WO2023162731A1 - ワクチン接種方法及び養殖魚 - Google Patents

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vaccination
cultured
vaccination method
tuna
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奈央子 梅田
隆 原
利宗 三宅
輝 楳田
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株式会社ニッスイ
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K61/00—Culture of aquatic animals
    • A01K61/10—Culture of aquatic animals of fish
    • A01K61/13—Prevention or treatment of fish diseases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Definitions

  • the present invention relates to a method for vaccination of farmed fish and to vaccinated farmed fish.
  • Streptococcal and iridovirus diseases are increasing in tuna farming. At present, there is no preventive method for streptococcal disease and iridovirus disease in cultured tuna other than vaccines.
  • a vaccine for fish iridovirus infection is described in JP-A-2019-119732.
  • a common method of vaccination for fish is to inject the vaccine liquid into the peritoneal cavity of anesthetized fish. ing.
  • Yuji Ishii "Streptococcal disease occurring in farmed bluefin tuna" (Suiken Center Dayori (Ehime Prefecture Agriculture, Forestry and Fisheries Research Institute, Fisheries Research Center, Cultivation Resources Research Institute), No. 11, P. 6-7 (2019) (January)) describes measures against streptococcal disease in bluefin tuna, but the risk of death due to scratches on the body surface due to handling is a disadvantage, and vaccination by injection is considered difficult. There is a description to that effect.
  • the present application provides a vaccination method for cultured fish such as tuna that minimizes handling stress and also minimizes loss of commercial value of edible parts.
  • Vaccination method In the vaccination method according to the first embodiment of the present application, the dorsal or tail muscles of cultured fish are pierced with an injection needle to inoculate the vaccine solution.
  • the position where the injection needle is punctured is preferably a site along the back midline of the cultured fish.
  • the position where the injection needle is punctured is the base of the dorsal fin.
  • the cultured fish be not anesthetized.
  • an adjuvant is added to the vaccine solution.
  • the farmed fish be mackerel fish, particularly tuna or bonito.
  • the farmed fish according to the second embodiment of the present application is characterized by having traces of vaccination on the back or tail.
  • the farmed fish be mackerel fish, particularly tuna or bonito.
  • Embodiments of the present application are thus configured to provide a vaccination method for cultured fish such as tuna that minimizes handling stress while also minimizing loss of commercial value of edible parts. It becomes possible to
  • FIG. 2 is a plan view schematically showing each part of a cultured fish; It is a graph which shows the transition of the cumulative mortality rate of cultured fish after administration of a vaccine of a comparative example.
  • the aquaculture facility that implements the vaccination method of this embodiment, and it may be selected as appropriate in consideration of the type and size of the target aquaculture fish. However, it is necessary to secure a sufficient size to avoid collision between cultured fish immediately after vaccination or between cultured fish and aquaculture equipment.
  • square cages preferably have a length and width of 20 m or more and a depth of 15 m or more
  • circular cages preferably have a diameter of 20 m or more and a depth of 15 m or more.
  • the upper limit is preferably 100 m or less in length and width, and 50 m or less in depth, in the case of square cages, and 100 m in diameter or less, and 50 m or less in depth, in the case of circular cages. This is because if the diameter is larger than this, the workability is deteriorated.
  • the vaccination method of this embodiment can be performed in either marine aquaculture facilities or land aquaculture facilities. If it is a marine aquaculture facility, aquaculture can be continued as it is. On the other hand, if it is a land-based aquaculture facility, it is easy to observe the effects of vaccines after vaccination.
  • the vaccination method of the present embodiment is suitable for mackerel fish, especially tuna or skipjack, which have low resistance to handling stress.
  • an example of cultured fish is shown in the plan view of FIG.
  • the cultured fish 1 in this figure is tuna.
  • the farmed fish 1 of this example has a spindle shape in plan view, and has a pair of pectoral fins 6 at the base of the head 2 .
  • a caudal fin 7 is present at the tip of the tail 4 .
