JP2024010532A

JP2024010532A - 化合物またはその塩

Info

Publication number: JP2024010532A
Application number: JP2022111915A
Authority: JP
Inventors: 慧山田; Kei Yamada; 友博藤井; Tomohiro Fujii; 豊松田; Yutaka Matsuda; 紀子畑田; Noriko Hatada
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 2022-07-12
Filing date: 2022-07-12
Publication date: 2024-01-24

Abstract

【課題】抗体に対する親和性物質との反応性に優れる化合物中間体を提供すること。
【解決手段】下記式（１）：

〔式中、Ｆは、フッ素原子を示し、Ｏは、酸素原子を示し、Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、Ｌ_１は、第１リンカーを示し、Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し、Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、Ｘは、脱離基を示す。〕で表される化合物またはその塩。
【選択図】なし

Description

本発明は、化合物またはその塩に関する。

近年、抗体薬物複合体（ＡｎｔｉｂｏｄｙＤｒｕｇＣｏｎｊｕｇａｔｅ：ＡＤＣ）の研究開発が盛んに行われている。ＡＤＣはその名の通り、抗体に薬物（例、抗がん剤）をコンジュゲーションした薬剤であり、がん細胞などに対して直接的な殺細胞活性を有する。代表的なＡＤＣとしては、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅ社およびＲｏｃｈｅ社が共同開発したＴ－ＤＭ１（商品名：カドサイラ（登録商標））がある。

Ｔ－ＤＭ１を始めとするＡＤＣは、開発当初からその不均一性が問題となっている。例えば、抗体中に７０～８０程度あるリジン残基に対して、低分子薬物をランダムに反応させているため、薬物抗体比（ＤｒｕｇＡｎｔｉｂｏｄｙＲａｔｉｏ：ＤＡＲ）やコンジュゲーション位置が一定ではない。通常このようなランダムコンジュゲーション法になるとＤＡＲが０～８の範囲となり、薬物の結合数が異なる複数の抗体薬剤が生じることが分かっている。近年ＡＤＣの薬物の結合数および結合位置を変化させると、体内動態や薬物の放出速度、効果が変化することが報告されている。これらのことから次世代型ＡＤＣではコンジュゲーションする薬物の個数と位置を制御することが求められている。個数および位置が一定であると、期待通りのｅｆｆｉｃａｃｙ、コンジュゲーション薬剤のバリエーション、ロット差いわゆるレギュレーションの問題が解決すると考えられている。

抗体の位置選択的修飾法は世界中で研究されているが、そのほとんどが遺伝子工学的手法もしくは酵素を用いた修飾法である。遺伝子工学的修飾法に関しては、位置選択性、個数選択性は制御できるものの、抗体自体の発現効率が低下（ＡＤＣを調製する際の総収率が低下）するなどの問題が指摘されている。また、抗体発現系の構築などに長い年月を要することが問題となっている。

最近、化学合成的手法により抗体の位置選択的な修飾を可能にするＣ－ＣＡＰ（ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｊｕｇａｔｉｏｎｂｙＡｆｆｉｎｉｔｙＰｅｐｔｉｄｅ）法が開発された（特許文献１）。本方法は、親和性ペプチド（ＡｆｆｉｎｉｔｙＰｅｐｔｉｄｅ）に対してＮＨＳ活性化エステルおよび薬物が連結されたペプチド試薬を抗体と反応させることにより、抗体の位置選択的な修飾に成功している。しかし、本方法により作製されるＡＤＣは、抗体と薬物がペプチド部分を含むリンカーを介して結合している。ペプチド部分は、潜在的な免疫原性を有し、また血中で加水分解され易い。したがって、本方法により作製されるＡＤＣは、リンカー中にペプチド部分を含む点で改善の余地がある。

上記Ｃ－ＣＡＰ法の改良方法として、親和性ペプチドを含む所定の化合物を用いる化学合成的手法により、ペプチド部分をリンカーとして含まない、機能性物質（例、薬物）を位置選択的に有する抗体を調製できる技術が報告されている（特許文献２～５）。これらの技術によれば、（Ａ）（ａ）抗体に対する親和性物質、（ｂ）切断性部分（切断により生体直交性官能基を生成してもよい。切断により生体直交性官能基を生成できる切断性部分としては、例えば、切断によりチオール基を生成できるチオエステル結合が挙げられる）、および（ｃ）抗体に対する反応性基、ならびに（ｄ）必要に応じて生体直交性官能基を含む化合物またはその塩を抗体と反応させて、（Ｂ）（ａ）抗体に対する親和性物質、および（ｂ）切断性部分、ならびに（ｄ）必要に応じて生体直交性官能基を含む抗体中間体またはその塩を生成すること、（Ｂ）抗体中間体またはその塩における切断性部分を切断して、（Ｃ）生体直交性官能基を含む抗体誘導体またはその塩を生成すること、ならび
に（Ｃ）生体直交性官能基を含む抗体誘導体またはその塩を機能性物質と反応させて、（Ｄ）抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩を生成することができる（特許文献２～５。特に図１、２を参照）。

国際公開第２０１６／１８６２０６号国際公開第２０１８／１９９３３７号国際公開第２０１９／２４０２８７号国際公開第２０１９／２４０２８８号国際公開第２０２０／０９０９７９号

上述した（Ａ）の化合物の作製のためには、（Ａ’）（ａ’）抗体に対する親和性物質に対する反応性基、（ｂ）切断性部分（切断により生体直交性官能基を生成してもよい）、および（ｃ）抗体に対する反応性基、ならびに（ｄ）必要に応じて生体直交性官能基を含む化合物中間体またはその塩を、抗体に対する親和性物質と反応させる必要がある。よって、本発明の目的は、抗体に対する親和性物質との反応性に優れる化合物中間体を提供することである。

本発明者らは、鋭意検討した結果、式（１）で表される化合物またはその塩が、抗体に対する親和性物質との反応性に優れるため、上記（Ａ）の化合物またはその塩の作製のための化合物中間体として有用であることを見出した。本発明者らはまた、上記（Ａ）の化合物またはその塩として、式（２）で表される化合物またはその塩を生成できること、よって、式（１）および（２）で表される化合物またはその塩の提供により、上記のような抗体中間体またはその塩、生体直交性官能基を含む抗体誘導体またはその塩、ならびに抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩を作製できることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、以下のとおりである。
〔１〕式（１）で表される化合物またはその塩。
〔２〕式（１）で表される化合物が、式（１ａ）で表される、〔１〕の化合物またはその塩。
〔３〕Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよいアルキレンを示す、〔２〕の化合物またはその塩。
〔４〕Ｌ_１が、置換されていてもよい炭素原子数１または２個のアルキレンを示す、〔３〕の化合物またはその塩。
〔５〕Ｌ_２’が、置換されていてもよい炭素原子数１～５個のアルキレンを示す、〔３〕または〔４〕の化合物またはその塩。
〔６〕式（１）で表される化合物が、式（１ｂ）で表される、〔１〕の化合物またはその塩。
〔７〕Ｌ_１’が、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個である）を示す、〔６〕の化合物またはその塩。
〔８〕主鎖を構成する原子が、炭素原子、窒素原子、酸素原子および硫黄原子、ならびにそれらの組み合わせからなる群より選ばれる、〔７〕の化合物またはその塩。
〔９〕Ｌ_２が、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい炭素原子数１～５個のアルキレンを示す、〔６〕～〔８〕のいずれかの化合物またはその塩。
〔１０〕式（１ｂ）で表される化合物が、式（１ｂ’）で表される、〔６〕の化合物またはその塩。
〔１１〕式（２ａ）で表される化合物またはその塩。
〔１２〕式（２ｂ）で表される化合物またはその塩。
〔１３〕式（２ｂ）で表される化合物が、式（２ｂ’）で表される、〔１２〕の化合物またはその塩。
〔１４〕式（２）で表される化合物またはその塩を含む、抗体の誘導体化試薬。

本発明の化合物またはその塩は、抗体の誘導体化に有用である。

図１は、本発明の一実施形態の概要を示す図である。抗体と化合物との間の反応様式の詳細は、例えば、特許文献２～５を参照のこと（図２～４も同様）。図２は、本発明の別の実施形態の概要を示す図である。図３は、本発明のさらに別の実施形態の概要を示す図である。図４は、本発明のさらに別の実施形態の概要を示す図である。

１．一般的な用語の定義
本明細書において、特定の発明または事項の説明に使用される用語および表現は、別の発明または事項の説明でも援用することができる。したがって、特定の発明または事項の説明に使用される用語および表現の定義、例、および好ましい例は、そのような用語及び表現で説明される別の発明または事項についても同様であってもよい。

本発明において、用語「抗体」は、以下のとおりである。また、用語「イムノグロブリン単位」は、このような抗体の構成単位である２価の単量体単位に対応するものであり、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位である。したがって、イムノグロブリン単位について、その由来、種類（ポリクローナルもしくはモノクローナル、アイソタイプ、および全長抗体もしくは抗体断片）、抗原、アミノ酸残基（例、リジン残基）の位置、および位置選択性等の用語および表現の定義、例、および好ましい例は、以下に説明する抗体のものと同様であり、表現「抗体」と交換可能に使用される。

抗体の由来は、特に限定されず、例えば、哺乳動物、鳥類（例、ニワトリ）等の動物に由来するものであってもよい。好ましくは、イムノグロブリン単位は、哺乳動物に由来する。このような哺乳動物としては、例えば、霊長類（例、ヒト、サル、チンパンジー）、齧歯類（例、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ）、愛玩動物（例、イヌ、ネコ）、家畜（例、ウシ、ブタ、ヤギ）、使役動物（例、ウマ、ヒツジ）が挙げられ、好ましくは霊長類または齧歯類であり、より好ましくはヒトである。

抗体の種類は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であってもよい。抗体はまた、２価の抗体（例、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）、または４価以上の抗体（例、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体）であってもよい。好ましくは、抗体は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体としては、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、所定の糖鎖が付加された抗体（例、Ｎ型糖鎖結合コンセンサス配列等の糖鎖結合コンセンサス配列を有するように改変された抗体）、二重特異性抗体、Ｆｃ領域タンパク質、Ｆｃ融合タンパク質が挙げられる。モノクローナル抗体のアイソタイプとしては、例えば、ＩｇＧ（例、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＹが挙げられる。本発明では、モノクローナル抗体として、全長抗体、または可変領域ならびにＣＨ１ドメインおよびＣＨ２ドメインを含む抗体断片を利用できるが、全長抗
体が好ましい。抗体は、好ましくはヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、より好ましくはヒトＩｇＧ全長モノクローナル抗体である。

抗体の抗原としては、任意の抗原を用いることができる。例えば、このような抗原としては、タンパク質〔オリゴペプチド、ポリペプチドを含む。糖等の生体分子で修飾されたタンパク質（例、糖タンパク質）であってもよい〕、糖鎖、核酸、低分子化合物が挙げられる。好ましくは、抗体は、タンパク質を抗原とする抗体であってもよい。タンパク質としては、例えば、細胞膜受容体、細胞膜受容体以外の細胞膜タンパク質（例、細胞外基質タンパク質）、リガンド、可溶性受容体が挙げられる。

より具体的には、抗体の抗原であるタンパク質は、疾患標的タンパク質であってもよい。疾患標的タンパク質としては、例えば、以下が挙げられる。

（１）がん領域
ＰＤ－Ｌ１、ＧＤ２、ＰＤＧＦＲα（血小板由来成長因子受容体）、ＣＤ２２、ＨＥＲ２、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ＥｐＣＡＭ、フィブロネクチン、ＰＤ－１、ＶＥＧＦＲ－２、ＣＤ３３、ＨＧＦ、ｇｐＮＭＢ、ＣＤ２７、ＤＥＣ－２０５、葉酸受容体、ＣＤ３７、ＣＤ１９、Ｔｒｏｐ２、ＣＥＡＣＡＭ５、Ｓ１Ｐ、ＨＥＲ３、ＩＧＦ－１Ｒ、ＤＬＬ４、ＴＮＴ－１／Ｂ、ＣＰＡＡｓ、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、ＣＤ１０５（エンドグリン）、ＩＣＡＭ－１、ＣＤ３０、ＣＤ１６Ａ、ＣＤ３８、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＫＩＲ２ＤＬ１，２，、ＮＫＧ２Ａ、ｔｅｎａｓｃｉｎ－Ｃ、ＩＧＦ（Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）、ＣＴＬＡ－４、ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ、ＣＤ１３８、ｃ－Ｍｅｔ、Ａｎｇ２、ＶＥＧＦ－Ａ、ＣＤ７９ｂ、ＥＮＰＤ３、葉酸受容体α、ＴＥＭ－１、ＧＭ２、グリピカン３、ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ、ＣＤ７４、Ｎｏｔｃｈ１、Ｎｏｔｃｈ２、Ｎｏｔｃｈ３、ＣＤ３７、ＴＬＲ－２、ＣＤ３、ＣＳＦ－１Ｒ、ＦＧＦＲ２ｂ、ＨＬＡ－ＤＲ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＥｐｈＡ３、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ１２３、ｇｐＡ３３、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ７受容体、ＤＬＬ４、ＶＥＧＦ、ＲＳＰＯ、ＬＩＶ－１、ＳＬＩＴＲＫ６、Ｎｅｃｔｉｎ－４、ＣＤ７０、ＣＤ４０、ＣＤ１９、ＳＥＭＡ４Ｄ（ＣＤ１００）、ＣＤ２５、ＭＥＴ、ＴｉｓｓｕｅＦａｃｔｏｒ、ＩＬ－８、ＥＧＦＲ、ｃＭｅｔ、ＫＩＲ３ＤＬ２、Ｂｓｔ１（ＣＤ１５７）、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡ、ＧＩＴＲ、ＴＡＭ（ｔｕｍｏｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅ）、ＣＥＡ、ＤＬＬ４、Ａｎｇ２、ＣＤ７３、ＦＧＦＲ２、ＣＸＣＲ４、ＬＡＧ－３、ＧＩＴＲ、ＦｕｃｏｓｙｌＧＭ１、ＩＧＦ－１、Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ２、ＣＳＦ－１Ｒ、ＦＧＦＲ３、ＯＸ４０、ＢＣＭＡ、ＥｒｂＢ３、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＰＴＫ７、ＥＦＮＡ４、ＦＡＰ、ＤＲ５、ＣＥＡ、Ｌｙ６Ｅ、ＣＡ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＬＡＭＰ１、ｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒ、ＥＰＨＡ２、ＤＲ５、Ｂ７－Ｈ３、ＦＧＦＲ４、ＦＧＦＲ２、α２－ＰＩ、Ａ３３、ＧＤＦ１５、ＣＡＩＸ、ＣＤ１６６、ＲＯＲ１、ＧＩＴＲ、ＢＣＭＡ、ＴＢＡ、ＬＡＧ－３、ＥｐｈＡ２、ＴＩＭ－３、ＣＤ－２００、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１６Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＰＩＧＦ、Ａｘｌ、ＭＩＣＡ／Ｂ、Ｔｈｏｍｓｅｎ－Ｆｒｉｅｄｅｎｒｅｉｃｈ、ＣＤ３９、ＣＤ３７、ＣＤ７３、ＣＬＥＣ１２Ａ、Ｌｇｒ３、トランスフェリン受容体、ＴＧＦβ、ＩＬ－１７、５Ｔ４、ＲＴＫ、ＩｍｍｕｎｅＳｕｐｐｒｅｓｓｏｒＰｒｏｔｅｉｎ、ＮａＰｉ２ｂ、ルイス血液型Ｂ抗原、Ａ３４、Ｌｙｓｉｌ－Ｏｘｉｄａｓｅ、ＤＬＫ－１、ＴＲＯＰ－２、α９インテグリン、ＴＡＧ－７２（ＣＡ７２－４）、ＣＤ７０

