WO2011162733A1 - Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами - Google Patents

Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами Download PDF

Info

Publication number
WO2011162733A1
WO2011162733A1 PCT/UA2010/000034 UA2010000034W WO2011162733A1 WO 2011162733 A1 WO2011162733 A1 WO 2011162733A1 UA 2010000034 W UA2010000034 W UA 2010000034W WO 2011162733 A1 WO2011162733 A1 WO 2011162733A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
bacteria
bacteriophages
viruses
fungi
rule
Prior art date
Application number
PCT/UA2010/000034
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Владыслав РОЗЕНФЕЛЬД
Сэргий ДЯЧЕНКО
Олег МИХЕЙUЕВ
Александр ИВАНОВ
Original Assignee
Rozenfeld Vladislav
Dyachenko Sergiy
Mikheytsev Oleg
Ivanov Alexandr
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rozenfeld Vladislav, Dyachenko Sergiy, Mikheytsev Oleg, Ivanov Alexandr filed Critical Rozenfeld Vladislav
Priority to RU2011136591/15A priority Critical patent/RU2011136591A/ru
Priority to PCT/UA2010/000034 priority patent/WO2011162733A1/ru
Publication of WO2011162733A1 publication Critical patent/WO2011162733A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics

Definitions

  • An antibacterial and / or antifungal component that has the property of specifically binding to bacteria and / or fungi
  • the invention relates to pharmacology, veterinary medicine, cosmetology, medicine, food and canning industries.
  • the claimed product can be used as a disinfectant and hygiene product.
  • Bocteriophage dysenteric polyvalent (Bacteriophagum dysentericum polyvalentum in tabulettis cum acidostato tegimento et in suppositoriis), manufactured by FSUE NPO Mikrogen, Moscow, Russia.
  • the drug is a sterile filtrate of the phagolysates of the causative agents of bacterial dysentery Shigella Flexner and Zonie. They are produced in liquid form, as well as in tablets, with an acid-resistant coating and in candles. It is intended for the treatment of patients with bacterial dysentery (children from 6 months of age and adults), the prevention of this disease; treatment of convalescents.
  • Bacteriophage coliprotein liquid and tablets with acid-resistant coating (Bacteriophagum coliproteicum liquidum et in tabulettis cum acidostato tegimento) manufactured by FSUE NPO Mikrogen, Moscow, Russia.
  • Bacteriophage coliprotein liquid - a clear liquid of light yellow color. In tablet form, it is part of tablets with an acid-resistant coating of acetylphthalyl cellulose. It is a mixture of phagolysate filtrates that are active against the most common enteropathogenic Escherichia serological groups 020, 026, 033, 044, 055, 01 11, 0119, 0124, 0125, 0127, 0151 protea of a peaceful and vulgar. Indications: used for the treatment and prevention of enterocolitis, treatment of colpitis of coliprotein etiology, dysbiosis and other diseases caused by flora sensitive to the drug.
  • Klebsiella polyvalent bacteriophage (Bacteriophagum klebsiellae polyvalentum), manufactured by FSUE NPO Mikrogen, Moscow, Russia.
  • the bacteriophage Klebsiella polyvalent purified liquid is a purified filtrate of phagolysates of Klebsiella ozena, rhinoscleromas of pneumonia.
  • the drug has the form of a clear liquid with a faint yellow or greenish tint.
  • fungal viruses in combination with bacterial viruses, for example, the drug Sextafag, manufacturer: Microgen NPO FSUE (NPO Biomed) ( Russian).
  • NIZIN is a natural food preservative that is used in the production of various food products (dairy products, processed cheeses, beer and live fermented kvass, canned fish and vegetables) to prevent bacterial spoilage, bombing, slowing down (stopping) acidity and , ultimately, in order to increase the shelf life, (see Instructions for use (Promotional leaflet of the manufacturer - Food Specialist LLC Russia, Moscow, 2009).
  • NIZIN is a polypeptide antibiotic ohm narrow spectrum of action and has all the disadvantages of antibiotics, including side effects, the development of antibiotic-resistant strains and specific activity of the spectrum unchanged.
  • bacteriophages concentrate is aimed at creating an antimicrobial effect.
  • This supplement does not affect the normal flora of the human body.
  • a change in microflora due to natural causes requires the manufacturer of such an additive to constantly adapt bacteriophages to such changes, followed by a long registration procedure and evidence of the safety of newly identified bacteriophages.
  • the effectiveness of bacteriophages in vivo depends on the efficiency of their replication, determined by the individual properties of the organism of a particular person, and is poorly repeated [1].
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26)
  • bacteriophage enzymes as an antimicrobial agent is known [2, 3].
  • Such a technical solution allows to provide high selectivity of the antimicrobial effect (less than bacteriophages and more than known antibiotics).
  • the enzymes of bacteriophages unlike the bacterial viruses themselves, have no effect on the microbial ecology of the environment and the transfer of genetic information to microorganisms.
  • the use of bacteriophage enzymes for therapeutic purposes causes significantly fewer side effects compared to antibiotics.
  • bacteriophage enzymes unlike live viruses, do not have the ability to specifically bind to target cells and accumulate due to this in the foci of accumulation of target cells. The use of such enzymes requires the creation of significant concentrations thereof.
  • the basis of the invention is the task of creating a new product, which is a biologically active component with antibacterial and / or antifungal properties, the function of specifically binding to bacteria and / or * fungi, and
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) properties to ensure rapid restructuring of production under the newly emerging strains of microorganisms. Moreover, the new product should not be capable of transmitting genetic information.
  • an antibacterial and / or antifungal component that has the ability to specifically bind to bacteria and / or fungi, characterized in that it contains antibacterial and / or antifungal viruses, modified so that they have impaired replication function.
  • New in the claimed invention is that the biologically active component contains antibacterial and / or antifungal viruses, modified so that they have impaired replication function.
  • microflora of flour normalizes the content of spore-forming bacteria, especially you. subtilis. Lactic acid bacteria, acetic acid bacilli, false yeast, mold spores are also found in flour. There should not be coccal forms of bacteria that develop with increased moisture content of flour [4].
  • the causative agent is hay bacillus (Vas. Subtilis), which produces powerful amylolytic and proteolytic enzymes.
  • Cretaceous disease is caused by heat-resistant yeast.
  • Pigment spots are caused by gram-negative pigment-forming bacteria (miraculous, Pseudomonas aeruginosa, fluorescent bacillus).
  • Drunk bread - occurs when the flour is infected with toxins of the fungus of the genus Fusarium.
  • Mold must be caused by mold spores that come from the air, from containers, from the hands and clothing of staff. Spore-bearing bacteria of the genus Clostridium create conditions unfavorable for the propagation of baker's yeast, and give them an unpleasant rancid taste.
  • the use of wheat flour infected with Bacillus mesentericus spores when baking bread can lead to infection by ductility (potato disease) and the spread of the disease throughout the bakery.
  • Types of microbial spoilage of pasta are:
  • Swelling is caused by heteroenzymatic lactic acid bacteria.
  • the appearance of color is caused by yeast of the genus Candida.
  • Souring is associated with the development of lactic acid bacteria.
  • Molds are caused by fungi of the genera Penicillium, Aspergillus, Rhizopus.
  • Damage is caused by osmophilic yeast that initiates fermentation. If air humidity is high, mold may occur.
  • SUBSTITUTE SHEET Damage to caramel fillings (fermentation, rancidity) caused by lactic acid and putrefactive bacteria can occur.
  • Cream products are perishable products. Sour cream may occur. Golden staphylococci, pathogenic intestinal bacteria can get into the cream, which is fraught with poisoning and the occurrence of infections. [four]
  • Gram-positive bacteria found in wort and beer include lactic acid sticks, beer sardines, and micrococci.
  • Lactobacilli (lactobacilli) cause a deterioration in the taste and aroma of beer, cause clouding and souring, and sometimes - mucus.
  • Beer sardines develop well in the presence of carbon dioxide and alcohol and usually breed in bottom-fermented beer, forming opalescent turbidity, a fine-grained precipitate, mucus, causing an unpleasant taste and honey smell in the beer (beer sardine disease).
  • Micrococci, streptococci easily adapt to anaerobic conditions, accumulate in yeast sediments of fermentation and camp tanks, cause clouding of the beer and a change in its taste.
  • Gram-negative microorganisms include acetic acid bacteria, E. coli bacteria, and others.
  • Acetic acid bacteria cause a quick souring of beer, clouding, some species form mucus and make beer more viscous.
  • Flavobacteria enter production with seed yeast. A silky haze and the smell of parsnip appear in infected beer.
  • Achromobacteria cause beer spoilage (turbidity and foul odor) within a few hours.
  • Bacteria of the group of Escherichia coli develop in the wort, giving the beer a sweetish fruity flavor and the smell of boiled cabbage.
  • Wild yeast is a pest of production, inhibits the development of cultured yeast, and worsens the organoleptic properties of beer.
  • the most common among the wild yeast found in brewing are yeasts of the genera Saccharomyces, Hansenula, Candida, Pihia, Torulopsis
  • Sugar mycetes usually increase the content of higher alcohols and esters in beer, give the beer a sweetish or tart bitter taste, cause clouding of the beer and the formation of an unpleasant odor.
  • hansenul yeast forms, in addition to ethyl alcohol, butyl and amyl alcohols, acetic, butyric, succinic acids and ethers, which causes a pungent smell of beer.
  • the yeast of pychium and candida developing in beer, forms a white or grayish film, causes turbidity, gives the beer a fruity, ethereal and medicinal flavor.
  • leukonostoks Leuconostoc mesenteroides
  • hay bacillus Bacillus subtilis
  • other microorganisms that, when grown on sugar-containing media, form capsules.
  • Acetic acid bacteria acetobacteria
  • acetobacteria genus Acetobacter. Developing in kvass, they oxidize ethyl alcohol to acetic acid, resulting in a sharp increase in its acidity.
  • Mycelial fungi penicillus, aspergillus, rhizopus, mucoridae, etc. give the affected kvass a characteristic moldy smell and an unpleasant aftertaste.
  • the main causative agent of kvass damage is Candida mycoderma.
  • Coliforms (representatives of Escherichia, Citrobacter, Enterobacter and Klebsiella).
  • Yeast causes biological spoilage of soft drinks. Osmophilic yeast causes fermentation of fruit and berry juices, fruit drinks, blend syrups and other semi-finished products, worsening the organoleptic properties of drinks (smell, taste, color), foaming of drinks occurs.
  • the main types of yeast developing in soft drinks are yeast of the genus Candida mycoderma, Hansemaspora apiculatus, schizosaccharomyces.
  • Acetate bacteria representatives of the genus Acetobacter, form a whitish or gray film on the surface of drinks, cause souring.
  • Lactobacillus bacteria cause souring of juices, form stable turbidity and cause spoilage of raw materials. They can also cause sourness of drinks.
  • Mycelial fungi are Aspigillus, Penicillium, Fusarium and other fungi. [four] '
  • Yeast forms films on the surface of the wine, more esters that add foreign odors to the wine, fruity - essential and medicinal flavors, cause clouding of the wine, reduce the fermentation activity of cultured yeast.
  • yeast from the genera Zygosaccharomyces, Hansenula, Pichia, Schizosaccharomyces, Asatanomyces, Saccharomycodes, Candida, Torulopsis, Cluconibacter.
  • Acetobacter form a thin film on the surface of the wine, give it a pungent smell.
  • the main causative agent of turnip is bacteria of the genus Bacterium tastarophorum.
  • Wine disease tour. contributes to high temperature during fermentation of the wort and aging.
  • the introduction at a certain stage of wine development of viruses with impaired replication function ⁇ corresponding to pests will preserve the wine, preventing it from changing the organoleptic properties provided by the manufacturer and to prevent poisoning of consumers.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Rancid taste and unpleasant odor occur due to the decomposition of fats by some yeast, mushrooms, fluorescent putrefactive bacteria, which have lipolytic activity.
