WO2017050571A1 - Biosensor und verfahren zum nachweis von keimen - Google Patents

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WO2017050571A1
WO2017050571A1 PCT/EP2016/071040 EP2016071040W WO2017050571A1 WO 2017050571 A1 WO2017050571 A1 WO 2017050571A1 EP 2016071040 W EP2016071040 W EP 2016071040W WO 2017050571 A1 WO2017050571 A1 WO 2017050571A1
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test strip
biosensor
lateral flow
germ
flow test
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PCT/EP2016/071040
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Inventor
Petra Neff
Katrin Luckert
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Robert Bosch Gmbh
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Publication date
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
    • G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
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    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses

Definitions

  • Biosensor and method for detection of germs The present invention relates to a biosensor in the form of a lateral flow
  • Test strip and a method for the detection of germs.
  • Molds and above all mold spores and toxins secreted by mold fungi are not to be underestimated as pathogens of infections and chronic diseases, for example inflammatory lung diseases. Furthermore, molds and mold spores are potential allergens that can lead to the triggering of allergic complaints. Mold infestation or, in general, microbial contamination can occur, in particular, within various domestic appliances, for example in washing machines or coffee machines. today
  • washing powder compartment can come. Even modern coffee machines, especially fully automatic machines, are often exposed to microbial contamination, as compared to conventional filter coffee machines for cleaning difficult and cumbersome achievable areas are available due to the complex structure.
  • the different moist locations in a modern coffee machine eg Water tank, hoses, pomace, grinder
  • a modern coffee machine eg Water tank, hoses, pomace, grinder
  • Mold fungi may have very good growth conditions.
  • Washing programs or cleaning programs are carried out, which should reduce a germ load. Since such cleaning measures in practice, however, may not be carried out regularly and an occurring bacterial load is not noticed, it can come by the unrecognized bacterial load to health problems for the user.
  • a hand-held measuring device for the detection of hidden mold damage is known. This can be a mold in indoor areas, such. B. on walls can be detected.
  • the device includes, among other things, a collection unit for receiving an interior sample and an immunological test unit.
  • German Patent Application DE 196 04 195 A1 discloses an analysis method in which antibodies or antigens are aspirated from the room air and subsequently detected by an immune reaction.
  • the invention relates to a biosensor for the immunological detection of germs, wherein the biosensor according to the invention is designed as a lateral flow test strip with germ-specific antibodies.
  • the mobility characteristics of the antibodies change as the antibodies complex with the germ to be detected. This change in mobility characteristics will be
  • biosensor used according to the invention to detect germs with the lateral flow test strips in a particularly simple and user-friendly manner.
  • Preferred embodiments of the biosensor are the subject of the dependent claims.
  • the biosensor according to the invention which is based on an immunological detection, is very sensitive, so that it is also possible to detect germs, which under certain circumstances occur in relatively low concentrations. Furthermore, the selectivity is due to the use of highly specific antibodies, which are highly specific antibodies, and many others.
  • Biosensors a possibly beginning incipient germs are detected at an early stage, so that appropriate measures, such as the cleaning of a germ-loaded household appliance,
  • the biosensor is designed in the form of a lateral flow test strip.
  • a lateral flow test is a detection method based on a combination of thin layer chromatography and immunostaining.
  • the sample optionally together with bound antibodies, migrates over the length of the test strip due to capillary forces (thin-layer chromatography). Since the
  • the mobility properties of the antibodies change when the antibodies complex with the germ to be detected, as a result of which they depend on the presence of the germs to be detected
  • At least one detection reagent is bound to the germ-specific antibodies.
  • the detection reagent is directly or directly bound to the germ-specific antibody.
  • the detection reagents can be covalently immobilized (coupled) via amino acid groups.
  • COOH / NH2 can be coupled.
  • other reactive groups of the antibody e.g. Cysteine / SH groups, when using linker systems for chemical bonding with the
  • the detection reagent is metal particles or dye molecules.
  • an optical read-out system can be realized in a very user-friendly manner, wherein it can be recognized by means of a color reaction, which can be evaluated, for example, with the naked eye, whether there is a germ load or not. In particular, quantitative detection is generally inaccurate or even impossible to visualize with the eye.
  • optical devices may also be used in other embodiments, eg cameras, which in particular also permit a quantitative or semiquantitative evaluation on the basis of a measurement of color gradations or intensity graduations.
  • the evaluation can be software-based, for example, a comparison with eg
  • the stored reference values can be made.
  • the camera of a mobile phone can be used as an optical device.
  • the biosensor is provided for the detection of molds and / or mold spores and / or bacteria. These mentioned germs are relevant in the first place for a possible germ load of household appliances. A bacterial infestation or a mold infestation or infestation with mold spores occurs especially in permanently moist places in household appliances, for example in water tanks or hoses, or in places where moist material stored for a long time, for example in a pomace container.
  • the biosensor can be directed to the detection of a particular germ. Depending on the device and application case, it is preferably determined in advance which germ could be mainly responsible for a load.
  • the germ-specific antibodies are directed against surface molecules of the germ to be detected.
  • the antibody may preferably be directed against an epitope on the surface of the germs. This has the advantage that no further sample preparation, z. B. no disruption of cells or the like, must be done.
  • the germ-specific antibodies can bind directly to the germs to be detected, so that the immunological detection can be done in a very simple manner.
  • Detection system is therefore aligned the biosensor on the detection of certain germs.
  • test strips that are set up for the detection of molds and test strips that are set up for the detection of specific bacteria can be provided.
  • several different test strips can be used in parallel or sequentially for the detection of certain germs.
  • test strip itself can also be designed so that it is set up for the parallel detection of different germs.
  • the lateral flow test strip is designed as a disposable article. Following use of the biosensor and bacterial loading test, the test strip may then be discarded, with the germs collected and analyzed on the test strip, together with the test strip, disposed of directly in the household waste. The accumulated on the test strip germs are usually not dangerous goods. If the lateral flow test strip as
  • Disposable article is designed, it has the further particular advantage that such an article is generally very inexpensive to produce.
  • the lateral flow test strip comprises a sample-receiving pad and / or a capillary and / or at least one detection field.
  • the sample-receiving pad which is the Sample collection and also conjugation with the assay components (antibodies) is preferably adjusted to the sample in terms of pore size and binding properties.
