WO2023111238A1 - Procédé de préparation d'un substrat d'élevage de larves d'insectes par hydrolyse enzymatique et substrat obtenu - Google Patents

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plants
mixture
larvae
substrate
carried out
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PCT/EP2022/086294
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Alexandre LAURO
Nicolas Hamelin
Marie-Eve FAURE
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Definitions

  • the present invention relates to a method for preparing a substrate for rearing insect larvae from by-products derived from plants, comprising specific steps a) to c). It also relates to the substrate obtained, and to the method of breeding insects using such a substrate.
  • Protein production is one of the key issues for the decades to come, with a growing deficit in the world (60 Mt by 2030).
  • the protein deficit is particularly critical for the aquaculture sector. With nearly half of wild fish stocks exploited at biologically unsustainable levels, aquaculture is expanding rapidly to meet growing global demand. According to the 2016 FAO report on the state of world fisheries and aquaculture, the majority of aquatic products today come from aquaculture and no longer from fisheries. With a growth of more than 5% per year, the aquaculture sector is the fastest growing agribusiness sector.
  • Insect farming responds to this problem by providing a source of nutrients for animal nutrition and agriculture.
  • These products make it possible to introduce new, more sustainable protein sources, especially in aquaculture, for which insect proteins are particularly suitable.
  • insect meal is an excellent solution to support the growth of aquaculture, whose traditional sources of food (wild fish meal or soy meal) are insufficient and have a strong environmental impact.
  • the industries for transforming plants into by-products include, in particular, starch manufacturing (production of starch from cereals, in particular wheat or maize), the sugar industry (production of sugar from sugar cane or beet) or oil production (from in particular palm oil obtained from the fruit of the oil palm, and palm kernel oil obtained from kernels of the fruit of the oil palm).
  • starch manufacturing production of starch from cereals, in particular wheat or maize
  • sugar industry production of sugar from sugar cane or beet
  • oil production from in particular palm oil obtained from the fruit of the oil palm, and palm kernel oil obtained from kernels of the fruit of the oil palm.
  • These industries generate plant by-products that can be used as as sources of proteins, lipids and potentially carbohydrates, which may be of interest for the rearing of insect larvae, but which have not been valued so far.
  • the processes used include the isolation of the compounds of interest by mechanical methods (grinding, separation of different fractions for starch production or the preparation of proteins), which may include fermentation and/or of distillation.
  • the subject of the present invention is a method for preparing a substrate for rearing insect larvae from by-products derived from plants, comprising the following steps: a) obtaining by-products derived from plants in the form of particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm, even more preferably less than or equal to 1.5 mm, if necessary by homogenization, b) mixing the product obtained in a) with an aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase, to obtain a composition whose moisture content is between 55% and 85% by weight relative to the total weight of the mixture, and c) addition of at least an enzyme to mixture b), to hydrolyze mixture b), then homogenization, in which step c) is concomitant with or subsequent to step b).
  • the process according to the invention makes it possible to efficiently valorize the by-products derived from plants, preferably from the production of palm oil. Indeed, these by-products are subjected to steps a) to c), which makes it possible to obtain a substrate of major interest for the rearing of insect larvae. Indeed, without wanting to be bound by any theory, high quality nutrients, compatible with the needs of agriculture, are released from these by-products, and allow the larvae to develop in good conditions. The insects obtained are then easily transformed into animal feed, in particular aquaculture.
  • the present invention also relates to a substrate for rearing insect larvae obtained by the process according to the invention.
  • a substrate according to the invention can be used for the breeding of insect larvae.
  • the present invention also relates to the use of an aqueous mixture of by-products derived from hydrolyzed plants, said aqueous mixture comprising particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm, even more preferably less than or equal to 1.5 mm, as a substrate for raising insect larvae.
  • the subject of the present invention is a method for rearing insect larvae, comprising the method according to the invention, then, during or after the hydrolysis of step c), a step d) of inoculation of insect larvae in the mixture c) and incubation.
  • the method for preparing a substrate for rearing insect larvae from by-products derived from plants comprises the following steps: a) obtaining by-products derived from plants in the form of particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm, even more preferably less than or equal to 1.5 mm, if necessary by homogenization, b) mixing the product obtained in a) with an aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase, to obtain a composition whose moisture content is between 55% and 85% by weight relative to the total weight of the mixture, and c) addition of at least one enzyme to the mixture b), then homogenization, in which stage c) is concomitant with or subsequent to stage b).
  • the insect larvae are in particular the larvae of the diptera Hermetia lllucens, Musca Domestica, the beetles Tenebrio Molitor, Alphitobius diaperinus as well as the larvae of the locusts Acheta domesticus, Gryllodes sig illatus or Field Cricket Gryllus assimilis.
  • the insect larvae are the larvae of Hermetia illucens.
  • Plant by-products are co-products obtained during plant processing.
  • the plants are lignocellulosic, i.e. composed of lignin, cellulose and hemicellulose.
  • they are chosen from oil plants, cereals, wood and plants from the sugar industry.
  • the by-products derived from plants are chosen from oilseed plant cakes, oil mill effluents (POME), decanter cakes, cereal cakes, oilseeds, shells and skins of oilseeds, cereal co-products such as corncobs or wheat or rice straw, and products from the manufacture of sugar, such as sugar cane bagasse or beet pulp.
  • POME oil mill effluents
  • the by-products derived from plants are chosen from oilseed plant cakes and cereal cakes, preferably from palm kernel cakes (PKC and/or PKE and/or PKM), almond, peanut , safflower, hemp, rapeseed, copra (coconut), cultivated flax, corn (corn germ cake), rape, walnut, olive (cake called "pomace” of olives ), poppy seed (poppy or poppy seed cake), sesame, soy and sunflower cake.
  • PKC and/or PKE and/or PKM palm kernel cakes
  • almond peanut , safflower, hemp, rapeseed, copra (coconut), cultivated flax, corn (corn germ cake), rape, walnut, olive (cake called "pomace” of olives ), poppy seed (poppy or poppy seed cake), sesame, soy and sunflower cake.
