WO2019123688A1 - α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物、α－グルコシダーゼ阻害剤、糖分解酵素活性阻害用食品組成物、糖分解酵素活性阻害剤、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法、及び、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分の定量分析方法 - Google Patents

α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物、α－グルコシダーゼ阻害剤、糖分解酵素活性阻害用食品組成物、糖分解酵素活性阻害剤、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法、及び、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分の定量分析方法 Download PDF

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清水　邦義
謙伸 広松
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国立大学法人九州大学
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    • A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Definitions

  • the present invention relates to a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase, an ⁇ -glucosidase inhibitor, a food composition for inhibiting glycolytic enzyme activity, a glycolytic enzyme activity inhibitor, and a method for producing an ⁇ -glucosidase inhibitor.
  • Diabetes is a disease in which blood glucose concentration is higher than normal, ie, hyperglycemic condition. Under normal conditions, even if the blood sugar level rises after a meal, the blood sugar level decreases due to the action of insulin. However, in diabetes, due to a reduction in insulin secretion and a reduction in insulin sensitivity, it is not possible to lower the blood glucose level elevated by meals.
  • Non-patent Document 1 Since mushrooms have many water-soluble and insoluble dietary fibers in fruit body, it is expected to suppress the rise in blood glucose level. Dietary fiber plays an important role in carbohydrate metabolism, and previous studies have shown that the occurrence of diabetes, one of the carbohydrate metabolic diseases, and dietary fiber intake are related (Non-patent Document 1). ).
  • Numeri sugitake (scientific name: Pholiota adiposa (Fr.) kummer) is a kind of edible mushroom belonging to the Moegiaceae sugitake genus. Fukuoka O-N shown in FIG. 1 is registered as a new variety of this Numeri sugitake species in 2003. Fukuoka O-N is said to be an illusionary mushroom because of its rarity and uniqueness that only spring and autumn can be used for natural products.
  • a first aspect of the present invention is a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase, which comprises a Numeri Sagittachi-derived component as an active ingredient.
  • a second aspect of the present invention is the food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase according to the first aspect, wherein the active ingredient is a methanol extract of Numerisagitake, which is a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase.
  • a third aspect of the present invention is the food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase according to the first or second aspect, wherein the active ingredient is a mycelium-derived component of Numeritake mushroom, a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase It is a thing.
  • a fourth aspect of the present invention is the food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase according to any one of the first to third aspects, wherein the active ingredient is an ergosterol represented by the structural formula (1) , Ergosterol peroxide represented by the formula (2), di-2-ethylhexyl phthalate (Di- (2-ethylhexyl) phthalate) represented by the formula (3), 5 ⁇ represented by the formula (4) 14 ⁇ -ergosta-7,22-dien-3-one-11-acetate (5 ⁇ , 14 ⁇ -Ergosta-7, 22-dien-3-one, 11-acetate), 5 ⁇ -ergosta represented by the formula (5) -7,22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ -diol diacetate (5 ⁇ -Ergosta-7, 22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ -diol, diacetate) or trilinolein (1, 2, 3) represented by the formula (6) -Tri (cis, cis-9,12-octadeca
  • a fifth aspect of the present invention is a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase, which comprises trilinolein represented by the structural formula (6) as an active ingredient.
  • a sixth aspect of the present invention is the food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase according to the fifth aspect, wherein the ergosterol represented by the structural formula (1), and the ergosterol represented by the formula (2) Peroxide, di-2-ethylhexyl phthalate represented by the formula (3), 5 ⁇ , 14 ⁇ -ergosta-7, 22-diene-3 represented by the formula (4) -On-11-acetate (5 ⁇ , 14 ⁇ -Ergosta-7, 22-dien-3-one, 11-acetate) or 5 ⁇ -ergosta-7, 22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ represented by the formula (5) It is a food composition for ⁇ -glucosidase inhibition which further contains a diol diacetate (5 ⁇ -Ergosta-7, 22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ -diol, diacetate) as an active ingredient.
  • the ergosterol represented by the structural formula (1), and the ergosterol represented by the formula (2) Peroxide, di-2-ethy
  • a seventh aspect of the present invention is an ⁇ -glucosidase inhibitor comprising a Numerischitake-derived component as an active ingredient.
  • the eighth aspect of the present invention is a food composition for inhibiting the activity of glycolytic enzyme activity, which comprises a Numerischitake-derived component as an active ingredient.
  • the ninth aspect of the present invention is a glycolytic enzyme activity inhibitor comprising a Numerischitake-derived component as an active ingredient.
  • a tenth aspect of the present invention is a method for producing an ⁇ -glucosidase inhibitor, which comprises an extraction step of extracting an active ingredient from Numeri sigistake.
  • An eleventh aspect of the present invention is the method for producing an ⁇ -glucosidase inhibitor according to the tenth aspect, wherein in the extraction step, methanol is used as a solvent.
  • a twelfth aspect of the present invention is a method of quantitatively analyzing an active ingredient of ⁇ -glucosidase inhibitory activity, comprising the step of injecting a sample derived from Numerisagitake into a silica-based reverse phase column to which a triacontyl group is chemically bonded.
  • a thirteenth aspect of the present invention is a functional food for ⁇ -glucosidase inhibition or glycolytic enzyme activity inhibition.
  • a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase according to any of the first to eleventh aspects, an ⁇ -glucosidase inhibitor, a food composition for inhibiting glycolytic enzyme activity, a glycolytic enzyme activity inhibitor or ⁇ -A method for promoting health by ⁇ -glucosidase inhibition or glycolytic enzyme activity inhibition using a method for producing a glucosidase inhibitor.
  • the inventors of the present invention not only have the negative attribute of being rich in dietary fiber which is characteristic of common mushroom, but not absorbed easily. And ⁇ -glucosidase inhibitory activity was also found to have a positive attribute.
