WO2023100712A1 - 光照射装置、細胞培養装置、処理装置、光照射方法、および細胞培養方法 - Google Patents

光照射装置、細胞培養装置、処理装置、光照射方法、および細胞培養方法 Download PDF

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liquid
light irradiation
irradiation device
illumination light
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明ゆえ 孫
卓真 後藤
敬大 石水
泰斗 中村
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    • C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves

Definitions

  • the present disclosure relates to a light irradiation device and the like for performing sterilization.
  • Patent Document 1 describes that light specified by a spectrum having a peak wavelength in a wavelength range of 400 nm or more and 410 nm or less can exhibit a high sterilizing effect.
  • a light irradiation device includes an illumination unit capable of irradiating an irradiation target with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • a light irradiation method includes an irradiation step of irradiating an irradiation target with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less; and a control step of controlling the irradiance of the illumination light when the object is irradiated with the illumination light and/or the time during which the object is irradiated with the illumination light.
  • FIG. 10 is a diagram showing a schematic configuration of a processing apparatus according to Embodiment 3 of the present disclosure. It is an enlarged view which shows the structure of the filter with which the said processing apparatus is provided.
  • FIG. 11 is a diagram showing a schematic configuration of a processing apparatus according to Embodiment 4 of the present disclosure; It is a flow chart which shows an example of processing of liquid using the above-mentioned treating device.
  • FIG. 11 is a diagram showing a schematic configuration of a processing device 1B according to Embodiment 5 of the present disclosure; It is a sectional view showing composition of a column with which the above-mentioned processing equipment is provided.
  • FIG. 4 is a graph showing measurement results of a first test as an experimental example of the present disclosure
  • 7 is a graph showing measurement results of a second test as an experimental example of the present disclosure
  • 7 is a graph showing measurement results of a third test as an experimental example of the present disclosure
  • FIG. 11 is a graph showing measurement results of a fourth test as an experimental example of the present disclosure
  • FIG. 1 is a front view showing an example of the configuration of a cell culture device 1 according to this embodiment.
  • the cell culture device 1 includes a housing 10 , a controller 20 and a light irradiation device 30 .
  • the housing 10 may accommodate a culture container 50 containing cultured cells and a medium for culturing the cultured cells.
  • a plurality of support portions 11 may be arranged in the vertical direction inside the housing 10 .
  • the culture vessel 50 may be made of a material that is translucent to visible light.
  • the culture container 50 can be placed on the support portion 11.
  • the cell culture apparatus 1 shown in FIG. 1 includes three support sections 11, the number of support sections 11 is not particularly limited. As will be described later, the supporting portion 11 may be translucent to visible light.
  • the control unit 20 controls various functions of the cell culture device 1 .
  • the control unit 20 may control the temperature, humidity, O 2 concentration, and/or CO 2 concentration inside the housing 10 using, for example, known methods.
  • the light irradiation device 30 may be provided inside the housing 10 so as to be able to irradiate the culture container 50 with illumination light.
  • the light irradiation device 30 may include a light emitting element 31 (illumination section) and an ultraviolet light reduction section 32, as shown in FIG. FIG. 1 shows a case where the light irradiation device 30 is provided on the top surface inside the housing 10 .
  • the support portion 11 of the housing 10 is translucent, and the illumination light emitted from the light irradiation device 30 can reach all the culture vessels 50 placed on each support portion 11. be.
  • the support portion 11 having translucency the number of light irradiation devices 30 mounted on the cell culture device 1 can be reduced. Therefore, the manufacturing cost of the cell culture device 1 can be reduced.
  • the light-emitting element 31 can irradiate an irradiation target with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • the inventors of the present invention have found through intensive research that a high antibacterial action can be obtained by irradiating an object to be irradiated with illumination light having the above irradiance. Since a higher antibacterial effect can be obtained, the irradiance to the irradiated object may be 10 mW/cm 2 or more, or may be 20 mW/cm 2 or more.
  • the illumination light emitted from the light emitting element 31 does not contain ultraviolet light, or contains ultraviolet light that does not damage the irradiation target.
  • the integrated illuminance of the illumination light irradiated to the irradiation target by the light irradiation device 30 may be 1.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more, and may be 2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 . or more.
  • the integrated illuminance is obtained from the irradiance of the illumination light when the illumination light is applied to the culture vessel to be irradiated, and the time during which the culture vessel is illuminated with the illumination light.
  • the control unit 20 can control the irradiance and the irradiation time of the illumination light.
  • the ultraviolet light reducing unit 32 reduces the amount of light in the wavelength band of the ultraviolet region contained in the illumination light emitted from the light emitting element 31 .
  • the ultraviolet light reducing section 32 may be, for example, an ultraviolet filter.
  • the illumination light from which the amount of light in the wavelength band in the ultraviolet region has been reduced by the ultraviolet light reducing unit 32 has an irradiance of 0.2 mW/cm 2 or less on the irradiation target in a wavelength region of less than 380 nm. There may be. Thereby, it is possible to suppress the decrease in the viability of the cultured cells.
  • FIG. 2 is a flow chart showing an example of the processing of the cell culture method according to this embodiment.
  • a cell culture medium is prepared (preparation step, step S1).
  • the absorbance at 405 nm of the cell culture medium in this embodiment may be 0.33 or less.
  • the cell culture device 1 may be used as a device for culturing animal cells that do not contain chlorophyll.
  • step S2 the culture container 50 containing the cell culture medium seeded with the cultured cells is placed on the support portion 11 of the housing 10 (step S2).
  • the cultured cells are cultured while irradiating the culture vessel with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more to the irradiation target in the wavelength region of 380 nm or more and 420 nm or less by the light irradiation device 30 (irradiation step, Culture step, step S3).
  • the cells can be cultured while killing only bacteria that are not desired to proliferate without damaging the cultured cells to be cultured.
  • step S2 the controller 20 controls the irradiance of the illumination light applied to the culture vessel and/or the duration of illumination light irradiation to the culture vessel (control step). Specifically, the control unit 20 controls the integrated illuminance of the illumination light irradiated to the irradiation target by the light irradiation device 30 to be 1.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more.
  • the irradiation step and the control step are a light irradiation method according to one aspect of the present disclosure.
  • the mode of using the light irradiation device 30 in the cell culture device 1 for culturing cells has been described, but the light irradiation device 30 can also be used for other purposes.
  • the light irradiation device 30 can be used as a sterilization device.
  • the light irradiation device 30 can be used for blood contained in a transparent container such as blood for transfusion (however, blood from which red blood cells have been removed).
  • a transparent container for containing blood for transfusion is usually made of polystyrene, which does not transmit ultraviolet rays, and therefore cannot be sterilized by ultraviolet irradiation.
  • the light irradiation device 30 of the present disclosure irradiates visible light in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less, so that the light can reach the inside of the transparent container. Therefore, the inside of the transparent container can be sterilized without damaging the cells of the blood components. For the same reason, the light irradiation device 30 may also be used for joint parts used in dialysis.
  • the light irradiation device 30 may be used for food and/or beverages. Food and beverages cannot undergo sterilization processes such as gamma sterilization. Therefore, the expiration date is shortened. Also, irradiation of foods and beverages with ultraviolet light destroys their nutritional components. On the other hand, the light irradiation device 30 of the present disclosure irradiates visible light in the wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less, so that sterilization can be performed without destroying the nutritional components of foods and beverages, and consumption Deadlines can be extended.
  • FIG. 3 is a front view showing the configuration of the cell culture device 1A according to this embodiment.
  • the light irradiation device 30 is provided on the top surface inside the housing 10 .
  • an irradiation device 30 is provided in the cell culture apparatus 1A according to the present embodiment.
  • the light irradiation device 30 is provided for each stage divided by the support portion 11 of the housing 10, variations in the intensity of the light irradiated to the culture vessel can be reduced. can be done.
  • the supporting portion 11 does not have to be translucent.
  • Cell preparations are produced by culturing cells taken from donors. Specifically, cell preparations are prepared by first culturing cells collected from a donor to create a master cell bank, expanding the cells in the master cell bank to create a working cell bank, and further expanding and culturing the cells in the working cell bank. It is a liquid containing mass-produced cells. Mass-produced cell preparations are dispensed into small containers. If a cell preparation dispensed into a small container is contaminated with contaminants (eg, bacteria, endotoxin, etc.), it can cause serious infections or fever in the human body. A technique for removing a substance to be removed contained in a liquid is disclosed in Patent Document 2, for example.
  • a processing apparatus and a processing method for dispensing a liquid containing cultured cells into small containers will be described.
  • the processing apparatus of the present disclosure does not necessarily process liquid containing cultured cells, and can process liquid containing cells collected from a specimen, for example.
  • FIG. 4 is a diagram showing a schematic configuration of the processing device 101 in this embodiment.
  • the processing apparatus 101 includes a storage container 110, a light irradiation unit 120 (light irradiation device), a filter 130 (removal unit), a pump 140 (liquid delivery unit), and a dispensing unit 150. , tube 160 .
  • the processing device 101 is a dispensing device for dispensing the cell preparation as the liquid L containing cells stored in the storage container 110 into the small container 200 .
  • the storage container 110 is a container that stores the liquid L containing cultured cells.