  • Microorganisms can get into the production of mayonnaise with raw materials; splitting proteins, carbohydrates, fats. These are bacteria of the genera Bacillus, Clostridium, Proteus, Pseudomonas, yeast Candida, Lipolitica, and fungi of the genera Aspergillus, Penicillium, etc. Developing in mayonnaise, these microorganisms can cause its spoilage. [four]
  • Fusarium is caused by fungi of the genus Fusarium.
  • Late blight is caused by late blight fungus.
  • Phomosis (dry black rot or heart rot) is caused by Phoma.
  • Moniliosis (fruit rot of fruits and vegetables) is caused by a fungus of the genus Monilia.
  • Potato scab is caused by various forms of soil actinomycetes, often of the genus Streptomyces.
  • Vascular bacteriosis is caused by rod-shaped cold-resistant bacteria of the genus Xanthomonas (xanthomones) and undisputed bacteria of the genus Erwinia.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Wet bacterial rot of vegetables is caused by bacteria of the genera Pseudomonas and Erwinia. Dry black rot (alternariosis) is caused by a fungus of the genus Alternaria.
  • Gray rot is caused by a fungus of the genus Botrytis.
  • the white rot of carrots and other root crops is caused by a fungus of the genus Sclerotinia.
  • Citrus rot during storage is primarily caused by fungi of the genus Penicillium. [four]
  • PRODUCTS INTENDED FOR LONG STORAGE (CANNED FOOD):
  • spore-forming bacteria are found in the residual microflora of sterilized canned food. These are acid- and gas-forming mesophilic aerobic and facultative anaerobic bacteria of the genus Bacillus (Bacillus subtilis, Bacillus meganterium, Bacillus cereus), acid-forming thermophilic aerobes Bacillus stearothermophilus, Bacillus aerothermloid and bacteriocile oryloblobiform putrid bacteria. [four]
  • Pathogenic microorganisms that can be transmitted to humans through food and food raw materials include microflora of various properties, from relatively harmless to highly pathogenic, causing life-threatening infectious diseases (typhoid fever, dysentery, paratyphoid, etc.).
  • One of the characteristic microbiological pathogens of diseases transmitted to the human body through food and food raw materials are bacteria of the Salmonella group. Salmonellosis usually develops as a result of consumption of contaminated foods,
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) prepared or preserved under conditions favorable for the development of this microorganism.
  • the main source of human infection with Salmonella are considered products of animal origin (meat, poultry, egg products that are not subjected to special processing). So, the use of egg products containing a significant number of microorganisms of the Salmonella group as components in the production of bakery products or in prepared salads can cause an outbreak of poisoning, since these products are not subjected to heat treatment sufficient to destroy these microorganisms. Products can be infected with salmonella if not properly transported, stored, and prepared and can become a source of disease. Shigella bacteria cause dysentery, or shigellosis.
  • Shigella dysenteriae produces enterotoxin with high cytotoxicity. Often diarrheal diseases are caused by Escherichia coli bacteria of different strains. It should be noted that E. coli are not always pathogenic. In addition to those considered, other gram-negative bacteria can cause foodborne toxic infections: Pseudomonas, Yersinia enterocolitica, etc. [4]
  • botulism caused by the bacterial toxin Clostridium botulinum.
  • Clostridium botulinum The causative agents of botulism reproduce well in culinary processed and long-term stored products. Most meat, fish, and canned vegetables are a favorable environment for them. Cases of the development of these bacteria in some fruit canned foods are also known [4].
  • Bacillus cereus refers to a large gram-positive aerobic spore-forming bacilli that can grow under anaerobic conditions. My body is responsible for
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) spoilage of pasteurized milk and cream (rancidity).
  • the data make it possible to classify these bacilli as pathogenic microorganisms.
  • Bacillus cereus is not dangerous, therefore, the main task of preventive measures should be to prevent spore germination and subsequent propagation of vegetative cells in the finished products.
  • a problem of international concern is enterotoxicosis caused by staphylococcal microflora. About 50% of Staphylococcus aureus secreted are capable of producing enterotoxin in laboratory tests; moreover, the same strain can produce two or more enterotoxins [4].
  • mycotoxins are formed - substances that are toxic when administered orally to humans.
  • Mycotoxins are generally resistant to conventional treatment methods.
  • Mycotic infections include, for example, ficomycosis, which is caused by Mucora ceae, which are ingested with food, especially the genera Absidia, Rhizopus, Mortierella, Basiodobobus, Mucor, and Cunninghamella. Fight with ficomycosis, which is caused by Mucora ceae, which are ingested with food, especially the genera Absidia, Rhizopus, Mortierella, Basiodobobus, Mucor, and Cunninghamella. Fight with
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Mycotoxicosis consists in ensuring the conditions for the production, processing, storage, transportation and distribution of food products that prevent the formation of mycotoxins. It is especially important to prevent the growth of fungi in foods during storage [4].
  • Putrefactive bacteria are especially harmful to baker's yeast, shortening their shelf life.
  • the proposed solution according to this invention is that in order to eliminate the negative effects of putrefactive bacteria during the production and storage of yeast in order to disinfect equipment and / or the finished product, it is necessary to use (as an antibiotic) a bacteriophage with impaired reproductive function, directed against putrefactive bacteria.
  • Dairy products The development of bacteria Streptococcus lactis leads to souring of milk, bacteria Alcaligenes viscosus cause curdling of milk and give it a rancid taste. The bitter taste also appears in the presence of proteolytic bacteria Streptococcus liquefaciens in milk.
  • the quality of disinfection of production tanks and technological equipment which can serve as a source of secondary contamination of raw materials with undesirable microflora, has a significant impact on microbiological indicators [4].
  • a new, original way of increasing the shelf life of slaughtered cattle meat is proposed. Before slaughter, the animal is disinfected with viruses that can disrupt the vital functions of microorganisms, for example, bacteriophages, with impaired replication function, directed against pyogenic bacteria. These particles will protect meat and fish after slaughter.
  • viruses that can disrupt the vital functions of microorganisms, for example, bacteriophages, with impaired replication function, directed against pyogenic bacteria.
  • Pasteurization is the process of one-time heating of most often liquid products or substances before. 60 ° C for 60 minutes or at a temperature
  • This invention is applicable not only to food and food raw materials:
  • the shelf life of such plants depends, inter alia, on maintaining normal microflora and preventing tissue damage by microorganisms, which makes it possible to carry out the present invention.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) the use of viruses that can disrupt the vital functions of microorganisms with impaired replication function directed against any of the known world organisms involved in these processes, for example, the genus Proteus, Streptococcus, Stafilococcus, clostridia, Aspergillus and Penicillium fungi, as well as against any unknown microorganism isolated from the dead body of a person or animal without its microbiological classification, but when detecting a virus sensitive to it and preparing a virus preparation with impaired replication function d.
  • viruses that can disrupt the vital functions of microorganisms with impaired replication function directed against any of the known world organisms involved in these processes, for example, the genus Proteus, Streptococcus, Stafilococcus, clostridia, Aspergillus and Penicillium fungi, as well as against any unknown microorganism isolated from the dead body of a person or animal without its microbiological classification
  • halitosis halitosis
  • the bacterium Helicobacter pylori is present in the oral cavity in most people. In the presence of periodontal diseases, with poor oral hygiene, with poor installation of fillings, i.e. for causes of halitosis, the oral cavity can serve as a habitat for the Helicobacter pylori bacteria.
  • a virus is known which disrupts the vital activity of a given microbe. The present invention allows to solve the problem of helicobacteriosis.
  • Soap for women, soap for men, soap for children with antibacterial effect It is known that the normal microflora of the skin and mucous membranes in children before puberty is different from that during puberty. The microflora of the skin of the mucous membranes in men and women is also excellent. Existing antiseptics do not have such a subtle specificity to provide the above age and gender features of hygiene products. At the same time, the present invention allows to solve this problem.
  • the claimed invention will help to solve the problem by using viruses with impaired replication function, directed against any of the representatives of pathogenic or conditionally pathogenic bacteria.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) contamination of livestock and poultry products with antibiotics that can cause allergic and other undesirable reactions.
  • the present invention avoids these negative aspects and obtain environmentally friendly products of animal husbandry and poultry farming.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 10. Disinfection of any equipment. It is known that, depending on the functional purpose, various objects in contact with people have different microflora composition depending on the region, the characteristics of the physicochemical and biological environment (banknotes, public transport handrails, medical equipment of purulent-septic hospitals, therapeutic hospitals, oncology hospitals, pediatric hospitals, infectious hospitals, cutlery, air conditioners, clothing, shoes, car interiors). The present invention allows individually to ensure microbiological safety in each case.
  • the claimed invention allows to destroy potentially dangerous microflora without changing the mineral composition and organoleptic properties of water, taking into account regional characteristics and without affecting the microflora of the environment.
  • Condoms with antibacterial lubricant can lead to the death of normal vaginal microflora. In this case, the development of chronic diseases of the pelvic organs can be no less dangerous than the development of sexually transmitted diseases.
  • the present invention allows to selectively prevent infection with potentially dangerous bacteria, without affecting the normal microflora of the genital tract.
  • Antibiotics and other substances are widely known that exhibit antimicrobial activity when introduced into humans and animals and are relatively safe for their health (unlike substances that inhibit microbes only by direct contact with them and which cannot be introduced into the human body and animals due to their side effects). These are antimicrobial
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) substances have saved many lives at the moment. At the same time, any AB can sooner or later cease to be effective. This happens because pathogens eventually “adapt” to a particular drug aimed at combating them. Bacterial strains resistant to a specific AB appear. To solve this problem, new antibiotics are constantly being created. Modern science offers another way to fight - bacteriophagy, that is, the destruction of pathogenic microbes with the help of other microorganisms. As "doctors" use special viruses that kill pathogenic bacteria.
  • bacteriophages Encountering a sensitive microbial cell, the bacteriophage penetrates into it, switches the mechanism of its action on the reproduction of itself (bacteriophage) like, which, breaking the cell membrane, tenfold attack other microbes. Lysis takes on a spontaneous character, and release from unwanted microbes occurs in a matter of hours. According to the doctors who conducted the experiment, bacteriophagy is a real alternative to antibiotics. At the same time, the cost of a new type of treatment is much lower. This is a safe type of medication, because, firstly, bacteriophages destroy only one type of microorganism and do not destroy the beneficial microflora (highly selective, unlike AB); secondly, treatment rarely causes allergic reactions.
  • viruses are divided according to their ability to infect living objects. There are viruses of multicellular organisms, unicellular organisms, plants, animals, fungi. Moreover, there is a high specificity of viruses in relation to host cells. So, there are bacteriophages - bacterial viruses, among which, depending on the infected object, actinophages are distinguished (according to some classifications) - bacteriophages actinomycetes, mycophages - bacteriophages of fungi. Sometimes fungal viruses
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) considered separately from bacteriophages.
  • Specific viruses as a rule, infect microorganisms only within one genus, species, and sometimes a specific strain of the microorganism.
  • viruses themselves and, in particular, bacteriophages with intact replication function have a number of significant drawbacks.
  • Bacteriophages can affect the general ecology during mass introduction. They pose a potential biological hazard. If ABs are excreted from the human body in concentrations that are not able to affect microbial ecology, being also subjected to repeated dilution in the environment, then bacteriophages, on the contrary, are capable of reproduction in the environment, being excreted with human secretions and
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) animals.
