WO2023210042A1 - Ｉｌ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬 - Google Patents

Ｉｌ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬 Download PDF

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WO2023210042A1
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cells
inhibitor
tumor
administered
mice
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PCT/JP2022/037436
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研一郎 清野
ナビール 梶原
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国立大学法人北海道大学
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Definitions

  • the present invention relates to a medicament for treating and/or preventing tumors expressing IL-34.
  • MDSCs Myeloid-derived suppressor cells
  • MDSCs are bone marrow-derived immunosuppressive cells that are involved in the construction of the tumor microenvironment.
  • MDSCs are a heterogeneous cell population in terms of differentiation, morphology, and function, and include at least monocytic myeloid-derived suppressor cells (M-MDSCs) and polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cells (polymorphonuclear MDSCs). PMN-MDSC).
  • MDSCs are reported to be involved in immunosuppression and angiogenesis (see Non-Patent Documents 1 and 2).
  • Estrogen receptor (ER) inhibitors are reported to act on MDSCs and affect the tumor microenvironment (see Non-Patent Document 3).
  • TNBC triple negative breast cancer
  • ER estrogen receptor
  • PgR progesterone receptor
  • HER2 human epidermal growth factor receptor type 2
  • TNBC exhibits higher recurrence rates, rapid progression after recurrence, and poor prognosis compared to other types of breast cancer. Therefore, a new treatment method for TNBC is desired.
  • IL-34 interleukin-34
  • the present inventor analyzed the effect of IL-34 on TNBC and found that IL-34 is involved in the differentiation of MDSCs. Furthermore, the present inventors have also found that the above-mentioned effects of IL-34 also require ER signals. Based on these findings, the present inventor thought that it might be possible to find a new treatment method for tumors expressing IL-34.
  • An object of the present invention is to provide a medicament for treating and/or preventing tumors expressing IL-34. Another object of the present invention is to provide a method for treating tumors that express IL-34.
  • the present inventors have found that by suppressing ER signals in tumors that express IL-34, it is possible to release the suppression of immunity caused by IL-34 through MDSCs.
  • the present invention was completed after further investigation.
  • the present invention relates to the following medicaments for treating and/or preventing tumors expressing IL-34, and methods for treating tumors expressing IL-34.
  • the medicament according to [1] which contains the estrogen receptor signal inhibitor and the immune checkpoint inhibitor as active ingredients.
  • the medicament according to [1] which contains the estrogen receptor signal inhibitor, the cell-killing anticancer agent, and the immune checkpoint inhibitor as active ingredients.
  • the estrogen receptor signal inhibitor is an estrogen receptor inhibitor.
  • the estrogen receptor inhibitor is at least one selected from the group consisting of methylpiperidinopyrazole, fulvestrant, tamoxifen, and toremifene.
  • the estrogen receptor signal inhibitor is an estrogen production inhibitor.
  • the estrogen production inhibitor is anastrozole.
  • the present invention it is possible to provide a medicament for treating and/or preventing a tumor expressing IL-34, and a method for treating a tumor expressing IL-34.
  • FIG. 1 is a schematic diagram for explaining the mechanism by which anti-tumor immunity is suppressed and the effect of anti-tumor agents is reduced in tumors expressing IL-34.
  • FIG. 2 is a schematic diagram for explaining the mechanism by which an ER signal inhibitor cancels the above-described effect of IL-34 in tumors expressing IL-34.
  • FIG. 3A is a graph showing the results of statistical analysis of the expression level of IL-34 in each type of human breast cancer.
  • FIG. 3B is a Kaplan-Meier plot of the overall survival rate of groups with high and low expression levels of IL-34 among triple-negative breast cancer patients.
  • FIG. 4A is a photograph of 4T1 cells and 4T1 cells in which the IL-34 gene has been knocked out.
  • FIG. 4B is a graph showing the concentration of IL-34 in the culture medium of two types of cells.
  • FIG. 5A is a contour plot showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC among CD45 positive cells in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 5B is a graph showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC among CD45-positive cells in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 6 is a graph showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC in CD45-positive cells after culturing in the presence or absence of IL-34.
  • FIG. 5A is a contour plot showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC among CD45 positive cells in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 5B is a graph showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC among CD45
  • FIG. 7A is a photograph showing the distribution of Tregs in tumors derived from 4T1 cells.
  • FIG. 7B is a photograph showing the distribution of Tregs in tumors derived from IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 8A is a graph showing the number of Tregs per field in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 8B is a graph showing the average number of Tregs per field in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 9A is a photograph showing the distribution of vascular endothelial cells in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 9B is a graph showing the percentage of vascular endothelial cells per field in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 10A is a contour plot showing M-MDSC and PMN-MDSC in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells of mice treated with MPP.
  • FIG. 10B is a graph showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC in CD45-positive cells in tumors derived from 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells of mice administered MPP.
  • FIG. 11A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with PTX.
  • FIG. 11B is a graph showing the weight of tumors derived from 4T1 cells in mice administered PTX.
  • FIG. 11C is a graph showing the time course of tumor size derived from IL-34 knockout 4T1 cells in mice administered PTX.
  • FIG. 11D is a graph showing the weight of tumors derived from IL-34 knockout 4T1 cells in mice administered PTX.
  • FIG. 12A is a graph showing the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered PTX and/or MPP.
  • FIG. 12B is a graph showing the percentage of M-MDSC and PMN-MDSC among CD45-positive cells in tumors derived from 4T1 cells of mice administered PTX and/or MPP.
  • FIG. 13A is a graph showing the results of the MTT test on 4T1 cells.
  • FIG. 13B is a graph showing the results of the MTT test on IL-34 knockout 4T1 cells.
  • FIG. 14A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with FUL.
  • FIG. 14B is a graph showing the weight of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with FUL on day 14.
  • FIG. 15 is a graph showing the percentage of various cells among CD45-positive cells in tumors derived from 4T1 cells of mice administered with FUL.
  • FIG. 16A is a graph showing changes over time in tumor size derived from IL-34 knockout 4T1 cells in mice administered with FUL.
  • FIG. 16B is a graph showing the weight of tumors derived from IL-34 knockout 4T1 cells in mice treated with FUL on day 14.
  • FIG. 17 is a graph showing the percentages of various cells among CD45-positive cells in tumors derived from IL-34 knockout 4T1 cells of mice administered with FUL.
  • FIG. 18A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered PTX and/or FUL.
  • FIG. 18B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells in mice administered PTX and/or FUL.
  • FIG. 19A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 19B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells in mice administered ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 20A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 20B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells of mice administered ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 21A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells of mice administered with ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, PTX and/or FUL.
  • FIG. 21B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells of mice administered ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, PTX and/or FUL.
  • FIG. 22 is a graph showing the results of the MTT test on CT26 cells.
  • FIG. 23A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from CT26 cells of mice administered with ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 23B is a graph showing the size on day 14 of tumors derived from CT26 cells of mice administered ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 24A is a graph showing changes over time in tumor size derived from IL-34 overexpressing CT26 cells or IL-34 knockout CT26 cells in mice administered with ⁇ PD-1.
  • FIG. 24B is a graph showing the size on day 14 of tumors derived from IL-34 overexpressing CT26 cells or IL-34 knockout CT26 cells in mice administered with ⁇ PD-1.
  • FIG. 25A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells in mice administered with ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 25B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells of mice administered ⁇ CTLA-4 and/or FUL.
  • FIG. 26A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells of mice administered with ⁇ CTLA-4 and/or TAM.
  • FIG. 26B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells in mice administered ⁇ CTLA-4 and/or TAM.
  • FIG. 27A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells of mice administered ⁇ CTLA-4 and/or TOR.
  • FIG. 27B is a graph showing the weight at day 14 of tumors derived from 4T1 cells in mice administered ⁇ CTLA-4 and/or TOR.
  • FIG. 28A is a graph showing changes over time in the size of tumors derived from 4T1 cells of mice administered with ⁇ CTLA-4 and/or ANZ.
  • FIG. 28B is a graph showing the weight on day 14 of tumors derived from 4T1 cells of mice administered ⁇ CTLA-4 and/or ANZ.
  • the medicament according to the present invention is a medicament for treating and/or preventing a tumor expressing IL-34, and contains an estrogen receptor (ER) signal inhibitor as an active ingredient and other arbitrary ingredients.
  • ER signal inhibitors are administered in combination with cell-killing anticancer agents and/or immune checkpoint inhibitors. Therefore, the medicament according to the present invention may further contain an immune checkpoint inhibitor and/or a cell-killing anticancer agent as an active ingredient in addition to the ER signal inhibitor.
  • the first aspect of the present invention is to treat and/or treat IL-34-expressing tumors containing an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer drug or an immune checkpoint inhibitor as active ingredients. or regarding medicines for prevention.
  • a second aspect of the present invention provides an IL-34-expressing drug containing an ER signal inhibitor as an active ingredient, to be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor or a cell-killing anticancer drug.
  • the present invention relates to medicaments for treating and/or preventing tumors.
  • a third aspect of the present invention includes a step of examining whether a tumor expresses IL-34, and, when the tumor expresses IL-34, an ER signal inhibitor and a cell killing agent.
  • the present invention relates to a method for treating a tumor that expresses IL-34, the method comprising the step of administering an anticancer drug or an immune checkpoint inhibitor to a patient.
  • a fourth aspect of the present invention provides an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer agent or For use with immune checkpoint inhibitors.
  • a medicine according to one embodiment of the present invention contains an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer agent as active ingredients.
  • a medicament according to another embodiment of the present invention contains an ER signal inhibitor and an immune checkpoint inhibitor as active ingredients.
  • a medicament according to another embodiment of the present invention contains an ER signal inhibitor, a cell-killing anticancer agent, and an immune checkpoint inhibitor as active ingredients.
  • the medicament according to the present invention contains an estrogen receptor (ER) signal inhibitor.
  • ER signal inhibitors are substances that block or suppress ER-mediated signals, regardless of the mechanism.
  • the type of ER signal inhibitor is not particularly limited, and can be appropriately selected from known ones depending on the tumor to be treated.
  • the ER signal inhibitor is an estrogen receptor (ER) inhibitor or an estrogen production inhibitor.
  • An ER inhibitor is a substance that blocks or suppresses ER signals by interfering with or inhibiting the binding of estrogen to the ER, regardless of the mechanism.
  • the type of ER inhibitor is not particularly limited, and can be appropriately selected from known ones depending on the tumor to be treated.
  • ER inhibitors include methylpiperidinopyrazole, fulvestrant, tamoxifen, amsenestrant, diredestrant, camizestrant, erakestrant, lindestrant, raloxifene, iodoxifene, LY353381, LY117081, Toremifene, 4-[7-(2,2-dimethyl-1-oxopropoxy-4-methyl-2-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]-2H-1-benzopyran-3-yl ]-phenyl-2,2-dimethylpropanoate, 4,4'-dihydroxybenzophenone-2,4-dinitrophenyl-hydrazone, SH646, etc.
  • Preferred ER inhibitors in the present invention include fulvestrant, tamoxifen. , amsenestrant, diredestrant, camizestrant, erakestrant, lintodestrant, etc. are selective estrogen receptor downregulators (SERDs).
  • SESDs selective estrogen receptor downregulators
  • One type of ER inhibitor is used alone. However, it is more preferable to use two or more types together.
  • Estrogen production inhibitors are substances that stop or suppress the production of estrogen, which is an ER ligand, regardless of the mechanism.
  • the type of estrogen production inhibitor is not particularly limited, and can be appropriately selected from known ones depending on the tumor to be treated.
  • Examples of estrogen production inhibitors include aromatase inhibitors such as anastrozole, exemestane, letrozole, and LH-RH agonist preparations such as goserelin and leuprorelin. Although one type of estrogen production inhibitor may be used alone, a combination of two or more types is more preferable.
  • methods for suppressing the ER signal include binding other substances (e.g. antibodies) to the ER ligand so that the ER ligand binds to the ER.
  • other substances e.g. antibodies
  • other substances function as ER signal inhibitors.
  • Immune checkpoint inhibitors are substances that target biomolecules called immune checkpoint molecules that have the effect of suppressing self-directed immune responses and excessive immune responses, and inhibit or suppress the expression or physiological activity of these molecules. be.
  • the type of immune checkpoint inhibitor is not particularly limited, and can be appropriately selected from known ones depending on the tumor to be treated.
  • Immune checkpoint molecules include PD-L1/PD-L2 and its receptor PD-1, CD80/CD86 and its receptor CTLA-4, galectin-9 and its receptor TIM-3, HVEM and its receptor BTLA are known.
  • immune checkpoint inhibitors include low molecular weight compounds that inhibit the physiological activity of immune checkpoint molecules, antibodies that specifically bind to immune checkpoint molecules, and inhibitory nucleic acids that suppress the expression of immune checkpoint molecules. included.
