WO2023054714A1

WO2023054714A1 - 抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩、ならびにその製造に用いられる抗体誘導体および化合物またはそれらの塩

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Publication number: WO2023054714A1
Application number: PCT/JP2022/036852
Authority: WO
Inventors: 豊松田; 友博渡部; 紀子畑田; 友博藤井
Original assignee: 味の素株式会社
Priority date: 2021-09-30
Filing date: 2022-09-30
Publication date: 2023-04-06
Also published as: CA3234689A1; AU2022353331A1

Abstract

本発明は、抗体と機能性物質との結合比率が特定の範囲に制御され、かつ所望の性質に優れた抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩を提供する。より具体的には、本発明は、下記式（Ｉ）：　〔式中、　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基を介して、Ｉｇに隣接するＬ_１と位置選択的に結合しており、　ＨＧは、親水性基等を示し、　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基等の側鎖を示し、　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、　Ｄは、機能性物質を示し、　ｒは、１．５～２．５である。〕で表される構造単位を含む、抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩、ならびにそれらに関連する物質を提供する。

Description

抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩、ならびにその製造に用いられる抗体誘導体および化合物またはそれらの塩

　本発明は、抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩、ならびにその製造に用いられる抗体誘導体および化合物またはそれらの塩などに関する。

　近年、抗体薬物複合体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）の研究開発が盛んに行われている。ＡＤＣはその名の通り、抗体に薬物（例、抗癌剤）をコンジュゲーションした薬剤であり、癌細胞などに対して直接的な殺細胞活性を有する。代表的なＡＤＣとしては、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅ社およびＲｏｃｈｅ社が共同開発したＴ－ＤＭ１（商品名：カドサイラ（登録商標））がある。

　ＡＤＣは、抗体中に存在する特定のアミノ酸残基の側鎖中の官能基を薬物に結合することにより作製されている。ＡＤＣの作製に利用されるこのような官能基の例は、抗体中に存在するリジン残基の側鎖中のアミノ基である。抗体中のリジン基（例、２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位のリジン残基）を位置選択的に修飾する技術として、幾つかの技術が報告されている（例、特許文献１～４）。

　ＡＤＣでは、リンカーを介して抗体および薬物が連結されている。ＡＤＣにおけるリンカーとしては、種々のものが存在する。例えば、抗癌剤として用いられるＡＤＣでは、ヒト血漿中で安定であり、かつ、癌細胞内で薬物を放出するために特定酵素で切断可能な構造を有するリンカーとして、バリン－シトルリンからなるジペプチド（Ｖａｌ－Ｃｉｔ：ＶＣ構造）を含むリンカーが存在する。このようなジペプチドを含むリンカーは、下記（Ａ）に示されるように、ヒト血漿中では安定であるものの、下記（Ｂ）に示されるように、ヒト癌細胞内のリソソーム中のカテプシン（ｃａｔｈｅｐｓｉｎ）ＢによりＶＣ構造が認識されて、シトルリンのカルボキシ末端側に存在するアミド結合が切断される。したがって、このようなジペプチドを含むリンカーを有するＡＤＣは、ヒト癌細胞内で薬物を放出して薬効を発現することができる。

　しかし、上記のようなジペプチドを含むリンカーを有するＡＤＣは、マウス血漿中では不安定である（非特許文献１および２）。これは、マウス血漿中には、ＶＣ構造を認識して、シトルリンのカルボキシ末端側に存在するアミド結合を切断するカルボキシラーゼであるＣｅｓ１ｃが存在することから、上記のようなジペプチドを含むリンカーがＣｅｓ１ｃにより血漿中で切断されてしまうためである。したがって、上記のようなジペプチドを含むリンカーを有するＡＤＣについては、マウスとヒトでは体内動態が大きく異なる。そのため、マウスでは、ヒトにおける薬効を評価し難いという問題がある。

　上述のように「抗体－スペーサー－ＶＣ構造－スペーサー－薬物」という構造を有するＡＤＣについてマウス血漿中での不安定性を改善するため、リンカー（すなわち、スペーサー－ＶＣ構造－スペーサー）の改変によるＡＤＣの安定化が試みられており、このような観点から、上記リンカーを介して抗体および薬物またはそのミミック（ｍｉｍｉｃ）を連結しているＡＤＣが報告されている。例えば、上記リンカーを、抗体および薬物またはそのミミックを連結している主鎖中ではなく、その主鎖の側鎖中に含むＡＤＣとして、以下が報告されている（特許文献５）。

Ａｂ：抗体
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル
Ｖａｌ：バリン残基
Ｃｉｔ：シトルリン残基

　ところで、非特許文献３には、ＡＤＣの疎水度が高ければ高い程、血漿クリアランスが早くなること、およびＡＤＣの疎水度はＨＩＣ（Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）－ＨＰＬＣで評価可能なことが記載されている。

国際公開第２０１８／１９９３３７号国際公開第２０１９／２４０２８８号国際公開第２０１９／２４０２８７号国際公開第２０２０／０９０９７９号国際公開第２０１５／０３８４２６号

Ｄｏｒｙｗａｌｓｋａ　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍ．，２０１５，２６（４），６５０－６５９Ｄｏｒｙｗａｌｓｋａ　ｅｔ　ａｌ．，Ｍｏｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｈｅｒ．，２０１６，１５（５），９５８－７０Ｌｙｏｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２０１５，３３（７），７３３－５

　本発明の目的は、抗体と機能性物質との結合比率を特定の範囲に制御しつつ、所望の性質に優れた抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩を提供することである。

　本発明者らは、鋭意検討した結果、抗体および薬物（または薬物ミミック）を連結している主鎖の側鎖中に特定構造のリンカーを含み、かつ、イムノグロブリン単位と機能性物質との結合の平均比率（機能性物質／イムノグロブリン単位）を所望の範囲（１．５～２．５）で有する位置選択的なコンジュゲートが、優れた性質を有することを見出した。例えば、このような位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、優れたクリアランス（長い体内滞留時間）、低い凝集率（高いモノマー比率）、カテプシンＢによる高い切断性（ヒト細胞内での機能性物質の高い放出能）、およびマウス血漿中での高い安定性を有する。このような位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、コンジュゲート分子表面に露出し易い側鎖先端またはその付近に親水性基を有するため分子全体の親水性を効率的に向上させることができ、また、上記のような優れた性質を示すことができる。

　本発明者らはまた、このような位置選択的なコンジュゲートの作製に有用な抗体誘導体および化合物を開発することに成功した。式（Ｉ）～（ＶＩＩ）のような構造で表される本発明の位置選択的なコンジュゲート、抗体誘導体、および化合物は、式（Ｖ）で表される構造単位のうちＸおよびＹを除く部分構造単位を共有するという技術的特徴を有する。本発明者らは、このような技術的特徴を有する一連の発明を開発することに成功し、本発明を完成するに至った。先行技術は、本発明の位置選択的なコンジュゲートの化学構造、およびこのような化学構造と上述のような優れた性質との関係性を記載も示唆もしていない。先行技術はまた、このような位置選択的なコンジュゲートの作製に利用することができる本発明の抗体誘導体および化合物を記載も示唆もしていない。

　すなわち、本発明は、以下のとおりである。

　第１の実施形態では、本発明は、下記式（Ｉ）：

〔式中、
　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基を介して、Ｉｇに隣接するＬ_１と位置選択的に結合しており、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｄは、機能性物質を示し、
　２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率ｒは、１．５～２．５である。〕で表される構造単位を含む、抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（Ｉ）で表される構造単位は、下記式（Ｉ’）：

〔式中、
　Ｉｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｄ、およびｒは、それぞれ、式（Ｉ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される構造単位であってもよい。

　第２の実施形態では、本発明は、下記式（ＩＩ）：

〔式中、
　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基を介して、Ｉｇに隣接するＬ_１と位置選択的に結合しており、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_２は、生体直交性官能基を示し、
　２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率ｒは、１．５～２．５である。〕で表される構造単位を含む、生体直交性官能基を位置選択的に有する抗体誘導体またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（ＩＩ）で表される構造単位は、下記式（ＩＩ’）：

〔式中、
　Ｉｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_２、およびｒは、それぞれ、式（ＩＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される構造単位であってもよい。

　第３の実施形態では、本発明は、下記式（ＩＩＩ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示し、
　Ｄは、機能性物質を示す。〕で表される、生体直交性官能基、および機能性物質を有する化合物またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（ＩＩＩ）で表される化合物は、下記式（ＩＩＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＤは、それぞれ、式（ＩＩＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される化合物であってもよい。

　第４の実施形態では、本発明は、上記第３の実施形態に従う化合物またはその塩を含む、抗体の誘導体化試薬を提供する。

　第５の実施形態では、本発明は、下記式（ＩＶ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、第１生体直交性官能基を示し、
　Ｂ_２は、第２生体直交性官能基を示す。〕で表される、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（ＩＶ）で表される化合物は、下記式（ＩＶ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＢ_２は、それぞれ、式（ＩＶ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される化合物であってもよい。

　第６の実施形態では、本発明は、上記第５の実施形態に従う化合物またはその塩を含む、抗体または機能性物質の誘導体化試薬を提供する。

　第７の実施形態では、本発明は、下記式（Ｖ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　ＸおよびＹは、それぞれ独立して、１価の基を示す。〕で表される、化合物またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、下記式（Ｖ）で表される化合物は、下記式（Ｖ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｘ、およびＹは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される化合物であってもよい。

　第８の実施形態では、本発明は、下記式（ＶＩ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｘは、１価の基を示し、
　Ｒ_２は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_２は、２価の基を示し、
　Ｂ_２は、生体直交性官能基を示す。〕で表される、生体直交性官能基を有する化合物またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（ＶＩ）で表される化合物は、下記式（ＶＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＸは、それぞれ、式（ＶＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれ、
　Ｒ_２は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_２は、２価の基を示し、
　Ｂ_２は、生体直交性官能基を示す。〕で表される化合物であってもよい。

　第９の実施形態では、本発明は、下記式（ＶＩＩ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｙは、１価の基を示し、
　Ｒ_１は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１は、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示す。〕で表される、生体直交性官能基を有する化合物またはその塩を提供する。

　特定の実施形態では、式（ＶＩＩ）で表される化合物は、下記式（ＶＩＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＹは、それぞれ、式（ＶＩＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれ、
　Ｒ_１は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１は、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示す。〕で表される化合物であってもよい。

　好ましい実施形態では、上記イムノグロブリン単位は、ヒトイムノグロブリン単位であってもよい。

　より好ましい実施形態では、上記ヒトイムノグロブリン単位は、ヒトＩｇＧ抗体であってもよい。

　好ましい実施形態では、上記リジン残基は、Ｅｕ　ｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位に存在するものであってもよい。

　好ましい実施形態では、位置選択的な結合は、リジン残基の側鎖中のアミノ基、およびＬ_１中のカルボニル基の結合によるアミド結合により達成されるものであってもよい。

　好ましい実施形態では、上記ｒは、１．９～２．１であってもよい。

　好ましい実施形態では、親水性基は、カルボン酸基、スルホン酸基、水酸基、ポリエチレングリコール基、ポリサルコシン基、および糖部分からなる群より選ばれる１以上の基であってもよい。

　好ましい実施形態では、環Ａは、置換基を有していてもよいフェニレン基であってもよい。

　好ましい実施形態では、機能性物質は、医薬、標識物質、または安定化剤であってもよい。

　好ましい実施形態では、上記位置選択的なコンジュゲートまたは抗体誘導体は、サイズ排除クロマトグラフィーにより分析したときに、２．６％以下の凝集率を示していてもよい。

　好ましい実施形態では、親水性基を含んでいてもよい２価の基（－Ｌ_ＨＧ－）は、下記式（ａ）：
－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ１－（Ｃ＝Ｏ）_ｎ２－（ＮＲ_ＨＧ）_ｎ３－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ４－　（ａ）
〔式中、
　複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　ｎ１は、０～３の整数であり、
　ｎ２は、０または１の整数であり、
　ｎ３は、０または１の整数であり、
　ｎ４は、０～３の整数である。〕で表される２価の基であってもよい。

　より好ましい実施形態では、式（ａ）で表される２価の基は、下記式（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）：
（ａ１）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；
（ａ２）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－（Ｃ＝Ｏ）－（ＮＲ_ＨＧ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；または
（ａ３）　－（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_２－；
〔式中、
　複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含む炭素原子数１～６のアルキル基を示す。〕で表される２価の基であってもよい。

　好ましい実施形態では、親水性基は、それぞれ独立して、カルボン酸基、スルホン酸基、または水酸基であってもよい。

　より好ましい実施形態では、親水性基は、カルボン酸基であってもよい。

　好ましい実施形態では、生体直交性官能基は、マレイミド残基、チオール残基、フラン残基、ハロカルボニル残基、アルケン残基、アルキン残基、アジド残基、またはテトラジン残基であってもよい。

　本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、長い体内滞留時間、高いモノマー比率（低い凝集率）、ヒト細胞内での機能性物質の高い放出能、およびマウス血漿中の高い安定性等の優れた性質を有し得る。
　本発明の抗体誘導体および化合物またはそれらの塩、および試薬は、例えば、上記位置選択的なコンジュゲートの製造における合成中間体として有用である。

図１は、式（Ｉ）で表される本発明の位置選択的なコンジュゲート、式（ＩＩ）で表される本発明の抗体誘導体、ならびに式（ＩＩＩ）～（ＶＩＩ）で表される本発明の化合物の相互関係を示す図である。これらの物質は、式（Ｖ）で表される構造単位のうちＸおよびＹを除く部分構造単位を共有する。また、これらの物質は、図１中に示したスキームにより合成することができる。したがって、本発明は、合成中間体および最終合成物の関係にある一連の発明を提供する。図２は、式（Ｉ）で表される本発明の位置選択的なコンジュゲート、式（ＩＩ）で表される本発明の抗体誘導体、ならびに式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）で表される本発明の化合物の合成概要を示す図である。図３は、式（ＩＶ）～（ＶＩＩ）で表される本発明の化合物の合成概要の一例を示す図である。ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド

１．一般的な用語の定義
　本発明において、用語「抗体」は、以下のとおりである。また、用語「イムノグロブリン単位」は、このような抗体の基本構成要素である２価の単量体単位に対応するものであり、２個の重鎖および２個の軽鎖を含む単位である。したがって、イムノグロブリン単位について、その由来、種類（ポリクローナルもしくはモノクローナル、アイソタイプ、および全長抗体もしくは抗体断片）、抗原、リジン残基の位置、および位置選択性の定義、例、および好ましい例は、以下に説明する抗体のものと同様である。

　抗体の由来は、特に限定されず、例えば、哺乳動物、鳥類（例、ニワトリ）等の動物に由来するものであってもよい。好ましくは、イムノグロブリン単位は、哺乳動物に由来する。このような哺乳動物としては、例えば、霊長類（例、ヒト、サル、チンパンジー）、齧歯類（例、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ）、愛玩動物（例、イヌ、ネコ）、家畜（例、ウシ、ブタ、ヤギ）、使役動物（例、ウマ、ヒツジ）が挙げられ、好ましくは霊長類または齧歯類であり、より好ましくはヒトである。

　抗体の種類は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であってもよい。抗体はまた、２価の抗体（例、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）、または４価以上の抗体（例、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体）であってもよい。好ましくは、抗体は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体としては、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、所定の糖鎖が付加された抗体（例、Ｎ型糖鎖結合コンセンサス配列等の糖鎖結合コンセンサス配列を有するように改変された抗体）、二重特異性抗体、Ｆｃ領域タンパク質、Ｆｃ融合タンパク質が挙げられる。モノクローナル抗体のアイソタイプとしては、例えば、ＩｇＧ（例、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＹが挙げられる。本発明では、モノクローナル抗体として、全長抗体、または可変領域ならびにＣＨ１ドメインおよびＣＨ２ドメインを含む抗体断片を利用できるが、全長抗体が好ましい。抗体は、好ましくはヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、より好ましくはヒトＩｇＧ全長モノクローナル抗体である。

　抗体の抗原としては、任意の抗原を用いることができる。例えば、このような抗原としては、タンパク質〔オリゴペプチド、ポリペプチドを含む。糖等の生体分子で修飾されたタンパク質（例、糖タンパク質）であってもよい〕、糖鎖、核酸、低分子化合物が挙げられる。好ましくは、抗体は、タンパク質を抗原とする抗体であってもよい。タンパク質としては、例えば、細胞膜受容体、細胞膜受容体以外の細胞膜タンパク質（例、細胞外基質タンパク質）、リガンド、可溶性受容体が挙げられる。

　より具体的には、抗体の抗原であるタンパク質は、疾患標的タンパク質であってもよい。疾患標的タンパク質としては、例えば、以下が挙げられる。

（１）癌領域
　ＰＤ－Ｌ１、ＧＤ２、ＰＤＧＦＲα（血小板由来成長因子受容体）、ＣＤ２２、ＨＥＲ２、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ＥｐＣＡＭ、フィブロネクチン、ＰＤ－１、ＶＥＧＦＲ－２、ＣＤ３３、ＨＧＦ、ｇｐＮＭＢ、ＣＤ２７、ＤＥＣ－２０５、葉酸受容体、ＣＤ３７、ＣＤ１９、Ｔｒｏｐ２、ＣＥＡＣＡＭ５、Ｓ１Ｐ、ＨＥＲ３、ＩＧＦ－１Ｒ、ＤＬＬ４、ＴＮＴ－１／Ｂ、ＣＰＡＡｓ、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、ＣＤ１０５（エンドグリン）、ＩＣＡＭ－１、ＣＤ３０、ＣＤ１６Ａ、ＣＤ３８、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＫＩＲ２ＤＬ１，２，、ＮＫＧ２Ａ、ｔｅｎａｓｃｉｎ－Ｃ、ＩＧＦ（Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、ＣＴＬＡ－４、ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ、ＣＤ１３８、ｃ－Ｍｅｔ、Ａｎｇ２、ＶＥＧＦ－Ａ、ＣＤ７９ｂ、ＥＮＰＤ３、葉酸受容体α、ＴＥＭ－１、ＧＭ２、グリピカン３、ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｆａｃｔｏｒ、ＣＤ７４、Ｎｏｔｃｈ１、Ｎｏｔｃｈ２、Ｎｏｔｃｈ３、ＣＤ３７、ＴＬＲ－２、ＣＤ３、ＣＳＦ－１Ｒ、ＦＧＦＲ２ｂ、ＨＬＡ－ＤＲ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＥｐｈＡ３、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ１２３、ｇｐＡ３３、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ７受容体、ＤＬＬ４、ＶＥＧＦ、ＲＳＰＯ、ＬＩＶ－１、ＳＬＩＴＲＫ６、Ｎｅｃｔｉｎ－４、ＣＤ７０、ＣＤ４０、ＣＤ１９、ＳＥＭＡ４Ｄ（ＣＤ１００）、ＣＤ２５、ＭＥＴ、Ｔｉｓｓｕｅ　Ｆａｃｔｏｒ、ＩＬ－８、ＥＧＦＲ、ｃＭｅｔ、ＫＩＲ３ＤＬ２、Ｂｓｔ１（ＣＤ１５７）、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡ、ＧＩＴＲ、ＴＡＭ（ｔｕｍｏｒ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ）、ＣＥＡ、ＤＬＬ４、Ａｎｇ２、ＣＤ７３、ＦＧＦＲ２、ＣＸＣＲ４、ＬＡＧ－３、ＧＩＴＲ、Ｆｕｃｏｓｙｌ　ＧＭ１、ＩＧＦ－１、Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ　２、ＣＳＦ－１Ｒ、ＦＧＦＲ３、ＯＸ４０、ＢＣＭＡ、ＥｒｂＢ３、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＰＴＫ７、ＥＦＮＡ４、ＦＡＰ、ＤＲ５、ＣＥＡ、Ｌｙ６Ｅ、ＣＡ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＬＡＭＰ１、ｔｉｓｓｕｅ　ｆａｃｔｏｒ、ＥＰＨＡ２、ＤＲ５、Ｂ７－Ｈ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ２、α２－ＰＩ、Ａ３３、ＧＤＦ１５、ＣＡＩＸ、ＣＤ１６６、ＲＯＲ１、ＧＩＴＲ、ＢＣＭＡ、ＴＢＡ、ＬＡＧ－３、ＥｐｈＡ２、ＴＩＭ－３、ＣＤ－２００、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１６Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＰＩＧＦ、Ａｘｌ、ＭＩＣＡ／Ｂ、Ｔｈｏｍｓｅｎ－Ｆｒｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ、ＣＤ３９、ＣＤ３７、ＣＤ７３、ＣＬＥＣ１２Ａ、Ｌｇｒ３、トランスフェリン受容体、ＴＧＦβ、ＩＬ－１７、５Ｔ４、ＲＴＫ、Ｉｍｍｕｎｅ　Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　Ｐｒｏｔｅｉｎ、ＮａＰｉ２ｂ、ルイス血液型Ｂ抗原、Ａ３４、Ｌｙｓｉｌ－Ｏｘｉｄａｓｅ、ＤＬＫ－１、ＴＲＯＰ－２、α９インテグリン、ＴＡＧ－７２（ＣＡ７２－４）、ＣＤ７０

（２）自己免疫疾患・炎症性疾患
　ＩＬ－１７、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＮＦ－α、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－１３、ＩＬ－２３、ＩＬ－６、ＡｃｔＲＩＩＢ、β７－Ｉｎｔｅｇｒｉｎ、ＩＬ－４αＲ、ＨＡＳ、Ｅｏｔａｘｉｎ－１、ＣＤ３、ＣＤ１９、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１５、ＣＤ３ε、Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ、ＩＬ－１β、ＩＬ－１α、ＩＬ－１７、ＴＳＬＰ（Ｔｈｙｍｉｃ　Ｓｔｒｏｍａｌ　Ｌｙｍｐｈｏｐｏｉｅｔｉｎ）、ＬＡＭＰ（Ａｌｐｈａ４　Ｂｅｔａ　７　Ｉｎｔｅｇｒｉｎ）、ＩＬ－２３、ＧＭ－ＣＳＦＲ、ＴＳＬＰ、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＴＬＲ－３、ＢＡＦＦ－Ｒ、ＭＡｄＣＡＭ、ＩＬ－３１Ｒ、ＩＬ－３３、ＣＤ７４、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ７９Ｂ、ＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、Ｃ５、ＦｃＲｎ、ＣＤ２８、ＴＬＲ４、ＭＣＡＭ、Ｂ７ＲＰ１、ＣＸＣＲ１，２　Ｌｉｇａｎｄｓ、ＩＬ－２１、Ｃａｄｈｅｒｉｎ－１１、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＬ２０、ＩＬ－３６Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＣＤ８６、ＴＮＦ－α、ＩＬ－７Ｒ、Ｋｖ１．３、α９インテグリン、ＬＩＦＨＴ

