WO2017072375A1 - Tratamiento para mejorar la germinación de semillas y semillas así tratadas - Google Patents

Tratamiento para mejorar la germinación de semillas y semillas así tratadas Download PDF

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seeds
treatment
germination
seed
enzyme
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English (en)
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Inventor
Sergio Atares Real
Joaquin Romero Lopez
Ignasi SALAET MADORRAN
María FERRER GINES
Miguel Angel Naranjo Olivero
Elena COLOM TOMAS
Original Assignee
Fertinagro Nutrientes, S.L.
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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50Isolated enzymes; Isolated proteins

Definitions

  • the present invention relates to a treatment to improve the germination of seeds, as well as to the seeds that incorporate said treatment.
  • the invention relates to a treatment for improving the germination of seeds, in particular plants rich in phytic acid such as cereals, legumes, nuts, based on the treatment of providing the seeds with a coating that includes an agent with phytase activity
  • a coating that includes an agent with phytase activity
  • This enzyme in a coating helps the hydrolyzing of the phytic phosphorus, making it more accessible for the seed and, thereby, improving its germination.
  • phosphorus is a vital component for the development of plants since it is an essential element in many biological processes, being essential in germination processes.
  • Phosphorus accumulates in the seeds and in the fruit in the form of organic phosphorus, where it is essential for the formation and development of the seed.
  • Phytic acid in the form of phytate is the main form of storage of phosphorus in legumes, cereals, oilseeds, with values between 1-5% of the weight and even representing up to 6% in dry weight of the seed.
  • the phytic acid formula of formula CgH-isC ⁇ Ps is the main form of storage of phosphorus in legumes, cereals, oilseeds.
  • phytase enzymes are being very studied, they are a product widely used in the feeding of monogastric animals (which cannot digest phytate), since it is an enzyme capable of hydrolyzing phytate and releasing organic phosphorus, thus doing the match accessible to the animal.
  • monogastric animals which cannot digest phytate
  • phytate represents an important part of the organic phosphorus in the soil and plants do not have direct access to it.
  • phytases meso-inositol hexaphosphate phosphohydrolases, catalyze the cleavage of phytic acid or phytate acid phosphate groups, resulting in a free acid phosphate group and a lower inositol phosphate ester.
  • phosphorus is an essential element for the growth of living beings, it is necessary to supplement their development with assimilable inorganic phosphorus. Therefore, the majority of fertilizers used as background fertilizers or as a starter (germination inductors) supplied incorporate nitrogen and a high amount of phosphorus in their formulations. This constitutes a factor of soil contamination, since not all of the inorganic phosphorus supplied is used by the plants, accumulating part of it in the soils, which in the long term can cause long-term problems of contamination of the zonal waters and subsequent etrophication . On the other hand, the organic phosphorus present in the soil is in a form that cannot be assimilated by the plant and cannot be used by it in the germination process.
  • organic phosphorus in nature is mostly in the form of phosphate groups attached to carbon groups, forming the typical reserve structure known as phytate or phytic acid.
  • This is the main form of storage of organic phosphorus in legumes, cereals, oilseeds. Therefore, to take advantage of this phosphorus, the action of endogenous phosphatases enzymes that facilitate the release of this organic phosphorus is necessary.
  • Phytate is also considered an anti-nutritional factor due to its ability to sequester divalent ions such as zinc, magnesium, calcium and iron, avoiding the availability of these for the plant (Reyes-Moreno C, Paredes-López O. 1993. Hard-to -cook phenomenon in common beans (Phaseolus vulgaris) - A review.
  • a phosphatase is an enzyme (EC 3.1 .3) of the group of esterases that catalyzes the removal of phosphate groups from certain organic substrates, leading to the release of a phosphate ion molecule and the appearance of a hydroxyl group. in the place where the phosphate group was esterified.