  • Preferred immune checkpoint inhibitors in the present invention are specific antibodies against immune checkpoint molecules, preferably anti-PD-1 antibodies, anti-PD-L1 antibodies, anti-PD-L2 antibodies, anti-CTLA-4 antibodies, and the like. Typical examples of these include nivolumab (anti-PD-1 antibody, brand name: Opdivo), ipilimumab (anti-CTLA-4 antibody, brand name: Yervoy), and pembrolizumab (anti-PD-1 antibody, brand name: Keytruda). This antibody is already used in Although one type of immune checkpoint inhibitor may be used alone, a combination of two or more types is more preferable.
  • Cytocidal anticancer drugs are substances that target DNA, microtubules, etc. in cells and kill cancer cells or suppress their proliferation.
  • the type of cell-killing anticancer agent is not particularly limited, and can be appropriately selected from known ones depending on the tumor to be treated. Examples of cell-killing anticancer agents include alkylating agents, antimetabolites, platinum agents, topoisomerase inhibitors, microtubule acting anticancer agents, and anticancer antibiotics.
  • alkylating agents examples include ifosfamide, carbocone, cyclophosphamide, dacarbazine, thiotepa, temozolomide, nimustine, busulfan, procarbazine, melphalan, ranimustine, and the like.
  • antimetabolites include enocitabine, capecitabine, carmofur, cladribine, gemcitabine, cytarabine, cytarabine ocphosphate, tegafur, tegafur uracil, tegafur gimeracil oteracil potassium, doxifluridine, nelarabine, hydroxycarbamide, fluorouracil, fludarabine, These include pemetrexed, pentostatin, mercaptopurine, and methotrexate.
  • platinum agents include oxaliplatin, carboplatin, cisplatin, nedaplatin, and the like.
  • topoisomerase inhibitors include irinotecan, etoposide, topotecan, and the like.
  • microtubule-acting anticancer agents include eribulin, docetaxel, toptecan, paclitaxel, vinorelbine, vincristine, vindesine, vinblastine, and the like.
  • anti-cancer antibiotics include actinomycin D, aclarubicin, amrubicin, idarubicin, epirubicin, dinostatin stimaramer, daunorubicin, doxorubicin, pirarubicin, bleomycin, peplomycin, mitomycin C, mitoxantrone, liposomal doxorubicin. etc. are included.
  • one type of cell-killing anticancer agent may be used alone, a combination of two or more types is more preferable.
  • the medicament according to the present invention contains the above-mentioned ER signal inhibitor (for example, ER inhibitor or estrogen production inhibitor), or a combination of the ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer drug and/or an immune checkpoint inhibitor. It contains the combination as an active ingredient and can be used as a medicament for the treatment and/or prevention of tumors expressing IL-34.
  • ER signal inhibitor for example, ER inhibitor or estrogen production inhibitor
  • a combination of the ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer drug and/or an immune checkpoint inhibitor contains the combination as an active ingredient and can be used as a medicament for the treatment and/or prevention of tumors expressing IL-34.
  • containing as an active ingredient means containing an effective amount of an ER signal inhibitor or a combination containing the same.
  • an effective amount of an ER signal inhibitor is defined as the effective amount of an ER signal inhibitor when combined with a cytocidal anticancer agent or immune checkpoint inhibitor, or when the cytocidal anticancer agent or immune checkpoint inhibitor is used alone. It means an amount that exhibits an effect stronger than the tumor therapeutic and/or preventive effect that would be exerted when administered.
  • the effective amount of the ER signal inhibitor depends on the type and usage of the ER signal inhibitor and the combined cell-killing anticancer drug or immune checkpoint inhibitor, the subject's age, sex, weight, tumor type, etc. To be determined accordingly.
  • the amount of the cell-killing anticancer agent may be any amount that can treat and/or prevent tumors when combined with the ER signal inhibitor.
  • the amount of cytocidal anticancer agent is equivalent to or less than the amount when used alone.
  • Using a dose of a cytocidal anticancer drug equivalent to that used alone can have a stronger effect on the tumor, and for a shorter period of time or when no effect can be seen when used alone. Tumors can be treated and/or prevented in a subject.
  • using a cytocidal anticancer drug in a smaller amount than when used alone has the advantage that the amount of cytocidal anticancer drug can be reduced while maintaining its efficacy against tumors. has.
  • one type of cell-killing anticancer agent may be used alone, or two or more types may be used in combination.
  • "Used in combination” refers to the administration of two or more cell-killing anticancer drugs together or separately, simultaneously or sequentially, to a subject for whom tumor treatment and/or prevention is desired. means.
  • the amount of the immune checkpoint inhibitor may be any amount that can treat and/or prevent tumors when combined with the ER signal inhibitor.
  • the amount of immune checkpoint inhibitor will be equal to or less than the amount when used alone.
  • Immune checkpoint inhibitors used at doses equivalent to those used alone have a stronger effect on tumors, for a shorter period of time, or in patients for whom no effect was observed when used alone. Tumors can be treated and/or prevented in patients.
  • using a lower amount of an immune checkpoint inhibitor than when used alone has the advantage that the amount of immune checkpoint inhibitor can be reduced while maintaining efficacy against the tumor.
  • one type of immune checkpoint inhibitor may be used alone, or two or more types may be used in combination.
  • "Used in combination” means administering two or more immune checkpoint inhibitors together or separately, simultaneously or sequentially, to a subject for whom tumor treatment and/or prevention is desired. do.
  • the term "therapy” as used herein encompasses all types of medically acceptable therapeutic interventions aimed at curing, temporary remission, etc. of disease.
  • the term “prophylaxis” also encompasses all types of medically acceptable prophylactic interventions aimed at preventing or suppressing the onset or onset of disease. That is, the treatment and/or prevention of tumors expressing IL-34 includes various treatments including delaying or stopping the progression of tumors expressing IL-34, regression or disappearance of lesions, prevention of onset or prevention of recurrence, etc. Includes medically acceptable interventions for the purpose of
  • the medicament according to the present invention is applicable to subjects suffering from or at risk of suffering from tumors expressing IL-34, such as rodents including mice, rats, hamsters and guinea pigs, humans, primates including chimpanzees and rhesus monkeys, It is administered to mammals such as livestock, including pigs, cows, goats, horses and sheep, and companion animals, including dogs and cats. Preferred subjects are humans.
  • Tumors that can be treated and/or prevented by the medicament of the present invention are not particularly limited as long as they express IL-34.
  • a tumor that expresses IL-34 is a tumor that substantially expresses IL-34. It is a tumor that can be detected.
  • tumors that express IL-34 include breast cancer, including triple-negative breast cancer, colon cancer, lung cancer, stomach cancer, esophageal cancer, kidney cancer, bladder cancer, ovarian cancer, cervical cancer, and uterine corpus cancer. These include cancer, head and neck cancer, and malignant melanoma.
  • the medicament according to the present invention contains an ER signal inhibitor, the tumor (tumor cell) expressing IL-34 may be estrogen receptor (ER) negative.
  • an ER-negative tumor is a tumor in which ER is not substantially expressed, and ER expression cannot be detected by molecular biological techniques such as RT-PCR or immunological detection. , or a tumor in which the expression level is small.
  • triple negative breast cancer is ER negative.
  • the tumor that can be treated and/or prevented by the medicament according to the present invention can be cancer at any stage.
  • the medicament according to the present invention includes drugs other than the active ingredients or buffers, antioxidants, preservatives, proteins, hydrophilic polymers, amino acids, chelating agents, nonionic surfactants, Pharmaceutical compositions can be formed or formulated with pharmaceutically acceptable ingredients such as excipients, stabilizers, carriers, etc. and used. Pharmaceutically acceptable ingredients are well known to those skilled in the art and can be prepared in the form of a preparation from, for example, ingredients listed in the Japanese Pharmacopoeia, 18th edition and other specifications, within the scope of ordinary skill. It can be selected as appropriate.
  • the dosage form of the medicament according to the present invention or a pharmaceutical composition containing the same is not particularly limited, and can be appropriately selected depending on the target site, the type of tumor, etc.
  • the dosage form is generally preferably a parenteral preparation, and can be, for example, an injection, a transdermal preparation, an enteral preparation, an infusion, or the like.
  • the route of administration of the medicament according to the present invention is not particularly limited.
  • intravascular administration preferably intravenous administration
  • intraperitoneal administration intraintestinal administration, subcutaneous administration, local administration to a target site, etc.
  • the medicament according to the present invention is administered to a living body by intravenous or local administration.
  • the dosage of the medicament according to the present invention or the pharmaceutical composition containing the same is appropriately selected depending on the usage, age, sex, body weight, type of tumor, etc. of the subject.
  • the medicament of the first and fourth aspects of the present invention or a pharmaceutical composition containing the same is a combination of an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer agent and/or an immune checkpoint inhibitor.
  • the medicaments of the first aspect and the fourth aspect administer an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer drug and/or an immune checkpoint inhibitor to a subject together or separately, simultaneously or sequentially.
  • Any medicine prepared for the purpose of administration may be used, such as a combination drug or a preparation containing an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer drug and/or an immune checkpoint inhibitor that are each formulated independently.
  • a combination drug containing an ER signal inhibitor and a cell-killing anticancer agent and/or an immune checkpoint inhibitor may be used as long as it can be used as a combination drug.
  • the medicament of the second aspect of the present invention or a pharmaceutical composition containing the same is for use in combination with a cell-killing anticancer agent or an immune checkpoint inhibitor.
  • the medicament of the second aspect may be a medicament in a pre-combined state, insofar as it is intended to be used in combination with a cell-killing anti-cancer drug and/or an immune checkpoint inhibitor, i.e. a combination. It may be a drug used in the manufacture of a drug, a drug manufactured or sold for use in combination, or the like.
  • cytocidal anticancer drug or an immune checkpoint inhibitor refers to the use of a cytocidal anticancer drug or It is meant to be administered together or separately, simultaneously or sequentially with an immune checkpoint inhibitor.
  • the present invention provides a step of examining whether a tumor expresses IL-34, and, when the tumor expresses IL-34, an ER signal inhibitor (for example, an ER inhibitor or an estrogen production inhibitor). ) and administering to a patient a cytocidal anticancer drug or an immune checkpoint inhibitor.
  • an ER signal inhibitor for example, an ER inhibitor or an estrogen production inhibitor.
  • the method for determining whether a tumor expresses IL-34 is not particularly limited. As mentioned above, whether or not a tumor expresses IL-34 can be detected by molecular biological techniques such as RT-PCR and immunological detection.
  • the route of administration of the ER signal inhibitor and the cell-killing anticancer agent or immune checkpoint inhibitor is not particularly limited.
  • intravascular administration preferably intravenous administration
  • intraperitoneal administration preferably intraperitoneal administration
  • intraintestinal administration preferably intraintestinal administration
  • subcutaneous administration preferably intracutaneous administration
  • local administration to a target site, etc. can be performed.
  • FIG. 1 is a schematic diagram for explaining the mechanism by which anti-tumor immunity is suppressed and the effect of anti-tumor agents is reduced in tumors that express IL-34 (eg, triple-negative breast cancer).
  • IL-34 eg, triple-negative breast cancer
  • IL-34 produced by tumor cells acts on bone marrow-derived progenitor cells and changes the balance of myeloid-derived suppressor cells (MDSCs). More specifically, IL-34 increases monocytic myeloid-derived suppressor cells (M-MDSC) and decreases polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cells (PMN-MDSC) ( Figures 5A to 6 reference). M-MDSC increases regulatory T cells (Tregs) (see FIGS. 7A to 8B), resulting in an immunosuppressive state within the tumor.
  • M-MDSC monocytic myeloid-derived suppressor cells
  • PMN-MDSC polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cells
  • IL-34 suppresses the production of vascular endothelial growth factor (VEGF) from MDSCs.
  • VEGF vascular endothelial growth factor
  • IL-34 is thought to change the tumor microenvironment so as to put it in an immunosuppressive state via MDSC.
  • FIG. 2 is a schematic diagram for explaining the mechanism by which an ER signal inhibitor cancels the above-described effect of IL-34 in tumors that express IL-34 (eg, triple-negative breast cancer).
  • ER signal inhibitors e.g., ER inhibitors or estrogen production inhibitors
  • ER signal inhibitors inhibit the effect of IL-34 on MDSCs, thereby reducing the tumor microenvironment caused by IL-34.
  • Suppress change That is, ER signal inhibitors inhibit IL-34-induced changes in MDSC balance, decreasing M-MDSCs and increasing PMN-MDSCs (see FIGS. 10A, 10B and 12B).
  • Tregs are reduced and the immunosuppressive state within the tumor is released (see Figure 15).
  • ER signal inhibitors can also de-suppress intratumor angiogenesis.
  • ER signal inhibitors are thought to suppress the above-described changes in the tumor microenvironment caused by IL-34 by inhibiting the effect of IL-34 on MDSCs.
  • ER signal inhibitors can be drugs that improve the immunosuppressive changes in the tumor microenvironment caused by IL-34.
  • antitumor agents cytocidal anticancer agents or immune checkpoint inhibitors
  • ER signal inhibitors e.g., ER inhibitors or estrogen production inhibitors
  • ER signal inhibitors e.g., ER inhibitors or estrogen production inhibitors
  • no inhibitory antibodies against human IL-34 have been established. It is useful to use ER signal inhibitors as an alternative method to inhibit the effect.