  • the sample-receiving pad may be formed, for example, from nitrocellulose and be realized for example in the form of a membrane. Furthermore, for example, cellulose or
  • test strip itself may for example be based on a strip of plastic as a carrier.
  • capillary is meant an area of the test strip that can be traversed by liquids due to capillary forces. Generally suitable for this
  • liquid-permeable materials for example nitrocellulose
  • Polyvinylidene fluoride (charge-modified) nylon or polyethersulfones.
  • the lateral flow test strip preferably comprises a control field, so that the user can, for example, by direct comparison of the
  • Check field with the detection field can check whether a positive or a negative test result.
  • the germ-specific antibodies may for example be presented in dried form on the test strip or be added from a separate solution.
  • the capillary is designed so that after a complex formation of the antibody with the optionally
  • test strip may contain one or more buffers, for example recording buffer and / or detection buffer and / or running buffer.
  • the lateral flow test strip may be assigned a buffer cartridge, from which any buffer required is released.
  • the sample is applied to the sample receiving pad in liquid or solid form.
  • a required buffer for example a running buffer, is released from the buffer cartridge and applied, for example, in the region of the sample-receiving pad, so that the sample can be transported by capillary forces.
  • the sample is applied in liquid form (for example, a water sample from a water tank), it may also be sufficient for the sample to be applied
  • Liquid is taken from the sample. In this case, a separate run buffer is not required. If a sample is tested in dry form (eg coffee residues from the grinder), manual or automatic addition of buffer is required.
  • a pre-stored in a buffer cartridge buffer can be released manually or automatically and applied directly or via a channel, for example by means of capillary forces on the sample receiving pad.
  • the buffer cartridge (for example a plastic container) can be designed, for example, so that the buffer is released by kinking.
  • a cell disruption reagent e.g. a detergent
  • a buffer solution e.g. a buffer solution
  • the antibodies By means of thin-layer chromatographic separation, the antibodies, if appropriate together with the germs to be detected in complex form, reach the detection field and / or a control field of the lateral flow test strip.
  • the test result is preferably by a colored reaction or a
  • Color change visible to the user Colored readout systems are particularly preferred for this, so that there is no need for further aids for the evaluation of the test strip.
  • optical devices e.g. the camera of a mobile phone or otherwise, be used for the evaluation.
  • biosensor according to the invention for an immunological detection of germs in one
  • the biosensor according to the invention thus allows the user a independent inspection of potentially infested areas, for example in a washing machine or coffee machine. After the test has been carried out, the user receives a qualitative or semiquantitative or possibly quantitative result, so that suitable cleaning measures can be taken if necessary for a positive test result.
  • the shape and configuration of the biosensor or the lateral flow test strip can be adapted to the intended sampling location in the household appliance.
  • the lateral flow test strip can be configured in a conventional rod shape.
  • the test strip is adjusted accordingly, for example by a
  • test strip can be inserted, for example, in a hose or the like. You can also continue
  • Sampling sticks or the like may be provided, with the aid of, for example, a swab sample is taken in the device, which is then applied to the test strip.
  • the invention further relates to the use of a biosensor in the form of a
  • Lateral flow test strip for the immunological detection of germs in a household appliance, in particular in a washing machine or in a
  • Coffee machine With regard to further features of the lateral flow test strip and in particular with regard to the use for detecting germs in a domestic appliance, reference is made to the above description.
  • the invention comprises a method for detecting germs in a household appliance, in particular in a washing machine or in a coffee machine.
  • This method initially involves providing a biosensor in the form of a lateral flow test strip in the above-described
  • a liquid sample or swab sample is taken and contacted with the lateral flow test strip.
  • the lateral flow test strip for example, directly into a liquid, for example, in a water tank, the household appliance, immersed.
  • the implementation of the lateral flow Tests and the detection of any present in the sample germs according to the immunological test principle based on capillary forces described above.
  • the mobility properties of the germ-specific antibodies of the test strip are used, which change depending on a complexation with the germ to be detected.
  • a readout of the lateral flow test strip takes place.
  • an optical read-out by the user takes place, a colored detection system preferably being provided for the test strip.
  • the biosensor according to the invention provides a uniform and at the same time simple technical platform in the form of the lateral flow test strip, which can be obtained by the use of different immunological detection reagents and
  • the design as a lateral flow test strip which is preferably designed as a disposable article, a very cost-effective and suitable for everyday use execution is possible.
  • Sampling point or a plug-in cartridge an automated test can be realized.
  • Coffee maker can be set up so that e.g. a sample is taken at regular intervals in an automated manner and applied to a test strip for germ analysis.
  • the evaluation and evaluation of the test strip can optionally be carried out automatically and the result can be displayed, for example, on a display, so that necessary and suitable cleaning measures or the like can be carried out.
  • FIG. 1 shows a schematic view of a preferred embodiment of a lateral flow test strip as a biosensor according to the invention.
  • Fig. 2 are schematic representations (A, B, C) of a test strip for
  • FIG. 1 shows a biosensor in the form of a lateral flow test strip 10 in a schematic view.
  • the test strip 10 is provided for the immunological detection of germs 50, depending on the germ to be detected, germ-specific antibodies 40 are present.
  • a detection reagent 41 is preferably bound directly to each antibody 40, wherein the detection reagents 41 are, for example, metal particles or
  • the lateral flow test strip 10 can be used to detect germs, in particular of molds, mold spores or bacteria, in household appliances, for example in washing machines or in coffee machines.
  • the biosensor according to the invention can generally be used for checking a germ load in all devices or devices which have, for example, permanently moist spots or other sites prone to germs.
  • the biosensor according to the invention can in principle also be used generally for a germ test in a liquid or solid sample.
  • the test strip 10 comprises a sample-receiving pad 11, a capillary 12 and a detection field 13 and a control field 14.
  • the germ-specific antibody 40 together with the detection reagent 41 bound thereto can be provided, for example, in dried form in the area of the sample-receiving pad 11.
  • the antibody 40 may be transferred to the test strip along with a buffer applied to the test strip 10, such as in the region of the sample receiving pad 11, before or after sample application.
  • the user first of all receives a sample, for example from a washing machine (eg from the drum or a washing powder compartment) or from a coffee machine, for example from the water tank, the pomace or from the region of the grinder or Brewing group, taken. This may be a liquid sample or a swab specimen.
  • Swab sample can be used, for example, a swab.
