FR2694159A1 - Composition comprenant de la choline, ou ses dérivés ou ses sels, et utilisable dans le domaine agricole pour favoriser la photosynthèse des plantes. - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole qui peut favoriser la photosynthèse des plantes. La présente invention concerne également le procédé de préparation de cette composition ainsi que son utilisation. La composition selon la présente invention peut accélérer la photosynthèse de différents types de plantes et ainsi augmenter la qualité des cultures et le rendement de ces dernières. La composition comprend une quantité efficace de choline, de ses dérivés ou de sels utilisables dans le domaine agricole, ainsi qu'un support utilisable dans le domaine agricole.

Description

La présente invention concerne une composition, desti-

née à être utilisée dans le domaine agricole, pour favoriser

la photosynthèse des plantes; elle concerne également le pro-

cédé de préparation de cette composition ainsi que l'utili-

sation de cette dernière La présente invention concerne plus particulièrement une composition, favorisant la photosynthèse des plantes, contenant principalement de la choline ou ses dérivés ou sels utilisables dans le domaine agricole, des éléments minéraux, de l'allantoïne ou ses dérivés ainsi qu'un support utilisable dans le domaine agricole, le procédé de

préparation de cette dernière et son utilisation.

La chlorocholine est un additif alimentaire qui est

largement utilisée dans l'alimentation animale depuis 1940.

La chlorocholine favorise l'utilisation de la méthionine chez l'animal Farkas et al ( 1985) ont mis en évidence que la

vitesse de transformation de la chlorocholine en phosphatidyl-

choline augmente après infiltration de 14 C-mévalonate et de stérol dans des feuilles de Phaseolus vulgaris L Sfaudtlunder

et al ( 1982) ont mis en évidence que l'addition de chloro-

choline à une culture de levure induit l'augmentation de la

quantité de phosphatidylcholine jusqu'à un certains niveau.

Kates et al ( 1975) indique que la phosphatidylcholine repré-

sente jusqu'à 27 % de la quantité totale de phospholipides dans les chloroplastes, 62 % étant localisés dans les thylakoids

et 24 % étant localisés au niveau des lamelles stromatiques.

La vitesse de la photosynthèse est liée à l'activité et au taux enzymatique de la Ru BP (ribulose biphosphate) carboxylase (Jensen, Ann, Rev Plant Physiol 28:378-400,

1972), pour ce qui concerne la fonction de la phosphatidyl-

choline qui représente un constituant important des phospho-

lipides pour les enzymes liés à la membrane, des chercheurs ont décrit la phosphatidylcholine comme un agent formant l'environnement hydrophobe qui est nécessaire aux enzymes liés Les enzymes activés et leurs substrats sont alors dans des conditions optimum pour la catalyse enzymatique (Tang, Zhangcheng News-letters of Plant Physiology, 1983 ( 3):8-14,

1981) D'autres chercheurs ont également indiqué que la phos-

phatidylcholine ( 70 % d'acide linoléique) pourrait restaurer

l'activité de l'AT Pase.

Comme chacun le sait, la photosynthèse chez les plantes peut être divisée en des réactions qui ont lieu à la lumière et en des réactions qui se déroulent à l'obscurité L'AT Pase est l'enzyme clé pour la réaction se déroulant à la lumière et la Ru BP carboxylase et la G-3-P déshydrogénase sont des

enzymes clés pour la réaction se déroulant à l'obscurité.

L'augmentation de l'activité de l'AT Pase peut induire l'ac-

célération de la formation d'ATP, ce dernier fournissant l'énergie nécessaire à l'assimilation du CO L'augmentation

de l'activité de la Ru BP carboxylase va entraîner l'augmen-

tation de la quantité de CO qui a été fixée et assimilée.

L'augmentation de l'activité de la G-3-P déshydrogénase va entraîner l'augmentation de la teneur en sucre produit par voie photosynthétique L'accélérateur de la photosynthèse selon la présente invention peut augmenter l'activité des

trois enzymes photosynthétiques clés qui ont été cités ci-

dessus. Lors de leur exposition à la lumière, les plantes non

seulement ont une respiration normale, consommant de l'éner-

gie, mais ont également une espèce de photorespiration qui

peut consommer environ 40 % des nutriments qui ont été photo-

synthétisés par la plante Si la photorespiration pouvait être réduite de 50 %, les rendements en plantes pourraient

être augmentés de plus de 10 % L'agent accélérant la photo-

synthèse selon la présente invention, qui correspond à un inhibiteur idéal de la photorespiration, peut réduire cette

dernière d'environ 50 %.

A l'heure actuelle, l'inhibiteur de la photorespiration

classique le plus utilisé au plan international est l'hydro-

génosulfite de sodium, ce dernier ne pouvant inhiber que 10 à

% de la photorespiration L'agent accélérant la photo-

synthèse selon la présente invention peut cependant inhiber

environ 50 % de la photorespiration.

La présente invention indique, et ce pour la première fois, la possibilité d'utilisation de la choline, de ses

dérivés ou sels, ou de l'allantoïne ou ses dérivés pour favo-

riser la photosynthèse des plantes et pour inhiber leur photo-

respiration Jusqu'à présent, il n'existe aucun rapport ou

aucune invention relative à l'utilisation dans des expérien-

ces ou dans des applications de ces compositions agissant sur la photosynthèse des plantes (l'indication de la littérature scientifique correspondante ainsi que les critiques qui s'y rapportent se trouvent dans une annexe séparée), ni aucun

rapport traitant d'un sujet proche.

A l'heure actuelle, du fait de l'explosion démographi-

que mondiale et de la diminution de la superficie par habi-

tant, la demande croissante en produits agricoles est extrê-

mement importante; notamment, au niveau des pays du Tiers

Monde o la situation de famine est très grave L'agent accé-

lérant la photosynthèse selon la présente invention peut favoriser l'absorption de l'énergie lumineuse et la fixation d'une quantité plus importante de CO et augmenter ainsi le rendement en produit agricole dans les conditions originales de culture Par conséquent, l'invention représente un moyen efficace pour lutter contre la famine et pour augmenter dans

une large mesure les rendements en cultures d'intérêt écono-

mique.

Un objet de la présente invention concerne une compo-

sition destinée à être utilisée dans le domaine agricole qui

peut favoriser la photosynthèse des plantes.

Un autre objet de la présente invention concerne un procédé de préparation et la méthode d'utilisation de la composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole

citée ci-dessus.

La composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la présente invention comprend principalement une quantité efficace de choline, de ses dérivés ou sels utilisables dans le domaine agricole et un support utilisable

dans le domaine agricole.

Cette composition peut éventuellement contenir une quantité efficace d'éléments minéraux et/ou d'allantoïne ou

de ces dérivés.

Les éléments minéraux contenus dans la composition selon la présente invention fonctionnent principalement de trois façons: ( 1) en tant que co-enzyme de l'enzyme clé de la photosynthèse; ( 2) en tant qu'activateur de l'enzyme clé de la photosynthèse; ( 3) en tant que complexe du produit de la photosynthèse pour accélérer le transfert dans le corps de la plante. La fonction de l'allantoïne ou de ses dérivés est d'inhiber une partie de la réaction de photorespiration de façon à ce que la quantité de substance organique consommée

lors de la photorespiration soit minimale et que l'accumula-

tion du produit résultant de la photosynthèse soit maximale.

La composition selon la présente invention peut conte-

nir une certaine quantité de composés auxiliaires, incluant un agent régulant le p H (tel que soude, carbonate de sodium,

etc), un agent mouillant et un tensio-actif.

