WO2023051669A1 - 喹啉衍生物与抗cd47抗体的药物组合 - Google Patents
喹啉衍生物与抗cd47抗体的药物组合 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2023051669A1 WO2023051669A1 PCT/CN2022/122474 CN2022122474W WO2023051669A1 WO 2023051669 A1 WO2023051669 A1 WO 2023051669A1 CN 2022122474 W CN2022122474 W CN 2022122474W WO 2023051669 A1 WO2023051669 A1 WO 2023051669A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- seq
- amino acid
- acid sequence
- heavy chain
- light chain
- Prior art date
Links
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 125000002943 quinolinyl group Chemical class N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 title 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 71
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 58
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 58
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 56
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 42
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 36
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 240
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 62
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 62
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 claims description 15
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 claims description 10
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 claims description 8
- HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N Cyclopropylamine Chemical compound NC1CC1 HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 7
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 101000605639 Homo sapiens Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform Proteins 0.000 claims description 6
- 102100038332 Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform Human genes 0.000 claims description 6
- 208000032818 Microsatellite Instability Diseases 0.000 claims description 5
- 230000033607 mismatch repair Effects 0.000 claims description 5
- 108091092878 Microsatellite Proteins 0.000 claims description 4
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007054 Medullary Carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003252 Signet Ring Cell Carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000023356 medullary thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010879 mucinous adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000008123 signet ring cell adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011050 comedo carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims 1
- 125000004531 indol-5-yl group Chemical group [H]N1C([H])=C([H])C2=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C12 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 57
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 57
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 57
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 101000868279 Homo sapiens Leukocyte surface antigen CD47 Proteins 0.000 description 26
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 22
- 102100032913 Leukocyte surface antigen CD47 Human genes 0.000 description 22
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 12
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 11
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 10
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 9
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 9
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 9
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 9
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 8
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 8
- UUAKQNIPIXQZFN-UHFFFAOYSA-N 1-[[4-[(4-fluoro-2-methyl-1h-indol-5-yl)oxy]-6-methoxyquinolin-7-yl]oxymethyl]cyclopropan-1-amine;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.COC1=CC2=C(OC=3C(=C4C=C(C)NC4=CC=3)F)C=CN=C2C=C1OCC1(N)CC1 UUAKQNIPIXQZFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940124619 anlotinib hydrochloride Drugs 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- 101000863873 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type substrate 1 Proteins 0.000 description 6
- 102100029948 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type substrate 1 Human genes 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- KSMZEXLVHXZPEF-UHFFFAOYSA-N 1-[[4-[(4-fluoro-2-methyl-1h-indol-5-yl)oxy]-6-methoxyquinolin-7-yl]oxymethyl]cyclopropan-1-amine Chemical compound COC1=CC2=C(OC=3C(=C4C=C(C)NC4=CC=3)F)C=CN=C2C=C1OCC1(N)CC1 KSMZEXLVHXZPEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940124618 Anlotinib Drugs 0.000 description 5
- 206010052358 Colorectal cancer metastatic Diseases 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 102000044459 human CD47 Human genes 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 3
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 208000037844 advanced solid tumor Diseases 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- -1 quinoline derivative tyrosine kinase inhibitor Chemical class 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 description 2
- 206010018852 Haematoma Diseases 0.000 description 2
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 description 2
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 229940027991 antiseptic and disinfectant quinoline derivative Drugs 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 231100000371 dose-limiting toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940093430 polyethylene glycol 1500 Drugs 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 150000003248 quinolines Chemical class 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124676 vascular endothelial growth factor receptor Drugs 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100289995 Caenorhabditis elegans mac-1 gene Proteins 0.000 description 1
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100030708 GTPase KRas Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000584612 Homo sapiens GTPase KRas Proteins 0.000 description 1
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 206010069755 K-ras gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 101710098610 Leukocyte surface antigen CD47 Proteins 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011789 NOD SCID mouse Methods 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010049190 Red blood cell agglutination Diseases 0.000 description 1
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940121647 egfr inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 150000005699 fluoropyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000012215 gene cloning Methods 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940125052 lemzoparlimab Drugs 0.000 description 1
- 229940067578 letaplimab Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 229940121581 magrolimab Drugs 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000037843 metastatic solid tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical class N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 238000009520 phase I clinical trial Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