  • the sample is then applied to the sample receiving pad 11.
  • the test strip 10 with the region of the sample-receiving pad 11 is immersed directly in the liquid sample.
  • the test strip 10 may have an extension in the form of an attached rod or the like.
  • a buffer cartridge 30 may be provided, from which the buffer is released manually if necessary or optionally in an automated form.
  • buffering is generally not mandatory.
  • the germs 50 bind specifically to the antibodies 40 (antigen-antibody binding), so that complexes are formed. These complexes have changed their running properties compared to the free antibodies 40, resulting in a separation in the capillary 12.
  • the free antibody 40 runs to a certain extent further or faster than the complex of antibody 40 and germ 50.
  • the free antibody 40 reaches the remoter control field 14 further away.
  • the complex of antibody 40 and mold spore 50 reaches "only" the detection field 13. This running behavior is through a
  • Detection reagent 41 for example, a discoloration due to the metal particles in the detection field 13 and / or in the control panel 14.
  • a direct or indirect color reaction can be made in the detection field 13 and / or in the control panel 14, which can be determined by simple optical inspection of the Test strip 10 can be evaluated.
  • the color reaction can be read by the user whether the germ was in the sample or not.
  • the user receives a qualitative proof or a semiquantitative or quantitative result, the equipment of the test strip 10 and in particular the
  • Concentration of the reagents, in particular the antibody 40 is preferably designed so that a threshold for a problematic concentration of the detected germ is taken into account.
  • an optical device for example a camera, can be used for the evaluation.
  • the antibody is bound directly or directly to a dye or metal particles, so that the presence of the antibody in the respective readout field (detection field and / or control field) is directly recognizable as a color reaction.
  • the respective readout field detection field and / or control field
  • detection reagents Interaction with other detection reagents takes place, for example by known per se enzymatic detection reactions.
  • corresponding detection reagents in particular in the area of the detection field and optionally the control field, must be integrated in the test strips.
  • the control panel 14 is in particular designed so that when correct
  • test strip 10 in each case a reaction in the control field is detectable, wherein in the control panel, for example, in the above
  • FIG. 2 shows with reference to the representations A, B and C of an inventive
  • Test Strip 200 shows the possible results when performing a
  • a user can easily independently check whether, for example, a germ load is present in a washing machine or a coffee machine.
  • the user Before a cleaning action to be carried out on a regular basis, the user can check, for example, whether a germ load is actually present and a cleaning is required. In this way, for example, the

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Abstract

Ein Biosensor ist zum immunologischen Nachweis von Keimen (50) vorgesehen. Der Biosensor ist in Form eines Lateral-Flow-Teststreifens (10) ausgestaltet, wobei der Lateral-Flow-Teststreifen (10) Keim-spezifische Antikörper (40) aufweist. Die Mobilitätseigenschaften der Antikörper (40) ändern sich, wenn die Antikörper (40) mit dem nachzuweisenden Keim (50) komplexieren, wobei diese Änderung der Mobilitätseigenschaften für den Nachweis der Keime (50) genutzt wird.

Description

Beschreibung
Titel
Biosensor und Verfahren zum Nachweis von Keimen Die vorliegende Erfindung betrifft einen Biosensor in Form eines Lateral- Flow-
Teststreifens sowie ein Verfahren zum Nachweis von Keimen.
Stand der Technik In verschiedenen Bereichen der menschlichen Wohnumgebung kann es zu erheblichen Keimbelastungen kommen. Insbesondere ein Schimmelbefall ist nicht selten und kann zu großen gesundheitlichen Problemen führen.
Schimmelpilze und vor allem Schimmelpilzsporen sowie von Schimmelpilzen abgesonderte Giftstoffe sind als Erreger von Infektionen und chronischen Erkrankungen, beispielsweise entzündlichen Lungenerkrankungen, nicht zu unterschätzen. Weiterhin stellen Schimmelpilze und Schimmelpilzsporen potenzielle Allergene dar, die zur Auslösung von allergischen Beschwerden führen können. Ein Schimmelpilzbefall oder allgemein eine Keimbelastung kann insbesondere innerhalb von verschiedenen Haushaltsgeräten auftreten, beispielsweise in Waschmaschinen oder Kaffeemaschinen. Heutige
Waschmaschinen besitzen komplexe Programme, die auch aus
Energiespargründen auf hohe Temperaturen verzichten. Dauerfeuchte Stellen sowie niedrige Temperaturen beim Waschgang und Nahrungsreste bieten Keimen gute Wachstumsbedingungen, so dass es zu einem Keimbefall in beispielsweise der Wäschetrommel, in Schläuchen oder in einem
Waschpulverfach kommen kann. Auch moderne Kaffeemaschinen, insbesondere Vollautomaten, sind oftmals Keimbelastungen ausgesetzt, da im Vergleich mit herkömmlichen Filterkaffeemaschinen verschiedene für eine Reinigung schwer und umständlich erreichbare Bereiche durch den komplexen Aufbau vorhanden sind. Die verschiedenen Feuchtstellen in einer modernen Kaffeemaschine (z. B. Wassertank, Schläuche, Trester, Mahlwerk) bieten für Bakterien und
Schimmelpilze unter Umständen sehr gute Wachstumsbedingungen.
Für Kaffeemaschinen und für Waschmaschinen werden bereits
Reinigungsmaßnahmen vorgeschlagen, wobei mithilfe von speziellen
Reinigungsmitteln (Tabs oder Reinigungslösungen) bestimmte
Waschprogramme oder Reinigungsprogramme durchgeführt werden, die eine Keimbelastung reduzieren sollen. Da solche Reinigungsmaßnahmen in der Praxis jedoch möglicherweise nicht regelmäßig durchgeführt werden und eine auftretende Keimbelastung nicht bemerkt wird, kann es durch die unerkannte Keimbelastung zu gesundheitlichen Problemen beim Anwender kommen.
Aus der internationalen Patentanmeldungsschrift WO 2012/089417 AI ist ein Handmessgerät zum Nachweis von verdeckten Schimmelschäden bekannt. Hiermit kann ein Schimmelbefall in Innenräumen, z. B. an Wänden, erkannt werden. Das Gerät umfasst unter anderem eine Sammeleinheit zur Aufnahme einer Innenraumprobe sowie eine immunologische Testeinheit.
