<Desc/Clms Page number 1>
EMI1.1
DEUTSCHE AKADEMIE DER WISSENSCHAFTEN ZU BERLIN
EMI1.2
"Procédé de préparation de 2',3'-didésoxy-3'-fluoro-pyrimiâine- nucléosides à activité cytostatique".
L'invention se rapporte à un procédé de préparation de 2',3'-didésoxy-3'-fluoro-pyrimidine-nucléosides à activité cytostatique, de formule générale I :
EMI1.3
<Desc/Clms Page number 2>
dans laquelle X 'représente 0, S ou NH, et R représente H, alcoyle, alcoyle substitué, halogène, OH ou SH.
Les 2',3'-didésoxy-nucléosides de cette composition n'ont pas encore été préparés jusqu'à présent.
Pour l'obtention de nucléosides avec constituant sucré contenant du fluor il y a en principe deux possibilités : a) on condense un dérivé fluoré de sucre réactif avec une base de pyrimidine ou purine [H.M. Kissman et M.J. Weiss,
J. amer. chem. Soc. 80, 5559 (1958) ; J.A. Wright et
N. F. Taylor, Carbohydr. Res. 6, 347 (1968)]. b) on introduit le fluor sur le nucléoside intact [P. Langen et G. Kowollik, Europ. J. Biochemistry 6, 334 (1968) :
J. F. Codington, I. L. Doerr et J.J. Fox, J. org. Chemistry
29, 555 (1964) ; R. J. Cushley, J. F. Codington et H.J. Fox,
Canadian J. Chem. 46, 1131 (1968)].
Par le procédé a) on a préparé jusqu'ici que quelques 5'-désoxy-5'-fluoro- et 3'-désoxy-3'-fluoro-nucléosi- des avec un groupe OH sur le C-2'.
Par le procédé b) on a préparé jusqu'ici : des 5'- désoxy-5'-fluoro-nucléosides par réaction de dérivés 5'-O- sulfonylés avec des fluorures, des 2'-désoxy-2'-fluoro- nucléosides par scission avec H2F2 de cyclonucléosideset'un dérivé 2'-désoxy-2'-fluoré- et resp. 3'-désoxy-3'-fluoré à partir d'un 2',3'-époxyde. di
Pour l'obtention de 2',3'-didésoxy-3'-fluoro-mucléo- sides, la méthode a) possède l'inconvénient qu'avec des 2- désoxy-sucres, à cause de l'influence directrice manquante d'un groupe 2-OH, on obtient toujours des mélanges de nucléo- sides anomères dont la séparation et la corrélation de confi- guration d'après l'expérience soulève des difficultés considé- rables.
Parmi les réactions citées selon le procédé b), aussi bien l'échange direct d'un groupe 0-sulfonyle contre un
<Desc/Clms Page number 3>
EMI3.1
fluorure, cause de la plus: :taiblè':'réà' t1Vité' sur.1'.tié.vdè carbone secondaire, que la scission du 2',3'-époxyde pour la préparation de 2',"didésoxY-"-fluoro-nuolésides, ne sont pas applicables. L'introduction de fluor sur le.nucléoside
EMI3.2
intact par scission du cyclonueléoside avec H2F2'ri'est appli- cable avec chance de succès jusqu'à présent que dans le cas de 02,2'-cyolo-dérivés de 28-hydroxypyrimîdïne-nuciéosides, étant donné que leur liaison N-glycosidique, contrairement à celle des 2'-désoxy-nuoléosides et de leurs dérivés, est très stable envers les acides.
L'invention, s'impose pour objectif do découvrir un
EMI3.3
procédé simple pour la préparation des 2',3'-àiàésoxy-3'- fluoro-pyrimidine-nucléosides inconnus à ce jour, de formule générale I, en traitant des pyrimidine-nucléosides appropriés, substitués sur l'oxygène du groupe 3'-OH, avec des agents de fluoration.
