será o sinal. Em um método de competição, um sinal será gerado se os analitos não estiverem presentes na amostra, e nenhum sinal será gerado se os analitos estiverem presentes. Da mesma forma, quanto maior o número dos analitos, cuja quantidade excede um limite na amostra, mais fraco será o sinal produzido em uma região de sinal onde eles se encontram. O “limite” neste documento é um valor clínico ou geral e pode ser ajustado de acordo com diferentes situações. Por exemplo, quando o método de competição é usado para detectar os analitos, partículas de ouro (pretas ou púrpuras) são usadas como marcadores para a geração do sinal. Geralmente, quando a concentração na amostra excede o limite, espera-se que nenhum sinal seja gerado, indicando um resultado positivo. Quando a concentração na amostra é menor do que o limite, espera-se que um sinal seja gerado, indicando um resultado negativo. A forma do sinal pode ser uma linha, um ponto circular ou qualquer outra forma. Quando não existir uma linha colorida, um cartão de cor padronizada é geralmente usado para comparar a concentração da cor ou a profundidade da cor para julgar o padrão de um resultado negativo ou de um resultado positivo. Normalmente, quanto menor o número de analitos na amostra, mais escura se torna a linha colorida. No inverso, quanto maior for o conteúdo dos analitos na amostra, mais clara se torna a linha colorida, indicando assim o nível quantitativo ou concentração do teor dos analitos na amostra.
[064] Os elementos de teste podem ser papel de teste, que pode ser selecionado de materiais que absorvem ou não absorvem água. O papel de teste pode incluir uma variedade de materiais para transferência de amostra líquida. Um dos materiais do papel de teste pode cobrir outro material, por exemplo, papel de filtro que cobre uma membrana de nitrocelulose. Uma das áreas do papel de teste pode ser selecionada de um ou mais materiais, enquanto a outra área é selecionada de um ou mais materiais diferentes. O papel de teste pode estar aderido a um determinado suporte ou superfície rígida para melhorar a resistência de adesão do papel de teste.
[065] Os analitos são detectados por um sistema gerador de sinais, por exemplo, usando uma ou mais enzima que reagem especificamente com os analitos, e usando o método de imobilização da substância de ligação específica no papel de teste de detecção, conforme descrito acima, uma ou mais combinações do sistema gerador de sinais são imobilizadas na área de teste do analito do papel de teste. Uma substância que gera sinais pode estar presente na área de adição de amostras, na área de reagente ou na área de teste, ou em todo o papel de teste, e a substância pode preencher um ou mais materiais do papel de teste. Uma solução contendo substância sinalizadora é adicionada na superfície do papel de teste ou um ou mais materiais do papel de teste são imersos na solução contendo substância sinalizadora. O papel de teste ao qual a solução contendo substância sinalizadora é adicionada é seco. O sinal aqui pode ser qualquer sinal de sistema, tal como partículas coloridas, como partículas de ouro, partículas de látex ou corantes coloridos e, obviamente, também substâncias fluorescentes.
[066] As áreas respectivas do papel de teste podem ser arranjadas nas seguintes maneiras: uma área de adição de amostra 101, uma área de reagente, uma área de teste 103, uma área de controle, uma área para determinação se uma amostra está ou não adulterada, e uma área de absorção de amostra líquida. A área de controle está localizada atrás da área de teste. Todas as áreas podem ser arranjadas em uma tira de papel de tese usando apenas um material. Materiais diferentes também podem ser usados para áreas diferentes. As áreas respectivas podem estar em contato direto com a amostra líquida ou áreas diferentes são arranjadas de acordo com a direção de fluxo da amostra líquida, e uma extremidade traseira de cada área é conectada e sobreposta com uma extremidade frontal de outra área. Os materiais usados podem ser materiais com uma propriedade de absorção de água melhorada, tal como um papel de filtro, fibra de vidro ou membradas de nitrocelulose. O papel de teste também pode usar outras formas.
[067] Geralmente, uma tira de reagente normalmente usada é uma tira de reagente de membrana de nitrocelulose, ou seja, uma área de detecção inclui uma membrana de nitrocelulose (NC) e moléculas de ligação específicas são imobilizadas na membrana de nitrocelulose para exibir resultados de detecção; também pode ser uma membrana de acetato de celulose ou uma membrana de náilon etc. Por exemplo, tiras de reagentes ou dispositivos contendo tiras de reagentes são descritas pelas patentes a seguir: US 4857453; US 5073484; US 5119831; US 5185127; US 5275785; US 5416000; US 5504013; US 5602040; US 5622871; US 5654162; US 5656503; US 5686315; US 5766961; US 5770460; US 5916815; US 5976895; US 6248598; US 6140136; US 6187269; US 6187598; US 6228660; US 6235241; US 6306642; US 6352862; US 6372515; US 6379620; e US 6403383. As tiras de testes e dispositivos semelhantes com tiras de testes divulgadas nos documentos de patentes acima podem ser todas aplicadas aos elementos de teste ou dispositivos de detecção da presente invenção para detectar os analitos, tais como a detecção dos analitos na amostra.
[068] As tiras de reagente de detecção aplicadas à presente invenção podem ser normalmente denominadas de tiras de teste de fluxo lateral. As estruturas específicas e princípios de detecção dessas tiras de reagente são tecnologias bem conhecidas dos versados na técnica da técnica anterior. Uma tira de reagente de detecção comum (Figura 1) inclui uma área de coleta de amostra ou uma área de adição de amostra 101, uma área de rotulagem (não mostrada), uma área de detecção 103 e uma área de absorção de água. A área de coleta de amostra inclui uma esponja receptora de amostras. A área de rotulagem inclui uma esponja de rotulagem. A área de absorção de água pode incluir uma esponja de absorção de água. A área de detecção inclui substâncias químicas necessárias, tais como reagentes imunológicos ou reagentes químicos enzimáticos, que podem detectar se um analito está ou não contido. Geralmente, uma tira de reagente de detecção normalmente usada é uma tira de reagente de membrana de nitrocelulose, ou seja, uma área de detecção 103 inclui uma membrana de nitrocelulose, e é uma área para exibir resultados de detecção pela imobilização de moléculas de ligação específicas na membrana de nitrocelulose; também pode ser uma membrana de acetato de celulose ou uma membrana de náilon etc. Obviamente, uma área de controle de resultado de detecção também pode ser incluída a jusante da área de detecção. Geralmente, a área de controle e a área de detecção aparecem em uma forma de linhas horizontais, que são linhas de detecção ou linhas de controle. Tais tiras de reagentes de detecção são tiras de reagentes tradicionais, e obviamente, elas também podem ser de outros tipos de tiras de reagentes que utilizam ação capilar para detecção. Além disso, tiras de reagentes de detecção geral possuem componentes de reagentes químicos, tais como anticorpos imobilizados ou outros reagentes. Quando eles encontram um líquido, o líquido flui ao longo das tiras de reagentes com ação capilar, e com o fluxo, os componentes do reagente seco são dissolvidos no líquido, assim, procedendo para a próxima área, os reagentes secos nessa área são processados, para executar a detecção necessária. O fluxo de líquido procede principalmente através da ação capilar. Neste documento, todos eles podem ser aplicados ao dispositivo de detecção da presente invenção, ou arranjados em uma câmara de detecção para entrar em contato com uma amostra líquida, ou usados para detectar a presença ou a ausência de um analito na amostra líquida que entra na câmera de detecção ou a quantidade da sua presença.
