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Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von neuen Verbindungen mit antiviraler Wirksamkeit.
Rhinovirusinfektionen sind für etwa 70% der Fälle verantwortlich, wo die allgemein als gewöhnlicher Schnupfen bekannte Krankheit auftritt, obwohl Infektionen durch andere Viren, wie Entero- und Coronaviren, und allergische Reaktionen ebenfalls zu einem "Schnupfen" führen können. Die Menschheit auf der ganzen Welt ist für rhinovirale Infektion empfänglich, die ein Hauptgrund für Krankheit und Fehlen vom Arbeitsplatz und somit von grosser ökonomischer Signifikanz ist.
Der gewöhnliche Schnupfen wird über Tröpfchen übertragen, die, wenn eine infizierte Person hustet oder niest, ausgehaucht und dann von einer andern Person eingeatmet werden und die Infektion des Atmungstraktes verursachen. Nach einer Inkubationszeit von 48 h bis zu 2 Wochen kann die infizierte Person unter Halsentzündung, Husten, Niesen, erhöhten Schleimsekretionen und Fieber zufolge einer sekundären Bakterieninfektion leiden.
Nach der Infektion bleibt eine gewisse Risistenz gegen einen Rhinovirus-Serotyp bestehen, die jedoch keine Immunität gegen andere Serotypen verleiht. Die kontinuierliche Wiederinfektion durch in bestimmten Gegenden vorherrschende Serotypen hält ein gewisses Ausmass an Resistenz gegen diese Viren bei den meisten Personen aufrecht. Ein Schnupfen tritt demzufolge nur dann auf, wenn ein neuer Serotyp auftritt ; dies ist durchschnittlich 2- bis 3mal im Jahr.
Da es keine Gegenimmunität und weiterhin mindestens 120 bekannte immunologisch bestimmte Rhinovirusserotypen gibt, scheint die Impfung keine entwicklungsfähige Behandlungsmethode zu sein. Als Methode zum Vermindern des Auftretens von Schnupfen wurde Lufthygiene versucht, dies war jedoch nicht erfolgreich. Es scheint, dass die einzige praktische Behandlung diejenige mit einer Verbindung wäre, die zur Verabreichung an Menschen geeignet und vorzugsweise gegen alle üblichen Serotypen oder zumindest gegen einen weiten Bereich von Rhinoviren wirksam ist. Trotz erheblicher Forschungsarbeit auf diesem Gebiet sind derartige Verbindungen derzeit nicht verfügbar und es gibt kein etabliertes chemotherapeutisches Mittel gegen diese Erkrankung.
Es wurde nun gefunden, dass Flavan und verschiedene Derivate hievon gegen bestimmte Viren, einschliesslich jene, die den Atmungstrakt infizieren, beispielsweise Picora-, Menge-, Arbo-, Myxo-, Corona-, Herpes- und Adenovirus, aktiv sind. Insbesondere weisen diese Verbindungen eine Wirksamkeit gegen Rhinoviren, insbesondere gegen die Serotypen 1B, 2 und 9, auf. Abgesehen von einigen Verbindungen, die unter diese Klasse fallen und bekannt sind, von denen jedoch in dieser Hinsicht keinerlei derartige Wirksamkeit angegeben wurde, wurden auch neue Derivate hergestellt und getestet. Es wurde gefunden, dass diese Verbindungen Rhinoviren während in vitro-Versuchen in Kultur hemmen können und einige auch eine gewisse Wirksamkeit gegen andere Viren, wie Herpes-, Influenza- und Masernviren, zeigen.
Weiterhin besitzen die gleichen Verbindungen in vivo Wirksamkeit gegen Rhinoviren, insbesondere wenn sie in geeigneten Dosen Menschen und Säugetieren verabreicht werden. Während Flavan selbst eine recht gute Wirksamkeit gegen Rhinoviren besitzt, weisen substituierte Derivate eine ähnliche oder erhöhte Wirksamkeit, je nach Art und Stellung des Substituenten, auf.
Es hat sich auch gezeigt, dass die Verbindungen eine sehr niedrige Toxizität mit einer LDs von mehr als 500 mg/kg aufweisen.
Die Aktivität kann gemäss dem Fleckenhemmungstest festgestellt und gemäss dem Fleckenreduktionstest gemessen werden. Bei beiden Untersuchungen wird eine Einschichtzellenkultur in einer Petrischale gebildet und danach mit einer Virussuspension infiziert, worauf die Kultur mit Nähragarose in Form eines Gels überschichtet wird. Dieses Gel gewährleistet, dass das Virus nicht über die Kultur verbreitet wird und somit Flächen lokalisierter Zellenzerstörung oder Flecken gebildet werden.
Beim Fleckenhemmungstest wird eine Filterpapierscheibe, die 0, 01 ml aufnimmt, wenn sie mit einer Lösung der Verbindung imprägniert wird, auf die Oberseite des Agarosegels gelegt. Die Verbindung kann dann durch das Gel diffundieren, so dass ihre grösste Konzentration rund um die Scheibe und ihre niedrigste Konzentration gegen die Peripherie der Petrischale zu vorhanden ist.
Die Wirsamkeit der Verbindung kann nun festgestellt werden, indem die Hemmungszone der Fleckbildung beobachtet wird.
Die feststellbare Aktivität wird nach dem Fleckenreduktionstest gemessen. Ein Bereich an
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Konzentrationen der Verbindung mit bekannter Molarität wird der Nähragaroseüberschichtung einverleibt. Die Fleckunterdrückung ist zur Verbindungskonzentration proportional. Die Fleckanzahl wird ausgedrückt als Prozent einer Kontrolle und eine Dosisreaktionskurve kann gezogen werden. Aus dieser Kurve können 50% der wirksamen Dosis (es,) bestimmt werden.
Einige Flavane sind in der chemischen Literatur bereits bekannt, doch ist bisher keine Ver- öffentlichung erfolgt, in der deren Verwendung zur Behandlung von Menschen oder Tieren vorgeschlagen wurde, mit Ausnahme von 3, 3', 4, 4', 5, 7-Hexahydroxyflavan, das zur Behandlung von Venenerkrankungen verwendet werden kann, 3-Hydroxyflavan, das ohne Erfolg gegen virale Hepatitis eingesetzt wurde (Lancet, , 1153 [1977 ]) ; verschiedene 3, 6-Dialkyl- oder-Dialkoxyflavane (US-PS Nr. 3, 555, 047), die den Blutcholesterinspiegel senken können; 1-Epi-3',4',5',5,7-pentahydroxy-
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vitaminähnlichen Effekt ausüben kann.
