WO2013189118A1 - 图像处理方法和装置 - Google Patents

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WO2013189118A1
WO2013189118A1 PCT/CN2012/079831 CN2012079831W WO2013189118A1 WO 2013189118 A1 WO2013189118 A1 WO 2013189118A1 CN 2012079831 W CN2012079831 W CN 2012079831W WO 2013189118 A1 WO2013189118 A1 WO 2013189118A1
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microscope
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丁建文
周丰良
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爱威科技股份有限公司
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    • G06COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
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    • G06V20/60Type of objects
    • G06V20/69Microscopic objects, e.g. biological cells or cellular parts
    • G06V20/695Preprocessing, e.g. image segmentation

Definitions

  • the stage assembly includes a fixing member and a sliding member, wherein the fixing member is fixedly coupled to the microscope frame, and the sliding member is slidably disposed on the fixing member in a horizontal direction; the objective lens is vertically movable in a vertical direction.
  • the concentrating mirror is movably disposed below the stage assembly in a vertical direction.
  • the apparatus further comprises: a microscope transmission control device for controlling movement of the stage assembly, the objective lens and the condensing mirror.
  • the resolution of the CCD camera is greater than or equal to 2 million pixels.
  • the first image is reduced by N times to obtain a second image, where N is an integer, and the resolution of the second image is 1/N of the resolution of the first image; the first image processing unit 204 is configured to be in the second image The identifiable target is identified and classified, and the target that is not identifiable in the second image is located; the second image processing unit 206 is connected to the first image processing unit, and is configured to be used in the first image The position of the positioning position in the two images is identified.