  • Example 1 shows the results of methylpiperidinopyrazole (MPP) as an ER signal inhibitor (ER inhibitor) against triple negative breast cancer (TNBC).
  • MPP methylpiperidinopyrazole
  • TNBC triple negative breast cancer
  • FIG. 3A is a graph showing the results of statistical analysis of the expression level of IL-34 in each type of human breast cancer. From the top, the results are shown for triple-negative breast cancer (TNBC), HER2-positive breast cancer (HER2), Luminal A breast cancer, and Luminal B breast cancer.
  • FIG. 3B is a Kaplan-Meier plot of the overall survival rate of the group with high (top 50%) and low (bottom 50%) expression levels of IL-34 among TNBC patients.
  • Table 1 shows the results of Cox proportional hazards analysis for 10-year survival of TNBC patients.
  • IL-34 was characteristically highly expressed in TNBC among breast cancers. Additionally, as shown in Figure 3B and Table 1, the expression of IL-34 in TNBC was significantly correlated with poor prognosis.
  • the murine TNBC cell line 4T1 was prepared. Additionally, an IL-34 gene knockout cell line was created from the 4T1 cell line (see Non-Patent Document 4).
  • FIG. 4A is a photograph of the 4T1 cell line (Ctrl 4T1) and the IL-34 knockout 4T1 cell line (Il34 KO 4T1).
  • FIG. 4B is a graph showing the concentration of IL-34 in the culture medium of the two cell lines. As shown in this graph, IL-34 was expressed in the 4T1 cell line, whereas IL-34 was not expressed in the knockout cell line. This graph is also described in Non-Patent Document 4, and please refer to Non-Patent Document 4 for details. Furthermore, estrogen receptor (ER) was not expressed in any of the cell lines.
  • ER estrogen receptor
  • 1 ⁇ 10 5 4T1 cells or knockout cells were subcutaneously inoculated into the right flank of female BALB/c mice, and tumors derived from these cells were collected from the mice 14 days later. Cells were isolated from the tumor using cell isolation reagents. The collected cells were stained for CD11b, CD45, Ly6C, and Ly6G using an antibody labeled with a fluorescent dye. The cells after staining were analyzed by flow cytometry.
  • FIG. 5A shows M-MDSCs (CD11b + Ly6C + Ly6G ⁇ cells) and PMN-MDSCs in CD45-positive cells in tumors derived from 4T1 cells (Ctrl) or tumors derived from IL-34 knockout 4T1 cells (KO). (CD11b + Ly6C lo Ly6G + cells).
  • M-MDSC increased and PMN-MDSC decreased within the tumor.
  • M-MDSC increased and PMN-MDSC decreased in the presence of IL-34.
  • Treg changes in IL-34-expressing tumors 1 ⁇ 10 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells were inoculated subcutaneously into the right flank of female BALB/c mice and 14 days later these cells were derived. Tumors were collected from mice. Paraffin sections of the tumors were prepared, and CD4 and FOXP3 in the sections were immunohistochemically stained using the ABC method. In addition, the nuclei in the sections were stained with hematoxylin as a counterstain.
  • FIG. 7A is a photograph showing the distribution of Tregs (CD4 + FOXP3 + cells) in a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 tumor).
  • FIG. 7B is a photograph showing the distribution of Tregs (CD4 + FOXP3 + cells) in a tumor derived from knockout cells (Il34 KO 4T1 tumor). Although these pictures have been converted to grayscale, in reality, CD4 + cells are stained brown and FOXP3 + cells are stained black.
  • Tregs were increased in tumors expressing IL-34.
  • Angiogenic changes in tumors expressing IL-34 1 ⁇ 10 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells were inoculated subcutaneously into the right flank of female BALB/c mice and 14 days later these cells were derived. Tumors were collected from mice. Paraffin sections of the tumors were prepared, and CD31 in the sections was immunohistochemically stained using the ABC method. In addition, the nuclei in the sections were stained with hematoxylin as a counterstain.
  • FIG. 9A is a photograph showing the distribution of vascular endothelial cells (CD31 + cells) in a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl) or a tumor derived from knockout cells (KO).
  • angiogenesis was suppressed, especially angiogenesis inside the tumor.
  • Figure 10A shows tumors derived from 4T1 cells in mice that were not administered MPP (Ctrl 4T1 (DMSO)), tumors derived from 4T1 cells in mice that were administered MPP (Ctrl 4T1 (MPP)), or tumors that were derived from 4T1 cells in mice that were administered MPP.
  • Contour lines showing the proportion of M-MDSCs (CD11b + Ly6C + Ly6G ⁇ cells) and PMN-MDSCs (CD11b + Ly6C lo Ly6G + cells) in a tumor derived from knockout cells of a mouse (Il34 KO 4T1 (DMSO)). It's a plot.
  • FIG. 10B shows tumors derived from 4T1 cells in mice that were not administered MPP (Ctrl 4T1 (DMSO)), tumors derived from 4T1 cells in mice that were administered MPP (Ctrl 4T1 (MPP)), or tumors that were derived from 4T1 cells in mice that were administered MPP.
  • administering decreased M-MDSC and increased PMN-MDSC within the tumor. This suggests that the effect of IL-34 can be canceled by administering an ER inhibitor.
  • N. S. indicates p>0.05.
  • PTX administration had a significant effect on tumors that did not express IL-34. This suggests that treatment with PTX is effective in tumors that do not express IL-34.
  • Figure 12B shows a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl (PTX)) in a mouse administered with PTX alone, a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl (MPP)) in a mouse administered MPP alone, and a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl (MPP)) in a mouse administered with PTX alone.
  • * indicates p ⁇ 0.05, ** indicates p ⁇ 0.01, and *** indicates p ⁇ 0.001.
  • MPP restored the therapeutic effect of PTX even within tumors expressing IL-34.
  • MPP administration decreased M-MDSC and increased PMN-MDSC in tumors expressing IL-34.
  • results are not shown here, in tumors derived from 4T1 cells of mice administered with MPP, it was confirmed that blood vessels were also generated inside the tumors.
  • Example 2 shows the results of fulvestrant (FUL) as an ER signal inhibitor (ER inhibitor) against triple negative breast cancer (TNBC). As mentioned above, TNBC is ER negative.
  • FUL ER inhibitor
  • 5 ⁇ 10 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells were cultured in 10% FBS, 100 U/mL with or without fulvestrant (FUL).
  • the cells were seeded in 200 ⁇ L of RPMI-1640 medium supplemented with penicillin and 100 ⁇ g/mL streptomycin, and cultured for 3 days at 37° C. in an environment of 5% CO 2 to conduct an MTT test.
  • FUL was added to the medium at a final concentration of 0.1 ⁇ M, 1 ⁇ M, or 10 ⁇ M, or DMSO was added as a control.
  • FIG. 13A is a graph showing the results of the MTT test on 4T1 cells.
  • FIG. 13B is a graph showing the results of the MTT test on knockout cells. N. S. indicates p>0.05.
  • FUL had no significant effect on the tumor cells themselves. This suggests that ER inhibitors act not on tumor cells themselves but on other cells that constitute the tumor microenvironment.
  • Tumor changes due to ER inhibitor (FUL) administration 1 ⁇ 10 5 4T1 cells or IL-34 knockout 4T1 cells were subcutaneously inoculated into the right flank of female BALB/c mice.
  • Fulvestrant (FUL) (1.25 mg), an ER inhibitor, was subcutaneously administered once every 3 days from the 5th day after cell inoculation.
  • the size of the tumor was measured using a caliper three times a week.
  • Tumors derived from these cells were collected from mice 14 days after inoculation. Cells were isolated from the tumor using cell isolation reagents. The collected cells were stained for CD3, CD8, CD11b, CD45, CD69, CD206, Ly6C, and Ly6G using an antibody labeled with a fluorescent dye. The cells after staining were analyzed by flow cytometry.
  • FUL significantly suppressed the growth of tumors expressing IL-34. Furthermore, as shown in FIG. 15, administration of FUL decreased immunosuppressive bone marrow cells and increased killer T cells in tumors expressing IL-34.
  • N. S. indicates p>0.05.
  • Figure 18A shows a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (DMSO/Saline)) in a mouse that was not administered PTX and FUL, and a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (DMSO/Saline)) in a mouse that was administered PTX alone.
  • Figure 18B shows tumors derived from 4T1 cells in mice that were not administered PTX and FUL (DMSO/Saline), tumors derived from 4T1 cells in mice that were administered PTX alone (DMSO/PTX), and tumors that were derived from 4T1 cells in mice that were administered only PTX and
  • N. S. indicates p>0.05, * indicates p ⁇ 0.05, ** indicates p ⁇ 0.01, and *** indicates p ⁇ 0.001.
  • Figure 19A shows a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (DMSO/IgG)) in a mouse that was not administered ⁇ CTLA-4 and FUL, and a tumor derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (DMSO/IgG)) in a mouse that was administered ⁇ CTLA-4 alone.
  • Figure 20A shows tumors derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (IgG/DMSO)) from mice that were not administered ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4 and FUL, and 4T1 cells from mice that were administered ⁇ PD-1 and ⁇ CTLA-4.
  • Tumors derived from 4T1 cells Ctrl 4T1 ( ⁇ PD-4/ ⁇ CTLA-4/DMSO)
  • tumors derived from 4T1 cells Ctrl 4T1 ( ⁇ PD-4/ ⁇ CTLA-4/DMSO)
  • Figure 20B shows tumors derived from 4T1 cells (IgG/DMSO) from mice that did not receive ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4 and FUL, and from 4T1 cells from mice that received ⁇ PD-1 and ⁇ CTLA-4.
  • Day 14 of tumor ( ⁇ PD-4/ ⁇ CTLA-4/DMSO) and tumor ( ⁇ PD-4/ ⁇ CTLA-4/FUL) derived from 4T1 cells of mice co-administered with ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, and FUL. It is a graph showing the weight of (n 4).
  • N. S. indicates p>0.05, * indicates p ⁇ 0.05, and *** indicates p ⁇ 0.001.
  • tumor growth was significantly suppressed by the combined administration of FUL compared to when only ⁇ PD-1 and ⁇ CTLA-4 were administered.
  • Figure 21A shows tumors derived from 4T1 cells (Ctrl 4T1 (IgG/Saline/DMSO)) from mice to which ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, PTX and FUL were not administered, and tumors from mice to which PTX and FUL were co-administered.
  • Tumors derived from 4T1 cells Ctrl 4T1 (IgG/PTX/FUL)
  • tumors derived from 4T1 cells Ctrl 4T1 ( ⁇ PD-1/ ⁇ CTLA-FUL)
  • FIG. 21B shows tumors derived from 4T1 cells (IgG/Saline/DMSO) from mice that were not administered ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, PTX and FUL, and tumors derived from 4T1 cells from mice that were co-administered with PTX and FUL.
  • tumor IgG/PTX/FUL
  • ⁇ PD-1 derived from 4T1 cells of mice co-administered with ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4 and PTX ( ⁇ PD-1/ ⁇ CTLA-4/PTX/DMSO), and ⁇ PD-1
  • * indicates p ⁇ 0.05, ** indicates p ⁇ 0.01, and *** indicates p ⁇ 0.001.
  • tumor growth was significantly suppressed by the combined administration of ⁇ PD-1, ⁇ CTLA-4, PTX, and FUL.
  • Example 3 shows the results of fulvestrant (FUL) as an ER signal inhibitor (ER inhibitor) for colorectal cancer.
  • CT26 cells 5 ⁇ 10 CT26 cells were seeded in 200 ⁇ L of RPMI-1640 medium supplemented with 10% FBS, 100 U/mL penicillin, 100 ⁇ g/mL streptomycin, with or without fulvestrant (FUL), and incubated at 37 °C.
  • the cells were cultured for 3 days in an environment of 5% CO2, and an MTT test was conducted.
  • FUL was added to the medium at a final concentration of 0.1 ⁇ M, 1 ⁇ M, or 10 ⁇ M, or DMSO was added as a control.
  • FIG. 22 is a graph showing the results of the MTT test on CT26 cells. N. S. indicates p>0.05.
  • FUL had no significant effect on the tumor cells themselves. This suggests that ER inhibitors act not on tumor cells themselves but on other cells that constitute the tumor microenvironment.
  • N. S. indicates p>0.05, * indicates p ⁇ 0.05, ** indicates p ⁇ 0.01, and *** indicates p ⁇ 0.001.
  • Figure 24A shows tumors derived from overexpressing cells in mice that were not administered ⁇ PD-1 (Il34 OE + IgG) and tumors derived from overexpressing cells in mice that were administered ⁇ PD-1 alone (Il34 OE + ⁇ PD).
  • Figure 24B shows tumors derived from overexpressing cells in mice that were not administered ⁇ PD-1 (Il34 OE + IgG) and tumors derived from overexpressing cells in mice that were administered ⁇ PD-1 alone (Il34 OE + ⁇ PD).
  • Example 4 presents the results of fulvestrant (FUL), tamoxifen (TAM) and toremifene (TOR) as ER signal inhibitors (ER inhibitors), and ER signal inhibitors (estrogen The results of anastrozole (ANZ) as a production inhibitor) are shown.
