WO2023012295A1 - Composition biostimulante a base de monopotassium phosphate sous forme acide - Google Patents

Composition biostimulante a base de monopotassium phosphate sous forme acide Download PDF

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WO2023012295A1
WO2023012295A1 PCT/EP2022/071994 EP2022071994W WO2023012295A1 WO 2023012295 A1 WO2023012295 A1 WO 2023012295A1 EP 2022071994 W EP2022071994 W EP 2022071994W WO 2023012295 A1 WO2023012295 A1 WO 2023012295A1
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composition according
plant
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PCT/EP2022/071994
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Fabrice LEMARCHAND-GASNAULT
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Vivagro
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    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C05G5/00—Fertilisers characterised by their form
    • C05G5/20—Liquid fertilisers
    • C05G5/23—Solutions

Definitions

  • the invention relates to the use as a biostimulant and / or elicitor product and / or nutritive product and / or to fight against pathogens of a composition comprising a mixture of phosphoric acid and dihydrogen phosphate in aqueous and acid form, and a method of treating cultures.
  • Nitrogen, phosphorus and potassium are the three main nutrients necessary for the growth of plants, in particular the growth of leaves, green stems and fruits. Plants also need secondary elements such as magnesium, calcium as well as trace elements (copper, zinc, manganese for example).
  • Soils naturally contain all of these elements necessary for the growth of plants. However, they are generally not present in the soil in sufficient quantities or in forms to support optimum growth and obtain optimum plant yield.
  • fertilizers are more or less complex and can include major fertilizing elements that require a large amount of input for the plant (Nitrogen, Phosphorus, Potassium), secondary elements (magnesium, calcium) or trace elements such as copper , iron, manganese, zinc, cobalt, molybdenum (typically as molybdate) and boron (typically as borate).
  • major fertilizing elements that require a large amount of input for the plant (Nitrogen, Phosphorus, Potassium)
  • secondary elements magnesium, calcium
  • trace elements such as copper , iron, manganese, zinc, cobalt, molybdenum (typically as molybdate) and boron (typically as borate).
  • Phosphorus (P) is a major element useful to the plant for optimal growth. It is present in different forms among which we can cite phosphates, phosphites or phosphonates. Phosphates are considered fertilizers because they provide a nutrient supply of phosphorus that can be assimilated by the plant.
  • Products based on phosphite or phosphonate have a dual function on crops, on the one hand they act, in theory, as a source of phosphorus, on the other hand they act, in the form of phosphite ion (P03j , as a stimulant of the self-defense mechanisms of plants against pathogenic fungi in the roots, neck, branches, fruits, etc.
  • Phosphites in the form of phosphorous acid or phosphonic acid are authorized as phytosanitary products. They act systemically in the plant with the presence of residues in the form of phosphite ions in the treated crops.They are applied by foliar route in the majority of cases.
  • Products based on monopotassium phosphate such as monopotassium phosphate 0-52-34 (MKP) are also known, but also based on dipotassium phosphate such as dipotassium phosphate 0-41-54 (DKP).
  • Such products certainly act as a fertilizer but do not have any eliciting properties and therefore do not make it possible to activate/stimulate the natural defenses of the plant.
  • they are in solid form and when these are put into solution, they do not include or only contain very small amounts of phosphoric acid. They are applied in large quantities with localized contributions to the soil which allow greater absorption than foliar applications. Its relatively neutral pH avoids stability problems in wet conditions, limits soil acidification, and facilitates the spreading of the product on the ground in granular form.
  • the invention proposes a new composition based on aqueous monopotassium phosphate, in liquid form, the pH of said composition of which is between 1 and 4 which makes it possible to obtain an elicitation product and a product of nutrition, preferentially by foliar way.
  • the monopotassium phosphate is in the form of a phosphoric acid and/or a dihydrogen phosphate.
  • composition has very good results when it is used as an elicitor product, biostimulant product, nutritive product but also, surprisingly, in the fight against pathogens such as mildew or scab on several plant species.
  • the invention relates to a composition
  • a composition comprising a mixture of phosphoric acid and aqueous dihydrogen phosphate in liquid form, characterized in that the pH of said composition is between 1 and 4.
  • the mixture consists of phosphoric acid, dihydrogen phosphate and water.
  • the mixture exhibited good results when it is used as a biostimulant and/or elicitor product and/or nutritive product and/or for combating pathogens.
  • the invention also relates to a process for preparing but also a process for treating cultures.
  • FIG. 1 represents the results of the treatment on the vine leaves with the composition according to the invention alone or in combination with the Maniflow product based on 124 g/l of Bordeaux mixture.
  • FIG. 2 represents the results of the treatment on the grapevine clusters with the composition according to the invention alone or in combination with the Maniflow product.
  • FIG. 3 represents the results of the treatment on the fruits of the apple tree with the composition according to the invention in combination with a contact product and compared with a reference treatment and an untreated control.
  • FIG. 4 represents the results of the treatment on the defoliation of the apple tree with the composition according to the invention in combination with a contact product and compared with a reference treatment and an untreated control.
  • FIG. 5 represents the results of the proteomic study on the activation of alternative mechanisms to generate sufficient additional ATP for growth processes, following the activation of plant defenses.
  • FIG. 6 represents the results of the proteomic study demonstrating a greater availability of phosphate for purposes of nutrition, stimulation of the plant but also in the fight against pathogenic agents.
  • FIG. 7 represents the results of the proteomic study demonstrating the improvement of the overall ability to counter the damage caused by the pathogen.
  • the present invention therefore relates to a composition based on aqueous monopotassium phosphate in liquid form, the pH of said composition of which is between 1 and 4.
  • the monopotassium phosphate according to the invention in acid and aqueous form is a mixture of phosphoric acid and dihydrogen phosphate, preferably the mixture consists of phosphoric acid, dihydrogen phosphate and water. It is presented according to the following formula.
  • the monopotassium phosphate in acid form according to the invention of Formula 1 thus has a pH of less than 4, preferably between 1 and 4, more preferably the composition according to the invention has a pH chosen from 1.7; 1.8; 1.9; 2.0; 2.1; 2.2; 2.3; 2.4; 2.5; 2.6; 2.7; 2.8; 2.9; 3.0; 3.1; 3.2; 3.3; 3.4; 3.5; 3.6; 3.7; 3.8; 3.9; 4.0; and their combinations. More preferably a pH below 2.5. Even more preferably a pH of less than 2.15 ( ⁇ 0.01).
  • pH equal to X or “pH of X” is meant within the meaning of the invention a pH equal to X plus or minus 0.1.
  • pH equal to 2.5 is meant within the meaning of the invention a pH equal to 2.5 plus or minus 0.1.
  • the predominantly present forms of monopotassium phosphate in solution are phosphoric acid and dihydrogen phosphate. More preferentially, when the pH is lower than 2.15 then the phosphoric acid (H3PO4) represents more than 50% of the mixture. When the pH is between 2.15 and 4, the dihydrogen phosphate (H2PO4) represents more than 50% of the mixture. Thus, the lower the pH, the greater the quantity of phosphoric acid will be in the mixture, allowing better availability of the phosphate.
  • the composition according to the invention based on monopotassium phosphate therefore has a pH of less than 4 and more preferably less than or equal to 2.5.
  • the composition thus comprises more than 50% in the mixture of the form (H3PO4) when the pH is less than 2.15.
  • composition according to the invention makes it possible to obtain an elicitation product but also, due to the presence of an available phosphate form, to maintain the fertilizer qualities. Said composition therefore makes it possible to act as a fertilizer by also associating elicitation and biostimulation properties without the presence of phosphite residues.
  • the composition according to the invention is applied in solution at a concentration of between 0.4% and 5%, preferably between 1% and 5% in water.
  • the acid form i.e. phosphoric acid represents 295 g/L of the mixture.
  • the inventors have selected a particular high P/K ratio which makes it possible to significantly improve the properties of the composition according to the invention.
  • the P/K ratio makes it possible to improve the stimulating and nutritional qualities and the availability of the phosphate.
  • the P/K ratio of the composition is between 5.5:1 and 7:1, preferably between 6:1 and 6.4:1, even more preferably the P/K ratio is equal at 6.2:1.
  • monopotassium phosphate such as monopotassium phosphate 0-52-34 (MKP) marketed by Prayon
  • dipotassium phosphate such as dipotassium phosphate 0-41-54 (DKP) marketed by Haifa
  • P/K ratio equal to 1.52 and 0.75.
  • Such ratios do not make it possible to obtain a satisfactory availability of the phosphate and consequently presents results of effectiveness lower than those of the composition according to the invention. They are therefore exclusively nutritional products and not elicitation products.
  • said composition comprises neither phosphorous acid (H3PO3 ⁇ ), nor phosphonic acid (H2PO3+).
  • H3PO3 ⁇ phosphorous acid
  • H2PO3+ phosphonic acid
  • phosphorous acid and phosphonic acid is also meant the residues of these molecules, such as residues of H3PO3 and PO3.
  • residues of H3PO3 and PO3 residues of H3PO3 and PO3.
  • these forms of phosphorous acid or phosphonic acid can be in different types of potassium, sodium or aluminum salt.
  • composition according to the invention does not comprise the HPO4 and PO4 form.
  • the composition according to the invention comprises a mixture consisting of phosphoric acid, dihydrogen phosphate and water.
  • the composition consists of a mixture consisting of phosphoric acid, dihydrogen phosphate and water.