Die Offenlegungsschrift einer deutschen Patentanmeldung DE 196 04 195 AI offenbart ein Analyseverfahren, bei dem Antikörper oder Antigene aus der Raumluft angesaugt werden und anschließend mit einer Immunreaktion nachgewiesen werden.
Offenbarung der Erfindung
Vorteile der Erfindung
Die Erfindung betrifft einen Biosensor zum immunologischen Nachweis von Keimen, wobei der Biosensor erfindungsgemäß als Lateral- Flow-Teststreifen mit Keim-spezifischen Antikörpern ausgestaltet ist. Die Mobilitätseigenschaften der Antikörper ändern sich, wenn die Antikörper mit dem nachzuweisenden Keim komplexieren. Diese Änderung der Mobilitätseigenschaften werden
erfindungsgemäß genutzt, um mit dem Lateral- Flow-Teststreifen in besonders einfacher und anwenderfreundlicher Weise Keime nachweisen zu können. Bevorzugte Ausgestaltungen des Biosensors sind Gegenstand der abhängigen Ansprüche.
Der auf einem immunologischen Nachweis basierende, erfindungsgemäße Biosensor ist sehr sensitiv, so dass auch Keime, die unter Umständen in verhältnismäßig geringer Konzentration auftreten, nachgewiesen werden können. Des Weiteren ist die Selektivität durch den Einsatz von hochspezifischen
Antikörpern sehr hoch. Dadurch kann mithilfe des erfindungsgemäßen
Biosensors ein unter Umständen erst beginnender Keimbefall schon in einem frühen Stadium erkannt werden, so dass entsprechende Maßnahmen, beispielsweise die Reinigung eines keimbelasteten Haushaltgerätes,
vorgenommen werden können, bevor es zu einer gesundheitsrelevanten erheblichen Keimbelastung kommt.
Erfindungsgemäß ist der Biosensor in Form eines Lateral- Flow-Teststreifens ausgestaltet. Unter einem Lateral- Flow-Test ist ein Nachweisverfahren zu verstehen, das auf einer Kombination einer Dünnschichtchromatographie und einer Immunfärbung beruht. Hierbei wandert die Probe, gegebenenfalls zusammen mit gebundenen Antikörpern, über die Länge des Teststreifens aufgrund von Kapillarkräften (Dünnschichtchromatographie). Da sich die
Mobilitätseigenschaften der Antikörper erfindungsgemäß ändern, wenn die Antikörper mit dem nachzuweisenden Keim komplexieren, kann aufgrund dieser von der Gegenwart der nachzuweisenden Keime abhängigen
Mobilitätseigenschaften der Nachweis geführt werden.
In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung des Lateral- Flow-Teststreifen ist an die Keim-spezifischen Antikörper wenigstens ein Nachweisreagenz gebunden. Vorzugsweise ist das Nachweisreagenz direkt oder unmittelbar an die Keim-spezifischen Antikörper gebunden. Die Nachweisreagenzien können zum Beispiel kovalent über Aminosäuregruppen immobilisiert (gekoppelt) werden. So kann zum Beispiel über COOH / NH2 gekoppelt werden. Weiterhin eignen sich andere reaktive Gruppen des Antikörpers, z.B. Cysteine / SH-Gruppen, bei Verwendung von Linkersystemen zur chemischen Bindung mit den
Nachweisreagenzien. Vorzugsweise handelt es sich bei dem Nachweisreagenz um Metall-Partikel oder Farbstoffmoleküle. Hierdurch kann in sehr anwenderfreundlicher Weise ein optisches Auslesesystem realisiert werden, wobei anhand einer Farbreaktion, die beispielsweise mit bloßem Auge auswertbar ist, erkannt werden kann, ob eine Keimbelastung vorliegt oder nicht. Insbesondere ein quantitativer Nachweis ist im Allgemeinen mit dem Auge nur ungenau oder gar nicht darstellbar. Für eine optische Auslesung oder Auswertung können daher in anderen Ausgestaltungen auch optische Geräte eingesetzt werden, z.B. Kameras, die insbesondere auch eine quantitative oder semiquantitative Bewertung anhand einer Messung von Farbabstufungen oder Intensitätsabstufungen erlauben. Die Auswertung kann Software-gestützt erfolgen, wobei beispielsweise ein Vergleich mit z.B.
hinterlegten Referenzwerten (Kalibrationssoftware) vorgenommen werden kann. In bevorzugten Ausgestaltungen kann z.B. die Kamera eines Mobiltelefons als optisches Gerät eingesetzt werden.
In bevorzugten Ausgestaltungen des Biosensors ist der Biosensor zum Nachweis von Schimmelpilzen und/oder Schimmelpilzsporen und/oder Bakterien vorgesehen. Diese genannten Keime sind an erster Stelle für eine mögliche Keimbelastung von Haushaltsgeräten relevant. Ein bakterieller Befall oder ein Schimmelpilzbefall oder ein Befall mit Schimmelpilzsporen kommt vor allem an dauerfeuchten Stellen in Haushaltsgeräten vor, beispielsweise in Wassertanks oder Schläuche, oder an Stellen, an denen feuchtes Material längere Zeit lagert, beispielsweise in einem Tresterbehälter. Durch Auswahl von entsprechenden Keim-spezifischen Antikörpern für den erfindungsgemäßen Biosensor kann der Biosensor auf den Nachweis eines bestimmten Keims ausgerichtet werden. Je nach Gerät und Anwendungsfall wird dabei vorzugsweise vorab ermittelt, welcher Keim hauptsächlich für eine Belastung verantwortlich sein könnte. Dies kann beispielsweise für Kaffeemaschinen an unterschiedlichen Stellen unterschiedlich sein (z.B. Tank - Bakterien, Mahlwerk - Schimmel). Viele geeignete Antikörper liegen kommerziell vor. Ein monoklonaler Antikörper kann gegenüber polyklonalen Antikörpern bevorzugt sein, da im Allgemeinen die Selektivität eines monoklonalen Antikörpers größer ist. Andererseits können auch polyklonale Antikörper insbesondere im Hinblick auf die Kosten mit Vorteil eingesetzt werden. In besonders bevorzugter Weise sind die Keim-spezifischen Antikörper gegen Oberflächenmoleküle des nachzuweisenden Keims gerichtet. Der Antikörper kann sich dabei vorzugsweise gegen ein Epitop auf der Oberfläche der Keime richten. Dies hat den Vorteil, dass keinerlei weitere Probenaufbereitung, z. B. kein Aufbruch von Zellen oder Ähnliches, erfolgen muss. Die Keim-spezifischen Antikörper können direkt an die nachzuweisenden Keime binden, so dass der immunologische Nachweis in sehr einfacher Weise erfolgen kann.