  • a dorsal fin 5 is present along the midline 10 on the back 3 .
  • the vaccination method of the present embodiment can target cultured fish of any size, but may target cultured fish of a size that can be caught. However, if it is too large, it may not be possible to efficiently carry out a series of vaccinations, such as picking it up from the cage and fixing it at the time of vaccination.
  • a series of vaccinations such as picking it up from the cage and fixing it at the time of vaccination.
  • the fish weight is 6.0 kg or less, preferably 4.0 kg or less, more preferably 2.0 kg or less
  • vaccination can be performed without excessively stressing the tuna.
  • the cultured fish used in the vaccination method of the present embodiment need only develop immunity to the extent that they can produce antibodies when vaccinated.
  • bluefin tuna with a body weight of 0.3 kg or more, preferably 0.4 kg or more, more preferably 0.5 kg or more may be used.
  • the farmed fish After scooping up the farmed fish, the farmed fish may be secured to prevent movement during vaccination.
  • the farmed fish may be fixed on the floor or platform using hands or equipment. After vaccination, it is necessary to return the fish to the cage immediately, so it is convenient to fix the fish by hand. Since the cultured fish in this embodiment are vulnerable to rubbing, it is preferable to fix them so as not to rub against them.
  • fixing by hand of the operator it is preferable to use, for example, rubber gloves so as not to touch the cultured fish directly.
  • the cushion When fixing the farmed fish on the floor or table, if a cushion is placed on the floor or the table and the farmed fish is placed on top of it, the cushion will cushion the farmed fish, so the farmed fish can be pressed down to some extent.
  • the cultured fish may be fixed with a material such as a plastic bag or a plastic sheet that does not cause friction when touched.
  • farmed fish are not anesthetized during vaccination.
  • the fish are caught or scooped up from the cage, immersed in an anesthetic tank containing an anesthetic solution diluted with seawater, and then removed from the anesthetic tank.
  • anesthesia In this way, there are more opportunities to touch fish during anesthesia, but with tuna, contact with the body surface causes mucus and scales to fall off, causing abrasions on the skin, which makes it easier for bacterial infections to occur. lead to decreased sex. Therefore, vaccination without anesthesia can reduce the chance of contact with tuna.
  • the dorsal or tail muscle of cultured fish is pierced with an injection needle, and the vaccine solution is inoculated there.
  • muscles of the back or tail refer to muscles in the area along the midline of the back, around the fin bones of the back (or between splits), or on the back near the head. Alternatively, it refers to the edible muscles of the relatively less useful part of the tail.
  • the position where the injection needle is punctured is the part along the midline of the back of the cultured fish, especially the part that is discarded when disassembled for food. It is desirable to have In other words, the muscle along the median line 10 in the back 3 is desirable as the position where the injection needle is punctured during vaccination in this embodiment. This is because the use of the midline 10 as a mark makes it easier to inoculate while avoiding muscles that are normally edible, and also because it is possible to remove parts where there is a possibility of residual vaccine from edible parts. is.
  • the position where the injection needle is punctured is the base of the dorsal fin.
  • the dorsal fin base has many bones and skin parts, and if this part is vaccinated, it will be discarded when disassembled for food, so the loss of commercial value of the cultured fish 1 can be minimized.
  • the depth of injection needle puncture during vaccination is 3 mm or more and less than 1.0 cm. This is because if the depth is 1.0 cm or more, the inside of the body may be damaged, and if the depth is less than 3 mm, the inoculated vaccine may leak.
  • a syringe with a needle of about 5 mm for vaccination because the entire length of the needle can be punctured.
  • the thickness of the injection needle can be appropriately selected depending on the size of the cultured fish, but is preferably 21-23 gauge, for example. However, if the cultured fish weigh about 500 g, the lower limit of the depth may be 1 mm.
  • the upper limit of the depth may be less than 1.5 cm.