Abstract
一种治疗受试者的癌症的方法，包括向所述受试者施用治疗有效量的抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂。还提供了抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂在制备治疗受试者的癌症的药物中的用途。还提供了包含抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂的药物组合及试剂盒。其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐。
Description
本发明属于生物医药领域，涉及喹啉衍生物与抗CD47抗体的用途及药物组合。
酪氨酸激酶是一组催化蛋白质酪氨酸残基磷酸化的酶，在细胞内的信号转导中起着重要的作用，它参与正常细胞的调节、信号传递和发育，也与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移和凋亡密切相关。许多受体酪氨酸激酶都与肿瘤的形成相关，根据其细胞外区域结构的不同可分为表皮生长因子受体(EGFR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)等。安罗替尼(Anlotinib)是一种喹啉衍生物类酪氨酸激酶抑制剂，其作为多靶点酪氨酸激酶抑制剂(TKI)在影响肿瘤血管生成和增殖信号传导方面发挥作用。文献WO2008112407在实施例24中公开了一种喹啉衍生物类的酪氨酸激酶抑制剂1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺及其制备方法。
CD47是一种广泛表达于多个物种和各个组织之间的跨膜糖蛋白，也被称为整合素相关蛋白，是免疫球蛋白超家族中的成员。抑制性受体信号调节蛋白α(SIRPα)是CD47的配体之一，CD47结合在SIRPα的NH2末端IgV样结构域。SIRPα主要表达于髓系来源的细胞，包括巨噬细胞、粒细胞、DC细胞、肥大细胞以及它们的前体，包括造血干细胞。CD47表达和/或活性已经牵涉许多疾病和病症。多项不同的研究表明，几乎所有的肿瘤细胞和肿瘤组织都高表达CD47。肿瘤细胞表面高表达的CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα结合，释放“别吃我”(don’t eat me)的信号，从而导致肿瘤组织浸润区的巨噬细胞不但同肿瘤细胞和谐相处，而且还会通过促进肿瘤内血管增殖，抑制效应T细胞发挥作用，促进肿瘤细胞扩增和生长。目前已有针对CD47-SIRPαaxis的药物例如抗CD47抗体进入临床试验。
目前针对癌症的治疗仍有未满足的临床需求。
发明内容
本发明提供了抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂在制备治疗受试者的癌症的药物中的用途，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明提供了一种治疗受试者的癌症的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了一种药物组合，其包含：(a)抗CD47抗体，以及(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了用于治疗癌症的药物组合，其包含：(a)抗CD47抗体，以及(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了包含所述药物组合的试剂盒。
图1为抗CD47抗体对小鼠生存率的影响。
图2为抗CD47抗体单次给药后小鼠体重随时间的变化。
图3为抗CD47抗体单次给药后不同时间的小鼠体重变化率。
图4为抗CD47抗体单次给药后小鼠RBC随时间的变化。
图5为抗CD47抗体单次给药后不同时间的小鼠RBC变化率。
图6为抗CD47抗体单次给药后小鼠HGB含量随时间的变化。
图7为抗CD47抗体单次给药后不同时间的小鼠HGB变化率。
图8为抗CD47抗体、盐酸安罗替尼单用或二者联用后人结直肠癌DiFi小鼠皮下移植瘤肿瘤体积的变化。
图9为抗CD47抗体、盐酸安罗替尼单用或二者联用后荷瘤小鼠体重的变化。
发明详述
术语
术语“抗体”以其最广义使用，并且涵盖各种抗体结构，涵盖各种结构的天然抗体和人工抗体，包括但不限于单克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体、三特异性抗体等)、单链抗体、抗体片段等，只要它们展现出期望的抗原结合活性。抗体可以是完整抗体。抗体片段指完整抗体以外的分子，其包含完整抗体的部分，该部分结合该完整抗体所结合的抗原。抗体片 段的实例包括但不限于Fv、Fab、Fab'、Fab’-SH、F(ab')2、单链抗体分子(例如scFv)和单结构域抗体。
术语“同种型”是指由重链恒定区基因编码的抗体种类。
术语“嵌合抗体”是下述抗体：所述抗体具有衍生自一种物种的重链可变区的至少一部分和轻链可变区的至少一部分；以及衍生自另一物种的恒定区的至少一部分。例如，在一些实施方案中，嵌合抗体可以包含鼠类可变区和人恒定区。
“人源化抗体”是下述抗体：所述抗体含有衍生自非人抗体的互补决定区(CDR)；和衍生自人抗体的框架区以及恒定区。例如，本文提供的结合CD47的人源化抗体可以包含衍生自一种或多种鼠类抗体的CDR以及人框架区和恒定区。
术语“可变结构域”或“可变区”是指抗体的涉及该抗体与抗原结合的结构域。例如天然四链抗体(例如来源于人、鼠等)具有重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，来源于骆驼科或鲨鱼等动物的仅重链抗体具有单可变结构域。大多数情况下，天然抗体的每个可变结构域基本上由四个“框架区”和三个“互补决定区”组成。四个框架区分别称为框架区1(FR1)、框架区2(FR2)、框架区3(FR3)、及框架区4(FR4)；所述框架区由本领域及下文中分别称为互补决定区1(CDR1)、互补决定区2(CDR2)及互补决定区3(CDR3)的三个互补决定区(CDR)间隔开。因此，可变结构域的一般结构可如下表示为：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。一个具体的例子，重链可变区的一般结构可如下表示为：FR1-HCDR1-FR2-HCDR2-FR3-HCDR3-FR4。一个具体的例子，轻链可变区的一般结构可如下表示为：FR1-LCDR1-FR2-LCDR2-FR3-LCDR3-FR4。可变结构域因具有抗原结合位点而赋予抗体对抗原的特异性。
“CDR”(互补决定区)，也称为“高变区”(HVR)，通常是指在序列上高度可变和/或形成结构限定的环的抗体可变区的每个区域。天然四链抗体通常包含六个CDR，三个在重链可变区中，分别为重链CDR1(HCDR1)、重链CDR2(HCDR2)和重链CDR3(HCDR3)，另外三个在轻链可变区中，分别为轻链CDR1(LCDR1)、轻链CDR2(LCDR2)和轻链CDR3(LCDR3)。仅重链抗体或单可变结构域通常具有三个CDR(CDR1、CDR2和CDR3)。
当前有许多方法来划分定义CDR。其中，Kabat定义基于序列可变性划分CDR，并且是最常用的(Elvin A.Kabat,et al，Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版,Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991))；而Chothia定义则基于结构环的位置(Cyrus Chothia,et al,Canonical Structures for the Hypervariable Regions of Immunoglobulins,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))。AbM定义是Kabat定义和Chothia定义之间的折衷方案，并且被Oxford Molecular的AbM抗体建模软件使用。“接触(contact)”定义CDR的基础是对可用的复合物晶体结构的分析。然而，应当注意的是，基于不同的方法划分定义获得的同一抗体可变区的CDR的边界可能有所差异，即不同方法划分定义的同一抗体可变区的CDR序列可能有所不同。因此，在涉及用本发明某些划分定义的具体CDR序列限定抗体时，所述抗体的范围还涵盖了转换为其他任意定义(例如Chothia、AbM定义等)的CDR序列限定的抗体。
术语“框架区”(FR)是除了本文定义的CDR残基之外的那些可变结构域的氨基酸残基。
术语“分离的”是指已经从其天然环境中分离的目标化合物(例如，抗体或核酸)。
如本文所用，术语“EC50”是指有效浓度，抗体的50％最大应答。如本文所用，术语“IC50”是指抑制浓度，抗体的50％最大应答。EC50和IC50两者均可以通过ELISA或FACS分析或本领域已知的任何其他方法进行测量。
术语“K
D”在用于本文时指平衡解离常数，以摩尔浓度(M)表示。抗体的K
D值可以使用本领域公知的方法测定。一种优选的测定抗体K
D的方法是使用表面等离振子共振(surface plasmon resonance)，更优选使用生物传感器系统，例如Biacore系统。
如本文所用，术语“受试者”包括任何人类或非人动物。术语“非人动物”包括所有的脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，诸如非人灵长类、绵羊、犬、锚、马、牛、鸡、两栖动物、爬行动物等。优选地，根据本发明的受试者是人。除非标明，术语“患者”或“受试者”可以互换使用。
如本文所用，“癌症”是指哺乳动物中特征通常在于不受调控的细胞生长的生理病状。未受控制的细胞分裂和生长导致形成侵入相邻组织的恶性肿瘤，并且还可通过淋巴系统或血流转移到身体的远侧部分。“癌症”或“癌症组织”可包括肿瘤。
“复发性”癌症是在对初始治疗(例如手术)产生应答后，在初始部位或远处部位再生的癌症。“局部复发性”癌症是在治疗后，在与先前治疗的癌症相同的位置出现的癌症。
“不能切除的”癌症是无法通过手术去除的。
“转移性”癌症是指从身体的一部分(例如肺部、胃部等)扩散到身体的另一部分的癌症。
术语“治疗”指试图改变治疗个体中疾病的自然进程，并且可以是为了预防或在临床病理学的过程期间实施的临床干预。治疗的期望效果包括但不限于预防疾病的发生或复发，缓解症状，降低疾病的任何直接或间接病理学后果，预防转移，减缓疾病进展率，改善或减轻疾病状态，及消退或改善的预后。
如本文所用，术语“治疗有效量”是指向受试者提供治疗性益处所必需的化合物、组合物或药物组合的量。
术语“药学上可接受的”是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”包括碱根离子与自由酸形成的盐或酸根离子与自由碱形成的盐，例如包括盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、草酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐或对甲基苯磺酸盐，优选盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、对甲基苯磺酸盐、钠盐、钾盐、铵盐、氨基酸盐等。
术语“非固定组合”指两种以上活性组分作为独立的实体(例如药物组合物、制剂)同时、并行或依序且无具体时间限制地给予受试者，其中所述给予受试者的活性成分达到治疗有效量水平。非固定组合可列举的例子是鸡尾酒疗法，例如给予3种或以上之活性组分。在非固定组合中，所述各个活性组分可以作为完全独立的药物组合物进行包装、销售或给药。
术语“固定剂量”是指不考虑患者的体重或体表面积(BSA)施用给患者的剂量。因此将固定剂量规定为药剂(例如，抗CD47抗体)的绝对量，而不是规定为例如mg/kg剂量；例如，80kg人和100kg人将接受相同剂量的抗体(例如，800mg抗CD47抗体)。与固定剂量不同的方式，还可以按照患者的体重或体表面积计算给药剂量进行给药，例如按照患者的体重以0.5mg/kg-70mg/kg的剂量给药。
术语“单剂量”是指含有一定量药品的最小包装单元，例如一盒药有七粒胶囊，则每个胶囊为单剂量；或者每瓶注射液为单剂量。在本文中，术语“单剂量”和“单位剂量”具有相同的含义，并可互换使用。
“药物组合物”是指包含活性成分和药学上可接受的载体的组合物。
氨基酸序列的“同一性百分数(％)”是指将待比对序列与本文中所示的具体氨基酸序列进行比对并且如有必要的话为达到最大序列同一性百分数而引入空位后，并且不以任何保守置换作为序列同一性的一部分时，待比对序列中与本文中所示的具体氨基酸序列的氨基酸残基相同的氨基酸残基百分数。氨基酸序列的同一性比对可以采用本领域范围内的多种方式进行，例如BLAST，BLAST-2，ALIGN或Megalign(DNASTAR)软件。本领域技术人员可决定用于比对序列的适宜参数，包括在比较序列的全长里获得最大比对需要的任何算法。
术语“Xn”和“Xaa”等同，是指未指定的氨基酸(Unspecified Amino Acid)，通过相关表述中的后续定义来指定其涵盖的范围。
术语“包括”、“含有”或“包含”及其变体应理解为“包括但不限于”，意味着除所列出的要素、组分和步骤外，还可涵盖其它未指明的要素、组分和步骤。
在本文中，除非上下文另有明确规定，否则单数术语涵盖复数指代物，反之亦然。
为了描述和公开的目的，以引用的方式将所有的专利、专利申请和其它已确定的出版物在此明确地并入本文。这些出版物仅因为它们的公开早于本申请的申请日而提供。所有关于这些文件的日期的声明或这些文件的内容的表述是基于申请者可得的信息，并且不构成任何关于这些文件的日期或这些文件的内容的正确性的承认。而且，在任何国家，在本文中对这些出版物的任何引用并不构成关于该出版物成为本领域的公知常识的一部分的认可。本发明的各个方面将在下述部分中进一步详细描述。
抗CD47抗体适合与所述酪氨酸激酶抑制剂联用治疗癌症。此外，上述联用还可以具有如下某一或某几方面的优势：
(1)在一些实验中发现，抗CD47抗体与所述酪氨酸激酶抑制剂联用可以提高单药的抗肿瘤效果，例如杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤的生长或/消除肿瘤等。特别地，例如在一些实体瘤如结直肠癌中具有良好的疗效或/和安全性。
(2)抗CD47抗体与所述酪氨酸激酶抑制剂可以提供在患者中具有良好耐受的治疗，安全性好，例如具有较少的不良反应或/和并发症。
(3)相较于单药或其他某些已知的药物或联用药物，抗CD47抗体与所述酪氨酸激酶抑制剂可以允许以 更少量(例如给药剂量或/和总给药量)的给药并获益。
本发明提供了抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂在制备治疗受试者的癌症的药物中的用途，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明提供了一种治疗受试者的癌症的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺的盐酸盐，优选二盐酸盐。
在一些实施方案中，所述癌症是实体瘤。在一些实施方案中，所述实体瘤为晚期实体瘤。
在一些实施方案中，所述癌症为原发性的、复发性或转移性的。在一些具体的实施方案中，所述癌症是复发性或/和转移性实体瘤。在一些更具体的实施方案中，所述癌症是复发性或/和转移性晚期实体瘤。
