WO2012089220A1 - Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and composition produced by said method - Google Patents

Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and composition produced by said method Download PDF

Info

Publication number
WO2012089220A1
WO2012089220A1 PCT/EA2011/000014 EA2011000014W WO2012089220A1 WO 2012089220 A1 WO2012089220 A1 WO 2012089220A1 EA 2011000014 W EA2011000014 W EA 2011000014W WO 2012089220 A1 WO2012089220 A1 WO 2012089220A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
antibiotic
rifamycins
pharmaceutical composition
water
Prior art date
Application number
PCT/EA2011/000014
Other languages
French (fr)
Russian (ru)
Inventor
Владимир Евстахиевич БАБИЙ
Алексей Владимирович ИГНАТЬЕВ
Светлана Эммануиловна ГЕЛЬПЕРИНА
Ольга Олеговна МАКСИМЕНКО
Людмила Витальевна ВАНЧУГОВА
Елена Владимировна ШИПУЛО
Original Assignee
Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема" filed Critical Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"
Priority to AP2013007013A priority Critical patent/AP2013007013A0/en
Priority to UAA201309032A priority patent/UA108527C2/en
Publication of WO2012089220A1 publication Critical patent/WO2012089220A1/en
Priority to ZA2013/05684A priority patent/ZA201305684B/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis

Definitions

  • the present invention relates to the field of medicine, pharmacy, nanotechnology and colloid chemistry, in particular, to a method for producing a water-soluble dosage form (pharmaceutical composition) of an antibiotic from the group of rifamycins, such as rifabutin, rifampicin, rifapentin, rifaximin and their pharmaceutically acceptable derivatives for the treatment of tuberculosis .
  • rifamycins such as rifabutin, rifampicin, rifapentin, rifaximin and their pharmaceutically acceptable derivatives for the treatment of tuberculosis .
  • Rifamycins are a group of semisynthetic antibiotics formed by radiant fungi of the genus Streptomyces, as well as their semisynthetic derivatives.
  • One of the first antibiotics of this group, rifampicin ( Figure 1) which is a semi-synthetic derivative of rifamycin SV, has a wide spectrum of antibacterial activity and good solubility. Rifampicin is rapidly absorbed by intramuscular administration; maximum plasma concentration is reached after 30 minutes, the therapeutic concentration persists for 6-8 hours.
  • rifampicin Since rifampicin is soluble in water, its dosage form as an injection is known by dissolving 0.15 g of rifampicin in 2.5 ml of sterile water for injection, vigorously shaking the ampoule with the powder until complete dissolution and dilution of the resulting solution in 125 ml of 5% glucose solution; the specified solution is administered to the patient intravenously, at a rate of 60 to 80 drops per minute.
  • rifabutin whose chemical structure is 4-deoxo-3,4 - [2 -spiro [1H-isobutyl-4-piperaidyl] 2,5-dihydro-1 H-imidazole] (Fig. 2).
  • rifabutin is similar to rifampicin (the drug inhibits RNA synthesis by forming a complex with DNA-dependent RNA polymerase), however, it significantly exceeds its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties.
  • the challenge remains to develop a soluble dosage form of rifabutin suitable for intravenous administration to a patient in need (when dissolved in an appropriate pharmaceutically acceptable carrier), while having a low toxicity and efficacy no less than traditional oral forms of this antibiotic.
  • the prior art method for producing a rifapentin dosage form suitable for intravenous administration to experimental animals comprising: dissolving rifapentin in 0.1 M NaHC0 3 containing 10% ⁇ , ⁇ -dimethylformamide and 0.001 M ascorbic acid, followed by adjusting the pH of the solution to 8.5-8.6 by adding 1 n. NaOH;
  • the rifapentin dosage form thus obtained was suitable for intravenous administration to experimental animals at a dose of 3 mg / kg body weight and 10 mg / kg body weight (Assandri A., Ratti B., Carlos T. Pharmacokinetics of rifapentine, a new long lasting rifamycin , in the rat, the mouse and the rabbit. - The Journal of Antibiotics, Sept. 1984, p. 1067).
  • the specified composition additionally contains a water-soluble natural or synthetic polymer stabilizer with a molecular weight of not more than 70 kDa and, if necessary, a lipid plasticizer and fillers at a certain quantitative ratio of the components.
  • the disadvantage of the nanosomal polylactide-based rifabutin dosage form is that the long-term intravenous dosage form can be toxic, and this toxicity is not due to rifabutin itself, but to the high concentration of the biodegradable polymer (PLGA or PLA) contained in the nanoparticles, which limits the possibility of further development and clinical use of such nanoparticles.
  • PLGA or PLA biodegradable polymer
  • the aforementioned analogue also discloses a pharmaceutical composition for treating tuberculosis and Helicobacter pylori-mediated diseases, which is a rifabutin solubilized albumin powder (lyophilizate) obtained by this method and having an average particle size of 4 to 10 nm, and when a pharmaceutically acceptable diluent or carrier is added - suitable for intravenous administration to a patient in need of this stable solution, characterized by an average particle size of from 4 to 10 nm.
  • the task to be solved by the claimed solution is aimed at simplifying the technology for producing a pharmaceutical composition of an antibiotic from a group of rifamycins, as well as eliminating highly toxic organochlorine solvents immiscible with water.
  • the claimed technical solution is aimed at obtaining a pharmaceutical composition of an antibiotic from the group of rifamycins suitable for parenteral (intravenous) administration to a patient in need thereof.
  • Said composition is obtained by a method comprising a) dissolving an antibiotic from the group of rifamycins in an organic solvent selected from the group of water-miscible solvents; b) adding to the solution obtained in stage a) an aqueous albumin solution obtained by dissolving 1-10% m / v albumin in sterilized demineralized water; c) mixing the resulting mixture; d) filtration; d) the addition of a cryoprotectant; e) freezing; g) drying (lyophilic or spray).
  • the mentioned method is carried out as follows: dissolve an antibiotic selected from the group of rifamycins in an organic solvent selected from the group of miscible with water solvents, for example, acetone, isopropanol, ethanol. Next, the resulting solution is added to an aqueous solution of human serum albumin and stirred, preferably on a mixer, until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator).
  • a cryoprotectant preferably selected from 1-5% mannitol, 1-5% glucose, 1-5% lactose or 1-5% trehalose, is added; they are frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying). Lyophilisate powder when resuspending in the previous volume is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times - 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
  • a pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases caused by persistence in a Helicobacter pylori patient is an antibiotic powder (lyophilisate) from the rifamycin group solubilized with albumin, and when a pharmaceutically acceptable diluent and / or carrier is added, wherein the acceptable diluent or carrier is, for example, a 0.9% NaCI solution or additionally contains 0.1 -0.3% ascorbic acid, suitable for intravenous administration in need of this patient and is a stable suspension, while said lyophilisate and said suspension are characterized by ednim particle size of 200-800 nm, and upon dilution 100 times - 5- 80 nm, said lyophilizate prepared in accordance with the claimed invention method.
  • the acceptable diluent or carrier is, for example, a 0.9% NaCI solution or additionally contains 0.1 -0.3% ascorbic acid, suitable for intravenous administration in need of this patient and is a stable suspension, while said lyophilisate and said
  • rifabutin (Rb) 140 mg is dissolved in 1.7 ml of acetone and added to 100 ml of a 3% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (3% trehalose) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying).
  • the resulting lyophilizate powder when resuspended in the same volume, is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times, 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
  • rifapentin 100 mg was dissolved in 2.5 ml of isopropanol and added to 100 ml of a 5% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (5% mannitol) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying).
  • Rp rifapentin
  • the resulting lyophilizate powder when resuspended in the same volume, is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times, 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
  • rifaximin 13o mg was dissolved in 2.0 ml of ethanol and added to 100 ml of a 4% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (3% mannitol) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying).
  • Received lyophilisate powder when resuspended in the same volume is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times - 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using a Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
  • mice linear Balb / c mice, females, age 7-8 weeks, weight 20-22 g. There are 10 animals in each experimental group.
  • Infection intravenous administration in the lateral tail vein, dose - 5x10 6 CFU of Mycobacterium tuberculosis strain H37Rv. Used stock stock of strain Mycobacterium tuberculosis H37Rv, which is stored at -70 ° C.
  • Antibiotics rifabutin (substance) and the intravenous form according to isorethenium (rifabutin iv - 687), were prepared no more than an hour before the start of therapy in accordance with passport recommendations. To prepare a rifabutin solution, 10 mg of the substance was ground in a mortar, 4 ml of sterile distilled water was added and dissolved by prolonged pipetting to a final concentration of 2.5 mg / ml. The intravenous form (rifabutin iv 687) was diluted with water to a final concentration of 2.5 mg / ml.
  • the duration of therapy was 4 weeks. Treatment began on day 7 after infection.
  • the drugs were administered to animals of the experimental groups for 4 weeks 3 times a week (Monday, Wednesday, Friday) iv in a volume of 0.2 ml into the lateral tail vein in the following doses: 500, 100 and 20 ⁇ g / mouse. Mice in the control group were injected with 0.2 ml of physiological saline.
  • FIG. 5 illustrating the dependence of the effectiveness of tuberculosis treatment on the form, dose and method of administration of the rifabutin antibiotic, where Lg 10 CFU of M. tuberculosis is shown on the ordinate axis when sowing from the organs of mice, the doses used for treatment are shown on the abscissa axis, the data are also shown in Tables 2 and 2a.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