Demgemäss bezieht sich die Erfindung auf ein Verfahren zur Herstellung von neuen mono-, di-und trisubstituierten Flavanderivaten der allgemeinen Formel
EMI2.2
worin R'und R 'Substituenten aus der Gruppe Halogen, Cyano, Trifluormethyl, nied. Alkylamino, nied. Alkyl und Wasserstoff, und R2 und RZ'Substituenten aus der Gruppe Halogen, Cyano, Trifluormethyl, nied. Alkyl, nied. Alkoxy, mit Ausnahme von 4'-nied. Alkoxy, Amino, nied. Alkylamino, Hydroxy, mit Ausnahme von 4'-Hydroxy, und Wasserstoff bedeuten, mit der Massgabe, dass, wenn R2 und R"Wasserstoffatome darstellen, einer der Substituenten R'und R I'eine andere Bedeutung als Wasserstoff oder nied.
Alkyl hat, und mit der weiteren Massgabe, dass mindestens einer der Substituenten R R'', R und R"'Wasserstoff darstellt, und deren pharmazeutisch verwendbaren Salzen.
Die Verbindung der Formel (1) weist Substituenten R 1 und R l'in den Stellungen 6 und/oder
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Chemistry, 2. Ausgabe, 1948, MacMillan, London, Seite 528, beschrieben. Es kann aus der Molmasse M, der Dichte und dem Brechungsindex 11 gemäss der Gleichung
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berechnet werden.
Die Werte für viele Substituenten wurden von Vogel bestimmt und sind in J. Chem. Soc. im Jahre 1948 veröffentlicht worden.
Bevorzugt als Substituenten werden Chlor und Cyano für R R2', R2 und R2' und Hydroxyl für R2 bzw. R' ; Chlor ist der am meisten bevorzugte Substituent.
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Die Bedingungen der Wahl der Anzahl, der Stellung und der Art des Substituenten können zweckmässigerweise kombiniert werden, um die Wahrscheinlichkeit der Erhöhung der Wirksamkeit zu verbessern. Jedoch hängen die Endeigenschaften der Verbindungen bei der Verwendung auch von andern physikalischen und biologischen Eigenschaften ab.
Salze der Verbindungen (I) können gebildet werden, wenn ein Hydroxy- oder Aminosubstituent vorhanden ist. Pharmazeutisch verwendbare Salze sind jene von Mineralsäuren, wie Salzsäure oder Schwefelsäure, organischen Säuren, wie Milch-, Malein- und Essigsäure, und von Basen, wie Natrium oder Kalium.
Die neuen Verbindungen mit der höchsten Wirksamkeit in Versuchen sind 4'-Fluorflavan, 3', 4'-Dichlor-6-methylflavan, 4'-Chlor-7-methylflavan, 4'-Methylflavan, 6-Chlor-4'-methylflavan und 4', 6-Dichlorflavan.
Das erfindungsgemässe Verfahren zur Herstellung der Verbindungen (I) besteht darin, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel
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worin R', R ', R und R 'die obige Bedeutung haben, reduziert und dann cyclisiert oder cyclisiert und dann reduziert und gegebenenfalls durch Umsetzung einer erhaltenen Verbindung, welche einen Amino- oder Hydroxysubstituenten enthält, in einem wässerigen Medium mit einer geeigneten Mineralsäure oder einer organischen Säure oder einer Base ein Salz bildet.
Erfindungsgemäss können die Verbindungen der Formel (II) durch Behandlung mit Salzsäure cyclisiert werden, wobei das Flavyliumsalz erhalten wird, das durch katalytische Hydrierung zu einem Flavan reduziert werden kann (z. B. US-PS Nr. 3, 555, 047).
Das Chalkon kann durch katalytische Hydrierung zum Dihydrochalkon reduziert werden. Das erforderliche Flavan wird dann durch Behandlung des Dihydrochalkons mit Zinkchlorid in Benzol erhalten (z. B. Van Allan, Reynolds und Regan, J. Org. Chem. [1967], 32, 1897). Anderseits kann das Chalkon mit einem komplexen Hydridreduktionsmittel, wie Natriumborhydrid oder Cyanoborhydrid, behandelt werden, um das entsprechende (2-Hydroxyphenyl)-äthylphenylcarbinol zu erhalten.
Letzteres wird dann unter Verwendung eines Säurekatalysators, wie Essigsäure oder p-Toluolsulfonsäure, cyclisiert (z. B. L. Jurd, Chem. and Ind. [1967], 2175).
Die kombinierte Reduktion und Cyclisierung von Chalkonen der Formel (II) wird durchgeführt, wenn diese Verbindungen mit einer Mischung von Lithiumaluminiumhydrid und Aluminiumchlorid behandelt werden (M. M. Bokadia et al., J. Chem. Soc. [1962], 1658).
Die Reduktion und Cyclisierung gemäss der Erfindung wird am meisten bevorzugt durch Behandlung der Verbindung der Formel (II) mit einem Natriumborhydrid in einem Ätherlösungsmittel, vorzugsweise Tetrahydrofuran, und nachfolgende Cyclisierung unter Verwendung einer geeigneten Säure, vorzugsweise Essigsäure, durchgeführt.
Die Verbindungen der Formel (II) werden durch Knoevenagel-Kondensation von geeignet substituierten Acetophenon- und Benzaldehydderivaten (Nielsen, Organic Reactions, [1968], 16, 44) hergestellt. Dies kann durch Säure- oder Basenkatalyse in wässerigen oder organischen Medien unter Verwendung von organischen oder anorganischen Säuren oder Basen, wie Alkalimetallhydroxyden oder-alkoxyden, erfolgen.
Die Ausgangsmaterialien, die zur Herstellung von Chalkonen (II) erforderlich sind, sind im Handel erhältlich oder können in bekannter Weise hergestellt werden.
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Die erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen werden zur Herstellung von pharmazeutischen Zubereitungen verwendet, die eine Verbindung der Formel (I), ein Tautomeres oder ein pharmazeutisch verwendbares Salz hievon zusammen mit einem pharmazeutisch verwendbaren Träger hiefür enthalten. Insbesondere enthält eine derartige Zubereitung eine Verbindung der Formel (I) in wirksamer Einheitsdosisform.
Der hier verwendete Ausdruck "wirksame Einheitsdosisform" bezeichnet eine vorherbestimmte antivirale Menge, die ausreicht, gegen die Virusorganismen in vivo wirksam zu sein. Pharmazeutisch verwendbare Träger sind bekannte Materialien, die zum Zweck der Verabreichung von Medikamenten akzeptiert sind, und können feste, flüssige oder gasförmige Materialien sein, die sonst inert und medizinisch annehmbar sowie mit den aktiven Bestandteilen verträglich sind.