  • FUL fulvestrant
  • TAM tamoxifen
  • TOR toremifene
  • ER inhibitors ER signal inhibitors
  • ER signal inhibitors ER signal inhibitors
  • ANZ anastrozole
  • fulvestrant only anti-CTLA-4 antibody ( ⁇ CTLA-4) (250 ⁇ g/3 days), which is an immune checkpoint inhibitor, is an ER inhibitor from day 5 after inoculation of cells.
  • TAM tamoxifen
  • toremifene starting from day 5 after cell inoculation, the ER inhibitor toremifene (TOR) (400 ⁇ g/day) alone or ⁇ CTLA-4 (250 ⁇ g/3 days) and TOR (400 ⁇ g/day) were administered. 1 day) was administered.
  • anastrozole from the 5th day after inoculating the cells, the estrogen production inhibitor anastrozole (ANZ) (50 ⁇ g/1 day) alone or ⁇ CTLA-4 (250 ⁇ g/3 days) was administered. and ANZ (50 ⁇ g/day) were administered.
  • Figure 25A shows tumors derived from 4T1 cells from mice that were not administered ⁇ CTLA-4 and FUL (Ctrl), tumors derived from 4T1 cells from mice that were administered ⁇ CTLA-4 alone ( ⁇ CTLA-4), and tumors derived from 4T1 cells from mice that received ⁇ CTLA-4 alone ( ⁇ CTLA-4);
  • Figure 26A shows tumors derived from 4T1 cells from mice to which ⁇ CTLA-4 and TAM were not administered (Ctrl), tumors derived from 4T1 cells from mice to which TAM was administered alone (TAM), and tumors derived from 4T1 cells from mice to which ⁇ CTLA-4 and TAM were not administered (Ctrl);
  • Figure 26B shows tumors derived from 4T1 cells in mice that were not administered with ⁇ CTLA-4 and TAM (Ctrl), tumors derived from 4T1 cells in mice that were administered with TAM alone (TAM), and tumors that were derived from 4T1 cells in mice that were administered with ⁇ CTLA-4 and TAM alone.
  • Figure 27A shows tumors derived from 4T1 cells in mice that were not administered with ⁇ CTLA-4 and TOR (Ctrl), tumors derived from 4T1 cells in mice that were administered with TOR alone (TOR), and tumors that were derived from 4T1 cells in mice that were not administered with ⁇ CTLA-4 and TOR (TOR);
  • Figure 28A shows a tumor derived from 4T1 cells in a mouse that was not administered with ⁇ CTLA-4 and ANZ (Ctrl), a tumor derived from 4T1 cells in a mouse that was administered with ANZ alone (ANZ), and a tumor derived from 4T1 cells in a mouse that was not administered with ⁇ CTLA-4 and ANZ (ANZ),
  • Figure 28B shows tumors derived from 4T1 cells in mice to which ⁇ CTLA-4 and ANZ were not administered (Ctrl), tumors derived from 4T1 cells in mice to which ANZ was administered alone (ANZ), and tumors in which ⁇ CTLA-4 and ANZ were administered.
  • the medicament according to the present invention is useful for treating or preventing tumors that express IL-34.

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Abstract

本発明に係る医薬は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬であって、エストロゲン受容体シグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と、を有効成分として含有する。

Description

ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬
　本発明は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬に関する。
　骨髄由来抑制細胞（myeloid-derived suppressor cell；ＭＤＳＣ）は、骨髄由来の免疫抑制細胞であり、腫瘍微小環境の構築に関与している。ＭＤＳＣは、分化、形態および機能において不均質（heterogeneous）な細胞集団であり、少なくとも単球系骨髄由来抑制細胞（monocytic MDSC；Ｍ－ＭＤＳＣ）と多形核細胞系骨髄由来抑制細胞（polymorphonuclear MDSC；ＰＭＮ－ＭＤＳＣ）の２つのサブセットに分けられる。ＭＤＳＣは、免疫抑制および血管新生に関与していると報告されている（非特許文献１、２参照）。エストロゲン受容体（ＥＲ）阻害剤は、ＭＤＳＣに作用し、腫瘍微小環境に影響を及ぼすと報告されている（非特許文献３参照）。
　一方、トリプルネガティブ乳がん（triple negative breast cancer；ＴＮＢＣ）は、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰｇＲ）およびヒト上皮増殖因子受容体２型（ＨＥＲ２）の発現を伴わない悪性腫瘍である。ＴＮＢＣは、他のタイプの乳がんと比較して、より高い再発率、再発後の急速な進行を示し、予後が不良である。このため、ＴＮＢＣに対する新たな治療法が望まれている。最近、本発明者らによって、ＴＮＢＣではインターロイキン－３４（ＩＬ－３４）が高発現していると報告されている（非特許文献４参照）。
Vinit Kumar, et al., "The nature of myeloid-derived suppressor cells in the tumor microenvironment", Trends in Immunology, Vol. 37, pp. 208-220. Dmitry I. Gabrilovich, et al., "Coordinated regulation of myeloid cells by tumours", Nature Reviews Immunology., Vol. 12, pp. 253-268. Nikolaos Svoronos, et al., "Tumor Cell-Independent Estrogen Signaling Drives Disease Progression Through Mobilization of Myeloid-Derived Suppressor Cells", Cancer Discovery, Vol. 7, pp. 72-85. Nabeel Kajihara, et al., "Interleukin-34 contributes to poor prognosis in triple-negative breast cancer", Breast Cancer, Vol. 27, pp. 1198-1204.
　本発明者は、ＴＮＢＣにおけるＩＬ－３４の作用を解析したところ、ＩＬ－３４はＭＤＳＣの分化に関与していることを突き止めた。さらに、本発明者は、ＩＬ－３４による上記の作用は、ＥＲシグナルも必要であることも突き止めた。そして、本発明者は、これらの知見からＩＬ－３４を発現している腫瘍の新たな治療法を見出せるのではないかと考えた。
　本発明の目的は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬を提供することである。また、本発明の別の目的は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療方法を提供することである。
　本発明者は、上記課題を解決するべく鋭意研究を行った結果、ＩＬ－３４を発現する腫瘍において、ＥＲシグナルを抑制することで、ＩＬ－３４によるＭＤＳＣを介した免疫の抑制などを解除できることを見出し、さらに検討を加えて本発明を完成させた。
　すなわち、本発明は、以下のＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬、ならびにＩＬ－３４を発現している腫瘍の治療方法に関する。
　［１］エストロゲン受容体シグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と、を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬。
　［２］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤および前記殺細胞性抗がん剤を有効成分として含有する、［１］に記載の医薬。
　［３］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤および前記免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する、［１］に記載の医薬。
　［４］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤、前記殺細胞性抗がん剤および前記免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する、［１］に記載の医薬。
　［５］前記腫瘍は、エストロゲン受容体陰性の腫瘍である、［１］～［４］のいずれか一項に記載の医薬。
　［６］前記腫瘍は、トリプルネガティブ乳がんである、［５］に記載の医薬。
　［７］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン受容体阻害剤である、［１］～［６］のいずれか一項に記載の医薬。
　［８］前記エストロゲン受容体阻害剤は、メチルピペリジノピラゾール、フルベストラント、タモキシフェンおよびトレミフェンからなる群から選択される少なくとも１つである、［７］に記載の医薬。
　［９］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン産生阻害剤である、［１］～［６］のいずれか一項に記載の医薬。
　［１０］前記エストロゲン産生阻害剤は、アナストロゾールである、［９］に記載の医薬。
　［１１］前記殺細胞性抗がん剤は、パクリタキセルである、［１］～［１０］のいずれか一項に記載の医薬。
　［１２］前記免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＣＴＬＡ－４抗体および抗ＰＤ－１抗体からなる群から選択される少なくとも１つである、［１］～［１１］のいずれか一項に記載の医薬。
　［１３］免疫チェックポイント阻害剤または殺細胞性抗がん剤と併用投与されるための、エストロゲン受容体シグナル阻害剤を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬。
　［１４］前記腫瘍は、エストロゲン受容体陰性の腫瘍である、［１３］に記載の医薬。
　［１５］前記腫瘍は、トリプルネガティブ乳がんである、［１４］に記載の医薬。
　［１６］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン受容体阻害剤である、［１３］～［１５］のいずれか一項に記載の医薬。
　［１７］前記エストロゲン受容体阻害剤は、メチルピペリジノピラゾール、フルベストラント、タモキシフェンおよびトレミフェンからなる群から選択される少なくとも１つである、［１６］に記載の医薬。
　［１８］前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン産生阻害剤である、［１３］～［１５］のいずれか一項に記載の医薬。
　［１９］前記エストロゲン産生阻害剤は、アナストロゾールである、［１８］に記載の医薬。
　［２０］腫瘍がＩＬ－３４を発現しているか否かを調べる工程と、前記腫瘍がＩＬ－３４を発現している場合に、エストロゲン受容体シグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤とを患者に投与する工程と、を有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療方法。
　［２１］ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬の製造のための、エストロゲン受容体シグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤との使用。
　本発明によれば、ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬、ならびにＩＬ－３４を発現している腫瘍の治療方法を提供することができる。
図１は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍において抗腫瘍免疫が抑制され、かつ抗腫瘍剤の効果が低減するメカニズムを説明するための模式図である。 図２は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍において、ＥＲシグナル阻害剤が上記のＩＬ－３４の作用を解除するメカニズムを説明するための模式図である。 図３Ａは、各タイプのヒト乳がんおけるＩＬ－３４の発現量の統計解析の結果を示すグラフである。図３Ｂは、トリプルネガティブ乳がん患者の中でＩＬ－３４の発現量が多い群と少ない群の全生存率のカプランマイヤープロットである。 図４Ａは、４Ｔ１細胞およびＩＬ－３４遺伝子をノックアウトした４Ｔ１細胞の写真である。図４Ｂは、２種類の細胞の培養液中のＩＬ－３４の濃度を示すグラフである。 図５Ａは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示す等高線プロットである。図５Ｂは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである。 図６は、ＩＬ－３４の存在下または非存在下で培養した後のＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである。 図７Ａは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、Ｔｒｅｇの分布を示す写真である。図７Ｂは、ＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、Ｔｒｅｇの分布を示す写真である。 図８Ａは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、１視野あたりのＴｒｅｇの数を示すグラフである。図８Ｂは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、１視野あたりのＴｒｅｇの数の平均値を示すグラフである。 図９Ａは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、血管内皮細胞の分布を示す写真である。図９Ｂは、４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、１視野あたりの血管内皮細胞の割合を示すグラフである。 図１０Ａは、ＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、Ｍ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣを示す等高線プロットである。図１０Ｂは、ＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである。 図１１Ａは、ＰＴＸを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１１Ｂは、ＰＴＸを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の重さを示すグラフである。図１１Ｃは、ＰＴＸを投与したマウスのＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１１Ｄは、ＰＴＸを投与したマウスのＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の重さを示すグラフである。 図１２Ａは、ＰＴＸおよび／またはＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさを示すグラフである。図１２Ｂは、ＰＴＸおよび／またはＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである。 図１３Ａは、４Ｔ１細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。図１３Ｂは、ＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。 図１４Ａは、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１４Ｂは、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図１５は、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中の各種細胞の割合を示すグラフである。 図１６Ａは、ＦＵＬを投与したマウスのＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１６Ｂは、ＦＵＬを投与したマウスのＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図１７は、ＦＵＬを投与したマウスのＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍における、ＣＤ４５陽性細胞中の各種細胞の割合を示すグラフである。 