  • Such breeding can unpredictably change the microbial landscape of the environment, which can cause an environmental disaster.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The isolated samples are treated with chloroform, heated, or otherwise interrupted the activity of bacteria. In each sample, the presence of particles of bacteriophages with replication function is determined. The earliest test in time is detected in which bacteriophages with replication function are not detected. The time interval from the beginning of infection of a bacterial cell culture with bacteriophages to the moment of sampling, the earliest in which bacteriophages with replication function are not detected, is the time period after which bacteria infected with a specific bacteriophage under specific cultivation conditions should be deprived of life.
  • the obtained highly selective antibiotic of a new system class differs from the bacteriophages used in that it, in fact, is a derivative of the bacteriophage that retains antimicrobial activity, but does not have the ability to replicate and transmit genetic information.
  • the preparations obtained by us are distinguished by easy technological adjustment of antibacterial properties, which occurs by adapting the bacteriophage to new strains due to mutant individuals or testing a new strain to an extensive library of bacteriophages or isolating them from wastewater or other environmental objects.
  • the proposed substance with specific activity against microorganisms combines the positive properties of previously known antibacterial substances, both incapable of replication and viruses, while it is devoid of negative properties of both. Namely: these substances do not possess replication abilities, as well as antibiotics (as well as sulfonamides and other substances that are not capable of replication) and are non-toxic and highly selective, like bacteriophages and other viruses.
  • Staphylococcus aureus was isolated from stool of the patient in the amount of 100 thousand colony forming units per 1 g of feces. (In the example below, the use of the term Staphylococcus aureus means that it is precisely the strain that is isolated from the stool of the patient).
  • the culture of the microorganism was seeded on agar according to the method of Grazia to determine the number of bacteriophages per unit
  • the concentration of bacteriophages with preserved replication function was increased.
  • concentration of the isolated bacteriophage was determined, amounting to 100 thousand particles in 1 ml of sterile filtrate. The same filtrate was frozen to -10 ° C and, after freezing, it was thawed in a thermostat at + 20 ° C, again frozen in -, liquid nitrogen by
  • the filtrate does not contain bacteria and fungi with replication function, but containing viruses with impaired replication function as "FVN"
  • the filtrate does not contain bacteria and fungi with replication function, but containing viruses with impaired replication function as "FVN”
  • FVN viruses with impaired replication function
  • a certain amount of liquid remained in the tubes.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product when applied to agar in a Petri dish and introduced into the broth culture in an amount of 0.5 ml or more, prevented the growth of the isolated Staphylococcus aureus strain.
  • the finished product did not affect the growth of the Staphylococcus epidermalis strain isolated from the stool of the same patient when applied to agar in a Petri dish before inoculating a pure Staphylococcus epidermalis culture.
  • Candida albicans was isolated from feces of the patient in the amount of 1 thousand colony forming units per 1 g of feces (hereinafter in the example the use of the term Candida albicans means that
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) exactly the strain that is isolated from the stool of the patient). From the colonies of the microorganism, material was taken which was distributed on Sabouraud Medium in Petri dishes so that after 48 hours of cultivation, microorganism growth was obtained. After this, the Saburo (Fluid Sabouraud Medium) was transferred to the liquid medium.
  • Each RF was titrated with physiological saline with a dilution of 10 times (1 volume fraction of the sample and 9 volume fractions of 0.9% sterile sodium chloride solution) from 1/10 to 1/10000.
  • 1 ml of each dilution and undiluted sample was introduced into 10 ml of Saburo liquid medium, after which 1 ml of Candida albicans culture in Saburo liquid medium obtained as described above was added to each sample. Samples were cultured for 48 hours. At the same time, as a control, a Saburo medium sample was cultured into which 2 ml of physiological saline was injected. After 60
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) hours compared the transparency of the samples compared with the control sample. In a titration series of 6 out of 8 samples, suppression of the appearance of turbidity associated with the growth of Candida albicans was revealed. Breeding inhibiting the growth of the fungus was from 1/10 to 1/1000.
  • a dilution titer in which there is no inhibition of fungal growth corresponded to 10 or less virus particles in 1 ml of FR, thus, 1/1000 dilution contained about 100 virus particles, 1/100 dilution - about 1000 particles, dilution 1/10 - about 10 thousand particles, in undiluted preparation - about 100 thousand particles.
  • the flow rate of the filtrate was 0.125 ml / min, the flow rate of distilled water was 5 ml / min.
  • 203 ml of the finished product — VFN containing viruses with impaired replication function and suppressing the activity of microorganisms of the isolated Candida albicans strain — turned up in the product collection tank.
  • a certain amount of liquid remained in the tubes through which the liquid flowed.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product when introduced in a volume of 0.5 ml in a liquid Saburo medium before introducing a culture of fungi contained in a liquid medium Saburo in a volume of 1. ml obtained 48
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) hourly cultivation of Candida albicans fungi obtained from the stool of the patient prevented the growth of Candida albicans. At the same time, the finished product did not affect the growth of the Candida albicans strain obtained from a stool sample of another patient under similar cultivation conditions.
  • the resulting sample was frozen to -30 ° C and, after freezing, thawed in a thermostat, re-frozen to -5 ° C and thawed in a thermostat. After that, dry crystalline sodium chloride was introduced into the filtrate with constant stirring until dissolution ceased
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function. So was obtained PVF, the finished product.
  • PVF the finished product.
  • the samples taken did not reveal Aspergillus niger and Mycoplasma pneumoniae.
  • Candida albicans and Staphylococcus epidermalis were sown.
  • the microorganism Proteus vulgaris was isolated in the amount of 10 million colony forming units per 1 g of the content of the boil.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) each was placed on a microorganism culture grown on solid medium. In places where 3 samples of sterile filtrates were added, lysis of the microorganism culture was detected. The material of each of the 3 samples was introduced together into the liquid culture of the microorganism, and after 48 hours of cultivation, FR was obtained from the liquid culture. The resulting filtrate contained 6 million particles of bacteriophages that lyse the isolated strain of Proteus vulgaris. The RF was treated with gamma radiation in the standard mode used to sterilize medical equipment in a liquid layer 2 mm thick. in a plastic container.
  • the filtrate was frozen to -10 ° C and thawed, re-frozen to -10 ° C and thawed. According to the method of Grazia, reproductive bacteriophages in the filtrate processed by the above method were not detected. An IHF was received.
  • the PVF was freeze dried so that in each sample located in a 10-ml glass ampoule bacteriophages with impaired replication function were contained.
  • the contents of the ampoule after diluting it with 5 ml of a 0.9% sodium chloride solution, were applied in a volume of 1 ml on agar in a Petri dish before sowing the culture of the isolated strain of Proteus vulgaris. Under standard cultivation, no growth of Proteus vulgaris was observed, but growth of other microorganisms was detected.
  • Trichosporon spp. was isolated from human hair. At the same time, a Trichosporon spp culture was obtained on a liquid medium and on a dense medium. A sample containing a bacteriophage obtained from sheep wool was introduced into a liquid medium. After 105 hours of incubation, Trichosporon spp. together with the bacteriophage was obtained FR. The FR was frozen twice and then thawed. So was obtained FVN. The resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The finished product inhibited the growth of the isolated strain of Trichosporon spp. in the amount of 0.05 ml per 10 cm of solid nutrient medium when applying the drug before applying the sample Trichosporon spp.
  • the drug was mixed in a ratio of 1/10 with olive oil.
  • Example 6 Antibacterial and antifungal activity. Strains of Cryptococcus neoformans and Pseudomonas aeruginosa were isolated from the sputum of a patient infected with HIV-1.
  • the intermediate product was introduced dropwise (0.05 ml per drop, 20 drops per minute) into a flowing solution of twice distilled water (10 ml per minute). It turned out FVN.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product was poured into 100 ml vials designed for drip dosing of the liquid, receiving the drug.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The finished product was introduced into cocoa butter (1 ml of the finished product per 2 ml of cocoa butter) and 5 ml suppositories were formed. Thus, a drug was obtained.
  • a bacteriophage was obtained in a liquid culture medium.
  • the bacteriophage was isolated in the form of RF containing 100 thousand bacteriophages in 1 ml.
  • the RF was frozen twice at -5 ° C, followed by thawing. Centrifugation was carried out in such a way that no bacteriophages with replication function were detected in the supernatant. So received PVF.
  • the finished product was added to chewing gum in an amount of 1 ml of PVF per 1 serving, getting the finished product. Also, the finished product was added in an amount of 1 ml of PVF per 100 ml of water intended for drinking.
  • a bacteriophage was obtained in a liquid culture medium.
  • the bacteriophage was isolated as RF.
  • a sterile filtrate containing bacteriophages with impaired replication function was obtained from the filtrate.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) viruses with preserved replication function.
  • the finished product was added to beer (including during its preparation). In this case, the addition of the product did not affect the usual technological process, which confirms the absence of the effect of the product on technological strains of microorganisms.
  • Example 9 Antibacterial and antifungal activity.
  • Microbiological examination of the patient’s skin included: Propionobacter acne, St. aureus, Candida albicans.
  • Propionobacter acne a bacteriophage was obtained in a liquid culture medium.
  • St. aureus was obtained bacteriophage in a liquid culture medium.
  • a bacteriophage was obtained in a liquid culture medium.
  • DFs were combined in equal volume concentrations.
  • a combined RF was obtained containing 10 thousand bacteriophages active against each of the above microorganisms. The combined RF was saturated with a solution of cesium chloride until the dissolution of cesium chloride ceased at a temperature of 37 ° C.
  • the resulting liquid was combined with distilled water at a ratio of the flow rate of the PVF with cesium chloride and distilled water as 1/20. So it turned out FVN.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product was introduced into the shampoo from a ratio of 10 ml of the finished product per 100 ml of shampoo.
  • the use of shampoo by the patient daily for washing his head and body led to the fact that after 20 days the above conditionally pathogenic microorganisms (Propionobacter acne, St. aureus, Candida albicans) were not detected in the inoculation taken from the surface of the patient's body.
  • the number of colony forming units of Staphylococcus epidermalis in culture from the patient’s skin before and after application of the shampoo increased by 1.5 times.
  • Microorganism cultures were obtained: Micobact. flavum, Ps. Fluorescens, Bact. Indigonaceum, Aerobacter, Salmonella.
  • Bacteriophages were isolated from wastewater that lyse the resulting microorganism strains individually. Bacteriophages were introduced into the culture of microorganisms, each in the culture of the microorganism in respect of which the bacteriophage was virulent.
  • the FR was twice frozen at -10 ° C and thawed at + 20 ° C, irradiated with ultraviolet light. So was obtained FVN.
  • the resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product was administered at the rate of 1 ml per 1000 ml of cow's milk. Milk was not subjected to pasteurization and other methods of preventing microbial colonization. Milk was stored in a sterile glass bottle, hermetically sealed with a sterile plastic stopper at a temperature of 20 ° C for 10 days. After evaluating the organoleptic characteristics after 10 days of storage, no differences were revealed compared with those up to 10 days of storage.
  • Example 11 Preservative additive.
  • the preparation was obtained by filtering cultures of 3 microorganisms, the identification of which was not carried out, obtained from non-preserved wine of the previous harvest, into which samples of bacteriophages destroying these microorganisms were introduced, and then RF was obtained.
  • the concentration of RF was 100 thousand viruses of each of the 3 strains per 1 ml.
  • the RF was frozen in liquid nitrogen and thawed at + 20 ° C. After this, the RF was introduced into distilled water in a tenfold smaller volume. Received PVF. The resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • Example 12 Preservative additive.
  • the RF was treated with ultraviolet light in a 2 mm layer. at exposure 5 sec. but a sample. After that, the liquid was saturated with sodium chloride at 25 ° C until the dissolution of salt crystals ceased and was mixed in a ratio of 1/10 with a larger volume of distilled
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) water. It turned out FVN. The resulting product was processed in such a way that it would not contain viruses with preserved replication function.