在一些实施方案中，所述实体瘤为结直肠癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为原发性结直肠癌和/或继发性结直肠癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为在先治疗失败的结直肠癌，例如，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的结直肠癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为结直肠腺癌，在一些实施方案中，所述结直肠腺癌为筛状粉刺型腺癌、髓样癌、微乳头癌、粘液腺癌、锯齿状腺癌或印戒细胞癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为RAS野生型的结直肠癌；在一些的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的RAS野生型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为BRAF野生型的结直肠癌；在一些的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的BRAF野生型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为RAS和/或BRAF野生型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为PIK3CA野生型的结直肠癌；在一些的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的PIK3CA野生型的结直肠癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为RAS突变型的结直肠癌；在一些实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的RAS突变型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为BRAF突变型的结直肠癌；在一些实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的BRAF突变型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为RAS/BRAF突变型的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为PIK3CA突变型的结直肠癌；在一些的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的PIK3CA突变型的结直肠癌。在一些典型的实施方案中，所述结直肠癌为RAS突变的晚期和/或转移性结直肠癌；在一些典型的实施方案中，所述结直肠癌为KRAS突变的晚期和/或转移性结直肠癌。在一些典型的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的RAS突变的晚期和/或转移性结直肠癌。在一些典型的实施方案中，所述结直肠癌为放疗和/或化疗和/或靶向药物治疗失败的KRAS突变的晚期和/或转移性结直肠癌。在一些典型的实施方案中，所述结直肠腺癌为RAS突变的晚期和/或转移性结直肠腺癌。
在一些实施方案中，所述的RAS突变包括但不限于KRAS和NRAS突变。在一些实施方案中，所述的RAS突变为KRAS突变。在一些实施方案中，所述的RAS突变为NRAS突变。在一些实施方案中，所述结直肠癌为喜树碱类药物、铂类药物、氟嘧啶衍生物和/或EGFR抑制剂治疗失败的KRAS突变的晚期和/或转移性结直肠癌。
在一些实施方案中，所述结直肠癌为pMMR(错配修复功能完整)或/和MSS(微卫星稳定)的结直肠癌。在一些实施方案中，所述结直肠癌为dMMR(错配修复功能缺陷)或/和MSI(微卫星不稳定)的结直肠癌。
在一些实施方案中，给予患有癌症的受试者的治疗有效量的抗CD47抗体和所述酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，按患者体重给药，所述抗CD47抗体的治疗剂量为0.5mg/kg-70mg/kg，例如0.5mg/kg-40mg/kg，15mg/kg-40mg/kg，15mg/kg-30mg/kg，25mg/kg-35mg/kg，或15mg/kg-35mg/kg。合适的剂量包括例如1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、16mg/kg、17mg/kg、18mg/kg、19mg/kg、20mg/kg、21mg/kg、22mg/kg、23mg/kg、24mg/kg、25mg/kg、26mg/kg、27mg/kg、28mg/kg、29mg/kg、30mg/kg、31mg/kg、32mg/kg、33mg/kg、34mg/kg、35mg/kg、36mg/kg、37mg/kg、38mg/kg、39mg/kg、40mg/kg、41mg/kg、42mg/kg、43mg/kg、44mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、60mg/kg、65mg/kg或70mg/kg。
在一些实施方案中，给予患有癌症的受试者治疗剂量的抗CD47抗体时，也可以以固定剂量施用，在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的固定剂量为60mg-3000mg，例如60mg-2000mg，600mg-1800mg，或1000mg-1800mg，合适的固定剂量包括例如60mg、100mg、180mg、360mg、500mg、600mg、700mg、800mg、900mg、1000mg、1100mg、1200mg、1300mg、1400mg、1500mg、1600mg、1700mg、 1800mg、1900mg、2000mg、2500mg或3000mg。
在一些实施方案中，以每3-21天，例如每3-14天，或7-14天施用一次、两次或更多次治疗剂量的抗CD47抗体。合适的给药频率例如每周两次、每周一次(q1w)、每2周一次(q2w)、或每3周一次(q3w))施用治疗剂量的抗CD47抗体。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体通常可施用介于1次至6次之间(例如，1次、2次、3次、4次、5次或6次)的治疗剂量来治疗癌症(诸如肝癌)，但可给予7次、8次、9次、10次、11次、12次、13次、14次或更多次的治疗剂量。
在一些实施方案中，给予患有癌症的受试者治疗剂量的抗CD47抗体时，以每2-6周为一个治疗周期，例如每2周(14天)、每3周(21天)、每4周(28天)、每5周(35天)或每6周(42天)一个治疗周期。
在一些实施方案中，允许通过递增剂量方式施用抗CD47抗体以达到所述的治疗剂量。
在一些实施方案中，允许在施用治疗剂量的抗CD47抗体前，施用低于治疗剂量的亚治疗剂量的所述的抗CD47抗体。
在一些实施方案中，所述酪氨酸激酶抑制剂的施用剂量为6mg-20mg，例如6mg-16mg，6mg-12mg，或8mg-12mg。所述酪氨酸激酶抑制剂的合适的施用剂量例如可以为6mg、8mg、10mg、12mg、14mg、16mg、18mg或20mg。
在一些实施方案中，所述酪氨酸激酶抑制剂可以每日施用一次或多次，优选一次。
在一些实施方案中，所述酪氨酸激酶抑制剂采用每日给药一次连续给药2周停药2周的方案。在一些实施方案中，所述酪氨酸激酶抑制剂采用每日给药一次连续给药2周停药1周。在某些特定的实施方案中，以每日一次8mg、10mg或12mg的剂量口服给药，连续用药2周，停1周的给药方式施用所述酪氨酸激酶抑制剂。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体和所述的酪氨酸激酶抑制剂同时、顺序或间隔给药。
本发明还提供了一种药物组合，其包含：
(a)抗CD47抗体，以及
(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺的盐酸盐，优选二盐酸盐。
在一些实施方案中，所述药物组合为非固定组合。非固定组合中的抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂各自呈药物组合物形式。
在一些实施方案中，所述酪氨酸激酶抑制剂以具有至少一个单剂量的药物组合物形式存在，其中单剂量为6mg-20mg，例如6mg-16mg、6mg-12mg、或8mg-12mg。所述酪氨酸激酶抑制剂的合适的单剂量包括例如为6mg、8mg、10mg、12mg、14mg、16mg、18mg或20mg。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体以适用于固定剂量给药的药物组合物形式存在。
在一些实施方案中，本发明提供了包含所述药物组合的试剂盒。所述试剂盒可以包括指导为患有癌症的受试者施用所述药物组合的说明书。所述试剂盒还可以包括从商业和用户的角度所需要的其它材料，例如可以包括其它缓冲液、稀释剂、针、注射器等。
在一些实施方案中，所述药物组合用于治疗本文上述的癌症。
在一些实施方案中，提供了用于治疗本文上述癌症的药物组合，其包含：
(a)抗CD47抗体，以及
(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，式I的化合物的药学上可接受的盐为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺的盐酸盐，优选二盐酸盐。
所述药物组合中，所述抗CD47抗体、所述酪氨酸激酶抑制剂可以采用上述用途或方法中所涉及的给药途径、给药剂量、给药时间/间隔等，在此不再赘述。
式I的化合物或其药学上可接受的盐
如本申请所用，式I的化合物的化学名为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺，其具有如下的结构式：
本申请中，凡是涉及安罗替尼，均是指式I的化合物。盐酸安罗替尼为式I化合物的盐酸盐。
式I化合物可以以它的游离碱形式给药，也可以以其盐、水合物和前药的形式给药，该前药在体内转换成式I化合物的游离碱形式。例如，式I化合物药学上可接受的盐在本申请的范围内，可按照本领域公知的方法由不同的有机酸和无机酸产生所述盐。
在一些实施方案中，以式I化合物盐酸盐的形式给药。在一些实施方案中，以式I化合物一盐酸盐的形式给药。在一些实施方案中，以式I化合物二盐酸盐的形式给药。在一些实施方案中，以式I化合物盐酸盐的晶体形式给药。在特定的实施方案中，以式I化合物二盐酸盐的晶体形式给药。
式I化合物或其药学上可接受的盐可通过多种途径给药，该途径包括但不限于选自以下的途径：口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、透颊、鼻内、吸入、阴道、眼内、局部、皮下、脂肪内、关节内、腹膜内和鞘内。在一个特定的实施方案中，通过口服给药。
本文中，除非另有说明，对于其提供的剂量和范围都是基于式I化合物游离碱形式的分子量。
抗CD47抗体
以下提供了一些示例性的适用于上述用途、方法或药物组合中的抗CD47抗体。
某些实施方案中，除了与人CD47或/和食蟹猴CD47结合外，提供的抗CD47抗体还显示了其他诸多用于靶向治疗的期望的特征。具体地，这些期望的特征例如可以是1.53E-08或更小的K
D值与CD47结合、阻断CD47与SIRPα的结合、促进巨噬细胞介导的对表达CD47细胞的吞噬作用、没有明显诱导CD4
+T细胞的凋亡、不引起实质性的红细胞减少、贫血或红细胞凝集、所述抗原结合多肽或其抗原结合部分的熔解温度TT62℃，聚合温度TaggT61℃等中的至少一个。在一些实施方案中，抗CD47抗体表现了更好的治疗效果；在一些实施方案中，抗CD47抗体表现了降低的副作用。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体是嵌合的、人源化的或人的。在一个特定的实施方案中，所述抗CD47抗体是人源化的。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。在一些实施方案中，所述抗CD47抗体是IgG4同种型。在一些实施方案中，所述抗CD47抗体是IgG4同种型且含有根据EU编号的S228P氨基酸取代。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：6所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：11所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：16所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：21所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：26所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：7所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：12所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：17所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：22所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：27所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：3所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：13所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：18所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：23所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：28所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：14所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：19所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：24所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：32所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：33、35、37、39、41、83、85或87所示可变区序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：34、36、38、40、42、84、86或88所示可变区序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：83所示可变区序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：84所示可变区序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：85所示可变区序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：86所示可变区序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：87所示可变区序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：88所示可变区序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO：33、35、37、39、41、83、85或87所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO：34、36、38、40、42、84、86或88所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO：39所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO：40所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。