図１８Ａは、ＰＴＸおよび／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１８Ｂは、ＰＴＸおよび／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図１９Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図１９Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２０Ａは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２０Ｂは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２１Ａは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよび／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２１Ｂは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよび／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２２は、ＣＴ２６細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。 図２３Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２３Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍の１４日目の大きさを示すグラフである。 図２４Ａは、αＰＤ－１を投与したマウスのＩＬ－３４過剰発現ＣＴ２６細胞またはＩＬ－３４ノックアウトＣＴ２６細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２４Ｂは、αＰＤ－１を投与したマウスのＩＬ－３４過剰発現ＣＴ２６細胞またはＩＬ－３４ノックアウトＣＴ２６細胞に由来する腫瘍の１４日目の大きさを示すグラフである。 図２５Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２５Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２６Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＴＡＭを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２６Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＴＡＭを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２７Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＴＯＲを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２７Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＴＯＲを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。 図２８Ａは、αＣＴＬＡ－４および／またはＡＮＺを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の大きさの経時的変化を示すグラフである。図２８Ｂは、αＣＴＬＡ－４および／またはＡＮＺを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍の１４日目の重さを示すグラフである。
　本発明に係る医薬は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬であって、エストロゲン受容体（ＥＲ）シグナル阻害剤を有効成分として含有し、その他任意の成分を含むことができる。ＥＲシグナル阻害剤は、殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤と併用投与される。したがって、本発明に係る医薬は、ＥＲシグナル阻害剤に加えて、さらに免疫チェックポイント阻害剤および／または殺細胞性抗がん剤を有効成分として含有してもよい。
　すなわち、本発明の第１の態様は、ＥＲシグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と、を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬に関する。また、本発明の第２の態様は、免疫チェックポイント阻害剤または殺細胞性抗がん剤と併用投与されるための、ＥＲシグナル阻害剤を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬に関する。また、本発明の第３の態様は、腫瘍がＩＬ－３４を発現しているか否かを調べる工程と、前記腫瘍がＩＬ－３４を発現している場合に、ＥＲシグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤とを患者に投与する工程と、を有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療方法に関する。また、本発明の第４の態様は、ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬の製造のための、ＥＲシグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤との使用に関する。
　たとえば、本発明の一実施の形態に係る医薬は、ＥＲシグナル阻害剤および殺細胞性抗がん剤を有効成分として含有する。また、本発明の別の実施の形態に係る医薬は、ＥＲシグナル阻害剤および免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する。また、本発明のさらに別の実施の形態に係る医薬は、ＥＲシグナル阻害剤、殺細胞性抗がん剤および免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する。
　以下、特に断らない限り、本発明の詳細は、ＩＬ－３４などの生体高分子および分子生物学的機構を含め、ヒトを代表例として説明される。
　（エストロゲン受容体シグナル阻害剤）
　本発明に係る医薬は、エストロゲン受容体（ＥＲ）シグナル阻害剤を含有する。ＥＲシグナル阻害剤は、メカニズムにかかわらず、ＥＲを介するシグナルを遮断または抑制する物質である。ＥＲシグナル阻害剤の種類は、特に限定されず、治療対象の腫瘍に応じて公知のものから適宜選択されうる。たとえば、ＥＲシグナル阻害剤は、エストロゲン受容体（ＥＲ）阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤である。
　ＥＲ阻害剤は、メカニズムにかかわらず、エストロゲンのＥＲへの結合を妨害または阻害してＥＲシグナルを遮断または抑制する物質である。ＥＲ阻害剤の種類は、特に限定されず、治療対象の腫瘍に応じて公知のものから適宜選択されうる。ＥＲ阻害剤の例には、メチルピペリジノピラゾール、フルベストラント、タモキシフェン、アムセネストラント、ジレデストラント、カミゼストラント、エラケストラント、リントデストラント、ラロキシフェン、ヨードキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、４－［７－（２，２－ジメチル－１－オキソプロポキシ－４－メチル－２－［４－［２－（１－ピペリジニル）エトキシ］フェニル］－２Ｈ－１－ベンゾピラン－３－イル］－フェニル－２，２－ジメチルプロパノアート、４，４’－ジヒドロキシベンゾフェノン－２，４－ジニトロフェニル－ヒドラゾン、ＳＨ６４６などが含まれる。本発明において好ましいＥＲ阻害剤は、フルベストラント、タモキシフェン、アムセネストラント、ジレデストラント、カミゼストラント、エラケストラント、リントデストラントなどのエストロゲン受容体発現低下薬（Selective estrogen receptor downregulator；ＳＥＲＤ）である。ＥＲ阻害剤は、１種類を単独で使用してもよいが、２種以上の併用がより好ましい。
　エストロゲン産生阻害剤は、メカニズムにかかわらず、ＥＲリガンドであるエストロゲンの産生を停止または抑制する物質である。エストロゲン産生阻害剤の種類は、特に限定されず、治療対象の腫瘍に応じて公知のものから適宜選択されうる。エストロゲン産生阻害剤の例には、アナストロゾールやエキセメスタン、レトロゾールなどのアロマターゼ阻害剤、ゴセレリンやリュープロレリンなどのＬＨ－ＲＨアゴニスト製剤などが含まれる。エストロゲン産生阻害剤は、１種類を単独で使用してもよいが、２種以上の併用がより好ましい。
　なお、ＥＲシグナルを抑制する方法としては、上記のようにＥＲ阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤を用いる方法の他に、他の物質（例えば抗体）をＥＲリガンドに結合させてＥＲリガンドがＥＲと結合するのを阻害する方法も考えられる。この場合は、他の物質がＥＲシグナル阻害剤として機能する。
　（免疫チェックポイント阻害剤）
　免疫チェックポイント阻害剤は、自己に対する免疫応答や過剰な免疫応答を抑制する作用を持つ免疫チェックポイント分子と称される生体分子を標的とし、その分子の発現または生理活性を阻害または抑制する物質である。免疫チェックポイント阻害剤の種類は、特に限定されず、治療対象の腫瘍に応じて公知のものから適宜選択されうる。免疫チェックポイント分子としては、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－Ｌ２およびその受容体であるＰＤ－１、ＣＤ８０／ＣＤ８６およびその受容体であるＣＴＬＡ－４、ガレクチン－９およびその受容体であるＴＩＭ－３、ＨＶＥＭおよびその受容体であるＢＴＬＡなどが知られている。本発明においては、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ８０およびＣＤ８６からなる群から選択される少なくとも１つを阻害の標的とすることが好ましい。免疫チェックポイント阻害剤の例には、免疫チェックポイント分子の生理活性を阻害する低分子化合物、免疫チェックポイント分子に特異的に結合する抗体、免疫チェックポイント分子の発現を抑制する阻害性核酸などが含まれる。本発明において好ましい免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイント分子に対する特異抗体、好ましくは抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体などである。これらの典型例は、ニボルマブ（抗ＰＤ－１抗体、商品名：オプジーボ）、イピリムマブ（抗ＣＴＬＡ－４抗体、商品名：ヤーボイ）、ペムブロリズマブ（抗ＰＤ－１抗体、商品名：キイトルーダ）などの臨床で既に使用されている抗体である。免疫チェックポイント阻害剤は、１種類を単独で使用してもよいが、２種以上の併用がより好ましい。
　（殺細胞性抗がん剤）
　殺細胞性抗がん剤は、細胞中のＤＮＡや微小管などを標的とし、がん細胞を殺傷したり増殖を抑制したりする物質である。殺細胞性抗がん剤の種類は、特に限定されず、治療対象の腫瘍に応じて公知のものから適宜選択されうる。殺細胞性抗がん剤の例には、アルキル化剤、代謝拮抗剤、プラチナ製剤、トポイソメラーゼ阻害剤、微小管作用抗癌剤、抗がん性抗生物質が含まれる。アルキル化剤の例には、イホスファミド、カルボコン、シクロホスファミド、ダカルバジン、チオテパ、テモゾロミド、ニムスチン、ブスルファン、プロカルバジン、メルファラン、ラニムスチンなどが含まれる。代謝拮抗剤の例には、エノシタビン、カペシタビン、カルモフール、クラドリビン、ゲムシタビン、シタラビン、シタラビンオクホスファート、テガフール、テガフール・ウラシル、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム、ドキシフルリジン、ネララビン、ヒドロキシカルバミド、フルオロウラシル、フルダラビン、ペメトレキセド、ペントスタチン、メルカプトプリン、メトトレキサートなどが含まれる。プラチナ製剤の例には、オキサリプラチン、カルボプラチン、シスプラチン、ネダプラチンなどが含まれる。トポイソメラーゼ阻害剤の例には、イリノテカン、エトポシド、ノギテカンなどが含まれる。微小管作用抗癌剤の例には、エリブリン、ドセタキセル、ノギテカン、パクリタキセル、ビノレルビン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンブラスチンなどが含まれる。抗がん性抗生物質の例には、アクチノマイシンＤ、アクラルビシン、アムルビシン、イダルビシン、エピルビシン、ジノスタチンスチマラマー、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ピラルビシン、ブレオマイシン、ペプロマイシン、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、リポソーマルドキソルビシンなどが含まれる。殺細胞性抗がん剤は、１種類を単独で使用してもよいが、２種以上の併用がより好ましい。
　（医薬または医薬組成物）
　本発明に係る医薬は、上記のＥＲシグナル阻害剤（例えば、ＥＲ阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤）を、あるいはＥＲシグナル阻害剤と殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤との組み合わせを有効成分として含有し、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療および／または予防のための医薬として使用することができる。ここで「有効成分として含有する」とは、有効量のＥＲシグナル阻害剤またはこれを含む組み合わせを含有することを意味する。
　本発明において、ＥＲシグナル阻害剤の有効量は、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と組み合わされたときに、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤が単独で用いられた場合に発揮する腫瘍の治療および／または予防の効果を上回る強さの効果を発揮する量を意味する。ＥＲシグナル阻害剤の有効量は、ＥＲシグナル阻害剤および組み合わされる殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤の種類、用法、対象者の年齢、性別、体重、腫瘍の種類などに応じて適宜決定される。
　本発明において、殺細胞性抗がん剤の量は、ＥＲシグナル阻害剤と組み合わされたときに腫瘍を治療および／または予防することができる量であればよい。通常は、殺細胞性抗がん剤の量は、単独で用いられる場合の量と同等であるか、またはこれより少ない。単独で用いられる場合の量と同等の量の殺細胞性抗がん剤を用いることで、腫瘍に対するより強力な効果が発揮され、より短期間に、または単独で用いても効果が確認できなかった対象者において、腫瘍を治療および／または予防することができる。また、単独で用いられる場合の量よりも少ない量の殺細胞性抗がん剤を用いることは、腫瘍に対する効果を維持しながら、殺細胞性抗がん剤の量を減らすことができるという利点を有する。
　本発明において、殺細胞性抗がん剤は、１種類を単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。「組み合わせて用いる」とは、腫瘍の治療および／または予防が望まれる対象者に対して、２種以上の殺細胞性抗がん剤を一緒にまたは別々に、同時にまたは逐次的に投与することを意味する。
　本発明において、免疫チェックポイント阻害剤の量は、ＥＲシグナル阻害剤と組み合わされたときに腫瘍を治療および／または予防することができる量であればよい。通常は、免疫チェックポイント阻害剤の量は、単独で用いられる場合の量と同等であるか、またはこれより少ない。単独で用いられる場合の量と同等の量の免疫チェックポイント阻害剤を用いることで、腫瘍に対するより強力な効果が発揮され、より短期間に、または単独で用いても効果が確認できなかった対象者において、腫瘍を治療および／または予防することができる。また、単独で用いられる場合の量よりも少ない量の免疫チェックポイント阻害剤を用いることは、腫瘍に対する効果を維持しながら、免疫チェックポイント阻害剤の量を減らすことができるという利点を有する。
　本発明において、免疫チェックポイント阻害剤は、１種類を単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。「組み合わせて用いる」とは、腫瘍の治療および／または予防が望まれる対象者に対して、２種以上の免疫チェックポイント阻害剤を一緒にまたは別々に、同時にまたは逐次的に投与することを意味する。
　本明細書において用いられる用語「治療」は、疾患の治癒、一時的寛解などを目的とする医学的に許容される全てのタイプの治療的介入を包含する。また、用語「予防」は、疾患の罹患または発症の防止もしくは抑制を目的とする医学的に許容される全てのタイプの予防的介入を包含する。すなわち、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療および／または予防とは、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の進行の遅延または停止、病変の退縮または消失、発症の予防または再発の防止などを含む、種々の目的の医学的に許容される介入を包含する。
　本発明に係る医薬は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍に罹患した、または罹患するおそれのある対象、例えばマウス、ラット、ハムスターおよびモルモットを含むげっ歯類、ヒト、チンパンジーおよびアカゲザルを含む霊長類、ブタ、ウシ、ヤギ、ウマおよびヒツジを含む家畜、イヌおよびネコを含む愛玩動物といった哺乳動物に投与される。好ましい対象は、ヒトである。
　本発明に係る医薬により治療および／または予防することができる腫瘍は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍であれば特に限定されない。ここでＩＬ－３４を発現する腫瘍とは、ＩＬ－３４が実質的に発現している腫瘍であり、例えばＲＴ－ＰＣＲや免疫学的検出法などの分子生物学的手法によってＩＬ－３４の発現を検出することができる腫瘍である。ＩＬ－３４を発現する腫瘍の例には、トリプルネガティブ乳がんなどの乳がん、大腸がん、肺がん、胃がん、食道がん、腎がん、膀胱がん、卵巣がん、子宮頸がん、子宮体がん、頭頚部がん、悪性黒色腫などが含まれる。本発明に係る医薬はＥＲシグナル阻害剤を含むが、ＩＬ－３４を発現する腫瘍（腫瘍細胞）は、エストロゲン受容体（ＥＲ）陰性であってもよい。その理由は、ＥＲシグナル阻害剤は、腫瘍細胞ではなく他の細胞（例えばＭＤＳＣ）に作用しているからと考えられるが、これに限定されない。ここでＥＲ陰性の腫瘍とは、ＥＲが実質的に発現していない腫瘍であり、例えばＲＴ－ＰＣＲや免疫学的検出法などの分子生物学的手法によってＥＲの発現を検出することができないか、またはその発現量が僅かである腫瘍である。たとえば、トリプルネガティブ乳がんは、ＥＲ陰性である。また、本発明に係る医薬により治療および／または予防することができる腫瘍は、任意のステージのがんでありうる。
　本発明に係る医薬は、上記の有効成分に加えて、有効成分以外の薬物または緩衝剤、抗酸化剤、保存剤、タンパク質、親水性ポリマー、アミノ酸、キレート化剤、非イオン性界面活性剤、賦形剤、安定化剤、担体などの薬学的に許容される成分と医薬組成物を形成しまたは製剤化して、使用することができる。薬学的に許容される成分は、当業者において周知であり、当業者が通常の実施能力の範囲内で、例えば第十八改正日本薬局方その他の規格書に記載された成分から製剤の形態に応じて適宜選択されうる。
　本発明に係る医薬またはこれを含む医薬組成物の剤形は、特に限定されず、標的部位や腫瘍の種類などに応じて適宜選択されうる。剤形は、一般に非経口製剤であることが好ましく、例えば注射剤、経皮剤、経腸剤、点滴剤等であることができる。また、本発明に係る医薬の投与経路も、特に限定されない。非経口製剤である場合は、例えば血管内投与（好ましくは静脈内投与）、腹腔内投与、腸管内投与、皮下投与、標的部位への局所投与等を行うことができる。好ましい実施形態の一つにおいて、本発明に係る医薬は、静脈内投与または局所投与により生体に投与される。また、本発明に係る医薬またはこれを含む医薬組成物の投与量は、用法、対象者の年齢、性別、体重、腫瘍の種類などに応じて適宜選択される。
　前述のとおり、本発明の第１の態様および第４の態様の医薬またはこれを含む医薬組成物は、ＥＲシグナル阻害剤と殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤との組み合わせを有効成分として含有する。第１の態様および第４の態様の医薬は、ＥＲシグナル阻害剤と殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤とを一緒にまたは別々に、同時にまたは逐次的に、対象者に投与することを目的として調製される医薬であればよく、それぞれ独立に製剤化されたＥＲシグナル阻害剤と殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤とを含む併用剤、あるいは製剤化可能である限りＥＲシグナル阻害剤と殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤とを含む合剤であってもよい。
