WO2019004444A1 - 骨形成促進剤及び促進方法 - Google Patents

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優里子 古屋
保田　尚孝
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オリエンタル酵母工業株式会社
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Definitions

  • the present invention relates to a bone formation promoter and promoter comprising TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand), which is one of TNF family molecules, or an anti-TRAIL receptor antibody as an active ingredient.
  • TRAIL tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand
  • TRAIL tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand
  • an agonist for TRAIL for example, an anti-TRAIL agonist antibody can act on TRAIL on the cell surface to transmit a signal to osteoblasts or cells capable of differentiating into osteoblasts to promote differentiation.
  • an anti-TRAIL agonist antibody can act on TRAIL on the cell surface to transmit a signal to osteoblasts or cells capable of differentiating into osteoblasts to promote differentiation.
  • the present invention provides a bone formation promoter for promoting the differentiation of osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells into osteoblasts and calcification of osteoblasts, and a method for promoting bone formation using the bone formation promoter. With the goal.
  • the present inventors analyzed factors of the TNF / TNF receptor parallel family as candidates as part of mechanism analysis of peptide D (W9 peptide) (Japanese Patent No. 5191487), and among the analysis, TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody Found osteoblast differentiation / calcification action. That is, it was revealed that TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody acts on osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells to promote differentiation to osteoblasts, and further acts on osteoblasts to promote calcification . This finding was that TRAIL or the anti-TRAIL receptor antibody itself bound to the TRAIL receptor to generate a forward signal. Conventionally, it has been reported that osteoblasts etc.
  • TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody itself is an anti-TRAIL agonist antibody It is known that it acts directly on osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells via TRAIL receptor without any action to promote differentiation into osteoblasts, further acts on osteoblasts, and promotes calcification. It was not done.
  • a bone formation promoter comprising a substance that binds to TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) receptor as an active ingredient, wherein the substance is TRAIL or an anti-TRAIL receptor antibody.
  • TRAIL tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand
  • the bone formation promoter according to [1] which promotes osteoblast differentiation.
  • the bone formation promoter of [1] which promotes the calcification of osteoblasts.
  • a bone formation promoter to be used in combination with BMP-2 which comprises TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) or an anti-TRAIL receptor antibody.
  • a method of promoting bone formation which comprises administering TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) or an anti-TRAIL receptor antibody.
  • the present specification includes the disclosure content of Japanese Patent Application No. 2017-128971 on which the priority of the present application is based.
  • the TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody itself acts directly on the osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells via the TRAIL receptor without being affected by the anti-TRAIL agonist antibody, and the osteoblast of the osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells As it promotes differentiation into cells, acts on osteoblasts, promotes calcification, and promotes bone formation, it can be used for the prevention or treatment of bone metabolic diseases such as osteoporosis.
  • FIG. 5 shows that TRAIL promotes osteogenesis by promoting osteoblast mineralization. It is a figure which shows that promotion of the mineralization of osteoblasts by TRAIL is suppressed by TRAIL neutralizing antibody.
  • FIG. 6 shows the synergistic bone formation induction effect of TRAIL and BMP-2.
  • Fig. 5 shows induction of bone formation by promoting differentiation of human mesenchymal stem cells into osteoblasts and promoting mineralization by anti-TRAIL receptor antibodies.
  • FIG. 5 shows induction of bone formation using mouse osteoblast precursor cells by TRAIL receptor antibody.
  • FIG. 5 shows induction of bone formation using human mesenchymal stem cells by TRAIL receptor antibody.
  • the present invention is a bone formation promoter, which comprises, as an active ingredient, a substance that binds to TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) receptor.
  • TRAIL tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand
  • TRAIL acts directly on osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells without receiving the action of anti-TRAIL agonist antibody, and promotes differentiation of osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells to osteoblasts, as well as osteoblasts. It acts on cells, promotes calcification, and induces and promotes bone formation. That is, calcium phosphate is deposited by mineralization by osteoblasts to form a bone matrix.
  • TRAIL binds to TRAIL receptors (TRAIL-R1 (DR4), TRAIL-R2 (DR5)) of osteoblast precursor cells, mesenchymal stem cells or osteoblasts, and is directed forward to osteoblast precursor cells or osteoblasts It is thought that a signal is introduced to promote differentiation and calcification or to promote bone formation.
  • the forward signal refers to a signal in the direction from the ligand to the receptor that the ligand binds to the receptor and enters the signal in cells expressing the receptor.
  • TRAIL-R1 and TRAIL-R2 In addition to TRAIL-R1 and TRAIL-R2 described above in which intracellular signals are transmitted to TRAIL receptors, TRAIL-R3 (DcR1), TRAIL-R4 (DcR2), and Osteoprotegerin are known as decoy receptors.
  • TRAIL human-derived TRAIL
  • SEQ ID NO: 1 The amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 is one example, and TRAIL of the present invention also includes isoforms of TRAIL.
