WO2022068929A1 - 嘧啶二酮类化合物及其用途 - Google Patents

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WO2022068929A1
WO2022068929A1 PCT/CN2021/122197 CN2021122197W WO2022068929A1 WO 2022068929 A1 WO2022068929 A1 WO 2022068929A1 CN 2021122197 W CN2021122197 W CN 2021122197W WO 2022068929 A1 WO2022068929 A1 WO 2022068929A1
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alkyl
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halogen
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张学军
常少华
李学强
刘勇
王洪强
叶大炳
王永刚
钱丽娜
刘礼飞
张博
杨俊�
李莉娥
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武汉人福创新药物研发中心有限公司
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Definitions

  • the present disclosure belongs to the field of medicinal chemistry. Specifically, the present disclosure relates to pyrimidinedione compounds, and more particularly, the present disclosure relates to a pyrimidinedione compound, a preparation method thereof, and use thereof in the preparation of medicines.
  • CD73 also known as extracellular 5'-nucleotide hydrolase, is an exonuclease belonging to the metallophosphatase superfamily and is a peripheral glycoprotein whose major form is anchored by glycosylphosphatidylinositol (GPI) It is fixed on the plasma membrane with a molecular weight of 70KD and is encoded by the NT5E gene.
  • GPI glycosylphosphatidylinositol
  • CD73 is widely expressed on the cell surface of different tissues, including brain, lung, heart, spleen, lymph node, kidney, colon, vascular endothelium, and bone marrow; it is also expressed on various immune cells, including macrophages, neutrophils, myeloid suppression cells (MDSCs), dendritic cells (DCs), natural killer cells (NKs), and regulatory T cells (Tregs) (Soleimani A et al., Biochimie, 2020, 176:21-30.); a variety of tumor cells also have Highly expressed CD73, such as: melanoma, breast cancer, pancreatic cancer, ovarian cancer, colon cancer and prostate cancer, etc. (Gao Z et al., Biomed Res Int, 2014, 2014:460654.). CD73 is also present in a soluble form (sCD73) in biological fluids, including serum, and preserves holoenzyme activity.
  • sCD73 soluble form
  • CD73 mainly exerts physiological and pathological effects by hydrolyzing AMP (adenosine monophosphate) to produce extracellular adenosine (ADO).
  • ADO is associated with four G protein-coupled receptors (GPCRs): A1 adenosine A2A adenosine receptor (A2AR), A2B adenosine receptor (A2BR) and A3 adenosine receptor (A3AR) play a role, of which A2AR plays a major role (Linden J et al., Annu.Rev.Immunol., 2019, 37:325-347.).
  • GPCRs G protein-coupled receptors
  • Adenosine receptors are not only expressed in tumor cells, but also expressed on the cell surface of immune cells and vascular endothelial cells infiltrated in the tumor microenvironment. After binding to the receptors, ADO produces a variety of immunosuppressive and tumor-promoting effects. .
  • CD73 is closely related to tumor growth, angiogenesis and metastasis. Under normal physiological conditions, the extracellular ADO level is between 20 and 300 nM, but in the tumor microenvironment, the increase is maintained to the micromolar level (30-100 ⁇ M), and the high extracellular ADO concentration is mainly generated by CD73 hydrolysis of AMP affected. Studies have shown that soluble CD73 (sCD73) levels are increased in the plasma of cancer patients compared to healthy individuals (Klemens MR et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1990, 172:1371-7..).
  • CD73 is upregulated in pancreatic ductal carcinoma (PDAC) compared to normal pancreatic tissue and is associated with tumor size, lymph node metastasis, metastasis and poor prognosis (Harvey Jerry B et al, Front Immunol, 2020, 11:508.).
  • PDAC pancreatic ductal carcinoma
  • ORIC-533 significantly reduced the ADO concentration in the tumor microenvironment while reducing tumor volume.
  • CD73 inhibitors can block tumor growth by releasing immunosuppression, and can also be used in combination with other targeted therapies and/or immunotherapy and radiotherapy to increase the anti-tumor effect.
  • CD73 can block tumor growth by releasing immunosuppression, and can also be used in combination with other targeted therapies and/or immunotherapy and radiotherapy to increase the anti-tumor effect.
  • anti-CD73 with anti-PD-L1 (programmed death receptor-ligand 1) and/or anti-CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte-associated protein 4) antibodies was more effective than alone Treatment with anti-PD-L1 and/or anti-CTLA-4 antibodies is more effective (Allard B et al, Clin.
  • CD73 in melanoma patients receiving PD-1 immunotherapy levels were found to be up-regulated, whereas a distinct CD73-high macrophage population persisted in glioblastoma patients after anti-PD-1 treatment, and CD73 deficiency enhanced anti-PD-1 and anti-CTLA-4 in mouse glioblastoma Efficacy in a cell tumor model (Goswami S et al., Nat.Med., 2020, 26:39-46.); radiotherapy leads to the destruction of some tumor cells, so that a large amount of intracellular ATP is released to the outside, on the surface of tumor cells or Under the action of free CD73, it is converted into adenosine, which produces an immunosuppressive effect, which is considered to be one of the reasons for the poor prognosis of some patients after radiotherapy, so the combination of CD73 inhibitor and radiotherapy may have a synergistic effect (Wennerberg E et al., Cancer Immunol Res, 2020
  • CD73 inhibition may be a promising approach to treating tumors.
  • the present disclosure aims to propose a novel CD73 inhibitor, which can be used to prepare a drug for the treatment of tumor-related diseases.
  • the present disclosure proposes a compound, which is a compound represented by formula I, and its tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, pharmaceutically acceptable salt or prodrug:
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Z 1 , Z 2 are each independently selected from N or C;
  • Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from the group consisting of hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted by R b , and said R b substitution may be one or more substitutions, and said R b is each independently For the following substituents: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C 3 -C 6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5 -8-membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; when there are multiple substituents, the substituents are the same or different; the 5-8 membered In the heteroaryl group, the heteroatom is selected from one or more of N, S, O and P, and the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl group, the heteroatom is selected from One or more of N,
  • the compound represented by formula I its tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, pharmaceutically acceptable salt or prodrug are:
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Z 1 , Z 2 are each independently selected from N or C;
  • Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted groups with R b , and said substitutions each independently refer to one or more of the following substituents: C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C 3 -C 6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5-8 membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocyclenyl; when there are multiple substituents, the substituents are the same or different; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and P In one or more of the heteroatoms, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl group, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P, and the heteroatoms are The number of atoms is 1-3; in the 4-8 membered hetero
  • the groups are each independently selected from C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 6 cycloalkyl, 5 -8-membered aryl, 5-8 membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl or 4-8 membered heterocycloalkenyl.
  • the heteroatom of the heteroaryl group is N.
  • the number of heteroatoms in the heteroaryl group is 1-3, preferably 1 or 2.
  • the halogen is F, Cl, Br or I, preferably F or Cl.
  • n 1 or 2
  • m 1 or 1
  • the C 1 -C 6 alkyl group is independently a C 1 -C 4 alkyl group, preferably methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl.
  • R 1 is an unsubstituted or R a substituted C 1 -C 6 alkyl or an unsubstituted or R a substituted C 1 -C 6 alkyl-O-
  • m is 1 or 2, preferably, m is 1.
  • R 1 is a C 1 -C 6 alkyl substituted by Ra or a C 1 -C 6 alkyl-O- substituted by Ra, the number of substitutions 1-3 independently.
  • R 1 is C 1 -C 6 alkyl substituted by Ra , or C 1 -C 6 alkyl-O- substituted by Ra
  • the substitutions are each When independently C 1 -C 6 alkyl, or C 1 -C 6 alkyl-O-, the C 1 -C 6 alkyl described in the substitution is independently C 1 -C 4 alkyl, Preferably methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl.
  • R 1 is independently selected from unsubstituted or R a substituted C 1 -C 3 alkyl or unsubstituted or R a substituted C 1 -C 3 alkyl-O-, Said R a substitution is one or more substitutions, and said R a is each independently selected from the following substituents: halogen, hydroxy, cyano, amino, C 1 -C 6 alkyl.
  • R 1 is independently selected from unsubstituted or R a substituted methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl, said R a Substitution is one or more substitutions, and each of said R a is independently selected from the following substituents halogen, hydroxy, cyano, amino, C 1 -C 6 alkyl.
  • R 1 is independently selected from unsubstituted or substituted methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl, when R a is halogen , the halogen is F, Cl, Br or I, preferably F or Cl.
  • R 1 is independently selected from unsubstituted or R a substituted C 1 -C 4 alkyl, the R a substitution is one or more substitutions, and the R a is independently selected from the following substituents : halogen, hydroxy, cyano, amino, C 1 -C 6 alkyl; wherein m is 1 or 2, n is 0, preferably m is 1 and n is 0.
  • Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 , the total number of said R 2 is 1-3.
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxy, cyano, amino, C 1 -C 6 alkyl unsubstituted or substituted by R b , and said R b substitution is a or multiple substitutions
  • the R b is each independently the following substituents: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C 3 -C 6 -cycloalkyl, 5-8-membered aryl, 5-8-membered heteroaryl, 4-8-membered heterocycloalkyl, or 3-9-membered heterocycloalkenyl; when there are multiple substituents, the The substituents are the same or different; in the 5-8 membered heteroaryl group, the heteroatom is selected from one or more of N, S, O and P, and the number of heteroatoms is 1-3; the 4 In the -8-membered heterocycloal
  • the halogen is F, Cl, Br, I, preferably F or Cl.
  • R 2 is independently selected from unsubstituted or C 1 -C 6 alkyl substituted by R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is each Independently selected from the following substituents: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C 3 -C 6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl base, 5-8 membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and one or more of P, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P , the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterod hetero
  • R 2 is independently selected from unsubstituted or substituted C 1 -C 4 alkyl groups with R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is each Independently selected from the following substituents: halogen, cyano, amino, hydroxy, C1 - C6 alkyl, C1 - C6 alkyl-O-, C3 - C6 cycloalkyl.
  • R 2 is independently selected from unsubstituted or R b substituted methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl, the R b Substitution is one or more substitutions, and each of said R b is independently selected from the following substituents: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C3 - C6cycloalkyl .
  • the C 1 -C 6 alkyl group is independently a C 1 -C 4 alkyl group, preferably methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl.
  • the C 3 -C 6 cycloalkyl is independently cyclopropane, cyclobutane alkane, cyclopentane or cyclohexane, preferably cyclopropane, cyclobutane.
  • R 2 when R 2 is an unsubstituted or substituted 5-8-membered aryl group, the 5-8-membered aryl group is independently phenyl or naphthyl, preferably benzene base.
  • the 5-8-membered heteroaryl group is independently pyrrole, pyrazole, triazine azole, furan, oxazole, thiophene, thiazole, pyridine, pyrazine or pyrimidine, preferably pyrazole, furan, thiophene, pyridine.
  • R 2 when R 2 is an unsubstituted or substituted 4-8-membered heterocycloalkyl group, the 4-8-membered heterocycloalkyl group is independently azetidine , oxetane, tetrahydropyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, hexahydropyran or tetrahydro-2H-thiopyran 1,1-dioxide, preferably azetidine, oxetane .
  • the 4-8-membered heterocycloalkenyl group is independently 1, 2 , 3 ,4-tetrahydropyridyl, 1,2-dihydropyridyl, 1,4-dihydropyridyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, 1,4,5,6-tetrahydropyrimidine base, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, 2-imidazolinyl, 2-pyrazolinyl, dihydroimidazolyl, dihydrooxazolyl, dihydrooxadiazolyl, dihydrothiazolyl, 3,4-dihydro-2H-pyranyl, dihydrofuranyl, or fluorodihydrofuranyl and oxides thereof, preferably dihydrothiazolyl, 3,4-dihydro-2H-pyranyl, dihydrofuranyl, or fluorodihydrofuranyl and oxides thereof, preferably dihydrothiazolyl, 3,4
  • R 2 when R 2 is substituted C 1 -C 6 alkyl, substituted C 3 -C 6 cycloalkyl, substituted 5-8 membered aryl, substituted 5-8 membered hetero
  • R 2 when R 2 is substituted C 1 -C 6 alkyl, substituted C 3 -C 6 cycloalkyl, substituted 5-8 membered aryl, substituted 5-8 membered hetero
  • the number of said substitutions is 3.
  • R 2 when R 2 is substituted C 1 -C 6 alkyl, substituted C 3 -C 6 cycloalkyl, substituted 5-8 membered aryl, substituted 5-8 membered hetero Aryl or substituted 4-8 membered heterocycloalkyl, when each of the substitutions is independently halogen, the halogen is F, Cl, Br or I, preferably F or Cl.
  • R 2 when R 2 is substituted C 1 -C 6 alkyl, substituted C 3 -C 6 cycloalkyl, substituted 5-8 membered aryl, substituted 5-8 membered hetero Aryl or substituted 4-8 membered heterocycloalkyl, the substitution is one or more substitutions, and the substitutions are each independently selected from C 1 -C 4 alkyl, preferably, R 2 is substituted of methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or isobutyl.
  • Z 1 , Z 2 are each independently selected from N or C,
  • R 2 is C 1 -C 6 alkyl substituted by R b , C 3 -C 6 cycloalkyl substituted by R b , 5-8-membered aryl substituted by R b , 5-membered aryl substituted by R b
  • R b When an 8-membered heteroaryl group or a 4-8-membered heterocycloalkyl group substituted by R b is used, the number of said substitutions is 2 or 3.
  • Z 1 , Z 2 are each independently selected from N or C;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino , unsubstituted or C 1 -C 6 alkyl substituted by R b
  • R b substitution is one or more substitutions
  • the R b is independently selected from the following substituents: halogen, cyano, amino , hydroxy, C 1 -C 6 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-O-, C 3 -C 6 cycloalkyl.
  • the halogen is F, Cl, Br, I, preferably F or Cl.
  • R 2 is selected from hydrogen, -F, -Cl, -Br, amino, cyano, -CH 3 , -CF 3 , -CHF 2 or -CH 2 CH 3 .
  • X is selected from C or N;
  • Said Z 1 , Z 2 , Y 1 , Y 2 , Y 3 are as defined above.
  • X is N or C.
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Y 1 and Y 2 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 and Y 2 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted groups with R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is independently selected Substituents from the following: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C1 - C6 alkyl, C1 - C6 alkyl-O-, C3 - C6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5 -8-membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and P One or more of the heteroatoms, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P, and the heteroatoms are The number is 1-3; in the
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Y 1 and Y 3 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted groups with R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is independently selected Substituents from the following: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C1 - C6 alkyl, C1 - C6 alkyl-O-, C3 - C6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5 -8-membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and P One or more of the heteroatoms, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P, and the heteroatoms are The number is 1-3; in the
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted groups with R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is independently selected Substituents from the following: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C1 - C6 alkyl, C1 - C6 alkyl-O-, C3 - C6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5 -8-membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and P One or more of the heteroatoms, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P, and the heteroatoms are The number is 1-3; in the
  • n 0, 1, 2, 3 or 4;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • X is selected from N or C
  • Z 2 is independently selected from N or C
  • Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently selected from N, C, O or S; the Y 1 , Y 2 , and Y 3 are each independently substituted by one or more R 2 ;
  • R 2 is independently selected from hydrogen, halogen, hydroxyl, cyano, amino, unsubstituted or substituted groups with R b , said R b substitution is one or more substitutions, and said R b is independently selected Substituents from the following: halogen, cyano, amino, hydroxyl, C1 - C6 alkyl, C1 - C6 alkyl-O-, C3 - C6 cycloalkyl, 5-8 membered aryl, 5 -8-membered heteroaryl, 4-8 membered heterocycloalkyl, or 3-9 membered heterocycloalkenyl; in the 5-8 membered heteroaryl, the heteroatom is selected from N, S, O and P One or more of the heteroatoms, the number of heteroatoms is 1-3; in the 4-8 membered heterocycloalkyl, the heteroatoms are selected from one or more of N, S, O and P, and the heteroatoms are The number is 1-3; in the
  • the compound represented by formula I its tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, pharmaceutically acceptable salt or prodrug is selected from any of the following compounds :
  • the present disclosure proposes a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective dose of the above compound, its tautomer, stereoisomer, hydrate, solvate, pharmaceutically Acceptable salts or prodrugs and pharmaceutically acceptable excipients.
  • the pharmaceutical compositions of the present disclosure may include therapeutically effective doses of the above-mentioned compounds, tautomers, stereoisomers, hydrates, solvates, and pharmaceutically acceptable salts thereof
  • prodrugs and pharmaceutically acceptable pharmaceutical carriers, diluents or excipients are mixed to prepare pharmaceutical preparations suitable for oral or parenteral administration.
  • Methods of administration include, but are not limited to, intradermal, intramuscular, intraperitoneal, intravenous, subcutaneous, intranasal, and oral routes.
  • the formulations may be administered by any route, such as by infusion or bolus injection, by route of absorption through the epithelium or mucocutaneous (eg, oral mucosa or rectum, etc.). Administration can be systemic or local.
  • formulations for oral administration include solid or liquid dosage forms, specifically, tablets, pills, granules, powders, capsules, syrups, emulsions, suspensions and the like.
  • the formulations can be prepared by methods known in the art and include carriers, diluents or excipients conventionally used in the art of pharmaceutical formulations.
  • the present disclosure proposes the above-mentioned compounds, or tautomers, stereoisomers, hydrates, solvates, pharmaceutically acceptable salts or prodrugs thereof, with PD-1/PD-L1
  • cancers include, for example, bladder cancer, breast cancer, bile duct cancer, rectal cancer, colon cancer, stomach cancer, gallbladder cancer, neuroblastoma, head and neck cancer, liver cancer, lung cancer, lymphoma, medulloblastoma, melanoma, ovarian cancer , pancreatic, prostate or kidney cancer.
  • the present disclosure proposes that the above-mentioned compounds, tautomers, stereoisomers, hydrates, solvates, pharmaceutically acceptable salts or prodrugs thereof, or the above-mentioned pharmaceutical compositions are prepared for use in Use in medicines for treating diseases related to CD73.
  • the above-mentioned compounds or their tautomers, stereoisomers, hydrates, solvates, pharmaceutically acceptable salts or prodrugs or the above-mentioned pharmaceutical compositions are prepared for the treatment of CD73-related diseases Use in a medicament useful in the treatment of cancer.
  • cancers include, for example, bladder cancer, breast cancer, bile duct cancer, colorectal cancer, colon cancer, stomach cancer, gallbladder cancer, neuroblastoma, head and neck cancer, liver cancer, lung cancer, lymphoma, medulloblastoma, melanoma, ovary cancer, pancreatic cancer, prostate cancer, or kidney cancer.
  • the present disclosure provides a method for treating a disease related to CD73, the method comprising administering to a subject the compound represented by the above formula I, its tautomer, stereoisomer, hydrated compounds, solvates, pharmaceutically acceptable salts or prodrugs and/or the above-mentioned pharmaceutical compositions.
  • the CD73-related disease is cancer.
  • cancers include, for example, bladder cancer, breast cancer, bile duct cancer, colorectal cancer, colon cancer, stomach cancer, gallbladder cancer, neuroblastoma, head and neck cancer, liver cancer, lung cancer, lymphoma, medulloblastoma, melanoma, ovary cancer, pancreatic cancer, prostate cancer, or kidney cancer.
  • pharmaceutically acceptable refers to those compounds, materials, compositions and/or dosage forms that, within the scope of sound medical judgment, are suitable for use in contact with human and animal tissue without more toxicity, irritation, allergic reactions or other problems or complications, commensurate with a reasonable benefit/risk ratio.
  • pharmaceutically acceptable salts refers to pharmaceutically acceptable salts of non-toxic acids or bases, including salts of inorganic acids and bases, organic acids and bases.
  • salts are contemplated by the present disclosure. They can serve as intermediates in the purification of compounds or in the preparation of other pharmaceutically acceptable salts or can be used in the identification, characterization or purification of the compounds of the present disclosure.
  • composition means a mixture of one or more compounds described herein, or a physiologically/pharmaceutically acceptable salt or prodrug thereof, and other chemical components, such as a physiologically/pharmaceutically acceptable carrier and excipients.