（３）脳神経疾患
　ＣＧＲＰ、ＣＤ２０、βアミロイド、βアミロイドプロトフィブリン、Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ　Ｇｅｎｅ－Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＬＩＮＧＯ（Ｉｇ　Ｄｏｍａｉｎ　Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１）、αシヌクレイン、細胞外ｔａｕ、ＣＤ５２、インスリン受容体、ｔａｕタンパク、ＴＤＰ－４３、ＳＯＤ１、ＴａｕＣ３、ＪＣウイルス

（４）感染症
　Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ　ｔｏｘｉｎ　Ｂ、サイトメガロウイルス、ＲＳウイルス、ＬＰＳ、Ｓ．Ａｕｒｅｕｓ　Ａｌｐｈａ－ｔｏｘｉｎ、Ｍ２ｅタンパク、Ｐｓｌ、ＰｃｒＶ、Ｓ．Ａｕｒｅｕｓ　ｔｏｘｉｎ、インフルエンザＡ、Ａｌｇｉｎａｔｅ、黄色ブドウ球菌、ＰＤ－Ｌ１、インフルエンザＢ、アシネトバクター、Ｆ－ｐｒｏｔｅｉｎ、Ｅｎｖ、ＣＤ３、病原性大腸菌、クレブシエラ、肺炎球菌

（５）遺伝性・希少疾患
　アミロイドＡＬ、ＳＥＭＡ４Ｄ（ＣＤ１００）、インスリン受容体、ＡＮＧＰＴＬ３、ＩＬ４、ＩＬ１３、ＦＧＦ２３、副腎皮質刺激ホルモン、トランスサイレチン、ハンチンチン

（６）眼疾患
　Ｆａｃｔｏｒ　Ｄ、ＩＧＦ－１Ｒ、ＰＧＤＦＲ、Ａｎｇ２、ＶＥＧＦ－Ａ、ＣＤ－１０５（Ｅｎｄｏｇｌｉｎ）、ＩＧＦ－１Ｒ、βアミロイド

（７）骨・整形外科領域
　Ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ、Ｍｙｏｓｔａｔｉｎ、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ－１、ＧＤＦ８、ＲＮＡＫＬ、ＨＡＳ、Ｓｉｇｌｅｃ－１５

（８）血液疾患
　ｖＷＦ、Ｆａｃｔｏｒ　ＩＸａ、Ｆａｃｔｏｒ　Ｘ、ＩＦＮγ、Ｃ５、ＢＭＰ－６、Ｆｅｒｒｏｐｏｒｔｉｎ、ＴＦＰＩ

（９）その他の疾患
　ＢＡＦＦ（Ｂ　ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ）、ＩＬ－１β、ＰＣＳＫ９、ＮＧＦ、ＣＤ４５、ＴＬＲ－２、ＧＬＰ－１、ＴＮＦＲ１、Ｃ５、ＣＤ４０、ＬＰＡ、プロラクチン受容体、ＶＥＧＦＲ－１、ＣＢ１、Ｅｎｄｏｇｌｉｎ、ＰＴＨ１Ｒ、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＩＬ－１β、ＡＴ２－Ｒ、ＩＡＰＰ

　モノクローナル抗体の具体例としては、特定のキメラ抗体（例、リツキシマブ、バシリキシマブ、インフリキシマブ、セツキシマブ、シルツキシマブ、ディヌツキシマブ、オルタトキサシマブ）、特定のヒト化抗体（例、ダクリヅマブ、パリビズマブ、トラスツズマブ、アレンツズマブ、オマリヅマブ、エファリヅマブ、ベバシヅマブ、ナタリヅマブ（ＩｇＧ４）、トシリヅマブ、エクリヅマブ（ＩｇＧ２）、モガムリヅマブ、ペルツヅマブ、オビヌツヅマブ、ベドリヅマブ、ペンプロリヅマブ（ＩｇＧ４）、メポリヅマブ、エロツヅマブ、ダラツムマブ、イケセキヅマブ（ＩｇＧ４）、レスリヅマブ（ＩｇＧ４）、アテゾリヅマブ）、特定のヒト抗体（例、アダリムマブ（ＩｇＧ１）、パニツムマブ、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、カナキヌマブ、オファツムマブ、デノスマブ（ＩｇＧ２）、イピリムマブ、ベリムマブ、ラキシバクマブ、ラムシルマブ、ニボルマブ、デュピルマブ（ＩｇＧ４）、セクキヌマブ、エボロクマブ（ＩｇＧ２）、アリロクマブ、ネシツムマブ、ブロダルマブ（ＩｇＧ２）、オララツマブ）が挙げられる（ＩｇＧサブタイプに言及していない場合、ＩｇＧ１であることを示す）。

　抗体中のアミノ酸残基の位置、および重鎖の定常領域の位置（例、ＣＨ２ドメイン）についてはＥＵ　ｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｈａｒｔ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／Ｈｕ＿ＩＧＨＧｎｂｅｒ．ｈｔｍｌを参照）。例えば、ヒトＩｇＧを対象とする場合、２４６位のリジン残基は、ヒトＩｇＧ　ＣＨ２領域の１６番目のアミノ酸残基に相当し、２４８位のリジン残基は、ヒトＩｇＧ　ＣＨ２領域の１８番目のアミノ酸残基に相当し、２８８位のリジン残基は、ヒトＩｇＧ　ＣＨ２領域の５８番目のアミノ酸残基に相当し、２９０位のリジン残基は、ヒトＩｇＧ　ＣＨ２領域の６０番目のアミノ酸残基に相当し、３１７位のリジン残基は、ヒトＩｇＧ　ＣＨ２領域の８７番目のアミノ酸残基に相当する。２４６／２４８位の表記は、２４６位または２４８位のリジン残基が対象であることを示す。２８８／２９０位の表記は、２８８位または２９０位のリジン残基が対象であることを示す。

　本発明によれば、抗体を構成するイムノグロブリン単位中の重鎖における特定のリジン残基（例、２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位のリジン残基）を位置選択的に修飾することができる（例、国際公開第２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９／２４０２８８号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、および国際公開第２０２０／０９０９７９号を参照）。本明細書において、「位置選択的」または「位置選択性」とは、抗体において特定のアミノ酸残基が特定の領域に偏在していないにもかかわらず、抗体中の特定のアミノ酸残基と結合できる所定の構造単位が、抗体中の特定の領域に偏在することをいう。したがって、「位置選択的に有する」、「位置選択的な結合」、「位置選択性での結合」等の位置選択性に関連する表現は、１個以上の特定のアミノ酸残基を含む標的領域における所定の構造単位の保有率または結合率が、標的領域における当該特定のアミノ酸残基と同種である複数個のアミノ酸残基を含む非標的領域における当該構造単位の保有率または結合率よりも有意なレベルで高いことを意味する。このような位置選択性は、５０％以上であり、好ましくは６０％以上、より好ましくは７０％以上、さらにより好ましくは８０％以上、特に好ましくは９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、または１００％であってもよい。

　本発明では、抗体中の重鎖における特定のリジン残基が位置選択的に修飾されている限り、他の位置の特定のアミノ酸残基がさらに位置選択的に修飾されていてもよい。例えば、抗体における所定の位置の特定のアミノ酸残基を位置選択的に修飾する方法は、国際公開第２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９／２４０２８８号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、および国際公開第２０２０／０９０９７９号に記載されている。このような特定のアミノ酸残基としては、修飾し易い側鎖（例、アミノ基、カルボキシ基、アミド基、ヒドロキシ基、チオール基）を有するアミノ酸残基（例、リジン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基、アスパラギン残基、グルタミン残基、スレオニン残基、セリン残基、チロシン残基、システイン残基）を利用できるが、好ましくは、アミノ基を含む側鎖を有するリジン残基、ヒドロキシ基を含む側鎖を有するチロシン残基、セリン残基、およびスレオニン残基、またはチオール基を含む側鎖を有するシステイン残基であり、より好ましくは、リジン残基であってもよい（すなわち、２４６／２４８位のリジン残基、２８８／２９０位のリジン残基、および３１７位のリジン残基のうちの、２つのリジン残基が位置選択的に二重修飾されていてもよく、３つのリジン残基が位置選択的に三重修飾されていてもよい）。

（ハロゲン原子）
　ハロゲン原子としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。

（１価の基）
　１価の基としては、例えば、１価の炭化水素基、および１価の複素環基が挙げられる。　　　

　１価の基は、１個以上（例えば１～１０個、好ましくは１～８個、より好ましくは１～６個、さらにより好ましくは１～５個、特に好ましくは１～３個）の後述する置換基により置換されていてもよい。

（１価の炭化水素基、およびそれに関連する用語）
　１価の炭化水素基としては、例えば、１価の鎖状炭化水素基、１価の脂環式炭化水素基、および１価の芳香族炭化水素基が挙げられる。

　１価の鎖状炭化水素基とは、鎖状構造のみで構成された炭化水素基を意味し、主鎖に環状構造を含まない。ただし、鎖状構造は直鎖状であっても分岐状であってもよい。１価の鎖状炭化水素基としては、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニルが挙げられる。アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、直鎖状、または分岐状のいずれであってもよい。

　アルキルとしては、炭素原子数１～１２のアルキルが好ましく、炭素原子数１～６のアルキルがより好ましく、炭素原子数１～４のアルキルがさらに好ましい。アルキルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数１～１２のアルキルとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓ－ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシルが挙げられる。

　アルケニルとしては、炭素原子数２～１２のアルケニルが好ましく、炭素原子数２～６のアルケニルがより好ましく、炭素原子数２～４のアルケニルがさらに好ましい。アルケニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数２～１２のアルケニルとしては、例えば、ビニル、プロペニル、ｎ－ブテニルが挙げられる。

　アルキニルとしては、炭素原子数２～１２のアルキニルが好ましく、炭素原子数２～６のアルキニルがより好ましく、炭素原子数２～４のアルキニルがさらに好ましい。アルキニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数２～１２のアルキニルとしては、例えば、エチニル、プロピニル、ｎ－ブチニルが挙げられる。

　１価の鎖状炭化水素基としては、アルキルが好ましい。

　１価の脂環式炭化水素基とは、環構造として脂環式炭化水素のみを含み、芳香族環を含まない炭化水素基を意味し、脂環式炭化水素は単環、多環のいずれであってもよい。ただし、脂環式炭化水素のみで構成されている必要はなく、その一部に鎖状構造を含んでいてもよい。１価の脂環式炭化水素基としては、例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニルが挙げられ、これらは、単環、多環のいずれであってもよい。

　シクロアルキルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルキルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルキルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルキルがさらに好ましい。シクロアルキルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルキルとしては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルが挙げられる。

　シクロアルケニルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルケニルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルケニルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルケニルがさらに好ましい。シクロアルケニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルケニルとしては、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニルが挙げられる。

　シクロアルキニルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルキニルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルキニルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルキニルがさらに好ましい。シクロアルキニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルキニルとしては、例えば、シクロプロピニル、シクロブチニル、シクロペンチニル、シクロヘキシニルが挙げられる。

　１価の脂環式炭化水素基としては、シクロアルキルが好ましい。

　１価の芳香族炭化水素基とは、芳香族環構造を含む炭化水素基を意味する。ただし、芳香族環のみで構成されている必要はなく、その一部に鎖状構造や脂環式炭化水素を含んでいてもよく、芳香族環は単環、多環のいずれであってもよい。１価の芳香族炭化水素基としては、炭素原子数６～１２のアリールが好ましく、炭素原子数６～１０のアリールがより好ましく、炭素原子数６のアリールがさらに好ましい。１価の芳香族炭化水素基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数６～１２のアリールとしては、例えば、フェニル、ナフチルが挙げられる。

　１価の芳香族炭化水素基としては、フェニルが好ましい。

　これらの中でも、１価の炭化水素基としては、アルキル、シクロアルキル、アリールが好ましい。

（１価の複素環基およびそれに関連する用語）
　１価の複素環基とは、複素環式化合物の複素環から水素原子１個を除いた基をいう。１価の複素環基は、１価の芳香族複素環基、または１価の非芳香族複素環基である。複素環基を構成するヘテロ原子として、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、リン原子、ホウ素原子及びケイ素原子からなる群から選択される１種以上を含むことが好ましく、酸素原子、硫黄原子及び窒素原子からなる群から選択される１種以上を含むことがより好ましい。

　１価の芳香族複素環基としては、炭素原子数１～１５の芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数１～９の芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数１～６の芳香族複素環基がさらに好ましい。１価の芳香族複素環基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。１価の芳香族複素環基としては、例えば、ピロリル、フラニル、チオフェニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インドリル、プリニル、アントラキノリル、カルバゾニル、フルオレニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、及びフタラジニルが挙げられる。

　１価の非芳香族複素環基としては、炭素原子数２～１５の非芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数２～９の非芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数２～６の非芳香族複素環基がさらに好ましい。１価の非芳香族複素環基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。１価の非芳香族複素環基としては、例えば、オキシラニル、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ジヒドロオキサジニル、テトラヒドロオキサジニル、ジヒドロピリミジニル、及びテトラヒドロピリミジニルが挙げられる。

　これらの中でも、１価の複素環基としては、５員または６員の複素環基が好ましい。

（２価の基）
　２価の基は、２価の直鎖炭化水素基、２価の環状炭化水素基、２価の複素環基、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－、－ＮＲ_７－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_７－、－ＮＲ_７－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－ＮＲ_７－、－ＮＲ_７－Ｃ（＝Ｓ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－（Ｏ－Ｒ_８）_ｍ－、および－（Ｓ－Ｒ_８）_ｍ１－からなる群より選ばれる１個の基、またはこれらの２個以上（例えば２～１０個、好ましくは２～８個、より好ましくは２～６個、さらにより好ましくは２～５個、特に好ましくは２または３個）の基を含む主鎖構造を有する基である。Ｒ_７は、水素原子、または後述する置換基を示す。Ｒ_８は、２価の直鎖炭化水素基、２価の環状炭化水素基、または２価の複素環基を示す。ｍ１は、１～１０の整数であり、好ましくは１～８の整数であり、より好ましくは１～６の整数であり、さらにより好ましくは１～５の整数であり、特に好ましくは１～３の整数である。

　２価の直鎖炭化水素基は、直鎖アルキレン、直鎖アルケニレン、または直鎖アルキニレンである。
　直鎖アルキレンは、炭素原子数１～６の直鎖アルキレンであり、炭素原子数１～４の直鎖アルキレンが好ましい。直鎖アルキレンとしては、例えば、メチレン、エチレン、ｎ－プロピレン、ｎ－ブチレン、ｎ－ペンチレン、ｎ－へキシレンが挙げられる。
　直鎖アルケニレンは、炭素原子２～６の直鎖アルケニレンであり、炭素原子数２～４の直鎖アルケニレンが好ましい。直鎖アルケニレンとしては、例えば、エチレニレン、ｎ－プロピニレン、ｎ－ブテニレン、ｎ－ペンテニレン、ｎ－へキセニレンが挙げられる。
　直鎖アルキニレンは、炭素原子数２～６の直鎖アルキニレンであり、炭素原子数２～４の直鎖アルキニレンが好ましい。直鎖アルキニレンとしては、例えば、エチニレン、ｎ－プロピニレン、ｎ－ブチニレン、ｎ－ペンチニレン、ｎ－へキシニレンが挙げられる。
　２価の直鎖炭化水素基としては、直鎖アルキレンが好ましい。

　２価の環状炭化水素基は、アリーレン、または２価の非芳香族環状炭化水素基である。
　アリーレンとしては、炭素原子数６～１４のアリーレンが好ましく、炭素原子数６～１０のアリーレンがより好ましく、炭素原子数６のアリーレンが特に好ましい。アリーレンとしては、例えば、フェニレン、ナフチレン、アントラセニレンが挙げられる。
　２価の非芳香族環状炭化水素基としては、炭素原子数３～１２の単環式または多環式である２価の非芳香族環状炭化水素基が好ましく、炭素原子数４～１０の単環式または多環式である２価の非芳香族環状炭化水素基がより好ましく、炭素原子数５～８の単環式である２価の非芳香族環状炭化水素基が特に好ましい。２価の非芳香族環状炭化水素基としては、例えば、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロへキシレン、シクロへプチレン、シクロオクチレンが挙げられる。
　２価の環状炭化水素基としては、アリーレンが好ましい。

　２価の複素環基は、２価の芳香族複素環基、または２価の非芳香族複素環基である。複素環を構成するヘテロ原子として、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、リン原子、ホウ素原子およびケイ素原子からなる群から選択される１種以上を含むことが好ましく、酸素原子、硫黄原子および窒素原子からなる群から選択される１種以上を含むことがより好ましい。
　２価の芳香族複素環基としては、炭素原子数３～１５の２価の芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数３～９の２価の芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数３～６の２価の芳香族複素環基が特に好ましい。２価の芳香族複素環基としては、例えば、ピロールジイル、フランジイル、チオフェンジイル、ピリジンジイル、ピリダジンジイル、ピリミジンジイル、ピラジンジイル、トリアジンジイル、ピラゾールジイル、イミダゾールジイル、チアゾールジイル、イソチアゾールジイル、オキサゾールジイル、イソオキサゾールジイル、トリアゾールジイル、テトラゾールジイル、インドールジイル、プリンジイル、アントラキノンジイル、カルバゾールジイル、フルオレンジイル、キノリンジイル、イソキノリンジイル、キナゾリンジイル、およびフタラジンジイルが挙げられる。
　２価の非芳香族複素環基としては、炭素原子数３～１５の非芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数３～９の非芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数３～６の非芳香族複素環基が特に好ましい。２価の非芳香族複素環基としては、例えば、ピロールジオンジイル、ピロリンジオンジイル、オキシランジイル、アジリジンジイル、アゼチジンジイル、オキセタンジイル、チエタンジイル、ピロリジンジイル、ジヒドロフランジイル、テトラヒドロフランジイル、ジオキソランジイル、テトラヒドロチオフェンジイル、ピロリンジイル、イミダゾリジンジイル、オキサゾリジンジイル、ピペリジンジイル、ジヒドロピランジイル、テトラヒドロピランジイル、テトラヒドロチオピランジイル、モルホリンジイル、チオモルホリンジイル、ピペラジンジイル、ジヒドロオキサジンジイル、テトラヒドロオキサジンジイル、ジヒドロピリミジンジイル、およびテトラヒドロピリミジンジイルが挙げられる。
　２価の複素環基としては、２価の芳香族複素環基が好ましい。

　好ましくは、２価の基は、アルキレン、アリーレン、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ_７－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_７－、－ＮＲ_７－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、および－（Ｏ－Ｒ_８）_ｍ－からなる群より選ばれる１個の基を含む主鎖構造を有する２価の基であるか、または、
　アルキレン、アリーレン、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ_７－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_７－、－ＮＲ_７－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、および－（Ｏ－Ｒ_８）_ｍ１－からなる群より選ばれる２個以上の基を含む主鎖構造を有する２価の基であり、
　Ｒ_７が、水素原子またはアルキルであり、
　Ｒ_８が、アルキレンまたはアリーレンであり、
　ｍ１が、１～５の整数（すなわち、１、２、３、４、または５）であってもよい。
　アルキレン、アリーレン、アルキルは、上述したものと同様である。

　２価の基における主鎖構造は、１個以上（例えば１～１０個、好ましくは１～８個、より好ましくは１～６個、さらにより好ましくは１～５個、特に好ましくは１～３個）の後述する置換基により置換されていてもよい。

（置換基）
　置換基としては、以下が挙げられる：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）１価の炭化水素基；
（ｉｉｉ）１価の複素環基；
（ｉｖ）アラルキル；
（ｖ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは１価の炭化水素基を示す。）；または
（ｖｉ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは１価の炭化水素基を示す。）；
（ｖｉｉ）ニトロ基、硫酸基、スルホン酸基、シアノ基、およびカルボキシル基。

　上記置換基におけるハロゲン原子、１価の炭化水素基、および１価の複素環基の定義、例、および好ましい例は、それぞれ、上述したものと同様である。

　アラルキルとは、アリールアルキルをいう。アリールアルキルにおけるアリールおよびアルキルの定義、例および好ましい例は、上述したとおりである。アラルキルとしては、炭素原子数３～１５のアラルキルが好ましい。このようなアラルキルとしては、例えば、ベンゾイル、フェネチル、ナフチルメチル、ナフチルエチルが挙げられる。

　好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～１２のアルキル、フェニル、もしくはナフチル；
（ｉｉｉ）炭素原子数３～１５のアラルキル；
（ｉｖ）５員または６員の複素環；
（ｖ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；
（ｖｉ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；または
（ｖｉｉ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

　より好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～１２のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；　
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

　さらにより好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～６のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～６のアルキルを示す。）；
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～６のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

　特に好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～４のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～４のアルキルを示す。）；
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～４のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

（親水性基）
　親水性基は、式（Ｉ）～（ＶＩＩ）またはその下位概念の式で表される構造単位を、より親水性にすることができる基である。親水性基を、当該構造単位中の所定の部位に有することにより、マウス血漿中でコンジュゲートをより安定化することができる。このような親水性基としては、例えば、カルボン酸基、スルホン酸基、水酸基、ポリエチレングリコール基、ポリサルコシン基、糖部分が挙げられる。親水性基は、コンジュゲート中に１個以上（例、１個、２個、３個、４個、または５個）含まれていてもよい。

　ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基は、－（ＣＨ_２－ＣＨ_２－Ｏ－）_ｋ１－で表される２価の基である。コンジュゲートがポリエチレングリコール基を有する場合、コンジュゲートは、ポリエチレングリコール基の一方の結合手が水素原子、または１価の基（例、１価の炭化水素基）と結合した１価の基を有していてもよい。ｋ１は、例えば３以上の整数、好ましくは４以上の整数、より好ましくは５以上の整数、さらにより好ましくは６以上の整数であってもよい。ｋ１はまた、１５以下の整数、好ましくは１２以下の整数、より好ましくは１０以下の整数、さらにより好ましくは９個以下の整数であってもよい。より具体的には、ｋ１は、３～１５の整数、好ましくは４～１２の整数、より好ましくは５～１０の整数、さらにより好ましくは４～９の整数であってもよい。

　ポリサルコシン基は、－（ＮＣＨ_３－ＣＨ_２－ＣＯ－）_ｋ２－で表される２価の基である。ポリサルコシン基は、ＰＥＧの代替物として使用することができる。ｋ２は、例えば３以上の整数、好ましくは４以上の整数、より好ましくは５以上の整数、さらにより好ましくは６以上の整数であってもよい。ｋ２はまた、１５以下の整数、好ましくは１２以下の整数、より好ましくは１０以下の整数、さらにより好ましくは９個以下の整数であってもよい。より具体的には、ｋ２は、３～１５の整数、好ましくは４～１２の整数、より好ましくは５～１０の整数、さらにより好ましくは４～９の整数であってもよい。

　糖部分は、単糖、オリゴ糖（例、二糖、三糖、四糖、五糖）、または多糖である。糖部分は、アルドースもしくはケトース、またはそれらの組合せを含むことができる。糖部分は、リボース、デオキシリボース、キシロース、アラビノース、グルコース、マンノース、ガラクトース、もしくはフルクトース、またはアミノ糖（例、グルコサミン）等の単糖、あるいはこのような単糖を含むオリゴ糖または多糖であってもよい。

　特定の実施形態では、糖部分は、低分子量の親水性基であってもよい。低分子親水性基とは、分子量１５００以下の親水性基をいう。低分子親水性基の分子量は、好ましくは１２００以下、１０００以下、８００以下、７００以下、６００以下、５００以下、４００以下、３００以下、２００以下、または１００以下であってもよい。低分子親水性基としては、カルボン酸基、スルホン酸基、水酸基、ならびに上記分子量を満たすポリエチレングリコール基、ポリサルコシン基、糖部分（例、単糖、オリゴ糖）が挙げられる。

（生体直交性官能基）
　生体直交性官能基は、生体構成成分（例、アミノ酸、タンパク質、核酸、脂質、糖、リン酸）とは反応しない、もしくは生体構成成分に対する反応の速度が遅いが、生体構成成分以外の成分に対して選択的に反応する基をいう。生体直交性官能基は、当該技術分野において周知である（例、Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ　Ｋ．Ｂ．ｅｔ　ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４０，２００４（２０１５）；Ｂｅｒｔｏｚｚｉ　Ｃ．Ｒ．ｅｔ　ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ　２９１，２３５７（２００１）；Ｂｅｒｔｏｚｚｉ　Ｃ．Ｒ．ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１，１３（２００５）を参照）。

　本発明では、生体直交性官能基として、タンパク質に対する生体直交性官能基が用いられる。本発明の試薬により誘導体化されるべきチオール基導入抗体は、タンパク質であるためである。タンパク質に対する生体直交性官能基は、タンパク質を構成する天然の２０種のアミノ酸残基の側鎖と反応しない、もしくは当該側鎖に対する反応の速度が遅いが、目的の官能基と反応する基である。タンパク質を構成する天然の２０種のアミノ酸は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、システイン（Ｃ）、グルタミン（Ｑ）、グリシン（Ｇ）、イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、フェニルアラニン（Ｆ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、トリプトファン（Ｗ）、チロシン（Ｙ）、バリン（Ｖ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）、およびリジン（Ｋ）である。これらの天然の２０種のアミノ酸のうち、側鎖がない（すなわち、水素原子である）グリシン、ならびに側鎖が炭化水素基である（すなわち、硫黄原子、窒素原子、および酸素原子からなる群より選ばれるヘテロ原子を側鎖に含まない）アラニン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、およびバリンは、通常の反応に対して不活性である。したがって、タンパク質に対する生体直交性官能基は、通常の反応に対して不活性である側鎖を有するこれらのアミノ酸の側鎖に加えて、アスパラギン、グルタミン、メチオニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、ヒスチジン、およびリジンの側鎖に対して反応しない、または反応の速度が遅いが、目的の官能基と反応する基である。

　このような生体直交性官能基としては、例えば、アジド残基、アルデヒド残基、チオール残基、アルケン残基（換言すれば、炭素原子間二重結合を有する最小単位であるビニレン（エテニレン）部分を有していればよい。以下同様）、アルキン残基（換言すれば、炭素原子間三重結合を有する最小単位であるエチニレン部分を有していればよい。以下同様）、ハロゲン残基、テトラジン残基、ニトロン残基、ヒドロキシルアミン残基、ニトリル残基、ヒドラジン残基、ケトン残基、ボロン酸残基、シアノベンゾチアゾール残基、アリル残基、ホスフィン残基、マレイミド残基、ジスルフィド残基、チオエステル残基、α―ハロカルボニル残基（例、α位にフッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を有するカルボニル残基。以下同様）、イソニトリル残基、シドノン残基、セレン残基が挙げられる。

　より具体的には、生体直交性官能基は、下記からなる群より選ばれるいずれか一つの化学構造に対応していてもよい。

〔ここで、
　Ｒ_１ａ、単一もしくは複数のＲ_１ｂ、および単一もしくは複数のＲ_１ｃは、同一もしくは異なって、上述の置換基、または電子吸引基であり、
　・は、結合手である。〕

　電子吸引基としては、例えば、ハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されたアルキル（例、トリフルオロメチル）、ボロン酸残基、メシル、トシル、トリフレート、ニトロ、シアノ、フェニル基、ケト基（例、アシル）が挙げられ、ハロゲン原子、ボロン酸残基、メシル、トシル、トリフレートが好ましい。

　特定の実施形態では、生体直交性官能基は、保護されていてもよい。保護されていてもよい生体直交性官能基とは、未保護の生体直交性官能基、または保護された生体直交性官能基をいう。未保護の生体直交性官能基は、上述の生体直交性官能基に該当する。保護された生体直交性官能基は、保護基の切断により生体直交性官能基を生成する基である。保護基の切断は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下での特定の処理により行うことができる。このような特定の処理としては、例えば、（ａ）酸性物質、塩基性物質、還元剤、酸化剤、酵素からなる群より選ばれる１種以上の物質による処理、（ｂ）光からなる群より選ばれる物理化学的刺激による処理、または（ｃ）自己分解性の切断性部分を含む切断性リンカーを用いた場合の放置が挙げられる。このような保護基およびその切断条件は、当該分野における技術常識である（例、Ｇ．Ｌｅｒｉｃｈｅ，Ｌ．　Ｃｈｉｓｈｏｌｍ，Ａ．Ｗａｇｎｅｒ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　＆　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０，５７１（２０１２）；Ｆｅｎｇ　Ｐ．　ｅｔ　ａｌ．，Ｊｏｕｎａｌ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ．１３２，１５００（２０１０）．；Ｂｅｓｓｏｄｅｓ　Ｍ．　ｅｔ　ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ，　９９，４２３（２００４）．；ＤｅＳｉｍｏｎｅ，Ｊ．Ｍ．，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ．１３２，１７９２８（２０１０）；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｄ．Ｈ．，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ，９１，１８７（２００３）；Ｓｃｈｏｅｎｍａｒｋｓ，Ｒ．Ｇ．，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ，９５，２９１（２００４））。

　保護された生体直交性官能基としては、例えば、ジスルフィド残基、エステル残基、アセタール残基、ケタール残基、イミン残基、ビシナルジオール残基が挙げられる。

　より具体的には、保護された生体直交性官能基は、以下からなる群より選ばれるいずれか一つの化学構造に対応していてもよい。

〔ここで、結合に直交する波線は、切断部位を示し、
　単一もしくは複数のＲ_２ａは、同一または異なって、水素原子、または上述の置換基からなる群より選ばれ、
　・は、結合手である。〕

　好ましくは、保護されていてもよい生体直交性官能基は、未保護の生体直交性官能基である。

（機能性物質）
　機能性物質は、抗体に任意の機能を付与する物質である限り特に限定されず、例えば、薬物、標識物質、親和性物質、輸送用物質、安定化剤が挙げられるが、好ましくは薬物、標識物質、親和性物質、または輸送用物質であってもよく、あるいは薬物または標識物質であってもよい。機能性物質はまた、単一の機能性物質であってもよく、または２以上の機能性物質が連結された物質であってもよい。

　薬物としては、任意の疾患に対する薬物であってもよい。このような疾患としては、例えば、癌（例、肺癌、胃癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、肝臓癌、甲状腺癌、前立腺癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮癌、骨癌、皮膚癌、脳腫瘍、黒色腫）、自己免疫疾患・炎症性疾患（例、アレルギー疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス）、脳神経疾患（例、脳梗塞、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症）、感染症（例、細菌感染症、ウイルス感染症）、遺伝性・希少疾患（例、遺伝性球状赤血球症、非ジストロフィー筋緊張症）、眼疾患（例、加齢黄斑変性症、糖尿病網膜症、網膜色素変性症）、骨・整形外科領域の疾患（例、変形性関節症）、血液疾患（例、白血病、紫斑病）、その他の疾患（例、糖尿病、高脂血症等の代謝異常症、肝臓疾患、腎疾患、肺疾患、循環器系疾患、消化器官系疾患）が挙げられる。薬物は、疾患の予防または治療薬、副作用の緩和薬であってもよい。

　より具体的には、薬物は、抗癌剤であってもよい。抗癌剤としては、例えば、化学療法剤、毒素、放射性同位体またはそれを含む物質が挙げられる。化学療法剤としては、例えば、ＤＮＡ損傷剤、代謝拮抗薬、酵素阻害剤、ＤＮＡインターカレート剤、ＤＮＡ切断剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ＤＮＡ結合阻害剤、チューブリン結合阻害剤、細胞傷害性ヌクレオシド、白金化合物が挙げられる。毒素としては、例えば、細菌毒素（例、ジフテリア毒素）、植物毒素（例、リシン）が挙げられる。放射性同位体としては、例えば、水素原子の放射性同位体（例、^３Ｈ）、炭素原子の放射性同位体（例、^１４Ｃ）、リン原子の放射性同位体（例、^３２Ｐ）、硫黄原子の放射性同位体（例、３５^Ｓ）、イットリウムの放射性同位体（例、^９０Ｙ）、テクネチウムの放射性同位体（例、^９９ｍＴｃ）、インジウムの放射性同位体（例、^１１１Ｉｎ）、ヨウ素原子の放射性同位体（例、^１２３Ｉ、^１２５Ｉ、^１２９Ｉ、^１３１Ｉ)、サマリウムの放射性同位体（例、^１５３Ｓｍ）、レニウムの放射性同位体（例、^１８６Ｒｅ）、アスタチンの放射性同位体（例、^２１１Ａｔ）、ビスマスの放射性同位体（例、^２１２Ｂｉ）が挙げられる。更に具体的には、薬物として、オーリスタチン（ＭＭＡＥ、ＭＭＡＦ）、メイタンシン（ＤＭ１、ＤＭ４）、ＰＢＤ（ピロロベンゾジアゼピン）、ＩＧＮ、カンプトテシン類縁体、カリケアミシン、デュオカルミシン、エリブリン、アントラサイクリン、ｄｍＤＮＡ３１、ツブリシンが挙げられる。

　標識物質は、標的（例、組織、細胞、物質）の検出を可能にする物質である。標識物質としては、例えば、酵素（例、ペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ）、親和性物質（例、ストレプトアビジン、ビオチン、ジゴキシゲニン、アプタマー）、蛍光物質（例、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質）、発光物質（例、ルシフェリン、エクオリン、アクリジニウムエステル、トリス（２，２’－ビピリジル）ルテニウム、ルミノール）、放射性同位体（例、上述したもの）、またはそれを含む物質が挙げられる。

　親和性物質は、標的に対する親和性を有する物質である。親和性物質としては、例えば、抗体等の親和性タンパク質またはペプチド、アプタマー、レクチン、標的核酸に対する相補鎖が挙げられる。親和性物質は、好ましくは、親和性タンパク質または親和性ペプチドであり、より好ましくは、抗体であってもよい。機能性物質として用いられる抗体が由来する動物の種類は、上述したものと同様である。

　機能性物質として用いられる抗体の種類は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であってもよい。抗体はまた、２価の抗体（例、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）、または４価以上の抗体（例、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体）であってもよい。好ましくは、抗体は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体としては、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、所定の糖鎖が付加された抗体（例、Ｎ型糖鎖結合コンセンサス配列等の糖鎖結合コンセンサス配列を有するように改変された抗体）、二重特異性抗体、Ｆｃ領域タンパク質、Ｆｃ融合タンパク質が挙げられる。モノクローナル抗体のアイソタイプとしては、例えば、ＩｇＧ（例、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＹが挙げられる。機能性物質として用いられる抗体としては、例えば、全長抗体およびそのフラグメント（フラグメント抗体）が挙げられる。フラグメント抗体は、所望の抗原に対する結合性を維持していればよく、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖが挙げられる。

　機能性物質として用いられる抗体の抗原性は、本発明の抗体、抗体誘導体、およびコンジュゲートにおけるイムノグロブリン単位の抗原性と同じであっても異なっていてもよく、異なることが好ましい。また、機能性物質として用いられる抗体の由来は、当該イムノグロブリン単位の由来と、同じであっても異なっていてもよく、異なることが好ましい。したがって、機能性物質として用いられる抗体は、上述のモノクローナル抗体の具体例で言及された、特定のキメラ抗体、特定のヒト化抗体、もしくは特定のヒト抗体、またはそれらに由来する抗体であってもよい。機能性物質として用いられる抗体はまた、上述のモノクローナル抗体の具体例で言及された、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４、またはそれに由来する抗体であってもよい。

　輸送用物質は、化合物の輸送能を有する物質である。輸送用物質としては、タンパク質外殻（例、マルチマー）中に化合物を内包できる物質（例、ヒトフェリチン等のフェリチン、ウイルス粒子、ウイルス様粒子）が好ましい。

　安定化剤は、抗体の安定化を可能にする物質である。安定化剤としては、例えば、ジオール類、グリセリン、非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、天然系界面活性剤、サッカリド、およびポリオール類が挙げられる。

　機能性物質はまた、ペプチド、タンパク質、核酸、低分子有機化合物、糖鎖、脂質、高分子ポリマー、金属（例、金）、キレーターであってもよい。ペプチドとしては、例えば、細胞膜透過ペプチド、血液脳関門透過性ペプチド、ペプチド医薬品が挙げられる。タンパク質としては、例えば、酵素、サイトカイン、フラグメント抗体、レクチン、インターフェロン、血清アルブミン、抗体が挙げられる。核酸としては、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、人工核酸が挙げられる。核酸としてはまた、例えば、ＲＮＡ干渉誘導性核酸（例、ｓｉＲＮＡ）、アプタマー、アンチセンスが挙げられる。低分子有機化合物としては、例えば、タンパク質分解誘導キメラ分子、色素、光分解性化合物が挙げられる。

　特定の実施形態では、機能性物質は、芳香族環を有する物質であってもよい。芳香族環を有する物質としては、例えば、モノメチルアウリスタチン（ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）〔例、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）〕、またはエキサテカン（Ｅｘａｔｅｃａｎ）が挙げられる。

（塩）
　本発明において、用語「塩」としては、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、無機塩基との塩、有機塩基との塩、およびアミノ酸との塩が挙げられる。無機酸との塩としては、例えば、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸との塩が挙げられる。有機酸との塩としては、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、シュウ酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸との塩が挙げられる。無機塩基との塩としては、例えば、アルカリ金属（例、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例、カルシウム、マグネシウム）、および亜鉛、アルミニウム等の他の金属、ならびにアンモニウムとの塩が挙げられる。有機塩基との塩としては、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、プロピレンジアミン、エチレンジアミン、ピリジン、エタノールアミン、モノアルキルエタノールアミン、ジアルキルエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンとの塩が挙げられる。アミノ酸との塩としては、例えば、塩基性アミノ酸（例、アルギニン、ヒスチジン、リジン、オルニチン）、および酸性アミノ酸（例、アスパラギン酸、グルタミン酸）との塩が挙げられる。塩は、好ましくは、無機酸（例、塩化水素）との塩、または有機酸（例、トリフルオロ酢酸）との塩である。

２．位置選択的なコンジュゲートまたはその塩
　本発明は、上記式（Ｉ）で表される構造単位を含む、抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩を提供する。本発明のコンジュゲートの位置選択性は、上述したとおりである。

　本発明に関連して提示される式（Ｉ）および他の式において、－（ハイフン）は、その両側に存在する２つの単位（例、原子、基）が共有結合していることを示す。

　抗体は、上述したようなイムノグロブリン単位を含む。このような抗体としては、例えば、２個の重鎖および２個の軽鎖を含み、かつ重鎖間および重鎖と軽鎖との間にジスルフィド結合を有するイムノグロブリン単位を含むＩｇＧ抗体、ＩｇＤ抗体およびＩｇＥ抗体、４個の重鎖および４個の軽鎖を含み、かつ重鎖間および重鎖と軽鎖との間にジスルフィド結合を有するイムノグロブリン単位を含むＩｇＡ抗体、８個の重鎖および８個の軽鎖を含み、かつ重鎖間および重鎖と軽鎖との間にジスルフィド結合を有するイムノグロブリン単位を含むＩｇＭ抗体が挙げられ、ＩｇＧ抗体（例、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）が好ましい。抗体は、好ましくはヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、より好ましくはヒトＩｇＧ全長モノクローナル抗体である。

　位置選択的な結合は、リジン残基の側鎖中のアミノ基と、それと結合可能な原子または基（例、カルボニル基、チオカルボニル基）との間の結合により達成されることが好ましく、リジン残基の側鎖中のアミノ基とカルボニル基との間のアミド結合により達成されることがより好ましい。

　式（Ｉ）において、ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示す。親水性基、および１価の基は、上述したとおりである。好ましくは、ＨＧは、親水性基を含む１価の基を示していてもよい。

　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖（すなわち、－ＣＨ（ＣＨ_３）_２）を示す。あるいは、Ｒ_Ａは、フェニルアラニン残基、スレオニン残基、ロイシン残基、またはアラニン残基の側鎖であってもよい。Ｒ_Ａにおけるアミノ酸残基の立体配置は、Ｌ体であってもＤ体であってもよく、Ｌ体が好ましい。

　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基の側鎖（すなわち、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣＯＮＨ_２）、またはアラニン残基の側鎖（すなわち、－ＣＨ_３）を示す。あるいは、Ｒ_Bは、グルタミン酸残基、グルタミン残基、リジン残基、アルギニン残基、スレオニン残基、またはメチオニン残基の側鎖であってもよい。Ｒ_Ｂにおけるアミノ酸残基の立体配置は、それぞれ、Ｌ体であってもＤ体であってもよく、Ｌ体が好ましい。

　Ｒ_ＡおよびＲ_Ｂの組み合わせは、Ｒ_Ａがバリン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがシトルリン残基またはアラニン残基の側鎖であることが好ましい。あるいは、Ｒ_ＡおよびＲ_Ｂの組み合わせの好ましい他の例は、以下である：
（ａ）Ｒ_Ａがバリン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがグルタミン酸残基、リジン残基、アルギニン残基、またはスレオニン残基の側鎖であること；
（ｂ）Ｒ_Ａがフェニルアラニン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがリジン残基、アルギニン残基、またはグルタミン残基の側鎖であること；
（ｃ）Ｒ_Ａがスレオニン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがスレオニン残基、またはメチオニン残基の側鎖であること；
（ｄ）Ｒ_Ａがロイシン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがグルタミン酸残基の側鎖であること；および
（ｅ）Ｒ_Ａがアラニン残基の側鎖であり、かつ、Ｒ_Ｂがアラニン残基の側鎖であること。

　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示す。２価の芳香族環基は、上述したアリーレンまたは２価の芳香族複素環である。２つの隣接原子（炭素原子および窒素原子）が結合している２価の芳香族環基の位置は、カテプシンＢによりシトルリンのカルボキシ末端側に存在するアミド結合が切断される場合、π電子の共役より－Ｏ－（Ｃ＝Ｏ）－における酸素原子とカルボニル基との間で開裂が生じる限り（例、背景技術における「（Ｂ）ヒト癌細胞内のリソソーム中で説明」で示される切断反応を参照）、特に限定されない。このような位置は、当該分野における技術常識であり、２価の芳香族環基の種類等の因子に応じて、当業者であれば容易に決定することができる。

　好ましくは、環Ａは、置換基を有していてもよい２価の単環式芳香族環基であってもよい。２価の芳香族環基は、フェニレン基、または２価の単環式芳香族複素環基である。

　より好ましくは、環Ａは、２価の６員環式芳香族環基であってもよい。６員環式芳香族環基としては、例えば、上述した種々の基が挙げられる。この場合、２つの隣接原子が結合している２価の６員環式芳香族環基の位置は、オルト位、またはパラ位であり、好ましくはパラ位である。

　さらにより好ましくは、環Ａは、置換基を有していてもよいフェニレン基であってもよい。この場合、２つの隣接原子が結合しているフェニレン基の位置は、オルト位、またはパラ位であり、好ましくはパラ位である。

　置換基を有していてもよい２価の芳香族環基における置換基は、上述したとおりである。このような置換基は、上述したような電子吸引基であってもよい。

　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示す。１価の基は、上述したとおりである。Ｒ_１、およびＲ_２における１価の基は、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基が好ましく、置換基を有していてもよいアルキルがより好ましく、アルキルがさらにより好ましい。アルキルとしては、上述したものが好ましい。

　特定の実施形態では、Ｒ_１、およびＲ_２で示される１価の基は、アミノ基の保護基であってもよい。このような保護基としては、例えば、アルキルカルボニル基（アシル基）（例、アセチル基、プロポキシ基、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基等のブトキシカルボニル基）、アルキルオキシカルボニル基（例、フルオレニルメトキシカルボニル基）、アリールオキシカルボニル基、アリールアルキル（アラルキル）オキシカルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル基）が挙げられる。