[069] Além disso, as próprias tiras de teste acima ou as tiras de teste de fluxo lateral são usadas para entrar em contato com a amostra líquida para testar se a amostra líquida contém o analito, o próprio elemento de teste da presente invenção pode ser usado como um dispositivo de detecção para detectar o analito na amostra, de modo que o próprio dispositivo de detecção seja equivalente ao elemento de teste neste documento. Por exemplo, após uma amostra de fluido ser misturada com um líquido de tratamento, o elemento de teste é diretamente usado para detecção. Como será descrito em detalhes abaixo, o elemento de teste pode ser usado sozinho para detecção ao mesmo tempo em que é descrito que um dispositivo receptor é usado para processar a amostra de fluido.
[070] Analitos
[071] Exemplos que podem usar analitos envolvidos na presente invenção incluem algumas substâncias moleculares pequenas, incluindo drogas (por exemplo, drogas de abuso). "Drogas de abuso" (DOA) refere-se ao uso de drogas para finalidades não médicas (geralmente exercendo uma função na paralisia dos nervos). O abuso dessas drogas resulta em dano físico e mental e causa dependência, vício e/ou morte. Exemplos de drogas de abuso incluem cocaína; anfetamina AMP (por exemplo, Black Beauty, comprimidos de anfetamina branca, dextroamphetamina, comprimidos de dexedrina, Beans); metanfetamina MET (crank, metanfetamina, cristal, speed); barbitúricos BAR (como Valium, Roche Pharmaceuticals, Nutley, New Jersey); sedativos (ou seja, drogas auxiliares do sono); ácido lisérgico dietilamida (LSD); inibidores (calmantes, goofballs, barbos, diabos azuis, yellow jackets, metaqualona); antidepressivos tricíclicos (TCA, ou seja imipramina, amitriptilina e doxepina); metileno dioximetam-fetamina MDMA; fenciclidina (PCP); tetrahidrocanabinol (THC, maconha, marijuana, haxixe, erva, etc.); opiáceos (ou seja, morfina MOP ou ópio, cocaína COC; heroína, oxicodona); ansiolíticos e sedativos-hipnóticos, e os ansiolíticos são uma classe de drogas usadas principalmente para reduzir a ansiedade, tensão e medo e estabilizar o humor e ter efeitos tanto hipnóticos como sedativos, incluindo benzodiazepinas BZO, BZ atípicas, diazônio de fusão NB23Cs, benzodiazepinas, ligantes para receptores BZ, e BZs de anel aberto, derivados de difenilmetano, carboxilatos de piperazina, carboxilatos de piperidina, quinazolinonas, derivados de tiazina e tiazol, outros heterociclos, sedativos/analgésicos do tipo imidazol (tais como oxicodona OXY, metadona MTD), derivados de propilenoglicol - carbamatos, compostos alifáticos, derivados de antraceno, etc. Um dispositivo de detecção usando a presente invenção também pode ser usado para a detecção de medicamentos que pertencem a fins médicos, mas são propensos a overdose, tais como antidepressivos tricíclicos (imipramina ou análogos) e acetaminofeno. Essas drogas serão metabolizadas em substâncias moleculares menores após serem absorvidas pelo corpo humano. Essas substâncias moleculares pequenas existem no sangue, urina, salina, suor e outros fluidos corporais ou em alguns fluidos corporais.
[072] Por exemplo, analitos detectados com a presente invenção incluem, mas não estão limitados a, creatinina, bilirrubina, nitrito, proteínas (não específicas), hormônios (por exemplo, gonadotropina coriônica humana, hormônio progesterona, hormônio estimulador de folículo, etc.), sangue, leucócitos, açúcares, metais pesados ou toxinas, substâncias bacterianas (tais como proteínas ou carboidratos de bactérias específicas, por exemplo, Escherichia coli 0157:H7, Staphylococcus, Salmonella, Clostridium, Campylobacter, L. monocytogenes, Vibrios ou Bacillus cereus) e substâncias associadas às características fisiológicas em amostras de urina, tais como pH e proporção. Qualquer outra análise química e clínica de urina pode usar uma forma de detecção de fluxo lateral para cooperar com o dispositivo da presente invenção para detecção.
[073] Material de melamina
[074] Um componente principal do material de melamina descrito neste documento é a resina de melamina e resina fenólica, que é um produto de copolicondensação composto principalmente por melamina, fenol e formaldeído. Um material usado na presente invenção para processar ou coletar amostras é um material feito por polimerização de melamina como uma matéria-prima principal, ou um material sintetizado, principalmente pelo uso de formaldeído e melamina como matérias-primas. Em algumas modalidades, o material da presente invenção inclui um material poroso produzido por um processo de espumagem após o formaldeído e melamina serem sintetizados diretamente como matérias-primas. A “espumagem” neste documento pode ser usada para fabricar materiais contendo microporos ou múltiplos poros por meio de qualquer método existente. O processo de espumagem também está presente na técnica anterior, por exemplo, resina de espumagem, um assistente de espumagem e resina de ligante (formando um adesivo de produto acabado) que são misturados. O processo de espumagem é conduzido conforme se segue: 80 partes de etileno-acetato de vinila (EVA), 20 partes de APAO PT 3385, 20 partes de azodicarbonamida, 19 partes de CaCO e 0,6 parte de peróxido de dicumil misturados e colocados em um molde para espumagem, e os poros fechados são quebrados por força mecânica, de modo que a esponja espumada possa ser obtida. Sua densidade (d) geralmente é de 0,028 g/cm, e a dureza geral de 25% é de 1,9 KPa. Assim como na espumagem, o mesmo material e diferentes processos de fabricação formarão coisas diferentes. Um processo de como realizar a espumagem também pode ser realizado ao consultar o esquema descrito na patente de invenção chinesa, publicação de patente CN110774604B, e qualquer tecnologia no relatório descritivo da patente pode ser usada como uma implementação específica da presente invenção para preparar uma esponja espumada. Um processo de produção de um material de espumagem também pode ser realizado ao consultar qualquer solução técnica na publicação de pedido de patente de invenção chinesa, publicação n° CN107553920A, que divulga especificamente um método de abertura de poros para uma esponja espumada, e um material de espumagem produzido pelo método divulgado neste pedido de patente também pode ser usado para um material de melamina da presente invenção para tratamento de espumagem. Pode-se entender que o processo de espumagem é apenas um processo para produzir um material poroso, e obviamente, qualquer outro método pode ser usado também para produzir o material poroso.
[075] Obviamente, em algumas modalidades, o material de melamina ou material poroso de melamina, também conhecido como um material de espuma de melamina, de acordo com a presente invenção, pode ser obtivo comercialmente, e muitas empresas se especializam na produção desse material. O processamento personalizado, também pode ser realizado, uma empresa de produção recebe os dados de proporção de formaldeído para melamina, ou uma dimensão porosa necessária, o número de poros de acordo com o volume unitário etc. Dessa forma, os materiais porosos necessários podem ser produzidos.
[076] Em algumas modalidades, o material de melamina neste documento inclui um material que absorve água poroso. O termo “que absorve água” neste documento significa um líquido que pode ser absorvido ao mesmo tempo que fica retido no material. Uma amostra é geralmente absorvida pela ação capilar. Em algumas modalidades, após o material poroso absorver um líquido, o líquido pode também ser liberado do material poroso. Neste documento, liberar significa que o material poroso pode ser fisicamente comprimido, para permitir que o líquido flua para o material poroso. Alternativamente, alguns líquidos são usados para imersão do material poroso, de modo que a amostra líquida, absorvida pelo material seja dissolvida em um líquido de processamento. O líquido de processamento neste documento não é uma amostra líquida, mas um reagente usado para dissolver a amostra, tal como alguns reagentes de ajuste de pH, soluções tamponantes e soluções de quebra. Há também muitas formas de compressão, todas servem para reduzir um volume do material poroso de alguma forma, de modo que a amostra líquida absorvida seja liberada do material poroso, e isso ocorre porque o material poroso é comprimido e o líquido flui para fora dele.
