WO2013162047A1 - 二次性副甲状腺機能亢進症治療剤 - Google Patents

Abstract

本発明は、下記式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、二次性副甲状腺機能亢進症治療剤に関する。

Description

二次性副甲状腺機能亢進症治療剤

　本発明は、２３−イン−ビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分とする二次性副甲状腺機能亢進症治療剤に関する。

　血中の副甲状腺ホルモン（以下、ＰＴＨと略す）の測定値は、副甲状腺機能の良好な指標であるため、慢性腎不全患者における二次性副甲状腺機能亢進症の治療は、血中ＰＴＨ濃度の低下を目標に実施されている。なお、ＰＴＨは通常、インタクトＰＴＨ（以下、ｉＰＴＨと略す）として測定される。
　活性型ビタミンＤ誘導体は、ＰＴＨの産生、分泌を抑制する作用を有している。このため、活性型ビタミンＤ誘導体は、腎不全患者におけるＰＴＨ依存的な骨病変（例えば、腎性骨異栄養症）が治療できると考えられ、有用な二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤として使用されている。代表的なものとしては、活性型ビタミンＤ_２誘導体であるｐａｒｉｃａｌｃｉｔｏｌが挙げられる。
　一方、二次性副甲状腺機能亢進症患者は、高齢者に多いだけでなく、腎不全の治療に副腎皮質ステロイドがしばしば使用されることから、ＰＴＨ非依存的な骨病変（例えば、骨粗鬆症）を併発していると指摘されている。腎性骨異栄養症のリスクがある腎不全患者であっても、骨折の原因は、閉経後骨粗鬆症や老人性骨粗鬆症によるものが多いと考えられている（非特許文献１）。骨粗鬆症による骨折は、死亡率を増大させ、寝たきりの原因となることが知られている。しかしながら、臨床使用されている骨粗鬆症治療剤は、腎不全患者における臨床エビデンスの乏しさ等から、腎不全患者では使用できないことが多い（非特許文献２）。また、腎不全患者に骨粗鬆症治療剤を使用する場合であっても、血中ＰＴＨ濃度を目標範囲に制御できない患者には、投与すべきではないと考えられている（非特許文献３）。このため、二次性副甲状腺機能亢進症のみならず骨粗鬆症も同時に治療できる薬剤が切望されているが、満足なプロファイルを有する治療薬がほとんどないのが現状である。

Ｍｉｌｌｅｒ、「Ｃｌｅｖｅ．Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ｍｅｄ」、２００９年、７６巻、ｐ．７１５−７２３ Ｋａｎｓａｌ、「Ａｄｖ．Ｃｈｒｏｎｉｃ．Ｋｉｄｎｅｙ．Ｄｉｓ」、２０１０年、１７巻、ｐ．ｅ４１−ｅ５１ Ｍｉｌｌｅｒ、「Ｂｏｎｅ」、２０１１年、４９巻、ｐ．７７−８１

　本発明の目的は、新規二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤を提供することである。
　本発明の別の目的は、骨病変の治療効果を有する新規二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤を提供することである。

　本発明者らは上記目的で鋭意研究した結果、以下の発明に到達した。
　すなわち、本発明は下記式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤である。

　ここで、Ｒ_１は水素原子、炭素数１~６のアルキル基、アルキルカルボニルオキシアルキル基（それぞれのアルキルの炭素数は１~６である）、またはアリールカルボニルオキシアルキル基（アリールの炭素数は６~１０であり、アルキルの炭素数は１~６である）を表す。Ｒ_２は水素原子もしくは炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数３~６の環状アルキル基を形成していてもよい。Ｒ_３は、炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_３およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数３~６の環状アルキル基を形成していてもよい。Ｘは酸素原子またはメチレン基を表し、ｎは１または２の整数を表す。
　また、本発明は下記式（１７）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤である。

　ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３の定義は、式（１）と同じである。

　本発明によれば、新規二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤が提供される。

　図１は、実施例１７のラット副甲状腺器官培養におけるＰＴＨ分泌抑制作用の試験結果を示す図である。
　図２は、実施例１８のラット腎不全（５／６腎動脈結紮）モデルにおけるＰＴＨ分泌抑制作用の試験結果を示す図である。
　図３は、実施例１９のラット腎不全モデルにおける、腰椎の骨密度増加作用の試験結果を示す図である。
　図４は、実施例１９のラット腎不全モデルにおける、大腿骨の骨密度増加作用の試験結果を示す図である。

　本発明における用語の定義は以下の通りである。
　アルキル基とは、直鎖、分岐鎖、あるいは環状の脂肪族炭化水素基をいう。炭素数１~６のアルキル基としては、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロプロピルメチル基、シクロヘキシル基を具体的な基として挙げることができる。
　アルキルカルボニルオキシアルキル基としては、ｔ−ブチルカルボニルオキシメチル基が具体的な基として挙げることができる。
　アリールカルボニルオキシアルキル基としては、フェニルカルボニルオキシメチル基をあげることができる。
　上記式（１）中、Ｒ_１は水素原子、炭素数１~６のアルキル基、アルキルカルボニルオキシアルキル基（それぞれのアルキルの炭素数は１~６である）、またはアリールカルボニルオキシアルキル基（アリールの炭素数は６~１０であり、アルキルの炭素数は１~６である）を表す。この中でも水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基またはｔ−ブチル基が好ましく、特に水素原子またはイソプロピル基が好ましい。アルキルカルボニルオキシアルキル基としては、ｔ−ブチルカルボニルオキシメチル基が好ましい。またアリールカルボニルオキシアルキル基としては、フェニルカルボニルオキシアルキル基が好ましい。
　上記式（１）中、Ｒ_２は水素原子もしくは炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数３~６の環状アルキル基を形成していてもよい。この中でも、Ｒ_２は水素原子かメチル基、または他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子と環状アルキル基を形成する場合には、シクロプロピル基が好ましい。
　上記式（１）中、Ｒ_３は炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_３およびそれらが結合する炭素原子とともに環状アルキル基を形成していてもよい。炭素数１~６のアルキル基としては、メチル基、エチル基が好ましい。また、他方のＲ_３およびそれらが結合する炭素原子とともに環状アルキル基を形成する場合には、シクロペンチル基が好ましい。
　また、上記式（１）中、Ｘは酸素原子またはメチレン基を表す。
　また、上記式（１）中、ｎは１または２の整数を表すが、特にｎ＝１が好ましい。
　本発明の式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体の好適な具体例としては次表に示される化合物を挙げることができる。

　本発明のビタミンＤ_３誘導体は必要に応じてその医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。そのような溶媒としては、水、メタノ−ル、エタノ−ル、１−プロパノール、２−プロパノール、ブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエ−テル、ｔ−ブチルメチルエ−テル、ベンゼン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ等を挙げることができる。特に、水、メタノ−ル、エタノ−ル、１−プロパノール、２−プロパノール、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチルを好ましいものとして挙げることができる。
　上記式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体の合成はいかなる方法で行ってもよいが、例えば下記スキーム１のように行うことができる。すなわち、化合物（２）と化合物（３）をカップリングさせた後、水酸基の保護基を脱保護、および必要に応じてエステル基を加水分解することで目的物（１）を得ることができる。

　上記式（２）において、Ｒ_２、Ｘおよびｎは、上記式（１）と同一である。また、上記式（２）におけるＲ_４は、上記式（１）における、Ｒ_１を表すか、メトキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、またはベンジルオキシメチル基を表す。この中でもメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基またはｔ−ブチル基、ｔ−ブチルカルボニルオキシメチル基、フェニルカルボニルオキシアルキル基、またはベンジルオキシメチル基が好ましい。
　また、上記式（２）におけるＲ_５は、水酸基の保護基を表す。水酸基の保護基としては、メトキシメチル基、炭素数１~３のアシル基（炭素数にはカルボニル炭素を含む）、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基などが挙げられる。このうちトリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基が好ましい例として挙げられる。
　また、上記式（２）中、ｎは１もしくは２の整数を表し、特にｎ＝１が好ましい。
　上記式中化合物（３）のＲ_３は、上記式（１）のＲ_３と同様である。また化合物（３）におけるＯＰＧは、保護された水酸基を表す。具体的には、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、メトキシメチル基をあげることができる。
　上記スキーム１中、Ｒ_２が水素原子の場合、化合物（２）は、例えば、文献（高山ら、ビタミンＤ　アナログ　イン　キャンサー　プリベンション　アンド　テラピー、リーセント　リザルツ　イン　キャンサー　リサーチ（Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ａｎａｌｏｇ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｃｅｎｔ　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、１６４巻、スプリンガー社（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ）、２８９−３１７頁、２００３年など）に記載のエンイン化合物（４）から下記スキーム２に従って合成することができる。すなわち（４）の１級水酸基の保護基（ｔ−ブチルジメチルシリル基；ＴＢＳ基）を選択的に脱保護して化合物（５）を得、これの水酸基を酸化してカルボキシル基とし、次いでエステル化することで、目的とする（２）（Ｒ_２＝ＴＢＳ）を得ることができる。

　一方、上記スキーム１中、Ｒ_３がメチル基の場合、化合物（３）は以下のスキーム３のように合成することができる。
　すなわち、文献記載（例えば、米国特許第４８０４５０２号明細書）に記載の化合物（６）をブロモメチレン化することで得ることができる。

　また、上記式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体のうち、Ｒ_２が水素原子の化合物は、上記スキーム１以外に下記スキーム４に示す方法でも合成することができる。すなわち、スキーム２中の化合物（５）をピバロイル基で保護し化合物（７）を得、これをスキーム１中の化合物（３）とカップリングとＡ環２位置換基末端の水酸基の脱保護を行うことで化合物（８）を得る。得られた化合物の水酸基をカルボン酸に酸化し、最後にすべての水酸基保護基を脱保護することで得ることができる。