  • TRAIL used as an active ingredient of a bone formation promoter in the present invention may be a full-length protein or a fragment peptide of a full-length protein and a fragment peptide having TRAIL activity.
  • human TRAIL when used, it may be a full-length protein having the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 or an analog thereof.
  • the amino acid sequence of TRAIL or its fragment peptide includes an amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted or added.
  • proteins or peptides having TRAIL activity is 1 to 9, preferably 1 to 5, and more preferably 1 or 2.
  • amino acid sequence in which one or several amino acids are deleted, substituted or added in such an amino acid sequence the amino acid sequence and the BLAST (Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information At least 85%, preferably 90% or more, more preferably 95% or more, particularly preferably 97% or more, when calculated using a basic local alignment search tool) or the like (eg, default or default parameters). Those having the above sequence identity are mentioned.
  • the anti-TRAIL receptor antibody can be obtained as a polyclonal antibody or a monoclonal antibody by known methods, and a monoclonal antibody is preferred.
  • Monoclonal antibodies include those produced by hybridomas and those produced by hosts transformed with an expression vector containing an antibody gene by genetic engineering techniques.
  • a monoclonal antibody-producing hybridoma can be prepared by a known method using TRAIL receptor or its fragment peptide as a sensitizing antigen.
  • the anti-TRAIL receptor antibodies of the present invention also include genetically modified antibodies, such as chimeric antibodies and humanized antibodies, which have been artificially modified for the purpose of, for example, reducing heterologous antigenicity to humans.
  • Such antibodies include chimeric antibodies, humanized antibodies and human antibodies, and any of them can be produced using known methods.
  • the chimeric antibody is obtained by obtaining the obtained DNA encoding the antibody V region, ligating it with the DNA encoding the human antibody C region, incorporating it into an expression vector, and introducing it into a host for production.
  • Humanized antibodies are also referred to as reshaped human antibodies.
  • a humanized antibody is obtained by implanting a complementarity determining region (CDR) of a non-human mammal, for example, a mouse antibody into the complementarity determining region of a human antibody, and may be prepared by a known method. (See European Patent Application Publication No. EP 125023, WO 96/02576).
  • human antibodies are used for C regions of chimeric antibodies and humanized antibodies.
  • C ⁇ 1, C ⁇ 2, C ⁇ 3 and C ⁇ 4 can be used for the H chain, and C ⁇ and C ⁇ for the L chain.
  • the human antibody C region may be modified to improve the stability of the antibody or its production.
  • Human antibodies can also be obtained, for example, by introducing human antibody loci and administering the antigens to transgenic animals capable of producing human-derived antibodies.
  • the transgenic animals include mice, and methods for producing mice capable of producing human antibodies are described, for example, in WO02 / 43478.
  • Anti-TRAIL receptor antibodies include not only complete antibodies but also functional fragments thereof.
  • a functional fragment of an antibody means a portion (partial fragment) of an antibody, which retains one or more of the effects of the antibody on an antigen, and more specifically, F (ab ') 2 , Fab', Examples include Fab, Fv, disulfide-linked Fv, single-chain Fv (scFv), polymers thereof, and the like (DJ King., Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 TJ International Ltd).
  • monoclonal antibodies When monoclonal antibodies are used, only one type of monoclonal antibody may be used, but two or more types, for example, two types, three types, four types or five types of monoclonal antibodies, which recognize different epitopes may be used. .
  • Anti-TRAIL receptor antibodies like TRAIL, directly bind to TRAIL receptors on osteoblasts to provide a forward signal to osteoblast precursor cells or osteoblasts, thereby promoting differentiation and calcification, or bone Promote formation.
  • Anti-TRAIL receptor antibodies mimic the activity of TRAIL.
  • TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody acts on osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells to promote differentiation of osteoblast precursor cells or mesenchymal stem cells to osteoblasts and acts on osteoblasts, lime Since it promotes bone formation and promotes bone formation, it can be used as an active ingredient of a pharmaceutical composition that enhances bone formation. In particular, bone formation is inhibited, and it can be used for treatment or prevention of bone metabolic diseases accompanied by bone density and bone loss.
  • bone metabolic diseases that can be treated by promoting bone formation, osteoporosis, juvenile osteoporosis, osteolytic bone disease, osteonecrosis, rheumatoid arthritis, bone loss due to osteoarthritis, inflammatory arthritis , Osteomyelitis, glucocorticoid treatment, periodontal bone loss, age-related bone loss, bone insufficiency, hypercalcemia, hyperparathyroidism, osteomalacia, bone mineralosis, Paget's disease And metastatic bone disease, bone loss due to cancer, and other bone loss disorders.
  • osteoporosis juvenile osteoporosis, osteolytic bone disease, osteonecrosis, rheumatoid arthritis, bone loss due to osteoarthritis, inflammatory arthritis, osteomyelitis, glucocorticoid treatment, loss of periodontal bone, aging Loss of bone due to bone loss and bone loss due to cancer are preferred.