  • the by-products derived from plants are those obtained during the production of palm oil:
  • Palm oil is an important product that has wide applications from the production of cooking oils, foods, confectionery to oleochemicals such as soaps and lubricants as well as biodiesel. Palm oil is derived from the Fresh Fruit Bunches (FFBs) of the oil palm Elaeis guineensis. The FFBs harvested from the oil palm plantation are processed in a palm oil mill to extract crude palm oil (CPO) as the main product. Oil palm fruit nuts (Palm Kernel, PK) are processed in a palm oil nut mill (Palm Kernel Crusher, Kernel Crushing Plant, KCP) to extract palm kernel oil (palm kernel oil, PKO ) as the main product.
  • FFBs Fresh Fruit Bunches
  • CPO crude palm oil
  • Oil palm fruit nuts Palm Kernel, PK
  • Palm Kernel Crusher Kernel Crushing Plant, KCP
  • Palm kernel cakes (palm kernel cakes or PKC; they include the palm kernel expeller or PKE, also called, during oil extraction by hexane, palm kernel meal (PKM)) , stalks (Empty Fruit Bunches or EFB), mesocarp fiber and decanter cake obtained by mechanical or natural decantation of POME (decanter cake).
  • PKC palm kernel cakes
  • PKE palm kernel expeller
  • EFB Empty Fruit Bunches
  • mesocarp fiber and decanter cake obtained by mechanical or natural decantation of POME (decanter cake).
  • the by-products derived from plants are chosen from palm kernel cakes (PKC and/or PKE and/or PKM), stalks (Empty Fruit bunches or EFB), mesocarp fiber, mill effluents palm oil, decanter cakes and mixtures thereof.
  • step a) by-products from plants are obtained, in the form of particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm, even more preferably less than or equal to 1.5 mm.
  • these by-products derived from plants can be obtained by homogenization to obtain a product with particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm, even more preferably less than or equal to 1, 5mm.
  • This homogenization can be carried out by grinding and/or sieving. Indeed, the particle size of the ground material obtained is important for the subsequent development of the larvae.
  • particles with a D50 strictly greater than 5 mm lead to poorer hydrolysis, poor assimilation of nutrients by the larvae and lower water retention capacity.
  • particles having a D50 of less than or equal to 5 mm according to the invention make it possible to absorb water, creating an ideal mixture which is moist without being liquid (rather of semi-liquid or pasty consistency).
  • step a) The homogenization of step a) is advantageously carried out by disc or hammer grinding, preferably by hammer.
  • This grinding and/or sieving step is conventional and known from the prior art.
  • the product obtained in a) is then mixed with an aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase: this is step b).
  • the aqueous composition obtained has a moisture content of between 55% and 85% by weight relative to the total weight of the mixture.
  • the aqueous composition can consist only of water.
  • the aqueous composition comprises compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase; such aqueous compositions are also referred to as "solubles".
  • Such aqueous compositions comprise an aqueous phase and compounds derived from plants (for example lipids, proteins and/or sugars) soluble in the aqueous phase; they are co-products of plant processing.
  • the aqueous composition is a palm oil mill effluent (Palm Oil Mill Effluent or POME).
  • the mixture of step b) is carried out with an aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase, to obtain a composition whose moisture content is between 55% and 85% by weight, preferably between 65% and 80% by weight relative to the total weight of the mixture.
  • step c) the mixture obtained in step b) is hydrolyzed, thanks to the addition of at least one enzyme: this is step c).
  • the enzyme which can be used is preferably chosen from hydrolases, more preferably from mannanases, hemicellulases, cellulases, lignases, xylanases, pectinases, carbohydrases, proteases, amylases, lipases, keratinases, phytases and their mixtures.
  • the enzyme from step c) is chosen from mannanases, cellulases and mixtures thereof. Indeed, preferably at least one mannanase and/or at least one cellulase is used.
  • a mannanase produced by Aspergillus niger, Trichoderma sp or Paenibacillus lentus is used.
  • a cellulase produced by Aspergillus niger, or by Trichoderma sp, preferably by Trichoderma viride or Trichoderma reesei, is used.
  • a mixture of mannanases is used, or else a mixture of at least one mannanase with at least one cellulase.
  • Step c) can be concomitant with or after step b).
  • step c) is carried out at the same time as step b); in this case, the product obtained in a), the aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase, and at least one enzyme, are mixed and then homogenized.
  • the aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase can be mixed with at least one enzyme, then the resulting mixture is added to the product obtained in a).
  • step c) is after step b); in this case, the product obtained in a) and the aqueous composition optionally comprising compounds derived from plants and soluble in the aqueous phase are first mixed, then at least one enzyme is added, and the mixture is homogenized.
  • the enzyme is present in the mixture in an effective amount.
  • effective amount is meant an amount capable of significantly hydrolyzing the mixture.
  • the enzyme is present in an amount expressed as units of enzymatic activity present per gram of dry matter of substrate (“units/g of substrate”).
  • the enzymatic activity used is that used by the supplier to characterize the effectiveness of its enzyme.
  • the enzyme is present in an amount of at least 0.5 units/g of substrate, preferably at least 1 unit/g of substrate, preferably at least 1.5 units/g of substrate.
  • the enzyme is present in an amount of between 0.5 and 2000 units/g of substrate, preferably between 1 and 1800 units/g of substrate, preferably between 1.5 and 1700 units/g of substrate.
  • the hydrolysis is carried out at a temperature between 25°C and 90°C, preferably between 25°C and 70°C.
  • the hydrolysis is carried out for a period of between 5 minutes and 10 days, preferably between 5 minutes and 3 days.
  • a substrate for rearing insect larvae is thus obtained.
  • This substrate has several advantages: it allows the larvae to live, move and feed in a single medium, without it being necessary to change this medium or provide other sources of nutrients to the larvae. In addition, it has a semi-liquid or pasty and homogeneous consistency that allows the larvae to have access to nutrients and to drink throughout the breeding period without the risk of drowning.
  • the substrate has partially dried, which makes it possible to separate the larvae from the substrate and to recover them without difficulty.
  • the invention therefore also relates to a substrate for rearing insect larvae obtained by the method according to the invention.
  • This “substrate”, also called “rearing medium”, is a composition intended for the rearing of insect larvae; it is nutritious and serves as a physical support for the larvae due to its particular properties.