The present invention relates to the field of medicine, pharmaceutics, nano-technology and colloidal chemistry, in particular to a method for producing a water-soluble medicinal form (pharmaceutical composition) of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, such as rifabutin, rifampicin, rifapentin, rifaximin and the pharmaceutically acceptable derivatives thereof for the treatment of tuberculosis. The problem addressed by the claimed solution is to simplify the technology for producing a pharmaceutical composition of the antibiotic from the group consisting of rifamycins, and also to eliminate highly toxic chloroorganic solvents. The claimed technical solution is directed towards producing a pharmaceutical composition of the antibiotic from the group consisting of rifamycins suitable for parenteral (intravenous) administration to a patient requiring treatment. The above-mentioned composition is produced by a method comprising a) dissolving the antibiotic from the group consisting of rifamycins in an organic solvent selected from a group consisting of solvents which mix with water; b) adding an aqueous solution of albumin produced by dissolving albumin in a 1-10% molar ratio in sterilized demineralized water to the solution produced in step a); c) stirring the mixture produced; d) filtering said mixture; e) adding a cryoprotector; f) freezing said mixture; g) drying said mixture (lyophilically or by spray drying).

Description

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРОРАСТВОРИ ОИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ  METHOD FOR PRODUCING A HYDROGEN SOLUTION OF A MEDICINAL FORM
АНТИБИОТИКА ANTIBIOTICS
ИЗ ГРУППЫ РИФАМИЦИНОВ И КОМПОЗИЦИЯ, ПОЛУЧЕННАЯ СПОСОБОМ FROM THE RIFAMYCIN GROUP AND THE COMPOSITION OBTAINED BY THE METHOD
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ FIELD OF TECHNOLOGY
Настоящее изобретение относится к области медицины, фармации, нанотехнологии и коллоидной химии, в частности, к способу получения водорастворимой лекарственной формы (фармацевтической композиции) антибиотика из группы рифамицинов, такого, как рифабутин, рифампицин, рифапентин, рифаксимин и их фармацевтически приемлемых производных для лечения туберкулеза.  The present invention relates to the field of medicine, pharmacy, nanotechnology and colloid chemistry, in particular, to a method for producing a water-soluble dosage form (pharmaceutical composition) of an antibiotic from the group of rifamycins, such as rifabutin, rifampicin, rifapentin, rifaximin and their pharmaceutically acceptable derivatives for the treatment of tuberculosis .
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ И ЗАДАЧИ ИЗОБРЕТЕНИЯ BACKGROUND OF THE INVENTION AND OBJECTS OF THE INVENTION
В последние десятилетия проблема повышения эффективности лечения туберкулеза и других микобактериозов приобрела особую актуальность в связи с повышением уровня заболеваемости во всем мире и в частности, в России. В связи с распространением ВИЧ-инфекции выделилась группа больных с повышенным риском развития как туберкулеза, так и нетуберкулезных микобактериозов, характеризующихся тяжелым диссеминированным течением заболевания. Фатальный иммунодефицит у ВИЧ- инфицированных больных, а также вторичный иммунодефицит у больных туберкулезом на фоне полирезистентности возбудителя вызывают серьезные трудности в лечении туберкулеза.  In recent decades, the problem of increasing the effectiveness of the treatment of tuberculosis and other mycobacterioses has become particularly relevant in connection with an increase in the incidence rate worldwide and in Russia in particular. In connection with the spread of HIV infection, a group of patients with an increased risk of developing both tuberculosis and non-tuberculous mycobacterioses, characterized by a severe disseminated course of the disease, was distinguished. Fatal immunodeficiency in HIV-infected patients, as well as secondary immunodeficiency in tuberculosis patients against the background of pathogen polyresistance, cause serious difficulties in the treatment of tuberculosis.
Наиболее перспективным путем повышения эффективности лечения туберкулеза и других микобактериозов (например, проказы, которая также представляет собой очень актуальную проблему для развивающихся стран) оказалось создание принципиально новых противотуберкулезных препаратов путем скрининга новых природных молекул или химической модификации известных структур. Однако их действенность ограничена во времени вследствие непрерывности процесса возникновения и распространения резистентности к новым препаратам. Тем не менее, создание в конце 80-х годов нового полусинтетического антибиотика широкого спектра действия из группы рифамицинов - рифабутина - стало важным достижением фармацевтической химии (Цыбанев А. А., Соколова Г. Б. Противотуберкулезный антибиотик пролонгированного действия - рифабутин. Антимикробный спектр, особенности фармакодинамики и фармакокинетики. - Антибиотики и химиотерапия, 1999; 44(8), стр. 30-36). The most promising way to increase the effectiveness of the treatment of tuberculosis and other mycobacterioses (for example, leprosy, which is also a very urgent problem for developing countries) turned out to be the creation of fundamentally new anti-TB drugs by screening new natural molecules or chemical modification of known structures. However, their effectiveness is limited in time due to the continuity of the process of emergence and spread of resistance to new drugs. Nevertheless, the creation in the late 80s of a new semi-synthetic broad-spectrum antibiotic from the group of rifamycins - rifabutin - was an important achievement in pharmaceutical chemistry (Tsybanev A.A., Sokolova G. B. The long-acting anti-tuberculosis antibiotic - rifabutin. Antimicrobial spectrum, features of pharmacodynamics and pharmacokinetics. - Antibiotics and chemotherapy, 1999; 44 (8), pp. 30-36).
Рифамицины - группа полусинтетических антибиотиков, образуемых лучистыми грибками рода Streptomyces, а также их полусинтетические производные. Один из первых антибиотиков данной группы, рифампицин (Фиг.1), представляющий собой полусинтетическое производное рифамицина SV, обладает широким спектром антибактериального действия и хорошей растворимостью. Рифампицин быстро всасывается при внутримышечном введении; максимум концентрации в плазме крови достигается через 30 мин, терапевтическая концентрация сохраняется в течение 6-8 ч. Поскольку рифампицин растворим в воде, известна его лекарственная форма в виде раствора для инъекций, получаемая путем растворения 0,15 г рифампицина в 2, 5 мл стерильной воды для инъекций, энергичного встряхивания ампулы с порошком до полного растворения и разведения полученного раствора в 125 мл 5 % раствора глюкозы; указанный раствор вводят пациенту внутривенно капельно, со скоростью 60— 80 капель в минуту. Rifamycins are a group of semisynthetic antibiotics formed by radiant fungi of the genus Streptomyces, as well as their semisynthetic derivatives. One of the first antibiotics of this group, rifampicin (Figure 1), which is a semi-synthetic derivative of rifamycin SV, has a wide spectrum of antibacterial activity and good solubility. Rifampicin is rapidly absorbed by intramuscular administration; maximum plasma concentration is reached after 30 minutes, the therapeutic concentration persists for 6-8 hours. Since rifampicin is soluble in water, its dosage form as an injection is known by dissolving 0.15 g of rifampicin in 2.5 ml of sterile water for injection, vigorously shaking the ampoule with the powder until complete dissolution and dilution of the resulting solution in 125 ml of 5% glucose solution; the specified solution is administered to the patient intravenously, at a rate of 60 to 80 drops per minute.