La composition contient de 0,001 à 99 % de choline, d'un de ses dérivés ou sels utilisables dans le domaine agricole, de O à 30 % d'éléments minéraux, de O à 99 % d'allantoïne ou de

ses dérivés et de O à 25 % de composés auxiliaires.

Un sel de choline ou un de ses dérivés qui peut utilisé dans le domaine agricole peut être un chlorure, bromure, iodure, phosphate, hydrogénophosphate, dihydrogénophosphate,

sulfate, hydrogénosulfate, carbonate, bicarbonate, hydrogéno-

sulfite, tartrate et un dérivé phosphatidylique, le chlorure

étant préféré.

Les éléments minéraux présents dans la composition selon la présente invention peuvent consister en B, Mg, Zn, Mo, S, I, Na, Si, Mn, Cu, Fe, K, Ca, P, etc ou le mélange de

deux ou de plusieurs d'entre eux.

La composition selon la présente invention peut être

utilisée en même temps que d'autres pesticides tels que dif-

férents types de pesticides organophosphoreux (tels que

methamidophos, omethoate, monocrotophos, etc), des pyréthri-

nes (tels que décamethrine, etc) et d'amines condensées, etc Dans un tel cas, on obtient à la fois un contrôle des

insectes/champignons et une augmentation du rendement.

La composition selon la présente invention peut être utilisée sous une forme quelconque et elle de préférence

utilisée en solution aqueuse.

La composition selon la présente invention, utilisée en tant qu'accélérateur de la photosynthèse, peut être appliquée de différentes façons; par exemple, elle peut être appliquée directement sur les feuilles ou sur les grains, ou elle peut être appliquée indirectement, auquel cas, elle est appliquée

sur le milieu o les plantes ou les graines se développent.

Elle peut être appliquée sous différentes formes, en tant que pâte, émulsion, poudre, ou elle peut être pulvérisée, elle peut être appliquée sous la forme de vapeur ou sous la forme de granules à libération lente Elle peut être appliquée sur une partie quelconque du corps de la plante, incluant feuille, tige, racine ou branches Elle peut être appliquée au niveau du sol entourant la racine ou sur les graines avant leur plantation La composition selon la présente invention peut également être injectée dans le corps de la plante ou être

pulvérisée sur les parties végétales par pulvérisation élec-

trique ou par d'autres techniques en volumes faibles La forme de la préparation dépend du but spécifique que l'on

doit atteindre.

Les préparations peuvent être réalisées sous une forme pulvérulente ou sous une forme de granule, auxquels cas le

support ou diluant solide peut être: kaolin, bentonite, dia-

tomite blanche, dolomite, carbonate de calcium, talc, poudre d'oxyde de magnésium, terre de foulon, gypse, diatomite, argile de poterie ou autres adjuvants Les granulés peuvent se présenter sous la forme de granulés prêts à l'emploi,

appropriés pour une application dans le sol sans qu'un trai-

tement supplémentaire ne soit nécessaire Ces granulés peu-

vent être préparés sous la forme de petits globules d'adju-

vant qui se sont imbibés du principe actif ou sont constitués d'un mélange de principe actif et d'adjuvant pulvérulent La préparation destinée au recouvrement des graines peut inclure

un type de réactif (par exemple de l'eau) qui permet l'adhé-

rence de la préparation aux graines La préparation peut également se présenter sous la forme de poudre mouillable ou de granulés qui peuvent être disposés dans l'eau; dans de

tels cas, la préparation doit contenir des agents de disper-

sion ou des agents mouillants qui favorisent la dispersion de cette dernière dans la solution Ces poudres et granulés peuvent également contenir des adjuvants et des agents de

mise en suspension.

Le terme "plante" utilisé ici implique les semis, lar

arbustes ou les arbres.

Le terme "utilisable dans le domaine agricole" signifie

utilisable dans le domaine agricole et horticole.

Le procédé de préparation de la composition selon la présente invention inclut le mélange d'une certaine quantité de choline, d'un de ses dérivés ou sels, utilisables dans le domaine agricole, avec un support utilisable dans le domaine

agricole, puis éventuellement l'addition d'une certaine quan-

tité d'éléments traces, d'allantoïne ou de ses dérivés et/ou d'un ou plusieurs composés auxiliaires, ou le mélange d'une certaine quantité de choline, d'un de ses dérivés ou sels,

utilisables dans le domaine agricole avec une certaine quan-

tité d'éléments minéraux, d'allantoïne ou d'un de ses dérivés et/ou de composés auxiliaires, puis leur mélange avec une certaine quantité de diluant ou de support utilisable dans le

domaine agricole.

La composition peut être utilisée pour accélérer la

photosynthèse de différentes plantes et pour inhiber la photo-

respiration de façon à augmenter grandement l'efficacité de

la photosynthèse La composition confère également aux plan-

tes des caractéristiques de résistance à la sécheresse et à

la déformation.

Les expériences et les exemples de réalisation décrits ci-dessous permettent d'illustrer la présente invention sans

limiter la portée de cette dernière.

Dans un mode de réalisation préféré, la chlorocholine est placée dans un récipient en émail, dans lequel on ajoute

une quantité appropriée d'eau, sous agitation, afin de pré-

parer une solution ayant une concentration de 58 à 73 %, puis on ajoute une certaine quantité d'éléments minéraux et

ltallantoïne pour obtenir des concentrations finales respec-

tives de 1 à 5 % et de 1,00 à 2,50 %, ces derniers étant dis-

sous sous agitation L'acidité de la solution finale est ajustée à un p H neutre L'agent accélérant la photosynthèse se présente finalement sous la forme d'une solution homogène marron. La composition selon la présente invention, préparée selon le procédé décrit ci-dessus, est diluée 1 500 à 2 000

fois, puis elle est introduite dans le cytoplasme des cel-

lules des feuilles des plantes par infiltration sous vide ou par pulvérisation directe Après une certaine période de

temps, les chloroplastes isolés sont extraits et analysés.

Les valeurs obtenues qui sont comparées avec un témoin sont les suivantes: la réactivité de Hill est augmentée de 1,16 à 1,23 fois; l'activité de l'AT Pase est augmentée de 1,6 à 1,9 fois; l'activité de la Ru BP carboxylase est augmentée de 1,2 à 1,4 fois; l'activité de la G-3-P déshydrogénase est

augmentée de 0,5 à 0,8 fois; la teneur en protéine est aug-

mentée de 29,6 à 32,4 %; la teneur en chlorophylle est augmen-

tée de 26,8 à 34,4 %; la vitesse de la photosynthèse est aug-

mentée de 44 à 68 *; et la glycolate oxydase, qui correspond à

l'enzyme clé de la photorespiration, est inhibée à 40-50 %.