  • the invention therefore also relates to the use of the substrate according to the invention for the rearing of insect larvae.
  • the invention also relates to a method for rearing insect larvae, comprising the method according to the invention, then, during or after the hydrolysis of step c), a step d) of inoculation of larvae of insects in the mixture c) and incubation.
  • the mixture obtained at the end of step c) corresponds to the substrate obtained according to the invention.
  • the inoculation is carried out by depositing the larvae, preferably at the stage of young larvae, on the mixture obtained during the hydrolysis of step c).
  • the incubation of the insect larva rearing method is carried out for 1 to 60 days at a temperature between 25°C and 45°C, preferably at a temperature between 25°C and 35°C.
  • the hydrolysis reaction takes place during inoculation and incubation.
  • the insect larvae are inoculated at the same time, or else within a time interval of a few minutes (typically 5 to 30 minutes) as the addition of the enzyme(s) (step c ).
  • the inoculation is carried out by depositing the larvae, preferably at the stage of young larvae, on the mixture obtained at the end of the step vs).
  • the incubation of the insect larva rearing method is carried out for 1 to 60 days at a temperature between 25°C and 45°C, preferably at a temperature between 25°C and 35°C.
  • the hydrolysis reaction takes place before inoculation and incubation.
  • the hydrolysis of step c) takes place for 1 to 7 days, preferably at a temperature of between 25°C and 90°C, preferably between 25°C and 70°C. Then inoculation and incubation take place.
  • Incubation of insect larvae is carried out under adequate temperature and humidity conditions.
  • the larvae are recovered after 1 to 60 days of incubation.
  • An advantage of the substrate and its use is that it is not necessary to change or renew it. A complete breeding cycle can therefore be carried out on a single batch of substrate.
  • the larvae are placed on the rearing substrate at the young larvae stage, then grow at a temperature between 25 and 45°C, at a humidity level between 30 and 90%, for a period of between 1 and 60 days, depending on the insect considered. Insects can then be sampled at the larvae or pupae stage of development.
  • the larvae can be used to produce high-protein foods (especially for aquaculture), oils; the digested substrate is called frass, and can be used as organic fertilizer; the pupae can be used to produce reproductive adults, in order to generate new generations of insects.
  • the invention also relates to the use of an aqueous mixture of by-products derived from hydrolyzed plants, said aqueous mixture comprising particles having a D50 less than or equal to 5 mm, preferably less than or equal to 2 mm , even more preferably less than or equal to 1.5 mm, as a substrate for rearing insect larvae.
  • the aqueous mixture of by-products derived from hydrolyzed plants comprises particles having a size less than or equal to 5 mm: this size makes it possible to obtain a substrate of good quality for the rearing of insect larvae.
  • this aqueous mixture is obtained by steps a) to c) above, and therefore includes an enzymatic hydrolysis.
  • the substrates, methods and uses according to the invention are preferably implemented in installations which are geographically close to the plant processing plants. Indeed, this makes it possible to avoid the transport of large volumes of by-products.
  • these methods and uses are implemented from the by-products coming from pipes and/or transport racks directly connected in the plant processing plants, and bringing the by-products to the installations in which they are transformed for provide substrates for rearing insect larvae.
  • the transformations of plants are implemented "continuously", that is to say that the by-products do not are not stored for more than 24 hours between their obtaining as by-products and their use in the processes according to the invention. This also makes it possible to reduce the storage costs of these by-products.
  • Example 1 examples of implementations of processes according to the invention and substrates obtained
  • step a The PKE by-product is ground so as to obtain a particle size of less than 2 mm (step a).
  • the product resulting from step a) is mixed with water previously mixed with the enzyme (concomitant steps b and c) in the following mass proportions: 1/3 of PKE for 2/3 of water.
  • step c the temperature is 30°C.
  • step d Young larvae are inoculated into the substrate and are raised for 7 days (step d) in an atmosphere controlled in temperature and humidity (incubation while retaining the humidity). The inoculation is carried out by depositing the larvae at the young larvae stage, on the substrate obtained during the hydrolysis of stage c) (ie no waiting between stages c) and d). The same quantity of larvae is used for each experiment.
  • This test format (small format) made it possible to test a large number of enzymes, to understand the effects on the texture of the substrate and the speed of growth, and to evaluate several concentrations.
  • the enzymes used are as follows:
  • Example 2 examples of implementations of processes according to the invention on a large scale and substrates obtained
  • the substrate is prepared as described in Example 1.
  • This test format is large (large format): Tray-type format containers are used.
  • the enzymes used are as follows:
  • the enzymes are used in a concentration of on average 0.15% per dry matter (DM) of substrate.
  • the mid-cycle temperature is measured, and compared with untreated PKE (control).
  • the enzymes tested make it possible to hydrolyze the PKE substrate and release nutrients. This allows the larvae to reach a higher average weight after 7 days than with the untreated substrate. Mannanases show the best efficiency. At iso-concentration, it is possible to reduce the quantities of mannanases by adding cellulase to obtain a similar effect.

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Abstract

L'invention se rapporte à un procédé de préparation d'un substrat d'élevage de larves d'insectes à partir de sous-produits issus de végétaux, comprenant les étapes suivantes: a) obtention de sous-produits issus de végétaux sous forme de particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1,5 mm, si nécessaire par homogénéisation, b) mélange du produit obtenu en a) avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d'humidité est compris entre 55% et 85% en poids par rapport au poids total de mélange, et c) ajout d'au moins une enzyme au mélange b), puis homogénéisation, dans lequel l'étape c) est concomitante ou postérieure à l'étape b).

Description

DESCRIPTION
Procédé de préparation d’un substrat d’élevage de larves d’insectes par hydrolyse enzymatique et substrat obtenu
La présente invention concerne un procédé de préparation d’un substrat d’élevage de larves d’insectes à partir de sous-produits issus de végétaux, comprenant des étapes a) à c) spécifiques. Elle se rapporte également au substrat obtenu, et au procédé d’élevage d’insectes utilisant un tel substrat.
La production de protéine est l’un des enjeux clés des décennies à venir, avec un déficit qui se creuse dans le monde (60Mt d’ici 2030).