  • FIG. 12 it is the fact that the inventors of the present invention have revealed for the first time the inventors of the present invention that the component of Numerisagitake has a very strong ⁇ -glucosidase inhibitory activity as compared to other mushrooms.
  • the food composition and the like of the present invention provide a novel use based on the new attribute of Numeri sugitake discovered by the present inventors.
  • a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase which can be expected to be as effective as or more effective without spending time to grow fruiting bodies.
  • FIG. 6 is a chromatograph of Numerigitake extract under the conditions of Table 5.
  • FIG. It is a figure which shows the alpha-glucosidase inhibition rate of eight types of mushrooms. It is a figure which shows a time-dependent change of the blood glucose level of the human by ingesting Numeris sugitake. It is a figure which shows an area value (AUC) under a blood glucose level rise curve. It is a figure which shows the (alpha)-glucosidase inhibition rate of the mycelium of Numeri sugitake.
  • a blood glucose level elevation inhibitor having ⁇ -glucosidase inhibitory activity As an anti-diabetic drug, a blood glucose level elevation inhibitor having ⁇ -glucosidase inhibitory activity is known.
  • carbohydrates are degraded and absorbed from the small intestine as monosaccharides.
  • Alpha-glucosidase bound to the small intestinal membrane is an enzyme that degrades disaccharides and oligosaccharides into monosaccharides that are easily absorbed in the small intestine.
  • By inhibiting the action of this ⁇ -glucosidase it is possible to reduce the rate of digestion of carbohydrates and to suppress an increase in blood glucose level.
  • the contents examined about the ⁇ -glucosidase inhibitory activity possessed by the extract of Numeri sugitake will be described.
  • FIG. 1 is a diagram showing a procedure of extraction and fractionation of an extract of Numeri bamboo.
  • the obtained methanol extract was dissolved in 80% methanol aqueous solution (300 mL) and divided into a soluble part and an insoluble part.
  • the 80% methanol aqueous solution insoluble portion was washed with hexane, and divided into a hexane soluble portion and a hexane insoluble portion.
  • hexane (300 mL ⁇ 2) is added to the 80% aqueous methanol solution soluble portion, and the polar component and the nonpolar component are extracted by liquid-liquid distribution to obtain an 80% aqueous methanol solution fraction mainly containing polar components.
  • the mixture was divided into hexane extracts mainly containing nonpolar components.
  • methanol was distilled off.
  • 150 mL of ultrapure water was added to make up the volume, and ethyl acetate (150 mL ⁇ 2) was added for extraction to obtain an ethyl acetate soluble portion (7.3 g) and an aqueous layer residue.
  • the aqueous layer residue was further fractionated to obtain a Pass fraction, a 100% water fraction, a 20% methanol fraction, a 50% methanol fraction, a 100% methanol fraction and an acetone fraction.
  • Fr. 1 was obtained using n-hexane and ethyl acetate (90: 10).
  • Fr. 2 and Fr. 3 used n-hexane and ethyl acetate (80: 20).
  • Fr.4 n-hexane and ethyl acetate (75:25) were used.
  • Fr. 5 n-hexane and ethyl acetate (70:30) were used.
  • Fr. 1 was obtained using n-hexane and ethyl acetate (90: 10).
  • Fr. 2 and Fr. 3 used n-hexane and ethyl acetate (80: 20).
  • Fr.4 n-hexane and ethyl acetate (75:25) were used.
  • Fr. 5 n-hexane and ethyl acetate (70:30) were used.
  • ⁇ -glucosidase inhibitory activity test was carried out according to the following procedure for each fraction fractionated in 1.2 above. First, 100 ⁇ L each of enzyme, sucrose and sample were mixed in a reaction tube (total 300 ⁇ L). Then, after stirring by vortexing, it was set on a shaker in a bacterial culture incubator, and stirred and reacted at 37 ° C. for 30 minutes. The block incubator was set to 100 ° C., the reaction tube was heated for 10 minutes, and after heating, air cooling was performed until it returned to room temperature.
  • reaction tube was centrifuged (4 ° C., 15 minutes, 1500 rpm), and the glucose concentration in the supernatant was measured by a biosensor.
  • the clinical drug deoxydinorycin (DNJ) was used as a positive control.
  • Glucose Measurement of glucose concentration was carried out according to the following procedure.
  • a mixture of sodium phosphate monobasic monohydrate (15 g), potassium chloride (3.7 g) and ultrapure water (500 mL) was used, and the pH was adjusted with sodium hydroxide. The Then, after adjusting to pH 7 using sodium azide, ultrapure water was added and the volume was adjusted to 1000 mL.
  • a mobile phase was used to adjust a glucose solution of 1.25 g / L, 2.5 g / L, and 5.0 g / L. Then, after measuring the control and the sample, the ⁇ -glucosidase inhibitory activity was calculated from the average value of the results.
  • FIG. 4 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (Pass fraction)
  • FIG. 4 (b) shows the results of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • a peak was detected between 9 and 14 minutes at the detection wavelength (254 nm) of preparative HPLC. Therefore, the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test was carried out for each fraction, but no inhibitory activity was found in the aqueous layer residue (Pass fraction).
  • FIG. 5 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (100% water fraction)
  • FIG. 5 (b) shows the results of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • a peak was detected between 9 and 14 minutes at the detection wavelength (254 nm) of preparative HPLC. Therefore, when each fraction was subjected to the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test, Fr. 3 (final concentration 25 ⁇ g / mL) of the aqueous layer residue (100% water fraction) was DNJ at a concentration lower than DNJ. Similar or stronger inhibitory activity was observed.
  • This active ingredient is presumed to be a compound having no UV absorption.
  • FIG. 6 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (20% methanol fraction)
  • FIG. 6 (b) shows the results of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • a peak was detected between 9 and 16 minutes at the detection wavelength (254 nm) of preparative HPLC. Therefore, when each fraction was subjected to the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test, the aqueous layer residue (20% methanol fraction) Fr. 1, Fr. 4, Fr. 5, Fr. 6, Fr.
