WO2020090740A1 - 石油増進回収用栄養剤 - Google Patents

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milk powder
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山下信彦
川嶋祥太
稲葉清
山口裕之
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大阪瓦斯株式会社
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor

Definitions

  • the present invention relates to a nutritive agent for enhanced oil recovery (hereinafter also simply referred to as a nutritional agent) used in an oil enhanced recovery method using a microorganism that increases the amount of oil recovered from an oil reservoir.
  • a nutritional agent for enhanced oil recovery
  • Petroleum existing in oil reservoirs such as underground rock layers can generally be extracted by excavating an oil well and pushing up crude oil to the borehole of the oil well with the pressure in the oil field.
  • the pressure in the existing oil field decreases, it will be the production limit of oil, but if the pressure in the oil field is artificially restored by methods such as injecting water into the formation, the oil It is also known that enhanced recovery can be achieved.
  • MEOR enhanced oil recovery technology
  • microorganisms metabolize the carbon source in the oil reservoir to reduce the viscosity of the oil in the oil reservoir and lower the surface tension to increase the fluidity of the oil and It is expected that the pressure in the oilfield will be increased by generating low-molecular gas such as methane, and the recovery amount of oil will be increased.
  • Patent Document 1 proposes an enhanced oil recovery method in which various nutrients such as vitamins, phosphates, and various electron donors are injected into an oil storage tank together with microorganisms.
  • Patent Document 2 proposes an enhanced oil recovery method of injecting peptone or protein and / or a digested product or extract thereof into an oil storage tank.
  • the present invention is to provide a method for more efficiently promoting oil recovery by using microorganisms in an oil reservoir.
  • the characteristic constitution of the nutritional supplement for enhanced oil recovery of the present invention for achieving the above object A nutrient for enhanced oil recovery, which is used in an enhanced oil recovery method using microorganisms, which increases the recovery amount of oil recovered from an oil reservoir, The point is that it contains enzyme-treated skim milk powder treated with protease and barley extract.
  • petroleum indigenous microorganisms are usually grown in the oil reservoir, and various kinds of anaerobic methane bacteria and hydrogen-producing bacteria such as anaerobic methane bacteria and hydrogen-producing bacteria are contained in both the oil layer and the oil layer water contained in the oil reservoir. It has been confirmed that the above microorganisms are growing.
  • a nutrient medium for enhanced oil recovery containing enzyme-treated skim milk powder and barley extract, a liquid medium in which the oil layer and oil layer water contained in the oil reservoir are added.
  • the enzyme-treated skim milk powder may be a skim milk powder having a low molecular weight by enzymatic decomposition, for example, skim milk powder with a proteolytic enzyme (protease) such as pepsin or trypsin, chymotrypsin, elastase, carboxypeptidase.
  • proteolytic enzyme proteolytic enzyme
  • Such enzymatic treatment is usually carried out at 20 ° C. to 40 ° C. for 5 to 60 minutes, so that skim milk powder sufficiently enzymatically decomposed can be expected.
  • skimmed milk powder is usually a vesicle or a particle-like protein / lipid complex with a diameter of 50 to 100 nm, in which proteins such as lactoferrin, serum albumin, casein, lactophorin, and keratin present in milk are associated with lipids. Since the body does not pass through a fine filter and is easily clogged, even if it is pressed into an underground oil reservoir, it does not sufficiently penetrate into the oil reservoir and an oil increase effect is expected. It is believed that this enzyme-processed skim milk powder does not pass through a fine filter because the protein contained in the skim milk powder has a low molecular weight and the protein-lipid complex has been decomposed. Since it is less likely to be clogged, it has high press-fitting properties to the core in the core sweep test.
  • proteins such as lactoferrin, serum albumin, casein, lactophorin, and keratin present in milk are associated with lipids.
  • one containing 0.1 to 10 g / L of the enzyme-treated skim milk powder and 1 to 20 g / L of barley extract is preferably used.