Après pulvérisation de la composition selon la présente in-

vention à différentes concentrations et à différents stades

de la croissance des différentes plantes, ces valeurs augmen-

tent plus ou moins Ces résultats indiquent que la composi-

tion selon la présente invention conduit à une activation significative de l'enzyme clé de la photosynthèse, de

l'AT Pase, de la Ru BP carboxylase et de la G-3-P déshydro-

génase et qu'elle conduit à une inhibition importante de

l'enzyme clé de la photorespiration et de la glycolate oxy-

dase Après une recherche internationale effectuée sur ordi-

nateur, aucun rapport se rapportant à une telle étude n'a été

trouvé en Chine ou à l'étranger De plus, les tests de rende-

ment effectués sur des cultures en champs qui ont été pulvé- risées avec l'agent accélérant la photosynthèse montrent que

l'augmentation du rendement est plus significative, que lors-

que l'on utilise d'autres agents accélérateurs destinés à augmenter le rendement Dans le cas de culture en champs, le rendement est supérieur à celui du témoin de 15,5 à 25 %, pour le coton de 16,2 à 22 %, pour les légumes de 30 à 60 % et pour

les arbres fruitiers de 26 à 35 % Toutes ces données indi-

quent que la présente invention correspond à une mesure im-

portante pour résoudre le problème fondamental consistant à favoriser la photosynthèse dans le domaine agricole afin

d'augmenter les rendements De plus, les études de photo-

synthèse qui étaient jusqu'à présent effectuées seulement à

un niveau théorique du fait du coût élevé des réactifs peu-

vent à présent être mises en oeuvre au plan industriel.

Les exemples pratiques suivants illustrent la présente invention. ( 1) Influence de la chlorocholine sur la Ru BP carboxylase et l'AT Pase pure sur du blé d'hiver: des solutions de choline à O ppm, 200 ppm, 500 ppm et 1 000 ppm sont

préparées puis introduites dans les feuilles des plan-

tes par infiltration sous vide; on détermine ensuite la

variation des activités de ces enzymes après leur ex-

traction à partir des feuilles Les procédés de prépa-

ration de détermination et les résultats qui sont obte-

nus sont décrits dans l'exemple d'application no 1.

( 2) Les effets de la chlorocholine sur la Ru BP carboxylase, la G-3-P déshydrogénase, la teneur en chlorophylle, la teneur en protéine et la vitesse de la photosynthèse sont déterminés sur du blé d'hiver à différentes phases

de sa croissance.

On prépare des solutions de chlorocholine à O ppm,

ppm, 500 ppm et 1 000 ppm; ces dernières sont pul-

vérisées sur les plantes à différentes phases de leur croissance puis, après extraction, on détermine les variations qui sont observées au niveau de l'activité de la Ru PB carboxylase, de la G-3-P déshydrogénase, de la teneur en chlorophylle, de la teneur en protéine et de la vitesse de la photosynthèse Se référer à l'exem-

ple d'application N O 2 pour plus de détail.

( 3) Etudes de l'effet de la chlorocholine sur l'augmenta-

tion du rendement de différentes cultures On prépare des solutions de chlorocholine à 0, 20, 50, 100, 200, 500, 1 000 et 2 000 ppm; ces solutions sont pulvérisées sur différentes cultures à différentes

phases de leur croissance On étudie ensuite l'augmen-

tation du rendement de ces différentes cultures qui est induite par la chlorocholine Se référer aux exemples

d'application 4, 5 et 6 pour plus de détail.

( 4) Inhibition de la glycolate oxydase correspondant à

l'enzyme clé de la photorespiration par l'allantoïne.

L'allantoïne, un constituant dans la composition selon la présente invention, agit en tant qu'inhibiteur de la photorespiration, c'est-à-dire qu'il inhibe l'activité

de l'enzyme clé: la glycolate oxydase et, par consé-

quent, une partie de la photorespiration Des plantes présentant une photorespiration importante (notamment des plantes en C 3, c'est-à-dire le blé, le riz, le coton et des légumes, etc) vont consommer une partie des produits résultant de la photosynthèse lors de la photorespiration Par conséquent, leur production est moins importante que celle des plantes présentant une photorespiration peu importante Lorsque 30 à 50 % de la

photorespiration est supprimé, le rendement est aug-

menté de 4 à 10 %.

La présente invention montre que l'addition d'allan-

toïne en différentes concentrations inhibe l'activité de la glycolate oxydase en des proportions différentes et il favorise l'accumulation des produits issus de la photosynthèse ainsi que les rendements Se référer pour

plus de détail à l'exemple d'application 3.

( 5) Effet d'augmentation de la production de la composition selon la présente invention sur différentes cultures de plantes Des solutions de l'agent accélérant la photosynthèse à différentes concentrations sont préparées et elles sont pulvérisées sur du blé, du riz, du coton, de l'ail, des épinards, du céleri, du chou, du concombre, du raisin, des poires, etc L'augmentation des rendements observés

est significative Se référer aux exemples d'applica-

tion no 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 et 16.

EXEMPLE 1

Influence de la chlorocholine sur les activités enzymatiques de la Ru BP carboxylase et de l'AT Pase pures chez le blé La chlorocholine est déterminée par un spectromètre infrarouge Hitachi de type 260-50 Le spectrogramme et le

spectre standard coïncident parfaitement; sa teneur est dé-

terminée par titration anhydre et elle est identifiée par chromatographie en phase gazeuse (SP-2305 E); sa pureté est de 99,99 % On prépare des solutions de chlorocholine à O ppm,

200 ppm et 500 ppm.

La Ru BP, le NADH (coenzyme I), le phosphoinisitide et le gel de glucosan (Sephadex) utilisés dans ces expériences proviennent tous de Sigma Chemical Company U S A. La préparation et la détermination de l'activité de la Ru BP carboxylase sont mises en oeuvre selon le procédé décrit

par Wu Guang-yao (Journal of Plant Physiology, 6, 3 ( 1980).

Les échantillons sont réalisés en trois exemplaires; pour chaque échantillon, 50 g de feuilles de blé sont prélevés, lavés puis essuyés afin d'éliminer l'eau; les feuilles sont ensuite immergées séparément dans des solutions de 200 ppm et de 500 ppm Elles sont chauffées à 300 C pendant 10 minutes; l'un des échantillons est immergé dans de l'eau distillée (O ppm) qui correspond au témoin Ces trois échantillons sont

soumis à une infiltration sous vide ( 750 mm Hg) pendant 40 mi-

nutes jusqu'à ce que les feuilles deviennent transparentes puis elles sont transférées dans un réfrigérateur pendant

1 heure Des quantités égales de 0,5 mole/l de tampon phos-

phate (p H 7,4, contenant 1 mmole d'EDTA et 0,5 mmoles de 1 l mercaptoéthanol) sont ajoutées à chaque échantillon et les

échantillons sont broyées dans un homogénéiseur Les homogé-

néisats sont filtrés sur une double couche de nylon Le p H des filtrats est ajusté à p H 6,4 et ces derniers sont incubés dans de l'eau à 60 C pendant 10 minutes, puis ils sont main- tenus dans un bain de glace Les surnageants liquides sont centrifugés dans une cryocentrifuge (type Zuko RS-20) à 500 x g pendant 10 minutes, après addition de (NH 4)2504 afin d'obtenir des solutions à 35 % de saturation et à 55 % de saturation, les solutions sont de nouveau centrifugées à

10500 x g Les pellets sont remis en suspension dans du tam-

pon phosphate (p H 7, contenant 0,1 mmole d'EDTA et 10 mmoles de mercaptoéthanol) Les solutions remises en suspension sont chargées sur une colonne chromatographique Sephadex G-50 et sur une colonne chromatographique G-200 On ajoute aux éluants ainsi obtenus du (NH 4)2504 de façon à obtenir une solution à % de saturation, les solutions sont ensuite centrifugées pendant 10 minutes Les pellets sont remis en suspension dans

du tampon tri-HC 1 à 0,01 mole/l (p H 7,8) Puis, après relar-

gage des échantillons sur une colonne Sephadex G-25, la Ru BP carboxylase pure est obtenue Cet enzyme se traduit par la présence d'une seule bande après électrophorèse en gel de polyacrylamide L'activité des enzymes est déterminée à l'aide d'un spectrophotomètre UV- 265 (Shimadzu Co) selon le procédé spectrophotométrique de Racker couplé au procédé

d'oxydation du NADH (Racker 1962); le procédé du test multi-

enzymatique est constitué d'un tampon Tris-HC 1 à 90 mmoles/l (comprenant 12 mmoles de Mg C 12, 0,4 mmole d'EDTA, p H 7,8),

mmoles d'ATP, 25 mmoles de Ru BP, 3 mmoles de NADH, 50 mmo-

les de phosphocréatine, 20 mmoles de Na HCO, d'acide phospho-

glycérique kinase, de glycéraldéhyde phosphate déshydrogé-

nase, de Ru BP carboxylase 0,1 ml; la quantité de NADH oxydée

en pmole par minute correspond à l'activité de la Ru BP car-

boxylase. Les résultats sont décrits dans la figure 1 Cette

figure montre que la chlorocholine augmente de façon signi-

ficative l'activité de la Ru BP carboxylase, cette dernière

augmentant de 1,7 fois par rapport au témoin.