  • the composition according to the invention may comprise other ingredients in combination with the mixture according to any of the preceding embodiments, making it possible to improve the performance of the product.
  • the composition may thus comprise zinc and/or manganese and/or silica.
  • Zinc is a catalyst for the production of ATP, essential for metabolic energy. Potash activates photosynthesis and manganese regulates nitrogen assimilation and controls activity chlorophyll of the plant.
  • the zinc is Zinc bis(dihydrogen phosphate) or zinc sulphate.
  • the silica acts as a nutrition regulator when it is in a monomeric form and therefore assimilable by the plant.
  • the concentration of phosphoric acid can be between 5 and 10% and the concentration of Zinc bis(dihydrogen phosphate) can be between 5 and 10%.
  • the mixture can also be used in combination with at least one other product.
  • the composition may also comprise a phytosanitary product and/or biostimulant product and/or fertilizer product and/or an adjuvant.
  • the combination of the mixture according to the invention and of a phytosanitary product and/or biostimulant product and/or fertilizer product and/or an adjuvant may be in the form of a single composition or in the form of an extemporaneous preparation.
  • adjuvant within the meaning of the invention is meant a product, having no biocidal or antiparasitic activity (that is to say insecticide or fungicide for example), added to the composition, to improve its efficiency.
  • the adjuvant makes it possible to improve the spraying quality of the agricultural product or the spreading properties of the product.
  • the phytosanitary product used in combination with the composition according to the invention is chosen from fungicides.
  • Fungicides are substances intended to eliminate fungi, preferably a copper-based fungicide.
  • fungicides Several different modes of action can be distinguished in fungicides, namely: those that affect respiratory processes and energy production, including those that target inhibition of spore germination such as multisite and those that target the inhibition of mitochondrial complex II or III such as strobilurins or SDHIs, those which affect membrane permeability by disturbing the synthesis of lipids, those which affect the biosynthesis of amino acids or proteins, those which affect the biosynthesis of nucleic acids and/ or cell division and microtubules and/or cell signaling, those that stimulate plant defense responses.
  • the biostimulant product used in combination with the composition according to the invention is chosen from purified algae extracts, complex plant extracts, purified plant extracts comprising in particular proteins, polysaccharides, lipids and polyphenols, among which mention may be made of anthocyanins, flavonoids and stilbenes such as resveratrol; purified extracts of macroorganisms; living microorganisms; purified extracts of microorganisms; and complex seaweed extracts.
  • the fertilizer product used in combination with the composition according to the invention is chosen from substances, or mixtures of substances, natural or of synthetic origin, used in agriculture to improve the soil and fertilize the cultivated plants. They include fertilizers, organic amendments and their mixture.
  • the fungicidal product used in combination with the composition according to the invention is chosen from triazolinthiones (for example prothioconazole), triazoles (for example tebuconazole), the family of succinate inhibitors dehydrogenase (SDHI), strobilurins, spirocetalamines, dithiocarbamates (eg manebe, mancozeb, zinc methiram), phthalimides (eg folpel, captan), guanidines (eg doguadine, triacetate guazatine) and/or quinones (Dithianon), cupric fungicides.
  • triazolinthiones for example prothioconazole
  • triazoles for example tebuconazole
  • SDHI succinate inhibitors dehydrogenase
  • strobilurins eg manebe, mancozeb, zinc methiram
  • phthalimides eg folpel, captan
  • guanidines
  • composition according to any one of the preceding embodiments is applied to plants as a biostimulant and/or elicitor product and/or nutritive product and/or to combat pathogens.
  • the invention also relates to the use of the composition according to any one of the preceding embodiments, in particular of the composition based on monopotassium phosphate in aqueous form intended to be applied to plants as biostimulant and/or elicitor product and/or nutritive product and/or for combating pathogens, characterized in that the pH of the said composition is between 1 and 4.
  • the invention relates to the use as a biostimulant and elicitor and nutritive product and to fight against pathogens.
  • the composition allows the following uses: stimulating the defenses of the plant, and/or reinforcing the metabolism of the plant, and/or increasing the redox balance, and/or increasing the cellular homeostasis, and/or increasing energy production.
  • the elements provided by the composition according to the invention thus allow the plant to grow, despite a decrease in the abundance of proteins linked to photosynthesis in the 2-4 days following the application of the invention, which is surprising in the plant kingdom.
  • the composition according to the invention allows a concomitant increase in proteins linked to homeostasis, energy management and the transport of sugars. This reduction therefore does not imply a cessation of growth, which demonstrates that plants grown under normal or diseased conditions and treated with the composition according to the invention activate alternative mechanisms to generate sufficient additional ATP to growth processes, following the activation of defenses.
  • composition according to the invention makes it possible to act as an elicitor and biostimulant product and consequently to fight against plant pathogens.
  • the composition according to the invention makes it possible to stimulate the defenses of the plant for at most 9 days, preferably 4 days after the application of the said composition.
  • Such a duration is particularly advantageous in the context of the present invention for the following reasons. Protection against pathogens by elicitation provides a response against pathogens developed by the plant itself. This makes it possible to dispense with the use of synthetic or mineral chemistry (cupric product) which has, among other drawbacks, the presence of residues.
  • the response induced by the plant makes it possible to diffuse this lower sensitivity throughout the plant, including during the vegetative growth phases, which protects the plant without renewal of the synthetic chemical treatment necessary during the growth phases of the plant.
  • Such a response makes it possible to overcome unfavorable climatic conditions such as rain. In fact, contact phytosanitary products have the disadvantage of being washed away in the event of heavy rain.
  • composition can be prepared according to the following process:
  • the invention also relates to a process for treating cultures in particularly vines, arboriculture (pome fruits, stone fruits, nuts, small fruits including strawberries), cereals (wheat, barley, corn), oilseed and protein crops, market gardening and fruit crops (vegetables fruits, leafy vegetables and root vegetables), tropical crops, ornamental crops and turf to stimulate said crops, comprising the application of the composition according to the invention based on aqueous monopotassium phosphate in liquid form with a pH of between 1 and 4, or a mixture of phosphoric acid and dihydrogen phosphate, applied at a rate of 1 to 8L per hectare or at a rate of 50 to 3000 L per hectare.
  • the invention relates to a process for treating crops to stimulate the plant's defences, in which the composition according to the invention is applied for at most 9 days, preferably 4 days after application.
  • the composition according to the invention is applied via the foliar or root route.
  • the quantities administered undiluted are of the order of 1 to 8 L per hectare, preferably from 3 to 6 L per hectare .
  • a foliar application is of particular interest for the treatment on the foliage, the flowers or the fruits, in particular on annual crops of the field crop type or more generally on field crops without a drip system.
  • This application is also of particular interest for perennial crops such as vines and arboriculture, including ornamental, the quantities administered comprising the composition diluted in water are of the order of 50 to 3000L per hectare, preferably 50 at 1000L per hectare.
  • a root application is preferred when a fertigation system is put in place, in particular for greenhouse crops. This application may also be preferred when the product is associated with a product applied to the ground.
  • root application When root application is preferred, it may be application by dipping or fertigation or drop by drop.
  • the composition When the composition is applied by foliar route, the composition is preferentially diluted in water in order to obtain “the porridge”. More preferentially, the diluted composition is applied in the form of a paste.
  • the composition When the composition is diluted, the composition is preferentially applied at the rate of 50 to 3000 L, preferentially of 50 to 1000 L per hectare.
  • the composition When the composition is undiluted, the composition is preferentially applied at the rate of 1 to 8 L per hectare, more preferentially from 3 to 6 L per hectare.
  • Example 1 Composition according to the invention at pH of 1.8-1.7
  • the composition when it is not diluted is composed of phosphoric acid and dihydrogen phosphate (H3PO4 and H2PO4-) whose pH is equal to 1.8-1.7.
  • H3PO4 and H2PO4- dihydrogen phosphate
  • the P/K ratio is 6.2:1.
  • composition is prepared according to the following process: a. Mix the H3PO4 in H2O water in a tank, b. Add KH2PO4 and dissolve, c. Possibly combined with a Magnesium, Zinc salt and assimilable silica, d. Adjust the pH to pH 1.7-1.8 by adding KOH or H3PO4 to the mixture
  • Example 2 Composition according to the invention at pH 2.15
  • composition when it is diluted in water at 1% is composed of phosphoric acid and dihydrogen phosphate (FhPC and H2PO4-) whose pH is equal to 2.15. At a pH of 2.15, the two forms represent about 50% of the mixture.
  • the acid form, ie phosphoric acid, represents 295 g/L of the mixture.
  • the P/K ratio is 6.2:1.
  • the composition is prepared by mixing the composition according to Example 1 in H2O water in a tank.
  • Example 3 Composition according to the invention at pH 4
  • the composition when it is not diluted is composed of phosphoric acid and dihydrogen phosphate (FhPC and H2PO4-) whose pH is equal to 4.
  • the acid form i.e. the acid phosphoric represents less than 5% of the mixture and the dihydrogen phosphate represents more than 95% of the mixture.
  • the P/K ratio is 6.2:1.
  • composition is prepared according to the following process: a. Mix the H3PO4 in H2O water in a tank, b. Add KH2PO4 and dissolve c. Possibly combined with other fungicide, biostimulant, fertilizer or adjuvant type ingredients. d. Adjust the pH to a pH equal to 4 by adding KOH or H3PO4 to the mixture.