  • phosphatases there are different families of enzymes depending on the substrate that they are capable of hydrolyzing. In this way we can find protein phosphatases, phosphatases that act on phosphorus bound to proteins and mainly dedicated to the regulation of cellular processes and acid phosphatases and basic phosphatases, which are found in the soil, being secreted by different microorganisms or by the own plants. The function of the latter Phosphatases is the release of phosphorus bound to the organic matter of the soil and making it accessible in this way for both microorganisms and plants (JC. Tarafdar et al. 1 987). Within this second group of phosphatases we find some special phosphatases called phytases. These enzymes have specificity on phytic acid.
  • germ inaction percentage refers to the percentage of germinated semi-illas in a sample referred to a specific germination time and conditions.
  • an object of the invention is to provide a treatment for improving the germination of semi-illas of plants rich in phytic acid, such as cereals, legumes, nuts, based on the treatment of providing the seeds with a coating that It includes an agent with phytase activity capable of hydrolyzing phytate phosphorus containing the outer layers of the seed.
  • the presence of this enzyme in a coating helps hydrolyze the phytic phosphorus, making it more accessible to the seed and, thereby, improving the speed and germination rate.
  • the treatment of the invention would also allow to minimize the frequency and amount of fertilizers applied, while maximizing the amount of phosphorus available to the plants.
  • the coated half-shells treated with the treatment according to the invention are also the subject of the invention.
  • phytic acid is considered an antinutrient because of its ability to retain divalent ions. Therefore, another benefit of the invention is the benefit that the addition of phytase has on the release of these ions due to the breakdown of phytic acid, thereby providing the seed with essential nutrients for its development.
  • the invention provides a treatment for improving the germination of seeds, in particular plants rich in phytic acid, including the treatment of providing the seeds with a coating that includes an enzyme with phytase activity, which helps the hydrolyzing of phytic phosphorus, making it more accessible to the seed and, thereby, improving its germination.
  • the enzyme with phytase activity is not particularly limited, in one embodiment of the invention the phytase employed is that described in patent application WO 201 1/141613, of the applicant itself.
  • the treatment of the invention consists in applying a coating based on an aqueous solution of an enzyme with phytase activity and subsequent drying of the coating on the surface of the seeds to obtain a dry seed.
  • said aqueous solution includes an organic buffer, preferably an organic buffer adjusted to a pH between 3 and 9, and in particular a citrate / citric acid buffer adjusted to a pH between 4.5 and 8.5.
  • the coating contains a contribution of an organic acid in order to buffer the medium and that no enzymatic activity is lost.
  • the aqueous solution containing the enzyme with phytase activity is a 5% aqueous citric acid solution adjusted to pH 5.5-8 with a 20% aqueous potassium hydroxide solution.
  • the amount of enzyme with phytase activity added to the coating in the form of an aqueous solution buffered with a citrate / citric acid buffer at pH 5.5-8 ranges between 50 FTU / kg of seed and 2,000,000 FTU / kg of seed, FTU being phytase units, this is the amount of enzyme needed to release 1 pmol of inorganic phosphorus per minute, from 0.0051 mol / l of sodium phytate, at a pH of 5.5, at 37 ° C.
  • the way of applying the liquid coating described on the seeds is not particularly limited, and spraying, immersion techniques, etc. can be used for this.
  • the aforementioned is equally applicable to drying the coating in order to obtain a dry coated seed, drying techniques can be applied at room temperature or at elevated temperatures, drying with hot air, etc. , provided that the properties of the coating that includes the enzyme with phytase activity are not altered.
  • a buffered aqueous solution was prepared as described above to which different amounts of enzyme with phytase activity were added as shown in the following examples. Later, barley, wheat and lentil seeds were coated with the prepared solution and germination tests were carried out in culture chambers, in these examples using the phytase described in WO 201 1/141613. For all examples, the germination percentage was calculated with respect to time, as well as the average length of the germ. The corresponding uncoated seeds were used as control.
  • the test conditions were as follows:
  • Working temperature between 2 ° C and 40 ° C
  • Light periods 10-13 hours of non-direct light and 1 1 -14 hours of darkness
  • the trials were monitored every 12 hours, with the germinated seeds and the length of the primary or hypocotyl root being counted.