  • the purpose of a pharmaceutical composition is to facilitate the administration of a compound to an organism.
  • excipient refers to a pharmaceutically acceptable inert ingredient.
  • classes of the term “excipient” include, without limitation, binders, disintegrants, lubricants, glidants, stabilizers, fillers, diluents, and the like. Excipients can enhance the handling characteristics of a pharmaceutical formulation, ie make the formulation more suitable for direct compression by increasing flowability and/or stickiness.
  • prodrug refers to a compound of the present disclosure that can be converted under physiological conditions or by solvolysis to a biologically active compound.
  • the prodrugs of the present disclosure are prepared by modifying functional groups in the compounds, which modifications can be removed by conventional procedures or in vivo to yield the parent compounds.
  • Prodrugs include compounds formed by connecting a hydroxyl group or amino group in the compounds of the present disclosure to any group. When the prodrugs of the compounds of the present disclosure are administered to mammalian individuals, the prodrugs are cleaved to form a free hydroxyl group, a free hydroxyl group, and a free group, respectively. the amino group.
  • stereoisomer refers to isomers resulting from different arrangements of atoms in a molecule in space, and includes cis-trans isomers, enantiomers, diastereomers and conformers.
  • the compounds of the present disclosure may exist as one of the possible isomers or as a mixture thereof, eg, as pure optical isomers, or as mixtures of isomers, eg, as racemic and non-isomeric isomers.
  • the prefixes D and L or R and S are used to denote the absolute configuration of the molecule with respect to the chiral center (or centers) in the molecule.
  • the prefixes D and L or (+) and (–) are symbols used to designate the rotation of plane polarized light by the compound, where (–) or L indicates that the compound is levorotatory.
  • the compounds described herein contain olefinic double bonds, unless otherwise specified, such double bonds include both E and Z geometric isomers. If the compound contains a disubstituted cycloalkyl group, the cycloalkyl group may be in the cis- or trans- (cis- or trans-) configuration.
  • Optically active (R)- or (S)-isomers can be prepared using chiral synthons or chiral preparations, or resolved using conventional techniques.
  • Compounds of the present disclosure containing asymmetrically substituted carbon atoms can be isolated in optically active or racemic forms. Resolution of racemic mixtures of compounds can be carried out by any of a number of methods known in the art. Exemplary methods include fractional recrystallization using chiral resolving acids, which are optically active salt-forming organic acids.
  • Suitable resolving agents for the fractional recrystallization process are, for example, optically active acids such as tartaric acid, diacetyltartaric acid, dibenzoyltartaric acid, mandelic acid, malic acid, lactic acid or various optically active camphorsulfonic acids such as ⁇ - D and L forms of camphorsulfonic acid.
  • optically active acids such as tartaric acid, diacetyltartaric acid, dibenzoyltartaric acid, mandelic acid, malic acid, lactic acid or various optically active camphorsulfonic acids such as ⁇ - D and L forms of camphorsulfonic acid.
  • resolving agents suitable for fractional crystallization methods include ⁇ -methyl-benzylamine in stereoisomerically pure form (eg, S and R forms or diastereomerically pure form), 2-phenylglycinol, Norephedrine, ephedrine, N-methylephedrine, cyclohexylethylamine, 1,2-diaminocyclohexane, etc.
  • Resolution of the racemic mixture can also be performed by elution on a column packed with an optically active resolving agent (eg, dinitrobenzoylphenylglycine). It can be carried out by high performance liquid chromatography (HPLC) or supercritical fluid chromatography (SFC).
  • tautomer refers to an isomer of a functional group resulting from the rapid movement of an atom in two positions in a molecule.
  • Compounds of the present disclosure may exhibit tautomerism.
  • Tautomeric compounds can exist as two or more interconvertible species.
  • Proton tautomers arise from the migration of covalently bonded hydrogen atoms between two atoms.
  • Tautomers generally exist in equilibrium, and attempts to separate individual tautomers usually result in a mixture whose physicochemical properties are consistent with a mixture of compounds. The position of equilibrium depends on the chemical properties within the molecule.
  • the ketone form predominates; in phenols, the enol form predominates.
  • the present disclosure includes all tautomeric forms of compounds.
  • the compounds of the present disclosure may contain unnatural proportions of atomic isotopes at one or more of the atoms that constitute the compounds.
  • compounds can be labeled with radioisotopes, such as deuterium ( 2 H), tritium ( 3 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C). All transformations of the isotopic composition of the compounds of the present disclosure, whether radioactive or not, are included within the scope of the present disclosure.
  • an "effective amount” or “therapeutically effective amount” with respect to a drug or pharmacologically active agent refers to a nontoxic but sufficient amount of the drug or agent to achieve the desired effect.
  • an "effective amount” of one active in a composition refers to the amount required to achieve the desired effect when used in combination with another active in the composition.
  • the determination of the effective amount varies from person to person, depends on the age and general condition of the recipient, and also depends on the specific active substance, and the appropriate effective amount in individual cases can be determined by those skilled in the art based on routine experiments.
  • active ingredient refers to a chemical entity that is effective in treating the target disorder, disease or condition.
  • substituted means that any one or more hydrogen atoms on a specified atom are replaced by a substituent, including deuterium and hydrogen variants, as long as the valence of the specified atom is normal and the substituted compound is stable .
  • Ketone substitution does not occur on aromatic groups.
  • optionally substituted means that it may or may not be substituted, and unless otherwise specified, the type and number of substituents may be arbitrary on a chemically achievable basis.
  • C 1 -C 6 alkyl is understood to mean a straight-chain or branched saturated monovalent hydrocarbon radical having 1, 2, 3, 4, 5 or 6 carbon atoms.
  • the alkyl group is, for example, methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, isopropyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, isopentyl, 2-methylbutyl, 1-methylbutyl, 1-ethylpropyl, 1,2-dimethylpropyl, neopentyl, 1,1-dimethylpropyl, 4-methylpentyl, 3-methylpentyl , 2-methylpentyl, 1-methylpentyl, 2-ethylbutyl, 1-ethylbutyl, 3,3-dimethylbutyl, 2,2-dimethylbutyl, 1,1-dimethylbutyl, 2,3-dimethylbutyl, 1,3-dimethylbut
  • C 1 -C 6 alkoxy should be understood as -O-(C 1 -C 6 alkyl), meaning that the alkyl group is attached to the rest of the molecule through an oxygen atom, wherein “C 1 -C 6 alkyl ” has the above definition.
  • C3 - C6cycloalkyl is understood to mean a saturated monovalent monocyclic or bicyclic hydrocarbon ring having 3 to 6 carbon atoms, including fused or bridged polycyclic ring systems. Such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl.
  • 4-8 membered heterocyclyl or “4-8 membered heterocycloalkyl” is understood to mean a saturated, unsaturated or partially saturated monocyclic, bicyclic or tricyclic ring having 4 to 8 atoms, wherein 1, 2, 3, 4 or 5 ring atoms are selected from N, O and S, which may be attached through carbon or nitrogen unless otherwise specified, wherein the -CH2- group is optionally replaced by -C(O)- and wherein, unless otherwise stated to the contrary, a ring nitrogen atom or a ring sulfur atom is optionally oxidized to form an N-oxide or S-oxide or a ring nitrogen atom is optionally quaternized; wherein -NH in the ring is optionally substituted with acetyl, formyl, methyl or methanesulfonyl; and the ring is optionally substituted with one or more halogens.
  • heterocyclyl group is bicyclic or tricyclic, at least one ring may optionally be a heteroaromatic ring or an aromatic ring, provided that at least one ring is non-heteroaromatic. If the heterocyclyl group is monocyclic, it must not be aromatic.
  • heterocyclyl groups include, but are not limited to, piperidinyl, N-acetylpiperidinyl, N-methylpiperidinyl, N-formylpiperazinyl, N-methanesulfonylpiperazinyl, homopiperazinyl , piperazinyl, azetidinyl, oxetanyl, morpholinyl, tetrahydroisoquinolinyl, tetrahydroquinolinyl, indoline, tetrahydropyranyl, dihydro -2H-pyranyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydrothiopyranyl, tetrahydrothiopyran-1-oxide, tetrahydrothiopyran-1,1-dioxide, 1H-pyridin-2-one and 2,5 -Dioximidazolidinyl.
  • 4-8 membered heterocycloalkenyl is to be understood as a non-aromatic monocyclic or polycyclic group containing 4 to 8 ring atoms, preferably 5 to 6 ring atoms, wherein the 4-8 membered heterocyclic group Cycloalkenyl contains 1 to 3 heteroatoms selected from N, O, S and P and contains at least one carbon-carbon double bond or carbon-nitrogen double bond.
  • Aza, oxa or thia included in the group name means at least one nitrogen, oxygen or sulfur atom, respectively, as a ring atom.
  • the nitrogen or sulfur atom of the 4-8 membered heterocycloalkenyl can optionally be oxidized to the corresponding N-oxide, S-oxide or S-dioxide.
  • Preferred 4-8 membered heterocycloalkenyl groups include, but are not limited to, 1,2,3,4-tetrahydropyridyl, 1,2-dihydropyridyl, 1,4-dihydropyridyl, 1,2,3 ,6-tetrahydropyridyl, 1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, 2-imidazolinyl, 2-pyrazolinyl, dihydroimidazolyl , dihydrooxazolyl, dihydrooxadiazolyl, dihydrothiazolyl, 3,4-dihydro-2H-pyranyl, dihydrofuranyl, fluorodihydrofuranyl and their oxides.
  • 5-8 membered aryl is to be understood as a monovalent aromatic or partially aromatic monocyclic, bicyclic or tricyclic hydrocarbon ring having 5-8 carbon atoms, especially a ring having 6 carbon atoms (" C 6 aryl”), such as phenyl; when the 5-8 membered aryl is substituted, it may be mono- or poly-substituted. Also, the substitution site is not limited, for example, it may be ortho-, para- or meta-substitution.
  • 5-8 membered heteroaryl is to be understood as a monovalent radical having 5-8 ring atoms, especially 5 or 6 carbon atoms, and comprising 1-5 heteroatoms independently selected from N, O and S Monocyclic, bicyclic or tricyclic aromatic ring groups. Monovalent monocyclic, bicyclic or tricyclic aromatic ring groups of 1 to 3 heteroatoms independently selected from N, O and S are preferred and, in addition, may be benzofused in each case.
  • heteroaryl is selected from the group consisting of thienyl, furyl, pyrrolyl, oxazolyl, thiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, isoxazolyl, isothiazolyl, oxadiazolyl, triazolyl, thiazolyl oxadiazolyl, etc.; or pyridyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, triazinyl, etc.; group, carbazolyl group, acridine group, phenazinyl group, phenothiazinyl group, phenoxazinyl group and the like.
  • halo or halogen is fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • the description method "...independently” used in the present disclosure should be understood in a broad sense, meaning that the described individuals are independent of each other and may be independent of each other. are the same or different specific groups.
  • the description mode "...independently” can either mean that in different groups, the specific options expressed in the same match do not affect each other, or it can mean that in the same group, the same symbols are used together. The specific options expressed between them do not affect each other.
  • the present disclosure provides CD73 inhibitors with novel structures, excellent pharmacokinetic properties, and good efficacy or druggability, which can be used to effectively treat CD73-related diseases and disorders.
  • the compound of the present disclosure has a good inhibitory effect on CD73 enzyme, and has a good in vitro drug effect.
  • the experimental results in mice show that the compounds of the present disclosure exhibit excellent pharmacokinetic properties and good druggability.
  • the present disclosure can significantly inhibit the growth of CT-26 colorectal cancer when used alone or in combination with PD-1 antibody, and the compounds of the present disclosure can significantly inhibit E. Role of G7-OVA T-cell lymphoma growth.
  • the structures of the compounds of the present disclosure were determined by nuclear magnetic resonance (NMR) and/or mass spectrometry (MS).
  • NMR nuclear magnetic resonance
  • MS mass spectrometry
  • the units of NMR shifts are 10-6 (ppm).
  • the solvents for NMR measurement are deuterated dimethyl sulfoxide, deuterated chloroform, deuterated methanol, etc., and the internal standard is tetramethylsilane (TMS).
  • M molar concentration, such as 1M hydrochloric acid means 1mol/L hydrochloric acid solution
  • HATU O-(7-azabenzotriazole-1-yl)-N,N,N,N-tetramethylurea hexafluorophosphonium salt
  • DIPEA can also be written as DIEA, diisopropylethylamine, that is, N,N-diisopropylethylamine
  • EGTA ethylene glycol bis(2-aminoethyl ether)tetraacetic acid
  • IC 50 the half inhibitory concentration, which refers to the concentration at which half of the maximum inhibitory effect is achieved.
  • reaction solution was poured into aqueous sodium carbonate solution (500 mL) and aqueous sodium sulfite solution (500 mL), then extracted with dichloromethane (2000 mL ⁇ 2), the organic phases were combined, washed with saturated brine (500 mL), and anhydrous Dry over sodium sulfate, filter, and concentrate to give (1S,2S)-ethyl 2-formylcyclopropane-1-carboxylate (67.0 g, 68% yield) as a yellow oil.
  • the fourth step the synthesis of (1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropane-1-carboxylic acid ethyl ester
  • reaction mixture was quenched with saturated aqueous sodium bicarbonate solution (1000 mL), then extracted with dichloromethane (500 mL ⁇ 2), the organic layers were combined, washed with saturated brine (1000 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain A yellow oil (1S,2S)-ethyl 2-(difluoromethyl)cyclopropane-1-carboxylate (95 g, crude) was used directly in the next step.
  • the sixth step synthesis of 1,3-dioxoisoindolin-2-yl (1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropane-1-carboxylate
  • the seventh step 2-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborane synthesis
  • the synthetic route of target compound 1 is as follows:
  • 5-chloro-7-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2-a]pyrimidine 500 mg, 1.71 mmol
  • 2-((1S, 2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborane 747.5 g, 3.43 mmol
  • dichlorobis [Di-tert-butyl-(4-dimethylaminophenyl)phosphine]palladium(II) (121.4 mg, 0.171 mmol)
  • cesium carbonate (1.40 g, 4.29 mmol) was dissolved in 1,4-dioxane ( 30 mL) and water (6 mL), and then reacted at 100 °C for 2 hours under nitrogen protection.
  • Step 4 5-(5-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-a]pyrimidin-7-yl)pyrimidine-2,4(1H Synthesis of ,3H)-dione
  • the synthetic route of target compound 2 is as follows:
  • the first step Synthesis of 3,6-dichloro-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyridazine
  • reaction mixture was diluted with water (50 mL), then extracted with ethyl acetate (100 mL*3), the organic phases were combined, washed with saturated brine (100 mL), dried over sodium sulfate, and concentrated to obtain the crude product.
  • the third step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyridazine-3-carbonitrile Synthesis
  • reaction solution was added to water (30 mL), extracted with ethyl acetate (30 mL ⁇ 3), the organic phase was washed twice with saturated brine (50 mL), and then the organic phase was dried with anhydrous sodium sulfate.
  • the fourth step (4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyridazin-3-yl ) synthesis of methylamine
  • Step 6 5-(4-(((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,5-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine-2,4 Synthesis of (1H,3H)-dione
  • the synthetic route of target compound 3 is as follows:
  • the first step Synthesis of 6-chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazine
  • Step 2 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2- Synthesis of b]pyridazine
  • 6-Chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazine (30 mg, 114.59 ⁇ mol) and (2,4-difluoromethyl) Methoxypyrimidin-5-yl)boronic acid (42.16 mg, 229.17 ⁇ mol) was dissolved in 1,4-dioxane (1 mL) and water (0.5 mL), and sodium carbonate (30.36 mg, 286.46 mg) was added under nitrogen ⁇ mol) and [1,1-bis(diphenylphosphino)ferrocene]dichloride palladium (16.77 mg, 22.92 ⁇ mol), the temperature was raised to 100° C.
  • the third step 5-((8-(1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2,4( Synthesis of 1H,3H)-dione
  • the synthetic route of target compound 4 is as follows:
  • the first step Synthesis of 4-chloro-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1-methyl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine
  • Step 2 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1-methyl-1H - Synthesis of Pyrazolo[3,4-b]pyridine
  • reaction mixture was diluted with water (5 mL) and extracted with ethyl acetate (20 mL ⁇ 3). The organic layers were combined, washed with saturated brine (10 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to obtain the crude product.
  • the third step 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-1-methyl-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine-6- Synthesis of pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • bromoacetone (2.3 g, 16.8 mmol) was added to the flask containing 4-bromo-6-chloropyridazin-3-amine (0.5 g, 2.4 mmol), and the reaction was carried out at 90°C overnight. Cool to room temperature, add petroleum ether (10 mL), filter, wash the filter cake with petroleum ether (10 mL ⁇ 3), collect the filter cake, spin dry to obtain a yellow solid 8-bromo-6-chloro-2-methylimidazo[1 ,2-b]pyridazine (0.5 g, 85% yield).
  • the second step Synthesis of 6-chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-methylimidazo[1,2-b]pyridazine
  • the third step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-2-methylimidazo Synthesis of [1,2-b]pyridazine
  • 6-chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-methylimidazo[1,2-b]pyridazine 140 mg, 0.543 mmol
  • (2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)boronic acid 300 mg, 1.630 mmol
  • [1,1-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride 39.8 mg
  • 0.054 mmol a mixed solution of sodium carbonate (173 mg, 1.630 mmol) in 1,4-dioxane (8 mL) and water (2 mL) was warmed to 100 ° C, reacted at this temperature for 3 h.
  • Step 4 5-(8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-methylimidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine Synthesis of -2,4(1H,3H)-dione
  • the synthetic route of target compound 6 is as follows:
  • the first step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-3-(1-ethyl) Synthesis of oxyvinyl)pyridazine
  • Step 2 1-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyridazine-3 -Synthesis of Ethan-1-one
  • the third step 1-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyridazine-3 -Synthesis of ethyl) ethyl-1-amine amine
  • the fourth step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-methylimidazo Synthesis of [1,5-b]pyridazine
  • the synthetic route of target compound 7 is as follows:
  • the first step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-7-(trifluoromethyl) Synthesis of yl)imidazo[1,5-b]pyridazine
  • Step 2 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-7-(trifluoromethyl)imidazo[1,5-b]pyridazine-2 Synthesis of -yl)pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • the crude product was purified by slurrying with methanol (10 mL) and water (50 mL) and filtered to give 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-7-(trifluoromethyl) as a grey solid ) imidazo[1,5-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione (99.2 mg, 30.4% yield).
  • the synthetic route of target compound 8 is as follows:
  • the first step the synthesis of (S)-2-chloro-3-methylbutan-1-ol
  • the second step the synthesis of (R)-2-isopropyl oxirane
  • the third step the synthesis of (1S,2R)-2-isopropylcyclopropane-1-carboxylic acid ethyl ester
  • Triethyl phosphoryl acetate (14.3 g, 63.8 mmol) was dissolved in 1,4-dioxane (20 mL), and then n-butyllithium (2.5 M, 30.2 mL) was added dropwise at 0°C. After completion, the reaction solution was stirred at 25°C for 0.5 hours, then the reaction solution was transferred to a stuffy tank, and then (R)-2-isopropyloxirane (5.00 g, 58.1 mmol) in 1,4 was added.
  • - Dioxane solution (10 mL). Tighten the stuffy jar, heat it up to 145°C and react for 12 hours.
  • the fourth step the synthesis of (1S,2R)-2-isopropylcyclopropane-1-carboxylic acid
  • the fifth step the synthesis of 3,6-dichloro-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazine
  • an aqueous solution of silver nitrate (3.57 g, 21.0 mmol, 25 mL) was added rapidly, and then an aqueous solution of ammonium persulfate (28.8 g, 126.2 mmol, 50 mL) was slowly added dropwise, and the reaction was continued at 70° C. for 1 hour.
  • the pH of the reaction solution was adjusted to about 9 with aqueous ammonia, then extracted with ethyl acetate (200 mL ⁇ 2), the organic layers were combined, the organic phase was washed with saturated brine (100 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain the crude product .