　好ましい実施形態では、Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、またはアミノ基の保護基を示す。好ましくは、Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ、水素原子であってもよい。

　Ｌ_１、およびＬ_２で示される２価の基は、上述したとおりである。

　特定の実施形態では、Ｌ_１、およびＬ_２で示される２価の基は、それぞれ、互いに反応可能な２つの生体直交性官能基の反応により生成する部分を含んでいてもよい。互いに反応可能な２つの生体直交性官能基の組合せは周知であるため、当業者は、このような組合せを適宜選択して、互いに反応可能な２つの生体直交性官能基の反応により生成する部分を含む２価の基を適宜設定することができる。互いに反応可能な生体直交性官能基の組合せとしては、例えば、チオール残基とマレイミド残基の組み合わせ、フラン残基とマレイミド残基の組み合わせ、チオール残基とハロカルボニル残基の組み合わせ（置換反応により、ハロゲンがチオールに置換される）、アルキン残基（好ましくは、上述したような置換基により置換されていてもよい、炭素原子間３重結合を有する環基）とアジド残基の組み合わせ、テトラジン残基とアルケン残基の組み合わせ、テトラジン残基とアルキン残基の組み合わせ、チオール残基と別のチオール残基の組み合わせ（ジスルフィド結合）が挙げられる。したがって、上記部分は、チオール残基とマレイミド残基の反応により生成する基、フラン残基とマレイミド残基の反応により生成する基、チオール残基とハロカルボニル残基の反応により生成する基、アルキン残基とアジド残基の反応により生成する基、またはテトラジン残基とアルケン残基の反応により生成する基、チオール残基と別のチオール残基の組み合わせにより生成するジスルフィド基であってもよい。

　特定の実施形態では、上記部分は、下記構造式のうちのいずれか一つの構造式により表される２価の基であってもよい。

〔ここで、白丸および黒丸は結合手を示す。〕

　Ｌ_１では、白丸の結合手がＩｇ結合部側に存在する原子に結合している場合、黒丸の結合手が「Ｎ－Ｒ_１」中の窒素原子（Ｎ）結合部側に存在する原子に結合していてもよく、
　白丸の結合手が「Ｎ－Ｒ_１」中の窒素原子（Ｎ）結合部側に存在する原子に結合している場合、黒丸の結合手がＩｇ結合部側に存在する原子に結合していてもよい。

　Ｌ_２では、白丸の結合手が「Ｎ－Ｒ_２」中の窒素原子（Ｎ）結合部側に存在する原子に結合している場合、黒丸の結合手が機能性物質（Ｄ）結合部側に存在する原子に結合していてもよく、
　白丸の結合手が機能性物質（Ｄ）結合部側に存在する原子に結合している場合、黒丸の結合手が「Ｎ－Ｒ_２」中の窒素原子（Ｎ）結合部側に存在する原子に結合していてもよい。

　Ｄで示される機能性物質は、上述したとおりである。

　ｒは、２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率を示し、１．５～２．５である。このような平均比率は、好ましくは１．６以上、より好ましくは１．７以上、さらにより好ましくは１．８以上、特に好ましくは１．９以上であってもよい。このような平均比率はまた、好ましくは２．４以下、より好ましくは２．３以下、さらにより好ましくは２．２以下、特に好ましくは２．１以下であってもよい。より具体的には、このような平均比率は、好ましくは１．６～２．４、より好ましくは１．７～２．３、さらにより好ましくは１．８～２．２、特に好ましくは１．９～２．１であってもよい。

　特定の実施形態では、本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、凝集し難いという所望の性質を有するため、凝集率によって特定することができる。より具体的には、本発明のコンジュゲートまたはその塩の凝集率は、５％以下であってもよい。本発明によれば、抗体の凝集を回避し易いためである。凝集率は、好ましくは４．８％以下、より好ましくは４．６％以下、さらにより好ましくは４．４％以下、特に好ましくは４．２％以下、４．０％以下、３．８％以下、３．６％以下、３．４％以下、３．２％以下、３．０％以下、２．８％以下、または２．６％以下である。抗体の凝集率は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）－ＨＰＬＣにより測定することができる（実施例およびＣｈｅｍｉｓｔｒｙＳｅｌｅｃｔ，２０２０，５，８４３５－８４３９を参照）。

　好ましい実施形態では、本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、２．６％以下の凝集率であってもよい。凝集率はまた、２．４％以下、２．２％以下、２．０％以下、１．８％以下、または１．６％以下であってもよい。

　好ましくは、式（Ｉ）で表される構造単位は、式（Ｉ’）で表されるものであってもよい。式（Ｉ’）で示されるＩｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｄ、およびｒは、それぞれ、式（Ｉ）で示されるものと同じである。

　式（Ｉ’）において、Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示す。親水性基、および２価の基は、上述したとおりである。親水性基を含んでいてもよい２価の基は、Ｌ_ＨＧに隣接する窒素原子および炭素原子を連結する主鎖中、または当該主鎖の側鎖中に含まれていてもよく、当該主鎖の側鎖中に含まれることが好ましい。

　好ましくは、親水性基を含んでいてもよい２価の基（－Ｌ_ＨＧ－）は、下記式（ａ）で表される２価の基であってもよい：
－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ１－（Ｃ＝Ｏ）_ｎ２－（ＮＲ_ＨＧ）_ｎ３－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ４－　（ａ）
（両末端に配置されたハイフン（－）は結合手を示す。）

　式（ａ）において、複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示す。親水性基および１価の基は、上述したとおりである。

　ｎ１は、０～３の整数であり、好ましくは０～２の整数であり、より好ましくは０または１の整数である。

　ｎ２は、０または１の整数である。

　ｎ３は、０または１の整数である。

　ｎ４は、０～３の整数であり、好ましくは０～２の整数であり、より好ましくは０または１の整数である。

　さらにより好ましくは、親水性基を含んでいてもよい２価の基（－Ｌ_ＨＧ－）は、下記式（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）で表される２価の基であってもよい：
（ａ１）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；
（ａ２）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－（Ｃ＝Ｏ）－（ＮＲ_ＨＧ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；または
（ａ３）　－（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_２－。

　式（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）において、複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含む炭素原子数１～６のアルキル基を示す。親水性基、および炭素原子数１～６のアルキル基は、上述したとおりである。

　式（Ｉ’）において、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示す。親水性基、および１価の基は、上述したとおりである。

　特定の実施形態では、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２で示される親水性基を含んでいてもよい１価の基は、アミノ基の保護基であってもよい。アミノ基の保護基としては、Ｒ_１、およびＲ_２について上述したものが挙げられる。例えば、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２の一方が、水素原子であり、他方が、アミノ基の保護基であってもよい。

　あるいは、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２の一方が、水素原子であり、他方が、親水性基を含む１価の基であってもよい。親水性基を含む１価の基としては、例えば、親水性基を含むアルキル基、親水性基を含むカルボキシル基、親水性基を含むアルキルカルボニル基（例、上述した基）、親水性基を含むアルキルオキシカルボニル基、親水性基を含むオキシカルボニル基が挙げられる。

　式（Ｉ’）において、少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。少なくとも１つの親水性基が含まれる部位およびその組み合わせとしては、例えば、以下が挙げられる：
（ｉ）Ｌ_ＨＧ単独；
（ｉｉ）Ｒ_ＨＧ１単独；
（ｉｉｉ）Ｒ_ＨＧ２単独；
（ｉｖ）Ｌ_ＨＧおよびＬ_ＨＧ１の組み合わせ；
（ｖ）Ｌ_ＨＧおよびＬ_ＨＧ２の組み合わせ；
（ｖｉ）Ｌ_ＨＧ１およびＬ_ＨＧ２の組み合わせ；ならびに
（ｖｉｉ）Ｌ_ＨＧ、Ｌ_ＨＧ１およびＬ_ＨＧ２の組み合わせ。
　これらのＬ_ＨＧ部位、Ｒ_ＨＧ１部位、Ｒ_ＨＧ２部位の各々に１つの親水性基が含まれていてもよく、２つ以上の親水性基が含まれていてもよい。

　上記の一連の式において説明した記号、および記号中の要素（例、切断性部位のような特定要素、または特定式）の定義、例、および好ましい例は、他の式についても同様である。

　本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、例えば、医薬、または試薬（例、診断薬、研究用試薬）として有用である。

　本発明のコンジュゲートまたはその塩は、医薬組成物の形態において提供されてもよい。このような医薬組成物は、本発明のコンジュゲートまたはその塩に加えて、医薬上許容され得る担体を含んでいてもよい。医薬上許容され得る担体としては、例えば、ショ糖、デンプン、マンニット、ソルビット、乳糖、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の賦形剤、セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ショ糖、デンプン等の結合剤、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、クエン酸カルシウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、エアロジル、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑剤、クエン酸、メントール、グリシルリシン・アンモニウム塩、グリシン、オレンジ粉等の芳香剤、安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン等の保存剤、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸等の安定剤、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウム等の懸濁剤、界面活性剤等の分散剤、水、生理食塩水、オレンジジュース等の希釈剤、カカオ脂、ポリエチレングリコール、白灯油等のベースワックスなどが挙げられるが、それらに限定されるものではない。本発明のコンジュゲートまたはその塩はまた、安定性を実現する任意の修飾（例、ＰＥＧ化）を有していてもよい。

　経口投与に好適な製剤は、水、生理食塩水、オレンジジュースのような希釈液に有効量のリガンドを溶解させた液剤、有効量のリガンドを固体や顆粒として含んでいるカプセル剤、サッシェ剤または錠剤、適当な分散媒中に有効量の有効成分を懸濁させた懸濁液剤、有効量の有効成分を溶解させた溶液を適当な分散媒中に分散させ乳化させた乳剤等である。

　医薬組成物は、非経口的な投与（例、静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、局所注入、腹腔内投与）に好適である。このような非経口的な投与に好適な医薬組成物としては、水性および非水性の等張な無菌の注射液剤があり、これには抗酸化剤、緩衝液、制菌剤、等張化剤等が含まれていてもよい。また、水性および非水性の無菌の懸濁液剤が挙げられ、これには懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、防腐剤等が含まれていてもよい。

　医薬組成物の投与量は、有効成分の種類・活性、病気の重篤度、投与対象となる動物種、投与対象の薬物受容性、体重、年齢等によって異なるが、適宜設定することができる。

　一実施形態では、本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、生体直行性官能基を位置選択的に有する抗体誘導体またはその塩を、機能性物質と反応させることにより製造することができる（図２）。このような反応は、抗体誘導体中の生体直行性官能基と機能性物質との間の反応により進行させることができる。

　機能性物質が、生体直交性官能基と反応し易い官能基を有する場合、機能性物質の当該官能基と、抗体誘導体中の生体直交性官能基とを適宜反応させることができる。生体直交性官能基と反応し易い官能基は、生体直交性官能基の具体的な種類によっても異なり得る。当業者であれば、適切な官能基を、生体直交性官能基と反応し易い官能基として適宜選択することができる（例、Ｂｏｕｔｕｒｅｉｒａ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｃｈｅｍ．　Ｒｅｖ．，２０１５，１１５，２１７４－２１９５）。生体直交性官能基と反応し易い官能基としては、例えば、生体直交性官能基がアジド残基の場合はアルキン残基が挙げられ、生体直交性官能基がチオール残基の場合はマレイミド残基およびジスルフィド残基が挙げられ、生体直交性官能基がアルデヒド残基またはケトン残基の場合はヒドラジン残基が挙げられ、生体直交性官能基がノルボルネン残基の場合はアジド残基が挙げられ、生体直交性官能基がテトラジン残基の場合はアルキン残基が挙げられるが、これらに限定されない。勿論、生体直交性官能基およびそれと反応し易い官能基の上記組み合わせでは、組み合わせを入れ代えることも可能である。したがって、上記組み合わせにおける最初の例を入れ替えた場合には、生体直交性官能基としてアルキン残基、および生体直交性官能基と反応し易い官能基としてアジド残基の組み合わせを用いることができる。

　機能性物質が、抗体誘導体中の生体直交性官能基と反応し易い官能基を有しない場合、薬物は、このような官能基を有するように誘導体化されてもよい。誘導体化は、当該分野における技術常識である（例、国際公開第２００４／０１０９５７号、米国特許出願公開第２００６／００７４００８号明細書、米国特許出願公開第２００５／０２３８６４９号明細書）。例えば、誘導体化は、任意の架橋剤を用いて行われてもよい。あるいは、誘導体化は、所望の官能基を有する特定のリンカーを用いて行われてもよい。本発明では、誘導体化された機能性物質も、機能性物質の一種にすぎないことから、単に「機能性物質」と呼称される。

　上記反応は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。例えば、このような反応は、適切な反応系、例えば緩衝液中において、室温（例、約１５～３０℃）で行うことができる。緩衝液のｐＨは、例えば５～９であり、好ましくは５．５～８．５であり、より好ましくは６．０～８．０である。緩衝液は、適切な触媒を含んでいてもよい。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。このような反応の詳細については、例えば、Ｇ．Ｊ．Ｌ．Ｂｅｒｎａｒｄｅｓ　ｅｔ　ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１１５，２１７４（２０１５）；Ｇ．Ｊ．Ｌ．Ｂｅｒｎａｒｄｅｓ　ｅｔ　ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ａｓｉａｎ．Ｊ．，４，６３０（２００９）；Ｂ．Ｇ．Ｄａｖｉｅｓ　ｅｔ　ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．，５，４７４０（２０１４）；Ａ．Ｗａｇｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ．Ｃｈｅｍ．，２５，８２５（２０１４）を参照のこと。

　別の実施形態では、本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩は、生体直行性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩を、Ｉｇ（イムノグロブリン単位）を有する原料抗体と反応させることにより製造することができる（図２）。

　上記原料抗体は、生体直交性官能基で位置選択的に修飾されたリジン残基を含む。原料抗体における生体直交性官能基は、生体直行性官能基および機能性物質を有する化合物における生体直交性官能基と互いに反応できるように選択することができる。原料抗体における生体直交性官能基としては、上述した種々の生体直行性官能基を利用することができる。汎用性の高さ等の観点から、原料抗体における生体直交性官能基は、レイミド残基、チオール残基、フラン残基、ハロカルボニル残基、アルケン残基、アルキン残基、アジド残基、またはテトラジン残基であってもよい。

　特定の実施形態では、上記原料抗体は、下記式（ＶＩＩＩ）：

〔式中、
　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基と、Ｉｇに隣接するカルボニル基との間でアミド結合を位置選択的に形成しており、
　Ｌは、－（Ｃ（Ｒ）_２）_ｍ－、－（Ｏ－Ｃ（Ｒ）_２－Ｃ（Ｒ）_２）_ｍ－、および－（Ｃ（Ｒ）_２－Ｃ（Ｒ）_２－Ｏ）_ｍ－からなる群より選ばれる２価の基であり、
　Ｒは、それぞれ独立して、水素原子、炭素原子数１～６のアルキル、炭素原子数２～６のアルケニル、または炭素原子数２～６のアルキニルであり、
　ｍは、０～１０の整数であり、
　Ｂは、Ｂ_１で表される生体直交性官能基と反応可能な生体直交性官能基であり、
　２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率ｒは、１．５～２．５である。〕で表されるイムノグロブリン単位を含んでいてもよい。上記式（ＶＩＩＩ）におけるＩｇおよびｒについての定義、例および好ましい例は、上述したものと同じである。

　ｍは、好ましくは１以上の整数、より好ましくは２以上の整数、３以上の整数、４以上の整数、または５以上の整数であってもよい。ｍはまた、好ましくは９以下の整数、より好ましくは８以下の整数、７以下の整数、または６以下の整数であってもよい。特定の場合、ｍは、１～８の整数（好ましくは２～６の整数）であってもよい。

　Ｂで示される生体直交性官能基は、上述した生体直交性官能基と同じである。

　生体直行性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩と上記原料抗体との反応は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない上述の条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。

　位置選択的なコンジュゲートまたはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、還元条件下の逆相ＨＰＬＣ、または質量分析により行うことができる。位置選択性の確認は、例えば、ペプチドマッピングにより行うことができる。ペプチドマッピングは、例えば、プロテアーゼ（例、トリプシン、キモトリプシン、）処理および質量分析により行うことができる。プロテアーゼとしては、エンドプロテアーゼが好ましい。このようなエンドプロテアーゼとしては、例えば、トリプシン、キモトリプシン、Ｇｌｕ－Ｃ、Ｌｙｓ－Ｎ、Ｌｙｓ－Ｃ、Ａｓｐ－Ｎが挙げられる。コンジュゲートまたはその塩は、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー）等の任意の精製方法により適宜精製することができる。

３．抗体誘導体またはその塩
　本発明はまた、上記式（ＩＩ）で表される構造単位を含む、生体直交性官能基を位置選択的に有する抗体誘導体またはその塩を提供する。本発明の抗体誘導体の位置選択性は、上述したとおりである。

　式（ＩＩ）において、Ｉｇ、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、およびｒは、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　Ｂ_２で示される生体直交性官能基は、上述したとおりである。

　特定の実施形態では、生体直交性官能基は、マレイミド残基、チオール残基、フラン残基、ハロカルボニル残基、アルケン残基、アルキン残基、アジド残基、またはテトラジン残基であってもよい。これらの生体直交性官能基は、反応効率に優れ、汎用性が高いため好ましい。

　好ましくは、式（ＩＩ）で表される構造単位は、式（ＩＩ’）で表されるものであってもよい。式（ＩＩ’）で表されるＩｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_２、およびｒは、それぞれ、式（ＩＩ）で示されるものと同じである。

　式（ＩＩ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　本発明の抗体誘導体またはその塩は、例えば、本発明の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩の作製のための中間体として有用である。

　本発明の抗体誘導体またはその塩は、例えば、第１生体直行性官能基および第２生体直行性官能基を有する化合物またはその塩を、Ｉｇ（イムノグロブリン単位）を有する原料抗体と反応させることにより製造することができる（図２）。原料抗体は、上述したものと同じである。

　第１生体直行性官能基および第２生体直行性官能基を有する化合物またはその塩と上記原料抗体との反応は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない上述の条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。

　抗体誘導体またはその塩の生成の確認は、本発明の位置選択的なコンジュゲートについて述べた方法と同様にして行うことができる（位置選択性の確認も同様）。抗体誘導体またはその塩は、本発明の位置選択的なコンジュゲートについて述べたような任意の精製方法により適宜精製することができる。

４．生体直交性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩
　本発明はまた、上記式（ＩＩＩ）で表される、生体直交性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩を提供する。

　式（ＩＩＩ）において、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、およびＤは、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示す。生体直交性官能基は、上述したとおりである。

　好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される化合物は、式（ＩＩＩ’）で表されるものであってもよい。式（ＩＩＩ’）で表されるＲ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＤは、それぞれ、式（ＩＩＩ）で示されるものと同じである。

　式（ＩＩＩ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　式（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物またはその塩は、例えば、本発明の位置選択的なコンジュゲートの作製のための中間体として有用である。式（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物またはその塩はまた、例えば、生体分子（例、抗体等のタンパク質、糖類、核酸、脂質）等の任意の物質の誘導体化に有用である。

　生体直交性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩は、例えば、第１生体直行性官能基および第２生体直行性官能基を有する化合物またはその塩を、機能性物質と反応させることにより製造することができる（図２）。機能性物質の詳細は、上述したとおりである。

　第１生体直行性官能基および第２生体直行性官能基を有する化合物またはその塩と機能性物質との反応は、適切な反応系、例えば有機溶媒系または水溶液（例、緩衝液）系において、適温（例、約１５～２００℃）で行うことができる。反応系は、適切な触媒を含んでいてもよい。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。勿論、このような反応は、上述の温和な条件下で行うこともできる。

　生体直行性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、または質量分析により行うことができる。このような化合物またはその塩は、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー）等の任意の精製方法により適宜精製することができる。

５．第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩
　本発明はまた、上記式（ＩＶ）で表される、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩を提供する。

　式（ＩＶ）において、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、およびＤは、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　Ｂ_１は、第１生体直交性官能基を示す。第１生体直交性官能基は、生体直交性官能基について上述したものと同じである。

　Ｂ_２は、第２生体直交性官能基を示す。第２生体直交性官能基は、生体直交性官能基について上述したものと同じである。

　好ましくは、第２生体直交性官能基は、第１生体直交性官能基と反応しない、または第１生体直交性官能基に対する反応性が低い生体直交性官能基であってもよい。この場合、式（ＩＶ）で表される化合物またはその塩の分子間反応を抑制することができる。したがって、第１および第２生体直交性官能基は、互いに反応しない、または互いの反応性が低い組み合わせで利用することができる。生体直交性官能基のこのような組み合わせは、当該分野において周知である。例えば、好ましい生体直交性官能基であるマレイミド残基、チオール残基、フラン残基、ハロカルボニル残基、アルケン残基、アルキン残基、アジド残基、およびテトラジン残基について、このような組み合わせの例は、以下のとおりである。

　好ましくは、式（ＩＶ）で表される化合物は、式（ＩＶ’）で表されるものであってもよい。式（ＩＶ’）で表されるＲ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＢ_２は、それぞれ、式（ＩＶ）で示されるものと同じである。

　式（ＩＶ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　式（ＩＶ）で表される本発明の化合物またはその塩は、例えば、本発明の抗体誘導体、および式（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の作製のための中間体として有用である。式（ＩＶ）で表される本発明の化合物またはその塩はまた、例えば、生体分子（例、抗体等のタンパク質、糖類、核酸、脂質）、および機能性物質等の任意の物質の誘導体化に有用である。

　一実施形態では、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩は、生体直行性官能基を有する式（ＶＩ）の化合物またはその塩を、Ｂ_１－Ｌ_１－ＮＨ－Ｒ_１で表される化合物と反応させることにより製造することができる（図３）。Ｂ_１、Ｌ_１、およびＲ_１の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。

　別の実施形態では、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩は、生体直行性官能基を有する式（ＶＩＩ）の化合物またはその塩を、炭酸ビス（４－ニトリフェニル）、およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）と反応させ、次いで、Ｂ_２－Ｌ_２－ＮＨ－Ｒ_２で表される化合物と反応させることにより製造することができる（図３）。Ｂ_２、Ｌ_２、およびＲ_２の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。