EMI3.4
A cet effet on chauffe des pyrimidine-02,3'-cylo- 2'-désoxy-nucléosides dans un solvant organique, de préférence un éther comme le dioxane ou le tétrahydrofurane, qui contient jusqu'à 20 %, de préférence 4 à 6 % d'acide fluorhydrique anhydre, pendant 15 minutes à plusieurs heures, de préférence 30 à 60 minutes, à 60-100 C, de préférence à 80-90 C. Ensuite on neutralise l'acide fluorhydrique en excès avec un composé approprié, par exemple CaC03; on sépare le CaF2 éventuellement formé, on élimine le solvant sous vide et l'on purifie le composé obtenu par cristallisation ou par chromatographie sur colonne.
Un autre mode d'exécution de l'invention est de
EMI3.5
chauffer un pyrimidine-02,3'-cyclo-2'-désoxy-nucléoside dans un solvant organique, de préférence un alcool mono- ou
EMI3.6
polyvalent comme le méthanols l'étharnol, le glycol ou le
<Desc/Clms Page number 4>
diéthylène glycol, pendant 1 à 10 heures, de préférence 1 à 2 heures, avec un fluorure minéral, de préférence KHF2 ou NH4F, à 130-230 Co Puis on élimine le solvant sous vide et l'on purifie le produit par chromatographie sur colonne, par exemple
EMI4.1
sur Celite.
Au lieu d'un pyrimidine-02,3'-cyclo-2'-désoxy- nucléoside on peut aussi conformément à l' invention mettre en jeu un pyrimidine-nucléoside sulfonylé sur le groupe 3'-OH, par exemple mésylé, qui, dans les conditions réactionnelles
EMI4.2
données, se transforme intermédiairement en un 02,3 -cyclo- 2'-désocy-nueléoaide. Le procédé conforme à l'invention ouvre une voie aisée vers les 2',3'-didésoxy-3'-fluoro-pyrimidine- nucléosides inconnue jusqu'ici. La réaction, en fonction des conditions, s'effectue avec de bons rendements.
Un avantage particulier de l'introduction de fluor dans le nucléoside intact réside dans le fait que la liaison glycooidique reste ainsi inchangée et que par conséquent la structure des produits de réaction à cet égard est inéquivoque, Les réactions con- formes à l'invention n'influencent pas les groupes protecteurs,
EMI4.3
conduisant atoccyclonucléosidas, sur les autres groupes OH du reste de sucre, qui sont éventuellement nécessaires dans la préparation des composés initiaux, par exemple des groupes trityle,
EMI4.4
Les 2',3'-didésoxY-3'-f1uQro-pctafuranooyl- pyrimidino-nucléosides préparée conformément à 17invention montrent une activité cytostatique surprenamment puissante.
Par exemple la 1-(2',3'-dicaoxy-'-fluoro---D-pentafurosyl)- thymine inhibe fortem,11-Ila-prolifération des cellules car- cinomateuses des ascites;d'br11ch chez les souris et la synthèse DNS. Une inhib1ti(::de 87 % de la prolifération cellulaire est atteinte in vi%ro à une concentration de ,.10-5m de substance Inhibitrice# oi: tc.ne inhibition de 50 % de la synthèse DNS pour 2 10-4 m de substance inhibitrice*
<Desc/Clms Page number 5>
L'invention est illustrée ci-après à l'aide @ d'exemples de réalisation.
Exemple 1 :
EMI5.1
On chauffe 1 g de 3'-0-mésyl-thymidine et 10 g de I#F2 ou de NH4F dans 100 em3 de diéthyléne glycol en bain préchauffé pendant 90 minutes à 190 C (température de bain).