  • fracture risk can be reduced by administering to patients with a high risk of fracture such as subjects with extremely low bone density and subjects with existing fractures.
  • the bone formation promoter containing TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody may be administered orally or parenterally such as subcutaneous administration, intramuscular injection, intravenous injection, rectal administration, transdermal administration and the like.
  • the dose of bone formation promoter to the subject including TRAIL varies depending on symptoms, age, body weight etc., but usually, when it is orally administered, the dose of TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody is about 0.01 per day for adults. They can be administered in one or several doses, ranging from mg to 1000 mg. In parenteral administration, about 0.01 mg to 1000 mg can be administered by subcutaneous injection, intramuscular injection, intravenous injection and the like once.
  • the bone formation promoter containing TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody as an active ingredient includes pharmaceutically acceptable carriers, diluents and excipients which are usually used in the field of formulation.
  • pharmaceutically acceptable carriers for example, as a carrier for tablets and excipients, lactose, magnesium stearate and the like are used.
  • a carrier for tablets and excipients lactose, magnesium stearate and the like are used.
  • suitable solubilizers such as alcohol, polyalcohol such as propylene glycol, nonionic surfactant etc. You may use it together with As an oily liquid, sesame oil, soybean oil and the like are used, and as a solubilizer, benzyl benzoate, benzyl alcohol and the like may be used in combination.
  • TRAIL or anti-TRAIL receptor antibodies that promote bone formation may be combined with BMP (Bone morphogenetic protein) family member (BMP).
  • BMP Bone morphogenetic protein family member
  • TRAIL and BMP can cooperate to promote differentiation, proliferation, maturation, calcification of osteoblasts or cells that can differentiate into osteoblasts, promote bone formation, cause increase in bone mass and the like.
  • BMP family members include BMP-4, BMP-2, BMP-7, BMP-6 and the like. Among these, BMP-2 is preferable. It includes a combination preparation or combination kit in which TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody and BMP are combined.
  • the present invention encompasses pharmaceutical compositions in combination with BMPs, including TRAIL or anti-TRAIL receptor antibodies.
  • the TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody and the BMP may be administered simultaneously or separately. Alternatively, they may be administered sequentially, and the order of administration may be TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody first, or BMP first.
  • the dose of BMP is not limited, it is about 0.01 mg to 1000 mg at one time.
  • the present invention provides a method of promoting bone formation in a subject comprising administering TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody to the subject, and administering TRAIL or anti-TRAIL receptor antibody, and BMP to the subject. And including methods of promoting bone formation in a subject.
  • mice osteoblast precursor cells used the strain marketed by RIKEN. E1 cells were cultured in maintenance medium supplemented with 10% FBS (JRH) in ⁇ MEM (SIGMA).
  • reagent Alizarin red used Nacalai Tesque.
  • 4% paraformaldehyde solution (Wako) or 95% ethanol solution (Wako) was used.
  • mTRAIL mouse TRAIL
  • the osteoblast differentiation medium was prepared by adding 100 nM dexamethasone (Wako), 50 ⁇ g / mL L-ascorbic acid (Wako) and 10 mM ⁇ -glycerophosphate (SIGMA) to the maintenance medium.
  • the anti-mouse TRAIL polyclonal antibody and the anti-mouse TRAIL monoclonal antibody were from R & D.
  • Example 1 Induction of bone formation by TRAIL MC3T3-E1 was seeded at 1 ⁇ 10 4 cells / well in a 48-well plate (Nunc). After culturing in a CO 2 incubator and confirming that the cells became confluent, the culture solution was replaced with a culture medium for osteoblast differentiation.
  • MC3T3-E1 was seeded at 1 ⁇ 10 4 cells / well in a 48-well plate (Nunc). After culturing in a CO 2 incubator and confirming that the cells became confluent, the culture solution was replaced with a culture medium for osteoblast differentiation.
  • Example 2 Synergistic bone differentiation when TRAIL and BMP were used in combination MC3T3-E1 was seeded at 1 ⁇ 10 4 cells / well in a 48-well plate (Nunc). After culturing in a CO 2 incubator and confirming that the cells became confluent, the culture solution was replaced with a culture medium for osteoblast differentiation.
  • Example 3 Bone Differentiation Action Using Anti-TRAIL Receptor Antibody Human mesenchymal stem cells (Lonza) were seeded at 1 ⁇ 10 4 cells / well in 24 well plates (Corning). After culturing in a CO 2 incubator and confirming that the cells became confluent, the culture solution was replaced with a culture medium for osteoblast differentiation. A group was prepared in which 0.2 and 1.0 ⁇ g / mL of an anti-TRAIL receptor (DR5) polyclonal antibody (Invitrogen) was added to this osteoblast differentiation medium. The medium was changed every two to three days each. The cells were fixed with 4% PFA 15 days after the initiation of culture, and stained by adding 200 ⁇ L of 1% alizarin red solution.