[077] Na indústria tradicional existente, a chamada espuma de melamina, também conhecida como uma espuma de melamina ou uma espuma de melamina-melamina, é um novo material com capacidade de absorver sons, isolamento térmico e preservação do calor, desenvolvido com êxito em todo o mundo nos anos 90. Além da sua excelente capacidade de absorção de som, isolamento térmico e resistência ao fogo, a espuma de melamina possui as vantagens da retardância de chama alta, proteção ambiental, propriedade higiênica e segurança comparada com outros produtos semelhantes tais como lã de vidro e espuma de poliuretano.
[078] Contudo, os inventores da presente invenção descobriram que, quando esse material especial é usado para absorver e processar a amostra, a absorção de um analito pode ser reduzida. Em particular, a absorção das seguintes substâncias na amostra pode ser bem melhorada, tal como o tetrahidrocanabinol (THC). Nos testes de abuso de drogas existentes, um problema de absorção do tetrahidrocanabinol é um problema de difícil solução, pois um material de um coletor tradicional possui um efeito de absorção no THC (tetrahidrocanabinol) na amostra, resultando em perda de detecção ou resultados de falsos negativos. Por exemplo, quando uma concentração de THC na amostra é A, um teor de THC em uma amostra coletada pelo coletor tradicional e comprimida pelo coletor é menor do que A ou muito menor do que A, um valor de teste obtido dessa forma é um erro com um valor real em uma amostra real, e esse erro pode provocar a perda de detecção. Especialmente em alguns produtos usando reagentes de diagnóstico in-vitro, uma amostra é coletada geralmente pelo uso de um coletor e, em seguida, comprimida pelo coletor, e então, uma amostra comprimida é testada. Se um material usado para absorver uma amostra apenas como um coletor possuir um efeito de absorção, a perda de detecção ou resultados de falsos negativos em geral serão provocados. É claro que, às vezes, é necessário usar um coletor para coletar uma amostra, e da mesma forma, às vezes é necessário processar a amostra antes dos testes, tais como filtração, dissolução e eluição de impurezas na amostra antes dos testes. Visto que o material de filtração usado possui absorção em um analito, ele causará erros entre os resultados de testes e resultados reais. Após o material de melamina da presente invenção ser usado para coleta e processamento de amostras, descobre-se que o analito, especialmente o THC, é raramente absorvido, de modo que um valor de detecção obtido está próximo de um valor real da própria amostra, evitando perda de detecção ou resultados errados de falsos negativos.
[079] Em algumas modalidades, o tetrahidrocanabinol neste documento geralmente inclui Δ9-THC (Δ9-tetrahidrocanabinol), uma fórmula molecular dele usando C21H30O2, e uma estrutura molecular dele conforme se segue, ou inclui uma ou mais dessas substâncias:
[080] Em algumas outras modalidades, o tetrahidrocanabinol neste documento geralmente inclui ácido 11-desmetil-Δ9-tetrahidrocanabinol-9- carboxílico (11-nor-Δ9-THC-9COOHΔ9-tetrahidrocanabinol), uma fórmula molecular dele sendo C21H28O4, uma estrutura química dele conforme se segue, ou inclui substâncias similares a ele:
[081] As substâncias similares neste documento são principalmente aquelas em que sua estrutura principal é similar ao tetrahidrocanabinol, mas grupos nas estruturas de espaço químico respectivas aparecem, mas suas estruturas principais são iguais ou similares ao tetrahidrocanabinol.
[082] Em algumas modalidades, o material de melamina usado na presente invenção é usado para coletar ou processar a amostra, de modo que um efeito de absorção em um analito possa ser reduzido. “Coletar” neste documento refere-se a um coletor preparado ou fabricado com um material contendo melamina usado para absorver uma amostra ou absorver uma amostra de fluido, que pode ser comprimido diretamente de um absorvedor após a absorção, ou uma amostra líquida eluída do absorvedor. Essa coleta pode ser pela absorção da amostra ou para absorver uma amostra de um corpo humano ou de um organismo, tal como uma coleta de saliva e amostras de escarro de uma cavidade oral de um humano ou mamífero, ou sugar algumas amostras de urina humana e amostras fecais para detecção subsequente. Obviamente, pode ocorrer também que o material de melamina da presente invenção é usado para coletar diretamente uma amostra sólida ou uma amostra semissólida, que é então seca e, em seguida, armazenada ou transportada, e quando é necessário realizar detecção, a amostra no coletor é dissolvida por um líquido e se torna uma amostra líquida em formato. Em algumas modalidades, o material poroso contendo um material de melamina pode ser usado para absorver um líquido ou amostra de fluido, e é então armazenado ou transportado para um local de detecção, a amostra de fluido é comprimida do material poroso antes da detecção, e a amostra de fluido é detectada em seguida. Em algumas modalidades, toda a parte para absorver uma amostra de um coletor consiste em um material de melamina ou um material poroso feito de material de melamina (espuma de melamina). É claro que, a parte para absorver a amostra pode consistir principalmente no material de melamina ou no material poroso feito de material de melamina (espuma de melamina), e também conter outros materiais não melamina, por exemplo, o material de melamina corresponde a 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% e 99% do total do material absorvente.
[083] A “absorção” neste documento refere-se principalmente à absorção de um analito em uma amostra através de um material de coleta quando uma amostra líquida é coletada ou processada. Essa absorção pode ser absorção física ou absorção por ligação química em um material que atua com grupos químicos do analito, dessa forma, a eluição secundária do material de coleta é relativamente dificultada pelos métodos convencionais. A presente invenção descobriu surpreendentemente que, quando um material contendo melamina ou um material poroso de melamina é usado para coletar uma amostra, um analito pouco absorvido e uma grande parte ou a maior parte do analito pode ser eluída, ou após um material absorvente ser comprimido, a maior parte do analito pode fluir do material absorvente com uma amostra líquida, e uma pequena parte do analito permanece no material absorvente. Ainda não está claro o que faz com que o material de melamina colete ou processe a amostra para reduzir a “absorção”, possivelmente, um efeito duplo de física ou química.
[084] Deve-se observar especificamente neste documento que o material de melamina pode ser um material sem poros ou um material com poros. Em algumas modalidades preferenciais, é um material, que absorve água com poros e, neste documento, pode ser produzido geralmente pelas técnicas de espumagem. Obviamente, o material de melamina também pode ser usado para fabricar estilos semelhantes a linha ou estilos de fios fibrosos. Cada fibra dessas fibras ou fios não possui uma estrutura de poro, mas quando múltiplas fibras são unidas, existem lacunas ou poros entre as fibras, tais como microporos e pequenas lacunas. A amostra também pode ser absorvida ou processada pela ação capilar. Por exemplo, também é possível usar fibras feitas do material de melamina para formar swabs de algodão em flocos. Os métodos para fabricar swabs de algodão em flocos são divulgados especificamente na técnica anterior, por exemplo, consultando as seguintes patentes: US8.114,027, US8.317.728, US 8.979.784, US 9.011.358, US 9.173.779, US 10.327.741, AU2004226798, JP4579902, ZL200610099310.9 para produção específica. Portanto, o chamado material de melamina neste documento pode ser um material poroso ou um material com poros. Não existem exigências fixas para o tamanho dos poros. Geralmente, também são aceitáveis os poros com ação capilar, ou materiais porosos que absorvem amostras líquidas também são aceitáveis. É claro que podem ser usados para fabricar um material absorvente em um elemento de teste. Portanto, além de usar diretamente o material de melamina poroso para absorver ou processar a amostra, outros dispositivos “que absorvem água” feitos do material de melamina também podem ser usados para absorver ou processar a amostra, por exemplo, uma área de aplicação de amostra 101 do elemento de teste pode ser um bloco fibroso feito de material de melamina para aplicação ou recepção de amostras, de modo que um fluído pode fluir em um bloco de amostras.