（２）自己免疫疾患・炎症性疾患
ＩＬ－１７、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－１７Ｒ、ＩＮＦ－α、ＩＬ－５Ｒ、ＩＬ－１３、ＩＬ－２３、ＩＬ－６、ＡｃｔＲＩＩＢ、β７－Ｉｎｔｅｇｒｉｎ、ＩＬ－４αＲ、ＨＡＳ、Ｅｏｔａｘｉｎ－１、ＣＤ３、ＣＤ１９、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１５、ＣＤ３ε、Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ、ＩＬ－１β、ＩＬ－１α、ＩＬ－１７、ＴＳＬＰ（ＴｈｙｍｉｃＳｔ
ｒｏｍａｌＬｙｍｐｈｏｐｏｉｅｔｉｎ）、ＬＡＭＰ（Ａｌｐｈａ４Ｂｅｔａ７Ｉｎｔｅｇｒｉｎ）、ＩＬ－２３、ＧＭ－ＣＳＦＲ、ＴＳＬＰ、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＴＬＲ－３、ＢＡＦＦ－Ｒ、ＭＡｄＣＡＭ、ＩＬ－３１Ｒ、ＩＬ－３３、ＣＤ７４、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ７９Ｂ、ＩｇＥ（免疫グロブリンＥ）、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、Ｃ５、ＦｃＲｎ、ＣＤ２８、ＴＬＲ４、ＭＣＡＭ、Ｂ７ＲＰ１、ＣＸＣＲ１，２Ｌｉｇａｎｄｓ、ＩＬ－２１、Ｃａｄｈｅｒｉｎ－１１、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＬ２０、ＩＬ－３６Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＣＤ８６、ＴＮＦ－α、ＩＬ－７Ｒ、Ｋｖ１．３、α９インテグリン、ＬＩＦＨＴ

（３）脳神経疾患
ＣＧＲＰ、ＣＤ２０、βアミロイド、βアミロイドプロトフィブリン、ＣａｌｃｉｔｏｎｉｎＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅＲｅｃｅｐｔｏｒ、ＬＩＮＧＯ（ＩｇＤｏｍａｉｎＣｏｎｔａｉｎｉｎｇ１）、αシヌクレイン、細胞外ｔａｕ、ＣＤ５２、インスリン受容体、ｔａｕタンパク、ＴＤＰ－４３、ＳＯＤ１、ＴａｕＣ３、ＪＣウイルス

（４）感染症
ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍＤｉｆｆｉｃｉｌｅｔｏｘｉｎＢ、サイトメガロウイルス、ＲＳウイルス、ＬＰＳ、Ｓ．ＡｕｒｅｕｓＡｌｐｈａ－ｔｏｘｉｎ、Ｍ２ｅタンパク、Ｐｓｌ、ＰｃｒＶ、Ｓ．Ａｕｒｅｕｓｔｏｘｉｎ、インフルエンザＡ、Ａｌｇｉｎａｔｅ、黄色ブドウ球菌、ＰＤ－Ｌ１、インフルエンザＢ、アシネトバクター、Ｆ－ｐｒｏｔｅｉｎ、Ｅｎｖ、ＣＤ３、病原性大腸菌、クレブシエラ、肺炎球菌

（５）遺伝性・希少疾患
アミロイドＡＬ、ＳＥＭＡ４Ｄ（ＣＤ１００）、インスリン受容体、ＡＮＧＰＴＬ３、ＩＬ４、ＩＬ１３、ＦＧＦ２３、副腎皮質刺激ホルモン、トランスサイレチン、ハンチンチン

（６）眼疾患
ＦａｃｔｏｒＤ、ＩＧＦ－１Ｒ、ＰＧＤＦＲ、Ａｎｇ２、ＶＥＧＦ－Ａ、ＣＤ－１０５（Ｅｎｄｏｇｌｉｎ）、ＩＧＦ－１Ｒ、βアミロイド

（７）骨・整形外科領域
Ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ、Ｍｙｏｓｔａｔｉｎ、Ｄｉｃｋｋｏｐｆ－１、ＧＤＦ８、ＲＮＡＫＬ、ＨＡＳ、Ｓｉｇｌｅｃ－１５

（８）血液疾患
ｖＷＦ、ＦａｃｔｏｒＩＸａ、ＦａｃｔｏｒＸ、ＩＦＮγ、Ｃ５、ＢＭＰ－６、Ｆｅｒｒｏｐｏｒｔｉｎ、ＴＦＰＩ

（９）その他の疾患
ＢＡＦＦ（Ｂｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ）、ＩＬ－１β、ＰＣＳＫ９、ＮＧＦ、ＣＤ４５、ＴＬＲ－２、ＧＬＰ－１、ＴＮＦＲ１、Ｃ５、ＣＤ４０、ＬＰＡ、プロラクチン受容体、ＶＥＧＦＲ－１、ＣＢ１、Ｅｎｄｏｇｌｉｎ、ＰＴＨ１Ｒ、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＩＬ－１β、ＡＴ２－Ｒ、ＩＡＰＰ

モノクローナル抗体の具体例としては、特定のキメラ抗体（例、リツキシマブ、バシリキシマブ、インフリキシマブ、セツキシマブ、シルツキシマブ、ディヌツキシマブ、オルタトキサシマブ）、特定のヒト化抗体（例、ダクリヅマブ、パリビズマブ、トラスツズマブ、アレンツズマブ、オマリヅマブ、エファリヅマブ、ベバシヅマブ、ナタリヅマブ（Ｉ
ｇＧ４）、トシリヅマブ、エクリヅマブ（ＩｇＧ２）、モガムリヅマブ、ペルツヅマブ、オビヌツヅマブ、ベドリヅマブ、ペンプロリヅマブ（ＩｇＧ４）、メポリヅマブ、エロツヅマブ、ダラツムマブ、イケセキヅマブ（ＩｇＧ４）、レスリヅマブ（ＩｇＧ４）、アテゾリヅマブ）、特定のヒト抗体（例、アダリムマブ（ＩｇＧ１）、パニツムマブ、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、カナキヌマブ、オファツムマブ、デノスマブ（ＩｇＧ２）、イピリムマブ、ベリムマブ、ラキシバクマブ、ラムシルマブ、ニボルマブ、デュピルマブ（ＩｇＧ４）、セクキヌマブ、エボロクマブ（ＩｇＧ２）、アリロクマブ、ネシツムマブ、ブロダルマブ（ＩｇＧ２）、オララツマブ）が挙げられる（ＩｇＧサブタイプに言及していない場合、ＩｇＧ１であることを示す）。

本発明では、抗体中の重鎖の定常領域における特定のアミノ酸残基を位置選択的に修飾することができる。このような特定のアミノ酸残基としては、例えば、リジン残基、チロシン残基、セリン残基、およびスレオニン残基が挙げられる。例えば、ヒトＩｇＧ１等のヒトＩｇＧでは、重鎖定常領域に存在する下記アミノ酸残基が抗体表面に露出し得るので、これらのアミノ酸残基を特定の切断性部位の導入に利用することができる（アミノ酸残基の位置はＥＵｎｕｍｂｅｒｉｎｇによる；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｈａｒｔ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／Ｈｕ＿ＩＧＨＧｎｂｅｒ．ｈｔｍｌを参照）。
（１）露出リジン残基
ＣＨ２ドメイン（例、２４６位、２４８位、２７４位、２８８位、２９０位、３１７位、３２０位、３２２位）
ＣＨ３ドメイン（例、３６０位、４１４位、４３９位）
（２）露出チロシン残基
ＣＨ２ドメイン（例、２７８位、２９６位、３００位）
ＣＨ３ドメイン（例、４３６位）
（３）露出セリン残基
ＣＨ２ドメイン（例、２５４位、２６７位、２９８位）
ＣＨ３ドメイン（例、４００位、４１５位、４４０位）
（４）露出スレオニン残基
ＣＨ２ドメイン（例、２５６位、２８９位）
ＣＨ３ドメイン（例、３３５位、３５９位）

抗体中のアミノ酸残基の位置、および重鎖の定常領域の位置（例、ＣＨ２ドメイン）についてはＥＵｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従う（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｈａｒｔ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／Ｈｕ＿ＩＧＨＧｎｂｅｒ．ｈｔｍｌを参照）。例えば、ヒトＩｇＧを対象とする場合、２４６位のリジン残基は、ヒトＩｇＧＣＨ２領域の１６番目のアミノ酸残基に相当し、２４８位のリジン残基は、ヒトＩｇＧＣＨ２領域の１８番目のアミノ酸残基に相当し、２８８位のリジン残基は、ヒトＩｇＧＣＨ２領域の５８番目のアミノ酸残基に相当し、２９０位のリジン残基は、ヒトＩｇＧＣＨ２領域の６０番目のアミノ酸残基に相当し、３１７位のリジン残基は、ヒトＩｇＧＣＨ２領域の８７番目のアミノ酸残基に相当する。２４６／２４８位の表記は、２４６または２４８位のリジン残基が対象であることを示す。２８８／２９０位の表記は、２８８または２９０位のリジン残基が対象であることを示す。

好ましくは、位置選択的に修飾される重鎖の定常領域における特定のアミノ酸残基は、リジン残基（例、２４６／２４８位、または２８８／２９０位のリジン残基）を位置選択的に修飾することができる。本明細書において、「位置選択的」または「位置選択性」とは、抗体において特定のアミノ酸残基が特定の領域に偏在していないにもかかわらず、抗体中の特定のアミノ酸残基と結合できる所定の構造単位が、抗体中の特定の領域に偏在することをいう。したがって、「位置選択的に有する」、「位置選択的な結合」、「位置選
択性での結合」等の位置選択性に関連する表現は、１個以上の特定のアミノ酸残基を含む標的領域における所定の構造単位の保有率または結合率が、標的領域における当該特定のアミノ酸残基と同種である複数個のアミノ酸残基を含む非標的領域における当該構造単位の保有率または結合率よりも有意なレベルで高いことを意味する。このような位置選択性は、５０％以上であり、好ましくは６０％以上、より好ましくは７０％以上、さらにより好ましくは８０％以上、特に好ましくは９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、または１００％であってもよい。本発明によれば、ペプチドを含有するリンカーを利用せずに、抗体中の重鎖における特定のリジン残基を位置選択的に修飾することができる。ペプチド部分は、潜在的な免疫原性を有し、また血中で加水分解され易い。したがって、ペプチド部分を含むリンカーの使用の回避は、臨床応用において望ましいものである。

本発明では、重鎖の定常領域における特定のアミノ酸残基（例、特定の位置のリジン残基）が位置選択的に修飾されている限り、他の位置の特定のアミノ酸残基がさらに位置選択的に修飾されていてもよい。例えば、抗体における所定の位置の特定のアミノ酸残基を位置選択的に修飾する方法は、国際公開第２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９／２４０２８８号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、および国際公開第２０２０／０９０９７９号に記載されている。このような特定のアミノ酸残基としては、修飾し易い側鎖（例、アミノ基、カルボキシ基、アミド基、ヒドロキシ基、チオール基）を有するアミノ酸残基（例、リジン残基、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基、アスパラギン残基、グルタミン残基、スレオニン残基、セリン残基、チロシン残基、システイン残基）を利用できるが、好ましくは、アミノ基を含む側鎖を有するリジン残基、ヒドロキシ基を含む側鎖を有するチロシン残基、セリン残基、およびスレオニン残基、またはチオール基を含む側鎖を有するシステイン残基であり、より好ましくは、リジン残基であってもよい（すなわち、２４６／２４８位のリジン残基、２８８／２９０位のリジン残基、および３１７位のリジン残基のうちの、２つのリジン残基が位置選択的に二重修飾されていてもよく、３つのリジン残基が位置選択的に三重修飾されていてもよい）。

