WO2017044003A1 - Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих - Google Patents

Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих Download PDF

Info

Publication number
WO2017044003A1
WO2017044003A1 PCT/RU2016/000498 RU2016000498W WO2017044003A1 WO 2017044003 A1 WO2017044003 A1 WO 2017044003A1 RU 2016000498 W RU2016000498 W RU 2016000498W WO 2017044003 A1 WO2017044003 A1 WO 2017044003A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
drug
melatonin
content
animals
sexual
Prior art date
Application number
PCT/RU2016/000498
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Сергей Владимирович ЕНГАШЕВ
Мария Сергеевна ГЕРМАНОВА
Сергей Борисович ГЕРМАНОВ
Екатерина Сергеевна ЕНГАШЕВА
Денис Дмитриевич НОВИКОВ
Яна Юрьевна ГЛАДУШКО
Дмитрий Владимирович ХОМИШИН
Ольга Леонидовна ГЕРМАНОВА
Александр Борисович МУРОМЦЕВ
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческий центр Агроветзащита"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческий центр Агроветзащита" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческий центр Агроветзащита"
Priority to EA201890438A priority Critical patent/EA035143B1/ru
Priority to EP16844787.8A priority patent/EP3332778A4/en
Publication of WO2017044003A1 publication Critical patent/WO2017044003A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A61K31/567—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in position 17 alpha, e.g. mestranol, norethandrolone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A61K31/585—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin containing lactone rings, e.g. oxandrolone, bufalin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A61K9/0017—Non-human animal skin, e.g. pour-on, spot-on
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives

Definitions

  • the invention relates to the field of veterinary medicine, namely, to a method for temporarily blocking or inhibiting the sexual functions of male mammals, including behavioral phenomena (search for a partner, dromomania, intraspecific aggression and aggression towards the owner, “labeling” of the territory, vocalization, etc. )
  • the method involves administering once / twice to the animal a pharmaceutical composition comprising as active substances an ⁇ -blocker, tropic to the posterior nuclei of the hypothalamus, melatonin and a steroid compound with gestagenic activity.
  • the method allows, with a minimum dose of a steroid hormone hazardous to animal health, to block the sexual behavior of males for a period of several weeks to six months.
  • the pharmaceutical composition is administered transdermally in the form of "Spot-on.”
  • gestagens for influencing the sexual behavior of males is accompanied by a large number of side effects, often irreversible: the adrenal cortex is inhibited and corticosteroids are disrupted, the pancreas is often damaged, with the development of diabetes to one degree or another, hepatotoxic effects are almost always detected, cholecystitis occurs.
  • urolithiasis subsequent urolithiasis
  • urolithiasis urolithiasis
  • breast hyperplasia is almost always detected with frequent subsequent adenocarcinoma.
  • the behavior of animals becomes passive, they are gaining excess weight.
  • the functioning of the gonads is also disturbed for a long time, which leads to unsuccessful bindings a long time after the cessation of the administration of gestagens.
  • the slow development of the effects of suppressing sexual behavior often does not save from "running away" along the trail of a female in estrus, with all subsequent problems.
  • attempts to influence the sexual behavior of males with the introduction of gestagens alone leave much to be desired.
  • melatonin suppresses ovulation, and in combination with steroids reduces the dose of the latter in the drug, which eliminates their side effects [Khundanov L., Gladkov A., Levashova V. Live suddenly ever after.
  • scientists are interested in melatonin // Med.vestn. 1997. Jfe 10 (77). S. 1-3.].
  • sheep, goats and other breeding animals use melatonin and its derivatives in the form of an implant for both females (to delay estrus) and males (decrease in sperm production) [EP0246910, publ. 11/25/1987].
  • the disadvantage of the invention is the complex manufacturing process of the implant, as well as difficulties for pet owners introducing it under the skin of restless pets.
  • a combination of ⁇ -blockers with progestogens and (or) estrogens is known for contraception and to reduce the sexual activity of both males and females in veterinary medicine [Korhov V.V. and other Postcoital steroids and non-steroidal contraceptives // Pharmacology and Toxicology, 1980, T. 43 (1), S. 94-96; Korhov V.V., Veshchilova T.P.
  • the contraceptive activity of a combination of steroids and antiadrenergic drugs // Bull. an experiment. biol. and honey., 1975, T. 79 (4), S. 77-79; RU2233586, publ. 08/10/2004].
  • the disadvantage of this invention is the low contraceptive effect of the combination (55%) and the inaccessibility in the market of the used synthetic gestagen.
  • the objective of the invention is to find the most safe and convenient method of temporarily blocking the sexual functions of male mammals, including behavioral phenomena (search for a partner, vocalization, etc.).
  • the technical result of this invention is to obtain a highly effective pharmaceutical composition for applying "Spot-on" in any period of the sexual cycle, which makes it easy to solve the problems of changing the sexual behavior of male mammals.
  • cyproterone acetate as a progestogen, which has high affinity for androgen receptors in both the hypothalamic and pituitary structures in males and blocks them without showing an androgenic effect that interferes with the rapid elimination of sexual activity.
  • Replacing the commonly used megestrol acetate with cyproterone acetate significantly increased the effect, reduced the load of the progestogen hormone and increased the physiological effect of males on the body. The effectiveness of this effect is higher when the drug is administered in the evening, which makes the hypothesis about the predominant value of melatonin in the development of the effect valid.
  • the introduction of an ⁇ -blocker into the composition made it possible to quickly and prolongedly stop the symptoms of excited male behavior.
  • gestagens with the highest affinity for the corresponding receptors are used: 6-chloro-1P, 2P-dihydro-17-hydroxy-3'H-cycloprop [1, 2] pregna-1, 4,6-trien-3, 20-dioacetate (cyproterone acetate) or (s) 17a-cyanomethyl-17P-hydroxyestra-4,9-dien-3-one (dienogest), or (s) (6R, 7R, 8R, 9S, 10R, 13S, 14S , 15S, 16S, 17S) -l, 3 ', 4', 6,6a, 7,8,9,10, l 1,12,13,14, 15,15a, 16 - hexadecahydro-10, 13-dimethylspiro - [17H-dicyclopropa- [6,7: 15, 16] cyclopenta [a] phenanthrene-17,2 '(5'H) -furan] -3,5
  • the doses should not exceed the commonly used therapeutic, because otherwise the probability increases sharply adverse side effects. Melatonin is practically safe with very significant excess doses.
  • melatonin and prooxan in the composition of the transdermal forms would have good transcutaneous bioavailability, and the progestogen, the concentration of which in the animal’s blood is not so critical for the severity of the effect, also with a certain composition of the transdermal pharmaceutical composition will enter the bloodstream in sufficient quantities and have a systemic action with minimal local effects.
  • a pharmaceutical composition for transdermal administration was selected containing (wt.%):
  • 1,2,3-triacetoxypropane up to 100 which provided a biological effect with the introduction of "Spot-on", identical to oral methods of administration, but the use of the drug is much more convenient.
  • Skin irritation is not detected, animals do not feel the moment of application and discomfort in the application area, so there is no combing and licking.
  • Lower concentrations of biologically active substances are selected from the condition of minimum quantities of biologically active substances that cause a guaranteed effect with the technically acceptable volume of the finished dosage form "Spot-on" for this type of animal (see example 9, 12, 19). So for cats, the optimal single volumetric dose is 0.5-2 ml, because with a larger quantity, the solution spreads over an unacceptably large area and moistens the wool.
  • the upper limits of the concentrations of propoxane and cyproterone acetate are selected based on the known toxicity data of these components with convenient amounts of the applied Spot-on form and their solubility in pharmaceutical compositions (see example 20, 24).
  • the upper limit of the concentration of melatonin is determined by its solubility in the selected solvent composition (see example 22).
  • This pH value is easily obtained by the necessary addition during ionometric control of a suitable carboxylic acid: glycyrrhizic or (and) succinic or (and) lactic, or (and) pyruvic, or (and) citric, or (and) malic, or (and) tartaric or (and) stearic, or (and) myristic, or (and) octanoic or (and) lauric acid (see examples 16, 18, 21, etc.), etc.
  • carboxylic acid glycyrrhizic or (and) succinic or (and) lactic, or (and) pyruvic, or (and) citric, or (and) malic, or (and) tartaric or (and) stearic, or (and) myristic, or (and) octanoic or (and) lauric acid (see examples 16, 18, 21, etc.), etc.
  • the required amount of carboxylic acid varies depending on from molecular weight and
  • Biological tests showed that the developed pharmaceutical composition, when applied once (less often twice) to males, quickly and completely blocks behavioral phenomena of active sexual behavior, while the effect develops within 12-72 hours and usually lasts from one months to six months, which minimizes the number of steroid compounds introduced into the body of the animal, and therefore the likelihood of severe, often fatal side effects that develop during The systemic administration of hormone-active steroids to the animal.
  • Juvenile features of the animal s behavior that appear after the use of the drug — playing and cognitive behavior in the absence of aggressiveness — are comfortable for pet owners.
  • the drug does not affect the skills of service dogs, the inhibition of sexual behavior favorably affects the productivity of their work.
  • the drug reversibly blocks the fertile functions of males, which are restored immediately after its termination.
  • the pharmaceutical composition is convenient to use - it is used for transdermal administration in the form of "Spot-on" in any period of the sexual cycle.
  • melatonin present in the composition [Katzung B.G. Basic and clinical pharmacology. V.2 / M.: Binom. 2008. 784c] improves the emotional background, has a strong antioxidant and adaptogenic effect, normalizes sleep.
  • a safe and convenient method for temporarily blocking the sexual functions of male mammals, including behavioral phenomena was proposed, and a pharmaceutical composition for its implementation was found.
  • the study of the acute toxicity of the preparation prepared according to example 16 was carried out on clinically healthy male white mice weighing 23-25 g, previously held in 15 day quarantine. Statistical groups consisted of 6 individuals. A total of 5 groups were formed. The animals were monitored for two weeks after administration of the drug, noting the timing of death, the general condition of the animals, the preservation of motor functions, appetite, the condition of the coat, respiration, and reaction to external stimuli.
  • the experimental preparation was administered to white mice intragastrically through an atraumatic metal probe in increasing doses according to Litchfield-Wilcoxon: 2.0 g / kg, 4.0g / kg, 6.0g / kg, 10.0g / kg and 12.0 g / kg. Control animals received water in the same volumes. The results are presented in Table 1.
  • the LD50 was 7.2 g / kg (calculated by the Kerber formula) with a standard error of 0.97 (by the Gaddam formula).
  • LD16 and LD84 were determined, which were 3.48 g / kg and 1 1.5 g / kg, respectively.
  • Group 1 - each animal was treated with 1 ml of the drug.
  • the drug was applied to intact skin along the spine between the shoulder blades for 10 days with a break for 3 and 6 days.
  • Individuals in the control group were treated with distilled water.
  • Clinical observations were performed one day before the application of the drug and 1, 2 and 5 days after the first application. Examination of animals included measuring body temperature, counting the number of heart contractions and respiratory movements, a visual assessment of the general condition and determination of hematological parameters.
  • the dog when applied repeatedly (within 10 days with a break for 3 and 6 days) to dogs of different age groups at a therapeutic dose and exceeding it by three times, it is well tolerated by animals and does not adversely affect the physiological state of the body and hematological parameters.
  • Group 1 animals that received 1 ml of the drug.
  • Group 2 animals that received 3 ml of the drug.
  • the drug was applied to the skin of the back between the shoulder blades. Animals were treated daily for 8 days with a break for 3 and 6 days. Individuals of the third group were injected with distilled water.
  • Clinical observations were carried out one day before the use of the drug, and then 1, 6, 12 hours and 1, 2, 5 days after the first application of the drug. Examination of animals included examination, measurement of body temperature, pulse rate and respiration, as well as the study of hematological and biochemical blood parameters.
  • a study of subchronic toxicity was performed on 15 outbred clinically healthy male rats. Animals were divided into three groups of 5 animals each. The effect of the drug on the animal organism was studied for 15 days at doses of 1/100 and 1/1000 of LD50.
  • the preparation prepared according to example 16 was applied daily subcutaneously to the back region of the 1st group at a dose of 0.07 g / kg and the 2nd group at a dose of 0.007 g / kg.
  • the third group did not apply any drugs.
  • hematological and biochemical blood parameters of animals were analyzed before the experiment and 5 days after the last application of the drug, and conducted macro- and microscopic examination of internal organs (see table 5, 6).
  • Tests regulating the sexual behavior of the drug obtained in example 16 were carried out on 4 domestic purebred clinically healthy cats living with different owners, from May 2013 to November 2014 (see table 7).
  • the drug was applied to animals on the second day of manifestation of sexual hunting in the evening in the amount of 1 ml on the back between the shoulder blades.
  • the experimental drug showed high efficiency as a regulator of sexual behavior for a period of 2 to 6 months in cats.
  • Tests to determine the effectiveness of the drug prepared according to example 16, with the aim of reducing sexual activity and correcting unwanted behavior were carried out on the basis of the shelter for homeless animals SGBOF “Zoozashchita plus” Serpukhov district of the Moscow region from February to April 2014 on 10 clinically healthy cats aged from 12 months to 3 years old weighing 3.3-4.8 kg.
  • the drug was applied once during the evening examination by drip application on dry intact skin in the back between the shoulder blades in a dose of 1 dropper-dropper (1 ml) per animal.
  • Animals of the control group received no drugs.
  • Cats of the experimental and control groups were examined 1 time per day.
  • Tests to determine the therapeutic efficacy of the preparation prepared according to example 16 were carried out from January to February 2015 in LLC Kaliningrad Regional Center for Veterinary Medicine on 14 clinically healthy cats aged from 10 months to 4 years old weighing 2.5-4, 0 kg
  • the animals were divided into two groups - experimental and control, 7 animals each.
  • the test agent was applied once during the evening reception in the clinic by dripping on dry intact skin in the back between the shoulder blades or in the neck at the base of the skull in a dose of 1 ml (20 drops) per animal.
  • Animals of the control group did not receive any drugs and continued to "walk".
  • the cats of the experimental and control groups were examined in the clinic once a week.
  • Tests to determine the therapeutic efficacy of the preparation prepared according to example 19 were carried out from January to March 2015 in LLC Kaliningrad Regional Center for Veterinary Medicine on 14 clinically healthy cats aged from 11 months to 4 years old weighing 2.5-4, 5 kg
  • the animals were divided into two groups - experimental and control, 7 animals each.
  • the test drug was applied to the cats of the experimental group once by drop application to dry intact skin in the back between the shoulder blades or in the neck at the base of the skull in a dose of 1 ml (20-25 drops) per animal.
  • Cats were kept in housing conditions. Animals of the control group did not receive any drugs and continued to "walk".
  • the cats of the experimental and control groups were examined in the clinic once a week.
  • Tests to evaluate the effectiveness of the drug prepared according to example 16 for correcting sexual behavior were carried out on the basis of a shelter for homeless animals SGOF “Zoozashchita plus” Serpukhov district of the Moscow region in the period from February to May 2014 on 12 clinically healthy dogs aged 1.5 up to 5 years weighing 7-35 kg. Animals were kept at the shelter base.
  • mice were divided into two groups - experimental and control, 6 animals each.
  • the drug was applied once during the evening inspection by drip application on dry intact skin in the back between the shoulder blades at a dose of 2 ml per animal weighing from 5 to 15 kg and 4 ml per animal weighing from 15 to 35 kg.
  • Animals of the control group received no drugs. Dogs from the experimental and control groups were examined 1 time per day.
  • Example 1 (Study of regulating the sexual behavior of the proposed drug on males)
  • Tests to determine the therapeutic efficacy of the preparation prepared according to example 16 were carried out in the period from January to February 2015 in LLC Kaliningrad Regional Center for Veterinary Medicine 14 clinically healthy dogs of different breeds weighing 7-30 kg. All animals were at the stage of sexual hunting.
  • the animals were divided into two groups - experimental and control, 7 animals each. Dogs of the experimental group were given the test drug once during the evening reception in the clinic by drip application on dry, intact skin in the region at the base of the skull in doses of 5 to 15 kg - 2 ml; from 15 to 35 kg - 4 ml. Dogs of the experimental and control groups were examined in the clinic once a week.
  • Tests to determine the therapeutic efficacy of the preparation prepared according to example 19 were carried out from January to March 2015 in LLC Kaliningrad Regional Center for Veterinary Medicine on 14 clinically healthy dogs of different breeds weighing 7-30 kg. All animals were at the stage of sexual hunting.
  • the animals were divided into two groups - experimental and control, 7 animals each. Dogs of the experimental group were applied the test drug once during the evening reception in the clinic by drip application to dry, intact skin in the neck at the base of the skull in doses by weight of the dog: from 5 to 15 kg - 2 ml; from 15 to 35 kg - 4 ml. After that, flowing bitches were brought to males and the response to them experimental animals. Dogs of the experimental and control groups were examined in the clinic once a week.
  • the experimental drug showed high efficiency as a regulator of sexual behavior in males.
  • the effect developed within 2-3 days and lasted for at least 30 days of observation.
  • Example 13 (The study regulates the sexual behavior of the proposed drug on cats and dogs)
  • Example 14 (The study regulates the sexual behavior of the proposed drug in cats and dogs)
  • the drug was applied to animals once in the evening on the skin, taking into account the body weight of animals in doses:
  • Example 15 (A study of suppressing signs of sexual arousal by the proposed drug in cats and dogs)
  • the drug was applied to cats once percutaneously in the neck and back at a dose of 1 ml per animal, regardless of body weight.
  • the preparation was applied once percutaneously in the neck and back in a dose of animals weighing less than 5 kg - 1 ml, from 5 to 15 kg - 2 ml; from 15 to 35 kg - 4 ml. Control of the drug was carried out every week according to the owners of the animals.
  • the mass is stirred while heating to 60 ° C until the components are completely dissolved, cooled to room temperature.
  • the pH is adjusted to 4.32 by the addition of stearic acid under the control of an ionometer with an input resistance> 2 G ⁇ .
  • the glass is wrapped with opaque foil.
  • To the resulting solution was added 10 g of base propoxane, 100 g of melatonin and 10 g of 6-chloro-1, 2p-dihydro-17-hydroxy-3'H-cycloprop [1, 2] pregna-1, 4,6-trien-3 , 20-dione acetate (cyproterone acetate). Stir while heating to 40 ° C until the components are completely dissolved.
  • the pH value is adjusted by adding stearic acid to a value of 4.30.
  • the total amount of stearic acid spent on adjusting the pH was 11 g.
  • the solution becomes cloudy.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is packaged in pipettes from polypropylene-floor ivinyl chloride in 1 ml. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the mass is stirred while heating to 60 ° C until the components are completely dissolved, cooled to room temperature.
  • the pH is adjusted to 4.32 by the addition of tartaric acid under the control of an ionometer with an input resistance> 2 G ⁇ .
  • the glass is wrapped with opaque foil. 10 g of butyroxane base, 100 g of melatonin and 10 g of cyproterone acetate are added to the resulting solution. Stir while heating to 40 ° C until the components are completely dissolved. Adjust the pH value by adding stearic acid to a value of 4.25. The total amount of stearic acid spent on adjusting the pH was 10 g. When cooled to room temperature, the solution becomes cloudy. Receive 992 g of the transdermal composition with the following parameters:
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows: 1. Description - mobile muddy liquid mass of a light yellow solution;
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • Example 20 (maximum cyproterone content)
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • Example 21 (average melatonin content, pyruvic acid + citric acid) 391 g of 1,2,3-triacetoxypropane, 150 g of ⁇ , Frequently Too-diethyltoluamide, 200 g of 1, 2-isopropylidenglycerol, are added to a 2-liter beaker equipped with a stirrer SOH of polyoxyethylated tocopherol, 10 g of polyoxyethylated lanolin, 1 g of 3- (octadecyloxy) -1,2-propanediol, 5 g of 2) panthenol and 5 g of N-MeTM-N- (l, 2i?, 3i?, 4 /?
  • the content of melatonin is 164.13 mg / cm; 6.
  • the content of proroxan 10.43 mg / cm 3
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • Example 22 (maximum melatonin content)
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the melatonin content is 108.99 mg / cm 3 ;
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the content of melatonin is 108.59 mg / cm;
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored in vivo in polymer pipettes for two years.
  • the mass is stirred while heating to 60 ° C until the components are completely dissolved, cooled to room temperature.
  • the pH is adjusted to 4.30 by the addition of stearic acid under the control of an ionometer with an input resistance> 2 G ⁇ .
  • the glass is wrapped with opaque foil.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After two years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the mass is stirred while heating to 60 ° C until the components are completely dissolved, cooled to room temperature.
  • the pH is adjusted to 4.17 by the addition of stearic acid under the control of an ionometer with an input resistance> 2 G ⁇ .
  • the glass is wrapped with opaque foil.
  • To the resulting solution were added 100 g of melatonin and 10 g of cyproterone acetate. Stir while heating to 40 ° C until the components are completely dissolved. Adjust the pH value by adding stearic acid to a value of 4.45. The total amount of stearic acid spent on adjusting the pH was 9 g. When cooled to room temperature, the solution becomes cloudy.
  • Get 981 g of the transdermal composition with the following parameters:
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes.
  • the pH is adjusted to 4.37 by the addition of stearic acid under the control of an ionometer with an input resistance> 2 G ⁇ .
  • the glass is wrapped with opaque foil.
  • To the resulting solution was added 15 g of tropafen, 100 g of melatonin and 10 g of cyproterone acetate. Mix the mass when heated to 40 ° C until the components are completely dissolved.
  • the pH value is adjusted by adding stearic acid to a value of 4.30.
  • the total amount of stearic acid spent on adjusting the pH was 10 g. When cooled to room temperature, the solution becomes cloudy.
  • Example 30 (selective ⁇ -blocker - prazosin)
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes.
  • the control group was not given any drugs.
  • the testosterone content in the blood of experimental animals was studied.
  • the hormone content was determined by the radioimmune chemiluminescent method.
  • Venous blood was sampled on an empty stomach in an amount of 1-2 ml before administration, 12.24 hours after transdermal administration of experimental drugs and then once a week. Blood samples were stored in the refrigerator. Serum was prepared from whole blood samples.
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is packaged in 1 ml polypropylene-polyvinyl chloride pipettes. After 2 years of storage, the parameters of the drug are as follows:
  • the drug is stable when stored under natural conditions in polymer pipettes for two years.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области ветеринарии. Предложен способ временного блокирования половых функций самцов млекопитающих, включая поведенческие феномены (поиск партнера, вокализация, и т.п.). Способ предполагает одно/двукратное введение животному фармацевтической композиции, включающей в качестве действующих веществ α-адреноблокатор, тропный к задним ядрам гипоталамуса, мелатонин и стероидное соединение с гестагенной активностью. Способ позволяет при минимальной дозе стероидного гормона блокировать половое поведение самцов животного на срок от нескольких недель до полугода (в зависимости от продолжительности светового дня). Фармацевтическая композиция предназначена для трансдермального введения в любой период цикла. Применение препарата не сопровождается побочными эффектами, характерными для данного вида лекарственных средств.