　また、本発明の第２の態様の医薬またはこれを含む医薬組成物は、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて用いるためのものである。第２の態様の医薬は、殺細胞性抗がん剤および／または免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて用いることが意図される限り、実際に組み合わせられる前の状態の医薬であってよく、すなわち組み合わせ医薬の製造に用いられる医薬、組み合わせて用いるために製造または販売されている医薬などであってもよい。また、ここで「殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて用いる」とは、腫瘍の治療および／または予防が望まれる対象者に対して、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と一緒にまたは別々に、同時にまたは逐次的に投与することを意味する。
　（腫瘍の治療方法）
　本発明は、腫瘍がＩＬ－３４を発現しているか否かを調べる工程と、前記腫瘍がＩＬ－３４を発現している場合に、ＥＲシグナル阻害剤（例えば、ＥＲ阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤）と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤とを患者に投与する工程と、を有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療方法を別の態様として提供する。
　腫瘍がＩＬ－３４を発現しているか否かを調べる方法は、特に限定されない。前述のとおり、腫瘍がＩＬ－３４を発現しているか否かは、例えばＲＴ－ＰＣＲや免疫学的検出法などの分子生物学的手法によって検出することができる。
　また、ＥＲシグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤との投与経路も、特に限定されない。前述のとおり、非経口製剤である場合は、例えば血管内投与（好ましくは静脈内投与）、腹腔内投与、腸管内投与、皮下投与、標的部位への局所投与等を行うことができる。
　（ＩＬ－３４を発現する腫瘍におけるＥＲシグナル阻害剤の効果）
　以下、ＩＬ－３４を発現する腫瘍におけるＥＲシグナル阻害剤の推察される効果について説明するが、本発明に係る医薬の効果はこれに限定されない。
　図１は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍（例えばトリプルネガティブ乳がん）において抗腫瘍免疫が抑制され、かつ抗腫瘍剤の効果が低減するメカニズムを説明するための模式図である。
　図１に示されるように、腫瘍細胞により産生されたＩＬ－３４は、骨髄由来前駆細胞に作用し、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）のバランスを変化させる。より具体的には、ＩＬ－３４は、単球系骨髄由来抑制細胞（Ｍ－ＭＤＳＣ）を増加させ、多形核細胞系骨髄由来抑制細胞（ＰＭＮ－ＭＤＳＣ）を減少させる（図５Ａ～図６参照）。Ｍ－ＭＤＳＣは、制御性Ｔ細胞（regulatory T cell；Ｔｒｅｇ）を増加させ（図７Ａ～図８Ｂ参照）、その結果として腫瘍内を免疫抑制状態とする。
　また、ＩＬ－３４は、ＭＤＳＣからの血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）の産生を抑制する。その結果として、腫瘍内の血管新生が抑制され（図９Ａおよび図９Ｂ参照）、殺細胞性抗がん剤や免疫チェックポイント阻害剤などが腫瘍内に到達しにくくなる。
　以上のように、ＩＬ－３４は、ＭＤＳＣを介して免疫抑制状態となるように腫瘍微小環境を変化させると考えられる。
　図２は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍（例えばトリプルネガティブ乳がん）において、ＥＲシグナル阻害剤が上記のＩＬ－３４の作用を解除するメカニズムを説明するための模式図である。
　図２に示されるように、ＥＲシグナル阻害剤（例えば、ＥＲ阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤）は、ＩＬ－３４によるＭＤＳＣへの作用を阻害することで、上記のＩＬ－３４による腫瘍微小環境の変化を抑制する。すなわち、ＥＲシグナル阻害剤は、ＩＬ－３４によるＭＤＳＣのバランスの変化を阻害し、Ｍ－ＭＤＳＣを減少させ、ＰＭＮ－ＭＤＳＣを増加させる（図１０Ａ、図１０Ｂおよび図１２Ｂ参照）。その結果、Ｔｒｅｇを減少させ、腫瘍内の免疫抑制状態を解除する（図１５参照）。また、ＥＲシグナル阻害剤は、腫瘍内の血管新生の抑制も解除しうる。
　以上のように、ＥＲシグナル阻害剤は、ＩＬ－３４によるＭＤＳＣへの作用を阻害することで、上記のＩＬ－３４による腫瘍微小環境の変化を抑制すると考えられる。別の言い方をすれば、ＥＲシグナル阻害剤は、ＩＬ－３４による腫瘍微小環境の免疫抑制的な変化を改善する医薬となりうる。そして、ＥＲシグナル阻害剤を使用することで、ＩＬ－３４を発現する腫瘍における抗腫瘍剤（殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤）の抗腫瘍効果が高まる（図１２Ａ、図１８Ａ～図２１Ｂ、図２３Ａおよび図２３Ｂ参照）。
　上記のＥＲシグナル阻害剤と類似の効果は、ＩＬ－３４に対する阻害抗体によっても得られると考えられる。しかしながら、ＥＲシグナル阻害剤（例えば、ＥＲ阻害剤またはエストロゲン産生阻害剤）は既に臨床で使用されているのに対し、ヒトＩＬ－３４に対する阻害抗体は樹立されていない現在、ヒトにおいてＩＬ－３４の作用を阻害する代替法としてＥＲシグナル阻害剤を用いることは有用である。
　以下の実施例によって、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されない。
　［実施例１］
　実施例１では、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）に対するＥＲシグナル阻害剤（ＥＲ阻害剤）としてのメチルピペリジノピラゾール（ＭＰＰ）の結果を示す。ＴＮＢＣは、ＥＲ陰性である。
　１．ＴＮＢＣにおけるＩＬ－３４の発現
　図３Ａは、各タイプのヒト乳がんにおけるＩＬ－３４の発現量の統計解析の結果を示すグラフである。上から、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、ＨＥＲ２陽性乳がん（ＨＥＲ２）、ルミナルＡ乳がん（Luminal A）、ルミナルＢ乳がん（Luminal B）の結果を示している。図３Ｂは、ＴＮＢＣ患者の中でＩＬ－３４の発現量が多い（上位５０％）群と少ない（下位５０％）群の全生存率のカプランマイヤープロットである。表１は、ＴＮＢＣ患者の１０年生存率に関するコックス比例ハザード分析の結果を示す。これらの図および表は、本発明者らが発表した非特許文献４に記載されているものであり、詳細は非特許文献４を参照されたい。
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　図３Ａに示されるように、ＩＬ－３４は、乳がんの中でもＴＮＢＣにおいて特徴的に高発現していた。また、図３Ｂおよび表１に示されるように、ＴＮＢＣにおけるＩＬ－３４の発現は、予後不良と有意に相関していた。
　２．ＩＬ－３４を発現する腫瘍におけるＭＤＳＣの変化
　マウスのＴＮＢＣ細胞株４Ｔ１を準備した。また、４Ｔ１細胞株からＩＬ－３４遺伝子のノックアウト細胞株を作製した（非特許文献４参照）。
　図４Ａは、４Ｔ１細胞株（Ctrl 4T1）およびＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞株（Il34KO 4T1）の写真である。図４Ｂは、２つの細胞株の培養液中のＩＬ－３４の濃度を示すグラフである。このグラフに示されるように、４Ｔ１細胞株ではＩＬ－３４が発現していたのに対し、ノックアウト細胞株ではＩＬ－３４が発現していなかった。このグラフも、非特許文献４に記載されているものであり、詳細は非特許文献４を参照されたい。また、いずれの細胞株においても、エストロゲン受容体（ＥＲ）は発現していなかった。
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはノックアウト細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種し、１４日後にこれらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。細胞単離試薬を用いて腫瘍から細胞を単離した。回収した細胞のＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、Ｌｙ６ＣおよびＬｙ６Ｇを蛍光色素で標識された抗体を用いて染色した。染色後の細胞についてフローサイトメトリーで解析した。
　図５Ａは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（KO）における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋Ｌｙ６Ｇ－細胞）およびＰＭＮ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ＣｌｏＬｙ６Ｇ＋細胞）の割合を示す等高線プロットである。図５Ｂは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（KO）における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである（ｎ＝６）。＊＊はｐ＜０．０１を示している。
　図５Ａおよび図５Ｂに示されるように、ＩＬ－３４の存在下では、腫瘍内においてＭ－ＭＤＳＣが増加し、ＰＭＮ－ＭＤＳＣが減少していた。
　３．ＩＬ－３４を含む培養系におけるＭＤＳＣの変化
　メスのＢＡＬＢ／ｃマウスの大腿骨から骨髄細胞を分離し、赤血球溶解バッファーを用いて赤血球を除去した。１×１０６個の骨髄細胞を、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、５０ｎｇ／ｍＬ組換えＧＭ－ＣＳＦ（BioLegend）、５０ｎｇ／ｍＬ組換えＩＬ－３４（BioLegend）を添加した２ｍＬのＲＰＭＩ－１６４０培地中で、３７℃、５％ＣＯ２の環境下において培養した。比較のため、組換えＩＬ－３４を添加しない点以外は同じ条件で、１×１０６個の骨髄細胞を培養した。培養開始から３日目に細胞を回収し、上記と同じ手順でフローサイトメトリーで解析した。
　図６は、ＩＬ－３４の存在下または非存在下で培養した後のＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋Ｌｙ６Ｇ－細胞）およびＰＭＮ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ＣｌｏＬｙ６Ｇ＋細胞）の割合を示すグラフである（ｎ＝３）。＊はｐ＜０．０５、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図６に示されるように、培養系においても、ＩＬ－３４の存在下では、Ｍ－ＭＤＳＣが増加し、ＰＭＮ－ＭＤＳＣが減少した。
　４．ＩＬ－３４を発現する腫瘍におけるＴｒｅｇの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種し、１４日後にこれらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。腫瘍のパラフィン切片を作製し、切片中のＣＤ４およびＦＯＸＰ３をＡＢＣ法で免疫組織化学染色した。また、対比染色として、切片中の核をヘマトキシリンで染色した。
　図７Ａは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 tumor）における、Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＦＯＸＰ３＋細胞）の分布を示す写真である。図７Ｂは、ノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO 4T1 tumor）における、Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＦＯＸＰ３＋細胞）の分布を示す写真である。これらの写真はグレースケールに変換されているが、実際は、ＣＤ４＋細胞は茶色に染色されており、ＦＯＸＰ３＋細胞は黒色に染色されている。
　図８Ａは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 tumor）またはノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO 4T1 tumor）における、１視野あたりのＴｒｅｇ（ＣＤ４＋ＦＯＸＰ３＋細胞）の数を示すグラフである（ｎ＝３）。図８Ｂは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1）またはノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO4T1）における、１視野あたりのＴｒｅｇ（ＣＤ４＋ＦＯＸＰ３＋細胞）の数の平均値を示すグラフである（ｎ＝３）。＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図７Ａ～図８Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現する腫瘍では、Ｔｒｅｇが増加していた。
　５．ＩＬ－３４を発現する腫瘍における血管新生の変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種し、１４日後にこれらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。腫瘍のパラフィン切片を作製し、切片中のＣＤ３１をＡＢＣ法で免疫組織化学染色した。また、対比染色として、切片中の核をヘマトキシリンで染色した。
　図９Ａは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）またはノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO）における、血管内皮細胞（ＣＤ３１＋細胞）の分布を示す写真である。図９Ｂは、４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）またはノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO）における、１視野あたりの血管内皮細胞（ＣＤ３１＋細胞）の割合を示すグラフである（ｎ＝３）。＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図９Ａおよび図９Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現する腫瘍では、血管新生が抑制されており、特に腫瘍内部における血管新生が抑制されていた。
　６．ＥＲ阻害剤（ＭＰＰ）投与によるＭＤＳＣの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。これらの細胞に由来する腫瘍の大きさをノギスで週３回測定し、腫瘍の大きさが５ｍｍに達したときにＥＲ阻害剤であるメチルピペリジノピラゾール（ＭＰＰ）（１．０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。細胞単離試薬を用いて腫瘍から細胞を単離した。回収した細胞のＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、Ｌｙ６ＣおよびＬｙ６Ｇを蛍光色素で標識された抗体を用いて染色した。染色後の細胞についてフローサイトメトリーで解析した。
　図１０Ａは、ＭＰＰを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO)）、ＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (MPP)）またはＭＰＰを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO 4T1 (DMSO)）における、Ｍ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋Ｌｙ６Ｇ－細胞）およびＰＭＮ－ＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ＣｌｏＬｙ６Ｇ＋細胞）の割合を示す等高線プロットである。図１０Ｂは、ＭＰＰを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO)）、ＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (MPP)）またはＭＰＰを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO4T1 (DMSO)）における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである（ｎ＝６）。＊はｐ＜０．０５、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図１０Ａおよび図１０Ｂに示されるように、ＭＰＰを投与することで、腫瘍内においてＭ－ＭＤＳＣが減少し、ＰＭＮ－ＭＤＳＣが増加した。このことから、ＥＲ阻害剤を投与することで、ＩＬ－３４の効果を解除できることが示唆される。
　７．抗がん剤とＥＲ阻害剤（ＭＰＰ）の併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から毎日、抗がん剤であるパクリタキセル（ＰＴＸ）（１．３ｍｇ／ｋｇ）のみを、またはＰＴＸ（１．３ｍｇ／ｋｇ）とＥＲ阻害剤であるメチルピペリジノピラゾール（ＭＰＰ）（１．０ｍｇ／ｋｇ）の組み合わせを腹腔内に投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。細胞単離試薬を用いて腫瘍から細胞を単離した。回収した細胞のＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、Ｌｙ６ＣおよびＬｙ６Ｇを蛍光色素で標識された抗体を用いて染色した。染色後の細胞についてフローサイトメトリーで解析した。
　図１１Ａは、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (PTX)）と、ＰＴＸを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (Saline)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝６）。図１１Ｂは、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（PTX）と、ＰＴＸを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Saline）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝６）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を示している。
　図１１Ａおよび図１１Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現している腫瘍では、ＰＴＸの投与に有意な効果が見られなかった。このことから、ＩＬ－３４を発現している腫瘍は、ＰＴＸによる治療に耐性を有することが示唆される。
　図１１Ｃは、ＰＴＸを単独投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO (PTX)）と、ＰＴＸを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO (Saline)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝６）。図１１Ｄは、ＰＴＸを単独投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO (PTX)）と、ＰＴＸを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（KO (Saline)）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝６）。＊はｐ＜０．０５を示している。