　また上記スキーム１中、Ｒ_２が置換されている場合、化合物（２）において、例えばＲ_２が他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子とシクロアルキル基を形成している場合、文献（高山ら、ビタミンＤ　アナログ　イン　キャンサー　プリベンション　アンド　テラピー、リーセント　リザルツ　イン　キャンサー　リサーチ（Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ａｎａｌｏｇ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｃｅｎｔ　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、１６４巻、スプリンガー社（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ）、２８９−３１７頁、２００３年など）に記載のエンイン化合物（４）と同様に、市販の４，６−Ｏ−ベンジリデン−アルファーＤ−メチル−グルコピラノシド（９）を出発物質とし、エポキシ化した後に、塩基条件下、エポキシドの開環を行い、化合物（１０）を得る。水酸基の保護で化合物（１１）を得た後、ベンジリデン環の開環、さらにグルコース１位の還元を行い、化合物（１２）を得る。続いて、ジオールよりエポキシドを形成し化合物（１３）を得、エポキシドとアセチレンの反応で３重結合部位を導入した化合物（１４）を得る。水酸基の適切な保護を行うことで、化合物（１５）を取得することができる。化合物（１５）と上記式スキーム１に記載のＣＤ環中間体（３）とのカップリングと選択的脱保護により化合物（１６）を得、さらに１級水酸基を酸化しカルボン酸とした後に、脱保護することで、目的の化合物（１）を取得することができる。

　また、本発明は下記式（１７）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤である。

　ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３の定義は、式（１）と同じである。
　式（１７）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物における、好ましいＲ_１、Ｒ_２およびＲ_３、ならびにそれらの好ましい組み合わせは、式（１）と同じである。
　式（１７）の合成法はいかなる方法で行ってもよいが、例えば下記スキーム６のように行うことができる。すなわち、スキーム１記載の化合物（２）と化合物（１８）をカップリングさせた後、水酸基の保護基を脱保護、および必要に応じてエステル基を加水分解することで目的物（１７）を得ることができる。

上記スキーム６中、化合物（１８）は、例えば下記のスキーム７のように合成することができる。すなわち、文献記載（例えば国際公開ＷＯ９５／３３７１６号パンフレット）の化合物（１９）にｎ−ブチルリチウム存在下、アセチレン化合物（２０）を作用させることで得ることができる。

　本発明における二次性副甲状腺機能亢進症には、骨病変を併発した場合が含まれる。骨病変には、ＰＴＨ依存的な骨病変およびＰＴＨ非依存的な骨病変が含まれる。ＰＴＨ依存的な骨病変としては腎性骨異栄養症があり、腎性骨異栄養症の具体例として、線維性骨炎、無形成骨、骨軟化症ＰＴＨ高値に伴う骨粗鬆症が挙げられる。ＰＴＨ非依存的な骨病変としては、腎不全に依存しない骨粗鬆症が挙げられ、具体的には、閉経後骨粗鬆症、老人性骨粗鬆症、ステロイド性骨粗鬆症が挙げられる。
　本発明のビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤は、通常製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。製剤用の担体や賦形剤としては、固体または液体いずれでもよく、例えば乳糖、ステアリン酸マグネシウム、スターチ、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、オリーブ油、ゴマ油、カカオバター、エチレングリコール等やその他常用のものが挙げられる。投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、あるいは静注、筋注等の注射剤、坐剤、経皮等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
　本発明の治療剤における有効成分の治療有効量は、投与経路、患者の年齢、性別、疾患の程度によって異なるが、通常０．０１~１０μｇ／日程度であり、投与回数は通常１~３回／日ないし１~３回／週であり、このような条件を満足するように製剤を調製するのが好ましい。

　以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって限定されるものではない。また、本発明における略号は以下の通りである。
ＴＢＳ＝ｔ−ブチルジメチルシリル基
ＴＥＳ＝トリエチルシリル基
ＴＥＳＣｌ＝クロロトリエチルシラン
ＴＭＳ＝トリメチルシリル基
ＴＭＳＣｌ＝クロロトリメチルシラン
Ｐｉｖ＝ピバロイル基
ＰｉｖＣｌ＝ピバロイルクロリド
ＴＢＡＦ＝テトラブチルアンモニウムフルオリド
ＣＳＡ＝（＋／−）−カンファー−１０−スルホン酸
ＰＤＣ＝ピリジニウムジクロメート
ＴＢＳＯＴｆ＝ｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート
ＤＩＢＡＬ＝水素化ジブチルアルミニウム
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴｓＣｌ＝ｐ−トルエンスルホニルクロリド
Ｔｓ＝ｐ−トルエンスルホニル
［実施例１］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−１）の製造

　（１）文献（例えば、Ｋｉｔｔａｋａら、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、２００４年、６９巻、７４６３−７４７１頁に）既知の化合物Ａ−１（２．２９ｇ，４．１１ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に溶解し、氷冷下で（＋／−）−カンファー−１０−スルホン酸（９５４ｍｇ，４．１１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて反応を停止し、反応液を酢酸エチルで希釈した。これを水、飽和食塩水で洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１）で精製して化合物Ａ−２（１．６４ｇ，収率９０％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．９６−５．８８（１Ｈ，ｍ），５．２７−５．２１（２Ｈ，ｍ），４．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，３．９Ｈｚ），３．８８−３．７２（５Ｈ，ｍ），３．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，４．１Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．５０−２．４６（１Ｈ，ｍ），２．３８−２．３３（１Ｈ，ｍ），２．０１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１．８５−１．６８（２Ｈ，ｍ），０．９１（９Ｈ，ｓ），０．９１（９Ｈ，ｓ），０．１０（９Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−２（１．０ｇ，２．２６ｍｍｏｌ）をピリジン（１０ｍＬ）に溶解し、０℃でピバロイルクロリド（０．６９ｍＬ，５．６５ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で攪拌した。無水メタノール（３ｍＬ）を加えて、室温でさらに３０分間攪拌した。トルエンを加えて減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１）で精製して化合物Ａ−３（１．０７２ｇ，収率９０％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．９５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１１．０，６．０Ｈｚ），５．２１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７，２．０，１．０Ｈｚ），５．１４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１１．０，２．０，１．０Ｈｚ），４．３２−４．２８（１Ｈ，ｍ），４．１８−４．１０（２Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），３．８１−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．６８−３．６０（１Ｈ，ｍ），３．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，３．４Ｈｚ），２．４９（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１７．０，２．７Ｈｚ），２．３５（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１６．９，２．８Ｈｚ），１．９６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．７Ｈｚ），１．８７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１４．０，７．０Ｈｚ），１．１９（９Ｈ，ｓ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ），０．０７（５Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（３）（ブロモメチル）トリフェニルホスホニウムブロミド（１．２５ｇ，２．８７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下、０℃に冷却した。ここに、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液，２．９０ｍＬ，２．８７ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で３０分間攪拌した。反応液を−７８℃まで冷却し、文献（例えば、Ｕｓｋｏｋｏｖｉｃら、米国特許第４８０４５０２号明細書）既知の化合物Ｂ−１（２００ｍｇ，０．５７４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１．５ｍＬ）に溶解して加えた。−７８℃で１時間攪拌後、０℃でさらに１時間攪拌した。反応液にシリカゲル（２．５ｇ）を加え、室温で１０分間激しく攪拌した後、セライトろ過した。得られたろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１）で精製して化合物Ｂ−２（１６１ｍｇ，収率６７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．９０−２．８６（１Ｈ，ｍ），２．２８−１．２４（２０Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），０．５８（３Ｈ，ｓ），０．１８（９Ｈ，ｓ）．
　（４）（３）で得られた化合物Ｂ−２（１．２ｇ，２．８２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド（１Ｍテトラヒドロフラン溶液，４．２３ｍＬ，４．２３ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃で３０分間攪拌した。酢酸エチルを加えて水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１）で精製した。精製物を無水ピリジン（１０ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下、０℃に冷却した。ここに、クロロトリエチルシラン（０．９４４ｍＬ，５．７０ｍｍｏｌ）を加え、室温まで昇温し、２．５時間攪拌した。反応液を０℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水を加え、トルエンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９９／１）で精製し、化合物Ｂ−３（７８３ｍｇ，収率８８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．９２−２．８５（１Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５，３．４Ｈｚ），２．０７−１．２４（１９Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９６（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．６６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．５７（３Ｈ，ｓ）．
　（５）（４）で得られた化合物Ｂ−３（７８３ｍｇ，１．６７ｍｍｏｌ）および（２）で得られた化合物Ａ−３（７３３ｍｇ，１．３９ｍｍｏｌ）を無水トルエン／トリエチルアミン（１／１，１１．１ｍＬ）に溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（２８９ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、１０５℃で２時間攪拌した。室温に冷却後、ジアミンシリカゲル（富士シリシア社製，６ｇ）、ｎ−ヘキサン（２０ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した後に、酢酸エチルを用いてろ過した。得られたろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→９５／５）で精製した。得られた精製物を無水テトラヒドロフラン（５．５ｍＬ）、無水メタノール（４．６ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド、メタノール溶液（０．９１ｍＬ，５．４６ｍｍｏｌ）を加えて、１時間還流した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→５０／５０）で精製し、化合物ＡＢ−１（６０９ｍｇ，収率６７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．３０（１Ｈ，ｂｒｓ），５．００（１Ｈ，ｂｒｓ），４．４６（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０５（１Ｈ，ｍ），３．８８−３．６９（４Ｈ，ｍ），３．３６（１Ｈ，ｂｒｓ），２．９４（１Ｈ，ｂｒｓ），２．８３−２．７７（１Ｈ，ｍ），２．６２−２．５６（１Ｈ，ｍ），２．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５，３．４Ｈｚ），２．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．９，４．４Ｈｚ），２．０６−１．２１（２１Ｈ，ｍ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９６（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．９３（９Ｈ，ｓ），０．８７（９Ｈ，ｓ），０．６７（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．５５（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
　（６）（５）で得られた化合物ＡＢ−１（４２７ｍｇ，０．５１４ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（５．２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した後、デスマーチン試薬（５２３ｍｇ，１．２３ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で２時間撹拌した後、室温に昇温し１時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。得られた残渣をｔ−ブタノール（２１ｍＬ）に溶解し、テトラヒドロフラン（３７ｍＬ）と２−メチルー２−ブテン（６．４７ｍＬ）を加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム（純度８０％，５８０ｍｇ，５．１４ｍｍｏｌ）とリン酸２水素ナトリウム・２水和物（４００ｍｇ，２．５７ｍｍｏｌ）の水溶液（７．３ｍＬ）を加えて、氷冷下で４５分攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０→８０／２０）で精製し、化合物ＡＢ−２（３４１ｍｇ，収率７８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．２７（１Ｈ，ｂｒｓ），４．９９（１Ｈ，ｂｒｓ），４．４５（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０７（１Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），３．３６（１Ｈ，ｂｒｓ），２．８４−２．７７（１Ｈ，ｍ），２．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１，１．５Ｈｚ），２．６０−２．５３（１Ｈ，ｍ），２．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５，３．４Ｈｚ），２．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．９，５．４Ｈｚ），２．０７−１．２１（１９Ｈ，ｍ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），０．９６（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８７（９Ｈ，ｓ），０．６７（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．５５（３Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０９（６Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
　（７）（６）で得られた化合物ＡＢ−２（１４０ｍｇ，０．１６５ｍｍｏｌ）をアセトン（１．６５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した後、塩酸（６規定、０．３３２ｍＬ）のアセトン希釈液（１．６５ｍＬ）を加え、室温で４時間攪拌した。ｎ−ヘキサン（３．３ｍＬ）を加えて、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／アセトン＝１／１）、薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／アセトン＝４／５）で粗精製し、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝０．１％ギ酸／１％メタノール／４％アセトニトリル／水；Ｂ＝０．１％ギ酸／５％水／１９％メタノール／アセトニトリル；０−２ｍｉｎ．：Ｂ＝２０％，２−２０ｍｉｎ．：Ｂ＝２０％→９８％，２０−２５ｍｉｎ．：Ｂ＝９８％，２５−３０ｍｉｎ．：Ｂ＝２０％）で精製することにより、化合物Ｃ−１（３４．９ｍｇ，収率４２％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），４．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），４．３６−３．５８（６Ｈ，ｍ），３．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１，３．２Ｈｚ），２．８６−２．７９（１Ｈ，ｍ），２．７２−２．５７（３Ｈ，ｍ），２．２９−２．１９（２Ｈ，ｍ），２．０４−１．２０（１９Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例２］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−２）の製造