  • Example 4 Composition according to the invention at a pH of 3
  • the composition when it is not diluted is composed of phosphoric acid and dihydrogen phosphate (HsPC and H2PO4-) whose pH is equal to 3.
  • the acid form i.e. the acid phosphoric represents about 10% of the mixture and the dihydrogen phosphate represents 90% of the mixture.
  • the P/K ratio is 6.2:1.
  • composition is prepared according to the process described in example 3 by adjusting the pH to 3.
  • Example 5 Composition according to the invention at pH of 1
  • the composition when it is not diluted is composed of phosphoric acid and dihydrogen phosphate (HsPC and H2PO4-) whose pH is equal to 1.
  • the acid form i.e. the acid phosphoric represents about 90% of the mixture while the dihydrogen phosphate form represents 10% of the mixture.
  • the P/K ratio is 6.2:1.
  • composition is prepared according to the process described in example 3 by adjusting the pH to 1.
  • Example 6 Proteomic study on the potato grown in a greenhouse.
  • Example 1 The mechanism of action of the composition according to Example 1 diluted to 2% was studied through a proteomic analysis of the Solanum tuberosum potato after foliar treatment with the composition at the 4-leaf stage.
  • the treatment protocol is presented in Table 1 below.
  • the proteins were extracted using the Pierce total vegetable protein extraction kit (Thermo Fisher) according to the manufacturer's recommendations. The proteins were mixed with Laemmli buffer and heated at 37°C for 30 minutes. Protein concentration was determined by the Bradford method and normalized for all samples. Samples were separated by SDS-PAGE and digested with trypsin overnight. The generated peptides were acidified and separated using an LTQ Orbitrap Fusion LUMOS (Thermo Fisher). Mass spectra were analyzed using Proteome Discoverer (version 2.4). The resulting MS/MS data was searched in the Solanum tuberosum (potato) database (cv. DM1-3 516 R44) UP000011115 (53105 entries).
  • the research parameters were: monoisotopic mass; trypsin as a cleavage enzyme; maximum two missed cleavages, cysteine carbamidomethylation as fixed changes; and N-terminal acetylation and oxidation of methionine as variable modifications. Results were filtered based on FDR ⁇ 0.01, and overall peptide scores. Background-based and nested ANOVA in the assay was used to test for differentially expressed proteins. Analyzes were performed using Proteome Discoverer 2.4. Protein quantitation values were exported to Excel for further analysis. These quantification values are presented in appendix 2.
  • the inventors carried out a comparative study of the proteome of the leaves of potatoes grown in a greenhouse and treated with the composition.
  • the treated leaves were compared to water-treated potatoes.
  • the plants were inoculated, or not, with the oomycete Phytophthora infestons, the causative agent of potato late blight, a hemi-biotrophic pathogen.
  • a pool of biological replicates of control and treated leaves was collected on three separate occasions in three independent trials.
  • Proteomic analyzes were performed on each of the pools per treatment. Proteomic analysis returned a total of 34219 high quality peptides corresponding to 2812 identifiable and quantifiable potato proteins in the samples.
  • composition according to Example 1 diluted to 2% increases the overall abundance of all the pathways, and particularly those linked to the detection and response to pathogens, to protein synthesis, to the organization of cell wall, redox balance, energy production, phenolic metabolism, and protein modification by glutathione S-transferase activities, known to help maintain normal growth under stress such as presented in table 2 below and figures 5 to 7.
  • Example 1 The treatment of healthy plants with the composition according to Example 1 thus increases the overall robustness and the potential for resilience of potato plants, and acts as a plant defense stimulator, capable of inducing a pre- defense against pathogens.
  • composition according to the invention based on monopotassium acid phosphate makes it possible to significantly increase the mechanisms of action linked to the growth of the plant, but also those linked to the improvement of the physiology of the plant. In particular, it has a positive impact on the proteins involved in energy and redox balance, the phytohormone jasmonate, the synthesis of secondary metabolites and the reorganization of the cell wall, as well as on the proteins involved in the defense against pathogens.
  • the composition according to the invention acts as a nutritive product, an elicitation product, a biostimulator, including a plant defense stimulator and increases the robustness of said plants against pathogenic agents.
  • Example 7 Test result in the fight against artichoke downy mildew.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The test aims to evaluate the effectiveness of a water-based treatment, of the composition according to example 1 at 2% in comparison with a cupric fertilizer (silicon copper, 5% copper in the form of sulphate ) at 0.5%, on artichoke downy mildew, Bremia lactucae.
  • the treatment was applied 5 days before the inoculation of the disease and the percentage of injured foliage is analyzed 9 days after the inoculation.
  • the results are presented in the form of a score as shown in the table below.
  • the reference product is known for its specific action on downy mildew. It was applied under laboratory conditions with no risk of leaching for this contact product, which sets the benchmark for optimum efficiency. Our composition is therefore significantly efficient with regard to the test device which is very favorable to the reference.
  • the composition according to the invention thus has a good efficacy of nearly 60% on artichoke downy mildew.
  • the test aims to evaluate the effectiveness of a water-based treatment, of the composition according to Example 1 at 2% and of the Bion product (acibenzolar-S-methyl 50%) at 0.01 %, on cauliflower downy mildew, Hyaloperonospora parasitica.
  • the reference product (BION) is an elicitor known for its performance. However, it presents a strong disturbance in terms of selectivity, which makes its use difficult.
  • the results of this test show that the composition according to the invention is close to this reference with the advantage of not bringing any risk of lack of selectivity with respect to the plant.
  • the composition according to the invention has a good efficacy of nearly 80% on cauliflower downy mildew.
  • Example 9 Test result in the fight against lettuce mildew.
  • the test aims to evaluate the effectiveness of a water-based treatment, of the composition according to Example 1 at 2% and of the Ortiva product (azoxystrobin 250 g/L) at 0.2%, on lettuce downy mildew, Bremia lactucae.
  • composition according to the invention shows good efficacy of nearly 90% on lettuce mildew in comparison with a recognized synthetic fungicide.
  • Example 10 - Test result in the fight against apple scab.
  • the test aims to evaluate the effectiveness of the composition according to the invention in combination with a contact product such as copper oxychloride, Captan and Mancozeb on apple scab in comparison with a reference systemic fungicide. , Trifloxistrobin or Tebuconazole in combination with one of the contact products mentioned above.
  • the treatment was applied 7 times according to the following protocol:
  • FIG. 4 On leaves (FIG. 4): The inventors have demonstrated an effect of the composition according to example 1 used at 4 L/ha in combination with the contact products. This efficacy (16% defoliation) is equivalent to that of the reference program based on contact and systemic fungicide products (18% defoliation). Indeed, the contact product combination with the present composition performs significantly better than the contact products used alone (24% defoliation) against 44% in the untreated control. The dose of the invention at 6 L/ha shows no difference. Thus, 4 L/ha is sufficient in combination with contact products. This performance is important and will facilitate the reserve for the following season.
  • composition according to Example 1 does not exhibit any residues as indicated in Table 8 below.
  • Example 11 - Test result in the fight against vine downy mildew.
  • the test aims to evaluate the effectiveness of the composition according to Example 1 in combination with the product Maniflow (Bordeaux mixture) against mildew on the vine at a rate of less than 4 kg Cu/ha/year .
  • the Merlot parcel comprising 3,300 vines/ha at the rate of 9 vines/parcel was artificially contaminated and not misted.
  • the treatment was applied 4 times according to the following protocol:
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) used alone on the attack frequency and intensity. This efficiency is equivalent to that of the copper-based reference product.
  • the inventors have also observed a strong synergistic effect between the combination of the copper-based product and the present composition according to the invention on sheet. Indeed, the combination of copper with the present composition performs significantly better than the copper used alone.
  • the inventors then tested 3 modalities at 3, 4 and 6 L of the composition associated with the cupric preparation. They observed a weak effect on the intensity and the frequency of attack between the 3 modalities at 3, 4 and 6 L of the composition associated with the cupric preparation. Thus, 3 L/ha is sufficient in combination with copper.
  • the composition according to the invention has no effect, when used alone, on the attack frequency and intensity, unlike the copper-based reference product.
  • a strong synergistic effect between the copper-based product and the composition according to the invention on clusters is present.
  • the combination of copper with said composition performs significantly better than copper used alone.
  • the inventors have however observed a weak effect on the intensity and the frequency of attack between the 3 modalities at 3.4 of the composition associated with the cupric preparation.
  • the dose of 3 L/ha is sufficient in combination with copper.
  • Example 12 Test result on the presence of phosphite residues after treatment with the composition according to Example 1.
  • the composition according to Example 1 is prepared as follows. The composition is diluted in water by adding the dose of the composition (1 to 8 L/ha) to a sprayer filled with 50% of the volume of water, then mixing by stirring. It is then completed with the additional water while maintaining the agitation. The mixture is then sprayed at the planned hectare dose (50-3000 L/ha) depending on the type of crop, the vegetative stage and the type of sprayer (air or projected jet)
  • composition according to the invention is applied to vines, apple trees, lettuce and potatoes.

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes d'une composition à base de monopotassium phosphate sous forme aqueuse et acide, et un procédé de traitement des cultures.

Description

COMPOSITION BIOSTIMULANTE A BASE DE
MONOPOTASSIUM PHOSPHATE SOUS FORME ACIDE
[0001] Domaine technique
[0002] L'invention concerne l'utilisation comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes d'une composition comprenant un mélange d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate sous forme aqueuse et acide, et un procédé de traitement des cultures.