  • the sixth step the synthesis of 3-chloro-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazine
  • the seventh step the synthesis of 6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazine-3-carbonitrile
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazine-3-carbonitrile (1.90 g, 5.84 mmol ) was dissolved in methanol (30.0 mL), under nitrogen protection, Raney nickel (1.50 g, 17.5 mmol) was added, then replaced with hydrogen 3 times, and then reacted at 50° C. for 10 hours under 50 Psi pressure.
  • Step 9 2-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)imidazo[1,5-b]pyridin Synthesis of oxazine
  • the first step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-7-methylimidazo Synthesis of [1,5-b]pyridazine (9A)
  • Step 2 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-7-methylimidazo[1,5-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine Synthesis of -2,4(1H,3H)-dione (9)
  • the synthetic route of target compound 10 is as follows:
  • the first step Synthesis of 1,3-dioxoisoindol-2-yl (1S,2R)-2-isopropylcyclopropane-1-carboxylate (10A)
  • the third step Synthesis of 6-chloro-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazin-3-amine (10C)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazin-3-amine 200 mg, 0.634 mmol
  • 1,4-dioxane 10 mL
  • chloroacetaldehyde 622.3 mg, 40% aqueous solution, 3.17 mmol
  • Step 6 5-(8-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2,4(1H,3H )-diketone (target compound 10)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-8-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazine 200 mg , 0.589 mmol was dissolved in hydrochloric acid (1 M, 5 mL), and the temperature was raised to 70 °C for 2 hours.
  • the synthetic route of target compound 11 is as follows:
  • the first step Synthesis of 6-chloro-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine (11B)
  • the reaction mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 2). The organic layers were combined, washed with saturated brine (50 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain the crude product.
  • the third step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2- Synthesis of b]pyridazine(11D)
  • reaction mixture was diluted with water (30 mL), then extracted with ethyl acetate (20 mL ⁇ 2), the organic layers were combined, washed with saturated brine (50 mL ⁇ 3), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain yellow solid compound 3 -Chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2-b ]pyridazine (11E) (200 mg, 65.7% yield).
  • Step 5 5-(3-Chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine- Synthesis of 2,4(1H,3H)-diketone (11)
  • the synthetic route of target compound 12 is as follows:
  • the first step Synthesis of 3-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-3-oxopropionic acid ethyl ester (12A)
  • Triethylamine (66.8 g, 659.8 mmol), magnesium chloride (27.9 g, 293.9 mmol) and monoethyl malonate potassium salt (37.5 g, 220.4 mmol) were added to acetonitrile (600 mL) at 25 °C, followed by It was stirred at 25°C for 3 hours.
  • Ethyl 3-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-3-oxopropanoate (5.80 g, 28.1 mmol) was added to 2M aqueous sodium hydroxide at 25°C (57.9mL), and then stirred at 25°C for 12 hours. After the reaction was completed, 1M aqueous hydrochloric acid was added dropwise to the reaction solution to adjust the pH to 2-3, and then extracted with ethyl acetate (100mL ⁇ 2).
  • the third step Synthesis of 3-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-3-oxo-N-(1H-pyrrol-1-yl)propanamide (12C)
  • Step 4 Synthesis of 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyrrolo[1,2-b]pyridazin-2(1H)-one (12D)
  • Step 7 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyrrolo[1,2-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine-2,4( Synthesis of 1H,3H)-diketone (12)
  • 2,4-Dichloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine 500 mg, 2.66 mmol
  • 2-[(1S,2S)-2-(difluoromethyl) ring propyl]-4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolane 638 mg, 2.93 mmol
  • potassium phosphate (1.69 g, 7.98 mmol) were dissolved in dioxane ( 10 mL) and water (0.5 mL), under nitrogen protection at 25°C, was added dichlorobis(triphenylphosphine)palladium(II) (187 mg, 266 ⁇ mol), and the mixture was stirred at 80°C for 12 hours.
  • Step 2 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyrrolo[2,1- Synthesis of f][1,2,4]triazine (13B)
  • Step 3 5-(4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl ) pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione (13) synthesis
  • Step 2 5-(2-Chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine- 2,4(1H,3H)-dione (target compound 14)
  • the first step Synthesis of 6-chloro-4-((1S,2S)-2-(fluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine (15B)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2S)-2-(fluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine 230 mg, 753 ⁇ mol
  • the mixture was dissolved in dioxane (6 mL), chloroacetaldehyde (370 mg, 40% aqueous solution, 1.83 mmol) was added, and the mixture was reacted at 100° C. for 5 hours.
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-8-((1S,2S)-2-(fluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazine 250 mg, 759 ⁇ mol
  • N,N-dimethylformamide 5 mL
  • N-chlorosuccinimide 44 mg, 759 ⁇ mol
  • Step 5 5-(3-Chloro-8-((1S,2S)-2-(fluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2 Synthesis of ,4(1H,3H)-dione (15)
  • reaction solution was concentrated to obtain a crude product, which was adjusted to alkaline by adding saturated sodium carbonate, filtered, and methanol (10 mL) was added to the filter cake and heated under reflux to make a light yellow solid compound 5-(3-chloro-8-((1S, 2S)-2-(fluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione (15) (32 mg, yielded rate 32.9%).
  • Step 2 5-(2,3-Dichloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl ) pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione (16) synthesis
  • the first step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-2-(trifluoromethyl) Synthesis of yl)imidazo[1,2-b]pyridazine (17A)
  • Step 2 5-(8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(trifluoromethyl)imidazo[1,2-b]pyridazine-6 -yl)pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione (target compound 17)
  • Step 2 1-(6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridazin-3-yl) Ethan-1-one (18B)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-3-(1-ethoxyvinyl)-4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)pyridin The oxazine (700 mg, 1.89 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (3 mL), hydrochloric acid (0.5 M, 3.78 mL) was added dropwise, and the reaction was carried out at 20° C. for 2 hours.
  • reaction solution was poured into an aqueous solution of sodium carbonate (10 mL), extracted with ethyl acetate (20 mL ⁇ 2), the organic phases were combined, washed with saturated brine (50 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated. The crude product was obtained, which was then separated by reversed-phase high performance liquid chromatography.
  • the fifth step 5-(4-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)-5-methylimidazo[1,5-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine-2, 4(1H,3H)-dione (target compound 18)
  • the first step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-2-ethylimidazo Synthesis of [1,2-b]pyridazine (19A)
  • Step 2 5-(8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-ethylimidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine Synthesis of -2,4(1H,3H)-dione (19)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-8-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazine (269.0 mg, 792.1 ⁇ mol) was dissolved in N-N dimethylformamide (3 mL), then N-chlorosuccinimide (105.1 mg, 792.1 ⁇ mol) was added dropwise, and the reaction was carried out at 25° C. for 1 hour.
  • Step 2 5-(3-Chloro-8-((1S,2R)-2-isopropylcyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2,4 (1H,3H)-dione (target compound 20)
  • the synthetic route of target compound 21 is as follows:
  • the first step 4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,5- Synthesis of b]pyridazin-7-amine (21A)
  • Step 2 5-(7-Amino-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,5-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine- 2,4(1H,3H)-dione (target compound 21)
  • the first step Synthesis of 1,3-dioxoisoindol-2-yl (1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropane-1-carboxylate (22B)
  • the third step Synthesis of 6-chloro-4-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine (22D)
  • 6-Chloro-4-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine (170 mg, 654 ⁇ mol) and (2,4-dimethoxypyrimidine-5 -yl)boronic acid (144 mg, 785 ⁇ mol) was dissolved in dioxane (5 mL) and water (1 mL), and sodium carbonate (208 mg, 1.96 mmol) and [1,1′-bis(diphenyl) were added under nitrogen protection Phosphine)ferrocene]dichloropalladium dichloromethane complex (107 mg, 131 ⁇ mol), the temperature was raised to 80° C. to react for 1 hour.
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-4-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine 100 mg, 293 ⁇ mol
  • dioxane 2 mL
  • chloroacetaldehyde 115 mg, 40% aqueous solution, 586 ⁇ mol
  • Step 6 3-Chloro-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-8-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[ Synthesis of 1,2-b]pyridazine(22G)
  • Step 7 5-(3-Chloro-8-(((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine Synthesis of -2,4(1H,3H)-dione (22)
  • the first step 5-(8-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine-2,4( Synthesis of 1H,3H)-diketone (23)
  • 6-(2,4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)-8-((1S,2S)-2-(trifluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridin The oxazine (20 mg, 54.8 ⁇ mol) was dissolved in tetrahydrofuran (0.5 mL), a hydrochloric acid solution (1 M, 0.5 mL) was added, and the reaction was stirred at 50° C. for 2 hours. After the reaction was completed, the reaction solution was concentrated to obtain a crude product.
  • the first step Synthesis of 6-chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropane)imidazo[1,2-b]pyrazine (24B)
  • 6-Chloro-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyridazin-3-amine (2.00 g, 8.88 mmol) was dissolved in dioxane (30 mL), Chloroacetaldehyde (2.61 g, 13.3 mmol, 40% aqueous solution) was added at 25°C, followed by stirring at 90°C for 2 hours.
  • the second step Synthesis of 6-chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-3-fluoroimidazo[1,2-b]pyridazine (24C)
  • 6-Chloro-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropane)imidazo[1,2-b]pyrazine (700 mg, 2.87 mmol) was dissolved in N,N-dimethyl To formamide (15 mL), 1-chloromethyl-4-fluoro-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octanebis(tetrafluoroborate) salt (1.22 g, 3.45 mmol) was added at 25°C ), followed by stirring at 80°C for 12 hours.
  • the third step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-3-fluoroimidazo[ Synthesis of 1,2-b]pyridazine(24D)
  • the reaction system was spin-dried to obtain a crude product.
  • Step 4 5-(8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-3-fluoroimidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine- Synthesis of 2,4(1H,3H)-diketone (24)
  • the first step 3-bromo-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[ Synthesis of 1,2-b]pyridazine(25A)
  • Step 2 5-(3-Bromo-8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl)pyrimidine- Synthesis of 2,4(1H,3H)-diketone (25)
  • the first step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5- Synthesis of yl)imidazo[1,2-b]pyridazine-3-carbonitrile (26)
  • reaction solution was concentrated, and then separated by high performance liquid chromatography.
  • the first step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2- b]Ethyl pyridazine-2-carboxylate (27A)
  • reaction solution was poured into water, filtered, the filter cake was collected, and dried to obtain a crude yellow solid compound 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2, 4-Dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2-b]pyridazine-2-carboxylic acid ethyl ester (27A) (880.0 mg, crude).
  • Step 2 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2- b] Pyridazine-2-carboxylic acid (27B)
  • the fourth step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5- yl)imidazo[1,2-b]pyridazine-2-carboxamide (27D)
  • the fifth step 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5- yl)imidazo[1,2-b]pyridazine-2-carbonitrile (target compound 27)
  • the first step (8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2 Synthesis of -b]pyridazin-2-yl)methanol (28A)
  • Ethyl pyridazine-2-carboxylate 100 mg, 238.5 ⁇ mol was added to tetrahydrofuran (1.00 mL), then lithium tetrahydroaluminum (18.1 mg) was added to the reaction solution in portions at 0°C under nitrogen protection , 476.9 ⁇ mol), and then stirred at 45°C for 2 hours.
  • Step 2 8-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-6-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)imidazo[1,2- Synthesis of b]pyridazine-2-carbaldehyde (28B)
  • the first step 7-chloro-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)-2-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)pyrrolo[ Synthesis of 1,2-b]pyridazine(29A)
  • Step 2 5-(7-Chloro-4-((1S,2S)-2-(difluoromethyl)cyclopropyl)pyrrolo[1,2-b]pyridazin-2-yl)pyrimidine- Synthesis of 2,4(1H,3H)-diketone (29)
  • Test Example 1 In vitro inhibitory activity of the compound on recombinant human CD73 enzyme
  • ATP Sigma; A7699-1G
  • Tris-MgCl 2 buffer Tris-MgCl 2 buffer
  • the final concentration was 100 ⁇ M, mix well, and continue Incubate for 5 min and detect with ATP-GLO kit (Promega; G7573).
  • test compound IC50 (nM) 1 91.05 2 9.989 3 12.08 4 561 5 56.27 6 47.09 7 450 8 38.91 9 80.19 10 16.84 11 14.92 12 36.61 13 802.6 14 38.91 15 46.65 16 71.38 17 12.77 18 39.74 19 40.81 20 18.69 twenty one 18.52 twenty two 21.05 twenty three 38.60 twenty four 13.88 25 17.81 26 277.6 27 86.31
  • mice Pharmacokinetic test in mice, using male ICR mice, 20-25 g, fasted overnight. Three mice were taken and administered by oral gavage (10 mg/kg). Blood was collected before administration, and at 15, 30 minutes and 1, 2, 4, 8, and 24 hours after administration; another 3 mice were taken and administered intravenously (3 mg/kg) before administration, and Blood was collected at 15, 30 minutes and 1, 2, 4, 8, and 24 hours after administration. Blood samples were centrifuged at 6800g at 2-8°C for 6 minutes, and plasma was collected and stored at -80°C.
  • mice experiments show that the compounds of the present disclosure exhibit excellent pharmacokinetic properties and good druggability.
  • the CT-26 cells in log phase were resuspended in PBS, and 5x10 5 CT-26 cells were inoculated subcutaneously at the right rear of the mice at 100 ⁇ L/mouse, and the tumor growth was observed regularly.
  • the mice were randomly divided into a model group and an administration group (single drug, combined with PD-1 antibody) according to the tumor size and the body weight of the mice. Before administration and during administration The tumor size and animal body weight were measured and recorded, and the difference in tumor size between the model group and the administration group was compared after the treatment to determine the drug effect.
  • mice After the mice were adaptively reared for one week, the E.G7-OVA cells in log phase were resuspended in PBS, and an appropriate number of E.G7-OVA cells were inoculated subcutaneously at the right rear of the mice at 100 ⁇ L/mouse.
  • the tumor growth was observed regularly, and when the tumor grew to an average volume of 80-100 mm, the mice were randomly divided into a model group and an administration group (single drug, combined with PD- 1 antibody) according to the tumor size and the weight of the mice.
  • the tumor size and animal body weight were measured and recorded during the administration, and the difference in tumor size between the model group and the administration group was compared after the treatment to determine the drug effect.
  • the experimental results show that the compounds of the present disclosure can significantly inhibit the growth of E.G7-OVA T-cell lymphoma when used alone or in combination with PD-1 antibody.