（ハロゲン原子）
ハロゲン原子としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。

（１価の基）
１価の基としては、例えば、１価の炭化水素基、および１価の複素環基が挙げられる。

１価の基は、１個以上（例えば１～１０個、好ましくは１～８個、より好ましくは１～６個、さらにより好ましくは１～５個、特に好ましくは１～３個）の後述する置換基により置換されていてもよい。

（１価の炭化水素基、およびそれに関連する用語）
１価の炭化水素基としては、例えば、１価の鎖状炭化水素基、１価の脂環式炭化水素基、および１価の芳香族炭化水素基が挙げられる。

１価の鎖状炭化水素基とは、鎖状構造のみで構成された炭化水素基を意味し、主鎖に環状構造を含まない。ただし、鎖状構造は直鎖状であっても分岐状であってもよい。１価の鎖状炭化水素基としては、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニルが挙げられる。アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、直鎖状、または分岐状のいずれであってもよい。

アルキルとしては、炭素原子数１～１２のアルキルが好ましく、炭素原子数１～６のア
ルキルがより好ましく、炭素原子数１～４のアルキルがさらに好ましい。アルキルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数１～１２のアルキルとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓ－ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシルが挙げられる。

アルケニルとしては、炭素原子数２～１２のアルケニルが好ましく、炭素原子数２～６のアルケニルがより好ましく、炭素原子数２～４のアルケニルがさらに好ましい。アルケニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数２～１２のアルケニルとしては、例えば、ビニル、プロペニル、ｎ－ブテニルが挙げられる。

アルキニルとしては、炭素原子数２～１２のアルキニルが好ましく、炭素原子数２～６のアルキニルがより好ましく、炭素原子数２～４のアルキニルがさらに好ましい。アルキニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数２～１２のアルキニルとしては、例えば、エチニル、プロピニル、ｎ－ブチニルが挙げられる。

１価の鎖状炭化水素基としては、アルキルが好ましい。

１価の脂環式炭化水素基とは、環構造として脂環式炭化水素のみを含み、芳香族環を含まない炭化水素基を意味し、脂環式炭化水素は単環、多環のいずれであってもよい。ただし、脂環式炭化水素のみで構成されている必要はなく、その一部に鎖状構造を含んでいてもよい。１価の脂環式炭化水素基としては、例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニルが挙げられ、これらは、単環、多環のいずれであってもよい。

シクロアルキルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルキルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルキルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルキルがさらに好ましい。シクロアルキルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルキルとしては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルが挙げられる。

シクロアルケニルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルケニルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルケニルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルケニルがさらに好ましい。シクロアルケニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルケニルとしては、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニルが挙げられる。

シクロアルキニルとしては、炭素原子数３～１２のシクロアルキニルが好ましく、炭素原子数３～６のシクロアルキニルがより好ましく、炭素原子数５～６のシクロアルキニルがさらに好ましい。シクロアルキニルが置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数３～１２のシクロアルキニルとしては、例えば、シクロプロピニル、シクロブチニル、シクロペンチニル、シクロヘキシニルが挙げられる。

１価の脂環式炭化水素基としては、シクロアルキルが好ましい。

１価の芳香族炭化水素基とは、芳香族環構造を含む炭化水素基を意味する。ただし、芳香族環のみで構成されている必要はなく、その一部に鎖状構造や脂環式炭化水素を含んでいてもよく、芳香族環は単環、多環のいずれであってもよい。１価の芳香族炭化水素基としては、炭素原子数６～１２のアリールが好ましく、炭素原子数６～１０のアリールがよ
り好ましく、炭素原子数６のアリールがさらに好ましい。１価の芳香族炭化水素基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。炭素原子数６～１２のアリールとしては、例えば、フェニル、ナフチルが挙げられる。

１価の芳香族炭化水素基としては、フェニルが好ましい。

これらの中でも、１価の炭化水素基としては、アルキル、シクロアルキル、アリールが好ましい。

（１価の複素環基およびそれに関連する用語）
１価の複素環基とは、複素環式化合物の複素環から水素原子１個を除いた基をいう。１価の複素環基は、１価の芳香族複素環基、または１価の非芳香族複素環基である。複素環基を構成するヘテロ原子として、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、リン原子、ホウ素原子及びケイ素原子からなる群から選択される１種以上を含むことが好ましく、酸素原子、硫黄原子及び窒素原子からなる群から選択される１種以上を含むことがより好ましい。

１価の芳香族複素環基としては、炭素原子数１～１５の芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数１～９の芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数１～６の芳香族複素環基がさらに好ましい。１価の芳香族複素環基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。１価の芳香族複素環基としては、例えば、ピロリル、フラニル、チオフェニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インドリル、プリニル、アントラキノリル、カルバゾニル、フルオレニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、及びフタラジニルが挙げられる。

１価の非芳香族複素環基としては、炭素原子数２～１５の非芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数２～９の非芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数２～６の非芳香族複素環基がさらに好ましい。１価の非芳香族複素環基が置換基を有する場合、上記炭素原子数に置換基の炭素原子数は含まれない。１価の非芳香族複素環基としては、例えば、オキシラニル、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ジヒドロオキサジニル、テトラヒドロオキサジニル、ジヒドロピリミジニル、及びテトラヒドロピリミジニルが挙げられる。

これらの中でも、１価の複素環基としては、５員または６員の複素環基が好ましい。

（２価の基）
２価の基は、２価の直鎖炭化水素基、２価の環状炭化水素基、２価の複素環基、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－、－ＮＲ_１－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_１－、－ＮＲ_１－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－ＮＲ_１－、－ＮＲ_１－Ｃ（＝Ｓ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－（Ｏ－Ｒ_２）_ｎ－、および－（Ｓ－Ｒ_２）_ｍ－からなる群より選ばれる１個の基、またはこれらの２個以上（例えば２～１０個、好ましくは２～８個、より好ましくは２～６個、さらにより好ましくは２～５個、特に好ましくは２または３個）の基を含む主鎖構造を有する基である。Ｒ_１は、水素原子、または後述する置換基を示す。Ｒ_２は、２価の直鎖炭化水素基、２価の環状炭化水素基、または２価の複素環基を示す。ｎおよびｍは、それぞれ、１～１０の整数であり、好ましくは１～８の整数であり、より好ましくは１～６の整数であり、さらにより好ましくは１～５の整数であり、特に好ましくは１～３の整数である。

２価の直鎖炭化水素基は、直鎖アルキレン、直鎖アルケニレン、または直鎖アルキニレンである。
直鎖アルキレンは、炭素原子数１～６の直鎖アルキレンであり、炭素原子数１～４の直鎖アルキレンが好ましい。直鎖アルキレンとしては、例えば、メチレン、エチレン、ｎ－プロピレン、ｎ－ブチレン、ｎ－ペンチレン、ｎ－へキシレンが挙げられる。
直鎖アルケニレンは、炭素原子２～６の直鎖アルケニレンであり、炭素原子数２～４の直鎖アルケニレンが好ましい。直鎖アルケニレンとしては、例えば、エチレニレン、ｎ－プロピニレン、ｎ－ブテニレン、ｎ－ペンテニレン、ｎ－へキセニレンが挙げられる。
直鎖アルキニレンは、炭素原子数２～６の直鎖アルキニレンであり、炭素原子数２～４の直鎖アルキニレンが好ましい。直鎖アルキニレンとしては、例えば、エチニレン、ｎ－プロピニレン、ｎ－ブチニレン、ｎ－ペンチニレン、ｎ－へキシニレンが挙げられる。
２価の直鎖炭化水素基としては、直鎖アルキレンが好ましい。

２価の環状炭化水素基は、アリーレン、または２価の非芳香族環状炭化水素基である。
アリーレンとしては、炭素原子数６～１４のアリーレンが好ましく、炭素原子数６～１０のアリーレンがより好ましく、炭素原子数６のアリーレンが特に好ましい。アリーレンとしては、例えば、フェニレン、ナフチレン、アントラセニレンが挙げられる。
２価の非芳香族環状炭化水素基としては、炭素原子数３～１２の単環式または多環式である２価の非芳香族環状炭化水素基が好ましく、炭素原子数４～１０の単環式または多環式である２価の非芳香族環状炭化水素基がより好ましく、炭素原子数５～８の単環式である２価の非芳香族環状炭化水素基が特に好ましい。２価の非芳香族環状炭化水素基としては、例えば、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロへキシレン、シクロへプチレン、シクロオクチレンが挙げられる。
２価の環状炭化水素基としては、アリーレンが好ましい。

２価の複素環基は、２価の芳香族複素環基、または２価の非芳香族複素環基である。複素環を構成するヘテロ原子として、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、リン原子、ホウ素原子およびケイ素原子からなる群から選択される１種以上を含むことが好ましく、酸素原子、硫黄原子および窒素原子からなる群から選択される１種以上を含むことがより好ましい。
２価の芳香族複素環基としては、炭素原子数３～１５の２価の芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数３～９の２価の芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数３～６の２価の芳香族複素環基が特に好ましい。２価の芳香族複素環基としては、例えば、ピロールジイル、フランジイル、チオフェンジイル、ピリジンジイル、ピリダジンジイル、ピリミジンジイル、ピラジンジイル、トリアジンジイル、ピラゾールジイル、イミダゾールジイル、チアゾールジイル、イソチアゾールジイル、オキサゾールジイル、イソオキサゾールジイル、トリアゾールジイル、テトラゾールジイル、インドールジイル、プリンジイル、アントラキノンジイル、カルバゾールジイル、フルオレンジイル、キノリンジイル、イソキノリンジイル、キナゾリンジイル、およびフタラジンジイルが挙げられる。
２価の非芳香族複素環基としては、炭素原子数３～１５の非芳香族複素環基が好ましく、炭素原子数３～９の非芳香族複素環基がより好ましく、炭素原子数３～６の非芳香族複素環基が特に好ましい。２価の非芳香族複素環基としては、例えば、ピロールジオンジイル、ピロリンジオンジイル、オキシランジイル、アジリジンジイル、アゼチジンジイル、オキセタンジイル、チエタンジイル、ピロリジンジイル、ジヒドロフランジイル、テトラヒドロフランジイル、ジオキソランジイル、テトラヒドロチオフェンジイル、ピロリンジイル、イミダゾリジンジイル、オキサゾリジンジイル、ピペリジンジイル、ジヒドロピランジイル、テトラヒドロピランジイル、テトラヒドロチオピランジイル、モルホリンジイル、チオモルホリンジイル、ピペラジンジイル、ジヒドロオキサジンジイル、テトラヒドロオキサジンジイル、ジヒドロピリミジンジイル、およびテトラヒドロピリミジンジイル
が挙げられる。
２価の複素環基としては、２価の芳香族複素環基が好ましい。

好ましくは、２価の基は、アルキレン、アリーレン、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ_１－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_１－、－ＮＲ_１－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、および－（Ｏ－Ｒ_２）_ｎ－からなる群より選ばれる１個の基を含む主鎖構造を有する２価の基であるか、または、
アルキレン、アリーレン、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ_１－、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_１－、－ＮＲ_１－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｏ－、および－（Ｏ－Ｒ_２）_ｎ－からなる群より選ばれる２個以上の基を含む主鎖構造を有する２価の基であり、
Ｒ_１が、水素原子またはアルキルであり、
Ｒ_２が、アルキレンまたはアリーレンであり、
ｎが、１～５の整数（すなわち、１、２、３、４、または５）であってもよい。
アルキレン、アリーレン、アルキルは、上述したものと同様である。

２価の基における主鎖構造は、１個以上（例えば１～１０個、好ましくは１～８個、より好ましくは１～６個、さらにより好ましくは１～５個、特に好ましくは１～３個）の後述する置換基により置換されていてもよい。

（置換基）
置換基としては、以下が挙げられる：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）１価の炭化水素基；
（ｉｉｉ）１価の複素環基；
（ｉｖ）アラルキル；
（ｖ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは１価の炭化水素基を示す。）；または
（ｖｉ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは１価の炭化水素基を示す。）；
（ｖｉｉ）ニトロ基、硫酸基、スルホン酸基、シアノ基、およびカルボキシル基。

上記置換基におけるハロゲン原子、１価の炭化水素基、および１価の複素環基の定義、例、および好ましい例は、それぞれ、上述したものと同様である。

アラルキルとは、アリールアルキルをいう。アリールアルキルにおけるアリールおよびアルキルの定義、例および好ましい例は、上述したとおりである。アラルキルとしては、炭素原子数３～１５のアラルキルが好ましい。このようなアラルキルとしては、例えば、ベンゾイル、フェネチル、ナフチルメチル、ナフチルエチルが挙げられる。

好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～１２のアルキル、フェニル、もしくはナフチル；
（ｉｉｉ）炭素原子数３～１５のアラルキル；
（ｉｖ）５員または６員の複素環；
（ｖ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；（ｖｉ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；または
（ｖｉｉ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

より好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～１２のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～１２のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

さらにより好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～６のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～６のアルキルを示す。）；
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～６のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

特に好ましくは、置換基は、以下であってもよい：
（ｉ）ハロゲン原子；
（ｉｉ）炭素原子数１～４のアルキル；
（ｉｉｉ）Ｒ_ａ－Ｏ－、Ｒ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－、Ｒ_ａ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、もしくはＲ_ａ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｒ_ａは、水素原子、もしくは炭素原子数１～４のアルキルを示す。）；
（ｉｖ）ＮＲ_ｂＲ_ｃ－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－、ＮＲ_ｂＲ_ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－、もしくはＲ_ｂ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ_ｃ－（Ｒ_ｂおよびＲ_ｃは、同一もしくは異なって、水素原子、もしくは炭素原子数１～４のアルキルを示す。）；または
（ｖ）上記（ｖｉｉ）で列挙したものと同じ基。