Description

Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области ветеринарии, а именно, к способу временного блокирования или торможения половых функций самцов млекопитающих животных, включая поведенческие феномены (поиск партнера, дромомания, внутривидовая агрессия и агрессия по отношению к хозяину, «мечение» территории, вокализация и т.п.). Способ предполагает одно/двукратное введение животному фармацевтической композиции, включающей в качестве действующих веществ α-адреноблокатор, тропный к задним ядрам гипоталамуса, мелатонин и стероидное соединение с гестагенной активностью. Способ позволяет при минимальной дозе опасного для здоровья животных стероидного гормона блокировать половое поведение самцов на срок от нескольких недель до полугода. Фармацевтическая композиция вводится трансдермально в форме «Спот-он».
Уровень техники
Половое поведение самцов собак и кошек в весенний период (удлиняющийся - длинный световой день) активизируется, что ведет к неприятным для владельцев животных изменениям в их поведении. Самцы становятся агрессивными (в том числе нередко и по отношению к хозяину), беспокойными, активно ищут партнера, что сопровождается дромоманией - «убеганием», при этом животные часто теряются, резко возрастает вероятность заражения зоонозными заболеваниями, включая бешенство. Мало приятны также особенности поведения самцов, такие как «мечение» территории, вокализация, животные могут царапать и грызть предметы домашней обстановки и т.п. Поэтому проблема подавления в первую очередь поведенческих феноменов полового поведения самцов в ветеринарии мелких домашних животных крайне актуальна. Наиболее эффективным методом решения этих проблем является стерилизация самцов животных, тем более что хирургическое вмешательство в случае самцов проще, безопаснее и дешевле, чем в случае самок. Однако в ряде случаев необратимая кастрация самцов может быть неприемлема - к примеру, при использовании ценных животных для разведения, для выставочных и служебных собак и т.п. Кастрация существенно изменяет поведение животного, придает черты апатичности и пассивности, значительно влияет на обмен веществ и экстерьер животных (в частности, резко возрастает склонность к ожирению, развитию диабета, рвотные позывы, артериальная гипертензия, тромбофлебиты, тромбоэмболия, гинекомастия). Таким образом, существует необходимость в фармацевтическом управлении половыми функциями самцов, не сопровождающимися необратимыми изменениями органов и систем животного. В гуманной медицине известно применение временной химической кастрации (как женщин, так и мужчин) введением в виде депо (пролонгированные инъекционные формы) повышенных количеств гипоталамических рилизинг-гормонов, это ведет к нарушению синхронизации системы гипоталамус-гипофиз, и в конечном итоге к блокированию на время поступления в кровь продуцируемых гипофизом гонадотропинов [Щекина Е.Г. Мужская контрацепция - завтрашний день! // Провизор. 2004. Вып.11]. Преимущественно данный метод применяют в онкологии, для лечения гормонозависимых опухолей [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е издание, переработанное, исправленное и дополненное / М: Новая волна, 2012]. Для применения этого метода в ветеринарии мелких домашних животных необходима разработка удобных инъекционных форм с более медленным высвобождением и адекватными дозами. Применение ограничивает также и высокая стоимость как самих рилизинг-гормонов, так и компонентов пролонгированных инъекционных форм. Наибольшее распространение получило введение самцам больших доз гестагенов, аналогично самкам, что в итоге по механизму обратной связи ингибирует продукцию гонадотропинов и вызывает эффекты временной химической кастрации. В России широко используют те же препараты на основе мегестрола ацетата, что и применяемые для контрацепции самок [RU2163809, опубл. 10.03.2001]. Однако для развития достоверного и быстрого подавления полового поведения самцов необходимо введение гестагенов более длительно и(или) в повышенных дозах, т.к. отклик гипофизарных структур у самцов ниже ввиду специфичности рецепторов. Применение гестагенов для воздействия на половое поведение самцов сопровождается большим количеством побочных эффектов, часто необратимых: угнетается кора надпочечников и нарушается выделение кортикостероидов, нередко повреждается поджелудочная железа, с развитием в той или иной степени диабета, практически всегда обнаруживаются гепатотоксические эффекты, возникают холециститы. В особенности для котов характерно развитие инфекций мочеполовой системы, с проявлением циститов и пиелонефритов и 16 000498
3
последующим уролитиазом (мочекаменная болезнь). Для молодых самцов нередко обнаруживают акромегалию. Почти всегда обнаруживается гиперплазия молочных желез с частым возникновением в последующем аденокарциномы. Поведение животных становится пассивным, они набирают избыточный вес. В значительной степени и на длительное время нарушается функционирование гонад, что приводит к неудачным вязкам спустя длительное время после прекращения введения гестагенов. Медленное развитие эффектов подавления полового поведения часто не спасает от «убегания» по следу самки в состоянии течки, со всеми последующими проблемами. Таким образом, попытки оказать воздействие на половое поведение самцов одним лишь введением гестагенов оставляют желать лучшего решения проблемы.
Известно применение для целей контрацепции у женщин сочетания гестагенов и мелатонина с возможным дополнительным введением эстрогена [RU21 14621, опубл. 10.06.1998], а также сочетания гестагенов и более активных производных мелатонина [ЕР0641565, опубл. 08.03.1995]. Мелатонин является гормоном эпифиза, нормализует биологические ритмы, оказывает адаптогенное действие на организм, относительно безвредное вещество и используется в широком терапевтическом интервале и широком диапазоне доз. Так в терапевтических дозах он используется для улучшения мужского и женского гаметогенеза [ЕР2253228, опубл. 24.11.2010]. Однако в повышенных дозах мелатонин подавляет овуляцию, а в сочетании со стероидами позволяет снизить дозу последних в препарате, что нивелирует их побочное действие [Хунданов Л., Гладков А., Левашова В. Жить долго и счастливо. Ученых заинтересовал мелатонин // Мед.вестн. 1997. Jfe 10 (77). С. 1-3.]. Для целей контрацепции овец, коз и других племенных животных используют мелатонин и его производные в форме имплантата как для самок (с целью задержки течки), так и для самцов (снижение спермопроизводства) [ЕР0246910, опубл. 25.11.1987]. Недостатком изобретения является сложный процесс изготовления имплантата, а также трудности для хозяев домашних животных введения его под кожу беспокойным питомцам.
Известно сочетание α-адреноблокаторов с гестагенами и(или) эстрогенами с целью контрацепции и с целью снижения половой активности как самцов, так и самок в ветеринарии [Корхов В.В. и др. Посткоитальные стероиды и нестероидные контрацептивы // Фармакология и токсикология, 1980, Т. 43 (1), С. 94-96; Корхов В.В., Вещилова Т.П. Контрацептивная активность сочетания стероидов и антиадренергических препаратов // Бюл. эксперим. биол. и мед., 1975, Т. 79 (4), С. 77-79; RU2233586, опубл. 10.08.2004]. Недостатком данного изобретения является невысокий контрацептивный эффект комбинации (55%) и недоступность на рынке используемого синтетического гестагена.
Задачей предлагаемого изобретения является нахождение максимально безопасного и удобного в применении способа временного блокирования половых функций самцов млекопитающих, включая поведенческие феномены (поиск партнера, вокализация, и т.п.). Технический результат данного изобретения заключается в получении высокоэффективной фармацевтической композиции для нанесения «Спот-он» в любой период полового цикла, которая позволяет легко решить вопросы изменения полового поведения самцов млекопитающих.
Раскрытие изобретения
При исследовании контрацептивных эффектов сочетания мелатонина и гестагенов с целью получения, по меньшей мере, эффекта подавления агрессивных реакций у «гуляющих» самцов нами был дополнительно введен известный неселективный а- адреноблокатор пророксан [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е издание, переработанное, исправленное и дополненное / М.: Новая волна, 2012], который взаимодействует с альфа-адренорецепторами задних ядер гипоталамуса, ответственных за формирование полового поведения. Пророксан снижает возбуждение, подавляет агрессивность, нормализует вестибулярную функцию без проявления значимых седативных и других побочных эффектов. Неожиданно было обнаружено, что в этом случае коррекция активного полового поведения самцов животных происходит после одного/двух применений описанного выше сочетания биологически активных веществ и продолжается сроком от нескольких недель до полугода. Эффект развивается быстро (от 12 часов), при этом блокируются поведенческие феномены полового поведения - поиск партнера, вокализация, агрессивность, возбуждение и т.п., и проявляются явно ювенильные особенности - активизация игрового и исследовательского поведения, животное становится дружелюбным. Данная комбинация активных веществ для снижения активного полового поведения не была обнаружена нами в литературе.
Введение только гестагена, либо введение гестагена в сочетании только с мелатонином либо только с α-адреноблокатором, также как и введение мелатонина только с α-адреноблокатором, не позволило получить значительную эффективность композиции и максимально возможно снизить дозу стероидного компонента в препарате.
В качестве гестагена нами был выбран ципротерона ацетат, который обладает высокой аффинностью к андрогенным рецепторам как в структурах гипоталамуса, так и гипофиза у самцов и блокирует их, не проявляя андрогенного воздействия, препятствующего быстрому купированию половой активности. Замена обычно используемого мегестрола ацетата на ципротерона ацетат позволила существенно увеличить эффект, снизить нагрузку прогестагенным гормоном и увеличить физиологичность воздействия на организм самцов. Эффективность этого воздействия при этом выше при введении препарата в вечернее время, что делает правомерной гипотезу о преобладающем значении мелатонина в развитии эффекта. Введение в композицию α-адреноблокатора позволило максимально быстро и пролонгированно купировать симптомы возбужденного поведения самцов.
В качестве неселективного α-адреноблокатора можно использовать близкие по свойствам пророксан или(и)бутироксан (см. пример 16, 17, 18 и др.), либо аналогичные по фармакологическим и химическим свойствам биологически активные вещества (БАВ). Другие проверенные селективные и неселективные α-адреноблокаторы не оказались столь эффективными и описанный эффект не вызывали (см. пример 31), что, по-видимому, обуславливается специфическим воздействием пророксана и бутироксана на структуры мозга.
В качестве прогестинового компонента используют гестагены, обладающие наибольшей аффинностью к соответствующим рецепторам: 6-хлор-1Р,2Р-дигидро-17- гидрокси-3'Н-циклопропа[1 ,2]прегна-1 ,4,6-триен-3,20-дионацетат (ципротерона ацетат) или (и) 17а-цианометил-17Р-гидроксиэстра-4,9-диен-3-он (диеногест), или (и) (6R,7R,8R,9S,10R,13S,14S,15S,16S,17S)-l,3',4',6,6a,7,8,9,10,l 1,12,13,14, 15,15а,16 - гексадекагидро- 10, 13-диметилспиро-[17Н-дициклопропа-[6,7: 15, 16]циклопента[а]фе- нантрен-17,2'(5'Н)-фуран]-3,5'(2Н)дион (дроспиренон). Применение ципротерона ацетата наиболее актуально из-за коммерческой доступности гормона.
Для гестагена и α-адреноблокатора дозы не должны превышать обычно используемые терапевтические, т.к. в противном случае резко возрастает вероятность неблагоприятных побочных эффектов. Мелатонин же практически безопасен при очень значительном превышении доз.
Можно было ожидать, что мелатонин и пророксан в составе трансдермальных форм будут обладать хорошей транскутанной биодоступностью, а гестаген, концентрации которого в крови животного не столь критичны для выраженности эффекта, также при определенном составе трансдермальной фармацевтической композиции, попадет в достаточном количестве в кровоток и окажет системное действие при минимальных местных эффектах. Была подобрана фармацевтическая композиция, предназначенная для трансдермального введения, содержащая (масс.%):
Гестаген Терапевтические
количества
Мелатонин Терапевтические
количества
а- Адреноблокатор, тропный к Терапевтические задним ядрам гипоталамуса количества
N-Menui-N-( 1 ,2R,3i?,4R,5S- 0,5
пентагидроксигексил)- октадеканамид
(Стеариламид меглюмина)
/ пантенол 0,5
Полиоксиэтилированный а- 9,3-10,2
токоферол
Полиоксиэтилированный 1
ланолин
3 -(октадецилокси)- 1 ,2- 0,1
пропандиол (Батилол)
Карбоновая кислота 0, 1 - 1 , 1
Ν,Ν-диэтилтолуамид 13,9-15,3
1 ,2-изопропилиденглицерол 18,6-20,4