Le test de l'activité de 1 'AT Pase au niveau des lamel-

les stromatiques des chloroplastes est effectué selon le procédé de Huang Shuo-hui ("Research Methods of Plant Physiology and Biochemistry" Shanghai Science Publishing House, 1985) et le test permettant de déterminer la teneur en protéine enzymatique est mis en oeuvre selon le procédé

phénol-Folin de Lowry (J Bio Chem 193:263, 1951).

Le procédé de préparation et le test de l'activité de

l'AT Pase située au niveau des lamelles stromatiques des chlo-

roplastes sont mis en oeuvre de la façon suivante: 10 g de

feuilles de blé sont prélevés, lavés et essuyés; à ces der-

nières, on ajoute respectivement des solutions de choline de 0, 200 et 500 ppm; la solution à O ppm sert de témoin Les

solutions sont introduites dans les feuilles de blé par in-

filtration sous vide, pendant 40 minutes, jusqu'à ce que les

feuilles deviennent transparentes La préparation de l'acti-

vateur et des solutions de réactif pour la Mg-AT Pase au ni-

veau des membranes thylakoides sont les suivantes: Solution d'activateur Solution de réactif Tris-HCI, p H 8,0 0,25 mole/i 0,2 ml Tris-H Cl, p H 8,0 0,5 mole/i 0,1 ml Na CI 0,5 mole/i 0,2 ml Mg C 12 0,05 mole/t 0,1 ml Mg C 12 0,05 mole/l 0,2 mlATP 50 mmole/l 0,1 ml DTT 50 mmoie/l 0,2 ml H O 0,2 mi PMS 0,5 mmole/i 0,2 ml Après élimination des débris insolubles grossiers des échantillons de feuilles homogénéisées, les chloroplastes sont remis en suspension dans du Tris-H Cl (p H 7,8) On ajoute 1 ml de suspension de chloroplaste (teneur en chlorophylle environ égale à 0,1 mg/ml) et 1 ml de solution d'activateur,

la photoactivation étant mise en oeuvre pendant 6 minutes.

Trois tubes à essai sont utilisés pour chaque groupe de trai-

tement On ajoute 0,5 ml de la suspension de chloroplaste activée et 0, 5 ml de la solution de réactif; ce mélange est incubé dans un bain d'eau à 37 C pendant 10 minutes (un tube maintenu dans la glace sert de témoin), puis on ajoute 0,1 ml d'acide trichloroacétique à 20 % dans chaque tube à essai afin de stopper la réaction Les échantillons sont centrifugés et

le surnageant de chaque tube est récupéré; 0,3 à 0,5 ml récu-

péré va être utilisé pour la récupération du phosphore inor-

ganique/hydrolysé provenant de l'ATP.

Pour déterminer la teneur en phosphore inorganique, 2,5 ml d'eau distillée sont ajoutés à 0,5 ml de surnageant dans chaque tube, l'ensemble est agité puis 2 ml de molybdate d'ammonium-sulfate ferreux sont ajoutés La réaction colorée

apparaît après 1 minute à la température ambiante La quan-

tité de phosphore est déterminée par une méthode colorimétri-

* que à 600 nm, à partir d'une courbe étalon de phosphore inor-

ganique qui est préparé à partir de solutions de Na HPO 4 à

O,001 M dilué pour obtenir des solutions à différentes concen-

trations dans du molybdate d'ammonium-acide trichloroacétique

à 20 % On représente en abscisses la concentration en phos-

phore inorganique qui a été déterminée par un spectrophoto-

mètre UV-256 à 660 nm et on représente en ordonnées la den-

sité optique A partir de ces données, la courbe étalon est tracée L'activité enzymatique est calculée selon la formule suivante: MP x V/V x 1000/chlorophylle x 60/t = MP/n+g chlorophylle hr

(V et V correspondent au volume des échantillons de réactif).

Les résultats de cette expérience sont décrits dans le

tableau 1 ci-dessous.

TABLEAU 1

Influence de la chlorocholine sur l'AT Pase au niveau des chloroplastes du blé d'hiver Chlorocholine Activité de l'AT Pase (ppm) (mole pi, mg chi h) 0 (témoin) 54,492 100

89,243 164500 104,224 191

Les données du tableau 1 indiquent que la chlorocholine conduit à une augmentation significative de l'activité de l'AT Pase et une solution de chlorocholine à 500 ppm entraîne une augmentation de l'activité de l'AT Pase de 1,9 fois par

rapport au témoin.

EXEMPLE 2

L'influence de la chlorocholine sur l'activité de la Ru BP carboxylase et de la G-3-P déshydrogénase, sur la teneur en chlorophylle, la teneur en protéine et la vitesse de la photosynthèse, est évaluée sur le blé d'hiver à différentes

phases de sa croissance.

La variété de blé d'hiver utilisée dans cette étude correspond à la variété 7225, et la fertilité du sol du champ

expérimental est homogène La taille des parcelles expérimen-

tales correspond à 6 m x 18 m Le taux d'application de l'en-

grais sur chaque parcelle est de 25 mg/mu Le taux de graines pour chaque parcelle est de 2,5 g, ce qui correspond à une quantité de 8,4 kg/mu L'influence de la chlorocholine est

analysée à différentes phases, au niveau des semis, du bour-

geonnement, de la floraison et à maturité, les échantillons de feuilles sont collectés 10 jours après la pulvérisation de

solutions de chlorocholine à 0, 50, 100 et 200 ppm.

( 1) La préparation et la détermination de la G-3-P déshy-

drogénase sont effectuées de la façon suivante: au moment de la phase de croissance, on prélève les quatre premières feuilles inférieures du blé qui constituent

un échantillon pour le test Chaque groupe de traite-

ment contient 10 g de feuilles qui sont prérefroidies, puis on enlève les nervures médianes de ces dernières et on les coupe en morceaux fins On ajoute alors 30 ml

de la solution d'extraction prérefroidie à O C (solu-

tion de tampon Tris-H Cl à 0,05 mole contenant 0,35 mole

de sorbitol, 0,002 mole d'EDTA, 0,1 % de mercaptoétha-

nol, à p H 7,8), puis on broie l'ensemble dans un homo-

généiseur à vitesse élevée Les homogénéisats sont filtrés à travers deux couches de filtres de nylon l 0,140 mm ( 100 mesh)l Le surnageant est centrifugé dans un cryocentrifuge (Seiko type RS-20) à 600 x g, 4500 x g et 9200 x g On détermine l'activité de la G-3-P déshydrogénase de la solution brute de G-3-P déshydrogénase à l'aide d'un spectrophotomètre de

Racker Le système réactionnel enzymatique est cons-

titué de Tris-H Cl 80 pmoles, Mg C 12 10 pmoles (p H 8,4), DTT 2,5 pmoles, ATP-Na 5 pmoles, NADPH 0,2 pmoles, 0,3 ml de la solution enzymatique brute contenant la G-3-P déshydrogénase Tous les composants sont chauffés respectivement à 300 C pendant 10 minutes, puis ils sont mélangés et chauffés de nouveau pendant 15 minutes; les réactions démarrent Dans le témoin, on utilise de

l'eau distillée à la place de la G-3-Pase.