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Abstract

式I所示的抑制CD73活性的化合物及其制备方法和在制备药物中的用途。

Description

嘧啶二酮类化合物及其用途
优先权信息
本申请请求2020年09月30日向中国国家知识产权局提交的、专利申请号为202011060399.4的专利申请的优先权和权益，并且通过参照将其全文并入此处。
技术领域
本公开属于医药化学领域，具体的，本公开涉及嘧啶二酮类化合物，更具体的，本公开涉及一种嘧啶二酮类化合物及其制备方法，以及其在制备药物中的用途。
背景技术
CD73又称为胞外5’-核苷酸水解酶，属于金属磷酸酯酶超家族的外切核酸酶，是一种外周糖蛋白，其主要形式是通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定在质膜上，分子量为70KD，由NT5E基因编码。CD73广泛表达于不同组织的细胞表面，包括脑、肺、心、脾、淋巴结、肾、结肠、血管内皮和骨髓；各种免疫细胞也有表达，包括巨噬细胞、中性粒细胞、髓系抑制细胞(MDSCs)、树突状细胞(DC)、自然杀伤细胞(NK)和调节性T细胞(Treg)(Soleimani A等人，Biochimie,2020,176:21-30.)；多种肿瘤细胞也有高表达的CD73，如：黑色素瘤、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、结肠癌和前列腺癌等(Gao Z等人，Biomed Res Int,2014,2014:460654.)。CD73也以可溶性形式(sCD73)存在于包括血清在内的生物体液中，并且保存了全酶活性。
CD73主要通过水解AMP(单磷酸腺苷)产生胞外腺苷(ADO)来发挥生理、病理作用，ADO通过与4个G蛋白偶联受体(GPCRs)：A1腺苷受体(A1AR)、A2A腺苷受体(A2AR)、A2B腺苷受体(A2BR)和A3腺苷受体(A3AR)来发挥作用，其中起主要作用的是A2AR(Linden J等人，Annu.Rev.Immunol.,2019,37:325-347.)。腺苷受体(ARs)不仅在肿瘤细胞中表达，在肿瘤微环境中浸润的免疫细胞和血管内皮细胞的细胞表面也有表达，ADO通过与受体结合后，产生多种免疫抑制与促肿瘤作用。
CD73与肿瘤的生长、血管生成和转移密切相关。在正常生理条件下，细胞外ADO水平在20至300nM之间，但在肿瘤微环境下，则升高维持至微摩尔水平(30-100μM)，而胞外高ADO浓度主要由CD73水解AMP产生所影响。研究表明癌症患者血浆中可溶性的CD73(sCD73)与健康人相比其水平增加(Klemens M R等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.,1990,172:1371-7..)。在胃肠道间质瘤中，肿瘤浸润的NK细胞表达更高水平的CD73，而NK细胞中A2AR信号的缺失可以改善CD73 +肿瘤转移，增强抗肿瘤免疫反应(Young A等人,Cancer Cell.2016；30(3):391-403.)。与正常胰腺组织相比，CD73在胰腺导管癌(PDAC)中表达上调，并且与肿瘤大小、淋巴结转移、转移和不良预后相关(Harvey Jerry B等人,Front Immunol,2020,11:508.)。ORIC公司的临床前研究中，CD73选择性抑制剂ORIC-533显著降低了肿瘤微环境的ADO浓度，同时减小了肿瘤体积。这些研究结果都表明，CD73在多种肿瘤中表达上调，抑制CD73可能能降低ADO浓度，进而抑制肿瘤的生长、转移。
CD73抑制剂除了单独使用，能通过解除免疫抑制来阻断肿瘤生长，还能与其他靶向疗法和/或免疫疗法、放疗联用，来增加抗肿瘤效果。在几种小鼠的肿瘤模型中，抗CD73与抗PD-L1(程序性死亡受体-配体1)和/或抗CTLA-4(细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4)抗体联合治疗比单独使用抗PD-L1和/或抗CTLA-4抗体治疗更有效(Allard B等人，Clin.Cancer Res.,2013,19:5626-35.)；接受PD-1免疫治疗的黑色素瘤患者的CD73水平被发现上调，而在抗PD-1治疗后，胶质母细胞瘤患者中持续存在独特的CD73高巨噬细胞群，CD73缺陷增强抗PD-1和抗CTLA-4在小鼠胶质母细胞瘤模型中的疗效(Goswami S等人，Nat.Med.,2020,26:39-46.)；放疗导致部分肿瘤细胞破坏，使胞内的大量ATP释放至胞外，在肿瘤细胞表面或游离的CD73作用下，转变为腺苷，产生免疫抑制作用，这被认为是部分患者放疗后预后不良的原因之一，因此CD73抑制剂与放疗联用可能会产生协同作用(Wennerberg E等人，Cancer Immunol Res,2020,8:465-478.)。
目前一些抗CD73单抗(MEDI9447、BMS986179、SRF373/NZV930、CPI-006/CPX-006、TJ004309)和选择性小分子抑制剂(LY3475070、AB680)已进入临床阶段，部分实验取得了令人鼓舞的早期结果(NCT02754141)，CD73抑制可能是治疗肿瘤的有希望的方法。
发明内容
本公开旨在提出一种新的CD73抑制剂，可用于制备治疗肿瘤相关疾病的药物。
本公开的第一方面，本公开提出了一种化合物，为式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药：
Figure PCTCN2021122197-appb-000001
其中，
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000002
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000003
中Y 1，Y 2，Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1，Y 2，Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代可以是一个或多个取代，所述的R b各自独立地为下列取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药为：
Figure PCTCN2021122197-appb-000004
其中，
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000005
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000006
中Y 1，Y 2，Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1，Y 2，Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，所述未取代或被R b取代的基团中，所述基团各自独立地选自C 1-C 6烷基、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基或4-8元杂环烯基。
在本公开一优选实施方案中，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000007
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000008
优选为
Figure PCTCN2021122197-appb-000009
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000010
为5元杂芳基、5元杂环烷基或5元杂环烯基，优选为5元杂芳基。
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000011
为5元杂芳基时，所述杂芳基的杂原子为N。
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000012
为5元杂芳基时，所述杂芳基的杂原子数为1-3个，优选为1或2个。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000013
中，当R 1为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl。
在本公开一优选实施方案中，当R 1为卤素时，m为1或2，优选地，m为1。
在本公开一优选实施方案中，当R 1为未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，所述的C 1-C 6烷基独立地为C 1-C 4烷基，较佳地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。
在本公开一优选实施方案中，当R 1为未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，m为1或2，优选地，m为1。
在本公开一优选实施方案中，当R 1为被R a取代的C 1-C 6烷基或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，所述的取代的个数独立地为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，当R 1为被R a取代的C 1-C 6烷基、或、被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，所述的取代各自独立地为C 1-C 6烷基、或C 1-C 6烷基-O-时，所述的取代中所述的C 1-C 6烷基独立地为C 1-C 4烷基，较佳地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。
在本公开一优选实施方案中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基-O-，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2。
在本公开一优选实施方案中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 3烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 3烷基-O-，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基。
在本公开一优选实施方案中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基。
在本公开一优选实施方案中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，当R a为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000014
中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基；其中m为1或2，n为0，优选地，m为1且n为0。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000015
中，当Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代时，所述R 2的总数为1～3个。
在本公开一优选实施方案中，R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地为下列取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br、I，优选为F或Cl。
在本公开一优选实施方案中，R 2独立地选自未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，R 2独立地选自未取代或被R b取代的C 1-C 4烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基。
在本公开一优选实施方案中，R 2独立地选自未取代或被R b取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基-O-时，所述的C 1-C 6烷基独立地为C 1-C 4烷基，较佳地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的C 3-C 6环烷基时，所述的C 3-C 6环烷基独立地为环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，优选为环丙烷、环丁烷。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的5-8元芳基时，所述的5-8元芳基独立地为苯基或萘基，优选为苯基。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的5-8元杂芳基时，所述的5-8元杂芳基独立地为吡咯，吡唑、三氮唑、呋喃、噁唑、噻吩、噻唑、吡啶、吡嗪或嘧啶，优选为吡唑、呋喃、噻吩、吡啶。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的4-8元杂环烷基时，所述的4-8元杂环烷基独立地为氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢吡咯烷基、四氢呋喃基、六氢吡喃或四氢-2H-硫吡喃1,1-二氧化物，优选为氮杂环丁烷，氧杂环丁烷。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为未取代或被R b取代的4-8元杂环烯基时，所述的4-8元杂环烯基独立地为1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2-二氢吡啶基、1,4-二氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、1,4,5,6-四氢嘧啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基、二氢咪唑基、二氢噁唑基、二氢恶二唑基、二氢噻唑基、3,4-二氢-2H-吡喃基、二氢呋喃基、或氟代二氢呋喃基及其氧化物，优选为二氢噻唑基、3,4-二氢-2H-吡喃基、二氢呋喃基。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基时，所述的取代的个数为3个。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基，所述的取代各自独立地为卤素时，所述的卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基，所述的取代是一个或多个取代，所述的取代各自独立地选自C 1-C 4烷基，优选地，R 2为取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000016
中，Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C，
当R 2为被R b取代的C 1-C 6烷基、被R b取代的C 3-C 6环烷基、被R b取代的5-8元芳基、被R b取代的5-8元杂芳基或被R b取代的的4-8元杂环烷基时，所述的取代的个数为2个或3个。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000017
中，Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
当Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代时，所述R 2的总数为1～3个，R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基。
在本公开一优选实施方案中，当R 2为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br、I，优选为F或Cl。
在本公开一优选实施方案中，R 2选自氢、-F、-Cl、-Br、氨基、氰基、-CH 3、-CF 3、-CHF 2或-CH 2CH 3。
在本公开一优选实施方案中，式I所示化合物为
Figure PCTCN2021122197-appb-000018
X选自C或N；
所述Z 1、Z 2、Y 1、Y 2、Y 3如前面所定义的。
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000019
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000020
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000021
Figure PCTCN2021122197-appb-000022
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000023
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000024
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000025
Figure PCTCN2021122197-appb-000026
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000027
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000028
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000029
Figure PCTCN2021122197-appb-000030
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000031
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000032
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000033
Figure PCTCN2021122197-appb-000034
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000035
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000036
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000037
Figure PCTCN2021122197-appb-000038
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000039
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000040
时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
Figure PCTCN2021122197-appb-000041
Figure PCTCN2021122197-appb-000042
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000043
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000044
时，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000045
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000046
Figure PCTCN2021122197-appb-000047
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000048
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000049
时，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000050
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000051
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000052
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000053
时，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000054
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000055
在本公开一优选实施方案中，当
Figure PCTCN2021122197-appb-000056
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000057
时，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000058
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000059
在本公开一优选实施方案中，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000060
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000061
在本公开一优选实施方案中，X为N或者C。
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000062
选自
Figure PCTCN2021122197-appb-000063
Figure PCTCN2021122197-appb-000064
在本公开一优选实施方案中，所述
Figure PCTCN2021122197-appb-000065
为
Figure PCTCN2021122197-appb-000066
在本公开一优选实施方案中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000067
选自
Figure PCTCN2021122197-appb-000068
Figure PCTCN2021122197-appb-000069
在本公开一优选实施方案中，所述化合物结构式为
Figure PCTCN2021122197-appb-000070
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000071
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未 取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000072
中Y 1、Y 2各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，所述化合物结构式为
Figure PCTCN2021122197-appb-000073
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000074
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000075
中Y 1、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，所述化合物结构式为
Figure PCTCN2021122197-appb-000076
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000077
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000078
中Y 1、Y 2、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，所述化合物结构式为
Figure PCTCN2021122197-appb-000079
m为0、1、2、3或者4；
Figure PCTCN2021122197-appb-000080
中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
n为0、1、2或者3；
X选自N或者C；
Z 2独立地选自N或者C；
Figure PCTCN2021122197-appb-000081
中Y 1、Y 2、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
在本公开一优选实施方案中，如式I所示的化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药选自下列任一化合物：
Figure PCTCN2021122197-appb-000082
Figure PCTCN2021122197-appb-000083
本公开的第二方面，本公开提出了一种药物组合物，所述药物组合物包括治疗有效剂量的上述化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药以及药学上可接受的赋形剂。
根据本公开的具体实施例，可以将本公开的所述药物组合物包括治疗有效剂量的上述化合物，其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药以及药学上可接受的药用载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过输注或推注，通过经上皮或皮肤粘膜(例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。
本公开的第三方面，本公开提出了上述化合物、或其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药与PD-1/PD-L1抗体或者PD-1/PD-L1抑制剂联用在制备用于治疗与CD73相关疾病药物中的用途，所述药物可用于治疗癌症。这些癌症包括例如膀胱癌、乳腺癌、胆管癌、直肠癌、结肠癌、胃癌、胆囊癌、神经母细胞瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、神经管母细胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或者肾癌。
本公开的第四方面，本公开提出了上述化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药或上述药物组合物在制备用于治疗与CD73相关疾病药物中的用途。
根据本公开的具体实施例，上述化合物或其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药或上述药物组合物在制备治疗与CD73相关疾病药物中的用途，所述药物可用于治疗癌症。这些癌症包括例如膀胱癌、乳腺癌、胆管癌、结直肠癌、结肠癌、胃癌、胆囊癌、神经母细胞瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、神经管母细胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或者肾癌。
本公开的第五方面，本公开提出了一种治疗与CD73相关疾病的方法，所述方法包括向受试者施用上述式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药和/或 上述药物组合物。
根据本公开的具体实施例，所述CD73相关疾病为癌症。这些癌症包括例如膀胱癌、乳腺癌、胆管癌、结直肠癌、结肠癌、胃癌、胆囊癌、神经母细胞瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、神经管母细胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或者肾癌。
术语和定义
除非另有说明，用于本公开申请，包括本申请说明书和权利要求书中记载的术语和定义如下。
本领域技术人员可以理解，根据本领域中使用的惯例，在本申请的结构式中，
Figure PCTCN2021122197-appb-000084
用于描绘化学键，所述化学键为部分或取代基与核心结构或骨架结构相连的点。
术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的无毒酸或碱的盐，包括无机酸和碱、有机酸和碱的盐。
除了药学可接受的盐外，本公开还考虑其他盐。它们可以在化合物纯化中或在制备其它药学上课接受的盐中充当中间体或可用于本公开化合物的鉴别、表征或纯化。
术语“药物组合物”表示一种或多种文本所述化合物或其生理学/药学上可接受的盐或前体药物与其它化学组分的混合物，其它组分例如生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。
术语“辅料”是指可药用惰性成分。术语“赋形剂”的种类实例非限制性地包括粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂和稀释剂等。赋形剂能增强药物制剂的操作特性，即通过增加流动性和/或粘着性使制剂更适于直接压缩。
术语“前药”是指可以在生理条件下或者通过溶剂解转化为具有生物活性的本公开化合物。本公开的前药通过修饰在该化合物中的功能基团来制备，该修饰可以按常规的操作或者在体内被除去，而得到母体化合物。前药包括本公开化合物中的一个羟基或者氨基连接到任何基团上所形成的化合物，当本公开化合物的前药被施予哺乳动物个体时，前药被割裂而分别形成游离的羟基、游离的氨基。
术语“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体、非对应异构体和构象异构体。
依据原料和方法的选择，本公开化合物可以以可能的异构体中的一个或它们的混合物的形式存在，例如作为纯旋光异构体，或作为异构体混合物，如作为外消旋和非对映异构体混合物，这取决于不对称碳原子的数量。当描述具有光学活性的化合物时，使用前缀D和L或R和S来表示就分子中的手性中心(或多个手性中心)而言分子的绝对构型。前缀D和L或(+)和(–)是用于指定化合物所致平面偏振光旋转的符号，其中(–)或L表示化合物是左旋的。前缀为(+)或D的化合物是右旋的。就给定的化学结构而言，除了这些立体异构体互为镜像外，这些立体异构体是相同的。具体的立体异构体也可称为对映异构体，并且所述异构体的混合物通常称作对映异构体的混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋体，当在化学反应或方法中没有立体选择性或立体特异性时，可出现所述外消旋混合物或外消旋体。烯烃、C＝N双键等的许多几何异构体也可以存在于本文所述的化合物中，且所有这种稳定的异构体在本公开中均被考虑。当本文所描述化合物含有烯双键时，除非另外说明，否则，这种双键包括E和Z几何异构体。如果化合物中含有二取代的环烷基，环烷基的取代基可能为顺式或反式(cis-或trans-)构型。
当将本公开式中与手性碳的键描写直成线时，应当理解为，手性碳的(R)和(S)两种构型和由此产生的其对映体纯的化合物和混合物两者包括在该通式范围内。本文中消旋体或者对映体纯的化合物的图示法来自Maehr，J.Chem.Ed.1985，62:114-120。除非另有说明，用楔形键和虚线键表示一个立体中心的绝对构型。
旋光性的(R)-或(S)-异构体可使用手性合成子或手性制剂制备，或使用常规技术拆分。含有不对称取 代的碳原子的本公开化合物能够以旋光活性形式或外消旋形式分离。化合物的外消旋混合物的拆分可以通过本领域已知的许多方法中的任一种来进行。示例性方法包括使用手性拆分酸的分级重结晶，该手性拆分酸是旋光活性的成盐有机酸。用于分级重结晶方法的适合的拆分剂例如是旋光活性酸，例如酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或各种旋光活性樟脑磺酸如β-樟脑磺酸的D和L形式。适合于分级结晶方法的其它的拆分剂包括立体异构纯形式的α-甲基-苄胺(例如，S和R形式或者非对映异构纯形式)、2-苯基甘氨醇、降麻黄碱、麻黄碱、N-甲基麻黄碱、环己基乙胺、1，2-二氨基环己烷等。外消旋混合物的拆分还可以通过在填充有旋光活性拆分剂(例如，二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸)的柱子上洗脱来进行。可以采用高效液相色谱(HPLC)法也可以采用超临界流体色谱法(SFC)进行。具体方法的选择以及洗脱条件、色谱柱的选择可以由本领域技术人员根据化合物的结构以及试验结果选择。进一步的，还可以使用已知构型的光学纯的起始原料或试剂，通过立体有机合成，获得本公开所描述化合物的任何对映体或非对映体。
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本公开化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本公开包含化合物的所有互变异构形式。
本公开的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘( 2H)，氚( 3H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。本公开的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本公开的范围之内。
针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本公开中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。酮取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
术语“C 1-C 6烷基”应理解为表示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子(“C 1-C 3烷基”)，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基。
术语“C 1-C 6烷氧基”应理解为-O-(C 1-C 6烷基)，表示烷基基团通过氧原子与分子其余部分相连，其中“C 1-C 6烷基”具有上述定义。如甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、1-丁氧基。
术语“C 3-C 6环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～6个碳原子，包括稠合或桥接的多环系统。如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
术语“4-8元杂环基”或“4-8元杂环烷基”应理解为表示具有4至8个原子的饱和、不饱和或部分饱和的单环、二环或三环，其中1、2、3、4或5个环原子选自N、O和S，除非另有说明，其可通过碳或氮连接，其中-CH 2-基团任选被-C(O)-代替；及其中除非另有相反说明，环氮原子或环硫原子任选被氧化以形成N-氧化物或S-氧化物或环氮原子任选被季铵化；其中环中的-NH任选被乙酰基、甲酰基、甲基或甲磺酰基取代；及环任选被一个或多个卤素取代。应该理解的是，当杂环基中S原子和O原子的总数超过1时，这些杂原子不彼此相邻。若所述杂环基为二环或三环，则至少一个环可任选为杂芳族环或芳 族环，条件是至少一个环是非杂芳族的。若所述杂环基为单环，则其一定不是芳族的。杂环基的实例包括但不限于哌啶基、N-乙酰基哌啶基、N-甲基哌啶基、N-甲酰基哌嗪基、N-甲磺酰基哌嗪基、高哌嗪基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吗啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、二氢吲哚基、四氢吡喃基、二氢-2H-吡喃基、四氢呋喃基、四氢噻喃基、四氢噻喃-1-氧化物、四氢噻喃-1,1-二氧化物、1H-吡啶-2-酮和2,5-二氧代咪唑烷基。
术语“4-8元杂环烯基”应理解为含有4至8个环原子，优选5至6个环原子的非芳族单环或多环基团，其中，所述4-8元杂环烯基包含选自N、O、S和P中的1至3个杂原子并且含有至少一个碳-碳双键或碳-氮双键。在基团名称中包含的氮杂、氧杂或硫杂是指至少一个氮、氧或硫原子分别地作为环原子。4-8元杂环烯基的氮或硫原子可以任选被氧化成相应的N-氧化物、S-氧化物或S-二氧化物。优选的4-8元杂环烯基包含但不限于1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2-二氢吡啶基、1,4-二氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、1,4,5,6-四氢嘧啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基、二氢咪唑基、二氢噁唑基、二氢恶二唑基、二氢噻唑基、3,4-二氢-2H-吡喃基、二氢呋喃基、氟代二氢呋喃基基及其氧化物等。“4-8元杂环烯基”还可包括环上相同碳原子上的两个可用氢原子同时被单一的基团＝O取代(即形成羰基)。
术语“5-8元芳基”应理解为具有5-8个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环，特别是具有6个碳原子的环(“C 6芳基”)，例如苯基；当所述5-8元芳基被取代时，其可以为单取代或者多取代。并且，对其取代位点没有限制，例如可以为邻位、对位或间位取代。
术语“5-8元杂芳基”应理解为具有5-8个环原子，特别是5或6个碳原子，且包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子的一价单环、双环或三环芳族环基团。优选1-3个且独立选自N、O和S的杂原子的一价单环、双环或三环芳族环基团，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。
术语“卤代基”或“卤素”为氟、氯、溴和碘。
另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本公开中所采用的描述方式“……独立地”应作广义理解，是指所描述的各个个体之间是相互独立的，可以独立地为相同或不同的具体基团。更详细地，描述方式“……独立地”既可以是指在不同基团中，相同符合之间所表达的具体选项之间互相不影响，也可以表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。
有益效果
根据本公开的实施例，本公开提供了结构新颖、药代动力学性质优良、药效或成药性好的CD73抑制剂，可以用于有效治疗CD73相关的疾病、病症。
本公开的化合物对CD73酶具有良好的抑制作用，体外药效良好。另外小鼠实验结果表明，本公开化合物表现出优良的药代动力学性质，成药性好。
此外，本公开单用或与PD-1抗体联用都具有显著的抑制CT-26结直肠癌生长的作用，而且本公开化合物单用或与PD-1抗体联用都具有显著的抑制E.G7-OVA T细胞淋巴瘤生长的作用。
本公开的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本公开的实践了解到。
发明详细描述
下面将结合实施例对本公开的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本公开，而不应视为限定本公开的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
如无特别说明，本公开的化合物均是通过核磁共振(NMR)和/或质谱(MS)来确定其结构的。NMR位移的单位为10 -6(ppm)。NMR测定的溶剂为氘代二甲基亚砜、氘代氯仿、氘代甲醇等，内标为四甲基硅烷(TMS)。
本公开的缩写定义如下：
M：摩尔浓度，如1M盐酸表示1mol/L盐酸溶液
DMA：N,N-二甲基乙酰胺
HATU：O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦盐
DIPEA：也可写为DIEA，二异丙基乙胺，亦即N,N-二异丙基乙胺
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
LC-MS：液质联用色谱
DMSO：二甲基亚砜
HEPES：4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸
EGTA：乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸
TLC：薄层色谱
IC 50：半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度。
制备1：
中间体1D的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000085
第一步：(1S,2S)-2-((苄氧基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000086
在氮气保护下把氢化钠(58.5g，1.46mol，含量60％)悬浮在甲苯(3000mL)中，然后在0℃下滴加磷酰基乙酸三乙酯(327.7g，1.46mol)，滴加完毕后在25℃下搅拌1小时，然后把(S)-(+)-缩水甘油苄基醚(200g，1.22mol)加入到反应液中，升温至130℃反应12小时。将反应混合物用水(5000mL)稀释，然后用乙酸乙酯(2000mL×2)萃取，合并有机层相，用饱和食盐水(2000mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1-10:1)得红色油状物(1S,2S)-2-((苄氧基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(180g，产率63％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.18-7.25(m,5H),4.42(s,2H),4.00-4.04(m,2H),3.33-3.37(m,1H),3.24-3.28(m,1H),1.62-1.66(m,1H),1.46-1.49(m,1H),1.06-1.16(m,4H),0.75-0.78(m,1H).
第二步：(1S,2S)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000087
把(1S,2S)-2-((苄氧基)甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(120g，512.2mmol)溶解在乙醇(1200mL)中，在氮气保护下，加入钯碳(30.0g，含量10％)，然后用氢气置换3次，然后在50Psi压力下50℃反应24小时。冷却至室温，用硅藻土过滤，滤饼用乙醇洗涤3次，把滤液浓缩得到黄色油状物(1S,2S)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(65.0g，产率85％)。
第三步：(1S,2S)-2-甲酰基环丙烷-1-羧酸乙酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000088
把(1S,2S)-2-(羟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(100g，693.6mmol)溶于二氯甲烷(1500mL)中，在0℃下缓慢加入戴斯-马丁氧化剂(353.0g，832.4mmol)，然后在25℃反应12小时。反应完成后，把反应液倒入碳酸钠水溶液(500mL)和亚硫酸钠水溶液(500mL)中，然后用二氯甲烷(2000mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色油状物(1S,2S)-2-甲酰基环丙烷-1-羧酸乙酯(67.0g，产率68％)。
第四步：(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000089
将(1S,2S)-2-甲酰基环丙烷-1-羧酸乙酯(95g，668.3mmol)溶解在二氯甲烷(1200mL)中，在0℃下滴加二乙氨基三氟化硫(237.0g，194mL，1.47mol)，然后在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(1000mL)淬灭，然后用二氯甲烷(500mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(1000mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色油状物(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(95g，粗品)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.62-5.91(m,1H),4.16(q,2H),1.88-1.96(m,2H),1.26-1.30(m,4H),1.12-1.16(m,1H)
第五步：(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000090
把(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸乙酯(95.0g，578.7mmol)溶于甲醇(500mL)和水(100mL)中，然后加入氢氧化钠(69.5g，1.74mmol)，在25℃下反应12小时。反应完成后，把反应液浓缩，加入水(500mL)，用甲基叔丁基醚(500mL×2)萃取，收集水相，把水相用1M盐酸调pH＝3，然后用乙酸乙酯(500mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色油状化合物(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸(47.0g，产率60％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.52(br.s,1H),5.65-5.94(m,1H),1.89-1.94(m,2H),1.34-1.37(m,1H),1.23-1.27(m,1H).