In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung des Biosensors werden
Antikörper verwendet, die gegen ß-Glucane von Schimmelpilzsporen gerichtet sind. Es sind jedoch auch andere oberflächenständige Antigene als Epitope für einen Antikörper, der erfindungsgemäß eingesetzt werden kann, geeignet. Durch entsprechende Wahl von geeigneten Antikörpern und einem geeigneten
Nachweissystem wird demnach der Biosensor auf die Erkennung bestimmter Keime ausgerichtet. Es können also beispielsweise Teststreifen, die für die Erkennung von Schimmelpilzen eingerichtet sind, und Teststreifen, die für die Erkennung von bestimmten Bakterien eingerichtet sind, bereitgestellt werden. Weiterhin können auch mehrere verschiedene Teststreifen parallel oder nacheinander zum Nachweis von bestimmten Keimen eingesetzt werden.
Weiterhin kann auch der Teststreifen selbst so ausgestaltet sein, dass er für den parallelen Nachweis von verschiedenen Keimen eingerichtet ist.
In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung des Biosensors ist der Lateral- Flow-Teststreifen als Einwegartikel konzipiert. Im Anschluss an die Verwendung des Biosensors und der Keimbelastungsüberprüfung kann der Teststreifen dann entsorgt werden, wobei die auf dem Teststreifen gesammelten und analysierten Keime zusammen mit dem Teststreifen direkt über den Hausmüll entsorgt werden können. Die auf dem Teststreifen akkumulierten Keime stellen dabei in der Regel kein Gefahrgut dar. Wenn der Lateral- Flow-Teststreifen als
Einwegartikel ausgestaltet ist, hat es den weiteren besonderen Vorteil, dass ein solcher Artikel im Allgemeinen sehr kostengünstig herstellbar ist.
In einer bevorzugten Ausgestaltung des Biosensors umfasst der Lateral-Flow- Teststreifen ein Probeaufnahme-Pad und/oder eine Kapillare und/oder wenigstens ein Nachweisfeld. Das Probenaufnahme-Pad, das der Probensammlung und auch der Konjugation mit den Assay- Komponenten (Antikörpern) dient, wird vorzugsweise in Bezug auf die Porengröße und die Bindungseigenschaften an die Probe angepasst. Das Probenaufnahme-Pad kann beispielsweise aus Nitrocellulose gebildet sein und beispielsweise in Form einer Membran realisiert sein. Weiterhin eignet sich z.B. Cellulose oder
Glasfaser. Der Teststreifen selbst kann beispielsweise auf einem Streifen aus Kunststoff als Träger basieren. Mit dem Ausdruck "Kapillare" ist ein Bereich des Teststreifens gemeint, der aufgrund von Kapillarkräften von Flüssigkeiten durchwandert werden kann. Im Allgemeinen eignen sich hierfür
flüssigkeitsdurchlässige Materialien, beispielsweise Nitrocellulose,
Polyvinylidenfluoride, (ladungsmodifiziertes) Nylon oder Polyethersulfone.
Weiterhin umfasst der Lateral- Flow-Teststreifen vorzugsweise ein Kontrollfeld, so dass der Anwender beispielsweise durch unmittelbaren Vergleich des
Kontrollfeldes mit dem Nachweisfeld überprüfen kann, ob ein positives oder ein negatives Testergebnis vorliegt. Die Keim-spezifischen Antikörper können beispielsweise in getrockneter Form auf dem Teststreifen vorgelegt sein oder aus einer separaten Lösung zugesetzt werden. Die Kapillare ist so ausgestaltet, dass nach einer Komplexbildung des Antikörpers mit dem gegebenenfalls
vorhandenen Keim die dünnschichtchromatographische Auftrennung erfolgen kann. Weiterhin kann der Teststreifen ein oder mehrere Puffer, beispielsweise Aufnahmepuffer und/oder Nachweispuffer und/oder Laufpuffer, enthalten.
Alternativ kann dem Lateral- Flow-Teststreifen eine Pufferkartusche zugeordnet sein, aus der ein gegebenenfalls erforderlicher Puffer freigesetzt wird. In dieser Ausgestaltung des Teststreifens wird die Probe auf das Probenaufnahme-Pad in flüssiger oder fester Form aufgegeben. Anschließend wird ein erforderlicher Puffer, beispielsweise ein Laufpuffer, aus der Pufferkartusche freigesetzt und beispielsweise in dem Bereich des Probenaufnahme-Pads aufgetragen, so dass die Probe durch Kapillarkräfte transportiert werden kann. Wenn die Probe in flüssiger Form aufgetragen wird (beispielsweise eine Wasserprobe aus einem Wassertank), kann es auch ausreichend sein, dass die
dünnschichtchromatographische Auftrennung der Probe nur mithilfe der
Flüssigkeit aus der Probe erfolgt. In diesem Fall ist ein separater Laufpuffer nicht erforderlich. Wird eine Probe in trockener Form (z.B. Kaffeereste aus dem Mahlwerk) untersucht, so ist eine manuelle oder automatische Zugabe von Puffer erforderlich. Beispielsweise kann ein in einer Pufferkartusche vorgelagerter Puffer manuell oder automatisch freigesetzt werden und direkt oder über einen Kanal, beispielsweise mittels Kapillarkräften, auf das Probenaufnahme-Pad aufgebracht werden. Die Pufferkartusche (beispielsweise ein Kunststoffbehältnis) kann z.B. so ausgestaltet sein, dass der Puffer durch Knicken freigesetzt wird.
Je nach Antikörper und Nachweissystem kann es erforderlich sein, für die Keimanalyse einen vollständigen oder partiellen Zellaufschluss (Aufbruch der
Keime) durchzuführen. In diesem Fall wird ein Zellaufschlussreagenz, z.B. ein Detergenz, vorzugsweise über eine Pufferlösung auf das Probenaufnahme-Pad aufgetragen, sodass auch unter Umständen bei einer flüssigen Probe ein Pufferauftrag erfolgen kann.