　上記反応は、適切な反応系、例えば有機溶媒系または水溶液（例、緩衝液）系において、適温（例、約１５～２００℃）で行うことができる。反応系は、適切な触媒を含んでいてもよい。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。勿論、このような反応は、上述の温和な条件下で行うこともできる。

　第１生体直行性官能基および第２生体直行性官能基を有する化合物またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、または質量分析により行うことができる。このような化合物またはその塩は、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー）等の任意の精製方法により適宜精製することができる。

６．一連の化合物またはその塩
（１）化合物またはその塩
　本発明はまた、上記式（Ｖ）で表される化合物またはその塩を提供する。

　式（Ｖ）において、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、および環Ａは、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　ＸおよびＹは、それぞれ独立して、１価の基を示す。１価の基は、上述したとおりである。

　好ましくは、式（Ｖ）で表される化合物は、式（Ｖ’）で表されるものであってもよい。式（Ｖ’）で表されるＲ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｘ、およびＹは、それぞれ、式（ＩＶ）で示されるものと同じである。

　式（Ｖ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　式（Ｖ）で表される化合物またはその塩は、例えば、本発明の位置選択的なコンジュゲート、抗体誘導体、および本発明の他の化合物の合成中間体として有用である。

　式（Ｖ）で表される化合物またはその塩は、例えば、下記式（Ｖ－１）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示す。〕で表される化合物またはその塩を、
　下記式（Ｖ－２）：

〔式中、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　ＸおよびＹは、それぞれ独立して、１価の基を示す。〕で表される化合物またはその塩と反応させることにより製造することができる（図３）。式（Ｖ－１）におけるＨＧ、Ｒ_Ａ、およびＲ_Ｂ、ならびに式（Ｖ－２）における環Ａ、Ｘ、およびＹの定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。このような反応は、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩の製造について上述した反応条件と同様の条件下で行うことができる。

（２）式（ＶＩ）で表される生体直交性官能基を有する化合物またはその塩
　本発明はまた、上記式（ＶＩ）で表される化合物またはその塩を提供する。

　式（ＶＩ）において、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_２、およびＬ_２は、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　Ｘで示される１価の基は、上述したとおりである。

　好ましくは、式（ＶＩ）で表される化合物は、式（ＶＩ’）で表されるものであってもよい。式（ＶＩ’）で表されるＲ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｘ、Ｒ_２、Ｌ_２、およびＢ_２は、それぞれ、式（ＩＶ）で示されるものと同じである。

　式（ＶＩ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　式（ＶＩ）で表される化合物またはその塩は、例えば、本発明の位置選択的なコンジュゲート、抗体誘導体、および本発明の所定の化合物の合成中間体として有用である。このような化合物またはその塩はまた、例えば、機能性物質の誘導体化に有用である。

　式（ＶＩ）で表される化合物またはその塩は、例えば、式（Ｖ）で表される化合物またはその塩を、炭酸ビス（４－ニトリフェニル）、およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）と反応させ、次いで、Ｂ_２－Ｌ_２－ＮＨ－Ｒ_２で表される化合物と反応させることにより製造することができる（図３）。Ｂ_２、Ｌ_２、およびＲ_２の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。このような反応は、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩の製造について上述した反応条件と同様の条件下で行うことができる。

（３）式（ＶＩＩ）で表される生体直交性官能基を有する化合物またはその塩
　本発明はまた、上記式（ＶＩＩ）で表される化合物またはその塩を提供する。

　式（ＶＩＩ）において、ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、およびＬ_１は、式（Ｉ）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ）において上述したものと同じである。

　Ｙで示される１価の基は、上述したとおりである。

　Ｂ_１で示される生体直交性官能基は、上述したとおりである。

　好ましくは、式（ＶＩＩ）で表される化合物は、式（ＶＩＩ’）で表されるものであってもよい。式（ＶＩＩ’）で表されるＲ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｙ、Ｒ_１、Ｌ_１、およびＢ_１は、それぞれ、式（ＩＩＶ）で示されるものと同じである。

　式（ＶＩＩ’）において、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、式（Ｉ’）において上述したとおりである。したがって、これらの要素および当該要素に関連する他の要素の定義、例および好ましい例は、式（Ｉ’）において上述したものと同じである。

　式（ＶＩＩ）で表される化合物またはその塩は、例えば、本発明の位置選択的なコンジュゲート、抗体誘導体、および本発明の所定の化合物の合成中間体として有用である。このような化合物またはその塩はまた、例えば、生体分子（例、抗体等のタンパク質、糖類、核酸、脂質）等の任意の物質の誘導体化に有用である。

　式（ＶＩＩ）で表される化合物またはその塩は、例えば、式（Ｖ）で表される化合物またはその塩を、Ｂ_１－Ｌ_１－ＮＨ－Ｒ_１で表される化合物と反応させることにより製造することができる（図３）。Ｂ_１、Ｌ_１、およびＲ_１の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。このような反応は、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩の製造について上述した反応条件と同様の条件下で行うことができる。

　式（Ｖ）、（ＶＩ）、または（ＶＩＩ）で表される化合物またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、または質量分析により行うことができる。このような化合物またはその塩は、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー）等の任意の精製方法により適宜精製することができる。

　次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

　実施例１における以下ペプチド、Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ、Ｚ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ、Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ、ＳＣＡ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨは、すべて同様の方法で調製した。なお、ＳＣＡ（ＯｔＢｕ）はコハク酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチル（ｍｏｎｏ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌ　ｓｕｃｃｉｎａｔｅ）、ＳＣＡはコハク酸（ｓｕｃｃｉｎｉｃ　ａｃｉｄ）の略である。
　Ｆｍｏｃ法によるＣｌ－ＴＣＰ（Ｃｌ）　ＰｒｏＴｉｄｅ　Ｒｅｓｉｎ（ＣＥＭ社）を用いたペプチド固相合成によって、Ｎ末端をアセチル基でキャッピングしたもの、Ｎ末端をコハク酸でキャッピングしたものを調製し、２０％ＨＦＩＰ／ジクロロメタンの溶液にて終夜撹拌することで、アミノ酸側鎖を保護したまま樹脂からの切り出しを行った。樹脂をフィルトレーションにより除去し、溶液を濃縮後、これを分取ＨＰＬＣにて精製し、生成物であるペプチドを得た。

Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．５０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．９５－５．９３（ｍ，１Ｈ），５．３８（ｂｒｓ，２Ｈ），４．３３－４．２７（ｍ，１Ｈ），４．２２－４．１８（ｍ，１Ｈ），４．１５－４．１０（ｍ，１Ｈ），２．９６－２．９５（ｍ，２Ｈ），２．２５－２．１９（ｍ，２Ｈ），２．００－１．９３（ｍ，１Ｈ），１．８９－１．８０（ｍ，４Ｈ），１．７３－１．６６（ｍ，２Ｈ），１．６１－１．５１（ｍ，１Ｈ），１．４６－１．３４（ｍ，１１Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５０２．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

Ｚ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．５０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９３－７．３７（ｍ，８Ｈ），６．０５－６．００（ｍ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８（ｓ，２Ｈ），４．１７－３．８１（ｍ，３Ｈ），３．００－２．９０（ｍ，２Ｈ），２．３１－２．２７（ｍ，２Ｈ），２．１０－１．３４（ｍ，１６Ｈ），０．８９－０．８３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９４．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．５０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３７（ｂｒｓ，２Ｈ），４．３２－４．１９（ｍ，３Ｈ），４．１６－４．１１（ｍ，１Ｈ），２．９８－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．２７－２．１３（ｍ，４Ｈ），２．００－１．７９（ｍ，５Ｈ），１．７６－１．５２（ｍ，５Ｈ），１．４２－１．３６（ｍ，２０Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８７．３５［Ｍ＋Ｈ］^＋

ＳＣＡ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．９６（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２５（ｂｒｓ，２Ｈ），４．３５－４．３０（ｍ，１Ｈ），４．２１－４．１８（ｍ，１Ｈ），４．１５－４．１０（ｍ，１Ｈ），２．９８－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．４０－２．２８（ｍ，４Ｈ），２．２４－２．１８（ｍ，２Ｈ），２．０１－１．９３（ｍ，１Ｈ），１．９０－１．８１（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．６３（ｍ，２Ｈ），１．６１－１．５１（ｍ，１Ｈ），１．４０－１．３１（ｍ，２０Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６１６．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ａｌａ－ＯＨ

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．５０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３３－４．２７（ｍ，１Ｈ），４．２２－４．１６（ｍ，２Ｈ），２．２３－２．１８（ｍ，２Ｈ），１．９９－１．９４（ｍ，１Ｈ），１．８９－１．８０（ｍ，４Ｈ），１．７３－１．６５（ｍ，１Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１６．２０［Ｍ＋Ｈ］^＋

実施例１：Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃの合成
（１－１）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）は下記のように合成した。

（１－１－１）アルコール（２）の合成

　Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（１９．９ｍｇ，３９．７μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（１８．１ｍｇ，４７．６μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（６．２７μＬ，４７．６μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（８．６３ｍｇ，４７．６μｍｏｌ）を加えて室温にて２１．５時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（２）（２８．５ｍｇ，ｑｕａｎｔ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ９．９５（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝７．４　Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０　Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），５．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０１（ｓ，１Ｈ），４．３４－４．２９（ｍ，１Ｈ），４．２６－４．２０（ｍ，１Ｈ），４．１４－４．１０（ｍ，１Ｈ），３．５３（ｓ，３Ｈ），３．００－２．８３（ｍ，２Ｈ），２．１８－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９４－１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８４－１．２３（ｍ，１７Ｈ），０．７９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．７５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６６５．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－１－２）ピレン（３）の合成

　（１－１－１）で得られたアルコール（２）（２８．５ｍｇ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４３０μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（２６．６ｍｇ，８５．７μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１１．１μＬ，６４．４μｍｏｌ）を加え、室温にて１．５時間攪拌した。ＬＣＭＳで反応を追跡したところ原料の残存が見られたため、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（１３．３ｍｇ，４２．９μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５．５４μＬ，３２．２μｍｏｌ）を追加し、室温にて５時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（６４．９ｍｇ，２１５μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（８．７ｍｇ，６４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５７．２μＬ，３３３μｍｏｌ）を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（３）（２６．１ｍｇ，２６．３μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０９－１０．０７（ｍ，１Ｈ），８．６３－８．６０（ｍ，１Ｈ），８．３３－７．６５（ｍ，１３Ｈ），７．６０－７．５７（ｍ，２Ｈ），７．３７－７．３２（ｍ，２Ｈ），５．９４－５．９１（ｍ，１Ｈ），５．７２－５．７０（ｍ，１Ｈ），５．３７（ｂｒｓ，２Ｈ），４．９８－４．９６（ｍ，１Ｈ），４．９３－４．００（ｍ，４Ｈ），３．８５－３．７５（ｍ，１Ｈ），３．５６－３．５５（ｍ，３Ｈ），２．９７－２．８７（ｍ，５Ｈ），２．１７－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９３－１．１７（ｍ，１９Ｈ），０．８０－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９９３．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－１－３）ピレン（４）の合成

　ピレン（３）（１０．８ｍｇ，１０．９μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７００μＬ）、水（４００μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（１０９μＬ，１０９μｍｏｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（４）（４．５ｍｇ，４．６μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０８－１０．０５（ｍ，１Ｈ），８．６２－８．５９（ｍ，１Ｈ），８．３３－７．５６（ｍ，１５Ｈ），７．３７－７．３５（ｍ，２Ｈ），５．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６１－５．６０（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），４．９８－４．０３（ｍ，５Ｈ），３．８８－３．７４（ｍ，１Ｈ），２．９９－２．８３（ｍ，５Ｈ），２．１５－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９３－１．１４（ｍ，１９Ｈ），０．８４－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９７９．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－１－４）ピレン（５）の合成

　ピレン（４）（３．７ｍｇ，３．８μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．９μＬ，１１μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（２．９ｍｇ，５．６μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（１．３ｍｇ、５．７μｍｏｌ）を加えて室温に戻し２時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（５）（１．３ｍｇ，１．１μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０２－９．９９（ｍ，１Ｈ），８．８５－７．８８（ｍ，１４Ｈ），７．６７－７．６５（ｍ，１Ｈ），７．６０－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３３－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．９１－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．９２－５．９１（ｍ，１Ｈ），５．６３－５．６２（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０７－４．９２（ｍ，２Ｈ），４．３５－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９９－２．８３（ｍ，７Ｈ），２．１７－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．８９（ｍ，１Ｈ），１．８５－１．７２（ｍ，４Ｈ），１．６６－１．４５（ｍ，３Ｈ），１．４０－１．１７（ｍ，１５Ｈ），１．０５－１．０１（ｍ，２Ｈ），０．８３－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１４３．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－１－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）の合成

　ピレン（５）（２．２ｍｇ，１．９μｍｏｌ）に１，４－ジオキサン（３８０μＬ）、４Ｍ塩化水素／ジオキサン溶液（９５μＬ，３８０μｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。氷冷後、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７１．８μＬ，４１８μｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）（２．１ｍｇ，１．９μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０３－１０．００（ｍ，１Ｈ），８．８４－７．８８（ｍ，１４Ｈ），７．６７－７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５６－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３３－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．９２－５．９０（ｍ，１Ｈ），５．６３－５．６１（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８－４．９６（ｍ，２Ｈ），４．３５－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９７－２．８３（ｍ，７Ｈ），２．２０－２．１６（ｍ，２Ｈ），１．９３－１．８８（ｍ，１Ｈ），１．８１－１．７８（ｍ，４Ｈ），１．６９－１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３５－１．１７（ｍ，６Ｈ），１．０８－１．０１（ｍ，２Ｈ），０．８１－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０８７．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）は下記のように合成した。

（１－２－１）アルコール（７）の合成

　Ｚ－Ｇｌｕ（ｔ－Ｂｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（５０．０ｍｇ，８４．３μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（３８．４ｍｇ，１０１μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（１３．３μＬ，１０１μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（１８．３ｍｇ，１０１μｍｏｌ）を加えて室温にて１６時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（７）（４９．１ｍｇ，６４．９μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０４－９．９５（ｍ，１Ｈ），８．４０－７．２８（ｍ，１２Ｈ），６．００－５．９７（ｍ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８－４．９７（ｍ，３Ｈ），４．４３－４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２４－４．２０（ｍ，１Ｈ），４．１６－４．０５（ｍ，１Ｈ），３．６０－３．５９（ｍ，３Ｈ），３．０４－２．９１（ｍ，２Ｈ），２．２６－２．２０（ｍ，２Ｈ），２．０３－１．２２（ｍ，１６Ｈ），０．８８－０．７８（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７５７．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２－２）ピレン（８）の合成

　アルコール（７）（４４．６　ｍｇ，５８．９μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６５０μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（５３．８ｍｇ，１７７μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２２．５μＬ，１３３μｍｏｌ）を加え、室温にて４時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（８９．１ｍｇ，２９５μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１．９ｍｇ，８８．４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７７．７μＬ，４５７μｍｏｌ）を加え、室温にて１８時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（８）（４９．２ｍｇ，４５．３μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ１０．１１－９．９７（ｍ，１Ｈ），８．６４－８．６０（ｍ，１Ｈ），８．３６－７．９５（ｍ，１１Ｈ），７．８２－７．７４（ｍ，１Ｈ），７．６５－７．５７（ｍ，２Ｈ），７．４９－７．１９（ｍ，８Ｈ），５．９１－５．９０（ｍ，１Ｈ），５．７２－５．７０（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），４．９８－４．８６（ｍ，４Ｈ），４．４１－４．００（ｍ，３Ｈ），３．８５―３．７５（ｍ，１Ｈ），３．５６－３．５４（ｍ，３Ｈ），３．００－２．８２（ｍ，５Ｈ），２．１９－２．１２（ｍ，２Ｈ），１．９２－１．１７（ｍ，１６Ｈ），０．８０－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０８５．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２－３）ピレン（９）の合成

　ピレン（８）（４４．８ｍｇ，４１．３μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３．７５ｍＬ）、水（１．２５ｍＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、水酸化リチウム一水和物（８．７ｍｇ，２１０μｍｏｌ）を加え、室温にて４時間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（９）（１８．４ｍｇ，１７．２μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０２（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０９－９．９７（ｍ，１Ｈ），８．６２－８．５９（ｍ，１Ｈ），８．３２－７．７８（ｍ，１２Ｈ），７．６３－７．４４（ｍ，３Ｈ），７．３７－７．３５（ｍ，２Ｈ），７．２９－７．２０（ｍ，５Ｈ），５．９１（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６１－５．６０（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），４．９８－４．８６（ｍ，４Ｈ），４．４５－４．３０（ｍ，１Ｈ），４．２４－４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０７－４．０２（ｍ，１Ｈ），３．８４－３．７４（ｍ，１Ｈ），２．９７－２．８２（ｍ，５Ｈ），２．１９－２．１２（ｍ，２Ｈ），１．９３－１．１１（ｍ，１６Ｈ），０．８０－０．７２（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０７１．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２－４）ピレン（１０）の合成

　ピレン（９）（１５．６ｍｇ，１４．６μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５．０μＬ，２９μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（１１．４ｍｇ，２１．９μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（４．８ｍｇ、２２μｍｏｌ）を加えて室温に戻し３時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（１０）（１５．４ｍｇ，１２．５μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．１１－１０．０１（ｍ，１Ｈ），８．９１－８．６３（ｍ，１Ｈ），８．４０－７．９６（ｍ，１２Ｈ），７．７２－７．２７（ｍ，１１Ｈ），６．９７－６．９４（ｍ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７１－５．６９（ｍ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．１４－４．９６（ｍ，４Ｈ），４．４９－４．４０（ｍ，１Ｈ），４．３０－４．２３（ｍ，１Ｈ），４．１６－３．８３（ｍ，３Ｈ），３．２５－３．２２（ｍ，１Ｈ），３．０２－２．９０（ｍ，７Ｈ），２．２６－２．２２（ｍ，２Ｈ），２．０１－１．９８（ｍ，１Ｈ），１．９２－１．８４（ｍ，１Ｈ），１．７７－１．６６（ｍ，２Ｈ），１．６５－１．０４（ｍ，１６Ｈ），１．１２－１．０４（ｍ，２Ｈ），０．８８－０．８０（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２３５．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）の合成

　ピレン（１０）（１２．１ｍｇ，９．７９μｍｏｌ）に１，４－ジオキサン（２．０ｍＬ）、４Ｍ塩化水素／ジオキサン溶液（４９０μＬ，１．９６ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。氷冷後、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３６６μＬ，２．１５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）（６．０ｍｇ，５．１μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４－９．９４（ｍ，１Ｈ），８．８４－８．５７（ｍ，１Ｈ），８．３２－７．８９（ｍ，１２Ｈ），７．７２－７．２０（ｍ，１１Ｈ），６．９０－６．８６（ｍ，２Ｈ），５．９０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６４－５．６２（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０７－４．８８（ｍ，４Ｈ），４．４２－４．２９（ｍ，１Ｈ），４．２１－４．１５（ｍ，１Ｈ），４．０８－３．７６（ｍ，３Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９５－２．８２（ｍ，７Ｈ），２．２１－２．１６（ｍ，２Ｈ），１．９２－０．９７（ｍ，１３Ｈ），０．８２－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１７９．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）は下記のように合成した。

（１－３－１）アルコール（１２）の合成

　Ａｃ－Ｇｌｕ（ｔ－Ｂｕ）－Ｇｌｕ（ｔ－Ｂｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（５０．０ｍｇ，７２．８μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８００μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（３３．２ｍｇ，８７．４μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（１１．５μＬ，８７．４μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（１５．８ｍｇ，８７．４μｍｏｌ）を加えて室温にて１６時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（１２）（５４．０ｍｇ，６３．５μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．００（ｓ，１Ｈ），８．２６－７．８８（ｍ，３Ｈ），７．６８－７．６０（ｍ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），６．００－５．９７（ｍ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８（ｓ，１Ｈ），４．４０－４．３７（ｍ，１Ｈ），４．３２－４．１９（ｍ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．０９－２．９０（ｍ，２Ｈ），２．２５－２．１８（ｍ，４Ｈ），２．０３－１．５３（ｍ，１０Ｈ），１．４６－１．３６（ｍ，２０Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８５０．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３－２）ピレン（１３）の合成

　アルコール（１２）（５０．３ｍｇ，５９．２μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６５０μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（５４．０ｍｇ，１７８μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２２．７μＬ，１３３μｍｏｌ）を加え、室温にて５時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（８９．５ｍｇ，２９６μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２．０ｍｇ，８８．８μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７８．１μＬ，４５９μｍｏｌ）を加え、室温にて１８時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（１３）（３４．０ｍｇ，２８．９μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．１４－１０．１２（ｍ，１Ｈ），８．６９－８．６７（ｍ，１Ｈ），８．４０－７．８２（ｍ，１３Ｈ），７．７６－７．７２（ｍ，１Ｈ），７．６８－７．６５（ｍ，２Ｈ），７．４４－７．３９（ｍ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０５－４．９７（ｍ，２Ｈ），４．４４－４．０８（ｍ，４Ｈ），３．９３－３．８０（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．６２（ｍ，３Ｈ），３．０５－２．９２（ｍ，５Ｈ），２．２５－２．１４（ｍ，４Ｈ），２．００－１．２８（ｍ，３０Ｈ），０．８７－０．８０（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１７８．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３－３）ピレン（１４）の合成

　ピレン（１３）（３０．７ｍｇ，２６．１μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２．２５ｍＬ）、水（０．７５ｍＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、水酸化リチウム一水和物（５．５ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を加え、室温にて４時間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（１４）（１７．２ｍｇ，１４．８μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．１３－１０．１０（ｍ，１Ｈ），８．６９－８．６６（ｍ，１Ｈ），８．４０－７．８５（ｍ，１３Ｈ），７．７７－７．７３（ｍ，１Ｈ），７．６７－７．６４（ｍ，２Ｈ），７．４４－７．４２（ｍ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６８－５．６７（ｍ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０５－４．９６（ｍ，２Ｈ），４．４６－４．１０（ｍ，４Ｈ），３．９２－３．８１（ｍ，１Ｈ），３．０５－２．９０（ｍ，５Ｈ），２．２５－２．１４（ｍ，４Ｈ），２．０３－１．２９（ｍ，３０Ｈ），０．８８－０．８０（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１６４．５５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３－４）ピレン（１５）の合成