  • the final concentrations of 25 ⁇ g / mL), Fr. 2 and Fr. 3 final concentrations of 5 ⁇ g / mL, 25 ⁇ g / mL
  • FIG. 7 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (50% methanol fraction)
  • FIG. 7 (b) shows the results of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • a peak was detected between 7 and 30 minutes at the detection wavelength (254 nm) of preparative HPLC. Therefore, when each fraction was subjected to an ⁇ -glucosidase inhibitory activity test, the aqueous layer residue (50% methanol fraction) Fr. 1 and Fr. 2 (final concentration 5 ⁇ g / mL, 25 ⁇ g / mL) 3, Fr. 4, Fr. 5, Fr. 6, Fr. 7, Fr. 8, Fr. 9, Fr. 10 (final concentration 25 .mu.g / mL) at DNJ lower concentrations than DNJ. Equivalent or stronger inhibitory activity was observed.
  • FIG. 8 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (100% methanol fraction)
  • FIG. 8 (b) shows the results of ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • Fr. 1 final concentration 5 ⁇ g / mL, 25 ⁇ g / mL
  • Fr. 2 Fr. 3
  • Fr. 9 Fr. 10 (final concentration 25 ⁇ g) of the aqueous layer residue (100% methanol fraction) / mL) showed lower or equal inhibitory activity to DNJ at lower concentrations than DNJ.
  • FIG. 9 (a) shows a preparative HPLC chromatogram of the aqueous layer residue (acetone fraction)
  • FIG. 9 (b) shows the results of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity test.
  • di-2-ethylhexyl phthalate (Di- (2-ethylhexyl) phthalate) (4) represented by the structural formula (3) in FIG. 5 ⁇ , 14 ⁇ -ergosta-7, 22-diene-3-one-11-acetate (5 ⁇ , 14 ⁇ -Ergosta-7, 22-dien-3-one, 11-acetate) represented by the formula (5) 5 ⁇ -ergosta-7,22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ -diol diacetate (5 ⁇ -Ergosta-7,22-diene-3 ⁇ , 11 ⁇ -diol, diacetate) Linolein (1,2,3-Tri (cis, cis-9,12-octadecadienoyl) Glycerol, 2,3-Bis [[(9Z, 12Z) -octadeca-9,12-dienoyl] oxylpropyl (9Z, 12Z ) -octade
  • Table 3 is a table showing ⁇ -glucosidase inhibition rates at 25 ⁇ g / mL and 50 ⁇ g / mL of the above isolated compounds.
  • Di- (2-ethylhexyl) phthalate represented by the formula (3) and trilinolein represented by the formula (6) exhibited particularly high inhibitory activity.
  • 4-hydroxy-2-undecenoic acid (4-hydroxy-2-undecenoic acid) represented by the structural formula (7) of FIG. 10 from the aqueous layer residue (100% methanol fraction and acetone fraction) The following "compound (7)" was isolated.
  • Table 4 below is a table showing 50% inhibitory concentration (IC 50 ) of ⁇ -glucosidase activity. It was revealed that the compound (6) and the compound (7) have particularly high ⁇ -glucosidase inhibitory activity.
  • Numeri sugitake contains a component having stronger ⁇ -glucosidase inhibitory activity than DNJ, which is a clinical drug. Therefore, the increase in blood sugar level can be expected to be suppressed by ingesting the food composition containing Numeri sugitake or its extract.
  • YMC registered trademark
  • FIG. (A) of FIG. 11 is a compound (6) isolated from Numerigitake
  • (b) is a hexane extract of Numerisugita
  • (c) is a solution of a mixture of a hexane extract and a compound (6) and loaded on the above column. It is the chromatograph obtained by measuring the eluted eluate by evaporative light scattering detection (ELSD).
  • ELSD evaporative light scattering detection
  • a solvent such as ethanol, hexane, isopropanol, acetone or the like may be used as an extraction solvent in the case of producing a food composition by extracting an active ingredient from Numerigitake.
  • FIG. 12 is a diagram showing the ⁇ -glucosidase inhibition rates of eight types of mushrooms, and from left to right, 1-deoxynojirimycin (hereinafter referred to as “DNJ”) used as a comparison control, N. persimmon, H. p. It shows the ⁇ -glucosidase inhibition rate of bamboo shoots, bamboo shoots, shiitake mushrooms, sugitake mushrooms, spinach and oyster mushrooms.
  • the sample concentration of DNJ is 300 ⁇ g / mL, and the sample concentration of mushrooms is 50 ⁇ g / mL.
  • Numeri gifugi exhibits extremely strong ⁇ -glucosidase inhibitory activity as compared to other mushrooms, and furthermore exhibits stronger ⁇ -glucosidase inhibitory activity than DNJ used as an ⁇ -glucosidase inhibitor.
  • the ⁇ -glucosidase inhibitory concentration (IC 50 ) of Alkabose which is generally used as an oral hypoglycemic agent, is 406 ⁇ g / mL.
  • the IC 50 of Numeri sugitake is 41 ⁇ g / mL, and the ⁇ -glucosidase inhibitory activity of N. persimmon is as strong as 9.9 times that of Alcavose.
  • FIG. 13 is a figure which shows a time-dependent change of the blood glucose level of the human by ingesting Numeris sugitake.
  • Fig. 13 (a) and (b) show the blood sugar level rising curve when the subject ingests the test product or the placebo product together with the cooked rice, and (a) shows 1.85 g of dry powder of Numerischitake equivalent to 25 g of fresh food. When used, (b) shows the case of using 3.7 g of dry powder of Nmerisugitake equivalent to 50 g of fresh.