进一步地，在一些这种实施方案中，所述抗CD47抗体还包含包含SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的HCDR1、包含SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的HCDR2、包含SEQ ID NO：14所示氨基酸序列的HCDR3、包含SEQ ID NO：19所示氨基酸序列的LCDR1、包含SEQ ID NO：24所示氨基酸序列的LCDR2和包含SEQ ID NO：32所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO：41所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO：42所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。进一步地，在一些这种实施方案中，所述抗CD47抗体还包含包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1、包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2、包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3、包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1、包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO：83所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO：84所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。进一步地，在一些这种实施方案中，所述抗CD47抗体还包含包含SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的HCDR1、包含SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的HCDR2、包含SEQ ID NO：14所示 氨基酸序列的HCDR3、包含SEQ ID NO：19所示氨基酸序列的LCDR1、包含SEQ ID NO：24所示氨基酸序列的LCDR2和包含SEQ ID NO：32所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO：87所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO：88所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。进一步地，在一些这种实施方案中，所述抗CD47抗体还包含包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1、包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2、包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3、包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1、包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：39所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：40所示的氨基酸序列。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：41所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：42所示的氨基酸序列。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：83所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：84所示的氨基酸序列。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：87所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：88所示的氨基酸序列。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：81所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：82所示的氨基酸序列。
在一些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体的重链可变区包含SEQ ID NO：79所示的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链可变区包含SEQ ID NO：80所示的氨基酸序列。
在另一些具体的实施方案中，所述的抗CD47抗体的重链可变区和轻链可变区包含选自SEQ ID NO：33/34、35/36、37/38、43/44、45/46、47/48、49/50、51/52、53/54、55/56、57/58、59/60、61/62、63/64、65/66、67/68、69/70、71/72、73/74、75/76、77/78、85/86所示的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗CD47抗体包含重链和轻链。在一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链包含与SEQ ID NO：181所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链包含与SEQ ID NO：183所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。一个具体的方案，所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：181的重链和根据SEQ ID NO：183的轻链。在另一些实施方案中，所述抗CD47抗体的重链包含与SEQ ID NO：185所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列，所述抗CD47抗体的轻链包含与SEQ ID NO：187所示序列具有至少80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的同一性的氨基酸序列。一个具体的方案，所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：185的重链和根据SEQ ID NO：187的轻链。在其他一些实施方案中，所述抗CD47抗体还可以包含Xi2H8、Xi16E5、Xi2B2、Xi3F10、Xi14A9、hz3F10-1.1、hz3F10-2.1、hz3F10-3.1、hz3F10-4.1、hz3F10-5.1、hz3F10-6.1、hz3F10-1.2、hz3F10-2.2、hz3F10-3.2、hz3F10-4.2、hz3F10-5.2、hz3F10-6.2、hz16E5-1.1、hz16E5-1.3、hz16E5-1.2、hz16E5-3.2、hz16E5-3.1、hz16E5-3.3抗体的重链和轻链。
还提供了一些示例性的结合CD47的单克隆抗体，包括2B2、2H8、3F10、16E5和14A9抗体的嵌合版本(Xi2B2、Xi2H8、Xi3F10、Xi16E5和Xi14A9)以及3F10、16E5、14A9的人源化变体。本文提供的示例性的结合CD47的抗体的HCDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)的氨基酸序列提供于下表S1中，LCDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)的氨基酸序列提供于下表S2中，部分抗体可变区以及部分抗体全长重链、轻链的氨基酸序列提供于下表S3、S4中。
表S1：抗CD47抗体的重链CDR序列
表S2：抗CD47抗体的轻链CDR序列
表S3：部分抗CD47抗体的可变区序列
表S4：部分抗CD47抗体的全长重链和全长轻链的序列
在某些具体的实施方案中，所述抗CD47抗体为hz14A9-2.3或hz14A9-2.4。
在其他一些实施方案中，所述抗CD47抗体可以是其他已知的抗体，例如magrolimab、letaplimab、AK117、AO-176、lemzoparlimab等。
所述抗CD47抗体可以通过多种途径给药，在其中一个实施方案中，通过静脉内给药。
所述抗CD47抗体可采用本领域熟知的方法进行制备。例如在适合所述抗CD47抗体表达的条件下，培养包含编码所述抗CD47抗体的核酸的宿主细胞，从所述宿主细胞或宿主细胞培养基中回收所述抗CD47抗体。为了产生抗CD47抗体，分离编码所述抗体的核酸，并插入一个或多个载体，用于在宿主细胞中进一步克隆或/和表达。所述核酸可以采用基因克隆、基因拼接、化学合成等多种本领域所熟知的方法获取。所述回收时，可以采用离心、亲和层析等步骤进行。
本文还提供了其他一些示例性的实施例，但不限于此：
实施方案1.抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂在制备治疗受试者的癌症的药物中的用途，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐，
实施方案2.一种治疗受试者的癌症的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐，
实施方案3.一种药物组合，其包含：
(a)抗CD47抗体，以及
(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐，
实施方案4.根据实施方案1-3中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中式I的化合物的药学上可接受的盐为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺的盐酸盐，优选二盐酸盐。
实施方案5.根据实施方案1-4中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含：
(i)重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：6所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：11所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：16所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：21所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：26所示氨基酸序列的LCDR3；
(ii)重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：7所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：12所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：17所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：22所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：27所示氨基酸序列的LCDR3；
(iii)重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：3所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：13所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：18所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：23所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：28所示氨基酸序列的LCDR3；
(iv)重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：14所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：19所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：24所示氨基酸序列的LCDR2， 和包含SEQ ID NO：32所示氨基酸序列的LCDR3；或者
(v)重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3。
实施方案6.根据实施方案1-5中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含选自以下任一项的重链可变区和轻链可变区：
(a)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：33所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：34所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(b)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：35所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：36所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(c)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：37所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：38所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(d)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：39所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：40所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(e)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：41所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：42所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(f)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：83所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：84所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(g)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：85所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：86所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及