1,2,3-триацетоксипропан до 100 которая обеспечила биологический эффект при введении «Спот-он», идентичный оральным способам введения, но применение препарата значительно более удобно. При этом не обнаруживается раздражения кожи, животные не ощущают момент нанесения и дискомфорт в зоне нанесения, поэтому отсутствует расчесывание и вылизывание.
Наилучшие результаты были отмечены при сочетании следующих компонентов (масс.%):
Ципротерона ацетат 0,9-2,0
Мелатонин 10-17,2
Пророксан основание 0,9-2,0
Ν-Μετ^-Ν-( 1 ,2R,3R,4R,5S- 0,5
пентагидроксигексил)- октадеканамид
Л-пантенол 0,5
полиоксиэтилированный 10
а-токоферол
полиоксиэтилированный 1
ланолин
З-(октадецилокси)- 1 ,2- 0,1
пропандиол
Стеариновая кислота 1,1
Ν,Ν-диэтилтолуамид 15
1 ,2-изопропилиден глицерола 20
1 ,2,3-триацетоксипропан До 100
Нижние концентрации биологически активных веществ выбраны из условия минимальных количеств БАВ, вызывающих гарантированный эффект при технически допустимом объеме готовой лекарственной формы «Спот-он» для данного вида животных (см. пример 9, 12, 19). Так для котов оптимальная разовая объемная доза - 0,5- 2 мл, т.к. при большем количестве раствор растекается на недопустимо большой площади и смачивает шерсть. Верхние пределы концентраций пророксана и ципротерона ацетата выбраны исходя из известных данных токсичности этих компонентов при удобных количествах наносимой формы «Спот-он» и растворимости их в фармацевтической композиции (см. пример 20, 24). Верхний предел концентрации мелатонина определяется его растворимостью в выбранном составе растворителей (см. пример 22).
Важным также оказалась необходимость стабилизации значения рН композиции на уровне 4-6, т.к. при большем значении рН быстро разрушается БАВ (например, ципротерона ацетат), а при меньшем существует вероятность раздражения кожи животного (см. пример 32, 33). Данное значение рН легко получить необходимой добавкой при ионометрическом контроле подходящей карбоновой кислоты: глицирризиновой или(и) янтарной или(и) молочной, или(и) пировиноградной, или(и) лимонной, или(и) яблочной, или(и) винной, или(и) стеариновой, или(и) миристиновой, или(и) октановой или(и) лауриновой кислоты (см. примеры 16, 18, 21, и др.) и др. Как показала практика необходимое количество карбоновой кислоты колеблется в зависимости от молекулярной массы и степени диссоциации от 0,1 до 1,1 масс%.
Проведенные биологические испытания (см. пример 6-15) показали, что разработанная фармацевтическая композиция при однократном (реже двукратном) нанесении самцам быстро и полностью блокирует поведенческие феномены активного полового поведения, при этом эффект развивается в течение 12-72 часов и сохраняется обычно от одного месяца до полугода, что позволяет свести к минимуму количество вводимого в организм животного стероидного соединения, а следовательно вероятность тяжелейших, часто летальных побочных эффектов, развивающихся при длительном системном введении животному гормонально активных стероидов. Проявляющиеся после применения препарата ювенильные особенности поведения животного - игровое и познавательное поведение при отсутствии агрессивности - комфортно для владельцев животных. Препарат не влияет на навыки служебных собак, ингибирование полового поведения благоприятно сказьшается на продуктивности их работы. Препарат обратимо блокирует фертильные функции самцов, которые восстанавливаются сразу после прекращения его действия. Фармацевтическая композиция удобна в применении - используется для трансдермального введения в форме «Спот-он» в любой период полового цикла. Присутствующий в композиции мелатонин по литературным данным [Катцунг Б.Г. Базисная и клиническая фармакология. Т.2 / М.:Бином. 2008. 784с] улучшает эмоциональный фон, обладает сильным антиоксидантным и адаптогенным действием, нормализует сон. Таким образом, предложен безопасный и удобный способ временного блокирования половых функций самцов млекопитающих, включая поведенческие феномены, и найдена фармацевтическая композиция для его осуществления.
Осуществление изобретения
Пример 1. (Исследование острой токсичности у белых мышей)
Материалы и методы:
Исследование острой токсичности препарата, приготовленного по примеру 16, проводили на клинически здоровых самцах белых мышей массой 23-25 г, предварительно выдержанных на 15 дневном карантине. Статистические группы состояли из 6 особей. Всего было сформировано 5 групп. За животными вели наблюдение в течение двух недель после введения препарата, отмечая сроки гибели, общее состояние животных, сохранение двигательных функций, аппетита, состояние шерстяного покрова, дыхания, реакцию на внешние раздражители.
Испытания проводились в соответствии с «Методическими рекомендациями по изучению общетоксического действия фармакологических веществ», утверждённых Минздравом России, 2005 г.
Экспериментальный препарат вводили белым мышам внутрижелудочно через атравматичный металлический зонд в возрастающих дозах по Литчфилду-Уилкоксону: 2,0 г/кг, 4,0г/кг, 6,0г/кг, 10,0г/кг и 12,0 г/кг. Контрольные животные получали воду в тех же объемах. Результаты представлены в Таблице 1.
Таблица 1
Результаты исследования острой токсичности
экспериментального препарата при внутрижелудочном введении(мыши)
Figure imgf000011_0001
ЛД50 составило 7,2 г/кг (рассчитано по формуле Кербера) при стандартной ошибке 0,97 (по формуле Гаддама). С помощью графического метода анализа зависимости «доза-эффект» определили LD16 и LD84, которые составили 3,48 г/кг и 1 1,5 г/кг соответственно.
Результаты:
Установлено, что LD50 (в/ж) =7,2±0,97 г/кг, что позволяет отнести данный препарат к 4 классу опасности (малотоксичное соединение) по ГОСТ 12.1.007-76.
Клиника острого отравления характеризовалась выраженным угнетением, вялостью животных почти сразу после введения. Затем наступал наркоз, из которого часть животных выходила, а часть погибала на 2-3 сутки. При проведении патологоанатомического вскрытия у погибших животных была отмечена гиперемия слизистой желудка, кровоизлияния на ходу кровеносных сосудов, полнокровие печени и почек.
Пример 2. (Исследование кожно-резорбтивного действия предлагаемого препарата) Материалы и методы:
Изучение кожно-резорбтивного действия препарата, приготовленного по примеру 18, изучалось в однократном и повторном (5 дней) опытах на белых крысах-самцах массой 180-200г. Для исследования были отобраны клинически здоровые особи без видимых повреждений кожного покрова. Животные были разделены на три группы:
1 группа - контроль (10 животных).
2 группа - однократная обработка (10 животных).
3 группа - пятикратная обработка (10 животных).
Целью однократного опыта являлось определение смертельных доз и соответственно определение кожно-орального коэффициента (К к/о):
ЛД50кожа
К к/о= ;
ЛД50желудок
Для этого, препарат в объеме 1 мл (5,0 г/кг) наносился на выстриженный участок кожи спины крысы размером 4x4 (2 раза в течение двух часов). Суммарная доза составила 10 г/кг. Результаты;
Клиническая картина интоксикации животных после однократной обработки практически не отличалась от контроля. Животные были активны, подвижны, хорошо поедали корм. Гибель животных не отмечалась. Аналогичные результаты получены в пятикратном эксперименте, где препарат наносился ежедневно в дозе 5,0 г/кг (1,0 мл на крысу).
Не было отмечено раздражающего действия препарата на кожу ни в одном из опытов. Не наблюдалось покраснения кожи, расчёсов, отёка, утолщения кожной складки.
Вывод: таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что препарат не обладает кожно-резорбтивным действием.
Пример 3. (Изучение переносимости предлагаемого препарата на кобелях)
Материалы и методы:
Исследование по переносимости препарата, приготовленного по примеру 16, проводили на 6 клинически здоровых кобелях метисах в возрасте от 15 месяцев до 4-х лет и массой 3,5-4,7кг. Животные были разделены на 3 группы по 2 особи в каждой:
1 группа - каждое животное обрабатывали 1 мл препарата.
2 группа - каждое животное обрабатывали 3 мл препарата.
3 группа - контрольная (без обработки).
Препарат наносили на неповрежденную кожу вдоль позвоночника между лопатками в течение 10 дней с перерывом на 3 и 6 дни. Особей контрольной группы обрабатывали дистиллированной водой. Клинические наблюдения проводили за сутки до нанесения препарата и через 1, 2 и 5 суток после первого применения. Обследование животных включало измерение температуры тела, подсчета количества сердечных сокращений и дыхательных движений, визуальную оценку общего состояния и определение гематологических показателей.
Результаты:
Многократное нанесение препарата в терапевтической и превышающей ее в три раза дозах не вызывало никаких отклонений от нормы в физиологическом статусе животных. Температура тела варьировала от 38,0 до 38,5 °С (при физиологической норме 37,5 - 39,0 °С). Частота пульса находилась в пределах колебаний от 70 до 77 ударов в минуту (норма 70-80). Количество дыхательных движений было от 15до 30 (норма 10-30). Общее состояние кобелей опытных групп не отличалось от состояния контрольных животных. Отмечено угнетение и отказ от корма особей второй группы в последние 2 дня опыта. Результаты гематологического исследования представлены в таблице 2.
Таблица 2
Влияние экспериментального препарата
на морфологический состав крови кобелей
Figure imgf000014_0001
Таким образом, препарат при многократном (в течение 10 дней с перерывом на 3 и 6 дни) нанесении кобелям разных возрастных групп в терапевтической дозе и превышающей ее в три раза хорошо переносится животными, не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние организма и гематологические показатели.
Пример 4. (Изучение переносимости предлагаемого препарата на котах) Материалы и методы:
Исследование переносимости препарата, приготовленного по примеру 16, на котах проводили на 9 клинически здоровых метисах в возрасте от 15 месяцев до 3,5 лет массой 3,5-5,0кг. Животные были разделены на 3 группы по три особи в каждой:
1 группа - животные, получавшие 1 мл препарата. 2 группа - животные, получавшие 3 мл препарата.
3 группа - контрольная.
Препарат наносили на кожу спины между лопатками. Животных обрабатывали ежедневно в течение 8 дней с перерывом на 3 и 6 дни. Особям третьей группы вводили дистиллированную воду.
Клинические наблюдения проводили за сутки до применения препарата, а затем через 1, 6, 12 часов и 1, 2, 5 дней после первого нанесения препарата. Обследование животных включало осмотр, измерение температуры тела, частоты пульса и дыхания, а также изучение гематологических и биохимических показателей крови.
Результаты:
Никаких отклонений от нормы в физиологическом статусе животных не отмечалось, аппетит сохранен, температура тела варьировала от 38,5 до 39,0°С, частота пульса находилась в пределах 100-110 ударов в минуту (норма 100-125), частота дыхания 20-25 (норма 20-30) дых.движ./мин, общее состояние опытных животных не отличалось от состояния контрольных.
Применение препарата не вызвало изменений в гематологических и биохимических показателях крови животных (таблица 3, 4).
Таблица 3
Влияние экспериментального препарата
на морфологический состав крови котов
Mb Эритроциты, Гемоглобин, Лейкоциты,
Группа
п/п 1012/л г/л 109/л
Обработка препаратом в
1 6,8±0,3 96,2±10,8 10,8±0,2
терапевтической дозе
Обработка препаратом в
2 трехкратно увеличенной 6,5±0,2 88,4±9,4 9,2±0,4
терапевтической дозе
3 Контрольная 8,0±0,1 98,8±7,8 9,7±0,1 Таблица 4
Влияние экспериментального препарата
на биохимические показатели состава крови котов
Figure imgf000016_0001
Вывод: коты хорошо переносили экспериментальный препарат при его многократном применении в терапевтической дозе и превышающей ее в 3 раза.
Пример 5. (Изучение субхронической токсичности на крысах)
Материалы и методы:
Изучение субхронической токсичности проводили на 15 беспородных клинически здоровых крысах-самцах. Животные были разделены на три группы по 5 особей в каждой. Воздействие препарата на организм животных изучали в течение 15 дней в дозах 1/100 и 1/1000 от LD50. Препарат, приготовленный по примеру 16, наносили ежедневно накожно в область спины 1-й группе в дозе 0,07 г/кг и 2-й группе в дозе 0,007 г/кг. Третьей группе никаких препаратов не наносили. В ходе исследования анализировались гематологические и биохимические показатели крови животных до начала эксперимента и через 5 дней после последнего нанесения препарата,а также было проведено макро- и микроскопическое исследование внутренних органов (см. таблицу 5, 6).
Результаты:
Таблица 5
Гематологические и биохимические показатели крови крыс до начала и после проведения эксперимента
Группа животных
Единицы
Показатели 1 2 3
измерения
(0,07 г/кг) (0,007 г/кг) (контроль)
До начала
Эритроциты 1012/л 8,0±0,3 7,7±0,5 8,0±0,7
Гемоглобин г/л 13,8±0,2 14,4±0,3 14,0±0,4
Лейкоциты 10 л 5,7±0,6 5,9±0,2 6,1±0,4
Лимфоциты % 67,5±2,1 72,4±1,7 71,7±0,9
Общий белок г/л 55,0±0,5 56,2±0,7 56,1±0,3
Глюкоза ммоль/л 5,7±1,1 5,5±1 ,7 6,0±0,9