  • the image analyzing device 20 further includes: a memory, configured to store the first image and the second image.
  • the obtained first image is reduced by N times to obtain a second image, where N is an integer, wherein the resolution of the second image is 1/N of the resolution of the first image; preferably, the first image and the first image The second image is saved.
  • the problem of inaccurate positioning and cell shifting can completely eliminate the phenomenon of low-magnification target and high-powered goaf in the old method, and eliminate the occurrence of missed detection from the source.
  • the structure of the objective lens is reduced, the objective lens is fixed, the focus will be more stable; since there is only one lens, the position of the condenser and the aperture need not be adjusted, and the adjustment mechanism of the entire microscope can be reduced from the original 5 axes to 3 axes.
  • the lifting and lowering adjustment of the stage can also be canceled.
  • the original 5-axis automatic adjustment can be further reduced to 2-axis adjustment.
  • the reduction of the adjustment mechanism not only reduces the control cost, but also makes the microscope more stable. improve.

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Abstract

本发明公开了一种图像处理方法和装置,其中,该装置包括:显微镜装置,用于获取检测标本放大后的第一图像,其中,显微镜装置的物镜的倍率小于或等于20,物镜的数值孔径大于或等于0.6;图像分析装置,包括:图像缩放单元,用于将显微镜装置获取的第一图像缩小N倍得到第二图像,其中,第二图像的分辨率为第一图像的分辨率的1/N;第一图像处理单元,用于对第二图像中能够识别出的目标进行识别和分类计数,并对第二图像中不能够识别出的目标进行定位;第二图像处理单元,用于根据第一图像处理单元的定位在第一图像相应的位置进行识别,解决了在目标筛选过程需要进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问题,实现快速而准确的分析检测标本。

Description

图像处理方法和装置 技术领域 本发明涉及医用器械领域, 具体而言, 涉及一种图像处理方法和装置。 背景技术 生物显微镜是医疗卫生单位、 高等院校、 研究所用于微生物、 细胞、 细菌、 组织 培养、 悬浮体、 沉淀物等的观察仪器, 可连续观察细胞、 细菌等在培养液中繁殖分裂 的过程等。 在细胞学、 寄生虫学、 肿瘤学、 免疫学、 遗传工程学、 工业微生物学、 植 物学等领域中应用广泛。 一般动植物细胞的尺寸在 10-100μιη之间, 较小的红细胞小于 6μιη, 血小板和真 菌尺寸更小, 有的会小于 3μιη。 为了能够清楚地观察到血液、 尿液和其它体液中的有 形成分, 显微镜需要有足够的分辨率。 当观察红、 白细胞和血小板等小目标时我们需 要显微镜的分辨率小于 1μιη。 而观察 ΙΟμιη以上大目标时, 分辨率需小于 3μιη。 (注: 显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距的能力, 当细胞大小 为最小分辨率的 3倍时, 能够清晰分辨的像素点为 7个, 此时能观察到的细胞内部像 素点仅为 1个。 如图 1所示, 若细胞小于最小分辨率的 3倍, 则看不清细胞内部的任 何结构了。) 用于细胞分析的生物显微镜常用物镜分别有 10倍、 20倍和 40倍 3种, 其对应的 数值孔径 ΝΑ—般情况下分别为 0.25, 0.45禾 Ρ 0.65, 由此可计算出显微镜的分辨率: ά=λ/ΝΑ 其中 λ为光源波长, ΝΑ为物镜的数值孔径。设光源的平均波长 λ为 0.6μιη, 则可 得出不同物镜下的分辨率见下表一: 表
