BG62330B1 - Method for lovastatin preparation - Google Patents
Method for lovastatin preparation Download PDFInfo
- Publication number
- BG62330B1 BG62330B1 BG99577A BG9957795A BG62330B1 BG 62330 B1 BG62330 B1 BG 62330B1 BG 99577 A BG99577 A BG 99577A BG 9957795 A BG9957795 A BG 9957795A BG 62330 B1 BG62330 B1 BG 62330B1
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- lovastatin
- water
- washed
- extraction
- extract
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pyrane Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Област на техникатаTechnical field
Изобретението се отнася до метод за получаване на ловастатин, който е вторичен метаболит с противогьбни свойства, а също така е инхибитор на З-хидрокси-З-метилглутарилкоензим A (HMG-CoA reductase). Този ензим катализира превръщането на хидроксиметилглутарата до мевалонат, с което на ранен стадий се ограничава скоростта на биосинтеза на холестерол в организма. Методът е приложим в медицината за третиране на атеросклероза и първична хиперхолестеролемия, а също така и като изходен продукт за получаване на гама полусинтетични производни с подобрени лечебни свойства.The invention relates to a method for the preparation of lovastatin, which is a secondary metabolite with antifungal properties and is also an inhibitor of 3-hydroxy-3-methylglutarylkoenzyme A (HMG-CoA reductase). This enzyme catalyzes the conversion of hydroxymethylglutarate to mevalonate, which at an early stage limits the rate of cholesterol biosynthesis in the body. The method is applicable in medicine for the treatment of atherosclerosis and primary hypercholesterolemia, as well as as a starting material for the preparation of a range of semi-synthetic derivatives with improved therapeutic properties.
Предшестващо състояние на техникатаBACKGROUND OF THE INVENTION
Известно е, че ловастатинът (2-метилбутанолова киселина-1,2,3,7,8,8а-хексахидро3,7-диметил-8-/2-тетрахидро-4-хидрокси-6-оксо-2Н-пиран-ил/етил-1 -нафталенил естер/2бета,6-алфа-диметил-8-/2-метил-1-оксобутокси/лактон с формулаLovastatin (2-methylbutanoic acid-1,2,3,7,8,8a-hexahydro3,7-dimethyl-8- (2-tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-yl) is known ethyl-1-naphthalenyl ester / 2beta, 6-alpha-dimethyl-8- (2-methyl-1-oxobutoxy) lactone of the formula
е биологичен продукт, синтезиран от различни щамове гъби, като напр. Aspergillus terreus ATCC - 20541.is a biological product synthesized by different strains of mushrooms, such as. Aspergillus terreus ATCC - 20541.
Известни са методи за получаване на ловастатин /1,2/, при които той се изолира от ферментационната течност, чрез подкисляването й до pH 3-6 и екстракция с етилацетат. Етилацетатният екстракт на ловастатин се промива с вода. От екстракта ловастатина се екстрахира с Ο,ΙΝ водна натриева основа. Алкалният воден екстракт се подкислява до pH 5 и се екстрахира със смес от хексан/етилацетат. След отделяне на органичния слой, последния се обезводнява и ловастатинът се утаява, като амониева сол. Тя се суспендира в толуол и се превръща в лактон при нагряване до 106°С в продължение на 2,5 h. Полученият лактон кристализира от концентрирания толуол и се прекристализира от етанол.Methods for the preparation of lovastatin (1,2) are known in which it is isolated from the fermentation liquid by acidification to pH 3-6 and extraction with ethyl acetate. The lovastatin ethyl acetate extract was washed with water. Lovastatin is extracted with Ο, Ο aqueous sodium hydroxide. The alkaline aqueous extract was acidified to pH 5 and extracted with a hexane / ethyl acetate mixture. After separation of the organic layer, the latter is dehydrated and lovastatin is precipitated as ammonium salt. It was suspended in toluene and converted to lactone when heated to 106 ° C for 2.5 h. The lactone obtained was crystallized from concentrated toluene and recrystallized from ethanol.