(h)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：87所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：88所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
实施方案7.根据实施方案1-6中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含选自以下任一项的重链可变区和轻链可变区：
(a)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：33所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：34所示的氨基酸序列；
(b)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：35所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：36所示的氨基酸序列；
(c)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：37所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：38所示的氨基酸序列；
(d)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：39所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：40所示的氨基酸序列；
(e)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：41所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：42所示的氨基酸序列；
(f)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：83所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：84所示的氨基酸序列；
(g)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：85所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：86所示的氨基酸序列；
(h)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：87所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：88所示的氨基酸序列；
(i)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：81所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：82所示的氨基酸序列；或者
(j)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：79所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：80所示的氨基酸序列。
实施方案8.根据实施方案1-7中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体选自以下任一项：
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：89的重链和根据SEQ ID NO：91的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：93的重链和根据SEQ ID NO：95的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：97的重链和根据SEQ ID NO：99的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：101的重链和根据SEQ ID NO：103的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：105的重链和根据SEQ ID NO：107的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：109的重链和根据SEQ ID NO：111的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：113的重链和根据SEQ ID NO：115的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：117的重链和根据SEQ ID NO：119的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：121的重链和根据SEQ ID NO：123的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：125的重链和根据SEQ ID NO：127的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：129的重链和根据SEQ ID NO：131的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：133的重链和根据SEQ ID NO：135的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：137的重链和根据SEQ ID NO：139的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：141的重链和根据SEQ ID NO：143的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：145的重链和根据SEQ ID NO：147的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：149的重链和根据SEQ ID NO：151的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：153的重链和根据SEQ ID NO：155的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：157的重链和根据SEQ ID NO：159的轻链
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：161的重链和根据SEQ ID NO：163的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：165的重链和根据SEQ ID NO：167的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：169的重链和根据SEQ ID NO：171的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：173的重链和根据SEQ ID NO：175的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：177的重链和根据SEQ ID NO：179的轻链；
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：181的重链和根据SEQ ID NO：183的轻链；或者
所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：185的重链和根据SEQ ID NO：187的轻链。
实施方案9.根据实施方案1-4中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含：
重链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3；和
轻链可变区，其包含：
包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3。
实施方案10.根据实施方案1-4、9中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含选自以下任一项的重链可变区和轻链可变区：
(a)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：87所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：88所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(b)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：87所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：88所示的氨基酸序列；
(c)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：81所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：82所示的氨基酸序列；或者
(d)所述的重链可变区包含SEQ ID NO：79所示的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含SEQ ID NO：80所示的氨基酸序列。
实施方案11.根据实施方案1-4、9-10中任一项所述的药物组合、方法或用途，其中所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：181的重链和根据SEQ ID NO：183的轻链，或者所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：185的重链和根据SEQ ID NO：187的轻链。
实施方案12.根据实施方案1-11中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。
实施方案13.根据实施方案1-12中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述癌症是原发性、复发性或转移性的。
实施方案14.根据实施方案1-13中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述癌症为实体瘤，例如结直肠癌。
实施方案15.根据实施方案1-14中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述结直肠癌为结直肠腺癌，优选地，所述结直肠腺癌为筛状粉刺型腺癌、髓样癌、微乳头癌、粘液腺癌、锯齿状腺癌或印戒细胞癌。
实施方案16.根据实施方案1-15中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述结直肠癌为包含RAS野生型、RAS突变型、BRAF野生型、BRAF突变型、PIK3CA野生型、pMMR(错配修复功能完整)、MSS(微卫星稳定)、dMMR(错配修复功能缺陷)、MSI(微卫星不稳定)中的一种或多种的结直肠癌。
实施方案17.根据实施方案1-16中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体的治疗剂量为60mg-3000mg。
实施方案18.根据实施方案1-17中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中以每3-21天施用一次治疗剂量的抗CD47抗体。
实施方案19.根据实施方案1-18中任一项所述的药物组合、用途或方法，在施用治疗剂量的抗CD47抗体前，施用亚治疗剂量的所述的抗CD47抗体。
实施方案20.根据实施方案1-19中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中通过递增剂量方式施用抗CD47抗体以达到治疗剂量。
实施方案21.根据实施方案1-20中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体通过静脉内施用或/和所述酪氨酸激酶抑制剂通过口服施用。
实施方案22.根据实施方案1-21中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂的施用剂量为6mg-20mg。
实施方案23.根据实施方案1-22中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体和所述的酪氨酸激酶抑制剂各自呈药物组合物的形式。
实施方案24.根据实施方案1-23中任一项所述的药物组合、用途或方法，所述抗CD47抗体和所述的酪氨酸激酶抑制剂同时、顺序或间隔给药。
实施方案25.根据实施方案3-24中任一项所述的药物组合，其中所述药物组合是非固定组合。
实施方案26.根据实施方案3-25中任一项所述的药物组合，其中所述酪氨酸激酶抑制剂以具有至少一个单剂量为6mg-20mg的药物组合物形式存在。
实施方案27.包含实施方案3-26中任一项所述的药物组合的试剂盒。
实施例1：抗CD47单克隆抗体的产生
使用CD47蛋白对小鼠的免疫并获取抗体可变区序列：
为了产生针对CD47的抗体，使用等体积的弗氏完全佐剂(初次免疫)或弗氏不完全佐剂(加强免疫)乳化的重组体hCD47-His Tag蛋白(ACRObiosystems，目录号：CD7-H5227)(50μg/小鼠Balb/c)或hCD47-mFc(ACRObiosystems，目录号：CD7-H52A5)每2周皮下免疫Balb/c小鼠，免疫三次持续6周。第四次免疫采用hCD47-mFc(ACRObiosystems，目录号：CD7-H52A5)蛋白，20μg/只小鼠，肌肉注射(水相佐剂)。细胞融合前三天，通过静脉内注射不含佐剂的抗原来加强小鼠免疫。使用聚乙二醇1500(Polyethylene Glycol 1500；Roche公司，目录号：10783641001)将来自免疫小鼠的脾细胞(1×10
8)与SP2/0骨髓瘤细胞(1.5×10
7)融合。
对杂交瘤细胞进行筛选及克隆化。克隆化的杂交瘤细胞保种并用于cDNA的提取，获取抗体可变区序列。
从对应的杂交瘤克隆(2B2、2H8、3F10、16E5、14A9)扩增、测序得到五个鼠源单克隆抗体(2B2、2H8、3F10、16E5、14A9抗体)的重链可变区(VH)序列和轻链可变区(VL)序列，序列信息如下：
嵌合抗体的构建和表达：
通过将小鼠抗体可变区的基因进行化学合成，将每种小鼠抗体的VL区分别连接到人κ链恒定区构建嵌合轻链，将小鼠VH区连接到人IgG4(EU编号S228P)恒定区构建嵌合重链。通过常规基因工程手段分别构建嵌合轻链的表达质粒和嵌合重链的表达质粒，将CHO细胞(200mL体系，在10
6个细胞/mL下)用100μg的每种嵌合重链表达质粒和嵌合轻链表达质粒进行转染并且将其培养6天。然后用蛋白A柱纯化上清液中的嵌合抗体。
