BE1024094B1 - Vaccin - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne un médiateur pro-résolution pour son utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l’administration d’un vaccin ou d’une composition immunogène comprenant au moins un antigène, et des vaccins ou des compositions immunogènes comprenant un tel médiateur pro-résolution.

Description

VACCIN

Domaine de l'invention

La présente invention concerne le domaine des vaccins, en particulier des vaccins présentant une réactogénicité réduite.

Contexte de l'invention

De nouvelles compositions ou de nouveaux vaccins présentant une immunogénicité améliorée sont nécessaires pour répondre aux besoins médicaux non satisfaits. Bien que les vaccins déclenchent de manière bénéfique des réponses immunitaires protectrices, les vaccins peuvent parfois également engendrer des effets secondaires transitoires, tels qu'une douleur au niveau du site d'injection, des gonflements et des ecchymoses, un phénomène communément appelé réactogénicité. Bien que la réactogénicité soit transitoire et ne soit pas considérée comme un problème majeur de sécurité, elle peut constituer une barrière contre la prise des vaccins au sein d'une population, et il existe donc un avantage évident pour la santé publique à réduire la réactogénicité.

Les médiateurs pro-résolution sont bien connus dans l'art et un certain nombre de candidats sont en essais cliniques pour le traitement, entre autres, des maladies oculaires et neurodégénératives. Des médiateurs pro-résolution ont été passés en revue dans des journaux scientifiques (voir Buckley et al. « Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327 ; Serhan « Pro-resolving lipid mediators are leads for resolution physiology », 2014, Nature 510 : 92-101) .

Un objet de la présente invention est d'améliorer les vaccins et les compositions immunogènes en réduisant leur réactogénicité au moyen de médiateurs pro-résolution. Résumé de l'invention

La présente invention propose un médiateur prorésolution défini dans le présent document pour son utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène défini dans le présent document. L'invention propose en outre un procédé de réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène défini dans le présent document, comprenant l'état d'administration d'un médiateur pro-résolution défini dans le présent document. L'invention propose également l'utilisation d'un médiateur pro-résolution défini dans le présent document dans la préparation d'un médicament pour réduire la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène défini dans le présent document. L'invention propose également des vaccins et des compositions immunogènes définis dans le présent document comprenant au moins un antigène défini dans le présent document et un médiateur pro-résolution défini dans le présent document. L'invention propose en outre des kits comprenant un médiateur pro-résolution défini dans le présent document, un antigène défini dans le présent document et/ou un adjuvant défini dans le présent document.

Brève description des figures

Figure 1 - Effet de la résolvine El (RvEl) sur le profil des cellules immunitaires locales induit par l'injection d'adjuvants. La figure 1 est un graphique représentant le nombre des différents types de cellules immunitaires par muscle collecté 24 heures après que des souris ont reçu différents schémas d'injection d'un adjuvant et/ou de RvEl, comme indiqué sur l'axe des y. Les noms des différents types de cellules immunitaires analysées sont donnés à côté du graphique, avec le code couleur correspondant. « De tôt » signifie cellules dendritiques totales.

Figure 2 - Effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur le profil des cellules immunitaires locales induit par l'injection d'adjuvants. La figure 2 est un graphique représentant le nombre des différents types de cellules immunitaires par muscle collecté 4 heures ou 24 heures après que des souris ont reçu différents schémas d'injection d'un adjuvant et/ou de MaRl, comme indiqué sur l'axe des x. Les noms des différents types de cellules immunitaires analysées sont donnés à côté du graphique, avec le code couleur correspondant. « De tôt » signifie cellules dendritiques totales.

Figure 3 - Effet de la résolvine El (RvEl) sur le profil des cytokines locales induit par l'injection d'adjuvants. La figure 3 est un graphique représentant la concentration de différents types de cytokines/chimiokines dans des muscles collectés après que des souris ont reçu différents schémas d'injection d'un adjuvant et/ou de RvEl, comme indiqué sur l'axe des y. Les noms des différents types de cytokines/chimiokines analysées sont donnés à côté du graphique, avec le code couleur correspondant. Le cadre A fournit les résultats obtenus à partir des muscles collectés 4 heures après l'injection d'adjuvant. Le cadre B fournit les résultats obtenus à partir des muscles collectés 24 heures après l'injection d'adj uvant.

Figure 4 - Effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur le profil des cytokines locales induit par l'injection d'adjuvants. La figure 4 est un graphique représentant la concentration de différents types de cytokines/chimiokines dans un muscle collecté 4 heures ou 24 heures après que des souris ont reçu différents schémas d'injection d'un adjuvant et/ou de MaRl, comme indiqué sur l'axe des x. Les noms des différents types de cytokines/chimiokines analysées sont donnés à côté du graphique, avec le code couleur correspondant.

Figure 5 - aucun effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur les réponses spécifiques de type lymphocytes T induites par l'injection de vaccins. La figure 5 est un graphique représentant le pourcentage de lymphocytes T CD4+ ou CD8+ exprimant au moins deux cytokines chez des souris ayant reçu différents schémas de vaccination, comme indiqué sur l'axe des x. Le cadre A fournit les résultats obtenus quand les cellules immunitaires extraites ont été stimulées avec l'antigène HBS. Le cadre B fournit les résultats obtenus quand les cellules immunitaires extraites ont été stimulées avec l'antigène OVA.

Figure 6 - aucun effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur les réponses spécifiques de type anticorps induites par l'injection d'un vaccin. La figure 6 est un graphique représentant la concentration en anticorps IgG dans des sérums de souris ayant reçu différents schémas de vaccination, comme indiqué sur l'axe des x. Le cadre A fournit les résultats obtenus en utilisant des anticorps anti-OVA. Le cadre B fournit les résultats obtenus en utilisant des anticorps anti-HBS. Description détaillée

Il est connu que les vaccins peuvent parfois être associés à une réactogénicité. La réactogénicité fait référence à un sous-ensemble d'effets secondaires qui sont associés à la réponse inflammatoire due à la vaccination. Les effets secondaires peuvent être divisés en effet locaux (par exemple, une douleur, un gonflement, un érythème et une induration) et en effets systémiques (par exemple, la fièvre, des nausées/vomissements, des diarrhées, des céphalées, une fatigue et une myalgie). L'amélioration des vaccins en réduisant leur réactogénicité peut améliorer la facilité d'accès aux vaccins par des populations spécifiques, par exemple en réduisant la douleur chez les adolescents et la fièvre chez les nourrissons. Par conséquent, une réactogénicité réduite peut améliorer la prise des vaccins, ce qui permet de couvrir une plus grande partie de la population et donc de réduire la morbidité/mortalité. De plus, une inflammation excessive peut également éventuellement affecter négativement la qualité de la réponse immunitaire induite par un vaccin ou une composition immunogène.

Un objet de la présente invention est donc de réduire la réactogénicité des vaccins. Par conséquent, la présente invention fournit un médiateur prorésolution défini dans le présent document pour son utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène défini dans le présent document.

La réactogénicité peut être évaluée directement chez des modèles in vivo spécifiques en mesurant la température corporelle, la fréquence cardiaque et/ou la psychomotricité avec un implant, ou indirectement en suivant des biomarqueurs dans le sang d'un animal qui indiquent la survenue d'une réponse inflammatoire pouvant être associée à une réactogénicité (par exemple, CRP, PGE2). Des modèles in vitro alternatifs peuvent également être utilisés : ils sont principalement basés sur l'activation de cellules humaines par la formulation à tester, qui peut aboutir à la libération de molécules ayant des propriétés pyrogènes (voir Schindler S. et al. « International validation of pyrogen tests based on cryopreserved human primary blood cells » Immunol. Methods, 2006, octobre 20 ; 316 (1-2) : 42-51). Résolution de la réponse inflammatoire

Une infection ou la lésion d'un tissu, ou une vaccination, entraîne habituellement une réponse inflammatoire aiguë, dont le déclenchement est responsable de la réactogénicité qui peut être associée aux vaccins ou aux compositions immunogènes. Ladite réponse inflammatoire aiguë est typiquement divisée en deux phases successives distinctes, à savoir l'initiation et la résolution. Par conséquent, l'étendue et la durée de la réponse inflammatoire aiguë peuvent être régulées à deux niveaux. D'une part, en ciblant les composés inhibant la réponse inflammatoire (antagonistes) qui auront un impact spécifique sur la phase d'initiation, pour limiter la durée et l'importance de la réponse. D'autre part, en ciblant les composés qui favoriseront de manière spécifique et active la résolution de la réponse inflammatoire (agonistes ou médiateurs pro-résolution). Médiateurs pro-résolution

Au sens de la présente invention, par « médiateurs pro-résolution », on entend les composés qui favorisent la résolution de la réponse inflammatoire, contrairement aux composés qui inhibent la réponse inflammatoire. Au niveau tissulaire et cellulaire, la résolution d'une inflammation peut être définie, au sens large, par le taux de clairance des cellules polymorphonucléaires (PMN) jusqu'au point où elles sont absentes du site de lésion tissulaire primaire et retournent à l'homéostasie. Les étapes clés de ce processus comprennent : 1) la clairance des stimuli de « danger » ; 2) le catabolisme des signaux locaux de survie et le silence des voies de signalisation proinflammatoires intracellulaires ; 3) la normalisation des gradients de chimiokines et l'apoptose des PMN ; et 4) 1'efferocytose (élimination des débris par les macrophages, notamment des neutrophiles apoptotiques) par les macrophages dérivés des tissus et des monocytes.

Les médiateurs pro-résolution sont caractérisés par leur capacité à favoriser/améliorer l'une quelconque des étapes ci-dessus. Certains d'entre eux ont également une action directe sur la réduction de la douleur, en agissant sur les récepteurs des nerfs terminaux, et peuvent également accélérer la cicatrisation et la réparation tissulaire. Les mécanismes impliqués dans la résolution de l'inflammation aiguë sont décrits et discutés, par exemple, dans Buckley et al. (« Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327) et Serhan (« Pro-resolving lipid mediators are leads for resolution physiology », 2014, Nature 510 :92-101) .

Ainsi, l'activité d'un médiateur pro-résolution peut être évaluée, par exemple, en mesurant dans des conditions d'inflammation, par exemple après une vaccination, (i) le profil d'infiltration des cellules immunitaires locales (c'est-à-dire la détermination de la proportion de chaque type de cellules immunitaires, comme par exemple les macrophages, les neutrophiles, les éosinophiles, les cellules NK, les lymphocytes T et/ou les lymphocytes B dans l'infiltrat) et en déterminant si le composé à évaluer est capable de moduler le profil, et/ou (ii) le statut d'apoptose des neutrophiles locaux et en déterminant si le composé à évaluer est capable d'augmenter le nombre des neutrophiles apoptotiques (par exemple, en utilisant un marqueur spécifique reconnaissant les neutrophiles et en effectuant une co-coloration avec de l'annexine V ou de l'iodure de propidium afin de discriminer les cellules apoptotiques), et/ou (iii) le profil des cytokines et chimiokines inflammatoires locales et/ou la présence de macrophages de résolution (par exemple, on peut faire la distinction entre les macrophages de résolution et les macrophages inflammatoires grâce à des marqueurs spécifiques) et en déterminant si le composé à évaluer est capable de moduler le profil. L'homme du métier connaît parfaitement les essais et les techniques à utiliser pour évaluer l'un quelconque mentionné ci-dessus. Par exemple, après l'injection d'un vaccin, en l'absence ou en présence d'un médiateur pro-résolution, l'activité de pro-résolution peut être surveillée et évaluée à différents moments temporels après l'injection au niveau du site d'injection, par exemple, en collectant des muscles, (i) en extrayant les cellules immunitaires, en les colorant avec des marqueurs spécifiques et en déterminant la teneur de chaque type cellulaire, par exemple, par cytométrie en flux, et/ou (ii) en mesurant les taux des cytokines au sein d'homogénats clarifiés obtenus après l'homogénéisation des muscles collectés. Une telle mesure peut être effectuée par n'importe quelle technique classique de détection des protéines, comme par exemple un dosage Elisa ou des immuno-essais à base de billes permettant simultanément le traitement et la mesure de multiples protéines au sein d'une unique réaction, communément appelés immuno-essais multiplex.

Au niveau du site d'injection d'un vaccin, par exemple, non seulement des médiateurs proinflammatoires sont produits, mais également des médiateurs locaux qui sont anti-inflammatoires et des médiateurs locaux de pro-résolution sont produits, lesquels médient la récupération à partir de l'inflammation et de la douleur. Par conséquent, l'anti-inflammation et la pro-résolution sont des mécanismes distincts pour lutter contre l'inflammation. La présente invention concerne l'utilisation de médiateurs pro-résolution plutôt que de molécules antiinflammatoires, comme par exemple des inhibiteurs de C0X2 (cyclooxygénase-2) . Les actions des médiateurs pro-résolution sont en contraste net avec celles des produits thérapeutiques anti-inflammatoires actuellement utilisés (par exemple, des inhibiteurs de COX et LOX), qui peuvent être des inhibiteurs de résolution. Par exemple, alors que les médiateurs antiinflammatoires bloquent le recrutement et l'entrée des neutrophiles dans le site de la lésion, les médiateurs pro-résolution favorisent la clairance des neutrophiles recrutés et présents au niveau du site de la lésion, par efferocytose. L'interruption du processus de résolution aiguë conduit à une inflammation incontrôlée qui est impliquée dans la pathogenèse de nombreuses maladies chroniques.

Par conséquent, des médiateurs pro-résolution ont été proposés pour traiter la douleur, par exemple la douleur postopératoire, la douleur arthritique, la douleur dentaire, les douleurs lombaires et l'affection abdominale inflammatoire (voir le document WO 11/034 887). En outre, des médiateurs pro-résolution ont été proposés pour une utilisation dans le traitement de l'asthme/de l'inflammation des voies respiratoires (document WO 05/089 744) et pour une utilisation dans le traitement/la prévention de la néovascularisation et de 1'hémangiogenèse (document WO 09/254 873).

Il a été montré que les inhibiteurs de COX2 peuvent en fait affecter négativement la production des médiateurs pro-résolution et peuvent réduire la réponse immunitaire contre l'antigène. En revanche et de manière surprenante, les présents inventeurs ont démontré que grâce à l'utilisation de médiateurs prorésolution, le profil des cellules immunitaires locales et le profil des cytokines locales (qui sous-tendent l'inflammation aiguë et la réactogénicité) peuvent être modulés ; de manière avantageuse, la réponse immunitaire dirigée contre un vaccin/une composition immunogène, quand de tels médiateurs pro-résolution sont utilisés, n'est pas affectée négativement.