物镜倍率 10 20 40
数值孔径 (ΝΑ) 0.25 0.45 0.65
分辨率
2.4μηι 1.33μηι 0.923 μηι
(ά=λ/ΝΑ) 可见, 为了能够清晰地观察到血小板、 真菌等小目标 (需要显微镜的分辨率需小 于 lum), 需要配置数值孔径在 0.6以上物镜, 通常采用低倍镜定位 (如 10倍镜)、 高 倍镜 (如 40倍镜) 跟踪识别的方法来实现 (具体参见专利 201110315831.4), 但是采 用这种方法进行观察的过程中, 需要调节物镜以进行高低倍转换, 动作繁琐, 很容易 产生机械误差, 使高低倍定位发生偏差, 导致定位不准, 此外, 由于样品流动可能造 成低倍定位的目标转到高倍观察时位置发生了变化, 甚至偏离了观察视野造成漏检。 针对相关技术中在目标筛选过程需要进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问 题, 目前尚未提出有效的解决方案。 发明内容 本发明提供了一种图像处理方法和装置, 以解决相关技术中在目标筛选过程需要 进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问题。 根据本发明的一个方面, 提供了一种图像处理装置, 该装置包括: 显微镜装置, 用于获取检测标本放大后的第一图像,其中,显微镜装置的物镜的倍率小于或等于 20, 物镜的数值孔径大于或等于 0.6; 图像分析装置, 包括: 图像缩放单元, 与显微镜装置 连接, 用于将显微镜装置获取的第一图像缩小 N倍得到第二图像, 其中, N为整数, 第二图像的分辨率为第一图像的分辨率的 1/N; 第一图像处理单元, 用于对第二图像 中能够识别出的目标进行识别和分类计数, 并对第二图像中不能够识别出的目标进行 定位; 第二图像处理单元, 与第一图像处理单元连接, 用于对第一图像中与第二图像 中的定位位置相应的位置进行识别。 优选地, 图像分析装置还包括: 存储器, 用于存储第一图像和第二图像。 优选地, 显微镜装置包括: 显微镜机架, 具有竖直向下的通孔; 适配接口, 设置 在显微镜机架的通孔中, 适配接口上端具有止挡凸缘; CCD摄像机, 固定设置在适配 接口的上端面; 物镜, 物镜有一个, 固定设置在适配接口的下端面, 且向远离适配接 口的方向延伸; 载物台组件, 位于物镜的下方, 且载物台组件与物镜相对应地设置; 聚光镜, 聚光镜与载物台组件相对应地设置; CCD摄像机的焦点、 物镜的中心以及聚 光镜的中心位于同一竖直线上。 优选地, 载物台组件包括固定部件和滑动部件, 其中, 固定部件与显微镜机架固 定连接, 滑动部件沿水平方向可滑动地设置在固定部件上; 物镜沿垂直方向可上下移 动地设置。 优选地, 聚光镜沿竖直方向可移动地设置于载物台组件的下方。 优选地, 该装置还包括: 显微镜传动控制装置, 用于控制上述载物台组件、 上述 物镜及上述聚光镜的移动。 优选地, CCD摄像机的分辨率大于或等于 200万像素。 根据本发明的另一方面, 提供了一种图像处理方法, 该方法包括: 通过显微镜装 置的 CCD摄像机获取检测标本放大后的第一图像,其中,显微镜装置的物镜的倍率小 于或等于 20, 物镜的数值孔径大于或等于 0.6; 将获取到的第一图像缩小 N倍得到第 二图像, N为整数, 其中, 第二图像的分辨率为第一图像的分辨率的 1/N; 对第二图 像中能够识别出的目标进行识别和分类计数, 并对第二图像中不能够识别出的目标进 行定位; 对第一图像中与第二图像中的定位位置相应的位置进行识别。 优选地, 通过显微镜装置的 CCD摄像机获取第一图像。 优选地, 上述方法还包括: 对第一图像和第二图像进行保存。 通过本发明, 首先采用物镜的倍率小于或等于 20且数值孔径大于或等于 0.6的显 微镜装置采集高分辨率的大图, 将采集到的大图缩小成较小分辨率的小图, 并保存。 在图像分析过程中, 先分析小图, 对能够识别的目标进行快速识别和分类计数, 对不 能识别的目标进行定位, 再根据定位结果在大图中找到相应的位置进行局部识别, 进 而达到提高图像的识别速度。 