  • the storage container 110 stores the liquid L mass-produced by the expansion culture from the working cell bank.
  • Liquid L may be a suspension of cultured cells in saline.
  • the cell density of liquid L may be 1 ⁇ 10 5 cells/kg or more, or 1 ⁇ 10 6 cells/kg or more.
  • the storage container 110 is made of a translucent material.
  • the light irradiation unit 120 irradiates the liquid L stored in the storage container 110 with irradiation light (illumination light) having a peak wavelength of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • the light irradiation unit 120 may be configured by, for example, an LED (light emitting diode).
  • the light irradiation unit 120 is capable of irradiating an irradiation target with irradiation light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • the inventors of the present invention have found through intensive research that a high antibacterial effect can be obtained by irradiating an object to be irradiated with irradiation light having the above irradiance.
  • the liquid L may contain anaerobic bacteria (eg, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, etc.), aerobic bacteria (eg, Sporigenus sporigenus). fungi, etc.), fungi (eg, yeast fungi, Aspergillus niger, etc.), and bacteria such as mycoplasma.
  • anaerobic bacteria eg, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, etc.
  • aerobic bacteria eg, Sporigenus sporigenus
  • fungi, etc. fungi
  • fungi eg, yeast fungi, Aspergillus niger, etc.
  • bacteria such as mycoplasma.
  • the irradiance to the object to be irradiated may be 10 mW/cm 2 or more in order to enhance the antibacterial effect. By setting the irradiance to the object to be irradiated to 20 mW/cm 2 or more, the antibacterial action can be further enhanced.
  • the irradiation light emitted from the light irradiation unit 120 does not contain ultraviolet light, or contains ultraviolet light to the extent that it does not damage the irradiation target.
  • the irradiance is less than 5 mW/cm 2 , the effect of inactivating bacteria is reduced. If the irradiance is higher than 100 mW/cm 2 , the irradiance may be set to 100 mW/cm 2 or less because the effect on the cells is increased.
  • the light irradiation unit 120 can inactivate bacteria without affecting cells by irradiating irradiation light having the above configuration.
  • the integrated illuminance of the irradiation light irradiated to the irradiation target by the light irradiation unit 120 may be 1.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more, and may be 2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 . or more.
  • the integrated illuminance may be 4.0 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or less for the purpose of reducing heat generation and damage to cells.
  • the integrated illuminance is obtained from the irradiance of the irradiation light when the liquid L to be irradiated is irradiated with the irradiation light, and the time during which the liquid L is irradiated with the irradiation light.
  • the absorbance at 405 nm for irradiation is 0.33 or less. Therefore, the absorbance at 405 nm of the liquid L in this embodiment may be 0.33 or less.
  • the irradiation light emitted from the light irradiation unit 120 may further include light with a wavelength longer than 420 nm.
  • bacteria can be further inactivated by the influence of molecular vibration caused by the light.
  • the wavelength is longer than 10,000 nm, the effect of inactivating bacteria is reduced because bacteria are less susceptible to molecular vibrations caused by infrared light, so it is not necessary to include light with a wavelength longer than 10,000 nm. .
  • the filter 130 is provided downstream of the light irradiation section 120 in the path along which the liquid L moves from the storage container 110 to the small container 200 in the processing apparatus 101 .
  • the filter 130 is connected to the storage container 110 by a tube 160 made of resin, for example.
  • the filter 130 removes the removal target substance contained in the liquid L after being irradiated with the irradiation light by the light irradiation unit 120 .
  • endotoxin contained in the liquid L containing cultured cells and/or bacteria inactivated by the light irradiation unit 120 are treated as substances to be removed.
  • Endotoxin is a substance containing lipopolysaccharide as a constituent.
  • FIG. 5 is an enlarged view showing the configuration of the filter 130.
  • the filter 130 is constructed by bundling a plurality of hollow fibers 131 .
  • FIG. 6 is an enlarged view of the hollow fiber 131 viewed from a direction perpendicular to the longitudinal direction. As shown in FIG. 6, the hollow fiber 131 has a plurality of holes 132 formed in the membrane constituting the hollow fiber 131 and having a size that allows endotoxin to pass through but does not allow cells to pass through.
  • the hollow fibers 131 may be made of, for example, cellulose, polysulfone, polyethersulfone, polyester-based polymer alloy, ethylene vinyl alcohol copolymer, polymethyl methacrylate, polyacrylonitrile, polyvinyl alcohol, polyolefin, and/or polyamide. good.
  • endotoxin is generated from bacteria (for example, Pseudomonas aeruginosa) that have been inactivated and killed by the light irradiation unit 120, when the liquid L inactivated by the light irradiation unit 120 is directly dispensed into the small container 200,
  • the liquid L contained in the small container 200 may contain endotoxin.
  • the endotoxin contained in the liquid L can be removed by passing the liquid L through the filter 130 before dispensing the liquid L into the small container 200 .
  • the filter 130 may have a longitudinal length of 50 to 1000 mm.
  • the filter 130 may have a hollow inner diameter of 50-4000 ⁇ m and a diameter of 200-5000 ⁇ m.
  • the filter 130 may have a thickness of 150 to 1000 ⁇ m.
  • the filter 130 may be composed of an organic material, an inorganic material, or a composite material of an organic material and an inorganic material. If the filter 130 comprises organic materials, it may be a mixture of different organics, such as polymer alloys. Filter 130 may be surface treated with an organic or inorganic material.
  • the pump 140 can send the liquid L from the storage container 110 to the filter 130 through the tube 160 .
  • the pump 140 may be, for example, a magnetically levitated pump in which the impeller floats contactlessly within a sealed casing and is driven by the rotating magnetic field of the motor.
  • the dispensing unit 150 aseptically dispenses the liquid L from which endotoxin has been removed by the filter 130 into a plurality of small containers 200 .
  • "aseptically” means that the instrument, device, and/or site to be used is kept sterile.
  • the configuration of the pipetting unit 150 is not particularly limited as long as the liquid L can be pipetted aseptically, and conventionally known devices can be used.
  • the dispensing unit 150 may dispense 0.5 ml to 20 ml or 1 ml to 15 ml of the liquid L into the small container 200 .
  • FIG. 7 is a flow chart showing an example of processing of the liquid L using the processing device 101. As shown in FIG.
  • the liquid L containing cultured cells stored in the storage container 110 is exposed to light in the wavelength region of 380 nm or more and 420 nm or less using the light irradiation unit 120. is irradiated with irradiation light having a peak wavelength (step S101, light irradiation step). This inactivates bacteria contained in the liquid L while reducing damage to cells.
  • the liquid L is sent from the storage container 110 to the filter 130 by driving the pump 140 (step S102).
  • step S103 removal step.
  • the endotoxin generated from the bacteria inactivated by the light irradiation in step S101 can be removed from the liquid L through the holes 132 formed in the hollow fibers 131 .
  • step S104 the liquid L from which endotoxin has been removed in step S103 is dispensed into a plurality of small containers 200 using the dispensing unit 150 (step S104).
  • step S101 bacteria contained in the liquid L can be inactivated while reducing damage to cells. Furthermore, endotoxin generated from the inactivated bacteria can be removed from the liquid L in step S103. As a result, liquid L free of bacteria and endotoxin can be dispensed.
  • a cell-containing product can be produced through the above treatment method. That is, the present disclosure also discloses methods for producing cell inclusions, including the processing methods described above.
  • FIG. 8 is a diagram showing a schematic configuration of the processing device 101A in this embodiment. As shown in FIG. 8, the processing apparatus 101A differs from the processing apparatus 101 of the third embodiment in the location where the light irradiation unit 120 is arranged.
  • the light irradiation unit 120 in this embodiment is arranged near the tube 160 connecting the storage container 110 and the filter 130, and can irradiate the tube 160 with irradiation light.
  • the tube 160 in this embodiment has translucency.
  • the light irradiation unit 120 irradiates the tube 160 with irradiation light, so that the liquid L in the tube 160 can be irradiated with the irradiation light.
  • FIG. 9 is a flowchart showing an example of liquid L processing using the processing apparatus 101A.
  • the liquid L is sent from the storage container 110 to the filter 130 by driving the pump 140 (step S111).
  • the light irradiation unit 120 irradiates the tube 160 with irradiation light.
  • the liquid L in the tube 160 is irradiated with irradiation light (step S112, light irradiation step). This inactivates bacteria contained in the liquid L while reducing damage to cells.
  • step S113 removal step
  • endotoxin generated from the bacteria inactivated by the light irradiation in step S112 can be removed from the liquid L through the holes 132 formed in the hollow fibers 131 .
  • step S113 the liquid L from which endotoxin has been removed in step S113 is dispensed into a plurality of small containers 200 using the dispensing unit 150 (step S114).
  • step S112 only bacteria contained in the liquid L can be inactivated while reducing damage to cells. Furthermore, endotoxin generated from the inactivated bacteria can be removed from the liquid L in step S113. As a result, liquid L free of bacteria and endotoxin can be dispensed. As described above, according to the liquid L processing method of the present embodiment, it is possible to dispense the liquid L from which bacteria and endotoxin have been removed while reducing damage to cells.