Diese pharmazeutischen Zubereitungen können parenteral, oder oder intranasal verabreicht oder als Suppositorium, als Inhalator, Salbe, Creme, Aerosol, Pulver oder Dampf verwendet oder als Nasentropfen u. dgl. eingenommen werden, wenn das Präparat zur Behandlung von Rhinovirusinfektionen verwendet wird.
Für derartige Infektionen werden die Zubereitungen oral oder parenteral in Dosen, berechnet als freies Flavan, von etwa 0, 125 pg bis 1, 25 mg/kg, vorzugsweise 0, 25 pg bis 0, 125 mg/kg, insbesondere 8 bis 30 g/kg Körpermasse verabreicht und in einer Einheitsdosisform, einige Male täglich in einer Menge von 10 pg bis 100 mg, zweckmässigerweise 0, 1 bis 10 mg/Einheitsdosis, verwendet.
Für die orale Verabreichung können feine Pulver oder Granulate Verdünnungs-, Dispergierund/oder oberflächenaktive Mittel enthalten und in Tropfen, in Wasser oder in einem Sirup ; in Kapseln oder Sachets im trockenen Zustand oder in einer nichtwässerigen Lösung oder Suspension, wobei Suspendiermittel zugesetzt werden können ; in Tabletten, wobei Bindemittel und Schmiermittel zugesetzt sein können ; oder in einer Suspension in Wasser oder einem Sirup dargereicht werden.
Wenn erwünscht oder notwendig, können Aromastoffe, Konservierungs-, Suspendier-, Verdickungsoder Emulgiermittel zugesetzt werden. Tabletten, Kapseln und Granulate werden bevorzugt und diese können überzogen werden. Anderseits werden die Zubereitungen als Lösung der Verbindung der Formel (I) in einem geeigneten Medium auf Ölbasis verabreicht.
Die Zubereitungen können auch intranasal unter Verwendung von Inhalatoren, Aerosolen oder Sprays oder durch Inhalation eines Dampfes, der die Verbindung der Formel (I) enthält, verabreicht werden.
Für die parenterale Verabreichung oder zur Verabreichung als Aerosole. Sprays oder Tropfen kann die Verbindung in wässeriger Lösung in einer Konzentration von etwa 0, 1 bis 10%, vorzugsweise 0, 1 bis 1%, insbesondere 0,2% Masse/Vol., präsentiert werden. Die Lösung kann Antioxydantien, Puffersubstanzen u. dgl. enthalten.
Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung näher erläutern, ohne dass diese jedoch hierauf beschränkt sein soll.
Beispiel 1 : a) Herstellung von 2', 4'-Dimethyl-2-hydroxychalkon
12, 2 g Salicylalkohol und 14, 8 g 2', 4'-Dimethylacetophenon wurden in 80 ml Äthanol gelöst und eine Lösung von 26,5 g Kaliumhydroxydpellets in 40 ml Wasser wurde unter Kühlen zugesetzt.
Die so erhaltene rote Lösung wurde 16 h bei Raumtemperatur stehengelassen und dann in einen Oberschuss an verdünnter Salzsäure gegossen. Das ausgefällte ölige Produkt wurde in Chloroform extrahiert und mit Wasser gewaschen und die Chloroformlösung eingedampft. Das Öl verfestigte sich bei Zerreiben mit Petroläther und der Feststoff wurde aus Toluol umkristallisiert, wobei 8, 20 g 2', 4'-Dimethyl-2-hydroxychalkon erhalten wurden, Fp. 122 bis 123 C. b) Herstellung von 2', 4'-Dimethylflavan
Die 8, 20 g des oben erhaltenen 2', 4'-Dimethyl-2-hydroxychalkons wurden in 150 ml Äthanol suspendiert und 2,50 g Natriumborhydrid wurden portionsweise zugesetzt. Die Mischung wurde 30 min lang gerührt und die erhaltene Lösung über Nacht stehengelassen.
Das Lösungsmittel wurde abdestilliert und der Rückstand in Chloroform gelöst und mit Wasser gewaschen. Bei Abdampfen des Chloroforms wurde das rohe Carbinolzwischenprodukt erhalten, das 2 h lang mit 100 ml Essigsäure am Rückfluss gekocht wurde. Bei Eindampfen wurde ein öliger Rückstand erhalten, der auf Aluminiumoxyd chromatographiert wurde, wobei mit Toluol eluiert wurde. Die Hauptfraktion nach
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Abdampfen des Lösungsmittels wurde unter Vakuum destilliert, wobei 4, 80 g 2', 4'-Dimethylflavan erhalten wurden, Kp. 135 bis 145 C/107 Pa.
Beispiele 2 bis 39 : Auf ähnliche Weise, wie in Beispiel 1 b) beschrieben, wurden die folgenden Verbindungen hergestellt :
EMI5.1
<tb>
<tb> Beispiel <SEP> Verbindung <SEP> Fp. <SEP> ( C)
<tb> 2 <SEP> 4'-Methylflavan <SEP> 94
<tb> 3 <SEP> 7-Chlorflavan <SEP> 37 <SEP> - <SEP> 40 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 6-Chlor-4'-methylflavan <SEP> 132 <SEP> - <SEP> 134
<tb> 5 <SEP> 4', <SEP> 6-Dichlorflavan <SEP> 97 <SEP> - <SEP> 99
<tb> 6 <SEP> 4', <SEP> 6-Dimethylflavan <SEP> 90 <SEP> - <SEP> 91
<tb> 7 <SEP> 4', <SEP> 7-Dichlorflavan <SEP> 62 <SEP> - <SEP> 65
<tb> 8 <SEP> 7-Chlor-4'-methylfalavan <SEP> 77 <SEP> - <SEP> 78
<tb> 9 <SEP> 4'-Chlor-6-methylflavan <SEP> 89
<tb> 10 <SEP> 3', <SEP> 4'-Dichlorflavan <SEP> 76
<tb> 11 <SEP> 2', <SEP> 4'-Dichlorflavan <SEP> Kp.
<SEP> 138 <SEP> - <SEP> 142/6,7 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 12 <SEP> 2',6'-Dichlorflavan <SEP> 87 <SEP> - <SEP> 89
<tb> 13 <SEP> 4'-Bromflavan <SEP> 78 <SEP> - <SEP> 79 <SEP>
<tb> 14 <SEP> 2'-Methylflavan <SEP> 73 <SEP> - <SEP> 75
<tb> 15 <SEP> 3', <SEP> 4'-Dichlor-6-methylflavan <SEP> Kp. <SEP> 170 <SEP> - <SEP> 180/20 <SEP> Pa
<tb> 16 <SEP> 4'-Chlorflavan <SEP> 76-77 <SEP>
<tb> 17 <SEP> 2'-Chlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 130-135'C/13, <SEP> 3 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 18 <SEP> 3'-Chlorflavan <SEP> Kp.
