WO2019070087A1 - 푸사리세틴 화합물을 포함하는 피부 미백용 조성물 - Google Patents

푸사리세틴 화합물을 포함하는 피부 미백용 조성물 Download PDF

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WO2019070087A1
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fusariceptin
compound
pigmentation
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안종석
고성균
장재혁
권민철
류인자
장민아
김보연
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한국생명공학연구원
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    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
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    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin

Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising a fusarietin compound or a composition for preventing, improving or treating pigmentation.
  • skin color is determined by the amount of melanin present in the skin, and melanin is present in the base layer of the epidermis, blocking the ultraviolet rays from the sun and protecting the skin.
  • excessive ultraviolet light causes excessive synthesis of melanin, or deterioration of the physiological function of the skin due to aging or the like, pigmentation that causes melanin to settle on the skin occurs.
  • pigmentation causes black skin, freckles and stains.
  • Melanin is biosynthesized in the melanosome present in the melanocyte, transferred to the surrounding epidermal cells through the dendrites of melanocytes, and migrates to the skin stratum corneum.
  • Melanogenesis in melanomas is initiated by the oxidation of tyrosine to dopa and dopaquinone by tyrosinase, a major protein of melanogenesis.
  • TRP tyrosinase-related protein-1
  • DCT DOPAchrome tautomerase
  • melanin examples include red-yellow phaeomelanin and dark brown-colored eumelanin. Generally, when the proportion of uramalin is high, black skin and dark hair are present. When the proportion of peromelanin is high, . Thus, it is known that white melanin is present in many of the white people, and melanin is present in the colored ones. It is known that the ratio of the two melanins affects the skin color and hair color.
  • tyrosinase in melanin synthase is necessary for the synthesis of both melanin, and TRP-1 and TRP-2 are mainly involved in the synthesis of eumelanin.
  • Melanocyte activation factors are mediated by ⁇ -melanocyte stimulating hormone ( ⁇ -MSH) and adrenocorticotrophin (ACTH) mediated by melanocortin receptors from keratinocytes and contribute to the activation of melanocytes .
  • ⁇ -MSH ⁇ -melanocyte stimulating hormone
  • ACTH adrenocorticotrophin
  • the fusariatin compound is isolated from the Fusarium sp. Strain, and the anticancer activity of the fusariceptin compound has been reported (Korea Patent No. 10-1308539) The efficacy for skin whitening, skin blackening or pigmentation improvement is unknown.
  • the present inventors have made intensive efforts to develop a whitening agent using a safe natural-derived substance.
  • the inventors of the present invention have found that the fusariceptin compound has remarkably excellent effects for preventing skin whitening, prevention of skin blackening or prevention of pigmentation, Completed.
  • It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition for skin whitening comprising a fusariceptin compound, a stereoisomer thereof or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of pigment deposition containing a fusariceptin compound, a stereoisomer thereof or a salt thereof as an active ingredient, and a step of administering the composition in a therapeutically effective amount to suspected individuals of pigment deposition And to provide a method for preventing or treating pigmentation.
  • the present invention provides a cosmetic composition for skin whitening or skin blackening, which comprises a fusariceptin compound represented by the following formula (1), a stereoisomer thereof or a salt thereof as an active ingredient.
  • the fusariceptin compound represented by the formula (1) includes, but is not limited to, a compound represented by the following formula (2) or a compound represented by the following formula (3).
  • the compound represented by Formula 2 is called a fusariceptin A compound, and the compound represented by Formula 3 is named a fusariceptin B compound.
  • the fusariceptin A compound or the fusariceptin B compound may include all stereoisomers thereof, salts thereof, as well as possible solvates, hydrates and the like which may be prepared therefrom.
  • the fusariceptin A compound represented by the formula (2) and the fusariceptin B compound represented by the formula (3) are provided as an example of the fusariceptin compound of the present invention showing skin whitening or anti-skin blackening effect.
  • the fusariceptin A compound or the fusariceptin B compound can be isolated and purified from Fusarium sp.
  • Strain FN080326 (Accession No. KCTC11985BP), which is a fungal strain, but is not limited thereto.
  • the strain of the genus Fusarium may be a strain of the accession number KCTC11985BP deposited with the Korean Collection for Type Culture (KCTC) under the name of FN080326 and directly isolated from soil samples by the present inventors. It is not limited.
  • the fusariceptin A compound or the fusariceptin B compound of the present invention can be isolated and purified by the method disclosed in Korean Patent No. 10-1308539, but is not limited thereto.
  • the fusariceptin A compound or the fusariceptin B compound can be prepared by the following procedure. First, the culture solution of Fusarium sp. FN080326 was extracted with the same amount of ethyl acetate to obtain an extract. The extract was concentrated by evaporation under reduced pressure to obtain a concentrate. Thereafter, the active fraction is eluted from the concentrate using column chromatography, concentrated under reduced pressure, and then separated by high performance liquid chromatography to obtain the fusariceptin A compound or the fusariceptin B compound of the present invention.
  • culture solution used in the present invention means a culture obtained by inoculating a strain into a liquid medium.
  • the culture solution may be a culture containing a strain, or a culture obtained by inoculating and culturing a strain, followed by removal of the bacteria, i.e., the strain.
  • the culture solution may be in the form of a culture solution itself, a concentrated solution in which the culture solution is concentrated, or a dried product in which the culture solution is dried.
  • skin whitening generally refers to any action that inhibits the production of melanin and thereby inhibits or prevents skin deposition of melanin.
  • the cosmetic composition of the present invention may comprise a salt of the fusarietin compound.
  • the term " salt” means a salt that can be used as a cosmetic product among salts in which cations and anions are bound by electrostatic attraction, and usually includes salts with metal salts, organic bases, Salts with acids, salts with organic acids, salts with basic or acidic amino acids, and the like.
  • Examples of the metal salt include alkali metal salts (sodium salt, potassium salt, etc.), alkaline earth metal salts (calcium salt, magnesium salt, barium salt, etc.), aluminum salts and the like;
  • Examples of salts with organic bases include salts with organic bases such as triethylamine, pyridine, picoline, 2,6-lutidine, ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, cyclohexylamine, dicyclohexylamine, N, Salts with isoparaffin;
  • Salts with inorganic acids include salts with hydrochloric acid, hydrobromic acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid and the like;
  • Salts with organic acids include salts with formic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, phthalic acid, fumaric acid, oxalic acid, tartaric acid, maleic acid, citric acid, succinic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic
  • the formulations of the cosmetic composition of the present invention may be in the form of, for example, solutions, shampoos, rinses, external ointments, creams, foams, nourishing lotions, suppositories, packs, supplements, emulsions, makeup bases, essences, But are not limited to, creams, sun oil, suspensions, emulsions, pastes, gels, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansers, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, patches, .
  • the cosmetic composition of the present invention may further comprise at least one cosmetically acceptable carrier compounded in a common cosmetic composition and may be, for example, oil, water, a surfactant, a moisturizer, a lower alcohol, a thickener, a chelate Coloring matters, preservatives, perfumes, etc. may be appropriately compounded, but the present invention is not limited thereto.