Le déficit protéique est particulièrement critique pour le secteur de l’aquaculture. Avec presque la moitié des stocks de poissons sauvages exploités à des niveaux biologiquement insoutenables, l’aquaculture se développe rapidement pour répondre à une demande globale grandissante. D’après le rapport 2016 de la FAO sur la situation mondiale des pêches et de l’aquaculture, la majorité des produits aquatiques provient aujourd’hui de l’aquaculture et non plus de la pêche. Avec une croissance de plus de 5% par an, le secteur de l’aquaculture est le secteur de l’agro-alimentaire à la croissance la plus rapide.
L’élevage d’insectes répond à cette problématique en fournissant une source de nutriments à destination de la nutrition animale et de l’agriculture. Ces produits permettent d’introduire de nouvelles sources de protéines plus durables, en particulier dans l’aquaculture, pour laquelle les protéines d’insectes sont particulièrement adaptées. En effet, la farine d’insectes est une excellente solution pour accompagner la croissance de l’aquaculture, dont les sources traditionnelles d’aliment (farine de poissons sauvages ou farine de soja) sont insuffisantes et ont un fort impact environnemental.
Par ailleurs, les industries de transformation de végétaux en produits dérivés incluent notamment l’amidonnerie (production d’amidon à partir de céréales, en particulier le blé ou le maïs), l’industrie sucrière (production de sucre à partir de canne à sucre ou de betterave) ou de production d’huile (à partir notamment d’huile de palme obtenue à partir du fruit du palmier à huile, et d’huile de palmiste obtenue à partir de noyaux du fruit du palmier à huile). Ces industries génèrent des sous-produits végétaux exploitables en tant que sources de protéines, de lipides et potentiellement de glucides, qui peuvent être d’intérêt pour l’élevage de larves d’insectes, mais qui sont peu valorisés jusqu’à présent. D’une façon générale, les procédés utilisés comprennent l’isolation des composés d’intérêt par des méthodes mécaniques (broyage, séparation de différentes fractions pour l’amidonnerie ou la préparation de protéines), qui peuvent inclure des étapes de fermentation et/ou de distillation. Ces procédés qui utilisent de l’eau, notamment dans les étapes de séparation, et peuvent mener à des sous-produits aux côtés du produit principal.
En particulier, la production d’huile de palme génère notamment des effluents, appelés « effluents de moulins à huile de palme (POME) », qui contiennent des matières organiques, mais aussi d’autres sous-produits et déchets qui incluent les tourteaux de palmiste. Le POME doit être soumis à un traitement pour se conformer à la norme requise par les autorités compétentes, sa dégradation par fermentation étant responsable de très fortes émissions de méthane, gaz à effet de serre particulièrement nocif. Cependant, en raison de la concentration de matières organiques, le traitement du POME a toujours été un défi dans l'industrie de la mouture de l'huile de palme. Le traitement du POME, lorsqu’il n’est pas utilisé pour la production de biogaz, n'est pas générateur de revenus, nécessite un coût substantiel pour l'huile de palme et occupe une grande superficie de terres. Quant aux tourteaux de palmiste, ils sont généralement peu, voire très peu valorisés ; ils sont essentiellement exportés à des fins d’alimentation animale, notamment des bovins, utilisés comme fertilisants, ou brûlés pour produire de l’énergie.
Il existe donc un besoin pour améliorer la valorisation des sous-produits issus de la transformation de végétaux, en particulier issus de la production d’huile de palme. En particulier, il existe un besoin de surcyclage (en anglais, upcycling) des sous-produits issus de la transformation de végétaux, et notamment issus de la production d’huile de palme. De préférence, ces sous-produits doivent être utilisés et/ou transformés pour diminuer l’impact environnemental ; utilisés et/ou transformés sur un site proche de leur lieu de production ; et/ou transformés pour en extraire leurs nutriments à des fins d’alimentation animale optimisée. Enfin, il existe un besoin pour une alimentation animale, en particulier des poissons et crevettes, optimisée.
La présente invention répond à ces besoins. La présente invention a pour objet un procédé de préparation d’un substrat d’élevage de larves d’insectes à partir de sous-produits issus de végétaux, comprenant les étapes suivantes : a) obtention de sous-produits issus de végétaux sous forme de particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, si nécessaire par homogénéisation, b) mélange du produit obtenu en a) avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d’humidité est compris entre 55% et 85% en poids par rapport au poids total de mélange, et c) ajout d’au moins une enzyme au mélange b), pour hydrolyser le mélange b), puis homogénéisation, dans lequel l’étape c) est concomitante ou postérieure à l’étape b).
Le procédé selon l’invention permet de valoriser les sous-produits issus de végétaux, de préférence issus de la production d’huile de palme. En effet, ces sous-produits sont soumis aux étapes a) à c), ce qui permet d’obtenir un substrat d’intérêt majeur pour l’élevage de larves d’insectes. En effet, sans vouloir être lié par une quelconque théorie, des nutriments de haute qualité, compatibles avec les besoins de l’agriculture, sont libérés à partir de ces sous-produits, et permettent aux larves de se développer dans de bonnes conditions. Les insectes obtenus sont ensuite facilement transformables en alimentation animale, notamment aquacole.
La présente invention a également pour objet un substrat d’élevage de larves d’insectes obtenu par le procédé selon l’invention. Un tel substrat selon l’invention est utilisable pour l’élevage de larves d’insectes.
La présente invention a également pour objet l’utilisation d’un mélange aqueux de sous-produits issus de végétaux hydrolysés, ledit mélange aqueux comprenant des particules présentant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, comme substrat pour l’élevage de larves d’insectes.
Enfin, la présente invention a pour objet un procédé d’élevage de larves d’insectes, comprenant le procédé selon l’invention, puis, pendant ou après l’hydrolyse de l’étape c), une étape d) d’inoculation de larves d’insectes dans le mélange c) et incubation. Le procédé de préparation d’un substrat d’élevage de larves d’insectes à partir de sous-produits issus de végétaux selon l’invention, comprend les étapes suivantes : a) obtention de sous-produits issus de végétaux sous forme de particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, si nécessaire par homogénéisation, b) mélange du produit obtenu en a) avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d’humidité est compris entre 55% et 85% en poids par rapport au poids total de mélange, et c) ajout d’au moins une enzyme au mélange b), puis homogénéisation, dans lequel l’étape c) est concomitante ou postérieure à l’étape b).