  • the finished product active against microorganisms Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas and Achromobacter, was administered intravenously to a cow weighing 545 kg 1 hour before slaughter.
  • Cows were slaughtered at intervals of 20 minutes, initially weighing 545 kg, then weighing 560 kg. 1 hour after slaughter, the organoleptic characteristics of the meat of slaughtered cows weighing 545 kg (sample 1) and 560 kg (sample 2) were evaluated. Organoleptic evaluation did not reveal differences.
  • Cow meat weighing 545 kg was stored at a temperature of + 10 ° C in a separate container (sample 3).
  • Cow meat weighing 560 kg was stored at a temperature of + 10 ° C in a separate container (sample 4).
  • Example 13 Preservative additive.
  • FVN active against microorganisms Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas and Achromobacter and Aspergillus glaucus, obtained from RF containing 100 thousand particles of viruses active against each of the microorganisms Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, and Pseudomobusus pseudomobusus 1 ml of FR.
  • the HPF was obtained by freezing and thawing the RF, after which it was treated with 2 mm ultraviolet light. volume with an exposure of 5 seconds per sample.
  • FVN was
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) processed in such a way that there would be no viruses with preserved replication function in its composition.
  • the finished product was applied to the surface of 2 kg of mutton in a volume of 2 ml.
  • Example 14 A disinfectant.
  • Example 15 Determination of the specific activity and acute toxicity of the preparation of bacterial viruses with impaired
  • the new drug has a pronounced antimicrobial effect in concentrations comparable to effective doses of antibiotics. It has a wider spectrum of action compared to most antibiotics used in medical practice.
  • the data in table 7 confirm the bactericidal effect of the presented bacteriophage with impaired replication function in relation to different types of microbes.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) impaired replication function, showed a therapeutic effect. With its introduction, only one mouse died in the first day of the experiment. Further mortality of animals was not observed.
  • viruses The variability of viruses is known, which can be used naturally (by isolating from environmental samples) or artificially (by repeatedly infecting bacteria and fungi with known viruses in order to obtain genetically excellent samples) to obtain viruses to which specific bacteria and / or fungi samples are sensitive.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) unwanted changes, it is possible to detect the virus precisely to this bacterium or to this fungus.
  • the proposed technical solution allows to obtain low-toxic agents with the ability to specifically bind to bacteria and fungi, both microbiologically identified and unidentified, both in living organisms and outside them, as well as inhibit their vital activity.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for bacteriophages with impaired in vitro replication function ( ⁇ l / ml)
  • PHAGE THERAPY BACTERIOPHAGES AS ANTIBIOTICS Elizabeth Kutter, Evergreen State College, Olympia, WA 98505 - Nov. 15, 1997

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к фармакологии, ветеринарии, косметологии, медицине, пищевой и консервной промышленностям. Кроме того, заявляемый продукт может применяться как дезинфицирующее и гигиеническое средство. Предложен антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами. Указанный компонент содержит антибактериальные и/или противогрибковые вирусы, измененные так, что у них нарушена репликационная функция. Заявляемый компонент позволит обеспечить быструю перестройку производства лекарственных и ветеринарных препаратов, косметических, консервирующих, гигиенических, дезинфицирующих средств под вновь появляющиеся штаммы микроорганизмов.

Description

Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к фармакологии, ветеринарии, косметологии, медицине, пищевой и консервной промышленностям. Кроме того, заявляемый продукт может применяться как дезинфицирующее и гигиеническое средство.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Известен лекарственный препарат «Бактериофаг дизентерийный поливалентный» (Bacteriophagum dysentericum polyvalentum in tabulettis cum acidostato tegimento et in suppositoriis), производства ФГУП «НПО «Микроген», г. Москва, Россия. Препарат представляет собой стерильный фильтрат фаголизатов возбудителей бактериальной дизентерии шигелл Флекснера и Зоние. Выпускают в жидком виде, а также в таблетках, с кислотоустойчивым покрытием и в свечах. Предназначен для лечения больных бактериальной дизентерией (детей с 6-ти месячного возраста и взрослых), профилактики этого заболевания; лечения реконвалесцентов.
Известен лекарственный препарат «Бактериофаг колипротейный жидкий и в таблетках с кислотоустойчивым покрытием». (Bacteriophagum coliproteicum liquidum et in tabulettis cum acidostato tegimento) производства ФГУП «НПО «Микроген», г. Москва, Россия. Бактериофаг колипротейный жидкий— прозрачная жидкость светло-желтого цвета. В таблетированном виде входит в состав таблеток с кислотоустойчивым покрытием из ацетилфталилцеллюлозы. Представляет собой смесь фильтратов фаголизатов, активных в отношении наиболее распространенных энтеропатогенных эшерихий серологических трупп 020, 026, 033, 044, 055, 01 11, 0119, 0124, 0125, 0127, 0151 протея мирабельного и вульгарного. Показания: применяется для лечения и профилактики энтероколитов, лечения кольпитов колипротейной этиологии, дисбактериозов и других заболеваний, вызванных чувствительной к препарату флорой.
Известен лекарственный препарат «Бактериофаг клебсиелловый поливалентный» (Bacteriophagum klebsiellae polyvalentum), производства ФГУП «НПО «Микроген», г. Москва, Россия. Бактериофаг клебсиелл поливалентный очищенный жидкий представляет собой очищенный фильтрат фаголизатов клебсиелл озены, риносклеромы пневмонии. Препарат имеет вид прозрачной жидкости со слабо-желтым или зеленоватым оттенком. Показания: предназначен для лечения озены, риносклеромы, гнойно-воспалительных, энтеральных и других заболеваний, вызванных бактериями клебсиелл, а также при обсемененности внутрибольничными штаммами клебсиелл.
Их общие недостатки заключаются в сложности создания новых лекарственных препаратов под изменяющиеся штаммы бактерий. Для создания нового препарата взамен нынешнего, перестающего убивать мутировавшие бактерии, понадобятся годы исследований и доказательств безопасности нового препарата.
Известны вирусные агенты, лизирующие дрожжевидные и плесневые грибы, в частности Candida, Penicillium (И.П. Ревенко, Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике; Киев, 1973 изд. «Урожай», с.12).
Возможно использование вирусов грибов в комбинации с бактериальными вирусами, например, лекарственным препаратом «Секстафаг», производитель: «Микроген» НПО ФГУП (НПО «Биомед») (Россия).
Недостатки такой комбинации также, как и в случае с предыдущими препаратами, заключаются в сложности перенастройки препарата под изменяющиеся штаммы бактерий. Для создания нового препарата взамен нынешнего, перестающего убивать мутировавшие бактерии, понадобятся годы исследований и доказательств безопасности нового препарата [1].
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Известен пищевой консервант-препарат НИЗИН - натуральный пищевой консервант, который применяется в производстве различных пищевых продуктов (молочные продукты, плавленые сыры, пиво и квасы живого брожения, рыбные и овощные консервы) для предотвращения бактериальной порчи, бомбажа, замедления (остановки) повышения кислотности и, в конечном итоге,- с целью увеличения срока хранения, (см. Инструкцию по применению (Рекламный проспект производителя - ООО «Фуд Специалист» Россия, г. Москва.2009 год). При этом НИЗИН является полипептидным антибиотиком узкого спектра действия и обладает всеми недостатками антибиотиков, включая побочные эффекты, развитие антибиотикорезистентных штаммов и неизменный спектр специфической активности.
Известна добавка в виде концентрата бактериофагов, входящая в состав зубной пасты «Гелевая паста-апликатор для полости рта с бактериофагами «ДЕНТОФАМ», производства ЗАО «МИРРА-М», Россия, обладающая, в том числе, антисептическим, антибактериальным эффектом (патент РФ JVTe 2165766).
Известен «гель-смазка лубрикант мирра- люкс (mirra-lux) профилактический с бактериофагами», «Гель косметический с бактериофагами» на основе аналогичной добавки того же производства.
Во всех случаях добавление концентрата бактериофагов преследует цель создания противомикробного эффекта. Данная добавка не оказывает влияния на нормальную флору организма человека. Однако, изменение микрофлоры в связи с естественными причинами требует от производителя такой добавки постоянной адаптации бактериофагов к таким изменениям с последующим прохождением длительной процедуры регистрации и доказательства безопасности вновь выявленных бактериофагов. Кроме того, эффективность бактериофагов in vivo зависит от эффективности их репликации, определяемой индивидуальными свойствами организма конкретного человека, и плохо повторяема [1].
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Известно применение ферментов бактериофагов в качестве антимикробного агента [2, 3]. Подобное техническое решение позволяет обеспечивать высокую селективность антимикробного эффекта (меньшую, чем у бактериофагов и большую, чем у известных антибиотиков). При этом, у ферментов бактериофагов, в отличие от самих бактериальных вирусов, отсутствует влияние на микробную экологию окружающей среды и передача генетической информации микроорганизмам. Использование ферментов бактериофагов в лечебных целях вызывает значительно меньше количество побочных эффектов по сравнению с антибиотиками. Однако, ферменты бактериофагов, в отличие от живых вирусов, не обладают способностью специфически связываться с клетками мишенями и накапливаться за счёт этого именно в очагах скопления клеток-мишеней. Использование таких ферментов требует создания значительных их концентраций. Кроме того, такие ферменты не стабильны и легко разрушаются путём кислотного гидролиза, ферментными механизмами, физическими факторами, что делает их малопригодными для применения в качестве агентов, длительно сохраняющих полезные свойства. По этой же причине вирусные ферменты мало применимы для системного применения (в отличие от местного применения) в лечебных целях. Помимо этого, введённые в организм в форме, не защищённой от иммунологического распознавания они способны вызывать сенсибилизацию и выработку антител их нейтрализующих. Находясь в составе вирусной частицы, ферменты защищены от иммунологического контроля. Сравнительные особенности бактериофагов и ферментов бактериофагов приведены в таблице 1.
РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В основу изобретения поставлена задача - создание нового продукта, являющегося биологически активным компонентом, обладающим антибактериальными и/или противогрибковыми свойствами, функцией специфически связываться с бактериями и/или* грибами, а также
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) свойствами позволяющими обеспечить быструю перестройку производства под вновь появляющиеся штаммы микроорганизмов. При этом новый продукт не должен быть способен к передаче генетической информации.
Поставленная задача решена антибактериальным и/или противогрибковым компонентом, обладающим свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами, характеризующимся тем, что он содержит антибактериальные и/или противогрибковые вирусы, измененные так, что у них нарушена репликационная функция.
Новым в заявляемом изобретении является то, что биологически активный компонент содержит антибактериальные и/или противогрибковые вирусы, измененные так, что у них нарушена репликационная функция.
Сравнительные особенности бактериофагов с нарушенной и сохраненной репликационной функцией приведены в таблице 2.
Актуальность создания новых противогрибковых и антибактериальных препаратов, дезинфицирующих и консервирующих средств для обработки различных пищевых продуктов объясняется наличием большого количества микроорганизмов, повреждающих муку, хлеб, макароны, вина, пиво и др.
Широту потенциального применения данного изобретения можно иллюстрировать информацией по конкретным продуктам питания и отдельным примерам товаров народного потребления:
1. МУКА:
В микрофлоре муки нормируется содержание спорообразующих бактерий, особенно Вас. subtilis. В муке встречаются также молочнокислые бактерии, уксуснокислые палочки, ложные дрожжи, споры плесневых грибов. Не должно быть кокковых форм бактерий, которые развиваются при повышенной влажности муки [4].
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 2. ХЛЕБ:
Тягучая болезнь хлеба. Возбудителем является сенная палочка (Вас. subtilis), продуцирующая мощные амилолитические и протеолитические ферменты.
Меловую болезнь вызывают термоустойчивые дрожжи.
Пигментные пятна вызываются грамм-отрицательными пигментообразующими бактериями (чудесная, синегнойная, флуоресцирующая палочки).