  • Example 1 Barley seeds were treated as described above by applying the buffered coating with increasing concentrations of enzyme with phytase activity from 0 FTU to 2,000,000 FTU / kg of seed and dried. The seeds were subsequently sown in a culture chamber. The germination percentage and the average germ length were calculated. The results are shown in the following Table:
  • Lentil seeds were treated as described above by applying the buffered coating with increasing concentrations of enzyme with phytase activity from 0 FTU to 2,000,000 FTU / kg of seed and dried. The seeds were subsequently sown in a culture chamber. The germination percentage and the average germ length were calculated. The results are shown in the following Table:
  • the treatment of the invention improves both the germination percentage and the average germ length compared to untreated seeds.

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Abstract

La invención se refiere a un tratamiento para mejorar la germinación de semillas, así como a las semillas que incorporan dicho tratamiento, donde el tratamiento consiste en aplicar sobre la superficie de las semillas un recubrimiento basado en una solución acuosa de una enzima con actividad fitasa y secado posterior del recubrimiento para obtener una semilla seca.La presencia de esta enzima en un recubrimiento ayuda a la hidrolización del fósforo fítico,haciéndolo más accesible para la semilla y, con ello, mejorando sugerminación.

Description

TRATAMIENTO PARA MEJORAR LA GERMINACIÓN DE SEMILLAS Y
SEMILLAS ASÍ TRATADAS
La presente invención se refiere a un tratamiento para mejorar la germinación de semillas, así como a las semillas que incorporan dicho tratamiento.
Más concretamente, la invención se refiere a un tratamiento para mejorar la germinación de semillas, en particular de plantas ricas en ácido fítico tales como cereales, legumbres, frutos secos, basándose el tratamiento en dotar a las semillas de un recubrimiento que incluye un agente con actividad fitasa. La presencia de esta enzima en un recubrimiento ayuda a la hidrolización del fósforo fítico, haciéndolo más accesible para la semilla y, con ello, mejorando su germinación.
Uno de los problemas con que se encuentra actualmente la agricultura, en particular la agricultura extensiva, es el porcentaje y la eficiencia en el proceso de germinación de los diferentes cultivos.
A este respecto, el fósforo es un componente vital para el desarrollo de las plantas puesto que es un elemento esencial en muchos procesos biológicos, siendo imprescindible en los procesos germinativos. El fósforo se acumula en las semillas y en el fruto en forma de fósforo orgánico, donde es esencial para la formación y desarrollo de la semilla. El ácido fítico en forma de fitato es la forma principal de almacenam iento de fósforo en legum bres, cereales, sem illas oleaginosas, con valores comprendidos entre el 1 -5% del peso e incluso que representan hasta el 6% en peso seco de la semilla. A continuación, se muestra la fórmula del ácido fítico, de fórmula CgH-isC^Ps.
Figure imgf000003_0001
Sin embargo, este fósforo acumulado en forma de ácido fítico no es asimilado de forma eficiente por parte de la planta, ya que la acción de las fitasas endógenas puede no ser suficiente para liberar todo el fósforo fítico de las semillas, reduciendo así el potencial del proceso de germinación.
Actualmente, las enzimas fitasas están siendo muy estudiadas, son un producto ampliamente utilizado en la alimentación de animales monogástricos (que no pueden digerir el fitato), puesto que se trata de una enzima capaz de hidrolizar el fitato y liberar el fósforo orgánico, haciendo así el fósforo accesible para el animal. De la misma forma se están investigando diferentes opciones para la utilización de estas enzimas en la nutrición vegetal puesto que el fitato representa una parte importante del fósforo orgánico que hay en el suelo y las plantas no tienen acceso directo a él. A este respecto, las fitasas, meso-inositol hexafosfato fosfohidrolasas, catalizan la escisión de los grupos fosfato del ácido fítico o del fitato, dando como resultado un grupo fosfato del ácido libre y un éster de inositol fosfato inferior.