[085] O “processamento” neste documento refere-se ao processamento de uma amostra com um material contendo melamina ou um material poroso de melamina antes da detecção. O processamento neste documento pode incluir o significa de coleta, ou pode incluir permitir que uma amostra líquida passe ou flua através do material contendo melamina ou do material poroso de melamina, a fim de obter o processamento da amostra antes da detecção, acredita-se que um analito não será danificado, tal como filtração para remover impurezas, por exemplo, algumas outras impurezas que não são substâncias alvo na saliva precisam ser filtradas, tais como proteínas ou enzimas, ou filtração do sangue para remover hemácias, etc. Portanto, em algumas modalidades, um material contendo melamina ou um material poroso de melamina pode ser usado como um coletor, e também pode ser usado para fabricar uma parte de uma tira de teste, por exemplo, como um material para uma área de aplicação de amostra da tira de teste, ou como um material para uma área de rotulagem, ou um material de uma área de detecção. Após tudo isso, o material poroso de melamina pode ser produzido de modo personalizado, e possuir um material poroso permite o fluxo por capilaridade das amostras de fluido. O material poroso neste documento pode ser múltiplos poros com ação capilar, ou um material poroso formado por um processo de “espumagem”.
[086] A presente invenção será descrita adicionalmente em detalhes abaixo em combinação com as modalidades. É necessário detalhar que as modalidades a seguir pretendem facilitar o entendimento da presente invenção, mas não possui qualquer efeito limitador sobre elas. As modalidades a seguir da presente invenção são apenas exemplos limitados de acordo com o espírito da presente invenção, cujo escopo é definido pelas reivindicações da presente invenção.
[087] Modalidade 1 Preparação de dispositivo de detecção de fluxo lateral para detecção de imunoensaio fornecido pela presente invenção.
[088] Um dispositivo de detecção de fluxo lateral para detecção de imunoensaio de coronavírus novo preparado nesta modalidade é mostrado nas Figuras 1 e 2, incluindo a tira de teste e, de acordo com uma direção de fluxo de líquido, de montante para jusante, incluindo sequencialmente uma área de amostra 101, uma área de rotulagem 102, uma área de detecção 103 e uma área que absorve água 104. A área que absorve água é preparada pelo uso de papel de filtro que absorve água como um bloco que absorve água; a área da amostra 101 usa um bloco de aplicação de amostra cujo material é fibra de vidro, de modo que uma amostra adicionada através de um orifício de adição de amostra S flua para a fibra de vidro, que é em seguida misturado com a amostra para fluir na direção da área de rotulagem 102; a área de rotulagem é feita em um bloco de rotulagem, incluindo partículas de rotulagem (tais como partículas de ouro, partículas fluorescentes, partículas de látex ou corantes, ou outras substâncias de rotulagem coloridas), antígenos ou anticorpos conjugados, em seguida, uma mistura de rotulagem é pulverizada em uma película de poliéster através de equipamento de pulverização para fabricar o bloco de rotulagem, e uma substância de rotulagem no bloco de rotulagem pode fluir com o fluxo de um líquido; a área de detecção usa uma membrana de nitrocelulose, anticorpos ou antígenos em uma linha de detecção são dissolvidos com uma solução tamponante PBS, em seguida, é usado equipamento de membrana porosa para desenhar uma linha na membrana de nitrocelulose, de modo que uma distância entre diferentes anticorpos seja de 3 a 8 milímetros, e em seguida, a membrana de nitrocelulose é colocada em um forno para secagem pelo uso de espera, os anticorpos, antígenos ou outras substâncias de ligação processadas na membrana geralmente não se movem, e a área de detecção inclui uma área de detecção 105 e uma área de controle de resultados de detecção 106.
[089] Após preparação da área que absorve água 104, a área de amostra 101, a área de rotulagem 102 e a área de detecção 103 são concluídas, respectivamente, são montadas de modo que uma extremidade do bloco de aplicação de amostra seja superposta em uma extremidade do bloco de rotulagem, a outra extremidade do bloco de rotulagem é superposta na membrana de nitrocelulose, e a membrana de nitrocelulose em uma extremidade de uma linha de controle é superposta pelo papel de filtro que absorve água, dessa forma, toda a tira de teste é formada e, em seguida, montada em um cartão de teste, em que o orifício de adição de amostra S no cartão de teste corresponde ao bloco de aplicação de amostra, a membrana de nitrocelulose corresponde a uma janela de grau, além disso, o orifício de adição de amostra S está localizado a jusante de um orifício de solução tamponante B.
[090] Quando um método de sanduíche é usado para fabricar um elemento de teste, pode ser um método direto de sanduíche de anticorpo duplo ou um método indireto. Por exemplo, se um antígeno A1 em uma amostra precisa ser detectado, um primeiro anticorpo AB1 para o antígeno A1 acoplado a um rótulo de cor pode ser processado em um bloco de rotulagem, e um segundo anticorpo AB2 para o antígeno A1 é imobilizado em uma linha de detecção. Se o teor do antígeno A1 na amostra for superior, substâncias rotuladas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura, indicando o maior teor.
[091] Em algumas modalidades, quando um método de competição é usado para teste, tal como quando é desejado detectar drogas de abuso na urina ou saliva, tal como THC (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo à antígenos com THC são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a partículas coloridas, e os antígenos com THC ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém THC, o THC se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[092] Essas tiras de teste podem ser usadas para detecção apenas do analito, ou podem ser colocadas em um cartão de teste para detecção, por exemplo, existe uma janela para observar resultados e uma janela para gotejamento de líquido no cartão de teste, a janela para gotejamento de líquido geralmente está localizada sobre uma área de aplicação de amostra, e uma janela para leitura dos resultados de detecção está localizada sobre uma área de detecção.
[093] Modalidade 2: Influência dos dispositivos de amostragem preparados com diferentes esponjas nos resultados de detecção de Δ9 -THC.
[094] Δ9-THC, também conhecido como tetrahidrocanabinol, Δ9- tetrahidrocanabinol, Δ1 -THC (conforme a nomenclatura anterior), e dronabinol (uma droga quimicamente sintetizada), THC na sigla, é uma substância psicoativa principal na cannabis, naturalmente presente na resina secretada pelos estames de flores fêmeas da planta morácea Cannabis sativa L. Após inalar cannabis contendo esse produto, as pessoas são excitadas e inibidas, e após fumar esse produto, os pensamentos surgem e somem, o espírito é agitado e as pessoas ficam conscientemente eufóricas; ou as pessoas caem em depressão e pânico. Após o uso prolongado, as pessoas sofrem privação mental e ficam gravemente incapacitadas para o trabalho. É uma substância de uso estritamente controlado. Contudo, durante o desenvolvimento de reagentes diagnósticos in-vitro de Δ9-THC, descobriu-se que o Δ9-THC é muito facilmente absorvido por um bloco de esponja tradicional para amostragem, resultando na sua detecção e ocorrência de resultados de detecção em falso negativo. Maior teor.