  • DR5 anti-TRAIL receptor
  • the intensity of alizarin staining increased in a concentration-dependent manner from + to ++ as compared with the group to which no anti-TRAIL receptor antibody alone was added. This indicates that the anti-TRAIL receptor antibody, like TRAIL, binds to the TRAIL receptor to promote osteoblast differentiation and calcification.
  • Example 4 Induction of Bone Formation by Anti-TRAIL Receptor Antibody Cultured Cells
  • the mouse osteoblast precursor cells (MC3T3-E1 cells) used the strain marketed by RIKEN. E1 cells were cultured in maintenance medium supplemented with 10% FBS (JRH) in ⁇ MEM (SIGMA).
  • the osteoblast differentiation medium was prepared by adding 100 nM dexamethasone (Wako), 50 ⁇ g / mL L-ascorbic acid (Wako) and 10 mM ⁇ -glycerophosphate (SIGMA) to the maintenance medium.
  • the anti-TRAIL receptor (DR5) antibody used a Santa Cruz monoclonal antibody (clone: MD5-1).
  • Bone formation promoters including TRAIL and anti-TRAIL receptor antibodies can be used for the prevention or treatment of bone metabolic diseases. All publications, patents and patent applications cited herein are incorporated herein by reference in their entirety.

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Abstract

骨芽前駆細胞の骨芽細胞への分化及び骨芽細胞の石灰化を促進する骨形成促進剤の提供。　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）レセプターに結合する物質を有効成分として含む骨形成促進剤であって、当該物質がTRAIL又は抗TRAILレセプター抗体である、骨形成促進剤。

Description

骨形成促進剤及び促進方法
　本発明は、TNFファミリー分子の一つであるTRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド：TNF related apoptosis-inducing ligand）又は抗TRAILレセプター抗体を有効成分とする骨形成促進剤及び促進方法に関する。
　TNFファミリー分子の一つであるTRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド：TNF related apoptosis-inducing ligand）は癌細胞にアポトーシスを誘導することが知られている。従来、骨代謝の分野においてTRAILは骨芽細胞に対してもアポトーシスを誘導すると考えられていた。
　従来より、ペプチドD等のRANKL結合分子が骨芽細胞への分化促進および骨形成を増強し得ることが報告されている（特許文献１を参照）。
　また、TRAILに対するアゴニスト、例えば抗TRAILアゴニスト抗体が、細胞表面上のTRAILに作用し骨芽細胞又は骨芽細胞に分化し得る細胞に対しシグナルを伝達し、分化促進し得ることが報告されている（特許文献２を参照）。しかし、これはTRAILに結合し、逆シグナルを入れるTRAILアゴニスト抗体の作用であり、TRAIL自身の骨に対する作用は知られていなかった。
特許第5191487号公報 特開2010-138106号公報
　本発明は、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化及び骨芽細胞の石灰化を促進する骨形成促進剤、及び該骨形成促進剤を用いた骨形成促進方法の提供を目的とする。
　本発明者らは、ペプチドD（W9ペプチド）（特許第5191487号公報）のメカニズム解析の一環としてTNF/TNFレセプターパラレルファミリーの因子を候補として解析し、その解析の中でTRAIL又は抗TRAILレセプター抗体の骨芽細胞分化/石灰化作用を見出した。すなわち、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体が骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞に作用し、骨芽細胞への分化を促進し、さらに骨芽細胞に作用し、石灰化を促進することが明らかとした。この知見は、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体自身がTRAILレセプターに結合して順方向のシグナルを入れるというものであった。従来は、細胞表面のTRAILに結合し、逆シグナルを入れる抗TRAILアゴニスト抗体の作用により骨芽細胞等が分化することは報告されていたが、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体自身が抗TRAILアゴニスト抗体の作用を受けることなく、TRAILレセプターを介し骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞に直接作用し、骨芽細胞への分化を促進し、さらに骨芽細胞に作用し、石灰化を促進することは知られていなかった。