  • the vaccination of this embodiment may be performed using a continuous syringe when continuously administering to a plurality of individuals. If the vaccine is administered using a continuous syringe, the vaccine can be administered continuously without refilling in the middle, which simplifies the work.
  • Diseases to be vaccinated in this embodiment include, for example, streptococcal disease and iridovirus disease, as well as vibriosis, yellowtail pseudotuberculosis, tuna pasteurellosis and nocardiosis.
  • Each vaccine may be mixed and used, or may be used as a separate vaccine.
  • Vaccines can be mixed and used to reduce the number of vaccinations.
  • an adjuvant be added to the vaccine liquid to enhance the antibody-producing action.
  • adjuvants aluminum gel or oil adjuvants or combinations thereof can be used.
  • Adjuvants can be used to induce higher antibody titers or increase the duration of antibody induction or both. Oil adjuvants are preferred because higher antibody titer induction and longer duration of antibody induction can be expected than aluminum gel.
  • the water temperature at the time of vaccination in this embodiment can be appropriately determined depending on the target farmed fish and the target disease.
  • the water temperature during vaccination against streptococcal disease and iridovirus in bluefin tuna is 14°C or higher and 30°C or lower, preferably 20°C or higher and 28°C or lower, more preferably 24°C or higher and 28°C or lower.
  • the vaccination of this embodiment be performed at a stage when the target fish disease has not occurred in the same water area. This is because the patient may become ill before the antibody titer has sufficiently increased.
  • Vaccination can be done anywhere near the fish pen, but it is desirable to do it, for example, on a boat or on a raft, considering that it is possible to immediately return the fish to the fish pen after vaccination.
  • feeding may be restricted for several days, but feeding may be performed without any special feeding restrictions. Normally, when vaccination is performed, poor feeding occurs in yellowtail, amberjack, etc., but if the vaccination is performed according to the method described in this embodiment, poor feeding may not occur, and normal feeding can be performed. can. As a result, it is possible to avoid the loss of time for breeding aquaculture fish to a large size.
  • Cultured fish vaccinated by the vaccination method of this embodiment may show signs of vaccination, such as scar contraction or swelling, on the back or tail. In that case, it can be easily determined whether or not the animal has been vaccinated by the vaccination method of the present embodiment. For example, if the vaccination is given at a site along the midline of the back, there will be a mark at that site. Also, if the base of the dorsal fin is vaccinated, there will be a mark at that site. Traces can be discerned with the naked eye or by using a microscope. Such vaccination traces may be used to mark parts to be discarded during dismantling.
  • vaccination may be performed once or multiple times.
  • a second or later booster inoculation may be performed after a predetermined period of time, such as 2 weeks, 1 month, 2 months, 6 months or 1 year.
  • a predetermined period of time such as 2 weeks, 1 month, 2 months, 6 months or 1 year.
  • an oral vaccine may also be used as a booster vaccination.
  • the vaccination method of the present application will be described below in Examples.
  • the target diseases of Visipak Note 5 oil used as a vaccine are type I streptococcus, type II streptococcus, iridovirus, Vibrio and tuberculosis.
  • the main components of oil adjuvants contained in vaccines are ethyl oleate and squalane.
  • Cumulative mortality rate (%) [number of dead tuna tails within observation period]/[number of tails at start of observation] x 100
  • Group 1 which was anesthetized
  • Group 2 which was held on a sponge mat without anesthesia
  • Group 3 which was held in a plastic bag without anesthesia.
  • the cumulative mortality rate was 83% in Group 1 indicated by the solid line in FIG.
  • the cumulative mortality rate was also 10% in Group 3, indicated by the lower dashed line. Retaining on a sponge mat had a relatively high cumulative mortality rate due to the damage caused by scratching the surface of the cultured fish, whereas retention on a plastic bag that minimized scratching the surface of the cultured fish had the highest cumulative mortality rate. is presumed to have decreased.
  • the cumulative mortality rate one month after vaccination in this example was 3.3% in the vaccinated group and 6.2% in the non-vaccinated group.