  • the nutritional supplement may contain other nutritional components such as glucose, casein peptone, fish extract, and corn extract in addition to enzyme-treated skim milk powder and barley extract.
  • the characteristic configuration of the liquid medium of the present invention It is in the point of including the above-mentioned nutrient for enhanced oil recovery, the oil layer and the oil layer water contained in the oil storage tank, and the basal medium.
  • the above liquid medium has a high press-fitting property to the core in the core sweep test, can be applied to the oil reservoir, and can be used to increase the amount of oil recovered from the oil reservoir.
  • Petroleum existing in oil reservoirs such as underground rock formations is produced from oil fields that have injection and pouring wells. Both the injection well and the pouring well reach the oil reservoir formed on the surface side of the bedrock from the surface. Then, in such an oil field, in the embodiment to which the nutrient for enhanced oil recovery of the present invention is applied, a medium to which various nutrients for enhanced oil recovery are added is injected.
  • the nutritional supplement for enhanced oil recovery contains enzyme-treated skim milk powder treated with protease and barley extract. Then, the enhanced oil recovery can be achieved by the effect that the microorganisms are allowed to generate methane inside the oil reservoir, and the pressure in the oil field is increased by the generated methane and various gas components produced as by-products.
  • Enhanced Clostridia medium (basic medium): Peptone 10g / L Yeast extract 3g / L, Meat extract 10g / L, Glucose 5g / L, Soluble starch 1g / L, Sodium chloride 5g / L, Sodium acetate 3 g / L, Cysteine hydrochloride 0.5 g / L, Agar 0.5g / L, Liquid medium containing at a ratio of pH of 6.6 to 7.0
  • the cultured sample of microorganisms was filtered with 1-10 ml to capture the microorganisms on the filter. Then, it was stained with a SYBR Green solution (manufactured by Ronza) for 5 minutes. After rinsing off excess stain solution with sterilized water, the stained filter was placed on a slide glass and observed with a fluorescence microscope (Olympus, IX-7) to count microorganisms.
  • the interfacial tension of crude oil with respect to various culture solutions was measured by a pendant drop method using a contact angle meter (Model B100, Asumi Giken Co., Ltd.). The measurement was performed at room temperature, and the specific gravities of the liquid phase and crude oil were set to 1.0 and 0.85, respectively.
  • the interfacial tension was calculated by the Young-Laplace method using the attached analysis software.
  • Fig. 2 shows the numbers of microorganisms in the oil layer (crude oil) and oil layer water collected from the oil field. From FIG. 2, it was found that both the oil layer and the oil layer water collected from the oil field contained microorganisms, and methane-producing bacteria were contained, although the number of inhabitants varied depending on the sample. In addition, when 16Sr gene analysis was performed on the detected microorganisms, it was found that various methane-producing bacteria belonging to the orders Methanosarcina and Methanomycobium such as Methanobacterium and Methanothermobacter grow.
  • this sample was subcultured for 35 days at 50 ° C in an enhanced Clostridia medium, and the number of produced microorganisms was examined. It was revealed that even if the amount was extremely small, it could grow to a practical level of about 10 million cells / g after culturing for 35 days. In addition, it was revealed that the dominant species in the methane-producing bacteria after growth was the thermophile methanothermobacter.
  • the enzyme-treated skim milk powder in the table is a 10% skim milk powder solution to which 3% (w / v) of protease was added and allowed to act at 40 ° C. for 2 hours to be heat-inactivated.
  • the degree of enzyme treatment was compared for those performed at 40 ° C. for about 120 minutes, but no significant difference was observed in the following measurement of core press-fit property and interfacial tension.
  • skim milk powder is useful as a carbon source for the medium, but has low filter permeability of 0.2 ⁇ m and is not sufficiently press-fit to perform a core sweep test (sample 2.
  • Core press-fitting property x was found.