  • the cosmetically acceptable carrier contained in the cosmetic composition of the present invention may vary depending on the formulation of the cosmetic composition.
  • the carrier component may include animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, starches, tragacanth, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, And the like may be used, but the present invention is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.
  • lactose When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder or the like may be used as a carrier component.
  • Propellants such as propane / butane or dimethyl ether, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.
  • a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent may be used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil and the like can be used, and particularly fatty acid esters of cottonseed oil, peanut oil, corn oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan May be used, but is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.
  • the formulation of the present invention is a suspension
  • a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspension such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tragacanth, but are not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.
  • the formulation of the present invention is a soap
  • an alkali metal salt of a fatty acid a fatty acid hemiester salt, a fatty acid protein hydrolizate, isethionate, a lanolin derivative, an aliphatic alcohol, a vegetable oil, glycerol, But is not limited thereto. These may be used alone or in combination of two or more.
  • the amount of the fusarietin compound represented by Formula 1 of the present invention, its stereoisomer or salt thereof is not limited to the total weight of the cosmetic composition, but may be 0.01 to 99% by weight, 0.1 to 90% by weight, , 1 wt% to 70 wt%, or 10 wt% to 50 wt%.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating pigment deposition comprising the fusariceptin compound represented by the above formula (1), a stereoisomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the fusariceptin compound represented by the formula (1) used in the pharmaceutical composition of the present invention may be a fusariceptin A compound represented by the formula (2) or a fusariceptin B compound represented by the formula (3), but is not limited thereto.
  • the fusariceptin A compound represented by formula (2) and the fusariceptin B compound represented by formula (3) in the present invention are provided as an example of the fusariceptin compound represented by formula (1) showing the effect of preventing or treating pigmentation.
  • pigmentation refers to hyperpigmentation caused by an increase in melanin in the skin, nail, or mucous membranes surrounding the oral cavity or nasal cavity.
  • the specific disease name is not particularly limited as long as it is the category of pigmentation which is medically or cosmetically related to the prevention, improvement or treatment of the present invention.
  • the specific disease name after inflammation is excessive pigmentation, stain, freckles, Melanin hyperpigmentation, black spots, other unclassified white spots, other disorders with reduced melanin formation, pigmented purpuric dermatosis, serpentine hemangiomas, other specified pigmentation disorders, iron pigmentation, tattoo pigmentation or unspecified It may be a pigmentation disorder.
  • prophylactic in the present invention means any action that inhibits or delays the occurrence of pigmentation upon administration of the composition of the present invention
  • treatment means that the composition of the present invention alleviates or alleviates the symptoms of pigmentation It means all acts.
  • the pharmaceutical composition comprising the fusarietin compound represented by the general formula (1) may inhibit melanin biosynthesis.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can inhibit the expression of tyrosinase and / or Trp-1.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be safely used for prolonged administration for the purpose of preventing, ameliorating or treating pigmentation.
  • the fusariceptin A compound represented by the formula (2) and the fusariceptin B compound represented by the formula (3) have no toxicity and side effects and can be safely used for prolonged administration for the purpose of prevention, improvement or treatment of diseases.
  • the fusariceptin A compound represented by the formula (2) and the fusariceptin B compound represented by the formula (3) of the present invention are combined with tyrosinase and / or Trp-1 (Fig. 1 to Fig. 5), which effectively inhibited the melanin biosynthesis, but did not show cytotoxicity, through in vitro and animal models. Therefore, the composition of the present invention can be usefully used as a preventive or remedy for pigment deposition.
  • inhibition of expression of tyrosinase or Trp-1 means the level of protein expression of tyrosinase or Trp-1 or the expression level of tyrosinase or Trp- Or the like, and also includes actions or conditions that reduce the enzymatic activity of tyrosinase or Trp-1.
  • the term " pharmaceutically acceptable salt” refers to a salt of a form that can be used pharmaceutically, among the salts in which the cation and anion are bound by an electrostatic attraction, Specific examples include the examples of the " salt " described above in the cosmetic composition.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the kind of carrier which can be used in the present invention is not particularly limited and any carrier commonly used in the technical field can be used.
  • the carrier include, but are not limited to, saline, sterilized water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, maltodextrin, glycerol, . These may be used alone or in combination of two or more.
  • composition of the present invention may be supplemented with other pharmaceutically acceptable additives such as excipients, diluents, antioxidants, buffers or bacteriostats, and may be used as fillers, extenders, wetting agents, disintegrants, , A binder, a lubricant, and the like may be additionally used.
  • other pharmaceutically acceptable additives such as excipients, diluents, antioxidants, buffers or bacteriostats, and may be used as fillers, extenders, wetting agents, disintegrants, , A binder, a lubricant, and the like may be additionally used.
  • the fusariceptin compound represented by the formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof is used in an amount of 0.01 to 99% by weight, 0.1 to 90% by weight, %, 1 wt% to 70 wt%, or 10 wt% to 50 wt% of the composition of the present invention, but the composition is not limited thereto and can be variously changed according to the condition of the subject to be administered, If desired, it may also be included in the total content of the pharmaceutical composition.
  • composition of the present invention may be formulated into various formulations suitable for oral administration or parenteral administration.
  • Non-limiting examples of oral dosage forms using the pharmaceutical compositions of the present invention include troches, lozenges, tablets, aqueous suspensions, oily suspensions, prepared powders, granules, emulsions, hard capsules, soft Capsules, syrups, and elixirs.
  • a binder such as lactose, saccharose, sorbitol, mannitol, starch, amylopectin, cellulose or gelatin; Excipients such as dicalcium phosphate and the like; Disintegrating agents such as corn starch or sweet potato starch; Magnesium stearate, calcium stearate, sodium stearyl fumarate, or polyethylene glycol wax, and the like. Sweetening agents, fragrances, syrups, and the like may also be used. Furthermore, in the case of capsules, in addition to the above-mentioned substances, liquid carriers such as fatty oils can be further used.
  • Non-limiting examples of the parenteral preparation using the pharmaceutical composition of the present invention include injections, suppositories, respiratory inhalation powders, aerosol preparations for spraying, ointments, powder for application, oils and creams.
  • aqueous solutions In order to formulate the pharmaceutical composition of the present invention for parenteral administration, sterilized aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations and external preparations may be used.
  • non-aqueous solutions and suspensions include propylene glycol, polyethylene Glycerol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate, and the like.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is formulated into an injection
  • the pharmaceutical composition of the present invention is mixed with a stabilizer or a buffer in water to prepare a solution or suspension, which is used for unit administration of an ampoule or a vial Can be formulated.
  • a propellant or the like may be added together with the additive such that the water-dispersed concentrate or the wet powder is dispersed.
  • composition of the present invention is formulated into an ointment, a cream, a powder for application, an oil, an external preparation for skin or the like, an animal oil, a vegetable oil, a wax, a paraffin, a starch, a tracer, a cellulose derivative, a polyethylene glycol, , Silica, talc, zinc oxide or the like as a carrier.