  • the decrease in feeding activity observed when this vaccine was intraperitoneally inoculated was not observed.
  • the present invention can be used for vaccination of farmed fish.

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Abstract

養殖魚の背部又は尾部の筋肉に注射針を穿刺してワクチン液を接種する、ワクチン接種方法。

Description

ワクチン接種方法及び養殖魚
　本発明は、養殖魚へのワクチン接種方法及びワクチン接種を施した養殖魚に関する。
　マグロ養殖で連鎖球菌症、イリドウイルス病の被害が拡大している。養殖マグロにおける連鎖球菌症、イリドウイルス病の予防法は、現状ではワクチン以外には存在しない。魚類のイリドウイルス感染症ワクチンについては特開２０１９－１１９７３２号公報に記載がある。魚類への一般的なワクチン接種は、麻酔をかけた魚の腹腔内へワクチン液を注射する方法が挙げられるが、マダイのワクチンのように一部のワクチン及び魚種のみで、筋肉注射が認可されている。なお、石井佑治「養殖クロマグロで発生した連鎖球菌症」（水研センターだより（愛媛県農林水産研究所　水産研究センター・栽培資源研究所）、第１１号、Ｐ．６－７（平成３１年１月））には、クロマグロの連鎖球菌症対策の記載があるが、ハンドリングによる体表のスレなどにより死亡が発生する恐れがデメリットとなり、注射法によるワクチン接種は困難であると考えられている旨の記載がある。
　ブリなどの養殖魚では、ワクチン接種は通常腹腔内投与で行われるが、マグロのように臓器が腹腔の壁面まで達している魚種に腹腔内投与でワクチン接種をした場合は、接種時に針で臓器に傷をつけてしまうことがある。また、マグロはハンドリングや麻酔による減耗が大きいため、一般的な腹腔内へのワクチン接種法は採用できない。一方、筋肉注射はハンドリング作業が比較的容易ではあるものの、注射した筋肉部位にワクチンが残留したり、肉芽腫を形成したりすることによって可食部の商品価値が失われることがある。
　以上の問題点に鑑み、本願は、マグロのような養殖魚に対し、ハンドリングストレスを最小限にしつつ、可食部の商品価値の滅失も最小限にするワクチン接種方法を提供する。
（１）ワクチン接種方法
　本願の第１の実施態様に係るワクチン接種方法は、養殖魚の背部又は尾部の筋肉に注射針を穿刺してワクチン液を接種する。
　なお、前記注射針が穿刺される位置は、養殖魚の背部正中線に沿った部位であることが望ましい。また、前記注射針が穿刺される位置は、背鰭基部であることが望ましい。さらに、前記養殖魚は無麻酔であることが望ましい。また、前記ワクチン液にはアジュバントが添加されていることが望ましい。
　なお、前記養殖魚はサバ科魚類であること、特にマグロ類又はカツオ類であることが望ましい。
（２）養殖魚
　本願の第２の実施態様に係る養殖魚は、背部又は尾部にワクチン接種の痕跡を有することを特徴とする。なお、背部正中線に沿った部位、特に背鰭基部に前記痕跡を有することが望ましい。
　なお、前記養殖魚はサバ科魚類であること、特にマグロ類又はカツオ類であることが望ましい。
　本願の実施態様は上記のように構成されているので、マグロのような養殖魚に対し、ハンドリングストレスを最小限にしつつ、可食部の商品価値の滅失も最小限にするワクチン接種方法を提供することが可能となる。
養殖魚の各部位を模式的に示す平面図である。 比較例のワクチン投与後の養殖魚の累積死亡率の推移を示すグラフである。