第六步：1,3-二氧代异吲哚啉-2-基(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000091
把(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸羧酸(20.0g，146.9mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.80g，14.7mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，在0℃下滴加N,N-二异丙基碳二酰亚胺(22.3g，176.4mmol)，在0℃下搅拌0.5小时，然后加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(28.8g，176.4mmol)，在25℃下反应12小时。反应完成后，加水(200mL)淬灭反应，用二氯甲烷(200mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。用硅胶柱分离纯化(100％二氯甲烷)得白色固体1,3-二氧代异吲哚啉-2-基(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯(33g，产率79.8％)。
第七步：2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000092
把1,3-二氧代异吲哚啉-2-基(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯(33.0g，117.4mmol)和双联嚬哪醇硼酸酯(59.6g，237.7mmol)溶于乙酸乙酯(400mL)中，在氮气保护下加热至85℃，滴加异烟酸乙酯(8.87g，8.06mL，58.7mmol)，然后在氮气保护下85℃反应12小时。反应结束后，把反应液浓缩，把残留物用石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1(300mL)打浆，然后用硅藻土过滤，用石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1(200mL)洗涤滤饼，把滤液浓缩得粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝100:1-20:1)得到黄色油状物2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(10g，产率39％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ5.30-5.60(m,1H),1.41-1.49(m,1H),1.22(s,12H),0.80-0.87(m,2H),0.11-1.13(m,1H).
实施例1：目标化合物1的制备
5-(5-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000093
目标化合物1的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000094
第一步：5,7-二氯咪唑并[1,2-a]嘧啶的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000095
把咪唑并[1,2-a]嘧啶-5,7-二酚(2.00g，13.2mmol)溶于三氯氧磷(20mL)中，在100℃下反应4小时。把反应液浓缩，然后缓慢加入到冰水混合物(50mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液调pH值到9，然后用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得黄色固体化合物5,7-二氯咪唑并[1,2-a]嘧啶(2.2g，产率88.4％)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.09(d,1H),7.88(d,1H),7.72(s,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):188.0[M+H] +
第二步：5-氯-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000096
在氮气保护下，把5,7-二氯咪唑并[1,2-a]嘧啶(2.20g，11.7mmol)，(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(2.15g，11.7mmol)，[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(856.2mg，1.17mmol)，碳酸钠(3.10g，29.3mmol)溶于1,4-二氧六环(50mL)和水(10mL)中，然后氮气保护下25℃反应10小时。反应完成后，将反应混合物用水(50mL)稀释，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-1:1)得黄色固体5-氯-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(1.50g，产率43.9％)。
LC-MS,M/Z(ESI):292.1[M+H] +
第三步：5-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000097
在氮气保护下，把5-氯-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(500mg，1.71mmol)，2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(747.5g，3.43mmol)，二氯双[二叔丁基 -(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)(121.4mg，0.171mmol)，碳酸铯(1.40g，4.29mmol)溶于1,4-二氧六环(30mL)和水(6mL)中，然后氮气保护下100℃反应2小时。反应完成后，将反应混合物用水(100mL)稀释，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-1:1)得黄色固体5-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(250mg，粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):348.1[M+H] +
第四步：5-(5-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000098
将5-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-a]嘧啶(250mg，0.720mmol)溶解在盐酸水溶液(1M，5mL)中，升温至75℃反应2小时。把反应液浓缩，经高效液相色谱(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：0％-15％，7分钟)分离纯化得黄色固体5-(5-(((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-7-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(30mg，产率12％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.77(s,1H),8.48(s,1H),8.25(d,1H),8.12(d,1H),5.89-6.19(m,1H),2.83-2.87(m,1H),2.13-2.19(m,1H),1.67-1.72(m,1H),1.56-1.60(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):320.1[M+H] +
实施例2：目标化合物2的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000099
目标化合物2的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000100
第一步：3,6-二氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000101
将3,6-二氯哒嗪(6.60g，44.3mmol)和(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸(6.03g，44.3mmol)溶解在水(150mL)中，然后加入浓硫酸(6.74mL)，在氮气保护下升温到70℃。然后快速加入硝酸银的水溶液(4.20g，24.7mmol，7.5mL)，然后再缓慢滴加过硫酸铵的水溶液(30.3g，132.9mmol，75mL)，70℃继续反应2小时。反应液用氨水调pH至9左右，然后用乙酸乙酯(500mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(500mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用反相柱分离纯化(0.1％三氟乙酸)得到黄色油状物3,6-二氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪(5.00g，产率46.4％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.10(s,1H),5.79-6.08(m,1H),2.39-2.45(m,1H),1.68-1.75(m,1H),1.51-1.54(m,1H),1.22-1.25(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):239.0[M+H] +
第二步：3-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000102
将3,6-二氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪(5.00g，20.9mmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(3.85g，20.9mmol)溶解在1,4-二氧六环(50mL)和水(10mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(6.65g，62.7mmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.53g，2.09mmol)，升温至70℃反应1小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，然后用乙酸乙酯(100mL*3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-2:1)得黄色油状化合物3-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪(4.5g，产率48％)。
LC-MS,M/Z(ESI):343.1[M+H] +
第三步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-甲腈的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000103
在氮气的保护下将3-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪(1.00g,2.31mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(211.0mg,230.5μmol)和氰化锌(270.6mg,2.31mmol)加入到N,N二甲基甲酰胺(10.0mL)，然后120℃反应12小时。反应完毕后，将反应液加入到水(30mL)中，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤两次，之后有机相用无水硫酸钠干燥，有机相浓缩得到粗品，粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝20:1-3:1)得黄色油状物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-甲腈(600.0mg,产率78.1％)。
LC-MS,M/Z(ESI):334.1[M+H] +
第四步：(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000104
把4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-甲腈(600.0mg，1.80mmol)和氨水(2.52g,18.0mmol,含量25％)溶解在甲醇(10.0mL)中，在氮气保护下，加入雷尼镍(240.0mg)，然后用氢气置换3次，然后在50Psi压力下30℃反应5小时。反应完毕后，用硅藻土过滤除去雷尼镍，滤饼用甲醇洗涤3次，把滤液浓缩得到黄色油状物(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺(160.0mg,收率25.0％)。
LC-MS,M/Z(ESI):338.1[M+H] +
第五步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑[1,5-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000105
将(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺(160.0mg,415.0μmol)溶在原甲酸三甲酯(6.00mL)中，然后80℃反应2小时。反应完毕后，直接将反应液浓缩得到黄色油状物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑[1,5-b]哒嗪(80.0mg,产率50.1％)。
LC-MS,M/Z(ESI):348.1[M+H] +
第六步：5-(4-(((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000106
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑[1,5-b]哒嗪(80.0mg,280.9μmol)溶在盐酸(1M,3.12mL)里，然后50℃反应12小时。反应完成后，直接将反应冻干，得到粗产品，将粗品加入甲醇(2.00mL)搅拌30min打浆纯化，过滤，将滤饼干燥得到灰色固体5-(4-(((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(13.7mg,产率17.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.65(s,1H),11.57(s,1H),9.41(s,1H),8.03-8.06(m,2H),7.16(s,1H),5.89-6.18(m,1H),2.58-2.61(m,1H),2.07-2.49(m,1H),1.42-1.48(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):320.1[M+H] +
实施例3：目标化合物3的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000107
目标化合物3的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000108
第一步：6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000109
将8-溴-6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg，430.17μmol)和2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(187.60mg,860.34μmol)溶解在1,4-二氧六环(6mL)和水(2mL)中，在氮气保护下加入碳酸铯(420.5mg，1.29mmol)和二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)(60.9mg，86.0μmol)，升温至100℃反应12小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯(V/V)＝20:1-3:1)得黄色油状物粗品。将粗品通过反相高效液相色谱法(柱子：Zhongpu RD-C18 150×25mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％三氟乙酸(99％)，B＝乙腈；梯度：25％-55％，10分钟)分离纯化得到黄色油状物6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(30mg，产率36.4％)。
LC-MS,M/Z(ESI):266.1[M+Na] +
第二步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000110
将6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(30mg,114.59μmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(42.16mg,229.17μmol)溶解在1,4-二氧六环(1mL)和水(0.5mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(30.36mg,286.46μmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(16.77mg,22.92μmol)，升温至100℃反应12小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(20mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品用硅胶板分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝3:2)得到白色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(25mg，产率46.4％)。
LC-MS,M/Z(ESI):348.1[M+H] +
第三步：5-((8-(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000111
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(25mg，53.2μmol)溶解在盐酸水溶液(1M，1.06mL)中，升温至70℃反应12小时。将反应体系旋干，粗品通过反相高效液相色谱法(柱子：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；溶剂：A＝水+0.05体积％盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：1％-30％，10分钟)分离纯化得白色固体5-(8-(1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(7.32mg，产率42.3％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.60-11.56(m,2H),8.39(s,1H),8.02(d,1H),7.96(s,1H),7.61(s,1H),5.93-6.23(m,1H),2.71-2.75(m,1H),2.36-2.45(m,1H),1.61-1.65(m,1H),1.46-1.51(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):320.1[M+H] +
实施例4：目标化合物4的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000112
目标化合物4的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000113
第一步：4-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000114
把4,6-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(300mg,1.48mmol)，碳酸钠(157.4mg,1.48mmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(327.78mg,1.78mmol)溶解在1,4-二氧六环(8mL)和水(2mL)中，在氮气保护下， 加入[1,1-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯(108.6mg,148.5μmol)，然后用氮气置换3次，在100℃反应2小时。反应完成后，用水(5mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并有机层，用饱和食盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到粗品。粗品用乙酸乙酯(2mL)打浆纯化，过滤得到黄色固体4-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(260mg，产率57.6％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.08(s,1H),8.07(s,1H),7.77(s,1H),4.15(s,3H),4.11(s,3H),4.09(s,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):306.1[M+H] +
第二步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000115
把4-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(100mg,327.8μmol)，碳酸钠(69.5mg,655.6μmol)和2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(85.8mg,363.4μmol)溶解在1,4-二氧六环(3mL)和水(1mL)中，在氮气保护下，加入二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)(21.1mg,29.8μmol)，然后用氮气置换3次，在100℃反应2小时。反应完成后，用水(5mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机层，用饱和食盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到粗品。粗品经硅胶板制备(乙酸乙酯：石油醚(V/V)＝3:1)纯化后得到白色固体4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(88.0mg，产率74.3％)。
LC-MS,M/Z(ESI):362.1[M+H] +
第三步：5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000116
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(64.9mg,179.8μmol)和盐酸溶液(1M,1.41mL)溶解在甲醇(1.50mL)中，在70℃下搅拌反应8小时。反应完成后，将粗品通过反相高效液相色谱法(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：17％-37％，7分钟)分离纯化得黄色固体5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(4.28mg，产率7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.51(s,1H),11.41(s,1H),8.34(d,1H),8.18(s,1H),7.80(s,1H),5.86-6.16(m,1H),4.02(s,3H),2.62-2.65(m,1H),2.01-2.03(m,1H),1.41-1.46(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):334.1[M+H] +
实施例5：目标化合物5的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000117
目标化合物5的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000118
第一步：8-溴-6-氯-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000119
避光条件下，向装有4-溴-6-氯哒嗪-3-胺(0.5g，2.4mmol)的烧瓶中加入溴代丙酮(2.3g，16.8mmol)，90℃反应过夜。冷却至室温，加入石油醚(10mL)，过滤，滤饼用石油醚洗涤(10mL×3),收集滤饼，旋干得黄色固体8-溴-6-氯-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(0.5g，收率85％)。
LC-MS,M/Z(ESI)：245.9[M+H] +
第二步：6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000120
氮气保护下，将8-溴-6-氯-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(420mg,1.704mmol)，二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)(241mg,0.341mmol)和磷酸钾(1085mg,5.11mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(5mL)的混合体系升温至80℃，搅拌十分钟，加入2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(409mg,1.874mmol)，80℃下反应三小时。冷却至室温，加入水(50mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物硅胶板纯化得到黄色固体6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(140mg，收率31.9％)。
LC-MS,M/Z(ESI)：258.1[M+H] +
第三步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000121
氮气保护下，将6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(140mg,0.543mmol)，(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(300mg,1.630mmol)，[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(39.8mg,0.054mmol)，碳酸钠(173mg,1.630mmol)的1,4-二氧六环(8mL)和水(2mL)的混合溶液升温至100℃，在该温度下反应3h.冷却至室温，加入水(30mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物硅胶板纯化得到固体8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(20mg，收率10.2％)。
第四步：5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000122
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(20mg，0.055mmol)溶于甲醇(3mL)中，加入1M稀盐酸(1mL，1mmol)，室温搅拌反应过夜。浓缩，残余物直接冻干得到淡黄色固体5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(12.2mg，收率66.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.70(d,1H),11.56(s,1H),8.29(s,1H),8.04(d,1H),7.70(s,1H),6.11(td,1H),2.86–2.74(m,1H),2.49(d,3H),2.32–2.18(m,1H),1.56–1.42(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI)：334.1[M+H] +
实施例6：目标化合物6的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000123
目标化合物6的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000124
第一步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000125
将3-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪(1.00g，1.90mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(822mg，2.28mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中，在氮气保护下加入二三苯基磷二氯化钯(133mg,190μmol)，升温至110℃反应3小时。将饱和的氟化钾溶液(50mL)加入到反应体系中，室温搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×3)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黑棕色油状物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪(1.00g,粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):379.2[M+H] +
第二步：1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000126
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)哒嗪(0.90g,2.38mmol)溶解在四氢呋喃(20mL)中，加入0.5M的盐酸水溶液(20mL)，在25℃下反应12小时。反应完成后，加水(30mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。该粗品用反相柱分离(0.1％三氟乙酸体系)得到棕色固体1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-酮(400mg，产率48.0％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.50(s,1H),7.67(s,1H),5.75(td,1H),4.11(s,3H),4.00(s,3H),2.91(s,3H),2.08-2.13(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.32-1.37(m,1H),1.15-1.21(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):351.1[M+H] +
第三步：1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-胺胺的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000127
将1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-酮(300mg,856μmol)和乙酸铵(660mg,8.56mmol)溶解在甲醇(10mL)，加入氰基硼氢化钠(80.7mg,1.28mmol)，在25℃下反应12小时。反应完成后，加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。该粗品用反相柱分离(0.1％三氟乙酸体系)得到黄色油状1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-胺(150mg，产率50％)。
LC-MS,M/Z(ESI):352.1[M+H] +
第四步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000128
将1-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)乙-1-胺(130mg，370μmol)溶解在原甲酸三甲酯(1.5mL)中，升温到110度，反应12小时。反应体系旋干得到黄色油状4-((1S,2S)-2-(二 氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(130mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):362.1[M+H] +
第五步：
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000129
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(130mg,粗品)溶解在盐酸水溶液(1M，5mL)中，升温至50℃反应12小时。把反应液浓缩，然后通过反相高效液相色谱法(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+盐酸(0.05％)，B＝乙腈；梯度：5％-25％，6.5分钟)分离纯化得黄色固体5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(28.86mg，两步收率23.4％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.63(s,1H),8.25(s,1H),7.45(s,1H),5.99(td,1H),2.87(s,3H),2.71-2.76(m,1H),2.01-2.06(m,1H),1.43-1.49(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):334.1[M+H] +
实施例7：目标化合物7的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000130
目标化合物7的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000131
第一步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000132
将(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺(530mg,1.57mmol)，三乙胺(635.9mg,6.28mmol)和4-二甲氨基吡啶(19.2mg,157.1μmol)溶在8毫升的二氯甲烷里面，在0℃下滴加三氟乙酸酐(1.65g,7.86mmol)，然后在25℃下反应2个小时。反应完毕后，将反应液直接浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝20:1-5:1)得黄色油状化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙 基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪(350mg，产率53.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):416.1[M+H] +
第二步：5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000133
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪(350mg,842.7μmol)溶在盐酸(1M，3mL)里面，50℃反应12个小时。反应完毕后，将反应液直接浓缩得到粗品。粗品通过甲醇(10mL)和水(50mL)打浆纯化，过滤得到灰色固体5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-(三氟甲基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(99.2mg，产率30.4％)。
1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.58(s,2H),7.97(s,1H),7.87(s,1H),7.29(s,1H)；5.88–6.18(m,1H),2.65-2.67(m,1H),2.05–2.08(m,1H),1.46-1.48(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):388.1[M+H] +
实施例8：目标化合物8的制备
5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
Figure PCTCN2021122197-appb-000134
目标化合物8的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000135
第一步：(S)-2-氯-3-甲基丁烷-1-醇的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000136
把(S)-2-氯-3-甲基丁酸(30.0g，0.22mmol)溶于四氢呋喃(300mL)中，在0-10℃下把四氢铝锂(9.17g，0.24mmol)缓慢加入，加完后在25℃下搅拌1小时，然后升温至50℃反应1小时。反应完成后，把反应液降温到0-10℃，依次加入水(9mL)，15％氢氧化钠水溶液(9mL)，水(27mL)。然后用硅藻土过滤，滤饼用四氢呋喃洗涤(100mL×3)，把滤液浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-2:1)得黄色油状物(S)-2-氯-3-甲基丁烷-1-醇(8.4g，产率31％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ3.91-3.94(m,1H),3.74-3.82(m,2H),2.06-2.09(m,1H),1.99-2.05(m,1H),1.04(dd,6H).
第二步：(R)-2-异丙基环氧乙烷的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000137
把氢氧化钾(52.1g，0.93mol)溶于水(50mL)中，降温到0-5℃，然后把(S)-2-氯-3-甲基丁烷-1-醇(25.0g，0.20mol)滴加进去，然后在25℃反应1小时。反应完成后，把反应液在25℃下用水泵进行蒸馏，馏分用干冰乙醇浴冷却收集，得到黄色油状物(R)-2-异丙基环氧乙烷(16.0g，产率91.1％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ2.71-2.74(m,2H),2.52-2.54(m,1H),1.47-1.53(m,1H),1.04(d,3H),0.97(d,3H).
第三步：(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸乙酯的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000138
把磷酰基乙酸三乙酯(14.3g，63.8mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)中，然后在0℃下滴加正丁基锂(2.5M，30.2mL)，滴加完成后，反应液在25℃下搅拌0.5小时，然后把反应液转移到闷罐中，然后再加入(R)-2-异丙基环氧乙烷(5.00g，58.1mmol)的1,4-二氧六环溶液(10mL)。把闷罐拧紧，升温至145℃反应12小时。反应完成后，把反应体系降温，然后加水(100mL)，用甲基叔丁基醚(100mL×2)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得黄色油状物(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸乙酯(7.0g，产率80.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ4.09-4.13(m,2H),1.36-1.39(m,1H),1.19-1.27(m,5H),1.09-1.13(m,1H),0.96-0.99(m,6H),0.69-0.75(m,1H).
第四步：(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000139
把(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸乙酯(7.00g，44.8mmol)溶于1，4-二氧六环(60mL)和水(60mL)中，然后加入氢氧化钠(17.9g，448.1mmol)，在100℃下反应7小时。反应完成后，用甲基叔丁基醚(100mL×2)萃取，收集水相，把水相用浓盐酸调pH＝1-2，然后用甲基叔丁基醚(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色油状物(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸(6.40g，粗品)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ1.56-1.60(m,1H),1.45-1.50(m,1H),1.37-1.40(m,1H),1.21-1.27(m,1H),1.60-1.85(m,6H),0.97-1.02(m,1H).