Les résultats de ces tests sont décrits dans la figure 2 Les résultats de la figure 2 montrent l'augmentation

de l'activité de la G-3-P déshydrogénase après pulvéri-

sation de la chlorocholine à différentes concentrations.

( 2) La préparation et la détermination de la Ru BP carboxy-

lase sont effectuées de la façon suivante: 3 feuilles de blé provenant des parties inférieures des plants de

blé sont prélevées à différentes phases de la crois-

sance Chaque échantillon contient 5 g de feuilles de blé prérefroidies, dont les nervures médianes ont été

enlevées et qui ont été coupées en petits morceaux.

12 ml de la solution d'extraction prérefroidie à O C (solution de tampon Tris-H Cl à 0,1 mole/l, contenant 12 mmoles de Mg C 12, 0,36 mmole d'EDTA et 5 mmoles de

mercaptoéthanol, p H 7,8) sont ajoutés à chaque échan-

tillon Le mélange est broyé à l'aide de grains de

quartz dans un mortier prérefroidi, on obtient un homo-

généisat L'homogénéisat est filtré à travers un double filtre de nylon l 0,147 mm ( 100 mesh)l Le surnageant est centrifugé dans un cryocentrifuge à haute vitesse

(Shimadazu Co, type IRS-20) à 10500 x g pendant 15 mi-

nutes et à trois reprises Après centrifugation, le

fluide centrifugé est soumis à une extraction fraction-

née avec (NH 4)2504 à 35-60 % Après l'extraction, la solution enzymatique de Ru BP carboxylase brute est obtenue Avant de déterminer l'activité enzymatique, la solution enzymatique brute est dessalée sur une colonne

Sephadex G-25 avec, comme éluant, du Tris-H Cl à 0,1 mo-

le/l L'activité de la Ru BP carboxylase est déterminée

par le procédé spectroscopique de Racker.

Les résultats de ce test sont décrits dans la figure 3.

La figure 3 montre que, après plusieurs pulvérisations

de chlorocholine à différentes concentrations, l'acti-

vité de la Ru BP carboxylase augmente par rapport au

témoin de 2,1 fois.

( 3) La détermination de la teneur en protéine et en chloro-

phylle est déterminée de la façon suivante: les solu-

tions de chlorocholine présentant les concentrations citées ci-dessus sont pulvérisées sur des plants de blé aux phases de croissance respectives Les teneurs en protéine aux quatre phases de croissance augmentent par rapport au témoin; à la phase de bourgeonnement, la teneur en protéine est la plus élevée et elle de 32,4 % supérieure au témoin, à maturité, la teneur en protéine

augmente de 29,6 % par rapport au témoin.

La teneur en chlorophylle augmente de façon significa-

tive par rapport au témoin pour chaque phase de crois-

sance A maturité, la teneur est supérieure de 34,4 % par rapport au témoin Au moment du bourgeonnement, elle est supérieure de 26,8 % Même au niveau du semis,

la teneur est supérieure de 15,4 * par rapport au té-

moin 5 à 8 jours après la pulvérisation de 500 ppm

d'une solution de chlorocholine, la couleur des feuil-

les des plants à différentes phases de la croissance devient significativement plus sombre Ce phénomène est

visible à l'oeil nu.

( 4) Influence de la chlorocholine sur la vitesse de la chlorosynthèse du blé d'hiver

Au moment de la floraison, on pulvérise sur les feuil-

les de blé, 200 ppm et 500 ppm d'une solution de chlo-

rocholine, puis la vitesse de la photosynthèse est évaluée sur les feuilles de blé à l'aide d'un analyseur de CO 2 par infrarouge Les résultats montrent que la vitesse de la photosynthèse a tendance à augmenter lorsque la concentration en chlorocholine augmente Le traitement dans 500 ppm d'une solution de chlorocholine se traduit par une augmentation de 68,79 % par rapport au témoin, alors que celui effectué avec 200 ppm d'une

solution se traduit par une augmentation de 51,28 %.

La détermination de la teneur en chlorophylle est effectuée selon le procédé décrit par Arnon (Plant

Physiol, 24 ( 1)1-15, 1949).

L'extraction et la détermination de la Ru BP carboxylase à différentes périodes de croissance du blé d'hiver sont effectuées selon le procédé de Feng Fusheng

(Newsletter of Plant Physiology, 1986 ( 6):20-22).

L'extraction et la détermination de la G-3-P déshy-

drogénase à différentes phases de la croissance sont effectuées selon le procédé de Feng Fushen (Newsletter

of Plant Physiology, 1984 ( 4):25-27).

La détermination de la vitesse de la photosynthèse est mesurée à l'aide d'un analyseur de CO 2 par infrarouge selon le procédé de Sestak et al (Infrared Gas

Analysers and Other Physical Analysers, 1971).

EXEMPLE 3

Expérience d'inhibition de l'enzyme clé de la photorespira-

tion: glycolate oxydase par l'allantoïne ( 1) Des solutions d'allantoïne à 0, 10, 50, 100, 200 et 500 ppm sont préparées et pulvérisées sur six groupes de plants de blé au moment du bourgeonnement et au stade de la maturité Des échantillons de ces groupes

sont prélevés 10 jours après.

( 2) L'extraction et la détermination de la glycolate oxy-

dase s'effectuent de la façon suivante: la glycolate oxydase joue un rôle important dans la photorespiration des plants; elle peut oxyder l'acide glycolique en

acide glyoxalique et produire du peroxyde d'hydrogène.

CH 20 H CHO

| 2

COO + 2 COO

C 00 H + 02 C 00 H

Le 2,6-dichlorophénolindolol est utilisé ici en tant qu'accepteur d'hydrogène, il reçoit l'hydrogène libéré du fait de l'oxydation de l'acide glycolique, ce qui entraîne sa réduction; la couleur bleue d'origine du dichlorophénolindolol disparaît alors La réaction mise en oeuvre est la suivante: forme oxydée du dichlorophénolindolol (couleur bleue) + acide glycolique forme réduite du dichlorophénolindolol (incolore) acide glyoxalique Du fait de la présence de l'indophénol oxydase dans

l'extrait brut de la glycolate oxydase, qui peut in-

duire l'oxydation du dichlorophénol indophénol, et par conséquent influencer la valeur du test, il est par conséquent nécessaire d'ajouter du KCN, lequel supprime efficacement l'activité de l'indophénol oxydase mais

n'agit pas sur l'activité de la glycolate oxydase.