Гореизброените известни методи, притежават редица недостатъци, по-важните от които са:The above known methods have a number of disadvantages, the most important of which are:
- използване на смеси от органични разтворители, които трудно се разделят при регенерация освен чрез високоефективни ректификационни процеси;- the use of mixtures of organic solvents which are difficult to separate during regeneration except by highly efficient rectification processes;
- за по-пълно екстрахиране на активното вещество от ферментационната течност се прилага разделно екстрахиране на филтрата с етилацетат, а мицелия с нисши алкохоли (метанол) и така органичните разтворители се смесват отново за концентриране под вакуум.- separate extraction of the filtrate with ethyl acetate is performed to extract the active substance from the fermentation fluid more fully, and the mycelium with lower alcohols (methanol) is mixed again to concentrate in vacuo.
Известният метод използва за сепариране от органичните примеси и пигментите изолиране на ловастатин-киселина като амониева сол. Тази амониева сол се получава чрез утаяване с газ-амоняк в ацетон. По метода освен техническите сложности с използването на газ-амоняк е и взривоопасен поради голямото количество ацетон; освен това количеството на амоняка е в голям излишък и може да доведе до частично деструктиране.The known method uses isolation of lovastatin acid as an ammonium salt to separate from organic impurities and pigments. This ammonium salt is obtained by precipitation with ammonia gas in acetone. In addition to the technical complexity of the process, the use of ammonia gas is also explosive due to the large amount of acetone; moreover, ammonia is high in excess and may lead to partial destruction.
Недостатъци са сравнително ниските добиви (30-60%) и ниската чистота - 95-97% (когато не е проведено двукратно хроматографско пречистване).The disadvantages are the relatively low yields (30-60%) and the low purity - 95-97% (when no two-chromatographic purification was performed).
Екстракционното пречистване, обикновено, включва реекстракция на продукта с вод2 на натриева основа, при което обаче се образуват големи по количество и устойчиви емулсии. Това силно забавя процесите дори при използването на високоефективни сепаратори, води до загуба на разтворител, а заедно с него и на продукт.Extraction purification usually involves the re-extraction of the product with water2 on a sodium basis, however large amounts of persistent emulsions are formed. This greatly slows down the process even with the use of high-efficiency separators, resulting in the loss of solvent and with it a product.
Техническа същност на изобретениетоSUMMARY OF THE INVENTION
Методът за получаване на ловастатин, съгласно изобретението се състои в следното:The method for preparing lovastatin according to the invention consists in the following:
Културалната течност след завършване на ферментационния процес на щам-продуцента се алкализира до pH 9,5-12. Прибавя се флокулант и се филтрува, след което мицелият се суспендира във вода, филтрува и промива. Ловастатинът от обединените филтрати се извлича и пречиства екстракционно с несмесващи се с вода органични разтворители, като напр. бутилацетат в присъствие на деемулгатор. Провежда се реекстракция с воден разтвор на алкален агент, напр. натриева основа. Водният алкален екстракт се подкислява до pH 4,0-5,5.The culture fluid, after completion of the fermentation process of the producer strain, was made alkaline to pH 9.5-12. The flocculant was added and filtered, after which the mycelium was suspended in water, filtered and washed. Lovastatin from the combined filtrates is extracted and purified by extraction with water-immiscible organic solvents, such as e.g. butyl acetate in the presence of a demulsifier. Re-extraction with an aqueous solution of an alkaline agent, e.g. sodium hydroxide. The aqueous alkaline extract was acidified to pH 4.0-5.5.
Следва нова екстракция със споменатия органичен разтворител, промива се с деминерализирана вода. Промитият екстракт се подлага на пречистващо-концентрираща обработка, с последваща термична или каталитична лактонизация. Екстрактът, съдържащ ловастатин-лактон се концентрира, кристализира, кристалите се филтруват, промиват и сушат.Following is a new extraction with the aforementioned organic solvent, washed with demineralized water. The washed extract is subjected to a purification-concentrating treatment, followed by thermal or catalytic lactonization. The extract containing lovastatin-lactone was concentrated, crystallized, the crystals were filtered, washed and dried.