Debido a que el fósforo es un elemento esencial para el crecimiento de los seres vivos, es necesario suplementar el desarrollo de estos con fosforo inorgánico asimilable. Por ello, la mayoría de los fertilizantes utilizados como abonado de fondo o como estárter (inductores de la germinación) suministrados incorporan nitrógeno y una alta cantidad de fósforo en sus formulaciones. Esto constituye un factor de contaminación de los suelos, ya que no todo el fósforo inorgánico suministrado es aprovechado por las plantas, acumulándose parte de él en los suelos, lo que a largo plazo puede provocar larga problemas de contaminación de las aguas zonales y posterior etrofización. Por otro lado, el fósforo orgánico presente en el suelo se encuentra en una forma no asim ilable por la planta y no puede ser utilizado por ésta en el proceso de germinación. Como se ha mencionado, el fósforo orgánico en la naturaleza se encuentra en su mayor parte en forma de grupos fosfatos unidos a grupos de carbono, formando la estructura típica de reserva conocida como fitato o ácido fítico. Esta es la forma principal de almacenamiento de fósforo orgánico en legumbres, cereales, semillas oleaginosas. Por ello, para que aprovechar este fósforo, es necesaria la acción de enzimas fosfatasas endógenas que faciliten la liberación de este fósforo orgánico. El fitato es considerado además un factor antinutricional debido a su habilidad en secuestrar iones divalentes como el zinc, magnesio, calcio y hierro, evitando la disponibilidad de estos para la planta (Reyes-Moreno C , Paredes-López O. 1993. Hard-to-cook phenomenon in common beans (Phaseolus vulgaris) - A review. Critical Reviews in Food Science and Nutrition 33: 224-286). Se ha demostrado que el contenido de fósforo orgánico en forma de ácido fitico en los cereales disminuye a medida que aumenta la actividad endógena de enzimas fosfatasas del propio vegetal (Sandberg 1991 ; Sripriya et al. 1 997; Centeno et al. 2001 ). En las semillas no germinadas se ha detectado muy poca actividad de la enzima fosfatasa intracelular, mientras que durante el proceso de germinación la actividad fitasa aumenta considerablemente y los niveles de fitato disminuyen (Konietzny et al. 1995; Viveros et al. 2000).
En este contexto, una fosfatasa es una enzima (EC 3.1 .3) del grupo de las estearasas que cataliza la eliminación de grupos fosfato de ciertos sustratos orgánicos, dando lugar a la liberación de una molécula de ion fosfato y la aparición de un grupo hidroxilo en el lugar en que se encontraba esterificado el grupo fosfato.
Dentro de las fosfatasas existen diferentes familias de enzimas dependiendo del sustrato que son capaces de hidrolizar. De esta forma podemos encontrar protein- fosfatasas, fosfatasas que actúan sobre el fósforo unido a proteínas y dedicadas principalmente a la regulación de procesos celulares y fosfatasas ácidas y fosfatasas básicas, que se encuentran en el suelo, siendo segregadas por diferentes microorganismos o por las propias plantas. La función de estas últimas fosfatasas es la liberación del fósforo unido a la materia orgánica del suelo y hacerlo accesible de esta forma tanto para microorganismos como para plantas (J.C . Tarafdar et al . 1 987). Dentro de este segundo grupo de fosfatasas encontramos unas fosfatasas especiales denominadas fitasas. Estas enzimas tienen especificidad sobre el ácido fítico.
Así, sería deseable aportar sobre la superficie de la semilla una adición de enzima fitasa que fuera capaz de hidrolizar el fósforo en forma de fitato que contienen las capas externas de la semilla, incrementando la accesibilidad de la semilla a esta reserva de fósforo y favoreciendo la velocidad y el índice de germinación, en términos de porcentaje de germinación de la misma. En la presente descripción, el concepto "porcentaje de germ inación" se refiere al porcentaje de sem illas germinadas en una muestra referido a un tiempo y condiciones de germinación determinadas.