  • the pharmaceutically effective amount and the effective dose of the pharmaceutical composition of the present invention can be varied depending on the formulation method, administration method, administration time and / or administration route of the pharmaceutical composition, and the kind of reaction to be achieved by administration of the pharmaceutical composition Including the age, weight, general health condition, degree and severity of the disease, sex, diet, excretion, drugs used simultaneously or simultaneously with the subject, and other compositional components, etc. May be varied according to factors well known in the art and in the pharmaceutical arts, and those of ordinary skill in the art can readily determine and prescribe dosages that are effective for the desired treatment.
  • the administration of the pharmaceutical composition of the present invention may be administered once a day or divided into several doses.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. Taking into consideration all of the above factors, in such an amount as to obtain the maximum effect in a minimal amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.
  • the route of administration and the mode of administration of the pharmaceutical composition of the present invention may be independent of each other, and may be arbitrarily selected depending on the route of administration and the mode of administration as long as the pharmaceutical composition can reach the desired site.
  • the pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally.
  • parenteral administration method of the pharmaceutical composition of the present invention examples include intravenous administration, intraperitoneal administration, intramuscular administration, transdermal administration or subcutaneous administration, and the method of applying, spraying or inhalation the above composition But are not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may exert an excellent effect even when it is used alone, but it can be used in combination with various methods such as hormone therapy and drug therapy to increase the therapeutic efficiency.
  • Another embodiment of the present invention is a method of preventing or treating pigmentation, comprising the step of administering the fosaricetin compound to a suspected individual of the pigmentation in a therapeutically effective amount.
  • the suspected individual of the pigment deposition refers to all animals, including humans, in which pigmentation has occurred or may occur, and the individual can be efficiently treated by administering the fosaricetin compound of the present invention to suspect individuals of pigmentation .
  • the pigment deposition is as described above.
  • the method of treatment of the present invention may comprise administering a therapeutically effective amount of the fusariceptin compound represented by formula (1).
  • Suitable total daily doses may be determined by the treatment within the scope of sound medical judgment and are generally from 0.005 to 4000 mg / kg, from 0.001 to 2000 mg / kg, from 0.01 to 1000 mg / kg, from 0.05 to 200 mg / kg, Or 0.1 to 100 mg / kg may be administered once to several times per day.
  • the specific therapeutically effective amount for a particular patient will depend upon the nature and extent of the reaction to be achieved, the particular composition, including whether or not other agents are used, the age, weight, Sex and diet of the patient, the time of administration, the route of administration and the rate of administration of the composition, the duration of the treatment, the drugs used or concurrently used with the specific composition, and similar factors well known in the medical arts.
  • the present invention also provides the use of the fusarietin compound represented by the above formula (1), a stereoisomer thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in the manufacture of a medicament for preventing or treating pigmentation.
  • the present invention provides a food composition for preventing or ameliorating pigment deposition containing the fusariceptin compound represented by Formula 1, a stereoisomer thereof or a salt thereof as an active ingredient.
  • the fusariceptin compound represented by the formula (1) used in the food composition of the present invention may be a fusariceptin A compound represented by the formula (2) or a fusariceptin B compound represented by the formula (3), but is not limited thereto.
  • the fusariceptin A compound represented by the formula (2) and the fusariceptin B compound represented by the formula (3) are provided as an example of the fusariceptin compound represented by the formula (1) showing the effect of preventing or improving the pigment deposition.
  • improvement in the present invention means any action whereby the pigmentation is alleviated or beneficially altered by the composition of the present invention.
  • the fosaricetin compound represented by the formula (1) of the present invention When the fosaricetin compound represented by the formula (1) of the present invention is incorporated into a health functional food, the compound may be added as it is or may be used in combination with other health functional foods or health functional foods, Can be used.
  • the amount of the active ingredient to be mixed can be appropriately determined depending on the purpose of use.
  • the salt of the fusarietin compound represented by the formula (1) of the present invention is not limited in its content with respect to the total weight of the food composition, but may be 0.01 to 99% by weight, 0.1 to 90% by weight, 1 to 1% 70% by weight, or 10% by weight to 50% by weight. However, in the case of long-term intake for the purpose of health control and hygiene, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range.
  • health functional food that can contain the compound of the present invention.
  • specific examples thereof include nutritional capsules, vitamin complexes, candies, snacks, confectionery, gums, dairy products including ice cream, , Drinks, alcoholic beverages and the like, and may include all of the health functional foods in the conventional sense, and foods used as feed for animals.
  • the health functional food of the present invention may contain various sweetening agents, flavoring agents, or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages.
  • the natural carbohydrates may be polysaccharides such as disaccharides such as monosaccharides such as glucose and fructose, maltose, sucrose, dextrin, cyclodextrins, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol.
  • the sweeteners may be natural sweeteners such as tau martin and stevia extract, and synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame.
  • the health functional food of the present invention may contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusters, stabilizers, Alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. It may also contain flesh for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks.
  • the fusariceptin compound represented by the formula 1 of the present invention effectively inhibits the production of melanin and the expression of tyrosinase and Trp-1 without exhibiting toxicity in cell and animal experiments, thereby providing excellent skin whitening effect and pigmentation Prevention, improvement or therapeutic effect, and can be variously used as a cosmetic composition, a pharmaceutical composition and / or a food composition.
  • Fig. 1 shows the result of confirming whether or not the fusariceptin A compound (FSA) and the fusariceptin B compound (FSB) show cytotoxicity.
  • Fig. 3 shows the results of confirming the inhibitory effect of tyrosinase and Trp-1 on the fusariceptin A compound (FSA) and the fusariceptin B compound (FSB).
  • FIG. 4 shows the results of confirming the melanin formation inhibitory effect of the fusariceptin A compound (FSA) and the fusariceptin B compound (FSB) in the zebrafish.
  • FIG. 5 shows the results of heart rate measurement to confirm the toxicity of the fusarietin A compound (FSA) and the fusariceptin B compound (FSB) in zebrafish.
  • Mouse melanoma cells (B16F10) and human normal lung fibroblasts (MRC-5) were obtained from American Tissue Culture. Colection (ATCC).
  • Mouse melanoma cells (B16F10) (1 ⁇ 10 5 cells / well) and human normal lung fibroblast cells (MRC-5) (1 ⁇ 10 5 cells / well), respectively, while maintaining the 37 °C under air of 5% CO 2 200 ⁇ l of each of the above 5 ⁇ 10 3 cells was added to a 96-well plate using DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 50 mg / ml streptomycin and 50 U / ml penicillin, Lt; 0 > C < 2 > incubator for 24 hours.
  • FBS fetal bovine serum
  • the fosaricetin A compound and the fosaricetin B compound were treated for each concentration, and cultured at the same culture conditions for 24 hours and 48 hours. After the incubation, the culture medium was removed and 50 ⁇ l of a 10 mg / mL MTT [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5- diphenyltetrazoliumbromide] solution (Sigma, USA) and then reacted at 37 ° C for 4 hours.