Пьяный хлеб - возникает при заражении муки токсинами гриба рода Fusarium.
Плесневение вызывается спорами плесневых грибов, которые попадают из воздуха, с тары, с рук и одежды персонала. Спороносные бактерии рода Clostridium создают условия, неблагоприятные для размножения пекарских дрожжей, и придают им неприятный прогорклый вкус. Использование при выпечке хлеба пшеничной муки, инфицированной спорами Bacillus mesentericus, может привести к его заражению тягучестью (картофельной болезнью) и распространению болезни на всем хлебопекарном заводе. [4]
3. МАКАРОНЫ:
Видами микробной порчи макаронных изделий являются:
Вспучивание вызывается гетероферментативными молочнокислыми бактериями.
Появление окраски вызывают дрожжи рода Candida.
Прокисание связано с развитием молочнокислых бактерий.
Плесневение вызывают грибы родов Penicillium, Aspergillus, Rhizopus.
[4]
4. КОНДИТЕРСКИЕ ИЗДЕЛИЯ:
Порчу вызывают осмофильные дрожжи, инициирующие брожение. При повышенной влажности воздуха может возникнуть плесневение.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Может происходить порча карамельных начинок (брожение, прогоркание), вызываемая молочнокислыми и гнилостными бактериями.
Кремовые изделия относятся к скоропортящимся продуктам. Может происходить прокисание крема. В крем могут попасть золотистые стафилококки, патогенные кишечные бактерии, что чревато отравлениями и возникновением инфекций. [4]
5. ВРЕДИТЕЛИ ПИВОВАРЕНИЯ:
Микрофлора сусла и пива.
К грамм-положительным бактериям, встречающимся в сусле и пиве, относятся молочнокислые палочки, пивные сардины, микрококки.
Молочнокислые палочки (лактобациллы) вызывают ухудшение вкуса и аромата пива, вызывают помутнение и прокисание, а иногда - ослизнение. Пивные сардины хорошо развиваются в присутствии углекислого газа и спирта и обычно размножаются в пиве низового брожения, образуя опалесцирующую муть, мелкозернистый осадок, ослизнение, вызывая появление в пиве неприятного вкуса и медового запаха (сардинное заболевание пива). Микрококки, стрептококки легко приспосабливаются к анаэробным условиям, скапливаются в дрожжевых осадках бродильных и лагерных танков, вызывают помутнение пива и изменение его вкуса.
К грамм-отрицательным микроорганизмам относятся уксуснокислые бактерии, бактерии группы кишечной палочки и др.
Уксуснокислые бактерии вызывают быстрое прокисание пива, помутнение, некоторые виды образуют слизь и придают тягучесть пиву.
Флавобактерии попадают в производство с засевными дрожжами. В инфицированном пиве появляется шелковистая муть и запах пастернака.
Ахромобактерии вызывают порчу пива (помутнение и неприятный запах) в течение нескольких часов.
Бактерии группы кишечных палочек развиваются в сусле, придавая пиву сладковатый фруктовый привкус и запах вареной капусты.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Дикие дрожжи являются вредителями производства, тормозят развитие культурных дрожжей, ухудшают органолептические свойства пива. Наиболее распространенными среди диких дрожжей, встречающихся в пивоварении, являются дрожжи родов Saccharomyces, Hansenula, Candida, Pihia, Torulopsis
Дрожжи-сахаромицеты обычно увеличивают содержание в пиве высших спиртов и эфиров, придают пиву сладковатый или терпко-горький вкус, вызывают помутнение пива и образование неприятного запаха.
Дрожжи ганзенула при сбраживании Сахаров образуют кроме этилового спирта, также бутиловый и амиловый спирты, уксусную, масляную, янтарную кислоты и эфиры, что обуславливает резкий запах пива.
Дрожжи пихия и кандида, развиваясь в пиве, образуют белую или сероватую пленку, вызывают помутнение, придают пиву фруктово- эфирный и лекарственный привкус.
В 60-е годы в пивоваренном производстве были обнаружены ненормально мелкие дрожжевые клетки, замедляющие брожение и ускоряющие отмирание производственных дрожжей, так как они выделяют в среду токсичный белок - «убивающий фактор». Эти дрожжи назвали дрожжами-убийцами. [4]
6. КВАС:
Слизеобразующие микроорганизмы к которым относятся:
лейконостоки (Leuconostoc mesenteroides), сенная палочка (Bacillus subtilis) и другие микроорганизмы, которые при росте на сахаросодержащих средах образуют капсулы.
Уксуснокислые бактерии (ацетобактерии), род Acetobacter. Они, развиваясь в квасе, окисляют этиловый спирт до уксусной кислоты, в результате чего резко повышается его кислотность.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Грибы:
Мицеллиальные грибы (пеницилловые, аспергилловые, ризопусы, мукоровые и др.) придают пораженному квасу характерный плесневелый запах и неприятный привкус.
Дикие дрожжи:
Основным возбудителем порчи кваса является Candida mycoderma.
Колиформы (представители Escherichia, Citrobacter, Enterobacter и Klebsiella).
Попадают в квас через заградительное оборудование с водой при нарушениях санитарного режима производства работниками. Могут быть возбудителями инфекций пищеварительного тракта. [4]
7. БЕЗАЛКОГОЛЬНЫЕ ПРОДУКТЫ:
Дрожжи вызывают биологическую порчу безалкогольных напитков. Осмофильные дрожжи вызывают брожение фруктово-ягодных соков, морсов, купажных сиропов и других полуфабрикатов, ухудшая органолептические свойства напитков (запах, вкус, цвет), происходит вспенивание напитков. Основными видами дрожжей, развивающихся в безалкогольных напитках, являются дрожжи рода Candida mycoderma, Hansemaspora apiculatus, schizosaccharomyces.
Уксуснокислые бактерии (ацетобактерии), представители рода Acetobacter, образуют на поверхности напитков пленку беловатого или серого цвета, вызывают прокисание.
Молочнокислые бактерии (Lactobacillus) вызывают скисание соков, образуют устойчивую муть и вызывают порчу сырья. Также могут вызывать ослизнение напитков.
Слизеобразующие бактерии.
Наиболее часто ослизнение безалкогольных напитков вызывают бактерии рода лейконосток (вид лейконосток мезентероидес).
Мицелиальные грибы - это Aspigillus, Penicillium, Fusarium и другие грибы. [4] '
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 8. ВРЕДИТЕЛИ В ПРОИЗВОДСТВЕ ВИНА:
Плесневые грибы.
Наиболее часто в виноделии встречаются грибы родов Rhizopus, Mucor, Penicillium, Aspergillus, Pullularia (влажные черные слизистые пятна в вине, сусло превращается в слизистую тянущуюся массу), Botrytis.
Дрожжи образуют пленки на поверхности вина, больше эфиров, придающих вину посторонние запахи, фруктово - эфирный и лекарственный привкусы, вызывают помутнение вина, снижают бродильную активность культурных дрожжей. Это дрожжи родов Zygosaccharomyces, Hansenula, Pichia, Schizosaccharomyces, Asatanomyces, Saccharomycodes, Candida, Torulopsis, Cluconibacter.
Acetobacter образуют тонкую пленку на поверхности вина, придают ему резкий запах.
Многие представители рода молочнокислых палочек Lactobacillus вызывают образование слизи в вине, обуславливают появление вкуса и запаха квашеной капусты.
Micrococcus - вызывают понижение кислотности после бурного брожения, что способствует развитию в вине посторонней микрофлоры, вызывают также помутнение вина. [4] Главным возбудителем турна являются бактерии рода Bacterium tastarophorum. Заболеванию вин турном . способствует высокая температура при сбраживании сусла и выдержке.
В соответствии с данным изобретением, введение на определенном этапе развития вина вирусов с нарушенной репликационной функцией^ соответствующих вредителям, будет консервировать вино, не давая ему изменять органолептические свойства, предусмотренные производителем и предупреждать отравления потребителей.
9. МАРГАРИН:
Горький вкус - возникает при обильном обсеменении маргарина гнилостными бактериями (например, Pseudomonas bacillus).
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Прогорклый вкус и неприятный запах возникают вследствие разложения жиров некоторыми дрожжами, грибами, флюоресцирующими гнилостными бактериями, которые обладают липолитической активностью.
Образование пигментных пятен на поверхности маргарина обусловлено развитием грибов и некоторых пигментообразующих гнилостных бактерий.
Кислый вкус возникает при хранении маргарина при температуре выше 10° С в результате развития термоустойчивых молочнокислых бактерий.
[4]
: 10. МАЙОНЕЗ:
С сырьем в производство майонеза могут попасть микроорганизмы; расщепляющие белки, углеводы, жиры. Это бактерии родов Bacillus, Clostridium, Proteus, Pseudomonas, дрожжи Candida, Lipolitica и грибы родов Aspergillus, Penicillium и др. Развиваясь в майонезе, эти микроорганизмы могут вызвать его порчу. [4]
11. ОВОЩИ И ФРУКТЫ:
Фузариоз вызывается грибами рода Fusarium.
Фитофтороз вызывается грибом фитофторой.
Фомоз (черная сухая гниль или гниль сердечка) вызывается грибом Phoma.
Монилиоз (плодовая гниль плодов и овощей) вызывается грибом рода Monilia.
Парша картофеля вызывается различными формами почвенных актиномицетов, чаще рода Streptomyces.
Сосудистый бактериоз вызывается палочковидной холодоустойчивой бактерий рода Xanthomonas (ксантомонес) и бесспоровыми бактериями рода Erwinia.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Мокрая бактериальная гниль овощей вызывается бактериями родов Pseudomonas и Erwinia. Черная сухая гниль (альтернариоз) вызывается грибом рода Alternaria.
Серая гниль вызывается грибом рода Botrytis. Белая гниль моркови и других корнеплодов вызывается грибом рода Sclerotinia. Гниль цитрусовых в период хранения вызывают преимущественно грибы рода Penicillium. [4]
12. ПРОДУКТЫ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ (КОНСЕРВЫ):
В остаточной микрофлоре стерилизуемых консервов обнаруживаются, как правило, спорообразующие бактерии. Это кислото- и газообразующие мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные бактерии рода Bacillus (Bacillus subtilis, Bacillus meganterium, Bacillus cereus), кислотообразующие термофильные аэробы Bacillus stearothermophilus, Bacillus aerothermophilus, мезофильные гнилостные анаэробы Clostridium putrificum и Clostridium sporogenes, а также другие маслянокислые бактерии. [4]
13. ПИЩЕВОЕ СЫРЬЕ:
Еще большую опасность, чем порча пищевых продуктов, представляет собой вероятность инфицирования пищевого сырья во время переработки и последующего попадания в готовые пищевые продукты промышленного производства токсичных микроорганизмов. Патогенные микроорганизмы, способные передаваться к человеку через продукты питания и пищевое сырьё, включают разнообразную по свойствам микрофлору от сравнительно безвредной до сильно патогенной, вызывающей опасные для жизни инфекционные заболевания (брюшной тиф, дизентерию, паратифы и др.). Одним из характерных микробиологических возбудителей болезней, передаваемых в организм человека через продукты питания и пищевое сырьё, являются бактерии группы Salmonella. Сальмонеллез обычно развивается в результате потребления зараженных продуктов,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) приготовленных или сохранявшихся в условиях, благоприятных для развития этого микроорганизма. Основным источником заражения человека сальмонеллами считаются продукты животного происхождения (мясо, домашняя птица, яичные продукты, не подвергнутые специальной обработке). Так, употребление яичных продуктов, содержащих значительное число микроорганизмов группы Salmonella, в качестве компонентов при производстве хлебобулочных изделий или в готовых салатах может вызвать вспышку отравления, так как эти продукты не подвергаются тепловой обработке, достаточной для уничтожения указанных микроорганизмов. Продукты могут быть инфицированы сальмонеллами при неправильной транспортировке, хранении и приготовлении и могут стать источником заболевания. Дизентерию, или шигеллез, вызывают бактерии Shigella. Установлено, что Shigella dysenteriae вырабатывает энтеротоксин с высокой цитотоксичностью. Часто диарейные заболевания вызываются бактериями Escherichia coli разных штаммов. При этом необходимо отметить, что Е. coli не всегда бывают патогенными. Помимо рассмотренных, причиной пищевых токсикоинфекций могут стать и другие грамм-отрицательные бактерии: Pseudomonas, Yersinia enterocolitica и др. [4]
14. Одна из наиболее распространенных пищевых инфекций, или токсикоинфекций, — ботулизм, вызываемый токсином бактерий Clostridium botulinum. Возбудители ботулизма хорошо размножаются в кулинарно обработанных и длительное время хранящихся продуктах. Большинство мясных, рыбных, овощных консервов являются для них благоприятной средой. Известны также случаи развития этих бактерий в некоторых фруктовых консервах [4].