　すなわち、本発明は以下のとおりである。
[１]　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）レセプターに結合する物質を有効成分として含む骨形成促進剤であって、当該物質がTRAIL又は抗TRAILレセプター抗体である、骨形成促進剤。
[２]　骨芽細胞への分化を促進する、[１]の骨形成促進剤。
[３]　骨芽細胞の石灰化作用を促進する、[１]の骨形成促進剤。
[４]　さらに、BMP-2を含む[１]～[３]のいずれかの促進剤。
[５]　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）又は抗TRAILレセプター抗体を含む、BMP-2と併用される骨形成促進剤。
[６]　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）又は抗TRAILレセプター抗体を投与することを含む骨形成を促進する方法。
[７]　さらに、BMP-2を投与することを含む、[６]の骨形成を促進する方法。
　本明細書は本願の優先権の基礎となる日本国特許出願番号2017-128971号の開示内容を包含する。
　TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体自身が抗TRAILアゴニスト抗体の作用を受けることなく、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞に直接TRAILレセプターを介して作用し、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化を促進すると共に、骨芽細胞に作用し、石灰化を促進し、骨形成を促進するので、骨粗鬆症等の骨代謝疾患の予防又は治療に用いることができる。
TRAILが骨芽細胞の石灰化の促進により骨形成の誘導を示す図である。 TRAILによる骨芽細胞の石灰化の促進がTRAIL中和抗体により抑制されることを示す図である。 TRAILとBMP-2による相乗的な骨形成の誘導効果を示す図である。 抗TRAILレセプター抗体によるヒト間葉系幹細胞から骨芽細胞への分化促進及び石灰化の促進により骨形成の誘導を示す図である。 TRAILレセプター抗体によるマウス骨芽前駆細胞を用いた骨形成の誘導を示す図である。 TRAILレセプター抗体によるヒト間葉系幹細胞を用いた骨形成の誘導を示す図である。
　以下、本発明を詳細に説明する。
　本発明は、TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド：TNF related apoptosis-inducing ligand）レセプターに結合する物質を有効成分として含む、骨形成促進剤である。
　TRAILレセプターに結合する物質として、TRAIL及び抗TRAILレセプター抗体が挙げられる。
　TRAILは、抗TRAILアゴニスト抗体の作用を受けることなく骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞に直接作用し、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化を促進すると共に、骨芽細胞に作用し、石灰化を促進し、骨形成を誘導し促進する。すなわち、骨芽細胞による石灰化によりリン酸カルシウムが沈着し、骨基質が形成される。
　TRAILは、骨芽前駆細胞、間葉系幹細胞又は骨芽細胞のTRAILレセプター（TRAIL-R1(DR4)、TRAIL-R2(DR5)）に結合し、骨芽前駆細胞又は骨芽細胞に順方向のシグナルを入れ、その結果分化や石灰化を促進し、あるいは骨形成を促進すると考えられる。ここで、順方向のシグナルとは、リガンドがレセプターに結合してレセプターを発現している細胞内にシグナルを入れるというリガンドからレセプターへの方向のシグナルをいう。TRAILレセプターには細胞内にシグナルを入れる上記のTRAIL-R1、TRAIL-R2以外に、デコイレセプターとしてTRAIL-R3(DcR1)、TRAIL-R4(DcR2)、Osteoprotegerinが知られている。
　TRAILの由来種は限定されないが、ヒトに投与する場合はヒト由来のTRAILを用いることが好ましい。ヒト由来のTRAILの全長アミノ酸配列を、配列番号１に表す。配列番号１に表すアミノ酸配列は１例であり、本発明のTRAILにはTRAILのアイソフォームも含まれる。
　本発明で骨形成促進剤の有効成分として用いるTRAILは全長タンパク質でもよいし、全長タンパク質の断片ペプチドであってTRAILの活性を有する断片ペプチドでもよい。また、ヒトTRAILを用いる場合、配列番号１に表されるアミノ酸配列を有する全長タンパク質でもよいし、その類似体でもよい。例えば、配列番号１に表されるアミノ酸配列を有するTRAILの類似体として、例えば、TRAIL又はその断片ペプチドのアミノ酸配列において、１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列を含み、かつTRAILの活性を有するタンパク質若しくはペプチドを含む。ここで、１又は数個とは１～９個、好ましくは１～５個、さらに好ましくは１若しくは２個である。
　このようなアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列として、アミノ酸配列と、BLAST（Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information（米国国立生物学情報センターの基本ローカルアラインメント検索ツール））等（例えば、デフォルトすなわち初期設定のパラメータ）を用いて計算したときに、少なくとも85％以上、好ましくは90％以上、さらに好ましくは95％以上、特に好ましくは97％以上の配列同一性を有しているものが挙げられる。