  • the fusariceptin compound represented by the formula (1) can be used as a cosmetic composition, a pharmaceutical composition or a food composition without toxicity in vivo.
  • Example 2 Fusari A compound ( FSA ) And Fusari B compound ( FSB ) To measure melanin formation inhibitory activity
  • B16F10 melanoma cells (1 ⁇ 10 5 cells), while maintaining the 37 °C under air of 5% CO 2 was added with 10% fetal bovine serum (FBS), 50 mg / ml streptomycin and 50 U / ml of penicillin 2 ml of 2 x 10 5 cells were added to a 6-well plate using one DMEM medium and cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C for 24 hours.
  • FBS fetal bovine serum
  • penicillin 2 ml of 2 x 10 5 cells were added to a 6-well plate using one DMEM medium and cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C for 24 hours.
  • the medium was removed and replaced with DMEM containing 10% FBS and 0.2 mM ⁇ -MSH. Then, the fusariceptin A compound and the fusariceptin B compound derivative were diluted in the same medium to an appropriate amount, CO 2 and 37 ° C until the cell density reached about 80% or more. After incubation, the medium was removed, washed with PBS and treated with tricine to recover cell pellets. The recovered pellet was transferred to a 1.5 ml Eppendorf tube, centrifuged at 5,000 rpm for 10 minutes, and the supernatant was removed. The supernatant-removed pellet was dried in a 60 ° C thermostat for 24 hours, and 1N NaOH was added to dissolve the melanin in the cells. The dissolved melanin was diluted an appropriate amount with PBS, and the absorbance at 490 nm was measured to determine the inhibition rate of melanin formation using the following equation.
  • B absorbance at 490 nm of the test sample after incubation
  • C absorbance at 490 nm without the test sample before incubation
  • D absorbance at 490 nm after the incubation without test sample
  • the fusariceptin compound represented by the general formula (1) can be effectively used as a composition for preventing, ameliorating or treating skin whitening composition and / or pigmentation or hyperpigmentation by effectively inhibiting melanin synthesis have.
  • B16F10 melanin cells (1 ⁇ 10 5 cells), the DMEM medium, while maintaining the 37 °C under air of 5% CO 2 was added with 10% fetal bovine serum (FBS), 50 mg / ml streptomycin and 50 U / ml of penicillin 2 ml of 2 x 10 < 5 > cells were added to a 6-well plate and cultured in a CO2 incubator at 37 [deg.] C for 24 hours. Then, after the medium was removed, the medium and the samples were mixed at appropriate concentrations, and then cultured for 48 hours under the same conditions.
  • FBS fetal bovine serum
  • penicillin 2 ml of 2 x 10 &lt 5 &gt
  • a tyrosine-EDTA solution was added and the cells were separated and collected in a microtube, followed by centrifugation to remove the supernatant.
  • the separated pellet was washed with PBS and centrifuged.
  • the pellet was treated with PRO-PREP TM Protein Extract Solution (Intron, Inc.) and reacted at -20 ° C for 15 minutes. After centrifugation, the supernatant was transferred to a tube and stored at -20 ° C.
  • Proteins purified by the above method were subjected to electrophoresis using 12% SDS-PAGE and transferred to a PVDF membrane. After blocking for 1 hour in a Tris buffer solution containing 5% skim milk, the cells were reacted with tyrosinase, Trp-1 and b-actin antibodies, respectively. After the reaction, anti-mouse IgG-HRP and anti-rabbit IgG-HRP conjugated antibody were added and reacted for a predetermined time using ECL Western blotting Substrate (Thermo) and then developed.
  • ECL Western blotting Substrate Thermo
  • the fusariacetin A compound and the fusarietin B compound suppress the expression of Trp-1 and tyrosinase, enzymes involved in melanin production, at a concentration of about 10 mM (FIG. 3).
  • the fusariceptin compound represented by formula (1) effectively inhibited melanin production by inhibiting the expression of tyrosinase and / or Trp-1, thereby preventing skin whitening composition and / or preventing pigmentation or hyperpigmentation , ≪ / RTI > can be effectively used as a composition for the treatment, improvement, or treatment.
  • Example 4 Zebrafish Used Fusari A compound ( FSA ) And Fusari B compound (FSB)
  • the zebrafish was used to measure the whitening effect of the fosaricetin A compound and the fosaricetin B compound.
  • the zebrafish was maintained at 28 ° C for 14 hours / 10 hours per person / cancer cycle, and food was given three times a day at a constant time (Yang, YK et al., Nat. Protoc . , 2. 1740, 2007) .
  • the embryos were then harvested and the embryos were placed in 200-ml embryos on four-wells per well in a 48-well plate, followed by breeding zebrafish and lighting in the morning to induce spawning.
  • the fosaricetin A compound and the fosaricetin B compound were each treated at a concentration of 20 mM in the embryo culture medium, and the effect of the fosaricetin A compound on the pigment formation of the zebrafish under the condition of 28 ⁇ was measured with a stereomicroscope (SMZ-2T, Nikon, Japan ) Were observed from the beginning to 96 hpf (hour post fertilization).
  • the heart rate of the zebrafish was measured after the treatment with the fosaricetin A compound and the fosaricetin B compound. As a result, it was confirmed that when the fosaricetin A compound and the fosaricetin B compound were treated, the heart rate of about 170 times per minute was measured in the same manner as in the control, and no toxicity was shown (FIG. 5).
  • the fosaricetin compound represented by the general formula (1) can attain a skin whitening effect effectively without exhibiting toxicity to the living body, and is useful as a composition for preventing, improving or treating composition for skin whitening and / Can be effectively used.

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Abstract

본 발명은 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물, 약학적 조성물 또는 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물에 포함되는 푸사리세틴 화합물은 멜라닌 생합성을 억제하고 티로시나제 또는 Trp-1 발현을 저해하는 작용효과를 나타내며, 이에 따라 상기 푸사리세틴 화합물을 포함하는 조성물은 피부 미백용으로 사용하거나 색소침착의 예방, 개선 또는 치료용으로 사용할 수 있다.

Description

푸사리세틴 화합물을 포함하는 피부 미백용 조성물
본 발명은 푸사리세틴 화합물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물, 또는 색소침착의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 피부색은 피부 속에 존재하는 멜라닌 함량에 따라 결정되게 되며, 멜라닌은 표피 기저층에 존재하여 태양으로부터 오는 자외선을 차단하는 색소로서 피부를 보호하는 역할을 한다. 그러나 과도한 자외선으로 인해 멜라닌이 과다하게 합성되거나 노화 등에 의해 피부의 생리 기능이 떨어지게 되면, 멜라닌이 피부에 침착하게 되는 색소 침착이 일어나게 된다. 이러한 색소 침착은 검은 피부, 주근깨 그리고 기미 등을 유발하게 된다.