第五步：3,6-二氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000140
将3,6-二氯哒嗪(6.27g，42.1mmol)和(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷-1-羧酸(5.39g，42.1mmol)溶解在水(100mL)中，然后加入浓硫酸(5.39mL)，在氮气保护下升温到70℃。然后快速加入硝酸银的水溶液(3.57g，21.0mmol，25mL)，然后再缓慢滴加过硫酸铵的水溶液(28.8g，126.2mmol，50mL)，70℃继续反应1小时。反应完成后，反应液用氨水调pH至9左右，然后用乙酸乙酯(200mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(100mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-3:1)得黄色油状物3,6-二氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(3.20g，产率32.9％)。
LC-MS,M/Z(ESI):231.0[M+H] +
第六步：3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000141
将3,6-二氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(2.10g，9.09mmol)和2,4-二甲氧基嘧啶-5-硼酸(1.67g，9.09mmol)溶解在1,4-二氧六环(10mL)和水(3mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(2.89g，27.3mmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(664.8mg，0.91mmol)，升温至100℃反应2小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，然后用乙酸乙酯(150mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-2:1)得黄色油状物3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(2.00g，产率65.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):335.1[M+H] +
第七步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-甲腈的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000142
在氮气的保护下将3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(2.00g,5.97mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(547.0mg,597.4μmol)和氰化锌(2.00g,17.0mmol)加入到N,N二甲基甲酰胺(30mL)中，然后100℃反应3小时。反应完毕后，将反应液加入到水(30mL)中，在用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，之后有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-3:1)得黄色油状物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-甲腈(1.90g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):326.2[M+H] +
第八步：(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)甲胺的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000143
把6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-甲腈(1.90g，5.84mmol)溶解在甲醇 (30.0mL)中，在氮气保护下，加入雷尼镍(1.50g，17.5mmol)，然后用氢气置换3次，然后在50Psi压力下50℃反应10小时。反应完毕后，用硅藻土过滤除去雷尼镍，滤饼用甲醇洗涤3次，把滤液浓缩得到粗品，然后通过反相柱(0.1％HCl)得到黄色油状物(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)甲胺(500mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):330.2[M+H] +
第九步：2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000144
将(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)甲胺(240.0mg,728.6μmol)溶在原甲酸三甲酯(6.00mL)中，然后110℃反应12小时。反应完毕后，直接将反应液浓缩得到黄色油状物2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪(280.0mg，粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):340.2[M+H] +
第十步：5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000145
将2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪(200mg,589.3μmol)溶在盐酸(1M,5mL)里，然后50℃反应10小时。反应完成后，直接将反应液浓缩得到粗产品，然后通过反相高效液相色谱法(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：12％-32％，6.5分钟)分离纯化得到黄色固体5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(85mg，产率43.6％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.71(d,1H),8.35(d,1H),8.26(s,1H),7.38(s,1H),2.10-2.15(m,1H),1.25-1.39(m,4H),1.09(t,6H).
LC-MS,M/Z(ESI):312.1[M+H] +
实施例9：目标化合物9的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标产物9)
Figure PCTCN2021122197-appb-000146
目标化合物9的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000147
第一步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(9A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000148
将(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺(150mg,444.7μmol)溶在原乙酸酸三甲酯(5mL)里面，在加入催化量的乙酸(50uL),130℃下反应2个小时。反应完毕后，直接将反应液减压浓缩得到粗品黄色油状化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(9A)(160mg，粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):362.1[M+H] +
第二步：5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(9)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000149
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(160mg)溶在盐酸(1M，1mL)里，50℃下反应12个小时。反应完毕后，将反应液通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75*30mm*3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：4％-24％，6.5分钟)，得到黄色固体化合物5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-7-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(9)(44.6mg，两步产率30.1％)。
1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.79-11.80(m,1H),11.60(s,1H),7.29(s,1H),8.16-8.18(m,1H),7.29(s,1H),5.90-6.20(m,1H),2.85(s,3H),2.54-2.60(m,1H),2.05-2.18(m,1H),1.42-1.49(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):334.1[M+H] +
实施例10：目标化合物10的制备
5-(8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物10)
Figure PCTCN2021122197-appb-000150
目标化合物10的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000151
第一步：1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸酯(10A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000152
把(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸(4.86g，37.9mmol)和4-二甲基氨基吡啶(463.3mg，3.79mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，在0℃下滴加N,N-二异丙基碳二酰亚胺(5.74g，45.5mmol)，在0℃下搅拌0.5小时，然后加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(7.42g，45.5mmol)，在25℃下反应12小时。反应完成后，加水(200mL)淬灭反应，用二氯甲烷(200mL*2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。用硅胶柱分离纯化(100％二氯甲烷)得黄色固体化合物1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸酯(2)(10g，产率96.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.88-7.90(m,2H),7.77-7.80(m,2H),1.73-1.77(m,1H),1.47-1.53(m,1H),1.37-1.42(m,1H),1.18-1.26(m,1H),1.06-1.10(m,4H),1.03(d,3H).
第二步：2-((1S,2S)-2-异丙基环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(10B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000153
把1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2R)-2-异丙基环丙烷-1-羧酸酯(10.0g，36.6mmol)和双联嚬哪醇硼酸酯(18.6g，73.2mmol)溶于乙酸乙酯(100mL)中，在氮气保护下加热至85℃，滴加异烟酸乙酯(2.77g，2.51mL，18.3mmol)，然后在氮气保护下85℃反应12小时。反应结束后，把反应液浓缩，把残留物用石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1(300mL)打浆，然后用硅藻土过滤，用石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1(200mL)洗涤滤饼，把滤液浓缩得粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝50:1-10:1)得到黄色油状化合物2-((1S,2S)-2-异丙基环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(10B)(2.60g，产率33.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ1.22(s,12H),0.96-1.01(m,6H),0.81-0.85(m,1H),0.74-0.78(m,1H),0.62-0.66(m,1H),0.41-0.45(m,1H),-0.39--0.34(m,1H).
第三步：6-氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(10C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000154
将4-溴-6-氯哒嗪-3-胺(500mg，2.40mmol)和2-((1S,2S)-2-异丙基环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(1.01g,4.80mmol)溶解在1,4-二氧六环(20mL)和水(4mL)中，在氮气保护下加入碳酸铯(1.95g，6.00mmol)和双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]二氯化钯(169.8mg，0.239mmol)，升温至100℃反应12小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，然后用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯(V/V)＝10:1-1:1)得到黄色固体化合物6-氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(10C)(150mg，产率29.5％)。
LC-MS,M/Z(ESI):212.1[M+H] +
第四步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(10D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000155
将6-氯-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(150mg,0.708mmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(195.5mg,1.06mmol)溶解在1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(187.8mg,1.77mmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(51.8mg,70.8μmol)，升温至90℃反应2小时。将反应混合物用水(25mL)稀释，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-1:10)得到黄色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(10D)(200mg，产率89.5％)。
LC-MS,M/Z(ESI):316.2[M+H] +
第五步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(10E)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000156
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-胺(200mg,0.634mmol)溶解在1,4-二氧六环(10mL)中，加入氯乙醛(622.3mg,40％水溶液，3.17mmol)，升温至100℃反应2小时。将反应液浓缩得到黄色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(10E)(200mg，粗品)。粗品直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):340.1[M+H] +
第六步：5-(8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物10)
Figure PCTCN2021122197-appb-000157
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(200mg，0.589mmol)溶解在盐酸(1M，5mL)中，升温至70℃反应2小时。把反应液浓缩，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75*30mm*3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％HCl(36.5％)，B＝乙腈；梯度：10％-30％，6.5分钟)，得到白色固体化合物5-(8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(10)(135mg，两步产率68％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.44(d,1H),8.32(s,1H),8.22(d,1H),7.98(s,1H),2.21-2.25(m,1H),1.42-1.48(m,1H),1.32-1.39(m,3H),1.11(dd,6H).
LC-MS,M/Z(ESI):312.2[M+H] +
实施例11：目标化合物11的制备
5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物11)
Figure PCTCN2021122197-appb-000158
目标化合物11的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000159
第一步：6-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(11B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000160
将4-溴-6-氯哒嗪-3-胺(750mg，3.60mmol)和2-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(1.57g,7.20mmol)溶解在1,4-二氧六环(15mL)和水(3mL)中，在氮气保护下加入碳酸铯(3.52g，10.8mmol)和双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]二氯化钯(255mg，360μmol)，升温至90℃反应12小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯(V/V)＝20:1-1:1)得到黄色油状化合物6-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(11B)(420mg，产率53％)。
LC-MS,M/Z(ESI):220.1[M+H] +
第二步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(11C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000161
将6-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(400mg,1.82mmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(369mg,2.0mmol)溶解在1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(579mg,5.46mmol)和[1,1-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(133mg,182μmol)，升温至70℃反应2小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-10:1)得到黄色固体化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(11C)(320mg，产率51.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):324.0[M+H] +
第三步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(11D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000162
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(150mg,464μmol)溶解在1,4-二氧六环(3mL)中，加入氯乙醛(137mg,40％水溶液，696μmol)，升温至90℃反应2小时。将反应液浓缩得到棕色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(11D)(170mg，粗品)。粗品直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):348.0[M+H] +
第四步：3-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(11E)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000163
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(150mg,432μmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入N-氯代丁二酰亚胺(58mg,432μmol)，25℃反应2小时。将反 应混合物用水(30mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL×3)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体化合物3-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(11E)(200mg，产率65.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):382.0[M+H] +
第五步：5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(11)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000164
将3-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(190mg,288μmol)溶解在盐酸溶液(1M,10mL)中，在50℃下搅拌反应3小时。反应完成后，将反应液浓缩得到粗品。粗品通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(柱子：3_Phenomenex Luna C18 75*30mm*3μm；溶剂：A＝水+0.05体积％HCl(36.5％)，B＝乙腈；梯度：20％-40％，6.5分钟)，得到淡黄色固体化合物5-(3-氯-8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(11)(57.5mg，产率55.5％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.36(s,1H),8.35(s,1H),8.14(s,1H),5.91-6.20(m,1H),2.70-2.74(m,1H),2.24-2.28(m,1H),1.65-1.68(m,1H),1.52-1.55(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):354.0[M+H] +
实施例12：目标化合物12的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(12)
Figure PCTCN2021122197-appb-000165
目标化合物12的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000166
第一步：3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸乙酯(12A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000167
在25℃下，将三乙胺(66.8g,659.8mmol)，氯化镁(27.9g,293.9mmol)和丙二酸单乙酯钾盐(37.5g,220.4mmol)加入到乙腈(600mL)中，然后将其在25℃下搅拌3小时。同时，将(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷甲酸(20.0g,146.9mmol)和1,1-羰基二咪唑(35.7g,220.4mmol)加入到乙腈(400mL)中，同样将其在25℃下搅拌3小时，然后将后者的反应液(400mL)，在0℃下，滴加入前一批反应液(600mL)中，然后将反应液在25℃搅拌14小时。反应完成后，向反应液中加入水(200mL)，然后用乙酸乙酯(200mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(200mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-5:1)得到黄色油状化合物3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸乙酯(12A)(5.80g，产率19.14％)。
LC-MS,M/Z(ESI):205.0[M-H] +
第二步：3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸(12B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000168
在25℃下，将3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸乙酯(5.80g,28.1mmol)加入到2M氢氧化钠水溶液(57.9mL)中，然后在25℃下搅拌12小时，反应完成后，向反应液中滴加1M的盐酸水溶液，调节pH值到2～3，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，然后用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，然过滤，浓缩得到粗品黄色油状化合物3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸(12B)(3.34g，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):177.0[M-H] +
第三步：3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代-N-(1H-吡咯-1-基)丙酰胺(12C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000169
在25℃下，将3-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代丙酸(2.39g,13.4mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中，然后向其中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(5.56g,14.6mmol)，N,N-二异丙基乙胺(4.72g,36.5mmol)和1-氨基吡咯(1.00g,12.2mmol)，然后在25℃下搅拌12小时，反应完成后，向反应液中加入水(100mL)，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-5:1)纯化得到黄色油状化合物3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代-N-(1H-吡咯-1-基)丙酰胺(12C)(1.20g，产率40.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):241.0[M-H] +
第四步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2(1H)-酮(12D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000170
在25℃下，将3-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氧代-N-(1H-吡咯-1-基)丙酰胺(1.20g,4.95mmol)加入到醋酸(24.0mL)和二氧六环(72.0mL)中，然后100℃搅拌12小时。反应完成后，向反应液中加入水(100mL)，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-2:1)得到黄色油状化合物4-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2(1H)-酮(12D)(516mg，产率46.5％)。
LC-MS,M/Z(ESI):225.0[M+H] +
第五步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基三氟甲磺酸酯(12E)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000171
在25℃下，将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2(1H)-酮(250mg,1.12mmol)和三乙胺(338.5mg,3.35mmol)加入到二氯甲烷(3.00mL)中，然后将三氟甲磺酸酐(629.2mg,2.23mmol)在0℃下滴加入反应液中，混合物在0℃下搅拌30分钟。反应完成后，向反应液中加入水(50mL)，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品黄色油状化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基三氟甲磺酸酯(12E)(317.8mg，产率80.0％)。
LC-MS,M/Z(ESI):357.0[M+H] +
第六步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(12F)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000172
在25℃下，将4-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基三氟甲磺酸酯(317.8mg,892.0μmol)，2,4-二甲氧基嘧啶-5-硼酸(180.5mg,981.2μmol)，碳酸钠(236.4mg,2.23mmol)和1,1-双(二苯基磷)二茂铁二氯化钯(65.3mg,89.2μmol)加入到二氧六环(3.5mL)和水(0.7mL)中。然后在100℃下搅拌2小时。反应完成后，向反应液中加入水(50mL)，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品经制备板(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)纯化制备得到绿色油状化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(12F)(150mg，产率48.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):347.1[M+H] +
第七步：5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(12)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000173
在25℃下，将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(150mg,433.1μmol)加入到1M的盐酸水溶液(4.33mL)中，然后在50℃搅拌12小时。反应完成后，直接将反应液浓缩得到粗产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25mm×10μm；溶剂：A＝水+0.225体积％甲酸(99％)，B＝乙腈；梯度：22％-55％，11分钟)，得到目标化合物5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮 (12)(15.1mg，产率10.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ11.34(br d,2H),7.91(s,1H),7.83(dd,1H),6.8-6.9(m,2H),6.68(dd,1H),5.84-6.14(m,1H),2.49-2.50(m,1H),1.84-1.92(m,1H),1.20-1.28(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):319.0[M+H] +。
实施例13：目标化合物13的制备
5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物13)
Figure PCTCN2021122197-appb-000174
目标化合物13的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000175
第一步：2-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(13B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000176
把2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(500mg，2.66mmol)，2-[(1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环(638mg，2.93mmol)和磷酸钾(1.69g，7.98mmol)溶于二氧六环(10mL)和水(0.5mL)中，在25℃氮气保护下，加入二氯双(三苯基膦)钯(II)(187mg，266μmol)，80℃下搅拌12小时。将反应体系旋干，粗品用反相Flash(0.05％HCl)分离纯化得到黄色油状化合物2-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(13B)(450mg，产率21.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):244.1[M+H] +
第二步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(13B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000177
将2-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(450mg,1.72mmol),2,4-二甲氧基嘧啶-5-硼酸(348mg,1.89mmol)和碳酸钠(547mg,5.16mmol)溶于二氧六环(10mL)和水(2mL)中，在 25℃氮气保护下，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷(281mg，344μmol)，80℃下搅拌12小时。将反应体系旋干，粗品通过反相Flash(0.05％HCl)纯化得到黑棕色油状化合物4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(13C)(200mg，产率27.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):348.3[M+H] +
第三步：5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(13)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000178
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(200mg，474μmol)溶解在盐酸水溶液(1M，10mL)中，50℃反应12小时。将反应液浓缩，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：20％-40％，6.5分钟)，得到淡黄色固体化合物5-(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(13)(11.6mg，产率7.33％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.56(s,1H),8.27(s,1H),7.65(d,1H),7.22-7.24(m,1H),6.02(td,1H),3.03-3.07(m,1H),2.48-2.52(m,1H),1.77-1.83(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):320.1[M+H] +
实施例14：目标化合物14的制备
5-(2-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物14)
Figure PCTCN2021122197-appb-000179
目标化合物14的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000180
第一步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-醇(14A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000181
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(1.00g,2.98mmol)，磷酸氢二钠(1.14g,8.05mmol)和叔丁基N-(2-氯乙酰基)氨基甲酯(980mg,5.07mmol)溶在N，N二甲基乙酰胺(20mL)，100℃反应12小时。反应完成后，加水(100mL)淬灭反应，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。然后通过反相Flash(0.05％TFA)纯化得到粗品黄色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-醇(14A)(200mg，产率13.9％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.71(s,1H),7.40(s,1H),7.02(s,1H),5.84-6.13(m,1H),4.08(s,3H),4.10(s,3H),2.69-2.73(m,1H),2.05(br.s,1H),1.60-1.64(m,1H),1.24-1.28(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):364.1[M+H] +
第二步：5-(2-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物14)
Figure PCTCN2021122197-appb-000182
将8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-醇(200mg,435μmol)溶在1M盐酸水溶液中(2mL)，在50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：22％-52％，10分钟)，得到白色固体化合物5-(2-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物14)(0.37mg,产率0.1％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.12(s,1H),8.09(s,1H),7.59(s,1H),5.76-6.05(m,1H),2.66-2.69(m,1H),2.27-2.29(m,1H),1.56-1.60(m,1H),1.51-1.53(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):354.1[M+H] +。
实施例15：目标化合物15的制备
5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物15)
Figure PCTCN2021122197-appb-000183
目标化合物15的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000184
第一步：6-氯-4-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(15B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000185
将4-溴-6-氯哒嗪-3-胺(600mg，2.88mmol)和2-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环(1.15g,5.76mmol)溶解在二氧六环(24mL)和水(6mL)中，在氮气保护下加入碳酸铯(2.81g，8.64mmol)和二氯二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)磷钯(II)(204mg，288μmol)，100℃反应12小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯(V/V)＝20:1-1:1)得到黄色油状化合物6-氯-4-((1S，2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(15B)(160mg，产率27.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):202.6[M+H] +
第二步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(15C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000186
将6-氯-4-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(150mg,0.74mmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(205mg,1.12mmol)溶解在二氧六环(6mL)和水(1.5mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(237mg,2.23mmol)和1,1'-二(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)(54mg,74μmol)，80℃反应4小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，然后用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(30mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-0:1)得到黄色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(15C)(230mg，产率78％)。
LC-MS,M/Z(ESI):306.3[M+H] +
第三步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(15D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000187
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(230mg,753μmol)溶解在二氧六环(6mL)中，加入氯乙醛(370mg,40％水溶液，1.83mmol)，100℃反应5小时。将反应液浓缩得到棕色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(15D)(250mg，粗品)。粗品直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):330.3[M+H] +
第四步：3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(15E)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000188
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S，2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(250mg,759μmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入N-氯代丁二酰亚胺(44mg,759μmol)，25℃反应2小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(50mL×3)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体化合物3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S，2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(15E)(100mg，产率36.2％)。
LC-MS,M/Z(ESI):364.7[M+H] +
第五步：5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(15)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000189
将3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg,500μmol)溶解在盐酸溶液(1M,10mL)中，100℃下反应12小时。反应完成后，将反应液浓缩得到粗品，加入饱和碳酸钠调节至碱性，过滤，滤饼加入甲醇(10mL)加热回流打浆得到淡黄色固体化合物5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(15)(32mg，产率32.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.51-11.55(m,2H),8.01(s,1H),7.84(s,1H),7.48(s,1H),4.32-4.61(m,2H),1.12(s,1H),1.03(s,1H),1.21-1.57(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):336.7[M+H] +。
实施例16：目标化合物16的制备
5-(2,3-二氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物16)
Figure PCTCN2021122197-appb-000190
目标化合物16的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000191
第一步：2,3-二氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(16A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000192
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg,288μmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入N-氯代丁二酰亚胺(58mg,432μmol)，50℃反应16小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(20mL×3)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，粗品通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：A＝水+0.05体积％NH 4HCO 336.5％)，B＝乙腈；梯度：20％-40％，6.5分钟)得到淡黄色固体化合物：2,3-二氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(16A)(40mg，产率33.6％)。
LC-MS,M/Z(ESI):416.0[M+H] +
第二步：5-(2,3-二氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(16)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000193
将2,3-二氯-8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(40mg,96μmol)溶解在盐酸溶液(1M,10mL)中，在50℃下反应16小时。反应完成后，将反应液浓缩得到淡黄色固体化合物5-(2,3-二氯-8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(16)(20mg，产率53.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.56(t,2H),8.00(d,1H),7.62(s,1H),6.16-5.87(m,1H),2.66-2.60(m,1H),2.48-2.44(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.57-1.42(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):388.0[M+H] +。
实施例17：目标化合物17的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物17)
Figure PCTCN2021122197-appb-000194
目标化合物17的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000195
第一步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(17A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000196
把4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(150mg,463μmol)和3-溴-1,1,1-三氟-丙烷-2-酮(106mg,556μmol)溶于二氧六环(2.00mL)中，50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品黄色油状化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(17A)(180mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):416.1[M+H] +
第二步：5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物17)
Figure PCTCN2021122197-appb-000197
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(180mg，433μmol)溶在1M的盐酸水溶液中(1mL)，50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品，通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；溶剂：A＝水+0.05％体积盐酸36.5％)，B＝乙腈；梯度：30％-50％，6.5分钟)，得到白色固体化合物5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(17)(63.2mg，产率37.5％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.50(s,1H),8.16(s,1H),7.69(s,1H),5.77-6.07(m,1H),2.74-2.76(m,1H),2.36-2.39(m,1H),1.64-1.66(m,1H),1.50-1.54(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):388.1[M+H] +。
实施例18：目标化合物18的制备
5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物18)
Figure PCTCN2021122197-appb-000198
目标化合物18的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000199
第一步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(18A)
Figure PCTCN2021122197-appb-000200
把3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(650mg,1.94mmol),三丁基1-乙氧基乙烯基)锡烷(842mg,2.33mmol)和二氯双(三苯基膦)钯(II)(136mg,194μmol)溶在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)，然后在氮气保护下110℃反应3小时。反应完毕后，将反应液倒入氟化钾(10mL)水溶液中，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机相，用食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，粗品通过硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝20:1-5:1)得到黄色油状化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(700mg，97.3％产率)。
LC-MS,M/Z(ESI):371.1[M+H] +
第二步：1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-酮(18B)
Figure PCTCN2021122197-appb-000201
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-乙氧基乙烯基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪(700mg,1.89mmol)溶在四氢呋喃(3mL)中，滴加盐酸(0.5M,3.78mL)，在20℃下反应2小时。反应完毕后，将反应液用碳酸氢钠水溶液调pH至9，然后用二氯甲烷(20mL×2)萃取，合并有机相，用食盐水(50mL)洗涤， 无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-酮(18B)(350mg,粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):343.1[M+H] +
第三步：1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-胺(18C)
Figure PCTCN2021122197-appb-000202
将1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-酮(280mg,817μmol)，醋酸铵(630mg,8.18mmol)溶在甲醇(3mL)中，然后在20℃下反应12小时，再加入氰基硼氢化钠(77.0mg,1.23mmol)，然后在20℃下反应30分钟。反应完毕后，将反应液倒入碳酸钠(10mL)水溶液中，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；溶剂：A＝水+0.225％体积甲酸(99％)，B＝乙腈；梯度：15％-45％，10分钟)，得到黄色油状化合物1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-胺(18C)(80.0mg,29.5％产率)。
LC-MS,M/Z(ESI):344.1[M+H] +
第四步：2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(18D)
Figure PCTCN2021122197-appb-000203
将1-(6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)哒嗪-3-基)乙-1-胺(80.0mg,203μmol)溶在原甲酸三甲酯(108mg,1.02mmol)中，100℃下反应2小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品黄色油状化合物2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(18D)(80.0mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):354.1[M+H] +
第五步：5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物18)
Figure PCTCN2021122197-appb-000204
将2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪(80.0mg,226μmol)溶在盐酸(1M,1.13mL)中，50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；溶剂：A＝水+0.225％体积甲酸(99％)，B＝乙腈；梯度：14％-34％，6.5分钟)，得到黄色固体化合物5-(4-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)-5-甲基咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物18)(11.0mg,产率14.9％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.31(s,1H),8.18(s,1H),7.20(s,1H),2.84(s,3H),2.16-2.20(m,1H),1.33-1.35(m,2H),1.28-1.30(m,2H),1.07-1.12(m,6H).