[0003] Etat de l'art
[0004] L'azote, le phosphore et le potassium sont les trois nutriments principaux nécessaires pour la croissance des plantes, en particulier la croissance des feuilles, des tiges vertes et des fruits. Les plantes ont également besoin d'éléments secondaires tels que le magnésium, le calcium ainsi que des oligoéléments (cuivre, Zinc, Manganèse par exemple).
[0005] Les sols contiennent naturellement tous ces éléments nécessaires à la croissance des plantes. Toutefois, ils ne sont généralement pas présents dans le sol en quantité suffisante ou sous des formes permettant de soutenir une croissance optimale et obtenir un rendement optimal des plantes.
[0006] Il est donc d'intérêt de supplémenter les sols avec un produit comprenant de tels nutriments et apte à être assimilés par les plantes. L'utilisation des engrais dits naturels qui sont des engrais organiques dérivés de matière animale ou végétale tel que le fumier, le lisier, le compost permettent de remédier au moins en partie à une carence de ces nutriments.
[0007] Puis, les découvertes faites sur la nutrition des plantes ont permis le développement des engrais dits chimiques. Ainsi, les engrais naturels ont été complémentés voir remplacés en partie au profit des engrais chimiques qui ont permis d'améliorer très significativement le rendement par hectare. Ces engrais à base de constituants chimiques dans des quantités spécifiques permettent d'enrichir le milieu à travers des apports au sol ou par voie foliaire et ainsi favoriser la croissance des plantes. Les engrais sont plus ou moins complexes et peuvent comprendre des éléments fertilisants majeurs qui demandent de grande quantité d'apport pour la plante (Azote, Phosphore, Potassium), des éléments secondaires (magnésium, calcium) ou des oligo-éléments tels que le cuivre, le fer, le manganèse, le zinc, le cobalt, le molybdène (typiquement sous forme de molybdate) et le bore (typiquement sous forme de borate). [0008] Parmi ces engrais, on peut notamment citer les engrais à base de phosphore. Le phosphore (P) est un élément majeur utile à la plante pour une croissance optimale. Il est présent sous différentes formes parmi lesquels nous pouvons citer les phosphates, les phosphites ou les phosphonates. Les phosphates sont considérés comme des engrais, car ils fournissent un apport nutritif en phosphore assimilable par la plante.
[0009] Les produits à base de phosphite ou de phosphonate présentent une double fonction sur les cultures, d'une part ils agissent, en théorie, comme source de phosphore, d'autre part ils agissent, sous forme d'ion phosphite (P03j, comme stimulant des mécanismes d'autodéfense des plantes face aux champignons pathogènes aussi bien dans les racines, le col, les branches, les fruits, etc. Les phosphites sous forme d'acide phosphoreux ou d'acide phosphonique sont autorisés comme produits phytosanitaires. Ils agissent par systémie dans la plante avec la présence de résidus sous forme d'ion phosphite dans les cultures traitées. Ils sont appliqués par voie foliaire dans la majorité des cas.
[0010] Or, de tels produits ne peuvent pas être utilisés comme engrais tel qu'expliqué dans le règlement CE 2019/1009. En effet, ils ne représentent pas une source de phosphate disponible pour la plante et ne permet pas d'améliorer leur croissance, et par conséquent ne sont pas des engrais.
[0011] Il est également connu des produits à base de monopotassium phosphate tel que le Phosphate monopotassique 0-52-34 (MKP), mais également à base de dipotassium phosphate tel que le Phosphate dipotassique 0-41-54 (DKP). De tels produits agissent certes comme fertilisant mais n'ont pas de propriétés élicitrices et ne permettent donc pas d'activer/stimuler les défenses naturelles de la plante. De plus, ils se présentent sous forme solide et lorsque ceux-ci sont mis en solution, ils ne comprennent pas ou dans de très faibles quantités de l'acide phosphorique. Ils sont appliqués en grande quantité avec des apports localisés au sol qui permettent une plus grande absorption que les applications foliaires. Son pH relativement neutre évite des problèmes de stabilité en condition humide, limite l'acidification des sols, et facilite l'épandage du produit au sol sous forme de granulé.
[0012] Il existe donc un besoin pour un nouveau produit nutritif et éliciteur apportant du phosphore à la plante et permettant de surmonter les inconvénients de l'art antérieur, en particulier éviter la présence systématique de résidus phosphites mais également de fournir un phosphate comprenant de grandes quantités d'acide phosphorique sous forme liquide tout en ayant une bonne efficacité d'élicitation, de biostimulation, de nutrition et de lutte contre les pathogènes.
[0013] C'est l'objectif de l'invention.
[0014] Résumé de l'invention
[0015] Pour y répondre, l'invention propose une nouvelle composition à base de monopotassium phosphate aqueux, sous forme liquide, dont le pH de ladite composition est compris entre 1 et 4 qui permet d'obtenir un produit d'élicitation et un produit de nutrition, préférentiellement par voie foliaire. A un tel pH, le monopotassium phosphate se présente sous la forme d'un acide phosphorique et/ou d'un dihydrogénophosphate.
[0016] Les inventeurs ont ainsi découvert qu'une telle composition présentait de très bons résultats lorsqu'elle est utilisée comme produit éliciteur, produit biostimulant, produit nutritif mais également, de façon surprenante, dans la lutte contre les agents pathogènes tels que le mildiou ou la tavelure et ce sur plusieurs espèces végétales.
[0017] Ainsi, l'invention concerne une composition comprenant un mélange d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate aqueux sous forme liquide, caractérisée en ce que le pH de ladite composition est compris entre 1 et 4. Avantageusement, le mélange est constitué d'acide phosphorique, de dihydrogénophosphate et d'eau. En particulier, il a été constaté par les inventeurs que le mélange présentait de bons résultats lorsqu'elle est utilisée comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes.
[0018] Enfin, l'invention concerne également un procédé de préparation mais également un procédé de traitement des cultures.
[0019] D'autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l'invention, des exemples et des figures qui vont suivre.
[0020] Brève description des Figures
[0021] [Fig. 1] représente les résultats du traitement sur les feuilles de vigne avec la composition selon l'invention seul ou en combinaison avec le produit Maniflow à base de 124 g/l de bouillie bordelaise.
[0022] [Fig. 2] représente les résultats du traitement sur les grappes de vigne avec la composition selon l'invention seul ou en combinaison avec le produit Maniflow.
[0023] [Fig. 3] représente les résultats du traitement sur les fruits de pommier avec la composition selon l'invention en combinaison un produit de contact et comparé à un traitement de référence et un témoin non traité. [0024] [Fig. 4] représente les résultats du traitement sur la défoliation du pommier avec la composition selon l'invention en combinaison un produit de contact et comparé à un traitement de référence et un témoin non traité.
[0025] [Fig. 5] représente les résultats de l'étude protéomique sur l'activation des mécanismes alternatifs pour générer suffisamment d'ATP supplémentaire pour les processus de croissance, suite à l'activation des défenses de la plante.
[0026] [Fig. 6] représente les résultats de l'étude protéomique démontrant une plus grande disponibilité du phosphate à des fins de nutrition, de stimulation de la plante mais également dans la lutte contre les agents pathogènes.
[0027] [Fig. 7] représente les résultats de l'étude protéomique démontrant l'amélioration de la capacité globale à contrer les dommages causés par le pathogène.
[0028] Description détaillée de l'invention
[0029] Composition
[0030] La présente invention a donc pour objet une composition à base de monopotassium phosphate aqueux sous forme liquide dont le pH de ladite composition est compris entre 1 et 4.
[0031] En particulier, le monopotassium phosphate selon l'invention sous forme acide et aqueuse est un mélange d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate, préférentiellement le mélange est constitué d'acide phosphorique, de dihydrogénophosphate et d'eau. Il se présente selon la formule suivante.
[0032] [Formule 1]
Figure imgf000005_0001
[0034] Le monopotassium phosphate sous forme acide selon l'invention de Formule 1 a ainsi un pH inférieur à 4, préférentiellement entre 1 et 4, plus préférentiellement la composition selon l'invention présente un pH choisi parmi 1,7 ; 1,8 ; 1,9 ; 2,0 ; 2,1 ; 2,2 ; 2,3 ; 2,4 ; 2,5 ; 2,6 ; 2,7 ; 2,8 ; 2,9 ; 3,0 ; 3,1 ; 3,2 ; 3,3 ; 3,4 ; 3,5 ; 3,6 ; 3,7 ; 3,8 ; 3,9 ; 4,0 ; et leurs combinaisons. Plus préférentiellement un pH inférieur à 2,5. Encore plus préférentiellement un pH inférieur à 2,15 (±0,01).
[0035] Par « pH égal à X » ou « pH de X » on entend au sens de l'invention un pH égal à X plus ou moins 0,1. Ainsi, par pH égal à 2,5, on entend au sens de l'invention un pH égal à 2,5 plus ou moins 0,1.
[0036] A pH acide (pH inférieur à 7), les formes majoritairement présentes du monopotassium phosphate en solution sont l'acide phosphorique et le dihydrogénophosphate. Plus préférentiellement, lorsque le pH est inférieur à 2,15 alors l'acide phosphorique (H3PO4) représente plus de 50% du mélange. Lorsque le pH est compris entre 2,15 et 4, le dihydrogénophosphate (H2PO4 ) représente plus de 50% du mélange. Ainsi, plus le pH est faible, plus la quantité d'acide phosphorique sera importante dans le mélange permettant une meilleure disponibilité du phosphate.