Ферментационната течност в края на процеса съдържа смес от ловастатин-лактон и ловастатин-киселина. За максималното преминаване на двете форми на ловастатина във водната фаза, като сол на ловастатин-киселината се прилага алкализиране на ферментационната течност с алкализиращ агент - NaOH в границите на pH от 9,5 до 12 - (за предпочитане е pH 10,5). След достигане на необходимото pH се прибавя разтвор на флокулант и сместа се разбърква и филтрува. Като флокулиращо средство се използват органически синтетични високомолекулярни съединения кополимери на акриловата киселина с акриламид от йоногенен или нейоногенен тип. С прилагането на флокулант и промиване на мицелия при алкално pH се постига добив на филтрация минимум 95% като същевременно се намалява и времетраенето на процеса. Третирането с флокулант води и до частично отст раняване на пигментите, което е допълнителен положителен ефект. Оптимални резултати се получават при използването на катионен тип коагулант.The fermentation fluid at the end of the process contains a mixture of lovastatin-lactone and lovastatin acid. For the maximum transfer of the two forms of lovastatin into the aqueous phase, alkalisation of the fermentation liquid with an alkalizing agent NaOH is applied as a salt of lovastatin acid within the pH range of 9.5 to 12 - (preferably pH 10.5). After reaching the required pH, a solution of flocculant was added and the mixture was stirred and filtered. Organic synthetic macromolecular compounds of copolymers of acrylic acid with ionic or non-ionic type acrylamide are used as the flocculating agent. By applying a flocculant and washing the mycelium at alkaline pH, a filtration yield of at least 95% is achieved while also reducing the duration of the process. Flocculant treatment also results in the partial removal of pigments, which is an additional positive effect. Optimal results are obtained with the use of a cationic type coagulant.
Екстрахирането на ловастатин-киселина се извършва при pH 2-6, за предпочитане 4,05,5. При прибавянето на подходящи деемулгатори, се постига оптималното съотношение филтрирана ферментационна течност-органичен разтворител - напр. от 6:1 до 15:1 за предпочитане 10:1. Органичният разтворител може да бъде етилацетат, бутилацетат, метилизобутилкетон и др.п., за предпочитане бутилацетат.The extraction of lovastatin acid is carried out at pH 2-6, preferably 4,05,5. With the addition of suitable demulsifiers, the optimum ratio of filtered fermentation liquid to organic solvent is achieved, e.g. from 6: 1 to 15: 1, preferably 10: 1. The organic solvent may be ethyl acetate, butyl acetate, methyl isobutyl ketone and the like, preferably butyl acetate.
Полученият бутилацетатен екстракт се реекстрахира с водна натриева основа. В присъствие на деемулгатори се избягват емулсиите и е възможно използване на благоприятно съотношение 1: (2-5) на двете фази, което позволява концентриране на продукта и елиминиране на по-голямата част от баластните вещества, които остават в органичната фаза. При използването на екстрактор-сепаратор при меки условия (стайна температура) за кратко време (3-4 h) първоначалният обем се намалява около 40 пъти (респективно концентрацията на активното вещество се увеличава 40 пъти) и основното количество примеси се отстранява без да се образуват нови такива в резултат на деградационни процеси.The resulting butyl acetate extract was re-extracted with aqueous sodium hydroxide. In the presence of demulsifiers, emulsions are avoided and a favorable 1: (2-5) ratio of the two phases is possible, which allows the product to be concentrated and to eliminate most of the ballast remaining in the organic phase. When using an extractor-separator under mild conditions (room temperature) for a short time (3-4 h) the initial volume is reduced about 40 times (respectively, the concentration of the active substance is increased 40 times) and the basic amount of impurities is removed without forming new ones resulting from degradation processes.