De acuerdo con lo anterior, un objeto de la invención es proporcionar un tratamiento para mejorar la germinación de sem illas de plantas ricas en ácido fítico, tales como cereales, legumbres, frutos secos, basándose el tratamiento en dotar a las semillas de un recubrimiento que incluye un agente con actividad fitasa capaz de hidrolizar el fósforo en forma de fitato que contienen las capas externas de la sem illa. La presencia de esta enzima en un recubrim iento ayuda a la hidrolización del fósforo fítico, haciéndolo más accesible para la semilla y, con ello, mejorando la velocidad y el índice de germinación. El tratamiento de la invención perm itiría igualmente m in im izar la frecuencia y la cantidad de fertilizantes aplicados, maximizando a su vez la cantidad de fósforo disponible para las plantas. Son también objeto de la invención las sem illas recubiertas tratadas con el tratamiento de acuerdo con la invención.
Aunque durante la germinación la propia semilla sintetiza enzima fitasa capaz de liberar parte del fósforo del ácido fítico para su propio desarrollo, pero no lo suficiente como aprovecharse del contenido total de fitato que contiene la semilla, el aporte de fitasa exógena proporciona una mayor actividad enzimática, con lo que se obtiene un mayor rendimiento a la hora de hidrolizar el ácido fítico y, en consecuencia, una mayor concentración de fósforo asimilable.
Como se ha mencionado anteriormente, el ácido fítico es considerado un antinutriente por su capacidad de retener iones divalentes. Por tanto, es otra ventaja de la invención el beneficio que la adición de fitasa tiene sobre la liberación de estos iones debido a la ruptura del ácido fítico, facilitando con ello a la semilla nutrientes esenciales para su desarrollo.
La invención proporciona un tratamiento para mejorar la germinación de semillas, en particular de plantas ricas en ácido fítico, incluyendo el tratamiento dotar a las semillas de un recubrimiento que incluye una enzima con actividad fitasa, que ayuda a la hidrolización del fósforo fítico, haciéndolo más accesible para la semilla y, con ello, mejorando su germinación.
Aunque la enzima con actividad fitasa no está particularmente limitada, en una realización de la invención la fitasa empleada es la descrita en la solicitud de patente WO 201 1/141613, de la propia solicitante.
El tratam iento de la invención consiste en aplicar sobre la superficie de las semillas un recubrimiento basado en una solución acuosa de una enzima con actividad fitasa y secado posterior del recubrimiento para obtener una semilla seca. En una realización de la invención, dicha solución acuosa incluye un tampón orgánico, preferentemente un tampón orgánico ajustado a un pH entre 3 y 9, y en particular un tampón citrato/ácido cítrico ajustado a un pH entre 4,5 y 8,5.
A este respecto, las fitasas son extremadamente débiles, expresando su máxima actividad a un pH que varía entre 5,0 y 7,5. Por ello, en una realización el recubrimiento contiene un aporte de un ácido orgánico con la finalidad de tamponar el medio y que no se pierda actividad enzimática.
En una realización especialmente preferente de la invención, la solución acuosa que contiene la enzima con actividad fitasa es una solución acuosa al 5% de ácido cítrico ajustado a pH 5,5-8 con una disolución acuosa de hidróxido potásico al 20%. En otra realización de la invención, la cantidad de enzima con actividad fitasa añadida al recubrimiento en forma de solución acuosa tamponada con un tampón citrato/ácido cítrico a pH 5,5-8 oscila entre 50 FTU/Kg de semilla y 2.000.000 FTU/kg de semilla, siendo FTU unidades de fitasa, esto es la cantidad de enzima necesaria para liberar 1 pmol de fósforo inorgánico por minuto, de 0,0051 mol/l de fitato de sodio, a un pH de 5,5, a 37°C.