[095] Tira de reagente de THC: quando um método de competição é usado para teste, tal como quando é desejado detectar drogas de abuso na urina ou saliva, tal como THC (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo à antígenos com THC são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a partículas coloridas, e os antígenos com THC ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém THC, o THC se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[096] Modalidade 2.1: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC em amostras de saliva (método de competição) - Método colorimétrico de rotulagem usando partículas de ouro.
[097] Nesta modalidade, soluções de amostra padronizadas (preparadas com saliva) contendo 20, 40, 60 e 80 ng/mL de Δ9-THC são preparadas, respectivamente, e dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno pp) preparado com polipropileno, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 0,12 ml da amostra é extraída e gotejada em uma área de aplicação de amostra de uma tira de reagente de detecção, um teor de Δ9-THC na amostra é detectado por um método de competição, e após 10 minutos, são realizadas a leitura e fotografias contrastivas. Os resultados da detecção são divididos em G1 a G10, de acordo com um cartão colorimétrico (Figura 3), em que, menor ou igual a G4 é positivo, maior do que G4 é negativo, e resultados específicos são mostrados na Tabela 1; quanto maior for a leitura, menor é o teor das drogas.
[098] Tabela 1. Comparação das propriedades de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC.
[099] Como é possível observar na Tabela 1, comparado com um bloco de amostragem tradicional preparado no controle (esponja de polipropileno), os resultados de detecção das amostras coletadas pelo uso do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina possuem uma grande diferença. Quando amostra contém Δ9-THC de 20 ng/mL, um resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é G6, que é significativamente maior do que um resultado de detecção (G8) no controle. Quando a amostra contém Δ9-THC de 40, 60 e 80 ng/mL, um resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é G2 ou G1, que é inferior a G4 e é positivo, enquanto um resultado de detecção no controle é G5, e existe um resultado falso negativo. O resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é significativamente superior ao do controle. É possível observar que o bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina pode melhorar significativamente a sensibilidade de detecção do Δ9-THC na amostra, e o motivo é que a espuma de melamina pode reduzir significativamente a absorção para Δ9-THC durante a coleta da amostra e restaurar a autenticidade das amostras, de modo que falsos negativos podem ser evitados.
[100] Modalidade 2.2: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC em amostras de saliva (método de competição) - Método de leitura colorimétrico rotulado com ouro.
[101] Além da comparação de cores para julgar e ler os valores do teste, uma máquina é usada para maior precisão na leitura de Δ9-THC por máquina de ouro coloidal na saliva dos resultados do teste (detector de traços de drogas AFS-1000: A202006929.). Quanto maior o valor de T, menor é o teor de drogas nas amostras testadas, e os resultados específicos são mostrados na Tabela 2.
[102] Tabela 2. Resultados do teste da leitura da linha de detecção usando equipamento (comparação das propriedades de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC).
[103] Conclusão: quando uma solução negativa é testada, não existe diferença significativa entre os dados do grupo de controle e os dados do grupo experimental; quando uma solução positiva é testada, quando as amostras são todas 20 ng/mL, para amostragem usando a espuma de melamina, um valor T é 160 a 190, enquanto que para amostragem usando uma esponja de polipropileno tradicional, uma leitura de valor T é 350 a 370, e existe quase que o dobro de diferença, indicando que para amostras realizadas com a espuma de melamina, a absorção para Δ9-THC é significativamente reduzida e está próxima de um valor real, enquanto que para amostragem usando a esponja de polipropileno, resultados de falsos negativos pode ser provocados devido à grande absorção de Δ9-THC.
[104] Modalidade 2.3: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC em amostras de saliva (método de competição) - Método de leitura de rotulagem fluorescente.
[105] Quando a rotulagem fluorescente é usada, partículas rotuladas semelhantes à ouro, apenas substâncias para produção de sinal em um bloco de rotulagem se alteram. Portanto, quando um método de competição é usado para teste, tal como quando é desejado detectar drogas de abuso na urina ou saliva, tal como THC (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo à antígenos com THC são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a substâncias fluorescentes, e os antígenos com THC ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém THC, o THC se liga aos anticorpos acoplados por fluorescência, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as substâncias fluorescentes na linha de detecção são inferiores, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, substâncias fluorescentes coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, indicando um resultado negativo.
[106] Resultados: Leitura da tira de teste fluorescente de saliva de Δ9-THC. Quanto maior for o valor de X1/X2 (linha de teste T/linha de controle de resultado de teste C), mais forte será a linha, e menor será o teor de drogas na amostra. Cada grupo de dados nesse experimento é repetido três vezes, os resultados de leitura da máquina são ponderados e os resultados são mostrados na Tabela 3 abaixo (Figura 4).
[107] Tabela 3. Leitura da tira de teste fluorescente (X1/X2).
[108] Quando uma solução negativa é testada, não existe diferença significativa entre os dados do grupo de controle e os dados do grupo experimental; quando uma solução positiva é testada, quando as amostras são todas 20 ng/mL, para amostragem usando a espuma de melamina, um valor X1/X2 é 0,9 a 1,173, enquanto que para amostragem usando uma esponja de polipropileno tradicional, uma leitura de valor de X1/X2 é 3,4 a 3,8, e existe quase que o dobro de diferença, indicando que para amostras realizadas com a espuma de melamina, a absorção para Δ9-THC é significativamente reduzida e está próxima de um valor real, enquanto que para amostragem usando a esponja de polipropileno, resultados de falsos negativos pode ser provocados devido à grande absorção de Δ9-THC. Na Figura 4, em uma concentração de 20 ng/mL, três colunas de dados à esquerda são valores de leitura de fluorescência da amostragem por espuma de melamina, e três colunas de dados à direita são graus de absorção para a as mesmas amostras através da esponja de polipropileno tradicional.
[109] Entretanto, realizamos também experimento similares na esponja de álcool polivinílico (PVA) e esponja de poliuretano (PU), com resultados semelhantes aos da esponja de polipropileno (PP). Os resultados de detecção de um bloco de amostragem preparado por espuma de melamina são significativamente maiores do que aqueles da esponja de álcool polivinílico (PVA) e da esponja de poliuretano (PU), indicando que uma capacidade de absorção ao THC de um amostrador preparado pelo uso da espuma de melamina é, obviamente, menor do que a capacidade da esponja de álcool polivinílico (PVA) (Modalidade 3) e da esponja de poliuretano (PU).
[110] Modalidade 3: Influência nos resultados de detecção de Δ9 -THC in na saliva (método de competição).
[111] Nesta modalidade, dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de álcool polivinílico PVA) preparado com algodão, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 0,5 ml da amostra é extraída e gotejada em uma tira de reagente de detecção, e um teor de Δ9-THC na amostra é detectado por um método de competição. Sabe-se que a saliva padrão contém Δ9-THC de 20, 40, 60 e 80 ng/mL respectivamente, e os resultados da detecção são divididos em G1 a G10, de acordo com um cartão colorimétrico (Figura 3), em que, menor ou igual a G4 é positivo, maior do que G4 é negativo, e resultados de detecção são mostrados na Tabela 4.
[112] Tabela 4. Comparação das propriedades de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC na saliva.