　（１）実施例１（１）で得られた化合物Ａ−２（１．４５ｇ，３．２７ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）に溶解し、ピリジニウムジクロメート（６．１７ｇ，１６．４ｍｍｏｌ）を加えて、１２時間攪拌した。水を加え、ジエチルエーテルで抽出し、得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ａ−４（０．８２ｇ，収率５５％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．９０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，６．０，１１．０Ｈｚ），５．３０−５．２０（２Ｈ，ｍ），４．３３（１Ｈ，ｄｄｔ，Ｊ＝７．０，３．０，１．０Ｈｚ），３．９６（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝６．０，１．２Ｈｚ），３．８５−３．７５（１Ｈ，ｍ），３．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．３，３．７Ｈｚ），２．６３（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝５．９，１．９Ｈｚ），２．５０−２．３２（２Ｈ，ｍ），２．０２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．７Ｈｚ），０．９１（９Ｈ，ｓ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．１１（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−４（０．８２ｇ，１．７９ｍｍｏｌ）を無水メタノール（８ｍＬ）に溶解し、濃硫酸（７４μＬ，１．５ｍｍｏｌ）を加え、２．５時間攪拌した。室温に冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣を無水ジクロロメタンに溶解し、氷冷下で２，６−ルチジン（１．０１ｍＬ，９ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジメチルシリル　トリフルオロメタンスルホネート（１．６５ｍＬ，７．２ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で１時間攪拌した。無水メタノール（１．５ｍＬ）を加え、室温でさらに１０分間攪拌した。ｎ−ヘキサン／酢酸エチル（９／１）を加えて水で洗浄し、得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ａ−５（６８３．４ｍｇ，収率８１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．９４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，１７．２，６．５Ｈｚ），５．２１（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１７．３，１．３Ｈｚ），５．１４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．０，１．３Ｈｚ），４．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，３．４Ｈｚ），４．００−３．９７（１Ｈ，ｍ），３．８８−３．８２（２Ｈ，ｍ），３．６８（３Ｈ，ｓ），３．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．５，３．５Ｈｚ），２．５７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．４８（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１６．８，２．７Ｈｚ），２．３５（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１７．０，２．８Ｈｚ），１．９６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（３）（２）で得られた化合物Ａ−５（４７．０ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）および実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（４６．２ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をトルエン／トリエチルアミン（１／１，２ｍＬ）に溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（１２．５ｍｇ，０．０１０８ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、１１０℃で３時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１）で粗精製した。得られた粗精製物を無水ジクロロメタン／アセトニトリル（１／１，１ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下、０℃でリチウムテトラフルオロボレート（７８ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）、硫酸（１Ｍアセトニトリル溶液，０．０８ｍＬ，０．０８ｍｍｏｌ）を加えて３０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、これを酢酸エチルで抽出して得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣を、薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）で粗精製し、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％水／４０％メタノール／アセトニトリル；Ｂ＝７５％）で精製することにより、化合物Ｃ−２（６．８ｍｇ，１３％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），４．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），４．０６−３．７９（３Ｈ，ｍ），３．７３（３Ｈ，ｓ），３．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７，３．３Ｈｚ），２．８５−２．６０（７Ｈ，ｍ），２．２４（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１８．８，５．９Ｈｚ），２．０２−１．９６（３Ｈ，ｍ），１．８９−１．８２（２Ｈ，ｍ），１．７２−１．５４（６Ｈ，ｍ），１．５１（６Ｈ，ｓ），１．４７−１．２４（４Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
ＭＳ　ｍ／ｚ　５３７．２（Ｍ＋２３）＋５２３．３（Ｍ＋１８）＋
［実施例３］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−プロポキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−４）の製造

　（１）実施例２（１）で得られた化合物Ａ−４（２４０ｍｇ，０．５２５ｍｍｏｌ）を原料として、実施例２（２）と同様の方法でメタノールをプロパノールに替えて行い、化合物Ａ−６（１８．５ｍｇ，収率２７％）を得た。
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−６（４０．５ｍｇ，０．０８１ｍｍｏｌ）と実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（４７ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）を原料にして、実施例２（３）と同様の方法により、化合物Ｃ−４（６．８ｍｇ，１５％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），４．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），４．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），４．０６−３．９５（２Ｈ，ｍ），３．８５−３．７７（１Ｈ，ｍ），３．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，３．２Ｈｚ），２．８５−２．８２（１Ｈ，ｍ），２．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），２．７０−２．６２（４Ｈ，ｍ），２．２６−２．２２（２Ｈ，ｍ），２．０３−１．９８（３Ｈ，ｍ），１．９０−１．８０（３Ｈ，ｍ），１．７０−１．６４（７Ｈ，ｍ），１．５８−１．５３（４Ｈ，ｍ），１．５１（６Ｈ，ｓ），１．４８−１．４５（２Ｈ，ｍ），１．４０−１．２０（４Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９４（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例４］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１−メチル）エトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−５）の製造

　（１）実施例２（１）で得られた化合物Ａ−４（２４０ｍｇ，０．５２５ｍｍｏｌ）を原料として、実施例２（２）と同様の方法でメタノールをイソプロパノールに替えて行い、化合物Ａ−７（１５７．４ｍｇ，収率６０％）を得た。
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−７（３５ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）と実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（４４ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）を原料にして、実施例２（３）と同様の方法により、化合物Ｃ−５（６．８ｍｇ，１７％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），５．０９−５．０２（２Ｈ，ｍ），４．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），４．０５−３．７８（３Ｈ，ｍ），３．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７，３．３Ｈｚ），２．８５−２．５８（６Ｈ，ｍ），２．２８−１．５３（１８Ｈ，ｍ），１．５１（６Ｈ，ｓ），１．４６−１．３０（５Ｈ，ｍ），１．２６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），１．２４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例５］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｄ−１）の製造