[0037] Avantageusement, la composition selon l'invention à base de monopotassium phosphate a donc un pH inférieur à 4 et plus préférentiellement inférieur ou égale à 2,5. La composition comprend ainsi plus de 50% dans le mélange de la forme (H3PO4) lorsque le pH est inférieur à 2,15. Un tel mélange permet ainsi de surmonter les inconvénients de l'art antérieur et d'obtenir des propriétés d'élicitation, de biostimulation, de nutrition et de lutte contre les pathogènes particulièrement recherchée dans le cadre de la présente invention.
[0038] L'utilisation d'une forme acide de monopotassium phosphate n'a jamais été envisagée sur les aspects d'élicitation. En effet, biologiquement un pH acide va naturellement être défavorable aux vivants, en particulier un pH acide va perturber notamment les plantes. De façon surprenante, les inventeurs ont découvert que la composition selon l'invention permet d'obtenir un produit d'élicitation mais également de par la présence d'une forme phosphate disponible, de maintenir les qualités d'engrais. Ladite composition permet donc d'agir comme engrais en associant également des propriétés d'élicitations et de biostimulation sans présence de résidus phosphites.
[0039] Selon un mode de réalisation préféré, la composition selon l'invention est appliquée en solution à une concentration comprise entre 0,4% et 5%, préférentiellement entre 1% et 5% dans l'eau. Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, lorsque la composition selon l'invention est en solution à 1% dans l'eau et le pH est égal à 2,15 (plus ou moins 0,5), la forme acide, soit l'acide phosphorique représente 295 g/L du mélange.
[0040] Selon un autre mode de réalisation particulièrement préféré de l'invention, les inventeurs ont sélectionné un rapport P/K particulier élevé qui permet d'améliorer significativement les propriétés de la composition selon l'invention.
[0041] Le rapport P/K permet d'améliorer les qualités stimulatrices, nutritives et la disponibilité du phosphate.
[0042] Préférentiellement, le rapport P/K de la composition est compris entre 5,5 :1 et 7 :1, préférentiellement entre 6 :1 et 6,4 :1, encore plus préférentiellement le rapport P/K est égal à 6,2 :1.
[0043] Un tel rapport permet d'obtenir une plus grande disponibilité du phosphate à des fins de nutrition, de stimulation de la plante mais également dans la lutte contre les agents pathogènes.
[0044] A titre d'exemple le monopotassium phosphate tel que le Phosphate monopotassique 0-52-34 (MKP) commercialisé par Prayon, mais également le dipotassium phosphate tel que le Phosphate dipotassique 0-41-54 (DKP) commercialisé par Haifa ont respectivement un rapport P/K égal à 1,52 et 0,75. De tels rapports ne permettant pas d'obtenir une disponibilité satisfaisante du phosphate et par conséquent présente des résultats d'efficacité inférieur à ceux de la composition selon l'invention. Ce sont donc exclusivement des produits de nutrition et non pas des produits d'élicitation.
[0045] Etant donné la formulation spécifique de la composition selon l'invention, ladite composition ne comprend ni d'acide phosphoreux (H3PO3-), ni d'acide phosphonique (H2PO3+). L'absence de ces molécules est avantageuse dans le contexte de la présente invention car elle évite la présence d'effets indésirables tels que la présence de résidus, y compris sur les produits issus de la culture traitée.
[0046] Par acide phosphoreux et acide phosphonique on entend également les résidus de ces molécules, tels que des résidus de H3PO3 et PO3. A titre d'exemple, ces formes d'acide phosphoreux ou d'acide phosphonique peuvent se présenter sous différents types de sel de potassium, de sodium ou d'aluminium.
[0047] Préférentiellement, la composition selon l'invention ne comprend pas la forme HPO4 et PO4.
[0048] Selon une variante, la composition selon l'invention comprend un mélange constitué d'acide phosphorique, de dihydrogénophosphate et d'eau.
[0049] Selon une autre variante la composition est constituée d'un mélange constitué d'acide phosphorique, de dihydrogénophosphate et d'eau.
[0050] Avantageusement, la composition selon l'invention peut comprendre d'autres ingrédients en combinaison avec le mélange selon l'un des quelconques modes de réalisation précédent, permettant d'améliorer les performances du produit. La composition peut ainsi comprendre du zinc et/ou du manganèse et/ou de la silice. Le zinc est un catalyseur de la production de l'ATP, indispensable à l'énergie du métabolisme. La potasse permet d'activer la photosynthèse et le manganèse régule l'assimilation de l'azote et contrôle l'activité chlorophyllienne de la plante.
[0051] Préférentiellement, le zinc est le Zinc bis(dihydrogen phosphate) ou le sulfate de zinc.
[0052] Préférentiellement, la silice intervient comme régulateur de la nutrition lorsqu'il est sous une forme monomérique et par conséquent assimilable par la plante.
[0053] Lorsque la composition comprend également du zinc, la concentration de l'acide phosphorique peut être comprise entre 5 et 10% et la concentration de Zinc bis(dihydrogen phosphate) peut être comprise entre 5 et 10%.
[0054] Préférentiellement, le mélange peut également être utilisée en combinaison avec au moins un autre produit. Ainsi, la composition peut également comprendre un produit phytosanitaire et/ou produit biostimulant et/ou produit fertilisant et/ou un adjuvant. La combinaison du mélange selon l'invention et d'un produit phytosanitaire et/ou produit biostimulant et/ou produit fertilisant et/ou un adjuvant peut-être sous forme d'une seule composition ou sous forme d'une préparation extemporanée.
[0055] Par « adjuvant » au sens de l'invention on entend un produit, n'ayant pas d'activité biocide ou antiparasitaire (c'est-à-dire insecticide ou fongicide par exemple), ajouté à la composition, pour améliorer son efficacité. A titre d'exemple, l'adjuvant permet d'améliorer la qualité de pulvérisation du produit agricole ou les propriétés d'étalement du produit.
[0056] A titre d'exemple, le produit phytosanitaire utilisé en combinaison avec la composition selon l'invention est choisi parmi les fongicides.
[0057] Les fongicides sont des substances destinées à éliminer les champignons, préférentiellement un fongicide à base de cuivre. Plusieurs modes d'action différents peuvent être distingués dans les fongicides, à savoir : ceux qui affectent les processus respiratoires et la production d'énergie, y compris ceux qui ciblent l'inhibition de la germination des spores comme les multisites et ceux qui ciblent l'inhibition du complexe mitochondrial II ou III comme les strobilurines ou les SDHI, ceux qui affectent la perméabilité membranaire en perturbant la synthèse des lipides, ceux qui affectent la biosynthèse des acides aminés ou des protéines, ceux qui affectent la biosynthèse des acides nucléiques et/ou la division cellulaire et les microtubules et/ou la signalisation cellulaire, ceux qui stimulent les réactions de défense des plantes.
[0058] A titre d'exemple, le produit biostimulant utilisé en combinaison avec la composition selon l'invention est choisi parmi les extraits purifiés d'algues, les extraits complexes de plantes, les extraits purifiés de plantes comprenant notamment des protéines, des polysaccharides, des lipides et des polyphénols parmi lesquels on pourra citer les anthocyanes, les flavonoïdes et les stilbènes comme le resvératrol ; les extraits purifiés de macroorganismes ; les microorganismes vivants ; les extraits purifiés de microorganismes ; et les extraits complexes d' algues.
[0059] A titre d'exemple, le produit fertilisant utilisé en combinaison avec la composition selon l'invention est choisi parmi des substances, ou mélanges de substances, naturelles ou d'origine synthétique, utilisées en agriculture pour améliorer les sols et fertiliser les plantes cultivées. Ils comprennent les engrais, les amendements organiques et leur mélange.
[0060] A titre d'exemple, le produit fongicide utilisé en combinaison avec la composition selon l'invention est choisi parmi les triazolinthiones (par exemple le prothioconazole), les triazoles (par exemple le tebuconazole), la famille des inhibiteurs de la succinate déshydrogénase (SDHI), les strobilurines, les spirocetalamines, les dithiocarbamates (par exemple le manebe, le mancozebe, le methirame de zinc), les phtalimides (par exemple le folpel, le captane), les guanidines (par exemple la doguadine, le triacetate de guazatine) et/ou les quinones (Dithianon), des fongicides cupriques.
[0061] En particulier, la composition selon l'un des quelconques modes de réalisations précédent est appliquée sur les plantes comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes.
[0062] Ainsi, l'invention se rapporte également à l'utilisation de la composition selon l'un des quelconques modes de réalisation précédents, en particulier de la composition à base de monopotassium phosphate sous forme aqueuse destinée à être appliquée sur les plantes comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes, caractérisée en ce que le pH de ladite composition est compris entre 1 et 4. Préférentiellement, l'invention se rapporte à l'utilisation comme biostimulant et produit éliciteur et produit nutritif et pour lutter contre les pathogènes.