　抗TRAILレセプター抗体は、公知の方法により、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体として得ることができ、モノクローナル抗体が好ましい。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマに産生されるもの、及び遺伝子工学的手法により抗体遺伝子を含む発現ベクターで形質転換した宿主に産生されるものを含む。モノクローナル抗体産生ハイブリドーマは、TRAILレセプター又はその断片ペプチドを感作抗原として用いて、公知の手法により、作製することができる。本発明の抗TRAILレセプター抗体は、ヒトに対する異種抗原性を低下させること等を目的として人為的に改変した遺伝子組換え型抗体、例えば、キメラ抗体、ヒト型化（Humanized）抗体をも含む。このような抗体としてはキメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体が挙げられ、いずれも公知の方法を用いて製造することができる。キメラ抗体は、得た抗体V領域をコードするDNAを得て、ヒト抗体C領域をコードするDNAと連結し、これを発現ベクターに組み込んで宿主に導入し産生させることにより得られる。ヒト型化抗体は、再構成（reshaped）ヒト抗体ともいう。ヒト型化抗体は、ヒト以外の哺乳動物、例えばマウス抗体の相補性決定領域（CDR; complementarity determining region）をヒト抗体の相補性決定領域へ移植したものであり、公知の方法により作製することができる（欧州特許出願公開番号EP 125023号公報、WO 96/02576 号公報参照）。キメラ抗体及びヒト型化抗体のＣ領域には、ヒト抗体のものが使用され、例えばＨ鎖では、Ｃγ１、Ｃγ２、Ｃγ３、Ｃγ４を、Ｌ鎖ではＣκ、Ｃλを使用することができる。また、抗体又はその産生の安定性を改善するために、ヒト抗体Ｃ領域を修飾してもよい。
　ヒト抗体はまた、例えばヒト抗体遺伝子座を導入し、ヒト由来抗体を産生する能力を有するトランスジェニック動物に抗原を投与することにより得ることができる。該トランスジェニック動物としてマウスが挙げられ、ヒト抗体を産生し得るマウスの作出方法は、例えば、国際公開第WO02/43478号パンフレットに記載されている。
　抗TRAILレセプター抗体は、完全抗体だけでなく、その機能的断片も含む。抗体の機能的断片とは、抗体の一部分（部分断片）であって、抗体の抗原への作用を1つ以上保持するものを意味し、具体的にはF（ab'）2 、Fab'、Fab、Fv、ジスルフィド結合Fv、一本鎖Fv（scFv）、及びこれらの重合体等が挙げられる（D.J.King., Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 T.J.International Ltd）。
　また、モノクローナル抗体を用いる場合、１種類のみのモノクローナル抗体を用いてもよいが、認識するエピトープが異なる２種類以上、例えば２種類、３種類、４種類又は５種類のモノクローナル抗体を用いてもよい。
　抗TRAILレセプター抗体は、TRAILと同様に骨芽細胞上のTRAILレセプターに直接結合して骨芽前駆細胞又は骨芽細胞に順方向のシグナルを入れ、その結果分化や石灰化を促進し、あるいは骨形成を促進する。抗TRAILレセプター抗体は、TRAILの活性を模倣する。
　TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体は、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞に作用し、骨芽前駆細胞若しくは間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化を促進すると共に、骨芽細胞に作用し、石灰化を促進し、骨形成を促進するので、骨形成を増強する医薬組成物の有効成分として用いることができる。特に、骨形成が阻害され、骨密度や骨量減少を伴う骨代謝疾患の治療又は予防のために用いることができる。このような、骨形成の促進により治療することができる骨代謝疾患としては、骨粗鬆症、若年性骨粗鬆症、骨溶解性骨疾患、骨壊死、関節リウマチ、変形性関節症による骨の低下、炎症性関節炎、骨髄炎、グルココルチコイド処置、歯周の骨の喪失、加齢による骨の喪失、骨形成不全、高カルシウム血症、上皮小体機能亢進症、骨軟化症、骨石灰脱失症、パジェット病、転移性の骨疾患、癌による骨の喪失、及びその他の骨量減少症が挙げられる。
　この中でも、骨粗鬆症、若年性骨粗鬆症、骨溶解性骨疾患、骨壊死、関節リウマチ、変形性関節症による骨の低下、炎症性関節炎、骨髄炎、グルココルチコイド処置、歯周の骨の喪失、加齢による骨の喪失、癌による骨の喪失が好ましい。
　また、骨密度が著しく低い被験体や既存骨折のある被験体等の骨折リスクの高い被験体患者に投与することにより、骨折リスクを低減させることができる。
　TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体を含む骨形成促進剤は、経口で投与しても、また、皮下投与、筋肉注射、静脈注射、直腸投与、経皮投与等の非経口で投与してもよい。TRAILを含む骨形成促進剤の被験体への投与量は、症状、年齢、体重などによって異なるが、通常、経口投与では、成人に対して、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体の量で1日約0.01mg～1000mgであり、これらを1回、又は数回に分けて投与することができる。また、非経口投与では、1回約0.01mg～1000mgを皮下注射、筋肉注射、静脈注射等によって投与することができる。
　TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体を有効成分として含む骨形成促進剤は、製剤分野において通常用いられる薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤を含む。たとえば、錠剤用の担体、賦形剤としては、乳糖、ステアリン酸マグネシウムなどが使用される。注射用の水性液としては、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液などが使用され、適当な溶解補助剤、たとえばアルコール、プロピレングリコールなどのポリアルコール、非イオン界面活性剤などと併用してもよい。油性液としては、ゴマ油、大豆油などが使用され、溶解補助剤としては安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどを併用してもよい。