　（１）文献（例えば、Ｓａｉｔｏら、テトラヘドロン（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）、２００４年、６０巻、７９５１−７９６１頁））既知の化合物（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３，５−Ｂｉｓ［（ｔ−ｂｕｔｙｌｄｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ）ｏｘｙ］−４−［３−｛（ｔ−ｂｕｔｙｌｄｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ）ｏｘｙ｝ｐｒｏｐｙｌ］ｏｃｔ−１−ｅｎｅ−７−ｙｎｅから実施例１（１）と同様の方法で得られる化合物Ａ−８（０．７２ｇ，１．６９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６．８ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（０．４７ｍＬ，３．３７ｍｍｏｌ）、塩酸トリメチルアミン（１６ｍｇ，０．１６９ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（０．４８ｇ，２．５３ｍｍｏｌ）を加えて、室温で１時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られる残渣をジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解し、シアン化ナトリウム（１９９ｍｇ，４．０６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（３８０ｍｇ，２．５３ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃で２時間攪拌した。水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮して、粗体の化合物Ａ−９を得た。これをテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド（１Ｍテトラヒドロフラン溶液，５．０７ｍＬ，５．０７ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で１時間攪拌した。酢酸エチルを加え、水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、０℃でイミダゾール（４６０ｍｇ，６．７６ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（２１ｍｇ，０．１６９ｍｍｏｌ）、クロロトリエチルシラン（０．８５１ｍＬ，５．０７ｍｍｏｌ）を加えて５０℃で４０分攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン→２％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン→５％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン→１０％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ａ−１０（５３１．３ｍｇ，収率７２％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．０，７．０Ｈｚ），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．１Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．０Ｈｚ），４．００−３．９５（１Ｈ，ｍ），２．４２−２．３７（２Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），１．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１．８５−１．６５（３Ｈ，ｍ），１．４３−１．２９（２Ｈ，ｍ），１．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），０．８９（１９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−１０（４４９．４ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、−７８℃で冷却下、水素化ジイソブチルアルミニウム（１Ｍトルエン溶液，２．０８ｍＬ，２．０８ｍｍｏｌ）を加えて−７８度で５０分間攪拌した。無水メタノール（０．３ｍＬ）を加えて室温で２０分間攪拌し、さらに飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液を加えて、１０分間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をテトラヒドロフラン（６．９ｍＬ）に溶解し、ｔ−ブタノール（６．９ｍＬ）と２−メチルー２ブテン（４．５ｇ）を加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム（９３１ｍｇ，１０．３ｍｍｏｌ）とリン酸２水素ナトリウム（８０３ｍｇ，５．１５ｍｍｏｌ）の水溶液（６．９ｍＬ）を加えて、１時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１００／１→５０／１→２０／１→１０／１→５／１→２／１）で精製し、化合物Ａ−１１（２２０ｍｇ，４７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．０，７．０Ｈｚ），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．１Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．０Ｈｚ），４．００−３．９５（１Ｈ，ｍ），２．４２−２．３７（２Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），１．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１．８５−１．６５（３Ｈ，ｍ），１．４３−１．２９（２Ｈ，ｍ），１．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），０．８９（１９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（３）（２）で得られた化合物Ａ−１１（１２６．６ｍｇ，０．２７８ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１．２ｍＬ）に溶解し、０℃で冷却下、トリエチルアミン（０．１２６ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）を加えて４０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９５／５）で精製し、化合物Ａ−１２（１２６．５ｍｇ，７９％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．０，７．０Ｈｚ），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．１Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．０Ｈｚ），４．００−３．９５（１Ｈ，ｍ），２．４２−２．３７（２Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），１．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１．８５−１．６５（３Ｈ，ｍ），１．４３−１．２９（２Ｈ，ｍ），１．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），０．８９（１９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（４）（３）で得られた化合物Ａ−１２（４６ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）および実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（４７ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）をトルエン／トリエチルアミン（１／１，２ｍＬ）に溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（１２ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、１１０℃で３時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１）で粗精製した。得られた粗精製物をアセトンに溶解し、塩酸（６Ｎ，０．１ｍＬ，０．６ｍｍｏｌ）を加えて０℃で５０分攪拌し、さらに塩酸（６Ｎ，０．２ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ）を加えて室温で４０分攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をボンドエリュートＳＩ（バリアン製　ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１／２→酢酸エチル→酢酸エチル／酢酸＝９９／１）で粗精製した。さらに粗精製物を、逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％酢酸／５％水／アセトニトリル；Ｂ＝６５％）で精製することにより、化合物Ｄ−１（１４．６ｍｇ，３６％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），４．３９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），３．９２−３．８４（１Ｈ，ｍ），２．８６−２．７９（１Ｈ，ｍ），２．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．３，４．３Ｈｚ），２．３０−２．２０（４Ｈ，ｍ），２．０５−１．９６（３Ｈ，ｍ），１．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），１．８１−１．６４（８Ｈ，ｍ），１．５６（６Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１５．３，４．５Ｈｚ），１．５１（６Ｈ，ｓ），１．４９−１．４６（３Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ），１．４０−１．２４（５Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例６］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１，１−ジメチル）エトキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｄ−６）の製造

　（１）実施例５（１）で得られた化合物Ａ−９（５６５ｍｇ，１．２９ｍｍｏｌ）をジクロロメタンに溶解し、−７８℃で冷却下、水素化ジイソブチルアルミニウム（１Ｍトルエン溶液，２ｍＬ，２ｍｍｏｌ）を加えて−７８度２時間で攪拌した。無水メタノール（１ｍＬ）を加えて室温で２０分間攪拌し、さらに飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液を加えて、１０分間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をテトラヒドロフラン（１８．３ｍＬ）に溶解し、ｔ−ブタノール（１８．３ｍＬ）と２−メチルー２ブテン（６ｍＬ）を加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム（１．４７ｇ，１３ｍｍｏｌ）とリン酸２水素ナトリウム（１．０１ｇ，６．５ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）を加えて、１時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１→７／１→５／１）で精製し、化合物Ａ−１３（２３３．７ｍｇ，３８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．０，７．０Ｈｚ），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．１Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．０Ｈｚ），４．００−３．９５（１Ｈ，ｍ），２．４２−２．３７（２Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），１．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１．８５−１．６５（３Ｈ，ｍ），１．４３−１．２９（２Ｈ，ｍ），１．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），０．８９（１９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−１３（２２８．４ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）にトルエン（５ｍＬ）を加え、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド　ジｔ−ブチルアセタール（１．１ｍＬ，４ｍｍｏｌ）を加えて、８０℃で１時間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（３％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製し、化合物Ａ−１４（１１８．５ｍｇ，４６％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．８３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．０，７．０Ｈｚ），５．１５（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１７．２，１．０Ｈｚ），５．１０（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１０．０，１．０Ｈｚ），４．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，５．０Ｈｚ），４．００（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝６．２，３．８Ｈｚ），２．３９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．１，２．７Ｈｚ），２．１７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），１．７９−１．６３（３Ｈ，ｍ），１．４４（９Ｈ，ｓ），１．４０−１．２０（４Ｈ，ｍ），０．８９（１８Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０５（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（３）（２）で得られた化合物Ａ−１４（５９．６ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）および実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（６０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）をトルエン／トリエチルアミン（１／１，２ｍＬ）に溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（１７ｍｇ，０．０１４７ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下、１１０℃で３．５時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１）で粗精製した。得られた粗精製物をテトラヒドロフランに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド（１Ｍテトラヒドロフラン溶液，０．８４ｍＬ，０．８４ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で２時間攪拌した。酢酸エチルでを加え、水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で粗精製し、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％水／４０％メタノール／アセトニトリル；Ｂ＝８５％）で精製することにより、化合物Ｄ−６（５．０ｍｇ，７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），４．３９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），３．９２−３．８４（１Ｈ，ｍ），２．８６−２．７９（１Ｈ，ｍ），２．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．３，４．３Ｈｚ），２．３０−２．２０（４Ｈ，ｍ），２．０５−１．９６（３Ｈ，ｍ），１．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），１．８１−１．６４（８Ｈ，ｍ），１．５６（６Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１５．３，４．５Ｈｚ），１．５１（６Ｈ，ｓ），１．４９−１．４６（３Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ），１．４０−１．２４（５Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例７］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（ｔ−ブチルカルボニルオキシ）メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−７）の製造

　（１）実施例２（１）で得られた化合物Ａ−４（１６４．３ｍｇ，０．３６０ｍｍｏｌ）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、トリエチルアミン（０．１５ｍＬ，１．０８ｍｍｏｌ）、ピバロイルオキシメチルクロリド（０．１０４ｍＬ，０．７１９ｍｍｏｌ）を加えて、室温で１時間攪拌した。１時間後、ヨウ化ナトリウム（１５０ｍｇ，１．００８ｍｍｏｌ），炭酸カリウム（１４０ｍｇ，１．００８ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃でさらに３０分間加熱撹拌した。室温まで冷却し、水で希釈後、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で精製し、化合物Ａ−１５（１５８．０ｍｇ，収率７７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．９８−５．９０（１Ｈ，ｍ），５．７６（２Ｈ，ｓ），５．２１（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１７．３２，１．４６Ｈｚ），５．１４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．３７，１．１０Ｈｚ），４．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．００，３．００Ｈｚ），４．０２−３．８２（３Ｈ，ｍ），３．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６１，３．４１Ｈｚ），２．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７１Ｈｚ），２．４７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１６．８３，２．６８，５．５０Ｈｚ），２．３４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１６．８３，２．７６，５．５０Ｈｚ），１．９６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６８Ｈｚ），１．２１（９Ｈ，ｓ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−１５（４０ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）と実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（３６ｍｇ，０．０８５ｍｍｏｌ）を原料にして、実施例２（３）と同様の方法により、化合物Ｃ−７（７．８ｍｇ，１８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．４７Ｈｚ），６．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ），５．８１−５．７６（２Ｈ，ｍ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２０Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｓ），４．０４−３．９５（２Ｈ，ｍ），３．８５−３．８０（１Ｈ，ｍ），３．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５６，３．１７Ｈｚ），２．８５−２．５７（６Ｈ，ｍ），２．２８−１．８１（８Ｈ，ｍ），１．５９−１．２４（１６Ｈ，ｍ），１．２３（９Ｈ，ｓ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例８］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（フェニルカルボニルオキシ）メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｃ−８）の製造