（抗体に対する親和性物質）
抗体に対する親和性物質は、抗体に対する親和性を有する限り特に限定されない。抗体に対する親和性物質としては、抗体のＦｃ領域（ＣＨ２領域およびＣＨ３領域、好ましくはＣＨ２領域）に対する親和性を有するものが好ましい。抗体に対する親和性物質としては、例えば、国際公開第２０１６／１８６２０６号、国際公開第／２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９２４０２８８号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、および国際公開第２０２０／０９０９７９号、ならびにこれらの国際公開公報中で引用されている文献中に開示される種々の親和性物質を用いることができる。

好ましくは、抗体に対する親和性物質は、上述の領域に対する親和性を有する親和性ペプチドであってもよい。より好ましくは、このような親和性ペプチドは、１個のリジン残基および２個のシステイン残基（２個のシステイン残基の側鎖中のチオール基は、ジスルフィド結合により、またはリンカーを介して連結されていてもよい。）を含んでいてもよい。この場合、例えば、式（２）で表される化合物またはその塩において、Ｙで表される抗体に対する親和性物質は、上記リジン残基の側鎖中のアミノ基が、Ｙと隣接するカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）と一緒になってアミド結合を形成していてもよい。

より具体的には、抗体に対する親和性物質は、抗体の重鎖における定常領域に対する親和性を有し、かつ１つのリジン残基（このリジン残基の側鎖中のアミノ基が、化合物との架橋に利用される）を有する親和性ペプチドであってもよい。このような親和性ペプチドとしては、以下のような既報の多数のペプチドを利用することができる：
（１）国際公開第２０１８／１９９３３７号の配列番号３９～７２のアミノ酸配列を含む親和性ペプチド；
（２）国際公開第２０１９／２４０２８８号の配列番号５、６、３７～１００のアミノ酸配列を含む親和性ペプチド；
（３）国際公開第２０１９／２４０２８７号の配列番号５、８～５７、６８～９２のアミノ酸配列を含む親和性ペプチド；
（４）ＱＥＴをＮ末端に有する親和性ペプチド（国際公開第２０２０／０９０９７９号の配列番号７～１０、２２～２５、５２、５３）；および
（５）後述の実施例に開示される親和性ペプチド（配列番号１～４）。

上記親和性ペプチドの各アミノ酸配列中の離間した少なくとも２つのシステイン残基は、ジスルフィド結合により環状ペプチドを形成することができる。あるいは、上記ペプチドにおいて、２つのシステイン残基中のチオール基は、以下で表されるカルボニル基含有リンカーにより連結されていてもよい。

上記で表されるカルボニル基含有リンカーの破線部分は、チオール基との結合部分を意味する。当該リンカーは、通常のジスルフィド結合よりも、還元反応等に対して安定である。このようなペプチドは、例えば、国際公開第２０１６／１８６２０６号に記載される方法により、調製することができる。

上記親和性ペプチドを構成するアミノ酸はＬ体またはＤ体のいずれであってもよいが、Ｌ体が好ましい（実施例ではペプチドを構成するアミノ酸残基は全てＬ体である）。上記親和性ペプチドは、架橋剤により特定のアミノ酸残基が修飾されて、目的の化合物またはその塩と連結されていてもよい。このような特定のアミノ酸残基としては、例えば、リジン残基、アスパラギン酸残基、およびグルタミン酸残基が挙げられるが、好ましくは、リジン残基である。特定のアミノ酸残基がリジン残基である場合、リジン残基の側鎖中のアミノ基が、目的化合物の標的カルボニル基と連結されて、アミド結合を形成することができる。架橋剤としては、例えば、ＤＳＧ（ｄｉｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌｇｌｕｔａｒａｔｅ、ジスクシンイミジルグルタレート）、ＤＳＳ（ｄｉｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌｓｕｂｅｒａｔｅ、ジスクシンイミジルスベレート）等のスクシンイミジル基を好ましくは２以上含む架橋剤、ＤＭＡ（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｄｉｐｉｍｉｄａｔｅ・２ＨＣｌ、アジプイミド酸ジメチル二塩酸塩）、ＤＭＰ（ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｉｍｅｌｉｍｉｄａｔｅ・２ＨＣｌ、ピメルイミド酸ジメチル二塩酸塩）、及びＤＭＳ（ｄｉｍｅｔｈｙｌ
ｓｕｂｅｒｉｍｉｄａｔｅ・２ＨＣｌ、スベルイミド酸ジメチル二塩酸塩）等のイミド酸部分を好ましくは２以上含む架橋剤、並びにＤＴＢＰ（ｄｉｍｅｔｈｙｌ３，３’－ｄｉｔｈｉｏｂｉｓｐｒｏｐｉｏｎｉｍｉｄａｔｅ・２ＨＣｌ、３，３’－ジチオビスプロピオンイミド酸ジメチル二塩酸塩）及びＤＳＰ（ｄｉｔｈｉｏｂｉｓ（ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ジチオビススクシンイミジルプロピオン酸）等のＳＳ結合を有する架橋剤が挙げられる（例、国際公開第２０１６／１８６２０６号）。

上記親和性ペプチドは、末端にあるアミノ基およびカルボキシ基が保護されていてもよい。Ｎ－末端アミノ基の保護基としては、例えば、アルキルカルボニル基（アシル基）（例、アセチル基、プロポキシ基、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基等のブトキシカルボニル基）、アルキルオキシカルボニル基（例、フルオレニルメトキシカルボニル基）、アリールオキシカルボニル基、アリールアルキル（アラルキル）オキシカルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル基）が挙げられる。Ｎ－末端アミノ基の保護基としては、アセチル基が好ましい。Ｎ－末端アミノ酸がグルタミン酸である場合、保護されたＮ－末端のグルタミン酸は、ピログルタミン酸の環状構造を有していてもよい。また、Ｎ－末端アミノ酸がグルタミンである場合、保護されたＮ－末端のグルタミンは、ピログルタミン酸型の環状構造を有していてもよい。Ｃ－末端カルボキシ基の保護基としては、例えば、エステルまたはアミドを形成可能な基が挙げられる。エステルまたはアミドを形成可能な基としては、例えば、アルキルオキシ基（例、メチルオキシ、エチルオキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ）、アリールオキシ基（例、フェニルオキシ、ナフチルオキシ）、アラルキルオキシ基（例、ベンジルオキシ）、アミノ基が挙げられる。Ｃ－末端カルボキシ基の保護基としては、アミノ基が好ましい。

（生体直交性官能基）
生体直交性官能基は、生体構成成分（例、アミノ酸、タンパク質、核酸、脂質、糖、リン酸）とは反応しない、もしくは生体構成成分に対する反応の速度が遅いが、生体構成成分以外の成分に対して選択的に反応する基をいう。生体直交性官能基は、当該技術分野において周知である（例、ＳｈａｒｐｌｅｓｓＫ．Ｂ．ｅｔａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４０，２００４（２０１５）；ＢｅｒｔｏｚｚｉＣ．Ｒ．ｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２９１，２３５７（２００１）；ＢｅｒｔｏｚｚｉＣ．Ｒ．ｅｔａｌ．，ＮａｔｕｒｅＣｈｅｍｉｃａｌＢｉｏｌｏｇｙ１，１３（２００５）を参照）。

本発明では、生体直交性官能基として、タンパク質に対する生体直交性官能基が用いられる。本発明の試薬により誘導体化されるべき抗体は、タンパク質であるためである。タンパク質に対する生体直交性官能基は、タンパク質を構成する天然の２０種のアミノ酸残基の側鎖と反応しない、もしくは当該側鎖に対する反応の速度が遅いが、目的の官能基と反応する基である。タンパク質を構成する天然の２０種のアミノ酸は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、システイン（Ｃ）、グルタミン（Ｑ）、グリシン（Ｇ）、イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、フェニルアラニン（Ｆ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、トリプトファン（Ｗ）、チロシン（Ｙ）、バリン（Ｖ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）、およびリジン（Ｌ）である。これらの天然の２０種のアミノ酸のうち、側鎖がない（すなわち、水素原子である）グリシン、ならびに側鎖が炭化水素基である（すなわち、硫黄原子、窒素原子、および酸素原子からなる群より選ばれるヘテロ原子を側鎖に含まない）アラニン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、およびバリンは、通常の反応に対して不活性である。したがって、タンパク質に対する生体直交性官能基は、通常の反応に対して不活性である側鎖を有するこれらのアミノ酸の側鎖に加えて、アスパラギン、グルタミン、メチオニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、ヒスチジン、およびリジンの側鎖に対して反応しない、または反応の速度が遅いが、目的の官能基と反応する基である。

このような生体直交性官能基としては、例えば、アジド残基、アルデヒド残基、チオール残基、アルケン残基（換言すれば、炭素原子間二重結合を有する最小単位であるビニレン（エテニレン）部分を有していればよい。以下同様）、アルキン残基（換言すれば、炭素原子間三重結合を有する最小単位であるエチニレン部分を有していればよい。以下同様）、ハロゲン残基、テトラジン残基、ニトロン残基、ヒドロキシルアミン残基、ニトリル
残基、ヒドラジン残基、ケトン残基、ボロン酸残基、シアノベンゾチアゾール残基、アリル残基、ホスフィン残基、マレイミド残基、ジスルフィド残基、チオエステル残基、α―ハロカルボニル残基（例、α位にフッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を有するカルボニル残基。以下同様）、イソニトリル残基、シドノン残基、セレン残基が挙げられる。

生体直交性官能基は、保護されていても、保護されていなくてもよい。生体直交性官能基とは、未保護の生体直交性官能基、または保護された生体直交性官能基をいう。未保護の生体直交性官能基は、上述の生体直交性官能基に該当する。保護された生体直交性官能基は、保護基の切断により生体直交性官能基を生成する基である。保護基の切断は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下での特定の処理により行うことができる。このような特定の処理としては、例えば、（ａ）酸性物質、塩基性物質、還元剤、酸化剤、酵素からなる群より選ばれる１種以上の物質による処理、（ｂ）光からなる群より選ばれる物理化学的刺激による処理、または（ｃ）自己分解性の切断性部分を含む切断性リンカーを用いた場合の放置が挙げられる。このような保護基およびその切断条件は、当該分野における技術常識である（例、Ｇ．Ｌｅｒｉｃｈｅ，Ｌ．Ｃｈｉｓｈｏｌｍ，Ａ．Ｗａｇｎｅｒ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０，５７１（２０１２）；ＦｅｎｇＰ．ｅｔａｌ．，ＪｏｕｎａｌｏｆＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ．１３２，１５００（２０１０）．；ＢｅｓｓｏｄｅｓＭ．ｅｔａｌ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅ，９９，４２３（２００４）．；ＤｅＳｉｍｏｎｅ，Ｊ．Ｍ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ．１３２，１７９２８（２０１０）；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｄ．Ｈ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅ，９１，１８７（２００３）；Ｓｃｈｏｅｎｍａｒｋｓ，Ｒ．Ｇ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅ，９５，２９１（２００４））。

保護された生体直交性官能基としては、例えば、ジスルフィド残基、エステル残基、アセタール残基、ケタール残基、イミン残基、ビシナルジオール残基が挙げられる。

好ましくは、生体直交性官能基は、未保護の生体直交性官能基である。

より好ましくは、生体直交性官能基は、他の生体直交性官能基との反応性（例、反応レベルおよび／または反応特異性）に優れる特定の生体直交性官能基であってもよい。このような生体直交性官能基としては、アジド残基、アルキン残基（好ましくは、上述したような置換基により置換されていてもよい、炭素原子間３重結合を有する環基）、テトラジン残基、アルケン残基、チオール残基、マレイミド残基、フラン残基、およびハロカルボニル残基が挙げられる。互いに反応可能な２つの生体直交性官能基の組み合わせは、例えば、アジド残基とアルキン残基の組み合わせ、テトラジン残基とアルケン残基の組み合わせ、テトラジン残基とアルキン残基の組み合わせ、チオール残基とマレイミド残基の組み合わせ、フラン残基とマレイミド残基の組み合わせ、チオール残基とハロカルボニル残基の組み合わせ（置換反応により、ハロゲンがチオールに置換される）、チオール残基と別のチオール残基の組み合わせ（ジスルフィド結合の生成）が挙げられる。さらにより好ましくは、生体直交性官能基は、チオール基、またはアジド基であってもよい。

（機能性物質）
機能性物質は、抗体に任意の機能を付与する物質である限り特に限定されず、例えば、薬物、標識物質、安定化剤が挙げられるが、好ましくは薬物または標識物質である。機能性物質はまた、単一の機能性物質であってもよく、または２以上の機能性物質が連結された物質であってもよい。

薬物としては、任意の疾患に対する薬物であってもよい。このような疾患としては、例えば、癌（例、肺癌、胃癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、肝臓癌、甲状腺癌、前立腺癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮癌、骨癌、皮膚癌、脳腫瘍、黒色腫）、自己免疫疾患・炎症性疾患（例、アレルギー疾患、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス）、脳神経疾患（例、脳梗塞、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症）、感染症（例、細菌感染症、ウイルス感染症）、遺伝性・希少疾患（例、遺伝性球状赤血球症、非ジストロフィー筋緊張症）、眼疾患（例、加齢黄斑変性症、糖尿病網膜症、網膜色素変性症）、骨・整形外科領域の疾患（例、変形性関節症）、血液疾患（例、白血病、紫斑病）、その他の疾患（例、糖尿病、高脂血症等の代謝異常症、肝臓疾患、腎疾患、肺疾患、循環器系疾患、消化器官系疾患）が挙げられる。薬物は、疾患の予防または治療薬、副作用の緩和薬であってもよい。

