BG111454A - Биологично активен състав - Google Patents

Abstract

Изобретението се отнася до биологично активен състав, който може да се използва както за лечение на хронични рани, така и за козметични цели. Препаратът решава проблема за ускоряване оздравителния процес на разнообразни по произход и състояние рани. Биологично активният състав съгласно изобретението съдържа относително ниска концентрация на стабилизирана в глицеринов гел алкална протеиназа, колагенов хидролизат, магнезиеви и цинкови йони, витамини, антисептици. Така създаденият препарат показва широк спектър на действие и редица положителни ефекти, което прави препарата многофункционален. Предложената комбинация от привидно противоположно действащи вещества позволява възстановяването на досега известните като незаздравяващи хронични рани при болни от диабет или страдащи от лошо кръвоснабдяване (артериална недостатъчност), като същевременно може да се използва и при разнообразни кожни дефекти като ужилване, възпаление от изгаряне или от насекоми, при различни хематоми от удар, при лишеи или струпеи от псориазис и др.

Description

БИОЛОГИЧНО АКТИВЕН СЪСТАВ

ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА

Изобретението се отнася до биологично активен състав на база протеолинични ензилли, който намира приложение в медицината, фармацевтичната промишленост и козметиката.

ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА

Усилията на редица изследователи са насочени към разработване на такива биологично активни състави, чието действие може да намали времето за заздравяване на рани с различен произход при прилагане на индивидуални терапевтични дози. Такива състави могат да съдействат за отстраняване на стари клетъчни остатъци и генериране на нова тъкан и следователно повишаване скоростта на зарастването на тъканите. При това хроничните рани показват различен профил на лечение от нормалните остри рани, тъй като те обикновено остават възпалени за продължителен период от време

Известни са препарати за лечение на рани като йодова тинктура, 3%ен разтвор на водороден прекис, разреден разтвор на калиев перманганат, йодасепт и други окислители. Те са предназначени да обеззаразят раната [1] и с това да се даде възможност на организма да изгради собствената си тъкан. Основният проблем при тези препарати е, че те имат ограничено приложение - окисляват (изгарят) не само микроорганизмите в раната, но и здрава тъкан на болния [1 ]. Приложението им може да доведе до зачервяване, подуване и са подходящи само при хора със съхранени защитни способности и добро кръвообращение, каквито обикновено са младите пациенти. Ежедневната практика показва, че споменатите дезинфекционни агенти при пациенти със затруднено кръвообращение или болни от диабет обикновено водят до некрози, удълбочаване и разширяване на раната и дори до апутация на крайник.

Известни са състави, чието приложение са ллетоли разчитащи на механичното изтегляне на ексудата от раната с помощта на силно набъбващ патентиран “мек силиконов материал с включен в превръзката антисептик”, [2]. Тези превръзки намаляват възможността за развитие на голям брой микроорганизми в раната, защото постоянно ги изтеглят извън областта на раната. Това разбира се подпомага лечението, но се оказва че и тези методи не водят до излекуване на хроничните незаздравяващи рани. Известно е използване на готови лепенки, съдържащи антисептици, например хлорхексидин ацетат [3], които се поставят директно върху раната. При тях обаче, контактът между лепенката и релефа на раната не винаги е добър, некротизиралата тъкан и фибриновите налепи почти не се повлияват и резултатите при хроничните незаздравяващи рани също не водят до затваряне на раната. Обикновено е трудно да бъде установена терапевтично ефективната доза за получаване на желания биологичен резултат. Най-новите тенденции при състави с биологично действие са такива, при които се използват ензими, съчетани с антисептици с широк спектър на действие [4,5]. Предложен е също състав , [6] според който гел от полиетиленов окис, съдържащ колагеназа от Clostridium histolyticum (вид микроорганизъм) и гентамицин осигурява безкръвно ензимно почистване на раната, стимулира развитието на здрави гранулации и не пречи на епителизационния процес. Ензимите разграждат некротизиралата тъкан, гнойта и фибриновите налепи и с това дават възможност на организма да започне да изгражда собствената си тъкан. Антисептикът осигурява стерилност в областта на раната. В повечето случаи това е достатъчно и раните заздравяват, но особено когато кръвообращението е слабо или болният е и диабетик, пациентът се нуждае и от допълнително подпомагане и ускоряване на заздравяването. Вече надделява мнението , че задоволителен резултат може да бъде постигнат само ако се намерят начини за стимулиране на пролиферацията на здравите клетки, гранулацията и ангиогенезата в областта на раната. В американски патент [7] много задълбочено е разработен въпросът за т.н.оздравяващи раната пептиди” (Wound Healing Peptides - WHPs). Те са получени при разграждане на нативен колаген с човешка или бактериална колагеназа.Тези пептиди притежават различни много положителни свойства - да ускоряват пролиферативните свойства на здравите епителни клетки (гранулация), засилват свойствата им да се ориентират и придвижват към определен химичен агент (хемотактични свойства) , ускоряват капилярната морфогенеза и др. Описани са и начини за изолирането им например чрез временна химична модификация с оглед специфичната им абсорбция върху специфични носители , елуиране в пречистен вид и превръщането им отново в нативна форма. С такава цел се прилагат препарати, които ускоряват гранулацията на раната като разграден с ензим денатуриран колаген [8].