[0063] Préférentiellement, la composition permet les utilisations suivantes : stimuler les défenses de la plante, et/ou renforcer le métabolisme de la plante, et/ou augmenter la balance redox, et/ou augmenter l'homéostasie cellulaire, et/ou augmenter la production d'énergie. [0064] Les éléments apportés par la composition selon l'invention permettent ainsi à la plante de croître et ce malgré une diminution de l'abondance de protéines liées à la photosynthèse dans les 2-4 jours suivant l'application de l'invention, ce qui est surprenant dans le règne végétal. Toutefois, la composition selon l'invention permet une augmentation concomitante des protéines liées à l'homéostasie, la gestion énergétique et le transport de sucres. Cette réduction n'implique donc pas un arrêt de la croissance, ce qui démontre que les plantes cultivées dans des conditions normales, ou malades, et traitées avec la composition selon l'invention, activent des mécanismes alternatifs pour générer suffisamment d'ATP supplémentaire pour les processus de croissance, suite à l'activation de défenses.
[0065] Ainsi, la composition selon l'invention permet d'agir comme produit éliciteur et biostimulant et par conséquent lutter contre les pathogènes des plantes.
[0066] Les inventeurs ont, de façon surprenante, observé que la composition selon l'invention permet de stimuler les défenses de la plante pendant au plus 9 jours, préférentiellement 4 jours après l'application de ladite composition. Une telle durée est particulièrement avantageuse dans le contexte de la présente invention pour les raisons suivantes. La protection contre les agents pathogènes par élicitation apporte une réponse contre les pathogènes développée par la plante elle-même. Cela permet de s'affranchir de l'utilisation de chimie de synthèse ou minérale (produit cuprique) qui présente parmi d'autre inconvénient la présence de résidus. La réponse induite par la plante permet de diffuser cette moindre sensibilité dans tout le végétal y compris pendant les phases de croissance végétative ce qui protège la plante sans renouvellement de traitement de chimie de synthèse nécessaire lors des phases de croissance du végétal. Enfin une telle réponse permet de s'affranchir des conditions climatiques défavorables telles que la pluie. En effet, les produits phytosanitaires de contact ont l'inconvénient d'être lessivés en cas de fortes pluies.
[0067] Procédé de préparation
[0068] La composition peut être préparée selon le procédé suivant :
Mélanger le H3PO4 dans de l'eau H2O dans une cuve,
Ajouter KH2PO4 et dissoudre
Eventuellement, ajuster le pH à une valeur comprise entre 1 et 4 en ajoutant KOH ou H3PO4 dans le mélange
[0069] Procédé de traitement des cultures
[0070] L'invention se rapporte également à un procédé de traitement des cultures en particulier la vigne, l'arboriculture (fruits à pépin, fruits à noyaux, fruits à coques, petits fruits y compris fraise), les céréales (blé, orge, mais), les cultures oléo-protéagineuses, les cultures maraîchères et fruitières (légumes fruits, légumes feuilles et légumes racines), les cultures tropicales, les cultures ornementales et le gazon pour stimuler lesdites cultures, comprenant l'application de la composition selon l'invention à base de monopotassium phosphate aqueux sous forme liquide de pH compris entre 1 et 4, soit un mélange d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate, appliquée à raison de 1 à 8L par hectare ou à raison de 50 à 3000 L par hectare.
[0071] Préférentiellement, l'invention concerne un procédé de traitement des cultures pour stimuler les défenses de la plante, dans lequel la composition selon l'invention est appliquée pendant au plus 9 jours, préférentiellement 4 jours après l'application.
[0072] Avantageusement, la composition selon l'invention est appliquée par voie foliaire ou racinaire. Lorsque la composition est appliquée par voie racinaire, par exemple à l'aide d'un système de goutte à goutte au sol, les quantités administrées non diluées sont de l'ordre de 1 à 8L par hectare, préférentiellement de 3 à 6L par hectare.
[0073] Une application par voie foliaire est particulièrement d'intérêt pour le traitement sur le feuillage, les fleurs ou les fruits, en particulier sur des cultures annuelles de type grandes cultures ou plus généralement sur des cultures pleins champs sans système de goutte à goutte. Cette application est également particulièrement d'intérêt pour les cultures pérennes telles que la vigne et l'arboriculture y compris ornementale, les quantités administrées comprenant la composition diluée dans l'eau sont de l'ordre de 50 à 3000L par hectare, préférentiellement de 50 à 1000L par hectare.
[0074] Une application racinaire est préférée lorsqu'un système de fertirrigation est mise en place, en particulier pour les cultures sous serre. Cette application peut aussi être préférée lorsque le produit est associé avec un produit appliqué au sol.
[0075] Lorsque l'application racinaire est préférée, il peut s'agir d'une application par trempage ou fertirrigation ou goutte à goutte.
[0076] Lorsque la composition est appliquée par voie foliaire, la composition est préférentiellement diluée dans l'eau afin d'obtenir « la bouillie ». Plus préférentiellement, la composition diluée est appliquée sous forme de bouillie. Lorsque la composition est diluée, la composition est préférentiellement appliquée à raison de 50 à 3000 L, préférentiellement de 50 à 1000L par hectare. Lorsque la composition n'est pas diluée, la composition est préférentiellement appliquée à raison de 1 à 8 L par hectare, plus préférentiellement de 3 à 6L par hectare.
[0077] L'invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l'invention et par des résultats.
[0078] Exemples
[0079] Exemple 1 - Composition selon l'invention à pH de 1,8-1, 7
[0080] La composition lorsqu'elle n'est pas diluée est composé d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate (H3PO4 et H2PO4-) dont le pH est égal à 1,8-1, 7. A un pH de 1,8-1, 7, la forme acide, soit l'acide phosphorique représente 60% du mélange et le dihydrogénophosphate représente 40% du mélange. Le rapport P/K est de 6,2 :1.
[0081] La composition est préparée selon le procédé suivant : a. Mélanger le H3PO4 dans de l'eau H2O dans une cuve, b. Ajouter KH2PO4 et dissoudre, c. Eventuellement associé à un sel de Magnésium, Zinc et de la silice assimilable, d. Ajuster le pH à un pH égal à 1,7-1, 8 en ajoutant KOH ou H3PO4 dans le mélange
[0082] Exemple 2 - Composition selon l'invention à pH de 2,15
[0083] La composition lorsqu'elle est diluée dans l'eau à 1% est composé d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate (FhPC et H2PO4-) dont le pH est égal à 2,15. A un pH de 2,15, les deux formes représentent de l'ordre de 50% du mélange. La forme acide, soit l'acide phosphorique représente 295 g/L du mélange. Le rapport P/K est de 6,2 :1.
[0084] La composition est préparée en mélangeant la composition selon l'exemple 1 dans de l'eau H2O dans une cuve.
[0085] Exemple 3 - Composition selon l'invention à pH de 4
[0086] La composition lorsqu'elle n'est pas diluée est composé d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate (FhPC et H2PO4-) dont le pH est égal à 4. A un pH de 4, la forme acide, soit l'acide phosphorique représente moins de 5% du mélange et le dihydrogénophosphate représente plus de 95% du mélange. Le rapport P/K est de 6,2 :1.
[0087] La composition est préparée selon le procédé suivant : a. Mélanger le H3PO4 dans de l'eau H2O dans une cuve, b. Ajouter KH2PO4 et dissoudre c. Eventuellement associé à d'autres ingrédients de type fongicide, biostimulant, fertilisant ou adjuvant. d. Ajuster le pH à un pH égal à 4 en ajoutant KOH ou H3PO4 dans le mélange.
[0088] Exemple 4 - Composition selon l'invention à pH de 3
[0089] La composition lorsqu'elle n'est pas diluée est composé d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate (HsPC et H2PO4-) dont le pH est égal à 3. A un pH de 3, la forme acide, soit l'acide phosphorique représente environ 10% du mélange et le dihydrogénophosphate représente 90% du mélange. Le rapport P/K est de 6,2 :1.
[0090] La composition est préparée selon le procédé décrit dans l'exemple 3 en ajustant le pH à 3.
[0091] Exemple 5 - Composition selon l'invention à pH de 1
[0092] La composition lorsqu'elle n'est pas diluée est composé d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate (HsPC et H2PO4-) dont le pH est égal à 1. A un pH de 1, la forme acide, soit l'acide phosphorique représente environ 90% du mélange alors que la forme dihydrogénophosphate représente 10% du mélange. Le rapport P/K est de 6,2 :1.
[0093] La composition est préparée selon le procédé décrit dans l'exemple 3 en ajustant le pH à 1.
[0094] Exemple 6 - Etude protéomique sur la pomme de terre cultivé sous serre.
[0095] Le mécanisme d'action de la composition selon l'exemple 1 dilué à 2% a été étudié à travers une analyse protéomique de la pomme de terre Solanum tuberosum après un traitement foliaire avec la composition au stade 4 feuilles. Le protocole du traitement est présenté dans le tableau 1 ci-dessous.