より具体的には、薬物は、抗癌剤であってもよい。抗癌剤としては、例えば、化学療法剤、毒素、放射性同位体またはそれを含む物質が挙げられる。化学療法剤としては、例えば、ＤＮＡ損傷剤、代謝拮抗薬、酵素阻害剤、ＤＮＡインターカレート剤、ＤＮＡ切断剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ＤＮＡ結合阻害剤、チューブリン結合阻害剤、細胞傷害性ヌクレオシド、白金化合物が挙げられる。毒素としては、例えば、細菌毒素（例、ジフテリア毒素）、植物毒素（例、リシン）が挙げられる。放射性同位体としては、例えば、水素原子の放射性同位体（例、^３Ｈ）、炭素原子の放射性同位体（例、^１４Ｃ）、リン原子の放射性同位体（例、^３２Ｐ）、硫黄原子の放射性同位体（例、３５^Ｓ）、イットリウムの放射性同位体（例、^９０Ｙ）、テクネチウムの放射性同位体（例、^９９ｍＴｃ）、インジウムの放射性同位体（例、^１１１Ｉｎ）、ヨウ素原子の放射性同位体（例、^１２３Ｉ、^１２５Ｉ、^１２９Ｉ、^１３１Ｉ）、サマリウムの放射性同位体（例、^１５３Ｓｍ）、レニウムの放射性同位体（例、^１８６Ｒｅ）、アスタチンの放射性同位体（例、^２１１Ａｔ）、ビスマスの放射性同位体（例、^２１２Ｂｉ）が挙げられる。更に具体的には、薬物として、オーリスタチン（ＭＭＡＥ、ＭＭＡＦ）、メイタンシン（ＤＭ１、ＤＭ４）、ＰＢＤ（ピロロベンゾジアゼピン）、ＩＧＮ、カンプトテシン類縁体、カリケアミシン、デュオカルミシン、エリブリン、アントラサイクリン、ｄｍＤＮＡ３１、ツブリシンが挙げられる。

標識物質は、標的（例、組織、細胞、物質）の検出を可能にする物質である。標識物質としては、例えば、酵素（例、ペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ）、親和性物質（例、ストレプトアビジン、ビオチン、ジゴキシゲニン、アプタマー）、蛍光物質（例、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質）、発光物質（例、ルシフェリン、エクオリン、アクリジニウムエステル、トリス（２，２’－ビピリジル）ルテニウム、ルミノール）、放射性同位体（例、上述したもの）、またはそれを含む物質が挙げられる。

安定化剤は、抗体の安定化を可能にする物質である。安定化剤としては、例えば、ジオール類、グリセリン、非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、天然系界面活性剤、サッカリド、およびポリオール類が挙げられる。

機能性物質はまた、ペプチド、タンパク質、核酸、有機化合物、無機化合物、糖鎖、脂質、高分子ポリマー、金属（例、金）、キレーターであってもよい。ペプチドとしては、例えば、細胞膜透過ペプチド、血液脳関門透過性ペプチド、ペプチド医薬品が挙げられる。タンパク質としては、例えば、酵素、サイトカイン、フラグメント抗体、レクチン、インターフェロン、血清アルブミン、抗体、フェリチンが挙げられる。核酸としては、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、人工核酸が挙げられる。核酸としてはまた、例えば、ＲＮＡ干渉誘
導性核酸（例、ｓｉＲＮＡ）、アプタマー、アンチセンスが挙げられる。有機化合物としては、例えば、タンパク質分解誘導キメラ分子、色素、光分解性化合物等の低分子有機化合物が挙げられる。無機化合物としては、例えば、シリカ、タルク、アルミナが挙げられる。

（塩）
本発明において、用語「塩」としては、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、無機塩基との塩、有機塩基との塩、およびアミノ酸との塩が挙げられる。無機酸との塩としては、例えば、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸との塩が挙げられる。有機酸との塩としては、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、シュウ酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸との塩が挙げられる。無機塩基との塩としては、例えば、アルカリ金属（例、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例、カルシウム、マグネシウム）、および亜鉛、アルミニウム等の他の金属、ならびにアンモニウムとの塩が挙げられる。有機塩基との塩としては、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、プロピレンジアミン、エチレンジアミン、ピリジン、エタノールアミン、モノアルキルエタノールアミン、ジアルキルエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンとの塩が挙げられる。アミノ酸との塩としては、例えば、塩基性アミノ酸（例、アルギニン、ヒスチジン、リジン、オルニチン）、および酸性アミノ酸（例、アスパラギン酸、グルタミン酸）との塩が挙げられる。塩は、好ましくは、無機酸（例、塩化水素）との塩、または有機酸（例、トリフルオロ酢酸）との塩である。

２．化合物またはその塩
２－１．抗体の誘導体化試薬として使用することができる化合物またはその塩の合成中間体
本発明は、下記式（１）で表される化合物またはその塩を提供する。
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１は、第１リンカーを示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し、
Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、
Ｘは、脱離基を示す。〕

本発明に関連して提示される式（１）および他の式において、－（ハイフン）は、その両側に存在する２つの単位が共有結合していることを示す。したがって、式（１）では、Ｘは、カルボニル基を構成する炭素原子と共有結合しており、Ｌ_１は、カルボニル基を構
成する炭素原子、およびＣ＝Ｗを構成する炭素原子と共有結合しており、Ｌ_２は、Ｃ＝Ｗを構成する炭素原子、およびカルボニル基を構成する炭素原子と共有結合している。

Ｘにより示される脱離基は、Ｘに隣接するカルボニル基の炭素原子とアミノ基との間の反応により脱離できる基である。当業者であれば、このような脱離基を適宜設定することができる。このような脱離基としては、例えば、以下が挙げられる：
（ａ）Ｒ－Ｓ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｓは、硫黄原子を示す。）；
（ｂ）Ｒ－Ｏ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｏは、酸素原子を示す。）；
（ｃ）Ｒ_Ａ－（Ｒ_Ｂ－）Ｎ（ここで、Ｒ_ＡおよびＲ_Ｂは、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｎは、窒素原子を示す。）；または
（ｄ）ハロゲン原子。

好ましくは、Ｘにより示される脱離基は、下記であってもよい：
（ａ）Ｒ－Ｓ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｓは、硫黄原子を示す。）；
（ｂ）Ｒ－Ｏ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｏは、酸素原子を示す。）；または
（ｃ）Ｒ_Ａ－（Ｒ_Ｂ－）Ｎ（ここで、Ｒ_ＡおよびＲ_Ｂは、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示す。）。

より好ましくは、Ｘにより示される脱離基は、下記であってもよい：
（ａ）Ｒ－Ｓ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｓは、硫黄原子を示す。）；または
（ｂ）Ｒ－Ｏ（ここで、Ｒは、水素原子、置換基を有していてもよい１価の炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の複素環基を示し、Ｏは、酸素原子を示す。）。

さらにより好ましくは、Ｘにより示される脱離基は、下記であってもよい：
（ａ）Ｒ－Ｓ（ここで、Ｒは、置換基を有していてもよい１価の芳香族炭化水素基、または置換基を有していてもよい１価の芳香族複素環基を示し、Ｓは、硫黄原子を示す。）。

特に好ましくは、Ｘにより示される脱離基は、下記であってもよい：
（ａ’）Ｒ－Ｓ（ここで、Ｒは、置換基を有していてもよい１価の芳香族炭化水素基（例、フェニル）を示し、Ｓは、硫黄原子を示す。）。

Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、酸素原子が好ましい。

Ｌ_１およびＬ_２によりそれぞれ示される第１リンカーおよび第２リンカーは、式（１）の化学構造から理解されるように、それらに隣接する原子を連結できればよい２価の基である。２価の基は、置換基で置換されていてもよく、または置換基で置換されていなくてもよい。置換基の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。第２リンカーについての２価の基は、生体直交性官能基またはそれを含む基をさらに有していてもよい。生体直交性官能基の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に隣接する原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有するものであり、硫黄原子、または酸素原子を有することが好まし
く、硫黄原子を有することがより好ましい。

特定の実施形態では、第１リンカーにおける主鎖（Ｌ_１に隣接するカルボニル基中の炭素原子とＣ＝Ｗ中の炭素原子とを連結する主鎖）を構成する原子数、および第２リンカーにおける主鎖（Ｌ_２に隣接するＣ＝Ｗ中の炭素原子とカルボニル基中の炭素原子とを連結する主鎖）を構成する原子数の合計は、２～５個であってもよい。このような原子数を有する第１リンカーおよび第２リンカーの使用により、イムノグロブリン単位中の重鎖のリジン残基を所定の基（例、親和性物質含有基）で位置選択的に修飾でき、しかも抗体と親和性ペプチド含有基との結合の平均比率を特定の範囲（例えば０．５～３．５、好ましくは１．０～３．０、より好ましくは１．５～２．５）に制御することが容易になる。本発明では、抗体と所定の基（例、親和性物質含有基）との結合の平均比率は、ＭＳ分析データをＤＡＲｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ社ソフト）により解析することで確認することができる。

第１リンカーにおける主鎖を構成する原子数、および第２リンカーにおける主鎖を構成する原子数の合計が好ましくは２～５個であることに照らすと、第１リンカーにおける主鎖を構成する原子数は１～４個であり、第２リンカーにおける主鎖を構成する原子数は１～４個である。例えば、第１リンカーにおける主鎖を構成する原子数、および第２リンカーにおける主鎖を構成する原子数の一方が１個である場合、他方は１～４個であり、一方が２個である場合、他方は１～３個であり、一方が３個である場合、他方は１または２個であり、一方が４個である場合、他方は１個である。好ましくは、第１リンカーにおける主鎖を構成する原子数が２個であり、第２リンカーにおける主鎖を構成する原子数が３個であってもよい。

第１リンカーおよび第２リンカーにおける主鎖は、鎖状構造、もしくは環状構造、またはこれらの組合せを含む構造から構成される。主鎖が環状構造を含まない鎖状構造である場合、主鎖の原子数は、鎖状構造中の原子数を数えることにより決定することができる。一方、主鎖が環状構造を含む構造である場合、環状構造を構成する所定の原子数を、主鎖の原子数として数えることにより決定することができる。具体的には、環状構造における主鎖の原子数は、環状構造中の２つの結合手を連絡する最短経路の原子数を数えることにより決定することができる（例えば、以下（ａ）～（ｄ）の太字経路を参照）。主鎖が、鎖状構造および環状構造の組合せを含む構造である場合、主鎖の原子数は、環状構造を含まない鎖状構造中の原子数を、環状構造中の２つの結合手を連絡する最短経路の原子数と合算することにより決定することができる。
・は、結合手である。
（ａ）の場合、最短経路は太字経路であるため、主鎖の原子数として数えられる２価の環状構造中の原子数は、２である。
（ｂ）の場合、最短経路は太字経路であるため、主鎖の原子数として数えられる２価の環状構造中の原子数は、３である。
（ｃ）の場合、いずれの経路も最短経路（等距離）であるため、主鎖の原子数として数えられる２価の環状構造中の原子数は、４である。
（ｄ）の場合、縮合部位の経路が最短経路であるため、主鎖の原子数として数えられる２価の環状構造中の原子数は、４である。

第１リンカーおよび第２リンカーにおける主鎖は、炭素原子、窒素原子、酸素原子および硫黄原子、ならびにそれらの組み合わせからなる群より選ばれる原子により構成されていてもよく、好ましくは、炭素原子のみ、または炭素原子と硫黄原子との組み合わせから構成されていてもよい。より好ましくは、第１リンカーおよび第２リンカーにおける主鎖は、２価の直鎖炭化水素基（好ましくはアルキレン）、２価の環状炭化水素基、２価の複素環基、硫黄原子、またはこれらの２以上（例、２または３）の組み合わせからなる基から構成されるものであってもよい。

特定の実施形態では、Ｌ_２は、Ｓ－Ｌ_２’（ここで、Ｌ_２’は、カルボニル基中の炭素原子に連結されている２価の基であり、かつＳは、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に連結されている硫黄原子である）であってもよい。Ｌ_２’で示される２価の基は、置換基で置換されていてもよく、または置換基で置換されていなくてもよい。Ｌ_２’で示される２価の基の主鎖（Ｌ_２’に隣接するカルボニル基中の炭素原子と硫黄原子とを連結する主鎖）は、アルキレンであることが好ましい。Ｌ_２’で示される２価の基の主鎖を構成する原子数は１～４個であり、好ましくは１～３個であり、より好ましくは２個であってもよい。このような場合、Ｌ_１で示される２価の基は、アルキレンであることが好ましい。Ｌ_１で示される２価の基の主鎖を構成する原子数は１～４個であり、好ましくは２または３個であり、より好ましくは２個であってもよい。

上記特定の実施形態では、式（１）で表される化合物またはその塩は、下記式（１ａ）で表されることができる。
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕。
式（１ａ）における各要素（例、Ｗ、Ｌ_１、Ｌ_２’、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）で説明したものと同様である。

別の特定の実施形態では、Ｌ_１は、Ｌ_１’－Ｓ（ここで、Ｌ_１’は、カルボニル基中の炭素原子に連結されている２価の基であり、かつＳは、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に連結されている硫黄原子である）であってもよい。Ｌ_１’で示される２価の基は、置換基で置換されていてもよく、または置換基で置換されていなくてもよい。Ｌ_１’で示される２価の基の主鎖（Ｌ_１’に隣接するカルボニル基中の炭素原子と硫黄原子とを連結する主鎖）は、アルキレンであることが好ましい。Ｌ_１’で示される２価の基の主鎖を構成する原子数は１～３個であり、好ましくは１または２個であり、より好ましくは１個であってもよい。好ましくは、Ｌ_１’で示される２価の基は、メチレンであってもよい。このような場合、Ｌ
_２で示される２価の基は、アルキレンであることが好ましい。Ｌ_２で示される２価の基の主鎖を構成する原子数は１～４個であり、好ましくは２～４個であり、より好ましくは３個であってもよい。

上記別の特定の実施形態では、式（１）で表される化合物またはその塩は、下記式（１ｂ）で表されることができる。
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（１ｂ）における各要素（例、Ｗ、Ｌ_１’、Ｌ_２、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）で説明したものと同様である。