　実施例２（１）で得られた化合物Ａ−４（１７５ｍｇ，０．３８３ｍｍｏｌ）を原料として、実施例７（１）におけるピバロイルオキシメチルクロリドをベンゾイルオキシメチルクロリドに替えて、実施例７（１）と同様に行い化合物Ａ−１６を得たのちに、化合物Ａ−１６（４１．３ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）と実施例１（３）で得られた化合物Ｂ−２（３４ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）を出発物質として、実施例７（２）と同様にして、化合物Ｃ−８（４．９ｍｇ，１１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：８．０９−８．０７（２Ｈ，ｍ），７．６２−７．４４（３Ｈ，ｍ），６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），６．０５−６．０１（３Ｈ，ｍ），５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ），５．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９３Ｈｚ），４．０５−３．９７（２Ｈ，ｍ），３．８７−３．８２（１Ｈ，ｍ），３．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５６，３．１７Ｈｚ），２．８５−２．６４（４Ｈ，ｍ），２．３２−２．１８（２Ｈ，ｍ），２．０５−１．５３（９Ｈ，ｍ），１．４９−１．２４（４Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ），０．５５（３Ｈ，ｓ）．
［実施例９］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（２−カルボキシー２，２−エタノ）エトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｅ−１）の製造

　（１）文献（例えば、Ｋｉｔｔａｋａら、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、２００４年、６９巻、７４６３−７４７１頁に）記載の化合物Ａ−１７（６．０３ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）をＮ−メチルピロリドン（６０ｍＬ）に溶解し、カリウムｔ−ブトキシド（１１．８８ｇ，１１４ｍｍｏｌ）を加えて、１３０度で４時間、加熱撹拌した。室温まで冷却し、水（２４０ｍＬ）を加え、ダイヤイオンＨＰ−２０ＳＳ（三菱化学製、３０ｇ（乾燥重量））を加えて、室温で一晩撹拌した。ろ過し、固体を飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）で洗浄し、アセトン（５００ｍＬ）で溶出した。溶出液を減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１／４）で精製し、化合物Ａ−１８（１．７８ｇ，２１％）を得た。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：７．５１−７．３６（５Ｈ，ｍ），５．５４（１Ｈ，ｓ），４．６１（１Ｈ，ｓ），４．４０−４．２９（２Ｈ，ｍ），４．０８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．２７Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２７，２．６８Ｈｚ），３．９３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ），３．８３−３．７５（３Ｈ，ｍ），３．６０−３．５０（３Ｈ，ｍ），３．４１（３Ｈ，ｓ），０．５９−０．４１（３Ｈ，ｍ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ａ−１８（２．９７ｇ，８．１０ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（３０ｍＬ）に溶解して０℃に冷却し、ピバロイルクロリド（１．１５ｍＬ，９．３２ｍｍｏｌ）を加えて同温で１時間攪拌した。無水メタノール（３ｍＬ）を加え、室温で５分間撹拌し、減圧濃縮した。トルエンに溶解して飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮、乾燥した。この粗体を無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解して０℃に冷却し、２，６−ルチジン（１．３ｍＬ，１１．６ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジメチルシリル　トリフルオロメタンスルホネート（２．１４ｍＬ，９．３２ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で１時間攪拌した。無水メタノール（５ｍＬ）を加えた後、減圧濃縮した。トルエンに溶解し、水で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン→１０％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ａ−１９（３．１９ｇ，収率６９％）を得た。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：７．４９−７．３４（５Ｈ，ｍ），５．５６（１Ｈ，ｓ），４．４５（１Ｈ，ｓ），４．２９−４．２５（２Ｈ，ｍ），４．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ），３．９８−３．９２（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．０８Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６８Ｈｚ），３．５６（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２９．７６，９．５１Ｈｚ），３．３５（３Ｈ，ｓ），１．１９（９Ｈ，ｓ），０．９１（９Ｈ，ｓ），０．６１−０．５１（４Ｈ，ｍ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ）．
　（３）（２）で得られたＡ−１９（３．１７ｇ，５．６１ｍｍｏｌ）をシクロヘキサン（６３ｍＬ）に溶解し、炭酸バリウム（７７５ｍｇ，３．９２ｍｍｏｌ）、過酸化ベンゾイル（１３６ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．２１ｇ，６．７３ｍｍｏｌ）を加えて、１時間加熱還流した。冷却後、セライトろ過し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して、粗体（４．０ｇ）を得た。この粗体を１−プロパノール（３６ｍＬ）と水（４ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、活性化させた亜鉛（７．３８ｇ，１１２．２ｍｍｏｌ）とシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１．４２ｇ，２２．４ｍｍｏｌ）を加えて１時間加熱還流した。冷却後、セライトろ過し、固体を１−プロパノールで洗浄後、液体を減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０→８０／２０）で精製し、化合物Ａ−２０（１．５０ｇ，収率５０％）を得た。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：８．０５−８．０２（２Ｈ，ｍ），７．５９−７．４３（３Ｈ，ｍ），６．１１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１１．００，１７．３２，６．００Ｈｚ），５．７８−５．７５（１Ｈ，ｍ），５．４１（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１７．３２，１．３４Ｈｚ），５．３０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．４９，１．２２Ｈｚ），４．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．４７Ｈｚ），３．９６−３．９３（２Ｈ，ｍ），３．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４７，５．１２Ｈｚ），３．７３−３．６８（２Ｈ，ｍ），３．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ），３．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ），１．１８（９Ｈ，ｓ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．５５（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
　（４）（３）で得られたＡ−２０（２．４１ｇ，４．５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２５ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン（１．２６ｍＬ，９ｍｍｏｌ）、トリメチルアミン塩酸塩（８６ｍｇ，０．９ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（１．３０ｇ，６．８ｍｍｏｌ）の順に加えて室温で１時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。この粗体（３．３１ｇ）をテトラヒドロフラン（１８ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフロリド（１Ｍテトラヒドロフラン溶液，１３．５ｍＬ，１３．５ｍｍｏｌ）を加えて、１．５時間加熱還流した。冷却後、減圧濃縮した後にトルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０）で精製し、化合物Ａ−２１（８５１ｍｇ，収率４７％）を得た。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：８．０６−８．０２（２Ｈ，ｍ），７．６１−７．４４（３Ｈ，ｍ），６．１０−６．０１（１Ｈ，ｍ），５．６７−５．６４（１Ｈ，ｍ），５．４２（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１７．２４，１．３４Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．５７，１．２２Ｈｚ），４．０４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２７．３２，１１．２２Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ），３．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ），３．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３２，５．３７Ｈｚ），３．１０−３．０６（１Ｈ，ｍ），２．７５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ），２．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８８，２．９３Ｈｚ），１．１９（９Ｈ，ｓ），０．５５（４Ｈ，ｓ）．
　（５）トリメチルシリルアセチレン（１．６２ｍＬ，１１．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（３ｍＬ）を窒素雰囲気下にし、溶液をドライアイスーアセトンで冷却した。ここに、ｎ−ブチルリチウム　ヘキサン溶液（２．６４Ｍ，３．９７ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）を加えて４５分撹拌した。ここに、（４）で得られた化合物Ａ−２１（８４６ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）、トリフルオロボランージエチルエーテル錯体（０．３４３ｍＬ，２．７３ｍｍｏｌ）を加え、ドライアイスーアセトン冷却下で２時間、０℃で１時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて室温に戻し、酢酸エチルで希釈した。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水の順で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮した。得られた残渣を無水メタノール（１０ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（８７０ｍｇ，６．３ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃で１時間加熱撹拌した。冷却後、減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６０／４０→５０／５０→３５／６５）で精製し、化合物Ａ−２２（３１１．５ｍｇ，収率６２％）を得た。
^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．５７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１７．００，１１．００，６．００Ｈｚ），４．８８（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１７．００，１．７０Ｈｚ），４．７３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１１．００，１．７０Ｈｚ），３．８５−３．８１（１Ｈ，ｍ），３．５１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．４２，５．７３，２．０７Ｈｚ），３．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５０Ｈｚ），３．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５０Ｈｚ），２．８５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．６３，２．２０Ｈｚ），２．１２−１．９２（２Ｈ，ｍ），１．８５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．６８Ｈｚ）．
　（６）（５）で得られた化合物Ａ−２２（５３４．４ｍｇ，２．２６ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（７．５ｍＬ）に溶解し、０℃でピバロイルクロリド（０．２７６ｍＬ，２．２６ｍｍｏｌ）を加えて、同温で４５分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。トルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣を無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、０℃で２，６−ルチジン（１．１ｍＬ，９．２２ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジメチルシリル　トリフルオロメタンスルホネート（１．７ｍＬ，７．５５ｍｍｏｌ）を加えて同温で１．５時間撹拌した。酢酸エチルを加えて飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝９９／１→８５／１５）で精製し、化合物Ａ−２３（１．０８ｇ，収率９１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．００−５．９１（１Ｈ，ｍ），５．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．３２Ｈｚ），５．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．００Ｈｚ），４．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０７，３．９０Ｈｚ），４．０３（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１９．０３，１１．２２Ｈｚ），３．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．７３，５．８５Ｈｚ），３．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ），３．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ），３．３９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．２７Ｈｚ），２．５１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１６．８３，６．００，３．００Ｈｚ），２．３６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１６．７１，６．１０，２．５６Ｈｚ），１．９５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．５６Ｈｚ），１．１９（９Ｈ，ｓ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８８（９Ｈ，ｓ），０．５５−０．４８　３Ｈ，ｍ），０．１１（３Ｈ，ｓ），０．０９（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．０３（３Ｈ，ｓ）．
　（７）（６）で得られた化合物Ａ−２３（７０ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）と実施例１（４）で得られた化合物Ｂ−３（６９ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を出発物質として、実施例１（５）と同様に反応させることで、化合物ＡＢ−３（４８．１ｍｇ，３７．４％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），６．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．４７Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｓ），５．０１（１Ｈ，ｓ），４．４７（１Ｈ，ｓ），４．０３（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝４．１５Ｈｚ），３．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０３Ｈｚ），３．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．１０，４．０３Ｈｚ），３．４６−３．３９（２Ｈ，ｍ），３．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５１Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｂｒ　ｓ），２．８０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），２．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４２Ｈｚ），２．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．３４，３．４２Ｈｚ），２．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．１５Ｈｚ），２．０５−１．８４（４Ｈ，ｍ），１．６６−１．４９（１２Ｈ，ｍ），１．４３−１．３０（４Ｈ，ｍ），１．０７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），０．９８−０．８３（３６Ｈ，ｍ），０．８２−０．８１（２Ｈ，ｍ），０．７０−０．６４（９Ｈ，ｍ），０．５７−０．５４（６Ｈ，ｍ），０．５１−０．３６（６Ｈ，ｍ），０．１１（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．０８（３Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
　（８）（７）で得られた化合物ＡＢ−３（４８．１ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）を原料として、実施例１（６）と同様の方法で、処理した。この反応物（２８．５ｍｇ，０．０３２７ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン／アセトニトリル（１／１　１ｍＬ）の混合溶媒に溶解して０℃に冷却した後、トシル酸一水和物（３１ｍｇ，０．１６３ｍｍｏｌ）、リチウムテトラフルオロボレート（３０ｍｇ，０．３２７ｍｍｏｌ）を加えて３０分間同温で撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／アセトン＝９／１＋０．５％酢酸）で粗精製し、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％水／４０％メタノール／アセトニトリル；Ｂ＝８５％）で精製することにより、化合物Ｅ−１（４．９ｍｇ，１６．６％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ），６．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｓ），５．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ），４．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６８Ｈｚ），４．０６−３．８２（２Ｈ，ｍ），３．５５−３．２５（２Ｈ，ｍ），２．８８−２．６０（２Ｈ，ｍ），２．２８−１．５４（１３Ｈ，ｍ），１．４２−１．２０（１０Ｈ，ｍ），１．１０−１．０８（１Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例１０］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２６，２７−ジメチル−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｆ−１）の製造