В то же время, при повторном применении данного антибиотика возможно очень быстрое развитие резистентности к нему микроорганизмов, в связи с чем были предложены новые антибиотики данной группы, в частности, рифабутин, по химической структуре представляющий собой 4-дезоксо-3,4 - [ 2-спиро [1Ч-изобутил-4-пипераидил] 2,5- дигидро-1 Н-имидазол] (Фиг. 2). По спектру и механизму действия рифабутин схож с рифампицином (препарат подавляет синтез РНК путем образования комплекса с ДНК- зависимой РНК-полимеразой), однако существенно превосходит его по фармакодинамическим и фармакокинетическим свойствами. At the same time, with repeated use of this antibiotic, a very rapid development of resistance of microorganisms to it is possible, in connection with which new antibiotics of this group were proposed, in particular, rifabutin, whose chemical structure is 4-deoxo-3,4 - [2 -spiro [1H-isobutyl-4-piperaidyl] 2,5-dihydro-1 H-imidazole] (Fig. 2). In terms of spectrum and mechanism of action, rifabutin is similar to rifampicin (the drug inhibits RNA synthesis by forming a complex with DNA-dependent RNA polymerase), however, it significantly exceeds its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties.
Актуальной остается задача разработки растворимой лекарственной формы рифабутина, пригодной для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту (при ее растворении в соответствующем фармацевтически приемлемом носителе), при этом малотоксичной и обладающей эффективностью не меньшей, чем традиционные пероральные формы данного антибиотика. The challenge remains to develop a soluble dosage form of rifabutin suitable for intravenous administration to a patient in need (when dissolved in an appropriate pharmaceutically acceptable carrier), while having a low toxicity and efficacy no less than traditional oral forms of this antibiotic.
Данная проблема актуальна и в отношении других полусинтетических антибиотиков данной группы - рифапентина (Фиг.З) и рифаксимина (Фиг.4), что также связано с их низкой растворимостью в водной среде. This problem is relevant in relation to other semi-synthetic antibiotics of this group - rifapentin (Fig.Z) and rifaximin (Figure 4), which is also associated with their low solubility in the aquatic environment.
Из уровня техники известен способ получения пригодной для внутривенного введения экспериментальным животным лекарственной формы рифапентина, включающий в себя: растворение рифапентина в 0,1 М NaHC03, содержащей 10% Ν,Ν- диметилформамида и 0,001 М аскорбиновой кислоты, с последующим доведением рН раствора до 8.5-8.6 путем добавления 1 н. NaOH; полученная таким образом лекарственная форма рифапентина была пригодна для внутривенного введения экспериментальным животным, в дозе 3 мг/кг массы тела и 10 мг/кг массы тела (Assandri A., Ratti В., Cristina Т. Pharmacokinetics of rifapentine, a new long lasting rifamycin, in the rat, the mouse and the rabbit. - The Journal of Antibiotics, Sept.1984, стр.1067). The prior art method for producing a rifapentin dosage form suitable for intravenous administration to experimental animals, comprising: dissolving rifapentin in 0.1 M NaHC0 3 containing 10% Ν, Ν-dimethylformamide and 0.001 M ascorbic acid, followed by adjusting the pH of the solution to 8.5-8.6 by adding 1 n. NaOH; The rifapentin dosage form thus obtained was suitable for intravenous administration to experimental animals at a dose of 3 mg / kg body weight and 10 mg / kg body weight (Assandri A., Ratti B., Cristina T. Pharmacokinetics of rifapentine, a new long lasting rifamycin , in the rat, the mouse and the rabbit. - The Journal of Antibiotics, Sept. 1984, p. 1067).
В то же время, данные о возможной канцерогенности (способности вызывать развитие раковых новообразований) и тератогенности (способности вызывать развитие врожденных уродств плода) диметилформамида, используемого, в соответствии с работой Assandri A., Ratti В, для растворения антибиотика, делают невозможным создание подобных растворимых форм антибиотиков рифамицинового ряда, пригодных для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту (человеку), с использованием указанной методики. At the same time, data on possible carcinogenicity (the ability to cause the development of cancerous tumors) and teratogenicity (the ability to cause the development of congenital malformations of the fetus) of dimethylformamide used in accordance with the work of Assandri A., Ratti B, for dissolving the antibiotic, makes it impossible to create such soluble forms of rifamycin antibiotics suitable for intravenous administration to the patient (person) in need using this method.
Из Евразийского патента (ЕА 012121 В1 , Кл. опубликован 28.08.2009), заявителя настоящей заявки, известна фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных Helicobacter pilory, на основе полимерных частиц размером 100-800 нм (наночастиц), содержащих антибиотик рифабутин в терапевтически эффективном количестве и вспомогательные вещества, пригодная для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту, при этом в качестве вспомогательных веществ используют полимер(ы) молочной кислоты (PLA) и/или сополимер(ы) молочной и гликолевой кислот (PLGA), при содержании гликолевой кислоты в сополимерах до 50 моль.% с дополнительной карбоксильной группой или без дополнительной карбоксильной группы на конце молекулы или сополимеры полимеров молочной кислоты или сополимеров молочной или гликолевой кислоты с полиэтиленгликолем; при этом молекулярная масса полимеров и сополимеров составляет от 2 до 200 кДа, причем композиция представляет собой лиофилизат, который при добавлении воды или физиологического раствора образует устойчивую суспензию с размером частиц 0,1-0,8 мкм. From the Eurasian patent (EA 012121 B1, CL. Published on 08.28.2009), the applicant of this application, there is known a pharmaceutical composition for treating tuberculosis and Helicobacter pilory mediated diseases based on polymer particles of 100-800 nm in size (nanoparticles) containing the antibiotic rifabutin in a therapeutically effective amount and adjuvants suitable for intravenous administration to a patient in need thereof, using lactic acid polymer (s) (PLA) and / or lactic and glycol copolymer (s) as adjuvants acid (PLGA), with glycolic acid in copolymers up to 50 mol.% with or without an additional carboxy group at the end of the molecule or copolymers of lactic acid polymers or copolymers of lactic or glycolic acid with polyethylene glycol; the molecular weight of the polymers and copolymers is from 2 to 200 kDa, and the composition is a lyophilisate, which, when added with water or physiological saline, forms a stable suspension with a particle size of 0.1-0.8 microns.
Указанная композиция дополнительно содержит водорастворимый природный или синтетический полимерный стабилизатор с молекулярной массой не более 70 кДа и, в случае необходимости, пластификатор липидной природы и наполнители при определенном количественном соотношении компонентов. The specified composition additionally contains a water-soluble natural or synthetic polymer stabilizer with a molecular weight of not more than 70 kDa and, if necessary, a lipid plasticizer and fillers at a certain quantitative ratio of the components.