Les larves d’insectes sont notamment les larves des diptères Hermetia lllucens, Musca Domestica, des coléoptères Tenebrio Molitor, Alphitobius diaperinus ainsi que les larves de criquets Acheta domesticus, Gryllodes sig illatus ou Field Cricket Gryllus assimilis. De manière préférée, les larves d’insectes sont les larves de Hermetia illucens.
Les sous-produits issus de végétaux sont des coproduits obtenus lors de la transformation des végétaux. De préférence, les végétaux sont lignocellulosiques, i.e. composés de lignine, cellulose et d’hémicellulose. De préférence, ils sont choisis parmi les plantes oléagineuses, les céréales, le bois et les plantes de l’industrie sucrière. De préférence, les sous-produits issus de végétaux sont choisis parmi les tourteaux de plantes oléagineuses, les effluents de moulin à huile (POME), les gâteaux de décanteur, les tourteaux de céréales, les graines d'oléagineuses, les coques et pellicules d'oléagineux, les coproduits de céréales tels que les rafles de maïs ou les pailles de blé ou de riz, et les produits de la fabrication du sucre, tels que la bagasse de canne à sucre ou la pulpe de betterave.
De préférence, les sous-produits issus de végétaux sont choisis parmi les tourteaux de plantes oléagineuses et les tourteaux de céréales, de préférence parmi les tourteaux de palmiste (PKC et/ou PKE et/ou PKM), d'amande, d'arachide, de carthame, de chanvre, de colza, de coprah (noix de coco), de lin cultivé, de maïs (tourteaux de germe de maïs), de navette, de noix, d'olive (tourteaux appelés « grignons » d'olives), de pavot (tourteaux d'œillette ou pavot), de sésame, de soja et les tourteaux de tournesol. De préférence, les sous-produits issus de végétaux sont ceux obtenus lors de la production d’huile de palme :
L'huile de palme est un produit important qui a des applications étendues de la production d'huiles de cuisson, d'aliments, de confiseries aux produits oléochimiques tels que les savons et les lubrifiants ainsi que le biodiesel. L'huile de palme est dérivée des grappes de fruits frais (Fresh Fruit Bunches ou FFB) du palmier à huile Elaeis guineensis. Les FFB récoltés dans la plantation de palmiers à huile sont traités dans un moulin à huile de palme pour en extraire l'huile de palme brute (crude palm oil, CPO) comme produit principal. Les noix de fruit de palmier à huile (Palm Kernel, PK) sont traitées dans un moulin à noix de palmier à huile (Palm Kernel Crusher, Kernel Crushing Plant, KCP) pour en extraire l’huile de palmiste (palm kernel oil, PKO) comme produit principal. Lors du traitement des FFB pour récupérer l'huile de palme brute, un grand volume d’effluents est également produit lors des différentes étapes de stérilisation, de pressage des FFB et de clarification de l’huile. Ces effluents contiennent en général de 0,5 à 3% d'huile, 3 à 6% de solides et 90 à 96% d'eau, sont appelées effluents de moulin à huile de palme (Palm Oil Mill Effluent ou POME). Le volume total des effluents est normalement de 60-70% du ratio pondéral de FFB traité en agriculture conventionnelle. Les autres sous-produits et déchets comprennent les tourteaux de palmiste (palm kernel cakes ou PKC ; ils incluent le palm kernel expeller ou PKE, appelé aussi, lors d’une extraction de l’huile par hexane, palm kernel meal (PKM)), les rafles (Empty Fruit bunches ou EFB), la fibre de mésocarpe et le gâteau de décanteur obtenu par décantation mécanique ou naturelle des POME (decanter cake).
Ainsi, de préférence, les sous-produits issus de végétaux sont choisis parmi les tourteaux de palmistes (PKC et/ou PKE et/ou PKM), les rafles (Empty Fruit bunches ou EFB), la fibre de mésocarpe, les effluents de moulin à huile de palme, les gâteaux de décanteur et leurs mélanges.
Dans l’étape a), on obtient des sous-produits issus de végétaux, sous forme de particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm. Si nécessaire, ces sous- produits issus de végétaux peuvent être obtenus par homogénéisation pour obtenir un produit avec des particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm. Cette homogénéisation peut être effectuée par broyage et/ou tamisage. En effet, la granulométrie du broyât obtenu est importante pour le développement subséquent des larves. Des particules présentant une D50 strictement supérieure à 5 mm entraînent une moins bonne hydrolyse, une mauvaise assimilation des nutriments par les larves et une moindre capacité de rétention d’eau. En revanche, des particules présentant une D50 inférieure ou égale à 5 mm selon l’invention permettent d’absorber l’eau, créant un mélange idéal qui est humide sans être liquide (plutôt de consistance semi-liquide ou pâteuse).
L’homogénéisation de l’étape a) est avantageusement réalisée par broyage à disque ou à marteau, préférentiellement à marteau. Cette étape de broyage et/ou de tamisage est classique et connue de l’art antérieur.
Le produit obtenu en a) est ensuite mélangé avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse: c’est l’étape b). La composition aqueuse obtenue présente un taux d’humidité compris entre 55% et 85% en poids par rapport au poids total de mélange.
La composition aqueuse peut être constituée seulement d’eau. Selon un autre mode de réalisation de l’invention, la composition aqueuse comprend des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse ; de telles compositions aqueuses sont également appelées « solubles ». De telles compositions aqueuses comprennent une phase aqueuse et des composés issus des végétaux (par exemples des lipides, des protéines et/ou des sucres) solubles dans la phase aqueuse ; ce sont des coproduits de la transformation des végétaux. De préférence, la composition aqueuse est un effluent de moulin à huile de palme (Palm Oil Mill Effluent ou POME).
De préférence, le mélange de l’étape b) est effectué avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d’humidité est compris entre 55% et 85% en poids, de préférence entre 65% et 80% en poids par rapport au poids total de mélange.