1) Préparation de l'extrait brut de glycolate oxydase Des échantillons constitués de 10 g de feuilles de blé provenant des groupes cités cidessus sont récupérés et lavés; après addition de 30 ml d'eau, ils sont broyés dans un mortier refroidi dans la glace, puis ils sont filtrés à travers quatre couches de gaze Le filtrat est centrifugé à

1000 x g dans un cryocentrifuge pendant 15 minu-

tes Après élimination des matières sédimentées, le p H final du surnageant est ajusté à 5,4 à

l'aide d'acide acétique à 10 % puis il est centri-

fugé de nouveau à 3500-4000 x g pendant 15 à minutes de façon à éliminer les protéines contaminantes On ajoute à chaque 10 ml d'extrait brut, 1,4 g de (NH 4)2504 de façon à obtenir une solution à 20 % de saturation La solution est agitée en continu pendant 30 minutes puis elle est centrifugée de nouveau de façon à éliminer le

précipité 0,7 g de (NH 4)2504 est ajouté au sur-

nageant de façon à obtenir 30 % de saturation.

Cette solution est de nouveau centrifugée à 3500-4000 x g pendant 20 minutes Le culot est dissous dans du tampon phosphate, p H 8,0, à 0,2 mole La solution obtenue correspond à une

solution de glycolate oxydase brute.

2.) Détermination de l'activité de la glycolate oxy-

dase Aux six groupes de traitement décrits ci-dessus auxquels on ajoute un témoin de colorimétrie, qui se présentent dans 7 tubes à essai différents, on ajoute 0,6 ml de KCN ( 0,01 mole/l), 0,5 ml de glycolate de potassium à 0,04 mole/l, 0,5 ml de la solution de glycolate oxydase diluée au 1/5, et 1 ml de tampon phosphate On ajoute dans tous les tubes, sauf dans celui correspondant au témoin de

colorimétrie, 0,3 ml de 2,6-dichlorophénolindo-

phénol de façon à ajuster le volume à 3 ml, puis la solution est rapidement transférée dans des cuves présentant un trajet optique de 1 cm et on

mesure la densité optique à 620 nm sur un spectro-

photomètre visible ultraviolet (Hitachi, type UV-265) Dans le tube à essai contenant le témoin, on utilise une solution tampon à la place du 2,6 -dichlorophénolindophénol.

La quantité d'enzyme requise pour réduire la den-

sité de 0,01 correspond à 1 unité Le poids frais de la matière requise correspond à l'activité de

l'enzyme.

3.) Résultats de l'inhibition de l'activité de la glycolate oxydase par l'allantoïne Concentration en Altantoïne (ppm) O 10 50 100 200 500 Phase de bourgeonnement 0-0,9 % -9,2 % -18,5 % -49,4 % -50,1 % Phase de maturité -1,0 % -8,8 % -17,6 % -51,3 % -49,8 % Les résultats du tableau ci-dessus montrent que l'allantoïne inhibe de façon significative la glycolate oxydase; une solution d'allantoïne à

ppm réduit l'activité de cette dernière d'en-

viron 50 % au niveau des deux principales phases de

croissance du blé; par conséquent, la photorespi-

ration ne peut pas être mise en oeuvre Environ % du ribulose 1,5diphosphate produit lors de la photosynthèse ne sont pas consommés lors de la photorespiration Théoriquement, une solution à

ppm d'allantoïne devrait conduire à une aug-

mentation de la production qui devrait être voi-

sine de 10 %.

EXEMPLE 4

Effet de la chlorocholine sur l'augmentation du rendement en blé d'hiver Depuis 1988, des solutions de chlorocholine présentant différentes concentrations et contenant différents éléments mineurs ont été appliquées par pulvérisation en quantités importantes lors d'expériences réalisées sur des surfaces allant de petites parcelles à des champs importants pendant

3 années, toutes les expériences se sont conclus par un suc-

cès. Des solutions de chlorocholine à 0, 100, 200, 500 et

1 000 ppm simplement pulvérisées sur des plants de blé aug-

mentent le rendement dans différentes mesures Les pulvéri-

sations réalisées au stade du bourgeonnement et au moment de

la maturité augmentent le rendement de façon significative.

L'augmentation du rendement est comprise entre 10,6 et 11,8 %.

Une solution à 500 ppm de chlorocholine contenant des élé-

ments minéraux qui a été pulvérisée au moment du bourgeonne-

ment et au moment de la maturité augmente le rendement du blé

d'environ 12,0 à 15,1 %.

EXEMPLE D'APPLICATION 5

Effet de la chlorocholine sur le rendement en coton

La pulvérisation de solution à 200 et 500 ppm de chloro-

choline (la solution à O ppm correspondant au témoin) sur du coton au moment de la formation des bougeons des fleurs et de

la formation des capsules permet une augmentation du ren-

dement d'environ 10 % Lorsque la solution pulvérisée contient des éléments minéraux, la vitesse de chute des capsules et des fleurs est diminuée de 20 % et le rendement en coton est augmentée de 12,2 à 14,8 %, dans ce cas, la quantité de coton

égrené est augmentée de 20 kg.

EXEMPLE 6

Effet de la chlorocholine sur l'augmentation de la production en céleri et en épinard Le céleri et l'épinard sont des végétaux présentant une

période de croissance courte (environ 60 jours) La pulvéri-

sation de chlorocholine accélère la croissance des tiges et

des feuilles et accélère la maturité du fait de l'augmenta-

tion de la teneur en chlorophylle, protéine et sucre qui en résulte Après la pulvérisation de solutions à 200 et 500 ppm

de chlorocholine (la solution de chlorocholine à O ppm cor-

respondant au témoin), le rendement en céleri peut augmenter de 22 % et celui en épinard de 19,2 % L'addition d'éléments mineurs entraîne une augmentation du rendement du céleri de 28 % et, dans le cas des épinards, l'augmentation du rendement est de 25 % Une solution à 100 ppm de chlorocholine permet

également une augmentation du rendement d'environ 10 %.

EXEMPLE D'APPLICATION 7

Effet de la composition selon la présente invention (chloro-

choline, éléments mineurs et allantoïne) sur l'augmentation du rendement en blé d'hiver Les constituants de la composition sont en pourcentage: chlorocholine 63 % éléments mineurs 2,85 % allantoïne 1,23 % soda 0,22 % eau 32,7 % La solution décrite ci- dessus est diluée 1 500 à 2 000 fois, puis elle est pulvérisée sur des plants de blé

respectivement lors des phases de bourgeonnement et de matu-

rité (des pesticides acides faibles ou neutres peuvent être ajoutés) La pulvérisation s'effectue avant 10 heures du matin ou après 4 heures du soir S'il pleut dans la période de 8 heures qui suit la pulvérisation, il est nécessaire de répéter cette dernière 3 à 5 jours après la pulvérisation de l'agent accélérant la photosynthèse, la couleur des feuilles des plants traités devient beaucoup plus sombre que celle du témoin du fait de l'augmentation de la teneur en chlorophylle et les tiges deviennent plus fermes que celles du témoin, jours après un tel traitement Durant la dernière période de la croissance du blé, un vent chaud et sec prédomine dans

la Chine du nord; comme la chlorocholine augmente la résis-

tance à la sécheresse des plants sur lesquels a été pulvé-

risée cette dernière et on a constaté une meilleure résis-

tance à la sécheresse des plants traités que des témoins Le

remplissage des grains se fait normalement, la phase de matu-

rité se traduisant par une couleur jaune constatée sur envi-

ron 2/3 des feuilles et les épis restent verts; notamment, les feuilles du bas ne se dessèchent pas et restent vertes et une photosynthèse normale peut se dérouler, de sorte que les grains obtenus sont mous et pleins et le nombre de grains par épis augmente de 1 à 3 grains (le nombre d'épis/mu moyen est de l'ordre de 400 000; après pulvérisation, le nombre de grains peut augmenter de 40 000 à 120 000 grains/mu), le

poids de 1 000 grains étant augmenté de 2 à 4 g Générale-

ment, au cours de la période de croissance tardive, les raci-

nes des plants de blé deviennent sèches et meurent rapide-

ment Lorsque lragent accélérant la photosynthèse selon la présente invention a été pulvérisé, les racines des plants

restent en vie mais on ne constate pas de maturation tardive.