[0096] [Tableau 1]
Figure imgf000013_0001
0097] Dans le cadre de cet essai, il a été récupéré 18 échantillons comprenant chacun 8 folioles. Après extraction, un total de 2812 protéines a été identifiées et quantifiées par spectrométrie de masse. Sur les 2812 protéines, 2036 ont été identifiées dans l'ensemble des échantillons. Enfin une comparaison par paire (pair-wise comparison) a permis de retenir 1628 protéines pour l'étude protéomique détaillées en suivant.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) [0098] Préparation des échantillons et analyse LC-MS/MS
[0099] Les protéines ont été extraites à l'aide du kit d'extraction de protéines totales végétales Pierce (Thermo Fisher) selon les recommandations du fabricant. Les protéines ont été mélangées au tampon Laemmli et chauffées à 37°C pendant 30 minutes. La concentration en protéines a été déterminée par la méthode Bradford et normalisée pour tous les échantillons. Les échantillons ont été séparés par SDS-PAGE et digérés avec de la trypsine pendant la nuit. Les peptides générés ont été acidifiés et séparés à l'aide d'un LTQ Orbitrap Fusion LUMOS (Thermo Fisher). Les spectres de masse ont été analysés à l'aide de Proteome Discoverer (version 2.4). Les données MS/MS résultantes ont été recherchées dans la base de données Solanum tuberosum (pomme de terre) (cv. DM1-3 516 R44) UP000011115 (53105 entrées). Les paramètres de recherche étaient les suivants : masse monoisotopique ; trypsine comme enzyme de clivage ; deux clivages manqués maximum, carbamidométhylation de la cystéine comme modifications fixes ; et acétylation N-terminale et oxydation de la méthionine comme modifications variables. Les résultats ont été filtrés sur la base d'une FDR <0,01, et des scores globaux des peptides. L'ANOVA basée sur le fond et imbriquée dans l'essai a été utilisée pour tester les protéines exprimées de manière différentielle. Les analyses ont été réalisées à l'aide de Proteome Discoverer 2.4. Les valeurs de quantification des protéines ont été exportées dans Excel pour une analyse plus approfondie. Ces valeurs de quantification sont présentées dans l'annexe 2.
[0100] Bioinformatique et analyse statistique
[0101] Les protéines pertinentes ont été classées selon leurs voies métaboliques à l'aide de MapMan 3.0.0 (Thimm et al., 2004) et leurs processus biologiques à l'aide de la base de données d'ontologie génique (GO) publiquement disponible fournie par le Gene Ontology Consortium (Ashburner et al., 2000). L'analyse de l'interactome a été réalisée à l'aide de Cytoscape (Shannon et al., 2003) combiné à STRING (Jensen et al., 2009). Les interactions connues entre les protéines pertinentes dans les feuilles traitées ont été utilisées pour dessiner le réseau d'interaction des protéines. Lorsque cela était pertinent, BLAST a été utilisé pour proposer une identification ou une annotation potentielle pour les protéines non annotées/non attribuées. Les protéines avec un fold-change de >2 ou <0,50 dans l'expression entre les échantillons ont été considérées comme significatif. Les valeurs de fold-change des protéines ont été transformées en taux de variation entre l'invention et le témoin, en pourcentage, pour les ensembles de protéines appartenant à chaque processus biologique
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) (cluster).
[0102] Etude comparative protéomique
[0103] Afin d'étudier les mécanismes d'action dus au traitement avec la composition selon l'invention, les inventeurs ont réalisé une étude comparative du protéome des feuilles de pommes de terre cultivées en serre et traitées avec la composition. Les feuilles traitées ont été comparées à des pommes de terre traitées à l'eau. Les plantes ont été inoculées, ou non, avec l'oomycète Phytophthora infestons, l'agent causal du mildiou de la pomme de terre, un pathogène hémi-biotrophique. Un pool de réplicats biologiques de feuilles témoins et traitées a été collecté à trois occasions distinctes dans trois essais indépendants. Des analyses protéomiques ont été effectuées sur chacun des pools par traitement. L'analyse protéomique a retourné un total de 34219 peptides de haute qualité correspondant à 2812 protéines de pomme de terre identifiables et quantifiables dans les échantillons. Pour des analyses plus robustes, seules les protéines identifiées dans les trois réplicats biologiques indépendants, dans les trois essais, ont été sélectionnées pour une analyse comparative quantitative. Un résumé des protéines détectées dans les plantes saines traitées et absentes des plantes témoins saines est également fourni. Sur les 2812 protéines, 2036 protéines ont donc été détectées dans tous les échantillons. Parmi les 2036 protéines utilisées pour les comparaisons par paires, des annotations fonctionnelles globales ont pu être attribuées de manière fiable à 1628 protéines.
[0104] Résultats
[0105] Les résultats sont présentés dans la Figure 5, 6 et 7.
[0106] La composition selon l'exemple 1 dilué à 2% augmente l'abondance globale de toutes les voies, et particulièrement celles liées à la détection et à la réponse aux pathogènes, à la synthèse des protéines, à l'organisation de la paroi cellulaire, à l'équilibre redox, à la production d'énergie, au métabolisme des phénoliques, et à la modification des protéines par les activités de glutathion S-transférase, connues pour participer à maintenir une croissance normale en cas de stress tel que présenté dans le tableau 2 ci-après et les figures 5 à 7.
[0107] [Tableau 2]
Figure imgf000015_0001
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26)
Figure imgf000016_0001
[0108] Une diminution est observée dans l'abondance de protéines liées à la photosynthèse. (Figure 5) Les analyses ont ensuite porté sur les réponses des plantes aux pathogènes. La composition selon l'exemple 1 induit fortement des réponses de défense globales en l'absence de pathogène ; ceci inclut une augmentation de l'abondance des protéines associées à la biosynthèse/sensibilité de l'acide jasmonique (JA), des protéines de choc thermique, des endoglucanases, des peroxydases et du métabolisme secondaire des composés phénoliques (Figure 5 et 6).
[0109] Le traitement des plantes saines avec la composition selon l'exemple 1 augmente ainsi la robustesse globale et le potentiel de résilience des plants de pommes de terre, et agit comme un stimulateur des défenses des plantes, capable d'induire un pré-état de défense contre les pathogènes.
[0110] Les effets de l'action de la composition selon l'exemple 1 contre les pathogènes sont également liés à une augmentation de la synthèse protéique liée à l'équilibre redox, et au remodelage de la paroi cellulaire. La biosynthèse et/ou la détection de l'acide jasmonique et la synthèse des composés phénoliques secondaires sont également augmentées. Ces changements sont soutenus par une production accrue d'énergie et une homéostasie soutenue (Figure 5).
[0111] Ces résultats démontrent que la composition selon l'invention à base de monopotassium phosphate acide permet d'accroitre significativement les mécanismes d'action liés à la croissance de la plante, mais également ceux liés à l'amélioration de la physiologie de la plante. En particulier, elle a un impact positif sur les protéines impliquées dans l'équilibre énergétique et redox, la phytohormone jasmonate, la synthèse des métabolites secondaires et la réorganisation de la paroi cellulaire, ainsi que sur les protéines impliquées dans la défense contre les pathogènes. Ainsi, la composition selon l'invention agit comme un produit nutritif, un produit d'élicitation, un biostimulateur, y compris un stimulateur des défenses des plantes et augmente la robustesse desdites plantes vis-à-vis des agents pathogènes.
[0112] Exemple 7 - Résultat d'essai dans la lutte contre le mildiou de l'artichaut.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) [0113] L'essai vise à évaluer l'efficacité d'un traitement à base d'eau, de la composition selon l'exemple 1 à 2% en comparaison avec un engrais cuprique (Silicuivre, 5% de Cuivre sous forme de sulfate) à 0,5%, sur le mildiou de l'artichaut, Bremia lactucae.
[0114] Le traitement a été appliqué 5 jours avant l'inoculation de la maladie et le pourcentage de feuillage lésé est analysé 9 jours après l'inoculation. Les résultats sont présentés sous la forme d'un score comme indiqué dans le tableau ci-après.
[0115] [Tableau 3]
Figure imgf000017_0001
0116] Les résultats sont présentés dans le tableau suivant.
[0117] [Tableau 4]
Figure imgf000017_0002
0118] Le produit de référence est connu pour son action spécifique sur le mildiou. Il a été appliqué dans des conditions de laboratoire sans risque de lessivage pour ce produit de contact ce qui met la référence dans un optimum d'efficacité. Notre composition est donc significativement performante au regard du dispositif d'essai très favorable à la référence. La composition selon l'invention présente ainsi une bonne efficacité de près de 60% sur le mildiou de l'artichaut.
[0119] Exemple 8 - Résultat d'essai dans la lutte contre le mildiou du chou-fleur.
[0120] L'essai vise à évaluer l'efficacité d'un traitement à base d'eau, de la composition selon l'exemple 1 à 2% et du produit Bion (acibenzolar-S-methyl 50%) à 0,01%, sur le mildiou du chou-fleur, Hyaloperonospora parasitica.
[0121] Le traitement a été appliqué 5 jours avant l'inoculation de la maladie et le pourcentage de feuillage lésé est analysé 9 jours après l'inoculation. Les résultats sont présentés sous la forme d'un score comme indiqué dans le Tableau 3.
[0122] Les résultats sont présentés dans le tableau suivant.
[0123] [Tableau 5]
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26)
Figure imgf000018_0001
0124] Le produit de référence (BION) est un éliciteur connu pour sa performance. Il présente cependant une forte perturbation en termes de sélectivité ce qui rend son utilisation difficile. Les résultats de cet essai montrent que la composition selon l'invention est proche de cette référence avec l'avantage de n'apporter aucun risque de manque de sélectivité vis-à-vis de la plante. La composition selon l'invention présente une bonne efficacité de près de 80% sur le mildiou du chou-fleur.
[0125] Exemple 9 - Résultat d'essai dans la lutte contre le mildiou de la Laitue.