好ましくは、式（１ｂ）におけるＬ_２は、Ｃ（－Ｂ）（－Ｒ）－Ｌ_２’（ここで、Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンであり、Ｂは、生体直交性官能基であり、Ｒは、置換基である）であってもよい。炭素原子数２～５個のアルキレンとしては、炭素原子数２～４個のアルキレンが好ましく、炭素原子数３個のアルキレンがより好ましい。この場合、Ｃ（－Ｂ）（－Ｒ）中の炭素原子が、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に連結され、かつ、Ｌ_２’がカルボニル基の炭素原子に連結されることが好ましい。

好ましい実施形態では、式（１ｂ）で表される化合物またはその塩は、下記式（１ｂ’）で表されることができる。
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個であり、かつ、主鎖を構成する原子が、炭素原子、または炭素原子および窒素原子の組み合わせである）を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（１ｂ’）における各要素（例、Ｗ、Ｌ_１’、Ｌ_２’、Ｂ、Ｒ、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）および（１ｂ）で説明したものと同様である。

式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、および式（１ｂ’）で表される化合物またはその塩は、国際公開第／２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９２４０２８８号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、および国際公開第２０２０／０９０９７９号に記載される化合物またはその塩において、抗体に対する親和性物質におけるリジン残基の側鎖中のアミノ基と反応可能な部分を、ペンタフルオロフェニルオキシ基を有するように誘導体化することで製造することができる（本願の実施例も参照）。例えば、このような反応は、適切な有機溶媒系（例、ＣＨ_２Ｃｌ_２等のハロゲン化アルキル（例、ハロゲン化メチル）、およびトリエチルアミン等のアミンを含む有機溶媒）において、適温（例、約－１０～３０℃）で行うことができる。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。

式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、および式（１ｂ’）で表される化合物またはその塩の生成の確認は、ＮＭＲ、または質量分析により、行うことができる。このような化合物またはその塩は、クロマトグラフィー等の任意の方法により適宜精製することができる。

式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、および式（１ｂ’）で表される化合物またはそれらの塩は、例えば、抗体の誘導体化試薬として有用である後述の化合物またはその塩の合成中間体として使用することができる。式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、および式（１ｂ’）で表される化合物またはそれらの塩は、親和性物質との反応効率が高いため、後述の化合物またはその塩の効率的な合成に有用である。

２－２．抗体の誘導体化試薬として使用することができる化合物またはその塩
前記式（１）で表される化合物またはその塩を、抗体に対する親和性物質と反応させることにより、下記式（２）で表される化合物またはその塩が生成される。
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１は、第１リンカーを示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し
、
Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（２）における各要素（例、Ｗ、Ｌ_１、Ｌ_２、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）で説明したものと同様である。

Ｙで示される抗体に対する親和性物質の定義、例および好ましい例は、上述したものと同様である。式（２）で表される化合物またはその塩において、Ｙで示される抗体に対する親和性物質は、親和性物質中の特定のアミノ酸残基の側鎖中の官能基が、直接的に、またはリンカーを介して間接的に、Ｙと隣接するカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）に連結されていてもよい。特定のアミノ酸残基の側鎖中の官能基としては、例えば、リジン残基の側鎖中のアミノ基、ならびにアスパラギン酸残基およびグルタミン酸残基の側鎖中のカルボキシ基が挙げられ、リジン残基の側鎖中のアミノ基が好ましい。親和性物質中の特定のアミノ酸残基の側鎖中の官能基がリジン残基の側鎖中のアミノ基である場合、リジン残基の側鎖中のアミノ基は、Ｙと隣接するカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）と一緒になってアミド結合を形成していてもよい。

特定の実施形態では、式（２）で表される化合物またはその塩は、下記式（２ａ）で表されることができる。
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（２ａ）における各要素（例、Ｙ、Ｗ、Ｌ_１、Ｌ_２’、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）、式（１ａ）、および式（２）で説明したものと同様である。

別の特定の実施形態では、式（２）で表される化合物またはその塩は、下記式（２ｂ）で表されることができる。
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（２ｂ）における各要素（例、Ｙ、Ｗ、Ｌ_１’、Ｌ_２、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）、式（１ｂ）、および式（２）で説明したものと同様である。

好ましい実施形態では、式（２ｂ）で表される化合物またはその塩は、下記式（２ｂ’）で表されることができる。
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個であり、かつ、主鎖を構成する原子が、炭素原子、または炭素原子および窒素原子の組み合わせである）を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕
式（２ｂ’）における各要素（例、Ｙ、Ｗ、Ｌ_１’、Ｌ_２’、Ｂ、Ｒ、およびＸ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）、式（１ｂ）、式（１ｂ’）、および式（２）で説明したものと同様である。

式（２）、式（２ａ）、式（２ｂ）、および式（２ｂ’）で表される化合物またはその塩は、抗体に対する親和性物質を、式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、および式（１ｂ’）で表される化合物またはその塩とそれぞれ反応させることにより行うことができる。例えば、このような反応は、適切な有機溶媒系（例、ＣＨ_２Ｃｌ_２等のハロゲン化アルキル（例、ハロゲン化メチル）、およびトリエチルアミン等のアミンを含む有機溶媒）において、適温（例、約－１０～３０℃）で行うことができる。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。

式（２）、式（２ａ）、式（２ｂ）、および式（２ｂ’）で表される化合物またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、電気泳動法、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ）、ＮＭＲ、または質量分析により、行うことができる。このような化合物またはその塩は、クロマトグラフィー等の任意の方法により適宜精製することができる。

式（２）、式（２ａ）、式（２ｂ）、および式（２ｂ’）で表される化合物またはそれ
らの塩は、例えば、抗体の誘導体化試薬として有用である。例えば、このような化合物またはそれらの塩は、抗体重鎖の定常領域における特定のアミノ酸残基、好ましくはリジン残基（例、ＥＵｎｕｍｂｅｒｉｎｇにしたがう２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位のリジン残基）を位置選択的に修飾することができる。

より具体的には、式（２）で表される化合物またはそれらの塩によれば、下記式（３）：
〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１は、第１リンカーを示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し、
Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕で表される構造単位を含む親和性物質修飾抗体またはその塩を製造することができる（図１）。

特定の実施形態では、式（３）で表される化合物またはその塩は、下記式（３ａ）で表されることができる（図２）。
〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

別の特定の実施形態では、式（３）で表される化合物またはその塩は、下記式（３ｂ）
で表されることができる（図３）。
〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

好ましい実施形態では、式（３ｂ）で表される化合物またはその塩は、下記式（３ｂ’）で表されることができる。
〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個であり、かつ、主鎖を構成する原子が、炭素原子、または炭素原子および窒素原子の組み合わせである）を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

式（３）、式（３ａ）、式（３ｂ）、および式（３ｂ’）における各要素（例、Ｙ、Ｗ、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_１’、Ｌ_２’、Ｂ、およびＲ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、式（１）、式（１ａ）、式（１ｂ）、式（１ｂ’）、式（２）、式（２ａ）、式（２ｂ
）、および式（２ｂ’）で説明したものと同様である。

親和性物質修飾抗体は、抗体の構成単位（２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位）中の２つの重鎖の定常領域（好ましくはＦｃ領域またはＣＨ２ドメイン）中の１以上（好ましくは１または２、より好ましくは１）のリジン残基の側鎖中のアミノ基の修飾を介して、上記親和性物質を含むことができる。より具体的には、１以上（好ましくは１または２、より好ましくは１）のリジン残基の位置は、ＥＵｎｕｍｂｅｒｉｎｇに従うヒトＩｇＧ重鎖の２４６／２４８位、２８８／２９０位、または３１７位であってもよい（例、国際公開第２０１６／１８６２０６号、国際公開第２０１８／１９９３３７号、国際公開第２０１９／２４０２８７号、国際公開第２０１９／２４０２８８号、国際公開第２０２０／００９１６５号、国際公開第２０２０／０９０９７９号を参照）。修飾は、上述したように、位置選択的であってもよい。後述する式（４）、式（４ａ）、式（４ｂ）、式（４ｂ’）、式（５ａ）、および式（５ｂ’）においても、上記のようなリジン残基の側鎖中のアミノ基の修飾を介して、修飾部位（生体直交性官能基、または機能性物質）を含むことができる。

上記平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。平均修飾百分率ｒは、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１１０％以上、１２０％以上、１３０％以上、１４０％以上、または１５０％以上であってもよい。平均修飾百分率ｒはまた、４００％以下、３９０％以下、３８０％以下、３７０％以下、３６０％以下、３５０％以下、３４０％以下、３３０％以下、３２０％以下、３１０％以下、３００％以下、２９０％以下、２８０％以下、２７０％以下、２６０％以下、または２５０％以下であってもよい。より具体的には、平均修飾百分率ｒは、５０～３５０％、６０～３４０％、７０～３３０％、８０～３２０％、９０～３１０％、１００～３００％、１１０～２９０％、１２０～２８０％、１３０～２７０％、１４０～２６０％、または１５０～２５０％であってもよい。平均修飾百分率ｒは、質量分析（ＤＡＲｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ社ソフト）を併用することができる。後述する式（４）、式（４ａ）、式（４ｂ）、式（４ｂ’）、式（５ａ）、および式（５ｂ’）においても、平均修飾百分率ｒは、同様である。

親和性物質修飾抗体またはその塩の製造は、本発明の化合物またはその塩を、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を含む抗体またはその塩と反応させることにより行うことができる。反応における、抗体に対する本発明の化合物またはその塩の当量（本発明の化合物またはその塩／抗体）は、本発明の化合物またはその塩、および抗体の種類等の因子に応じて変動することから特に限定されないが、例えば１～１００であり、好ましくは２～８０であり、より好ましくは４～６０であり、さらにより好ましくは５～４０であり、特に好ましくは６～２０である。

このような反応は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。例えば、このような温和な条件下での反応は、適切な反応系、例えば緩衝液中において、室温（例、約１５～３０℃）で行うことができる。緩衝液のｐＨは、例えば５～９であり、好ましくは５．５～８．５であり、より好ましくは６．０～８．０である。緩衝液は、適切な触媒を含んでいてもよい。反応時間は、例えば１分～２０時間、好ましくは１０分～１５時間、より好ましくは２０分～１０時間、さらにより好ましくは３０分～８時間である。このような反応の詳細については、例えば、Ｇ．Ｊ．Ｌ．Ｂｅｒｎａｒｄｅｓｅｔａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１１５，２１７４（２０１５）；Ｇ．Ｊ．Ｌ．Ｂｅｒｎａｒｄｅｓｅｔａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ａｓｉａｎ．Ｊ．，４，６３０（２００９）；Ｂ．Ｇ．Ｄａｖｉｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．，５，４７４０（２０１４）；Ａ．Ｗａｇｎｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ．Ｃｈｅｍ．，２５，８２５（２０１４）を参照のこと
。

目的の親和性物質修飾抗体またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、電気泳動法、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ）、または質量分析により、行うことができる。位置選択性の確認は、ペプチドマッピングにより行うことができる。ペプチドマッピングは、例えば、プロテアーゼ処理および質量分析により行うことができる。プロテアーゼとしては、エンドプロテアーゼが好ましい。このようなエンドプロテアーゼとしては、例えば、トリプシン、キモトリプシン、Ｇｌｕ－Ｃ、Ｌｙｓ－Ｎ、Ｌｙｓ－Ｃ、Ａｓｐ－Ｎが挙げられる。親和性物質の導入個数の確認は、質量分析（ＤＡＲｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ社ソフト）を併用することができる）により行うことができる。親和性物質修飾抗体またはその塩は、クロマトグラフィー（例、上述したクロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィー）等の任意の方法により適宜精製することができる。

式（３ａ）、式（３ｂ）、および式（３ｂ’）で表される化合物またはその塩は、切断反応により、生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩を生成することができ、ならびに／あるいは、生成した生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩は、機能性物質と反応させることにより、抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩を生成することができる。

切断反応としては、（ａ）酸性物質、塩基性物質、還元剤、酸化剤、酵素からなる群より選ばれる１種以上の物質による処理、（ｂ）光等の物理化学的刺激による処理、または（ｃ）自己分解性の切断性部分を含む切断性リンカーを用いた場合の放置（インキュベーション）が挙げられる。これらの切断処理についてはまた、国際公開第２０１９／２４０２８７号、国際公開第２０１９／２４０２８８号、国際公開第２０２０／００９１６５号、国際公開第２０２０／０９０９７９号を参照することができる。

このような切断反応は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。例えば、このような温和な条件は、上述のとおりである。また、切断性部位がエステル（例、通常のエステル、またはチオエステル等の他のエステル）である場合、切断反応は、ヒドロキシルアミン溶液またはアルキルアミン溶液（例、ｐＨ４．０～８．０、１０ｍＭ～１０Ｍ）中で適切な時間（例、１時間）インキュベートすることで行うことができる（例、Ｖａｎｃｅ，Ｎ．ｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２０１９，３０，１４８－１６０）。

切断反応により得られた生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、電気泳動法、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ）、または質量分析により、行うことができる。位置選択性の確認は、上述したようなペプチドマッピングにより行うことができる。生体直交性官能基の導入個数の確認は、質量分析（ＤＡＲｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ社ソフト）を併用することができる）により行うことができる。生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩は、クロマトグラフィー等の任意の方法により適宜精製することができる。

式（３ａ）、式（３ｂ）、および式（３ｂ’）で表される化合物またはその塩の切断反応により生成することができる生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩は、それぞれ、式（４ａ）、式（４ｂ）、および式（４ｂ’）で表される生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩である（図２～４）。

〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
ＳＨは、チオール基（生体直交性官能基）を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｔは、１価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｔは、１価の基を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

Ｔは、１価の基であり、切断性部分の切断により生成することができる。１価の基は、置換されていても、置換されていなくてもよい。１価の基としては、上述したものが挙げられる。１価の基が置換されている場合の置換基としては、上述したものが挙げられる。