Проблем има при бавно заздравяващи рани, при които много често се появява, т.н. фибринов налеп. Той представлява съсирек образуван от наличния в кръвта и лимфата фибриноген, който като дойде в контакт с активирани тромбоцити, каквито има в изобилие в такива рани, се превръща в неразтворима пространствена мрежа от фибрин. Това е свойствена тъкан на организма. По естествен път тя бавно се разгражда и се налага отново да бъде разградена с протеолитичен препарат, което в много случаи налага лечението да се провежда от лекар - тесен специалист в областта. Освен това бавният процес на разграждане на фибриновия налеп допълнително забавя и общия процес на заздравяване на раната.

За ускоряване на гранулацията на раната са предложени различни вещества, които не е известно да са намерили съответно приложение в практиката: панкреатични ензимни инхибитори [9], полипептиди и нуклеинови киселини, които стимулират жизнеността на кератиноцитите и ендотелните клетки [7], ко-ензима Q-10 [10] или съдържанието им остава тайна като например гел, съдържащ ензим- от антарктичен планктон с почти универсално действие [11].

/*

ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ

Изобретението представлява биологично активен препарат на база протеолитични ензими, характеризиращ се с това, че съдържа ензимно хидролизиран стерилизиран колаген 0.1-10 % , магнезиев окис 0.01-0,04%, цинков окис 0.01-0.04 %, Vit А, 3000 -60,000 IU; Vit D 1000-12,000 IU, Vit Е 0.2 - 50 мгр, хлорхексидин-диглюконат 0.05-0.2 % и 10 - 500 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа.

Биологично активният състав съгласно изобретението съдържа относително ниска концентрация на стабилизирана в глицеринов гел алкална протеиназа, колагенов хидролизат, магнезиеви и цинкови йони, витамините A, D, Е, и хибитан. Така създаденият препарат показва широк спектър на действие и редица положителни ефекти, което прави препарата многофункционален.

Изобретението решава поставения проблем за ускоряване оздравителния процес на разнообразни по произход и състояние рани, при това е налице проява на синергизъм - като необичайно в един и същ препарат са обединени противоположни по своето действие върху организма вещества. От една страна това са ензими, които селективно разграждат некротизиралите части от раната, и от друга такива вещества, които стимулират, подхранват изграждането на здравата тъкан в ранения участък - колагенов хидролизат, магнезиеви и цинкови йони, витамините A, D, Е, при това при осигурена стерилност [12]. Неочакваният ефект е, че неконвенционалните за такива случаи съставки не инхибират ензима, нито понижават неговата активност при съхранение, а довеждат до синергичен ефект по отношение на заздравяването на раните. Така става възможно с един препарат да се лекуват хроничните рани на диабетици, възрастни хора или такива с проблеми на кръвоснабдяването в областта на раната. Новата комбинация не променя стабилността на ензима при съхранение. В продължение на една година при температура под 17°С протеолитичната активност на новия препарат не се променя повече от 5%.