Une famille particulière de médiateurs prorésolution sont des molécules dérivées des lipides qui sont issues d'acides gras polyinsaturés (PUFA). De tels médiateurs pro-résolution dérivés de lipides sont connus de l'homme du métier et ont été passés en revue dans des journaux scientifiques (voir Buckley et al. « Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327 ; Serhan « Pro-resolving lipid mediators are leads for resolution physiology », 2014, Nature 510 : 92-101) . Par conséquent, dans un mode de réalisation, les médiateurs pro-résolution destinés à être utilisés dans la présente invention sont dérivés de PUFA. La présente invention envisage en particulier ceux dérivés du PUFA ω-3 acide éicosapentaènoïque (EPA), par exemple les résolvines de type E, ou du PUFA ω-3 acide docosahexaènoïque (DHA), par exemple les résolvines de type D, les protectines et les marésines, ou de l'acide arachidonique ω-6 (AA), par exemple les lipoxines. Par conséquent, dans des modes de réalisation particuliers, les médiateurs pro-résolution destinés à être utilisés dans la présente invention sont dérivés du PUFA ω-3 acide éicosapentaènoïque (EPA), du PUFA ω-3 acide docosahexaènoïque (DHA) , ou du PUFA ω-6 acide arachidonique (AA). En particulier, les médiateurs prorésolution sont choisis dans le groupe constitué par : les résolvines (par exemple, RvEl, RvE2, RvDl), les protectines (par exemple, la protectine Dl (PDI), également connue sous le nom de neuroprotectine DI (NPDl) quand elle agit sur le système nerveux), les lipoxines (par exemple, la lipoxine A4 (LXA4)) et les marésines (par exemple, MaRl) ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de celles-ci (par exemple, RvEl, RvE2 et/ou RvDl en combinaison avec MaRl). Les résolvines peuvent être divisées en 2 types : le type D qui dérive du DHA (par exemple, RvDl, RvD2, RvD3 et RvD4) ; le type E dérivé de l'EPA (par exemple, RvEl, RvE2 et RvE3) . Dans des modes de réalisation particuliers, le médiateur pro-résolution utilisé dans la présente invention est choisi dans le groupe constitué par : RvEl, RvE2, RvE3, RvDl, RvD2, RvD3, RvD4, MaRl, PDI /NPDl, 17-HDHA et LXA4, ou un analogue fonctionnel de ceux-ci, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci. Les structures chimiques des résolvines de type D (RvDl, RvD2, RvD3 et RvD4), des résolvines de type E (RvEl, RvE2 et RvE3), des protectines (PD1/NPD1) et des marésines (MaRl) sont divulguées, par exemple, dans Buckley et al. (« Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327) qui est incorporé à la présente à titre de référence. La structure chimique de LXA4 est divulguée dans Serhan et al. (« Resolving inflammation : dual anti-inflammatory and pro-resolution lipid mediators », 2008, Nat. Rev. Immunol. 8 : 349-361) qui est incorporé à la présente à titre de référence.

Dans un mode de réalisation particulier, le médiateur pro-résolution est RvEl ou un analogue fonctionnel de celui-ci. Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, le médiateur pro-résolution est MaRl ou un analogue fonctionnel de celui-ci.

Les médiateurs pro-résolution utilisés dans la présente invention peuvent être d'origine naturelle ou synthétique. Des mimétiques synthétiques peuvent être plus faciles à produire et peuvent être avantageux en étant chimiquement stables. Des mimétiques chimiquement stables de nombreux médiateurs pro-résolution, entre autres de RvEl et de RvDl, sont connus dans l'art (voir Serhan & Petasis « Resolvins and Protectins in Inflammation-Resolution », 2011, Chem Rev. 111(10) : 5922-5943 ; le document WO 05/089 744 ; les documents WO 09/154 873 et WO 11/034 887).

Par « analogue fonctionnel », on entend, au sens de la présente invention pour un médiateur prorésolution donné, un médiateur dont la structure chimique est modifiée mais qui conserve sa capacité à réduire la réactogénicité et/ou à moduler 1'inflammation.

Antigènes de vaccin

Les médiateurs pro-résolution de l'invention décrite dans le présent document sont utilisés pour réduire la réactogénicité d'un vaccin ou d'une composition immunogène. Les vaccins et les compositions immunogènes de l'invention comprennent au moins un antigène. Par « antigène », on entend toute molécule capable de déclencher une réponse immunitaire chez un humain ou un animal. Par exemple, un antigène peut être un organisme entier, une protéine/un polypeptide, un polysaccharide, un peptide, un acide nucléique, un conjugué protéine-polysaccharide, ou un haptène capable de déclencher une réponse immunitaire chez un humain ou un animal, chacun de ces types d'antigène, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci, étant spécifiquement envisagé comme antigène possible dans des modes de réalisation spécifiques des vaccins ou des compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention. Au sens de la présente invention, les termes « protéine » et « polypeptide » sont synonymes et interchangeables. La réponse immunitaire peut être dirigée contre un pathogène, comme par exemple des virus, des bactéries, des parasites ou des champignons. Par conséquent, dans certains modes de réalisation, l'antigène des vaccins ou des compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention dérive d'un organisme choisi dans le groupe constitué par : les virus, les bactéries, les parasites et les champignons, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci. En variante, l'antigène peut être un antigène associé à une tumeur, et les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention peuvent être utiles pour le traitement immunothérapeutique des cancers. Au sens de la présente invention, « un antigène dérivé d'un organisme » englobe, en particulier, l'organisme dans sa globalité (des organismes entiers, comme par exemple un virus entier ou une bactérie entière) , ou une ou plusieurs molécules provenant seulement de l'organisme. L'antigène peut être l'organisme entier d'origine naturelle, et la ou les molécules, par exemple un ou plusieurs polypeptides, provenant de l'organisme peuvent être isolées et purifiées à partir d'un tel organisme entier d'origine naturelle. En variante, l'antigène peut être produit de manière artificielle, par exemple en utilisant une technologie de recombinaison ou en utilisant une synthèse chimique. Ces antigènes recombinants peuvent être sous une forme de type sauvage, c'est-à-dire que leur séquence nucléotidique ou leur séquence d'acides aminés est identique à la séquence des antigènes correspondants dérivés de l'organisme entier d'origine naturelle. En variante, lesdits antigènes recombinants peuvent comprendre de manière avantageuse une ou plusieurs mutations, c'est-à-dire que leur séquence nucléotidique ou leur séquence d'acides aminés comprend une ou plusieurs mutations par rapport à la séquence des antigènes de type sauvage correspondants. Les organismes entiers peuvent être vivants atténués ou tués/inactivés. Des procédés d'inactivation faisant appel à des moyens physiques et/ou chimiques sont connus de l'homme du métier.

Virus L'antigène dans les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention peut dériver d'un virus. Par conséquent, dans des modes de réalisation particuliers, l'antigène dérive d'un virus. En particulier, l'antigène peut être un virus entier. Le virus entier peut être vivant atténué ou tué/inactivé. En variante, l'antigène peut être un polypeptide dérivé d'un virus.

Les virus appropriés sont issus des familles Orthomyxoviridae, comme par exemple les virus de la grippe, Paramyxoviridae, comme par exemple le virus respiratoire syncytial (RSV), le virus des oreillons ou le virus de la rougeole, Togaviridae, comme par exemple le virus de la rubéole, Papovaviridae, comme par exemple les papillomavirus humains (HPV), Herpesviridae, comme par exemple les virus de l'herpès simplex (HSV), les cytomégalovirus humains (HCMV), les virus d'Epstein-Barr (EBV), ou les virus de la varicelle et du zona (VZV), Picornaviridae, comme par exemple les entérovirus, les rhinovirus, les poliovirus, Flaviviridae, comme par exemple les virus de la dengue ou le virus de l'hépatite C (HCV) , Hepadnaviridae, comme par exemple le virus de l'hépatite B (HBV) , Retroviridae, comme par exemple les virus de l'immunodéficience humaine (VIH), Reoviridae, comme par exemple les rotavirus, Rhabdoviridae, comme par exemple les virus de la rage, ou Filoviridae, comme par exemple virus Ebola. Dans un mode de réalisation, 1'antigène des vaccins ou des compositions immunogènes de l'invention dérive d'un virus choisi dans le groupe constitué par le virus de la grippe, le RSV, le HPV, le virus de la rougeole, le virus de la rubéole, le virus des oreillons, le HCMV, le VZV, le virus de la dengue, le poliovirus, le VIH, le HBV, le virus Ebola et un rotavirus, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.

Dans un mode de réalisation particulier, l'antigène dérive du HCMV. De manière appropriée, l'antigène de HCMV est la glycoprotéine gB, qui peut être dépourvue du domaine transmembranaire (comme divulgué dans le document EP 0 802 979 Bl), facultativement en combinaison avec une ou plusieurs protéines pp65, IE1, pUL131, gL, gH, pUL128 et pUL130 du HCMV. De manière appropriée, l'antigène de HCMV est une combinaison de gB, gL, gH, pULl31, pULl28 et pUL130. En variante, l'antigène de HCMV est une combinaison de gL, gH, pULl31, pULl28 et pUL130.

Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, l'antigène dérive du VZV. De manière appropriée, l'antigène de VZV est la glycoprotéine gE, de laquelle le domaine transmembranaire peut être supprimé, comme divulgué dans le document EP 0 405 867 Bl.

Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, l'antigène dérive du RSV. De manière appropriée, l'antigène de RSV est un polypeptide choisi dans le groupe constitué par la protéine de fusion (F), la protéine de fixation (G), la protéine de matrice (M2) et la nucléoprotéine (N). Des antigènes polypeptidiques de RSV particulièrement appropriés pour être inclus dans les vaccins ou les compositions immunogènes selon l'invention sont les polypeptides F à conformation contrainte. Des polypeptides F à conformation contrainte ont déjà été décrits à la fois dans la conformation de préfusion (PreF) et la conformation de postfusion (PostF). Des exemples d'antigènes de type protéine F à conformation contrainte dans la conformation de préfusion ont été décrits dans l'art et sont divulgués en détail, par exemple, dans les documents WO 09/079 796, WO 10/149 745, WO 11/008 974 et WO 12/158 613, chacun étant incorporé à la présente à titre de référence. De même, des antigènes de type protéine F à conformation contrainte dans la conformation de postfusion sont également connus dans l'art et peuvent être utilisés dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention. Des exemples de polypeptides de type protéine F à conformation contrainte postfusion sont donnés, par exemple, dans le document WO 11/008 974, et dans Swanson et al. (PNAS, 2011, Vol. 108 : 9619-9624), chacun étant incorporé à la présente à titre de référence. Dans des modes de réalisation particuliers, les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans la présente invention comprennent un antigène polypeptidique dérivé du RSV choisi dans le groupe constitué par : la protéine F, la protéine preF, la protéine N et la protéine M2.

Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, l'antigène dérive du HBV. De manière appropriée, l'antigène est l'antigène de surface de l'hépatite B (HBS).

Bactéries L'antigène dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention peut dériver d'une bactérie. Par conséquent, dans des modes de réalisation particuliers, l'antigène dérive d'une bactérie. Dans des modes de réalisation particuliers supplémentaires, l'antigène est une bactérie choisie dans le groupe constitué par : B. pertussis, S. Pneumoniae et N. Meningitidis, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de celle-ci. Ce peut être une bactérie entière et elle peut être tuée/inactivée ou vivante atténuée.

Des antigènes particuliers de type bactéries entières pouvant être utilisés dans la présente invention sont Bordetella pertussis. Dans un mode de réalisation, l'antigène de B. pertussis est la bactérie entière (antigène Pw) , facultativement en combinaison avec l'anatoxine tétanique (T) et/ou l'anatoxine diphtérique (D) . Dans des modes de réalisation particuliers, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent Pw, l'anatoxine tétanique et l'anatoxine diphtérique (DTPw). L'antigène Pw peut être inactivé grâce à plusieurs procédés connus, notamment les procédés sans mercure. De tels procédés peuvent comprendre une inactivation par la chaleur, le formaldéhyde, le glutaraldéhyde, l'acétone-I ou l'acétone-II (voir, par exemple, Gupta et al., 1987, J. Biol. Stand. 15 : 87 ; Gupta et al., 1986, Vaccine, 4 : 185) . Des procédés de préparation de l'antigène Pw inactivé approprié pour être utilisé dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention sont divulgués dans le document WO 93/24 148, qui est incorporé à la présente à titre de référence. Dans un mode de réalisation particulier d'un vaccin ou d'une composition immunogène comprenant un antigène Pw destiné à être utilisé dans l'invention, le composant Pw de la composition induit une réactogénicité réduite. La réactogénicité des vaccins anti-Pw est principalement provoquée par un lipo-oligosaccharide (« LOS ») , qui est l'endotoxine provenant de la membrane externe bactérienne. La partie lipide A du LOS est principalement responsable de la réactogénicité. Afin de produire un vaccin contenant un antigène Pw moins réactogène (par rapport aux vaccins anti-Pw « traditionnels », par exemple produits par les procédures d'inactivation décrites ci-dessus), l'endotoxine peut être génétiquement ou chimiquement détoxifiée et/ou extraite de la membrane externe. Dans des modes de réalisation particuliers, l'antigène de B. pertussis du vaccin ou de la composition immunogène destiné à être utilisé dans l'invention comprend un antigène Pw « à faible réactogénicité » dans lequel le LOS a été génétiquement ou chimiquement détoxifié et/ou extrait. Par exemple, l'antigène Pw peut être soumis à un traitement avec un mélange contenant un solvant organique, comme le butanol, et de l'eau, comme décrit dans le document WO 06/002 502 et dans Dias et al. (Human Vaccines & Immunotherapeutics, 2012, 9(2) :339- 348), qui sont incorporés à la présente à titre de référence. Dans des modes de réalisation alternatifs, une « faible réactogénicité » est obtenue en obtenant l'antigène Pw à partir d'une souche de B. pertussis génétiquement modifiée pour produire un LOS moins toxique. Le document WO 06/065 139 (incorporé à la présente à titre de référence) divulgue la 3-0-désacylation et la détoxification génétiques du LOS de B. pertussis, pour donner des souches comprenant un LOS au moins partiellement 3-O-désacylé. L'antigène de B. pertussis du vaccin ou de la composition immunogène de l'invention peut donc être un antigène Pw dérivé d'une souche de B. pertussis qui a été modifiée pour exprimer une enzyme de modification du lipide A, comme une dés-O-acylase. En particulier, une telle souche peut exprimer la 3-O-désacylase PagL, comme décrit dans le document WO 06/065 139, ainsi que dans Geurtsen et al. (Infection and Immunity, 2006, 74(10) : 5574-5585) et dans Geurtsen et al. (Microbes and Infection, 2007, 9 : 1096-1103), tous étant incorporés à la présente à titre de référence. En variante ou en plus, la souche de laquelle l'antigène Pw est dérivé peut naturellement, ou du fait d'une modification, être dépourvue de la capacité de modifier ses groupes phosphates du lipide A avec une glucosamine, possède un squelette de diglucosamine de lipide A substitué en position C-3' avec C10-OH ou C12-OH et/ou exprime des espèces de LOS moléculaire qui sont dépourvues d'heptose terminal. Une telle souche, 18-323, est divulguée dans Marr et al. (The Journal of Infectious Diseases, 2010, 202(12) : 1897-1906) (incorporé à la présente à titre de référence). D'autres antigènes bactériens particuliers pouvant être utilisés dans les vaccins ou les compositions immunogènes selon la présente invention dérivent de Streptococcus pneumoniae. Au moins une protéine streptococcique et/ou au moins un saccharide capsulaire streptococcique, facultativement conjugué à une protéine de support, sont inclus de manière appropriée en tant qu' antigènes dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention. Des antigènes protéiques et saccharidiques appropriés dérivés de Streptococcus pneumoniae sont décrits dans le document WO 14/060 385 (incorporé à la présente à titre de référence). Dans certains modes de réalisation, l'au moins une protéine de Streptococcus pneumoniae est choisi dans le groupe constitué par la famille des triades de polyhistidine (PhtX), la famille des protéines de liaison à la choline (CbpX) , les CbpX tronquées, la famille des LytX (enzyme autolytique), les LytX tronquées, les protéines chimères CbpX tronquée-LytX tronquée, la PcpA (protéine pneumococcique A de liaison à la choline) , la PspA (protéine pneumococcique A de surface), la PsaA (protéine pneumococcique A d'adhérence de surface), la Spl28 (Streptococcus pneumoniae 128), la SplOl (Streptococcus pneumoniae 101), la Spl30 (Streptococcus pneumoniae 130), la SP125 (Streptococcus pneumoniae 125) et la SP133 (Streptococcus pneumoniae 133) . Dans des modes de réalisation supplémentaires, les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés selon l'invention comprennent 1 ou plus de 1 (par exemple, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 ou 23) saccharide capsulaire de