　（１）トリメチルシリルアセチレン（１．８４ｍＬ，１３．０ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下、氷浴で冷却しながらｎ−ブチルリチウム（１．５９Ｍ　ｎ−ヘキサン溶液，８．１８ｍＬ，１３．０ｍｍｏｌ）を１０分間で滴下した。ここにＴａｎａｋａらの方法（国際公開ＷＯ９８／５８９０９明細書）により合成される化合物Ｂ−４（１．９１ｇ，４．３３ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解して加え、１１０℃で２４時間加熱還流した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて攪拌した後、ｎ−ヘキサンで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、これを減圧濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン−メタノール（１：１，２０ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（７１８ｍｇ，５．２０ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩攪拌した。反応液に水を加えた後にｎ−ヘキサンで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ｂ−５（１．１４ｇ，収率８９％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．９０−２．８６（１Ｈ，ｍ），２．２５（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１６．６，３．０Ｈｚ），２．１０−１．８８（５Ｈ，ｍ），１．７２−１．２５（９Ｈ，ｍ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．５８（３Ｈ，ｓ）ｐｐｍ．
　（２）（１）で得られた化合物Ｂ−５（３０１ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下、−７８℃に冷却しながらｎ−ブチルリチウム（１．５９Ｍ　ｎ−ヘキサン溶液，０．６７３ｍＬ，１．０２ｍｍｏｌ）を滴下し、３０分間攪拌した。ここに３−ペンタノン（０．２１６ｍＬ，２．０４ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃のまま１時間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて室温に昇温した。反応液を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／１）で精製して化合物Ｂ−６（２０５ｍｇ，収率５３％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），５．３９（１Ｈ，ｓ），５．１０（１Ｈ，ｓ），４．４４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．９Ｈｚ），４．１１−４．０７（１Ｈ，ｍ），３．８４−３．８１（１Ｈ，ｍ），３．７５−３．６８（２Ｈ，ｍ），３．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．４，３．３Ｈｚ），２．８４−２．８１（１Ｈ，ｍ），２．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．７，４．４Ｈｚ），２．５２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．２９−２．２０（３Ｈ，ｍ），２．１５−１．８３（６Ｈ，ｍ），１．７０−１．２２（１４Ｈ，ｍ），１．０８−１．０１（９Ｈ，ｍ），０．５５（３Ｈ，ｓ）ｐｐｍ．
　（３）（２）で得られた化合物Ｂ−６（３９６ｍｇ，１．０４ｍｍｏｌ）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解し、クロロトリエチルシラン（０．２８３ｍＬ，１．６８ｍｍｏｌ）、イミダゾール（１５２ｍｇ，２．２３ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２７ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃で１時間加熱撹拌した。室温まで冷却し、無水メタノール（１ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。トルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０）で精製して化合物Ｂ−７（４５４．８ｍｇ，収率８８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．９１−２．８５（１Ｈ，ｍ），２．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．４６，３．５４Ｈｚ），２．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５８，６．８３Ｈｚ），２．０２−１．８８（４Ｈ，ｍ），１．７１−１．５８（９Ｈ，ｍ），１．５４−１．２４（７Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ），０．９８−０．９１（２２Ｈ，ｍ），０．７３−０．６４（９Ｈ，ｍ），０．５８（３Ｈ，ｓ），０．５２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）．
　（４）実施例２（１）で得られた化合物Ａ−４（４５７ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．４２１ｍＬ，３ｍｍｏｌ）、クロロメチルベンジルエーテル（０．２７６ｍＬ，２ｍｍｏｌ）を加えて、０℃で１時間４５分撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後に、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９５／５）で精製し、化合物Ａ−２４（４８５ｍｇ，収率８４％）を得た。
　（５）（３）で得られた化合物Ｂ−７（４４ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）と（４）で得られた化合物Ａ−２４（４３ｍｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）を出発原料として、実施例５（４）記載の方法に準じて、カップリング反応と脱保護反応を行った。得られた反応粗体は薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／アセトン＝４／１＋酢酸（１．５ｖ／ｖ％））で粗精製した後に、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％水／４０％メタノール／アセトニトリル；Ｂ＝７５％）で精製することにより、化合物Ｆ−１（４．７ｍｇ，１２％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ），５．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ），４．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９３Ｈｚ），４．０８−３．９４（２Ｈ，ｍ），３．８２−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１７，３．０５Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２０Ｈｚ），２．６９−２．６０（３Ｈ，ｍ），２．３０−２．２０（２Ｈ，ｍ），１．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７１Ｈｚ），１．９１−１．８０（１Ｈ，ｍ），１．７２−１．２４（１６Ｈ，ｍ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ），１．０３（８Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４４Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例１１］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２６，２７−ノル−２５−シクロペンチル−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール（化合物Ｆ−２）の製造

　（１）実施例１０（１）で得られた化合物Ｂ−５（４４２ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を出発物質として、実施例１０（２）と同様の方法に従って、化合物Ｂ−８とシクロペンタノンの混合物（４２７．２ｍｇ）を得た。この粗体を出発物質とし、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．５ｍＬ）、クロロトリエチルシラン（０．２８３ｍＬ，１．６８ｍｍｏｌ）、イミダゾール（１５２ｍｇ，２．２３ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２７ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を用い、実施例１０（３）と同様の方法により、化合物Ｂ−９（５０６．２ｍｇ，収率６８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．９２−２．８５（１Ｈ，ｍ），２．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．４６，３．２９Ｈｚ），２．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．１０，６．８３Ｈｚ），２．０２−１．５７（１９Ｈ，ｍ），１．５４−１．２６（７Ｈ，ｍ），１．０７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ），０．９８−０．９１（１５Ｈ，ｍ），０．７３−０．６３（８Ｈ，ｍ），０．５７（３Ｈ，ｓ），０．５２（３Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）．
　（２）（１）で得られた化合物Ｂ−９（４４ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）と実施例１０（４）で得られた化合物Ａ−２４（４３ｍｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）を出発物質として、実施例１０（５）と同様の方法により、化合物Ｆ−２（２．０ｍｇ，収率５％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．９８Ｈｚ），５．３６（１Ｈ，ｓ），５．０７（１Ｈ，ｓ），４．４６（１Ｈ，ｓ），４．１０−３．９３（２Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｂｒ　ｓ），３．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），３．０７−２．６２（９Ｈ，ｍ），２．３０−２．１９（２Ｈ，ｍ），２．０５−１．２４（２５Ｈ，ｍ），１．０６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例１２］（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３−ジオール（化合物Ｇ−１）の製造

