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NOUVEAU PROCEDE D'EXTRACTION DE L'AUREOMYCINE.
La présente invention a pour objet un procédé d'extraction de 1' auréomycine à partir des moûts de fermentation de Streptomyces Aureofactens.
Elle concerne en premier lieu la combinaison d'un certain nombre de manipulations déjà plus ou moins connues mais quia lorsqu'elles sont appli- quées dans l'ordre indiquée permettent d'obtenir un produit de grande pureté et avec un bon rendement. L'extraction telle qu'elle est préconisée comporte les phases suivantes : 1) Acidification des jus de fermentation et filtration.
2) Précipitation alcaline et récupération du gâteau alcalin.
3) Extraction de ce gâteau alcalin par de l'isopropanol acidifié.
4) Addition de sel à l'extrait isopropylique.
5) Concentration des extraits isopropyliques et cristallisation en présence d'é- thylglycol.
Un deuxième objet de l'invention consiste en l'extraction par l' isopropanol du gâteau alcalin obtenu par précipitation alcaline du filtrat acide: on a constaté,,, en effets qu'il était beaucoup plus avantageux de faire l'extrac- tion sur le gâteau alcalin obtenu à ce stades plutôt que sur le gâteau alcalin obtenu directement par précipitation alcaline des jus de fermentation (économie dû solvent d'extraction, pureté plus grande de l'extrait).
D'autre part, l'extraction de ce gâteau alcalin présente un problème difficile à résoudre si en effets, on opère avec un liquide non misci- ble à 1?eau la réalisation technique de cette extraction est délicate et on obtient une bouillie épaisse très difficile à filtrer, ce qui constitue des inconvénients majeurs pour une application industrielle.
Si au contraires on utilise un solvant miscible à 1?eau l'extraction et la filtration se font bien, mais on entraine un grand nombre d'impuretéslors de
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la concentration, on a une très grande quantité de liquide à éliminer et ensui- te la cristallisation se fait difficilement par suite de la présence de la grande quantité d'impuretés.
On a résolu ce problème lorsqu'on a constaté, et ceci fait un troisième objet de l'invention, que l'on pouvait utiliser l'isopropanol, sol- vant miscible à l'eau, comme solvant d'extraction, à condition d'ajouter en- suite du sel à l'extrait obtenu, ce qui a pour effet d'éliminer une grosse par- tie de l'eau et des impuretés sans qu'il y ait de perte de l'activité. L'ex- trait ainsi obtenu est ensuite concentré et la cristallisation du produit final est effectuée en présence d'éthylglycol.
L'exemple suivant, à titre non limitatif, montre comment l'in- vention peut être mise en pratique.
EXEMPLE.
On acidifie 220 litres de moût de fermentation renfermant 1.550 mg/1 d'aurémocycine par 6 Kg d'acide sulfurique à 25%, de façon à ob- tenir un pH de 1,5 On ajoute 3 Kg de Supercel Hyflo et filtre. On lave avec 110 litres d'eau acidifiée à pH 1,5. On rassemble le filtrat et les eaux de lavage (300 litres), puis ajoute de la lessive de soude à 10% (environ 14 li- tres), jusqu'à avoir un pH de 8 à 9, et 2 Kg de Supercel Hyflo. On filtre et lave avec 30 litres d'eau. Le gâteau alcalin obtenu est mis en suspension dans 10 litres d'isopropanol auquel on a ajouté 0,9 1 d'acide sulfurique à 25% de façon à obtenir un pH = 1,5 et 0,5 Kg de chlorure de sodium.
On agite, filtre et lave avec 10 litres d'isopropanol à 60%.
A la solution obtenue (23 litres), on ajoute 2,5 Kg de chlorure de sodium.