Durch die dünnschichtchromatographische Auftrennung erreichen die Antikörper, gegebenenfalls zusammen mit den nachzuweisenden Keimen in Komplexform, das Nachweisfeld und/oder ein Kontrollfeld des Lateral- Flow-Teststreifens. Das Testergebnis ist vorzugsweise durch eine farbige Reaktion bzw. einen
Farbumschlag für den Anwender sichtbar. Farbige Auslesesysteme sind hierfür besonders bevorzugt, so dass es keiner weiteren Hilfsmittel für die Auswertung des Teststreifens bedarf. In anderen Ausgestaltungen können optische Geräte, z.B. die Kamera eines Mobiltelefons oder anderes, für die Auswertung herangezogen werden.
In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung ist der erfindungsgemäße Biosensor für einen immunologischen Nachweis von Keimen in einem
Haushaltsgerät eingerichtet bzw. vorgesehen, beispielsweise für den Nachweis von Keimen in einer Waschmaschine oder in einer Kaffeemaschine.
Insbesondere bei derartigen Geräten, die im Allgemeinen dauerhaft feuchte
Stellen aufweisen, kann es sehr schnell zu schädlichen Keimbelastungen kommen. Mithilfe des erfindungsgemäßen Biosensors können solche
Keimbelastungen schnell und einfach von einem Anwender nachgewiesen werden, ohne dass hierfür besondere Kenntnisse oder Fähigkeiten erforderlich wären. Der erfindungsgemäße Biosensor erlaubt damit dem Nutzer eine selbstständige Überprüfung potentiell befallener Stellen, beispielsweise in einer Waschmaschine oder einer Kaffeemaschine. Der Nutzer erhält dabei nach der Durchführung des Tests ein qualitatives oder ein semiquantitatives oder gegebenenfalls quantitatives Ergebnis, so dass bei einem positiven Testergebnis gegebenenfalls geeignete Reinigungsmaßnahmen ergriffen werden können.
Die Form und Ausgestaltung des Biosensors bzw. des Lateral- Flow-Teststreifens kann dabei an die vorgesehene Probenentnahmestelle im Haushaltsgerät angepasst sein. Im einfachsten Fall kann der Lateral- Flow-Teststreifen in einer üblichen Stäbchenform ausgestaltet sein. Es kann jedoch auch vorgesehen sein, dass insbesondere zum Erreichen von weniger gut zugänglichen Stellen, beispielsweise in einer Waschmaschine oder in einer Kaffeemaschine, der Teststreifen entsprechend angepasst ist, beispielsweise durch eine
Stielverlängerung oder Ähnliches, so dass der Teststreifen beispielsweise in einen Schlauch oder Ähnliches eingeführt werden kann. Weiterhin können auch
Probenentnahmestäbchen oder Vergleichbares vorgesehen sein, mit deren Hilfe beispielsweise eine Abstrichprobe im Gerät entnommen wird, die anschließend auf den Teststreifen aufgetragen wird. Die Erfindung betrifft weiterhin die Verwendung eines Biosensors in Form eines
Lateral- Flow-Teststreifens zum immunologischen Nachweis von Keimen in einem Haushaltsgerät, insbesondere in einer Waschmaschine oder in einer
Kaffeemaschine. Bezüglich weiterer Merkmale des Lateral- Flow-Teststreifens und auch insbesondere bezüglich der Verwendung zum Nachweis von Keimen in einem Haushaltsgerät wird auf die obige Beschreibung verwiesen.
Schließlich umfasst die Erfindung ein Verfahren zum Nachweis von Keimen in einem Haushaltsgerät, insbesondere in einer Waschmaschine oder in einer Kaffeemaschine. Dieses Verfahren umfasst zunächst die Bereitstellung eines Biosensors in Form eines Lateral- Flow-Teststreifens in der oben beschriebenen
Ausgestaltung. Aus dem Haushaltsgerät wird eine flüssige Probe oder eine Abstrichprobe entnommen und mit dem Lateral- Flow-Teststreifen kontaktiert. Alternativ kann der Lateral- Flow-Teststreifen beispielsweise auch direkt in eine Flüssigkeit, beispielsweise in einen Wasserbehälter, des Haushaltsgerätes, eingetaucht werden. Anschließend erfolgt die Durchführung des Lateral-Flow- Tests und der Nachweis der gegebenenfalls in der Probe vorhandenen Keime gemäß dem oben beschriebenen immunologischen Testprinzip auf der Basis von Kapillarkräften. Für den Nachweis werden die Mobilitätseigenschaften der Keimspezifischen Antikörper des Teststreifens genutzt, die sich in Abhängigkeit von einer Komplexierung mit dem nachzuweisenden Keim ändern. Schließlich erfolgt eine Auslesung des Lateral- Flow-Teststreifens. In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung erfolgt hierbei eine optische Auslesung durch den Anwender, wobei vorzugsweise für den Teststreifen ein farbiges Nachweissystem vorgesehen ist.
Der erfindungsgemäße Biosensor stellt eine einheitlich und gleichzeitig einfache technische Plattform in Form des Lateral- Flow-Teststreifens bereit, die durch den Einsatz unterschiedlicher immunologischer Nachweisreagenzien und
insbesondere durch Einsatz Keim-spezifischer Antikörper als Nachweisverfahren für unterschiedliche Keime ausgelegt werden kann. Durch die Ausgestaltung als Lateral- Flow-Teststreifen, der vorzugsweise als Einwegartikel konzipiert ist, ist eine sehr kostengünstige und alltagstaugliche Ausführung möglich.
Neben den oben beschriebenen Anwendungsfällen für Einwegsensoren im manuellen Testverfahren kann durch Erweiterung der Geräte um eine
Probenahmestelle bzw. eine einsteckbare Kartusche eine automatisierbare Testung realisiert werden. Beispielsweise kann das Mahlwerk einer
Kaffeemaschine so eingerichtet werden, dass z.B. in regelmäßigen Abständen in automatisierter Weise eine Probe entnommen und auf einen Teststreifen zur Keimanalyse aufgetragen wird. Auch die Auswertung und Bewertung des Teststreifens kann gegebenenfalls automatisch durchgeführt und das Ergebnis beispielsweise auf einem Display angezeigt werden, sodass erforderliche und geeignete Reinigungsmaßnahmen oder ähnliches durchgeführt werden können.