　本実施形態のワクチン接種方法を実行する養殖設備には特に制限はなく、対象となる養殖魚の種類や大きさなどを考慮して適宜選択すればよい。ただし、ワクチン接種直後の養殖魚同士、又は養殖魚と養殖設備との衝突をさけるために十分な大きさを確保する必要がある。たとえば、クロマグロの場合、たとえば角形の生簀の場合、縦横がそれぞれ２０ｍ以上、深さ１５ｍ以上であることが望ましく、円形の生簀の場合、直径２０ｍ以上、深さ１５ｍ以上が望ましい。上限としては、角形生簀の場合、縦横それぞれ１００ｍ以下、深さ５０ｍ以下が望ましく、円形生簀の場合直径１００ｍ以下、深さ５０ｍ以下が望ましい。これ以上大きいと作業性が落ちるからである。
　本実施形態のワクチン接種方法は、海面養殖設備又は陸上養殖設備のどちらでも行うことができる。海面養殖設備であれば、そのまま養殖を継続できる。一方、陸上養殖設備であれば、ワクチン接種後のワクチンの影響の観察が容易である。
　なお、本実施形態のワクチン接種方法は、ハンドリングストレスに対する耐性が低いサバ科魚類、特にマグロ類又はカツオ類に適している。ここで、養殖魚の例を図１の平面図に示す。本図の養殖魚１は、マグロである。本例の養殖魚１は、平面視で紡錘形を呈し、頭部２の付け根に１対の胸鰭６が存在する。また、尾部４の先には尾鰭７が存在する。背部３には正中線１０に沿って背鰭５が存在する。
　本実施形態のワクチン接種方法は任意の大きさの養殖魚を対象とすることができるが、釣りあげることができる範囲の大きさの養殖魚を対象としてもよい。ただし、あまりに大きいと生簀からの取り上げ、ワクチン接種時の固定など一連のワクチン接種が効率的に行えない場合がある。たとえば、クロマグロの場合、魚体重が６．０ｋｇ以下、望ましくは４．０ｋｇ以下、より望ましくは２．０ｋｇ以下であれば、マグロにストレスを過剰に与えることなくワクチン接種を行うことができる。本実施形態のワクチン接種方法を使用する養殖魚はワクチンを接種したときに抗体を産生可能な程度免疫が発達していればよい。たとえば、クロマグロでは魚体重が、０．３ｋｇ以上、望ましくは０．４ｋｇ以上、より望ましくは０．５ｋｇ以上の個体を使用して行ってもよい。
　養殖魚をすくい上げた後、ワクチン接種時は養殖魚が動かないようにしっかり固定してもよい。たとえば、手や器具を用いて床や台の上に養殖魚を固定してもよい。ワクチン接
種後は、すぐに生簀に戻す必要があるため、作業者の手で固定するのが簡便である。本実施形態における養殖魚は擦れに弱いため、擦れないように固定するのがよい。作業者の手で固定する場合、養殖魚に直接触れないように、たとえばゴム手袋を用いるとよい。
　養殖魚を床又は台の上に固定する際に、床又は台の上にクッションを敷いてその上に養殖魚を置けば、クッションで緩衝されるので養殖魚をある程度強く押さえることができる。養殖魚を固定するとき、養殖魚には擦れを生じる材質のもので養殖魚に触れないようにするのがよい。擦れが生じ得ると後で細菌の感染から斃死することがあるからである。たとえば、ビニール袋又はビニールシートのように、触れても擦れが生じない材質のもので養殖魚を固定してもよい。
　ワクチン接種の際、養殖魚は無麻酔であることが望ましい。一般的に、養殖魚に麻酔を施す際には、生簀から魚を釣り上げるか、又はすくい上げるかして、海水で希釈した麻酔液を容れた麻酔水槽に魚を浸漬したのち、麻酔水槽から魚をすくい上げる作業を行う。このように、麻酔の際に魚に触れる機会が増えるが、マグロ類では体表への接触で粘液及び鱗が脱落して皮膚の擦過傷が生じ、ここから細菌による感染が生じやすくなるため、生産性の低下につながる。よって、無麻酔でワクチン接種を行うことで、マグロ類への接触の機会を減らすことができる。