On élimine le solvant sous vide (pompe à huile, température de bain jusqu'à un maximum de 140 C) et l'on mélange le résidu après addition de 3 cm3 d'eau chaude avec 10 g de Celite. On applique le mélange sur une colonne de chromatographie (3,6 x 183 cm) de 400 g de Celite/120 cm3 d'eau et on élue avec de l'ester acétique saturé d'eau. Les fractions 6 à 18 (chacune
EMI5.2
de 10 cm') contiennent de la 1-(21,51-didésoxY-31-fluoro-p-D- pentafuranosyl)-thymine chromatographiquement pure, qui après concentration sous vide et post-distillation éventuelle avec de l'éthanol absolu, se préaente à l'état cristallisé.
Rendement 106 mg. Le point de fusion après recristallisation à partir d'eau ou d'un mélange ester acétique/éther de pétrole et séchage (100 C, 1 mm Hg, P205), est de 176-177 C. Sur 0,25 mm de couche mince silica gel-HF avec de l'ester acétique saturé d'eau, la valeur du F est de 0,01.
EMI5.3
Absorption UV dans H20 : Max 265,5 5 m ,m, / min 234 ID p. ; dans NaOH 0,1 n : À riax 266 mi, 245 mpz Le composé par chauffage avec de la cc,:ad,;) - caustique alcoolique aqueuse (16 heures d'ébullition à r-e#' i. se con- vcrtit presque intëgraleme:r!: en 2' ,' i1idéhydrl)-'3't:...dsoxy- thymidine.
Exemple 2 @
EMI5.4
On chauffé' 900- ag ,de 02,3'scYclo-1-(2'--doxy--D- xylofuranosyl)-thymine corom;1é0r.1t à l'exemple 1 avec 10 . g de M .2 ou de NH4F dans du àiéthyléne glycc,1 pendit 10 , .a miúte5 à.19060,ou dana de 1'méthanol .en bambe tubulaire
<Desc/Clms Page number 6>
pendant 20 heures à 150 C, puis on traite de la même manière
EMI6.1
que précédemment. Rendement : 100-120 mg de 1-(2'3'-didésoncy.- 3'-fluoro--D-pentafuranosyl)-thymine. Les propriétés sont celles indiquées à l'exemple 1.
Exemple 3 :
EMI6.2
On chauffe 330 mg de 02,3'-cyclo-1-(2'-désoxy--D-.
:'Yoi'11ranosyl)-th:,..;ine avec 30 em3 d'une solution à z d'acide :'::; t,::#hyd:>::i. que dans du dioxane anhydre en récipient d'acier ou de nickel fermé pendant 45 minutes à 90 C (température de bain).
Oa neutralise la solution refroidie après addition d'un. peu d'eau avec du carbonate de calcium ou de î'hydroglucarbonate de sodium et on extrait par un lavage abondant à l'acétone le précipité minéral séparé par centrifugation. On concentre les solutions réunies à siccité sous vide. On purifie le résidu comme à l'exemple 1. par chromatographie sur colonne.
EMI6.3
Rendement : 165 mede 1-(21,3e-didésoxY-31-fluoro-p-D-penta- furanosyl)-thymine. Les propriétés sont celles données à l'exemple 1.
'Exemple 4 !
EMI6.4
On fait réagir 290 mg de 0,5'-cyclo-1-(2'-désoxy- 5=-0-trityl--k,xylofuranosyl)-thynne avec 25 cm". d'une solution à 4 % d'acide fluorhydrique dans du dioxme anhydre comme à l'exemple 3 durant 90 minutes à 80 C. On traite la
EMI6.5
solution comme à l'exemple 1 et on isole la 1-(2',5'-didé- BoxY-3;-f1uoro-pD-pentafuranosyl)-hymine de manière analogue par chromatographie sur colonne. Rendement : 95 !Eg. Les pro- priétés du produit sont celles citées à l'exemple 1.
REVENDICATIONS.
EMI6.6
Pl-rocédé de préparation de 2 ''-didsoxy-"fiuoro-pimidinG-ntlC16s1d9s à activïté cytostatique de
**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.