Streptococcus pneumoniae, facultativement conjugué à une protéine de support. Dans des modes de réalisation particuliers, le ou les saccharides capsulaires de Streptococcus pneumoniae, facultativement conjugués à une protéine de support, inclus dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention, comprennent des saccharides dérivés de sérotypes choisis parmi les sérotypes suivants : 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 1 OA, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F et 33F. Par exemple, un vaccin ou une composition immunogène 7-valent peut comprendre des saccharides de sérotypes 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F et 23F. Un vaccin ou une composition immunogène 10-valent peut comprendre des saccharides dérivés des mêmes 7 sérotypes et comprendre en outre des saccharides de sérotypes 1, 5 et 7F. Un vaccin ou une composition immunogène 12- valent peut comprendre des saccharides dérivés des mêmes 10 sérotypes et comprendre en outre des saccharides de sérotypes 6A et 19A. Un vaccin ou une composition immunogène 13-valent peut comprendre les mêmes 12 sérotypes et comprendre en outre le sérotype 3. Un vaccin ou une composition immunogène 15-valent peut comprendre des saccharides dérivés des mêmes 13 sérotypes et comprendre en outre des saccharides dérivés des sérotypes 22F et 33F. D'autres antigènes saccharidiques, par exemple un 23-valent (comme les sérotypes 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F et 33F), sont également envisagés comme antigènes dans les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention. Le terme « saccharide » peut indiquer un polysaccharide ou un oligosaccharide et inclut les deux. Des polysaccharides peuvent être isolés à partir de bactéries et peuvent être dimensionnés jusqu'à un certain degré grâce à des procédés connus (voir, par exemple, les documents EP 0 497 524 B1 et EP 0 497 525, incorporés à la présente à titre de référence) et facultativement par microfluidisation. Les polysaccharides peuvent être dimensionnés afin de réduire la viscosité dans les échantillons de polysaccharides et/ou d'améliorer l'aptitude à la filtration des produits conjugués. Le terme « conjugué » fait référence à un saccharide capsulaire lié par liaison covalente à une protéine de support. La protéine de support peut être n'importe quel peptide ou n'importe quelle protéine. Des protéines de support appropriées sont décrites dans le document WO 14/060 385 (incorporé à la présente à titre de référence). La protéine de support peut être l'anatoxine tétanique (TT), le fragment C de l'anatoxine tétanique, des mutants non toxiques de l'anatoxine tétanique, l'anatoxine diphtérique (DT), CRM197, d'autres mutants non toxiques de l'anatoxine diphtérique, comme CRM176, CRM228, CRM 45 ; CRM 9, CRM 45, CRM102, CRM103 et CRM107 (où CRM signifie matériel à réaction croisée), la pneumolysine pneumococcique, OMPC (protéine C de la membrane externe), les protéines de choc thermique, des protéines pertussiques, des cytokines, des lymphokines, des facteurs de croissance ou des hormones, des protéines artificielles comprenant de multiples épitopes de lymphocytes T CD4+ humains provenant de divers antigènes dérivés de pathogènes, comme la protéine N19, la protéine pneumococcique PspA de surface, les protéines d'absorption du fer, l'anatoxine A ou B de C. difficile, une protéine de H. influenzae, la PhtA pneumococcique (protéine A à triades de polyhistidine), la PhtD pneumococcique (protéine D à triades de polyhistidine), la PhtB pneumococcique (protéine B à triades de polyhistidine) , ou la PhtE (protéine E à triades de polyhistidine) . Dans un mode de réalisation, l'au moins un conjugué de saccharide capsulaire de Streptococcus pneumoniae est conjugué à une protéine de support choisie dans le groupe constitué par l'anatoxine tétanique (TT), le fragment C de TT, l'anatoxine diphtérique, CRM197 (matériel à réaction croisée 197), la pneumolysine détoxifiée, la protéine D (de H. influenzae) , PhtD, PhtDE et N19. Le saccharide peut être lié à la protéine de support par n'importe quel procédé connu. D'autres antigènes bactériens particuliers pouvant être utilisés dans la présente invention sont dérivés de Neisseria meningitidis. Dans certains modes de réalisation, l'antigène des vaccins ou des compositions immunogènes destiné à être utilisé dans l'invention est un saccharide capsulaire de N. meningitidis issu d'un sérogroupe choisi dans le groupe constitué par : le sérogroupe A (MenA) , le sérogroupe C (MenC) , le sérogroupe Y (MenY) , et le sérogroupe W-135 (MenW) , ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci, facultativement conjugué à une protéine de support. En effet, ces saccharides peuvent être conjugués de manière appropriée à l'une quelconque des protéines de support décrites ci-dessus en relation avec les saccharides streptococciques. Dans certains modes de réalisation, le vaccin ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent un saccharide capsulaire de N. meningitidis de sérogroupe A (MenA), un saccharide capsulaire de N. meningitidis de sérogroupe C (MenC), un saccharide capsulaire de N. meningitidis de sérogroupe Y (MenY) , et un saccharide capsulaire de N. meningitidis de sérogroupe W-135 (MenW), facultativement conjugué à la protéine CRM197 de support ou à la protéine TT de support. D'autres antigènes bactériens particuliers dérivés de Neisseria meningitidis pouvant être utilisés dans la présente invention sont dérivés de N. meningitidis de sérogroupe B (« MenB ») . Des antigènes appropriés pour déclencher des réponses anti-MenB comprennent les polypeptides, les lipo-oligosaccharides et/ou les vésicules membranaires. Les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention peuvent comprendre un ou plusieurs antigènes polypeptidiques méningococciques de sérogroupe B. Dans certains modes de réalisation, l'antigène est un polypeptide de N. meningitidis de sérogroupe B choisi dans le groupe constitué par : la protéine NadA (également connue sous le nom de protéine « 961 ») , la protéine NHBA (également connue sous le nom de protéine « 287 ») , la protéine fHBP (également connue sous le nom de protéine « 741 ») , la protéine GNA1030 (également connue sous le nom de protéine « 953 »), et la protéine GNA2091 (également connue sous le nom de protéine « 936 »), ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de celles-ci, facultativement en combinaison avec un OMV dérivé de N. meningitidis de sérogroupe B. Ces antigènes seront habituellement présents sous forme de polypeptides purifiés, par exemple des polypeptides recombinants. Des formes appropriées de ces antigènes sont divulguées dans le document WO 04/032 958, incorporé à la présente à titre de référence. Les cinq antigènes peuvent être présents dans la composition sous forme de cinq protéines séparées, ou de manière appropriée au moins deux des antigènes sont exprimés sous la forme d'une unique chaîne polypeptidique (une « protéine hybride »), par exemple pour que les cinq antigènes forment moins de cinq polypeptides, comme décrit dans le document WO 04/032 958. Dans certains modes de réalisation, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent au moins la protéine NadA, la protéine NHBA, la protéine fHBP, la protéine GNA1030 et la protéine GNA2091. Dans des modes de réalisation particuliers, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8, comme divulgué dans le document WO 04/032 958, incorporé à la présente à titre de référence. Dans des modes de réalisation particuliers supplémentaires, de tels vaccins ou de telles compositions immunogènes de l'invention comprennent en plus un OMV dérivé de N. meningitidis de sérogroupe B, comme décrit ci-dessous. D'autres antigènes bactériens particuliers sont les vésicules de membrane externe (OMV). Celles-ci comprennent n'importe quelle vésicule protéo-liposomique obtenue par la dislocation d'une membrane externe ou la formation de vésicules à partir d'une membrane externe qui comprennent des composants protéiques de la membrane externe. Des bactéries à Gram-négatif, comme Neisseria, sécrètent des OMV lors de la croissance active. Les composants immunogènes principaux des OMV sont les protéines de membrane externe (OMP) et les lipo-polysaccharides liés à la membrane (LPS). Les OMV peuvent être préparés à partir de n'importe quelle bactérie à Gram-négatif, notamment des bactéries neisseriennes pathogènes, comme Neisseria gonorrhoea et Neisseria meningitidis. L'approche OMV est particulièrement utile pour Neisseria meningitidis du sérogroupe B, car sa capsule polysaccharidique est peu immunogène. Par conséquent, dans certains modes de réalisation, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent un OMV dérivé d'une souche de N. meningitidis de sérogroupe B, facultativement en combinaison avec l'un quelconque des antigènes polypeptidiques méningococciques de sérogroupe B décrits ci-dessus. Les OMV sont préparés artificiellement à partir des bactéries, et peuvent être préparés en utilisant un traitement par détergent (par exemple, avec le désoxycholate) , ou par un moyen ne faisant pas appel à un détergent, comme décrit dans le document WO 12/020 326, par exemple, qui est incorporé à la présente à titre de référence.

Parasites L'antigène dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention peut dériver de parasites. De manière appropriée, l'antigène peut dériver de parasites provoquant le paludisme. Par conséquent, dans certains modes de réalisation, l'antigène dans les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention est dérivé de parasites qui provoquent le paludisme, comme par exemple Plasmodium falciparum ou Plasmodium vivax. De manière appropriée, l'antigène dérivé de Plasmodium falciparum est RTS,S. Comme divulgué dans le document WO 93/10 152 (incorporé à la présente à titre de référence), RTS,S est une protéine hybride constituée de la partie C-terminale de la protéine circumsporozoite (CS) de Plasmodium falciparum liée, par l'intermédiaire de quatre acides aminés de la partie preS2 de l'antigène de surface de l'hépatite B, à l'antigène (S) de surface du virus de l'hépatite B.

Antigènes associés aux tumeurs L'antigène dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention peut être un antigène associé à une tumeur. De manière appropriée, l'antigène peut être un antigène de rejet de tumeur, comme ceux pour un cancer de la prostate, du sein, colorectal, du poumon, pancréatique, rénal et de type mélanome. Des exemples non limitatifs d'antigènes comprennent MAGE 1, 3 et MAGE 4 ou d'autres antigènes MAGE, comme divulgué dans le document WO 99/40 188.

Immunisation par acide nucléique ARN à auto-réplication

Une immunisation par acide nucléique peut être réalisée en administrant un ARN à auto-réplication (ou un ARN à auto-amplification) encapsulé dans et/ou absorbé sur une petite particule. L'ARN code pour un antigène polypeptidique d'intérêt, et la particule peut délivrer cet ARN en mimant la fonction de distribution d'un virus naturel. Après l'administration in vivo des particules, l'ARN est libéré à partir des particules et est traduit à l'intérieur d'une cellule pour fournir l'antigène in situ. L'un quelconque des antigènes polypeptidiques décrits ci-dessus, approprié pour être inclus dans les vaccins ou les compositions immunogènes selon l'invention, peut être exprimé sous la forme d'une molécule d'ARN à auto-réplication codant pour ledit antigène, comme décrit dans le document WO 12/006 376 qui est incorporé à la présente à titre de référence. Par conséquent, dans des modes de réalisation particuliers où les antigènes dans les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention sont des polypeptides, de tels polypeptides sont codés par un ARN à auto-réplication. Dans une telle situation, ledit ARN à auto-réplication est couplé de manière appropriée à un système de distribution, en particulier des systèmes de distribution à base de lipides, comme une nano-émulsion cationique (CNE), ou un liposome. De manière appropriée, quand le système à base de lipides est une CNE, l'ARN à auto-réplication est absorbé sur la surface externe de la CNE, alors que quand ledit système à base de lipides est un liposome, l'ARN à auto-amplification est encapsulé dans le liposome.

Par « molécule d'ARN à auto-réplication » (ou « ARN à auto-amplification ») , il est signifié que, quand il est administré à une cellule de vertébré, même sans aucune protéine, la molécule conduit à la production de multiple ARN fils par transcription à partir de lui-même, comme expliqué dans le document WO 12/006 376, ce qui aboutit finalement à l'expression de l'antigène codé qui devient un polypeptide majeur des cellules.

Un système approprié pour obtenir une autoréplication de cette manière consiste à utiliser un réplicon à base d'alphavirus, comme décrit en détail dans le document WO 12/006 376. De manière appropriée, ledit réplicon code pour (i) une ARN polymérase ARN dépendante qui peut transcrire un ARN à partir de la molécule d'ARN à auto-réplication et (ii) un antigène d'intérêt. La polymérase peut être une réplicase d'alphavirus, comprenant par exemple une ou plusieurs protéines nsPl, nsP2, nsP3 et nsP4 d'alphavirus. Des caractéristiques appropriées de molécules d'ARN à autoréplication et des procédés pour les préparer sont également décrits dans le document WO 12/006 376.

Dans certains modes de réalisation, les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans la présente invention comprennent un liposome et un ARN à auto-réplication codant pour l'un quelconque des antigènes polypeptidiques décrits dans le présent document encapsulé dans le liposome. Dans des modes de réalisation supplémentaires, les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans la présente invention comprennent une CNE et un ARN à auto-réplication codant pour l'un quelconque des antigènes polypeptidiques décrits dans le présent document absorbé sur la surface externe de la CNE. Dans des modes de réalisation particuliers, la molécule d'ARN à auto-réplication code pour des antigènes polypeptidiques dérivés du groupe constitué par : HCMV, RSV and VIH.

Des exemples de CNE pouvant être utilisées dans la présente invention, ainsi que des procédés pour les préparer, sont décrits dans le document WO 12/006 380 qui est incorporé à la présente à titre de référence.

Divers lipides amphiphiles peuvent former des bicouches dans un environnement aqueux pour encapsuler un noyau aqueux contenant un ARN sous la forme d'un liposome. Ces lipides peuvent avoir un groupe de tête hydrophile anionique, cationique ou zwitterionique. Certains phospholipides sont anioniques, tandis que d'autres sont zwitterioniques et d'autres sont cationiques. Les classes appropriées de phospholipides comprennent, mais sans s'y limiter, les phosphatidyl-éthanolamines, les phosphatidylcholines, les phosphatidylsérines et les phosphatidylglycérols. Des lipides cationiques utiles comprennent, mais sans s'y limiter, le dioléoyl triméthylammonium propane (DOTAP), le 1,2-distéaryloxy-N,N-diméthyl-3-aminopropane (DSDMA), le 1,2-dioléyloxy-N,N-diméthyl-3-aminopropane (DODMA), le 1,2-dilinoléyloxy-N,N-diméthyl-3-aminopropane (DLinDMA), le 1,2-dilinolényloxy-N,N-diméthyl-3-amino-propane (DLenDMA). D'autres lipides cationiques utiles sont décrits dans le document WO 15/095 340, par exemple les lipides revendiqués dans l'une quelconque des revendications 1 à 8 du document WO 15/095 340 incorporé à la présente à titre de référence. Les lipides zwitterioniques comprennent, mais sans s'y limiter, les lipides zwitterioniques de type acyle et les lipides zwitterioniques de type éther. Des exemples de lipides zwitterioniques utiles sont le DPPC, le DOPC et la dodécylphosphocholine. Les particules liposomiques de l'invention peuvent être formées à partir d'un unique lipide ou à partir d'un mélange de lipides. Un mélange peut comprendre (i) un mélange de lipides anioniques, (ii) un mélange de lipides cationiques, (iii) un mélange de lipides zwitterioniques, (iv) un mélange de lipides anioniques et de lipides cationiques, (v) un mélange de lipides anioniques et de lipides zwitterioniques, (vi) un mélange de lipides zwitterioniques et de lipides cationiques ou (vii) un mélange de lipides anioniques, de lipides cationiques et de lipides zwitterioniques. Quand un mélange de lipides est utilisé, il n'est pas nécessaire que tous les composants lipidiques du mélange soient amphiphiles, par exemple un ou plusieurs lipides amphiphiles peuvent être mélangés avec du cholestérol. La partie hydrophile d'un lipide peut être PEGylée (c'est-à-dire, modifiée par la fixation covalente d'un polyéthylène glycol). Cette modification peut augmenter la stabilité et empêcher une adsorption non spécifique des liposomes. Les particules liposomiques sont habituellement divisées en trois groupes : les vésicules multilamellaires (MLV) ; les petites vésicules unilamellaires (SUV) ; et les grosses vésicules unilamellaires (LUV) . Les MLV ont de multiples bicouches dans chaque vésicule, en formant plusieurs compartiments aqueux séparés. Les SUV et les LUV ont une unique bicouche encapsulant un noyau aqueux ; les SUV ont généralement un diamètre U 50 nm et les LUV ont un diamètre > 50 nm. Les particules liposomiques utiles dans cet aspect de l'invention sont idéalement des LUV ayant un diamètre situé dans la plage allant de 50 à 220 nm. Des techniques de préparation de liposomes appropriés sont bien connues dans l'art. Un procédé utile est décrit dans Jeffs et al. (Pharmaceutical Research, 2005, 22(3) : 362-372) et implique le mélange (i) d'une solution éthanolique des lipides, (ii) d'une solution aqueuse de l'acide nucléique et (iii) d'un tampon, ce qui est suivi d'un mélange, d'un équilibrage, d'une dilution et d'une purification.