Однако недостатком наносомальной лекарственной формы рифабутина на основе полилактидов является то, что упомянутая лекарственная форма при длительном внутривенном введении может проявлять токсичность, причем данная токсичность обусловлена не самим рифабутином, а именно высокой концентрацией биодеградируемого полимера (PLGA или PLA), содержащегося в наночастицах, что ограничивает возможность дальнейшей разработки и клинического применения таких наночастиц. However, the disadvantage of the nanosomal polylactide-based rifabutin dosage form is that the long-term intravenous dosage form can be toxic, and this toxicity is not due to rifabutin itself, but to the high concentration of the biodegradable polymer (PLGA or PLA) contained in the nanoparticles, which limits the possibility of further development and clinical use of such nanoparticles.
В качестве ближайшего аналога заявляемому решению можно назвать способ получения порошка (лиофилизата) наносомального рифабутина, солюбилизированного альбумином, раскрытый в Евразийском патенте (ЕА 013569 В1 , кл. А61 К31/438, опубликован 30.06.2010), где водную смесь рифабутина, альбумина и органического растворителя при температуре от 0 до +40°С диспергируют, подвергают гомогенизации высоким давлением с получением наноэмульсии, удаляют из полученной наноэмульсии органический растворитель, фильтруют, добавляют криопротектор, замораживают и лиофилизируют, причем указанную водную смесь рифабутина и альбумина получают путем растворения 2-5% (м/о) альбумина в деминерализованной воде, с последующим добавлением к указанному раствору альбумина 2-5% (о/о) органического растворителя и рифабутина в количестве от 0,2 до 20,0 мас.%. As the closest analogue to the claimed solution, one can name a method for producing nanosomal rifabutin powder (lyophilisate) solubilized with albumin, disclosed in the Eurasian patent (EA 013569 B1, class A61 K31 / 438, published June 30, 2010), where an aqueous mixture of rifabutin, albumin and organic solvent at a temperature of 0 to + 40 ° C is dispersed, subjected to high pressure homogenization to obtain a nanoemulsion, removed from the obtained nanoemulsion organic solvent, filtered, cryoprotectant added, frozen and lyophilized, wherein said aqueous mixture of rifabutin and albumin is obtained by dissolving 2-5% (m / v) albumin in demineralized water, followed by adding 2-5% (v / v) to the indicated albumin solution o) an organic solvent and rifabutin in an amount of from 0.2 to 20.0 wt.%.
В упомянутом аналоге раскрыта также фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных Helicobacter pylori, представляющая собой порошок (лиофилизат) рифабутина, солюбилизированного альбумином, полученный указанным способом и характеризующийся средним размером частиц от 4 до 10 нм, а при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя или носителя - пригодный для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивый раствор, характеризующийся средним размером частиц от 4 до 10 нм. The aforementioned analogue also discloses a pharmaceutical composition for treating tuberculosis and Helicobacter pylori-mediated diseases, which is a rifabutin solubilized albumin powder (lyophilizate) obtained by this method and having an average particle size of 4 to 10 nm, and when a pharmaceutically acceptable diluent or carrier is added - suitable for intravenous administration to a patient in need of this stable solution, characterized by an average particle size of from 4 to 10 nm.
Несмотря на присущие данной растворимой (внутривенной) форме рифабутина достоинства (сравнительная простота получения данной формы и высокая эффективность в лечении острой микобактериальной инфекции), в синтезе данной лекарственной формы используются высокотоксичные хлорорганические растворители, такие, как хлористый метилен (пункты 2,3,6 формулы и примеры 1-2); кроме того, получение указанной растворимой формы сопряжено с необходимостью осуществления гомогенизации (предпочтительно - с использованием гомогенизатора высокого давления), что также усложняет технологию синтеза данной формы и увеличивает его себестоимость. Despite the advantages inherent in this soluble (intravenous) form of rifabutin (comparative simplicity of obtaining this form and high efficiency in the treatment of acute mycobacterial infection), highly toxic organochlorine solvents such as methylene chloride are used in the synthesis of this dosage form (paragraphs 2,3,6 of the formula and examples 1-2); in addition, obtaining the indicated soluble form is associated with the need for homogenization (preferably using a high pressure homogenizer), which also complicates the synthesis technology of this form and increases its cost.
Задачей, на решение которой направлено заявляемое решение, является упрощение технологии получения фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов, а также исключение высокотоксичных хлорорганических растворителей, несмешивающихся с водой. The task to be solved by the claimed solution is aimed at simplifying the technology for producing a pharmaceutical composition of an antibiotic from a group of rifamycins, as well as eliminating highly toxic organochlorine solvents immiscible with water.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ SUMMARY OF THE INVENTION
Заявляемое техническое решение направлено на получение фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов, пригодных для парентерального (внутривенного) введения нуждающемуся в этом пациенту. Упомянутая композиция получена способом, включающим а) растворение антибиотика из группы рифамицинов в органическом растворителе, выбранном из группы смешивающихся с водой растворителей; б) добавление к раствору, полученному на стадии а), водного раствора альбумина, полученного растворением 1-10% м/о альбумина в стерилизованной деминерализованной воде; в) перемешивание полученной смеси; г) фильтрацию; д) добавление криопротектора; е) замораживание; ж) высушивание (лиофильное или распылительное). The claimed technical solution is aimed at obtaining a pharmaceutical composition of an antibiotic from the group of rifamycins suitable for parenteral (intravenous) administration to a patient in need thereof. Said composition is obtained by a method comprising a) dissolving an antibiotic from the group of rifamycins in an organic solvent selected from the group of water-miscible solvents; b) adding to the solution obtained in stage a) an aqueous albumin solution obtained by dissolving 1-10% m / v albumin in sterilized demineralized water; c) mixing the resulting mixture; d) filtration; d) the addition of a cryoprotectant; e) freezing; g) drying (lyophilic or spray).
Упомянутый способ осуществляют следующим образом: растворяют антибиотик, выбранный из группы рифамицинов, в органическом растворителе, выбранном из группы смешивающихся с водой растворителей, например, ацетон, изопропанол, этанол. Далее полученный раствор добавляют к водному раствору человеческого сывороточного альбумина и перемешивают, предпочтительно, на мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-400 об/мин., или же удаляют органический растворитель отгонкой при пониженном давлении (с помощью роторного испарителя). Полученную суспензию фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор, предпочтительно, выбранный из 1-5% маннита, 1-5% глюкозы, 1-5% лактозы или 1-5% трегалозы; замораживают (при температуре -60-70 °С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Порошок- лиофилизат при ресуспендировании в прежнем объеме характеризуется средним размером частиц 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Malvern Zetasizer Nano ZS). The mentioned method is carried out as follows: dissolve an antibiotic selected from the group of rifamycins in an organic solvent selected from the group of miscible with water solvents, for example, acetone, isopropanol, ethanol. Next, the resulting solution is added to an aqueous solution of human serum albumin and stirred, preferably on a mixer, until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator). The resulting suspension is filtered through a glass filter (pore 1), a cryoprotectant, preferably selected from 1-5% mannitol, 1-5% glucose, 1-5% lactose or 1-5% trehalose, is added; they are frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying). Lyophilisate powder when resuspending in the previous volume is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times - 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