　本実施形態のワクチン接種方法では、養殖魚の背部又は尾部の筋肉に注射針を穿刺して、そこへワクチン液を接種する。ここで、「背部又は尾部の筋肉」とは、背部正中線に沿った領域で背中の担鰭骨周辺（若しくは分れ身と分れ身の間）の筋肉、又は、頭部に近い背中側若しくは尾部の比較的利用価値の低い部位の可食部の筋肉をいう。
　なお、注射針が穿刺される位置は、可食部の商品価値の滅失を最小限にするために、養殖魚の背部正中線に沿った部位、特に、食用に解体したときに廃棄される部位であることが望ましい。換言すると、本実施形態のワクチン接種の際に注射針を穿刺する位置は、背部３において正中線１０に沿った部位の筋肉が望ましい。正中線１０を目印にすることで通常可食部となる筋肉を避けた接種が容易になるからであり、また、ワクチン残留の可能性がある部位を食用となる部分から除去することができるためである。
　また、注射針が穿刺される位置は、背鰭基部であることが望ましい。背鰭基部は骨や皮の部分が多く、この部位にワクチンを接種した場合、食用に解体したときに廃棄されるので、養殖魚１の商品価値の滅失を最小限に抑えることができる。
　ワクチン接種の際に注射針を穿刺する深さは３ｍｍ以上１．０ｃｍ未満であることが望ましい。１．０ｃｍ以上であると、体内を傷つけることがあり、３ｍｍより浅いと接種したワクチンが漏れてしまうことがあるためである。たとえば、５ｍｍ程度の針をもつ注射器を用いてワクチン接種を行うと、この針の全長を穿刺できるため好ましい。注射針の太さは養殖魚の大きさにより適宜選択することができるが、たとえば２１～２３ゲージが好ましい。ただし、養殖魚の体重が５００ｇ程度であれば、深さの下限は１ｍｍであってもよい。また、養殖魚の体重が６ｋｇ以上であれば、深さの上限は１．５ｃｍ未満であってもよい。また、本実施形態のワクチン接種は、複数の個体に連続的に行う際には連続式注射器を用いて行ってもよい。連続式注射器を用いてワクチンを接種すれば、途中でワクチンを充填せずに連続的に投与できるので作業が簡便となる。
　本実施形態でワクチン接種の対象となる疾病は、たとえば、連鎖球菌症及びイリドウイルス病の他、ビブリオ症、ブリの類結節症、マグロのパスツレラ症及びノカルジア症も挙げられる。それぞれのワクチンは混合して使用してもよいし、それぞれ別のワクチンとして使用してもよい。ワクチンは混合して使用すればワクチン接種の回数を減らすことがで
きる。
　ワクチン液には、抗体産生作用を高めるためアジュバントが添加されていることが望ましい。アジュバントとしては、アルミニウムゲル若しくはオイルアジュバント又はこれらの組み合わせを使用することができる。アジュバントを使用することにより高い抗体価の誘導若しくは抗体誘導の持続時間の増加又はその両方を実現させることができる。オイルアジュバントはアルミニウムゲルよりも高い抗体価の誘導及び抗体誘導のより長い持続時間を期待できるため、好ましい。
　本実施形態のワクチン接種時の水温は、対象の養殖魚及び対象とする疾病によって適宜決めることができる。たとばクロマグロの連鎖球菌症及びイリドウィルスのワクチン接種時の水温は、１４℃以上３０℃以下、望ましくは２０℃以上２８℃以下、より望ましくは２４℃以上２８℃以下である。
　本実施形態のワクチン接種は、同じ水域に対象となる魚病が発生していない段階で行うことが望ましい。抗体価が十分上昇する前に罹患してしまうことがあるからである。