Vecteurs viraux

En variante, une immunisation par acide nucléique peut être réalisée en utilisant un vecteur capable de se répliquer ou incapable de se répliquer, tel qu'un vecteur viral. De nombreux vecteurs viraux appropriés pour introduire des acides nucléiques codant pour des antigènes d'intérêt dans un sujet sont connus dans l'art, et comprennent à la fois les virus à ADN et à ARN. Des exemples appropriés sont : les vecteurs adénoviraux (capables de se répliquer ou incapables de se répliquer), les vecteurs à base de poxvirus, notamment les vecteurs à base du virus de la vaccine, tels que le virus Ankara de la vaccine (MVA) modifié, le NYVAC, les vecteurs à base d'avipox, le virus de la variole du canari (ALVAC) et le virus de la variole aviaire (FPV), les vecteurs à base d'alphavirus (comme le virus Sindbis, les virus de la forêt de Semliki, le virus de la rivière Ross, et le virus de l'encéphalite équine du Venezuela) et leurs chimères et leurs réplicons, les vecteurs à base d'un virus de l'herpès (par exemple, les vecteurs dérivés de cytomégalovirus), les vecteurs à base d'arénavirus, comme le virus de la chorioméningite lymphocytaire (LCMV), un rétrovirus, un lentivirus, les particules pseudo-virales, et de nombreux autres. Dans un mode de réalisation, l'antigène polypeptidique dans les vaccins ou les compositions immunogènes destinés à être utilisés dans la présente invention est codé par un vecteur adénoviral. Dans des modes de réalisation particuliers, l'antigène polypeptidique codé par un vecteur adénoviral dérive du VIH, du paludisme, d'Ebola ou du RSV. La production et l'utilisation de vecteurs adénoviraux sont bien connues de l'homme du métier. Des exemples appropriés de description de la conception, de la production et de l'utilisation de vecteurs adénoviraux peuvent être trouvés, par exemple, dans les documents WO 05/071 093 et WO 10/086 189, qui sont incorporés à la présente à titre de référence. Les vecteurs adénoviraux utilisables dans la présente invention peuvent provenir de divers hôtes mammifères. Les vecteurs adénoviraux peuvent provenir d'un adénovirus humain. Des exemples de tels adénovirus humains sont Adl, Ad2, Ad4, Ad5, Ad6, Adll, Ad24, Ad34, Ad35, en particulier Ad5, Adll et Ad35.

En variante, les vecteurs adénoviraux peuvent provenir d'un adénovirus de primate non humain, par exemple un adénovirus de chimpanzé, comme un choisi parmi les sérotypes ChAd3, ChAd63, ChAd83, ChAdl55, Pan5, Pan6, Pan7 et Pan9. Plus précisément, le virus peut être un adénovirus non humain, comme un adénovirus simien et, en particulier, un adénovirus de chimpanzé, comme ChAdl55, Pan 5, 6, 7 ou 9. Des exemples de telles souches sont donnés dans le document WO 03/000 283, qui est incorporé à la présente à titre de référence, et sont disponibles auprès de l'American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, Virginie 20110-2209, et d'autres sources. Des souches souhaitables d'adénovirus de chimpanzé comprennent Pan 5 [ATCC VR-591], Pan 6 [ATCC VR-592] et Pan 7 [ATCC VR-593] .

Les vecteurs adénoviraux utilisables dans la présente invention peuvent provenir d'un adénovirus incapable de se répliquer, par exemple, comprenant une délétion El fonctionnelle. Les vecteurs adénoviraux utilisables dans la présente invention comprennent PanAd3 (document WO 10/086 189) et ChAdl55 (document GB 1 510 357.5) . Dans certains modes de réalisation, l'antigène des vaccins ou des compositions immunogènes destinés à être utilisés dans l'invention est exprimé de manière recombinante dans le vecteur adénoviral ChAdl55. Dans des modes de réalisation particuliers, le vecteur adénoviral ChAdl55 code au moins un antigène dérivé du virus respiratoire syncytial (RSV), en particulier l'un quelconque des antigènes polypeptidiques du RSV décrits ci-dessus. Les vecteurs adénoviraux peuvent être produits par n'importe quelle lignée cellulaire appropriée dans laquelle le virus est capable de se répliquer. Sans s'y limiter, une telle lignée cellulaire peut être choisie parmi les cellules HeLa [numéro d'accès ATCC CCL 2], A549 [numéro d'accès ATCC CCL 185], HEK 293, KB [CCL 17], Detroit [par exemple, Detroit 510, CCL 72] et WI-38 [CCL 75], entre autres.

Adjuvants

Les vaccins et les compositions immunogènes de l'invention peuvent également comprendre un adjuvant en plus de l'antigène. Des adjuvants sont utilisés dans les vaccins afin de renforcer et de moduler la réponse immunitaire dirigée contre l'antigène. Cependant, les adjuvants peuvent induire une réactogénicité accrue et, dans ces modes de réalisation particuliers, les vaccins et les compositions immunogènes de l'invention comprennent un adjuvant. Les adjuvants décrits ci-dessous dans le présent document peuvent être combinés avec l'un quelconque des antigènes décrits ci-dessus dans le présent document. L'adjuvant peut être n'importe quel adjuvant connu de l'homme du métier, mais des adjuvants comprennent (mais sans s'y limiter) les émulsions huile-dans-eau (par exemple, MF59 ou AS03), les liposomes, les saponines, les agonistes de TLR2, les agonistes de TLR3, les agonistes de TLR4, les agonistes de TLR5, les agonistes de TLR6, les agonistes de TLR7, les agonistes de TLR8, les agonistes de TLR9, les sels d'aluminium, les nanoparticules, les microparticules, les ISCOM, le fluorure de calcium et les composites de composés organiques ou leurs combinaisons.

Emulsions huile-dans-eau

Dans un mode de réalisation de la présente invention, il est proposé un vaccin ou une composition immunogène destiné à être utilisé dans l'invention comprenant une émulsion huile-dans-eau. Les émulsions huile-dans-eau de la présente invention comprennent une huile métabolisable et un agent émulsifiant. Pour qu'une composition huile-dans-eau quelconque soit appropriée pour une administration humaine, la phase huileuse du système d'émulsion doit comprendre une huile métabolisable. La signification du terme huile métabolisable est bien connue dans l'art. Métabolisable peut être défini par « étant capable d'être transformé par le métabolisme » (Dorland's Illustrated Medical Dictionary, W.B. Sanders Company, 25ème édition, 1974). Une huile métabolisable particulièrement appropriée est le squalène. Le squalène (2,6,10,15,19,23-hexaméthyl-2,6,10,14,18,22-tétracosahexaène) est une huile insaturée que l'on trouve en grande quantité dans l'huile de foie de requin, et en plus petites quantités dans l'huile d'olive, l'huile de germe de blé, l'huile de son de riz et les levures, et est une huile particulièrement préférée pour une utilisation dans une émulsion huile-dans-eau de l'invention. Le squalène est une huile métabolisable en vertu du fait que c'est un intermédiaire dans la biosynthèse du cholestérol (Merck index, lOème Edition, entrée no. 8619). Dans certains modes de réalisation, dans lesquels les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent une émulsion huile-dans-eau, l'huile métabolisable est présente dans le vaccin ou dans la composition immunogène en une quantité de 0,5% à 10% (en volume/volume) du volume total de la composition. L'émulsion huile-dans-eau comprend en outre un agent émulsifiant. De manière appropriée, l'agent émulsifiant peut être un monooléate de sorbinate polyoxyéthyléné (POLYSORBATE 80). En outre, ledit agent émulsifiant est présent de manière appropriée dans le vaccin ou la composition immunogène en une quantité de 0,125 to 4 % (en volume/volume) du volume total de la composition. L'émulsion huile-dans-eau peut comprendre facultativement un tocol. Les tocols sont bien connus dans l'art et sont décrits dans le document EP 0 382 271 B1. De manière appropriée, le tocol peut être 1'alpha-tocophérol ou un dérivé de celui-ci, comme le succinate d'alpha-tocophérol (également connu sous le nom de succinate de vitamine E) . Ledit tocol est présent de manière appropriée dans la composition d'adjuvant en une quantité de 0,25 % à 10 % (en volume/volume) du volume total de la composition immunogène. L'émulsion huile-dans-eau peut également comprendre facultativement du trioléate de sorbitane (SPAN 85).

Le procédé de production des émulsions huile-dans-eau est bien connu de l'homme du métier. Généralement, le procédé comprend le mélange de la phase huileuse (comprenant facultativement un tocol) avec un tensioactif, tel qu'une solution de PBS/TWEEN8 0™, ce qui est suivi d'une homogénéisation au moyen d'un homogénéisateur, il sera évident pour l'homme du métier qu'un procédé comprenant le passage du mélange deux fois à travers l'aiguille d'une seringue est approprié pour homogénéiser de petits volumes de liquide. De même, le procédé d'émulsification dans un microfluidiseur (machine M110S Microfluidics, maximum de 50 passages, pendant une période de 2 minutes à une pression maximale d'entrée de 6 bar (pression de sortie d'environ 850 bar) peut être adapté par l'homme du métier pour produire des volumes plus petits ou plus importants d'émulsion. L'adaptation peut être réalisée par une expérimentation de routine comprenant la mesure de l'émulsion résultante jusqu'à ce qu'il soit obtenu une préparation ayant des gouttelettes d'huile de diamètre requis.

Dans une émulsion huile-dans-eau, l'huile et l'émulsifiant doivent être dans un support aqueux. Le support aqueux peut être, par exemple, une solution saline tamponnée au phosphate ou une solution de citrate.

En particulier, les systèmes d'émulsion huile-dans-eau utilisés dans la présente invention présentent une petite taille de gouttelette d'huile de l'ordre du sous-micron. De manière appropriée, les tailles des gouttelettes seront dans la plage allant de 120 à 750 nm, plus particulièrement des diamètres allant de 120 à 600 nm. Encore plus particulièrement, l'émulsion huile-dans-eau contient des gouttelettes d'huile parmi lesquelles au moins 70 % en termes d'intensité ont un diamètre inférieur à 500 nm, plus particulièrement au moins 80 % en termes d'intensité ont un diamètre inférieur à 300 nm, plus particulièrement au moins 90 % en termes d'intensité ont un diamètre situé dans la plage allant de 120 à 200 nm.

La taille des gouttelettes d'huile, c'est-à-dire le diamètre, selon la présente invention est donnée en termes d'intensité. Il existe plusieurs manières pour déterminer le diamètre de la taille des gouttelettes huile par intensité. L'intensité est mesurée en utilisant un instrument de dimensionnement, de manière appropriée par diffusion dynamique de la lumière, comme le Malvern Zetasizer 4000 ou, de préférence, le Malvern Zetasizer 3000HS. Une première possibilité consiste à déterminer le diamètre moyen z (ZAD) par diffusion dynamique de la lumière (spectroscopie de corrélation photonique-PCS) ; ce procédé donne en plus l'indice de polydispersité (PDI), et à la fois le ZAD et le PDI sont calculés avec l'algorithme des cumulants. Il n'est pas nécessaire de connaître l'indice de réfraction des particules pour obtenir ces valeurs. Un second moyen consiste à calculer le diamètre de la gouttelette d'huile en déterminant la répartition des tailles de toutes les particules grâce à un autre algorithme, soit le Contin, ou NNLS, soit l'algorithme « Malvern » automatique (l'algorithme par défaut fourni par l'instrument de dimensionnement). La plupart du temps, comme l'indice de réfraction des particules d'une composition complexe est inconnu, seule la répartition des intensités est prise en compte, et si nécessaire les moyens d'intensité provenant de cette répartition.