  • FIG. 13 (c) is a blood sugar level rising curve when 50 g of fresh Numerigitake or Eryngii is heated and ingested as a feed. The number of subjects was 14 Nerris sugitake and 14 Eryngii. The blood glucose level was measured from the subject's fingertips, and was taken 30 minutes, 60 minutes, and 120 minutes before eating.
  • FIG. 14 is a diagram showing an area under the blood glucose level rising curve (AUC) corresponding to each blood sugar level rising curve of FIG.
  • FIG. 15 is a diagram showing the ⁇ -glucosidase inhibition rate of N. camphora mycelium. As shown in FIG. 15, it was revealed that the mycelium of Numerisagitake also exhibits high ⁇ -glucosidase inhibitory activity. In other words, it is considered that the active ingredient of the ⁇ -glucosidase inhibitory activity is contained not only in the fruiting body of Numerisgitake but also in the mycelium. In addition, the ⁇ -glucosidase inhibitory activity of Numeri sugitake mycelium showed higher inhibitory activity than DNJ used as an ⁇ -glucosidase inhibitor.
  • Mycelium is obtained in a short time by culture as compared to the fruiting body which requires a cultivation period. Therefore, it is possible to more easily provide a food composition for inhibiting ⁇ -glucosidase by using mycelium of Numeri bamboo.

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Abstract

本発明では、新たな機能性を有する、ヌメリスギタケ由来の食品組成物等を提供することを目的とする。　本発明の解決手段は、ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とするα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。本発明によれば、α－グルコシダーゼ阻害活性を有する、ヌメリスギタケ由来の食品組成物等を提供することが可能になる。なお、本発明の食品組成物等は、本願の発明者らが発見したヌメリスギタケの新たな属性に基づいて、新規の用途を提供するものである。

Description

α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物、α－グルコシダーゼ阻害剤、糖分解酵素活性阻害用食品組成物、糖分解酵素活性阻害剤、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法、及び、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分の定量分析方法
　本発明は、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物、α－グルコシダーゼ阻害剤、糖分解酵素活性阻害用食品組成物、糖分解酵素活性阻害剤、及び、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法に関する。
　糖尿病は、血液中のグルコース濃度が正常より高い状態、つまり、高血糖状態になる病気である。正常であれば、食事の後に血糖値が上昇しても、インスリンの作用により、血糖値は低下する。しかし、糖尿病では、インスリン分泌量の低下やインスリン感受性の低下により、食事により上昇した血糖値を下げることができなくなる。
　これまで、食物繊維による血糖値上昇抑制効果については多く報告されており、その効果の発現が、食物繊維の種類や量によって異なることが示唆されている。また、水溶性食物繊維において、血糖値上昇抑制効果が強く見られることが報告されている。食物繊維は人間が有する消化酵素では消化できない。そのため、食べ物が消化器系を通過する時間を短くし、排便量を多くし、吸収量を減らすことが知られている。
　キノコは子実体に水溶性および不溶性食物繊維を多く有しているため、血糖値の上昇抑制が期待されている。食物繊維は糖質代謝における重要な役割があり、先行研究により、糖質代謝疾患の一つである糖尿病の発生と、食物繊維の摂取量との関連性が示されている（非特許文献１）。
　ヌメリスギタケ（学名：Pholiota　adiposa　(Fr.)　kummer）は、モエギタケ科スギタケ属に属する食用キノコの１種である。このヌメリスギタケ種の新品種として、図１に示す福岡Ｏ－Ｎが２００３年に品種登録されている。福岡Ｏ－Ｎは、天然物では春と秋しか採れない珍しさと、その美味しさから幻のキノコと言われている。
Trowell H. Dietary fibre, ischaemic heart disease and diabetes mellitus. Proceedings of the Nutrition Society. 32:151-157.1973.
　しかしながら、食用キノコの食物繊維による血糖値上昇抑制効果が多く報告されている一方で、ヌメリスギタケの生理活性については未解明な部分が多い。
　そこで、本発明では、新たな機能性を有する、ヌメリスギタケ由来の食品組成物等を提供することを目的とする。