　ピレン（１４）（１４．７ｍｇ，１２．６μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４．２９μＬ，２５．２μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（９．８ｍｇ，１９μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（４．１ｍｇ、１９μｍｏｌ）を加えて室温に戻し３．５時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（１５）（７．０ｍｇ，９．２μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０８－１０．０５（ｍ，１Ｈ），８．９２－７．９５（ｍ，１５Ｈ），７．７５－７．７３（ｍ，１Ｈ），７．６３－７．５９（ｍ，２Ｈ），７．４０－７．３４（ｍ，２Ｈ），６．９７－６．９４（ｍ，２Ｈ），６．００－５．９８（ｍ，１Ｈ），５．７０－５．６９（ｍ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．１４－５．０１（ｍ，２Ｈ），４．４５－４．３８（ｍ，１Ｈ），４．３２－３．８３（ｍ，５Ｈ），３．２５－３．２０（ｍ，１Ｈ），３．１０－２．９０（ｍ，７Ｈ），２．２５－２．１８（ｍ，４Ｈ），２．０８－１．２４（ｍ，３４Ｈ），１．１２－１．０４（ｍ，２Ｈ），０．８８－０．８１（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１３２８．６０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）の合成

　ピレン（１５）（６．１ｍｇ，４．６μｍｏｌ）に１，４－ジオキサン（９２０μＬ）、４Ｍ塩化水素／ジオキサン溶液（２３０μＬ，９１８μｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。氷冷後、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１７２μＬ，１．１０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）（３．７ｍｇ，３．０μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．０４（ｂｒｓ，２Ｈ），１０．０１－９．９８（ｍ，１Ｈ），８．８３－７．８９（ｍ，１５Ｈ），７．７１－７．６９（ｍ，１Ｈ），７．５６－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３３－７．２６（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．９１－５．９０（ｍ，１Ｈ），５．６４－５．６２（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８－４．９２（ｍ，２Ｈ），４．３５－４．３２（ｍ，１Ｈ），４．２５－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９９－２．８２（ｍ，７Ｈ），２．２１－２．１５（ｍ，４Ｈ），１．９３－１．１７（ｍ，１６Ｈ），１．０５－１．０１（ｍ，２Ｈ），０．８２－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２１６．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）は下記のように合成した。

（１－４－１）アルコール（１７）の合成

　ＳＣＡ（ｔ－Ｂｕ）－Ｇｌｕ（ｔ－Ｂｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（５０．０ｍｇ，８１．２μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８９０μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（３７．０ｍｇ，９７．４μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（１２．８μＬ，９７．４μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（１７．６ｍｇ，９７．４μｍｏｌ）を加えて室温にて１６時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（１７）（６０．４ｍｇ，７７．５μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０１（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝７．２　Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．８　Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８（ｓ，１Ｈ），４．４１－４．３０（ｍ，２Ｈ），４．２１－４．１７（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．０４－２．９５（ｍ，２Ｈ），２．４４－２．１５（ｍ，６Ｈ），２．０３－１．９５（ｍ，１Ｈ），１．９２－１．８３（ｍ，１Ｈ），１．７４－１．５８（ｍ，３Ｈ），１．４６－１．３４（ｍ，２０Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７７９．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４－２）ピレン（１８）の合成

　アルコール（１７）（５８．０　ｍｇ，７４．５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８２０μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（６８．０ｍｇ，２２３μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２８．５μＬ，１６８μｍｏｌ）を加え、室温にて６時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（１１３ｍｇ，３７３μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５．１ｍｇ，１１２μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９８．３μＬ，５７８μｍｏｌ）を加え、室温にて１７時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（１８）（３７．１ｍｇ，３３．５μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．１５－１０．１３（ｍ，１Ｈ），８．７０－８．６７（ｍ，１Ｈ），８．４０－８．０３（ｍ，１１Ｈ），７．９０－７．８６（ｍ，１Ｈ），７．７５－７．７２（ｍ，１Ｈ），７．６８－７．６４（ｍ，２Ｈ），７．４４－７．３９（ｍ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０５－４．９８（ｍ，２Ｈ），４．４０－４．０８（ｍ，３Ｈ），３．９３－３．８０（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．６２（ｍ，３Ｈ），３．０５－２．９０（ｍ，５Ｈ），２．４４－２．１５（ｍ，６Ｈ），２．０２－１．９８（ｍ，１Ｈ），１．９１－１．８５（ｍ，１Ｈ），１．７５－１．５５（ｍ，３Ｈ），１．５０－１．３０（ｍ，２０Ｈ），０．８８－０．８０（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１０７．５５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４－３）ピレン（１９）の合成

　ピレン（１８）（１７．４ｍｇ，１５．７μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（６７５μＬ）、水（２２５μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（８６．４μＬ，８６．４μｍｏｌ）を加え、氷冷下で５時間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（１９）（１７．２ｍｇ，１５．７μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．１４－１０．１１（ｍ，１Ｈ），８．６８－８．６６（ｍ，１Ｈ），８．４０－８．０１（ｍ，１１Ｈ），７．８９－７．８５（ｍ，１Ｈ），７．７５－７．７２（ｍ，１Ｈ），７．６７－７．６４（ｍ，２Ｈ），７．４４－７．４１（ｍ，２Ｈ），５．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６８－５．６７（ｍ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０５－４．９３（ｍ，２Ｈ），４．４４－４．１０（ｍ，３Ｈ），３．９２－３．８１（ｍ，１Ｈ），３．０５－２．９４（ｍ，５Ｈ），２．４３－２．１５（ｍ，６Ｈ），２．０２－１．９７（ｍ，１Ｈ），１．８８－１．８５（ｍ，１Ｈ），１．７７－１．６６（ｍ，３Ｈ），１．６１－１．３０（ｍ，２０Ｈ），０．８８－０．８０（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０９３．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４－４）ピレン（２０）の合成

　ピレン（１９）（１６．３ｍｇ，１４．９μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５．１μＬ，３０μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（１１．７ｍｇ，２２．４μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（４．９ｍｇ、２２μｍｏｌ）を加えて室温に戻し３時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（２０）（１２．１ｍｇ，９．６２μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０１－９．９８（ｍ，１Ｈ），８．８５－７．８８（ｍ，１４Ｈ），７．６８－７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５６－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３３－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．９２－５．９０（ｍ，１Ｈ），５．６３－５．６２（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８－４．９２（ｍ，２Ｈ），４．３６－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），３．００－２．８３（ｍ，７Ｈ），２．３６－２．０８（ｍ，６Ｈ），１．９５－１．８９（ｍ，１Ｈ），１．８４－１．７８（ｍ，１Ｈ），１．６８－１．５０（ｍ，３Ｈ），１．４２－１．１７（ｍ，２４Ｈ），１．０７－０．９７（ｍ，２Ｈ），０．８１－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２５７．５５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）の合成

　ピレン（２０）（１０．５ｍｇ，８．３５μｍｏｌ）に酢酸エチル（１．７ｍＬ）、４Ｍ塩化水素／酢酸エチル（２．０９ｍＬ，８．３６ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４．５時間撹拌した。氷冷後、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７８１μＬ，４．５９ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）（７．５ｍｇ，６．６μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．０２（ｂｒｓ，２Ｈ），１０．０４－９．９８（ｍ，１Ｈ），８．８５－７．８９（ｍ，１４Ｈ），７．６５－７．６２（ｍ，１Ｈ），７．５６－７．５２（ｍ，２Ｈ），７．３３－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６３－５．６２（ｍ，１Ｈ），５．３７（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８－４．９３（ｍ，２Ｈ），４．３６－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），３．０２－２．８０（ｍ，７Ｈ），２．３８－２．１６（ｍ，６Ｈ），１．９６－１．７７（ｍ，２Ｈ），１．７０－１．１７（ｍ，９Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，２Ｈ），０．８１－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１４５．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２１）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２１）は下記のように合成した。

（１－５－１）アルコール（２２）の合成

　Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ａｌａ－ＯＨ（２０．９ｍｇ，５０．３μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７００μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（２９．０ｍｇ，７６．３μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（１０．１μＬ，７６．７μｍｏｌ）を加え、室温にて１２分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（１１．０ｍｇ，６０．７μｍｏｌ）を加えて室温にて１８時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（２２）（２０．３ｍｇ，３５．１μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ９．９８－９．８９（ｍ，１Ｈ），８．３２－８．１８（ｍ，１Ｈ），８．０７－７．８５（ｍ，１Ｈ），７．７３－７．５９（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．４　Ｈｚ，２Ｈ），５．０８（ｓ，１Ｈ），４．４５－４．３４（ｍ，１Ｈ），４．３２－４．２７（ｍ，１Ｈ），４．２０－４．０９（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｓ，３Ｈ），２．２４－２．２０（ｍ，２Ｈ），２．０１－１．９６（ｍ，１Ｈ），１．９０－１．８０（ｍ，４Ｈ），１．７２－１．６７（ｍ，１Ｈ），１．３９－１．３６（ｍ，９Ｈ），１．３０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５７９．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－５－２）ピレン（２３）の合成

　アルコール（２２）（１７．５　ｍｇ，３０．２μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１７４μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（１８．９ｍｇ，６０．８μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７．８０μＬ，４５．４μｍｏｌ）を加え、室温にて３０分間攪拌した。ＬＣＭＳを確認したところ原料が残っていたため、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（９．５ｍｇ，３１μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．９０μＬ，２２．７μｍｏｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（３６．２ｍｇ，１２０μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（６．３ｍｇ，４７μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４０．３μＬ，２３５μｍｏｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（２３）（１２．９　ｍｇ，１４．２μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０５－１０．０２（ｍ，１Ｈ），８．６１－８．６０（ｍ，１Ｈ），８．３０－７．７８（ｍ，１２Ｈ），７．６７－７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３７－７．３３（ｍ，２Ｈ），５．７２－５．７０（ｍ，１Ｈ），４．９８－４．８９（ｍ，２Ｈ），４．３４－４．００（ｍ，３Ｈ），３．８５－３．７５（ｍ，１Ｈ），３．５６－３．５５（ｍ，３Ｈ），２．９３－２．８７（ｍ，３Ｈ），２．１７－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９４－１．９１（ｍ，１Ｈ），１．８５－１．７５（ｍ，４Ｈ），１．６５－１．６１（ｍ，１Ｈ），１．３１－１．２３（ｍ，１２Ｈ），０．８０－０．７３（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９０７．３５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－５－３）ピレン（２４）の合成

　ピレン（２３）（１１．８ｍｇ，１３．０μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８００μＬ）、水（４００μＬ）に溶解したのち氷冷し、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（６５μＬ，６５μｍｏｌ）を加え、３０分間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（２４）（８．９ｍｇ，１０．０μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４－９．９１（ｍ，１Ｈ），８．６３－８．６０（ｍ，１Ｈ），８．３３－７．７７（ｍ，１２Ｈ），７．６９－７．５５（ｍ，３Ｈ），７．３７－７．３５（ｍ，２Ｈ），５．６１－５．６０（ｍ，１Ｈ），４．９８－４．８６（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．０３（ｍ，３Ｈ），３．８４－３．７４（ｍ，１Ｈ），２．９３－２．８７（ｍ，３Ｈ），２．１８－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．９２（ｍ，１Ｈ），１．８５－１．７７（ｍ，４Ｈ），１．６７－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．３１－１．２４（ｍ，１２Ｈ），０．８１－０．７５（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８９３．３５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－５－４）ピレン（２５）の合成

　ピレン（２４）（６．７ｍｇ，７．５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．９μＬ，２２μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（５．９ｍｇ，１１μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（２．４ｍｇ、１１μｍｏｌ）を加えて室温に戻し１時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（２５）（４．１ｍｇ，３．９μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ９．９８－９．９５（ｍ，１Ｈ），８．８３－７．７７（ｍ，１４Ｈ），７．６７－７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５６－７．５０（ｍ，２Ｈ），７．３４－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．８９－６．８６（ｍ，２Ｈ），５．６３－５．６１（ｍ，１Ｈ），５．０６－４．９３（ｍ，２Ｈ），４．３７－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１７－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９５－２．８３（ｍ，５Ｈ），２．１７－２．１０（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．８９（ｍ，１Ｈ），１．８５－１．７５（ｍ，４Ｈ），１．６５－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．３１－１．１７（ｍ，１６Ｈ），１．０２－１．００（ｍ，２Ｈ），０．８１－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０５７．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－５－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２１）の合成

　ピレン（２５）（２．４ｍｇ，２．３μｍｏｌ）に１，４－ジオキサン（４５４μＬ）、４Ｍ塩化水素／ジオキサン溶液（５６８μＬ，２．２７ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００μＬ）を加えたのち、氷冷下、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２１４μＬ，１．２５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２１）（１．１ｍｇ，１．１μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００　ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１１．９９（ｂｒｓ，１Ｈ），９．９８－９．９６（ｍ，１Ｈ），８．８４－７．８８（ｍ，１４Ｈ），７．６６－７．６３（ｍ，１Ｈ），７．５４－７．５０（ｍ，２Ｈ），７．３４－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．６３－５．６１（ｍ，１Ｈ），５．０７－４．９３（ｍ，２Ｈ），４．３６－３．７６（ｍ，５Ｈ），３．１７－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．９５－２．８３（ｍ，５Ｈ），２．２０－２．１６（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．９０（ｍ，１Ｈ），１．８８－１．７６（ｍ，４Ｈ），１．６７－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．３２－１．１７（ｍ，７Ｈ），１．０２－１．０１（ｍ，２Ｈ），０．８１－０．７４（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９９９．３５［Ｍ－Ｈ］^―

比較例１：Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄの合成
（１－１）Ｌｉｎｋｅｒ－Ｐａｙｌｏａｄ（２６）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－Ｐａｙｌｏａｄ（２６）は下記のように合成した。

　Ｌｉｎｋｅｒ－Ｐａｙｌｏａｄ（２６）は下記のスキームに従い合成した。

　Ｌｉｎｋｅｒ－Ｐａｙｌｏａｄ（２６）のＭＳ分析結果は下記の通りであった。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０５０．５５［Ｍ＋Ｈ］^＋

実施例２：ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの合成
（２－１）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの合成
　以降の比較例および実施例では、チオール基導入抗体として、国際公開第２０１９／２４０２８７号（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）の実施例８１－７に記載される抗体誘導体（チオール基導入トラスツズマブ）を用いた。この抗体誘導体は、抗体重鎖の２４６位または２４８位のリジン残基の側鎖のアミノ基を介して、トラスツズマブ（ヒト化ＩｇＧ１抗体）にチオール基が位置選択的に導入されている下記構造を有する（リジン残基の位置はＥＵ　ｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う）。

（上記構造において、抗体重鎖から伸びているＮＨ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－ＣＨ_２－ＣＨ_２－は、リジン残基の側鎖に対応し、このリジン残基の側鎖中のアミノ基に対してチオール含有基であるＨＳ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－Ｃ（＝Ｏ）が付加されている。本抗体は、ペプチドマッピング法で他のリジン残基での修飾が検出されなかったことから、抗体重鎖の２４６位または２４８位での位置選択性が１００％であると解される。）

　チオール基導入抗体のｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ７．４ＰＢＳバッファー）溶液（２０μＭ）に実施例１で合成したＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃのＤＭＦ溶液（１０ｍＭ）を１０当量加え、室温にて２時間静置後、ＮＡＰ－５　Ｃｏｌｕｍｎｓ（ＧＥヘルスケア社製）を用いて精製してＡＤＣ　ｍｉｍｉｃを得た。

　実施例１－１で合成したＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　１を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）が２個導入された１５０３５０にピークが確認された。

　同様に実施例１－２のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　２を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６）が２個導入された１５０５３５にピークが確認された。

　同様に実施例１－３のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　３を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）が２個導入された１５０６０９にピークが確認された。

　同様に実施例１－４のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　４を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１６）が２個導入された１５０４６６にピークが確認された。

　同様に比較例１のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２６）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　５を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（２６）が２個導入された１５０２７６にピークが確認された。

（２－２）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのＤＡＲ解析
　実施例２－１で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析は既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）に従って行い、ＤＡＲは２であることを確認した。

実施例３：疎水性カラムクロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）による、ＡＤＣおよびＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの疎水性度の評価
　既報（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１９，９１，２０，１２７２４－１２７３２）に従い、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。測定は下記の条件を用いて行った。ＨＩＣクロマトグラムにおける、ＡＤＣのリテンションタイムによってＡＤＣの疎水性度を評価することができる。

測定システム：Ｃｈｒｏｍａｓｔｅｒ（登録商標）（日立社製）
カラム：東ソーバイオサイエンス社製Ｔｏｓｏｈ　Ｂｉｏｂｕｔｈｙｌ　ＮＰＲ　２．５μｍ　４．６×３５ｍｍカラム
グラジエント：溶離液Ａ／Ｂの線形グラジエント
流速：０．８ｍＬ／分
溶離液Ａ：１．１Ｍ　（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４，２５ｍＭ　Ｎａ_２ＨＰＯ_４／ＮａＨ_２ＰＯ_４（ｐＨ６．０）
溶離液Ｂ：２５ｍＭ　Ｎａ_２ＨＰＯ_４／ＮａＨ_２ＰＯ_４（ｐＨ６．０、２５ｖ／ｖ％　イソプロパノール添加）
検出器：ＵＶ（２８０ｎｍ）

　その結果、実施例１－１，１－２，１－３，１－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃはリテンションタイムが早い傾向であることが確認され、親水性度が高いことがわかる。よって、実施例１－１，１－２，１－３，１－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは、血漿クリアランスが遅く、体内に留まる時間が長いと考えられることから、好ましいＡＤＣであることが確認された。

実施例４：サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）による、ＡＤＣおよびＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの凝集率の評価
　既報（ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＳｅｌｅｃｔ，２０２０，５，８４３５－８４３９）に従い、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。測定は下記の条件を用いて行った。

測定システム：１２６０　ＨＰＬＣ　ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ社製）
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ社製ＡｄｖａｎｃｅＢｉｏ　ＳＥＣ　３００Å　２．７μｍ，４．６ｍｍ×１５０ｍｍ
流速：０．２５ｍＬ／分
溶離液：１００ｍＭリン酸二水素ナトリウム／リン酸水素ナトリウム，２５０ｍＭ塩化ナトリウムの水溶液（ｐＨ６．８），１０％ｖ／ｖイソプロパノール
検出器：ＵＶ（２８０ｎｍ）

実施例５：酵素カテプシンＢを用いた、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの評価
　各種ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのカテプシンＢによる切断能は下記のように、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃから脱落した蛍光分子の量を解析することで評価した。

（５－１）カテプシンＢ切断性試験
　既報（Ｎａｔｕｒｅ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ　２０１８，９，２５１２）に従って下記の通り実施した。ＭＥＳ　ｂｕｆｆｅｒ（１０ｍＭ　ＭＥＳ，４０μＭ　ＤＴＴ，ｐＨ５．０）１８０μＬに対し、１ｍｇ／ｍＬの濃度になるようにＡＤＣ　ｍｉｍｉｃを加えたのち、６本のエッペンチューブに３０μＬずつ分注した。６本のサンプルのうち３本は、０℃にて即座にアセトニトリルを１００μＬずつ加えてボルテックスで攪拌したのち遠心分離を行うことで、沈殿物を得た。生じた上澄み溶液を回収し、ＨＰＬＣ分析を行った。残りの３本は３７℃で６時間インキュベーションした。各サンプルにアセトニトリルを１００μＬずつ加えてボルテックスで攪拌したのち遠心分離を行うことで、沈殿物を得た。生じた上澄み溶液を回収し、ＨＰＬＣ分析を行った。

（５－２）ＨＰＬＣ分析を用いた、脱落した蛍光分子の量の解析
　測定は、液体クロマトグラフィー／蛍光検出法を用いて、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃから脱落した蛍光分子量を測定した。実施例７－１で０℃にて即座にアセトニトリルを加えた３本のサンプルを０時間のものとし、実施例７－１に記載されるように３７℃で６時間インキュベーションした３本のサンプルを６時間のものとし、６時間サンプルと０時間サンプルの蛍光強度の差分を解析した。

　別途Ｐｙｒｅｎｅを用いて、ＨＰＬＣによる蛍光強度のエリア面積と、濃度の相関を算出した。その算出式を用いて上記各ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの蛍光強度の差分を濃度に変換した。０時間の濃度を１００％としたときの、前述の蛍光強度の差分の割合を脱落率として算出した。

　表４に示した通り、合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは十分なカテプシンＢ切断を有していることが分かった。

実施例６：マウス血漿を用いた、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの評価
（６－１）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの血漿中安定性試験
　マウス血漿（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ社製）５００μＬに対し、０．１ｍｇ／ｍＬの濃度になるようにＡＤＣ　ｍｉｍｉｃを加えたのち滅菌ろ過を行った。この溶液を６本のエッペンチューブに５０μＬずつ分注した。６本のサンプルのうち３本は、３７℃に設定したインキュベーターで４日間保管した。残りの３本は－８０℃の冷凍庫の中で同様に４日間保管した。各サンプルにアセトニトリルを１００μＬずつ加えてボルテックスで攪拌したのち遠心分離を行うことで、沈殿物を得た。生じた上澄み溶液を回収し、ＨＰＬＣ分析を行った。

（６－２）ＨＰＬＣ分析を用いた、脱落した蛍光分子の量の解析
　測定は、液体クロマトグラフィー／蛍光検出法を用いて、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃから脱落した蛍光分子量を測定した。実施例９－１で冷凍庫保管した３本のサンプルをＤａｙ＝０のものとし、実施例９－１で３７℃保管した３本のサンプルをＤａｙ＝４のものとし、Ｄａｙ＝４とＤａｙ＝０の蛍光強度の差分を解析した。