<SEP> 120-125 <SEP> 0/9, <SEP> 3 <SEP> Pa
<tb> 19 <SEP> 3'-Methoxyflavan <SEP> 53-55 <SEP>
<tb> 20 <SEP> 4'-Fluorflavan <SEP> 66 <SEP> - <SEP> 67 <SEP>
<tb> 21 <SEP> 4'-Brom-6-chlorflavan <SEP> 105 <SEP> - <SEP> 107 <SEP>
<tb> 22 <SEP> 6-Fluorflavan <SEP> 66 <SEP> - <SEP> 68 <SEP>
<tb> 23 <SEP> 6-Bromflavan <SEP> 58 <SEP> - <SEP> 59 <SEP>
<tb> 24 <SEP> 6-Brom-4'-methylflavan <SEP> 129-130 <SEP>
<tb> 25 <SEP> 6-Brom-4'-chlorflavan <SEP> 78 <SEP> - <SEP> 81
<tb> 26 <SEP> 2'-Methoxyflavan <SEP> 80-81 <SEP>
<tb> 27 <SEP> 3'-Trifluormethylflavan <SEP> 64 <SEP> - <SEP> 65
<tb> 28 <SEP> 6-Methoxyflavan <SEP> 85-86 <SEP>
<tb> 29 <SEP> 4', <SEP> 8-Dichlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 137 <SEP> - <SEP> 142/8 <SEP> Pa
<tb> 30 <SEP> 2'-Hydroxyflavan <SEP> Kp. <SEP> 130 <SEP> - <SEP> 135/60 <SEP> Pa
<tb> 31 <SEP> 6-Chlorflavan <SEP> 71-72 <SEP>
<tb> 32 <SEP> 3'-Methylflavan <SEP> Kp.
<SEP> 114 <SEP> - <SEP> 120/13 <SEP> Pa
<tb> 33 <SEP> 4'- <SEP> (N, <SEP> N-Dimethylamino)-flavan <SEP> 77-78 <SEP>
<tb> 34 <SEP> 4'-Aminoflavan <SEP> 85 <SEP> - <SEP> 87 <SEP>
<tb> 35 <SEP> 4'-Isopropylflavan <SEP> 46 <SEP> - <SEP> 47 <SEP>
<tb>
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EMI6.1
<tb>
<tb> Beispiel <SEP> Verbindung <SEP> Fp. <SEP> (OC)
<tb> 36 <SEP> 6-Chlor-4'-isopropylflavan <SEP> 117 <SEP> - <SEP> 119 <SEP>
<tb> 37 <SEP> 8-Chlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 155-160/10, <SEP> 7 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 38 <SEP> 6, <SEP> 8-Dichlorflavan <SEP> 74-76 <SEP>
<tb> 39 <SEP> 4'-Chlor-6-äthylflavan <SEP> 61 <SEP> - <SEP> 63 <SEP>
<tb>
Versuche in vivo
Die Verbindung 41, 6-Dichlorflavan wurde in Olivenöl B. P. in Konzentrationen von 3 und 1 mg/ml gelöst. 0, 1 ml aliquote Teile dieser Lösungen wurden Mäusen oral verabreicht.
Retro-orbitale Blutproben wurden 1/2 und 1 h nach der Verabreichung der Dosis und danach stündlich bis zu 7 h und dann wieder nach 24 h entnommen. Das Plasma aus diesen Blutproben wurde gesammelt und auf antivirale Wirksamkeit untersucht, wobei der oben beschriebene Fleckenhemmungstest angewendet wurde. Die gesamten Faeces jeder Maus wurden nach 24 h gesammelt und in einem Minimum von abs. Alkohol eingeweicht, welche Flüssigkeit dann durch den Fleckenhemmungstest auf antivirale Wirksamkeit getestet wurde. Die Gallenblasen der Mäuse wurden entfernt und jeweils mit 10 pl abs. Alkohol extrahiert ; der Extrakt wurde ebenfalls nach dem Fleckenhemmungstest getestet.
Die antivirale Wirksamkeit wurde in den Plasmaproben bis 2 h nach der Verabreichung und in den Gallenblasen- und Faecesextrakten festgestellt. Durch Auftragen gegen eine Standardkurve wurden die Plasmakonzentrationen nach 1 h bei 2 bis 4 pM für Mäuse, die eine niedrigere Dosis erhielten, und bei 10 pM für Mäuse, die eine höhere Dosis erhielten (wobei die Dosen etwa 30 bzw. 100 mg/kg Körpermasse betrugen), bestimmt.
Intranasale Verabreichung-Simulation in vitro
Petrischalen wurden wie für den Fleckenhemmungstest vorbereitet und die ineinanderverlaufende Zellschicht mit einer Schicht von Agarosegel bedeckt. Die Verbindung 41, 6-Dichlorflavan (1 pg) wurde in Äthanol gelöst und auf die Deckel der Petrischalen aufgebracht. Als das Äthanol verdampft war, wobei die Verbindung über die Innenseite der Deckel ausgebreitet war, wurden diese auf die Petrischalen gelegt. Eine ausreichende Menge der Verbindung war durch die Agaroseschicht gedrungen und bewirkte eine totale Hemmung der Fleckenbildung.
Im folgenden sind einige Beispiele für die mit den erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen hergestellten pharmazeutischen Zubereitungen angegeben ; diese wurden nach den in der Pharmazie bekannten Methoden erhalten.
1. Ein Inhalationsmittel zur Verwendung in einem Einblaseapparat wurde aus folgenden Be- standteilen hergestellt :
EMI6.2
Tween 80 0, 5 g
Span 80 0, 5 g
Methyl-p-hydroxybenzoesäure 0, 1 g
Wasser auf IM ml.
2. Eine Suspension zur Verwendung als Nasentropfen wurde aus den folgenden Bestandteilen hergestellt :
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EMI7.1
Natriumchlorid 0, 5 g
Natriumlaurylsulfat 0, 1 g
Methyl-p-hydroxybenzoesäure 0, 1 g
Wasser auf 100 ml.
3. Kapsel I
4', 6-Dichlorflavan 6, 0 g sprühgetrocknete Lactose 300, 0 g
Gelatinekapseln (Grösse 0) wurden jeweils mit 500 mg der Formulierung gefüllt, was 10 mg des aktiven Bestandteiles pro Kapsel ergab.