В рамках настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента Helicobacter pylori. Упомянутая фармацевтическая композиция представляет собой порошок (лиофилизат) антибиотика из группы рифамицинов, солюбилизированного альбумином, а при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя, где приемлемый разбавитель или носитель представляет собой, например, 0,9% раствор NaCI или дополнительно содержит 0,1-0,3% аскорбиновой кислоты, пригодна для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту и представляет собой устойчивую суспензию, при этом указанный лиофилизат и указанная суспензия характеризуются средним размером частиц 200-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5- 80 нм, причем указанный лиофилизат получают заявляемым в соответствии с настоящим изобретением способом. In the framework of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases caused by persistence in a Helicobacter pylori patient. Said pharmaceutical composition is an antibiotic powder (lyophilisate) from the rifamycin group solubilized with albumin, and when a pharmaceutically acceptable diluent and / or carrier is added, wherein the acceptable diluent or carrier is, for example, a 0.9% NaCI solution or additionally contains 0.1 -0.3% ascorbic acid, suitable for intravenous administration in need of this patient and is a stable suspension, while said lyophilisate and said suspension are characterized by ednim particle size of 200-800 nm, and upon dilution 100 times - 5- 80 nm, said lyophilizate prepared in accordance with the claimed invention method.
Представленные ниже примеры предназначены для иллюстрации заявляемого изобретения, а не для ограничения объема притязаний, и раскрывают получение водорастворимой лекарственной формы антибиотиков из группы рифамицинов (включая рифампицин, рифабутин, рифапентин и рифаксимин) предлагаемым в рамках заявляемого изобретения способом, а также применение указанных водорастворимых лекарственных форм для лечения микобактериозов (на примере острой микобактериальной инфекции, обусловленной внутривенным введением животным суспензии микобактерий). The following examples are intended to illustrate the claimed invention, and not to limit the scope of claims, and disclose the receipt of a water-soluble dosage form of antibiotics from the group of rifamycins (including rifampicin, rifabutin, rifapentin and rifaximin) according to the method of the invention, as well as the use of these water-soluble dosage forms for the treatment of mycobacteriosis (for example, acute mycobacterial infection caused by intravenous administration of an animal suspension of mycobacteria).
ПРИМЕР 1 EXAMPLE 1
140 мг рифабутина (Rb) растворяют в 1 ,7 мл ацетона и добавляют к 100 мл 3% водного раствора человеческого сывороточного альбумина. Перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-400 об/мин., или же удаляют органический растворитель отгонкой при пониженном давлении (с помощью роторного испарителя); фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (3% трегалозу), замораживают (при температуре -60-70 °С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат при ресуспендировании в прежнем объеме характеризуется средним размером частиц 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Malvern Zetasizer Nano ZS).  140 mg of rifabutin (Rb) is dissolved in 1.7 ml of acetone and added to 100 ml of a 3% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (3% trehalose) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying). The resulting lyophilizate powder, when resuspended in the same volume, is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times, 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
ПРИМЕР 2 EXAMPLE 2
100 мг рифапентина (Rp) растворяют в 2,5 мл изопропанола и добавляют к 100 мл 5% водного раствора человеческого сывороточного альбумина. Перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-400 об/мин., или же удаляют органический растворитель отгонкой при пониженном давлении (с помощью роторного испарителя); фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (5% маннит), замораживают (при температуре -60-70 °С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат при ресуспендировании в прежнем объеме характеризуется средним размером частиц 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5- 80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Malvern Zetasizer Nano ZS).  100 mg of rifapentin (Rp) was dissolved in 2.5 ml of isopropanol and added to 100 ml of a 5% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (5% mannitol) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying). The resulting lyophilizate powder, when resuspended in the same volume, is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times, 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using the Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
ПРИМЕР З EXAMPLE Z
13o мг рифаксимина (Rx) растворяют в 2,0 мл этанола и добавляют к 100 мл 4% водного раствора человеческого сывороточного альбумина. Перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-400 об/мин., или же удаляют органический растворитель отгонкой при пониженном давлении (с помощью роторного испарителя); фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (3% маннит), замораживают (при температуре -60-70 °С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат при ресуспендировании в прежнем объеме характеризуется средним размером частиц 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Malvern Zetasizer Nano ZS). 13o mg of rifaximin (Rx) was dissolved in 2.0 ml of ethanol and added to 100 ml of a 4% aqueous solution of human serum albumin. Stirred on a magnetic stirrer until the organic solvent is completely removed, at a stirring speed of 300-400 rpm, or the organic solvent is removed by distillation under reduced pressure (using a rotary evaporator); filtered through a glass filter (pore 1), cryoprotectant (3% mannitol) is added, frozen (at a temperature of -60-70 ° C) and lyophilized (or dried by spray drying). Received lyophilisate powder when resuspended in the same volume is characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times - 5-80 nm (determined by dynamic light scattering using a Malvern Zetasizer Nano ZS analyzer).
Характеристики полученных образцов (включая вид использованного органического растворителя, способ его удаления из лекарственной формы, количественное содержание лекарственного вещества (антибиотика) в каждом образце, а также размеры частиц до разбавления и после разбавления) указаны в Таблице 1. The characteristics of the samples obtained (including the type of organic solvent used, the method of its removal from the dosage form, the quantitative content of the drug substance (antibiotic) in each sample, as well as the particle sizes before dilution and after dilution) are shown in Table 1.
Таблица 1. Характеристики композиций (наночастиц) рифабутина, рифапентина и рифаксимина, полученных в соответствии с Примерами 1-4. Table 1. Characteristics of the compositions (nanoparticles) of rifabutin, rifapentin and rifaximin obtained in accordance with Examples 1-4.