  • FIG. 8 illustrates an example in which the light irradiation unit 120 irradiates the tube 160 connecting the storage container 110 and the pump 140 with irradiation light
  • the processing apparatus of the present disclosure is not limited to this.
  • the tube 160 connecting the filter 130 and the pump 140 may be irradiated with irradiation light.
  • the irradiation light may be applied to the tube 160 connecting the 140 .
  • FIG. 10 is a diagram showing a schematic configuration of the processing device 101B in this embodiment. As shown in FIG. 10, the processing apparatus 101B includes a column 170 (removal section) instead of the filter 130 in the third embodiment.
  • FIG. 11 is a cross-sectional view showing the configuration of the column 170.
  • FIG. FIG. 11 is a schematic diagram for facilitating understanding, and it should be noted that the actual size of each part differs from the size shown in FIG.
  • the column 170 has a filling section 172 filled with an adsorbent 171 therein.
  • the adsorbent 171 is an adsorbent capable of adsorbing endotoxin.
  • the adsorbent 171 may be composed of, for example, an organic material or a composite material of organic and inorganic materials.
  • the adsorbent 171 may be fibrous, spherical, sheet-like, or crushed, for example. If the adsorbent 171 comprises an organic material, it may be a mixture of different organics, such as a polymer alloy.
  • the adsorbent 171 may be surface-treated with an organic or inorganic substance.
  • the filling part 172 is filled with the adsorbent 171 so that the cells can pass through and the endotoxin is difficult to pass through.
  • FIG. 12 is a flow chart showing an example of processing of the liquid L using the processing device 101B.
  • the liquid L containing cultured cells stored in the storage container 110 is irradiated with the light irradiation unit 120 at a peak wavelength of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • step S121 light irradiation step. This inactivates only bacteria contained in the liquid L while reducing damage to cells.
  • the liquid L is sent from the storage container 110 to the filter 130 by driving the pump 140 (step S122).
  • step S123 removal step
  • the endotoxin is adsorbed on the adsorbent 171, and the endotoxin generated from the bacteria inactivated by the light irradiation in step S121 can be removed from the liquid L.
  • step S123 the liquid L from which endotoxin has been removed in step S123 is dispensed into a plurality of small containers 200 using the dispensing unit 150 (step S124).
  • step S121 only bacteria contained in the liquid L can be inactivated while reducing damage to cells. Furthermore, endotoxins generated by the inactivated bacteria can be removed from the liquid L in step S123. As a result, liquid L free of bacteria and endotoxin can be dispensed. As described above, according to the method for treating the liquid L described above, it is possible to dispense the liquid L from which bacteria and endotoxin have been removed while reducing damage to cells.
  • a processing apparatus may be configured to include both the filter 130 described in Embodiment 3 and the column 170 described in Embodiment 5 as a removal unit that removes endotoxin. Thereby, the possibility that the liquid L to be dispensed is mixed with endotoxin can be reduced.
  • a light source that emits white light including wavelengths in the visible light region (hereinafter referred to as the first light source), or light having a sharp intensity peak at a wavelength of 405 nm (in the present disclosure, a single wavelength of 405 nm) NB (Nutrient Broth), which is considered to have a photosensitizing component, is irradiated with light emitted from an LED light source (hereinafter referred to as a second light source) that emits light),
  • the amounts of active oxygen generated by light from both light sources were compared and measured. The measurement was performed multiple times by changing the dilution ratio of the NB medium.
  • NB medium a stock solution was prepared by dissolving a commercially available powdered reagent for NB medium in pure water so that the concentration of the NB powder was 8 mg/mL. Using the dilution rate of this stock solution as 1, NB media with various dilution rates were prepared and used for experiments.
  • the irradiance was 1.3 mW/cm 2 for the first light source and 31.1 mW/cm 2 for the second light source at 395 to 415 nm, and irradiation was performed for 120 minutes.
  • a 96-well plate was used as the culture vessel, and after irradiating 0.1 mL of the medium, the amount of active oxygen generated was measured.
  • an apparatus SpectraMax M2 manufactured by Molecular Devices was used, and the measured value obtained was converted to H 2 O 2 concentration.
  • ⁇ Second test> The light emitted from the first light source or the light emitted from the second light source is applied to Staphylococcus aureus seeded in the same culture container as the first test containing the NB medium, and the antibacterial activity value Measured measurements. Light irradiation was performed 24 hours after inoculation of Staphylococcus aureus in the culture container, and the irradiation time was 2 hours. Cultivation and measurement were performed multiple times by changing the dilution ratio of the NB medium. In a second test, Staphylococcus aureus was also seeded in a culture vessel containing water containing no NB medium. The measurement of the antibacterial activity value in the second test was performed according to JIS 1702 and JISR1756.
  • ⁇ Third test> The absorbance of light with a wavelength of 405 nm was measured while changing the dilution ratio of the NB medium.
  • the same culture vessel as in the first test and the apparatus SpectraMax M2 manufactured by Molecular Devices were used.
  • FIG. 13 is a graph showing the measurement results of the first test. As shown in FIG. 13, the amount of active oxygen generated increased as the concentration of the NB medium increased, regardless of whether the first light source or the second light source was used.
  • FIG. 14 is a graph showing the measurement results of the second test. As shown in FIG. 14, the antibacterial activity value was low when the first light source was used. In contrast, when the second light source was used, the antibacterial activity value was high. In the second test, when the second light source was used, the antibacterial activity value decreased when the dilution ratio of the NB medium was 0.02 or more.
  • FIG. 15 is a graph showing the measurement results of the third test. As shown in FIG. 15, in the second test, the absorbance at a wavelength of 405 nm was high when the NB medium with a dilution rate of 0.02 or more was used, which reduced the antibacterial activity value.
  • the antibacterial activity decreased in the high-concentration NB medium in the second test because the NB medium absorbed light with a wavelength of 405 nm, and the amount of light reaching the cells of Staphylococcus aureus This is thought to be due to a decrease in the intracellular photosensitizing effect of Staphylococcus aureus.
  • the antibacterial activity value was also high when water containing no NB medium was used.
  • the antibacterial activity value is 2 or more, it is considered to have antibacterial activity, so when the second light source was used in the second test, there was an antibacterial effect in all tests. That is, in other words, it was shown that an antibacterial effect can be obtained by irradiating light on an irradiation target having an absorbance of 0.33 or less for light with a wavelength of 405 nm. From the graph shown in FIG. 15, it is considered that the antibacterial activity value becomes less than 2 when the dilution ratio of the NB medium is greater than 1, that is, when the absorbance is greater than 0.331.
  • Ultraviolet light, single-wavelength light with a wavelength of 405 nm, or single-wavelength light with a wavelength of 472 nm is applied to human retinal pigment epithelial cells in a dedicated medium containing commercially available 2% FBS (Fetal Bovine Serum). The viability of human retinal pigment epithelial cells was measured. The integrated illuminance in each test was 2.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 . Culture and light irradiation were performed for 2 hours, and the number of living cells before and after culture was counted using a commercially available Cell Counting Kit-8 to calculate the survival rate.
  • FIG. 16 is a graph showing the measurement results of the fourth test. As shown in FIG. 16, when irradiated with ultraviolet rays, the survival rate of human retinal pigment epithelial cells was almost 0%, whereas light with a single wavelength of 405 nm or single wavelength with a wavelength of 472 nm was used. When exposed to light, the viability of human retinal pigment epithelial cells was approximately 80%.
  • a light irradiation device includes an illumination unit capable of irradiating an irradiation target with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less.
  • the irradiance may be 10 mW/cm 2 or more.
  • the irradiance may be 20 mW/cm 2 or more.
  • a light irradiation device is the light irradiation device according to any one of Aspects 1 to 3 above, wherein the integrated illuminance of the illumination light with which the object is irradiated is 1.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more.
  • a light irradiation device in any one of Aspects 1 to 3, wherein the integrated illuminance of the illumination light irradiated to the irradiation target is 2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more. good.
  • the illumination light has an irradiance of 0.2 mW/cm 2 or less on the irradiation target in a wavelength region of less than 380 nm.
  • a light irradiation device in any one of Aspects 1 to 6 above, further includes an ultraviolet light reducing unit that reduces the amount of light in a wavelength band of an ultraviolet region included in the illumination light irradiated to the irradiation target. may be
  • the absorbance at a wavelength of 405 nm of the irradiation target may be 0.33 or less.
  • a light irradiation device is a light irradiation device according to any one of aspects 1 to 8, wherein the irradiation target is a culture container containing cultured cells and a culture medium for culturing the cultured cells. good.
  • the irradiation target may be blood from which red blood cells have been removed.
  • the irradiation target may be food and/or beverage.
  • a cell culture device is a case capable of accommodating the light irradiation device according to any one of aspects 1 to 8, cultured cells, and a culture container containing a culture medium for culturing the cultured cells. and a controller that controls the temperature, humidity, O 2 concentration, and/or CO 2 concentration in the housing, and the light irradiation device can irradiate the culture container with illumination light.
  • a light irradiation method includes an irradiation step of irradiating an irradiation target with illumination light having an irradiance of 5 mW/cm 2 or more in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less; and a control step of controlling the irradiance of the illumination light when the object is irradiated with the illumination light and/or the time during which the object is irradiated with the illumination light.