Dans les expériences des deux dernières années, les résultats montrent une augmentation significative du rendement qui peut

atteindre 15,8-22,4 % Dans un champ de blé typique, l'augmen-

tation du rendement obtenu est de 71,5 kg/mu Sur la figure 4, la partie droite des plants de maïs ont été pulvérisée

alors que la partie gauche sert de témoin.

EXEMPLE 8

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse selon la pré-

sente invention sur l'augmentation du rendement La solution est préparée et diluée selon le procédé décrit dans l'exemple 7 La solution diluée contenant 200 et 500 ppm (solution mère) est pulvérisée respectivement aux phases de bourgeonnement et de maturité; 30 kg de solution diluée sont nécessaires pour pulvériser le feuillage de 1 mu de plants de riz 4 à 8 jours après la pulvérisation, les feuilles deviennent plus foncées que celles du témoin Les

tiges deviennent plus fermes et les bourgeons apparaissent.

Du fait du nombre plus important d'épillet efficace produit après la pulvérisation de l'agent accélérant la photosynthèse au moment du bourgeonnement, le nombre de grains par "ear" pourrait augmenter de 2 à 4 Le nombre moyen de "ear/mu" est de 250 000; cependant au niveau du grain qui a été pulvérisé avec l'agent accélérant la photosynthèse, l'augmentation

pourrait être de 30 000 ears par rapport au témoin La pulvé-

risation de l'agent accélérant la photosynthèse au moment de la maturité augmente la vitesse de remplissage des grains et

mille grains pourraient peser 3 à 5 g de plus que le témoin.

Notamment, en période de pluie, sur les plants de riz sur lesquels a été pulvérisé l'agent accélérant la photosynthèse, la photosynthèse se produit beaucoup plus vite que sur le témoin et ils peuvent mettre en oeuvre une photosynthèse plus ou moins normale Du fait de la présence de tiges plus fermes

sur les plants traités, la résistance à la verse est augmen-

tée Les expériences de ces dernières années montrent que

l'agent accélérant la photosynthèse selon la présente inven-

tion entraîne une augmentation plus importante du rendement en riz qu'il ne le fait pour le blé d'hiver, l'augmentation moyenne étant de 16,8 à 25 % et, pour un champ de riz, l'augmentation peut atteindre une valeur aussi élevée que

kg/mu.

EXEMPLE 9

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur l'augmenta-

tion du rendement en coton La solution est préparée et diluée selon le procédé de l'exemple 7 On pulvérise cette dernière sur les plants à deux moments, au moment de l'apparition des bourgeons de fleur et au moment du développement précoce des capsules 8 à 10 jours après la pulvérisation, la couleur des feuilles devient beaucoup plus foncée que celle du témoin Les tiges

sont plus fermes et les plants se rabougrissent Comme l'a-

gent accélérant la photosynthèse améliore la résistance à la sécheresse, la chute des bourgeons en fleur et des capsules qui est due à la sécheresse doit pouvoir être évitée, tandis qu'en même temps l'augmentation de la teneur en produits issus de la photosynthèse améliore le rapport carbone/azote

(C/N) dont le déséquilibre représente une des causes impor-

tantes de la chute des capsules/fleurs Après la pulvérisa-

tion de l'agent accélérant la photosynthèse, la vitesse de la chute des capsules/fleurs est réduite d'environ 20-40 % par

rapport au témoin (pour le coton ordinaire, cela peut attein-

dre une valeur aussi élevée que 60 %) Le coton est une plante en C 3 (??) typique qui présente une photorespiration très importante L'allantoïne contenue dans l'agent accélérant la photosynthèse peut inhiber une partie de la photorespiration et ainsi augmenter le rendement en conséquence Durant les trois dernières années, la réduction de la chute des capsules en été qui se produit dans les champs sur lesquels a été pulvérisé l'agent accélérant la photosynthèse est le signe marquant d'une augmentation du rendement, laquelle est de 16,2 à 22 %; une augmentation de 30 kg de coton égrené/mu dans

des champs de coton typiques étant obtenue.

EXEMPLE 10

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur l'augmenta-

tion du rendement en ail La solution est préparée et diluée selon le procédé de l'exemple 7 Les plants d'ail sont pulvérisés une fois avant et après leur bourgeonnement Du fait de l'augmentation de la photosynthèse, les feuilles d'ail deviennent vert foncé, le bourgeonnement est plus important, la pellicule est plus ferme représentant environ 1/3 de l'épaisseur par rapport au

témoin, 3 à 5 jours après la pulvérisation Comme la chloro-

choline contenu dans l'agent accélérant la photosynthèse augmente la quantité de produits issus de la photosynthèse et accélère également le transport et le stockage des éléments mineurs B et des nutriments, etc, il peut également y avoir une augmentation du transport de nutriment; la production des gousses d'ail pourrait être augmentée d'environ 15 % et celle des bulbes d'ail pourrait augmenter d'une valeur supérieure ou égale à 50 % La figure 5 représente, sur la partie gauche,

l'ail qui a été traité par l'agent accélérant la photosyn-

thèse et le témoin est représenté sur la partie droite.

EXEMPLE 11

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur le rendement en chou chinois La solution est préparée et diluée selon le procédé de

l'exemple 7 On pulvérise cette solution sur le plant, res-

pectivement lors de la plantation des semis, en phase inter-

médiaire et en phase finale de croissance Le chou chinois

est un légume traditionnel dans la Chine du nord et du sud.

En Chine du sud, ce chou est l'un des légumes qui est dispo-

nible toute l'année Le chou de Chine a une période de crois-

sance courte Comme l'agent accélérant la photosynthèse n'est ni toxique, ni n'entraîne de problème de pollution, il peut être appliqué lors de la période de croissance finale S'il est pulvérisé lors de la plantation des semis, la croissance des plants est accélérée Du fait de l'augmentation de la

quantité de produits issus de la photosynthèse et de la quan-

tité de chlorophylle, les tiges et les feuilles deviennent tendres et plus épaisses, les feuilles se colorent en vert brillant et les plants deviennent uniformes Lors de temps pluvieux dans le sud, les racines ne pourrissent pas et atteignent la phase de maturité 3 à 4 jours avant celle des témoins Dans la figure 6, A représente un chou chinois sur lequel a été pulvérisé l'agent accélérateur et B représente

le témoin.

EXEMPLE 12

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur le rendement en raisin La solution à pulvériser est préparée selon le procédé de l'exemple 7 et elle est diluée avant d'être pulvérisée La solution est pulvérisée respectivement au moment de la phase de floraison précoce, au moment o les fruits sont verts et

au moment o les fruits sont à un stade intermédiaire L'aug-

mentation de la quantité de produits issus de la photosyn-

thèse lors de la phase de croissance précoce, du fait de

l'action de l'agent accélérant la photosynthèse et l'augmen-

tation de l'hormone de croissance du fait de l'action de.

l'élément mineur Zn, se traduisent par un développement des bourgeons de fleur normal, un nombre de grappes de fleurs supérieur et par la production d'un nombre de fruits plus important L'agent accélérant la photosynthèse favorise la formation de sucre lorsque les fruits sont verts ou lorsque les fruits sont à un stade intermédiaire, ce qui favorise une maturité précoce Dans cette expérience, l'augmentation de la production de fruits obtenus après la pulvérisation d'une solution à 200 ppm est de 28 à 32 % Elle est de 30 à 35 % lorsqu'une solution à 500 ppm a été pulvérisée et les fruits se colorent en violet (deviennent matures) 10 à 20 jours plus tôt.