（１）３−メチル−１−ブチン（２．１４ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下、氷浴で冷却しながらｎ−ブチルリチウム（２．６４Ｍ　ｎ−ヘキサン溶液、７．９５ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）を１５分間で滴下した。ここにＴａｎａｋａらの方法（国際公開ＷＯ９８／５８９０９明細書）により合成される化合物Ｂ−９（３．１９ｇ、７．００ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解して加え、１１０℃で２４時間加熱還流した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて攪拌した後、ｎ−ヘキサンで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルを通じて濾過した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン→３％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン）で精製して化合物Ｂ−１０（１．６６ｇ、収率７０％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：５．６５（１Ｈ，ｓ），２．８９−２．８６（１Ｈ，ｍ），２．５４−２．５２（１Ｈ，ｍ），２．２２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１６．４，３．４，２．４Ｈｚ），２．０２−１．８６（４Ｈ，ｍ），１．７１−１．２６（９Ｈ，ｍ），１．１１（９Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２１．３，１１．７，４．９Ｈｚ），０．５７（３Ｈ，ｓ）ｐｐｍ．
（２）（１）で得られた化合物Ｂ−１０（２３６ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ）と実施例１（２）で得られた化合物Ａ−３（２６２．０ｍｇ，０．４９６ｍｍｏｌ）を原料にして、実施例１（５）と同様の方法により、化合物ＡＢ−４（１９９．４ｍｇ，５７％）を得た後に、このＡＢ−４（１９１．０ｍｇ，０．２７３ｍｍｏｌ）を原料にして、実施例２（１）と同様の方法により、化合物ＡＢ−５（３４．６ｍｇ，１７．７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．１５Ｈｚ），５．２８（１Ｈ，ｓ），５．００（１Ｈ，ｓ），４．４６（１Ｈ，ｓ），４．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，５．１Ｈｚ），３．９０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．３８（１Ｈ，ｓ），２．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０Ｈｚ），２．６５−２．６２（３Ｈ，ｍ），２．５８−２．５０（３Ｈ，ｍ），２．２２（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１５．０，２．０Ｈｚ），２．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．１，５．１Ｈｚ），２．０１−１．２９（２６Ｈ，ｍ），１．１５（９Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．８７（９Ｈ，ｓ），０．５５（３Ｈ，ｓ），０．１０（３Ｈ，ｓ），０．０９（６Ｈ，ｓ），０．０７（３Ｈ，ｓ）．
（３）（２）で得られたＡＢ−５（３４．６ｍｇ，０．０４８５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）と無水アセトニトリル（１ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、０℃撹拌下、りちうむテトラフルオロボレート（４６．９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）、１Ｍ硫酸／アセトニトリル溶液（０．０３９ｍＬ，０．０３９ｍｍｏｌ）を加えて、０℃で１時間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチル抽出、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後に濃縮した。得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／アセトン＝４／１＋酢酸（１．５ｖ／ｖ％））で粗精製した後に、さらに逆相ＨＰＬＣ（Ａ＝９５％水／アセトニトリル；Ｂ＝０．５％水／４０％メタノール／アセトニトリル；Ｂ＝８５％）で精製することにより、化合物Ｇ−１（４．５ｍｇ，１９％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：６．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），４．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），４．０８−３．９６（２Ｈ，ｍ），３．８２−３．７６（１Ｈ，ｍ），３．３４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１，３．２Ｈｚ），２．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），２．６８−２．４８（４Ｈ，ｍ），２．２７−２．１９（２Ｈ，ｍ），２．０１−１．２１（１６Ｈ，ｍ），１．１５（８Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０６（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．５４（３Ｈ，ｓ）．
［実施例１３］
ＶＤＲ親和性評価
　ＶＤＲの評価は市販の測定評価キット、例えばインビトロジェン社が販売するポーラースクリーン　ビタミン　Ｄ　レセプター　コンペティターアッセイ　レッド（ＰＯＬＡＲＳＣＲＥＥＮ　ＶＩＴＡＭＩＮ　Ｄ　ＲＥＣＥＰＴＯＲ　ＣＯＭＰＥＴＩＴＯＲ　ＡＳＳＡＹ，ＲＥＤ　（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）　Ｃａｔ．Ｎｏ．ＰＶ４５６９）を用いて、以下の手順で、評価を行った。
　３８４ウェル　ブラックプレートに２ウェルずつ、化合物溶液を１０μＬずつ加えた。キットに含まれているＶＤＲ／Ｆｌｕｏｒｏｍｏｎｅ　ＶＤＲ　Ｃｏｍｐｌｅｘを各ウェルに１０μＬずつ加え、室温で２時間反応させた。２時間後、蛍光偏光を測定し、親和性を評価した。
　なお、親和性は、１，２５−（ＯＨ）２−ビタミンＤ_３の親和性を１とした場合の相対値（１／Ｘ）で評価した。

　本発明で得られた化合物は、強いＶＤＲ親和性を有することが確認された。特に、化合物Ｃ−１、化合物Ｄ−１は非常に強いＶＤＲ親和性を有することが判明した。
［実施例１４］
ヒト骨芽細胞（ＨＯＳ細胞）におけるＶＤＲ転写活性
（１）レポーターベクターはｐＧＬ３ベクター（ｐｒｏｍｅｇａ社）を用い、ルシフェラーゼ遺伝子の上流に、文献既知の方法（Ｏｚｏｎｏら、ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　）、２６５巻、２１８８１−２１８８８頁、１９９０年）で得られるヒトオステオカルシン遺伝子プロモーター部分の配列を、ＨＯＳ細胞（ＡＴＣＣより入手）から取得したｃＤＮＡよりクローニングし、組み込んで構築した。発現ベクターはｐＣＤＮＡ３ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にヒトＶＤＲおよびヒトＲＸＲをコードするＤＮＡ配列を挿入して構築した。ＨＯＳ細胞は１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ_２の条件で培養し、２日あるいは３日ごとに継代した。
（２）継代培養していた細胞を遠心回収し、無血清、フェノールレッド不含のＤＭＥＭ培地に４×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度で分散させ、９６ウェルプレートに０．１ｍＬ／ウェルで播種した。この系に、（１）に記載した各種ベクターをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）試薬を用いてウェルあたり０．０５ｍＬ添加した。３７℃で３時間インキュベートした後、各ウェルに各種濃度の被験化合物エタノール溶液あるいはコントロールとしてエタノールを２μＬずつ添加した。３７℃で２４時間インキュベートした後、培地を取り除き、ＰＢＳ（−）で一度洗浄した後、ＤｕａｌＧｌｏ−Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　Ａｓｓａｙ　ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、ルミノメータ（ベルトールド社）によりルシフェラーゼ活性を測定した。
　その結果、本発明の化合物は、いずれもＥＣ_５０値が２０ｎＭ以下の転写活性を有することが判明した。さらに、化合物Ｃ−１、Ｃ−２、Ｄ−１、Ｅ−１、Ｆ−１、Ｆ−２については、ＥＣ_５０値が０．２ｎＭ以下の転写活性を有することが判明した。特に、化合物Ｄ−１、Ｆ−１、Ｆ−２については、ＥＣ_５０値が０．０２ｎＭ以下の転写活性を有することが判明した。
［実施例１５］
骨粗鬆症モデル（卵巣摘出）ラットにおける骨密度増強作用（比較試験）
　１２週齢のＳＤ系雌性ラット（日本チャールス・リバー株式会社）の両側卵巣を摘出し、４週間放置後、本発明の化合物、並びに国際公開ＷＯ０１／６２７２３号パンフレットに記載されている２α−（３−ヒドロキシプロピル）オキシー１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３を、週５回、４週間、それぞれ経口投与した。最終投与２４時間後、エーテル麻酔下で採血を行い、安楽死させた。麻酔下において、第４第５腰椎の骨密度を二重Ｘ線骨塩量測定装置（ＱＤＲ−２０００，ＨＯＬＯＧＩＣ）を用いて測定した。比較のために、偽手術（ｓｈａｍ）群（開腹手術をするが卵巣摘出せず、試験化合物の投与を行わない）と卵巣摘出（ＯＶＸ）群（卵巣摘出するが試験化合物の投与を行わない）についても解剖時において腰椎の骨密度の測定を行った。また、各群における血清中のカルシウム濃度の測定も行った。

　手術を施すことにより、ＯＶＸ群の骨密度は、偽手術群（ｓｈａｍ）群に比べて低下することが確認された。ビタミンＤ誘導体を投与することによって、骨密度の回復が確認された。しかしながら、国際公開ＷＯ０１／６２７２３号パンフレットに記載されている２α−（３−ヒドロキシプロピル）オキシー１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３投与群は、骨密度の増加にあわせて血中カルシウム値が上昇し、骨密度がｓｈａｍ群以上になるために必要な投与量に（２５ｎｇ／ｋｇ）おいては、血清カルシウム値上昇幅が１ｍｇ／ｄＬ以上と大きく上昇してしまうことが判明した。
　一方で本発明の化合物は、血清カルシウム値の上昇範囲がＯＶＸの血清カルシウム値より１ｍｇ／ｄＬ以下の範囲内で、ｓｈａｍ群と同等以上の骨密度にまで、骨密度を増強させることが判明した。
　以上の結果から、本発明のビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、従来報告されているビタミンＤ_３誘導体よりも優れた骨への作用を有していることが判明した。
［実施例１６］
アデニン腎症モデルラットにおけるＰＴＨ分泌濃度抑制作用
　８週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本チャールス・リバー株式会社）に１日１回、１４日間、１６０ｍｇ／ｋｇ／日の用量のアデニン溶液を経口投与し、腎症を発症させた。本発明の化合物溶液を、アデニン投与８日目から、１日１回、７日間、経口投与した。アデニン投与７日目とアデニン最終投与日の翌日に、尾静脈から採血し、血清ｉＰＴＨ濃度、血清カルシウム濃度、血清リン濃度の測定を実施した。得られたデータは、アデニン投与７日目の測定値を化合物Ｃ−１投与前の測定値として、アデニン最終投与日の翌日の測定値を化合物Ｃ−１投与後の測定値として、示した。比較のために、正常群（アデニン溶液の溶媒と本発明の化合物溶液の溶媒を投与）と腎症群（アデニン溶液と本発明の化合物溶液の溶媒を投与）についても、血清ｉＰＴＨ濃度、血清カルシウム濃度、血清リン濃度の測定を行った。