Enfin, le mélange obtenu à l’étape b) est hydrolysé, grâce à l’ajout d’au moins une enzyme : c’est l’étape c). L’enzyme utilisable est de préférence choisie parmi les hydrolases encore préférentiellement parmi les mannanases, les hémicellulases, les cellulases, les lignases, les xylanases, les pectinases, les carbohydrases, les protéases, les amylases, les lipases, les kératinases, les phytases et leurs mélanges. De préférence l’enzyme de l’étape c) est choisie parmi les mannanases, les cellulases et leurs mélanges. En effet, de préférence on utilise au moins une mannanase et/ou au moins une cellulase.
De préférence, on utilise une mannanase produite par Aspergillus niger, Trichoderma sp ou Paenibacillus lentus. De préférence, on utilise une mannanase produite par Trichoderma sp.
De préférence, on utilise une cellulase produite par Aspergillus niger, ou par Trichoderma sp, de préférence par Trichoderma viride ou Trichoderma reesei.
De préférence, on utilise un mélange de mannanases, ou bien un mélange d’au moins une mannanase avec au moins une cellulase.
L’étape c) peut être concomitante ou postérieure à l’étape b).
Selon une première variante, l’étape c) est effectuée en même temps que l’étape b) ; dans ce cas, le produit obtenu en a), la composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, et au moins une enzyme, sont mélangés puis homogénéisés. Selon ce mode de réalisation, la composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse peut être mélangée avec au moins une enzyme, puis le mélange résultant est ajouté au produit obtenu en a).
Selon une seconde variante, l’étape c) est après l’étape b) ; dans ce cas, le produit obtenu en a) et la composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse sont d’abord mélangés, puis au moins une enzyme est ajoutée, et le mélange est homogénéisé.
De préférence, l’enzyme est présente dans le mélange en une quantité efficace. Par « quantité efficace », on entend une quantité capable d’hydrolyser significativement le mélange. De préférence, l’enzyme est présente en une quantité exprimée en unités d’activité enzymatique présente par gramme de matière sèche de substrat (« unités/g de substrat »). L’activité enzymatique utilisée est celle utilisée par le fournisseur pour caractériser l’efficacité de son enzyme. De préférence, l’enzyme est présente en une quantité d’au moins 0,5 unités/g de substrat, de préférence au moins 1 unité/g de substrat, de préférence au moins 1 ,5 unité/g de substrat. De préférence, l’enzyme est présente en une quantité comprise entre 0,5 et 2000 unités/g de substrat, de préférence entre 1 et 1800 unités/g de substrat, de préférence entre 1 ,5 et 1700 unités/g de substrat.
Enfin, le mélange obtenu est homogénéisé. De préférence, l’hydrolyse est réalisée à une température comprise entre 25°C et 90°C, de préférence entre 25°C et 70°C. De préférence, l’hydrolyse est réalisée pendant une durée comprise entre 5 minutes et 10 jours, de préférence entre 5 minutes et 3 jours.
A la fin de l’étape c) du procédé selon l’invention, on obtient ainsi un substrat d’élevage de larves d’insectes. Ce substrat présente plusieurs avantages : il permet aux larves de vivre, de se déplacer et de se nourrir dans un milieu unique, sans qu’il soit nécessaire de changer ce milieu ou d’apporter d’autres sources de nutriments aux larves. En outre, il présente une consistance semi-liquide ou pâteuse et homogène qui permet aux larves d’avoir accès aux nutriments et de boire pendant toute la durée de l’élevage sans risque de noyade. A la fin de l’élevage, le substrat a partiellement séché, ce qui permet de séparer les larves du substrat et de les récupérer sans difficulté.
L’invention a donc également pour objet un substrat d’élevage de larves d’insectes obtenu par le procédé selon l’invention. Ce « substrat », aussi appelé « milieu d’élevage », est une composition destinée à l’élevage de larves d’insectes ; elle est nutritive et sert de support physique aux larves du fait de ses propriétés particulières. L’invention a donc également pour objet l’utilisation du substrat selon l’invention pour l’élevage de larves d’insectes.
L’invention a également pour objet un procédé d’élevage de larves d’insectes, comprenant le procédé selon l’invention, puis, pendant ou après l’hydrolyse de l’étape c), une étape d) d’inoculation de larves d’insectes dans le mélange c) et incubation. Le mélange obtenu à la fin de l’étape c) correspond au substrat obtenu selon l’invention.
De préférence, selon une première variante, l’inoculation est réalisée en déposant les larves, de préférence au stade de jeunes larves, sur le mélange obtenu en cours d’hydrolyse de l’étape c). Par suite, l’incubation du procédé d’élevage de larves d’insectes est réalisée pendant 1 à 60 jours à une température comprise entre 25°C et 45°C, de préférence à une température comprise entre 25°C et 35°C. Selon une telle variante, la réaction d’hydrolyse se déroule pendant l’inoculation et l’incubation. Typiquement, selon cette première variante, les larves d’insecte sont inoculées en même temps, ou bien dans un intervalle de temps de quelques minutes (typiquement 5 à 30 minutes) que l’ajout du(des) enzyme(s) (étape c).
De préférence, selon une seconde variante, l’inoculation est réalisée en déposant les larves, de préférence au stade de jeunes larves, sur le mélange obtenu à la fin de l’étape c). Par suite, l’incubation du procédé d’élevage de larves d’insectes est réalisée pendant 1 à 60 jours à une température comprise entre 25°C et 45°C, de préférence à une température comprise entre 25°C et 35°C. Selon une telle variante, la réaction d’hydrolyse se déroule avant l’inoculation et l’incubation. De préférence, selon cette variante, l’hydrolyse de l’étape c) se déroule pendant 1 à 7 jours, de préférence à une température comprise entre 25°C et 90°C, de préférence entre 25°C et 70°C. Puis l’inoculation et l’incubation ont lieu.
L’incubation des larves d’insectes est effectuée dans des conditions de température et humidité adéquates. Eventuellement, les larves sont récupérées après 1 à 60 jours d’incubation. Un intérêt du substrat et de son utilisation est qu’il n’est pas nécessaire de le changer ou le renouveler. On peut donc effectuer un cycle complet d’élevage sur un seul lot de substrat.