　本発明の第１の観点は、ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とするα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第２の観点は、第１の観点のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物であって、前記有効成分は、ヌメリスギタケのメタノール抽出物である、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第３の観点は、第１又は第２の観点のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物であって、前記有効成分は、ヌメリスギタケの菌糸体由来成分である、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第４の観点は、第１から第３のいずれかの観点のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物であって、前記有効成分は、構造式が（１）式で表されるエルゴステロール、（２）式で表されるエルゴステロールペルオキシド、（３）式で表されるジ－２－エチルへキシルフタレート（Di-(2-ethylhexyl)phthalate）、（４）式で表される５α、１４β－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３－オン－１１－アセテート（5α, 14β-Ergosta-7, 22-dien-3-one, 11-acetate）、（５）式で表される５α－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３β、１１α－ジオールジアセテート（5α-Ergosta-7, 22-diene-3β, 11α-diol, diacetate）又は（６）式で表されるトリリノレイン（1,2,3-Tri(cis,cis-9,12-octadecadienoyl) Glycerol、2,3-Bis[[(9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoyl]oxy]propyl (9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoate）である、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第５の観点は、構造式が（６）式で表されるトリリノレインを有効成分として含有するα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第６の観点は、第５の観点のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物であって、構造式が（１）式で表されるエルゴステロール、（２）式で表されるエルゴステロールペルオキシド、（３）式で表されるジ－２－エチルへキシルフタレート（Di-(2-ethylhexyl)phthalate）、（４）式で表される５α、１４β―エルゴスタ－７，２２－ジエン－３－オン－１１―アセテート（5α,14β-Ergosta-7,22-dien-3-one,11-acetate）又は（５）式で表される５α―エルゴスタ－７，２２－ジエン－３β、１１α―ジオールジアセテート（5α-Ergosta-7,22-diene-3β, 11α-diol, diacetate）を有効成分としてさらに含有する、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物である。
　本発明の第７の観点は、ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とするα－グルコシダーゼ阻害剤である。
　本発明の第８の観点は、ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とする糖分解酵素活性阻害用食品組成物である。
　本発明の第９の観点は、ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とする糖分解酵素活性阻害剤である。
　本発明の第１０の観点は、ヌメリスギタケから有効成分を抽出する抽出ステップを含む、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法である。
　本発明の第１１の観点は、第１０の観点のα－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法であって、前記抽出ステップにおいて、溶媒としてメタノールを用いる、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法である。
　本発明の第１２の観点は、トリアコンチル基が化学結合したシリカ系逆相カラムに、ヌメリスギタケ由来の試料を注入するステップを含む、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分の定量分析方法である。
　本発明の第１３の観点は、α－グルコシダーゼ阻害用又は糖分解酵素活性阻害用の機能性食品である。
　本発明の第１４の観点は、第１から第１１の観点のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物、α－グルコシダーゼ阻害剤、糖分解酵素活性阻害用食品組成物、糖分解酵素活性阻害剤又はα－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法を用いた、α－グルコシダーゼ阻害又は糖分解酵素活性阻害による、健康増進方法である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
　本発明の各観点によれば、α－グルコシダーゼ阻害活性を有する、ヌメリスギタケ由来の食品組成物等を提供することが可能になる。
　なお、本願発明者らは、図１３（ｃ）及び図１４（ｃ）に示される通り、ヌメリスギタケが一般的なキノコの特徴である食物繊維が豊富で吸収されにくいという消極的な属性だけでなく、α－グルコシダーゼ阻害活性という積極的な属性をも有することを見出した。また、図１２に示される通り、他のキノコと比較して、ヌメリスギタケ由来成分が非常に強いα－グルコシダーゼ阻害活性を有することは、本発明の発明者らによって初めて明らかにされたことである。本発明の食品組成物等は、本願発明者らが発見したヌメリスギタケの新たな属性に基づいて、新規の用途を提供するものである。
　特に、ヌメリスギタケのメタノール抽出物において強いα－グルコシダーゼ阻害活性がみられた。なお、ヌメリスギタケのような天然物の抽出物には、多種多様な化学物質が含まれている。そのため、本発明における優れたα－グルコシダーゼ阻害活性に寄与する成分は、本願の出願時において図１０に示す一部の成分を特定することが出来たが、全成分は特定されておらず、また、更なる特定のためには多くの時間を要する見込みである。
　本発明の第２又は第１１の観点によれば、ヌメリスギタケからα－グルコシダーゼ阻害の有効成分を抽出することが容易になる。
　本発明の第３の観点によれば、子実体を育てる時間をかけることなく、同等以上の有効性を期待できるα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物を提供することが可能になる。
　本発明の第４から第６の観点によれば、高い阻害率を有するα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物を提供することが可能になる。
　本発明の第１２の観点によれば、ヌメリスギタケに含まれる有効成分である化合物（６）の定量分析が容易になる。
ヌメリスギタケの抽出物の抽出及び分画の手順を示す図である。 80%メタノール水溶液画分、ヘキサン抽出物、ヘキサン可溶部のα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 酢酸エチル可溶部のα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（Pass画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（100％水画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（20％メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（50％メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（100％メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 水層残渣（アセトン画分）の分取HPLCクロマトグラムとα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す図である。 ヌメリスギタケから単離された化合物の構造式を示す図である。 表５の条件におけるヌメリスギタケ抽出物のクロマトグラフである。 ８種のキノコのα－グルコシダーゼ阻害率を示す図である。 ヌメリスギタケを摂取によるヒトの血糖値の経時変化を示す図である。 血糖値上昇曲線下面積値（ＡＵＣ）を示す図である。 ヌメリスギタケの菌糸体のα－グルコシダーゼ阻害率を示す図である。