15. Имеются сведения о пищевых токсикоинфекциях, связанных с аэробными спорообразующими бациллами. Bacillus cereus относится к крупным грамм-положительным аэробным спорообразующим бациллам, способным расти и в анаэробных условиях. Ми оорганизм ответствен за
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) порчу пастеризованного молока и сливок (прогоркание). Данные позволяют отнести эти бациллы к числу патогенных микроорганизмов. В малых количествах Bacillus cereus не опасен, поэтому основной задачей профилактических мероприятий должно являться предотвращение прорастания спор и последующего размножения вегетативных клеток в готовых продуктах. [4]
16. Проблемой международного значения являются энтеротоксикозы, вызванные стафилококковой микрофлорой. Около 50% выделяемых Staphylococcus aureus способны при испытаниях в лабораторных условиях вырабатывать энтеротоксин, более того, один и тот же штамм может вырабатывать два и более энтеротоксина [4].
17. Вспышки септической ангины и скарлатины являются результатом пищевых токсикоинфекций, вызванных бактериями Streptococcus. Потребление сырого молока и его продуктов, инфицированных бактериями Brucella, приводит к заражению бруцеллезом. Хотя в молоке бактерии Brucella не размножаются, они тормозят естественное скисание и процессы переработки молока при изготовлении таких продуктов, как масло, мягкие сыры и мороженое. В окружающей среде при отсутствии прямого солнечного освещения бактерии Brucella сохраняются в течение многих недель и могут переносить замораживание, однако дезинфицирующие средства и нагревание свыше 333° К приводят к их инактивации [4].
18. В результате метаболизма как минимум 150 видов плесневых грибов в определенных пищевых продуктах и в соответствующих условиях образуются микотоксины - вещества, токсичные при пероральном приеме для человека. Микотоксины, как правило, резистентны к обычным методам обработки. К числу микотических инфекций относят, например, фикомикоз, который вызывают попавшие с пищей в организм человека Mucora сеае, особенно родов Absidia, Rhizopus, Mortierella, Basiodobobus, Mucor и Cunninghamella. Борьба с
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) микотоксикозами состоит в обеспечении условий производства, переработки, хранения, перевозки и распределения пищевых продуктов, обеспечивающих предотвращение образования микотоксинов. Особенно важно предотвратить рост грибов в продуктах при хранении [4].
19. Особенно большой вред гнилостные бактерии наносят хлебопекарным дрожжам, сокращая срок их хранения. Предлагаемое решение, согласно данному изобретению, состоит в том, что для устранения негативных последствий действий гнилостных бактерии при производстве и хранении дрожжей с целью дезинфекции оборудования и/или готового продукта, необходимо использование (в качестве антибиотика) бактериофага с нарушенной репродуктивной функции, направленные против гнилостных бактерий.
20. Молочные продукты: Развитие бактерий Streptococcus lactis приводит к скисанию молока, бактерии Alcaligenes viscosus вызывают сворачивание молока и придают ему прогорклый вкус. Горький вкус появляется также при наличии в молоке протеолитических бактерий Streptococcus liquefaciens . При переработке молока и молочных продуктов существенное влияние на микробиологические показатели оказывает качество дезинфекции производственных емкостей и технологического оборудования, которые могут служить источником вторичного обсеменения сырья нежелательной микрофлорой [4].
21. Предлагается новый, оригинальный способ увеличения срока годности мяса забиваемого скота. Перед забоем животное дезинфицируют с помощью вирусов, способных нарушать жизнедеятельность микроорганизмов, например, бактериофагов, с нарушенной репликационной функцией, направленных против гноеродных бактерий. Эти же частицы предохранят мясо и рыбу после убоя.
22. Полезная замена пастеризации и стерилизации пищевых продуктов. Пастеризация— процесс одноразового нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ до. 60 °С в течение 60 минут или при температуре
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 70-80 °C в течение 30 мин. Технология была открыта в середине XIX века французским микробиологом Луи Пастером. При подобном режиме кроме негативной флоры погибает и полезная, теряется часть витаминов и ферментов. Заявляемое техническое решение дает возможность создания средств, имеющих целью, в отличии от пастеризации, не только уничтожение вредоносной флоры ,но и сохранение при этом всех витаминов, ферментов и полезных микроорганизмов.
Данное изобретение применимо не только в отношении продуктов питания и пищевого сырья:
1. Известен шампунь от перхоти Head&Shoulders, содержащий антигрибковый компонент пиритион цинка, который действует против гриба Malassezia globosa, поскольку появление перхоти связано, в том числе, с этим и иными грибами. Возможно создание вируса гриба Malassezia globosa с нарушенной репликационной функцией, что решит задачу уничтожения гриба без вредоносных последствий.
2. Учение Мечникова о преждевременной старости человека, связываемое с постоянной интоксикацией организма продуктами жизнедеятельности гнилостных бактерий кишечника получило не только широкое признание, но и практическое применение. Заявляемое изобретение дает возможность создания профилактических продуктов питания, имеющих целью системное нивелирование вышеописанного негативного эффекта.
3. Средство для продления жизни срезанных растений.
Длительность сохранности таких растений зависит в том числе и от поддержания нормальной микрофлоры и предотвращения повреждения тканей микроорганизмами, что позволяет осуществить предлагаемое изобретение.
4. Разложение мёртвых тел человека, животных и растений связано, в том числе, с развитием в них гнилостных процессов и процессов брожения. Оно может быть предотвращено или замедленно путем
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) использования вирусов, способных нарушать жизнедеятельность микроорганизмов, с нарушенной репликационной функцией, направленных против любого из известных мироорганизмов, участвующих в этих процессах, например рода Proteus, Streptococcus, Stafilococcus, клостридий, грибов Aspergillus и Penicillium, а также в отношении любого неизвестного микроорганизма, выделенного из мёртвого тела человека или животного без его микробиологической классификации, но при выявлении чувствительного к нему вируса и приготовлении препарата вируса с нарушенной репликационной функцией.
5. Учеными под руководством доктора Нао Сузуки из Стоматологического колледжа города Футуока было обнаружено, что бактерия, вызывающая язву и рак желудка, обитает в полости рта людей, страдающих галитозом (неприятным запахом изо рта). Бактерия Helicobacter pylori присутствует в полости рта у большинства людей. При наличии заболеваний пародонта, при плохой гигиене полости рта, при плохой установке пломб, т.е. при причинах, вызывающих неприятный запах изо рта, полость рта может служить местом обитания для бактерии Helicobacter pylori. Известен вирус который нарушает жизнедеятельность данного микроба. Предлагаемое изобретение позволяет решать проблему хеликобактериоза.
1 6. Следует отметить, что большинство фармацевтических носителей, продуктов питания и личной гигиены могут содержать в себе дополнительным биологически активным компонентом, любые вирусы, обладающие антибактериальными и/или противогрибковыми свойствами, у которых нарушена репликационная функция, и которые могут быть адресно направлены против соответствующих представителей патогенной и/или условно-патогенной флоры. В отличие от антибиотиков, они не создают угрозу здоровью пользователей и, в отличие от бактериофагов не создают угрозу микробному пейзажу окружающей среды и тела человека.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 7. Учеными было доказано, что антибактериальное мыло, содержащее в себе триклозан, имеет множество побочных эффектов. Оно уничтожает, в том числе и полезные микроорганизмы, что лишает кожу естественной защиты. Поэтому ежедневное применение такого мыла способствует тому, что патогенные бактерии вырабатывают устойчивость к триклозану и к иным антибактериальным средствам. Заявляемое изобретение поможет решить проблему с помощью применения вирусов с нарушенной репликационной функцией, направленных против любого из представителей патогенных или условно-патогенных бактерий или их комбинации.
Мыло для женщин, мыло для мужчин, мыло для детей с антибактериальным эффектом. Известно, что нормальная микрофлора кожи и слизистых оболочек у детей до полового созревания отлична от таковой в период полового созревания. Микрофлора кожи слизистых оболочек у мужчин и женщин также отлична. Существующие антисептики не обладают столь тонкой специфичностью, чтобы обеспечить указанные выше возрастные и половые особенности средств гигиены. В то же время, предлагаемое изобретение позволяет решить эту проблему.
8. Антибактериальные салфетки, антибактериальный лосьон, аэрозоль для компьютерной клавиатуры и иных поверхностей и объемов, дезодоранты, гели и пенки для душа, очищающие лосьоны, губки и другие чистящие и моющие средства. Заявляемое изобретение поможет решить проблему с помощью применения вирусов с нарушенной репликационной функцией, направленных против любого из представителей патогенных или условно-патогенных бактерий.
9. Выгодная замена антибиотиков в животноводстве. Антибиотики широко применяются в животноводстве и птицеводстве с профилактической и лечебной целью. Отрицательными сторонами этой практики является широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов как у животных, так и у людей, а так же
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) контаминация продуктов животноводства и птицеводства антибиотиками, способными вызывать аллергические и другие нежелательные реакции. Предлагаемое изобретение позволяет избежать этих отрицательных сторон и получать экологически чистые продукты животноводства и птицеводства.
Ведущая роль в повышении ежесуточных привесов животных всегда отдавалась качеству кормов. Однако нельзя забывать важную составляющую в питании животных - воду, которой ,по сравнению с кормами, потребляется в 2-3 раза больше. Именно с ней легче всего распространяются инфекции. Обычная питьевая вода ферм идеально подходит по кислотности, температурным и кормовым условиям для развития энтеробактерий, плесени и дрожжей. И открытые системы подачи воды (конусные поилки, чаны и баки для ее хранения) очень легко загрязняются кормами и навозом. Даже ниппельные поилки не обеспечивают необходимое качество воды и могут забиваться бактериальными биопленками. Между тем, голландскими учеными доказано, что существует прямая корреляция между уровнем зараженности воды и производственными показателями животноводства, такими как конверсия корма, сохранность поголовья, ежесуточные привесы и пр. Как показывает практика, традиционные дезинфицирующие средства, такие как хлорин и иные не всегда справляются с микробиологическим загрязнением питьевой воды. В частности, содержание энтеробактерий в 1 мл остается на уровне 20-300 тыс. И животноводы вынуждены применять антибиотики. При этом, многие лекарственные препараты, подающиеся с питьевой водой, сделаны на основе лактозы и являются отличной питательной средой для патогенов. Кроме того, животные неохотно пьют даже слабохлорированную воду и, как следствие, хуже потребляют корма. В таких условиях нужны качественно новые технологические подходы к гигиене воды на фермах. Одним из них является применение бактериофагов с нарушенной репликационной функцией.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 10. Дезинфекция любого оборудования. Известно, что в зависимости от функционального предназначения различные предметы, контактирующие с людьми имеют разный состав микрофлоры в зависимости от региона, особенностей физико-химического и биологического окружения (купюры, поручни общественного транспорта, медицинское оборудование гнойно- септических стационаров, терапевтических стационаров, онкологических стационаров, педиатрических стационаров, инфекционных стационаров, столовые приборы, кондиционеры воздуха, одежда, обувь салоны автомобилей). Предлагаемое изобретение позволяет индивидуально обеспечить микробиологическую безопасность в каждом конкретном случае.