멜라닌은 멜라노사이트 (melanocyte) 내에 존재하는 멜라노좀 (melanosome)에서 생합성되어 멜라노사이트의 수지상 돌기를 통하여 주위의 표피세포로 전달되고, 피부 각질층으로 이동하게 된다. 멜라노좀 내의 멜라닌 생성 과정은 멜라닌 생성의 주요 단백질인 티로시나아제 (tyrosinase)에 의해 티로신이 도파, 도파퀴논으로 산화됨으로써 시작되고, 이들은 티로시나아제 관련 효소-1 (tyrosinase-related protein-1; TRP-1)과 도파크롬 토토머라제 (DOPAchrome tautomerase; DCT; TRP-2)의 효소작용 및 자동 산화 반응에 의해 도파크롬 (dopachrome), 인돌카르복실산 (indole carboxylic acid), 인돌퀴논 (indole quinone) 등으로 대사되어 멜라닌으로 최종 합성된다.
멜라닌 색소의 종류에는 적노랑색의 페오멜라닌 (phaeomelanin)과 흑갈색의 유멜라닌 (eumelanin)이 있으며, 일반적으로 유멜라닌의 비율이 높은 경우 검은 피부와 검은 머리카락이, 페오멜라닌 비율이 높으면 경우 흰 피부와 금발이 나타난다. 따라서 백인들에게는 페오멜라닌이, 유색 인종에게는 유멜라닌이 많이 존재하는 것으로 알려져 있으며, 상기 두 가지 멜라닌의 비율에 따라 피부색과 모발색에 영향을 주는 것으로 알려져 있다.
멜라닌 합성 효소 중 티로시나아제는 상기 두 가지 멜라닌의 합성에 모두 필요하며, TRP-1과 TRP-2는 유멜라닌 합성에 주로 관여하는 것으로 알려져 있다. 멜라닌 세포의 활성화 인자는 케라틴세포로부터 α-멜라노사이트 자극 호르몬 (α-Melanocyte stimulating hormone; α-MSH)과 ACTH (adrenocorticotrophin)가 멜라노코르틴 수용체 (melanocortin receptor)를 중개하여 멜라닌 세포의 활성화에 기여하는 것으로 알려져 있다.
최근 피부 미백제 관련 연구는 주로 티로시나아제 활성을 억제하는 물질, 멜라닌 생산 기전에 관련된 단백질을 조절하는 물질, 멜라노좀 이동을 억제하는 물질, α-MSH의 길항제, N-글리코실화 억제 물질 등과 같이 멜라닌 형성 기전 (melanogenesis)을 방해하여 미백 효과를 도모하는 물질을 탐색하는 방향으로 진행되고 있다 (Seiberg M. et al., Experimental Cell Research, 254, p25, 2000, Motogawa T. Fragrance J., 9, p38, 2000, Negroiu G. et al., Biochem. J. 344, p659, 1999). 그러나, 피부 미백제 개발은 오랜 연구에도 불구하고, 강한 독성, 낮은 안정성 및 피부 투과성, 불충분한 활성으로 인해 그 사용이 제한적으로 이루어지고 있는 실정이다. 또한 현재까지 개발된 멜라닌 생성 저해제, 티로시나아제 저해제 등의 부작용으로 인해, 더욱 안전한 천연 유래 물질을 이용한 미백제의 개발에 관심이 모아지고 있다.
한편, 푸사리세틴 (Fusarisatin) 화합물은 푸사리움 속 (Fusarium sp.) 균주로부터 분리된 것으로, 푸사리세틴 화합물의 항암 활성에 대하여는 보고된 바가 있으나 (대한민국 등록특허 제10-1308539호), 현재까지 피부 미백, 피부 흑화 방지 또는 색소 침착 개선에 대한 효능은 알려진 바가 없다.
이에 본 발명자들은 안전한 천연 유래 물질을 이용한 미백를 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 푸사리세틴 화합물이 피부 미백, 피부 흑화 방지 또는 색소 침착의 예방, 개선 또는 치료에 현저히 우수한 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
대한민국 등록특허공보 제10-1308539호
본 발명의 목적은 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 색소침착의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이를 색소침착의 의심 개체에 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 색소침착의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 색소침착의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각에 대한 다른 설명 및 실시형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
화장료 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 또는 피부 흑화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2017011099-appb-I000001
상기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 이에 제한되는 것은 아니나, 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물을 포함한다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017011099-appb-I000002
[화학식 3]
Figure PCTKR2017011099-appb-I000003
상기 화학식 2로 표시되는 화합물은 푸사리세틴 A 화합물이라 명명되고, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물은 푸사리세틴 B 화합물이라 명명된다. 푸사리세틴 A 화합물 또는 푸사리세틴 B 화합물은 이의 입체이성질체, 이의 염뿐만 아니라 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물, 수화물 등을 모두 포함할 수 있다.
본 발명에서 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 및 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물은 피부 미백 또는 피부 흑화 방지 효과를 보이는 본 발명의 푸사리세틴 화합물의 일 예시로 제공된다.
본 발명에 있어서, 푸사리세틴 A 화합물 또는 푸사리세틴 B 화합물은 곰팡이 균주인 푸사리움 속 (Fusarium sp.) FN080326 균주 (수탁번호 KCTC11985BP)로부터 분리 및 정제되어 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 푸사리움 속 균주는 본 발명자들이 토양시료로부터 직접 분리 동정하고 FN080326로 명명하여, 한국생명공학연구원 미생물자원센터 (Korean Collection for Type Culture; KCTC)에 기탁한 수탁번호 KCTC11985BP의 균주일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 푸사리세틴 A 화합물 또는 푸사리세틴 B 화합물은 대한민국 등록특허 제10-1308539호에서 개시한 방법으로 분리 및 정제될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일례로, 푸사리세틴 A 화합물 또는 푸사리세틴 B 화합물은 다음의 과정을 통해 제조될 수 있다. 먼저, 푸사리움 속 FN080326 균주의 배양액을 동량의 에틸아세테이트로 추출하여 추출액을 수득한 후, 상기 추출액을 감압증발 방법으로 농축하여 농축액을 수득한다. 그 후, 컬럼크로마토그래피를 이용하여 상기 농축액으로부터 활성분획을 용출하고, 감압 농축한 다음, 고속 액체 크로마토그래피를 통해 분리하여 본 발명의 푸사리세틴 A 화합물 또는 푸사리세틴 B 화합물을 얻을 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "배양액"은 액체 배지에 균주를 접종하여 배양한 것을 의미한다. 상기 배양액은 균주를 포함한 것, 또는 균주를 접종하여 배양한 후, 제균 즉 균주를 제거한 배양액일 수 있다. 본 발명에서 배양액은 배양액 자체, 배양액을 농축한 농축액 또는 배양액을 건조시킨 건조물 형태일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "피부 미백"은 일반적으로 멜라닌의 생성을 저해하여 멜라닌의 피부 침착을 억제하거나 방지하는 모든 작용을 의미한다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 푸사리세틴 화합물의 염을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "염"은 양이온과 음이온이 정전기적 인력에 의해 결합하고 있는 물질인 염 중에서도 화장품으로 사용될 수 있는 형태의 염을 의미하며, 통상적으로 금속염, 유기 염기와의 염, 무기산과의 염, 유기산과의 염, 염기성 또는 산성 아미노산과의 염 등이 될 수 있다. 예를 들어, 금속염으로는 알칼리 금속염 (나트륨염, 칼륨염 등), 알칼리 토금속염 (칼슘염, 마그네슘염, 바륨염 등), 알루미늄염 등; 유기 염기와의 염으로는 트리에틸아민, 피리딘, 피콜린, 2,6-루티딘, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 시클로헥실아민, 디시클로헥실아민, N,N-디벤질에틸렌디아민 등과의 염; 무기산과의 염으로는 염산, 브롬화수소산, 질산, 황산, 인산 등과의 염; 유기산과의 염으로는 포름산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프탈산, 푸마르산, 옥살산, 타르타르산, 말레인산, 시트르산, 숙신산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산 등과의 염; 염기성 아미노산과의 염으로는 아르기닌, 라이신, 오르니틴 등과의 염; 산성 아미노산과의 염으로는 아스파르트산, 글루탐산 등과의 염이 될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형은 예를 들어, 용액, 샴푸, 린스, 외용 연고, 크림, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취, 스프레이 등을 들 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물은 일반 화장료에 배합되는 화장품적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양할 수 있다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 그 함량이 제한되는 것은 아니나, 0.01 중량％ 내지 99 중량％, 0.1 중량% 내지 90 중량%, 1 중량% 내지 70 중량%, 또는 10 중량% 내지 50 중량%로 포함될 수 있다.