构建并表达得到五种嵌合抗体，其嵌合重链和嵌合轻链的全长序列及其编码核酸如下：Xi2H8(嵌合重链及其编码核酸：SEQ ID NOs：89～90；嵌合轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs：91～92)、Xi2B2(嵌合重链及其编码核酸：SEQ ID NOs：97～98；嵌合轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs：99～100)、Xi3F10((嵌合重链及其编码核酸：SEQ ID NOs：101～102；嵌合轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs：103～104))、Xi16E5(嵌合重链及其编码核酸：SEQ ID NOs：93～94；嵌合轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs：95～96)、Xi14A9(嵌合重链及其编码核酸：SEQ ID NOs：105～106；嵌合轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs：107～108)。
抗体人源化设计：
3F10、14A9和16E5的人鼠嵌合抗体使用CDR移植方法进行人源化(参见，例如，美国专利号5,225,539)。
人源化3F10、14A9和16E5抗体的序列及其编码核酸如下：hz3F10-1.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.109～110；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.111～112)、hz3F10-2.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.113～114；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.115～116)、hz3F10-3.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.117～118；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.119～120)、hz3F10-4.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.121～122；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.123～124)、hz3F10-5.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.125～126；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.127～128)、hz3F10-6.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.129～130；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.131～132)、hz3F10-1.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.133～134；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.135～136)、hz3F10-2.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.137～138；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.139～140)、hz3F10-3.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.141～142；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.143～144)、hz3F10-4.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.145～146；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.147～148)、hz3F10-5.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.149～150；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.151～152)、hz3F10-6.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.153～154；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.155～156)、hz16E5-1.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.157～158；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.159～160)、hz16E5-1.3(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.161～162；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.163～164)、hz16E5-1.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.165～166；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.167～168)、hz16E5-3.2(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.169～170；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.171～172)、hz16E5-3.1(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.173～174；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.175～176)、hz16E5-3.3(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.177～178；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.179～180)、hz14A9-2.3(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.181～182；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.183～184)、hz14A9-2.4(重链及其编码核酸：SEQ ID NOs.185～186；轻链及其编码核酸：SEQ ID NOs.187～188)。
人源化3F10、14A9和16E5抗体的构建和表达：
合成编码人源化3F10、14A9和16E5抗体全长轻链和全长重链的DNA并且将所述DNA克隆到表达载体(包括例如CN107001463A披露的pcDNA3.1载体、CN109422811A披露的pCHO1.0载体等)。将CHO细胞(200ml体系，在10
6个细胞/ml下)用100μg的每种人源化抗体重链表达质粒和轻链表达质粒进行转染并且将其用ExpiCHO培养基(Gibco；货号：A29100-01)在37℃、5％CO
2的培养箱中培养6天。离心分离得到上清液后，然后用蛋白A柱纯化上清液中的人源化抗体。
实施例2：抗CD47抗体的基于Biacore的亲和力分析
通过Biacore分别测量人CD47蛋白(Human CD47Protein,His Tag；ACRObiosystems公司，目录号：CD7-H5227)和食蟹猴CD47蛋白(Cynomolgus/Rhesus macaque CD47Protein,His Tag；ACRObiosystems公司，目录号：CD7-C52H1)与抗CD47抗体(嵌合的或人源化的)之间的结合动力学，获得平衡解离常数K
D(单位M)；所述Biacore分析在25℃下进行并且以1Hz的数据收集速率进行记录。
将多克隆兔抗小鼠IgG(GE，BR-1008-38)用10mM pH 5.0的乙酸钠进行稀释，并且使用胺偶联试剂盒(GE，BR10050)固定到CM5生物传感器芯片的参考流动池和实验流动池上达到约15000RΜ。在每个循环的开始，将稀释的测试抗体(1.5μg/mL)注射在实验流动池上，持续1分钟以被捕获。这些数据表明，如通过Biacore测量的，抗CD47抗体(嵌合的和人源化的)结合CD47。
表1：抗CD47嵌合抗体与人CD47和食蟹猴CD47的结合亲和力
表2：抗CD47人源化抗体与人CD47和食蟹猴CD47的结合亲和力
实施例3：抗CD47抗体基于促使巨噬细胞吞噬作用的分析
基于流式细胞术测定抗CD47抗体促使细胞表面含有SIRPα的巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的能力。
使用单核细胞分离试剂盒(STEMCELL，目录号：19058)从人的外周血单个核细胞(PBMC，赛笠生物，目录号：190056)中分离出单核细胞，铺入24孔板(Greiner bio-one，目录号：662-160)中，每孔5×10
5个细胞，并在100ng/mL刺激因子M-CSF(R&D Systems公司，目录号：216-MC-010)的环境诱导7天，从而诱导成巨噬细胞。将1×10
6个靶细胞HL60(上海细胞所，目录号：TCHu23)悬浮于5μmol/L CFSE(BD公司，目录号：565082)荧光染料(荧光染料用PBS缓冲液稀释到所需浓度)中，37℃水浴锅避光孵育15min，PBS缓冲液洗涤细胞，制备成CFSE标记的HL60细胞；将CFSE标记的HL60细胞分别与10μg/mL、1μg/mL抗CD47抗体(嵌合的抗体见表3，人源化的抗体见表4)于37℃、5％CO
2培养箱中孵育1-2h。PBS缓冲液洗涤三次孵育后的HL60细胞，加入到巨噬细胞中，37℃、5％CO
2培养箱中作用2-4h，PBS缓冲液洗涤三次后，每孔加入260μl PBS、20μl抗APC-CD14(APC Mouse Anti-Human CD14，BD公司，目录号：555399)和20μl PE-CD11b(PE Mouse Anti-Human CD11b/Mac-1，BD公司，目录号：555388)抗体的混合液，4℃避光孵育30min，PBS缓冲液洗涤三次，胰酶(Gibco，目录号：12604-013)消化下来用流式细胞仪(BD公司，型号规格：C6)检测巨噬细胞的吞噬率(％)。
抗CD47嵌合抗体和抗CD47人源化抗体对巨噬细胞吞噬作用的影响参见表3和表4，其中嵌合抗体Xi3F10、Xi16E5、Xi14A9以及抗CD47人源化抗体具有良好的促吞噬作用，人源化抗体hz14A9-2.3、hz14A9-2.4表现更优异。
表3：抗CD47嵌合抗体基于促使巨噬细胞吞噬作用的分析(吞噬率，％)
| 抗体名称 | 10μg/mL | 1μg/mL |
| Xi2B2 | 4.1 | 7.3 |
| Xi2H8 | 3.5 | 7.1 |
| Xi3F10 | 59.8 | 65.7 |
| Xi16E5 | 28.8 | 11.5 |
| Xi14A9 | 44.67 | 54.17 |
表4：抗CD47人源化抗体基于促使巨噬细胞吞噬作用的分析(吞噬率，％)
| 抗体名称 | 10μg/mL | 1μg/mL | 抗体名称 | 10μg/mL | 1μg/mL |
| hz3F10-1.1 | 43.10 | 41.25 | hz3F10-6.2 | 44.19 | 49.32 |
| hz3F10-2.1 | 55.23 | 47.24 | hz16E5-1.1 | 4.02 | 14.79 |
| hz3F10-3.1 | 58.72 | 50.60 | hz16E5-3.1 | 24.19 | 6.37 |
| hz3F10-4.1 | 58.26 | 50.26 | hz16E5-1.2 | 17.83 | 5.1 |
| hz3F10-5.1 | 58.46 | 50.45 | hz16E5-3.2 | 2.03 | 3.02 |
| hz3F10-6.1 | 60.91 | 47.57 | hz16E5-1.3 | 4.33 | 3.03 |
| hz3F10-1.2 | 38.86 | 55.52 | hz16E5-3.3 | 4.7 | 11.62 |
| hz3F10-2.2 | 34.72 | 44.19 | hz14A9-2.3 | 74.93 | 71.48 |
| hz3F10-3.2 | 37.09 | 47.04 | hz14A9-2.4 | 81.66 | 81.65 |
| hz3F10-4.2 | 31.67 | 46.24 | Hu5F9 | 72.35 | 67.5 |
| hz3F10-5.2 | 29.6 | 47.06 |
实施例4：基于nano DSF检测抗CD47抗体的热稳定性
高通量蛋白稳定性分析仪Prometheus NT.48是得到蛋白分子结构稳定性、聚集稳定性、胶体分散稳定性等多种类型数据的设备。利用该设备检测抗CD47嵌合抗体以及抗CD47人源化抗体的熔解温度(Tm)和聚合温度(Tagg)，结果见表5和表6，表明抗CD47抗体具有良好的热稳定性。
表5：抗CD47嵌合抗体热稳定性
| 抗体名称 | Tm(℃) | Tagg(℃) |
| Xi2B2 | 62.99 | 61.34 |
| Xi2H8 | 69.77 | 68.57 |
| Xi3F10 | 70.51 | 70.59 |
| Xi16E5 | 69.89 | 73.39 |
| Xi14A9 | 66.73 | 75.75 |
表6：抗CD47人源化抗体热稳定性
| 抗体名称 | Tm(℃) | Tagg(℃) | 抗体名称 | Tm(℃) | Tagg(℃) |
| hz3F10-1.1 | 68.44 | 72.68 | hz14A9-2.4 | 68.3 | 68.3 |
| hz3F10-2.1 | 68.44 | 72.68 | hz3F10-4.2 | 68.48 | 61.13 |
| hz3F10-3.1 | 68.15 | 61.53 | hz3F10-5.2 | 68.69 | 62.67 |
| hz3F10-4.1 | 68.35 | 62.54 | hz3F10-6.2 | 68.64 | 61.91 |
| hz3F10-5.1 | 68.05 | 62.12 | hz16E5-1.1 | 68.21 | 61.87 |
| hz3F10-6.1 | 68.6 | 68.6 | hz16E5-3.1 | 69.20 | 61.84 |
| hz3F10-1.2 | 68.71 | 61.92 | hz16E5-1.2 | 69.54 | 61.90 |
| hz3F10-2.2 | 68.92 | 62.40 | hz16E5-3.2 | 69.10 | 61.44 |
| hz3F10-3.2 | 68.30 | 61.80 | hz16E5-1.3 | 68.90 | 73.77 |
| hz14A9-2.3 | 68.10 | 73.42 | hz16E5-3.3 | 68.72 | 73.81 |
实施例5抗CD47抗体在淋巴瘤Raji细胞小鼠血液瘤模型中的药效活性
使用血液瘤Raji细胞建立小鼠血液瘤模型，并在该模型上应用抗CD47抗体，评价该抗体的药效活性。