4. Kapsel II
EMI7.2
Maisstärke 20, 8 g
Polyvinylpyrrolidin 5, 2 g
Gelatinekapseln (Grösse 1) wurden jeweils mit 400 mg der Formulierung gefüllt, was 10 mg des aktiven Bestandteils pro Kapsel ergab.
5. Tablette aus 4', 6-Dichlorflavan
Eine Tablettenformulierung enthaltend eine Mischung von 10 mg 4', 6-Dichlorflavan, 90 mg Lactose, 10 mg Maisstärke und 1 mg Magnesiumstearat wurde durch Nassgranulieren hergestellt.
6. Tablettenformulierungen jeweils mit einem Gehalt an einem der Flavanderivate der Beispiele 5 bis 55 wurden nach der unter 5. beschriebenen Methode hergestellt.
7. Ölformulierung von 4', 6-Dichlorflavan
EMI7.3
Die Verbindung wurde im Olivenöl zur Verwendung durch orale Verabreichung gelöst.
8. Verschiedene Flavanderivate wurden nach dem Fleckenreduktionstest getestet und ihre ED s, gegen Rhinovirus Serotype 1B festgestellt.
EMI7.4
<tb>
<tb>
Flavanderivat <SEP> ED <SEP> so <SEP> (pM)
<tb> 4', <SEP> 6-Dichlor- <SEP> 0,0014
<tb> 4'-Methyl-6-chlor- <SEP> 0, <SEP> 0023
<tb> 4'-Methyl- <SEP> 0, <SEP> 0125
<tb> 6-Methoxy- <SEP> 0, <SEP> 0125
<tb> 2'-Methyl-0, <SEP> 015
<tb> 4'-Chlor-7-methyl- <SEP> 0, <SEP> 0155
<tb> 3', <SEP> 4'-Dichlor-6-methyl- <SEP> 0, <SEP> 017
<tb> 4'-Fluor-0, <SEP> 0175
<tb> 4'-Brom-6-chlor- <SEP> 0, <SEP> 021
<tb> 4'-Brom-0, <SEP> 036
<tb>
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EMI8.1
<tb>
<tb> Flavanderivat <SEP> ED <SEP> (pM)
<tb> 4'-Chlor-0, <SEP> 04
<tb> 3', <SEP> 4' <SEP> -Dichlor- <SEP> 0, <SEP> 04
<tb> 4', <SEP> 6-Dimethyl- <SEP> 0,042
<tb> 2', <SEP> 6'-Dichlor <SEP> 0,048
<tb> 4', <SEP> 7-Dichlor- <SEP> 0,048
<tb> 4'-Amino-0, <SEP> 05
<tb> 6-Chlor-0, <SEP> 05
<tb> 2', <SEP> 4'-Dichlor- <SEP> 0,064
<tb> 4'-Acetoxy-0, <SEP> 067
<tb> 7-Chlor-0, <SEP> 07
<tb> 4'-Methyl-7-chlor-0,
<SEP> 083
<tb> 2'-Chlor-0, <SEP> 112 <SEP>
<tb> 3'-Methoxy- <SEP> 0,125
<tb> 6-Methyl-0, <SEP> 15 <SEP>
<tb> 4'-N, <SEP> N-Dimethylamino- <SEP> 0,265
<tb> 3'-Chlor-0, <SEP> 27
<tb> 3'-Methyl- <SEP> 0, <SEP> 29
<tb> 2'-Methoxy-0, <SEP> 37
<tb> 2'-Hydroxy- <SEP> 0, <SEP> 78
<tb> 3'-Trifluormethyl- <SEP> 1, <SEP> 4
<tb>
PATENTANSPRÜCHE :
1. Verfahren zur Herstellung von neuen mono-, di-und trisubstituierten Flavanderivaten der allgemeinen Formel
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The invention relates to a process for the preparation of new compounds with antiviral activity.
Rhinovirus infections are responsible for about 70% of cases where the disease commonly known as common runny nose occurs, although infections by other viruses such as entero- and corona viruses and allergic reactions can also lead to a "runny nose". Humanity all over the world is susceptible to rhinoviral infection, which is a major cause of illness and absence from work and is therefore of great economic significance.
The common runny nose is transmitted through droplets that, when an infected person coughs or sneezes, are breathed out and then inhaled by another person, causing the respiratory tract infection. After an incubation period of 48 hours to 2 weeks, the infected person may experience sore throat, cough, sneezing, increased mucus secretions and fever due to a secondary bacterial infection.
After infection, there is a certain risk of developing a rhinovirus serotype, but this does not confer immunity to other serotypes. Continuous re-infection by serotypes prevalent in certain areas maintains a certain level of resistance to these viruses in most people. A runny nose therefore only occurs when a new serotype occurs; this is an average of 2 to 3 times a year.
Since there is no anti-immunity and there are still at least 120 known immunologically determined rhinovirus serotypes, vaccination does not appear to be a viable treatment method. Air hygiene has been tried as a method of reducing the occurrence of runny nose, but has not been successful. It appears that the only practical treatment would be that with a compound that is suitable for administration to humans and is preferably effective against all common serotypes or at least against a wide range of rhinoviruses. Despite substantial research in this area, such compounds are currently unavailable and there is no established chemotherapeutic agent against this disease.
It has now been found that flavan and various derivatives thereof are active against certain viruses, including those which infect the respiratory tract, for example Picora, Lot, Arbo, Myxo, Corona, Herpes and Adenovirus. In particular, these compounds have activity against rhinoviruses, in particular against serotypes 1B, 2 and 9. Aside from some compounds that fall into this class and are known, but of which no such activity has been reported in this regard, new derivatives have also been made and tested. It has been found that these compounds can inhibit rhinoviruses in culture during in vitro experiments and some also show some activity against other viruses such as herpes, influenza and measles viruses.
Furthermore, the same compounds have activity against rhinoviruses in vivo, especially when they are administered in suitable doses to humans and mammals. While flavan itself has a fairly good activity against rhinoviruses, substituted derivatives have a similar or increased activity, depending on the type and position of the substituent.
The compounds have also been shown to have very low toxicity with an LDs of more than 500 mg / kg.
The activity can be determined according to the stain inhibition test and measured according to the stain reduction test. In both studies, a single-layer cell culture is formed in a Petri dish and then infected with a virus suspension, after which the culture is overlaid with nutrient agarose in the form of a gel. This gel ensures that the virus is not spread through the culture and thus areas of localized cell destruction or spots are formed.
In the stain inhibition test, a filter paper disc, which takes up 0.01 ml when it is impregnated with a solution of the compound, is placed on the top of the agarose gel. The compound can then diffuse through the gel so that its greatest concentration around the disk and its lowest concentration towards the periphery of the Petri dish is too.