의약 용도
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 색소침착의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학적 조성물에 사용되는 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 및 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물은 색소침착의 예방 또는 치료 효과를 보이는 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물의 일 예시로 제공된다.
본 발명에서 사용되는 용어 "색소침착 (pigmentation)"은 일반적으로 피부, 손발톱 또는 구강이나 비강을 둘러싸고 있는 점막 등에 멜라닌이 증가하여 발생한 과다 색소 침착을 의미한다. 본 발명의 예방, 개선 또는 치료 대상이 되는 색소침착은 의학적 또는 미용적으로 색소 침착의 범주에 해당하는 한 구체적인 질환명이 특별히 제한되지 않으나, 염증후 과다색소침착, 기미, 주근깨, 밀크커피색반점, 기타 멜라닌 과다색소침착, 흑색점, 달리 분류되지 않은 백피증, 멜라닌 형성 감소된 기타 장애, 색소성 자색반피부병, 뱀모양 혈관종, 기타 명시된 색소침착의 장애, 철색소침착, 문신색소침착 또는 상세불명의 색소침착장애일 수 있다.
본 발명에서 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 색소침착의 발생을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"는 본 발명의 조성물에 의해 색소침착의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에 있어서, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물을 포함하는 약학적 조성물은 멜라닌 생합성을 저해할 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 티로시나제 및/또는 Trp-1의 발현을 억제할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 색소침착의 예방, 개선 또는 치료 목적으로 장기간 투여 시에도 안전하게 사용할 수 있다. 예컨대, 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 및 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물은 독성 및 부작용이 없어 질환의 예방, 개선 또는 치료 목적으로 장기간 투여 시에도 안전하게 사용할 수 있다.
본 발명의 구체적 일실시예에서, 본 발명의 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 및 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물은 멜라닌 생성에 관여하는 효소인 티로시나아제 및/또는 Trp-1의 발현을 효과적으로 억제함으로써 멜라닌 생합성을 효과적으로 저해하면서도 세포 독성을 나타내지 않는다는 것을 시험관 및 동물 모델을 통해 최초로 규명하였다 (도 1 내지 도 5). 따라서, 본 발명의 조성물은 색소침착의 예방 또는 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "티로시나아제 (tyrosinase) 또는 Trp-1 (tyrosinase-related protein-1)의 발현 억제"는 티로시나아제 또는 Trp-1의 단백질 발현 수준 또는 티로시나아제 또는 Trp-1의 유전자 발현 수준을 감소시키는 모든 작용이나 상태 등을 의미하며, 티로시나아제 또는 Trp-1의 효소 활성을 감소시키는 작용이나 상태도 포함한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한 염"은, 양이온과 음이온이 정전기적 인력에 의해 결합하고 있는 물질인 염 중에서도 약제학적으로 사용될 수 있는 형태의 염을 의미하며, 그 종류에 대한 구체적인 예는 화장료 조성물에서 상술한 "염"의 예를 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용될 수 있는 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토 덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 필요한 경우, 부형제, 희석제, 항산화제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제들을 첨가하여 사용할 수 있으며, 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 있어서, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약학적 조성물의 전체의 중량을 기준으로 0.01 중량％ 내지 99 중량％, 0.1 중량% 내지 90 중량%, 1 중량% 내지 70 중량%, 또는 10 중량% 내지 50중량%로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않으며 투여 대상의 상태, 구체적인 병증의 종류, 진행 정도 등에 따라 다양하게 변경될 수 있다. 필요한 경우, 약학적 조성물의 전체 함량으로도 포함될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여를 위한 적합하고 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제; 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴 푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스 등과 같은 윤활유 등을 사용할 수 있으며, 감미제, 방향제, 시럽제 등도 사용할 수 있다. 나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 비경구용 제제의 비제한적인 예로는, 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 연고, 크림, 도포용 파우더, 오일, 피부 외용제 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 약학 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수도 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양으로 투여할 수 있으며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한, 특별한 제한 없이 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 비경구 투여 방법으로는, 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 사용하여도 우수한 효과를 발휘할 수 있으나, 치료 효율을 증가시키기 위하여 추가적으로 호르몬 치료, 약물 치료 등의 다양한 방법들과 병용하여 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 실시양태는 상기 푸사리세틴 화합물을 색소침착의 의심 개체에 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 색소침착의 예방 또는 치료 방법이다. 본 발명에서 상기 색소침착의 의심 개체는 색소침착이 발생하였거나 발생할 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하며, 본 발명의 푸사리세틴 화합물을 색소침착의 의심 개체에 투여함으로써 개체를 효율적으로 치료할 수 있다. 색소침착에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 치료 방법은 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물을 치료적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.005 내지 4000 mg/kg, 0.001 내지 2000 mg/kg, 0.01 내지 1000 mg/kg, 0.05 내지 200 mg/kg, 또는 0.1 내지 100 mg/kg을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 색소침착의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
식품 조성물
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 색소침착의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물에 사용되는 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 및 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물은 색소침착의 예방 또는 개선 효과를 보이는 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물의 일 예시로 제공된다.