[0126] L'essai vise à évaluer l'efficacité d'un traitement à base d'eau, de la composition selon l'exemple 1 à 2% et du produit Ortiva (azoxystrobine 250 g/L) à 0,2%, sur le mildiou de la Laitue, Bremia lactucae.
[0127] Le traitement a été appliqué 5 jours avant l'inoculation de la maladie et le pourcentage de feuillage lésé est analysé 9 jours après l'inoculation. Les résultats sont présentés sous la forme d'un score comme indiqué dans le Tableau 6.
[0128] Les résultats sont présentés dans le tableau suivant.
[0129] [Tableau 6]
Figure imgf000018_0002
0130] La composition selon l'invention montre une bonne efficacité de près de 90% sur le mildiou de la Laitue en comparaison avec un fongicide de synthèse reconnu.
[0131] Exemple 10- Résultat d'essai dans la lutte contre la tavelure du pommier.
[0132] L'essai vise à évaluer l'efficacité de la composition selon l'invention en combinaison avec un produit de contact tel que l'oxychlorure de cuivre, Captane et Mancozèbe sur la tavelure du pommier en comparaison avec un fongicide systémique de référence, le Trifloxistrobine ou le Tébuconazole en combinaison avec l'un des produits de contact cités précédemment.
[0133] Le traitement a été appliqué 7 fois selon le protocole suivant :
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) Volume de bouillie : 1000 L/ha
Cadence moyenne : 16 jours
Notations sur fruits et sur feuilles (défoliaison en fin de cycle).
[0134] Le traitement est détaillé dans le tableau 7 ci-après. [0135] [Tableau 7]
Figure imgf000019_0001
0136] Les résultats concernant la tavelure du pommier sur les fruits sont présentés dans la figure 3.
[0137] Sur Fruits (Figure 3) : Les inventeurs ont démontré, un effet de la composition selon l'exemple 1 à 0,4% et 0,6% sur la fréquence et l'intensité d'attaque utilisée à 4 L/ha et 6 L/ha en combinaison avec les produits de contact. Cette efficacité (15% de fréquence et 2,5 % d'intensité) est équivalente à celle du programme de référence à base de produits fongicides de contact et systémiques (16,4% fréquence et 2,8 % d'intensité). En effet, l'association produit de contact avec la présente composition performe significativement mieux que les produits de
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) contact utilisés seuls (25% fréquence et 5 % d'intensité).
[0138] Sur feuilles (Figure 4) : Les inventeurs ont démontré un effet de la composition selon l'exemple 1 utilisée à 4 L/ha en combinaison avec les produits de contact. Cette efficacité (16% de défoliaison) est équivalente à celle du programme de référence à base de produits fongicides de contact et systémiques (18% de défoliaison). En effet, l'association produit de contact avec la présente composition performe significativement mieux que les produits de contact utilisés seuls (24% de défoliaison) contre 44% dans le témoin non traité. La dose de l'invention à 6 L/ha ne montre pas de différence. Ainsi, 4 L/ha suffisent en combinaison avec les produits de contact. Cette performance est importante et facilitera la mise en réserve pour la saison suivante.
[0139] Enfin, la composition selon l'exemple 1 ne présente pas de résidus comme indiqué dans le tableau 8 ci-après.
[0140] [Tableau 8]
Figure imgf000020_0001
Limite de quantification (LOQ) : 0,01 ppm.
LMR autorisée en UE : 150 ppm.
[0141] Exemple 11 - Résultat d'essai dans la lutte contre le mildiou de la vigne.
[0142] L'essai vise à évaluer l'efficacité de la composition selon l'exemple 1 en combinaison avec le produit Maniflow (bouillie bordelaise) contre le mildiou sur la vigne à raison d'une quantité inférieure à 4kg Cu/ha/an.
[0143] La parcelle de Merlot comprenant 3 300 ceps/ha à raison de 9 ceps/parcelle a été contaminée artificiellement et non brumisée. Le traitement a été appliqué 4 fois selon le protocole suivant :
Volume de bouillie : 225L/ha
Cadence moyenne : 8 jours
Dose totale Cu : 3 870g
Contamination artificielle le 11 mai, par cèpes contaminateurs.
[0144] Les résultats sont présentés en Figure 1 pour les feuilles de vigne et en Figure 2 pour les grappes.
[0145] Sur feuilles : Les inventeurs ont démontré un effet de la composition selon l'invention
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) utilisée seul sur la fréquence et l'intensité d'attaque. Cette efficacité est équivalente à celle du produit de référence à base de cuivre. Les inventeurs ont également constaté un effet de synergie fort entre la combinaison du produit à base de cuivre et la présente composition selon l'invention sur feuille. En effet, l'association cuivre avec la présente composition performe significativement mieux que le cuivre utilisé seul. Les inventeurs ont ensuite testé 3 modalités à 3, 4 et 6 L de la composition associées à la préparation cuprique. Ils ont observé un faible effet sur l'intensité et la fréquence d'attaque entre les 3 modalités à 3, 4 et 6 L de la composition associées à la préparation cuprique. Ainsi, 3 L/ha suffisent en combinaison avec le cuivre.
[0146] Sur Grappes : La composition selon l'invention ne présente aucun effet, utilisée seul sur la fréquence et l'intensité d'attaque contrairement au produit de référence à base de cuivre. Toutefois, là encore, un effet de synergie fort entre le produit à base de cuivre et la composition selon l'invention sur grappes est présent. L'association cuivre avec ladite composition performe significativement mieux que le cuivre utilisé seul. Enfin, les inventeurs ont cependant observé un faible effet sur l'intensité et la fréquence d'attaque entre les 3 modalités à 3, 4 de la composition associée à la préparation cuprique. La dose de 3 L/ha suffit en combinaison avec le cuivre.
[0147] Exemple 12 - Résultat d'essai sur la présence de résidus phosphite après traitement avec la composition selon l'exemple 1.
[0148] La composition selon l'exemple 1 est préparée de la manière suivante. La composition est diluée dans de l'eau en ajoutant la dose de la composition (1 à 8 L/ha) dans un pulvérisateur rempli à 50% du volume d'eau, puis un mélange par agitation. On complète ensuite avec l'eau complémentaire en maintenant l'agitation. On pulvérise ensuite la bouillie à la dose hectare prévue (50- 3000 L/ha) en fonction du type de culture, du stade végétatif et du type de pulvérisateur (jet porté ou projeté)
[0149] La composition selon l'invention est appliquée sur vigne, sur pommier, sur laitue et sur pomme de terre.
[0150] Les résultats sont présentés dans les tableaux 9, 10, 11 et 12 ci-après.
[0151] [Tableau 9]
Figure imgf000021_0001
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26)
Figure imgf000022_0001
0152] [Tableau 10]
Figure imgf000022_0002
0153] [Tableau 11]
Figure imgf000022_0003
0154] [Tableau 12]
Figure imgf000022_0004
0155] Les résultats présentés dans les tableaux démontrent bien que le traitement apporté par la composition selon l'invention n'apporte aucun résidus phosphites après traitement.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26)

Claims

Revendications
[Revendication 1] Utilisation d'une composition comprenant un mélange d'acide phosphorique et de dihydrogénophosphate, sous forme aqueuse, appliquée sur les plantes comme biostimulant et/ou produit éliciteur et/ou produit nutritif et/ou pour lutter contre les pathogènes, caractérisée en ce que le pH de ladite composition est compris entre 1 et 4.
[Revendication 2] Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le pH est inférieur à 2,5.
[Revendication 3] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le rapport P/K de la composition est compris entre 5,5 :1 et 7 :1.
[Revendication 4] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le rapport P/K de la composition est compris entre 6 :1 et 6,4 :1.
[Revendication 5] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition comprend un mélange constitué d'acide phosphorique, de dihydrogénophosphate et d'eau.
[Revendication 6] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition ne comprend pas d'acide phosphoreux et d'acide phosphonique.
[Revendication 7] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition est utilisée comme biostimulant et produit éliciteur et produit nutritif et pour lutter contre les pathogènes
[Revendication 8] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition comprend du zinc et/ou du manganèse et/ou de la silice.
[Revendication 9] Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le zinc est le Zinc bis(dihydrogen phosphate) ou le sulfate de zinc.
[Revendication 10] Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que la concentration de l'acide phosphorique est comprise entre 5 et 10% et la concentration de Zinc bis(dihydrogen phosphate) est comprise entre 5 et 10%.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26)
[Revendication 11] Utilisation selon l'une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le mélange est utilisée en combinaison avec un produit phytosanitaire et/ou biostimulant et/ou fertilisant et/ou adjuvant.
[Revendication 12] Utilisation selon l'une des revendications précédentes, pour stimuler les défenses de la plante et/ou renforcer le métabolisme de la plante et/ou augmenter la balance redox et/ou augmenter l'homéostasie cellulaire et/ou augmenter la production d'énergie.
[Revendication 13] Procédé de traitement des cultures pour stimuler les défenses de la plante, dans lequel la composition de l'une des revendication 1 à 10 est appliquée pendant au plus 9 jours, préférentiellement 4 jours après l'application.
[Revendication 14] Procédé de traitement des cultures pour stimuler lesdites cultures, caractérisé en ce que la composition de l'une des revendications 1 à 10 est appliquée non diluée à raison de 1 à 8L par hectare ou diluée à raison de 50 à 3000 L par hectare.
[Revendication 15] Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la composition de l'une des revendications 1 à 10 est appliqué par voie foliaire ou racinaire.
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