Съдейки по отличните резултати (бързо заздравяване на хронични рани), които се получават при прилагането на състава, съгласно изобретението, при лекуване на рани, съвсем неочаквано при ензимната хидролиза на денатурирания колаген с помощта на протеаза с много широка специфичност, се получават къси пептиди, които имат подобни действия на високомолекулните пептиди (Wound Healing Peptides - WHPs), описани в американския патент [7] , които там са получени при разграждане на нативен колаген с помощта на много специфичен ензим, каквито са колагеназите.

Предимствата на новия препарат са следните : Предложената комбинация от привидно противоположно действащи вещества позволява възстановяването на досега известните като незаздравяващи хронични рани W дори при болни от диабет или страдащи от лошо кръвоснабдяване (артериална недостатъчност), като същевременно може да се използва и при разнообразни кожни дефекти като ужилване, възпаление от изгаряне или от насекоми, при различни хематоми от удар, при лишеи или струпеи от псориазис и др.

Колагеновият хидролизат съдържа свободни аминокиселини и къси пептиди, които могат да се вградят в екстрацелуларния матрикс и с това да направят кожата по-здрава, плътна и устойчива, без да е необходимо тези аминокиселини да бъдат доставени по кръвен път, което ускорява заздравяването на раната и намалява вероятността от бръчки.

Препаратът доставя витамините A, D и Е, както и йоните на магнезия и цинка, всички участващи в метаболизма на колагена, което прави кожата по-жизнена.

Алкалната протеиназа разтваря често появяващия се в раната и свойствен за организма фибринов налеп и с това ускорява заздравяването ζ’* й.

Препаратът може да се използва и при леки възпаления, предизвикани от прекомерно слънчево облъчване, докосване до горещ предмет, ухапване от насекоми, прищипване, порязване, при поява на струпеи или лишеи и др.

Съставът на препарата осигурява хидрофилна среда при изграждането на новата тъкан, а това води до естествената среда на изграждане на тъканта. По този начин разработеният препарат ускорява зарастването, избягва се залепване на превръзката, и води до намаляване на вероятността от появата на цикатрикс.

Препаратът, прониквайки в дълбочина, показва неочакван ефект тъй като разтваря дори намиращи се там хематоми (синина от съсирена кръв), както и фибриновите налепи в капилярите, последните стават попроходими и кръвообръщението се подобрява (появява се контролирано зачервяване около раната, т.е. повишава се кръвообращението), което също ускорява зарастването на раната,

Препаратът поддържа средата стерилна и с това дава възможност дори на организми със слаби съпротивителни сили, в които почти всички процеси се извършват бавно все пак да изградят отново своя кожен дефект.

Използването на препарата съгласно изобретението позволява прилагането на автотрансплантация на кожа от същия пациент и така може да се постигне зарастването дори на обширни нелечими хронични рани.

Използването на препарата съгласно изобретението позволява заздравяване на рани дори при диабетици на инсулин, псориазис и възръстни хора със силно затруднено кръвообращение.

С един и същи препарат се извършва както почистването на раната, така и стимулирането на нейното заздравяване.