Ne Средний диаметр Индекс Ne Average Diameter Index
Раство- The solution is
ЛВ1 Криопротектор наночастиц полидисперсности п/п ритель LV 1 Cryoprotector of polydispersity nanoparticles
(Z-Ave D), нм (PDI)  (Z-Ave D), nm (PDI)
Трегалоза, 358,6±4,676 нм 0.204±0.028 1 мас.% в расчете Разбавление Разбавление Trehalose, 358.6 ± 4.676 nm 0.204 ± 0.028 1 wt.% Calculated as Dilution Dilution
1 Rb2 Этанол 1 Rb 2 Ethanol
на объем в 100 раз: в 100 раз:  per volume 100 times: 100 times:
фильтрата 17.20±0.729 нм 0.664±0.028 filtrate 17.20 ± 0.729 nm 0.664 ± 0.028
Трегалоза, 395,8±4,981 нм 0.2 6±0.007 5 мас.% в расчете Разбавление РазбавлениеTrehalose, 395.8 ± 4.981 nm 0.2 6 ± 0.007 5 wt.% Calculated as Dilution Dilution
Rb2 Этанол Rb 2 Ethanol
на объем в 100 раз: в 100 раз:  per volume 100 times: 100 times:
фильтрата 34.28±17.76 нм 0.415±0.123  filtrate 34.28 ± 17.76 nm 0.415 ± 0.123
748.8±29.81 нм 0.500±0.076 748.8 ± 29.81 nm 0.500 ± 0.076
Маннит, 3 мас.% Mannitol, 3 wt.%
Разбавление Разбавление Dilution dilution
3 Rp3 Изопропанол в расчете на 3 Rp 3 Isopropanol based on
в 100 раз: в 100 раз:  100 times: 100 times:
объем фильтрата  filtrate volume
22.72±4.770 нм 0.567Ю.131 22.72 ± 4.770 nm 0.567U.131
601 ,4±43,92 нм 0.451 ±0.039601, 4 ± 43.92 nm 0.451 ± 0.039
Маннит, 5 мас.% Mannitol, 5 wt.%
Разбавление Разбавление Dilution dilution
4 Rx4 Ацетон в расчете на 4 Rx 4 Acetone based on
в 100 раз: в 100 раз:  100 times: 100 times:
объем фильтрата  filtrate volume
23.02±6.016 нм 0.576±0.077 23.02 ± 6.016 nm 0.576 ± 0.077
Лекарственное вещество; Рифабутин; Рифапентин; Рифаксимин Drug substance; Rifabutin; Rifapentin; Rifaximin
ПРИМЕР 4.  EXAMPLE 4
Экспериментальные животные: линейные мыши Balb/c, самки, возраст 7-8 недель, вес 20-22 г. В каждой экспериментальной группе 10 животных.  Experimental animals: linear Balb / c mice, females, age 7-8 weeks, weight 20-22 g. There are 10 animals in each experimental group.
Образцы органов для высева: легкие (Л) и селезенка (С) мышей. Samples of organs for seeding: lungs (L) and spleen (C) of mice.
Заражение: внутривенное введение в боковую хвостовую вену, доза - 5х106КОЕ Mycobacterium tuberculosis штамма H37Rv. Использовали стоковый запас штамма Mycobacterium tuberculosis H37Rv, который хранится при -70°С. Антибиотики: рифабутин (субстанция) и внутривенная форма по изооретению (рифабутин в/в - 687), приготовляли не более чем за час до начала терапии в соответствии с паспортными рекомендациями. Для приготовления раствора рифабутина, 10 мг субстанции растирали в ступке, добавляли 4 мл стерильной дистиллированной воды и растворяли длительным пипетированием до конечной концентрации 2,5 мг/мл. Внутривенную форму (рифабутин в/в - 687) разводили водой до конечной концентрации 2,5 мг/мл. Infection: intravenous administration in the lateral tail vein, dose - 5x10 6 CFU of Mycobacterium tuberculosis strain H37Rv. Used stock stock of strain Mycobacterium tuberculosis H37Rv, which is stored at -70 ° C. Antibiotics: rifabutin (substance) and the intravenous form according to isorethenium (rifabutin iv - 687), were prepared no more than an hour before the start of therapy in accordance with passport recommendations. To prepare a rifabutin solution, 10 mg of the substance was ground in a mortar, 4 ml of sterile distilled water was added and dissolved by prolonged pipetting to a final concentration of 2.5 mg / ml. The intravenous form (rifabutin iv 687) was diluted with water to a final concentration of 2.5 mg / ml.
Длительность терапии составила 4 недели. Лечение начали на 7 день после заражения. Препараты вводили животным экспериментальных групп в течение 4-х недель 3 раза в неделю (понедельник, среда, пятница) в/в в объеме 0,2 мл в боковую хвостовую вену в следующих дозах: 500, 100 и 20 мкг/мышь. Мышам контрольной группы вводили по 0,2 мл физиологического раствора. The duration of therapy was 4 weeks. Treatment began on day 7 after infection. The drugs were administered to animals of the experimental groups for 4 weeks 3 times a week (Monday, Wednesday, Friday) iv in a volume of 0.2 ml into the lateral tail vein in the following doses: 500, 100 and 20 μg / mouse. Mice in the control group were injected with 0.2 ml of physiological saline.
Эвтаназию животных проводили на следующий день после окончания лечения. Десятикратные разведения гомогенатов органов (легкие и селезенка) высевали на среду Мидлбрук 7Н11 агар. Подсчет КОЕ (колониеобразующие единицы) проводился через 21 день после посева. Animal euthanasia was performed the day after the end of treatment. Tenfold dilutions of organ homogenates (lungs and spleen) were plated on Middlebrook 7H11 agar medium. Counting CFU (colony forming units) was carried out 21 days after sowing.
При выполнении эксперимента были получены результаты, представленные на фиг. 5 иллюстрирующей зависимость эффективности лечения туберкулеза от формы, дозы и способа введения антибиотика рифабутина, где на оси ординат показаны Lg10 КОЕ М. tuberculosis при высевах из органов мышей, на оси абсцисс показаны используемые для лечения дозы, данные также приведены таблицах 2 и 2а. When performing the experiment, the results shown in FIG. 5 illustrating the dependence of the effectiveness of tuberculosis treatment on the form, dose and method of administration of the rifabutin antibiotic, where Lg 10 CFU of M. tuberculosis is shown on the ordinate axis when sowing from the organs of mice, the doses used for treatment are shown on the abscissa axis, the data are also shown in Tables 2 and 2a.
Таблица 2. Средние значения десятичных логарифмом КОЕ с доверительными интервалами, полученными их легких и селезенки мышей (графические данные представлены на фиг.5). Table 2. Mean decimal values of the CFU logarithm with confidence intervals obtained from their lungs and spleen of mice (graphic data are presented in FIG. 5).
Figure imgf000010_0001
Figure imgf000010_0001
*- достоверное отличие от значений КОЕ субстанции рифабутина при Р>0,05  * - significant difference from the values of CFU of the substance rifabutin at P> 0.05
Результаты эксперимента показали, что при лечении экспериментальной острой туберкулезной инфекции мышей внутривенная форма рифабутина (рифабутин 687) была эффективнее субстанции рифабутина, вводимой перорально. Значительная разница по эффективности между субстанцией рифабутина и рифабутином в/в была показана для дозы 100 мкг/мышь или 5мг/кг (это эффективная доза для человека при пероральном введении). При использовании этой дозы рифабутин в/в приводил к нулевому росту колоний (эффективность - 100%), т.е. стерилизации в легких и селезенке, а эффективность субстанции рифабутина составила 17,8% - в селезенке и 5,9% - в легких. Но и в минимальной используемой дозе - 20 мкг/мышь рифабутин в/в был значительно эффективней субстанции рифабутина (таблица 2а). The experimental results showed that in the treatment of experimental acute tuberculosis infection in mice, the intravenous form of rifabutin (rifabutin 687) was more effective than oral rifabutin. A significant difference in efficacy between rifabutin substance and iv rifabutin was shown for a dose of 100 μg / mouse or 5 mg / kg (this is an effective dose for humans when administered orally). Using this dose, iv rifabutin led to zero colony growth (100% efficiency), i.e. sterilization in the lungs and spleen, and the effectiveness of the substance rifabutin was 17.8% in the spleen and 5.9% in the lungs. But even in the minimum dose used - 20 μg / mouse rifabutin IV was significantly more effective than the substance rifabutin (table 2a).