Полученият водно-алкален реекстракт се подкислява до pH 4,0-5,5 и отново се екстрахира с бутилацетат в съотношение 1:(5-10). Полученият втори бутилацетатен екстракт се промива с деминерализирана вода и се подлага на пречистващо-концентрираща обработка.The resulting aqueous-alkaline re-extract was acidified to pH 4.0-5.5 and extracted again with 1: (5-10) butyl acetate. The resulting second butyl acetate extract was washed with demineralized water and subjected to a purification-concentrating treatment.
Тази обработка може да се осъществи по два начина.This processing can be done in two ways.
При единия от тях вторият бутилацетатен екстракт се концентрира под вакуум при прав хладник и температура 50-75°С, при което се обезводнява на принципа на азеотропна дестилация като се отстранява около 30% от обема. В така обезводнения бутилацетатен екстракт ловостатин киселината се лактонизира по термичен метод като се нагрява до температура 120°С за 2 h при обратен хладник. Степента на лактонизация се следи с ВЕТХ-анализ. След завършване на процеса лактонизация - превръщане над 95 % - бутилацетатния екстракт се охлажда до температура около 50°С и се промива двукратно с равен обем 1%-ен разтвор на натриева основа. След това се промива до pH 6,0 с деминерализирана вода. Промитият бутилацетатен концентрат се дестилира допълнително под вакуум при температура около 5070°С до съдържание на лактон 12-15%, което се следи с количествен ВЕТХ анализ. Провежда се обезцветяване с активен въглен. Обезцветеният концентрат се охлажда до температура 0°С-минус 5°С при разбъркване в продължение на едно денонощие. Кристализиралият ловастатин-лактон се центрофугира, промива се с охладен безводен бутилацетат и се суши под вакуум.In one of them, the second butyl acetate extract was concentrated in vacuo under a direct refrigerator and at a temperature of 50-75 ° C, whereby it was dehydrated on the principle of azeotropic distillation, removing about 30% of the volume. In the dehydrated butyl acetate extract, lovostatin acid is lactonized by thermal method, heated to 120 ° C for 2 h at reflux. The degree of lactonization was monitored by HPLC analysis. After completion of the lactonization process - conversion over 95% - the butyl acetate extract was cooled to a temperature of about 50 ° C and washed twice with an equal volume of 1% sodium hydroxide solution. It is then washed to pH 6.0 with demineralized water. The washed butyl acetate concentrate was further distilled in vacuo at a temperature of about 5070 ° C to a lactone content of 12-15%, which was monitored by quantitative HPLC analysis. Activated charcoal discoloration is carried out. The discolored concentrate was cooled to 0 ° C-minus 5 ° C with stirring overnight. The crystallized lovastatin-lactone was centrifuged, washed with cooled anhydrous butyl acetate and dried in vacuo.
При другия начин на пречистващо-концентриращата обработка обезводняването на втория бутилацетатен екстракт се извършва при замразяване до температура минус 15°С-минус 20°С в продължение на 5-8 h. Кристализиралият лед се отстранява чрез филтруване. Към концентрата, след обезцветяване с активен въглен се добавя амониев ацетат с 10% излишък от стехиометричното количество. При постоянно разбъркване сместа се охлажда до минус 10°С за 4-5 h. Суспензията се центрофугира. Амониевата сол се промива с охладен ацетон. Получената бяла, кристална амониева сол се суши. Добивът е 75% по съдържанието на ловастатин във ферментационната течност и чистотата над 95%. Лактонизирането се извършва по описаните в литературата методи.In the other method of purification-concentrating treatment, the dehydration of the second butyl acetate extract is carried out by freezing to a temperature of minus 15 ° C-minus 20 ° C for 5-8 hours. The crystallized ice is removed by filtration. Ammonium acetate was added to the concentrate after decolourisation with charcoal with a 10% excess stoichiometric amount. With constant stirring, the mixture was cooled to minus 10 ° C for 4-5 h. The suspension was centrifuged. The ammonium salt was washed with cooled acetone. The resulting white, crystalline ammonium salt was dried. The yield is 75% by the content of lovastatin in the fermentation liquid and the purity is above 95%. Lactonization is performed according to the methods described in the literature.