The effectiveness of the compound can now be determined by observing the zone of inhibition of staining.
The detectable activity is measured after the stain reduction test. An area
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Concentrations of the compound with known molarity are incorporated into the nutrient agarose overlay. The stain suppression is proportional to the concentration of the compound. The number of spots is expressed as a percentage of a control and a dose response curve can be drawn. From this curve 50% of the effective dose (es,) can be determined.
Some flavans are already known in the chemical literature, but so far no publication has been proposed to use them for the treatment of humans or animals, with the exception of 3, 3 ', 4, 4', 5, 7-hexahydroxyflavan , which can be used to treat venous diseases, 3-hydroxyflavan, which has been used to no avail against viral hepatitis (Lancet,, 1153 [1977]); various 3,6-dialkyl- or dialkoxyflavans (U.S. Patent Nos. 3,555,047) that can lower blood cholesterol; 1-Epi-3 ', 4', 5 ', 5,7-pentahydroxy-
EMI2.1
can have a vitamin-like effect.
Accordingly, the invention relates to a process for the preparation of new mono-, di- and tri-substituted flavane derivatives of the general formula
EMI2.2
wherein R 'and R' substituents from the group halogen, cyano, trifluoromethyl, low. Alkylamino, low Alkyl and hydrogen, and R2 and RZ 'substituents from the group halogen, cyano, trifluoromethyl, nied. Alkyl, low Alkoxy, with the exception of 4'-nied. Alkoxy, amino, low Alkylamino, hydroxy, with the exception of 4'-hydroxy, and hydrogen, with the proviso that when R 2 and R "represent hydrogen atoms, one of the substituents R 'and R I'has a meaning other than hydrogen or lower.
Has alkyl, and with the further requirement that at least one of the substituents R R ", R and R" 'is hydrogen, and their pharmaceutically usable salts.
The compound of formula (1) has substituents R 1 and R 1 'in positions 6 and / or
EMI2.3
Chemistry, 2nd Edition, 1948, MacMillan, London, page 528. It can consist of the molecular weight M, the density and the refractive index 11 according to the equation
EMI2.4
be calculated.
The values for many substituents were determined by Vogel and are described in J. Chem. Soc. published in 1948.
Preferred substituents are chlorine and cyano for R R2 ', R2 and R2' and hydroxyl for R2 and R '; Chlorine is the most preferred substituent.
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The conditions for the selection of the number, the position and the type of the substituent can expediently be combined in order to improve the probability of increasing the effectiveness. However, the ultimate properties of the compounds in use also depend on other physical and biological properties.
Salts of compounds (I) can be formed if a hydroxy or amino substituent is present. Pharmaceutically usable salts are those of mineral acids such as hydrochloric acid or sulfuric acid, organic acids such as lactic, maleic and acetic acid, and of bases such as sodium or potassium.
The new compounds with the highest efficacy in tests are 4'-fluoroflavan, 3 ', 4'-dichloro-6-methylflavan, 4'-chloro-7-methylflavan, 4'-methylflavan, 6-chloro-4'-methylflavan and 4 ', 6-dichlorflavan.
The process according to the invention for the preparation of the compounds (I) consists in that a compound of the general formula
EMI3.1
wherein R ', R', R and R 'have the above meaning, reduced and then cyclized or cyclized and then reduced and optionally by reacting a compound obtained containing an amino or hydroxy substituent in an aqueous medium with a suitable mineral acid or an organic acid or a base forms a salt.
According to the invention, the compounds of formula (II) can be cyclized by treatment with hydrochloric acid to give the flavylium salt, which can be reduced to a flavan by catalytic hydrogenation (e.g. US Pat. No. 3,555,047).
The chalcone can be reduced to dihydrochalcone by catalytic hydrogenation. The required flavan is then obtained by treating the dihydrochalcone with zinc chloride in benzene (e.g. Van Allan, Reynolds and Regan, J. Org. Chem. [1967], 32, 1897). On the other hand, the chalcone can be treated with a complex hydride reducing agent such as sodium borohydride or cyanoborohydride to obtain the corresponding (2-hydroxyphenyl) ethylphenyl carbinol.
The latter is then cyclized using an acid catalyst such as acetic acid or p-toluenesulfonic acid (e.g. L. Jurd, Chem. And Ind. [1967], 2175).
The combined reduction and cyclization of chalcones of formula (II) is carried out when these compounds are treated with a mixture of lithium aluminum hydride and aluminum chloride (M. M. Bokadia et al., J. Chem. Soc. [1962], 1658).
The reduction and cyclization according to the invention is most preferably carried out by treating the compound of formula (II) with a sodium borohydride in an ether solvent, preferably tetrahydrofuran, and subsequent cyclization using a suitable acid, preferably acetic acid.
The compounds of the formula (II) are prepared by Knoevenagel condensation of suitably substituted acetophenone and benzaldehyde derivatives (Nielsen, Organic Reactions, [1968], 16, 44). This can be done by acid or base catalysis in aqueous or organic media using organic or inorganic acids or bases, such as alkali metal hydroxides or alkoxides.
The starting materials required for the production of chalcones (II) are commercially available or can be produced in a known manner.
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The compounds obtainable according to the invention are used for the production of pharmaceutical preparations which contain a compound of the formula (I), a tautomer or a pharmaceutically acceptable salt thereof together with a pharmaceutically acceptable carrier therefor. In particular, such a preparation contains a compound of formula (I) in effective unit dosage form.
The term "effective unit dose form" as used herein means a predetermined antiviral amount sufficient to be effective against the virus organisms in vivo. Pharmaceutically acceptable carriers are known materials which are accepted for the purpose of administering medicaments and can be solid, liquid or gaseous materials which are otherwise inert and medically acceptable and which are compatible with the active ingredients.
These pharmaceutical preparations can be administered parenterally, or or intranasally or used as a suppository, as an inhaler, ointment, cream, aerosol, powder or vapor or as nose drops and the like. Like. Are taken when the preparation is used for the treatment of rhinovirus infections.
For such infections, the preparations are administered orally or parenterally in doses, calculated as free flavan, from approximately 0.125 pg to 1.25 mg / kg, preferably 0.25 pg to 0.125 mg / kg, in particular 8 to 30 g / kg body weight administered and used in a unit dose form, several times a day in an amount of 10 pg to 100 mg, conveniently 0.1 to 10 mg / unit dose.
For oral administration, fine powders or granules may contain diluents, dispersants and / or surfactants, and in drops, in water or in a syrup; in capsules or sachets in the dry state or in a non-aqueous solution or suspension, whereby suspending agents can be added; in tablets, whereby binders and lubricants can be added; or in a suspension in water or syrup.