ISCOM

Dans certains modes de réalisation de la présente invention, il est fourni des vaccins ou des compositions immunogènes de l'invention comprenant des ISCOM. Les ISCOM sont bien connus dans l'art (voir Kersten & Crommelin, 1995, Biochimica et Biophysica Acta 1241 : 117-138) . Les ISCOM comprennent une saponine, du cholestérol et des phospholipides et forment une structure de type cage ouverte ayant généralement une taille de 40 nm. Les ISCOM résultent de l'interaction entre des saponines, le cholestérol et d'autres phospholipides. Un mélange réactionnel classique pour la préparation d'un ISCOM est 5 mg/ml de saponine et 1 mg/ml pour chacun parmi le cholestérol et le phospholipide. Des Phospholipides appropriés pour être utilisé dans les ISCOM comprennent, mais sans s'y limiter, une phosphocholine (didécanoyl-L-a- phosphatidylcholine [DDPC], dilauroylphosphatidyl-choline [DLPC], dimyristoylphosphatidylcholine [DMPC], dipalmitoyl phosphatidylcholine [DPPC] , distéaroyl phosphatidylcholine [DSPC], dioléoyl phosphatidylcholine [DOPC], 1-palmitoyl, 2-oléoylphosphatidyl-choline [POPC], Diélaïdoyl phosphatidylcholine [DEPC]), un phosphoglycérol (1,2-dimyristoyl-sn-glycéro-3-phosphoglycérol [DMPG], 1,2-dipalmitoyl-sn-glycéro-3- phosphoglycérol [DPPG], 1,2-distéaroyl-sn-glycéro-3- phosphoglycérol [DSPG], l-palmitoyl-2-oléoyl-sn- glycéro-3-phosphoglycérol [POPG]), un acide phosphatidique (acide 1,2-dimyristoyl-sn-glycéro-3-phosphatidique [DMPA], acide dipalmitoyl phosphatidique [DPPA], acide distéaroyl-phosphatidique [DSPA]), une phosphoéthanolamine (1,2-dimyristoyl-sn-glycéro-3- phosphoéthanolamine [DMPE], 1,2-dipalmitoyl-sn-glycéro- 3-phosphoéthanolamine [DPPE], 1,2-distéaroyl-sn- glycéro-3-phosphoéthanolamine DSPE 1,2-dioléoyl-sn-glycéro-3-phosphoéthanolamine [DOPE]), une phoshosérine, un polyéthylène glycol [PEG] un phospholipide (mPEG-phospholipide, polyglycérine-phospholipide, phospholipide fonctionnalisé, phosholipide à extrémité activé). Dans des modes de réalisation particuliers, les ISCOM comprennent la l-palmitoyl-2-oléoyl-glycéro-3-phosphoéthanolamine. Dans des modes de réalisation particuliers supplémentaires, une phosphatidylcholine hautement purifiée est utilisée et peut être choisie dans le groupe constitué par : une phosphatidylcholine (d'œuf), une phosphatidylcholine hydrogénée (d'œuf) une phosphatidylcholine (de soja), une phosphatidylcholine hydrogénée (de soja). Dans des modes de réalisation particuliers supplémentaires, les ISCOM comprennent la phosphatidyléthanolamine [POPE] ou un dérivé de celle-ci . Un certain nombre de saponines sont appropriées pour être utilisées dans les ISCOM. L'activité adjuvante et hémolytique de saponines individuelles a été étudiée dans l'art de manière approfondie. Par exemple, le Quil A (dérivé de l'écorce de l'arbre Quillaja Saponaria Molina d'Amérique du Sud), et ses fractions, sont décrits dans le document US 5 057 540 et dans « Saponins as vaccine adjuvants », Kensil, C.R., Crit Rev Cher Drug Carrier Syst, 1996, 12 (1-2) : 1-55 ; et le document EP 0 362 279 Bl. Des ISCOM comprenant des fractions de Quil A ont été utilisés dans la préparation de vaccins (document EP 0 109 942 Bl). Il a été rapporté que ces structures ont une activité adjuvante (documents EP 0 109 942 Bl ; WO 96/11 711) . Les fractions de Quil A, les dérivés du Quil A et/ou leurs combinaisons sont des préparations appropriées de saponines pour une utilisation dans les ISCOM. Les saponines hémolytiques QS21 et QS17 (fractions de Quil A purifiées par CLHP) ont été décrites comme étant des adjuvants puissants, et leur procédé de production est décrit dans les documents US 5 057 540 et EP 0 362 279 Bl. Il est également décrit dans ces références l'utilisation du QS7 (une fraction non hémolytique du Quil A) qui joue le rôle d'adjuvant puissant pour les vaccins systémiques. L'utilisation du QS21 est décrite en outre dans Kensil et al. (1991. J. Immunology vol 146, 431-437). Des combinaisons de QS21 et de polysorbate ou de cyclodextrine sont également connues (document WO 99/10 008). Des systèmes d'adjuvants particulaires comprenant des fractions de QuilA, comme QS21 et QS7, sont décrits dans les documents WO 96/33 739 et WO 96/11 711, et ceux-ci sont incorporés à la présente. D'autres fractions particulières du QuilA appelées QH-A, QH-B, QH-C, et un mélange de QH-A et de QH-C appelé QH-703 sont divulgués dans le document WO 96/011 711 sous la forme d'ISCOM et sont incorporés à la présente.

Microparticules

Dans certains modes de réalisation de la présente invention, il est fourni un vaccin ou une composition immunogène de l'invention comprenant des microparticules. Des microparticules, des compositions comprenant des microparticules et des procédés de production de microparticules sont bien connus dans l'art (voir Singh et al. [2007 Expert Rev. Vaccines 6(5) : 797-808] et le document WO 98/033 487). Le terme « microparticule », tel qu'utilisé dans le présent document, fait référence à une particule d'environ 10 nm à environ 10 000 pm de diamètre ou de longueur, dérivée de matériaux polymères présentant divers poids moléculaires et, dans le cas des copolymères tels que le PLG, divers rapports lactide/glycolide. En particulier, les microparticules auront un diamètre permettant une administration parentérale sans que les aiguilles et les capillaires se bouchent. Les microparticules sont également connues sous le nom de microsphères. La taille d'une microparticule est facilement déterminée grâce à des techniques bien connues dans l'art, comme la spectroscopie de corrélation photonique, la diffractométrie laser et/ou la microscopie électronique à balayage. Les microparticules utilisables ici seront formées à partir de matériaux qui sont stérilisables, non toxiques et biodégradables. De tels matériaux comprennent, mais sans s'y limiter, un poly(a-hydroxyacide), un poly(acide hydroxybutyrique) , une polycaprolactone, un polyorthoester, un polyanhydride.

Liposomes

Dans certains modes de réalisation de la présente invention, il est fourni un vaccin ou une composition immunogène de l'invention comprenant des liposomes. Le terme « liposomes » fait référence, d'une manière générale, à des structures lipidiques uni- ou multilamellaires (en particulier, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 lamelles en fonction du nombre de membranes lipidiques formées) renfermant une partie interne aqueuse. Les liposomes et les formulations de liposomes sont bien connus dans l'art. Les lipides, qui sont capables de former des liposomes, comprennent toutes les substances ayant les propriétés des graisses ou des propriétés ressemblant aux graisses. Les lipides pouvant constituer les lipides dans les liposomes peuvent être choisis dans le groupe constitué par les glycérides, les glycérophospholipides, les glycéro-phosphinolipides, les glycérophosphonolipides, les sulfolipides, les sphingolipides, les phospholipides, les isoprénolides, les stéroïdes, les stéarines, les stérols, les archéolipides, les lipides cationiques de synthèse et les lipides contenant des glucides. La taille des liposomes peut varier de 30 nm à plusieurs pm en fonction de la composition des phospholipides et du procédé utilisé pour la préparation. Dans des modes de réalisation particuliers de l'invention, la taille des liposomes sera située dans la plage allant de 50 nm à 500 nm, et dans d'autres modes de réalisation, de 50 nm à 200 nm. La diffusion dynamique de la lumière laser est un procédé utilisé pour mesurer la taille des liposomes qui est bien connu de l'homme du métier. Les liposomes contiennent de manière appropriée un lipide neutre, par exemple une phosphatidylcholine, qui est de manière appropriée non cristalline à température ambiante, par exemple la phosphatidylcholine du jaune d'œuf, la dioléoyl phosphatidylcholine (DOPC) ou la dilauryl phosphatidylcholine. Dans un mode de réalisation particulier, les liposomes de la présente invention contiennent de la DOPC. Les liposomes peuvent également contenir un lipide chargé qui augmente la stabilité de la structure liposome-saponine pour les liposomes composés de lipides saturés. Dans ce cas, la quantité de lipide chargé est de manière appropriée de 1 à 20 % (en poids/poids) , de préférence de 5 à 10 %. Le rapport stérol sur phospholipide est de 1 à 50 % (en mole/mole) , de manière appropriée de 20 à 25 % (en mole/mole).

Saponines

Dans certains modes de réalisation de l'invention, le vaccin ou la composition immunogène de l'invention comprend une saponine. Une saponine particulièrement appropriée pour être utilisée dans la présente invention est le Quil A et ses dérivés. Le Quil A est une préparation de saponines isolée à partir de l'arbre Quillaja Saponaria Molina d'Amérique du Sud, et son activité adjuvante a été décrite pour la première fois par Dalsgaard et al. en 1974 (« Saponin adjuvants », Archiv. für die gesamte Virusfoischung, Vol. 44, Springer Verlag, Berlin, p 243-254). Il a été isolé par CLHP des fragments purifiés du Quil A conservant l'activité adjuvante sans la toxicité associée au Quil A (document EP 0 362 278), par exemple QS7 et QS21 (également connus sous le nom de QA7 et QA21). Le QS-21 est une saponine naturelle dérivée de l'écorce du Quillaja saponaria Molina, qui induit les lymphocytes T cytotoxiques CD8+ (CTL) , les lymphocytes Thl et une réponse prédominante de type anticorps IgG2a, et est une saponine particulière dans le contexte de la présente invention. L'adjuvant de type saponine dans les compositions immunogènes de l'invention est, en particulier, une fraction immunologiquement active du Quil A, comme QS-7 ou QS-21, de manière appropriée QS-21. Dans des modes de réalisation particuliers, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention contiennent la fraction de saponine immunologiquement active sous une forme sensiblement pure. En particulier, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention contiennent le QS-21 sous une forme sensiblement pure, c'est-à-dire que le QS21 est pur à au moins 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, par exemple pur à au moins 95 %, ou pur à au moins 98 %.

Dans un mode de réalisation particulier, le QS21 est avec un stérol exogène, comme le cholestérol par exemple. Des stérols appropriés comprennent le β-sitostérol, le stigmastérol, l'ergostérol, l'ergocalciférol et le cholestérol. Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, la composition d'adjuvant comprend du cholestérol en tant que stérol. Ces stérols sont bien connus dans l'art, par exemple le cholestérol est décrit dans le Merck Index, llème Edition, page 341, en tant que stérol d'origine naturelle que l'on trouve dans les graisses animales.

Dans un mode de réalisation, les liposomes de l'invention qui comprennent une saponine contiennent de manière appropriée un lipide neutre, par exemple une phosphatidylcholine, qui est de manière appropriée non cristalline à température ambiante, par exemple la phosphatidylcholine du jaune d'œuf, la dioléoyl phosphatidylcholine (DOPC) ou la dilauryl phosphatidylcholine. Les liposomes peuvent également contenir un lipide chargé qui augmente la stabilité de la structure liposome-QS21 pour les liposomes composés de lipides saturés. Dans ce cas, la quantité de lipide chargé est de manière appropriée de 1 à 20 % (en poids/poids) , en particulier de 5 à 10 % (en poids/poids) . Le rapport stérol sur phospholipide est de 1 à 50 % (en mole/mole), de manière appropriée de 20 à 25 % (en mole/mole).

Quand la fraction de saponine active est QS21, le rapport QS21/stérol est généralement de l'ordre de 1/100 à 1/1 (en poids/poids), de manière appropriée entre 1/10 à 1/1 (en poids/poids), et de préférence de 1/5 à 1/1 (en poids/poids) . De manière appropriée, un excès de stérol est présent, le rapport QS21/stérol étant d'au moins 1/2 (en poids/poids). Dans un mode de réalisation, le rapport QS21/stérol est de 1/5 (en poids/poids). De manière appropriée, le stérol est le cholestérol. D'autres saponines utiles proviennent des plantes Aesculus hippocastanum ou Gyophilla struthium. D'autres saponines qui ont été décrites dans la littérature comprennent l'escine, qui a été décrite dans le Merck index (12ème Edition : entrée 3737) en tant que mélange de saponines se trouvant dans les graines du marronnier d'Inde, Lat : Aesculus hippocastanum. Son isolement est décrit par chromatographie et purification (Fiedler, Arzneimittel-Forsch. 4, 213 (1953)), et au moyen de résines échangeuses d'ions (Erbring et al., document US 3 238 190). Des fractions d'escine ont été purifiées et se sont avérées être biologiquement actives (Yoshikawa et al., 1996, Chem Pharm Bull (Tokyo), 44(8) : 1454-1464). La sapoalbine issue de Gypsophilla struthium (R. Vochten et al., 1968, J. Pharm. Belg. 42 : p 213-226) a également été décrite en relation avec la production des ISCOM, par exemple.

Une saponine, comme QS21, peut être utilisée en des quantités situées entre 1 et 100 pm par dose humaine de la composition d'adjuvant. Le QS21 peut être utilisé à un taux d'environ 50 pg, par exemple entre 40 et 60 pg, de manière appropriée entre 45 et 55 pg ou entre 49 et 51 pg, ou de 50 pg. Dans un mode de réalisation supplémentaire, la dose humaine de la composition d'adjuvant comprend du QS21 à un taux d'environ 25 pg, par exemple entre 20 et 30 pg, de manière appropriée entre 21 et 29 pg ou entre 22 et 28 pg ou entre 28 et 27 pg ou entre 24 et 26 pg, ou de 25 pg.

Agoniste de TLR4

Dans certains modes de réalisation, le vaccin ou la composition immunogène de l'invention comprend un agoniste de TLR4. Par « agoniste de TLR », on entend un composant qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire d'une voie de signalisation de TLR, soit sous la forme d'un ligand direct, soit indirectement par l'intermédiaire de la génération d'un ligand endogène ou exogène (Sabroe et al., 2003, JIp 1630-5). Un agoniste de TLR4 est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire d'une voie de signalisation de TLR4. Un exemple approprié d'agoniste de TLR4 est un lipopolysaccharide, de manière appropriée un dérivé non toxique du lipide A, en particulier le lipide A monophosphorylé, ou plus particulièrement le lipide A monophosphorylé 3-désacylé (3D-MPL).

Le 3D-MPL est vendu sous le nom de MPL par GlaxoSmithKline Biologicals et est appelé MPL ou 3D-MPL dans tout le document. Voir, par exemple, les documents US 4 436 727 ; US 4 877 611 ; US 4 866 034 et US 4 912 094. Le 3D-MPL favorise principalement les réponses de type lymphocytes T CD4+ avec un phénotype IFN-y (Thl) . Le 3D-MPL peut être produit selon les procédés décrits dans le document GB 2 220 211 A. Sur le plan chimique, c'est un mélange de lipide A monophosphorylé 3-désacylé avec 4, 5 ou 6 chaînes acylées. Dans la composition de la présente invention, de petites particules de 3D-MPL peuvent être utilisées pour préparer la composition adjuvante aqueuse. Le 3D-MPL sous forme de petites particules présente une taille de particule telle qu'il peut être stérilisé par filtration à travers un filtre de 0,22 pm. De telles préparations sont décrites dans le document WO 94/21 292. De préférence, du 3D-MPL pulvérulent est utilisé pour préparer les compositions adjuvantes aqueuses de la présente invention. D'autres agonistes de TLR4 pouvant être utilisés sont les glucosaminide phosphates d'alkyle (AGP), comme ceux divulgués dans le document WO 98/50 399 ou le document US No. 6 303 347 (des procédés de préparation d'AGP sont également divulgués), de manière appropriée RC527 ou RC529 ou des sels pharmaceutiquement acceptables d'AGP comme divulgué dans le document US No. 6 764 840. D'autres agonistes appropriés de TLR-4 sont décrits dans les documents WO 03/011 223 et WO 03/099 195, comme le composé I, le composé II et le composé III décrits aux pages 4 et 5 du document WO 03/011 223 ou aux pages 3 et 4 du document WO 03/099 195, et en particulier les composés divulgués dans le document WO 03/011 223, comme ER803022, ER803058, ER803732, ER804053, ER804057m ER804058, ER804059, ER804442, ER804680 et ER804764. Par exemple, un agoniste approprié de TLR-4 est ER804057.

Un agoniste de TLR4, tel qu'un lipopolysaccharide, comme le 3D-MPL, peut être utilisé en une quantité située entre 1 et 100 pg par dose humaine de la composition adjuvante. Le 3D-MPL peut être utilisé à un taux d'environ 50 pg, par exemple entre 40 et 60 pg, de manière appropriée entre 45 et 55 pg ou entre 49 et 51 pg ou 50 pg. Dans un autre mode de réalisation, la dose humaine de la composition adjuvante comprend du 3D-MPL à un taux d'environ 25 pg, par exemple entre 20 et 30 pg, de manière appropriée entre 21 et 29 pg ou entre 22 et 28 pg ou entre 28 et 27 pg ou entre 24 et 26 pg, ou 25 pg.