Таблица 2а. Сравнительная эффективность лечения туберкулеза препаратом рифабутина в/в и субстанции рифабутина, выраженная в %. Table 2a. Comparative efficacy of tuberculosis treatment with iv rifabutin and rifabutin substance, expressed in%.
Figure imgf000011_0001
Figure imgf000011_0001
Применение заявляемого способа для получения растворимых форм антибиотиков из группы рифамицинов (большинство из которых, практически нерастворимы в воде и, следовательно, не могут быть непосредственно растворены в водосодержащем фармацевтически приемлемом разбавителе или носителе), в сравнении с ближайшим аналогом обеспечивает следующие преимущества: а) упрощение, удешевление получения лекарственной формы за счет исключения стадий гомогенизации и диспергирования, и б) обеспечение большей экологичности технологии, в частности, способности не оказывать побочного негативного влияния на получение лекарственной формы, т.е. отсутствие в готовой лекарственной форме остаточных количеств высокотоксичного хлористого метилена, за счет исключения из технологического процесса не смешивающихся с водой высокотоксичных хлорорганических растворителей, и кроме того, в сравнении с традиционными (пероральными) лекарственными формами рифабутина и других антибиотиков группы рифамицинов - обеспечение более высокой эффективности лечения микобактериозов и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента Helicobacter pylori.  The use of the proposed method to obtain soluble forms of antibiotics from the group of rifamycins (most of which are practically insoluble in water and, therefore, cannot be directly dissolved in an aqueous pharmaceutically acceptable diluent or carrier), in comparison with the closest analogue provides the following advantages: a) simplification , cheaper preparation of the dosage form by eliminating the stages of homogenization and dispersion, and b) ensuring greater environmental friendliness of the technology, in particular, In general, do not have a negative side effect on obtaining the dosage form, i.e. the absence of residues of highly toxic methylene chloride in the finished dosage form, due to the exclusion of highly toxic organochlorine solvents that are not miscible with water from the technological process, and in addition, in comparison with traditional (oral) dosage forms of the rifabutin and other antibiotics of the rifamycin group, ensuring a higher treatment efficiency mycobacteriosis and diseases caused by persistence in the patient's body Helicobacter pylori.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕ1 FORMULA OF THE INVENTION1
1. Способ получения водорастворимой лекарственной формы (фармацевтической композиции) антибиотика из группы рифамицинов, солюбилизированного альбумином, до порошка-лиофилизата, включающий: 1. A method of obtaining a water-soluble dosage form (pharmaceutical composition) of an antibiotic from the group of rifamycins, solubilized with albumin, to a lyophilisate powder, including:
а) растворение антибиотика из группы рифамицинов в органическом растворителе, выбранном из группы смешивающихся с водой растворителей,  a) dissolving an antibiotic from the group of rifamycins in an organic solvent selected from the group of miscible with water solvents,
б) добавление к раствору, полученному на стадии а), водного раствора альбумина, полученного растворением 1-10% м/о альбумина в стерилизованной деминерализованной воде,  b) adding to the solution obtained in stage a) an aqueous albumin solution obtained by dissolving 1-10% m / v albumin in sterilized demineralized water,
в) перемешивание полученной смеси,  c) mixing the resulting mixture,
г) фильтрацию,  g) filtration,
д) добавление криопротектора,  d) adding a cryoprotectant,
е) замораживание,  e) freezing,
ж) высушивание (лиофильное или распылительное).  g) drying (lyophilic or spray).
2. Способ по п.1 , отличающийся тем, что антибиотик из группы рифамицинов выбран из группы, включающей рифабутин, рифампицин, рифапентин и рифаксимин и их фармацевтически приемлемые производные.  2. The method according to claim 1, characterized in that the antibiotic from the group of rifamycins is selected from the group comprising rifabutin, rifampicin, rifapentin and rifaximin and their pharmaceutically acceptable derivatives.
3. Способ по п.1 , отличающийся тем, что указанный органический растворитель, выбирают из группы смешивающихся с водой растворителей: ацетона, этанола и изопропанола.  3. The method according to claim 1, characterized in that said organic solvent is selected from the group of water-miscible solvents: acetone, ethanol and isopropanol.
4. Фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента Helicobacter pylori, представляющая собой порошок (лиофилизат) антибиотика из группы рифамицинов, солюбилизированного альбумином, а при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя - пригодную для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивую суспензию, отличающаяся тем, что указанный лиофилизат и указанная суспензия характеризуются средним размером частиц 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм, причем указанный лиофилизат получают способом по любому из п. п.1-3.  4. A pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases caused by persistence of Helicobacter pylori in the patient’s body, which is a powder (lyophilisate) of an antibiotic from the rifamycin group solubilized with albumin, and when a pharmaceutically acceptable diluent and / or carrier is added, it is suitable for intravenous administration to a person in need a stable suspension for the patient, characterized in that said lyophilisate and said suspension are characterized by an average particle size of 100-800 nm, and when diluted 100 times - 5-80 nm, wherein said lyophilizate is prepared by a process according to claim p.1-3..
5. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что антибиотик из группы рифамицинов выбран из группы, включающей рифабутин, рифампицин, рифапентин и рифаксимин и их фармацевтически приемлемые производные  5. The pharmaceutical composition according to claim 4, characterized in that the antibiotic from the group of rifamycins is selected from the group comprising rifabutin, rifampicin, rifapentin and rifaximin and their pharmaceutically acceptable derivatives
6. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель представляет собой 0,9% раствор NaCI. 6. The pharmaceutical composition according to claim 4, characterized in that the pharmaceutically acceptable diluent or carrier is a 0.9% NaCI solution.
7. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что указанный фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель дополнительно содержит 0,1- 0,3% аскорбиновой кислоты. 7. The pharmaceutical composition according to claim 4, characterized in that said pharmaceutically acceptable diluent or carrier further comprises 0.1-0.3% ascorbic acid.
PCT/EA2011/000014 2010-12-27 2011-12-21 Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and composition produced by said method WO2012089220A1 (en)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AP2013007013A AP2013007013A0 (en) 2010-12-27 2011-12-21 Method for producing a watersoluble medicinal formof an antibiotic from the group consisting of rif amycins, and composition produced by said method
UAA201309032A UA108527C2 (en) 2010-12-27 2011-12-21 Preparation process of rifamycin group antibiotics watersoluble form
ZA2013/05684A ZA201305684B (en) 2010-12-27 2013-07-26 Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins,and composition produced by said method