[113] Como é possível observar na Tabela 2, para amostras de saliva, comparado com um bloco de amostragem preparado no controle (esponja de álcool polivinílico PVA), os resultados de detecção de Δ9-THC das amostras coletadas pelo uso do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina também possuem uma grande diferença. Quando a saliva contém Δ9-THC de 20 ng/mL, um resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é G6, enquanto um resultado de detecção no controle é G8. Quando a saliva contém Δ9-THC de 40 e 60 ng/mL, um resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é G1, que é inferior a G4 e é positivo, enquanto um resultado de detecção no controle é G5 ou G6, e existe um resultado negativo. O resultado de detecção do bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina é significativamente superior ao do controle. É possível observar que o bloco de amostragem preparado pela espuma de melamina pode melhorar significativamente a sensibilidade de detecção do Δ9-THC na amostra, e o motivo é que a espuma de melamina pode reduzir significativamente a absorção para Δ9-THC durante a coleta da amostra de saliva e restaurar a autenticidade das amostras, de modo que falsos negativos podem ser evitados.
[114] Modalidade 4: Influência nos resultados de detecção de Δ9 -THC, AMP, COC, MET e OPI na saliva existente simultaneamente nas amostras (método de competição) - Método colorimétrico de cartão colorido.
[115] Uma tira de teste é preparada de acordo com o método da Modalidade 1 acima, e apenas as substâncias alvo são diferentes. Para detalhes, consulte um método de produção na Figura 1 como se segue (outras condições são iguais).
[116] THC: quando é Δ9-THC (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com Δ9- THC são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados às partículas coloridas, e os antígenos com Δ9-THC ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém Δ9-THC, o Δ9-THC se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[117] AMP: quando é AMP (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com AMP são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a partículas coloridas, e os antígenos com AMP ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém AMP, o AMP se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[118] COC: quando é COC (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com COC são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a partículas coloridas, e os antígenos com COC ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém COC, o COC se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[119] MET: quando é MET (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com MET são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados a partículas coloridas, e os antígenos com MET ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém MET, o MET se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[120] OPI: quando é OPI (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com OPI são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados às partículas coloridas, e os antígenos com OPI ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém OPI, o OPI se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[121] Teores diferentes dos padrões são preparados usando a mesma saliva, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno pp) preparado com algodão, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 500 microlitros da amostra são extraídos e gotejados em uma área de aplicação de amostra de uma tira de reagente de detecção, e um teor de Δ9-THC na amostra é detectado por um método de competição. Sabe-se que a saliva padrão contém Δ9-THC, AMP, COC, MET e OPI, correspondendo às concentrações mostradas na Tabela 5; os resultados da detecção são divididos em G1 a G10, de acordo com um cartão colorimétrico (Figura 3), em que, menor ou igual a G4 é positivo, maior do que G4 é negativo, e resultados de detecção são mostrados na Tabela 5.
[122] Quando uma solução positiva é testada, uma intensidade de cor de linha de uma tira de reagente de THC para amostragem por uma espuma de melamina é significativamente inferior ao da esponja de polipropileno para amostragem. Como é um método de competição, quanto maior a intensidade, menor o teor de um analito em uma amostra, e quanto menor a intensidade, maior o teor de um analito em uma amostra após se sugado e comprimido por um bloco de amostragem. Através dos resultados experimentais acima, quando THC é misturado com AMP, COC, MET e OPI, não afeta a sensibilidade de outras substâncias de detecção. Isso mostra também que ao usar a espuma de melamina para amostragem, quando a amostra contém uma variedade de moléculas pequenas de abuso de drogas, isso não afeta os resultados de detecção normal de THC, e ainda consegue reduzir a ação de redução de THC.
[123] Tabela 5. Substâncias moleculares pequenas em Δ9-THC, AMP, COC, MET e OPI incluídas no mesmo padrão.
[124] Modalidade 5,1: Influência nos resultados de detecção de Δ9-THC- COOH in na saliva (método de competição) - Método colorimétrico.
[125] Nesta modalidade, soluções de amostra (preparadas com saliva) contendo 20, 40 e 60 ng/mL de Δ9-THC-COOH são preparadas, respectivamente, e dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno) preparado com polipropileno, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 0,12 ml da amostra é extraída e gotejada em uma tira de reagente de detecção, e após 10 minutos, são realizadas a leitura e fotografias contrastivas. Quanto maior a leitura, menor o teor de drogas, uma leitura do padrão é julgada como maior do que G4, o que é negativo, e uma leitura menor ou igual a G4, que é positiva. Os resultados são mostrados na Tabela 6.
[126] Preparação de uma tira de teste refere-se ao método na Modalidade 1, especificamente descrito como se segue: THC: quando é Δ9-THC-COOH (uma molécula de droga pequena, hapteno - raramente imunogênico), anticorpos correspondendo aos antígenos com Δ9-THC-COOH são tratados em um bloco de rotulagem e acoplados às partículas coloridas, e os antígenos com Δ9-THC-COOH ou substâncias similares são tratados em uma linha de detecção. Quando uma amostra contém Δ9-THC-COOH, o Δ9- THC-COOH se liga aos anticorpos das partículas coloridas, e quando ele flui para a linha de detecção, os antígenos na linha de detecção e um analito na amostra se liga competitivamente aos anticorpos, de modo que, se o teor das moléculas pequenas na amostra é superior, as partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais clara ou mais fraca, indicando um resultado positivo; caso contrário, se o teor das moléculas pequenas na amostra é inferior, partículas coloridas capturadas na linha de detecção são superiores, e a cor é mais escura ou mais forte, indicando um resultado negativo.
[127] Tabela 6. Valores do resultado obtidos pelo uso de diferentes materiais para amostragem.
[128] Pode-se observar pelos resultados experimentais acima que, quando a espuma de melamina é usada para amostragem das amostras de saliva, uma leitura é 3 de acordo com um padrão positivo de 20 ng/ml, enquanto que uma leitura de 1 de acordo com uma condição de 30 ng/ml, que pode ser diretamente julgada como um resultado positivo (devido ao uso de um método de competição), caso contrário, quando o polipropileno tradicional é usado para absorção da amostra, de acordo com a condição de 30 ng/ml, uma leitura é 4,5 a 5, que ainda é julgada como sendo um resultado negativo. Isso mostra que o polipropileno possui um efeito de absorção maior em Δ9- THC-COOH quando usado para amostragem ou processamento da amostra. Na realidade, em uma amostra comprimida a partir de um bloco de absorção, um teor real de Δ9-THC-COOH é significativamente menor do que 30 ng/ml.
[129] Modalidade 5,2: Influência nos resultados de detecção de Δ9-THC- COOH em saliva (método de competição) - Leitura automática por máquina colorimétrica rotulada com ouro.
[130] Uma tira de reagente preparada pelo método na Modalidade 5.1 e as amostras são idênticos, tiras de teste são do mesmo lote, apenas um modo de leitura não é colorimetria por olho nu, mas valores numéricos diretos são obtidos por um método de leitura por máquina. Leitura por máquina de ouro coloidal na saliva de Δ9-THC-COOH: quanto maior o valor de T, menor o teor de drogas. Os resultados específicos são mostrados na Tabela 7.
[131] Tabela 7. Valores numéricos de leitura por máquina.
[132] Conclusão: quando uma solução negativa é testada, não existe diferença significativa entre os dados do grupo de controle e os dados do grupo experimental; quando uma solução positiva é testada, quando as amostras são todas 20 ng/mL, para amostragem usando a espuma de melamina, um valor T é 60 a 82, enquanto que para amostragem usando uma esponja de polipropileno tradicional, uma leitura de valor T é 155 a 162, e existe quase que o dobro ou o triplo de diferença, indicando que para amostras realizadas com a espuma de melamina, a absorção para Δ9-THC- COOH é significativamente reduzida e está próxima de um valor real, enquanto que para amostragem usando a esponja de polipropileno, resultados de falsos negativos pode ser provocados, devido à grande absorção de Δ9-THC-COOH.