La forma de aplicar el recubrimiento líquido descrito sobre las semillas no está particularmente limitada, pudiendo emplearse para ello técnicas de pulverización, inmersión, etc. Lo dicho anteriormente es igualmente aplicable al secado del recubrimiento con el fin de obtener una semilla recubierta seca, pudiendo aplicarse técnicas de secado al aire a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas, secado con aire caliente, etc. , siempre que no se vean alteradas las propiedades del recubrimiento que incluye la enzima con actividad fitasa.
Para comprobar la efectividad del tratamiento según la invención, se preparó una solución acuosa tamponada tal como se ha descrito anteriormente a la que se adicionaron diferentes cantidades de enzima con actividad fitasa según se muestra en los ejemplos siguientes. Posteriormente se recubrieron con la solución preparada semillas de cebada, trigo y lenteja y se llevaron a cabo ensayos de germinación en cámaras de cultivo, en estos ejemplos utilizando la fitasa descrita en la patente WO 201 1/141613. Para todos los ejemplos se calculó el porcentaje de germinación con respecto al tiempo, así como la longitud media del germen. Como control se emplearon las correspondientes semillas sin recubrimiento. Las condiciones de ensayo fueron las siguientes:
Temperatura de trabajo: entre 2°C y 40°C Periodos de luz: 10-13 horas de luz no directa y 1 1 -14 horas de oscuridad
Humedad de trabajo: 2-25%.
Los ensayos tuvieron un seguimiento cada 12 horas, contabilizándose las semillas germinadas y la longitud de la raíz primaria o hipocótilo.
Ejemplo 1 Se trataron semillas de cebada tal como se ha descrito anteriormente aplicando el recubrimiento tamponado con concentraciones crecientes de enzim a con actividad fitasa desde 0 FTU hasta 2.000.000 FTU/kg de semilla y se secaron. Las semillas posteriormente fueron sembradas en cámara de cultivo. Se calculó el porcentaje de germinación y la longitud media del germen. Los resultados se muestran en la Tabla siguiente:
Figure imgf000008_0001
Ejemplo 2
Se trataron semillas de trigo tal como se ha descrito anteriormente aplicando el recubrimiento tamponado con concentraciones crecientes de enzim a con actividad fitasa desde 0 FTU hasta 2.000.000 FTU/kg de semilla y se secaron. Las semillas posteriormente fueron sembradas en cámara de cultivo. Se calculó el porcentaje de germinación y la longitud media del germen. Los resultados se muestran en la Tabla siguiente:
Porcentaje de germinación
FTU/Kg de semilla 24 horas 48 horas 72 horas 96 horas 120 horas control 0 0 18 56 77
50 0 0 23 69 82
500 0 22 41 76 81 5.000 0 91 91 93 97
50.000 0 87 89 92 95
500.000 0 97 97 100 100
2.000.000 0 89 98 98 100
Longitud media del germen (mm)
24 horas 48 horas 72 horas 96 horas 120 horas
Control 0 1 16 30 48
50 0 8 29 39 63
500 0 9 45 73 96
5.000 0 22 61 99 109
50.000 0 24 87 1 18 185
500.000 0 43 109 177 201
2.000.000 0 79 1 14 189 258
Ejemplo 3
Se trataron semillas de lenteja tal como se ha descrito anteriormente aplicando el recubrimiento tamponado con concentraciones crecientes de enzim a con actividad fitasa desde 0 FTU hasta 2.000.000 FTU/kg de semilla y se secaron. Las semillas posteriormente fueron sembradas en cámara de cultivo. Se calculó el porcentaje de germinación y la longitud media del germen. Los resultados se muestran en la Tabla siguiente:
Porcen taje de germinación
FTU/Kg de semilla 24 horas 48 horas 72 horas 96 horas 120 horas control 0 3 68 81 81
50 0 2 23 74 87
500 5 81 93 93 95
5.000 8 84 87 89 89
50.000 7 87 91 91 97
500.000 8 92 92 93 93
2.000.000 6 97 97 97 97
Longitud media del germen (mm)
24 horas 48 horas 72 horas 96 horas 120 horas
Control 0 0 15 19 20
50 0 0 16 25 27
500 0 12 19 32 35
5.000 0 16 22 39 41
50.000 0 21 29 44 50
500.000 0 20 34 49 58 2.000.000 0 29 41 66 96
Como se puede observar de los resultados de los ejemplos anteriores, el tratamiento de la invención mejora tanto el porcentaje de germinación como la longitud media del germen en comparación con las semillas no tratadas.