If desired or necessary, flavoring, preserving, suspending, thickening or emulsifying agents can be added. Tablets, capsules and granules are preferred and these can be coated. On the other hand, the preparations are administered as a solution of the compound of formula (I) in a suitable oil-based medium.
The preparations can also be administered intranasally using inhalers, aerosols or sprays or by inhalation of a vapor containing the compound of formula (I).
For parenteral administration or for administration as aerosols. The compound can be presented in sprays or drops in aqueous solution in a concentration of about 0.1 to 10%, preferably 0.1 to 1%, in particular 0.2% mass / vol. The solution can contain antioxidants, buffer substances and the like. Like. included.
The following examples are intended to explain the invention in more detail, but without restricting it to them.
Example 1: a) Preparation of 2 ', 4'-dimethyl-2-hydroxychalkon
12.2 g of salicylic alcohol and 14.8 g of 2 ', 4'-dimethylacetophenone were dissolved in 80 ml of ethanol and a solution of 26.5 g of potassium hydroxide pellets in 40 ml of water was added with cooling.
The red solution thus obtained was left to stand at room temperature for 16 hours and then poured into an excess of dilute hydrochloric acid. The precipitated oily product was extracted into chloroform and washed with water and the chloroform solution was evaporated. The oil solidified on trituration with petroleum ether and the solid was recrystallized from toluene to give 8.20 g of 2 ', 4'-dimethyl-2-hydroxychalkon, mp 122 to 123 C. b) Preparation of 2', 4 '-Dimethylflavan
The 8.20 g of the 2 ', 4'-dimethyl-2-hydroxychalkone obtained above were suspended in 150 ml of ethanol and 2.50 g of sodium borohydride were added in portions. The mixture was stirred for 30 minutes and the resulting solution was left to stand overnight.
The solvent was distilled off and the residue was dissolved in chloroform and washed with water. Evaporation of the chloroform gave the crude carbinol intermediate which was refluxed with 100 ml acetic acid for 2 hours. Evaporation gave an oily residue which was chromatographed on aluminum oxide, eluting with toluene. The main fraction after
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Evaporation of the solvent was distilled in vacuo to give 4.80 g of 2 ', 4'-dimethylflavan, bp 135 to 145 C / 107 Pa.
Examples 2 to 39: The following compounds were prepared in a similar manner to that described in Example 1 b):
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<tb>
<tb> Example <SEP> connection <SEP> Fp. <SEP> (C)
<tb> 2 <SEP> 4'-methylflavan <SEP> 94
<tb> 3 <SEP> 7-Chlorflavan <SEP> 37 <SEP> - <SEP> 40 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 6-chloro-4'-methylflavan <SEP> 132 <SEP> - <SEP> 134
<tb> 5 <SEP> 4 ', <SEP> 6-dichlorflavan <SEP> 97 <SEP> - <SEP> 99
<tb> 6 <SEP> 4 ', <SEP> 6-dimethylflavan <SEP> 90 <SEP> - <SEP> 91
<tb> 7 <SEP> 4 ', <SEP> 7-dichlorflavan <SEP> 62 <SEP> - <SEP> 65
<tb> 8 <SEP> 7-chloro-4'-methylfalavan <SEP> 77 <SEP> - <SEP> 78
<tb> 9 <SEP> 4'-chloro-6-methylflavan <SEP> 89
<tb> 10 <SEP> 3 ', <SEP> 4'-dichlorflavan <SEP> 76
<tb> 11 <SEP> 2 ', <SEP> 4'-dichlorflavan <SEP> Kp.
<SEP> 138 <SEP> - <SEP> 142 / 6.7 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 12 <SEP> 2 ', 6'-dichlorflavan <SEP> 87 <SEP> - <SEP> 89
<tb> 13 <SEP> 4'-Bromflavan <SEP> 78 <SEP> - <SEP> 79 <SEP>
<tb> 14 <SEP> 2'-methylflavan <SEP> 73 <SEP> - <SEP> 75
<tb> 15 <SEP> 3 ', <SEP> 4'-dichloro-6-methylflavan <SEP> Kp. <SEP> 170 <SEP> - <SEP> 180/20 <SEP> Pa
<tb> 16 <SEP> 4'-Chlorflavan <SEP> 76-77 <SEP>
<tb> 17 <SEP> 2'-Chlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 130-135'C / 13, <SEP> 3 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 18 <SEP> 3'-chlorflavan <SEP> Kp.
<SEP> 120-125 <SEP> 0/9, <SEP> 3 <SEP> Pa
<tb> 19 <SEP> 3'-methoxyflavan <SEP> 53-55 <SEP>
<tb> 20 <SEP> 4'-Fluorflavan <SEP> 66 <SEP> - <SEP> 67 <SEP>
<tb> 21 <SEP> 4'-bromo-6-chlorflavan <SEP> 105 <SEP> - <SEP> 107 <SEP>
<tb> 22 <SEP> 6-Fluorflavan <SEP> 66 <SEP> - <SEP> 68 <SEP>
<tb> 23 <SEP> 6-Bromflavan <SEP> 58 <SEP> - <SEP> 59 <SEP>
<tb> 24 <SEP> 6-bromo-4'-methylflavan <SEP> 129-130 <SEP>
<tb> 25 <SEP> 6-bromo-4'-chlorflavan <SEP> 78 <SEP> - <SEP> 81
<tb> 26 <SEP> 2'-methoxyflavan <SEP> 80-81 <SEP>
<tb> 27 <SEP> 3'-trifluoromethylflavan <SEP> 64 <SEP> - <SEP> 65
<tb> 28 <SEP> 6-methoxyflavan <SEP> 85-86 <SEP>
<tb> 29 <SEP> 4 ', <SEP> 8-dichlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 137 <SEP> - <SEP> 142/8 <SEP> Pa
<tb> 30 <SEP> 2'-hydroxyflavan <SEP> Kp. <SEP> 130 <SEP> - <SEP> 135/60 <SEP> Pa
<tb> 31 <SEP> 6-Chlorflavan <SEP> 71-72 <SEP>
<tb> 32 <SEP> 3'-methylflavan <SEP> Kp.