  • a cell culture method includes a preparation step of preparing a cell medium having an absorbance of 0.33 or less, and an irradiance of 5 mW/cm 2 or more to the cell medium in a wavelength range of 380 nm or more and 420 nm or less. and a culturing step of culturing the cells while irradiating with illumination light.
  • the illumination light may have an irradiance of 0.2 mW/cm 2 or less on the cell culture medium in a wavelength region of less than 380 nm. .
  • a processing method includes a light irradiation step of irradiating a liquid containing cells with irradiation light having a peak wavelength of 380 nm or more and 420 nm or less, and after the light irradiation step, an object to be removed contained in the liquid and a removal step of removing the material.
  • the liquid in the light irradiation step, may be irradiated with the irradiation light at an irradiance of 5 mW/cm 2 or more.
  • the integrated illuminance of the irradiation light to the liquid may be 1.2 ⁇ 10 5 mJ/cm 2 or more.
  • the liquid in the removing step, (1) the liquid is removed by a filter including hollow fibers having holes through which the substance to be removed can pass. (2) passing the liquid through a filling portion filled with an adsorbent capable of adsorbing the substance to be removed and through which the cells can pass;
  • the light irradiation step includes (1) the liquid stored in a predetermined storage container, or (2) the filter or It may be a step of irradiating at least one of the liquid moving to the filling section with the irradiation light.
  • the cells may be cultured cells.
  • the substance to be removed may be endotoxin.
  • the absorbance of the liquid at a wavelength of 405 nm may be 0.33 or less.
  • the irradiation light in the light irradiation step may further include light having a wavelength longer than 420 nm.
  • the light having a wavelength longer than 420 nm may be light having a wavelength of 10000 nm or less.
  • a method for producing a cell-containing material according to aspect 26 of the present disclosure includes the treatment method according to any one of aspects 16 to 25 above.
  • the processing apparatus includes a light irradiation unit that irradiates a liquid containing cells with irradiation light having a peak wavelength of 380 nm or more and 420 nm or less, and after the irradiation light is irradiated by the light irradiation unit and a removing unit that removes a substance to be removed contained in the liquid.
  • a storage container capable of storing the liquid
  • a tube connecting the storage container and the removing unit, and the liquid passing through the tube
  • a liquid feeding section capable of feeding liquid from the container to the removing section.
  • the light irradiation unit irradiates at least one of the liquid stored in the storage container and the liquid in the tube. It may be possible to irradiate light.
  • the processing apparatus in any one of aspects 27 to 29 above, further includes a dispensing unit capable of aseptically dispensing the liquid processed by the removing unit into a plurality of small containers. may be provided.
  • Reference Signs List 1 1A cell culture device 10 housing 20 control section 30 light irradiation device 31 light emitting element (illumination section) 32 Ultraviolet reduction unit 50 Culture vessel 101, 101A, 101B Treatment device 131 Hollow fiber 110 Storage container 120 Light irradiation unit 130 Filter (removal unit) 140 pump 150 dispensing unit 160 tube 170 column (removal unit) 171 adsorbent 172 filling part 200 small container

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Abstract

光照射装置は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射可能な照明部を備える。

Description

光照射装置、細胞培養装置、処理装置、光照射方法、および細胞培養方法
　本開示は、滅菌処理を行うための光照射装置などに関する。
　近年、可視光領域の波長帯の光に殺菌効果があることが報告されている。例えば、特許文献１には、４００ｎｍ以上かつ４１０ｎｍ以下の波長領域にピーク波長を有するスペクトルで特定される光が高い殺菌効果を発揮できると記載されている。
国際公開２０２０／０４５６６５号 日本国特開２０１８－１５８２７５
　本開示の一態様に係る光照射装置は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射可能な照明部を備える。
　本開示の一態様に係る光照射方法は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射する照射工程と、前記照射対象に前記照明光を照射したときの該照明光による放射照度、及び／又は、前記照射対象に前記照明光を照射する時間を制御する制御工程と、を含む。
本開示の実施形態１に係る細胞培養装置１の構成の一例を示す正面図である。 本開示の実施形態１に係る細胞培養方法の処理の一例を示すフローチャートである。 本開示の実施形態２に係る細胞培養装置１の構成の一例を示す正面図である。 本開示の実施形態３に係る処理装置の概略構成を示す図である。 上記処理装置が備えるフィルタの構成を示す拡大図である。 上記フィルタが備える中空糸を長手方向に垂直な方向から見た拡大図である。 上記処理装置を用いた液体の処理の一例を示すフローチャートである。 本開示の実施形態４に係る処理装置の概略構成を示す図である。 上記処理装置を用いた液体の処理の一例を示すフローチャートである。 本開示の実施形態５に係る処理装置１Ｂの概略構成を示す図である。 上記処理装置が備えるカラムの構成を示す断面図である。 上記処理装置を用いた液体の処理の一例を示すフローチャートである。 本開示の実験例としての第１試験の測定結果を示すグラフである。 本開示の実験例としての第２試験の測定結果を示すグラフである。 本開示の実験例としての第３試験の測定結果を示すグラフである。 本開示の実験例としての第４試験の測定結果を示すグラフである。
　〔実施形態１〕
　以下、本開示の一実施形態について、詳細に説明する。
　〔細胞培養装置〕
　図１は、本実施形態における細胞培養装置１の構成の一例を示す正面図である。図１に示すように、細胞培養装置１は、筐体１０と、制御部２０と、光照射装置３０と、を備えている。