  • the skim milk powder was treated with an enzyme, the interfacial tension was lowered and the core press-fitting property was improved (Sample 6, core press-fitting property ⁇ ). In other words, it was found that it can be used for core sweep tests and can be expected to be applicable to oil reservoirs.
  • skim milk powder is known to be an inexpensive and versatile nutrient that acts as a carbon source for the growth of microorganisms, but has low core pressability and poor availability for use in MEOR. Is known (Sample 2).
  • the core press-fitting property is improved (Sample 6), and it is considered that it can be applied to the oil reservoir, but the improvement of the oil-increasing effect (decrease of interfacial tension) Can't expect.
  • the nutrient for enhanced oil recovery of the present invention can be used to increase the recovery amount of oil recovered from an oil reservoir.

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Abstract

石油貯留層内から石油増進回収できる石油増進回収用栄養剤を提供する。 プロテアーゼ処理された酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有する。

Description

石油増進回収用栄養剤
 本発明は、石油貯留層から回収される石油の回収量を増加させる微生物を利用した石油増進回収方法に用いられる石油増進回収用栄養剤(以下単に栄養剤という場合もある)に関する。
 地下の岩石層等の石油貯留層中に存在する石油は、一般に、油井を掘削し、油田内の圧力で原油を油井の試錐孔まで押し上げることにより、取り出すことができる。このような場合、存在する油田内の圧力が減少すれば、石油の産出限界となるが、その地層中に水を注入するなどの方法により、人工的に油田内の圧力を復元すれば石油の増進回収を図ることができることも知られている。
 さらに、油田内の圧力を復元する技術として微生物を用いた石油の増進回収技術(MEOR)が注目されている。MEORは、石油貯留層から追加の原油を得るために、微生物を栄養液と共に注入井に導入する技術である(特許文献1参照)。また、微生物を注入することなく栄養液を注入井に導入することによっても、同様の効果が得られるものと考えられている(特許文献2参照)。
 すなわち、石油貯留層中において微生物に石油貯留層内の炭素源を代謝させ、石油貯留層内の石油の粘性を下げ、表面張力を下げることにより石油の流動性を高めるとともに、石油貯留層内でメタン等の低分子ガスを生成させることにより油田内の圧力を高め、石油の回収量を高めることが期待されるものである。
 しかしMEORは、1926年に提唱されて以降研究が進められているのにもかかわらず、基礎データに乏しく実用化に至っていないという実情にある(非特許文献1、2参照)。
特表2010-535271号公報 特表平03-505106号公報
Beckman, J. W.:Ind. Eng. Chem., November, 10, 3 (1926). 藤原和弘他:生物工学,第92巻 第4号 194頁(2014).