　図１１Ｃおよび図１１Ｄに示されるように、ＩＬ－３４を発現していない腫瘍では、ＰＴＸの投与に有意な効果が見られた。このことから、ＰＴＸによる治療は、ＩＬ－３４を発現していない腫瘍に効果を有することが示唆される。
　図１２Ａは、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (PTX+DMSO)）と、ＭＰＰを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (MPP+Saline)）と、ＰＴＸとＭＰＰを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (PTX+MPP)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝６）。図１２Ｂは、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (PTX)）と、ＭＰＰを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (MPP)）と、ＰＴＸとＭＰＰを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl (PTX+MPP)）における、ＣＤ４５陽性細胞中のＭ－ＭＤＳＣおよびＰＭＮ－ＭＤＳＣの割合を示すグラフである（ｎ＝６）。＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図１２Ａに示されるように、ＭＰＰを投与することで、ＩＬ－３４を発現する腫瘍内においてもＰＴＸの治療効果が復活した。また、図１２Ｂに示されるように、ＭＰＰを投与することで、ＩＬ－３４を発現する腫瘍内においてＭ－ＭＤＳＣが減少し、ＰＭＮ－ＭＤＳＣが増加した。また、ここでは結果を示さないが、ＭＰＰを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍では、腫瘍内部においても血管が新生されているのが確認された。これらのことから、ＭＰＰを投与することで、ＩＬ－３４を発現する腫瘍に対する抗がん剤の効果を復活できることが示唆される。
　［実施例２］
　実施例２では、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）に対するＥＲシグナル阻害剤（ＥＲ阻害剤）としてのフルベストラント（ＦＵＬ）の結果を示す。前述のとおり、ＴＮＢＣは、ＥＲ陰性である。
　１．培養系における腫瘍細胞に対するＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の効果
　５×１０３個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞を、フルベストラント（ＦＵＬ）を含むまたは含まない、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加した２００μＬのＲＰＭＩ－１６４０培地に播種し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下において３日間培養して、ＭＴＴ試験を行った。培地には最終濃度が０．１μＭ、１μＭまたは１０μＭとなるようにＦＵＬを、あるいはコントロールとしてＤＭＳＯを添加した。
　図１３Ａは、４Ｔ１細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。図１３Ｂは、ノックアウト細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を示している。
　図１３Ａおよび図１３Ｂに示されるように、ＦＵＬは腫瘍細胞そのものには有意な効果を示さなかった。このことから、ＥＲ阻害剤は、腫瘍細胞そのものではなく、腫瘍微小環境を構成する他の細胞に対して作用することが示唆される。
　２．ＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）投与による腫瘍の変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞またはＩＬ－３４ノックアウト４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から３日に１回、ＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ）を皮下に投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。細胞単離試薬を用いて腫瘍から細胞を単離した。回収した細胞のＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ２０６、Ｌｙ６ＣおよびＬｙ６Ｇを蛍光色素で標識された抗体を用いて染色した。染色後の細胞についてフローサイトメトリーで解析した。
　図１４Ａは、ＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO)）と、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (FUL)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図１４Ｂは、ＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO）と、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図１５は、ＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO）と、ＦＵＬを投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Fulvestrant）における、ＣＤ４５陽性細胞中の各種細胞の割合を示すグラフである（ｎ＝４）。＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を示している。
　図１４Ａおよび図１４Ｂに示されるように、ＦＵＬは、ＩＬ－３４を発現している腫瘍の増大を有意に抑制した。また、図１５に示されるように、ＦＵＬを投与することで、ＩＬ－３４を発現している腫瘍内において免疫抑制性の骨髄細胞が減少し、キラーＴ細胞が増加した。
　図１６Ａは、ＦＵＬを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO 4T1 (DMSO)）と、ＦＵＬを投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO 4T1 (FUL)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図１６Ｂは、ＦＵＬを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（DMSO）と、ＦＵＬを投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（FUL）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を示している。
　図１７は、ＦＵＬを投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（DMSO）と、ＦＵＬを投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Fulvestrant）における、ＣＤ４５陽性細胞中の各種細胞の割合を示すグラフである（ｎ＝４）。
　図１６Ａ～図１７に示されるように、ＩＬ－３４を発現していない腫瘍では、ＦＵＬを投与しても有意な変化が見られなかった。
　図１４Ａ～図１７の結果から、ＥＲ阻害剤は、腫瘍細胞がＥＲを発現していなくてもＩＬ－３４を発現している腫瘍に有効であることが示唆される。
　３．抗がん剤とＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、抗がん剤であるパクリタキセル（ＰＴＸ）（１．３ｍｇ／ｋｇ／日）のみを、またはＰＴＸ（１．３ｍｇ／ｋｇ／日）とＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせを投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。
　図１８Ａは、ＰＴＸおよびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO/Saline)）と、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO/PTX)）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (FUL/Saline)）と、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (FUL/PTX)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図１８Ｂは、ＰＴＸおよびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO/Saline）と、ＰＴＸを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO/PTX）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL/Saline）と、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL/PTX）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を、＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図１８Ａおよび図１８Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現する腫瘍では、ＰＴＸの単独投与に有意な効果が見られなかった。一方、ＦＵＬを投与することで、ＰＴＸの治療効果が復活した。これらのことから、ＦＵＬを投与することで、ＩＬ－３４を発現する腫瘍に対する抗がん剤の効果を復活できることが示唆される。
　４．免疫チェックポイント阻害剤とＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＣＴＬＡ－４抗体（αＣＴＬＡ－４）（２５０μｇ／３日）のみ、免疫チェックポイント阻害剤であるαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）と抗ＰＤ－１抗体（αＰＤ－１）（２５０μｇ／３日）との組み合わせ、αＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とαＰＤ－１（２５０μｇ／３日）とＦＵＬ（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせを投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。
　図１９Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO/IgG)）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (DMSO/αCTLA-4)）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (FUL/IgG)）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (FUL/αCTLA-4)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図１９Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO/IgG）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（DMSO/αCTLA-4）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL/IgG）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL/αCTLA-4）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図１９Ａおよび図１９Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現している腫瘍では、αＣＴＬＡ－４の単独投与に有意な効果が見られなかった。一方、ＦＵＬを投与することで、αＣＴＬＡ－４の治療効果が復活した。
　図２０Ａは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (IgG/DMSO)）と、αＰＤ－１およびαＣＴＬＡ－４を投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (αPD-4/αCTLA-4/DMSO)）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (αPD-4/αCTLA-4/FUL)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２０Ｂは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（IgG/DMSO）と、αＰＤ－１およびαＣＴＬＡ－４を投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αPD-4/αCTLA-4/DMSO）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αPD-4/αCTLA-4/FUL）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を、＊はｐ＜０．０５を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図２０Ａおよび図２０Ｂに示されるように、αＰＤ－１およびαＣＴＬＡ－４のみを投与した場合に比べて、さらにＦＵＬを併用投与することで腫瘍の増大が顕著に抑制された。
　これらのことから、ＦＵＬを投与することで、ＩＬ－３４を発現している腫瘍に対する免疫チェックポイント阻害剤の効果を復活または促進できることが示唆される。
　５．抗がん剤と免疫チェックポイント阻害剤とＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、抗がん剤であるパクリタキセル（ＰＴＸ）（１．３ｍｇ／ｋｇ／日）とＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせ、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＰＤ－１抗体（αＰＤ－１）（２５０μｇ／３日）および抗ＣＴＬＡ－４抗体（αＣＴＬＡ－４）（２５０μｇ／３日）とＰＴＸ（１．３ｍｇ／ｋｇ／日）との組み合わせ、またはαＰＤ－１（２５０μｇ／３日）およびαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＰＴＸ（１．３ｍｇ／ｋｇ／日）とＦＵＬ（１．２５ｍｇ／３日）との組み合わせ、を投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。
　図２１Ａは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (IgG/Saline/DMSO)）と、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (IgG/PTX/FUL)）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＰＴＸを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (αPD-1/αCTLA-4/PTX/DMSO)）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl 4T1 (αPD-1/αCTLA-4/PTX/FUL)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２１Ｂは、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（IgG/Saline/DMSO）と、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（IgG/PTX/FUL）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４およびＰＴＸを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αPD-1/αCTLA-4/PTX/DMSO）と、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αPD-1/αCTLA-4/PTX/FUL）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図２１Ａおよび図２１Ｂに示されるように、αＰＤ－１、αＣＴＬＡ－４、ＰＴＸおよびＦＵＬを併用投与することで腫瘍の増大が顕著に抑制された。
　［実施例３］
　実施例３では、大腸がんに対するＥＲシグナル阻害剤（ＥＲ阻害剤）としてのフルベストラント（ＦＵＬ）の結果を示す。
　１．培養系における腫瘍細胞に対するＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の効果
　マウスの大腸がんＣＴ２６細胞株を準備した。ＣＴ２６細胞株ではＩＬ－３４が発現しているが、エストロゲン受容体（ＥＲ）は発現していない。
　５×１０３個のＣＴ２６細胞を、フルベストラント（ＦＵＬ）を含むまたは含まない、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加した２００μＬのＲＰＭＩ－１６４０培地に播種し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下において３日間培養して、ＭＴＴ試験を行った。培地には最終濃度が０．１μＭ、１μＭまたは１０μＭとなるようにＦＵＬを、あるいはコントロールとしてＤＭＳＯを添加した。
　図２２は、ＣＴ２６細胞に対するＭＴＴ試験の結果を示すグラフである。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を示している。
　図２２に示されるように、ＦＵＬは腫瘍細胞そのものには有意な効果を示さなかった。このことから、ＥＲ阻害剤は、腫瘍細胞そのものではなく、腫瘍微小環境を構成する他の細胞に対して作用することが示唆される。
　２．免疫チェックポイント阻害剤とＥＲ阻害剤（ＦＵＬ）の併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個のＣＴ２６細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＣＴＬＡ－４抗体（αＣＴＬＡ－４）（２５０μｇ／３日）のみ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせを投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。
　図２３Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (Ctrl)）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (αCTLA-4)）と、ＦＵＬを単独投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (FUL)）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (αCTLA-4/ FUL)）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２３Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (Ctrl)）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (αCTLA-4)）と、ＦＵＬを単独投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (FUL)）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスのＣＴ２６細胞に由来する腫瘍（CT26 (αCTLA-4/ FUL)）の１４日目の大きさを示すグラフである（ｎ＝４）。Ｎ．Ｓ．はｐ＞０．０５を、＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を示している。