Claims

REIVINDICACIONES
Tratamiento para mejorar la germinación de semillas, caracterizado porque consiste en aplicar sobre la superficie de las sem illas un recubrimiento basado en una solución acuosa de una enzima con actividad fitasa y secado posterior del recubrimiento para obtener una semilla seca.
Tratamiento para mejorar la germinación de semillas según la reivindicación
1 , caracterizado porque la solución acuosa que contiene la enzima con actividad fitasa incluye un tampón de ácido orgánico ajustado a un pH entre 3 y 9.
Tratamiento para mejorar la germinación de semillas según la reivindicación
2, caracterizado porque el tam pón de ácido orgán ico es un tam pón citrato/ácido cítrico ajustado a un pH entre 4,5 y 8,5.
Tratamiento para mejorar la germinación de semillas según la reivindicación
3, caracterizado porque la solución acuosa que contiene la enzima con actividad fitasa es una solución acuosa al 5% de ácido cítrico ajustado a pH 5,5-8 con una disolución acuosa de hidróxido potásico al 20%.
Tratamiento para mejorar la germinación de semillas según la reivindicación 1 , caracterizado porque la cantidad de enzima con actividad fitasa añadida al recubrimiento en forma de solución acuosa tamponada oscila entre 50 FTU/Kg de semilla y 2.000.000 FTU/kg de semilla, siendo FTU unidades de fitasa, esto es la cantidad de enzima necesaria para liberar 1 pmol de fósforo inorgánico por minuto, de 0,0051 mol/l de fitato de sodio, a un pH de 5,5, a 37°C. 6. Semilla seca caracterizada porque está tratada con un tratamiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011141613A2 (es) 2011-08-08 2011-11-17 Fertinagro Nutrientes, S.L. Nueva fitasa, procedimiento de obtencion y utilizacion de la misma

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BIJENDER SINGH ET AL: "Plant Growth Promotion by an Extracellular HAP-Phytase of a Thermophilic Mold Sporotrichum thermophile", APPLIED BIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGY, vol. 160, no. 5, 1 March 2010 (2010-03-01), United States, pages 1267 - 1276, XP055241506, ISSN: 0273-2289, DOI: 10.1007/s12010-009-8593-0 *
CHONG W. CHANG: "Study of phytase and fluoride effects in germinating corn seeds", CEREAL. CHEM., 1 March 1967 (1967-03-01), pages 129 - 142, XP055241525, Retrieved from the Internet <URL:http://www.aaccnet.org/publications/cc/backissues/1967/Documents/chem44_129.pdf> [retrieved on 20160114] *
MARÍA C. PILAR ET AL: "Alkaline Phosphatase-Polyresorcinol Complex: Characterization and Application to Seed Coating", JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, vol. 57, no. 5, 11 March 2009 (2009-03-11), US, pages 1967 - 1974, XP055240433, ISSN: 0021-8561, DOI: 10.1021/jf803146m *
PRADNYA D GUJAR ET AL: "Effect of phytase from Aspergillus niger on plant growth and mineral assimilation in wheat ( Triticum aestivum Linn.) and its potential for use as a soil amendment", JOURNAL OF THE SCIENCE OF FOOD AND AGRICULTURE, vol. 93, no. 9, 28 January 2013 (2013-01-28), GB, pages 2242 - 2247, XP055241510, ISSN: 0022-5142, DOI: 10.1002/jsfa.6032 *
REYES-MORENO C; PAREDES-LÓPEZ O: "Hard-to-cook phenomenon in common beans (Phaseolus vulgaris) - A review", CRITICAL REVIEWS IN FOOD SCIENCE AND NUTRITION, vol. 33, 1993, pages 224 - 286

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