ПРИМЕРИ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ

Пример №1 за получаване на 5%-ен нишестен гел

В ЮОгр. водно-глицеринов разтвор (50:50 об/т) се поставят 5гр. депротеинизирано нишесте разбърква се добре и температурата на сместа постепенно се повишава до достигане на хомогененна маса. След охлаждане до стайна температура, на 100g гел се добавят 0,1 гр хидролизиран стерилизиран колаген, 0,01 гр. магнезиев окис, 0,01 гр. цинков окис, 3,000 IU Vit А, 1,000 III Vit D, 2 мгр Vit Е, 0,2g хлорхексидин-диглюконат и 10 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа. Следи се pH 5,0 Полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. и се съхранява при температура под 17°С. Пример №2 за получаване на 10%-ен нишестен гел

В ЮОгр. водно-глицеринов разтвор (50:60 об/т) се поставят Югр. депротеинизирано нишесте разбърква се добре и температурата на сместа постепенно се повишава до достигане на хомогененна маса. След охлаждане, на 100g гел се добавят 2 гр. хидролизиран стерилизиран колаген, 0,02 гр. магнезиев окис, 0,02 гр. цинков окис, 6,000 IU Vit А, 2,000 IU Vit D, 4 мгр Vit Е, 0,2g хлорхексидин-диглюконат и 50 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа. pH - 7,0 Полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл и се съхранява при температура под 17°С. Срок на годност две години.

Пример №3 за получаване на 15%-ен нишестен гел

В ЮОгр. водно-глицеринов разтвор (50:80 об/т) се поставят Югр. депротеинизирано нишесте разбърква се добре и температурата на сместа постепенно се повишава до достигане на хомогененна маса. След охлаждане, на 100g гел се добавят 5 гр. хидролизиран стерилизиран колаген, 0,04 гр. магнезиев окис, 0,04 гр. цинков окис, 10,000 IU Vil А, 4,000 IU Vit D, 6 мгр Vit Е, 0,2g хлорхексидин-диглюконат и 100 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа. pH 5,0 . Полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. и се съхранява при температура под17°С.

Пример №4 за получаване на 15%-ен нишестен гел

В 100гр. водно-глицеринов разтвор (10:90 об/т) се поставят Югр. депротеинизирано нишесте разбърква се добре и температурата на сместа постепенно се повишава до достигане на хомогененна маса. След охлаждане, на 100g гел се добавят 5 гр. хидролизиран стерилизиран колаген, 0,04 гр. магнезиев окис, 0,04 гр. цинков окис, 20,000 IU Vit А, 8,000 IU Vit D, 10 мгр Vit Е, 0,5g хлорхексидин-диглюконат и 200 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа. pH 9,0. Полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. и се съхранява при температура под 17°С.

Пример №5 за получаване на 18%-ен нишестен гел

В 100гр. глицерин се поставят 8-15гр. депротеинизирано нишесте разбърква се добре и температурата на сместа постепенно се повишава до достигане на хомогененна маса. След охлаждане, на 100g гел се добавят 10 гр. хидролизиран стерилизиран колаген, 0,04 гр. магнезиев окис, 0,04 гр. цинков окис, 60,000 IU Vit А, 12,000 IU Vit D, 50 мгр Vit Е, 0,5g хлорхексидиндиглюконат и 200 СТА протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа. pH - 7.0 . Полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. и се съхранява при температура под 17°С.

Пример №6 за получаване на 2.5%-ен полиакриламиден гел

Процедира се както е описано в пример 4, но вместо нишесте се прибавя 2,4 гр. акриламид, 0,07 гр. метиленбизакриламид, останалите компоненти както в пример 1 и накрая се добавят 0,04 гр. тетраметилетилендиамин и 0.05 гр. амониев персулфат. Оставя се на стайна температура да желира разбърква се и полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. Съхранява при температура под 17°С. Срок на годност две години.

Пример №7 за получаване на 2%-ен полиакриламиден гел

Процедира се както е описано в пример 4, но вместо нишесте се прибавя 1,9 гр. акриламид, 0,08 гр. метиленбизакриламид, останалите компоненти както в пример 1 и накрая се добавят 0,03 гр. тетраметилетилендиамин и 0.04 гр. аллониев персулфат. Оставя се на стайна температура да желира разбърква се и полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. Съхранява при температура под 17°С. Срок на годност две години.