　以下、図面を参照して、本発明の実施例について述べる。なお。本発明の実施の形態は以下の実施例に限定されるものではない。
　抗糖尿病薬として、α－グルコシダーゼ阻害活性を有する血糖値上昇抑制剤が知られている。通常の消化において、炭水化物は分解されて、単糖として小腸から吸収される。小腸膜に結合しているα－グルコシダーゼは、二糖やオリゴ糖を、小腸で吸収しやすい単糖に分解する酵素である。このα－グルコシダーゼの働きを阻害することで、炭水化物の消化速度を低下させ、血糖値の上昇を抑制することができる。以下、ヌメリスギタケの抽出物が有するα－グルコシダーゼ阻害活性について検討した内容について述べる。
１．１　抽出方法
　まず、乾燥ヌメリスギタケ粉末5kgにメタノールを25mL加え抽出を行い、メタノール抽出物259gを得た。
１．２　抽出物の分画手順
　図1は、ヌメリスギタケの抽出物の抽出及び分画の手順を示す図である。得られたメタノール抽出物を80%メタノール水溶液（300mL）に溶解させ、可溶部と不溶部に分けた。次に、80%メタノール水溶液不溶部は、ヘキサンで洗浄し、ヘキサン可溶部とヘキサン不溶部に分けた。続いて、80%メタノール水溶液可溶部にヘキサン（300mL×2）を加え、液－液分配により極性成分および非極性成分の抽出を行い、主に極性成分が含まれる80％メタノール水溶液画分と、主に非極性成分が含まれるヘキサン抽出物に分けた。80%メタノール水溶液画分を回収後、メタノールを留去した。その後、超純水150 mLを加えて定容後、酢酸エチル（150mL×2）を加えて抽出を行い、酢酸エチル可溶部（7.3g）および水層残渣を得た。水層残渣は、さらに分画を行い、Pass画分、100%水画分、20%メタノール画分、50%メタノール画分、100%メタノール画分及びアセトン画分を得た。
　さらに、酢酸エチル可溶部については、次の手順に従って下記表１に示す溶媒を用いたシリカゲルオープンカラムクロマトグラフィーにより、Fr.1からFr.25に分画した。はじめにn-ヘキサンと酢酸エチル（90:10）を用いてFr.1を得た。Fr.2およびFr.3は、n-ヘキサンと酢酸エチル（80:20）を用いた。Fr.4は、n-ヘキサンと酢酸エチル（75:25）を用いた。Fr.5は、n-ヘキサンと酢酸エチル（70:30）を用いた。Fr.6は、n-ヘキサンと酢酸エチル（60:40）を用いた。Fr.7およびFr.8は、n-ヘキサンと酢酸エチル（50:50）を用いた。Fr.9は、n-ヘキサンと酢酸エチル（40:60）を用いた。Fr.10は、n-ヘキサンと酢酸エチル（30:70）を用いた。Fr.11およびFr.12は、n-ヘキサンと酢酸エチル（20:80）を用いた。Fr.13は、n-ヘキサンと酢酸エチル（10:90）を用いた。Fr.14からは溶媒条件を、酢酸エチルとメタノールに変更し、分画を行なった。Fr.14は酢酸エチルとメタノール（100:0）を用いた。Fr.15は酢酸エチルとメタノール（90:10）を用いた。Fr.16は酢酸エチルとメタノール（80:20）を用いた。Fr.17およびFr.18は酢酸エチルとメタノール（70:30）を用いた。Fr.19およびFr.20は酢酸エチルとメタノール（60:40）を用いた。Fr.21は酢酸エチルとメタノール（50:50）を用いた。Fr.22は酢酸エチルとメタノール（40:60）を用いた。Fr.23は酢酸エチルとメタノール（30:70）を用いた。Fr.24およびFr.25は酢酸エチルとメタノール（20:80）を用いた。分画には、全量が5Lの溶媒を分画に供した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　また、Pass画分、100%水画分、20%メタノール画分、50%メタノール画分、100%メタノール画分及びアセトン画分については、下記表２の条件の分取クロマトグラフィーにより、それぞれ複数の画分（Fr.）に分画した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
１．３　α－グルコシダーゼ阻害活性試験の手順
　上記１．２で分画した各画分について、α－グルコシダーゼ阻害活性試験を次の手順で行った。まず、反応チューブに酵素、スクロースおよび試料を各100μLずつ混合した（合計300μL）。その後、ボルテックスにより撹拌後、菌培養インキュベーター内のシェイカー上にセットし、37℃で30分間、撹拌・反応させた。ブロックインキュベーターを100℃にセットし、反応チューブを10分間加熱し、加熱後、室温に戻るまで空冷を行なった。その後、　反応チューブを遠心分離（4℃、15分、1500rpm）し、上清中のグルコース濃度をバイオセンサにより測定した。ポジティブコントロールには臨床薬であるデオキシジノリマイシン（DNJ）を用いた。
１．４　バイオセンサを用いたグルコース測定
　グルコース濃度の測定は次の手順で行った。バイオセンサの移動相には、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（15g）、塩化カリウム（3.7g）および超純水（500mL）を混合したものを用い、水酸化ナトリウムでpH調整を行った。その後、アジ化ナトリウムを用いてpH7に調整後、超純水を加えて1000mLに定容した。グルコースの標準溶液は移動相を用いて、1.25g/L、2.5g/L、5.0g/Lのグルコース溶液を調整した。そして、コントロールおよび試料を測定後、結果の平均値から、α－グルコシダーゼ阻害活性の算出を行った。
２．１　α－グルコシダーゼ阻害活性試験結果
　はじめに、乾燥ヌメリスギタケより抽出したメタノール抽出物200μg/mLの阻害活性試験を行ったところ、阻害率は93.8％であり、非常に高い阻害活性を有することが明らかになった。
　次に、ヘキサン不溶部400μg/mLの阻害活性試験を行ったところ、阻害率は20.0％であった。なお、NMR及びGC-MS解析により、ヘキサン不溶部の主成分はトレハロースであることが判明した。
　次に、80%メタノール水溶液画分、ヘキサン抽出物、ヘキサン可溶部のα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を図2に示す。臨床薬であるDNJでは最終濃度300 μg/mLで、80%程度の阻害率が得られた。80%メタノール水溶液画分（最終濃度50 μg/mL）、ヘキサン抽出物（最終濃度25 μg/mL、50 μg/mL）は、DNJよりも低濃度において、DNJより強い阻害活性が見られた。
　次に、酢酸エチル可溶部のα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を図3に示す。酢酸エチル可溶部では、Fr. 2、Fr. 3、Fr. 4、Fr. 5、Fr. 7、Fr. 8、Fr. 9、Fr. 10、Fr. 11、Fr. 12（最終濃度50 μg/mL）、Fr. 6、Fr. 13（最終濃度25 μg/mL、50 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　また、Fr. 14、Fr. 15、Fr. 16、Fr. 17、Fr. 18、Fr. 20、Fr. 21、Fr. 23、Fr. 24、Fr. 25（最終濃度50 μg/mL）、Fr. 19、Fr. 22（最終濃度25 μg/mL、50 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　次に、図4(a)に水層残渣（Pass画分）の分取HPLCクロマトグラム、図4(b)にα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、9～14分の間にピークが検出された。そこで、各分画物について、α－グルコシダーゼ阻害活性試験を行なったが、水層残渣（Pass画分）には阻害活性は見られなかった。