　筐体１０は、培養細胞と培養細胞を培養するための培地とを収容した培養容器５０を収納可能となっていてもよい。筐体１０の内部には、複数の支持部１１が上下方向に並んで設けられていてもよい。培養容器５０は、可視光に対して透光性を有する材質で構成されていてもよい。
　支持部１１は、培養容器５０が載置可能となっている。図１に示す細胞培養装置１では、３個の支持部１１を備えているが、支持部１１の個数は特に限定されるものではない。支持部１１は、後述するように、可視光に対して透光性を有していてもよい。
　制御部２０は、細胞培養装置１の各種機能を制御する。制御部２０は、例えば、公知の方法を用いて、筐体１０の内部の温度、湿度、Ｏ２濃度、及び／又は、ＣＯ２濃度を制御してもよい。
　光照射装置３０は、照明光を培養容器５０に照射可能なように筐体１０の内部に設けられていてもよい。光照射装置３０は、図１に示すように、発光素子３１（照明部）と、紫外線低減部３２とを備えていてもよい。図１には、光照射装置３０が、筐体１０の内部の天面に備えられている場合を示している。この場合、筐体１０の支持部１１が透光性を有しており、光照射装置３０から照射された照明光は、各支持部１１に載置されたすべての培養容器５０に到達可能である。このように、透光性を有する支持部１１を採用することにより、細胞培養装置１に搭載する光照射装置３０の個数を少なくすることができる。よって、細胞培養装置１の製造コストを削減することができる。
　発光素子３１は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を照射対象に照射可能となっている。本発明者らは、鋭意研究により、上記の放射照度を有する照明光を照射対象に照射することにより、高い抗菌作用を得られることを見出した。より高い抗菌作用を得られることから、照射対象への放射照度は、１０ｍＷ／ｃｍ２以上であってもよく、２０ｍＷ／ｃｍ２以上であってもよい。発光素子３１から照射される照明光は、紫外光が含まれていない、または、照射対象に対する損傷を与えない程度の紫外光が含まれている。
　抗菌効果を向上させる観点から、光照射装置３０による照射対象に照射する照明光の積算照度は、１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよく、２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよい。積算照度は、照射対象としての培養容器に照明光を照射したときの該照明光による放射照度、及び、培養容器に照明光を照射する時間によって求められる。放射照度および照明光を照射する時間は、制御部２０によって制御され得る。
　紫外線低減部３２は、発光素子３１から照射された照明光に含まれる紫外線領域の波長帯の光量を減じる。紫外線低減部３２は、例えば、紫外線フィルタであってもよい。本開示の一態様では、紫外線低減部３２により紫外線領域の波長帯の光量が減じられた照明光は、３８０ｎｍ未満の波長領域において、前記照射対象への放射照度が０．２ｍＷ／ｃｍ２以下であってもよい。これにより、培養細胞の生存率が低下することを抑制することができる。
　〔細胞培養方法〕
　次に、本実施形態における細胞培養方法について説明する。図２は、本実施形態における細胞培養方法の処理の一例を示すフローチャートである。
　本実施形態における細胞倍法方法では、図２に示すように、まず、細胞培地を準備する（準備工程、ステップＳ１）。ここで、後述する実験例において説明するように、照射対象の波長が４０５ｎｍにおける吸光度が０．３３以下である場合に、抗菌活性があることが実験において示されている。そのため、本実施形態における細胞培地の４０５ｎｍにおける吸光度は、０．３３以下であってもよい。細胞培養装置１は、特に葉緑素を含まない動物細胞を培養する装置として用いられてもよい。
　次に、培養細胞が播種された細胞培地を収容した培養容器５０を筐体１０の支持部１１に載置する（ステップＳ２）。
　次に、光照射装置３０により、３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域において、照射対象への放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を培養容器に照射しながら培養細胞を培養する（照射工程、培養工程、ステップＳ３）。これにより、培養対象の培養細胞に対して損傷を与えることなく、増殖させたくない菌のみを死滅させながら細胞を培養させることができる。
　ステップＳ２では、制御部２０によって、培養容器に照射される照明光の放射照度、及び／又は、培養容器に照明光を照射する時間を制御する（制御工程）。具体的には、制御部２０は、光照射装置３０による照射対象に照射する照明光の積算照度が１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上となるように制御する。上記照射工程および上記制御工程は、本開示の一態様に係る光照射方法である。
　本実施形態では、細胞を培養する細胞培養装置１において光照射装置３０を用いる態様について説明したが、光照射装置３０は、それ以外の用途にも用いることができる。例えば、光照射装置３０は、殺菌装置として用いることができる。具体的には、例えば、光照射装置３０は、輸血用の血液などの透明容器に収容された血液（但し、赤血球が除かれた血液）に対して用いることができる。輸血用の血液を収容する透明容器は、通常紫外線が透過しないポリスチレンを材料として製造された容器であるため、紫外線の照射によっては殺菌を行うことができない。これに対して、本開示の光照射装置３０は、３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域の可視光を照射するため、光が透明容器の内部に到達することができる。そのため、血液成分の細胞に損傷を与えることなく、透明容器の内部を殺菌することができる。また、同様の理由により、透析に用いられるジョイント部品などにも光照射装置３０を用いてもよい。
　また、光照射装置３０は、食品、及び／又は、飲料に対して用いられてもよい。食品および飲料は、ガンマ線滅菌処理などの滅菌処理を行うことができない。そのため、消費期限が短くなってしまう。また、食品および飲料に紫外線を照射すると、栄養成分が破壊されてしまう。これに対して、本開示の光照射装置３０は、３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域の可視光を照射するため、食品および飲料の栄養成分を破壊することなく、滅菌処理を行うことができ、消費期限を長くすることができる。
　〔実施形態２〕
　本開示の他の実施形態について、以下に説明する。説明の便宜上、上記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を繰り返さない。
　図３は、本実施形態における細胞培養装置１Ａの構成を示す正面図である。実施形態１における細胞培養装置１では、光照射装置３０が筐体１０の内部の天面に備えられていた。これに対して、本実施形態における細胞培養装置１Ａは、図３に示すように、筐体１０の内部の天面に加えて、最下段の支持部１１を除く支持部１１の下面にも光照射装置３０が備えられている。
　上記の構成によれば、筐体１０の支持部１１により区分けされている各段に対して光照射装置３０が設けられているので、培養容器に照射される光の強度のバラツキを低減することができる。
　本実施形態における細胞培養装置１Ａでは、支持部１１が透光性を有していなくてもよい。
　〔実施形態３〕
　細胞製剤は、ドナーから採取した細胞を培養することにより製造される。具体的には、細胞製剤は、ドナーから採取した細胞を初期培養してマスターセルバンクを作製し、マスターセルバンクの細胞を拡大培養してワーキングセルバンクを作製し、ワーキングセルバンクの細胞をさらに拡大培養して量産される細胞を含む液体である。量産された細胞製剤は、小容器に分注される。小容器に分注された細胞製剤に、汚染物質（例えば、細菌、エンドトキシンなど）が混入していると人体に重篤な感染症を引き起こしたり、発熱を倦起したりする。液体に含まれる除去対象物質を除去する技術が、例えば、特許文献２に開示されている。
　本実施形態では、培養された細胞を含む液体（例えば、細胞製剤）を小容器に分注する処理装置及び処理方法について説明する。ただし、本開示の処理装置は、必ずしも培養された細胞を含む液体を処理対象とする必要はなく、例えば、検体から採取した細胞を含む液体を処理対象とすることができる。
　（処理装置）
　図４は、本実施形態における処理装置１０１の概略構成を示す図である。図４に示すように、処理装置１０１は、貯留容器１１０と、光照射部１２０（光照射装置）と、フィルタ１３０（除去部）と、ポンプ１４０（送液部）と、分注部１５０と、チューブ１６０とを備えている。処理装置１０１は、貯留容器１１０に貯留された、細胞を含む液体Ｌとしての細胞製剤を小容器２００に分注するための分注装置である。
　貯留容器１１０は、培養された細胞を含む液体Ｌを貯留する容器である。本実施形態では、貯留容器１１０には、ワーキングセルバンクから拡大培養することにより量産された液体Ｌが貯留されている。液体Ｌは、培養された細胞が生理食塩水に懸濁された懸濁液であってよい。液体Ｌの細胞密度は、１×１０５個／ｋｇ以上であってもよく、１×１０６個／ｋｇ以上であってもよい。貯留容器１１０は、透光性を有する材料で構成されている。
　光照射部１２０は、貯留容器１１０に貯留された液体Ｌに対して、３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下のピーク波長を有する照射光（照明光）を照射する。光照射部１２０は、例えば、ＬＥＤ（light emitting diode）によって構成されてもよい。
　光照射部１２０は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照射光を照射対象に照射可能となっている。本発明者らは、鋭意研究により、上記の放射照度を有する照射光を照射対象に照射することにより、高い抗菌作用を得られることを見出した。光照射部１２０は、照射光を照射することにより、液体Ｌに含まれる可能性がある、嫌気性細菌（例えば、黄色ブドウ球菌、枯草菌、緑膿菌など）、好気性細菌（例えば、スポリゲヌス菌など）、真菌（例えば、酵母真菌、クロコウジカビなど）、及び、マイコプラズマなどの細菌を不活性化させることができる。
　照射対象への放射照度は、抗菌作用を高めるために、１０ｍＷ／ｃｍ２以上であってもよい。照射対象への放射照度を、２０ｍＷ／ｃｍ２以上にすると、さらに抗菌作用を高めることができる。光照射部１２０から照射される照射光は、紫外光が含まれていない、又は、照射対象に対する損傷を与えない程度の紫外光が含まれている。
　上記放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２未満であると、細菌を不活性化する効果が低下してしまう。上記放射照度が１００ｍＷ／ｃｍ２よりも大きい場合、細胞に対する影響が大きくなってしまうため、上記放射照度は１００ｍＷ／ｃｍ２以下としてもよい。
　光照射部１２０は、上記の構成を有する照射光を照射することにより、細胞に対しては影響を与えずに、細菌を不活性化させることができる。