Weitere Merkmale und Vorteile der Erfindung ergeben sich aus der
nachfolgenden Beschreibung von Ausführungsbeispielen im Zusammenhang mit den Zeichnungen. Hierbei können die einzelnen Merkmale jeweils für sich oder in Kombination miteinander verwirklicht sein. en Zeichnungen zeigen: Fig. 1 eine schematische Ansicht einer bevorzugten Ausgestaltung eines Lateral- Flow-Teststreifens als erfindungsgemäßer Biosensor; und
Fig. 2 schematische Darstellungen (A, B, C) eines Teststreifens zur
Illustrierung der Auswertung des Teststreifens.
Beschreibung von Ausführungsbeispielen
Fig. 1 zeigt einen Biosensor in Form eines Lateral- Flow-Teststreifens 10 in schematischer Ansicht. Der Teststreifen 10 ist zum immunologischen Nachweis von Keimen 50 vorgesehen, wobei je nach nachzuweisendem Keim Keimspezifische Antikörper 40 vorhanden sind. An jeden Antikörper 40 ist jeweils ein Nachweisreagenz 41 vorzugsweise direkt gebunden, wobei es sich bei den Nachweisreagenzien 41 beispielsweise um Metall-Partikel oder
Farbstoffmoleküle handelt. Mit besonderem Vorteil kann der Lateral-Flow- Teststreifen 10 zum Nachweis von Keimen, insbesondere von Schimmelpilzen, Schimmelpilzsporen oder Bakterien, in Haushaltsgeräten eingesetzt werden, beispielsweise in Waschmaschinen oder in Kaffeemaschinen. Darüber hinaus kann der erfindungsgemäße Biosensor allgemein zum Überprüfen einer Keimbelastung bei allen Geräten oder Vorrichtungen eingesetzt werden, die beispielsweise dauerfeuchte Stellen oder andere keimgefährdete Stellen aufweisen. Weiterhin kann der erfindungsgemäße Biosensor im Prinzip auch allgemein für eine Keimüberprüfung in einer flüssigen oder festen Probe eingesetzt werden.
Der Teststreifen 10 umfasst ein Probenaufnahme-Pad 11, eine Kapillare 12 sowie eine Nachweisfeld 13 und ein Kontrollfeld 14. Der Keim-spezifische Antikörper 40 zusammen mit dem daran gebundenen Nachweisreagenz 41 kann beispielsweise in getrockneter Form im Bereich des Probenaufnahme-Pads 11 bereitgestellt werden. In anderen Ausgestaltungen kann der Antikörper 40 zusammen mit einem Puffer, der vor oder nach dem Probenauftrag auf den Teststreifen 10, beispielsweise im Bereich des Probenaufnahme-Pads 11, aufgegeben wird, auf den Teststreifen übertragen werden. Zur Durchführung des Tests auf Keimbefall wird von dem Anwender zunächst eine Probe, beispielsweise aus einer Waschmaschine (z. B. aus der Trommel oder einem Waschpulverfach) oder aus einer Kaffeemaschine, beispielsweise aus dem Wassertank, dem Trester oder aus dem Bereich des Mahlwerks oder der Brühgruppe, entnommen. Hierbei kann es sich um eine flüssige Probe oder um eine Abstrichprobe handeln. Zur Erleichterung der Entnahme einer
Abstrichprobe kann beispielsweise ein Abstrichstäbchen verwendet werden. Die Probe wird anschließend auf das Probenaufnahme-Pad 11 aufgetragen. Im Fall von flüssigen Proben kann es alternativ vorgesehen sein, dass der Teststreifen 10 mit dem Bereich des Probenaufnahme-Pads 11 direkt in die flüssige Probe eingetaucht wird. Um dieses Eintauchen zu erleichtern, insbesondere im Hinblick auf schwer zugängliche Stellen, kann beispielsweise der Teststreifen 10 eine Verlängerung in Form eines angefügten Stäbchens oder Ähnliches aufweisen. Insbesondere im Fall von Abstrichproben kann es erforderlich sein, weiterhin einen Laufpuffer im Bereich des Probenaufnahme-Pads 11 aufzutragen. Hierfür kann eine Pufferkartusche 30 vorgesehen sein, aus der der Puffer bei Bedarf manuell oder gegebenenfalls in automatisierter Form freigesetzt wird. Im Fall von flüssigen Proben ist ein Pufferauftrag im Allgemeinen nicht zwingend erforderlich. Im Bereich des Probenaufnahme-Pads 11 gelangen die gegebenenfalls vorhandenen Keime 50 (z. B. Schimmelpilzsporen) mit den Antikörpern 40 in
Kontakt. Die Keime 50 binden spezifisch an die Antikörper 40 (Antigen- Antikörper-Bindung), so dass Komplexe ausgebildet werden. Diese Komplexe haben gegenüber den freien Antikörpern 40 veränderte Laufeigenschaften, wodurch es zu einer Auftrennung in der Kapillare 12 kommt. Der freie Antikörper 40 läuft gewissermaßen weiter oder schneller als der Komplex aus Antikörper 40 und Keim 50. Der freie Antikörper 40 erreicht dabei das weiter entfernt liegende Kontrollfeld 14. Der Komplex aus Antikörper 40 und Schimmelpilzspore 50 erreicht "nur" das Nachweisfeld 13. Dieses Laufverhalten wird durch eine
Farbreaktion, ausgelöst durch das Nachweisreagenz 41, in den jeweiligen Feldern 13 bzw. 14 sichtbar. Bei der Verwendung von Metall-Partikeln als
Nachweisreagenz 41 kann beispielsweise eine Verfärbung infolge der Metall- Partikel in dem Nachweisfeld 13 und/oder in dem Kontrollfeld 14 erfolgen. Wenn beispielsweise Farbstoffe als Nachweisreagenz 41 verwendet werden, kann eine direkte oder indirekte Farbreaktion in dem Nachweisfeld 13 und/oder in dem Kontrollfeld 14 erfolgen, die durch einfache optische Begutachtung des Teststreifens 10 ausgewertet werden kann. Je nachdem, in welchem Feld bzw. in welchen Feldern die Farbreaktion erkennbar ist, ist es für den Anwender ablesbar, ob der Keim in der Probe war oder nicht. Hierbei erhält der Anwender einen qualitativen Nachweis oder ein semiquantitatives oder quantitatives Ergebnis, wobei die Ausstattung des Teststreifens 10 und insbesondere die
Konzentration der Reagenzien, insbesondere der Antikörper 40, vorzugsweise so ausgelegt ist, dass ein Schwellenwert für eine problematische Konzentration des nachzuweisenden Keims berücksichtigt wird. Gegebenenfalls kann ein optisches Gerät, beispielsweise eine Kamera, für die Auswertung verwendet werden.