此外, 由于小图是大图进行电子缩放得到的, 因此, 在 只需使用单一的物镜即可完成上述的操作, 无需调节物镜进行高低倍转换, 解决了在 目标筛选过程需要进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问题, 实现快速而准确的分 析检测标本。 附图说明 此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解, 构成本申请的一部分, 本发 明的示意性实施例及其说明用于解释本发明, 并不构成对本发明的不当限定。 在附图 中: 图 1是根据相关技术中的细胞内部像素点的一种优选的示意图; 图 2是根据本发明实施例的图像处理装置的一种优选的结构图; 图 3是根据本发明实施例的图像处理装置的显微镜装置的主视图; 图 4是根据图 3的显微镜装置的右视图; 以及 图 5是根据本发明实施例的图像处理方法的一种优选的流程图。 具体实施方式 下文中将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。 需要说明的是, 在不冲突的 情况下, 本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。 实施例 1 本发明提供了一种图像处理装置, 图 2示出该装置的一种优选的结构图, 该图像 处理装置包括: 显微镜装置 10, 用于获取检测标本放大后的第一图像, 其中, 显微镜 装置 10的物镜的倍率小于或等于 20, 物镜的数值孔径大于或等于 0.6; 图像分析装置 20, 图像分析装置 20包括: 图像缩放单元 202, 与显微镜装置 10连接, 用于将显微 镜装置获取的第一图像缩小 N倍得到第二图像, 其中, N为整数, 第二图像的分辨率 为第一图像的分辨率的 1/N; 第一图像处理单元 204,用于对第二图像中能够识别出的 目标进行识别和分类计数, 并对第二图像中不能够识别出的目标进行定位; 第二图像 处理单元 206, 与第一图像处理单元连接, 用于对第一图像中与第二图像中的定位位 置相应的位置进行识别。 优选的, 图像分析装置 20还包括: 存储器, 用于存储第一图 像和第二图像。 在上述优选的实施方式中,首先采用物镜的倍率小于或等于 20且数值孔径大于或 等于 0.6 的显微镜装置采集高分辨率的大图, 将采集到的大图缩小成较小分辨率的小 图, 并保存。 在图像分析过程中, 先分析小图, 对能够识别的目标进行快速识别和分 类计数, 对不能识别的目标进行定位, 再根据定位结果在大图中找到相应的位置进行 局部识别, 进而达到提高图像的识别速度。 此外, 由于小图是大图进行电子缩放得到 的, 因此, 在只需使用单一的物镜即可完成上述的操作, 无需调节物镜进行高低倍转 换, 解决了在目标筛选过程需要进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问题, 实现快 速而准确的分析检测标本。 下面结合示例进行具体说明: 在进行标本检测过程中, 先通过显微镜装置采集标本, 优选的, 采用倍率较低、 大数值孔径 (为了能看清血小板、 真菌等小目标, 需要数值孔径为 0.6或以上) 的物 镜配合高分辨率的 CCD摄像机来采集标本图像,这种结构的显微镜装置采集的图像既 保持了低倍物镜的大视野范围, 又保留了较高的清晰度。 优选的, 本发明选用的物镜 为 20倍率的物镜。 通过高分辨率的 CCD摄像机采集大图并保存, 例如, 1600* 1200 分辨率的 CCD摄像机来采集 20倍物镜的图像, 采用上述结构采集的大图其清晰度可 达到现有的在 800*600分辨率下采集 40倍物镜的图像的清晰度;然后将采集到的大图 缩小为低分辨率的小图, 优选的, 将大图缩小 4倍, 分辨率为 800*600的小图, 完成 图像缩放后, 保存大图和小图。 在保存完大图和小图后, 进行图像分析, 先对保存的小图进行分析: 首先快速筛 选小图中的目标, 对小图中能够识别出的相对较大的目标进行自动识别和分类计数, 同时判断图中是否存在不能识别的小目标。 当图中不存在小目标时, 当前视野即处理 完毕而不必转入大图中进行识别。 当存在不能够识别的小目标时即对其进行定位, 然 后根据小图中的定位位置, 在大图中的相应位置进行局部识别, 进而提高图像的识别 速度。 本发明还对上述的显微镜装置 10 提供了一种优选的实施方式, 具体来说, 图 3 为该显微镜装置 10的主视图,图 4为该显微镜装置 10的右视图,显微镜装置 10包括: 显微镜机架 102, 具有竖直向下的通孔; 适配接口 104, 设置在显微镜机架 102的通孔 中, 适配接口 104上端具有止挡凸缘; CCD摄像机 106, 固定设置在适配接口 104的 上端面, 优选的, CCD摄像机 106的分辨率大于或等于 200万像素; 物镜 108, 物镜 108有一个, 固定设置在适配接口 104的下端面, 且向远离适配接口 104的方向延伸; 载物台组件 110, 位于物镜 108的下方, 且载物台组件 110与物镜 108相对应地设置; 聚光镜 112, 聚光镜 112与载物台组件 110相对应地设置; CCD摄像机 106的焦点、 物镜 108的中心以及聚光镜 112的中心位于同一竖直线上。 