 そこで、石油貯留層中において微生物に石油貯留層内の炭素源を代謝させ、石油の回収量を高めるために、石油を資化し、石油貯留層内の石油の粘性を下げ、表面張力を下げることにより石油の流動性を高めたり、石油貯留層内でメタン等の低分子ガスを生成させることにより石油の流動性をより一層高めたりできる微生物が求められ、かつ、そのような微生物を効率的に増殖可能な方法が研究されており、これにより、石油増進回収する方法が求められている。
 たとえば、特許文献1では、ビタミン、リン酸塩および多様な電子供与体などの多様な栄養素を微生物とともに石油貯留槽に注入する石油増進回収方法が提案されている。また、特許文献2では、ペプトンもしくはプロテインおよび/またはそれらの消化物もしくはエキスを石油貯留槽に注入する石油増進回収方法が提案されている。
 しかし、これらの従来の方法は現実的には実用化に遠く、また、栄養源として多様な成分を調製する必要がある点から、改良の余地があった。
 したがって、本発明は上記実状に鑑み、石油貯留層内で微生物により、さらに効率よく石油増進回収する方法を提供することにある。
 上記目的を達成するための本発明の石油増進回収用栄養剤の特徴構成は、
 石油貯留層から回収される石油の回収量を増加させる、微生物を利用した石油増進回収方法に用いられる石油増進回収用栄養剤であって、
 プロテアーゼ処理された酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有する点にある。
 本発明者らによると、石油貯留層には、通常石油常在微生物が生育しており、石油貯留層に含まれる油層および油層水のいずれにも嫌気性のメタン菌や水素生成菌など、種々の微生物が生育していることが確認されている。
 そこで、このような微生物を優先的に増殖可能な栄養源として、酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有する石油増進回収用栄養剤を、石油貯留層に含まれる油層および油層水に添加した液体培地中で、石油貯留層内に生息する微生物を増殖させると、供給された栄養剤により、石油増進回収に有利であるといわれている界面張力の低下が観測されることを実験的に明らかにした。
 すなわち、石油貯留層内に、上記栄養剤を注入すると、メタン菌をはじめとする種々の石油常在微生物の生育が活発になり(活性化し)、石油貯留層に含まれる種々の物質を資化して他の物質に変換すること等により、石油貯留層内の界面張力が低下して、回収される石油の回収量の増加が期待できることが明らかになった。
 ここで、酵素処理脱脂粉乳は、脱脂粉乳を酵素分解にて低分子化したものであればよく、たとえば、脱脂粉乳をペプシンやトリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、カルボキシペプチダーゼなどのタンパク質分解酵素(プロテアーゼ)で処理したものが好適である。このような酵素処理は、通常20℃~40℃において、5~60分作用させることで、十分酵素分解された脱脂粉乳が期待できる。
 さらに、通常脱脂粉乳は、乳中に存在するラクトフェリンや血清アルブミン、カゼイン、ラクトフォリン、ケラチンなどのタンパク質と脂質が会合した、大きさが直径50~100nmの小胞あるいは粒子状のタンパク質・脂質複合体が存在しているため、微細なフィルタを通過せず、目詰まりしやすいことから、地中の石油貯留層に圧入しても、十分石油貯留層中に浸入せず、増油効果が期待されないものと考えられているが、この酵素処理脱脂粉乳は、脱脂粉乳に含まれるたんぱく質が低分子化し、タンパク質・脂質複合体が分解されたものとなっているため、微細なフィルタを通過して目詰まりしにくいため、コア掃攻試験におけるコアに対して圧入性が高いものとなっている。
 さらに、酵素処理脱脂粉乳のみでは石油貯留層にて界面張力を低下させる効果がほとんどないのに対して、大麦エキスを組み合わせて含有していることにより、脱脂粉乳の持つ界面張力を低下させる効果が復元される。そのため、プロテアーゼ処理された酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有することにより、高い圧入性と高い界面張力を低下させる効果が両立されることが実験的に明らかになった。
 また、栄養剤の具体的成分比率としては、前記酵素処理脱脂粉乳を0.1~10g/L含有するとともに、大麦エキスを1~20g/L含有するものが好適に用いられる。
 尚、栄養剤は、酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスのほか、グルコース、カゼインペプトン、魚エキス、トウモロコシエキス等の他の栄養成分を含有していてもよい。