　抗菌効果を向上させる観点から、光照射部１２０による照射対象に照射する照射光の積算照度は、１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよく、２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよい。上記積算照度は、発熱及び細胞へのダメージを低減する目的から４．０×１０５ｍＪ／ｃｍ２以下としてもよい。積算照度は、照射対象としての液体Ｌに照射光を照射したときの該照射光による放射照度、及び、液体Ｌに照射光を照射する時間によって求められる。
　ここで、後述する実験例において説明するように、照射対象の波長が４０５ｎｍにおける吸光度が０．３３以下である場合に、抗菌活性があることが実験において示されている。そのため、本実施形態における液体Ｌの４０５ｎｍにおける吸光度は、０．３３以下であってもよい。
　光照射部１２０から照射される照射光は、波長が４２０ｎｍよりも長い光をさらに含んでいてもよい。これにより、当該光による分子振動の影響により細菌をさらに不活性化させることができる。ただし、波長が１００００ｎｍよりも長くなると、細菌が赤外光による分子振動の影響を受けにくくなり細菌を不活性化させる効果が低下するため、波長が１００００ｎｍよりも長い光を含ませなくてもよい。
　フィルタ１３０は、処理装置１０１における、貯留容器１１０から小容器２００までの液体Ｌが移動する経路において、光照射部１２０の下流に設けられている。フィルタ１３０は、例えば樹脂によって構成されたチューブ１６０によって貯留容器１１０と接続されている。フィルタ１３０は、光照射部１２０によって照射光が照射された後の液体Ｌに含まれる除去対象物質を除去する。本実施形態における処理装置１０１では、培養された細胞を含む液体Ｌに含まれるエンドトキシン及び／又は光照射部１２０にて不活性化された菌を除去対象物質としている。エンドトキシンとは、リポ多糖を構成成分に含む物質である。
　図５は、フィルタ１３０の構成を示す拡大図である。図５に示すように、フィルタ１３０は、複数の中空糸１３１を束ねることにより構成されている。図６は、中空糸１３１を長手方向に垂直な方向から見た拡大図である。図６に示すように、中空糸１３１は、中空糸１３１を構成する膜に、エンドトキシンを通過させるとともに、細胞を通過させない大きさを有する複数の孔１３２が形成されている。中空糸１３１は、例えば、セルロース、ポリスルホン、ポリエーテルスルフォン、ポリエステル系ポリマーアロイ、エチレンビニルアルコール共重合体、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリルニトリル、ポリビニルアルコール、ポリオレフィン、及び／又はポリアミドなどによって構成されてもよい。
　光照射部１２０によって不活性化されて死滅した細菌（例えば、緑膿菌）からエンドトキシンが発生するため、光照射部１２０によって不活性化された液体Ｌをそのまま小容器２００に分注した場合、小容器２００に含まれる液体Ｌにエンドトキシンが含まれてしまう虞がある。これに対して、本実施形態における処理装置１０１では、小容器２００に液体Ｌを分注する前に、液体Ｌをフィルタ１３０に通すことにより、液体Ｌに含まれるエンドトキシンを除去することができる。
　フィルタ１３０は、長手方向の長さが、５０～１０００ｍｍであってもよい。フィルタ１３０は、中空部内径が５０～４０００μｍであってもよく、直径が２００～５０００μｍであってもよい。また、フィルタ１３０は、厚みが１５０～１０００μｍであってもよい。また、フィルタ１３０は、有機材料、無機材料、又は、有機材料及び無機材料の複合材料によって構成されてもよい。フィルタ１３０が有機材料を含む場合、例えばポリマーアロイのような、異なる有機物の混合物でもよい。フィルタ１３０は、有機物質又は無機物質により表面処理をされていてもよい。
　ポンプ１４０は、チューブ１６０を通して、液体Ｌを貯留容器１１０からフィルタ１３０に送液可能となっている。ポンプ１４０は、例えば、インペラが密閉されたケーシングの中で非接触に浮上し、モータの回転磁界によって駆動される磁気浮上ポンプであってもよい。
　分注部１５０は、フィルタ１３０によってエンドトキシンが除去された液体Ｌを複数の小容器２００に無菌的に分注する。ここで、「無菌的に」とは、使用する器具、装置、及び／又は使用部位について無菌状態が保たれている状態であることを意味する。分注部１５０の構成は、液体Ｌを無菌的に分注可能であれば特に限定されるものではなく、従来公知の装置を用いることができる。分注部１５０は、小容器２００に対して、液体Ｌを０．５ｍｌ～２０ｍｌ分注してもよく、１ｍｌ～１５ｍｌ分注してもよい。
　（処理方法）
　次に、処理装置１０１を用いた液体Ｌの処理方法（分注方法）について説明する。図７は、処理装置１０１を用いた液体Ｌの処理の一例を示すフローチャートである。
　図７に示すように、本実施形態における処理方法では、まず、貯留容器１１０に貯留された、培養された細胞を含む液体Ｌに対して光照射部１２０を用いて３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域にピーク波長を有する照射光を照射する（ステップＳ１０１、光照射工程）。これにより、細胞に対する損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌を不活性化させる。
　光照射部による光照射を終えると、ポンプ１４０を駆動させることにより、液体Ｌを貯留容器１１０からフィルタ１３０に送液する（ステップＳ１０２）。
　次に、チューブ１６０を通して貯留容器１１０から送液された液体Ｌをフィルタ１３０により濾過する（ステップＳ１０３、除去工程）。これにより、中空糸１３１に形成された孔１３２を介して、ステップＳ１０１における光照射によって不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを液体Ｌから除去することができる。
　最後に、ステップＳ１０３においてエンドトキシンが除去された液体Ｌを、分注部１５０を用いて複数の小容器２００に分注する（ステップＳ１０４）。
　上記の液体の処理方法によれば、ステップＳ１０１において、細胞に対する損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌を不活性化させることができる。さらに、ステップＳ１０３において、不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを液体Ｌから除去することができる。その結果、細菌及びエンドトキシンが含まれない液体Ｌを分注することができる。以上のことから、上記の液体Ｌの処理方法によれば、細胞に対する損傷を低減しつつ、細菌及びエンドトキシンが除去された液体Ｌを分注することができる。上記の処理方法を経ることにより細胞含有物の製造を行うことができる。すなわち、本開示は、上記の処理方法を含む、細胞含有物の製造方法についても開示する。
　〔実施形態４〕
　本開示の他の実施形態について、以下に説明する。なお、説明の便宜上、上記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を繰り返さない。
　図８は、本実施形態における処理装置１０１Ａの概略構成を示す図である。図８に示すように、処理装置１０１Ａは、光照射部１２０が配置されている箇所が実施形態３の処理装置１０１と異なっている。
　具体的には、本実施形態における光照射部１２０は、貯留容器１１０とフィルタ１３０とを接続しているチューブ１６０の近傍に配置されており、チューブ１６０に対して照射光を照射可能となっている。本実施形態におけるチューブ１６０は、透光性を有している。本実施形態では、光照射部１２０がチューブ１６０に対して照射光を照射することにより、チューブ１６０の中の液体Ｌに対して照射光を照射可能となっている。
　次に、処理装置１０１Ａを用いた液体Ｌの処理方法（分注方法）について説明する。図９は、処理装置１０１Ａを用いた液体Ｌの処理の一例を示すフローチャートである。
　図９に示すように、本実施形態における処理方法では、まず、ポンプ１４０を駆動させることにより、液体Ｌを貯留容器１１０からフィルタ１３０に送液する（ステップＳ１１１）。
　次に、光照射部１２０によりチューブ１６０に対して照射光を照射する。その結果、チューブ１６０の中の液体Ｌに照射光が照射される（ステップＳ１１２、光照射工程）。これにより、細胞に対しての損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌を不活性化させる。
　次に、チューブ１６０を通して貯留容器１１０から送液された液体Ｌをフィルタ１３０により濾過する（ステップＳ１１３、除去工程）。これにより、中空糸１３１に形成された孔１３２を介して液体Ｌから、ステップＳ１１２における光照射によって不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを除去することができる。
　最後に、ステップＳ１１３においてエンドトキシンが除去された液体Ｌを、分注部１５０を用いて複数の小容器２００に分注する（ステップＳ１１４）。
　上記の液体の処理方法によれば、ステップＳ１１２において、細胞に対する損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌のみを不活性化させることができる。さらに、ステップＳ１１３において、不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを液体Ｌから除去することができる。その結果、細菌及びエンドトキシンが含まれない液体Ｌを分注することができる。以上のことから、本実施形態の液体Ｌの処理方法によれば、細胞に対する損傷を低減しつつ、細菌及びエンドトキシンが除去された液体Ｌを分注することができる。
　図８では、貯留容器１１０とポンプ１４０とを接続するチューブ１６０に対して光照射部１２０により照射光を照射する例を図示したが、本開示の処理装置はこれに限られない。本開示の一態様の処理装置では、フィルタ１３０とポンプ１４０とを接続するチューブ１６０に対して照射光を照射してもよく、貯留容器１１０とポンプ１４０とを接続するチューブ１６０及びフィルタ１３０とポンプ１４０とを接続するチューブ１６０に照射光を照射してもよい。
　〔実施形態５〕
　本開示の他の実施形態について、以下に説明する。なお、説明の便宜上、上記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を繰り返さない。
　図１０は、本実施形態における処理装置１０１Ｂの概略構成を示す図である。図１０に示すように、処理装置１０１Ｂは、実施形態３におけるフィルタ１３０に代えてカラム１７０（除去部）を備えている。
　図１１は、カラム１７０の構成を示す断面図である。図１１は、理解の容易化のための概略図であり、各部の大きさは実際の大きさは図１１に示す大きさとは異なることに留意されたい。図１１に示すように、カラム１７０は、内部に吸着材１７１が充填された充填部１７２を備えている。