본 발명에서 용어 "개선"은 본 발명의 조성물에 의해 색소침착이 완화되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물을 건강기능식품에 포함하여 사용할 경우, 상기 화합물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 본 발명의 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물 이의 염은 식품 조성물의 총 중량에 대하여 그 함량이 제한되는 것은 아니나, 0.01 중량％ 내지 99 중량％, 0.1 중량% 내지 90 중량%, 1 중량% 내지 70 중량%, 또는 10 중량% 내지 50 중량%로 포함될 수 있다. 그러나, 건강 조절 및 위생을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물을 포함할 수 있는 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 구체적인 예로는 영양 캡슐, 비타민 복합제, 캔디류, 스넥류, 과자류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 및 알코올 음료 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 건강기능식품이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드, 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨과 같은 당알콜일 수 있다. 상기 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제 및 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제일 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 세포 실험 및 동물 실험에서 독성을 나타내지 않으면서, 멜라닌의 생성과 티로시나아제 및 Trp-1의 발현을 효과적으로 억제함으로써 우수한 피부 미백 효과와 색소침착의 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타내는바, 화장료 조성물, 약학적 조성물 및/또는 식품 조성물 등으로 다양하게 활용될 수 있다.
도 1은 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)이 세포 독성을 나타내는지 여부를 확인한 결과를 나타낸다.
도 2는 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 멜라닌 생성 저해 효과를 확인한 결과를 나타낸다.
도 3은 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 티로시나아제 및 Trp-1 발현 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸다.
도 4는 제브라피쉬에서 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 멜라닌 생성 저해 효과를 확인한 결과를 나타낸다.
도 5는 제브라피쉬에서 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 독성을 확인하기 위한 심장 박동수 측정 결과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 푸사리세틴 A 화합물 (FSA) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 세포 독성 평가
마우스 멜라노마 세포(B16F10) 및 인간 정상 폐섬유아세포(MRC-5)는 American Tissue Culture. Colection (ATCC)에서 구입하여 사용하였다.
마우스 멜라노마 세포(B16F10) (1×105 세포/웰) 및 인간 정상 폐섬유아세포(MRC-5) (1×105 세포/웰) 각각을 5% CO2의 공기 하에서 37 ℃를 유지하면서 10% 소태아혈청(FBS), 50 mg/ml 스트렙토마이신 및 50 U/ml 페니실린을 첨가한 DMEM 배지를 이용하여 96-웰 플레이트에 상기 각각의 5×103 세포를 200 ㎕씩 나누어 넣고, 37 ℃의 CO₂인큐베이터에서 24 시간 동안 배양하였다.
그 다음, 푸사리세틴 A 화합물과 푸사리세틴 B 화합물을 각각 농도별로 처리하여 같은 배양 조건에서 24 시간 및 48 시간 동안 배양하였다. 상기 배양이 끝난 후, 배양액을 제거하고 웰당 50 ㎕의 10 mg/mL MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide] 용액(Sigma, St. Louis, MO, USA)을 첨가한 후 4 시간 동안 37 ℃에서 반응시켰다. 그 다음, 바닥에 있는 포르마잔 (formazan) 결정이 제거되지 않도록 주의하면서 상층액을 제거하고 웰당 50 ㎕의 DMSO (dimethyl sulfoxide)를 첨가한 후, 10 분간 진탕하고 590 nm에서 OD (optical density)를 측정하였다. 그 결과, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물은 모두 멜라노마 세포 (B16F10)와 인간 정상 폐섬유아세포 (MRC-5)에서 세포 독성을 나타내지 않는 것으로 확인되었다 (도 1).
상기 결과를 통해, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 화장료 조성물, 약학적 조성물 또는 식품 조성물로서 생체 내 독성 없이 사용될 수 있음을 알 수 있다.
< 실시예 2> 푸사리세틴 A 화합물 ( FSA ) 및 푸사리세틴 B 화합물 ( FSB )의 멜라닌 생성 저해 활성 측정
푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물의 멜라닌 생산 저해 활성을 확인하기 위하여 B16F10 멜라노마 세포를 이용하여 멜라닌 생성 저해 효과를 측정하였다. 먼저, B16F10 멜라노마 세포 (1×105 세포)를 5% CO2의 공기 하에서 37 ℃를 유지하면서 10% 소태아혈청(FBS), 50 mg/ml 스트렙토마이신 및 50 U/ml의 페니실린을 첨가한 DMEM 배지를 이용하여 6-웰 플레이트에 2×105 세포를 2 ㎖씩 첨가하고 37 ℃의 CO₂인큐베이터에서 24 시간 동안 배양하였다.
배양 후, 배지를 제거하고 10% FBS, 0.2 mM α-MSH 함유된 DMEM으로 교체한 다음, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물 유도체를 동일 배지에 적당량 희석한 후 각각 첨가하고, 5% CO2, 37 ℃ 조건 하에서 세포 밀집도가 약 80% 이상이 될 때까지 배양하였다. 배양 후, 배지를 제거한 다음 PBS로 세척하고 트리신으로 처리하여 세포 펠렛 (pellet)을 회수하였다. 회수된 펠렛을 1.5 ㎖ 에펜도르프 튜브로 옮겨 5,000 rpm으로 10 분간 원심분리한 후 상등액을 제거하였다. 상등액이 제거된 펠렛을 60 ℃ 항온기에서 24 시간 동안 건조시킨 후, 1N NaOH를 첨가하여 세포 내의 멜라닌을 용해시켰다. 용해된 멜라닌을 PBS로 적당량 희석하여 490 nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌 생성 저해율을 하기 수학식을 이용하여 구하였다.
멜라닌 생성 저해율 (%)=(1-(B-A)/(D-C))×100
(A: 배양 전 시험 샘플의 490 nm 흡광도, B: 배양 후 시험 샘플의 490 nm 흡광도, C: 배양 전 시험 샘플이 없는 490 nm 흡광도, D: 배양후 시험 샘플이 없는 490 nm 흡광도)
그 결과, 푸사리세틴 A 화합물이 22.8 mM (±1.14)일 때, 그리고 푸사리세틴 B 화합물이 28.1 mM (±1.14)일 때 각각 멜라닌 생성 저해율이 50%에 달하는 IC50 값을 나타내는 것으로 확인되었다 (도 2).
상기 결과를 통해, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 효과적으로 멜라닌 합성을 억제함으로써 피부 미백용 조성물 및/또는 색소침착 또는 과색소침착의 예방, 개선 또는 치료용 조성물로 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
< 실시예 3> 푸사리세틴 A 화합물 ( FSA ) 및 푸사리세틴 B 화합물 ( FSB )의 티로시나아제 및 Trp-1 발현 억제 확인
B16F10 멜라닌 세포 (1×105 세포)를 5% CO2의 공기 하에서 37 ℃를 유지하면서 10% 소태아혈청(FBS), 50 mg/ml 스트렙토마이신 및 50 U/ml의 페니실린을 첨가한 DMEM 배지를 이용하여 6-웰 플레이트에 2×105 세포를 2 ㎖씩 첨가하고 37 ℃의 CO₂인큐베이터에서 24 시간 동안 배양하였다. 그 다음, 배지 제거 후 배지와 농도별 시료를 적정량 혼합한 뒤, 다시 동일 조건에서 48 시간 동안 배양하였다.