　次に、図5(a)に水層残渣（100%水画分）の分取HPLCクロマトグラム、図5(b)にα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、9～14分の間にピークが検出された。そこで、各分画物について、α－グルコシダーゼ阻害活性試験を行なったところ、水層残渣（100%水画分）のFr. 3（最終濃度25 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。この活性成分はUV吸収を持たない化合物であると推察される。
　次に、図6(a)に水層残渣（20%メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラム、図6(b)にα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、9～16分の間にピークが検出された。そこで、各分画物について、α－グルコシダーゼ阻害活性試験を行なったところ、水層残渣（20%メタノール画分）のFr. 1、Fr. 4、Fr. 5、Fr. 6、Fr. 7（最終濃度25 μg/mL）、Fr. 2、Fr. 3（最終濃度5μg/mL、25μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　次に、図7(a)に水層残渣（50%メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラム、図7(b)にα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、7～30分の間にピークが検出された。そこで、各分画物について、α－グルコシダーゼ阻害活性試験を行なったところ、水層残渣（50%メタノール画分）のFr. 1、Fr. 2（最終濃度5 μg/mL、25 μg/mL）、Fr. 3、Fr. 4、Fr. 5、Fr. 6、Fr. 7、Fr. 8、Fr. 9、Fr. 10（最終濃度25 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　次に、図8(a)に水層残渣（100%メタノール画分）の分取HPLCクロマトグラム、α－グルコシダーゼ阻害活性試験結果図8(b)にを示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、7～50分の間にいくつかのピークが検出された。そこで、水層残渣（100%メタノール画分）のFr. 1（最終濃度5 μg/mL、25 μg/mL）、Fr. 2、Fr. 3、Fr. 9、Fr. 10（最終濃度25 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　最後に、図9(a)に水層残渣（アセトン画分）の分取HPLCクロマトグラム、図9(b)にα－グルコシダーゼ阻害活性試験結果を示す。分取HPLCの検出波長（254 nm）において、6～70分の間にいくつかのピークが検出された。そこで、水層残渣（アセトン画分）のFr. 1、 Fr. 2、Fr. 9、Fr. 10（最終濃度50 μg/mL）は、DNJより低濃度において、DNJと同等または、より強い阻害活性が見られた。
　さらに、水層残渣（アセトン画分）からシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返すことにより、構造式が図１０の（１）式で表されるエルゴステロール、及び、（２）式で表されるエルゴステロールペルオキシドを単離した。
　また、水層残渣（100%メタノール画分）から、構造式が図１０の（３）式で表されるジ－２－エチルへキシルフタレート（Di-(2-ethylhexyl)phthalate）、（４）式で表される５α、１４β－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３－オン－１１－アセテート（5α,14β-Ergosta-7,22-dien-3-one, 11-acetate）、（５）式で表される５α－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３β、１１α－ジオールジアセテート（5α-Ergosta-7,22-diene-3β,11α-diol, diacetate）、（６）式で表されるトリリノレイン（1,2,3-Tri(cis,cis-9,12-octadecadienoyl) Glycerol、2,3-Bis[[(9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoyl]oxy]propyl (9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoate、以下「化合物（６）」とも表記）を単離した。
　下記の表３は、上記の単離化合物の25μg/mL及び50μg/mLにおけるα－グルコシダーゼ阻害率を示す表である。（３）式で表されるDi-(2-ethylhexyl)phthalateと（６）式で表されるトリリノレインが特に高い阻害活性を示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　また、水層残渣（100％メタノール画分及びアセトン画分）から、構造式が図１０の（７）式で表される４－ヒドロキシ－２－ウンデセン酸（4-Hydroxy-2-Undecenoic acid、以下「化合物（７）」と表記）を単離した。
　下記の表４は、α－グルコシダーゼ活性の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を示す表である。化合物（６）と化合物（７）が特に高いα－グルコシダーゼ阻害活性を有することが明らかになった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
　上述の通り、ヌメリスギタケには、臨床薬であるDNJよりも強いα－グルコシダーゼ阻害活性を有する成分が含有されていることが明らかになった。したがって、ヌメリスギタケ又はその抽出物を含む食品組成物を摂取することにより、血糖値の上昇抑制が期待できる。
　続いて、下記の表５の条件において、ヌメリスギタケ抽出物のクロマトグラフィーを行った。下記のＹＭＣ（登録商標）カラムは、トリアコンチル基が化学結合したシリカ系逆相カラムであり、ＹＭＣ社から購入したものである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
　上記条件で得られたクロマトグラフを図１１に示す。図１１の（ａ）はヌメリスギタケから単離した化合物（６）、（ｂ）はヌメリスギタケのヘキサン抽出物、（ｃ）はヘキサン抽出物と化合物（６）の混合物の溶液をそれぞれ上記カラムに充填し、溶出した溶離液を蒸発光散乱検出（ＥＬＳＤ）で測定して得られたクロマトグラフである。図１１中の矢印の位置には、（ａ）と（ｃ）ではピークがあるが、化合物（６）が含まれていない（ｂ）ではピークが見られなかった。よって、表５の条件を用いれば、ヌメリスギタケ抽出物から化合物（６）を単離するためにクロマトグラフィーを何度も繰り返すことなく、化合物（６）の定量分析を行うことが可能になる。