特定の実施形態では、Ｔで示される１価の基は、置換されていてもよいヒドロキシアミノ基であってもよい。置換されていてもよいヒドロキシアミノ基は、下記式（α）により表すことができる。
ＮＲ_ｉ－ＯＲ_ｉｉ（α）
〔式中、
Ｒ_ｉ、Ｒ_ｉｉは、それぞれ独立して、水素原子、または１価の炭化水素基を示す。）
ここで、１価の炭化水素基は、置換されていても、置換されていなくてもよい。１価の炭化水素基、ならびに１価の炭化水素基が置換されている場合の置換基の定義、例、および好ましい例は、上述したとおりである。好ましくは、置換されていてもよいヒドロキシアミノ基は、ＮＨ－ＯＲ_ｉｉ（ここで、Ｒ_ｉｉはアルキル基を示す。）であってもよい。より好ましくは、置換されていてもよいヒドロキシアミノ基は、ＮＨ－ＯＲ_ｉｉ（ここで、Ｒ_ｉｉは炭素原子数１～６のアルキル基を示す。）であってもよい。

抗体誘導体またはその塩と機能性物質との反応（コンジュゲーション）は、タンパク質の変性・分解（例、アミド結合の切断）を引き起こし得ない条件（温和な条件）下で適宜行うことができる。

コンジュゲートまたはその塩の生成の確認は、その具体的な原料および生成物の分子量にもよるが、例えば、電気泳動法、クロマトグラフィー（例、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ）、または質量分析により、行うことができる。位置選択性の確認は、上述したようなペプチドマッピングにより行うことができる。機能性物質の導入個数の確認は、質量分析（ＤＡＲｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ社ソフト）を併用することができる）により行うことができる。コンジュゲートまたはその塩は、クロマトグラフィー等の任意の方法により適宜精製することができる。

式（４ａ）、および式（４ｂ’）で表される生体直交性官能基を有する抗体誘導体またはその塩を機能性物質と反応させることにより生成することができる抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩は、それぞれ、式（５ａ）、および式（５ｂ’）で表される抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩である（図２～４）。

〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し
、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｚは、機能性物質を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し
Ｌ_２’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

〔式中、
Ｉｇは、２個の重鎖および必要に応じて２個の軽鎖を含むイムノグロブリン単位を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｔは、１価の基を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｂ’は、機能性物質と生体直交性官能基との反応により生成する基または当該生成する基を含む基を示し、
Ｚは、機能性物質を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
前記親和性物質による前記イムノグロブリン単位の平均修飾百分率ｒは、５０％以上である。〕

式（４）、式（４ａ）、式（４ｂ）、および式（４ｂ’）、式（５ａ）、および式（５ｂ’）における各要素（例、Ｙ、Ｗ、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_１’、Ｌ_２’、Ｂ、Ｂ’、Ｒ、Ｔ）の定義、例および好ましい例等の詳細は、前述の式で説明したものと同様である。また、式（５ｂ’）におけるＴの定義、例および好ましい例等の詳細は、式（４ｂ）、および式（４ｂ’）で説明したものと同様である。

また、式（１ａ）、式（２ａ）、式（３ａ）、式（４ａ）、および式（５ａ）に関連し得る情報（図２）として、国際公開第２０１９／２４０２８７号の実施例８１を参照することができる。

３．用途
本発明は、本発明の化合物またはその塩を含む、抗体誘導体化用試薬を提供する。

本発明の試薬は、他の成分をさらに含む組成物の形態で提供されてもよい。このような他の成分としては、例えば、溶液、安定化剤（例、酸化防止剤、保存剤）が挙げられる。溶液としては、水溶液が好ましい。水溶液としては、例えば、水（例、蒸留水、滅菌蒸留水、精製水、生理食塩水）、緩衝液（例、リン酸水溶液、Ｔｒｉｓ－塩酸緩衝液、炭酸－重炭酸緩衝液、ホウ酸水溶液、グリシン－水酸化ナトリウム緩衝液、クエン酸緩衝液）が挙げられるが、緩衝液が好ましい。溶液のｐＨは、例えば５．０～９．０、好ましくは５．５～８．５である。本発明の試薬は、液状または粉末状（例、凍結乾燥粉末）において
提供することができる。

以下の実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

実施例１：ペンタフルオロエステル試薬の合成
ペンタフルオロエステル試薬（１）は下記の通り合成した。

（１－１）化合物２の合成

３，３’－ＤｉｔｈｉｏｄｉｐｒｏｐｉｏｎｉｃＡｃｉｄ（１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、０℃でＤＭＦ（１００μＬ）、ＯｘａｌｙｌＣｈｌｏｒｉｄｅ（１．５ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）を加え０℃で１５分、常温で１時間撹拌した。その後、０℃でＢｅｎｚｅｎｅｔｈｉｏｌ（１．５３ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）、Ｐｙｒｉｄｉｎｅ（４ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）を加え常温で３時間撹拌した。ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で反応を確認後、結晶を除去し、酢酸エチルと１Ｍ塩酸水溶液で抽出後、有機層を濃縮した。ヘキサンと酢酸エチルの混合溶液で溶出し、各フラクションをＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）により確認した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより有機溶媒を除去後、真空乾燥を行い、化合物（２）を（１．２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ＝７．４４（ｓ，１０Ｈ），３．１６－３．０６（ｍ，５Ｈ），３．０７－２．９５（ｍ，４Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－２）化合物３の合成

（１－１）で合成した化合物（２）（５２．５ｍｇ，１３３μｍｏｌ）を酢酸９．３ｍＬに溶解させ、粉末の亜鉛（１３．０ｍｇ，２００μｍｏｌ）を加え４０分９０℃にて攪拌した。４０分後、粉末の亜鉛（７３．９ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）をさらに加え、９０℃で１時間攪拌した。１時間後、吸引ろ過により粉末の亜鉛を除去し、回収したろ液を減圧濃縮し、ヘキサン／酢酸エチルの順相クロマトグラフィーにより精製することで目的とする化合物（３）（１９．１ｍｇ，９６．３μｍｍｏｌ）を得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ＝７．４５（ｓ，５Ｈ），３．０２（ｔｄ，Ｊ＝６．８，０．７Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｄｔｄ，Ｊ＝７．６，６．９，０．６Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１９９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－３）化合物４の合成

化合物（３）（１．２９ｇ，６．５ｍｍｏｌ）にアセトニトリル２．７ｍＬ，ピリジン０．３ｍＬを加え溶解した。その後、無水コハク酸（０．６５ｇ，６．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（１２．２ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を加え１時間攪拌した。１Ｍ塩酸水溶液２０ｍＬを加え、酢酸エチルにより抽出した。減圧濃縮することで、化合物（４）（１．２５ｇ，４．２ｍｍｏｌ）を得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ ＝７．４４（ｓ，５Ｈ），３．２２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．７５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９９．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（１－４）ペンタフルオロエステル試薬（化合物１）の合成

（１－３）で合成した化合物（４）（３．１６ｇ、１０．５９ｍｍｏｌ）にＣＨ_２Ｃｌ_２（５３．０ｍＬ）、トリエチルアミン（３．７ｍＬ、２６．４７ｍｍｏｌ）を加え、溶解した。０℃でペンタフルオロフェニルトリフルオロ酢酸（３．６ｍＬ、２１．１７ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で反応を確認後、反応溶液を濃縮した。ヘキサンと酢酸エチルの混合溶液で溶出し、各フラクションを
ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）により確認した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより有機溶媒を除去後、真空乾燥を行い、上記化合物を（４．３６ｇ、０．９ｍｍｏｌ）得た。

１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ ＝７．４４（ｓ，５Ｈ），３．２５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，４Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８６．９［Ｍ＋Ｎａ］＋

実施例２：アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬の合成
（２－１）アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（５）の合成
アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（５）は下記の通り合成した。

（２－１－１）リンカー中間体（６）の合成

５－アジドペンタン酸（８００ｍｇ，５．５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１４ｍＬ）に溶解させ、クロロギ酸イソブチル（８０８μＬ，６．１５ｍｍｏｌ）、Ｎ－メチルモルホリン（８７３μＬ，８．３９ｍｍｏｌ）を加え０℃にて３０分攪拌した後、１ＭＮａＯＨ水溶液（４ｍＬ）に溶解したヒドラジン水和物（１．３６ｇ，６．７１ｍｍｏｌ）を加えて室温にて３時間攪拌した。減圧下濃縮した後、１ＭＮａＯＨ水溶液を加え、系内のｐＨをｐＨ１０に調整し、酢酸エチルで洗浄後、水層に１ＭＨＣｌ水溶液を加え、系内のｐＨを３．０に調整し、酢酸エチルを加えて洗浄し、得られた酢酸エチル溶液に硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより硫酸ナトリウムを取り除き、減圧下濃縮カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することにより、リンカー中間体（６）を得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ６．２９（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｔｄ，Ｊ＝８．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５３－２．３８（ｍ，３Ｈ），２．３６－２．１６（ｍ，３Ｈ），２．１２（ｓ，２Ｈ），１．９６（ｄｑ，Ｊ＝１４．７，７．６Ｈｚ，１Ｈ），１．８４－１．５９（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－１－２）リンカー中間体（７）の合成

リンカー中間体（６）（２．４１ｇ，５．５９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２８ｍＬ）に溶解させ、チオフェノール（６２７μＬ，６．１５ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ（３．４９ｇ，６．７１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．４２ｍＬ，８．３９ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。その後、減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより、リンカー中間体（７）を得た（２．２０ｇ，５．２３ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４３（ｓ，５Ｈ），６．１０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｔｄ，Ｊ＝７．７，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．８７－２．６３（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．１６－１．９８（ｍ，１Ｈ），１．８３－１．５８（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．３７－１．２２（ｍ，２Ｈ），０．９１（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２１［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－１－３）リンカー中間体（８）の合成

リンカー中間体（７）（２．２０ｇ，５．２３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えて、室温にて１時間攪拌した後、減圧下濃縮しジクロロメタンを除去し、水を加えて凍結乾燥することにより、リンカー中間体（８）を得た（１．９８ｇ，５．４３ｍｍｏ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４４（ｓ，Ｊ＝６．３，４．６，２．４Ｈｚ，５Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｔｄ，Ｊ＝７．５，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｑｔ，Ｊ＝１６．８，６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．３３（ｄｔ，Ｊ＝１２．４，６．８Ｈｚ，３Ｈ），２．１８（ｄｑ，Ｊ＝１４．４，７．４Ｈｚ，１Ｈ），１．７４（ｄｑ，Ｊ＝１１．８，７．５，６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝１７．７，１０．５，４．８Ｈｚ，
２Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－１－４）リンカー中間体（９）の合成

リンカー中間体（８）（１００ｍｇ，０．２７４ｍｍｏ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解させ、（４０．６μＬ，０．２８０ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ（１５０ｍｇ，０．２８８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７０．１μＬ，０．４１２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間攪拌した。１ＭＨＣｌ水溶液を加えて系内をｐＨ３に調整し、ジクロロメタンを加えて希釈し、水、食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより、硫酸ナトリウムを除去した後、減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより、リンカー中間体（９）を得た（８４．７ｍｇ，０．１７１ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．５０－７．３８（ｍ，５Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．７８（ｔｄｄ，Ｊ＝７．８，４．６，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７０－３．５４（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｄｔ，Ｊ＝９．１，６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．９６－２．６７（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｐｄ，Ｊ＝７．１，４．５Ｈｚ，２Ｈ），１．８５－１．６０（ｍ，６Ｈ），１．４９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９５［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－１－５）リンカー中間体（１０）の合成

リンカー中間体（９）（８４．７ｍｇ，０．１７１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えて、室温にて１時間攪拌した後、減圧下濃縮しジクロロメタンを除去し、水を加えて凍結乾燥した後、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することによりリンカー中間体（１０）を得た（４６．８ｍｇ，０．１０７ｍｍｏ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｄ４）δ７．４４（ｄｑ，Ｊ＝２．３，１．５Ｈｚ，５Ｈ），４．６９－４．５７（ｍ，１Ｈ），３．７９－３．６７（ｍ，２Ｈ），３．４０－３．３０（ｍ，２Ｈ），２．８９－２．７１（ｍ，２Ｈ），２．４４－２．２３（ｍ，４Ｈ），２．０８－１．９５（ｍ，１Ｈ），１．８２－１．６１（ｍ，４Ｈ）．

（２－１－６）アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（５）の合成

リンカー中間体（１０）（４４５．０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）にＣＨ２Ｃｌ２（９．０ｍＬ）、トリエチルアミン（３１４ｕＬ、２．２５ｍｍｏｌ）を加え、溶解した。０℃でペンタフルオロフェニルトリフルオロ酢酸（３０９ｕＬ、１．８０ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で反応を確認後、反応溶液を濃縮した。ヘキサンと酢酸エチルの混合溶液で溶出し、各フラクションをＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）により確認した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより有機溶媒を除去後、真空乾燥を行い、上記化合物（５）を（４１３．７ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ） δ ＝７．５０－７．３８（ｍ，５Ｈ），６．４５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ｔｄ，Ｊ＝８．３，４．６Ｈｚ，１Ｈ），４．０８－
３．９２（ｍ，２Ｈ），３．３１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），
２．９７－２．７５（ｍ，２Ｈ），２．４０－２．２４（ｍ，３Ｈ），２．２４－２．１１（ｍ，１Ｈ），１．８４－１．６２（ｍ，４Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６０５．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－２）アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（１１）の合成
アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（１１）は下記の通り合成した。