On agite jusqu'à dissolution du sel, laisse reposer et décante les deux cou- ches formées. On filtre la solution isopropylique (15,5 litres). Après addi- tion de 1,5 litre d'éthylglycol, on concentre cette solution jusqu'à un volume d'environ 1,5 litre à une température de 35 à 40 sous un vide de 50 mm de mercure. Après cristallisation, on essore la bouillie obtenue et lave avec 150 cm3 d'éthylgycol à 80%, puis 150 cm3 d'eau. Le produit brut obtenu est mis en suspension dans 350 cm3 d'eau, puis essoré. On recommence cette opéra- tion, puis lave sur filtre avec 300 cm3 d'eau. Le produit est ensuite séché sous vide (2 mm) à 40 On obtient ainsi 220 g de chlorhydrate d'auréomycine possédant déjà un haut degré de pureté.
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NEW PROCESS FOR THE EXTRACTION OF AUREOMYCIN.
The present invention relates to a process for extracting aureomycin from the fermentation musts of Streptomyces Aureofactens.
It relates in the first place to the combination of a certain number of operations which are already more or less known but which, when they are applied in the order indicated, make it possible to obtain a product of high purity and with a good yield. The extraction as recommended comprises the following phases: 1) Acidification of the fermentation and filtration juices.
2) Alkaline precipitation and recovery of the alkaline cake.
3) Extraction of this alkaline cake with acidified isopropanol.
4) Addition of salt to the isopropyl extract.
5) Concentration of isopropyl extracts and crystallization in the presence of ethyl glycol.
A second object of the invention consists in the extraction with isopropanol of the alkaline cake obtained by alkaline precipitation of the acid filtrate: it has been observed, in effect, that it was much more advantageous to carry out the extraction on the alkaline cake obtained at this stage rather than on the alkaline cake obtained directly by alkaline precipitation of the fermentation juices (saving on extraction solvent, greater purity of the extract).
On the other hand, the extraction of this alkaline cake presents a problem which is difficult to solve if, in effect, one operates with a liquid immiscible with water, the technical realization of this extraction is delicate and one obtains a very thick slurry. difficult to filter, which constitutes major drawbacks for industrial application.
If, on the contrary, a solvent miscible with water is used, the extraction and filtration are carried out well, but a large number of impurities are entrained during
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concentration, there is a very large amount of liquid to remove and then crystallization is difficult due to the presence of the large amount of impurities.
This problem was solved when it was found, and this forms a third object of the invention, that isopropanol, a water-miscible solvent, could be used as an extraction solvent, provided that Then add salt to the extract obtained, which has the effect of removing a large part of the water and impurities without any loss of activity. The extract thus obtained is then concentrated and the crystallization of the final product is carried out in the presence of ethyl glycol.
The following example, without limitation, shows how the invention can be put into practice.
EXAMPLE.
220 liters of fermentation must containing 1,550 mg / l of auremocycin are acidified with 6 kg of 25% sulfuric acid, so as to obtain a pH of 1.5. 3 kg of Supercel Hyflo are added and filtered. Washed with 110 liters of acidified water to pH 1.5. The filtrate and the washing water (300 liters) are combined, then 10% sodium hydroxide solution (approximately 14 liters) is added, until a pH of 8 to 9 is obtained, and 2 kg of Supercel Hyflo. It is filtered and washed with 30 liters of water. The alkaline cake obtained is suspended in 10 liters of isopropanol to which 0.9 1 of 25% sulfuric acid has been added so as to obtain a pH = 1.5 and 0.5 kg of sodium chloride.
Stirred, filtered and washed with 10 liters of 60% isopropanol.
2.5 kg of sodium chloride are added to the solution obtained (23 liters).
Stirred until the salt has dissolved, let stand and decant the two layers formed. The isopropyl solution (15.5 liters) is filtered. After addition of 1.5 liters of ethyl glycol, this solution is concentrated to a volume of about 1.5 liters at a temperature of 35 to 40 under a vacuum of 50 mm Hg. After crystallization, the slurry obtained is filtered off and washed with 150 cm3 of 80% ethylgycol, then 150 cm3 of water. The crude product obtained is suspended in 350 cm3 of water and then drained. This operation is repeated, then washed on a filter with 300 cm3 of water. The product is then dried under vacuum (2 mm) at 40 ° C. 220 g of aureomycin hydrochloride is thus obtained which already has a high degree of purity.