Полученият по един от двата начина на пречистващо-концентрираща обработка ловастатин лактон се прекристализира из етилацетат.The lovastatin lactone obtained by one of the two methods of purification-concentrating treatment was recrystallized from ethyl acetate.
Предимствата на изобретението са следните:The advantages of the invention are the following:
- Постига се максимално извличане на активното вещество във водна среда при алкализиране до оптимално pH с добиви над 95% спрямо съдържанието в културалната течност.- Maximum recovery of the active substance in aqueous media is achieved by alkalizing to an optimum pH in yields exceeding 95% relative to the content in the culture fluid.
- С прибавянето на флокуланти се постига повишаване обема на филтрата, респ. извличането на ловастатин киселината, намаляване времетраенето на процеса и облекчаване пречистването в следващите фази.- With the addition of flocculants, the filtrate volume or resp. extraction of lovastatin acid, reducing the duration of the process and facilitating purification in subsequent phases.
- Екстрахирането на ловастатин от филтрата се извършва без да се използват смеси от органични разтворители в присъствие на деемулгатори, което резултира в намаляване на емулсиите, респ. увеличаване обема на фазата, съдържаща активното вещество и намаляване на загубите.- The extraction of lovastatin from the filtrate is carried out without the use of mixtures of organic solvents in the presence of demulsifiers, resulting in the reduction of the emulsions, respectively. increasing the volume of the phase containing the active substance and reducing the losses.
- Предлагат се два начина на пречист ващо-концентрираща обработка: при единия от тях се използва само един вид органичен разтворител, (а не смеси от такива) като се прилага обезводняването му чрез азеотропна дестилация с последваща термична лактонизация; при другия се прилага получаването на амониева сол при значително по-меки условия (с амониев ацетат) и се избягва използването на амоняк-газ, което освен техническите усложнения води до странични смолистообразни разградни продукти.- Two methods of purifying-concentrating treatment are offered: one of them uses only one type of organic solvent (not mixtures thereof) by applying dehydration by azeotropic distillation followed by thermal lactonization; the other uses the production of ammonium salt under significantly milder conditions (with ammonium acetate) and avoids the use of ammonia gas, which, in addition to the technical complications, results in by-products of resinous degradation products.
И при двата начина на пречистващоконцентриращата обработка се постига висок добив на ловастатин с високо качество съгласно USP 23: чистота над 98,5%, ниско съдържание на сродни органични примеси като се избягва сложното хроматографско пречистване.A high yield of lovastatin of high quality according to USP 23 is achieved in both methods of purification concentrating treatment: purity above 98.5%, low content of related organic impurities, avoiding complex chromatographic purification.
Примери за изпълнение на изобретениетоExamples of carrying out the invention
Пример 1:Example 1:
Филтрация.Filtration.
т3 културална течност на ловастатин се алкализират с 20% NaOH при разбъркване до pH 10,5-11. В продължение на 4 h периодично се подава NaOH, така че pH да не пада под 10. След стабилизиране на pH в границите (9,5-10,5) се прибавя 0,1% воден разтвор на Праестол 650 ВС в количество 100 g/m3. Разбърква се 30 min, след което се филтрува на барабанен вакуум филтър. С промивни води (pH 10,5) обема на филтрата се довежда до 70 т3. Добивът на филтрация е над 95%.m 3 lovastatin culture fluid is basified with 20% NaOH with stirring to pH 10.5-11. NaOH was added periodically for 4 h so that the pH did not fall below 10. After stabilizing the pH in the range (9.5-10.5), 0.1% aqueous solution of Praestol 650 BC in an amount of 100 g was added. / m 3 . The mixture is stirred for 30 min and then filtered on a drum vacuum filter. With wash water (pH 10.5) the volume of the filtrate is adjusted to 70 m 3 . The filtration yield is over 95%.