本发明还提供了一种载物台组件 110、 物镜 108及聚光镜 112的优选的方案, 具 体地, 载物台组件 110包括固定部件和滑动部件, 其中, 固定部件与显微镜机架 102 固定连接, 滑动部件沿水平方向可滑动地设置在固定部件上, 优选的, 上述滑动部件 沿水平方向可分别进行前后和左右滑动; 物镜 108沿垂直方向可上下移动地设置聚光 镜 112沿竖直方向可移动地设置于载物台组件的下方, 在图 3中的箭头方向为载物台 组件 110的滑动方向; 图 4中上方的竖直箭头方向为物镜 108的滑动方向, 下方竖直 箭头方向为聚光镜 112的移动方向, 水平箭头方向为载物台组件 110的滑动方向。 本发明还对上述显微镜装置 10进行了优选, 作为一种优选的方案, 该装置还包括 显微镜传动控制装置, 用于控制上述载物台组件 110、上述物镜 108及上述聚光镜 112 的移动。 具体来说, 显微镜传动控制装置分别与载物台组件 110的水平运动结构、 物 镜 108的上下运动结构以及聚光镜 112的上下运动结构相连, 以达到控制上述载物台 组件 110、 上述物镜 108及上述聚光镜 112的移动的效果。 优选的, 本发明中显微镜 传动控制装置控制载物台前后、左右移动精度 <3微米,控制物镜的上下移动的精度 <0.5 微米。 上述显微镜装置的优选的实施方式,对稳定显微镜的焦距将更加有利, 具体来说, 现有的显微镜装置的多物镜结构, 当转换物镜时, 由于镜头是移动的, 其必定存在一 定的间隙, 这势必对焦距的稳定性产生影响; 其次, 以前的结构中载物台组件需要进 行三维运动, 由于载物台组件较重, 它在升降方向又不是固定的, 当其前后或左右移 动时可能影响到载物台升降机构造成焦距的变化, 而上述结构的载物台组件的升降是 固定的, 其水平方向的移动并不会影响其焦距的变化, 当水平方向改变视野位置时, 其焦距将更加稳定。 实施例 2 在上述图像处理装置的基础上, 本发明还提供了一种图像处理方法, 图 5示出图 像处理方法的一种优选的流程图, 该方法包括如下步骤:
S502, 通过显微镜装置获取检测标本放大后的第一图像, 其中, 显微镜装置的物 镜的倍率小于或等于 20, 物镜的数值孔径大于或等于 0.6; 优选的, 通过显微镜装置 的 CCD摄像机获取第一图像, CCD摄像机的分辨率大于或等于 200万像素。
S504, 将获取到的第一图像缩小 N倍得到第二图像, N为整数, 其中, 第二图像 的分辨率为第一图像的分辨率的 1/N; 优选的, 对第一图像和第二图像进行保存。
S506, 对第二图像中能够识别出的目标进行识别和分类计数, 并对第二图像中不 能够识别出的目标进行定位; S508, 对第一图像中与第二图像中的定位位置相应的位置进行识别。 在上述优选的实施方式中,首先采用物镜的倍率小于或等于 20且数值孔径大于或 等于 0.6 的显微镜装置采集高分辨率的大图, 将采集到的大图缩小成较小分辨率的小 图, 并保存。 在图像分析过程中, 先分析小图, 快速筛选小图中的目标, 对能够识别 的大目标进行快速自动识别和分类计数, 同时判断图中是否存在不能识别的小目标。 当图中不存在小目标时, 当前视野即处理完毕而不必转入大图中进行识别。 当存在不 能识别的小目标时对即其进行定位, 再根据定位结果在大图中找到相应的位置进行局 部识别, 进而达到提高图像的识别速度。此外, 由于小图是大图进行电子缩放得到的, 因此, 在只需使用单一的物镜即可完成上述的操作, 无需调节物镜进行高低倍转换, 解决了在目标筛选过程需要进行高低倍镜转换而导致的定位不准的问题, 实现快速而 准确的分析检测标本。 下面结合示例进行具体说明: 在进行标本检测过程中, 先通过显微镜装置采集标本, 优选的, 采用倍率较低、 大数值孔径 (为了能看清血小板、 真菌等小目标, 需要数值孔径为 0.6或以上) 的物 镜配合高分辨率的 CCD摄像机来采集标本图像, 优选的, CCD摄像机的分辨率大于 或等于 200万像素。 这种结构的显微镜装置采集的图像既保持了低倍物镜的大视野范 围, 又保留了较高的清晰度。 优选的, 本发明选用的物镜为 20倍率的物镜。 通过高分 辨率的 CCD摄像机采集大图并保存, 例如, 1600* 1200分辨率的 CCD摄像机来采集 20倍物镜的图像, 采用上述结构采集的大图其清晰度可达到现有的在 800*600分辨率 下采集 40倍物镜的图像的清晰度; 然后将采集到的大图缩小为低分辨率的小图,优选 的, 将大图缩小 4倍, 分辨率为 800*600的小图, 完成图像缩放后, 保存大图和小图。 