Мочевина ммоль/л 4,0±0,2 4,5±0,1 4,8±0,3
Креатинин ммоль/л 0,3±0,03 0,4±0,02 0,5±0,04
Щелочная
Ед/л 34,8±1,6 34,8±1,6 28,8±1,2 фосфатаза
ерез 5 дней после последнего нанесения препарата
Эритроциты 10"/л 7,7±0,2 7,5±0,7 8,0±0,3
Гемоглобин г/л 12,0±0,7 12,8±0,9 13,6±0,9
Лейкоциты 10% 6,4±0,3 6,2±0,2 5,8±0,7
Лимфоциты % 64,6±4,9 66,4±7,7 69,2±5,3
Общий белок г/л 50,8±1,7 52,2±2,3 54,4±2,9
Глюкоза ммоль/л 6,8±0,4 6,2±0,2 6,0±0,9
Мочевина ммоль/л 4,0±0,2 4,1 ±0,3 3,9±0,1
Креатинин ммоль/л 0,4±0,02 0,6±0,01 0,4±0,03
Щелочная
Ед/л 34,8±5,6 36,2±7,5 30,4±4,9 фосфатаза Гематологические и биохимические показатели крови крыс 1 и 2 групп были на уровне показателей в контроле (3 группа) и соответствовали физиологической норме для животных данного пола и возраста.
Макро- и микроскопическое исследования внутренних органов крыс показали: серозные оболочки гладкие, блестящие, дыхательные пути свободны. Сердце, печень, почки, селезенка, органы желудочно-кишечного тракта, поджелудочная железа, надпочечники, тимус, семенники обычной консистенции, окраски, размеров. Печень у всех крыс нормальной гистоструктуры, у одной из 1-ой группы была отмечена умеренная, очаговая зернистая дистрофия гепатоцитов. Почки - во всех случаях полнокровие капилляров, особенно в составе клубочков, а также в интерстиции, эпителий прямых и извитых канальцев не изменен. Сердце - кардиомиоциты обычного вида, адекватная васкуляризация. Легкие - бронхиальное дерево без особенностей. Селезенка - увеличение доли красной пульпы, реакция фолликулов в виде размытых границ, без светлых центров размножения. Поджелудочная железа - во всех случаях дольки разделены жировой тканью, в паренхиме - нормальные островки и паренхима. Надпочечники - нормальные соотношения и полнокровие слоев. Тимус - крупные дольки со сливающимися светлыми центрами, умеренное полнокровие. Семенники - как в контроле, так и в опыте содержали зрелые нормальные сперматозоиды в придатке. Тонкая кишка - во всех случаях соответствовала возрастной гистоструктуре.
Массовые коэффициенты внутренних органов крыс представлены в таблице 6.
Таблица 6
Массовые коэффициенты внутренних органов крыс после 15 дневного нанесения экспериментального препарата
Figure imgf000018_0001
Вывод: проведенные исследования показали, что длительное применение экспериментального препаратав дозах выше терапевтических не вызывает изменения гематологическихи биохимических показателей крови лабораторных животных и не оказывает отрицательное воздействие на морфологию внутренних органов.
Пример 6. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах)
Материалы и методы:
Испытания регулирующего половое поведение препарата, полученного по примеру 16, проводились на 4 домашних беспородных клинически здоровых котах, живущих у разных хозяев, в период с мая 2013 по ноябрь 2014 г (см. таблицу 7).
Таблица 7
Figure imgf000019_0001
Препарат животным наносили на второй день проявления половой охоты в вечернее время в количестве 1 мл на спину между лопатками.
Результаты:
После применения препарата хозяевами котов отмечалось исчезновение проявлений половой охоты, успокоение животных, снижение агрессивности, снижение проявлений вокализации.
У одного кота половая охота возобновились спустя 2 месяца после применения препарата, у одного кота— спустя 6 месяцев, у двух - спустя 3 месяца.
Побочных эффектов препарата не было отмечено. Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения на срок от 2 до 6 месяцев у котов.
Пример 7. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах)
Материалы и методы:
Испытания по определению эффективности применения препарата, приготовленного по примеру 16, с целью снижения половой активности и коррекции нежелательного поведения (повышенная агрессивность и вокализация, поиск полового партнера, мечение территории мочой) проводились на базе приюта для бездомных животньк СГОБФ «Зоозащита плюс» Серпуховского района Московской области в период с февраля по апрель 2014г на 10 клинически здоровых котах в возрасте от 12 месяцев до 3 лет массой 3,3-4,8 кг.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 5 особей в каждой. Котам опытной группы препарат наносили однократно во время вечернего осмотра путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в области спины между лопатками в дозе 1 пипетка-капельница (1 мл) на животное. Животные контрольной группы никаких препаратов не получали. Котов опытной и контрольной группы осматривали 1 раз в день.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов двум котам опытной группы, препарат наносили повторно в той же дозе.При применении препарата побочных явлений и осложнений у котов не наблюдалось. Признаки полового возбуждения и связанного с ним поведения не отмечали у опытных животных в течение всего периода наблюдения (67 дней), эффект наступал на 1-2 сутки.
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения у котов. Эффект развивался быстро за 1-2 суток и сохранялся в течение 67 дней наблюдения. Пример 8. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах)
Материалы и методы:
Испытания по определению терапевтической эффективности препарата, приготовленного по примеру 16, проводились в период с января по февраль 2015 г в ООО «Калининградский областной центр ветеринарной медицины» на 14 клинически здоровых котах в возрасте от 10 месяцев до 4 лет массой 2,5-4,0 кг.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 7 особей в каждой. Котам опытной группы в период повышенной половой активности на 2-3 день проявления признаков наносили испытуемое средство однократно во время вечернего приема в клинике путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в области спины между лопатками или в области шеи у основания черепа в дозе 1 мл (20 капель) на животное. Животные контрольной группы никаких препаратов не получали и продолжали «гулять». Котов опытной и контрольной группы осматривали в клинике 1 раз в неделю.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов двум котам опытной группы, препарат нанесли повторно в той же дозе. Применение препарата побочных явлений и осложнений у котов не выявило. Половая активность у 5 котов опытной группы прекратилась на 2-ые сутки, у 2 - на 3-тьи сутки. За 30 дней исследования у 4 котов контрольной группы половая активность регистрировалась трижды, у 3 котов дважды. У всех котов опытной группы половая активность за 30 дней проведения опыта не наступила.
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения у котов. Эффект развивался за 2-3 суток и сохранялся в течение 30 дней наблюдения.
Пример 9. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах) Материалы и методы:
Испытания по определению терапевтической эффективности препарата, приготовленного по примеру 19, проводились в период с января по март 2015 г в ООО «Калининградский областной центр ветеринарной медицины» на 14 клинически здоровых котах в возрасте от 11 месяцев до 4 лет массой 2,5-4,5 кг.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 7 особей в каждой. Котам опытной группы в период повышенной половой активности наносили испытуемый препарат однократно путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в области спины между лопатками или в области шеи у основания черепа в дозе 1 мл (20-25 капель) на животное. Коты содержались в квартирных условиях. Животные контрольной группы никаких препаратов не получали и продолжали «гулять». Котов опытной и контрольной группы осматривали в клинике 1 раз в неделю.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов трем котам опытной группы, препарат нанесли повторно в той же дозе. При применении препарата побочных явлений и осложнений у животных не наблюдалось. Половая активность у 4 котов опытной группы прекратилась на третьи сутки, у 3 - на четвертые сутки. За 40 дней исследования у котов контрольной группы половая активность не прекратилась, животные «метили» территорию. У всех котов опытной группы половая активность за 28 дней не наступила. На 33-ий день 2 кота пометили территорию, на 35-ый день 2 кота загуляли, периодически кричали и беспокоились. Остальные животные опытной группы стали беспокойньми, 2 кота на 38-ой день опыта пометили территорию, стали агрессивными.
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения у котов. Эффект развивался за 3-4 суток и сохранялся минимум в течение 28 дней наблюдения.
Пример 10. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на кобелях) Материалы и методы:
Испытания по оценке эффективности применения препарата, приготовленного по примеру 16, для коррекции полового поведения проводились на базе приюта для бездомных животных СГОБФ «Зоозащита плюс» Серпуховского района Московской области в период с февраля по май 2014г на 12 клинически здоровых кобелях в возрасте от 1,5 до 5 лет массой 7-35 кг. Животные содержались на базе приюта.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 6 особей в каждой. Кобелям опытной группы препарат наносили однократно во время вечернего осмотра путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в области спины между лопатками в дозе 2 мл на животное массой от 5 до 15 кг и 4 мл на животное массой от 15 до 35 кг. Животные контрольной группы никаких препаратов не получали. Кобелей опытной и контрольной группы осматривали 1 раз в день.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов двум животным опытной группы, препарат наносили повторно в той же дозе. При применении препарата побочных явлений и осложнений у кобелей не наблюдалось. Признаки снижения агрессивности и половой активности у собак опытной группы прекратились на 2-3 день после применения препарата. Собаки контрольной группы вели себя без изменения поведения. Спустя 76 дней после нанесения препарата у животных опытной группы не отмечалось выраженного нежелательного поведения.
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения кобелей. Эффект развивался за 2-3 суток и сохранялся в течение 76 дней наблюдения.
Пример 1 1. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на кобелях)
Материалы и методы:
Испытания по определению терапевтической эффективности препарата, приготовленного по примеру 16, проводились в период с января по февраль 2015 г в ООО «Калининградский областной центр ветеринарной медицины» на 14 клинически здоровых кобелях разных пород массой 7-30 кг. Все животные находились в стадии половой охоты.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 7 особей в каждой. Кобелям опытной группы наносили испытуемое средство однократно во время вечернего приема в клинике путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в областынеи у основания черепа в дозах по массе собаки т 5 до 15 кг- 2 мл; от 15 до 35 кг - 4 мл. Кобелей опытной и контрольной группы осматривали в клинике 1 раз в неделю.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов двум собакам опытной группы, препарат нанесли повторно в той же дозе. Беспокойное поведение животных опытной группы прекратилось через 48-72 часа после дачи препарата и не возобновлялось в течение 30 дней (период наблюдения).
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения кобелей.Эффект развивался за 2-3 суток и сохранялся в течение 30 дней наблюдения.
Пример 12. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на кобелях)
Материалы и методы:
Испытания по определению терапевтической эффективности препарата, приготовленного по примеру 19, проводились в период с января по март 2015 г в ООО «Калининградский областной центр ветеринарной медицины» на 14 клинически здоровых кобелях разных пород массой 7-30 кг. Все животные находились в стадии половой охоты.
Животных разделили на две группы - опытную и контрольную, по 7 особей в каждой. Кобелям опытной группы наносили испытуемое средство однократно во время вечернего приема в клинике путем капельного нанесения на сухую неповрежденную кожу в область шеи у основания черепа в дозах по массе собаки:от 5 до 15 кг- 2 мл; от 15 до 35 кг - 4 мл. После этого к кобелям приводили течных сук и оценивали реакцию на них подопытных животных. Кобелей опытной и контрольной группы осматривали в клинике 1 раз в неделю.
Результаты:
При отсутствии должного эффекта в течение 24 часов двум собакам опытной группы, препарат нанесли повторно в той же дозе. Беспокойное поведение животных экспериментальной группы прекратилось на 2-3 день после применения препарата и не возобновлялось в течение 30 дней (период наблюдения), на течных сук подопытные реагировали спокойно. Тогда как кобели контрольной группы находились в фазе половой активности в течение всего опыта и активно реагировали на сук. Спустя 30 дней после нанесения препарата у 5 кобелей опытной группы половая активность возобновилась полностью. У двух собак, обработанных повторно, беспокойство вернулось на 36 день.