Екстракция.Extraction.
Филтратът се довежда до pH 4,0-5,5 с прибавяне на киселина - сярна или фосфорна, при разбъркване. Към бутилацетат, приготвен за екстракция се прибавя при разбъркване 1,2 kg Армогард 5356 предварително разтворен в 10-15 1 бутилацетат. Екстракцията се извършва с екстрактор-сепаратори при съотношение 10:1. В отпадните води остават не повече от 1-4% ловастатин или добивът на екстракция е 96-98%. Бутилацетатният екстракт се промива с деминерализирана вода.The filtrate was adjusted to pH 4.0-5.5 with the addition of acid - sulfuric or phosphoric, with stirring. 1.2 kg of Armogard 5356 pre-dissolved in 10-15 1 butyl acetate was added to the butyl acetate prepared for extraction with stirring. The extraction is performed with extractor separators at a ratio of 10: 1. No more than 1-4% lovastatin is left in the wastewater or the extraction yield is 96-98%. The butyl acetate extract was washed with demineralized water.
Реекстракция.Re-extraction.
Към 7 т3 промит бутилацетатен екстракт се прибавя 1,5 kg Armogard 5411 разтворен в 4-5 1 бутилацетат и реекстракцията се извършва в съотношение 3:1. Получава се 2,24To the 7m 3 washed butyl acetate extract was added 1.5 kg of Armogard 5411 dissolved in 4-5 1 butyl acetate and the re-extraction was carried out at a ratio of 3: 1. Obtained 2.24
2,5 m3 воден реекстракт с pH 9-10. Към водния реекстракт се прибавят 20-25% бутилацетат. При разбъркване се прибавя минерална киселина за довеждане на pH до 4,0-5,5 и сместа се разбърква 20 min, след което отстоява 4-5 h. Долният воден слой се отстранява. Бутилацетатният екстракт се промива с равен обем деминерализирана вода. При температура 50-70°С и вакуум се дестилира около 30% от бутилацетата. След обезводняването сухия бутилацетатен концентрат се нагрява до 120°С за 2 h при прав хладник. Степента на лактонизация се следи чрез ВЕТХ. След завършване на процеса лактонизация (над 95% превръщане) бутилацетатния концентрат се охлажда до температура около 50°С и се промива двукратно с равен обем 1 % -ен воден разтвор на натриева основа. След това се промива с деминерализирана вода до pH 6,0.2.5 m 3 aqueous reextract with pH 9-10. 20-25% butyl acetate was added to the aqueous reextract. With stirring, a mineral acid was added to bring the pH to 4.0-5.5 and the mixture was stirred for 20 min, then stood for 4-5 h. The lower aqueous layer is removed. The butyl acetate extract was washed with an equal volume of demineralized water. At a temperature of 50-70 ° C and vacuum, about 30% of butyl acetate is distilled. After dehydration, the dry butyl acetate concentrate was heated to 120 ° C for 2 h in a direct refrigerator. The degree of lactonization was monitored by HPLC. After completion of the lactonization process (over 95% conversion), the butyl acetate concentrate was cooled to a temperature of about 50 ° C and washed twice with an equal volume of 1% aqueous sodium hydroxide solution. It is then washed with demineralized water to pH 6.0.