　蛍光分子の脱落率の算出は、実施例５－２に従って実施した。
　結果は下記の表の通り蛍光分子の脱落率を評価した。

　その結果、比較例１で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃに対し、実施例１－１，１－２で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは３倍以上の安定性を示し、実施例１－３，１－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは１０倍以上もの安定性を示した。

実施例７：Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄの合成
（７－１）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（３５）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（３５）は下記のように合成した。

（７－１－１）カーボネート（３６）の合成

　（１－１－１）で得られたアルコール（２）（１０５ｍｇ，０．１５８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（１００ｍｇ，０．３２９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（８３μＬ，０．４８ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、室温にて１９．５時間攪拌した。エバポレーターでＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを除去した後、得られた粗生成物に酢酸エチル（３ｍＬ）を加えて溶解させたのち、ジエチルエーテル（３ｍＬ）を加えた。得られた溶液をフィルトレーションにより残渣を除去したのち、真空ポンプによって有機溶媒を除去し、カーボネート（３６）（１０２ｍｇ，０．１２３ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：８３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋，８５２．１［Ｍ＋Ｎａ］^＋

（７－１－２）化合物（３７）の合成

　（７－１－１）で得られた化合物（３６）（６９ｍｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３．５ｍＬ）に溶解させ、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１６ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）、市販のｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌａｕｒｉｓｔａｔｉｎ　Ｅ（ＭＭＡＥ，６１ｍｇ，０．０８５ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。続いて、ジイソプロピルエチルアミン（２９μＬ，０．１７ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温、窒素雰囲気下２２．５時間攪拌した。エバポレーターにて有機溶媒を除去したのち、アセトニトリル：水＝１：１の溶液を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物３７（７９ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１４０８．９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－１－３）化合物（３８）の合成

　（７－１－２）で得られた化合物（３７）（９７ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７ｍＬ）、水（２ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１．０Ｍ、１．４ｍＬ，１．４ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、そのまま１時間攪拌した。反応溶液に塩酸を加え、ｐＨ６に調製した後、、アセトニトリル：水＝１：１を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物３８（７０ｍｇ，０．０５０ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１３９４．７［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－１－４）化合物（３９）の合成

　（７－１－３）で得られた化合物（３８）（３４ｍｇ，０．０２４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２５μＬ，０．１４ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（２０ｍｇ，０．０３８ｍｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（８．７ｍｇ，０．０４０ｍｍｏｌ）を加えて室温に戻し２０時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、化合物（３９）（２９ｍｇ，０．０１９ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１５５８．９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－１－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（３５）の合成

　（７－１－４）で得られた化合物（３９）（２９ｍｇ，０．０１９ｍｍｏｌ）にアセトニトリル（５００μＬ）、８５ｗｔ％リン酸水溶液（０．５０ｍＬ，７．３ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で３時間撹拌した。反応完結後、水（２ｍＬ）を加え、反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　（３５）（１８ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１５０２．９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－２）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）は下記のように合成した。

（７－２－１）化合物（４１）の合成

　（７－１－３）で得られた化合物（３８）（１０ｍｇ，０．００７２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０μＬ，０．０５７ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（７．０ｍｇ，０．０１３ｍｍｏｌ）を加えた。次にＤＢＣＯ－ヘキシルアミン（４．７ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液を加えて室温に戻し２０時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、化合物（４１）（５．８ｍｇ，０．００３４ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１６９６．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－２－２）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）の合成

　（７－２－１）で得られた化合物（４１）（１３ｍｇ，０．００７７ｍｍｏｌ）にアセトニトリル（５００μＬ）、８５ｗｔ％リン酸水溶液（０．５０ｍＬ，７．３ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で４時間撹拌した。反応完結後、水（２ｍＬ）を加え、反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）（７．４ｍｇ，０．００４５ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１６３８．９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）は下記のように合成した。

（７－３－１）カーボネート（４３）の合成

　（１－１－１）で得られたアルコール（２）（１４０ｍｇ，０．１６５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（１０８ｍｇ，０．３５５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１００μＬ，０．５７４ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、室温にて１８時間攪拌した。エバポレーターにて有機溶媒を除去したのち、アセトニトリル：水＝１：１の溶液を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物４３（１３０ｍｇ，０．１２８ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１０１５．６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３－２）化合物（４４）の合成

　（７－３－１）で得られた化合物（４３）（８５ｍｇ，０．０８４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（２０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、市販のｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌａｕｒｉｓｔａｔｉｎ　Ｅ（ＭＭＡＥ，６３ｍｇ，０．０８８ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。続いて、ジイソプロピルエチルアミン（７５μＬ，０．４３ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温、窒素雰囲気下２３時間攪拌した。エバポレーターにて有機溶媒を除去したのち、アセトニトリル：水＝１：１の溶液を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物４４（９４ｍｇ，０．０５９ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１５９３．６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３－３）化合物（４５）の合成

　（７－３－２）で得られた化合物（４４）（９４ｍｇ，０．０５９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）、水（２ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１．０Ｍ、０．６ｍＬ，０．６ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、そのまま１時間攪拌した。反応溶液に塩酸を加え、ｐＨ５に調製した後、、アセトニトリル：水＝１：１を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物４５（７７ｍｇ，０．０４９ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１５７９．７［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３－４）化合物（４６）の合成

　（７－３－３）で得られた化合物（４５）（７７ｍｇ，０．０４９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５０μＬ，０．２９ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（８７ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（３５ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を加えて室温に戻し２０時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、化合物（４６）（６５ｍｇ，０．０３７　ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１７４４．７［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）の合成

　（７－３－４）で得られた化合物（４６）（６５ｍｇ，０．０３７ｍｍｏｌ）にアセトニトリル（２ｍＬ）、８５ｗｔ％リン酸水溶液（１．００ｍＬ，１４．６ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で６時間撹拌した。反応完結後、水（２ｍＬ）を加え、反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）（４９ｍｇ，０．０３０ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１６３１．６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－４）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）は下記のように合成した。

（７－４－１）化合物（４８）の合成

　（７－３－１）で得られた化合物（４３）（６７ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、市販のＥｘａｔｅｃａｎ　ｍｅｓｙｌａｔｅ（ＣＡＳ：１６９８６９－９０－３、３５ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。続いて、ジイソプロピルエチルアミン（５０μＬ，０．２９ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温、窒素雰囲気下４時間攪拌した。エバポレーターにて有機溶媒を除去したのち、アセトニトリル：水＝１：１の溶液を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物４８（５７ｍｇ，０．０４３ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１３１１．７［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－４－２）化合物（４９）の合成

　（７－４－１）で得られた化合物（４８）（５７ｍｇ，０．０４３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）、水（１．５ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１．０Ｍ、０．５ｍＬ，０．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、そのまま１時間攪拌した。反応溶液に塩酸を加え、ｐＨ５に調製した後、、アセトニトリル：水＝１：１を加え、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥を行うことにより、化合物４９（４５ｍｇ，０．０３５ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１２９７．６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－４－３）化合物（５０）の合成

　（７－４－２）で得られた化合物（４９）（４５ｍｇ，０．０３５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３０μＬ，０．１７ｍｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（５５ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（２２ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）を加えて室温に戻し１８時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、化合物（５０）（２２ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１４６２．７［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－３－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）の合成

　（７－４－３）で得られた化合物（５０）（２２ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ）にアセトニトリル（１ｍＬ）、８５ｗｔ％リン酸水溶液（１．０ｍＬ，１４．６ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で１．５時間撹拌した。反応完結後、水（１ｍＬ）を加え、反応液を逆相分取クロマトグラフィーにて精製し、生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）（１８．８ｍｇ，０．０１３９ｍｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ－ｄ６）　δ　１０．０４（ｓ，１Ｈ），８．１０－８．０５（ｍ，４Ｈ），７．８０－７．７７（ｍ，２Ｈ），７．５９－７．５５（ｍ，２Ｈ），７．３５－７．３０（ｍ，３Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．５４－６．５３（ｍ，１Ｈ），６．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），５．３３－５．２８（ｍ，２Ｈ），４．２９－４．１５（ｍ，４Ｈ），３．１９－２．９８（ｍ５Ｈ），２．４３－２．３８（ｍ，５Ｈ），２．２７－２．２０（ｍ，７Ｈ），１．９５－１．８３（ｍ，８Ｈ），１．７３－１．６２（ｍ，４Ｈ），１．４２－１．３０（ｍ，７Ｈ），１．２３－１．１３（ｍ，３Ｈ），０．８４（ｍ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）　ｍ／ｚ：１３４９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２５）の合成
　下記に示すＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２５）は、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄｍｉｍｉｃ（１２０）の合成において、ｓａｒｃｏｓｉｎｅ－ｐｙｒｅｎｅの代わりにＭＭＡＥを用い、同様の方法で合成した。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１９６８．１４［Ｍ＋Ｈ］^＋

（７－６）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２６）の合成
　下記に示すＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２６）は、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄｍｉｍｉｃ（３５）の合成において、ＭＭＡＥの代わりにＥｘａｔｅｃａｎ　ｍｅｓｙｌａｔｅを用い、同様の方法で合成した。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２２０．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

実施例８：ＡＤＣの合成
（８－１）ＡＤＣ４の合成
　以降の比較例および実施例では、チオール基導入抗体として、国際公開第２０１９／２４０２８７号（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）の実施例８１－７に記載される抗体誘導体（チオール基導入トラスツズマブ）を用いた。この抗体誘導体は、抗体重鎖の２４６位または２４８位のリジン残基の側鎖のアミノ基を介して、トラスツズマブ（ヒト化ＩｇＧ１抗体）にチオール基が位置選択的に導入されている下記構造を有する（リジン残基の位置はＥＵ　ｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う）。

　チオール基導入抗体のｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ７．４ＰＢＳバッファー）溶液（２０μＭ）に実施例１２－１で合成したＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　（３５）のＤＭＦ溶液（１０ｍＭ）を１０当量加え、室温にて２時間静置後、ＮＡＰ－５　Ｃｏｌｕｍｎｓ（ＧＥヘルスケア社製）を用いて精製してＡＤＣ　４を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（３５）が２個導入された１５１４１４にピークが確認された。

（８－２）ＡＤＣ５の合成
　（８－１）に従って、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）よりＡＤＣ５を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４２）が２個導入された１５１６７３にピークが確認された。

（８－３）ＡＤＣ６の合成
　（１３－１）に従って、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）よりＡＤＣ６を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４７）が２個導入された１５１１０９にピークが確認された。

（８－４）ＡＤＣ８の合成
　（１３－１）に従って、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２５）よりＡＤＣ８を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２５）が２個導入された１５０５２４にピークが確認された。

（８－５）ＡＤＣ１１の合成
　（１３－１）に従って、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２６）よりＡＤＣ１１を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（１２６）が２個導入された１５０６１５にピークが確認された。

実施例９：ＡＤＣのＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析
　実施例３の条件を用いて、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。

　続いて、ＨＩＣ－ＨＰＬＣを用いてＡＤＣの疎水性評価を行った。測定は実施例３に従って行った。ＨＩＣクロマトグラムにおける、ＡＤＣのリテンションタイムによってＡＤＣ　の疎水性度を評価することができる。比較対象に原料抗体でありＴｒａｓｔｕｚｕｍａｂを用いた。

　エキソ型ＡＤＣであるＡＤＣ４，５，６は、ＨＩＣクロマトグラムにおけるリテンションタイムが原料抗体と遜色なく、より親水性のＡＤＣであることが分かる。

実施例１０：サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）による、ＡＤＣの凝集率の評価
　実施例４に従い、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。

　その結果、（８－１）、（８－２）および（８－３）で合成したＡＤＣは、凝集率が低い傾向であることが確認され、より安定性が高いことがわかる。よって、実施例８で合成したＡＤＣは、好ましいＡＤＣであることが確認された。

実施例１１：Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃの合成
（１１－１）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）は下記のように合成した。

（１１－１－１）アルコール（５７）の合成

　Ａｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（５１．７ｍｇ，１０３μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５２０μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（４６．９ｍｇ，１２３μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（１５．９μＬ，１２３μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（２２．３ｍｇ，１２３μｍｏｌ）を加えて室温にて１９時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（５７）（５６．３ｍｇ，８６．５μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ９．９９（ｓ，１Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．９８（ｂｒｓ，１Ｈ），５．４１（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０８（ｓ，１Ｈ），４．６４－４．５９（ｍ，１Ｈ），４．３９－４．３４（ｍ，１Ｈ），４．２２－４．１８（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｓ，３Ｈ），３．０１－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．６９－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，１Ｈ），２．００－１．９５（ｍ，１Ｈ），１．８３（ｓ，３Ｈ），１．６９―１．６６（ｍ，１Ｈ），１．６２－１．５３（ｍ，１Ｈ），１．４３－１．３４（ｍ，１１Ｈ），０．８４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．７９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６５１．３５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－１－２）ピレン（５８）の合成

　アルコール（５７）（５５．０ｍｇ，８４．５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４２３μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（７７．１ｍｇ，２５４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３２．３μＬ，１９０μｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（７６．７ｍｇ，２５４μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７．１ｍｇ，１２７μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５３．９μＬ，３１７μｍｏｌ）を加え、室温にて１．５時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（５８）（６０．９ｍｇ，６２．２μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．１４－１０．１１（ｍ，１Ｈ），８．６８－８．６６（ｍ，１Ｈ），８．３９－８．０１（ｍ，１０Ｈ），７．８９－７．８５（ｍ，１Ｈ），７．６７－７．５８（ｍ，３Ｈ），７．４４－７．３９（ｍ，２Ｈ），５．９８（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７９－５．７７（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０４－４．９７（ｍ，２Ｈ），４．６５－４．５９（ｍ，１Ｈ），４．３９－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．０７（ｍ，２Ｈ），３．９２－３．８２（ｍ，１Ｈ），３．６２－３．６１（ｍ，３Ｈ），２．９９－２．９１（ｍ，５Ｈ），２．６９－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，１Ｈ），２．０１－１．９７（ｍ，１Ｈ），１．８３（ｓ，３Ｈ），１．７０－１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４４－１．３０（ｍ，１１Ｈ），０．８６－０．７７（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９７９．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－１－３）ピレン（５９）の合成

　ピレン（５８）（２４．９ｍｇ，２５．４μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１．８８ｍＬ）、水（６２５μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（３０．５μＬ，３０．５μｍｏｌ）を加え、室温にて５０分間攪拌した。反応終了後、０．１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（５９）（８．３ｍｇ，８．６μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１３．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．１３－１０．０９（ｍ，１Ｈ），８．６８－８．６５（ｍ，１Ｈ），８．３９－８．００（ｍ，１０Ｈ），７．８８－７．８４（ｍ，１Ｈ），７．６７－７．５９（ｍ，３Ｈ），７．４４－７．４１（ｍ，２Ｈ），５．９８（ｂｒｓ，１Ｈ），５．６８－５．６７（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），５．０４－４．９３（ｍ，２Ｈ），４．６４－４．６１（ｍ，１Ｈ），４．４１－４．３５（ｍ，１Ｈ），４．３２－４．０９（ｍ，２Ｈ），３．９１－３．８０（ｍ，１Ｈ），２．９９－２．９１（ｍ，５Ｈ），２．７０－２．６４（ｍ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，１Ｈ），２．０１－１．９８（ｍ，１Ｈ），１．８３（ｓ，３Ｈ），１．７０－１．５７（ｍ，２Ｈ），１．４５－１．３０（ｍ，１１Ｈ），０．８６－０．７７（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９６５．４５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－１－４）ピレン（６０）の合成

　ピレン（５９）（７．２ｍｇ，７．５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１５０μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２．５μＬ，１４．９μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（５．８ｍｇ，１１．２μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（２．４ｍｇ、１１．２μｍｏｌ）を加えて室温に戻し１時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（６０）（５．７ｍｇ，５．１μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１０．０７－１０．０４（ｍ，１Ｈ），８．９１－８．８８（ｍ，１Ｈ），８．６５－７．９５（ｍ，１２Ｈ），７．６２－７．５８（ｍ，３Ｈ），７．４０－７．３６（ｍ，２Ｈ），６．９６－６．９４（ｍ，２Ｈ），５．９７（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７０－５．６８（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｂｒｓ，２Ｈ），５．１４－５．００（ｍ，２Ｈ），４．６５－４．６１（ｍ，１Ｈ），４．４２－４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２５－４．１９（ｍ，１Ｈ），４．１５－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．３０－３．２１（ｍ，２Ｈ），３．０４－２．８９（ｍ，７Ｈ），２．７０－２．６４（ｍ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，１Ｈ），２．０１－１．９７（ｍ，１Ｈ），１．８３（ｓ，３Ｈ），１．７５－１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４８－１．２４（ｍ，１５Ｈ），１．１２－１．０３（ｍ，２Ｈ），０．８６－０．７８（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１２９．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－１－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）の合成

　ピレン（６０）（４．７ｍｇ，４．２μｍｏｌ）にアセトニトリル（２０８μＬ）を加え、氷冷下で８５％リン酸溶液（７２．４μＬ，１．２５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）（３．１ｍｇ，２．９μｍｏｌ）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ１２．３８（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０５－１０．０１（ｍ，１Ｈ），８．９１－８．８８（ｍ，１Ｈ），８．６５－７．９４（ｍ，１２Ｈ），７．６３－７．５８（ｍ，３Ｈ），７．４０－７．３４（ｍ，２Ｈ），６．９６－６．９３（ｍ，２Ｈ），６．００（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７０－５．６８（ｍ，１Ｈ），５．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），５．１５－４．９９（ｍ，２Ｈ），４．６４－４．６０（ｍ，１Ｈ），４．４３－４．３７（ｍ，１Ｈ），４．２５－４．２２（ｍ，１Ｈ），４．１５－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．３０－３．２１（ｍ，２Ｈ），３．０４－２．８９（ｍ，７Ｈ），２．７３－２．６９（ｍ，１Ｈ），２．４６－２．４４（ｍ，１Ｈ），２．０４－１．９６（ｍ，１Ｈ），１．８４－１．８３（ｍ，３Ｈ），１．７７－１．５９（ｍ，２Ｈ），１．４４－１．０４（ｍ，８Ｈ），０．８６－０．７７（ｍ，６Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０７３．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－２）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６６）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１）は下記のように合成した。

（１１－２－１）アルコール（６７）の合成

　Ａｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＯＨ（５０．２ｍｇ，４７．３μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２３７μＬ）に溶解させ、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３，トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスファート（２１．６ｍｇ，５６．８μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（７．４８μＬ，５６．８μｍｏｌ）を加え、室温にて１０分間撹拌した。続いて、４－アミノマンデル酸メチル（１０．３ｍｇ，５６．８μｍｏｌ）を加えて室温にて２０時間撹拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（６７）（４７．７ｍｇ，３９．１μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２２０．６５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－２－２）ピレン（６８）の合成

　（１－１－１）で得られたアルコール（６７）（４６．３ｍｇ，３７．９μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３８０μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（３４．６ｍｇ，１１４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１４．５μＬ，８５．３μｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。その後、氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（３４．５ｍｇ，１１４μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（７．７ｍｇ，５６．９μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２４．２μＬ，１４２μｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。反応後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（６８）（３７．１ｍｇ，２４．０μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７７５．３０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－２－３）ピレン（６９）の合成

　ピレン（６８）（２０．３ｍｇ，１３．１μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（９８３μＬ）、水（３２７μＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（３１．４μＬ，３１．４μｍｏｌ）を加え、室温にて２．５時間攪拌した。反応終了後、１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（６９）（１６．７ｍｇ，１０．９μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１５３４．８５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－２－４）ピレン（７０）の合成

　ピレン（６９）（１４．９ｍｇ，９．７１μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４８６μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．３μＬ，１９．４μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（７．６ｍｇ，１４．６μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（３．２ｍｇ、１４．６μｍｏｌ）を加えて室温に戻し１時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（７０）（１３．１ｍｇ，７．７１μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６９８．９０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－２－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６６）の合成

　ピレン（７０）（５．２５ｍｇ，３．０９μｍｏｌ）にアセトニトリル（３０９μＬ）を加え、氷冷下で８５％リン酸溶液（５３．８μＬ，μ９２７ｍｏｌ）を加え、室温で２５時間撹拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６６）（３．７ｍｇ，２．５１μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１４７４．００［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－３）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１１）は下記のように（１－３）とはことなる経路でも合成した。

（１１－３－１）アルコール（９６）の合成

　実施例（１－３－１）で得られたアルコール（１２）（８０．０ｍｇ，９４．１μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７．０ｍＬ）、水（２．３５ｍＬ）に溶解させ、氷冷下５分間攪拌した後、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（２２６μＬ，２２６μｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。反応終了後、１Ｍ塩酸を用いて約ｐＨ６に調整し、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記アルコール（９６）（６１．５ｍｇ，７３．６μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８３６．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－３－２）アルコール（９７）の合成

　アルコール（９６）（６０．５ｍｇ，７２．４μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３．６ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２５μＬ，１４５μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（５６．５ｍｇ，１０９μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（２３．７ｍｇ、１０９μｍｏｌ）を加えて室温に戻し３時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、アルコール（９７）（６８．０ｍｇ，７２．４μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０００．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－３－３）化合物（９８）の合成

　アルコール（９７）（１０．０ｍｇ，１０．０μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．１ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、炭酸ビス（４－ニトロフェニル）（３０．４ｍｇ，１００μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．８μＬ，２２．５μｍｏｌ）を加え、室温にて３時間攪拌した。反応後、順相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記化合物（９８）（５．６ｍｇ，４．８μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１６３．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－３－４）ピレン（１５）の合成

　化合物（９８）（１０．０ｍｇ，８．６μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８６μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｓａｒｃｏｓｉｎ－Ｐｙｒｅｎｅ（２．２ｍｇ，７．２μｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．５ｍｇ，１１μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．８μＬ，１１μｍｏｌ）を加え、室温にて４時間攪拌した。反応後、順相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することによりアセトニトリルを除去し、凍結乾燥することにより、上記ピレン（１５）（３．０ｍｇ，２．３μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１３２８．６０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－３－５）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１５）の合成
　実施例（１－３－５）と同様の方法でＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１５）は合成された。