 また、本発明の液体培地の特徴構成は、
 上記石油増進回収用栄養剤と、石油貯留槽に含まれる油層及び油層水と、基本培地とを含む点にある。
 上記液体培地は、コア掃攻試験におけるコアに対して圧入性が高く、石油貯留層へも適用でき、石油貯留層から回収される石油の回収量を増加させるのに利用できる。
 したがって、石油貯留層内で微生物により界面張力を低下させるなどの効果により、効果的に石油増進回収できるようになった。
石油貯留層中の微生物によるメタンガス生成を示すグラフ 石油貯留層中の微生物生息数を示すグラフ ガス生成量比較試験結果を示すグラフ
 以下に、本発明の実施形態にかかる石油増進回収用栄養剤を説明する。尚、以下に好適な実施例を記すが、これら実施例はそれぞれ、本発明をより具体的に例示するために記載されたものであって、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々変更が可能であり、本発明は、以下の記載に限定されるものではない。
 地下の岩石層等の石油貯留層中に存在する石油は、注入井および注出井を有する油田から産出される。注入井および注出井は、いずれも、地表から、岩盤層の地表側に形成される石油貯留層に達している。そして、このような油田において本発明の石油増進回収用栄養剤を適用した実施形態においては、各種石油増進回収用栄養剤を添加した培地を注入する。石油増進回収用栄養剤は、プロテアーゼ処理された酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有するものとする。すると、石油貯留層内部において微生物にメタン生成を促し、生成するメタンや副生する種々のガス成分により油田内の圧力を高める等の効果により、石油増進回収を図ることができる。
〔石油貯留層中の微生物の解析〕
 油田から採取した油層(原油)および油層水を試料として強化クロストリジア培地(RCM)で培養したところ、メタンガスの発生量は、図1のようになった。なお、培養条件は以下の通りである。
試料:原油10mL+油層水10mL+強化クロストリジア培地20mL
温度:40℃(実線)、50℃(破線)
容器:バイアル瓶(容量100mL)ラバーゴム、アルミキャップによる密栓を行い容器内気相部分はアルゴン置換(嫌気培養)
強化クロストリジア培地(基本培地):
ペプトン      10g/L
酵母エキス      3g/L、
肉エキス      10g/L、
ブドウ糖       5g/L、
可溶性でんぷん    1g/L、
塩化ナトリウム    5g/L、
酢酸ナトリウム    3g/L、
システイン塩酸塩 0.5g/L、
寒天       0.5g/L、
の比率で含有し、pH6.6~7.0の液体培地
〔各種分析方法〕
 各種分析結果については、下記要領にて分析を行った。
(微生物数の分析)
 微生物の培養された試料を1~10mlフィルタ濾過し微生物をフィルタ上に補足した。その後SYBRGreen溶液(Ronza社製)で5分間染色した。滅菌水で余分な染色液を洗い流したのち、染色したフィルタをスライドガラス上にのせ、蛍光顕微鏡(Olympus製,IX-7)で観察し微生物の計数をおこなった。
(ガス成分)
 二酸化炭素、メタンおよび水素の各ガス濃度は、島津社製ガスクロマトグラフィー(GC2014)を用いて分析した。キャリアーはアルゴンガスを用い、分離カラムはshincarbonSTを用いた。オーブン温度は200℃にて分析を行った。
(界面張力の測定)原油の種々の培養液に対する界面張力は、接触角計(株式会社あすみ技研、モデルB100)を用いて、ペンダントドロップ法によって測定した。計測は室温で行い、液相と原油の比重をそれぞれ1.0、0.85とした。付属の解析ソフトウエアを用いてYoung-Laplace法によって界面張力を計算した。
 図1より、油田から採取した油層(原油)および油層水を試料とした場合、試料中には、強化クロストリジア培地で増殖してメタンを生産するメタン生産菌が含まれていることが明らかになった。これは、複数種の原油試料について共通して確認することができ、油田の形成メカニズムとも関連して一般的な油田には、共通して強化クロストリジア培地で増殖してメタンを生産するメタン生産菌が含まれていると推定できるものである。