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения кобелей. Эффект развивался за 2-3 суток и сохранялся в течение минимум 30 дней наблюдения.
Пример 13. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах и кобелях)
Материалы и методы:
Испытания эффективности препарата, приготовленного по примеру 16, с целью снижения половой активности и коррекции поведения у котов и кобелей проводили на базе Дзержинской СББЖ в период с апреля по июль 2014г.
Под наблюдением находилось 8 котов и 5 кобелей разных пород в возрасте от 1,5 до 6 лет с признаками нежелательного сексуального поведения (повышенная агрессивность и вокализация, поиск полового партнера, мечение территории мочой и т.д.). Все животные были клинически здоровы. Наблюдение вели в клинике и в условиях домашнего содержания животных с участием их владельцев. Препарат применяли индивидуально однократно накожно в области шеи и спины животных. Доза котам составляла 1 мл на особь, кобелям - 2 мл на животное массой от 5 до 15 кг и 4 мл на животное массой от 15 до 35 кг. Результаты:
Наблюдение за состоянием животных не выявило видимых отклонений в поведении и физиологическом статусе животных. Снижение полового возбуждения наступало у кобелей на 1-3 день после дачи препарата. У котов стабильный признак «успокоения» наблюдали на 1-2 день. Период «успокоения» варьировал от 3 недель до 3 месяцев (период наблюдения).
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения котов и кобелей. Эффект развивался за 1-3 суток и сохранялся от 3 недель до 3 месяцев наблюдения.
Пример 14. (Исследование регулирующего половое поведение предлагаемого препарата на котах и кобелях)
Материалы и методы:
Испытания препарата, приготовленного по примеру 16, предназначенного для снижения половой активности и коррекции поведения у котов и кобелей проводили на базе ГУ ВМО «Балашихинская СББЖ» в период с марта по июнь 2014 г. Под наблюдением находились 10 котов и 6 кобелей (половозрелые, фертильные, клинически здоровые) с признаками нежелательного поведения (повышенная агрессивность и вокализация, поиск полового партнера, мечение территории мочой и т.д.). Препарат наносили животным однократно в вечернее время накожно с учетом массы тела животных в дозах:
- котам 1 мл на животное вне зависимости от веса;
- кобелям массой менее 5 кг - 1 мл, от 5 до 15 кг- 2 мл; от 15 до 35 кг - 4 мл. Результаты:
Повторное нанесение препарата через 24 часа потребовалось 3 котам и 2 кобелям, т.к. признаки нежелательного поведения сохранились. Подавление отрицательного поведения на фоне сексуального возбуждения у котов и кобелей полностью произошло в течение первых 2-3 суток. Побочных эффектов и осложнений у животных в процессе наблюдения не было выявлено.Возобновление нежелательного поведения не было отмечено за период наблюдения (3,5 месяца).
Вывод: экспериментальный препарат показал высокую эффективность в качестве регулятора полового поведения котов и кобелей. Эффект развивался за 2-3 суток и сохранился 3,5 месяца наблюдений.
Пример 15. (Исследование подавления признаков полового возбуждения предлагаемым препаратом у котов и кобелей)
Материалы и методы:
Испытания по определению эффективности применения препарата для регулирования полового поведения, приготовленного по примеру 16, проводились на базе ГБУ Пачелмская РСББЖ Пензенской области в период с февраля по май 2014г на 6 клинически здоровых котах и 8 клинически здоровых кобелях.
Препарат наносили котам однократно накожно в области шеи и спины в дозе 1 мл на животное вне зависимости от массы тела. Кобелям препарат наносили однократно накожно в области шеи и спины в дозе животным массой менее 5 кг - 1 мл, от 5 до 15 кг- 2 мл; от 15 до 35 кг - 4 мл. Контроль действия препарата проводили каждую неделю со слов владельцев животных.
Результаты:
Стадия покоя развивалась у подопытных животных в течение 12-72 часов. Эффективность применения препарата на котах и кобелях при коррекции поведения животных на фоне полового возбуждения составила 100%.Побочных эффектов не отмечалось.
Вывод: экспериментальный препарат показал 100% эффективность в подавлении признаков нежелательного поведения животных на фоне полового возбуждения. Эффект развивался за 12-72 часа.
Пример 16. (получение)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 1 ООг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола,5г D-пантенола и 5 г N-MeTHn-N-(l,2R,3R,4R,55- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,32 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 10 г 6- хлор- 1 ,2р-дигидро- 17-гидрокси-З 'Н-циклопропа[ 1 ,2]прегна- 1 ,4,6-триен-3 ,20-диона ацетат (ципротерона ацетат). Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,30. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 993 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см3 ;
3. рН 4,31 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,93 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 1 10,17 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,78 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,1 1 г/см3;
3. рН 4,29;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,48 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 109,83 мг/см ;
6. Содержание пророксана 10,17 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет. Пример 17. (пророксан и бутироксан)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г /J-пантенола и 5 г
Figure imgf000029_0001
пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,32 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют5 г пророксана основания и 5 г бутироксана основания, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,25. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 993 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1 , 10 г/см3 ;
3. рН 4,27;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,93 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 110,17 мг/см ;
6. Содержание пророксана5,43 мг/см3;
7. Содержание бутироксана5,36 мг/см ;
8. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-пол ивинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,11 г/см ;
3. рН 4,29;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,48 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 109,83 мг/см3; 6. Содержание пророксана4,89 мг/см3;
7. Содержание бутироксана5,14 мг/см3;
8. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 18. (бутироксан + винная кислота)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1 ,2-пропандиола, 5г / пантенола и 5 г N-MeTCDi-N-(l,2R,3R,4i?,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,32 добавлением винной кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г бутироксана основания, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,25. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 10 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 992 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см3 ;
3. рН 4,27;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,93 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 110,17 мг/см ;
6. Содержание бутироксана1 1,36 мг/см3;
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,11 г/см3; 3. pH 4,29;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,48 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 109,83 мг/см3 ;
6. Содержание бутироксана 1 1,14 мг/ см3 ;
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 19. (минимальное содержание ципротерона)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой,вносят 395 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г .D-пантенола и 5 г N-MeTra-N-(l ,2R,3R,4R,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 5 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,34. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 1 1 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 992 г транс дермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1 , 12 г/ см3 ;
3. рН 4,32;
4. Содержание ципротерона ацетата 5,51 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 1 13,15 мг/см ;
6. Содержание пророксана 1 1 ,16 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие: 1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1 , 11 г/ см3 ;
3. рН 4,34;
4. Содержание ципротерона ацетата 5,32 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 112,91 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,94 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 20. (максимальное содержание ципротерона)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой,вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г £>-пантенола и 5 г N-MeTnn-N-(l,2R,3R,4R,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,25 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавили 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 18,2 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,30. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 1001,2 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см ;
3. рН 4,27;
4. Содержание ципротерона ацетата 19,96 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 109,92 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,87 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз. Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,09 г/см ;
3. рН 4,28;
4. Содержание ципротерона ацетата 19,22 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 109,17 мг/см3 ;
6. Содержание пророксана 10,27 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 21. (среднее содержание мелатонина, пировиноградная+лимонная кислота) В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой,вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г 2)-пантенола и 5 г N-MeTM-N-(l,2i?,3i?,4/?,55- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Довели значение рН до 4,27 добавлением пировиноградной кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачиваютстакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 150 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением лимонной кислоты до значения 4,28. Количество пировиноградной кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 5 г, а лимонной 4 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 1041 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,15 г/см ;
3. рН 4,31 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,81 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 164,13 мг/см ; 6. Содержание пророксана 10,43 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,13 г/см3;
3. рН 4,33;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,35 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 162,61 мг/см ;
6. Содержание пророксана 10,17 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 22. (максимальное содержание мелатонина)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой,вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г £>-пантенола и 5 г N-M&mn-N-(l,2R,3R,4R,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,25 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 185 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,29. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 1078 г транс дермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1 , 17 г/ см3 ;
3. рН 4,32; 4. Содержание ципротерона ацетата 10,64 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 200,54 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,57 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1 ,14 г/см3 ;
3. рН 4,31 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,09 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 199,04 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,14 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 23. (среднее содержание пророксана)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1 ,2-пропандиола, 5г .D-пантенола и 5 г N-MeTrni-N-(l,2R,3i?,4/?,55- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 15 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,29. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 998 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета; 2. Плотность - 1,09 г/см3;
3. рН 4,30;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,57 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 108,99 мг/см3;
6. Содержание пророксана 16,02 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см3 ;
3. рН 4,32;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,12 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 107,21 мг/см3;
6. Содержание пророксана 15,48 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 24. (максимальное содержание пророксана)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5 г -пантенола и 5 г N-MeTftji-N-(l,2R,3/?,4R,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 18 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,29. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня pH, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 1001 г транс дермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см3 ;