PBS缓冲液配制的Raji细胞悬液浓度5×10
6个/mL，0.1mL/每只小鼠通过尾静脉注射到雌性NOD/SCID小鼠中。7天后随机分成4组，每组10只，其中，组1：IgG4组，组2：Hu5F9组，组3：hz3F10-6.1，组4：hz14A9-2.3，腹腔注射给药，给药剂量为10mg/kg，连续给药21天。观察动物生存期。
如图1，在Raji血液瘤模型中，抗CD47抗体hz14A9-2.3和hz3F10-6.1具有抗肿瘤活性。小鼠的生存率数据显示：IgG4组第17天全组动物死亡，中位生存期为13.5天；Hu5F9组第30天全组动物死亡，中位生存期为18.5天；hz14A9-2.3组第34天全组动物死亡，中位生存期为28.5天；hz3F10-6.1组第21天全组动物死亡，中位生存期为17.5天。这些数据表明抗体hz14A9-2.3在延长动物生存期方面的药效优于其他组别，抗体hz3F10-6.1和Hu5F9的效果基本持平。
实施例6抗CD47抗体单次给药的毒性检测
由于CD47在红细胞上表达并在清除老化红细胞方面发挥作用，因此对抗CD47抗体在B-hCD47小鼠中的毒性作用进行比较。
将B-hCD47小鼠随机分成3组：Hu5F9组3只，hz14A9-2.3组4只、hz3F10-6.1组3只。通过单次尾静脉注射给予B-hCD47小鼠一定剂量的Hu5F9抗体、hz14A9-2.3抗体或hz3F10-6.1抗体，给药剂量为10mg/kg，检测给药后2天、4天、7天、10天、14天红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)量、体重的变化。
表7：给药后小鼠体重变化率(vs给药前)
| 给药后天数 | Hu5F9 10mpk | hz14A9-2.3 10mpk | hz3F10-6.1 10mpk |
| 0 | 0.0％ | 0.0％ | 0.0％ |
| 2 | -7.0％ | 2.3％ | -13.0％ |
| 4 | -3.2％ | 6.3％ | -15.8％ |
| 7 | -5.1％ | 2.0％ | -2.5％ |
| 10 | 4.8％ | 5.9％ | -8.4％ |
| 14 | 5.6％ | 8.6％ | 8.2％ |
表8：给药后小鼠RBC变化率(vs给药前)
| 给药后天数 | Hu5F9 10mpk | hz14A9-2.3 10mpk | hz3F10-6.1 10mpk |
| 0 | 0.0％ | 0.0％ | 0.0％ |
| 2 | -52.8％ | -13.6％ | -56.7％ |
| 4 | -61.8％ | -16.7％ | -75.6％ |
| 7 | -22.2％ | -9.8％ | -38.7％ |
| 10 | -21.6％ | -8.5％ | -6.6％ |
| 14 | -7.4％ | -2.2％ | -2.0％ |
表9：给药后小鼠HGB变化率(vs给药前)
| 给药后天数 | Hu5F9 10mpk | hz14A9-2.3 10mpk | hz3F10-6.1 10mpk |
| 0 | 0.0％ | 0.0％ | 0.0％ |
| 2 | -52.7％ | -13.3％ | -57.1％ |
| 4 | -57.8％ | -18.5％ | -74.7％ |
| 7 | -16.5％ | -9.9％ | -39.2％ |
| 10 | -12.8％ | -10.0％ | -6.0％ |
| 14 | -1.2％ | -3.9％ | -3.0％ |
如表7、图2和图3所示，只有hz14A9-2.3组小鼠体重是持续增加的，Hu5F9和hz3F10-6.1两组小鼠在给药后体重先下降，后上升；hz3F10-6.1组下降幅度高于Hu5F9组。如表8-表9、图4-图7所示，给药后三组动物的RBC和HGB均出现下降，给药后4天达最低，随后开始上升。hz14A9-2.3组给药后7天RBC和HGB基本恢复正常，另外两组至少于给药后10天基本恢复正常。给药后4天RBC和HGB的下降幅度，由高到低依次为：hz3F10-6.1＞Hu5F9＞hz14A9-2.3。可知，抗体hz14A9-2.3没有显著的毒性，优于阳性抗体Hu5F9。
实施例7hz14A9-2.3、盐酸安罗替尼单用或二者联用对人结直肠癌DiFi小鼠皮下移植瘤的疗效
实验动物为NOD-SCID小鼠，5周，♀，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。生产许可证号：SCXK(京)2019-0008；动物合格证号110322211100393952。饲养环境：SPF级。人结直肠癌DiFi细胞来自药明康德生物技术有限公司赠送。DiFi细胞于37℃、含5％CO
2的空气培养箱中培养。一周2次传代，当细胞呈指数生长期时，胰酶消化，收集细胞，计数，接种。每只小鼠皮下接种8×10
6DiFi小鼠细胞，待肿瘤长到100-150mm
3，分组，静脉注射(IV)药物，每周2次(BIW)，共4次；或灌胃给药(i.g.)，每天1次(QD)，共21次，给药体积0.1mL/10g体重；给药剂量和给药方案见表10。
实验指标为考察药物对肿瘤生长的影响，具体指标为T/C％或肿瘤生长抑制率(TGI％，抑瘤率)。
每周二次用游标卡尺测量肿瘤直径，肿瘤体积(V)计算公式为：
V＝1/2×a×b
2，其中a、b分别表示长、宽。
T/C(％)＝(T-T
0)/(C-C
0)×100，其中T、C分别为测试组和对照组动物实验结束时的肿瘤体积；T
0、C
0分别为测试组和对照组动物实验开始时的肿瘤体积。
肿瘤生长抑制率％(TGI％)＝100-T/C(％)。
当肿瘤出现消退时，肿瘤生长抑制率％(TGI％)＝100-(T-T
0)/T
0×100
如果肿瘤比起始体积缩小，即T<T
0或C<C
0时，即定义为肿瘤部分消退(PR)；如果肿瘤完全消失，即定义为肿瘤完全消退(CR)。
实验结束(D20)，CO
2麻醉处死动物，随后解剖取瘤并拍照。
表10:hz14A9-2.3、盐酸安罗替尼单用或二者联用对人结直肠癌DiFi小鼠皮下移植瘤的疗效
注：随机分组，第一次给药时间为D0；BIW：每周2次；IV：静脉注射；i.g.：灌胃给药；QD：每天1次。
结果如表10、图8-9，抗CD47抗体hz14A9-2.3(1.5mg/kg，IV，BIW×2)对人结直肠癌DiFi小鼠皮下移植瘤生长有抑制作用，抑瘤率为55％；盐酸安罗替尼(1mg/kg，i.g.，QD×21)对DiFi小鼠皮下移植瘤的抑瘤率为74％；hz14A9-2.3(1.5mg/kg，IV，BIW×2)与盐酸安罗替尼(1mg/kg，i.g.，QD×21)联用对DiFi小鼠皮下移植瘤的抑瘤率提高到96％，显著强于单药疗效(P<0.01)；hIgG4组小鼠体重最大下降10.3％(D20))，说明肿瘤模型对小鼠有伤害作用；hz14A9-2.3、盐酸安罗替尼组小鼠体重最大下降分别为2.2％(D20)和5.1％(D20)，hz14A9-2.3+安罗替尼联用组小鼠体重最大下降3.1％(D20),说明以上药物可以改善小鼠的一般状态，可能是通过抑制小鼠肿瘤生长所致。
实施例8抗CD47抗体单药或联合用药在晚期恶性肿瘤患者中的I期临床试验
主要目的：评估抗CD47抗体单药(Ia阶段)或联合用药(Ib阶段)在晚期恶性肿瘤患者中的安全性和耐受性，确定剂量限制性毒性(DLT)、最大耐受剂量(MTD)(如有)或最佳生物剂量(OBD)以及II期推荐剂量(RP2D)。
次要目的：评估抗CD47抗体单独使用或联合使用时抗CD47抗体在晚期恶性肿瘤患者中的药代动力学(PK)特征；评估抗CD47抗体单药或联合用药治疗晚期恶性肿瘤的初步有效性；评估抗CD47抗体的免疫原性；评估抗CD47抗体单独使用或联合使用时的药效动力学(PD)特征。
主要入组标准：
1. 18岁≤年龄≤75岁(以签署知情同意书日期计算)；男女不限；ECOG评分0～1分；预计生存期T3个月。
2.恶性实体肿瘤需满足：a.经组织学或细胞学明确诊断的恶性实体肿瘤。b.符合RECIST1.1定义的疾病进展/复发。c.标准治疗失败或无标准治疗方法。
试验设计及给药方案：
本研究采用开放、剂量递增试验设计，分Ia单药剂量递增和Ib联合剂量递增两个阶段。
Ia单药剂量递增阶段，符合标准的患者按照入组顺序依次分配到5个抗CD47抗体剂量组(60mg、180mg、600mg、1200mg和1800mg)。每位入组的患者，接受目标剂量抗CD47抗体治疗，暂定每周静脉输注一次，每4周(28天)一个治疗周期，最长治疗时间不超过2年。
Ib联合剂量递增阶段，选择Ia单药剂量递增阶段确定的MTD或OBD或RP2D剂量或给药方案，分不同适应症队列进行联合用药的剂量递增。其中，抗CD47抗体与盐酸安罗替尼联合治疗的队列纳入复发性/转移性晚期实体瘤患者，安罗替尼(10/12mg,QD,d1-14/q3w)方案治疗采用的安罗替尼胶囊为口服胶囊剂，规格为8mg、10mg和12mg(按C
23H
22FN
3O
3计)，由正大天晴药业集团股份有限公司生产和提供。
Ib联合剂量递增阶段的入选/排除标准、给药方案和研究流程，会根据Ia单药剂量递增阶段的结果和经验，对方案及时修订。
有效性及安全性评价按标准进行。
本研究使用的抗CD47抗体为hz14A9-2.3注射液，为静脉给药的无菌注射液，由正大天晴药业南京顺欣制药有限公司生产和提供。本研究还涉及抗CD47抗体与其他治疗剂的联用评估，在此不展开描述。
Claims (15)
- 抗CD47抗体和酪氨酸激酶抑制剂在制备治疗受试者的癌症的药物中的用途，其中所述酪氨酸激酶抑制剂为式I的化合物或其药学上可接受的盐，
- 一种药物组合，其包含：(a)抗CD47抗体，以及(b)酪氨酸激酶抑制剂，其中所述酪氨酸激酶抑制剂是式I的化合物或其药学上可接受的盐，
- 根据权利要求1-2中任一项所述的药物组合或用途，其中式I的化合物的药学上可接受的盐为1-[[[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基-6-甲氧基喹啉-7-基]氧基]甲基]环丙胺的盐酸盐，优选二盐酸盐。
- 根据权利要求1-3中任一项所述的药物组合或用途，其中所述抗CD47抗体包含：(i)重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的HCDR3；和轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：25所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的LCDR3；(ii)重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：6所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：11所示氨基酸序列的HCDR3；和轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：16所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：21所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：26所示氨基酸序列的LCDR3；(iii)重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：7所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：12所示氨基酸序列的HCDR3；和轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：17所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO： 22所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：27所示氨基酸序列的LCDR3；(iv)重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：3所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：13所示氨基酸序列的HCDR3；和轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：18所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：23所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：28所示氨基酸序列的LCDR3；或者(v)重链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的HCDR1，包含SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的HCDR2，和包含SEQ ID NO：14所示氨基酸序列的HCDR3；和轻链可变区，其包含：包含SEQ ID NO：19所示氨基酸序列的LCDR1，包含SEQ ID NO：24所示氨基酸序列的LCDR2，和包含SEQ ID NO：32所示氨基酸序列的LCDR3。
- 根据权利要求1-4中任一项所述的药物组合或用途，其中所述抗CD47抗体包含选自以下任一项的重链可变区和轻链可变区：(a)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：87所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：88所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(b)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：33所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：34所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(c)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：35所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：36所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(d)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：37所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：38所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(e)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：39所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：40所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(f)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：41所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：42所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；(g)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：83所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：84所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及(h)所述的重链可变区包含与SEQ ID NO：85所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的轻链可变区包含与SEQ ID NO：86所示序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