　吸着材１７１は、エンドトキシンが吸着可能な吸着材である。吸着材１７１は、例えば、有機材料、又は、有機材料及び無機材料の複合材料によって構成されていてもよい。吸着材１７１は、例えば、繊維状、球状、シート状、又は破砕の状態であってもよい。吸着材１７１が有機材料を含む場合、例えばポリマーアロイのような、異なる有機物の混合物でもよい。吸着材１７１は、有機物質又は無機物質により表面処理をされていてもよい。充填部１７２において、充填部１７２における吸着材１７１の充填量が多すぎると細胞の目詰まりが発生し、液体Ｌが充填部１７２を通過する速度が低下してしまう。そのため、充填部１７２は、細胞が通過可能であり、かつ、エンドトキシンが通過しにくくなるように吸着材１７１が充填されている。
　次に、処理装置１０１Ｂを用いた液体Ｌの処理方法（分注方法）について説明する。図１２は、処理装置１０１Ｂを用いた液体Ｌの処理の一例を示すフローチャートである。
　図１２に示すように、本実施形態における処理方法では、まず、貯留容器１１０に貯留された、培養された細胞を含む液体Ｌに対して光照射部１２０を用いて３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下のピーク波長を有する照射光を照射する（ステップＳ１２１、光照射工程）。これにより、細胞に対する損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌のみを不活性化させる。
　光照射部１２０による光照射を終えると、ポンプ１４０を駆動させることにより、液体Ｌを貯留容器１１０からフィルタ１３０に送液する（ステップＳ１２２）。
　次に、チューブ１６０を通して貯留容器１１０から送液された液体Ｌをカラム１７０（より詳細には、充填部１７２）に通す（ステップＳ１２３、除去工程）。これにより、吸着材１７１にエンドトキシンが吸着され、ステップＳ１２１における光照射によって不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを液体Ｌから除去することができる。
　最後に、ステップＳ１２３においてエンドトキシンが除去された液体Ｌを、分注部１５０を用いて複数の小容器２００に分注する（ステップＳ１２４）。
　上記の液体の処理方法によれば、ステップＳ１２１において、細胞に対する損傷を低減しつつ、液体Ｌに含まれる細菌のみを不活性化させることができる。さらに、ステップＳ１２３において、不活性化した細菌から発生したエンドトキシンを液体Ｌから除去することができる。その結果、細菌及びエンドトキシンが含まれない液体Ｌを分注することができる。以上のことから、上記の液体Ｌの処理方法によれば、細胞に対する損傷を低減しつつ、細菌及びエンドトキシンが除去された液体Ｌを分注することができる。
　本開示の一態様の処理装置では、エンドトキシンを除去する除去部として、実施形態３において説明したフィルタ１３０と、実施形態５において説明したカラム１７０とをともに備える構成であってもよい。これにより、分注される液体Ｌにエンドトキシンが混入する可能性を低減することができる。
　以上、本開示に係る発明について、諸図面および実験例に基づいて説明してきた。しかし、本開示に係る発明は上述した各実施形態に限定されるものではない。すなわち、本開示に係る発明は本開示で示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本開示に係る発明の技術的範囲に含まれる。つまり、当業者であれば本開示に基づき種々の変形または修正を行うことが容易であることに注意されたい。また、これらの変形または修正は本開示の範囲に含まれることに留意されたい。
　［実験例１]
　本開示の一実験例について以下に説明する。
　本実験例では、光を照射することによる抗菌作用について調査する試験を行った。具体的には、以下の第１試験、第２試験および第３試験を行った。
　＜第１試験＞
　可視光領域の波長を含む白色光を発する光源（以下、第１光源と称する）から照射された光、または、波長４０５ｎｍに鋭い強度ピークを有する光（本開示においては、波長４０５ｎｍの単波長の光とも称する）を照射するＬＥＤ光源（以下、第２光源と称する）から照射された光を、光増感成分を有すると考えられるＮＢ（ニュートリエントブロス、Ｎｕｔｒｉｅｎｔ　Ｂｒｏｔｈ）培地に対して照射し、両光源の光による活性酸素発生量を比較測定した。測定は、ＮＢ培地の希釈率を変えて複数回行った。ＮＢ培地は、市販のＮＢ培地用粉末試薬を純水に溶かして、ＮＢ粉末の濃度が８ｍｇ／ｍＬとなる原液を調製した。この原液の希釈率を１として、種々の希釈率のＮＢ培地を調製して実験に供した。
　放射照度は、３９５～４１５ｎｍにおいて、第１光源では１．３ｍＷ／ｃｍ２、第２光源では３１．１ｍＷ／ｃｍ２とし、１２０分照射を行った。培養容器は、９６ｗｅｌｌ　ｐｌａｔｅの容器を用い、培地０．１ｍＬに対して照射を行った後、活性酸素発生量の測定を実施した。測定には、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｖｉｃｅｓ社製の装置ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ　Ｍ２を用い、得られた測定値をＨ２Ｏ２濃度に換算した。
　＜第２試験＞
　第１光源から照射された光、または、第２光源から照射された光を、ＮＢ培地を収容した第１試験と同じ培養容器に播種された黄色ブドウ球菌に対して照射し、抗菌活性値の測定を測定した。光照射は、黄色ブドウ球菌を培養容器に播種してから２４時間後に行い、照射時間は２時間とした。培養および測定は、ＮＢ培地の希釈率を変えて複数回行った。また、第２試験では、ＮＢ培地を含んでいない水が収納された培養容器に黄色ブドウ球菌を播種した試験も行った。第２試験の抗菌活性値の測定は、ＪＩＳ　１７０２およびＪＩＳＲ１７５６に準拠して行った。
　＜第３試験＞
　ＮＢ培地の希釈率を変えながら、波長４０５ｎｍの光の吸光度を測定した。吸光度の測定には、第１試験と同じ培養容器、および、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｄｅｖｉｃｅｓ社製の装置ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ　Ｍ２を用いた。
　図１３は、第１試験の測定結果を示すグラフである。図１３に示されるように、第１光源および第２光源のいずれを用いた場合にも、ＮＢ培地の濃度が高くなるにつれて活性酸素の発生量が増加した。
　図１４は、第２試験の測定結果を示すグラフである。図１４に示されるように、第１光源を用いた場合には、抗菌活性値が低かった。これに対して、第２光源を用いた場合、抗菌活性値が高かった。また、第２試験において、第２光源を用いた場合、ＮＢ培地の希釈率が０．０２以上になると、抗菌活性値が低下した。
　図１５は、第３試験の測定結果を示すグラフである。図１５に示されるように、第２試験において抗菌活性値が低下した希釈率が０．０２以上のＮＢ培地を用いた場合に、波長４０５ｎｍの吸光度が高かった。
　第２試験および第３試験の結果から、第２試験において高濃度のＮＢ培地で抗菌活性が低下したのは、ＮＢ培地によって波長４０５ｎｍの光が吸収され、黄色ブドウ球菌の細胞内に到達する光量が低下し、黄色ブドウ球菌の細胞内の光増感作用が低下したためと考えられる。また、第２試験において第２光源を用いた場合、ＮＢ培地を含んでいない水を使用した場合にも抗菌活性値が高かった。
　第２試験では抗菌活性値が２以上であれば抗菌活性があると見なされることから、第２試験において第２光源を用いた場合には、すべての試験において抗菌効果があった。すなわち、換言すれば、波長４０５ｎｍの光に対する吸光度が０．３３以下である照射対象に光を照射することにより、抗菌効果があることが示された。図１５に示されるグラフから、ＮＢ培地の希釈率が１よりも大きい、すなわち、吸光度が０．３３１よりも大きくなると、抗菌活性値が２未満になると考えられる。
　［実験例２]
　本開示の他の実験例について以下に説明する。
　本実験例では、光を照射することによる培養する対象の細胞に対する毒性について調査する試験を行った。具体的には、以下の第４試験を行った。
　＜第４試験＞
　市販の２％のＦＢＳ（ウシ胎児血清、Ｆｅｔａｌ　Ｂｏｖｉｎｅ　Ｓｅｒｕｍ）を含む専用培地中のヒト網膜色素上皮細胞に対し、紫外線、波長４０５ｎｍの単波長の光、または、波長４７２ｎｍの単波長の光を暗所で照射し、ヒト網膜色素上皮細胞の生存率を測定した。各試験における積算照度は、２．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２とした。培養および光照射は２時間行い、培養前後の生細胞数を、市販のＣｅｌｌ　Ｃｏｕｎｔｉｎｇ　Ｋｉｔ－８によりカウントし、生存率を計算した。
　図１６は、第４試験の測定結果を示すグラフである。図１６に示すように、紫外線を照射した場合には、ヒト網膜色素上皮細胞の生存率はほぼ０％であったのに対し、波長４０５ｎｍの単波長の光、または、波長４７２ｎｍの単波長の光を照射した場合には、ヒト網膜色素上皮細胞の生存率は約８０％であった。
　〔まとめ〕
　本開示の態様１に係る光照射装置は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射可能な照明部を備える。
　本開示の態様２に係る光照射装置は、上記の態様１において、前記放射照度は、１０ｍＷ／ｃｍ２以上であってもよい。
　本開示の態様３に係る光照射装置は、上記の態様１または２において、前記放射照度は、２０ｍＷ／ｃｍ２以上であってもよい。
　本開示の態様４に係る光照射装置は、上記の態様１から３のいずれかにおいて、前記照射対象に照射する前記照明光の積算照度は、１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよい。
　本開示の態様５に係る光照射装置は、上記の態様１から３のいずれかにおいて、前記照射対象に照射する前記照明光の積算照度は、２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよい。
　本開示の態様６に係る光照射装置は、上記の態様１から５のいずれかにおいて、前記照明光は、３８０ｎｍ未満の波長領域において、前記照射対象への放射照度が０．２ｍＷ／ｃｍ２以下であってもよい。
　本開示の態様７に係る光照射装置は、上記の態様１から６のいずれかにおいて、前記照射対象に照射する前記照明光に含まれる紫外線領域の波長帯の光量を減じる紫外線低減部をさらに備えていてもよい。
　本開示の態様８に係る光照射装置は、上記の態様１から７のいずれかにおいて、前記照射対象の波長４０５ｎｍにおける吸光度は、０．３３以下であってもよい。
　本開示の態様９に係る光照射装置は、上記の態様１から８のいずれかにおいて、前記照射対象は、培養細胞、及び前記培養細胞を培養するための培地を収容した培養容器であってもよい。
　本開示の態様１０に係る光照射装置は、上記の態様１から８のいずれかにおいて、前記照射対象は、赤血球が除かれた血液であってもよい。