그 다음, 각 플레이트 내의 세포를 회수하기 위하여 티로신-EDTA 용액을 넣고 세포를 분리하여 마이크로튜브에 획득한 후 원심분리하여 상등액을 제거하였다. 분리된 펠렛을 PBS로 세척하고 원심분리한 후, 펠렛에 PRO-PREP TM Protein Extract Solution (Intron, Inc.)을 처리하여 -20 ℃에서 15 분간 반응시켰다. 원심분리 진행 후, 상등액을 튜브로 옮겨 -20 ℃에 보관하였다.
상기 방법으로 정제한 단백질을 12% SDS-PAGE를 이용하여 전기영동을 실행하고 이를 PVDF 막으로 이전하였다. 5% 스킴 밀크 (skim milk)가 함유된 트리스 완충용액에서 1 시간 블로킹 (blocking) 과정을 거친 후에 티로시나아제, Trp-1, b-actin 항체와 각각 반응시켰다. 반응 후, 항-마우스 IgG-HRP와 항-래빗 IgG-HRP가 결합된 항체를 가하고, ECL Western bloting Substrate (Thermo)를 사용하여 일정 시간 동안 반응시킨 후 현상하였다.
그 결과, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물은 약 10 mM 농도에서부터 멜라닌 생성에 관여하는 효소인 티로시나아제와 Trp-1 발현을 억제하는 것으로 확인되었다 (도 3).
상기 결과를 통해, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 티로시나아제 및/또는 Trp-1의 발현을 억제함으로써 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하여 피부 미백용 조성물 및/또는 색소침착 또는 과색소침착의 예방, 개선 또는 치료용 조성물로 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
< 실시예 4> 제브라피쉬(zebrafish)를 이용한 푸사리세틴 A 화합물 ( FSA ) 및 푸사리세틴 B 화합물 (FSB)의 미백 효과 확인
푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물의 미백 효과를 측정하기 위하여 제브라피쉬를 이용하였다. 먼저 제브라피쉬를 28 ℃에서 14시간/10시간 명/암 사이클 조건을 유지시키고, 먹이를 일정한 시간에 하루 세 번 제공하였다 (Yang, Y. K. et al., Nat. Protoc., 2. 1740, 2007). 그 다음, 제브라피쉬를 교배시키고 아침에 조명을 켜서 산란을 유도한 후, 배아 (Embryo)를 수거하여 200 ml의 배아 배지를 48-웰 플레이트에 웰당 4개의 배아를 넣어주었다.
그 다음, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물을 각각 배아 배지에 20 mM의 농도로 처리하고, 28 ℃ 조건 하에서 제브라피쉬의 색소 형성에 미치는 영향을 실체 현미경 (SMZ-2T, Nikon, Japan)을 이용하여 발생 초기부터 96 hpf (hour post fertilization)까지 관찰하였다.
그 결과, 제브라피쉬에 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물을 처리한 경우 모두 피부에 멜라닌 생성이 억제되는 것을 확인할 수 있었다 (도 4).
또한, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물이 제브라피쉬에 독성을 미치는지 확인하기 위해, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물 처리 후 제브라피쉬의 심장 박동수를 측정하였다. 그 결과, 푸사리세틴 A 화합물 및 푸사리세틴 B 화합물을 처리한 경우 대조군과 동일하게 분당 170회 내외의 심장 박동수가 측정되어 독성을 나타내지 않는 것으로 확인되었다 (도 5).
상기 결과를 통해, 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물은 생체에 독성을 나타내지 않으면서 효과적으로 피부 미백 효과를 달성할 수 있어, 피부 미백용 조성물 및/또는 색소침착의 예방, 개선 또는 치료용 조성물로 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
본 명세서는 본 발명의 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 내용은 그 상세한 기재를 생략하였으며, 본 명세서에 기재된 구체적인 예시들 이외에 본 발명의 기술적 사상이나 필수적 구성을 변경하지 않는 범위 내에서 보다 다양한 변형이 가능하다. 따라서 본 발명은 본 명세서에서 구체적으로 설명하고 예시한 것과 다른 방식으로도 실시될 수 있으며, 이는 본 발명의 기술 분야에 통상의 지식을 가진 자이면 이해할 수 있는 사항이다.

Claims (15)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000004
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물인 화장료 조성물.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000005
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000006
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 멜라닌 생합성을 저해하는 것인 화장료 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 티로시나제 또는 Trp-1 발현을 저해하는 것인 화장료 조성물.
  5. 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 색소침착 또는 과색소침착의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000007
  6. 제 5 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물인 약학적 조성물.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000008
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000009
  7. 제 5 항에 있어서, 상기 색소침착은 염증후 과다색소침착, 기미, 주근깨, 밀크커피색반점, 기타 멜라닌 과다색소침착, 흑색점, 달리 분류되지 않은 백피증, 멜라닌 형성 감소된 기타 장애, 색소성 자색반피부병, 뱀모양 혈관종, 기타 명시된 색소침착의 장애, 철색소침착, 문신색소침착 및 상세불명의 색소침착장애로 이루어진군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 질환인 약학적 조성물.
  8. 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염을 치료적 유효량으로 색소침착의 의심 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 색소침착의 예방 또는 치료 방법.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000010
  9. 제 8 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물인 색소침착의 예방 또는 치료 방법.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000011
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000012
  10. 제 8 항에 있어서, 상기 색소침착은 염증후 과다색소침착, 기미, 주근깨, 밀크커피색반점, 기타 멜라닌 과다색소침착, 흑색점, 달리 분류되지 않은 백피증, 멜라닌 형성 감소된 기타 장애, 색소성 자색반피부병, 뱀모양 혈관종, 기타 명시된 색소침착의 장애, 철색소침착, 문신색소침착 및 상세불명의 색소침착장애로 이루어진군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 질환인 색소침착의 예방 또는 치료 방법.
  11. 색소침착의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염의 용도.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000013
  12. 제 11 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물인 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염의 용도.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000014
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000015
  13. 제 11 항에 있어서, 상기 색소침착은 염증후 과다색소침착, 기미, 주근깨, 밀크커피색반점, 기타 멜라닌 과다색소침착, 흑색점, 달리 분류되지 않은 백피증, 멜라닌 형성 감소된 기타 장애, 색소성 자색반피부병, 뱀모양 혈관종, 기타 명시된 색소침착의 장애, 철색소침착, 문신색소침착 및 상세불명의 색소침착장애로 이루어진군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 질환인 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염의 용도.
  14. 하기 화학식 1로 표시되는 푸사리세틴 화합물, 이의 입체이성질체 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 색소침착 또는 과색소침착의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000016
  15. 제 14 항에 있어서, 상기 푸사리세틴 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 푸사리세틴 A 화합물 또는 하기 화학식 3으로 표시되는 푸사리세틴 B 화합물인 식품 조성물.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000017
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017011099-appb-I000018
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