　なお、養殖魚の消化管に餌が入っていると、ワクチン接種作業の間に酸欠になりやすいため、ワクチン接種の少なくとも１日前には餌止めをすることが望ましい。また、マグロは遊泳しなければ呼吸が十分にできないため水から引き上げている間は呼吸ができない。そのため養殖魚に与えるストレスを少なくするためにも、ワクチン接種後はすみやかに生簀に戻すのが好ましい。
　養殖魚のすくい上げからワクチン接種を経て、生簀に戻すまでの一連の作業時間はできるだけ短いのがよい。たとえばクロマグロの場合、この作業時間は１分以内が好ましい。ワクチン接種の場所は生簀の近くであればどこでもよいが、ワクチン接種後直ちに生簀へ戻すことを可能にすることを考慮すれば、たとえば船上や筏などで行うことが望ましい。
　ワクチン接種をした養殖魚に対する給餌については、数日の給餌制限を行ってもよいが、給餌制限を特別に設けずに給餌を行ってもよい。通常、ワクチン接種を行った場合、ブリやカンパチなどでは摂餌不良となるが、本実施形態に記載の方法によるワクチン接種であれば摂餌不良とならないことがあり、通常の給餌を行うことができる。それにより、養殖魚を大きく飼育するための時間的損失を免れることが可能である。
　本実施形態のワクチン接種方法でワクチンを接種された養殖魚は、背部又は尾部にワクチン接種の痕跡、たとえば、瘢痕収縮又は腫脹が認められることがある。その場合、本実施形態のワクチン接種方法でワクチンを接種されたかどうかが容易に判別できる。たとえば、背部正中線に沿った部位にワクチンが接種されれば、その部位に痕跡が見られる。また、背鰭基部にワクチンが接種されれば、その部位に痕跡が見られる。痕跡は肉眼又は顕微鏡を用いることによって判別することが可能である。このようなワクチン接種の痕跡によって、解体の際に廃棄すべき部分の目印としてもよい。
　本実施形態のワクチン接種方法によれば、腹腔内接種が適さないマグロ類のような養殖魚であっても、比較的容易かつ最小のハンドリングストレスでワクチン接種が可能となり、また、ワクチン接種による可食部の商品価値の滅失も最小限に抑えられる。
　なお、本実施形態のワクチン接種回数は、１回でもよいが、複数回行ってもよい。所定期間、たとえば２週間、１箇月、２箇月、６箇月又は１年、をおいて２回目、あるいはそれ以降の、ブースター接種を行ってもよい。また、無麻酔での複数回のワクチン接種によるハンドリングストレスを考慮して、ブースター接種として経口ワクチンを併用してもよ
い。
　以下、実施例にて本願のワクチン接種方法を説明する。
（１）試験方法
　長崎県五島市の金子産業株式会社五島事業所にて、魚体重０．２～０．５ｋｇのクロマグロの幼魚に対し、入荷の際に随時ワクチンを接種した後、生け簀へ収容した。ワクチンは共立製薬株式会社製造販売の「ビシパック注５ｏｉｌ」を使用し、一般的な可食部を避け、背鰭基部にこれを接種した。接種は、令和３年８月２日から８月５日まで随時行い、最終的に１２０尾に接種を行った。ワクチン接種時の水温は約２７℃であった。
　ここで、ワクチンとして使用したビシパック注５ｏｉｌの対象疾病はＩ型連鎖球菌、ＩＩ型連鎖球菌、イリドウイルス、ビブリオ菌及び類結節症菌である。ワクチンが含有するオイルアジュバントの主成分はオレイン酸エチル及びスクワランである。本ワクチンの用法用量は、ブリに投与する場合、体重２０ｇ～１ｋｇのブリの腹腔内に連続注射器を用いて本ワクチン０．１ｍｌを１回投与するよう定められているが、本実施例では、ヨコワ１尾当たり０．２ｍｌを投与した。
　なお、比較例として、平成１９年に、西南水産株式会社安満地漁場（高知県幡多郡大月町）で、同魚種に対し阪大微生物病研究会製造、大日本製薬株式会社販売のイリド・レンサ混合不活化ワクチン「ビケン」を腹腔内投与した場合を観察した。なお、ワクチン接種の際、麻酔を行った第１群、無麻酔でスポンジマット上に保定した第２群及び無麻酔でビニール袋に入れて保定した第３群の３群に分けた。ワクチン接種時の水温は約２８℃であった。そして、ワクチン接種後の累積死亡率を、下記式により計算した。