3. рН 4,31 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,75 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 109,37 мг/см ;
6. Содержание пророксана 19,54 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,08 г/см3;
3. рН 4,27;
■а
4. Содержание ципротерона ацетата 10,27 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 108,02 мг/см3;
6. Содержание пророксана 19,28 мг/см3
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 25. (диеногест)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г D-пантенола и 5 г N-Memrc-N-(l,2i?,3i?,4i?,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждают до комнатной температуры. Доводятзначение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 10 г 17а-цианометил-17 -гидроксиэстра-4,9-диен-3-она (диеногест). Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,32. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 1 1 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 993 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,08 г/см3;
3. рН 4,30;
4. Содержание диеногеста 10,64 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 108,59 мг/см ;
6. Содержание пророксана 10,71 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса, раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см ;
3. рН 4,28;
4. Содержание диеногеста 10,05 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 108,01 мг/см3;
6. Содержание пророксана 9,92 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 26. (диеногест и ципротерон ацетат)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5г / пантенола и 5 г N-MeTKii-N-(l,2R,3R,4R,5S- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 5 г диеногеста и 5 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,32. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 993 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,08 г/см ;
3. рН 4,30;
4. Содержание диеногеста5,58 мг/см ;
5. Содержание ципротерона ацетата5, 41 мг/см ;
6. Содержание мелатонина 108,59 мг/см ;
7. Содержание пророксана 10,71 мг/см3
8. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса, раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см ;
3. рН 4,28;
4. Содержание диеногеста5,15 мг/см ;
5. Содержание ципротерона ацетата 5,02 мг/см3;
6. Содержание мелатонина 108,01 мг/см3;
7. Содержание пророксана 9,92 мг/см
8. Вязкость - 4,5 сПз.
Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 27. (дроспиренон)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, ЮОг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола, 5 г -пантенола и 5 г Ν-ΜβτΗΠ-Ν-(1,2/?,3/?,4 -,55' пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов,охлаждаютдо комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана основания, 100 г мелатонина и 10 г (6R,7R,8R,9S,10R,13S,14S,15S,16S,17S)-l,3',4',6,6a,7,8,9,10,l l,12,13,14,15,15a,16- гексадекагидро- 10,13 - диметилспиро- [ 17Н-дициклопропа-
[6,7: 15,16]циклопента[а]фенантрен-17,2'(5'Н)-фуран]-3,5'(2Н)диона (дроспиренон). Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,32. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 11 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают993 г транс дермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1 ,09 г/см3;
3. рН 4,30;
4. Содержание дроспиренона 10,75 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 109,57 мг/см ;
6. Содержание пророксана 10,67 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через два года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса раствор светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,08 г/см ;
3. рН 4,28;
4. Содержание дроспиренона 10,03 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 108,86 мг/см ;
6. Содержание пророксана 10,17 мг/см
7. Вязкость - 4,5 сПз. Таким образом, препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 28. (без пророксана)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1 ,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 1 ООг полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 1 г 3-(октадецилокси)-1 ,2-пропандиола, 5 г D-пантенола и 5 г N-MeTM-N-(l,2/?,3R,4/?,55- пентагидроксигексил)-октадеканамида. Массу перемешивают при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов, охлаждают до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,17 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,45. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 9 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 981 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1 ,08 г/см ;
3. рН 4,41 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,14 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 1 15,17 мг/ см3 ;
6. Вязкость - 4,5 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл.
Пример 29. (неселективный α-адреноблокатор - тропафен)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1 ,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100 г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 5г / пантенола, 5 г Н-метил-Н-(1 ,2/?,З ,4 ,55'-пентагидроксигексил)-октадеканамида и 1 г 3-(октадецилокси)-1 ,2-пропандиола. Перемешивают массу при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов. Охлаждают при перемешивании до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,37 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 15 г тропафена, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают массу при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,30. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 10 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 997 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,12 г/см ;
3. рН 4,33;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,96 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 132,70 мг/см3;
6. Содержание тропафена 16,38 мг/см3
7. Вязкость - 4,6 сПз.
Препарат расфасован в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Пример 30. (селективный α-адреноблокатор - празозин)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100 г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 5г D-пантенола, 5 г ^метил-К-(1,2Д,З ,4 ,55-пентагидроксигексил)-октадеканамида и 1 г 3-(октадецилокси)-1 ,2-пропандиола. Перемешивают массу при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов. Охлаждают при перемешивании до комнатной температуры. Доводят значение рН до 4,30 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 2,5 г празозина, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают массу при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением стеариновой кислоты до значения 4,15. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 7 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 992 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,10 г/см ;
3. рН 4,11 ;
4. Содержание ципротерона ацетата 11 ,73 мг/см3;
5. Содержание мелатонина 112,16 мг/см3 ;
6. Содержание празозина 2,39 мг/см
7. Вязкость - 4,6 сПз.
Препарат расфасован в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл.
Пример 31. (Изучение влияния препаратов: с пророксаном, без пророксана, с тропафеном, с празозином)
Материалы и методы:
Изучение влияния препаратов, приготовленных по примерам 16, 28, 29 и 30 проводили на 25 половозрелых клинически здоровых котах в возрасте 1,5-7 лет, разделенных на 5 групп по 3 особи в каждой. Кормление проводилось на стандартном рационе с использованием сухих кормов и консервов и достаточным количеством питьевой воды. Препараты наносили однократно в дозе 1 мл на особь на неповрежденную кожу вдоль позвоночника между лопатками.
1 группа получала препарат по примеру 16,
2 группа - препарат по примеру 28,
3 группа - препарат по примеру 29,
4 группа - препарат по примеру 30.
Контрольной группе никаких препаратов не давали.
Экспериментальные средства применяли животным, находящимся в фазе повышенной половой активности, о чем свидетельствовало возбужденное половое поведение (вокализация, интерес противоположным полом, агрессивность и т.д.) и значения тестостерона в крови.
В ходе эксперимента проводилось изучение содержания тестостерона в крови подопытных животных. Содержание гормона определяли радиоиммунным хемилюминисцентным методом. Отбор венозной крови производили натощак в количестве 1-2 мл перед введением, через 12,24 часа после трансдермального введения экспериментальных препаратов и далее раз в неделю. Образцы крови хранили в холодильнике. Из образцов цельной крови готовили сыворотку.
Результаты:
Таблица 8
Содержание тестостерона в крови, нмоль/л
Figure imgf000044_0001
Вывод: из представленных результатов видно, что применение препарата по примеру 16 оказывает регулирующее воздействие на половое поведение, снижая уровень тестостерона до уровня гормона у котов фазы полового покоя на срок до 5-и месяцев (период наблюдения). Применение препаратов по примерам 28, 29 и 30 также снижает уровни исследуемых гормонов до базального уровня, однако только на промежуток от 1 недели (4 группа) до 1 месяца (2-4 группа), после чего их концентрации повышаются до уровня, соответствующего периоду половой активности. При применении препаратов по примерам 28, 29 и 30 отмечается вялость животных и гипотония.
Пример 32. (рН > 6)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100 г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 5г D-пантенола, 5 г -метил^-(1,2/?,З ,4/?,55-пентагидроксигексил)-октадеканамида и 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола. Перемешивают массу при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов. Охлаждают при перемешивании до комнатной температуры. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г пророксана, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивали при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Значение рН при контроле ионометром с входным сопротивлением >2 ГОм составило 7,78. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 982 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,09 г/см3;
3. рН 7,80;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,18 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 151,01 мг/см3;
6. Содержание пророксана 10,33 мг/см
7. Вязкость - 4,6 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1 , 10 г/см ;
3. рН 7,84;
4. Содержание ципротерона ацетата 4,31 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 118,38 мг/см3 ;
6. Содержание пророксана7,52 мг/см3
7. Вязкость - 4,6 сПз. Таким образом, при рН выше 6 препарат не стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
Пример 33. (рН < 4)
В химический стакан объемом 2 л, снабженный мешалкой, вносят 391 г 1,2,3- триацетоксипропана, 150 г Ν,Ν-диэтилтолуамида, 200 г 1 ,2-изопропилиденглицерола, 100 г полиоксиэтилированногоа-токоферола, 10 г полиоксиэтилированного ланолина, 5г £)-пантенола, 5 г -метил- -(1,2 ?,3 ?,4 ?,55-пентагидроксигексил)-октадеканамида и 1 г 3-(октадецилокси)-1,2-пропандиола. Перемешивают массу при подогреве до 60°С до полного растворения компонентов. Охлаждают при перемешивании до комнатной температуры. Доводят значение рН до 3,37 добавлением стеариновой кислоты при контроле ионометром с входным сопротивлением > 2 ГОм. Оборачивают стакан непрозрачной фольгой. К полученному раствору добавляют 10 г бутироксана, 100 г мелатонина и 10 г ципротерона ацетата. Перемешивают массу при подогреве до 40°С до полного растворения компонентов. Корректируют значение рН добавлением трихлоруксусной кислоты до значения 3,02. Общее количество стеариновой кислоты, затраченное на корректировку уровня рН, составило 23 г. При охлаждении до комнатной температуры раствор мутнеет. Получают 1005 г трансдермальной композиции со следующими параметрами:
1. Описание - подвижная жидкая мутная масса желтого цвета;
2. Плотность - 1,15 г/см ;
3. рН З,35;
4. Содержание ципротерона ацетата 11,33 мг/см ;
5. Содержание мелатонина 117,16 мг/см ;
6. Содержание пророксана 11,79 мг/см
7. Вязкость - 4,6 сПз.
Препарат расфасовывают в пипетки из полипропилен-поливинилхлорида по 1 мл. Через 2 года хранения параметры препарата следующие:
1. Описание - подвижная мутная жидкая масса светло-желтого цвета;
2. Плотность - 1,12 г/см3;
3. рН 3,25;
4. Содержание ципротерона ацетата 10,94 мг/см ; 5. Содержание мелатонина 115,72 мг/см3;
6. Содержание пророксана 11,65 мг/см
7. Вязкость - 4,6 сПз.
Таким образом, при рН ниже 4 препарат стабилен при хранении в естественных условиях в полимерных пипетках в течение двух лет.
При исследовании на животных у опытных групп наблюдалось сильное устойчивое покраснение кожного покрова в месте нанесения препарата, что вызывало образование кожной складки толщиной 0,3 мм, которая не исчезала через 20 минут; животные проявляли беспокойство, старались счесать препарат.