Généralement, les larves sont déposées sur le substrat d’élevage au stade de jeunes larves, puis croissent à une température comprise entre 25 et 45°C, à un taux d’humidité compris entre 30 et 90%, pendant une durée comprise entre 1 et 60 jours, en fonction de l’insecte considéré. On peut alors prélever les insectes au stade de développement de larves ou de pupes. Les larves peuvent être utilisée pour produire des aliments hyperprotéinés (notamment destinés à l’aquaculture), des huiles ; le substrat digéré est appelé frass, et peut être utilisé comme engrais organique ; les pupes peuvent être utilisées pour produire des adultes reproducteurs, afin de générer les nouvelles générations d’insectes.
Enfin, l’invention se rapporte aussi à l’utilisation d’un mélange aqueux de sous- produits issus de végétaux hydrolysés, ledit mélange aqueux comprenant des particules présentant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, comme substrat pour l’élevage de larves d’insectes. Le mélange aqueux de sous-produits issus de végétaux hydrolysés comprend des particules ayant une taille inférieure ou égale à 5 mm : cette taille permet d’obtenir un substrat de bonne qualité pour l’élevage des larves d’insectes. De préférence, ce mélange aqueux est obtenu par les étapes a) à c) ci-dessus, et inclut donc une hydrolyse enzymatique. Les substrats, procédés et utilisations selon l’invention sont préférentiellement mis en œuvre dans des installations qui sont géographiquement proches des usines de transformation des végétaux. En effet, ceci permet d’éviter le transport de larges volumes de sous-produits. De préférence, ces procédés et utilisations sont mis en œuvre à partir des sous-produits provenant de tuyaux et/ou racks de transports directement branchés dans les usines de transformation de végétaux, et amenant les sous-produits aux installations dans lesquelles ils sont transformés pour donner les substrats d’élevage de larves d’insectes. De manière préférée, les transformations de végétaux (par exemple pour la production d’huile, d’amidon, de bioéthanol ou de protéines) sont mises en œuvre « en continu », c’est-à-dire que les sous-produits ne sont pas stockés plus de 24 heures entre leur obtention en tant que sous-produits et leur utilisation dans les procédés selon l’invention. Ceci permet également de réduire les coûts de stockage de ces sous-produits.
L’invention est maintenant illustrée par les exemples suivants, non limitatifs.
Exemple 1 : exemples de mises en œuyre de procédés selon l’invention et substrats obtenus
Dans ce premier exemple, des essais préliminaires (tests de screening) ont été réalisés.
Matériels & Méthodes
Des expériences ont été réalisées sur l'hydrolyse enzymatique du sous-produit PKE :
Protocole de préparation du substrat :
Le sous-produit PKE est broyé de façon à obtenir une granulométrie inférieure à 2 mm (étape a). Le produit résultant de l’étape a) est mélangé à l’eau préalablement mélangée avec l’enzyme (étapes b et c concomitantes) dans les proportions massiques suivantes : 1/3 de PKE pour 2/3 d’eau. Pour la majeure partie de l'hydrolyse (étape c), la température est de 30°C.
Inoculation : Des jeunes larves sont inoculées dans le substrat et sont élevées pendant 7 jours (étape d) sous atmosphère contrôlée en température et en humidité (incubation en retenant l’humidité). L’inoculation est réalisée en déposant les larves au stade de jeunes larves, sur le substrat obtenu en cours d’hydrolyse de l’étape c) (i.e. pas d’attente entre les étapes c) et d). Une même quantité de larves est utilisée pour chaque expérience.
Après 7 jours, le poids moyen des larves est mesuré.
Ce format de test (petit format) a permis de tester un grand nombre d’enzymes, d’appréhender les effets sur la texture du substrat et la vitesse de croissance, et d’évaluer plusieurs concentrations.
Enzymes :
Les enzymes utilisées sont les suivantes :
[Table 1 ]
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000013_0003
Résultats
Les résultats sont les suivants:
[Table 2]
Figure imgf000013_0001
[Table 3]
Figure imgf000013_0002
Les enzymes testées permettent d’hydrolyser du substrat PKE et de libérer des nutriments permettant aux larves d’atteindre un poids moyen plus élevé au bout de 7 jours que lorsqu’elles sont nourries sur du PKE non hydrolysé.
Conclusion : Ces expériences ont montré qu’une hydrolyse enzymatique permet d’améliorer l’efficience du substrat pour la croissance des larves. Ces enzymes permettent une hydrolyse efficace du substrat, tout en conservant une texture d’aliment adapté à l’élevage de larves d’insectes.
Exemple 2 : exemples de mises en œuyre de procédés selon l’invention à grande échelle et substrats obtenus
Suite aux tests de screening de l’exemple 1 , les essais à plus large échelle suivants ont été effectués.
Matériels & Méthodes
Protocole de préparation du substrat :
Le substrat est préparé comme décrit dans l’exemple 1.
Inoculation :
Ce format de test est grand (grand format) : On utilise des récipients de format de type bac.
On incube en tente (i.e. les bacs ne sont pas couverts, et le substrat sèche de manière plus naturelle) pendant 7 jours.
Enzymes :
Les enzymes utilisées sont les suivantes :
[Table 4]
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000015_0001
Les enzymes sont utilisées en concentration d’en moyenne 0,15% par matière sèche (MS) de substrat.
On utilise également une combinaison d’enzymes en ratio 1:1 à iso-concentration : on compare ainsi la performance de chaque enzyme à 0,7 %, ou une combinaison des deux à 0,35%.
On détermine plusieurs indicateurs : poids moyen, matière sèche des larves et température dans le substrat pendant la phase de croissance.
On mesure la température à mi-cycle, et on compare par rapport au PKE non traité (témoin).
Les résultats sont les suivants :
[Table 5]
Figure imgf000015_0002
[Table 6]
Figure imgf000016_0001
[Table 7]
Figure imgf000016_0002
Comme précédemment, les enzymes testées permettent d’hydrolyser du substrat PKE et de libérer des nutriments. Cela permet aux larves d’atteindre un poids moyen plus élevé au bout de 7 jours qu’avec le substrat non traité. Les mannanases montrent la meilleure efficacité. A iso-concentration, il est possible de réduire les quantités de mannanases par l’ajout de cellulase pour obtenir un effet similaire.