LC-MS,M/Z(ESI):326.1[M+H] +。
实施例19：目标化合物19的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物19)
Figure PCTCN2021122197-appb-000205
目标化合物19的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000206
第一步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪(19A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000207
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(200mg,618μmol)和1-溴丁烷-2-酮(140mg,928μmol)溶于二氧六环(6mL)中，接着60℃下搅拌12小时。将反应体系旋干得到黄色油状化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪(19A)(300mg，粗品)，直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):376.1[M+H] +
第二步：5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(19)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000208
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪(270mg，719μmol)溶解在盐酸水溶液(1M,5mL)中，升温至50℃反应12小时。将反应液浓缩，然后通过高效液相色谱进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25mm×10μm；溶剂：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：2％-32％，10分钟)，得到淡黄色固体化合物5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-乙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(19)(85.5mg，产率33.6％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.30(s,1H),8.28(s,1H),8.05(s,1H),6.07(td,1H),2.99-3.05(m,2H),2.71-2.73(m,1H),2.22-2.23(m,1H),1.64-1.68(m,1H),1.45-1.50(m,4H).
LC-MS,M/Z(ESI):348.1[M+H] +。
实施例20：目标化合物20的制备
5-(3-氯-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物20)
Figure PCTCN2021122197-appb-000209
目标化合物20的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000210
第一步：3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(20A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000211
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(269.0mg,792.1μmol)溶在N-N二甲基甲酰胺(3mL)中，然后滴加N-氯代丁二酰亚胺(105.1mg,792.1μmol)，在25℃反应1小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品黄色油状化合物3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(20A)(350.0mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):374.1[M+H] +
第二步：5-(3-氯-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物20)
Figure PCTCN2021122197-appb-000212
将3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(350.0mg,936.2μmol)溶在1M盐酸水溶液中(4mL)，在50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：30％-50％，6.5分钟)，得到黄色固体化合物5-(3-氯-8-((1S，2R)-2-异丙基环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物20)(138.0mg,产率42.1％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.31(s,1H),8.22(s,1H),7.89(s,1H),2.24-2.26(m,1H),1.38-1.40(m,1H),1.36-1.38(m,1H),1.32-1.35(m,2H),1.07-1.11(m,6H).
LC-MS,M/Z(ESI):346.1[M+H] +。
实施例21：目标化合物21的制备
5-(7-氨基-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物21)
Figure PCTCN2021122197-appb-000213
目标化合物21的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000214
第一步：4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-7-胺(21A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000215
把(4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-((2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-基)甲胺(80.0mg,237.2μmol)溶于乙醇(2.00mL)和水(0.50mL)中，在加入溴化氰(37.6mg,355.2μmol)搅拌30分钟，然后加入二异丙基乙胺(91.9mg,711.4μmol)在25℃反应1小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品黄色油状化合物4-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-7-胺(21A)(100mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):363.1[M+H] +
第二步：5-(7-氨基-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物21)
Figure PCTCN2021122197-appb-000216
将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-7-胺(50.0mg，215μmol)溶在1M的盐酸水溶液中(1mL)，在50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品，通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：8％-68％，6.5分钟)，得到黄色固体化合物5-(7-氨基-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物21)(7.00mg,产率7.91％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.27(s,1H),7.45(s,1H),7.12(s,1H),5.75-6.04(m,1H),2.36-2.38(m,1H),1.96-1.99(m,1H),1.42-1.46(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):335.1[M+H] +。
实施例22：目标化合物22的制备
5-(3-氯-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物22)
Figure PCTCN2021122197-appb-000217
目标化合物22的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000218
第一步：1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯(22B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000219
把(1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙羧酸(15.0g，97.4mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.19g，9.73mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中，在0℃下滴加N,N-二异丙基碳二酰亚胺(14.7g，116.8mmol)，在0℃下搅拌0.5小时，然后加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(19.1g，116.8mmol)，在20℃下反应12小时。反应完成后，加水(500mL)淬灭反应，用二氯甲烷(500mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。用硅胶柱分离纯化(100％二氯甲烷)得黄色固体化合物1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯(22B)(24.0g，产率82.4％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.89-7.92(m,2H),7.81-7.83(m,2H),2.39-2.42(m,2H),1.58-1.61(m,2H).
第二步：4,4,5,5-四甲基-2-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)-1,3,2-二氧杂硼烷(22C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000220
把1,3-二氧异吲哚-2-基(1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙烷-1-羧酸酯(24.0g，80.2mmol)和双联嚬哪醇硼酸酯(40.7g，160mmol)溶于乙酸乙酯(250mL)中，在氮气保护下加热至85℃，滴加异烟酸乙酯(6.06g，40.1mmol)，然后在氮气保护下85℃反应12小时。反应结束后，把反应液浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚)得到黄色油状化合物4,4,5,5-四甲基-2-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)-1,3,2-二氧杂硼烷(22C)(5.00g，产率26.4％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ1.68-1.70(m,1H),1.19-1.26(m,12H),0.87-0.88(m,1H),0.84-0.86(m,1H),0.32-0.32(m,1H).
第三步：6-氯-4-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(22D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000221
将4-溴-6-氯哒嗪-3-胺(1.00g，4.80mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-((1S，2S)-2-(三氟甲基)环丙基)-1,3,2-二氧杂硼烷(2.26g,9.59mmol)溶解在二氧六环(15mL)和水(3mL)中，在氮气保护下加入碳酸铯(4.69g，14.4mmol)和二氯二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)磷钯(II)(340mg，480μmol)，升温至100℃反应12小时。将反应混合物浓缩得到粗品。用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯(V/V)＝10:1-1:1)得到黄色油状化合物6-氯-4-((1S，2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(22D)(180mg，产率7.22％)。
LC-MS,M/Z(ESI):238.3[M+H] +
第四步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(22E)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000222
将6-氯-4-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(170mg,654μmol)和(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(144mg,785μmol)溶解在二氧六环(5mL)和水(1mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(208mg,1.96mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(107mg,131μmol)，升温至80℃反应1小时。将反应混合物浓缩得到粗品，用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝5:1-0:1)得到黄色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(22E)(100mg，产率44.8％)。
LC-MS,M/Z(ESI):342.3[M+H] +
第五步：6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(22F)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000223
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-4-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(100mg,293μmol)溶解在二氧六环(2mL)中，加入氯乙醛(115mg,40％水溶液，586μmol)，升温至90℃反应1小时。将反应液浓缩得到黄色固体化合物6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(22F)(120mg，粗品)。粗品直接用于下一步。
LC-MS,M/Z(ESI):366.1[M+H] +
第六步：3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S，2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(22G)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000224
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg,274μmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，加入N-氯代丁二酰亚胺(36.6mg,274μmol)，25℃反应1小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×3)洗涤有机相，硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.225％体积甲酸(99.0％)，B＝乙腈；梯度：52％-82％，7分钟)，得到黄色油状化合物3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(22G)(15mg，产率13.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):400.0[M+H] +
第七步：5-(3-氯-8-(((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(22)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000225
将3-氯-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S，2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(15mg,37.5μmol)溶解在四氢呋喃(0.5mL)中，加入盐酸溶液(1M,0.5mL)，在50℃下搅拌反应2小时。反应完成后，将反应液浓缩得到粗品。粗品通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：A＝水+0.225％体积甲酸(99.0％)，B＝乙腈；梯度：25％-55％，7分钟)，得到白色固体化合物5-(3-氯-8-(((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(22)(2.64mg，产率18.7％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.20(s,1H),7.72(s,1H),7.68(s,1H),2.88-2.90(m,1H),2.75-2.77(m,1H),1.76-1.78(m,1H),1.51-1.65(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):372.2[M+H] +
实施例23：目标化合物23的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(目标化合物23)
Figure PCTCN2021122197-appb-000226
目标化合物23的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000227
第一步：5-(8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(23)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000228
将6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(20mg,54.8μmol)溶解在四氢呋喃(0.5mL)中，加入盐酸溶液(1M,0.5mL)，在50℃下搅拌反应2小时。反应完成后，将反应液浓缩得到粗品。粗品通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：A＝水+0.225％体积甲酸(99.0％)，B＝乙腈；梯度：5％-35％，7分钟)，得到白色固体化合物5-(8-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(23)(6.99mg，产率37.4％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.12(s,1H),8.11(s,1H),7.71(s,1H),7.56(s,1H),2.89-2.94(m,1H),2.67-2.70(m,1H),1.67-1.71(m,1H),1.61-1.65(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):338.1[M+H] +。
实施例24：目标化合物24的制备
5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物24)
Figure PCTCN2021122197-appb-000229
目标化合物24的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000230
第一步：6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷)咪唑[1,2-b]吡嗪(24B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000231
将6-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)哒嗪-3-胺(2.00g,8.88mmol)溶于二氧六环(30mL)中，在25℃下加入氯乙醛(2.61g,13.3mmol，40％水溶液)，接着90℃下搅拌2小时。将反应体系旋干，粗品通过反相Flash(0.05％HCl)纯化得到黄色油状化合物6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷)咪唑[1,2-b]吡嗪 (24B)(1.50g，产率69.3％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.89(d,1H),7.70(d,1H),6.76(s,1H),5.91(td,1H),2.65-2.66(m,1H),2.61-2.64(m,1H),1.78-1.81(m,1H),1.50-1.54(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):244.1[M+H] +
第二步：6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(24C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000232
将6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙烷)咪唑[1,2-b]吡嗪(700mg,2.87mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中，在25℃下加入1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)盐(1.22g,3.45mmol)，接着在80℃下搅拌12小时。反应体系加入乙酸乙酯(50mL)，用饱和食盐水(50mL×5)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品通过反相Flash(0.05％HCl)得到黄色油状化合物6-氯-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(24C)(100mg，产率13.3％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.32(d,1H),6.74(s,1H),5.91(td,1H),2.61-2.62(m,1H),2.59-2.60(m,1H),1.79-1.81(m,1H),1.51-1.54(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):262.1[M+H] +
第三步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(24D)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000233
将6-氯-8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg，379μmol)和2,4-二甲氧基嘧啶-5-硼酸(76.7mg，417μmol)溶解在二氧六环(5mL)和水(1mL)中，在氮气保护下加入碳酸钠(121mg，1.14mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(61.9mg，75.8μmol)，升温至80℃反应12小时。将反应体系旋干得到粗品。粗品用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝10:1-1:1)得到白色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(24D)(100mg，产率65.2％)。
LC-MS,M/Z(ESI):366.1[M+H] +
第四步：5-(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(24)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000234
将8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪(100mg，247μmol)溶解在盐酸水溶液(1M，5mL)中，升温至50℃反应12小时。将反应液浓缩，然后通过高效液相色谱进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：A＝水+0.225％体积甲酸(99.0％)，B＝乙腈；梯度：15％-45％，7分钟)，得到淡黄色固体化合物5-(8-((1S,2S)-2-(二氟 甲基)环丙基)-3-氟咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(24)(43.4mg，产率50.6％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.16(s,1H),7.54(s,1H),7.40(d,1H),5.92(td,1H),2.69-2.74(m,1H),2.27-2.31(m,1H),1.58-1.60(m,1H),1.49-1.53(m,1H)。
LC-MS,M/Z(ESI):338.1[M+H] +。
实施例25：目标化合物25的制备
5-(3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(目标化合物25)
Figure PCTCN2021122197-appb-000235
目标化合物25的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000236
第一步：3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(25A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000237
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(50.0mg,144μmol)溶于N,N二甲基甲酰胺(1.00mL)中，在25℃下加入N-溴代丁二酰亚胺(25.6mg,144μmol)，在25℃搅拌1小时。反应体系加入水(50mL)，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色油状化合物3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(25A)(60mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):426.0[M+H] +
第二步：5-(3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(25)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000238
将3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(60.0mg，141μmol)溶解在盐酸水溶液(1M，3mL)中，升温至50℃反应12小时。将反应液浓缩，然后通过高效液相色谱仪进行分离，分离方法为(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；溶剂：A＝水+0.05％体积盐酸(36.5％)，B＝乙腈；梯度：22％-42％，6.5分钟)，得到淡黄色固体化合物。然后在甲醇(2mL)中加热到50℃重结晶得到白色固体化合物5-(3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(25)(7mg，产率9％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.35(s,1H),8.34(s,1H),8.13(s,1H),6.04(td,1H),2.70-2.73(m,1H),2.25-2.28(m,1H),1.62-1.66(m,1H),1.52-1.54(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):398.0[M+H] +。
实施例26：目标化合物26的制备
8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-腈(目标化合物26)
Figure PCTCN2021122197-appb-000239
目标化合物26的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000240
第一步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-腈(26)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000241
将5-(3-溴-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(110mg,276μmol)溶解在N,N二甲基甲酰胺(5mL)中，在氮气保护下加入氰化锌(38.9mg,332μmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(25.3mg,27.6μmol)和1,1-双(二苯基膦基)二茂铁(15.3mg,27.6μmol)，升温至120℃反应12小时。将反应液浓缩，然后通过高效液相色谱仪进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：A＝水+0.225％体积甲酸(99.0％)，B＝乙腈；梯度：20％-50％，7分钟)，得到淡黄色固体化合物8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-腈(26)(20.1mg，产率19.1％)。
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.30(s,1H),8.24(s,1H),7.89(s,1H),5.93(td,1H),2.74-2.79(m,1H),2.38-2.42(m,1H),1.68-1.70(m,1H),1.52-1.56(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):345.0[M+H] +
实施例27：目标化合物27的制备
8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-腈(目标化合物27)
Figure PCTCN2021122197-appb-000242
目标化合物27的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000243
第一步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯(27A)
Figure PCTCN2021122197-appb-000244
把4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)哒嗪-3-胺(700.0mg,2.17mmol)，3-溴-2-氧代丙酸乙酯(928.0mg,4.76mmol)和碳酸钠(688.5mg,6.50mmol)溶在N,N-二甲基甲酰胺(7mL)中，在40℃反应12小时。反应完毕后，将反应液倒入水中，过滤，收集滤饼，干燥得到粗品黄色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯(27A)(880.0mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):420.1[M+H] +
第二步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸(27B)
Figure PCTCN2021122197-appb-000245
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯(400.0mg,953.2μmol)和氢氧化钠(38.1mg,953.2μmol)溶在四氢呋喃(4mL)，在25℃反应2小时。反应完毕后，将反应液用1M盐酸调pH＝4，然后用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，然后用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸(27B)(200mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):392.1[M+H] +
第三步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(27C)
Figure PCTCN2021122197-appb-000246
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸(190.0mg,485.1μmol)，N,N-二异丙基乙胺(188.2mg,1.46mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(276.3mg,728.3μmol)溶在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)，在25℃反应30分钟，然后将氯化铵(31.1mg,582.3μmol)加入到反应液中，在25℃下反应1小时。反应完毕后，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，然后用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品黄色油状化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(220mg,粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):391.1[M+H] +
第四步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(27D)
Figure PCTCN2021122197-appb-000247
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(200mg,512.3μmol)溶在1M的盐酸水溶液中(2mL)，在50℃反应12小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到粗品黄色油状化合物8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(27D)(150mg，粗品)。
LC-MS,M/Z(ESI):363.1[M+H] +
第五步：8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-腈(目标化合物27)
Figure PCTCN2021122197-appb-000248
将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酰胺(140.0mg,386.2μmol)，三乙胺(78.2mg,772μmol)和三氟乙酸酐(162mg,772μmol)溶在四氢呋喃(2mL)里面，在25℃反应1小时。反应完毕后，将反应液浓缩得到产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；溶剂：A＝水+0.225％体积甲酸(99％)，B＝乙腈；梯度：22％-52％，7分钟)，得到白色固体化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二氧-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-腈(目标化合物27)(12.0mg,产率8.71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO_d 6):δ11.44(s,1H),9.11(s,1H),8.05(s,1H),7.69(s,1H),5.89-6.18(m,1H),2.66-2.67(m,1H),2.32-2.33(m,1H),1.64-1.65(m,1H),1.45-1.48(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):345.1[M+H] +。
实施例28：目标化合物28的制备
5-(2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(28)
Figure PCTCN2021122197-appb-000249
目标化合物28的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000250
第一步：(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲醇(28A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000251
在室温下，将8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯(100mg,238.5μmol)加入到四氢呋喃(1.00mL)中，然后在0℃和氮气保护下，分批向反应液中加入四氢铝锂(18.1mg,476.9μmol)，然后在45℃下搅拌2小时，反应完成后，向反应液中滴加冰水(0.1mL)和1M氢氧化钠水溶液(0.1mL)，之后再加入无水硫酸钠，然后过滤，滤饼用乙酸乙酯(25mL)洗涤，将滤液浓缩得到粗品。粗品通过制备板(石油醚：乙酸乙酯＝1:5)纯化得到黄色固体化合物(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲醇(28A)(20.0mg，产率22.2％)。
LC-MS,M/Z(ESI):378.0[M+H] +
第二步：8-((1S，2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-甲醛(28B)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000252
在室温下，将(8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)甲醇(20.0mg,53.0μmol)加入到二氯甲烷(0.50mL)中，然后在0℃和氮气保护下，分批向反应液中加入戴斯-马丁过碘烷(24.7mg,58.3μmol)，然后在25℃下搅拌1小时，反应完成后，向反应液中滴加饱和的硫代硫酸钠水溶液(25mL)，然后用乙酸乙酯(25mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(25mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品通过制备板(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化制备得到黄色油状化合物8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-甲醛(28B)(15.0mg，产率75.4％)。
LC-MS,M/Z(ESI):376.0[M+H] +
第三步：2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(28C)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000253
在室温下，将8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-甲醛(15mg,39.96μmol)加入到二氯甲烷(1.50mL)中，然后在0℃和氮气保护下，向反应液中滴加二乙氨基三氟化硫(14.17mg,87.92μmol)，然后在25℃下搅拌2小时，反应完成后，向反应液中滴加饱和的碳酸氢钠水溶液(25mL)，之后用乙酸乙酯(25mL×2)萃取，合并有机相，饱和食盐水(25mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品经制备板(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化制备得到黄色油状化合物2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(28C)(8.00mg，产率50.4％)。
LC-MS,M/Z(ESI):398.0[M+H] +
第四步：5-(2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(28)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000254
在室温下，将2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-6-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(8mg,20.13μmol)加入到1M的盐酸水溶液(0.80mL)中，然后将混合物在50℃搅拌12小时。然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25mm×10μm；溶剂：A＝水+0.225体积％甲酸(99％)，B＝乙腈；梯度：18％-48％，10分钟)，得到目标化合物5-(2-(二氟甲基)-8-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(28)(4.73mg，产率63.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.56(s,1H),8.01(s,1H),7.56(s,1H),7.00-7.30(m,1H),5.80-6.30(m,1H),2.73-2.76(m,1H),2.42-2.45(m,1H),1.62-1.64(m,1H),1.43-1.47(m,1H).