　骨形成を促進するTRAIL又は抗TRAILレセプター抗体は、BMP（Bone morphogenetic protein；骨形成タンパク質）ファミリーメンバー（BMP)と併用してもよい。TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体とBMPを併用することにより、相乗的な骨分化効果を奏することができる。TRAILとBMPは共同作用し、骨芽細胞又は骨芽細胞に分化し得る細胞の分化、増殖、成熟、石灰化を促進し、骨形成を促し、骨量増強等を引き起こし得る。BMPファミリーメンバーとしては、BMP-4、BMP-2、BMP-7、BMP-6等が挙げられる。この中でもBMP-2が好ましい。TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体とBMPを組合せた組合せ製剤または組合せキットを包含する。さらに、本願発明は、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体を含む、BMPと併用される医薬組成物を包含する。TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体とBMPは、同時に投与しても、別々に投与してもよい。また、順次に投与してもよく、投与順は、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体が先でもよいし、BMPが先でもよい。BMPの投与量は限定されないが、1回約0.01mg～1000mgである。
　さらに、本発明は、TRAIL又は抗TRAILレセプター抗体を被験体に投与することを含む、被験体における骨形成を促進する方法、及びTRAIL若しくは抗TRAILレセプター抗体、並びにBMPを被験体に投与することを含む、被験体における骨形成を促進する方法を包含する。
　本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
実施例に用いた培養細胞及び試薬
培養細胞　
　マウス骨芽前駆細胞（MC3T3-E1細胞）はRIKENから販売されている株を用いた。E1細胞はαMEM（SIGMA）に10％ FBS（JRH）を添加した維持培地で培養した。
試薬　
　アリザリンレッドはナカライテスク社製を用いた。　細胞固定には4％ パラホルムアルデヒド溶液（Wako）もしくは95% エタノール溶液（Wako）を用いた。mTRAIL(マウスTRAIL)はR&D社の組換えタンパク質を用いた。
　骨芽細胞分化用培地は維持用培地に100 nMのデキサメサゾン（Wako）、50μg/mLのL-アスコルビン酸（Wako）及び10 mMのβグリセロリン酸（SIGMA）を添加して作製した。
　抗マウスTRAILポリクローナル抗体及び抗マウスTRAILモノクローナル抗体はR&D社製を用いた。
実施例１　TRAILによる骨形成の誘導
　MC3T3-E1を1×104個/wellずつ48wellプレート(Nunc)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞がコンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。
　この骨芽細胞分化用培地に、2.5、5.0及び7.5 ng/mLのmTRAILを加え、2～3日毎に培地を交換した。培養開始から17日目で細胞を4 ％ PFAで固定し、1 ％のアリザリンレッド溶液を200μL加えて染色した。その結果、図１に示したように、濃度依存的にアリザリン染色の強度が＋、＋＋、＋＋＋と上昇した。
　また上記試験と同様に、MC3T3-E1を1×104個/wellずつ48wellプレート(Nunc)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞がコンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。
　次は、mTRAILを10 ng/mL加えた群に、さらに抗マウスTRAILポリクローナル抗体（R&D）を0.2μg/mLもしくは抗マウスTRAILモノクローナル抗体（R&D）を1.0μg/mLを添加し、2～3日毎に培地を交換した。培養開始から13日目で細胞を4 ％ PFAで固定し、1％のアリザリンレッド溶液を200μL加えて染色した。その結果、図２に示したように、mTRAIL 10 ng/mLを添加することによってMC3T3-E1細胞では、アリザリン染色陽性の骨芽細胞分化・石灰化が促進されていたが、中和抗体を添加することで、骨芽細胞の分化・石灰化能が抑制されることが確認できた。
　これらの結果から、mTRAILが直接的に骨芽前駆細胞に作用して石灰化を促進し、骨形成を誘導することが示された(図１及び図２)。
実施例２　TRAILとBMPを併用した場合の相乗的な骨分化作用
　MC3T3-E1を1×104個/wellずつ48wellプレート(Nunc)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞がコンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。
　この骨芽細胞分化用培地に、10 ng/mLのmTRAIL（R&D）を加え、さらに25 ng/mL rhBMP-2(オリエンタル酵母社製)を添加した群を作製した。各々2～3日毎に培地を交換した。培養開始から12日目で細胞を95％エタノールで固定し、1％のアリザリンレッド溶液を200μL加えて染色した。その結果、図３に示したように、mTRAIL単独でも無添加群に対し、アリザリン染色の強度が＋レベルで上昇していたが、さらにBMP-2を少量添加することで＋＋レベルの相乗的な骨分化作用が確認できた。
実施例３　抗TRAILレセプター抗体を用いた骨分化作用
　ヒト間葉系幹細胞（Lonza）を1×104個/wellずつ24wellプレート(コーニング)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞がコンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。この骨芽細胞分化用培地に、0.2及び1.0 μg/mLの抗TRAILレセプター(DR5)ポリクローナル抗体（Invitrogen）を添加した群を作製した。各々2～3日毎に培地を交換した。培養開始から15日目で細胞を4 ％ PFAで固定し、1％のアリザリンレッド溶液を200μL加えて染色した。その結果、図４に示したように、抗TRAILレセプター抗体単独でも無添加群に対し、アリザリン染色の強度が濃度依存的に＋から＋＋に上昇した。これは抗TRAILレセプター抗体がTRAILと同様にTRAILレセプターに結合して骨芽細胞の分化・石灰化を促進したことを示している。
実施例４　抗TRAILレセプター抗体による骨形成の誘導
培養細胞　