Промитият бутилацетатен концентрат се дестилира под вакуум при температура 60-70°С до съдържание на ловастатин 12-15%, обезцветява се на горещо с 2% въглен и се филтрува. Концентратът се охлажда при разбъркване до температура 0°С-минус 5°С в продължение на 24 h. Кристализиралият ловастатин лактон се центрофугира на кошова триколонна центрофуга, промива се със сух охладен бутилацетат и се суши под вакуум до съдържание на влага и летливи вещества не повече от 1 %.The washed butyl acetate concentrate was distilled in vacuo at 60-70 ° C to lovastatin content of 12-15%, decolorized hot with 2% charcoal and filtered. The concentrate was cooled with stirring to 0 ° C-minus 5 ° C for 24 hours. The crystallized lovastatin lactone was centrifuged on a three-column centrifuge basket, washed with dry cooled butyl acetate and dried in vacuo to a moisture content of not more than 1%.
Прекристализация.Recrystallization.
Изсушеният ловастатин лактон се разтваря в 10-кратно количество етилацетат при нагряване на обратен хладник при температура 60°С. Прибавя се 2% активен въглен, разбърква се 30 min и се филтрува на горещо през рамкова филтър преса или барабанен филтър. Обезцветеният етилацетатен разтвор се охлажда при разбъркване при минус 20°С в продължение на 24-48 h. Центрофугира се и се промива с леден етилацетат и след това с хексан. Суши се под вакуум при температура 55-60°С до съдържание на влага и летливи вещества не повече от 1 %.Dried lovastatin lactone was dissolved in 10 times ethyl acetate under reflux at 60 ° C. 2% activated charcoal was added, stirred for 30 min and filtered hot through a frame filter or a drum filter. The colorless ethyl acetate solution was cooled with stirring at minus 20 ° C for 24-48 hours. It was centrifuged and washed with ice ethyl acetate and then with hexane. Dry under vacuum at 55-60 ° C to a moisture content of up to 1% by moisture.
Добив над 70% спрямо съдържанието на ловастатин във ферментационната течност. Качество по USP 23: съдържание на ловастатин 98,5%; специфична ротация - 332°; примеси от сродни вещества - индивидуални примеси не повече от 0,5%, тотални примеси - не повече от 1,5%.Yield greater than 70% by content of lovastatin in the fermentation liquid. USP 23 quality: lovastatin content 98.5%; specific rotation - 332 °; contaminants - individual impurities not more than 0.5%, total impurities - not more than 1.5%.
Пример 2:Example 2:
Филтрация.Filtration.
ги3 ферментационна течност се обработва както е описано в пример 1 до получаване на воден алкален реекстракт.them 3 fermentation liquid was processed as described in Example 1 to obtain an aqueous alkaline reekstrakt.
Втора бутилацетатна екстракция.Second butyl acetate extraction.
Към водния реекстракт 2,5 т3 се прибавят 600 1 бутилацетат. При разбъркване сместа се подкислява до pH 4,5 с минерална киселина. След отслояване водния слой се изхвърля. Бутилацетатният екстракт се промива двукратно с деминерализирана вода. Промитият екстракт се замразява до минус 15°С минус 20°С в продължение на 4-5 h. Чрез филтрация водата се отстранява като лед.To the aqueous reextract of 2.5 m 3 was added 600 l of butyl acetate. With stirring, the mixture was acidified to pH 4.5 with mineral acid. After exfoliation, the aqueous layer is discarded. The butyl acetate extract was washed twice with demineralized water. The washed extract was frozen to minus 15 ° C minus 20 ° C for 4-5 h. Filtration removes water as ice.
Получаване на амониева сол.Preparation of ammonium salt.
Към обезводнения концентрат при разбъркване се добавя амониев ацетат с разчет 10% над стехиометричното количество. Сместа се разбърква 2 h при температура 0-5°С, при което кристализира ловастатин амониева сол. Кристалите от амониевата сол на ловастатина се центрофугират, промиват с охладен ацетон и сушат.Ammonium acetate was added to the dehydrated concentrate with stirring at a rate of 10% above the stoichiometric amount. The mixture was stirred for 2 h at 0-5 ° C, whereby lovastatin ammonium salt crystallized. The ammonium salt crystals of lovastatin are centrifuged, washed with cooled acetone and dried.