<SEP> 114 <SEP> - <SEP> 120/13 <SEP> Pa
<tb> 33 <SEP> 4'- <SEP> (N, <SEP> N-dimethylamino) -flavan <SEP> 77-78 <SEP>
<tb> 34 <SEP> 4'-aminoflavan <SEP> 85 <SEP> - <SEP> 87 <SEP>
<tb> 35 <SEP> 4'-isopropylflavan <SEP> 46 <SEP> - <SEP> 47 <SEP>
<tb>
<Desc / Clms Page number 6>
EMI6.1
<tb>
<tb> Example <SEP> connection <SEP> Fp. <SEP> (OC)
<tb> 36 <SEP> 6-chloro-4'-isopropylflavan <SEP> 117 <SEP> - <SEP> 119 <SEP>
<tb> 37 <SEP> 8-Chlorflavan <SEP> Kp. <SEP> 155-160 / 10, <SEP> 7 <SEP> Pa <SEP>
<tb> 38 <SEP> 6, <SEP> 8-dichlorflavan <SEP> 74-76 <SEP>
<tb> 39 <SEP> 4'-chloro-6-ethylflavan <SEP> 61 <SEP> - <SEP> 63 <SEP>
<tb>
Try in vivo
The compound 41, 6-dichlorflavan was dissolved in olive oil B.P. in concentrations of 3 and 1 mg / ml. 0.1 ml aliquots of these solutions were administered orally to mice.
Retro-orbital blood samples were taken 1/2 and 1 h after the dose was administered and then hourly up to 7 h and then again after 24 h. The plasma from these blood samples was collected and tested for antiviral activity using the stain inhibition test described above. The entire faeces of each mouse were collected after 24 hours and in a minimum of abs. Soaked alcohol, which liquid was then tested for antiviral activity by the stain inhibition test. The gall bladders of the mice were removed and 10 pl abs. Alcohol extracted; the extract was also tested after the stain inhibition test.
The antiviral activity was determined in the plasma samples up to 2 hours after the administration and in the gallbladder and faeces extracts. By plotting against a standard curve, plasma concentrations were determined after 1 h at 2 to 4 pM for mice receiving a lower dose and at 10 pM for mice receiving a higher dose (the doses being about 30 and 100 mg / kg body mass, respectively) were) determined.
Intranasal administration simulation in vitro
Petri dishes were prepared as for the stain inhibition test and the intermeshing cell layer was covered with a layer of agarose gel. Compound 41, 6-dichlorflavan (1 pg) was dissolved in ethanol and applied to the lid of the petri dishes. When the ethanol had evaporated with the compound spread over the inside of the lids, they were placed on the petri dishes. A sufficient amount of the compound had penetrated the agarose layer and caused a total inhibition of staining.
Some examples of the pharmaceutical preparations prepared with the compounds obtainable according to the invention are given below; these were obtained by the methods known in pharmacy.
1. An inhalant for use in a blower was made from the following ingredients:
EMI6.2
Tween 80 0.5 g
Span 80 0.5 g
Methyl p-hydroxybenzoic acid 0.1 g
Water to IM ml.
2. A suspension for use as a nose drop was made from the following ingredients:
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EMI7.1
Sodium chloride 0.5 g
Sodium lauryl sulfate 0.1 g
Methyl p-hydroxybenzoic acid 0.1 g
Water to 100 ml.
3. Capsule I
4 ', 6-dichlorflavan 6, 0 g spray-dried lactose 300, 0 g
Gelatin capsules (size 0) were each filled with 500 mg of the formulation, giving 10 mg of the active ingredient per capsule.
4. Capsule II
EMI7.2
Corn starch 20.8 g
Polyvinyl pyrrolidine 5, 2 g
Gelatin capsules (size 1) were each filled with 400 mg of the formulation, giving 10 mg of the active ingredient per capsule.
5. Tablet of 4 ', 6-dichloro-flavan
A tablet formulation containing a mixture of 10 mg 4 ', 6-dichlorflavan, 90 mg lactose, 10 mg corn starch and 1 mg magnesium stearate was prepared by wet granulation.
6. Tablet formulations each containing one of the flavane derivatives of Examples 5 to 55 were prepared by the method described under 5.
7. Oil formulation of 4 ', 6-dichlorflavan
EMI7.3
The compound was dissolved in the olive oil for use by oral administration.
8. Various flavane derivatives were tested after the stain reduction test and their ED s were found against rhinovirus serotype 1B.
EMI7.4
<tb>
<tb>
Flavane derivative <SEP> ED <SEP> so <SEP> (pm)
<tb> 4 ', <SEP> 6-dichloro- <SEP> 0.0014
<tb> 4'-methyl-6-chloro <SEP> 0, <SEP> 0023
<tb> 4'-methyl- <SEP> 0, <SEP> 0125
<tb> 6-methoxy- <SEP> 0, <SEP> 0125
<tb> 2'-methyl-0, <SEP> 015
<tb> 4'-chloro-7-methyl- <SEP> 0, <SEP> 0155
<tb> 3 ', <SEP> 4'-dichloro-6-methyl- <SEP> 0, <SEP> 017
<tb> 4'-fluoro-0, <SEP> 0175
<tb> 4'-bromo-6-chloro <SEP> 0, <SEP> 021
<tb> 4'-bromo-0, <SEP> 036
<tb>
<Desc / Clms Page number 8>
EMI8.1
<tb>
<tb> Flavane derivative <SEP> ED <SEP> (pM)
<tb> 4'-chloro-0, <SEP> 04
<tb> 3 ', <SEP> 4' <SEP> -Dichlor- <SEP> 0, <SEP> 04
<tb> 4 ', <SEP> 6-dimethyl- <SEP> 0.042
<tb> 2 ', <SEP> 6'-dichloro <SEP> 0.048
<tb> 4 ', <SEP> 7-dichloro- <SEP> 0.048
<tb> 4'-amino-0, <SEP> 05
<tb> 6-chloro-0, <SEP> 05
<tb> 2 ', <SEP> 4'-dichloro- <SEP> 0.064
<tb> 4'-acetoxy-0, <SEP> 067
<tb> 7-chloro-0, <SEP> 07
<tb> 4'-methyl-7-chloro-0,
<SEP> 083
<tb> 2'-chloro-0, <SEP> 112 <SEP>
<tb> 3'-methoxy- <SEP> 0.125
<tb> 6-methyl-0, <SEP> 15 <SEP>
<tb> 4'-N, <SEP> N-dimethylamino- <SEP> 0.265
<tb> 3'-chloro-0, <SEP> 27
<tb> 3'-methyl- <SEP> 0, <SEP> 29
<tb> 2'-methoxy-0, <SEP> 37
<tb> 2'-hydroxy- <SEP> 0, <SEP> 78
<tb> 3'-trifluoromethyl- <SEP> 1, <SEP> 4
<tb>
PATENT CLAIMS:
1. Process for the preparation of new mono-, di- and tri-substituted flavane derivatives of the general formula
EMI8.2
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