　アデニン溶液を経口投与することにより、腎症群の血清ｉＰＴＨ濃度は、正常群に比べて上昇することが確認された。腎症群では、アデニン投与７日目とアデニン最終投与日の翌日で、血清ｉＰＴＨ濃度に差は見られなかったが、本発明の化合物溶液を投与した群では、血清ｉＰＴＨ濃度の低下が見られた。一方で、本発明の化合物溶液の投与に依存した血清カルシウム濃度の上昇と血清リン濃度の上昇は、観察されなかった。
［実施例１７］
ラット副甲状腺器官培養におけるＰＴＨ分泌抑制作用
　１２週齢のＳＤ系雌性ラット（日本チャールス・リバー株式会社）から副甲状腺を採取し、シャーレ上で高リン濃度の培地を用いて器官培養を実施した。前培養として２１時間培養を行い、培養液中のＰＴＨ濃度をもとに群わけした。培地交換を行ったのち、本発明の化合物を１０ｐＭ、１００ｐＭ、１ｎＭとなるように培地に添加し、４８時間培養した。化合物を添加した培養開始後２４時間の時点で培地交換を行い、さらに２４時間後の培養開始後４８時間の時点で、培養開始後２４時間~４８時間の培養液を採取した。培養液中に分泌されたＰＴＨ量を用いてＰＴＨ分泌抑制率を算出した。
　副甲状腺採取後、高リン濃度の培地で２１時間前培養したときの各副甲状腺のＰＴＨ分泌量を化合物添加前のＰＴＨ値とした（ｐｒｅ）。化合物を添加した培養開始後２４時間~４８時間の２４時間のＰＴＨ分泌量を化合物添加後のＰＴＨ値とした（ｐｏｓｔ）。下式により、化合物を添加した培養開始後２４時間~４８時間の２４時間の、化合物添加前のＰＴＨ値に対するＰＴＨ分泌抑制率を算出し、平均値±標準誤差で表示した。
　ＰＴＨ％（ｐｏｓｔ／ｐｒｅ）＝（化合物Ｃ−１を添加した培養開始後２４時間~４８時間の２４時間に分泌されたＰＴＨ量）×１００／化合物Ｃ−１添加前の培地中ＰＴＨ量
　結果を図１に示す。高リン条件で培養することにより、化合物添加をしていない（ｖｅｈｉｃｌｅ）群では４８時間培養後、ＰＴＨは上昇することが確認された。本発明の化合物を添加した群では、用量依存的にＰＴＨ分泌の抑制が見られ、その抑制率は１００ｐＭ、１ｎＭで有意であった（Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定）。
［実施例１８］
ラット腎不全（５／６腎動脈結紮）モデルにおけるＰＴＨ分泌抑制作用
　１２週齢のＳＤ系雌性ラット（日本チャールス・リバー株式会社）の左腎の腎動脈を結紮し、２／３領域を虚血した後、右腎を全摘出し、５／６腎動脈結紮モデルを作製した。４週間飼育した後、本発明の化合物Ｃ−１を週３回、１週間ごとに投与量を４倍にする漸増法にて、４週間、合計１２回尾静脈内投与した。本発明の化合物の投与用量は０．００５ｎｍｏｌ／ｋｇから開始した。毎週、１週間の最終投与から２４時間後に採血を行い、血清ｉＰＴＨ濃度を測定した。また比較のために、偽手術（ｓｈａｍ）群（開腹手術後に左腎動脈結紮、右腎摘出はせず、投与液溶媒を投与する）と５／６腎動脈結紮（ｖｅｈｉｃｌｅ）群（５／６腎動脈結紮手術を行い、投与液溶媒を投与する）についても、毎週１週間の最終投与２４時間後に採血を行い、血清ｉＰＴＨ濃度を測定した。
　ラット腎不全モデルにおいて、化合物Ｃ−１投与前のＰＴＨ分泌量はｓｈａｍ群に対して約２．６倍上昇していた。各個体の投与前のＰＴＨ分泌量を１００％として、化合物Ｃ−１投与後のＰＴＨ分泌量を％で算出し、平均値±標準誤差で表示した。結果を図２に示す。本発明の化合物では、投与１週目で有意にＰＴＨ分泌抑制作用が認められ、投与２週目以降も有意にＰＴＨ分泌を抑制した（Ｓｔｕｄｅｎｔ‘ｓ　ｔ　ｔｅｓｔ）。
　以上の結果から、本発明のビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、優れたＰＴＨ分泌抑制作用を有していることが判明した。
［実施例１９］
ラット腎不全モデルにおける骨密度増加作用
　１２週齢のＳＤ系雌性ラット（日本チャールス・リバー株式会社）の左腎の腎動脈を結紮し、２／３領域を虚血した後、右腎を全摘出し、５／６腎動脈結紮モデルを作製した。４週間飼育した後、本発明の化合物Ｃ−１を週３回、１週間ごとに投与量を４倍にする漸増法にて、４週間、合計１２回尾静脈内投与した。本発明の化合物Ｃ−１の投与用量は０．００５ｎｍｏｌ／ｋｇから開始した。最終投与から２４時間後にペントバルビタール麻酔下で採血を行い、安楽死させた。剖検時に腰椎と大腿骨を採取し、第４第５腰椎の骨密度および大腿骨遠位の骨密度を、小動物用骨密度測定装置（ＰＩＸＩｍｕｓ２）を用いて測定した。また比較のために、ｓｈａｍ群とｖｅｈｉｃｌｅ群についても、第４第５腰椎の骨密度および大腿骨遠位の骨密度の測定を行った。
　ｖｅｈｉｃｌｅ群の骨密度（ＢＭＤ）を１００％とし、偽手術（ｓｈａｍ）群および化合物Ｃ−１投与群の骨密度を％で算出し、平均値±標準誤差で表示した。結果を図３および図４に示す。ラット腎不全モデルにおいて、ｖｅｈｉｃｌｅ群の骨密度は、偽手術（ｓｈａｍ）群に比べて、低下しないことが確認された。ＯＶＸモデルのような骨粗鬆症モデルとは異なる病態においても、本発明の化合物は有意に骨密度を増強させることが確認された（Ｓｔｕｄｅｎｔ‘ｓ　ｔ　ｔｅｓｔ）。
　以上の結果から、本発明のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、優れた骨への作用を有していることが判明した。
　本発明で用いられるビタミンＤ_３誘導体は、血清カルシウム濃度を上昇させることなく、腎不全により異常を示した血清ＰＴＨ濃度を速やかに低下させるとともに、血清カルシウム濃度の上昇を抑制しつつ、腎不全非依存的に減少した骨密度を増強する効果を有することが明らかになった。このことは、本発明で用いられるビタミンＤ_３誘導体が、ＰＴＨ分泌亢進に基づく二次性副甲状腺機能亢進症の治療薬として、特にＰＴＨ依存的な骨病変やＰＴＨ非依存的な骨病変を併発した二次性副甲状腺機能亢進症の治療に有用であることを示している。

　本発明のビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する薬剤は、二次性副甲状腺機能亢進症の治療剤として用いられる。

Claims (13)

1. 　下記式（１）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
   

   

   　ここで、Ｒ_１は水素原子、炭素数１~６のアルキル基、アルキルカルボニルオキシアルキル基（それぞれのアルキルの炭素数は１~６である）、またはアリールカルボニルオキシアルキル基（アリールの炭素数は６~１０であり、アルキルの炭素数は１~６である）を表す。Ｒ_２は水素原子もしくは炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数３~６の環状アルキル基を形成していてもよい。Ｒ_３は、炭素数１~６のアルキル基を表すか、または他方のＲ_３およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数３~６の環状アルキル基を形成していてもよい。Ｘは酸素原子またはメチレン基を表し、ｎは１または２の整数を表す。
2. 　Ｘが酸素原子を表す、請求項１に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
3. 　Ｘがメチレン基を表す、請求項１に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
4. 　ｎが１である、請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
5. 　Ｒ_２が水素原子を表す、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
6. 　Ｒ_１が水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｔ−ブチル基、ｔ−ブチルカルボニルオキシメチル基、またはフェニルカルボニルオキシメチル基を表す、請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
7. 　Ｒ_２が水素原子を表し、ｎが１である、請求項１から請求項６のいずれか１項に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
8. 　Ｒ_１が水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｔ−ブチル基、ｔ−ブチルカルボニルオキシメチル基、またはフェニルカルボニルオキシメチル基を表し、Ｒ_２が水素原子を表すか、または他方のＲ_２およびそれらが結合する炭素原子とでシクロプロピル基を形成し、Ｒ_３がメチル基、エチル基を表すか、または他方のＲ_３およびそれらが結合する炭素原子とでシクロプロピル基を形成し、Ｘが酸素原子またはメチレン基を表し、ｎ＝１である、請求項１に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
9. 　下記いずれかのビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、二次性副甲状腺機能亢進症治療剤：
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−エトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−プロポキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１−メチル）エトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１，１−ジメチル）エトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（ｔ−ブチルカルボニルオキシ）メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（フェニルカルボニルオキシ）メトキシカルボニルエトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−メトキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−エトキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−プロポキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１−メチル）エトキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−（１，１−ジメチル）エトキシカルボニルプロピル）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（２−カルボキシー２，２−エタノ）エトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（（２−カルボキシー２，２−ジメチル）エトキシ）−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２６，２７−ジメチル−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール
   　（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，２０Ｒ）−２−（２−カルボキシエトキシ）−２６，２７−ノル−２５−シクロペンチル−２３−イン−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１，３，２５−トリオール。
10. 　下記式（１７）で表されるビタミンＤ_３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
    

    

    　ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３の定義は、式（１）と同じである。
11. 　二次性副甲状腺機能亢進症が骨病変を併発したものである、請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
12. 　骨病変が骨粗鬆症である、請求項１１に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。
13. 　骨粗鬆症が腎不全に依存しない、請求項１２に記載の二次性副甲状腺機能亢進症治療剤。

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