　本開示の態様１１に係る光照射装置は、上記の態様１から８のいずれかにおいて、前記照射対象は、食品、及び／又は、飲料であってもよい。
　本開示の態様１２に係る細胞培養装置は、上記の態様１から８のいずれかの光照射装置と、培養細胞、及び前記培養細胞を培養するための培地を収容した培養容器を収納可能な筐体と、前記筐体内の温度、湿度、Ｏ２濃度、及び／又は、ＣＯ２濃度を制御する制御部と、を備え、前記光照射装置は、照明光を前記培養容器に照射可能である。
　本開示の態様１３に係る光照射方法は、照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射する照射工程と、前記照射対象に前記照明光を照射したときの該照明光による放射照度、及び／又は、前記照射対象に前記照明光を照射する時間を制御する制御工程と、を含む。
　本開示の態様１４に係る細胞培養方法は、吸光度が０．３３以下の細胞培地を準備する準備工程と、３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域において、前記細胞培地への放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上となる照明光を照射しながら細胞を培養する培養工程と、を含む。
　本開示の態様１５に係る細胞培養方法は、上記の態様１４において、前記照明光は、３８０ｎｍ未満の波長領域において、前記細胞培地への放射照度が０．２ｍＷ／ｃｍ２以下であってもよい。
　本開示の態様１６に係る処理方法は、細胞を含む液体に対して３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下のピーク波長を有する照射光を照射する光照射工程と、前記光照射工程後に、前記液体に含まれる除去対象物質を除去する除去工程と、を含む。
　本開示の態様１７に係る処理方法は、上記の態様１６において、前記光照射工程において、前記液体に対して５ｍＷ／ｃｍ２以上の放射照度で前記照射光を照射してもよい。
　本開示の態様１８に係る処理方法は、上記の態様１６または１７において、前記照射光の前記液体に対する積算照度は、１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上であってもよい。
　本開示の態様１９に係る処理方法は、上記の態様１６から１８のいずれかにおいて、前記除去工程では、（１）前記除去対象物質が通過可能な孔を有する中空糸を含むフィルタにより前記液体を濾過すること、又は、（２）前記除去対象物質が吸着可能な吸着材が充填され、前記細胞が通過可能である充填部に前記液体を通すこと、の少なくともいずれかを含んでもよい。
　本開示の態様２０に係る処理方法は、上記の態様１９において、前記光照射工程は、（１）所定の貯留容器に貯留された前記液体、又は、（２）前記貯留容器内から前記フィルタ又は前記充填部に移動する前記液体、の少なくともいずれかに前記照射光を照射する工程であってもよい。
　本開示の態様２１に係る処理方法は、上記の態様１６から２０のいずれかにおいて、前記細胞は、培養された細胞であってもよい。
　本開示の態様２２に係る処理方法は、上記の態様１６から２１のいずれかにおいて、前記除去対象物質は、エンドトキシンであってもよい。
　本開示の態様２３に係る処理方法は、上記の態様１６から２２のいずれかにおいて、前記液体の波長４０５ｎｍにおける吸光度は、０．３３以下であってもよい。
　本開示の態様２４に係る処理方法は、上記の態様１６から２３のいずれかにおいて、前記光照射工程における前記照射光は、波長が４２０ｎｍよりも長い光をさらに含んでいてもよい。
　本開示の態様２５に係る処理方法は、上記の態様２４において、前記波長が４２０ｎｍよりも長い光は、１００００ｎｍ以下の波長の光であってもよい。
　本開示の態様２６に係る細胞含有物の製造方法は、上記の態様１６から２５のいずれかの処理方法を含む。
　本開示の態様２７に係る処理装置は、細胞を含む液体に対して３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下のピーク波長を有する照射光を照射する光照射部と、前記光照射部によって前記照射光が照射された後の前記液体に含まれる除去対象物質を除去する除去部と、を備える。
　本開示の態様２８に係る処理装置は、上記の態様２７において、前記液体を貯留可能な貯留容器と、前記貯留容器と前記除去部とを接続するチューブと、前記チューブを通して、前記液体を前記貯留容器から前記除去部に送液可能な送液部と、を備えていてもよい。
　本開示の態様２９に係る処理装置は、上記の態様２８において、前記光照射部は、前記貯留容器に貯留された前記液体、又は、前記チューブの中の前記液体の少なくともいずれかに、前記照射光を照射可能であってもよい。
　本開示の態様３０に係る処理装置は、上記の態様２７から２９のいずれかにおいて、前記除去部により処理された前記液体を、複数の小容器に無菌的に分注可能な分注部をさらに備えていてもよい。
　１、１Ａ　細胞培養装置
　１０　筐体
　２０　制御部
　３０　光照射装置
　３１　発光素子（照明部）
　３２　紫外線低減部
　５０　培養容器
　１０１、１０１Ａ、１０１Ｂ　処理装置
　１３１　中空糸
　１１０　貯留容器
　１２０　光照射部
　１３０　フィルタ（除去部）
　１４０　ポンプ
　１５０　分注部
　１６０　チューブ
　１７０　カラム（除去部）
　１７１　吸着材
　１７２　充填部
　２００　小容器

Claims (19)

  1. 　照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射可能な照明部を備える光照射装置。
  2. 　前記放射照度は、１０ｍＷ／ｃｍ２以上である、請求項１に記載の光照射装置。
  3. 　前記放射照度は、２０ｍＷ／ｃｍ２以上である、請求項１または２に記載の光照射装置。
  4. 　前記照射対象に照射する前記照明光の積算照度は、１．２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上である、請求項１から３のいずれか１項に記載の光照射装置。
  5. 　前記照射対象に照射する前記照明光の積算照度は、２×１０５ｍＪ／ｃｍ２以上である、請求項１から３のいずれか１項に記載の光照射装置。
  6. 　前記照明光は、３８０ｎｍ未満の波長領域において、前記照射対象への放射照度が０．２ｍＷ／ｃｍ２以下である、請求項１から５のいずれか１項に記載の光照射装置。
  7. 　前記照射対象に照射する前記照明光に含まれる紫外線領域の波長帯の光量を減じる紫外線低減部をさらに備える、請求項１から６のいずれか１項に記載の光照射装置。
  8. 　前記照射対象の波長４０５ｎｍにおける吸光度は、０．３３以下である、請求項１から７のいずれか１項に記載の光照射装置。
  9. 　前記照射対象は、培養細胞、及び前記培養細胞を培養するための培地を収容した培養容器である、請求項１から８のいずれか１項に記載の光照射装置。
  10. 　前記照射対象は、赤血球が除かれた血液である、請求項１から８のいずれか１項に記載の光照射装置。
  11. 　前記照射対象は、食品、及び／又は、飲料である、請求項１から８のいずれか１項に記載の光照射装置。
  12. 　請求項１から８のいずれか１項に記載の光照射装置と、
    　培養細胞、及び前記培養細胞を培養するための培地を収容した培養容器を収納可能な筐体と、
    　前記筐体内の温度、湿度、Ｏ２濃度、及び／又は、ＣＯ２濃度を制御する制御部と、を備え、
    　前記光照射装置は、照明光を前記培養容器に照射可能である、細胞培養装置。
  13. 　細胞を含む液体に対して前記照明光を照射する、請求項１から８のいずれか１項に記載の光照射装置と、
    　前記光照射装置によって前記照明光が照射された後の前記液体に含まれる除去対象物質を除去する除去部と、を備える処理装置。
  14. 　前記液体を貯留可能な貯留容器と、
    　前記貯留容器と前記除去部とを接続するチューブと、
    　前記チューブを通して、前記液体を前記貯留容器から前記除去部に送液可能な送液部と、を備える、請求項１３に記載の処理装置。
  15. 　前記光照射装置は、前記貯留容器に貯留された前記液体、又は、前記チューブの中の前記液体の少なくともいずれかに、前記照明光を照射可能である、請求項１４に記載の処理装置。
  16. 　前記除去部により処理された前記液体を、複数の小容器に無菌的に分注可能な分注部をさらに備える、請求項１３から１５のいずれか１項に記載の処理装置。
  17. 　照射対象への３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域における放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上である照明光を、前記照射対象に照射する照射工程と、
    　前記照射対象に前記照明光を照射したときの該照明光による放射照度、及び／又は、前記照射対象に前記照明光を照射する時間を制御する制御工程と、を含む光照射方法。
  18. 　吸光度が０．３３以下の細胞培地を準備する準備工程と、
    　３８０ｎｍ以上４２０ｎｍ以下の波長領域において、前記細胞培地への放射照度が５ｍＷ／ｃｍ２以上となる照明光を照射しながら細胞を培養する培養工程と、を含む細胞培養方法。
  19. 　前記照明光は、３８０ｎｍ未満の波長領域において、前記細胞培地への放射照度が０．２ｍＷ／ｃｍ２以下である、請求項１８に記載の細胞培養方法。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011076033A (ja) * 2009-10-02 2011-04-14 Ushio Inc 光照射装置
JP2011209408A (ja) * 2010-03-29 2011-10-20 Hoya Corp レンズ用光照射装置
WO2012029677A1 (ja) * 2010-08-30 2012-03-08 コニカミノルタホールディングス株式会社 記録装置、光照射装置及び記録方法
WO2020045665A1 (ja) * 2018-08-30 2020-03-05 京セラ株式会社 発光装置、照明装置、及び把持物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011076033A (ja) * 2009-10-02 2011-04-14 Ushio Inc 光照射装置
JP2011209408A (ja) * 2010-03-29 2011-10-20 Hoya Corp レンズ用光照射装置
WO2012029677A1 (ja) * 2010-08-30 2012-03-08 コニカミノルタホールディングス株式会社 記録装置、光照射装置及び記録方法
WO2020045665A1 (ja) * 2018-08-30 2020-03-05 京セラ株式会社 発光装置、照明装置、及び把持物

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