1 1. Обеззараживание минеральных вод. Заявляемое изобретение позволяет уничтожать потенциально опасную микрофлору без изменения минерального состава и органолептических свойств воды с учётом региональных особенностей и без влияния на микрофлору окружающей среды.
12. Презервативы с антибактериальной смазкой. Использование неселективных антибактериальных агентов может привести к гибели нормальной микрофлоры влагалища. При этом развитие хронических заболеваний тазовых органов может быть не менее опасным, чем развитие заболеваний передающихся половым путём. Предлагаемое изобретение позволяет избирательно предотвращать инфицирование потенциально опасными бактериями, не влияя на нормальную микрофлору половых путей.
Широко известны антибиотики и другие вещества (например, сульфаниламиды), проявляющие антимикробную активность при введении в организм человека и животных и относительно безопасные для их здоровья (в отличие от веществ, подавляющих микробы только при непосредственном контакте с ними и которые нельзя вводить в организм человека и животных из-за их побочных эффектов). Эти антимикробные
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) вещества (далее АВ) спасли на данный момент многие жизни. Вместе с тем, любое АВ рано или поздно может перестать быть эффективным. Происходит это потому, что болезнетворные микроорганизмы со временем «приспосабливаются» к тому или иному лекарственному средству, направленному на борьбу с ними. Появляются резистентные к определенному АВ штаммы бактерий. Для решения этой проблемы постоянно создаются новые антибиотики. Современная наука предлагает еще один способ борьбы - бактериофагию, то есть уничтожение патогенных микробов с помощью других микроорганизмов. В качестве «лекарей» используют особые вирусы, которые убивают болезнетворные бактерии. Встречая чувствительную микробную клетку, бактериофаг проникает внутрь нее, переключает механизм ее действия на воспроизводство себе (бактериофагу) подобных, которые, разрывая оболочку клетки, в десятикратном количестве атакуют другие микробы. Лизис приобретает спонтанный характер, и освобождение от нежелательных микробов происходит в считанные часы. По мнению медиков, проводивших эксперимент, бактериофагия - реальная альтернатива антибиотикам. При этом стоимость нового вида лечения намного ниже. Это безопасный вид медикаментов, потому что, во-первых, бактериофаги уничтожают только один вид микроорганизмов и не уничтожают полезную микрофлору (высокоселективны, в отличие от АВ); во-вторых, лечение крайне редко вызывает аллергические реакции.
Общеизвестным является факт, что вирусы разделяют по их способности инфицировать живые объекты. Существуют вирусы многоклеточных организмов, одноклеточных организмов, растений, животных, грибов. При этом отмечается высокая специфичность вирусов в отношении клеток-хозяев. Так, существуют бактериофаги - вирусы бактерий, среди которых, в зависимости от инфицируемого объекта, различают (по некоторым классификациям) актинофаги - бактериофаги актиномицет, микофаги - бактериофаги грибов. Порой вирусы грибов
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) рассматривают отдельно от бактериофагов. Конкретные вирусы, как правило, инфицируют микроорганизмы только в пределах одного рода, вида, порой конкретного штамма микроорганизма.
Сравнительная характеристика бактериофагов, как частного варианта вирусов микроорганизмов, и антибиотиков приведены в табл.3.
Клиническая практика показала эффективность использования бактериофагов при инфекционных заболеваниях желудочно-кишечного тракта, а также при воспалительных заболеваниях пазух носа, ротовой полости, верхних дыхательных путей, мочеполовой системы, холециститах и других, вызванных бактериями, чувствительными к фагу.
Вместе с тем, сами вирусы и, как частность, бактериофаги с ненарушенной репликационной функцией обладают рядом существенных недостатков.
• Они способны передавать генетическую информацию и вызывать появление организмов (в частности - микроорганизмов) с непредсказуемыми свойствами.
• Их действие в организме человека и животных невозможно описать общепринятыми механизмами фармококинетики и фармакодинамики, стандартно применяемыми для всех лекарственных препаратов. В отличии от антибиотиков, препараты вирусы не тестируются для определения специфической активности стандартными для антибактериальных и противогрибковых веществ методами и методиками, а только лишь нестандартными методами и методиками, предусмотренными для Медицинских Иммуно- Биологических Препаратов (МИБГТ) в России.
· Бактериофаги могут повлиять на общую экологию при массовом внедрении. Они несут потенциальную биологическую угрозу. Если АВ выводятся из организма человека в концентрациях не способных повлиять на микробную экологию, подвергаясь ещё и многократному разведению в окружающей среде, то бактериофаги, наоборот, способны к размножению в окружающей среде, будучи выведены с выделениями человека и
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) животных. Такое размножение способно непредсказуемым образом изменять микробный пейзаж окружающей среды, что может вызвать экологическую катастрофу.
В научной литературе описаны несколько способов разрушения бактериофагов, и, соответственно, как частное, незапланированное следствие, но не более, нарушения репликационной функции бактериофагов:
- проведением осмотического шока путём экспозиции бактериофагов в гипертоническом солевом растворе в течение нескольких минут с последующим внесением их в гипотонический солевой раствор или воду;
- путём повторного замораживания и оттаивания водной суспензии бактериофагов;
- путём облучения суспензии бактериофагов излучением в ультрафиолетовом диапазоне.
Нами предлагается способ, не требующий этих дополнительных сложностей. Он состоит в том, что в культуре, содержащей инфицированные бактериофагом микроорганизмы в процессе внутриклеточной репликации бактериофага на этапе, когда сформированы отдельные компоненты бактериофага, но не произошла полная сборка частиц бактериофага, производится остановка жизнедеятельности клеток обработкой формальдегидом или нагреванием, так, что ферментные системы клетки оказываются неспособными продолжать дальнейшую сборку частиц бактериофага. После этого бактериальные клетки разрушаются. Разрушение бактерий приводит к высвобождению частиц бактериофага с нарушенной репликационной функцией. Для определения времени остановки жизнедеятельности бактериальных клеток после заражения культуры бактериальных клеток бактериофагом из этой культуры берут пробы в течение цикла развития вируса (бактериофага). Частота забора проб., зависит, от длительности "^икла развития вируса.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Выделенные пробы обрабатывают хлороформом, нагревают или по- другому прерывают жизнедеятельность бактерий. В каждой пробе определяют наличие частиц бактериофагов, обладающих репликационной функцией. Выявляют самую раннюю по времени пробу, в которой не выявляются бактериофаги с репликационной функцией. Промежуток времени от начала заражения культуры бактериальных клеток бактериофагами до момента заборы пробы, самой ранней, в которой не выявляются бактериофаги с репликационной функцией, и является тем временным отрезком, по окончании которого следует лишить жизнедеятельности бактерии, заражённые конкретным бактериофагом в конкретных условиях культивирования.
Полученный высокоселективный антибиотик нового системного класса отличается от применяемых бактериофагов тем, что он, по сути, является производным бактериофага, сохранившим анти-микробную активность, но не обладающим способностью к репликации и передаче генетической информации. Получаемые нами препараты отличаются легкой технологической корректировкой антибактериальных свойств, что происходит путём адаптации бактериофага к новым штаммам за счёт мутантных особей или тестирования нового штамма к обширной библиотеке бактериофагов или выделения их из сточных вод или других объектов окружающей среды.
Предложенное вещество со специфической активностью против микроорганизмов совмещает в себе положительные свойства известных ранее антибактериальных веществ, как неспособных к репликации, так и вирусов, при этом оно лишено отрицательных свойств и тех, и других. А именно: эти вещества не обладают репликационными способностями, так же, как и антибиотики (а также сульфаниламиды и прочие вещества, не способные к репликации) и нетоксичны и высокоселективны, как бактериофаги и иные вирусы.
Возможно лиофильное высушивание, увеличивающее сроки хранения.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Сравнительные характеристики антибиотиков и предлагаемых препаратов на основе бактериофагов с нарушенной репликационной функцией приведена в табл.4:
•способы идентификации не являются рутинными в фармацевтике, аналогов по данному признаку нет.
• сопоставление физических и химических свойств не является традиционным.
• физические характеристики (линейные размеры нанообъектов, оцениваемые в ходе стандартного исследования) и химические показатели (протеидный характер нанообъектов), а также биологические свойства - специфическая антимикробная активность - все это вместе может быть соотнесено только с упорядоченными биологическими объектами. Отсутствие генетической информации, что авторами заявлено (для исключения негативного признака) как описание стандартных тестов, подтверждающих возможность воспроизведения, отличает препарат от непроизносимого и ненаписуемого аналога - вирусов и бактериофагов. Другие продукты антибактериального или антивирусного назначения, отвечающие указанным признакам, неизвестны.
ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Пример 1. Антибактериальная активность.
Из кала пациента был выделен Staphylococcus aureus в количестве 100 тыс. колониеобразующих единиц на 1 г фекалий. (Далее в примере использование термина Staphylococcus aureus означает, что имеется ввиду, именно тот штамм, который выделен из кала пациента).
Из колоний микроорганизма был взят материал, который распределен на агаре в чашках Петри таким образом, что на 3-й день культивирования был получен рост микроорганизма. После этого произвели пересев на агар в чашке Петри для поддержания полученной культуры микроорганизма.
Одновременно культура микроорганизма была засеяна на агар по методу Грациа для определения количества бактериофагов в единице
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) объёма (8 образцов). Одновременно производился посев на бульон в 5 мл объёма (8 образцов).
На 3-й день от начала роста микроорганизма в пересеянной культуре были взяты пробы сточных вод в 6-и местах и 2 пробы озёрной воды. Пробы объёмом по 10 мл были профильтрованы вначале через стерильную фильтровальную бумагу, а затем через бактериальные фильтры. Таким образом, в пробах отсутствовали бактерии. По 1 мл фильтрата тестировали по способу Грациа с использованием выделенного штамма Staphylococcus aureus. Из 4-х проб из сточных вод и 1 пробы из озёрной воды были получены негативные колонии на газоне роста Staphylococcus aureus. Материал негативных колоний, полученных из 1 пробы сточных вод, был перенесён в бульонную культуру и, при дальнейшем культивировании, через 48 часов бульонная культура была обработана хлороформом и пропущена через бактериальный фильтр.
Таким образом, был получен фильтрат, содержащий бактериофаги с сохранённой репликационной функцией и не содержащий бактерии и грибы с репликационной функцией (далее фильтрат содержащий вирусы с сохранённой репликационной функцией и не содержащий бактерии и грибы с репликационной функцией будет обозначен как «ФР»).
После этого по 1 мл фильтрата ввели в 3-х дневную бульонную культуру исследуемого штамма Staphylococcus aureus: всего 3 пробы по 5 мл бульона и 1 мл фильтрата. Через 24 часа культивируемые образцы с введённым фильтратом обработали хлороформом, пропустили через бактериальные фильтры и соединили в одном флаконе.