In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung ist der Antikörper direkt oder unmittelbar an einen Farbstoff oder an Metall-Partikel gebunden, so dass das Vorhandensein des Antikörpers in dem jeweiligen Auslesefeld (Nachweisfeld und/oder Kontrollfeld) direkt als Farbreaktion erkennbar ist. In anderen
Ausgestaltungen ist es gleichfalls möglich, dass eine Farbreaktion erst im
Zusammenspiel mit weiteren Nachweisreagenzien stattfindet, beispielsweise durch an sich bekannte enzymatische Nachweisreaktionen. In diesem Fall müssen in den Teststreifen entsprechende Nachweisreagenzien, insbesondere im Bereich des Nachweisfeldes und gegebenenfalls des Kontrollfeldes, integriert sein. Weiterhin ist beispielsweise die Verwendung von Fluoreszenzfarbstoffen oder Vergleichbarem möglich.
Das Kontrollfeld 14 ist insbesondere so ausgestaltet, dass bei korrekter
Anwendung des Teststreifens 10 in jedem Fall ein Reaktion in dem Kontrollfeld nachweisbar ist, wobei in dem Kontrollfeld beispielsweise in der oben
beschriebenen Weise eine Farbreaktion sichtbar wird, die durch freie Antikörper mit daran gebundenem Nachweisreagenz ausgelöst wird, die im Überschuss auf dem Teststreifen vorhanden sind. Fig. 2 zeigt anhand der Darstellungen A, B und C eines erfindungsgemäßen
Teststreifens 200 die möglichen Ergebnisse bei der Durchführung eines
Keimbelastungstests. Je nach Position und Anzahl der strichförmigen
Farbreaktionen im Bereich 210, 220, 230 kann das Ergebnis ausgelesen werden. Im Fall A ist ein einzelner farbiger Strich in dem Bereich 210 zu erkennen, der im Kontrollfeld des Teststreifens 200 erscheint. Das Kontrollfeld liegt am weitesten entfernt vom Probenaufnahme-Pad (hier nicht näher dargestellt). In diesem Fall konnte der entsprechende Keim nicht nachgewiesen werden (Ergebnis negativ). Im Fall B sind im Bereich 220 sowohl im Kontrollfeld als auch im Nachweisfeld, das näher an dem nicht dargestellten Probenaufnahme-Pad liegt, jeweils ein farbiger Strich zu erkennen. Das Testergebnis ist in diesem Fall positiv, der Keim konnte also nachgewiesen werden. Im Fall C ist im Bereich 230 nur ein farbiger Strich im Nachweisfeld zu erkennen. Dieses Ergebnis ist ungültig, da kein Strich im Kontrollfeld erschienen ist.
Mit einem solchen erfindungsgemäßen Biosensor in Form eines Lateral-Flow- Teststreifens kann ein Anwender ohne weiteres selbstständig überprüfen, ob beispielsweise in einer Waschmaschine oder einer Kaffeemaschine eine Keimbelastung vorliegt.
Vor einer turnusmäßig durchzuführenden Reinigungsmaßnahme kann der Anwender beispielsweise prüfen, ob tatsächlich eine Keimbelastung vorliegt und eine Reinigung erforderlich ist. Auf diese Weise kann beispielsweise die
Durchführung von Reinigungsmaßnahmen, die oftmals mit der Verwendung von aggressiven Reinigungssubstanzen verbunden ist, auf ein tatsächlich erforderliches Maß eingeschränkt werden.

Claims

Biosensor zum immunologischen Nachweis von Keimen (50), dadurch gekennzeichnet, dass der Biosensor in Form eines Lateral- Flow-Teststreifens (10) ausgestaltet ist und Keim-spezifische Antikörper (40) aufweist, wobei sich die Mobilitätseigenschaften der Antikörper (40) ändern, wenn die Antikörper (40) mit dem nachzuweisenden Keim (50) komplexieren.
Biosensor nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass an die Keimspezifischen Antikörper (40) wenigstens ein Nachweisreagenz (41) gebunden ist.
Biosensor nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Nachweisreagenz (41) Metall-Partikel oder Farbstoffmoleküle umfasst.
Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Biosensor zum Nachweis von Schimmelpilzen und/oder
Schimmelpilzsporen und/oder Bakterien vorgesehen ist.
Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Keim-spezifische Antikörper (40) gegen Oberflächenmoleküle des nachzuweisenden Keims (50) gerichtet ist.
Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, das der Antikörper (40) gegen ß-Glucane von Schimmelpilzsporen gerichtet ist.
Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Lateral- Flow-Teststreifen (10) ein Einwegartikel ist.
Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Lateral- Flow-Teststreifen (10) ein Probeaufnahme-Pad (11) und/oder eine Kapillare (12) und/oder wenigstens ein Nachweisfeld (13) aufweist.
9. Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Lateral- Flow-Teststreifen (10) ein Kontrollfeld (14) aufweist.
10. Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass dem Lateral- Flow-Teststreifen (10) wenigstens eine Pufferkartusche (30) zugeordnet ist 11. Biosensor nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Biosensor für einen immunologischen Nachweis von Keimen (50) in einem Haushaltsgerät, insbesondere in einer Waschmaschine oder einer Kaffeemaschine, eingerichtet ist. 12. Verwendung eines Biosensors in Form eines Lateral- Flow-Teststreifens (10) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 11 zum immunologischen Nachweis von Keimen (50) in einem Haushaltsgerät, insbesondere in einer Waschmaschine oder in einer Kaffeemaschine. 13. Verfahren zum Nachweis von Keimen in einem Haushaltsgerät, insbesondere in einer Waschmaschine oder in einer Kaffeemaschine, umfassend die folgenden Schritte:
Bereitstellung eines Biosensors in Form eine Lateral-Flow- Teststreifens (10) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 11, - Kontaktierung einer flüssigen Probe oder einer Abstrichprobe aus dem Haushaltsgerät mit dem Lateral- Flow-Teststreifen (10), Auslesung des Lateral- Flow-Teststreifens (10).
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