- 根据权利要求1-5中任一项所述的药物组合或用途，其中所述抗CD47抗体选自以下任一项：所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：181的重链和根据SEQ ID NO：183的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：89的重链和根据SEQ ID NO：91的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：93的重链和根据SEQ ID NO：95的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：97的重链和根据SEQ ID NO：99的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：101的重链和根据SEQ ID NO：103的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：105的重链和根据SEQ ID NO：107的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：109的重链和根据SEQ ID NO：111的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：113的重链和根据SEQ ID NO：115的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：117的重链和根据SEQ ID NO：119的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：121的重链和根据SEQ ID NO：123的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：125的重链和根据SEQ ID NO：127的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：129的重链和根据SEQ ID NO：131的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：133的重链和根据SEQ ID NO：135的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：137的重链和根据SEQ ID NO：139的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：141的重链和根据SEQ ID NO：143的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：145的重链和根据SEQ ID NO：147的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：149的重链和根据SEQ ID NO：151的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：153的重链和根据SEQ ID NO：155的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：157的重链和根据SEQ ID NO：159的轻链所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：161的重链和根据SEQ ID NO：163的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：165的重链和根据SEQ ID NO：167的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：169的重链和根据SEQ ID NO：171的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：173的重链和根据SEQ ID NO：175的轻链；所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：177的重链和根据SEQ ID NO：179的轻链；或者所述抗CD47抗体包含根据SEQ ID NO：185的重链和根据SEQ ID NO：187的轻链。
- 根据权利要求1-6中任一项所述的药物组合或用途，其中所述抗CD47抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。
- 根据权利要求1-7中任一项所述的药物组合或用途，其中所述癌症是原发性、复发性或转移性的。
- 根据权利要求1-8中任一项所述的药物组合或用途，其中所述癌症为实体瘤；优选地，所述结直肠癌为结直肠腺癌，优选地，所述结直肠腺癌为筛状粉刺型腺癌、髓样癌、微乳头癌、粘液腺癌、锯齿状腺癌或印戒细胞癌；优选地，所述结直肠癌为包含RAS野生型、RAS突变型、BRAF野生型、BRAF突变型、PIK3CA野生型、pMMR(错配修复功能完整)、MSS(微卫星稳定)、dMMR(错配修复功能缺陷)、MSI(微卫星不稳定)中的一种或多种的结直肠癌。
- 根据权利要求1-9中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体的治疗剂量为60mg-3000mg。
- 根据权利要求1-10中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述抗CD47抗体通过静脉内施用或/和所述酪氨酸激酶抑制剂通过口服施用。
- 根据权利要求1-11中任一项所述的药物组合、用途或方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂的施用剂量为6mg-20mg。
- 根据权利要求2-12中任一项所述的药物组合，其中所述药物组合是非固定组合。
- 根据权利要求2-13中任一项所述的药物组合，其中所述酪氨酸激酶抑制剂以具有至少一个单剂量为6mg-20mg的药物组合物形式存在。
- 包含权利要求2-14中任一项所述的药物组合的试剂盒。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111162846 | 2021-09-30 | ||
| CN202111162846.1 | 2021-09-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2023051669A1 true WO2023051669A1 (zh) | 2023-04-06 |
Family
ID=85781335
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/CN2022/122474 WO2023051669A1 (zh) | 2021-09-30 | 2022-09-29 | 喹啉衍生物与抗cd47抗体的药物组合 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| WO (1) | WO2023051669A1 (zh) |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050249730A1 (en) * | 2002-01-18 | 2005-11-10 | Pierre Fabre Medicament | Novel anti-IGF-IR and/or anti-insulin/IGF-I hybrid receptors antibodies and uses thereof |
| CN101535295A (zh) * | 2006-10-12 | 2009-09-16 | 休普基因公司 | 用于调节dna甲基化的喹啉衍生物 |
| US20110293511A1 (en) * | 2009-09-29 | 2011-12-01 | Terrance Grant Johns | Specific binding proteins and uses thereof |
| CN108697794A (zh) * | 2015-12-17 | 2018-10-23 | 诺华股份有限公司 | C-met抑制剂和抗pd-1抗体分子的组合及其用途 |
| CN110256583A (zh) * | 2019-07-11 | 2019-09-20 | 中国科学院生物物理研究所 | 一种il-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用 |
| CN110431152A (zh) * | 2017-03-03 | 2019-11-08 | 雷纳神经科学公司 | 抗gitr抗体及其使用方法 |
| CN112048019A (zh) * | 2019-06-06 | 2020-12-08 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 抗人cd47单克隆抗体 |
| CN112513070A (zh) * | 2018-02-28 | 2021-03-16 | 辉瑞公司 | Il-15变体及其用途 |
| CN112915203A (zh) * | 2019-12-06 | 2021-06-08 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 喹啉衍生物与pd-1单抗的药物组合 |
| CN112915202A (zh) * | 2019-12-06 | 2021-06-08 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 喹啉衍生物与pd-1单抗的药物组合 |
-
2022
- 2022-09-29 WO PCT/CN2022/122474 patent/WO2023051669A1/zh unknown
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050249730A1 (en) * | 2002-01-18 | 2005-11-10 | Pierre Fabre Medicament | Novel anti-IGF-IR and/or anti-insulin/IGF-I hybrid receptors antibodies and uses thereof |
| CN101535295A (zh) * | 2006-10-12 | 2009-09-16 | 休普基因公司 | 用于调节dna甲基化的喹啉衍生物 |
| US20110293511A1 (en) * | 2009-09-29 | 2011-12-01 | Terrance Grant Johns | Specific binding proteins and uses thereof |
| CN108697794A (zh) * | 2015-12-17 | 2018-10-23 | 诺华股份有限公司 | C-met抑制剂和抗pd-1抗体分子的组合及其用途 |
| CN110431152A (zh) * | 2017-03-03 | 2019-11-08 | 雷纳神经科学公司 | 抗gitr抗体及其使用方法 |
| CN112513070A (zh) * | 2018-02-28 | 2021-03-16 | 辉瑞公司 | Il-15变体及其用途 |
| CN112048019A (zh) * | 2019-06-06 | 2020-12-08 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 抗人cd47单克隆抗体 |
| CN110256583A (zh) * | 2019-07-11 | 2019-09-20 | 中国科学院生物物理研究所 | 一种il-2突变体与抗体的融合蛋白及其应用 |
| CN112915203A (zh) * | 2019-12-06 | 2021-06-08 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 喹啉衍生物与pd-1单抗的药物组合 |
| CN112915202A (zh) * | 2019-12-06 | 2021-06-08 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 喹啉衍生物与pd-1单抗的药物组合 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11566069B2 (en) | Treatment of disease responsive to modulation of cannabanoid 1(CB1) receptor signaling | |
| US20230159634A1 (en) | Antibodies that bind human cannabinoid 1 (cb1) receptor | |
| EP3685855B1 (en) | Human anti-vegfr-2/kdr antibodies | |
| WO2021115303A1 (zh) | 一种抗Claudin18.2单克隆抗体、其制备方法及用途 | |
| TW201902514A (zh) | Ｐｄ－１抗體與ｖｅｇｆ配體或ｖｅｇｆ受體抑制劑聯合在製備治療腫瘤的藥物中的用途 | |
| WO2019076277A1 (zh) | 抗pd-1抗体和抗lag-3抗体联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途 | |
| CN112168961A (zh) | 治疗结直肠癌的联用药物组合物 | |
| WO2021099418A1 (en) | Anti-cd117 antibodies and methods of use thereof | |
| WO2023051669A1 (zh) | 喹啉衍生物与抗cd47抗体的药物组合 | |
| US11633475B2 (en) | Human anti-VEGFR-2/KDR antibodies | |
| WO2023051674A1 (zh) | 联合治疗血液肿瘤的抗cd47抗体 | |
| EP3280732B1 (en) | Antibodies binding to canine vascular endothelial growth factor and uses thereof in treating canine angiogenesis-related diseases | |
| EP4180457A1 (en) | Anti-cldn-18.2 antibody and use thereof | |
| WO2023143444A1 (zh) | 抗dkk1抗体、其药物组合物及用途 | |
| WO2023025303A1 (zh) | 抗cldn-18.2抗体药物偶联物及其用途 | |
| WO2023098785A1 (zh) | 抗4-1bb抗体及其用途 | |
| WO2023045859A1 (zh) | Cd38单克隆抗体及其应用 | |
| CN118055947A (zh) | 联合治疗血液肿瘤的抗cd47抗体 | |
| WO2023160517A1 (zh) | 包含抗ctla4和抗pd1的混合抗体的药物组合物及其治疗用途 | |
| CN117510641A (zh) | 靶向cd112r和tigit的双特异性抗体及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 22875052 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |