AR035187A1 - Fragmentos de acidos nucleicos de cianobacterias que codifican proteinas utiles para controlar caracteristicas de plantas por medio de transformacion nuclear o de plastomas - Google Patents

Abstract

Se describen cianobacterias como fuente alternativa de los genes ahas y pds para las transformaciones de plantas y para su uso como marcadores seleccionables. En particular, se proveen cianobacterias, p.ej. Synechocystis, como fuente de los agentes que codifican proteínas que no son sensibles a herbicidas y elementos genéticos para controlar la expresión en plástidos. Se encontraron fragmentos de ácidos nucleicos, tanto de la subunidad grande como de la subunidad pequena de la acetolacto sintetasa (ahas) que proveen resistencia a herbicidas. Además, se provee un nuevo polinucleótido aislado y purificado que consiste en un gen mutante de la fitoeno desaturasa (pds) de Synechosystis que confiere resistencia a la 4'-fluoro-6-[(a,a,a-trifluoro-m-tolil)oxil]picolinamida, un herbicida decolorante. Asimismo se describe un vector de expresión replicable que comprende la secuencia polinucleotídica de cianobacteria, un genoma nuclear y un plastoma que comprenden este vector de expresión replicable, una planta transgénica que es producida por transformación con dicho vector de expresión replicable y que presenta resistencia y resistencia cruzada a ciertos herbicidas decolorantes e imidazolinonas, la progenie derivada de dicha planta, un marcador seleccionable para una transformación que comprende el gen pds mutante de cianobacterias, un proceso de selección que comprende el uso del gen pds mutante de cianobacterias acoplado a la selección de inhibidores de pds para seleccionar nuevas características tales como la resistencia a los herbicidas, un marcador seleccionable para una transformación que comprende una subunidad de ahas de cianobacterias, un proceso de selección que comprende el uso de una subunidad de ahas de cianobacteria acoplado a la selección de una imidazolinona para seleccionar nuevas características tales como la resistencia a los herbicidas, un método de búsqueda de ensayo rápido basado en placas disenado para identificar inhibidores de vías metabólicas específicas que solamente son comunes a las cianobacterias fotoautotróficas y plantas superiores, un método para aislar y seleccionar mutantes resistentes a los herbicidas, un método para mejorar la transformación genética de las cianobacterias, un método para la transformación de plastomas con fragmentos de ácido nucleico de cianobacterias que codifican la resistencia a herbicidas y un método para identificar el sitio blanco de un gen en un organismo cuya secuencia genómica completa se encuentra disponible. Por consiguiente se proveen mejoras a los métodos que utilizan cianobacterias para la búsqueda de compuestos, incluyendo un nuevo protocolo de Alto rendimiento que constituye una manera rápida y eficiente en cuanto al costo para identificar los genes del sitio blanco.