　図２３Ａおよび図２３Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現している腫瘍では、αＣＴＬＡ－４の単独投与に有意な効果が見られなかった。一方、ＦＵＬを投与することで、αＣＴＬＡ－４の治療効果が復活した。これらのことから、ＦＵＬを投与することで、ＩＬ－３４を発現している腫瘍に対する免疫チェックポイント阻害剤の効果を復活または促進できることが示唆される。
　（参考）３．免疫チェックポイント阻害剤の投与による腫瘍の大きさの変化
　ＣＴ２６細胞株からＩＬ－３４遺伝子の過剰発現細胞株およびノックアウト細胞株を作製した（Naoki Hama, et al., "Interleukin-34 Limits the Therapeutic Effects of Immune Checkpoint Blockade", iScience, Vol. 23, 101584.を参照）。
　１×１０５個の過剰発現細胞またはノックアウト細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＰＤ－１抗体（αＰＤ－１）（２５０μｇ／３日）を投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。細胞を接種してから１４日後に、これらの細胞に由来する腫瘍をマウスから回収した。
　図２４Ａは、αＰＤ－１を投与しなかったマウスの過剰発現細胞に由来する腫瘍（Il34OE+ IgG）と、αＰＤ－１を単独投与したマウスの過剰発現細胞に由来する腫瘍（Il34OE+ αPD-1）と、αＰＤ－１を投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO + IgG）と、αＰＤ－１を単独投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO + αPD-1）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２４Ｂは、αＰＤ－１を投与しなかったマウスの過剰発現細胞に由来する腫瘍（Il34OE + IgG）と、αＰＤ－１を単独投与したマウスの過剰発現細胞に由来する腫瘍（Il34OE + αPD-1）と、αＰＤ－１を投与しなかったマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO+ IgG）と、αＰＤ－１を単独投与したマウスのノックアウト細胞に由来する腫瘍（Il34KO+ αPD-1）の１４日目の大きさを示すグラフである（ｎ＝４）。＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜０．０１を示している。
　図２４Ａおよび図２４Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を過剰発現させた腫瘍では、αＰＤ－１による抗腫瘍効果が見られなかった。一方、ＩＬ－３４を欠損させた腫瘍では、αＰＤ－１よる抗腫瘍効果が見られた。これらのことから、ＣＴ２６細胞に由来する腫瘍においても、ＩＬ－３４の発現により抗腫瘍免疫が抑制されていることが示唆される。
　［実施例４］
　実施例４では、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）に対する、ＥＲシグナル阻害剤（ＥＲ阻害剤）としてのフルベストラント（ＦＵＬ）、タモキシフェン（ＴＡＭ）およびトレミフェン（ＴＯＲ）の結果、ならびにＥＲシグナル阻害剤（エストロゲン産生阻害剤）としてのアナストロゾール（ＡＮＺ）の結果を示す。
　１．免疫チェックポイント阻害剤と、ＥＲ阻害剤（ＦＵＬ、ＴＡＭ、ＴＯＲ）またはエストロゲン産生阻害剤（ＴＡＭ）との併用投与による腫瘍の大きさの変化
　１×１０５個の４Ｔ１細胞をメスのＢＡＬＢ／ｃマウスの乳腺に皮下接種した。細胞を接種してから５日目から、免疫チェックポイント阻害剤、ＥＲ阻害剤（ＦＵＬ、ＴＡＭ、ＴＯＲ）および／またはエストロゲン産生阻害剤（ＴＡＭ）を投与した。また、腫瘍の大きさをノギスで週３回測定した。
　フルベストラント（ＦＵＬ）については、細胞を接種してから５日目から、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＣＴＬＡ－４抗体（αＣＴＬＡ－４）（２５０μｇ／３日）のみ、ＥＲ阻害剤であるフルベストラント（ＦＵＬ）（１．２５ｍｇ／３日）のみ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＦＵＬ（１．２５ｍｇ／３日）の組み合わせを投与した。
　タモキシフェン（ＴＡＭ）については、細胞を接種してから５日目から、ＥＲ阻害剤であるタモキシフェン（ＴＡＭ）（１００μｇ／１日）のみ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＴＡＭ（１００μｇ／１日）の組み合わせを投与した。
　トレミフェン（ＴＯＲ）については、細胞を接種してから５日目から、ＥＲ阻害剤であるトレミフェン（ＴＯＲ）（４００μｇ／１日）のみ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＴＯＲ（４００μｇ／１日）の組み合わせを投与した。
　アナストロゾール（ＡＮＺ）については、細胞を接種してから５日目から、エストロゲン産生阻害剤であるアナストロゾール（ＡＮＺ）（５０μｇ／１日）のみ、またはαＣＴＬＡ－４（２５０μｇ／３日）とＡＮＺ（５０μｇ／１日）の組み合わせを投与した。
　図２５Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/FUL）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２５Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、αＣＴＬＡ－４を単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4）と、ＦＵＬを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（FUL）と、αＣＴＬＡ－４およびＦＵＬを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/FUL）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。
　図２６Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＴＡＭを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＴＡＭを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（TAM）と、αＣＴＬＡ－４およびＴＡＭを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/TAM）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２６Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＴＡＭを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＴＡＭを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（TAM）と、αＣＴＬＡ－４およびＴＡＭを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/TAM）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。
　図２７Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＴＯＲを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＴＯＲを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（TOR）と、αＣＴＬＡ－４およびＴＯＲを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/TOR）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２７Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＴＯＲを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＴＯＲを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（TOR）と、αＣＴＬＡ－４およびＴＯＲを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/TOR）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。
　図２８Ａは、αＣＴＬＡ－４およびＡＮＺを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＡＮＺを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（ANZ）と、αＣＴＬＡ－４およびＡＮＺを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/ANZ）の大きさの経時的変化を示すグラフである（ｎ＝４）。図２８Ｂは、αＣＴＬＡ－４およびＡＮＺを投与しなかったマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（Ctrl）と、ＡＮＺを単独投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（ANZ）と、αＣＴＬＡ－４およびＡＮＺを併用投与したマウスの４Ｔ１細胞に由来する腫瘍（αCTLA-4/ANZ）の１４日目の重さを示すグラフである（ｎ＝４）。
　図２５Ａおよび図２５Ｂに示されるように、ＩＬ－３４を発現している腫瘍では、αＣＴＬＡ－４の単独投与に有意な効果が見られなかった。一方、図２５Ａ～図２８Ｂに示されるように、ＦＵＬ、ＴＡＭ、ＴＯＲまたはＡＮＺを投与することで、αＣＴＬＡ－４の治療効果が復活した。
　これらのことから、ＦＵＬ、ＴＡＭ、ＴＯＲまたはＡＮＺを投与することで、ＩＬ－３４を発現している腫瘍に対する免疫チェックポイント阻害剤の効果を復活または促進できることが示唆される。
　本出願は、２０２２年４月２５日出願の特願２０２２－７１７８５に基づく優先権を主張する。当該出願明細書および図面に記載された内容は、すべて本願明細書に援用される。
　本発明に係る医薬は、ＩＬ－３４を発現する腫瘍の治療または予防に有用である。

Claims (19)

  1. 　エストロゲン受容体シグナル阻害剤と、殺細胞性抗がん剤または免疫チェックポイント阻害剤と、を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現する腫瘍を治療および／または予防するための医薬。
  2. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤および前記殺細胞性抗がん剤を有効成分として含有する、請求項１に記載の医薬。
  3. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤および前記免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する、請求項１に記載の医薬。
  4. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤、前記殺細胞性抗がん剤および前記免疫チェックポイント阻害剤を有効成分として含有する、請求項１に記載の医薬。
  5. 　前記腫瘍は、エストロゲン受容体陰性の腫瘍である、請求項１に記載の医薬。
  6. 　前記腫瘍は、トリプルネガティブ乳がんである、請求項５に記載の医薬。
  7. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン受容体阻害剤である、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬。
  8. 　前記エストロゲン受容体阻害剤は、メチルピペリジノピラゾール、フルベストラント、タモキシフェンおよびトレミフェンからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項７に記載の医薬。
  9. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン産生阻害剤である、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬。
  10. 　前記エストロゲン産生阻害剤は、アナストロゾールである、請求項９に記載の医薬。
  11. 　前記殺細胞性抗がん剤は、パクリタキセルである、請求項１に記載の医薬。
  12. 　前記免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＣＴＬＡ－４抗体および抗ＰＤ－１抗体からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１に記載の医薬。
  13. 　免疫チェックポイント阻害剤または殺細胞性抗がん剤と併用投与されるための、エストロゲン受容体シグナル阻害剤を有効成分として含有する、ＩＬ－３４を発現している腫瘍を治療および／または予防するための医薬。
  14. 　前記腫瘍は、エストロゲン受容体陰性の腫瘍である、請求項１３に記載の医薬。
  15. 　前記腫瘍は、トリプルネガティブ乳がんである、請求項１４に記載の医薬。
  16. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン受容体阻害剤である、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の医薬。
  17. 　前記エストロゲン受容体阻害剤は、メチルピペリジノピラゾール、フルベストラント、タモキシフェンおよびトレミフェンからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１６に記載の医薬。
  18. 　前記エストロゲン受容体シグナル阻害剤は、エストロゲン産生阻害剤である、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の医薬。
  19. 　前記エストロゲン産生阻害剤は、アナストロゾールである、請求項１８に記載の医薬。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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HAMA NAOKI T, TAKUTO KOBAYASHI, NANUMI HAN, FUMIHITO KITAGAWA, NABEEL KAJIHARA, RYO OTSUKA, HARUKA WADA, HEE-KYUNG LEE, HWANSEOK R: "Interleukin-34 Limits the Therapeutic Effects of Immune Checkpoint Blockade", ISCIENCE, ELSEVIER, vol. 23, no. 10, 19 September 2020 (2020-09-19), pages 101584, XP093103676, DOI: 10.1016/j.isci.2020.101584 *
KAJIHARA NABEEL; KITAGAWA FUMIHITO; KOBAYASHI TAKUTO; WADA HARUKA; OTSUKA RYO; SEINO KEN-ICHIRO: "Interleukin-34 contributes to poor prognosis in triple-negative breast cancer", BREAST CANCER, JAPANESE BREAST CANCER SOCIETY, TOKYO, JP, vol. 27, no. 6, 23 June 2020 (2020-06-23), JP , pages 1198 - 1204, XP037272412, ISSN: 1340-6868, DOI: 10.1007/s12282-020-01123-x *
MARQUEZ-GARBAN DIANA C.; DENG GANG; COMIN-ANDUIX BEGONYA; GARCIA ALEJANDRO J.; XING YANPENG; CHEN HSIAO-WANG; CHEUNG-LAU GARDENIA;: "Antiestrogens in combination with immune checkpoint inhibitors in breast cancer immunotherapy", JOURNAL OF STEROID BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY, ELSEVIER SCIENCE LTD., OXFORD., GB, vol. 193, 19 June 2019 (2019-06-19), GB , XP085804787, ISSN: 0960-0760, DOI: 10.1016/j.jsbmb.2019.105415 *
SUN TING, ZHANG WENJIA, LI YUAN, JIN ZHENGYU, DU YANG, TIAN JIE, XUE HUADAN: "Combination Immunotherapy with Cytotoxic T-Lymphocyte–Associated Antigen-4 and Programmed Death Protein-1 Inhibitors Prevents Postoperative Breast Tumor Recurrence and Metastasis", MOLECULAR CANCER THERAPEUTICS, AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, US, vol. 19, no. 3, 1 March 2020 (2020-03-01), US , pages 802 - 811, XP093103674, ISSN: 1535-7163, DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-19-0495 *
TSUBAKI MASANOBU, TAKEDA TOMOYA, MATSUMOTO MIKIHIRO, KATO NATSUKI, YASUHARA SHOTA, KOUMOTO YU-ICHI, IMANO MOTOHIRO, SATOU TAKAO, N: "Tamoxifen suppresses paclitaxel-, vincristine-, and bortezomib-induced neuropathy via inhibition of the protein kinase C/extracellular signal-regulated kinase pathway", TUMOR BIOLOGY, KARGER, BASEL, CH, vol. 40, no. 10, 1 November 2018 (2018-11-01), CH , pages 1 - 13, XP093103672, ISSN: 1010-4283, DOI: 10.1177/1010428318808670 *
XANTHOPOULOS J. M., ROMANO A. E., MAJUMDAR S. K.: "Response of Mouse Breast Cancer Cells to Anastrozole, Tamoxifen, and the Combination", JOURNAL OF BIOMEDICINE AND BIOTECHNOLOGY, vol. 2005, no. 1, 1 January 2005 (2005-01-01), pages 10 - 19, XP093103673, ISSN: 1110-7243, DOI: 10.1155/JBB.2005.10 *

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