Лактонизация.Lactonization.
Амониевата сол на ловастатин се суспендира в сух бутилацетат, като 5%-на суспензия. Сместа се нагрява до 120°С за 2 h на обратен хладник, след което се дестилира част от бутилацетата на прав хладник така, че крайната концентрация на ловастатин да бъде 12-15%. При 50-60°С се прибавят 2% по обема активен въглен, разбърква се 30 min и въгленът се отстранява чрез филтруване. Концентратът кристализира при охлаждане до температура минус 15°С. Получените кристали ловастатин лактон се филтруват, промиват и се прекристализират както е описано в пример 1.The lovastatin ammonium salt is suspended in dry butyl acetate as a 5% suspension. The mixture was heated to 120 ° C for 2 h at reflux, after which part of the butyl acetate was distilled off to a reflux temperature so that the final lovastatin concentration was 12-15%. At 50-60 ° C, 2% by volume of activated carbon is added, stirred for 30 minutes and the carbon is removed by filtration. The concentrate crystallizes on cooling to minus 15 ° C. The resulting lovastatin lactone crystals were filtered, washed and recrystallized as described in Example 1.
Получава се ловастатин, отговарящ на USP - XXIII.Lovastatin corresponding to USP-XXIII is obtained.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG99577A BG62330B1 (en) | 1995-04-14 | 1995-04-14 | Method for lovastatin preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG99577A BG62330B1 (en) | 1995-04-14 | 1995-04-14 | Method for lovastatin preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BG99577A BG99577A (en) | 1996-12-31 |
| BG62330B1 true BG62330B1 (en) | 1999-08-31 |
Family
ID=3926096
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BG99577A BG62330B1 (en) | 1995-04-14 | 1995-04-14 | Method for lovastatin preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| BG (1) | BG62330B1 (en) |
-
1995
- 1995-04-14 BG BG99577A patent/BG62330B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BG99577A (en) | 1996-12-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2265665C2 (en) | Method for purifying fermentation broth | |
| RU2114912C1 (en) | Method of isolation of lovastatin | |
| WO1994029292A9 (en) | Process for the isolation of lovastatin | |
| AU2001236543A1 (en) | Method of purifying a fermentation broth | |
| US6268186B1 (en) | HMG-CoA reductase inhibitor preparation process | |
| US7052886B2 (en) | Process for the isolation of lovastatin | |
| JP3913329B2 (en) | Optical resolution method of (±) -chromancarboxylic acid | |
| BG62330B1 (en) | Method for lovastatin preparation | |
| AT401060B (en) | METHOD FOR INSULATING AND CLEANING MEVINOLIN | |
| RU2123347C1 (en) | Method of lappaconitine hydrobromide preparing | |
| SK51399A3 (en) | Method for the isolation of lovastatin from depleted fermentation culture medium | |
| RU2158598C2 (en) | Method of preparing dihydroquercetin | |
| CN114133331A (en) | Method for recovering and obtaining high-purity pravastatin ester | |
| US4354971A (en) | Non-extractive penicillin V recovery process | |
| SU1395659A1 (en) | Method of processing rose cell juice | |
| US3467680A (en) | Method of isolation of crude griseofulvin | |
| BG99153A (en) | Method for the isolation and purification of lovastatine | |
| SU908356A1 (en) | Method of producing arachidonic acid | |
| CN102993145A (en) | Lovastatin extraction and purification method | |
| CN117820119A (en) | High-content pravastatin ester crystal and preparation method thereof | |
| RU2203953C2 (en) | Method of isolation and purification of budesonide | |
| RU1223457C (en) | Method of obtaining luteolin | |
| CS239441B1 (en) | Method of isolation and separation of alkaloids of agroklavine and elymoklavine | |
| WO2006046130A2 (en) | Process for the preparation of pravastatin | |
| GB694795A (en) | Improvements in or relating to a process of treating steep liquor and the product resulting therefrom |