La diminution de température observée à mi-cycle permet d’élever les larves dans des conditions plus adaptées à leur métabolisme.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé de préparation d’un substrat d’élevage de larves d’insectes à partir de sous-produits issus de végétaux, comprenant les étapes suivantes : a) obtention de sous-produits issus de végétaux sous forme de particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, si nécessaire par homogénéisation, b) mélange du produit obtenu en a) avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d’humidité est compris entre 55% et 85% en poids par rapport au poids total de mélange, et c) ajout d’au moins une enzyme au mélange b), pour hydrolyser le mélange b), puis homogénéisation, dans lequel l’hydrolyse c) est réalisée à une température comprise entre 25°C et 90°C, et/ou est réalisée pendant une durée comprise entre 5 minutes et 10 jours, dans lequel l’étape c) est concomitante ou postérieure à l’étape b).
2. Procédé selon la revendication 1 , dans lequel les sous-produits issus de végétaux sont des coproduits obtenus lors de la transformation des végétaux, de préférence les végétaux sont lignocellulosiques ; de préférence les végétaux sont choisis parmi les plantes oléagineuses, les céréales, le bois et les plantes de l’industrie sucrière ; de préférence les sous-produits issus de végétaux sont choisis parmi les tourteaux de plantes oléagineuses, les effluents de moulin à huile, les gâteaux de décanteur, les tourteaux de céréales, les graines d'oléagineuses, les coques et pellicules d'oléagineux, les coproduits de céréales tels que les rafles de maïs ou les pailles de blé ou de riz, et les produits de la fabrication du sucre, tels que la bagasse de canne à sucre ou la pulpe de betterave.
3. Procédé selon la revendication 2, dans lequel les tourteaux sont choisis parmi les tourteaux de palmiste, d'amande, d'arachide, de carthame, de chanvre, de colza, de coprah, de lin cultivé, de maïs, de navette, de noix, d'olive, de pavot, de sésame, de soja et les tourteaux de tournesol.
4. Procédé selon l’une des revendications 1 à 3, dans lequel l’une des conditions suivantes est réalisée : - le mélange b) est effectué avec une composition aqueuse comprenant éventuellement des composés issus des végétaux et solubles dans la phase aqueuse, pour obtenir une composition dont le taux d’humidité est compris entre 65% et 80% en poids par rapport au poids total de mélange, et/ou
- l’hydrolyse c) est réalisée à une température comprise entre 25°C et 70°C, et/ou
- l’hydrolyse c) est réalisée pendant une durée comprise entre 5 minutes et 3 jours.
5. Procédé selon l’une des revendications 1 à 4, dans lequel l’enzyme de l’étape c) est choisie parmi les mannanases, les hémicellulases, les cellulases, les lignases, les xylanases, les pectinases, les carbohydrases, les protéases, les amylases, les lipases, les kératinases, les phytases et leurs mélanges, de préférence l’enzyme de l’étape c) est choisie parmi les mannanases, les cellulases et leurs mélanges.
6. Procédé selon l’une des revendications 1 à 5, dans lequel l’enzyme de l’étape c) est une mannanase produite par Aspergillus niger, Trichoderma sp ou Paenibacillus lentus, de préférence une mannanase produite par Trichoderma sp ; ou une cellulase produite par Aspergillus niger ou par Trichoderma sp, de préférence par Trichoderma viride ou Trichoderma reesei; de préférence l’enzyme de l’étape c) est un mélange de mannanases, ou bien un mélange d’au moins une mannanase avec au moins une cellulase.
7. Substrat d’élevage de larves d’insectes obtenu par le procédé selon l’une des revendications 1 à 6.
8. Procédé d’élevage de larves d’insectes, comprenant le procédé selon l’une des revendications 1 à 6, puis, pendant ou après l’hydrolyse de l’étape c), une étape d) d’inoculation de larves d’insectes dans le mélange c) et incubation.
9. Procédé d’élevage de larves d’insectes selon la revendication 8, dans lequel : selon une première variante, l’inoculation est réalisée en déposant les larves, de préférence au stade de jeunes larves, sur le mélange obtenu en cours d’hydrolyse de l’étape c), et par suite, l’incubation du procédé d’élevage de larves d’insectes est réalisée pendant 1 à 60 jours à une température comprise entre 25°C et 45°C ; ou selon une seconde variante, l’inoculation est réalisée en déposant les larves, de préférence au stade de jeunes larves, sur le mélange obtenu à la fin de l’étape c), de préférence 18 l’hydrolyse de l’étape c) se déroule pendant 1 à 7 jours, et par suite, l’incubation du procédé d’élevage de larves d’insectes est réalisée pendant 1 à 60 jours à une température comprise entre 25°C et 45°C.
10. Procédé d’élevage de larves d’insectes selon la revendication 8 ou 9, dans lequel l’incubation selon la première ou la seconde variant est réalisée à une température comprise entre 25°C et 35°C.
11. Utilisation d’un mélange aqueux de sous-produits issus de végétaux hydrolysés, ledit mélange aqueux comprenant des particules ayant une D50 inférieure ou égale à 5 mm, de préférence inférieure ou égale à 2 mm, encore plus préférentiellement inférieure ou égale à 1 ,5 mm, comme substrat pour l’élevage de larves d’insectes.
12. Utilisation du substrat selon la revendication 7, pour l’élevage de larves d’insectes.
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ANONYMOUS: "Elevage de Mouches Soldats Noires - Low-tech Lab", 20 November 2021 (2021-11-20), XP055940071, Retrieved from the Internet <URL:https://wiki.lowtechlab.org/wiki/Elevage_de_Mouches_Soldats_Noires> [retrieved on 20220707] *
DATABASE EMBASE [online] ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, AMSTERDAM, NL; 1 November 2019 (2019-11-01), DICKINSON E ET AL: "From waste to food: Optimising the breakdown of oil palm waste to provide substrate for insects farmed as animal feed", XP002807017, Database accession no. EMB-002003711284 *
DICKINSON E ET AL: "From waste to food: Optimising the breakdown of oil palm waste to provide substrate for insects farmed as animal feed", PLOS ONE 20191101 PUBLIC LIBRARY OF SCIENCE USA, vol. 14, no. 11, 1 November 2019 (2019-11-01), ISSN: 1932-6203 *

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