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201001854 2010-12-27
EA201001854A EA021117B1 (en) 2010-12-27 2010-12-27 Method for producing a water-soluble pharmaceutical composition of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases associated with helicobacter pylori

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2012089220A1 true WO2012089220A1 (en) 2012-07-05

Family

ID=46382331

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EA2011/000014 WO2012089220A1 (en) 2010-12-27 2011-12-21 Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and composition produced by said method

Country Status (5)

Country Link
AP (1) AP2013007013A0 (en)
EA (1) EA021117B1 (en)
UA (1) UA108527C2 (en)
WO (1) WO2012089220A1 (en)
ZA (1) ZA201305684B (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105012249A (en) * 2014-04-30 2015-11-04 北京星昊医药股份有限公司 Injection rifampicin and preparing method thereof
WO2015104668A3 (en) * 2014-01-09 2015-11-12 Camus Pharma Pvt. Ltd. Lyophilized formulations for parenteral use

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2540510C2 (en) * 2013-06-10 2015-02-10 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наноситема" Method of obtaining biocompatible gallium(iii)-containing highly disperse particles for manufacturing diagnostic preparations for positron-emission tomography

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1875941A (en) * 2006-06-29 2006-12-13 西北农林科技大学 An antibacterial rifampicin nanoemulsion and preparation method thereof
RU2337711C1 (en) * 2007-04-04 2008-11-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема" Agent for bacterial infections treatment
EA200900215A1 (en) * 2009-02-24 2010-04-30 Ооо «Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"» PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF TUBERCULOSIS AND DISEASES MEDIATED BY HELICOBACTER PILORI, BASED ON SOLID LIPID NANOPARTICLES, AND METHOD OF TREATMENT OF TUBERCULOSIS
EA200900214A1 (en) * 2009-02-24 2010-04-30 Ооо «Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"» PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF RIFABUTIN FOR THE TREATMENT OF TUBERCULOSIS, THE WAY OF ITS OBTAINING AND THE METHOD OF TREATMENT

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA012121B1 (en) * 2008-06-20 2009-08-28 Ооо «Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"» Pharmaceutical composition for the treatment of tuberculosis and diseases mediated by helicobacter pylori based on polymer nanoparticles, method for preparing thereof and methods of treatment

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1875941A (en) * 2006-06-29 2006-12-13 西北农林科技大学 An antibacterial rifampicin nanoemulsion and preparation method thereof
RU2337711C1 (en) * 2007-04-04 2008-11-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема" Agent for bacterial infections treatment
EA200900215A1 (en) * 2009-02-24 2010-04-30 Ооо «Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"» PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF TUBERCULOSIS AND DISEASES MEDIATED BY HELICOBACTER PILORI, BASED ON SOLID LIPID NANOPARTICLES, AND METHOD OF TREATMENT OF TUBERCULOSIS
EA200900214A1 (en) * 2009-02-24 2010-04-30 Ооо «Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"» PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF RIFABUTIN FOR THE TREATMENT OF TUBERCULOSIS, THE WAY OF ITS OBTAINING AND THE METHOD OF TREATMENT

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015104668A3 (en) * 2014-01-09 2015-11-12 Camus Pharma Pvt. Ltd. Lyophilized formulations for parenteral use
CN105012249A (en) * 2014-04-30 2015-11-04 北京星昊医药股份有限公司 Injection rifampicin and preparing method thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EA021117B1 (en) 2015-04-30
AP2013007013A0 (en) 2013-07-31
ZA201305684B (en) 2014-10-29
UA108527C2 (en) 2015-05-12
EA201001854A1 (en) 2012-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shegokar et al. Present status of nanoparticle research for treatment of tuberculosis
US8623417B1 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles with mTOR inhibitors and methods of making and using same
JP5898627B2 (en) Therapeutic polymer nanoparticles containing epothilone and methods of making and using the same
US9351933B2 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
Dube et al. Tuberculosis: from molecular pathogenesis to effective drug carrier design
NZ571354A (en) Polylactide nanoparticles
WO2011084518A2 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles comprising corticosteroids and methods of making and using same
JP5449388B2 (en) Polymeric micelle composition for resistant cancer treatment and method for producing the same
JP5780775B2 (en) Nanoparticles containing prostaglandin I2 derivatives
KR20170023173A (en) Targeted therapeutic nanoparticles and methods of making and using same
JP5425890B2 (en) Method for producing uniform-sized polymer nanoparticles containing poorly soluble drugs
WO2012089220A1 (en) Method for producing a water-soluble medicinal form of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and composition produced by said method
CN110538328A (en) polypeptide compound, drug-loaded nanoparticle, preparation method of polypeptide compound and drug-loaded nanoparticle, drug composition and application of drug composition
RU2337711C1 (en) Agent for bacterial infections treatment
EA013569B1 (en) Pharmaceutical composition of rifabutin for treating tuberculosis and other diseases mediated by helicobacter pylori, method of production thereof and method for treatment thereof
JP2010531827A (en) Cyclodextrin nanosponges as vehicles for antitumor agents
RU2308970C1 (en) Antibacterial agent for treatment of intracellular infection
Kumar et al. Nanotechnology: a focus on treatment of tuberculosis
RU2418585C1 (en) Rifampicin-based medication with prolonged action for treatment of resistent forms of tuberculosis
EA016410B1 (en) Pharmaceutical composition based on cyclodextrin nanoparticles comprising rifabutin, method for preparing thereof, method for treating mikobacteriosis and helicobacterial infection (variants)
Patil et al. Nanocarrier-based methods for effective antitubercular drug delivery
WO2021142150A1 (en) Long-acting therapeutic agent combinations and methods thereof
Sun Nanoparticle depot for intraperitoneal chemotherapy of ovarian cancer
WO2017046037A1 (en) Nanoparticles loaded with active ingredients, their process of preparation and their uses
US20170071866A1 (en) Nanoparticles loaded with active ingredients, their process of preparation, and their uses

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 11853562

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 11853562

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1