Des dérivés synthétiques du lipide A sont connus et semblent être des agonistes de TLR 4, comme, mais sans s'y limiter : 1'OM174, (2-désoxy-6-o-[2-désoxy-2-[(R)-3- dodécanoyloxytétra-décanoylamino]-4-o-phosphono^-D-glucopyranosyl ] -2- [ (R) -3-hydroxytétradécanoylamino] -a-D-glucopyranosyldihydrogénophosphate) (WO 95/14 026) l'OM 294 DP, (3S, 9R)-3-[(R)-dodécanoyloxytétra- décanoylamino]-4-oxo-5-aza-9(R)-[(R)-3-hydroxytétradécanoylamino] décan-1,10-diol,1,10-bis(dihydrogéno-phosphate) (WO 99/64 301 et WO 00/0 462) l'OM 197 MP-Ac DP, (3S, 9R)-3-[(R)-dodécanoyl- oxytétradécanoylamino]-4-oxo-5-aza-9-[(R)-3-hydroxytétra-décanoylamino]décan-1,10-diol, 1- dihydrogénophosphate 10-(6-aminohexanoate) (WO 01/46 127). D'autres ligands de TLR-4 capables d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-4 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) sont, par exemple, un lipopolysaccharide issu d'une bactérie à Gram négatif et ses dérivés, ou des fragments de ceux-ci, en particulier un dérivé non toxique de LPS (comme le 3D-MPL). D'autres agonistes appropriés de TLR sont : la protéine de choc thermique (HSP) 10, 60, 65, 70, 75 ou 90 ; la protéine tensioactive A, les oligosaccharides d'hyaluronane, les fragments de sulfate d'héparane, les fragments de fibronectine, les peptides du fibrinogène et la b-défensine-2, le muramyl dipeptide (MDP) ou la protéine F du virus respiratoire syncytial (RSV). Dans un mode de réalisation, l'agoniste de TLR est HSP 60, 70 ou 90.

Agonistes de TLR

Plutôt qu'un agoniste de TLR4, d'autres agonistes naturelles ou synthétiques des molécules de TLR peuvent être utilisés dans les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention. Ceux-ci comprennent, mais sans s'y limiter, les agonistes de TLR2, TLR3, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8 et TLR9.

Dans un mode de réalisation de la présente invention, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-1 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5). De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-1 est choisi parmi : les lipopeptides (LP) triacylés ; la moduline soluble dans le phénol ; un LP de Mycobacterium tuberculosis ; le LP trichlorhydrate de S-(2,3-bis(palmitoyloxy)-(2-RS)-propyl)-N-palmitoyl-(R)-Cys-(S)-Ser-(S)-Lys(4)-OH (Pam3Cys) qui mime l'extrémité N-terminale acylée d'une lipoprotéine bactérienne et le LP OspA de Borrelia burgdorfei.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-2 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-2 est un ou plusieurs parmi une lipoprotéine, un peptidoglycane, un lipopeptide bactérien issu de M. tuberculosis, B. burgdorferi, T. pallidum, des peptidoglycanes issus d'espèces telles que Staphylococcus aureus, des acides lipotéichoïques, des acides mannuroniques, des porines de Neisseria, des fimbriae bactériens, des facteurs de virulence de Yersinia, des virions de CMV, 1'hémagglutinine de la rougeole et le zymosan de levure.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-3 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-3 est un ARN double brin (ARNdb) ou un acide polyinosinique-polycytidylique (poly IC), un profil d'acides nucléiques moléculaires associé à une infection virale.

Dans un mode de réalisation alternatif, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-5 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-5 est une flagelline bactérienne. Ledit agoniste de TLR-5 peut être une flagelline ou peut être un fragment de flagelline qui conserve l'activité agoniste de TLR-5. La flagelline peut comprendre un polypeptide choisi dans le groupe constitué par H. pylorl ; S. typhimurium, V. cholera, S. marcesens, S. flexneri, T. pallidum, L. pneumophilia, B. hurgdorferei ; C. difficile , R. meliloti, A. tumefaciens ; R. lupine ; B. clarridgeiae, P. mirabilis , B. subtilus, L moncytogenes, P. aeruginoa et E. coli.

Dans un mode de réalisation particulier, la flagelline est choisie dans le groupe constitué par la flagelline B de S. typhimurium (numéro d'accès Genbank AF045151), un fragment de la flagelline B de S. typhimurium, le FliC d'E. coli (numéro d'accès

Genbank AB028476) ; un fragment de FliC d'E. coli ; la flagelline FliC de S. typhimurium (ATCC14028) et un fragment de la flagelline FliC de S. typhimurium.

Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, ledit agoniste de TLR-5 est une flagelline tronquée, comme décrit dans le document WO 09/156 405, c'est-à-dire une flagelline de laquelle le domaine hypervariable a été supprimé. Dans un aspect de ce mode de réalisation, ledit agoniste de TLR-5 est choisi dans le groupe constitué par : FliCûi74-4oo / FÜCM61-405 et FliCûi 38-405 ·

Dans un mode de réalisation particulier supplémentaire, ledit agoniste de TLR-5 est une flagelline, comme décrit dans le document WO 09/128 950.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-6 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-6 est une lipoprotéine mycobactérienne, un LP diacylé et la moduline soluble dans le phénol. D'autres agonistes de TLR6 sont décrits dans le document WO 03/043 572.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-7 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-7 est un ARN simple brin (ARNsb) , la loxoribine, un analogue de la guanosine aux positions N7 et C8, ou un composé d'imidazoquinoléine ou un dérivé de celui-ci. Dans un mode de réalisation particulier, l'agoniste de TLR est 1'imiquimod. D'autres agonistes de TLR7 sont décrits dans le document WO 02/085 905.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-8 (Sabroe et al., JI 2003 p 1630-5) . De manière appropriée, l'agoniste de TLR capable d'induire une réponse de signalisation par l'intermédiaire de TLR-8 est un ARN simple brin (ARNsb) , une molécule d'imidazoquinoléine ayant une activité antivirale, par exemple le requisimod (R848) ; le requisimod est également capable d'être reconnu par TLR-7. D'autres agonistes de TLR-8 pouvant être utilisés comprennent ceux décrits dans le document WO 04/071 459.

Dans un mode de réalisation supplémentaire, il est utilisé un agoniste de TLR qui est capable d'induire une réponse de signalisation, comme un agoniste de TLR comprenant un motif CpG. Le terme « oligonucléotide d'immunostimulation » est utilisé dans le présent document pour faire référence à un oligonucléotide qui est capable d'activer un composant du système immunitaire. Dans un mode de réalisation, l'oligonucléotide d'immunostimulation comprend un ou plusieurs motifs cytosine-guanosine non méthylés (CpG). Dans un mode de réalisation supplémentaire, l'oligonucléotide d'immunostimulation comprend un ou plusieurs motifs thymidine-guanosine non méthylés (TG) ou peut être riche en T. Par riche en T, on entend que la composition nucléotidique de l'oligonucléotide comprend plus de 50, 60, 70 ou 80 % de thymidine. Dans un mode de réalisation, l'oligonucléotide n'est pas un oligonucléotide d'immunostimulation et ne comprend pas un motif CpG non méthylé. Dans un mode de réalisation supplémentaire, l'oligonucléotide d'immunostimulation n'est pas riche en T et/ou ne comprend pas un motif TG non méthylé. L'oligonucléotide peut être modifié afin d'améliorer la stabilité in vitro et/ou in vivo. Par exemple, dans un mode de réalisation, les oligonucléotides sont modifiés de manière à comprendre un squelette de phosphorothioate, c'est-à-dire des liaisons inter-nucléotidiques. D'autres modifications appropriées, telles que des modifications de type diphosphorothioate, phosphoroamidate et méthyl-phosphonate, ainsi que des liaisons internucléotidiques alternatives aux oligonucléotides, sont bien connues de l'homme du métier et sont englobées par 1'invention.

Dans un autre mode de réalisation, les vaccins ou les compositions immunogènes de l'invention comprennent en outre un immunostimulant choisi dans le groupe constitué par : un agoniste de TLR-1, un agoniste de TLR-2, un agoniste de TLR-3, un agoniste de TLR-4, un agoniste de TLR-5, un agoniste de TLR-6, un agoniste de TLR-7, un agoniste de TLR-8, un agoniste de TLR-9, ou une combinaison de ceux-ci.

Composites du calcium

Dans certains modes de réalisation, le vaccin ou la composition immunogène de l'invention comprend un composite de fluorure de calcium, le composite comprenant Ca, F et Z. « Z » représente une molécule organigue. Le terme « composite » fait référence à une substance qui existe sous forme solide quand elle est sèche, et qui est insoluble ou peu soluble dans l'eau pure. Dans certains aspects, Z comprend un groupe fonctionnel qui forme un anion quand il est ionisé. De tels groupes fonctionnels comprennent, mais sans s'y limiter, un ou plusieurs groupes fonctionnels choisis dans le groupe constitué par : les groupes hydroxyle, hydroxylate, hydroxo, oxo, N-hydroxylate, hydroaxamate, N-oxyde, bicarbonate, carbonate, carboxylate, acide gras, thiolate, phosphate organique, dihydrogéno-phosphate, monohydrogénophosphate, monoesters de l'acide phosphorique, diesters de l'acide phosphorique, esters de phospholipide, phosphorothioate, sulfates, hydrogénosulfates, ènolate, ascorbate, phosphoascorbate, phénolate et imine-olates.

Dans certains aspects, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est une molécule organique anionique possédant une affinité pour le calcium et formant un composite insoluble dans l'eau avec le calcium et le fluorure.

Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z peut être catégorisé en ce qu'il comprend un membre d'une catégorie chimique choisi dans le groupe constitué par : un hydroxyle, les hydroxylates, un hydroxo, un oxo, un N-hydroxylate, un hydroaxamate, un N-oxyde, les bicarbonates, les carbonates, les carboxylates et un dicarboxylate, les sels d'acides carboxyliques, les sels de QS21, un extrait d'écorce de Quillaja saponaria, un extrait de saponine immunologique active, les sels d'un acide gras saturé ou insaturé, les sels de l'acide oléique, les sels d'acides aminés, les thiolates, un thiolactate, un sel de composé de thiol, les sels de cystéine, les sels de N-acétyl-cystéine, le L-2-oxo-4-thiazolidine-carboxylate, les phosphates, les dihydrogénophosphates, un monohydrogénophosphate, les sels d'acides phosphoriques, les monoesters d'acides phosphoriques et leurs sels, les diesters d'acides phosphoriques et leurs sels, les esters du lipide A 3-0-désacylé 4'-monophophorylé, les esters du 3D-MLA, le MPL, les esters de phospholipides, la DOPC, les dérivés dioléolyphosphatidiques, les phosphates provenant des motifs CpG, les phosphorothioates de la famille des CpG, les sulfates, les hydrogénosulfates, les sels d'acides sulfuriques, les ènolates, les ascorbates, un phosphoascorbate, un phénolate, 1'α-tocophérol, les imine-olates, la cytosine, la méthyl-cytosine, l'uracyle, la thymine, l'acide barbiturique, l'hypoxanthine, l'inosine, la guanine, la guanosine, la 8-oxo-adénine, la xanthine, l'acide urique, l'acide ptéroïque, l'acide ptéroylglutamique, l'acide folique, la riboflavine et la lumiflavine. Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est choisi dans le groupe constitué par : la N-acétyl cystéine, un thiolactate ; un adipate ; un carbonate ; l'acide folique ; la glutathione ; et l'acide urique. Dans certains aspects, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est choisi dans le groupe constitué par : la N-acétyl cystéine ; un adipate ; un carbonate ; et l'acide folique. Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est la N-acétyl cystéine, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % de N-acétyl cystéine (en poids/poids) et 37 % de Ca, 26 % de F, et 37 % de

N-acétyl cystéine (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est un thiolactate, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % de thiolactate (en poids/poids) et 42 % de Ca, 30 % de F, et 28 % de

thiolactate (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est un adipate, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % d'adipate (en poids/poids) et 38 % de Ca, 27 % de F, et 35 % d'adipate (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est un carbonate, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % de carbonate (en poids/poids) et 48 % de Ca, 34 % de F, et 18 % de carbonate (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est l'acide folique, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % d'acide folique (en poids/poids) et 22 % de Ca, 16 % de F, et 62 % d'acide folique (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est le glutathion, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, au plus 1 % de glutathion (en poids/poids) et 28 % de Ca, 20 % de F, et 52 % de glutathion (en poids/poids). Dans des aspects supplémentaires, les composites de fluorure de calcium décrits dans le présent document comprennent Z, où Z est l'acide urique, et le composite comprend entre 51 % de Ca, 48 % de F, et au plus 1 % d'acide urique (en poids/poids) et 36 % de Ca, 26 % de F, et 38 % d'acide urique (en poids/poids).

Sels d'aluminium

Dans un mode de réalisation, le vaccin ou la composition immunogène de l'invention comprend un sel d'aluminium. Des adjuvants appropriés de type sels d'aluminium sont bien connus de l'homme du métier et comprennent, mais sans s'y limiter, le phosphate d'aluminium, l'hydroxyde d'aluminium ou une combinaison de ceux-ci. Des adjuvants appropriés de type sels d'aluminium comprennent, mais sans s'y limiter, le Rehydragel™ HS, l'Alhydrogel™ 85, le Rehydragel™ PM, le Rehydragel™ AB, le Rehydragel™ HPA, le Rehydragel™ LV, l'Alhydrogel™ ou une combinaison de ceux-ci. En particulier, les procédés de l'invention sont utilisés pour déterminer la teneur en endotoxine de l'Adjuphos, du Rehydragel™ HS (3 % d'hydroxyde d'aluminium dans l'eau [General Chemical]) ou de l'Alhydrogel™ 85 (Brenntag BioSector [Danemark]).

En particulier, les sels d'aluminium peuvent avoir une capacité d'adsorption des protéines située entre 2.5 et 3,5, 2,6 et 3,4, 2,7 et 3,3 ou 2,9 et 3,2, 2,5 et 3,7, 2,6 et 3,6, 2,7 et 3,5, ou 2,8 et 3,4 protéines (BSA)/ml de sel d'aluminium. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le sel d'aluminium présente une capacité d'adsorption des protéines située entre 2,9 et 3,2 mg de BSA/mg de sel d'aluminium. La capacité d'adsorption des protéines du sel d'aluminium peut être mesurée par n'importe quel moyen connu de l'homme du métier. La capacité d'adsorption des protéines du sel d'aluminium peut être mesurée en utilisant le procédé décrit dans l'exemple 1 du document WO 12/136 823 (qui utilise la BSA) ou des variations de celui-ci.

Les sels d'aluminium décrits dans le présent document (c'est-à-dire ayant la capacité d'adsorption des protéines décrite dans le présent document) peuvent avoir une taille de cristal située entre 2,8 et 5,7 nm, telle que mesurée par diffraction X, par exemple de 2,9 à 5,6 nm, de 2,8 à 3,5 nm, de 2,9 à 3,4 nm ou de 3,4 à 5.6 nm ou de 3,3 à 5,7 nm, telle que mesurée par diffraction X. La diffraction X est bien connue de l'homme du métier. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la taille des cristaux est mesurée en utilisant le procédé décrit dans l'exemple 1 du document WO 12/136 823 ou des variations de celui-ci.