[133] Modalidade 5,3: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC-COOH em amostras de saliva (método de competição) - Método de leitura de rotulagem fluorescente.
[134] Uma tira de reagente preparada pelo método na Modalidade 2.3 e as amostras são idênticos, tiras de teste são do mesmo lote, apenas um modo de leitura não é colorimetria por olho nu, mas valores numéricos diretos são obtidos por um método de leitura por fluorescência. Leitura por tira de teste fluorescente de Δ9-THC-COOH: quanto maior o valor de X1/X2, mais forte é a linha e menor é o teor de drogas na amostra. Cada grupo de dados nesse experimento é repetido três vezes, os resultados de leitura da máquina são ponderados e os resultados são mostrados na Tabela 8 abaixo.
[135] Tabela 8. Valores de leitura fluorescente.
[136] Conclusão: quando uma solução negativa é testada, não existe diferença significativa entre os dados do grupo de controle e dados do grupo experimental; quando uma solução positiva é testada, os valores numéricos em um grupo de controle são significativamente maiores do que aqueles em um grupo experimental. O grau de absorção de Δ9-THC e Δ9-THC-COOH no grupo de controle é maior do que no grupo experimental, e a resistência de absorção dos blocos de esponja no grupo experimental é melhor do que nos blocos de esponja no grupo de controle.
[137] Modalidade 6,1: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC em amostras de urina (método de competição) - Cartão colorimétrico.
[138] Nesta modalidade, soluções de amostra (preparadas com urina) contendo 20, 40 e 60 ng/mL de Δ9-THC são preparadas, respectivamente, e dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno) preparado com polipropileno, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 0,12 ml da amostra é extraída e gotejada em uma tira de reagente de detecção, e após 10 minutos, são realizadas a leitura e fotografias contrastivas. Leitura de cartão colorido de ouro coloidal de urina: quanto maior a leitura, menor o teor de drogas, uma leitura do padrão é julgada como maior do que G4, o que é negativo, e uma leitura menor ou igual a G4, que é positiva.
[139] Tabela 9. Influência de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC na urina.
[140] Pode-se observar pelos resultados experimentais acima que (Figuras (5A e 5B), quando a espuma de melamina é usada para amostragem das amostras de urina, uma leitura é 2 de acordo com um padrão positivo de 20 ng/ml, enquanto que uma leitura de 1 de acordo com uma condição de 30 ng/ml, que pode ser diretamente julgada como um resultado positivo (devido ao uso de um método de competição), caso contrário, quando o polipropileno tradicional é usado para absorção da amostra, de acordo com a condição de 30 ng/ml, uma leitura é 6, que ainda é julgada como sendo um resultado negativo. Isso mostra que o polipropileno possui um efeito de absorção maior em Δ9-THC quando usado para amostragem ou processamento da amostra. Na realidade, em uma amostra comprimida a partir de um bloco de absorção, um teor real de Δ9-THC é menor do que 30 ng/ml.
[141] Modalidade 6,2: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC e Δ9-THC-COOH em amostras de urina (método de competição) - Leitura fluorescente.
[142] Leitura por máquina de fluorescência de urina na concentração de Δ9- THC-COOH: quanto maior o valor de T, menor o teor de drogas nas amostras testadas.
[143] Tabela 10. Influência de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC na urina.
[144] Conclusão: quando uma solução negativa é testada, não existe diferença significativa entre os dados do grupo de controle e dados do grupo experimental; quando uma solução positiva é testada, os valores numéricos em um grupo de controle são significativamente maiores do que aqueles em um grupo experimental. O grau de absorção de Δ9-THC e Δ9-THC-COOH no grupo de controle é maior do que no grupo experimental, e a resistência de absorção dos blocos de esponja no grupo experimental é melhor do que nos blocos de esponja no grupo de controle.
[145] Modalidade 7,1: Influência nos resultados de detecção de placa de Δ9 - THC em amostras de sangue (método de competição) - cartão colorimétrico.
[146] Nesta modalidade, soluções de amostra (preparadas com sangue total) contendo 20 e 60 ng/mL de Δ9-THC são preparadas, respectivamente, e dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno) preparado com polipropileno, os tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e a capacidade de absorção de amostragem é de 2 ml. Após a extrusão física de uma amostra, 80 uL da amostra são extraídos e gotejados em uma tira de reagente de detecção, e após 10 minutos, são realizadas a leitura e fotografias contrastivas. Leitura de cartão colorido de ouro coloidal de urina: quanto maior a leitura, menor o teor de drogas, uma leitura do padrão é julgada como maior do que G4, o que é negativo, e uma leitura menor ou igual a G4, que é positiva.
[147] Tabela 11. Influência de absorção de diferentes materiais ao Δ9-THC no sangue.
[148] Pode-se observar pelos resultados experimentais acima que, quando a espuma de melamina é usada para amostragem das amostras de sangue, uma leitura é 6,5 de acordo com o padrão positivo de 60 ng/ml, contudo, quando o polipropileno tradicional é usado para absorção da amostra, uma leitura é de 8,5. Uma concentração das amostras de sangue amostradas pela espuma de melamina é maior do que a das amostras de sangue amostradas por polipropileno, de modo que a vantagem da baixa absorção usando a espuma de melamina como um dispositivo de amostragem na coleta das amostras de sangue ainda existe.
[149] Modalidade 8: Comparação das concentrações de HPLC de amostras de Δ9-THC antes e após a absorção por esponjas novas e velhas
[150] 1. Instrumentos e condições: Cromatografia líquida de alta eficiência ágil HPLC-1260; condições cromatográficas: Coluna cromatográfica de fase reversa C18, um comprimento de onda de 210 nm, fases móveis: água de alta pureza e acetonitrila, uma razão de acetonitrila de 70%; uma vazão de 1 ml/min, uma temperatura de coluna de 40°C, e um volume de injeção de 10 μl.
[151] 2. Soluções de padrão de 5 ng/ml, 25 ng/ml, 50 ng/ml, 75 ng/ml e 100 ng/ml de tetrahidrocanabinol são preparadas para criar uma curva de calibração das concentrações e áreas de pico: y=0,116x+0,002, r=0,99996, R2=0,99992.
[152] 3. São extraídos 500 μl de uma solução de padrão de 100 ng/ml de tetrahidrocanabinol Δ9-THC (um volume de injeção de 10 μl); dois blocos de esponja de materiais diferentes são usados para amostragem, o primeiro é um bloco de amostragem preparado com uma espuma de melamina, o segundo é um bloco de esponja (esponja de polipropileno) preparado com polipropileno, tamanhos dos blocos de esponja são iguais, e uma capacidade de absorção de amostragem é 500μl. Após a extrusão física das amostras, 10 μl de volumes de injeção são extraídos de cada um para obter cromatogramas 6A, 6B e 6C e Tabela 12.