Пример №8 за получаване на 1,5%-ен полиакриламиден гел

Процедира се както е описано в пример 3, но вместо нишесте се прибавя 1,4 гр. акриламид, 0,07 гр. метиленбизакриламид, останалите компоненти както в пример 1 и накрая се добавят 0,03 гр. тетраллетилетилендиамин и 0.04 гр. амониев персулфат. Оставя се на стайна температура да желира разбърква се и полученият препарат се опакова в тубички от по 10,50 или 100 мл. Съхранява при температура под 17°С. Срок на годност две години.

Пример №9 Изпитване ефективността от приложение на препарата .

Кожният дефект се почиства механично с памук напоен с риванолов или физиологичен разтвор или най-добре с преварен разтвор на натриев бикарбонат (1/2 чаена лъжичка сода за пиене в 200 мл вряща вода). Увреденият участък се покрива с 1 - 2 мм от препарата най-добре директно или такъв слой се нанася върху марля и тя се прилепва върху кожата на всеки 24 часа. При нормално здрави организми и когато раната е повърхностна, обикновено след 4 до 6 превръзки областта от увредена кожа е почистена от гной и фибринови налепи (белезникави области), и се появява розова или червена здрава тъкан на дъното на раната, а ръбовете на раната стават добре оформени, леко зачервени поради засиленото кръвообращение и започват да се прибират към центъра на раната. Понататък раната се обработва по същия начин до пълно заздравяване.

Поради това, че раната е почистена, че появаващият се фибринов налеп непрекъснато се отстранява, че процесът на възстановяване протича във влажна естествена среда, и че възпалителният процес приключва бързо, вероятността от поява на цикатрикс е малка дори и при обширни рани. Процесът на заздравяване на раната е значително по-бавен от този на Q почистване на раната и зависи много силно от степента на кръвоснабдаване на участъка, в който се намира раната.

Литература .Иван Ламбев , Антисептици и дезинфектанти, в кн. Фармакология и токсикология. Изд. Медицина и физкултура, София, 2006, 145-151 .

. Mepilex® Border Ag; Molnlycke Health Care- Mepilex® Border . Bactigras Dressings Datacard, Medicated Gauze Dressing-Bactigras .П.Недков, Д.Тоушек, В.Горанов, Й.Топалов,Ив.Ковачев, Т.Костова, П.Буров “ Ензимен препарат за почистване на некротизиралата тъкан и втечняване на некротизирали налепи на трудно заздравяващи рани и улкуси и метод за неговото получаване” А.св. No.43554 , per. No.47030 от 17.03.1980 г.

.П.Недков и Йовчо Топалов”Ензимен препарат за почистване на гнойни и некротизирали рани” Български патент №101454 / 07.12.1999г . RU2174389

С7. ЕР2244719 = US8357655 =US2011110922.

8. Peter Nedkov, lovcho Topalov, Dragomir Dardanov, Plamen Christov, Usage of enzymes in the therapy of chronic wounds.Preliminary results, (Прието за печат в Compt.rend.Acad.bulg.Sci. април, 201 Зг. )

9.WO2011038417

10. US2010062048

11. W02008070698

12. http://www.cosmeticsinfo.org/index.php (COSMETICSINFO.ORG-Your sours for safety information about ....Chlorhexidine Digluconate)

Claims (3)

1. Претенция 1. Биологично активен препарат на база протеолитични ензими, характеризираш, се с това, че се състои от гел, съдържащ хидролизиран стерилизиран колаген 0.1-10 %. , . магнезиев окис 0.01-0,04%, цинков окис 0.01-0,04 %., Vit А, 3000 -60,000 IU; Vit D 1000 - 12000 IU, Vit Е 0.2 - 50 мгр, хлорхексидин-диглюконат 0.05-0.2 % и протеолитични единици пречистена и стабилизирана алкална протеиназа 10-500 СТА.

   Претениция
2. 2 Биологично активен препарат съгласно претенция 1, харатеризиращ се с това, че гелът е на база депротеинизирано нишесте във водно-глицеринов

   Претениция
3. 3 Биологично активен препарат съгласно претенция 1, харатеризиращ се с това, че гелът е на база полиакриламид.