 油田から採取した油層(原油)および油層水に含まれる微生物について、微生物の生息数を調べたところ図2のようになった。図2より、油田から採取した油層および油層水にはいずれも微生物が含まれており、試料によって生息数のばらつきはあるものの、メタン生産菌が含まれていることがわかった。また、検出された微生物について16Sr遺伝子解析を行ったところ、メタノバクテリウム、メタノサーモバクター等、メタノサルキナ目、メタノミクロビウム目に属する多様なメタン生産菌が生育していることが分かった。
 また、50℃におけるメタン生産量が優れていることを受け、この試料を強化クロストリジア培地で50℃にて35日間継代培養し、生成微生物数を調べたところ、試料に含まれるメタン生産菌の量がきわめて少ない場合であっても、35日間の培養後には1000万個/g程度の実用的なレベルに増殖できることが明らかになった。また、増殖後のメタン生産菌中における優占種は、好熱菌のメタノサーモバクターであることが明らかになった。
〔培地のコア圧入性〕
 油田から採取した油層(原油)および油層水に、石油増進回収用栄養剤として種々の添加剤を種々の割合で含む培地を添加した試料について、0.2μmのフィルタを用いてコア掃攻試験におけるコア圧入性を評価した。また、得られた培地添加試料をバイアルにて4週間培養した時の界面張力および増油効果を求めた。
 尚、表中における酵素処理脱脂粉乳とは、10%脱脂粉乳溶液にプロテアーゼを3%(w/v)添加して40℃にて2時間作用させたものを熱失活処理したものである。尚、酵素処理の程度は、40℃において120分程度行ったものについて比較したが、下記コア圧入性、界面張力の測定に関して大きな差は見られなかった。
 その結果、表1に示すように、脱脂粉乳は、培地の炭素源として有用であるが、0.2μmのフィルタ通過性が低く、コア掃攻試験を行うための圧入性が十分ではない(試料2、コア圧入性×)ことがわかった。しかし、脱脂粉乳を酵素処理すると界面張力が低下してコア圧入性が改善している(試料6、コア圧入性○)。つまり、コア掃攻試験に利用でき、石油貯留層へも適用できるものと期待できることがわかった。
 一方、カゼインペプトンは、増油効果が低いものの(試料1)、大麦エキスを添加することで界面張力が大きく低下し(試料4)、増油効果が改善することが、本発明者らの研究により明らかになっている。そこで、酵素処理脱脂粉乳に大麦エキスを加えて界面張力の低下効果についても調べ(試料7)、増油効果との相関を調べた。その結果、増油効果の改善(界面張力の低下)は、添加剤として大麦エキスを含有している場合に顕著であることが分かった(試料7)。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
〔ガス生成量比較試験〕
 表1の試料2と試料7を油層水に添加して、培養を行ったところ、各試料を用いた場合のガス生成量(メタン、二酸化炭素)は、図3のようになった。図3より、酵素処理の有無によって、ガス生成量に大きな変化はなく、酵素処理の有無はガス発生による増油効果に影響がないことが分かった。
〔まとめ〕
 脱脂粉乳は、カゼインペプトンに比べて、微生物の育成に関して炭素源として働く安価で汎用的な栄養素であることが知られているが、MEORに用いるためにはコア圧入性が低く利用性に乏しいことがわかっている(試料2)。これに対して脱脂粉乳を酵素処理すると、コア圧入性が改善するため(試料6)、石油貯留層へも適用可能になるものと考えられるが、増油効果の改善(界面張力の低下)までは期待できない。しかし、大麦エキスを添加すれば、比較的少ない添加量で充分な界面張力の低下が観測され、増油効果の改善(界面張力の低下)が期待できる(試料7)ことが明らかになった。
 本発明の石油増進回収用栄養剤は、石油貯留層から回収される石油の回収量を増加させるのに利用することができる。

Claims (3)

  1.  石油貯留層から回収される石油の回収量を増加させる、微生物を利用した石油増進回収方法に用いられる石油増進回収用栄養剤であって、
     プロテアーゼ処理された酵素処理脱脂粉乳および大麦エキスを含有する石油増進回収用栄養剤。
  2.  前記酵素処理脱脂粉乳を0.1~10g/L含有するとともに、大麦エキスを1~20g/L含有する請求項1に記載の石油増進回収用栄養剤。
  3.  請求項1又は2に記載の石油増進回収用栄養剤と、石油貯留層に含まれる油層及び油層水と、基本培地とを含む液体培地。
PCT/JP2019/042177 2018-10-29 2019-10-28 石油増進回収用栄養剤 WO2020090740A1 (ja)

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