（１１－４）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）の合成
　Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）は下記のように合成した。

（１１－４－１）化合物（１２２）の合成

　２１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－４，７，１０，１３，１６，１９－ヘキサオキサヘンエイコサン酸（１２１）（７０．０ｍｇ，１５４μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７．７２ｍＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５２．０μＬ，３０９μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（１２０ｍｇ，２３２μｍｏｌ）を加えた。次にＮ－（５－アミノペンチル）マレイミド塩酸塩（５０．６ｍｇ、２３２μｍｏｌ）を加えて室温に戻し４時間攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、化合物（１２２）（８３．４ｍｇ，１３５μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６１８．５０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－４－２）化合物（１２３）の合成

　化合物（１２２）（８２．０ｍｇ，１３３μｍｏｌ）をジクロロメタン（１３．３ｍＬ）、トリフルオロ酢酸（６．６４ｍＬ）に溶解させ、室温にて３０分間攪拌した。反応終了後、減圧濃縮によってジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸を除去し、上記化合物（１２３）（７１．８ｍｇ，ｑｕａｎｔ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１８．４０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－４－３）ピレン（１２４）の合成

　ピレン（１４）（１６．０ｍｇ，１４．０μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６９０μＬ）に溶解させたのち氷冷し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９．３μＬ，５５．０μｍｏｌ）、１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（１１ｍｇ，２１．０μｍｏｌ）を加えた。次にＰＥＧ６（１１．０ｍｇ、２１．０μｍｏｌ）を加えて室温に戻し２時間半攪拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、ピレン（１２４）（１１．２ｍｇ，６．７３μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６６４．８０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１１－４－４）Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）の合成

　ピレン（１２４）（５．０ｍｇ，３．０μｍｏｌ）にアセトニトリル（２００μＬ）を加え、氷冷下で８５％リン酸溶液（６０．０μＬ，８８０μｍｏｌ）を加え、室温で２５時間撹拌した。反応終了後、逆相分取クロマトグラフィーにて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し減圧濃縮しアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥することにより、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）（２．４ｍｇ，１．５μｍｏｌ）を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１５５２．６５［Ｍ＋Ｈ］^＋

実施例１２：ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの合成
（１２－１）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの合成
　以降の実施例では、実施例２と同様の方法でＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの調製を行った。

　（１１－１）のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　２２を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（５６）が２個導入された１５０３２２にピークが確認された。

　同様に（１１－２）のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６６）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　２４を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（６６）が２個導入された１５１１２５にピークが確認された。

　同様に（１１－４）のＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）とチオール含有抗体より、下記構造のＡＤＣ　ｍｉｍｉｃ　３３を合成した。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　ｍｉｍｉｃ（１２０）が２個導入された１５１２７９にピークが確認された。

（１２－２）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのＤＡＲ解析
　実施例１２－１で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析は既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）に従って行い、ＤＡＲは２であることを確認した。

実施例１３：疎水性カラムクロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）による、ＡＤＣおよびＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの疎水性度の評価
　既報（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１９，９１，２０，１２７２４－１２７３２）に従い、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。測定は下記の条件を用いて行った。ＨＩＣクロマトグラムにおける、ＡＤＣのリテンションタイムによってＡＤＣの疎水性度を評価することができる。

　その結果、実施例１１－１，１１－２，１１－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃはリテンションタイムが早い傾向であることが確認され、親水性度が高いことがわかる。よって、実施例１１－１，１１－２，１１－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは、血漿クリアランスが遅く、体内に留まる時間が長いと考えられることから、好ましいＡＤＣであることが確認された。

実施例１４：サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）による、ＡＤＣおよびＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの凝集率の評価
　既報（ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＳｅｌｅｃｔ，２０２０，５，８４３５－８４３９）に従い、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ分析を行った。測定は下記の条件を用いて行った。

実施例１５：酵素カテプシンＢを用いた、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの評価
　各種ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃのカテプシンＢによる切断能は下記のように、ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃから脱落した蛍光分子の量を解析することで評価した。

（１５－１）カテプシンＢ切断性試験
　実施例５と同様の方法で試験を行った。

（１５－２）ＨＰＬＣ分析を用いた、脱落した蛍光分子の量の解析
　実施例５と同様の方法で分析、解析を行った。

　表１２に示した通り、合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは十分なカテプシンＢ切断を有していることが分かった。

実施例１６：マウス血漿を用いたＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの評価
（１６－１）ＡＤＣ　ｍｉｍｉｃの血漿中安定性試験
　実施例６と同様の方法で試験を行った。

（１６－２）ＨＰＬＣ分析を用いた、脱落した蛍光分子の量の解析
　実施例６と同様の方法で分析、解析を行った。

　その結果、比較例１で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃに対し、実施例１２－４で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは２倍以上の安定性を示し、実施例１２－１，１２－２で合成したＡＤＣ　ｍｉｍｉｃは１０倍以上もの安定性を示した。

実施例１７：Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄの合成
　実施例（７－３－５）で合成したＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ　（４２）のＮＭＲスペクトルデータは次の通りであった。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ－ｄ_６）　δ１２．０６（ｂｒｓ，２Ｈ），１０．０５－１０．０７（ｍ，１Ｈ），８．４７－８．２８（ｍ，１Ｈ），８．２９－８．１９（ｍ，１Ｈ），８．１３－８．０４（ｍ，３Ｈ），７．９１－７．５６（ｍ，５Ｈ），７．３９－７．１７（ｍ，７Ｈ），６．９９（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｓ，１Ｈ），５．８６－５．６７（ｍ，１Ｈ），５．４３－５．３５（ｍ，３Ｈ），４．７７－４．１６（ｍ，６Ｈ），４．００－３．９８（ｍ，２Ｈ），３．８０－３．７６（ｍ，１Ｈ），３．５２－３．１８（ｍ，１２Ｈ），３．０１－２．７３（ｍ，９Ｈ），２．２６－２．１４（ｍ，６Ｈ），２．１２－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９７－１．９０（ｍ，２Ｈ），１．８４（ｓ，６Ｈ），１．７６－１．６９（ｍ，５Ｈ），１．４３－１．３５（ｍ，１０Ｈ），１．２３－１．１４（ｍ，３Ｈ），１．０１－０．９６（ｍ，７Ｈ），０．８３－０．６８（ｍ，２４Ｈ）．

実施例１８：ＡＤＣの合成
（１８－１）リンカー中間体の合成
（１８－１－１）リンカー中間体（１１５）の合成

　５－アジドペンタン酸（８００ｍｇ，５．５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１４ｍＬ）に溶解させ、クロロギ酸イソブチル（８０８μＬ，６．１５ｍｍｏｌ）、Ｎ－メチルモルホリン（８７３μＬ，８．３９ｍｍｏｌ）を加え０℃にて３０分攪拌した後、１Ｍ　ＮａＯＨ水溶液（４ｍＬ）に溶解したヒドラジン水和物（１．３６ｇ，６．７１ｍｍｏｌ）を加えて室温にて３時間攪拌した。減圧下濃縮した後、１Ｍ　ＮａＯＨ水溶液を加え、系内のｐＨをｐＨ１０に調整し、酢酸エチルで洗浄後、水層に１Ｍ　ＨＣｌ水溶液を加え、系内のｐＨを３．０に調整し、酢酸エチルを加えて洗浄し、得られた酢酸エチル溶液に硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより硫酸ナトリウムを取り除き、減圧下濃縮カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することにより、リンカー中間体（１１５）を得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ６．２９（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｔｄ，Ｊ＝８．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５３－２．３８（ｍ，３Ｈ），２．３６－２．１６（ｍ，３Ｈ），２．１２（ｓ，２Ｈ），１．９６（ｄｑ，Ｊ＝１４．７，７．６Ｈｚ，１Ｈ），１．８４－１．５９（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１８－１－２）リンカー中間体（１１７）の合成

　リンカー中間体（１１６）（２．４１ｇ，５．５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２８ｍＬ）に溶解させ、チオフェノール（６２７μＬ，６．１５ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ（３．４９ｇ，６．７１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．４２ｍＬ，８．３９ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。その後、減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより、リンカー中間体（１１７）を得た（２．２０ｇ，５．２３ｍｍｏｌ）。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４３（ｓ，５Ｈ），６．１０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｔｄ，Ｊ＝７．７，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．８７－２．６３（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．１６－１．９８（ｍ，１Ｈ），１．８３－１．５８（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．３７－１．２２（ｍ，２Ｈ），０．９１（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２１［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１８－１－３）リンカー中間体（１１８）の合成

　リンカー中間体（１１７）（２．２０ｇ，５．２３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えて、室温にて１時間攪拌した後、減圧下濃縮しジクロロメタンを除去し、水を加えて凍結乾燥することにより、リンカー中間体（１１８）を得た（１．９８ｇ，５．４３ｍｍｏ）。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４４（ｓ，Ｊ＝６．３，４．６，２．４Ｈｚ，５Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｔｄ，Ｊ＝７．５，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｑｔ，Ｊ＝１６．８，６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．３３（ｄｔ，Ｊ＝１２．４，６．８Ｈｚ，３Ｈ），２．１８（ｄｑ，Ｊ＝１４．４，７．４Ｈｚ，１Ｈ），１．７４（ｄｑ，Ｊ＝１１．８，７．５，６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝１７．７，１０．５，４．８Ｈｚ，２Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１８－１－４）リンカー中間体（１１９）の合成

　リンカー中間体（１１８）（１００ｍｇ，０．２７４ｍｍｏ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解させ、（４０．６μＬ，０．２８０ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ（１５０ｍｇ，０．２８８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７０．１μＬ，０．４１２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。１Ｍ　ＨＣｌ水溶液を加えて系内をｐＨ３に調整し、ジクロロメタンを加えて希釈し、水、食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより、硫酸ナトリウムを除去した後、減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより、リンカー中間体（１１９）を得た（８４．７ｍｇ，０．１７１ｍｍｏｌ）。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．５０－７．３８（ｍ，５Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．７８（ｔｄｄ，Ｊ＝７．８，４．６，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７０－３．５４（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｄｔ，Ｊ＝９．１，６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．９６－２．６７（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｐｄ，Ｊ＝７．１，４．５Ｈｚ，２Ｈ），１．８５－１．６０（ｍ，６Ｈ），１．４９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１８－１－５）リンカー中間体（１２０）の合成

　リンカー中間体（１１９）（８４．７ｍｇ，０．１７１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えて、室温にて１時間攪拌した後、減圧下濃縮しジクロロメタンを除去し、水を加えて凍結乾燥した後、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することによりリンカー中間体（１２０）を得た（４６．８ｍｇ，０．１０７ｍｍｏ）。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｄ４）δ７．４４（ｄｑ，Ｊ＝２．３，１．５Ｈｚ，５Ｈ），４．６９－４．５７（ｍ，１Ｈ），３．７９－３．６７（ｍ，２Ｈ），３．４０－３．３０（ｍ，２Ｈ），２．８９－２．７１（ｍ，２Ｈ），２．４４－２．２３（ｍ，４Ｈ），２．０８－１．９５（ｍ，１Ｈ），１．８２－１．６１（ｍ，４Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４３９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１８－２）アジド基を有する親和性試薬（１８）の調製

（上記アミノ酸配列は、配列番号１のアミノ酸配列である。）

　既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）記載のＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＩＩＷＣＴＹＨ－ＮＨ２（配列番号１、３０．９ｍｇ，１４．９μｍｏｌ、ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）をジメチルホルムアミド（４６８μＬ）に溶解し、実施例１８－１－５で合成したリンカー中間体（１２０）４６．８ｍｇ，０．１０７ｍｍｏｌ）、ＷＳＣ・ＨＣｌ（２９．７ｍｇ，０．１５５ｍｍｏｌ）を加え、室温にて５時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより、溶出した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することによりアセトニトリルを除去した後、凍結乾燥を行い、上記修飾試薬（１２１）を得た（１５．１ｍｇ，６．０２μｍｏｌ）。

（１８－３）２分子のペプチド試薬のＴｒａｓｔｕｚｕｍａｂへの導入

　続いて、実施例１８－２で調製したペプチド試薬（１２１）を用いて、トラスツズマブに対して既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）の手法に従い、コンジュゲーションを実施した。結果、修飾試薬（１２１）が導入された抗体を得た。ペプチド試薬（１２１）が導入された抗体のＤＡＲ分析は既報（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１９，９１，２０，１２７２４－１２７３２）に従い、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析を行い、２つのペプチド試薬が導入されたことを確認した。

（１８－４）アジド基が導入されたトラスツズマブ（Ｔ－１）の合成

　実施例１８－３で得た修飾試薬（１２１）が導入された抗体に対して、既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）の手法を参考に、メトキシアミン溶液を加え、室温で３時間振盪することで、切断反応を実施した。結果、アジド基が導入された抗体を得た。分析は既報（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１９，９１，２０，１２７２４－１２７３２）に従い、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析を行い、アジド基が導入されていることを確認した。

（１８－５）ＡＤＣ７の合成
　上記アジド導入抗体に対して、Ｌｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）を加え、ＡＤＣ（７）を得た。ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を行い、反応生成物はＬｉｎｋｅｒ－ｐａｙｌｏａｄ（４０）が２個導入された１５１２７６にピークが確認された。また、ＥＳＩ－ＴＯＦＭＳ分析を既報（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１）に従って行い、ＤＡＲは２であることを確認した。

実施例１９：マウス血漿を用いた、ＡＤＣの評価
（１９－１）ＡＤＣの血漿中安定性試験
　マウス血漿（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ社製）５００μＬに対し、０．１ｍｇ／ｍＬの濃度になるようにＡＤＣ　ｍｉｍｉｃを加えたのち滅菌ろ過を行った。この溶液を６本のエッペンチューブに５０μＬずつ分注した。６本のサンプルのうち３本は、３７℃に設定したインキュベーターで４日間保管した。残りの３本は－８０℃の冷凍庫の中で同様に４日間保管した。各サンプルにアセトニトリルを１００μＬずつ加えてボルテックスで攪拌したのち遠心分離を行うことで、沈殿物を得た。生じた上澄み溶液を回収し、ＨＰＬＣ分析を行った。

（１９－２）ＨＰＬＣ分析を用いた、脱落したｐａｙｌｏａｄの量の解析
　測定は、液体クロマトグラフィー質量分析法（タンデム質量分析法を含む）を用いて、ＡＤＣから脱落したペイロード量を測定した。実施例１９－１で－８０℃の冷凍庫の中で同様に４日間保管したサンプルを０日目のものとし、実施例１９－１にて３７℃で４日間インキュベーションした３本のサンプルを４日目のものとし、４日目サンプルと０日目サンプルから検出されたペイロードのＭＳ強度を抽出イオンクロマトグラムによってそれぞれ算出し、それらの差分を解析した。

　別途ＭＭＡＥを用いて、ＨＰＬＣによるＴＩＣのエリア面積と、濃度の相関を算出した。その算出式を用いて上記各ＡＤＣの蛍光強度のＴＩＣを濃度に変換した。Ｄａｙ０の濃度を１００％としたときの、前述のイオンクロマトグラムの差分の割合を脱落率として算出した。

　その結果、実施例７－１，７－２，７－３で合成したＡＤＣは高い安定性を持つことが分かった。

Claims

　下記式（Ｉ）：

〔式中、
　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基を介して、Ｉｇに隣接するＬ_１と位置選択的に結合しており、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｄは、機能性物質を示し、
　２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率ｒは、１．５～２．５である。〕で表される構造単位を含む、抗体および機能性物質の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　イムノグロブリン単位がヒトイムノグロブリン単位である、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　ヒトイムノグロブリン単位がヒトＩｇＧ抗体である、請求項２記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　リジン残基が、Ｅｕ　ｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位に存在する、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　Ｌ_１がカルボニル基を有し、
　位置選択的な結合が、リジン残基の側鎖中のアミノ基、およびＬ_１中のカルボニル基の結合によるアミド結合により達成される、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　ｒが、１．９～２．１である、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　親水性基が、カルボン酸基、スルホン酸基、水酸基、ポリエチレングリコール基、ポリサルコシン基、および糖部分からなる群より選ばれる１以上の基である、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　環Ａが、置換基を有していてもよいフェニレン基である、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　機能性物質が、医薬、標識物質、または安定化剤である、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　前記位置選択的なコンジュゲートは、サイズ排除クロマトグラフィーにより分析したときに、２．６％以下の凝集率を示す、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　式（Ｉ）で表される構造単位が、下記式（Ｉ’）：

〔式中、
　Ｉｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｄ、およびｒは、それぞれ、式（Ｉ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される構造単位を含む、請求項１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　親水性基を含んでいてもよい２価の基（－Ｌ_ＨＧ－）が、下記式（ａ）：
－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ１－（Ｃ＝Ｏ）_ｎ２－（ＮＲ_ＨＧ）_ｎ３－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_ｎ４－　（ａ）
〔式中、
　複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　ｎ１は、０～３の整数であり、
　ｎ２は、０または１の整数であり、
　ｎ３は、０または１の整数であり、
　ｎ４は、０～３の整数である。〕で表される２価の基である、請求項１１記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　式（ａ）で表される２価の基が、下記式（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）：
（ａ１）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；
（ａ２）　－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－（Ｃ＝Ｏ）－（ＮＲ_ＨＧ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）－；または
（ａ３）　－（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ（Ｒ_ＨＧ）_２）_２－；
〔式中、
　複数のＲ_ＨＧは、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含む炭素原子数１～６のアルキル基を示す。〕で表される２価の基である、請求項１２記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　親水性基が、それぞれ独立して、カルボン酸基、スルホン酸基、または水酸基である、請求項１～１３のいずれか一項記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　親水性基が、カルボン酸基である、請求項１４記載の位置選択的なコンジュゲートまたはその塩。
　下記式（ＩＩ）：

〔式中、
　Ｉｇは、２個の重鎖および２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、かつ、２個の重鎖中のリジン残基の側鎖中のアミノ基を介して、Ｉｇに隣接するＬ_１と位置選択的に結合しており、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_２は、生体直交性官能基を示し、
　２個の重鎖あたりの前記結合の平均比率ｒは、１．５～２．５である。〕で表される構造単位を含む、生体直交性官能基を位置選択的に有する抗体誘導体またはその塩。
　生体直交性官能基が、マレイミド残基、チオール残基、フラン残基、ハロカルボニル残基、アルケン残基、アルキン残基、アジド残基、またはテトラジン残基である、請求項１６記載の抗体誘導体またはその塩。
　式（ＩＩ）で表される構造単位が、下記式（ＩＩ’）：

〔式中、
　Ｉｇ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_２、およびｒは、それぞれ、式（ＩＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される構造単位を含む、請求項１６記載の抗体誘導体またはその塩。
　下記式（ＩＩＩ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示し、
　Ｄは、機能性物質を示す。〕で表される、生体直交性官能基および機能性物質を有する化合物またはその塩。
　式（ＩＩＩ）で表される化合物が、下記式（ＩＩＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＤは、それぞれ、式（ＩＩＩ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される、請求項１９記載の化合物またはその塩。
　請求項１９記載の化合物またはその塩を含む、抗体の誘導体化試薬。
　下記式（ＩＶ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　Ｒ_１、およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１、およびＬ_２は、それぞれ独立して、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、第１生体直交性官能基を示し、
　Ｂ_２は、第２生体直交性官能基を示す。〕で表される、第１生体直交性官能基および第２生体直交性官能基を有する化合物またはその塩。
　式（ＩＶ）で表される構造単位が、下記式（ＩＶ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｂ_１、およびＢ_２は、それぞれ、式（ＩＶ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される、請求項２２記載の化合物またはその塩。
　請求項２２記載の化合物またはその塩を含む、抗体または機能性物質の誘導体化試薬。
　下記（１）、（２）、または（３）の化合物またはその塩：
（１）下記式（Ｖ）：

〔式中、
　ＨＧは、親水性基、または親水性基を含む１価の基を示し、
　Ｒ_Ａは、バリン残基の側鎖を示し、
　Ｒ_Ｂは、シトルリン残基、またはアラニン残基の側鎖を示し、
　環Ａは、置換基を有していてもよい２価の芳香族環基を示し、
　ＸおよびＹは、それぞれ独立して、１価の基を示す。〕で表される、化合物またはその塩；
（２）下記式（ＶＩ）：

〔式中、
　ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＸは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｒ_２は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_２は、２価の基を示し、
　Ｂ_２は、生体直交性官能基を示す。〕で表される、生体直交性官能基を有する化合物またはその塩；あるいは
（３）下記式（ＶＩＩ）：

〔式中、
　ＨＧ、Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＹは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｒ_１は、水素原子、または１価の基を示し、
　Ｌ_１は、２価の基を示し、
　Ｂ_１は、生体直交性官能基を示す。〕で表される、生体直交性官能基を有する化合物またはその塩。
　前記（１）、（２）、または（３）の化合物が、それぞれ、下記（１’）、（２’）、または（３’）の化合物である、請求項２５記載の化合物またはその塩：
（１’）下記式（Ｖ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、Ｘ、およびＹは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧは、結合、または親水性基を含んでいてもよい２価の基を示し、
　Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ独立して、水素原子、親水性基、または親水性基を含んでいてもよい１価の基を示し、
　少なくとも１つの親水性基が、Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２からなる群より選ばれる１以上の部位において含まれる。〕で表される、化合物またはその塩；
（２’）下記式（ＶＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＸは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ、式（Ｖ’）で示されるものと同じであり、
　Ｒ_２、Ｌ_２、およびＢ_２は、それぞれ、式（ＶＩ）で示されるものと同じである。〕で表される、化合物またはその塩；あるいは
（３’）下記式（ＶＩＩ’）：

〔式中、
　Ｒ_Ａ、Ｒ_Ｂ、環Ａ、およびＹは、それぞれ、式（Ｖ）で示されるものと同じであり、
　Ｌ_ＨＧ、Ｒ_ＨＧ１、およびＲ_ＨＧ２は、それぞれ、式（Ｖ’）で示されるものと同じであり、
　Ｒ_１、Ｌ_１、およびＢ_１は、それぞれ、式（ＶＩＩ）で示されるものと同じである。〕で表される、請求項２５記載の化合物またはその塩。