L'augmentation du rendement qui a été obtenue sur dif-

férentes cultures avec la composition selon la présente in-

vention est décrit ci-dessous: Augmentation du rendement de différentes cultures (%): Chlorocholine + Chlorocholine + Cultures Chiorocholine éléments minéraux Allantoïne Eléments minéraux + Attantoïne Blé, millet, riz 10,6-11,8 12,0-15,1 4-6 15,5- 25 maïs, sorgho, coton

9.2-11,5 12,2-14,83 4-8 16,2-22

Végétaux à feuilles18-22 24-28 6-10 30-45 Végétaux à fruits 24-28 26-40 8-10 42-60 Arbres fruitiers 15-18 20-22 4-6 26-35

EXEMPLE D'APPLICATION 13

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur le blé et le concombre lorsqu'il est utilisé en tant qu'agent recouvrant les grains 1 jour avant l'ensemencement du concombre et du blé, 1,6 ml de l'agent accélérant la photosynthèse, préparé selon le procédé de l'exemple 7, sont dilués avec 60 ml d'eau fraîche, de façon à recouvrir les grains qui occupent une surface au sol de 1 mu ( 10 kg de grains de blé ou 1,5 kg de graines de concombre) La vitesse de germination des grains de blé traités est 8,5 % supérieure à celle du témoin (la vitesse de germination du témoin est de 91 %, celle des grains traités est de 99,5 %) La vitesse de germination du concombre traité est 5,1 % supérieure à celle du témoin (la vitesse de germination du témoin est de 19,5 %, celle des graines traitées est de 95,6 %) Le rendement en blé traité est 12,2 % supérieur à celui du témoin et le rendement en concombre

traité est 26,4 % supérieur à celui du témoin.

EXEMPLE 14

Effet de l'agent accélérant la photosynthèse sur le rendement en blé lorsque ce dernier est combiné avec des pesticides

La solution de la composition selon la présente inven-

tion est préparée et diluée selon le procédé de l'exemple 7.

Cette solution à laquelle a été ajoutée du methamidophos dilué au 1/500 ème est pulvérisée sur du blé respectivement en phase de bourgeonnement et en phase de maturité Les plants qui ont été pulvérisés par un mélange agent accélérant la photosynthèse/methamidophos conduisent à un rendement qui est 3 % supérieur à celui qui est obtenu avec les plants qui ont ététraités avec l'agent accélérant la photosynthèse seul et le rendement est de 22,4 % supérieur au témoin (sur lequel a été pulvérisé ni l'agent accélérant la photosynthèse, ni le methamidophos) L'agent accélérant la photosynthèse et le methamidophos n'interfèrent pas l'un avec l'autre lorsqu'ils

*sont pulvérisés ensemble.

EXEMPLE 15

Augmentation du rendement provoqué par l'application de

l'agent accélérant la photosynthèse sous une forme pulvéru-

lente au niveau des tubercules des patates douces Pour préparer une poudre de recouvrement contenant 25 % de chlorocholine, on ajoute à de la bentonite une solution contenant 70 % de chlorocholine, 30 % d'éléments mineurs et 1,23 % d'allantoine 0,5 kg de cette poudre est mélangé avec 9,5 kg de terre; ce mélange est appliqué sur la partie basale

des plants de patates douces à la moitié de la phase de crois-

sance, ces derniers sont arrosés correctement On obtient des

2694159 -

tubercules qui sont beaucoup plus gros et le rendement est de

plus de 40 % supérieur à celui du témoin.

EXEMPLE 16

Augmentation du rendement obtenu après pulvérisation de l'agent accélérant la photosynthèse à l'aide d'un vaporisa- teur électrique sur des plants de concombre La composition selon la présente invention est préparée selon le procédé décrit dans l'exemple 7 La solution obtenue

est diluée et appliquée lors de la période précoce de forma-

tion des fleurs femelles, lors de l'apparition des fruits verts, et lors de la période o les fruits sont en phase

intermédiaire Les pulvérisations effectuées par un vapori-

sateur électrique étant homogènes, le taux de formation des fruits par les plants de concombre est de 10 à 18 * supérieur

à celui du témoin (notamment pour les concombres en serre).

De plus, les fruits sont plus gros et plus tendres Il en résulte que le rendement est de 40 % supérieur à celui du témoin Dans les exemples correspondant à une surface de 4/10 mu en serre (serre en plastique), approximativement 100

catties de concombre peuvent être récoltés tous les jours.

Dans la présente description et dans les revendications

auxquelles elle donne lieu on entend par: mu = à 0,0667 hectares

catties = 1/2 kilogramme.

Claims (11)

REVEND ICAT IONS

1. Une composition destinée à être utilisée dans-le domaine agricole pour favoriser la photosynthèse des plantes, comprenant une quantité efficace de choline, de ses dérivés ou sels utilisables dans le domaine agricole ainsi qu'un

support utilisable dans le domaine agricole.

2. Une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 1, qui comprend de

plus une quantité efficace d'éléments minéraux.

3 Une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 1, qui comprend de

plus une quantité efficace d'allantoïne et de ses dérivés.

4. Une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 1, qui comprend de

plus un ou plusieurs types de composés auxiliaires.

5. Une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient de 0,001 à 99 % de choline, de ses dérivés ou sels, de O à 30 % d'éléments minéraux, de O à 99 % d'allantoïne

ou de ses dérivés et de O à 25 % de composés auxiliaires.

6. Une composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 5, caractérisée en ce

que la choline, ses dérivés ou ses sels consistent en: chlo-

rhydrate de choline, bromhydrate de choline, iodhydrate de choline, phosphate de choline, hydrogénophosphate de choline, sulfate de choline, hydrosulfate de choline, bicarbonate de

choline, hydrosulfite de choline, tartrate de choline, hy-

droxyde de choline ou phosphaditylcholine.

7. La composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 6, caractérisée en ce que les éléments minéraux sont sélectionnés parmi B, Mg, Zn, Mo, S, Mn, Cu, Fe, K, Ca, P, I, Na, Si ou le mélange de deux

ou plusieurs des éléments cités.

8. La composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 7, caractérisée en ce que le support utilisable dans le domaine agricole consiste

en eau.

9. La composition destinée à être utilisée dans le domaine agricole selon la revendication 1, caractérisée en ce que le support utilisable dans le domaine agricole correspond à un support solide classique tel que kaolin, bentonite, diatomite blanche.

10. Un procédé de préparation de la composition selon

les revendications 1 à 9, qui comprend le mélange de la cho-

line, de ses dérivés ou sels utilisables dans le domaine agricole, avec un support utilisable dans le domaine agricole

et éventuellement l'addition d'éléments minéraux, d'allan-

toïne ou de ses dérivés et/ou de composés auxiliaires.

11. Un procédé de préparation de la composition se-

lon les revendications 1 à 9, qui comprend, dans un premier

temps, le mélange de la choline, de ses dérivés ou sels uti-

lisables en agriculture, avec des éléments minéraux, d'allan-

toïne ou de ses dérivés et/ou des composés auxiliaires puis, dans un deuxième temps, le mélange avec un support utilisable

dans le domaine agricole.