在保存完大图和小图后, 进行图像分析, 先对保存的小图进行分析: 首先快速筛 选小图中的目标, 对小图中能够识别出的相对较大的目标进行快速自动识别和分类计 数, 同时判断小图中是否存在不能识别的小目标。 当图中不存在小目标时, 当前视野 即处理完毕而不必转入大图中进行识别。 当存在小图中不能够识别的较小的目标时即 对其进行定位; 然后根据小图中的定位位置, 在大图中的相应位置进行局部识别, 进 而达到提高图像的识别速度。 从以上的描述中, 可以看出, 本发明实现了如下技术效果: 采用上述方法, 用缩小的图像进行过筛和小目标的定位可保证图像识别的快速, 定位后的小目标直接转入原图中相应位置可得到相应目标的清晰大图便于实现准确识 另 |J, 同时由于小图是由原大图按比例缩小得来, 避免了传统分析方法中通过高低倍镜 分别定位采图所带来的定位不准和细胞移位问题, 可彻底杜绝老方法中低倍有目标而 高倍采空图的现象, 从源头上杜绝了漏检的产生。 在结构上减少了物镜的转换机构, 物镜是固定的, 聚焦将更加稳定; 由于只有一 个镜头, 聚光镜与光圈的位置也不需要调整, 整个显微镜的调节机构由原来的 5轴可 减少为 3轴, 当把载物台调平后载物台的升降调节也可取消, 原来的 5轴自动调节可 进一步减少为 2轴调节, 调节机构的减少不仅使控制成本降低, 同时使显微镜的稳定 性大大提高。 以上所述仅为本发明的优选实施例而已, 并不用于限制本发明, 对于本领域的技 术人员来说, 本发明可以有各种更改和变化。 凡在本发明的精神和原则之内, 所作的 任何修改、 等同替换、 改进等, 均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

权 利 要 求 书
1. 一种图像处理装置, 其特征在于, 包括:
显微镜装置, 用于获取检测标本放大后的第一图像, 其中, 所述显微镜装 置的物镜的倍率小于或等于 20, 所述物镜的数值孔径大于或等于 0.6;
图像分析装置, 包括:
图像缩放单元, 与所述显微镜装置连接, 用于将所述显微镜装置获取的所 述第一图像缩小 N倍得到第二图像, 其中, N为整数, 所述第二图像的分辨率 为所述第一图像的分辨率的 1/N;
第一图像处理单元, 用于对所述第二图像中能够识别出的目标进行识别和 分类计数, 并对所述第二图像中不能够识别出的目标进行定位;
第二图像处理单元, 与所述第一图像处理单元连接, 用于对所述第一图像 中与所述第二图像中的定位位置相应的位置进行识别。
2. 根据权利要求 1所述的装置, 其特征在于, 所述图像分析装置还包括: 存储器, 用于存储所述第一图像和所述第二图像。
3. 根据权利要求 1所述的装置, 其特征在于, 所述显微镜装置包括:
显微镜机架, 具有竖直向下的通孔;
适配接口, 设置在所述显微镜机架的所述通孔中, 所述适配接口上端具有 止挡凸缘;
CCD摄像机, 固定设置在所述适配接口的上端面; 物镜, 所述物镜有一个, 固定设置在所述适配接口的下端面, 且向远离所 述适配接口的方向延伸;
载物台组件, 位于所述物镜的下方, 且所述载物台组件与所述物镜相对应 地设置;
聚光镜, 所述聚光镜与所述载物台组件相对应地设置;
所述 CCD摄像机的焦点、 所述物镜的中心以及所述聚光镜的中心位于同 一竖直线上。 根据权利要求 3所述的装置, 其特征在于,
所述载物台组件包括固定部件和滑动部件, 其中, 所述固定部件与所述显 微镜机架固定连接,所述滑动部件沿水平方向可滑动地设置在所述固定部件上; 所述物镜沿垂直方向可上下移动地设置。 根据权利要求 3所述的装置, 其特征在于, 所述聚光镜沿竖直方向可移动地设 置于所述载物台组件的下方。 根据权利要求 3所述的装置, 其特征在于, 还包括: 显微镜传动控制装置, 用于控制所述载物台组件、 所述物镜及所述聚光镜 的移动。 根据权利要求 3所述的装置, 其特征在于, 所述 CCD摄像机的分辨率大于或 等于 200万像素。 一种图像处理方法, 其特征在于, 包括:
通过显微镜装置获取检测标本放大后的第一图像, 其中, 所述显微镜装置 的物镜的倍率小于或等于 20, 所述物镜的数值孔径大于或等于 0.6;
将获取到的所述第一图像缩小 N倍得到第二图像, N为整数, 其中, 所述 第二图像的分辨率为所述第一图像的分辨率的 1/N;
对所述第二图像中能够识别出的目标进行识别和分类计数, 并对所述第二 图像中不能够识别出的目标进行定位;
对所述第一图像中与所述第二图像中的定位位置相应的位置进行识别。 根据权利要求 8所述的方法, 其特征在于, 通过所述显微镜装置的 CCD摄像 机获取所述第一图像。 根据权利要求 8所述的方法, 其特征在于, 所述方法还包括: 对所述第一图像 和所述第二图像进行保存。
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