Modes d'administration

Le médiateur pro-résolution peut être administré en même temps, avant ou après l'administration du vaccin ou de la composition immunogène. Par conséquent, l'invention propose des médiateurs pro-résolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le ou les médiateurs pro-résolution étant administrés 5, 10, 20, 30, 45 minutes ou plus, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 heures ou plus avant l'administration du vaccin ou de la composition immunogène, en particulier entre 30 minutes et 3 heures, en particulier environ 1 heure avant l'administration du vaccin ou de la composition immunogène. L'invention propose en outre, dans certains modes de réalisation, des médiateurs pro-résolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le ou les médiateurs pro-résolution étant administrés de manière concomitante avec ledit vaccin ou ladite composition immunogène. Les médiateurs pro-résolution peuvent être administrés en même temps par la même voie d'administration ou par une voie différente. Par « de manière concomitante », on entend plus ou moins 5 minutes au maximum par rapport au moment de l'administration du vaccin ou de la composition immunogène, par exemple jusqu'à 1, 2, 3 ou 4 minutes avant ou après l'administration du vaccin ou de la composition immunogène. Dans les modes de réalisation dans lesquels le ou les médiateurs pro-résolution de l'invention sont administrés de manière concomitante avec le vaccin ou la composition immunogène par la même voie d'administration, ledit ou lesdits médiateurs prorésolution peuvent être formulés de manière appropriée avec le composant antigène et/ou le composant adjuvant du vaccin ou de la composition immunogène. Par conséquent, dans des modes de réalisation particuliers, le ou les médiateurs pro-résolution de l'invention sont formulés avec le composant antigène des vaccins ou des compositions immunogènes de l'invention. Dans des modes de réalisation particuliers supplémentaires, le ou les médiateurs pro-résolution de l'invention sont formulés avec le composant adjuvant des vaccins ou des compositions immunogènes de l'invention. L'invention propose en outre, dans certains modes de réalisation, des médiateurs pro-résolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le ou les médiateurs pro-résolution étant administrés 5, 10, 20, 30, 45 minutes ou plus, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 heures ou plus après l'administration du vaccin ou de la composition immunogène, en particulier entre 30 minutes et 3 heures, en particulier à environ 1 heure.

Le médiateur pro-résolution décrit dans le présent document peut être administré par n'importe quelle voie d'administration. La voie d'administration peut être identique à ou différente de celle du vaccin/de la composition immunogène. Par conséquent, l'invention propose des médiateurs pro-résolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le médiateur prorésolution étant administré par la même voie que le vaccin ou la composition immunogène. L'invention propose également des médiateurs prorésolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le médiateur pro-résolution décrit dans le présent document étant administré par une voie différente de celle du vaccin ou de la composition immunogène.

Un médiateur pro-résolution décrit dans le présent document peut être administré par voie orale, sublinguale, intramusculaire, intradermique (par exemple, un timbre transdermique avec micro-saillies) ou transdermique (par exemple, une pommade ou une crème). L'invention propose en outre des médiateurs prorésolution de l'invention pour une utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène, le médiateur pro-résolution décrit dans le présent document pouvant être administré au niveau du même site sur le patient (par exemple, le haut du bras), mais par des voies différentes d'administration (en particulier, dans lequel le vaccin ou la composition immunogène est délivré par voie intramusculaire ou intradermique, et dans lequel le médiateur prorésolution est délivré par voie transdermique (par exemple, une pommade ou une crème) . La crème ou la pommade comprenant le médiateur pro-résolution peut être administrée avant, de manière concomitante avec, ou après l'administration du vaccin/de la composition immunogène par administration intradermique ou intramusculaire.

Compositions pharmaceutiquement acceptables

Le ou les médiateurs pro-résolution, le vaccin et les compositions immunogènes de l'invention sont pharmaceutiquement acceptables. Ils peuvent comprendre des composants en plus du ou des médiateurs prorésolution, du ou des antigènes et/ou de l'adjuvant, par exemple ils comprennent généralement un ou plusieurs supports et/ou excipients pharmaceutiques.

Les compositions peuvent comprendre des conservateurs, comme le thiomersal ou le 2-phénoxy-éthanol. Des modes de réalisation particuliers, le vaccin ou les compositions immunogènes de l'invention sont sensiblement exempts (c'est-à-dire, moins de 5 pg/ml) de substance à base de mercure, par exemple exempts de thiomersal. En particulier, les compositions sont exemptes de mercure et d'un quelconque conservateur.

Les compositions de l'invention peuvent être isotoniques et peuvent donc comprendre un sel physiologique, comme un sel de sodium. Le chlorure de sodium (NaCl) est préféré, lequel peut être présent entre 1 et 20 mg/ml. Les autres sels pouvant être présents comprennent le chlorure de potassium, le dihydrogénophosphate de potassium, le phosphate disodique déshydraté, le chlorure de magnésium, le chlorure de calcium.

Les compositions ont généralement une osmolalité située entre 200 mOsm/kg et 400 mOsm/kg, de préférence entre 240 et 360 mOsm/kg, et en particulier entre 290 et 310 mOsm/kg.

Les compositions de l'invention peuvent comprendre un ou plusieurs tampons. Les tampons classiques comprennent : un tampon au phosphate ; un tampon Tris ; un tampon au borate ; un tampon au succinate ; un tampon à l'histidine ; ou un tampon au citrate. Les tampons seront généralement inclus dans la plage allant de 5 à 2 0 mM.

Le pH des compositions de l'invention peut être situé entre 5,0 et 8,1, et plus généralement entre 6,0 et 8,0, par exemple entre 6,5 et 7,5, ou entre 7,0 et 7,8 .

Kit de l'invention

Le ou les médiateurs pro-résolution, le ou les antigènes et/ou l'adjuvant peuvent être préparés extemporanément, au moment de l'administration. Par conséquent, l'invention fournit des kits comprenant le ou les médiateurs pro-résolution, le ou les antigènes et/ou l'adjuvant prêts pour le mélange. Les kits permettent au(x) médiateur(s) pro-résolution, au(x) antigène(s) et/ou à l'adjuvant d'être maintenus séparément jusqu'au moment de l'utilisation. Ceci est particulièrement important si le médiateur prorésolution doit être administré à un moment différent ou par une voie d'administration différente, par exemple.

Par conséquent, la présente invention propose des kits comprenant i) un antigène tel que décrit dans le présent document ; et ii) un médiateur pro-résolution tel que décrit dans le présent document. La présente invention propose également des kits comprenant i) d'un adjuvant tel que décrit dans le présent document ; et ii) un médiateur pro-résolution tel que décrit dans le présent document. La présente invention propose en outre des kits comprenant i) un antigène tel que décrit dans le présent document ; ii) un adjuvant tel que décrit dans le présent document ; et iii) un médiateur pro-résolution tel que décrit dans le présent document.

Les composants sont physiquement séparés les uns des autres au sein d'un kit, et cette séparation peut être réalisée de diverses manières. Par exemple, les deux composants peuvent être dans deux récipients séparés, par exemple des flacons. Les contenus des deux flacons peuvent ensuite être mélangés, par exemple en retirant le contenu d'un flacon et en l'ajoutant à l'autre flacon, ou en retirant séparément les contenus des deux flacons et en les mélangeant dans un troisième récipient (par exemple, un flacon).

Dans un mode de réalisation particulier, un des composants du kit est dans une seringue et l'autre est dans un récipient, comme un flacon. La seringue peut être utilisée (par exemple, avec une aiguille) pour insérer son contenu dans le second récipient à des fins de mélange, et le mélange peut ensuite être aspiré dans la seringue. Le contenu mélangé de la seringue peut ensuite être administré à un patient, traditionnellement par l'intermédiaire d'une nouvelle aiguille stérile. Le conditionnement d'un composant dans une seringue élimine le besoin d'utiliser une seringue séparée pour l'administration au patient. Dans un autre agencement préféré, les deux composants du kit sont maintenus ensemble mais séparément dans la même seringue, par exemple une seringue à double chambre. Quand la seringue est actionnée (par exemple, lors de l'administration à un patient), alors les contenus des deux chambres sont mélangés. Cet agencement évite le besoin d'une étape séparée de mélange au moment de 1'utilisation.

Les composants du kit peuvent être sous forme aqueuse. Dans certains modes de réalisation, un composant, tels que le ou les antigènes ou le ou les médiateurs pro-résolution, est sous une forme sèche (par exemple, sous une forme lyophilisée), l'autre composant étant sous une forme aqueuse. Les deux composants peuvent être mélangés afin de réactiver le composant sec et d'obtenir une composition aqueuse pouvant être administrée à un patient. Un composant lyophilisé sera généralement situé dans un flacon plutôt que dans une seringue.

Les composants secs peuvent comprendre des agents de stabilisation, comme le lactose, le saccharose ou le mannitol, ainsi que leurs mélanges, par exemple des mélanges de lactose/saccharose, des mélanges de saccharose/mannitol, etc. Un agencement possible utilise un composant adjuvant aqueux dans une seringue pré-remplie et un composant antigène lyophilisé dans un flacon.

Exemples

Exemple 1 - Effet de la résolvine El (RvEl) sur le profil des cellules immunitaires locales induit par l'injection d'adjuvants

Des souris (n = 6/gr) ont reçu par injection intramusculaire du PBS, l'adjuvant AS03 (émulsion huile-dans-eau) ou l'adjuvant AS01B (MPL + QS21 dans des liposomes). 1 heure et 6 heures plus tard, une RvEl de synthèse (0,2 pg/dose) ou du PBS a également été administré par voie intramusculaire. Les muscles ont été collectés 24 heures après l'administration de 1'adjuvant/du PBS et les cellules immunitaires locales ont été extraites. Les cellules ont été colorées avec les anticorps suivants : Ly6c, SiglecF, CD90.2, Ly6G, CDllb, CDllc, HLA DR, CD45 et CD19, et analysées par cytométrie en flux. Le recrutement des cellules est exprimé en nombre de cellules par muscle. La zone tracée représente la moyenne obtenue pour une sous-population spécifique. Une analyse ANOVA à deux facteurs a été réalisée pour comparer les différents groupes. * : p < 0,05. Les résultats sont présentés sur la figure 1. La structure chimique de la RvE1 de synthèse utilisée dans la présente expérience est identique à la structure chimique de la RvE1 divulguée dans Buckley et al. (« Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327). Résultats — Conclusions L'injection de chacun des adjuvants, AS03 et AS01B, a entraîné le recrutement de cellules immunitaires sur le site d'injection, par rapport au PBS seul. L'injection de RvEl après l'injection de l'adjuvant AS03 a entraîné un recrutement significativement réduit de tous les types de cellules immunitaires testés. On arrive à la même conclusion dans le cas de l'injection de RvEl après l'injection de l'ASOlB, ce qui indique que la RvEl utilisée dans cette expérience était biologiquement active, en étant capable de moduler le profil des cellules immunitaires au niveau du site d'injection. Il est également intéressant de noter que l'injection de chaque adjuvant seul a donné un profil différent de cellules immunitaires au niveau du site d'injection. En outre, la RvEl en elle-même, avec le PBS seul, a semblé avoir seulement un effet minime sur le profil des cellules immunitaires au niveau du site d'injection, par rapport au PBS seul.

Exemple 2 - Effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur le profil des cellules immunitaires locales induit par l'injection d'adjuvants

Des souris (n = 6/gr) ont reçu par injection intramusculaire une 7-marésine-l de synthèse (MaRl) (5 ng/dose) ou du PBS jouant le rôle de témoin. 1 heure plus tard, les souris ont reçu par voie intramusculaire l'adjuvant AS01B ou du PBS. Les muscles ont été collectés 4 heures et 24 heures après l'administration de la 7-marésine-l/du PBS et les cellules immunitaires locales ont été extraites. Les cellules ont été colorées avec les anticorps suivants : Ly6c, SiglecF, CD90.2, Ly 6G, CDllb, CDllc, HLA DR, CD45 et CD19, et analysées par cytométrie en flux. Le recrutement des cellules est exprimé en nombre de cellules par muscle. La zone tracée représente la moyenne obtenue pour une sous-population spécifique. Une analyse ANOVA à deux facteurs a été réalisée pour comparer les différents groupes. * : p < 0,05. Les résultats sont présentés sur la figure 2. La structure chimique de la MaRl de synthèse utilisée dans la présente expérience est identique à la structure chimique de la MaRl divulguée dans Buckley et al. (« Proresolving Lipid Mediators and Mechanisms in the Resolution of Acute Inflammation », 2014, Immunity 40 : 315-327). Résultats — Conclusions

Quand MaRl est injectée avant l'injection de l'adjuvant AS01B, l'effet de modulation le plus significatif observé sur le profil des cellules immunitaires au niveau du site d'injection a été obtenu 24 heures après l'injection, ce qui confirme que dans cette expérience, MaRl était biologiquement active. Les principaux changements observés étaient une augmentation du recrutement des lymphocytes B et des lymphocytes T sur le site, ce qui est une caractéristique d'une phase de résolution tardive. Ceci suggère que l'observation d'un effet de modulation de MaRl peut dépendre du moment après l'injection, et que 4 heures après l'injection peut être trop tôt pour détecter un effet.

Exemple 3 - Effet de la résolvine El (RvEl) sur le profil des cytokines induit par l'injection d'adjuvants

Des souris (n = 6/gr) ont reçu par injection intramusculaire du PBS, l'adjuvant AS03 ou l'adjuvant AS01B. 1 heure et 6 heures plus tard, la même RvEl de synthèse que celle utilisée dans l'exemple 1 (0,2 pg/dose), ou du PBS a également été administré par voie intramusculaire. Les muscles ont été collectés 4 heures (A) et 24 heures (B) après l'administration de l'adjuvant ou du PBS et congelés à -70 °C. Les muscles ont été décongelés et homogénéisés, et les taux de cytokines (TNFa, IL-6, ILlb et IFNy) et de chimiokines (G-CSF, MCP-1, KC et ΜΙΡ-la) dans les homogénats clarifiés ont été mesurés par CBA (Becton Dickinson). Les concentrations en cytokine/chimiokine sont exprimées en pg/ml. La zone tracée représente la moyenne obtenue pour une cytokine/chimiokine spécifique. Une analyse ANOVA à deux facteurs a été réalisée pour comparer les différents groupes. * : p < 0,05 (voir la figure 3). Résultats — Conclusions L'injection de chacun des adjuvants, AS03 et AS01B, a entraîné une augmentation de la concentration en cytokines/chimiokines au niveau du site d'injection, par rapport au PBS seul, à des degrés différents. En ce qui concerne l'adjuvant AS01B, aucun effet de modulation significatif n'a été observé quand la RvEl a été injectée après l'injection de l'adjuvant aux deux moments temporels testés, c'est-à-dire 4 heures et 24 heures après l'injection de l'adjuvant (voir le cadre A et le cadre B, respectivement, de la figure 3). En ce qui concerne l'adjuvant AS03, un effet de modulation significatif a été observé quand la RvEl a été injectée après l'injection de l'adjuvant 4 heures après l'injection de l'adjuvant, tandis qu'aucun effet significatif n'a été observé 24 heures après l'injection de l'adjuvant. Ces résultats indiquent que la RvEl utilisée dans cette expérience était biologiquement active, en étant capable de moduler la concentration en cytokines/chimiokines au niveau du site d'injection. Lesdits résultats suggèrent également que la capacité de RvEl à moduler le profil des cytokines/chimiokines locales peut différer en fonction du type d'adjuvant qui est injecté et/ou que l'effet de modulation peut être observé à différents moments temporels après l'injection de l'adjuvant.