[153] Pode-se observar nas Figuras 6A a 6C e Tabela 12 que o tempo de aparência do pico de três soluções diferentes é de 10 a 11 minutos. Para um padrão (sem absorção de tratamento por qualquer material), uma altura de pico é de 74,845 e sua área é de 868,6890, e um valor de concentração obtido por uma fórmula do padrão é 100,770. O motivo de ser superior a 100 ng/ml é um erro provocado em um processo de preparação. Após um padrão da mesma concentração ser absorvido pela espuma de melamina, uma amostra comprimida é injetada pela HPLC, uma altura de pico da mesma é de 60,500, uma área da mesma é de 706,3172, e um valor de concentração obtido pela fórmula do padrão é 81,935. Isso mostra que após a absorção pela espuma de melamina, 20% de uma substância alvo é perdida em relação a uma amostra não absorvida, ou seja, cerca de 20% de Δ9-THC é absorvido, mas 80% de Δ9-THC é retido na amostra comprimida. Para uma solução após absorção pela espuma de polipropileno, após injeção por HPLC, uma altura de pico da mesma é de 13,939, uma área da mesma é de 161,1271, e um valor de concentração obtido pela fórmula do padrão é 18,693. Isso mostra que, após a absorção pela esponja de polipropileno tradicional, cerca de 80% de Δ9-THC é absorvido, enquanto apenas cerca de 20% de Δ9-THC permanece na amostra comprimida. Portanto, é indicado que, pela absorção e compressão de uma amostra pela espuma de melamina recém-descoberta da presente invenção, a absorção de Δ9-THC possa ser significativamente reduzida e a sensibilidade de detecção possa ser melhorada. Deve-se observar que as alturas dos picos nas figuras do anexo são todas precisas em 2 casas decimais, enquanto na tabela são alturas de picos reais.
[154] Tabela 12. Respostas após diferentes materiais absorverem os padrões.
[155] Modalidade 9: Espectros de análise composicional de esponjas novas/antigas
[156] A fim de analisar as composições químicas específicas de uma espuma de melamina das composições químicas, conduzimos análise de infravermelho na espuma de melamina e, geralmente, utilizamos resina sintética de polipropileno. Os resultados específicos são mostrados a seguir, consultando os espectros infravermelhos nas Figuras 7 e 8 para detalhes. É possível observar nos espectros infravermelhos acima que os números de ondas da espuma de melamina e de uma esponja de polipropileno são de 1.000 a 1.500 cm-1, e suas absorção de infravermelho são muito diferentes, indicando que os grupos funcionais das principais composições das duas esponjas são diferentes. A comparação adicional de uma base de dados mostra que uma composição principal da espuma de melamina é resina de melamina ou melanina e resina fenólica, que é um produto da copolicondensação de melamina, fenol e formaldeído. Uma esponja na Figura 2 é resina sintética de polipropileno.
[157] Modalidade 10 Experimentos de controle na detecção de antígeno de coronavírus novo.
[158] Um método de preparação de um papel de teste de antígeno de coronavírus novo usado neste experimento é igual ao da Modalidade 1. Este experimento adota um método de sanduíche. Quando maior a leitura da linha T, maior o teor de proteína nas amostras. As espumas de melamina e esponjas convencionais do mesmo tamanho e formato são usadas, respectivamente, para coletar 50 ul de amostras de proteína N de coronavírus novo (padrões), em seguida, as amostras são adicionadas, respectivamente, a 500 ul de uma solução de quebra para extração durante 15 segundos, e 100 ul delas são gotejados em um papel cartão de teste de detecção, e após 10 minutos, é realizada a leitura.
[159] Tabela 13. Comparação dos resultados de detecção de antígenos de coronavírus novo.
[160] Conclusão: nas amostras com uma concentração de amostra de 450 pg/ml, uma leitura sem absorção de esponja é G7, uma leitura após absorção por espuma de melamina é G5, é uma leitura após absorção pela esponja antiga é G4. Pode-se observar que uma leitura de amostragem por espuma de melamina é mais próxima de uma leitura verdadeira.
[161] Todas as patentes e publicações mencionadas no relatório descritivo da presente invenção indicam que essas são técnicas divulgadas na técnica, e a presente invenção pode usar essas técnicas. Todas as patentes e publicações citadas neste documento também são listadas nas referências conforme cada publicação é especificamente e individualmente mencionada e citada. A presente invenção descrita neste documento pode ser implementada na ausência de qualquer elemento ou elementos, limitação ou limitações, sem limitação especificamente declarada neste documento. Por exemplo, os termos “compreendendo”, “consistindo essencialmente em...” e “consistindo em...” em cada modalidade neste documento podem ser substituídos por quaisquer dos dois termos restantes. O chamado “um” neste documento significa apenas “um”, e não exclui que apenas um é incluído, e também significa que dois ou mais são incluídos. Os termos e expressões usados neste documento são modos de descrição e não estão limitados a eles. Não há intenção neste documento de indicar que esses termos e interpretações descritos neste relatório descritivo excluem quaisquer características equivalentes, mas é possível descobrir que quaisquer alterações ou emendas adequadas podem ser realizadas dentro dos escopos da presente invenção e das reivindicações. Pode-se compreender que as modalidades descritas na presente invenção são todas modalidades e características preferenciais, e qualquer pessoa versada na técnica pode realizar algumas emendas e alterações de acordo com a essência da descrição da presente invenção, e essas emendas e alterações também são consideradas como pertencendo ao escopo da presente invenção e os escopos definidos pelas reivindicações pendentes e dependentes.
Claims (19)
1. Dispositivo para coletar uma amostra líquida, caracterizado pelo fato de que compreende um material de melamina para absorver a amostra.
2. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o material de melamina compreende um material poroso ou um material que absorve água poroso de melamina.
3. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o material poroso de melamina compreende uma espuma de melamina.
4. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato que a espuma de melamina é uma estrutura semelhante à película plana ou uma estrutura semelhante a um bloco tridimensional.
5. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a estrutura semelhante à película plana é uma membrana filtrante em qualquer um dentre círculo, quadrado, elipse e polígono; e a estrutura semelhante a bloco é um cilindro, um cuboide, um cubo, um cone ou qualquer outro corpo tridimensional.
6. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a amostra é qualquer uma dentre um fluido corporal, cabelo, músculos, tecidos e órgãos retirados de um organismo.
7. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o fluido corporal é qualquer um dentre saliva, urina, sangue, escarro, linfa, plasma, sêmen, aspirados pulmonares e um fluido cérebro-espinhal.
8. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que um determinante na amostra é qualquer um dentre drogas de moléculas pequenas do abuso de drogas, células, ácidos nucleicos, proteínas e aminoácidos.
9. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que as moléculas pequenas de abuso de drogas compreendem tetrahidrocanabinol (THC) ou suas substâncias semelhantes.
10. Dispositivo, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de tetrahidrocanabinol compreende Δ9-THC ou Δ9-THC-COOH.
11. Dispositivo para coletar uma amostra, caracterizado pelo fato de que compreende uma haste cuja extremidade está coberta com um preenchedor fibroso hidrofílico, de modo a absorver a amostra, em que o preenchedor fibroso é sequencialmente depositado na extremidade de um campo eletrostático de acordo com uma determinada direção para formar uma camada em formato de escova para cobrar a extremidade da haste, o preenchedor fibroso é perpendicular a uma superfície da haste, e as fibras são fibras de melamina.
12. Método para processar uma amostra, caracterizado pelo fato de que compreende colocar a amostra em contato com um material absorvente, em que o material absorvente compreende um material de melamina.
13. Método, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o material absorvente é permitido absorver a amostra.
14. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que após o material absorvente realizar absorção da amostra, uma parte da amostra é liberada do material absorvente.
15. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a parte da amostra é detectada ou ensaiada.
16. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a liberação compreende espremer o material absorvente ou eluir o material absorvente com um líquido de tratamento para dissolver a amostra.
17. Método, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que um analito em uma amostra liberada é detectado por um elemento de teste.
18. Método, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o elemento de teste compreende uma tira de teste imunológico para detecção.
19. Método, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o analito compreende THC ou suas substâncias semelhantes.
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