累積死亡率（％）＝［観察期間内のマグロの死亡尾数］／［観察開始時の尾数］×１００
　以上の比較例における累積死亡率の推移を図２及び下記表１に示す。
　なお、ワクチン接種の際、麻酔を行った第１群、無麻酔でスポンジマット上に保定した第２群及び無麻酔でビニール袋に入れて保定した第３群の３群に分けた。その結果、投与後３日で、図２中で実線で示す第１群では累積死亡率は８３％を示し、破線で示す第２群では累積死亡率は６５％を示し、最も累積死亡率の低い点線で示す第３群でも累積死亡率は１０％であった。なお、スポンジマット上での保定は、養殖魚の表面を擦過することによるダメージにより累積死亡率が比較的高くなったのに対し、養殖魚の表面を極力擦過しないビニール袋での保定が最も累積死亡率が低くなったものと推測される。
　これに対し、本実施例のワクチン接種１箇月後の累積死亡率は、接種群で３．３％、非接種群で６．２％であった。また、接種群においては、本ワクチンを腹腔接種した際に観察される摂餌活性の低下は観察されなかった。
　また、実施例において、ワクチン接種１箇月後に、非接種群及び接種群それぞれ５尾から血液を採取し、連鎖球菌であるＬａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｇａｒｖｉｅａｅＩ型に対する抗体価をマイクロタイター法により測定した。その結果を表２に示す。なお、幾何平均算出にあたり、抗体価２未満の場合は抗体価を１とした。
　上記の結果、接種群では連鎖球菌に対する抗体価は非接種群に対し有意に高いことが分かった。なお、接種群及び被接種群ともに連鎖球菌症による死亡は認められなかった。
　同様に、上記で採取した血液から、イリドウイルスに対する抗体価をＥＬＩＳＡ法により測定した。その結果を表３に示す。
　上記の結果、接種群ではイリドウイルスに対する抗体価は非接種群に対し有意に高いことが分かった。なお、接種群及び被接種群ともにイリドウイルス病による死亡は認められなかった。
　本発明は、養殖魚へのワクチン接種に利用可能である。

Claims (12)

  1. 　養殖魚の背部又は尾部の筋肉に注射針を穿刺してワクチン液を接種する、ワクチン接種方法。
  2. 　前記注射針が穿刺される位置は、養殖魚の背部正中線に沿った部位である、請求項１に記載のワクチン接種方法。
  3. 　前記注射針が穿刺される位置は、背鰭基部である、請求項１に記載のワクチン接種方法。
  4. 　前記養殖魚は無麻酔である、請求項１から請求項３までのいずれか１項に記載のワクチン接種方法。
  5. 　前記ワクチン液にはアジュバントが添加されている、請求項１から請求項４までのいずれか１項に記載のワクチン接種方法。
  6. 　前記養殖魚はサバ科魚類である、請求項１から請求項５までのいずれか１項に記載のワクチン接種方法。
  7. 　前記サバ科魚類は、マグロ類又はカツオ類である、請求項６に記載のワクチン接種方法。
  8. 　背部又は尾部にワクチン接種の痕跡を有する、養殖魚。
  9. 　背部正中線に沿った部位に前記痕跡を有する、請求項８に記載の養殖魚。
  10. 　背鰭基部に前記痕跡を有する、請求項８に記載の養殖魚。
  11. 　サバ科魚類である、請求項８から請求項１０までのいずれか１項に記載の養殖魚。
  12. 　前記サバ科魚類は、マグロ類又はカツオ類である、請求項１１に記載の養殖魚。
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