Exemple 4 - Effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur le profil des cytokines locales induit par l'injection d'adj uvants

Des souris (n = 6/gr) ont reçu par injection intramusculaire la même MaRl de synthèse que celle utilisée dans l'exemple 2 (5 ng/dose), ou du PBS jouant le rôle de témoin. 1 heure plus tard, les souris ont reçu par voie intramusculaire l'adjuvant AS01B ou du PBS. Les muscles ont été collectés 4 heures et 24 heures après l'administration de la MaRl/du PBS et congelés à -70 °C. Les muscles ont été décongelés et homogénéisés, et les taux de cytokines (TNFa, IL-6, ILlb et IFNy) et de chimiokines (G-CSF, MCP-1, KC et ΜΙΡ-la) dans les homogénats clarifiés ont été mesurés par CBA (Becton Dickinson). Les concentrations en cytokine/chimiokine sont exprimées en pg/ml. La zone tracée représente la moyenne obtenue pour une cytokine/chimiokine spécifique. Une analyse ANOVA à deux facteurs a été réalisée pour comparer les différents groupes. * : p < 0,05 (voir la figure 4). Résultats — Conclusions L'injection de chacun des adjuvants AS01B a entraîné une augmentation de la concentration en cytokines/chimiokines au niveau du site d'injection, par rapport au PBS seul. Un effet transitoire de modulation significatif a été observé quand MaRl a été injectée avant l'injection de l'adjuvant 4 heures après l'injection de MaRl. Ces résultats indiquent que la MaRl utilisée dans cette expérience était biologiquement active, en étant capable de moduler le profil des cytokines/chimiokines locales au niveau du site d'injection.

Exemple 5 - Aucun effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur les réponses spécifiques de type lymphocytes T induites par l'injection de vaccins

Des souris (n = 30/gr) ont reçu par injection intramusculaire la même MaRl de synthèse que celle utilisée dans l'exemple 2 (5 ng/dose), ou du PBS jouant le rôle de témoin. 1 heure plus tard, les souris ont été vaccinées avec les antigènes OVA (ovalbumine) et HBS (antigène de surface de l'hépatite B) remis en suspension dans l'adjuvant AS01B ou dans du PBS. Ce schéma de vaccination a été répété 15 jours plus tard.

Les rates ont été prélevées 7 jours après la seconde immunisation, et les cellules immunitaires ont été extraites et stimulées pendant une nuit avec les peptides OVA (A) et HBS (B). Après coloration en surface avec les anticorps anti-CD4 et anti-CD8, les cellules ont été marquées de manière intracellulaire avec un anti-IL-2, un anti-IFN-γ et un anti-TNF-α et analysées par cytométrie en flux. Les résultats sont exprimés en pourcentage de lymphocytes T CD4+ ou CD8 + exprimant au moins 2 cytokines parmi celles testées. Chaque point représente une valeur individuelle, la barre représente la moyenne + /- ET (voir la figure 5). Résultats — Conclusions L'injection à la fois des antigènes OVA et HBS en combinaison avec l'adjuvant AS01B a induit une réponse significative de type lymphocyte T CD4+, ainsi qu'une réponse significative de type lymphocyte T CD8+, par rapport à l'injection des antigènes seuls. Quand MaRl a été injectée avant l'injection des antigènes en combinaison avec l'adjuvant AS01B, ni la réponse de type lymphocyte T CD4 + , ni la réponse de type lymphocyte T CD8+ n' a été observée pour être statistiquement inférieure aux réponses induites par les antigènes et l'adjuvant seuls (voir les cadres A et B de la figure 5) . Ces résultats indiquent que l'injection de MaRl n'a pas eu d'impact négatif sur la réponse immunitaire de type lymphocyte T induite par l'injection d'un vaccin adjuvanté.

Exemple 6 - Aucun effet de la 7-marésine-l (MaRl) sur les réponses spécifiques d'anticorps induites par 1'injection d'un vaccin

Des souris (n = 30/gr) ont reçu par injection intramusculaire la même MaRl de synthèse que celle utilisée dans l'exemple 2 (5 ng/dose), ou du PBS jouant le rôle de témoin. 1 heure plus tard, les souris ont été vaccinées avec les antigènes OVA et HBS remis en suspension dans l'adjuvant AS01B ou dans du PBS. Ce schéma de vaccination a été répété 15 jours plus tard. Les sérums ont été prélevés 7 jours après la seconde immunisation. Des anticorps anti-OVA (A) ou anti-HBs (B) ont été détectés par ELISA. Les titres des anticorps sont exprimés en ng/ml. Chaque point représente une valeur individuelle ; la barre représente la moyenne + /- ET (voir la figure 6). Résultats — Conclusions L'injection à la fois des antigènes OVA et HBS en combinaison avec l'adjuvant AS01B a induit une réponse significative d'anticorps anti-OVA (voir le cadre A de la figure 6) et une réponse significative d'anticorps anti-HBS (voir le cadre B de la figure 6) , par rapport à l'injection des antigènes seuls. Quand MaRl a été injectée avant l'injection des antigènes en combinaison avec l'adjuvant AS01B, ni la réponse de type anticorps anti-OVA (voir le cadre A de la figure 6) , ni la réponse de type anticorps anti-HBS n' a été observée pour être statistiquement inférieure aux réponses induites par les antigènes et l'adjuvant seuls. Ces résultats indiquent que l'injection de MaRl n'a pas eu d'impact négatif sur la réponse immunitaire de type anticorps induite par l'injection d'un vaccin adjuvanté.

Conclusions générales • L'administration intramusculaire d'une petite concentration de médiateurs pro-résolution, comme RvEl et MaRl, peut moduler le profil de recrutement des cellules immunitaires, ainsi que le profil des cytokines locales (figures 1, 2, 3 et 4). • Le moment de l'administration et la nature du médiateur pro-résolution administré peuvent moduler différemment le profil inflammatoire local induit par les adjuvants (figures 1, 2, 3 et 4). • Les cytokines locales principales modulées par l'administration des médiateurs pro-résolution sont IL-6 et MCP-1 (figure 3A, figure 4). • Les cellules immunitaires locales principales modulées par l'administration des médiateurs prorésolution sont les cellules lymphoïdes et les monocytes (figures 1 et 2). • Les médiateurs pro-résolution peuvent moduler le profil inflammatoire local induit par deux adjuvants différents (AS01B et AS03), ladite modulation et son étendue pouvant différer selon l'adjuvant et si l'on prend en compte le profil de recrutement des cellules immunitaires locales ou le profil des cytokines locales. • L'administration locale de médiateurs prorésolution n'a pas d'impact sur les réponses spécifiques de type lymphocyte T et de type anticorps contre un vaccin (figures 5 et 6).

Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes et d'autres formes de réalisation, sans pour autant sortir du cadre de l'invention.

Claims (50)

1. REVENDICATIONS

   1. Médiateur pro-résolution pour son utilisation dans la réduction de la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène comprenant au moins un antigène.
2. 2. Médiateur pro-résolution selon la revendication 1, dans lequel ledit médiateur pro-résolution est un lipide.
3. 3. Médiateur pro-résolution selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lequel ledit médiateur pro-résolution est d'origine naturelle.
4. 4. Médiateur pro-résolution selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lequel ledit médiateur pro-résolution est synthétique.
5. 5. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est dérivé d'acides gras poly-insaturés (PUFA).
6. 6. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est dérivé du PUFA ω-3 acide éicosapentaènoïque (EPA) , du PUFA ω-3 acide docosahexaènoïque (DHA) ou du PUFA ω-6 acide arachidonique (AA).
7. 7. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est choisi dans le groupe constitué par : une résolvine (série E ou série D) , une marésine, une lipoxine, une protectine, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de celles-ci.
8. 8. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est choisi dans le groupe constitué par : RvEl, RvE2, RvE3, RvDl, RvD2, RvD3, RvD4, MaRl, PD1/NPD1, 17-HDHA et LXA4, ou un analogue fonctionnel de ceux-ci, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.
9. 9. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est MaRl, ou un analogue fonctionnel de celui-ci.
10. 10. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans lequel le médiateur pro-résolution est RvEl, ou un analogue fonctionnel de celui-ci.
11. 11. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est administré 5, 10, 20, 30, 45 minutes ou plus, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10 heures ou plus avant l'administration du vaccin ou de la composition immunogène, en particulier entre 30 minutes et 3 heures, en particulier environ 1 heure.
12. 12. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans lequel le médiateur pro-résolution est administré de manière concomitante avec ledit vaccin ou ladite composition immunogène.
13. 13. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans lequel le médiateur pro-résolution est administré 5, 10, 20, 30, 45 minutes ou plus, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10 heures ou plus après l'administration du vaccin ou de la composition immunogène, en particulier entre 30 minutes et 3 heures, en particulier environ 1 heure.
14. 14. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est administré par la même voie que le vaccin ou la composition immunogène.
15. 15. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, dans lequel le médiateur pro-résolution est administré par une voie différente de celle du vaccin ou de la composition immunogène.
16. 16. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le médiateur prorésolution est administré par voie orale, sublinguale, intramusculaire, intradermique (par exemple, un timbre transdermique avec micro-saillies) ou transdermique (par exemple, une pommade ou une crème).
17. 17. Médiateur pro-résolution selon la revendication 15 ou 16, dans lequel le médiateur prorésolution est administré au niveau du même site mais par des voies différentes d'administration.
18. 18. Médiateur pro-résolution selon la revendication 17, dans lequel le vaccin ou la composition immunogène est délivré par voie intramusculaire ou intradermique, et dans lequel le médiateur pro-résolution est délivré par voie transdermique.
19. 19. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel le vaccin ou la composition immunogène comprend un adjuvant.
20. 20. Médiateur pro-résolution selon la revendication 19, dans lequel l'adjuvant est choisi dans le groupe constitué par : une émulsion huile-dans-eau (par exemple, MF59 ou AS03) , les liposomes, une saponine, un agoniste de TLR2, un agoniste de TLR3, un agoniste de TLR4, un agoniste de TLR5, un agoniste de TLR6, un agoniste de TLR7, un agoniste de TLR8, un agoniste de TLR9, les sels d'aluminium, les microparticules, les ISCOM, les composites de fluorure de calcium ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.
21. 21. Médiateur pro-résolution selon la revendication 19 ou 20, dans lequel l'adjuvant comprend une saponine et/ou un agoniste de TLR4.
22. 22. Médiateur pro-résolution selon la revendication 20 ou 21, dans lequel la saponine est un dérivé du Quil A.
23. 23. Médiateur pro-résolution selon la revendication 22, dans lequel le dérivé du Quil A est QS21.
24. 24. Médiateur pro-résolution selon la revendication 20 ou 21, dans lequel l'agoniste de TLR4 est un lipopolysaccharide détoxifié.
25. 25. Médiateur pro-résolution selon la revendication 24, dans lequel le lipopolysaccharide détoxifié est le 3D-MPL.
26. 26. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 20 à 25, dans lequel la saponine et/ou l'agoniste de TLR4 est dans une formulation liposomique.
27. 27. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 21 à 26, dans lequel l'adjuvant comprend en outre un agoniste de TLR9, en particulier un oligonucléotide CpG.
28. 28. Médiateur pro-résolution selon la revendication 19 ou 20, dans lequel l'adjuvant est une émulsion huile-dans-eau.
29. 29. Médiateur pro-résolution selon la revendication 28, dans lequel l'émulsion huile-dans-eau comprend du squalène et un monooléate de sorbitane polyoxyéthyléné (POLYSORBATE 80).
30. 30. Médiateur pro-résolution selon la revendication 29, dans lequel l'émulsion huile-dans-eau comprend en outre un trioléate de sorbitane (SPAN 85) ou de 1'alpha-tocophérol.
31. 31. Médiateur pro-résolution selon la revendication 19 ou 20, dans lequel l'adjuvant est un sel d'aluminium, en particulier 1'hydroxyde d'aluminium ou le phosphate d'aluminium.
32. 32. Médiateur pro-résolution selon la revendication 31, dans lequel l'adjuvant comprend en outre un agoniste de TLR4.
33. 33. Médiateur pro-résolution selon la revendication 32, dans lequel l'agoniste de TLR4 est adsorbé sur le sel d'aluminium, en particulier plus de 80, 85, 90, 95 % de l'agoniste de TLR4 sont adsorbés sur le sel d'aluminium.
34. 34. Médiateur pro-résolution selon la revendication 32 ou 33, dans lequel l'agoniste de TLR4 est un lipopolysaccharide détoxifié.
35. 35. Médiateur pro-résolution selon la revendication 34, dans lequel le lipopolysaccharide détoxifié est le 3D-MPL.
36. 36. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel l'antigène est choisi dans le groupe constitué par : un organisme entier, un polypeptide, un polysaccharide, un peptide, un acide nucléique et un conjugué protéine-polysaccharide, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.
37. 37. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel l'antigène dérive d'un organisme choisi dans le groupe constitué par : les virus, les bactéries, les parasites et les champignons, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.
38. 38. Médiateur pro-résolution selon une quelconque revendication précédente, dans lequel l'antigène dérive d'un virus.
39. 39. Médiateur pro-résolution selon la revendication 38, dans lequel le virus est choisi dans le groupe constitué par : le virus de la grippe, le RSV, le HPV, le virus de la rougeole, le virus de la rubéole, le virus des oreillons, le HCMV, le VZV, le virus de la dengue, le poliovirus, le VIH, le HBV, le virus Ebola et un rotavirus, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci.
40. 40. Médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 37, dans lequel l'antigène dérive d'une bactérie.
41. 41. Médiateur pro-résolution selon la revendication 40, dans lequel la bactérie est choisie dans le groupe constitué par : B. pertussis, S. Pneumoniae et N. Meningitidis, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de celles-ci.
42. 42. Médiateur pro-résolution selon la revendication 41, dans lequel l'antigène est l'antigène de bactérie entière B. pertussis (antigène Pw) , facultativement en combinaison avec l'anatoxine tétanique (T) et/ou l'anatoxine diphtérique (D).
43. 43. Médiateur pro-résolution selon la revendication 41, dans lequel l'antigène est un saccharide capsulaire de S. pneumoniae dérivé d'un sérotype choisi dans le groupe constitué par : les sérotypes 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F et 33F, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci, facultativement conjugué à une protéine de support.
44. 44. Médiateur pro-résolution selon la revendication 41, dans lequel l'antigène est un saccharide capsulaire de N. Meningitidis issu d'un sérogroupe choisi dans le groupe constitué par : le sérogroupe A (MenA), le sérogroupe C (MenC), le sérogroupe Y (MenY), et le sérogroupe W-135 (MenW), ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci, facultativement conjugué à une protéine de support.
45. 45. Médiateur pro-résolution selon la revendication 41, dans lequel l'antigène dérive de N. Meningitidis de sérogroupe B et est un polypeptide choisi dans le groupe constitué par : la protéine NadA, la protéine NHBA, la protéine fHBP, la protéine GNA1030, et la protéine GNA2091, ou n'importe quelle combinaison de deux ou plus de deux de ceux-ci, facultativement en combinaison avec une vésicule de membrane externe (OMV) dérivée de N. Meningitidis de sérogroupe B.
46. 46. Vaccin ou composition immunogène comprenant un antigène et un médiateur pro-résolution tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 10 l'antigène est tel que défini dans l'une quelconque des revendications 36 à 45 et un adjuvant tel que défini dans l'une quelconque des revendications 20 à 35.
47. 47. Kit comprenant i) un antigène tel que défini dans l'une quelconque des revendications 36 à 45 ; et ii) un médiateur pro-résolution.
48. 48. Kit comprenant i) un adjuvant tel que défini dans l'une quelconque des revendications 2 0 à 35 ; et ii) un médiateur pro-résolution tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 10.
49. 49. Kit comprenant i) un antigène tel que défini dans l'une quelconque des revendications 36 à 45 ; (ii) un adjuvant tel que défini dans l'une quelconque des revendications 20 à 35 ; et iii) un médiateur prorésolution tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 10.
50. 50. Utilisation d'un médiateur pro-résolution selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 dans la préparation d'un médicament pour réduire la réactogénicité induite par l'administration d'un vaccin ou d'une composition immunogène tel que défini dans la revendication 46.