　マウス骨芽前駆細胞（MC3T3-E1細胞）はRIKENから販売されている株を用いた。E1細胞はαMEM（SIGMA）に10％ FBS（JRH）を添加した維持培地で培養した。
試薬　
　アリザリンレッドはナカライテスク社製を用いた。　細胞固定にはWakoの4％パラホルムアルデヒド溶液(Nacalai)もしくは95%エタノール溶液（Wako）を用いた。
　骨芽細胞分化用培地は維持用培地に100 nMのデキサメサゾン（Wako）、50μg/mLのL-アスコルビン酸（Wako）及び10 mMのβグリセロリン酸（SIGMA）を添加して作製した。
　抗TRAILレセプター（DR5）抗体はSanta Cruz社のモノクローナル抗体（クローン：MD5-1）を用いた。
４－１　抗TRAILレセプター抗体によるマウス骨芽前駆細胞を用いた骨形成の誘導
　MC3T3-E1を1×104個/wellずつ48wellプレート(Nunc)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞がコンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。
　この骨芽細胞分化用培地に、1及び4μg/mLの抗TRAILレセプター（DR5）モノクローナル抗体を加え、2～3日毎に培地を交換した。培養開始から18日目で細胞を95％ エタノールで固定し、1％のアリザリンレッド溶液を200μL加えて染色した。その結果、図５に示したように、濃度依存的にアリザリン染色の強度が＋＋、＋と上昇した。
４－２　TRAILレセプター抗体によるヒト間葉系幹細胞を用いた骨形成の誘導
　hMSC (Lonza)を3×104個/wellずつ24wellプレート(Nunc)に播種した。CO2インキュベーター内で培養し、細胞が70%コンフルエント状態になったのを確認後、培養液を骨芽細胞分化用培地に交換した。
　この骨芽細胞分化用培地に、2μg/mLの抗TRAILレセプター（DR5）モノクローナル抗体を加え、2～3日毎に培地を交換した。培養開始から17日目で細胞を4％PFAにて固定し、1％のアリザリンレッド溶液を400μL加えて染色した。その結果、図６に示したように、アリザリン染色の強度が＋と上昇した。
　TRAIL及び抗TRAILレセプター抗体を含む骨形成促進剤は、骨代謝疾患の予防又は治療に用いることができる。
　本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願はそのまま引用により本明細書に組み入れられるものとする。

Claims (7)

  1. 　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）レセプターに結合する物質を有効成分として含む骨形成促進剤であって、当該物質がTRAIL又は抗TRAILレセプター抗体である、骨形成促進剤。
  2. 　骨芽細胞への分化を促進する、請求項１記載の骨形成促進剤。
  3. 　骨芽細胞の石灰化作用を促進する、請求項１記載の骨形成促進剤。
  4. 　さらに、BMP-2を含む請求項１～３のいずれか１項に記載の促進剤。
  5. 　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）又は抗TRAILレセプター抗体を含む、BMP-2と併用される骨形成促進剤。
  6. 　TRAIL（腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド）又は抗TRAILレセプター抗体を投与することを含む骨形成を促進する方法。
  7. 　さらに、BMP-2を投与することを含む、請求項６記載の骨形成を促進する方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010138106A (ja) * 2008-12-11 2010-06-24 Oriental Yeast Co Ltd 新規な細胞分化促進薬

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BU, R. ET AL.: "Expression and function of TNF- family proteins and receptors in human osteoblasts", BONE, vol. 33, no. 5, November 2003 (2003-11-01), pages 760 - 770, XP002303920, ISSN: 8756-3282 *
HIGUCHI, CHIKAHISA ET AL.: "Bone morphogenetic protein (BMP)", JAPANESE JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE, vol. 62, no. 2, 2004, pages 52 - 56, ISSN: 0047-1852 *
KATAGIRI, TAKENOBU: "BMP", TREATMENT OF OSTEOPOROSIS, vol. 3, no. 4, 2004, pages 338 - 344, ISSN: 1347-572X *
ROBINSON, L. J. ET AL.: "Tumor Necrosis Factor Family Receptors Regulating Bone Turnover: New Observations in Osteoblastic and Osteoclastic Cell Lines", ANNALS OF THE NEW YORK ACADEMY OF SCIENCES, vol. 1116, no. 1, 1 November 2007 (2007-11-01), pages 432 - 443, XP055569082, ISSN: 1749-6632 *
ZAULI, G. ET AL.: "TRAIL Inhibits Osteoclastic Differentiation by Counteracting RANKL-Dependent p27kipl Accumulation in Pre-Osteoclast Precursors", JOURNAL OF CELLULAR PHYSIOLOGY, vol. 214, no. 1, 2008, pages 117 - 125, XP055566663, ISSN: 1097-4652 *

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