Claims

Формула изобретения
1. Способ регулирования полового поведения самцов животных, включающий введение мелатонина и гестагена, отличающийся тем, что дополнительно вводят тропный к задним ядрам гипоталамуса α-адреноблокатор, при этом совокупность указанных биологически активных веществ вводят в терапевтических дозах в любой период полового цикла;
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве α-адреноблокатора, тропного к задним ядрам гипоталамуса, используют п роксан и(или) бутироксан;
3. Фармацевтическая композиция для регулирования полового поведения самцов животных, предназначенная для трансдермального введения «Спот-он», имеющая рН в интервале от 4,0 до 6,0 и содержащая терапевтические количества мелатонина, гестагена и α-адреноблокатора, тропного к задним ядрам гипоталамуса, при следующем соотношении компонентов (масс.%):
Гестаген Терапевтические
количества
Мелатонин Терапевтические
количества
а- Адреноблокатор, тропный к задним Терапевтические
ядрам гипоталамуса количества
N-MeTrni-N-(l,2R,3R,4R,5S- 0,5
пентагидроксигексил)-октадеканамид
D-пантенол 0,5
Полиоксиэтилированный а-токоферол 9,3-10,2
Полиоксиэтилированный ланолин 1
Карбоновая кислота 0,1-1,1
3 -(октадецилокси)- 1 ,2-пропандиол 0,1
Ν,Ν-диэтилтолуамид 13,9-15,3
1 ,2-изопропилиденгл ицерол 18,6-20,4
1 ,2,3-триацетоксипропан до 100
Фармацевтическая композиция по п.З, отличающаяся тем, что в качестве гестагена используют 6-хлор-1Р,2Р-дигидро-17-гидрокси-3'Н-
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) циклопропа[1,2]прегна-1,
4,6-триен-3,20-дионацетат (ципротерона ацетат) или
(и) 17а-цианометил-17р-гидроксизстра-4,9-диен-3-он (диеногест), или (и)
(6RJR,8R,9S, 1 OR, 13 S, 14S, 15S, 16S, 17S)- 1 ,3\4\6,6a,7,8,9, 10, 11 , 12, 13, 14,
15, 15a, 16 -гексадекагидро-10, 13-диметилспиро-[17Н-дициклопропа-
[6,7: 15,16] циклопента[а]фенантрен- 17,2 ' (5 'Н)-фуран]-3 , 5'(2Н)дион
(дроспиренон);
5. Фармацевтическая композиция по п.З, отличающаяся тем, что в качестве а- адреноблокатора, тропного к задним ядрам гипоталамуса, используют пророксан или(и) бутироксан.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
PCT/RU2016/000498 2015-08-04 2016-08-01 Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих WO2017044003A1 (ru)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201890438A EA035143B1 (ru) 2015-08-04 2016-08-01 Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих
EP16844787.8A EP3332778A4 (en) 2015-08-04 2016-08-01 METHOD FOR CONTROLLING SEXUAL BEHAVIOR IN MALE MAMMALS

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015132315 2015-08-04
RU2015132315A RU2616252C2 (ru) 2015-08-04 2015-08-04 Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017044003A1 true WO2017044003A1 (ru) 2017-03-16

Family

ID=58240274

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2016/000498 WO2017044003A1 (ru) 2015-08-04 2016-08-01 Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP3332778A4 (ru)
EA (1) EA035143B1 (ru)
RU (1) RU2616252C2 (ru)
WO (1) WO2017044003A1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0246910A2 (en) * 1986-05-23 1987-11-25 Hoechst Veterinär GmbH Coated veterinary implants
RU2233586C1 (ru) * 2002-12-15 2004-08-10 Зейналов Орхан Ахмед-оглы Средство для регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных и способ регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2067001C1 (ru) * 1987-03-23 1996-09-27 Эпплайд Медикал Рисерч, Лтд. Способ снижения риска заболевания раком молочной железы
US4855305A (en) * 1987-03-23 1989-08-08 Applied Medical Research Compositions and methods of effecting contraception utilizing melatonin
IN171596B (ru) * 1989-06-27 1992-11-21 Cohen Michael
RU2163809C2 (ru) * 1999-03-17 2001-03-10 Общество с ограниченной ответственностью "Группа ЭКСПА" Средство для регулирования половой активности у кошек и собак
AU2003206433A1 (en) * 2002-02-15 2003-09-04 Pantarhei Bioscience B.V. A pulmonary drug delivery composition containing a progestogen and an androgen for use in a contraceptive method in males

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0246910A2 (en) * 1986-05-23 1987-11-25 Hoechst Veterinär GmbH Coated veterinary implants
RU2233586C1 (ru) * 2002-12-15 2004-08-10 Зейналов Орхан Ахмед-оглы Средство для регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных и способ регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MASHKOVSKY M.D.: "«Novaia volna»", LEKARSTVENNYE SREDSTVA. M., 2012, pages 262 - 263, XP009508036 *
See also references of EP3332778A4 *
TEMURIANTS N. A. ET AL: "Ekzogennyi melatonin vliiaet na polovoe povedenie krys-samtsov, nakhodiashchikhsia v usloviiakh elektromagnitnogo ekranirovaniia. Uchenye zapiski Tavricheskogo natsionalnogo universiteta V. I.Vernadskogo. Seriia ''Biologiia, khimiia", SIMFEROPOL, vol. 27 (66), no. 4, 2014, pages 75 - 83, XP009509035 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201890438A1 (ru) 2018-09-28
EP3332778A1 (en) 2018-06-13
RU2015132315A (ru) 2017-02-07
EP3332778A4 (en) 2019-04-17
RU2616252C2 (ru) 2017-04-13
EA035143B1 (ru) 2020-05-06
EA201890438A8 (ru) 2018-12-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Long A discussion of the mechanism of action of adrenal cortical hormones on carbohydrate and protein metabolism
ES2949053T3 (es) Composiciones de gel para administración transdérmica para maximizar las concentraciones de fármaco en el estrato córneo y suero, y métodos de uso de las mismas
Fox et al. Changes in plasma cortisol concentrations in bitches in response to different combinations of halothane and butorphanol, with or without ovariohysterectomy
BR102020010865A2 (pt) formulações de hormônio injetáveis para controle do ciclo estral em mamíferos, seu processo de fabricação, métodos para controle do ciclo estral e para desencadear a puberdade e aperfeiçoamento de gestação em mamíferos
WO2007062483A1 (en) Increasing pregnancy rates
US4339438A (en) Injectable male animal sterilant for selectively controlling the function of testes
US4156427A (en) Injectable male animal sterilant for selectively controlling the function of testes
RU2295345C1 (ru) Средство для регулирования половой охоты у кошек и собак
RU2616252C2 (ru) Способ регулирования полового поведения самцов млекопитающих
RU2428144C1 (ru) Способ стимуляции воспроизводительной функции у животных
TW200808373A (en) Liquid drug formulation
US20180085460A1 (en) Methods of treating prostatitis
JP4899570B2 (ja) カカオバター油性製剤を用いたＬＨＲＨａの注射投与によるマハタ親魚の成熟・排卵誘導法
RU2728709C1 (ru) Средство для повышения репродуктивной функции
Bortree et al. Normal variations in the amount of ascorbic acid in the blood of dairy cattle
RU2617518C2 (ru) Способ регулирования полового поведения и контрацепции самок млекопитающих
Wintersteiner et al. The hormones
CN101332174A (zh) 二氢睾酮外用制剂及其药物用途
RU2233586C1 (ru) Средство для регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных и способ регуляции репродуктивной функции и половой активности позвоночных животных
RU2812129C1 (ru) Гормональное средство для регуляции половой охоты у мелких домашних животных
US20200375980A1 (en) Veterinary antiprolactinic composition
RU2664437C2 (ru) Средство пролонгированного действия на основе пролигестона для угнетения половой охоты у мелких домашних животных
Hampton et al. The laboratory rabbit
JPWO2005077378A1 (ja) 家畜哺乳動物の低カルシウム血症の予防、治療および／または処置方法
Newell-Fugate The effects of two formulations of deslorelin on the reproduction of male African wild dogs (Lycaon pictus)

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16844787

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: A201802151

Country of ref document: UA

Ref document number: 201890438

Country of ref document: EA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2016844787

Country of ref document: EP