　なお、ヌメリスギタケから有効成分を抽出して食品組成物を製造する場合の抽出溶媒としては、メタノールの他に、エタノール、ヘキサン、イソプロパノール、アセトン等の溶媒を用いても良い。
　図１２は、８種のキノコのα－グルコシダーゼ阻害率を示す図であり、左から順に、比較対照として用いた１－デオキシノジリマイシン（以下、「ＤＮＪ」という。）、ヌメリスギタケ、ぶなしめじ、ひらたけ、ゆきれいたけ、しいたけ、スギタケ、まいたけ、エリンギのα－グルコシダーゼ阻害率を示している。ＤＮＪの試料濃度は300μg/mLであり、キノコの試料濃度は50μg/mLである。ヌメリスギタケは、他のキノコに比べ極めて強いα－グルコシダーゼ阻害活性を示し、そのうえ、α－グルコシダーゼ阻害剤として用いられているＤＮＪよりも強いα－グルコシダーゼ阻害活性を示すことが明らかになった。
　また、一般に経口血糖降下薬として用いられているアルカボースのα－グルコシダーゼ阻害濃度（ＩＣ５０）は、４０６μｇ／ｍＬである。これに対し、ヌメリスギタケのＩＣ５０は、４１μｇ／ｍＬであり、ヌメリスギタケのα－グルコシダーゼ阻害活性は、アルカボースの９．９倍と非常に強いことが明らかになった。
　なお、現在までにヌメリスギタケについての研究例は少なく、ヌメリスギタケ由来成分が非常に強いα－グルコシダーゼ阻害活性を有することは、本発明の発明者らによって初めて明らかにされたことである。
　図１３は、ヌメリスギタケを摂取によるヒトの血糖値の経時変化を示す図である。図１３（ａ）及び（ｂ）は、被験者に試験品又はプラセボ品を米飯と共に摂取させた場合の血糖値上昇曲線であり、（ａ）は、生鮮２５ｇ相当のヌメリスギタケの乾燥粉末１．８５ｇを用いた場合、（ｂ）は、生鮮５０ｇ相当のヌメリスギタケの乾燥粉末３．７ｇを用いた場合を示している。図１３（ｃ）は、生鮮５０ｇのヌメリスギタケ又はエリンギを加熱し、お吸い物として摂取させた場合の血糖値上昇曲線である。なお、被験者数は、ヌメリスギタケ１４名、エリンギ１４名である。また、血糖値の測定は、被験者の指先から採血し、食前、３０分後、６０分後、１２０分後に行った。
　図１４は、図１３の各血糖値上昇曲線に対応する血糖値上昇曲線下面積値（ＡＵＣ）を示す図である。
　図１３及び図１４に示される通り、ヌメリスギタケが、食後血糖値の上昇を有意に抑制することが明らかになった。また、食後血糖値の上昇を抑制力は、エリンギよりもヌメリスギタケが高いことが明らかになった。一般にキノコに多く含まれる食物繊維が食後血糖値に影響していると考えられるが、食物繊維の含有比率は、ヌメリスギタケ乾燥物が３８％、エリンギ乾燥物が３７．８％と同程度である。そのため、ヌメリスギタケによる食後血糖値の上昇抑制には、食物繊維だけでなく、ヌメリスギタケ特有の有効成分が関与していると思われる。
　図１５は、ヌメリスギタケの菌糸体のα－グルコシダーゼ阻害率を示す図である。図１５に示される通り、ヌメリスギタケの菌糸体も、高いα－グルコシダーゼ阻害活性を示すことが明らかになった。つまり、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分は、ヌメリスギタケの子実体だけでなく、菌糸体にも含まれていると考えられる。また、ヌメリスギタケ菌糸体のα－グルコシダーゼ阻害活性は、α－グルコシダーゼ阻害剤として用いられているＤＮＪよりも高い阻害活性を示した。
　菌糸体は、栽培期間を要する子実体に比べて、培養により短期間で得られる。したがって、ヌメリスギタケの菌糸体を用いれば、α－グルコシダーゼ阻害用食品組成物をより容易に提供することが可能になる。

 

Claims (12)

  1. 　ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とするα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
  2. 　前記有効成分は、ヌメリスギタケのメタノール抽出物である、請求項１記載のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
  3. 　前記有効成分は、ヌメリスギタケの菌糸体由来成分である、請求項１又は２記載のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
  4. 　前記有効成分は、構造式が（１）式で表されるエルゴステロール、（２）式で表されるエルゴステロールペルオキシド、（３）式で表されるジ－２－エチルへキシルフタレート（Di-(2-ethylhexyl)phthalate）、（４）式で表される５α、１４β―エルゴスタ－７，２２－ジエン－３－オン－１１―アセテート（5α, 14β-Ergosta-7, 22-dien-3-one, 11-acetate）、（５）式で表される５α―エルゴスタ－７，２２－ジエン－３β、１１α―ジオールジアセテート（5α-Ergosta-7, 22-diene-3β, 11α-diol, diacetate）、（６）式で表されるトリリノレイン又は（７）式で表される４－ヒドロキシ－２－ウンデセン酸（4-Hydroxy-2-Undecenoic acid）である、請求項１から３のいずれかに記載のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
  5. 　構造式が（６）式で表されるトリリノレインを有効成分として含有するα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
  6. 　構造式が（１）式で表されるエルゴステロール、（２）式で表されるエルゴステロールペルオキシド、（３）式で表されるジ－2－エチルへキシルフタレート（Di-(2-ethylhexyl)phthalate）、（４）式で表される５α、１４β－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３－オン－１１－アセテート（5α,14β-Ergosta-7,22-dien-3-one,11-acetate）、（５）式で表される５α－エルゴスタ－７，２２－ジエン－３β、１１α－ジオールジアセテート（5α-Ergosta-7,22-diene-3β, 11α-diol, diacetate）又は（７）式で表される４－ヒドロキシ－２－ウンデセン酸（4-Hydroxy-2-Undecenoic acid）を有効成分としてさらに含有する、請求項５記載のα－グルコシダーゼ阻害用食品組成物。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
  7. 　ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とするα－グルコシダーゼ阻害剤。
  8. 　ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とする糖分解酵素活性阻害用食品組成物。
  9. 　ヌメリスギタケ由来成分を有効成分とする糖分解酵素活性阻害剤。
  10. 　ヌメリスギタケから有効成分を抽出する抽出ステップを含む、α－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法。
  11. 　前記抽出ステップにおいて、溶媒としてメタノールを用いる、請求項１０記載のα－グルコシダーゼ阻害剤の製造方法。
  12. 　トリアコンチル基が化学結合したシリカ系逆相カラムに、ヌメリスギタケ由来の試料を注入するステップを含む、α－グルコシダーゼ阻害活性の有効成分の定量分析方法。

     
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