LC-MS,M/Z(ESI):370.0[M+H] +。
实施例29：目标化合物29的制备
5-(7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(29)
Figure PCTCN2021122197-appb-000255
目标化合物29的合成路线如下所示：
Figure PCTCN2021122197-appb-000256
第一步：7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(29A)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000257
在25℃下，将4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(40.0mg,115.5μmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(0.50mL)中，然后向其中加入N-氯代丁二酰亚胺(15.4mg,115.5μmol)，然后将其在25℃下搅拌2小时。反应完成后，向反应液中加入水(10mL)，然后用乙酸乙酯(25mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(25mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。粗品经制备板(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)制备得到绿色固体化合物7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(29A)(38.5mg，产率87.5％)。
LC-MS,M/Z(ESI):381.0[M+H] +
第二步：5-(7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(29)的合成
Figure PCTCN2021122197-appb-000258
在25℃下，将7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)-2-(2,4-二甲氧基嘧啶-5-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪(38.5mg,101.1μmol)加入到1M的盐酸水溶液(1.01mL)中，然后在50℃搅拌12小时。反应完成后，直接将反应液浓缩得到粗产品，然后通过反相高效液相色谱法进行分离，分离方法为(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25mm×10μm；流动相：A＝水+0.225％体积甲酸，B＝乙腈；梯度：22％-55％，11分钟)，然后再经过手性拆分(色谱柱：Phenomenex-Cellulose-2 250mm×30mm,10μm；溶剂：A＝水+0.1％体积氨水(30％)，B＝甲醇；梯度：45％-45％，35min)分离得到目标化合物5-(7-氯-4-((1S,2S)-2-(二氟甲基)环丙基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(29)(2.29mg，产率6.41％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ10.62-11.83(m,2H),7.95(s,1H),6.98(d,1H),6.94(s,1H),6.83(d,1H),5.84-6.14(m,1H),1.89-1.99(m,2H),1.31-1.40(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):353.0[M+H] +。
测试例1：化合物对重组人CD73酶体外抑制活性
实验在含25mM Tris(Biosharp；77-86-1)、25mM MgCl 2(南京化学试剂有限公司；7791-18-6)的Tris-MgCl 2buffer中进行。用Tris-MgCl 2buffer将Human-CD73(Novoprotein；C446)配制为3×母液，按20μL/孔加入到96孔白板中，使终浓度为0.1μg/mL；用Tris-MgCl 2buffer将化合物终浓度稀释为合适的浓度梯度的3×母液，将化合物按照20μL/孔加入到上述的96孔测试白板中，混匀后，常温孵育30min，同时设定阳性对照组(不加化合物)和阴性对照组(不加CD73)；用Tris-MgCl 2buffer将AMP(Sigma；A1752-5G)配制为3×母液，按照20μl/孔加入到上述的96孔白板中，使终浓度为100μM，混匀，继续37℃孵育60min；ATP用Tris-MgCl 2buffer将ATP(Sigma；A7699-1G)配制为7×母液，按照10μL/孔加入到上述的96孔白板中，终浓度为100μM，混匀，继续孵育5min，用ATP-GLO试剂盒(Promega；G7573)检测。
按以下公式计算不同浓度化合物对Human-CD73抑制率，然后以化合物浓度为X轴，抑制率为Y轴，通过Prism软件计算化合物对Human-CD73抑制的IC 50值：
Figure PCTCN2021122197-appb-000259
表1 测试化合物对CD73酶体外抑制活性
测试化合物 IC 50(nM)
1 91.05
2 9.989
3 12.08
4 561
5 56.27
6 47.09
7 450
8 38.91
9 80.19
10 16.84
11 14.92
12 36.61
13 802.6
14 38.91
15 46.65
16 71.38
17 12.77
18 39.74
19 40.81
20 18.69
21 18.52
22 21.05
23 38.60
24 13.88
25 17.81
26 277.6
27 86.31
28 44.06
29 130.4
实验结果表明，本公开化合物对CD73酶具有良好的抑制作用。
测试例2：药代动力学试验
小鼠药代动力学试验，使用雄性ICR小鼠，20-25g，禁食过夜。取3只小鼠，口服灌胃给药(10mg/kg)。在给药前、和在给药后15、30分钟以及1、2、4、8、24小时采血；另外取3只小鼠，静脉注射给药(3mg/kg)，在给药前、和在给药后15、30分钟以及1、2、4、8、24小时采血。血液样品6800g，2-8℃离心6分钟，收集血浆，于-80℃保存。取各时间点血浆，加入3-5倍量含内标的乙腈溶液混合，涡旋混合1分钟，13000转/分钟4℃离心10分钟，取上清液加入3倍量水混合，取适量混合液进行LC-MS/MS分析。主要药代动力学参数用WinNonlin 7.0软件非房室模型分析。
表2 小鼠药代动力学试验结果
Figure PCTCN2021122197-appb-000260
小鼠实验结果表明，本公开化合物表现出优良的药代动力学性质，成药性好。
测试例3：CT-26结直肠癌体内药效试验
小鼠适应性饲养一周后，将处于对数期的CT-26细胞重悬于PBS，按100μL/只将5x10 5CT-26细胞接种于小鼠右侧后部处皮下，定期观察肿瘤生长情况，待肿瘤生长至平均体积80-100mm 3时，根据肿瘤大小和小鼠体重随机分为模型组和给药组(单药、与PD-1抗体联用)，给药前和给药过程中测量、记录肿瘤大小和动物体重，治疗结束后比较模型组和给药组肿瘤大小差异以确定药效。
实验结果表明，本公开化合物单用或与PD-1抗体联用都具有显著的抑制CT-26结直肠癌生长的作用。
测试例4：E.G7-OVA T细胞淋巴瘤体内药效试验
小鼠适应性饲养一周后，将处于对数期的E.G7-OVA细胞重悬于PBS，按100μL/只将合适数量的E.G7-OVA细胞接种于小鼠右侧后部处皮下，定期观察肿瘤生长情况，待肿瘤生长至平均体积80-100mm 3时根据肿瘤大小和小鼠体重随机分为模型组和给药组(单药、与PD-1抗体联用)，给药前和给药过程中测量、记录肿瘤大小和动物体重，治疗结束后比较模型组和给药组肿瘤大小差异以确定药效。
实验结果表明，本公开化合物单用或与PD-1抗体联用都具有显著的抑制E.G7-OVA T细胞淋巴瘤生长的作用。

Claims (28)

  1. 式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药：
    Figure PCTCN2021122197-appb-100001
    其中，
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100002
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100003
    中Y 1，Y 2，Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1，Y 2，Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代可以是一个或多个取代，所述的R b各自独立地为下列取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  2. 式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药：
    Figure PCTCN2021122197-appb-100004
    其中，
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100005
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100006
    中Y 1，Y 2，Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1，Y 2，Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的取代各自独立地是指下列取代基中的一个或多个取代：C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  3. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    所述未取代或被R b取代的基团中，所述基团各自独立地选自C 1-C 6烷基、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基或4-8元杂环烯基。
  4. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100007
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100008
    或者
    Figure PCTCN2021122197-appb-100009
    优选为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100010
    和/或，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100011
    为5元杂芳基、5元杂环烷基或5元杂环烯基，优选为5元杂芳基；
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100012
    为5元杂芳基时，所述杂芳基的杂原子为N；
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100013
    为5元杂芳基时，所述杂芳基的杂原子数为1-3个，优选为1或2个。
  5. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100014
    中，当R 1为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl；
    和/或，当R 1为卤素时，m为1或2，优选地，m为1；
    和/或，当R 1为未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，m为1或2，优选地，m为1；
    和/或，当R 1为被R a取代的C 1-C 6烷基或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-时，所述的取代的个数独立地为1-3个；
    和/或，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基-O-，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；
    和/或，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 3烷基或未取代或被R a取代的C 1-C 3烷基-O-，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基；
    和/或，R 1独立地选自未取代或被R a取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基；
    和/或，R 1独立地选自未取代或被R a取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，当R a为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl。
  6. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100015
    中，R 1独立地选自未取代或被R a取代的C 1-C 4烷基，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基；其中m为1或2，n为0，优选地，m为1且n为0。
  7. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100016
    中，当Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代时，所述R 2的总数为1～3个；
    和/或，R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地为下列取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原 子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；
    和/或，当R 2为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br、I，优选为F或Cl；
    和/或，R 2独立地选自未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；
    和/或，R 2独立地选自未取代或被R b取代的C 1-C 4烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基；
    和/或，R 2独立地选自未取代或被R b取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基；
    和/或，当R 2为未取代或被R b取代的C 3-C 6环烷基时，所述的C 3-C 6环烷基独立地为环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，优选为环丙烷、环丁烷；
    和/或，当R 2为未取代或被R b取代的5-8元芳基时，所述的5-8元芳基独立地为苯基或萘基，优选为苯基；
    和/或，当R 2为未取代或被R b取代的5-8元杂芳基时，所述的5-8元杂芳基独立地为吡咯，吡唑、三氮唑、呋喃、噁唑、噻吩、噻唑、吡啶、吡嗪或嘧啶，优选为吡唑、呋喃、噻吩、吡啶；
    和/或，当R 2为未取代或被R b取代的4-8元杂环烷基时，所述的4-8元杂环烷基独立地为氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢吡咯烷基、四氢呋喃基、六氢吡喃或四氢-2H-硫吡喃1,1-二氧化物，优选为氮杂环丁烷，氧杂环丁烷；
    和/或，当R 2为未取代或被R b取代的4-8元杂环烯基时，所述的4-8元杂环烯基独立地为1,2,3,4-四氢吡啶基、1,2-二氢吡啶基、1,4-二氢吡啶基、1,2,3,6-四氢吡啶基、1,4,5,6-四氢嘧啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基、二氢咪唑基、二氢噁唑基、二氢恶二唑基、二氢噻唑基、3,4-二氢-2H-吡喃基、二氢呋喃基、或氟代二氢呋喃基及其氧化物，优选为二氢噻唑基、3,4-二氢-2H-吡喃基、二氢呋喃基；
    和/或，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基时，所述的取代的个数为3个；
    和/或，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基，所述的取代各自独立地为卤素时，所述的卤素为F、Cl、Br或I，优选为F或Cl；
    和/或，当R 2为取代的C 1-C 6烷基、取代的C 3-C 6环烷基、取代的5-8元芳基、取代的5-8元杂芳基或取代的的4-8元杂环烷基，所述的取代是一个或多个取代，所述的取代各自独立地选自C 1-C 4烷基，优选地，R 2为取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。
  8. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100017
    中，Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
    当R 2为被R b取代的C 1-C 6烷基、被R b取代的C 3-C 6环烷基、被R b取代的5-8元芳基、被R b取代的5-8元杂芳基或被R b取代的的4-8元杂环烷基时，所述的取代的个数为2个或3个。
  9. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100018
    中，Z 1，Z 2各自独立地选自N或者C；
    当Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代时，所述R 2的总数为1～3个，R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的C 1-C 6烷基，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基；
    和/或，当R 2为卤素时，所述卤素为F、Cl、Br、I，优选为F或Cl。
  10. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    R 2选自氢、-F、-Cl、-Br、氨基、氰基、-CH 3、-CF 3、-CHF 2或-CH 2CH 3。
  11. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，其为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100019
    X选自C或N；
    所述Z 1、Z 2、Y 1、Y 2、Y 3如权利要求1所定义的。
  12. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100020
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100021
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100022
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100023
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100024
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100025
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100026
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100027
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100028
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100029
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100030
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100031
    Figure PCTCN2021122197-appb-100032
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100033
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100034
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100035
    Figure PCTCN2021122197-appb-100036
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100037
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100038
    时，R 2在所述Y 1、Y 2、Y 3上的取代为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100039
  13. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100040
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100041
    时，所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100042
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100043
    Figure PCTCN2021122197-appb-100044
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100045
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100046
    时，所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100047
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100048
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100049
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100050
    时，所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100051
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100052
    和/或，当
    Figure PCTCN2021122197-appb-100053
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100054
    时，所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100055
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100056
  14. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100057
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100058
    和/或，X为N或者C；
    和/或，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100059
    选自
    Figure PCTCN2021122197-appb-100060
    Figure PCTCN2021122197-appb-100061
  15. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
    所述
    Figure PCTCN2021122197-appb-100062
    为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100063
    和/或，
    Figure PCTCN2021122197-appb-100064
    选自
    Figure PCTCN2021122197-appb-100065
    Figure PCTCN2021122197-appb-100066
  16. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物结构式为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100067
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100068
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100069
    中Y 1、Y 2各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和 P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  17. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物结构式为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100070
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100071
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100072
    中Y 1、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  18. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物结构式为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100073
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100074
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未 取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100075
    中Y 1、Y 2、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  19. 根据权利要求1或2所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物结构式为
    Figure PCTCN2021122197-appb-100076
    m为0、1、2、3或者4；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100077
    中R 1独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基、或、未取代或被R a取代的C 1-C 6烷基-O-；所述的被R a取代的C 1-C 6烷基、或、所述的被R a取代的C 1-C 6烷基-O-中，所述的R a取代是一个或多个取代，所述的R a各自独立地选自以下取代基：卤素、羟基、氰基、氨基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、-COOH、-C(＝O)NH 2；当m不为0或1时，R 1独立地为相同或不同；
    n为0、1、2或者3；
    X选自N或者C；
    Z 2独立地选自N或者C；
    Figure PCTCN2021122197-appb-100078
    中Y 1、Y 2、Y 3各自独立地选自N、C、O或S；所述Y 1、Y 2、Y 3各自独立地被一个或多个R 2取代；
    R 2独立地选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、未取代或被R b取代的基团，所述的R b取代是一个或多个取代，所述的R b各自独立地选自以下取代基：卤素、氰基、氨基、羟基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基-O-、C 3-C 6环烷基、5-8元芳基、5-8元杂芳基、4-8元杂环烷基、或3-9元杂环烯基；所述的5-8元杂芳基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烷基中，杂原子选自 N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个；所述的4-8元杂环烯基中，杂原子选自N、S、O和P中的一种或多种，杂原子数为1-3个。
  20. 根据权利要求1所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述的式I所示的化合物选自下列任一化合物：
    Figure PCTCN2021122197-appb-100079
    Figure PCTCN2021122197-appb-100080
  21. 一种药物组合物，其特征在于，其包含如权利要求1-20中任一项所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，和药学上可接受的赋形剂。
  22. 根据权利要求1-20中任一项所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药与PD-1/PD-L1/CTLA-4抗体或者PD-1/PD-L1/CTLA-4抑制剂联用在制备用于治疗与CD73相关疾病的药物中的用途。
  23. 根据权利要求1-20中任一项所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药、或如权利要求21所述的药物组合物在制备用于治疗与CD73相关疾病的药物中的用途。
  24. 根据权利要求22或权利要求23所述的用途，其特征在于，所述CD73相关疾病为癌症。
  25. 根据权利要求24所述的用途，其特征在于，所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、胆管癌、直肠癌、结肠癌、胃癌、胆囊癌、神经胶母细胞瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、神经管母细胞瘤、黑色素瘤、胃肠道间质瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或者肾癌。
  26. 一种治疗与CD73相关疾病的方法，其特征在于，所述方法包括向受试者施用权利要求1-20中任一项所述的式I所示化合物、其互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药和/或权利要求21所述的药物组合物。
  27. 根据权利要求26所述的方法，其特征在于，所述CD73相关疾病为癌症。
  28. 根据权利要求27所述的方法，其特征在于，所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、胆管癌、直肠癌、结肠癌、胃癌、胆囊癌、神经胶母细胞瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、神经管母细胞瘤、黑色素瘤、胃肠道间质瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或者肾癌。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20230039553A1 (en) * 2020-05-01 2023-02-09 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2023201267A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
WO2023233130A1 (en) * 2022-05-30 2023-12-07 AdoRx Therapeutics Limited Cd73 inhibitor compounds
US11919869B2 (en) 2021-10-29 2024-03-05 Gilead Sciences, Inc. CD73 compounds

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116903595B (zh) * 2023-06-01 2024-02-13 遵义医科大学珠海校区 一种嘧啶二酮类化合物及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012005805A1 (en) * 2010-05-07 2012-01-12 Glaxosmithkline Llc Azaindazoles
CN102781940A (zh) * 2009-12-30 2012-11-14 艾科尔公司 取代的咪唑并吡啶基-氨基吡啶化合物
WO2019168744A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Eli Lilly And Company Cd73 inhibitors
WO2021222522A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102781940A (zh) * 2009-12-30 2012-11-14 艾科尔公司 取代的咪唑并吡啶基-氨基吡啶化合物
WO2012005805A1 (en) * 2010-05-07 2012-01-12 Glaxosmithkline Llc Azaindazoles
WO2019168744A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Eli Lilly And Company Cd73 inhibitors
WO2021222522A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20230039553A1 (en) * 2020-05-01 2023-02-09 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
US11919869B2 (en) 2021-10-29 2024-03-05 Gilead Sciences, Inc. CD73 compounds
WO2023201267A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
WO2023233130A1 (en) * 2022-05-30 2023-12-07 AdoRx Therapeutics Limited Cd73 inhibitor compounds

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