（２－２－１）リンカー中間体（１２）の合成

ジチオグリコール酸（６１３ｍｇ，３．３６ｍｍｏ）をジクロロメタン（１７ｍＬ）に溶解させ、_Ｄ－プロリンｔｅｒｔ－ブチル塩酸塩（１．５３ｇ，７．４０ｍｍｏｌ）、ＷＳＣ・ＨＣｌ（１．６１ｍｇ，８．４０ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール（９１．４ｍｇ，０．６７２ｍｍｏｌ）、トリアチルアミン（２．３３ｍＬ，１６．８ｍｍｏｌ）を加え、室温にて終夜攪拌した。減圧下濃縮した後、酢酸エチルを加えて希釈し、水、食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより硫酸ナトリウムを除去した後、減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することにより、リンカー中間体（１２）を得た（１．０９ｇ，２．２３ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ４．３９（ｄｔ，Ｊ＝８．３，３．６Ｈｚ，２Ｈ），３．７９－３．６０（ｍ，８Ｈ），２．３５－２．１４（ｍ，２Ｈ），２．１４－１．８５（ｍ，６Ｈ），１．４７（ｓ，１８Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８９［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－２－２）リンカー中間体（１３）の合成

リンカー中間体（１２４）（１．０９ｇ，２．２３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させ、水（５ｍＬ）に溶解したトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（８３１ｍｇ，２．９０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて終夜攪拌した後、反応液を酢酸エチルで希釈し、水、食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムを加えた。フィルトレーションにより硫酸ナトリウムを取り除き、減圧下濃縮した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することによりリンカー中間体（１３）を得た（８６７ｍｇ，３．５３ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ４．３９（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．０，８．４，３．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７７－３．５３（ｍ，２Ｈ），３．３９－３．２４（ｍ，２Ｈ），２．３３－２．０６（ｍ，２Ｈ），２．０６（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－２－３）リンカー中間体（１４）の合成

リンカー中間体（８）（２６４ｇ，０．７２３ｍｍｏ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解させ、リンカー中間体（１３）（１９５ｍｇ，０．７９５ｍｍｏｌ）、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ（４５２ｍｇ，０．８６８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３７０μＬ，２．１７ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。減圧下濃縮した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することにより、リンカー中間体（１４）を得た（１８０ｍｇ，０．３０３ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４４（ｐ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，５Ｈ），６．５２（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｔｄ，Ｊ＝８．５，４．６Ｈｚ，１Ｈ），４．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１９．２，８．４，３．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８０－３．４９（ｍ，４Ｈ），３．３９－３．２６（ｍ，２Ｈ），２．９４－２．６７（ｍ，２Ｈ），２．３９－２．２７（ｍ，２Ｈ），２．２７－１．８７（ｍ，３Ｈ），１．８７－１．５７（ｍ，８Ｈ），１．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，９Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９２［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－２－４）リンカー中間体（１５）の合成
リンカー中間体（１４）（１８０ｍｇ，０．３０３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えて、室温にて１時間攪拌した後、減圧下濃縮しジクロロメタンを除去し、水を加えて凍結乾燥することにより、リンカー中間体（１５）を得た（１７２．６ｍｇ，０．３２２ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４３（ｑ，Ｊ＝５．７，４．７Ｈｚ，５Ｈ），４．７１（ｔｄ，Ｊ＝８．７，４．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），３．９７－３．４７（ｍ，４Ｈ），３．３２（ｄｔ，Ｊ＝１２．９，６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８２（ｑｑ，Ｊ＝１５．４，７．４，６．１Ｈｚ，２Ｈ），２．４４－２．００（ｍ，８Ｈ），１．８７－１．５９（ｍ，４Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３６［Ｍ＋Ｈ］^＋

（２－２－５）アジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（１１）の合成

リンカー中間体（１５）（１７２．６ｍｇ，０．３２２ｍｍｏ）をジクロロメタン（１．６ｍＬ）に溶解させ、ペンタフルオロフェニルトリフルオロ酢酸（１１０ｍＬ，０．６４４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１３４μＬ，０．９６６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３ｈ攪拌した。減圧下濃縮した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧下濃縮することによりアジド導入型ペンタフルオロエステル試薬（１１）を得た（１５８．６ｍｇ，０．２２６ｍｍｏｌ）。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ７．４７－７．３６（ｍ，５Ｈ），６．５９－６．４０（ｍ，１Ｈ），４．９２－４．７８（ｍ，１Ｈ），４．７３（ｔｔ，Ｊ＝７．６，３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０１－３．６２（ｍ，４Ｈ），３．３１（ｑｄ，Ｊ＝６．６，２．８Ｈｚ，２Ｈ），２．９９－２．６８（ｍ，２Ｈ），２．５０－２．０９（ｍ，８Ｈ），１．８４－１．５６（ｍ，４Ｈ）．

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０２［Ｍ＋Ｈ］^＋

実施例３：ペンタフルオロエステル試薬とペプチドとのカップリング反応
（３－１）ペンタフルオロエステル試薬（１）とペプチドとのカップリング反応
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号１のアミノ酸配列である

既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ２のペプチド（配列番号１，５４．７ｍｇ，２６．４μｍｏｌ，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）をＤＭＦ（５００μＬ）に溶解させ、ペンタフルオロエステル試薬（１）のＤＭＦ溶液（１８４μＬ，７９．１μｍｏｌ，２００ｍｇ／ｍＬ）を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物（３９．７ｍｇ，１６．９μｍｏｌ）を収率６４％で得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝２１１７９［Ｍ＋２Ｈ］^２＋，ｚ＝３７８６［Ｍ＋３Ｈ］^３＋

（３－２）ペンタフルオロエステル試薬（１）の汎用性の確認
（３－２－１）Ａｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＩＩＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号２）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号２のアミノ酸配列である

実施例３－１の手法に従い、既報（国際公開第２０１９／２４０２８７号（ＷＯ２０１９／２４０２８７Ａ１、実施例８１）記載のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＩＩＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号２，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝３７９０［Ｍ＋３Ｈ］^３＋，ｚ＝４５９３［Ｍ＋４Ｈ］^４＋

（３－２－２）Ａｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＤＤＣ－ＮＨ_２（配列番号３）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号３のアミノ酸配列である

同様に、既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＤＤＣ－ＮＨ_２（配列番号３，ただし、５番目と３４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮するこ
とでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝３１５１１［Ｍ＋３Ｈ］^３＋，ｚ＝４１１３３
［Ｍ＋４Ｈ］^４＋

（３－２－３）Ａｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＥＥＣ－ＮＨ_２（配列番号４）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号４のアミノ酸配列である

既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）に記載の方法で合成したＡｃ－ＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＥＥＣ－ＮＨ_２（配列番号４，ただし、５番目と３４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝３１５２１［Ｍ＋３Ｈ］^３＋，ｚ＝４１１４１［Ｍ＋４Ｈ］^４＋

（３－３）アジド型ペンタフルオロエステル試薬の反応性の確認
（３－３－１）ペンタフルオロエステル試薬（５）とＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号１）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号１のアミノ酸配列である

実施例３－１の手法に従い、既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴ
ＹＨ－ＮＨ_２（配列番号１，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（５）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝２１１７９［Ｍ＋２Ｈ］^２＋，ｚ＝３７８７［Ｍ＋３Ｈ］^３＋

（３－３－２）ペンタフルオロエステル試薬（５）とＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＩＩＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号２）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号２のアミノ酸配列である

実施例３－１の手法に従い、Ａｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＩＩＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号２，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（５）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

（３－３－３）ペンタフルオロエステル試薬（１１）とＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号１）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号１のアミノ酸配列である

実施例３－１の手法に従い、既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９
，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２（配列番号１，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝２１２４９［Ｍ＋２Ｈ］^２＋，ｚ＝３８３３［Ｍ＋３Ｈ］^３＋

（３－３－４）ペンタフルオロエステル試薬（１１）とＡｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＤＤＣ－ＮＨ_２（配列番号３）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号３のアミノ酸配列である。

既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＤＤＣ－ＮＨ_２（配列番号３，ただし、５番目と３４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝３１５９０［Ｍ＋３Ｈ］^３＋，ｚ＝４１１９３［Ｍ＋４Ｈ］^４＋，ｚ＝５９５４［Ｍ＋５Ｈ］^５＋，ｚ＝６７９５［Ｍ＋６Ｈ］^６＋

（３－３－５）ペンタフルオロエステル試薬（１１）とＡｃ－ＦＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＥＥＣ－ＮＨ_２（配列番号４）とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号４のアミノ酸配列である。

実施例（３－２－３）で合成したＡｃ－ＮＭＱＣＱＲＲＦＹＥＡＬＨＤＰＮＬＮＥＥＱＲＮＡＲＩＲＳＩＫＥＥＣ－ＮＨ_２（配列番号４，ただし、５番目と３４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）のＤＭＦ溶液に、ペンタフルオロエステル試薬（１１）のＤＭＦ溶液を加え、室温で２４時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物を得た。

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｚ＝３１５９９［Ｍ＋３Ｈ］^３＋，ｚ＝４１２００［Ｍ＋４Ｈ］^４＋，ｚ＝５９６０［Ｍ＋５Ｈ］^５＋，ｚ＝６８００［Ｍ＋６Ｈ］^６＋

参考例１：その他の活性化エステル試薬を用いたペプチドとのカップリング
下記２種の活性化エステル試薬を実施例１－４に従い、化合物４より合成した。

参考例２：ＮＨＳエステル試薬（１６）とＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２のペプチド（配列番号１とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号１のアミノ酸配列である

既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２のペプチド（配列番号１，５０．９ｍｇ，２４．５３μｍｏｌ，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）をＤＭＦ（５００μＬ）に溶解させ、ＮＨＳエステル試薬（１）のＤＭＦ溶液（１４５μＬ，７３．５８μｍｏｌ，２００ｍｇ／ｍＬ）を加え、室温で１９時間攪拌した後、Ｅｔ_３Ｎ（１０．３μＬ，７３．５８μｍｏｌ）を加えてさらに２時間攪拌した後、、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し。減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物（３．４ｍｇ，１．４５μｍｏｌ）を収率６％で得た。

参考例３：ニトロフェニルエステル試薬（１７）とＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２のペプチド（配列番号１とのカップリング
上記アミノ酸配列はいずれも、配列番号１のアミノ酸配列である

既報（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，２０１９，５８，５５９２－５５９７）のペプチドであるＡｃ－ＲＧＮＣＡＹＨＫＧＱＬＶＷＣＴＹＨ－ＮＨ_２のペプチド（配列番号１，５２．２ｍｇ，２５．１５μｍｏｌ，ただし、４番目と１４番目の２つのシステインは、それぞれ分子内でジスルフィド結合している。）をＤＭＦ（５００μＬ）に溶解させ、ニトロフェニルエステル試薬（１７）のＤＭＦ溶液（１５８μＬ，７３．４６μｍｏｌ，２００ｍｇ／ｍＬ）を加え、室温で２３時間攪拌した後、逆相分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物が含まれるフラクションを回収し、減圧濃縮することでＭｅＣＮを除去した後、凍結乾燥を行い、上記ペプチドーリンカー連結物（１７．５ｍｇ，８．８０μｍｏｌ）を３１％で得た。

上記収率をまとめると、以下のとおりである。

したがって、ペンタフルオロフェニルエステル試薬が他の活性エステルより優位にペプチドと反応することが確認された。

Claims

下記式（１）：
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１は、第１リンカーを示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し、
Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される化合物またはその塩。
前記式（１）で表される化合物が、下記式（１ａ）：
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される、請求項１記載の化合物またはその塩。
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよいアルキレンを示す、請求項２記載の化合物またはその塩。
Ｌ_１が、置換されていてもよい炭素原子数１または２個のアルキレンを示す、請求項３記載の化合物またはその塩。
Ｌ_２’が、置換されていてもよい炭素原子数１～５個のアルキレンを示す、請求項３または４記載の化合物またはその塩。
前記式（１）で表される化合物が、下記式（１ｂ）：
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される、請求項１記載の化合物またはその塩。
Ｌ_１’が、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個である）を示す、請求項６記載の化合物またはその塩。
主鎖を構成する原子が、炭素原子、窒素原子、酸素原子および硫黄原子、ならびにそれらの組み合わせからなる群より選ばれる、請求項７記載の化合物またはその塩。
Ｌ_２が、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい炭素原子数１～５個のアルキレンを示す、請求項６～８のいずれか一項記載の化合物またはその塩。
前記式（１ｂ）で表される化合物が、下記式（１ｂ’）：
〔式中、
Ｆは、フッ素原子を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個であり、かつ、主鎖を構成する原子が、炭素原子、または炭素原子および窒素原子の組み合わせである）を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される、請求項６記載の化合物またはその塩。
下記式（２ａ）：
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１およびＬ_２’は、それぞれ独立して、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される化合物またはその塩。
下記式（２ｂ）：
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有する置換されていてもよい２価の基を示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される化合物またはその塩。
前記式（２ｂ）で表される化合物が、下記式（２ｂ’）：
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１’は、置換されていてもよい２価の基（ここで、Ｌ_１’に隣接する炭素原子および
硫黄原子を連結する主鎖を構成する原子数は１～５個であり、かつ、主鎖を構成する原子が、炭素原子、または炭素原子および窒素原子の組み合わせである）を示し、
Ｌ_２’は、置換されていてもよい炭素原子数２～５個のアルキレンを示し、
Ｓは、硫黄原子を示し、
Ｂは、生体直交性官能基またはそれを含む基を示し、
Ｒは、水素原子または置換基を示し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される、請求項１２記載の化合物またはその塩。
下記式（２）：
〔式中、
Ｙは、抗体に対する親和性物質を示し、
Ｏは、酸素原子を示し、
Ｗは、酸素原子または硫黄原子を示し、
Ｌ_１は、第１リンカーを示し、
Ｌ_２は、生体直交性官能基またはそれを含む基を有していてもよい第２リンカーを示し、
Ｌ_１またはＬ_２のいずれか一方は、Ｃ＝Ｗ中の炭素原子に対する隣接原子として、硫黄原子、酸素原子または窒素原子を有し、
Ｘは、脱離基を示す。〕で表される化合物またはその塩を含む、抗体の誘導体化試薬。