Таким образом, была повышена концентрация бактериофагов с сохранённой репликационной функцией. Путём титрования по методу Грациа была определена концентрация выделенного бактериофага, составившая 100 тысяч частиц в 1 мл стерильного фильтрата. Тот же самый фильтрат был заморожен до -10° С и после замерзания разморожен в термостате при +20° С, вновь заморожен в-, жидком азоте путём
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) погружения в него ёмкости с фильтратом на 5 секунд и разморожен в термостате при + 10° С. После этого в фильтрат, при постоянном помешивании, вводили сухой кристаллический хлорид натрия до прекращения растворения кристаллов при +25° С. После этого надосадочную жидкость в объёме 10 мл перенесли стерильным образом в стерильный сосуд. Далее была взята стерильная дистиллированная вода. Фильтрат и дистиллированная вода поступали по отдельным трубкам, которые соединялись в одну, по которой фильтрат, объединившийся с дистиллированной водой, поступал в резервуар для сбора продукта. Скорость поступления фильтрата составляла 0,25 мл/мин, скорость поступления дистиллированной воды составляла 5 мл/мин.
Таким образом, в резервуаре для сбора продукта оказалось после окончания поступления фильтрата 208 мл продукта, не содержащего бактерий и грибов и содержавшего бактериофаги с нарушенной репликационной функцией (далее фильтрат не содержащий бактерий и грибов с репликационной функцией, но содержащий вирусы с нарушенной репликационной функцией будет обозначен как «ФВН»), лизирующих выделенный штамм Staphylococcus aureus. Некоторое количество жидкости Осталось в трубках. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт при нанесении на агар в чашке Петри и введённый в бульонную культуру в количестве от 0,5 мл предотвращал рост выделенного штамма Staphylococcus aureus. При этом готовый продукт не оказывал влияния на рост штамма Staphylococcus epidermalis, выделенного из кала того же пациента при нанесении его на агар в чашке Петри перед засевом чистой культуры Staphylococcus epidermalis.
Пример 2. Противогрибковая активность.
Из кала пациента был выделен Candida albicans в количестве 1 тыс. колониеобразующих единиц на 1 г. фекалий (далее в примере использование термина Candida albicans означает, что имеется ввиду
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) именно тот штамм, который выделен из кала пациента). Из колоний микроорганизма был взят материал, который распределен на среде Сабуро (Sabouraud Medium) в чашках Петри таким образом, что через 48 часов культивирования был получен рост микроорганизма. После этого произвели пересев на жидкую среду Сабуро (Fluid Sabouraud Medium).
Через 48 часов от начала роста микроорганизма в пересеянной культуре были взяты пробы сточных вод в шести местах и две пробы озёрной воды. Пробы объёмом по 10 мл были профильтрованы вначале через стерильную фильтровальную бумагу, а затем через бактериальные фильтры, таким образом, в пробах отсутствовали бактерии и грибы. Из фильтратов проб были взяты образцы по 1 мл из каждого, которые были введены в жидкую среду Сабуро с полученным ростом Candida albicans. После этого образцы, содержащие культуру Candida albicans и фильтраты образцов сточных вод или озёрной воды, культивировались 48 часов, а затем были отдельно пропущены через бактериальные фильтры, в результате чего получились фильтраты, которые могли содержать вирусы, обладающие репликационной функцией. Из каждого из 8 образцов взяли по 1 мл и поместили в жидкую среду Сабуро, после чего в неё внесли 1 мл среды Сабуро в объёме 10 мл, содержащей Candida albicans на момент 48 часов его культивирования. После этого пробы культивировали 48 часов. После этого по отдельности пробы были пропущены через бактериальные фильтры, и были получены ФР для каждой пробы, то есть 8 ФР.
Каждый ФР был титрован физиологическим раствором с разведением в 10 раз (1 объемная доля пробы и 9 объемных долей 0,9% стерильного раствора хлорида натрия) от 1/10 до 1/10000. По 1 мл каждого разведения и неразведённой пробы вносилось в 10 мл жидкой среды Сабуро, после чего в каждый образец добавлялся 1 мл культуры Candida albicans в жидкой среде Сабуро, полученный как описано выше. Образцы культивировались 48 часов. Одновременно, в качестве контроля, культивировался образец среды Сабуро в который ввели 2 мл физиологического раствора. Через 60
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) часов сравнили прозрачность образцов по сравнению с контрольным образцом. В серии титрования 6 из 8 образцов было выявлено подавление появления мутности, связанное с ростом Candida albicans. Разведение, подавляющее рост гриба, было от 1/10 до 1/1000.
Мы считаем, что титр разведения при котором не происходит подавления роста гриба соответствовал 10 и менее частиц вируса в 1 мл ФР, таким образом, в разведении 1/1000 содержалось около 100 частиц вируса, в разведении 1/100 - около 1000 частиц, в разведении 1/10 - около 10 тыс. частиц, в неразведённом препарате - около 100 тыс. частиц.
10 мл неразведённого ФР, подавляющего рост Candida albicans (около 100 тыс. вируса в 1 мл) было заморожено до -10° С и после замерзания разморожено в термостате при +20° С, вновь заморожено в жидком азоте и разморожено в термостате. После этого в фильтрат, при постоянном помешивании, вводили кристаллический хлорид натрия до прекращения растворения кристаллов. После этого надосадочную жидкость в объёме 10 мл перенесли в стерильный сосуд. Далее фильтрат и дистиллированная вода поступали по отдельным трубкам, которые соединялись в одну, по которой фильтрат, объединившийся с дистиллированной водой, поступал в резервуар для сбора продукта. Скорость поступления фильтрата составляла 0,125 мл/мин, скорость поступления дистиллированной воды составляла 5 мл/мин. Таким образом, в резервуаре для сбора продукта оказалось после окончания поступления фильтрата 203 мл готового продукта - ФВН, содержащего вирусы, с нарушенной репликационной функцией, подавляющие жизнедеятельность микроорганизмов выделенного штамма Candida albicans. Некоторое количество жидкости осталось в трубках, по которым поступали жидкости. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт при внесении в объёме 0,5 мл в жидкую среду Сабуро перед внесением культуры грибов, содержащихся в жидкой среде Сабуро объёмом 1. мл, полученной 48
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) часовым культивированием грибов Candida albicans, полученных из кала пациента, предотвращал рост Candida albicans. При этом, готовый продукт не оказывал влияния на рост штамма Candida albicans, полученного из образца кала другого пациента в аналогичных условиях культивирования.
Пример 3. Антибактериальная и противогрибковая активность.
Из образца пятна, появившегося на стене в родильном доме, взяли посевы для выявления бактерий и грибов. Были обнаружены Aspergillus niger и Mycoplasma pneumoniae. Выделенные колонии обоих микроорганизмов пересеяли на жидкие среды для выращивания соответствующих микроорганизмов таким образом, что через 48 часов в полученных образцах было выявлено 10 млн. колоний Mycoplasma pneumoniae в 1 мл среды и 100 тыс. колоний Aspergillus niger в 1 мл среды соответственно. Перед этим были взяты пробы сточных вод в 6-и местах и 2 пробы озёрной воды. Пробы объёмом по 10 мл были профильтрованы вначале через стерильную фильтровальную бумагу, а затем через бактериальные фильтры. Из каждого фильтрата проб были взяты образцы по 1 мл, которые были введены в соотношении 1 мл пробы на 10 мл культуры микроорганизмов в жидкой культуральной среде и инкубировались 48 часов. После инкубирования все пробы были пропущены через бактериальные фильтры индивидуально так, что получились ФР. Каждый образец ФР был фильтрован через бактериальные фильтры:
Было выявлено по 1 образцу ФР Aspergillus niger и ФР Mycoplasma pneumoniae, которые содержат по 100 тыс. вирусных частиц в 1 мл ФР. Именно эти ФР были объединены в одном флаконе. Общий объём составил 10 мл.
Полученный образец был заморожен до -30° С и после замерзания разморожен в термостате, вновь заморожен до -5° С и разморожен в термостате. После этого в фильтрат при постоянном помешивании вводили сухой кристаллический хлорид натрия до прекращения растворения
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) кристаллов. После этого получили супернатант в объёме 5 мл. Далее супернатант фильтрата и дистиллированная вода поступали по отдельным трубкам, которые соединялись в одну, по которой супернатант фильтрата, объединившийся с дистиллированной водой, поступал в резервуар для сбора продукта. Скорость поступления супернатанта фильтрата составляла 0,125 мл/мин, скорость поступления дистиллированной воды составляла 5 мл/мин. Таким образом, в резервуаре для сбора продукта оказалось после окончания поступления супернатанта фильтрата 203 мл готового продукта, содержащего вирусы (с нарушенной репликационной функцией) Aspergillus niger и Mycoplasma pneumoniae. Некоторое количество жидкости осталось в трубках, по которым поступали жидкости. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Так был получен ФВН, готовый продукт. При нанесении в объёме 0,25 мл готового продукта на указанное в начале примера пятно, появившееся на стене в родильном доме, площадью 7-7,5 см 3 через 2 часа после нанесения продукта взятые пробы не выявили Aspergillus niger и Mycoplasma pneumoniae. В то же время, как до обработки пятна, так и после, высевались Candida albicans и Staphylococcus epidermalis.
Пример 4. Антибактериальная активность.
Из содержимого фурункула (код L02.0 по Международной Классификации болезней) был выделен микроорганизм Proteus vulgaris в количестве 10 млн. колониеобразующих единиц на 1 г. содержимого фурункула.
Из колоний микроорганизма был взят материал, из которого была получена культура микроорганизма в жидкой питательной среде, содержащая 10,5 млн. колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл. Одновременно была получена культура микроорганизма на плотной питательной среде. Из образцов сточных вод из 8 различных мест были получены 8 образцов стерильных фильтратов, которые объёмом по 0,05 мл
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) каждый были помещены на выращенную на плотной среде культуру микроорганизма. В местах внесения 3-х образцов стерильных фильтратов был выявлен лизис культуры микроорганизма. Материал каждого из 3-х образцов был внесён совместно в жидкую культуру микроорганизма и через 48 часов культивирования из жидкой культуры был получен ФР. В полученном фильтрате содержалось 6 млн. частиц бактериофагов, лизирующих выделенный штамм Proteus vulgaris. ФР был обработан гамма-излучением в стандартном режиме, применяемом для стерилизации медицинского оборудования в слое жидкости толщиной 2 мм. в пластиковой ёмкости. После этого фильтрат был заморожен до -10° С и разморожен, вновь заморожен до -10° С и разморожен. По методу Грациа, репродуктивных бактериофагов, в обработанном вышеописанным способом фильтрате, выявлено не было. Был получен ФВН.
ФВН был лиофильно высушен так, что в каждом образце, находящемся в стеклянной ампуле объёмом 10 мл, содержались бактериофаги с нарушенной репликационной функцией. Содержимое ампулы, после разведения его 5 мл 0,9% раствора натрия хлорида наносили в объеме 1 мл на агар в чашке Петри перед засеванием культуры выделенного штамма Proteus vulgaris. При стандартном культивировании роста Proteus vulgaris не наблюдалось, однако выявлялся рост иных микроорганизмов.
Пример 5. Противогрибковая активность.
Trichosporon spp. был выделен из волос человека. Одновременно на жидкой среде и на плотной среде была получена культура Trichosporon spp. В жидкую среду был введён образец, содержащий бактериофаг, полученный из шерсти овцы. Через 105 часов инкубации культуры Trichosporon spp. совместно с бактериофагом был получен ФР. ФР был дважды заморожен и, после этого, разморожен. Так был получен ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Готовый препарат подавлял рост выделенного штамма Trichosporon spp. в количестве 0,05 мл на 10 см плотной питательной среды при нанесении препарата перед нанесением образца Trichosporon spp. Препарат был смешан в соотношении 1/10 с оливковым маслом. Обработка волос пациента 2 раза в день в течение 5 дней привела к исчезновению симптомов заболевания. В посевах волос источник инфекции не был выявлен. При этом в смывах с волос определялся Candida albicans.
Пример 6. Антибактериальная и противогрибковая активность. Из мокроты пациента, инфицированного ВИЧ-1, были выделены штаммы Cryptococcus neoformans и Pseudomonas aeruginosa.
Оба микроорганизма были одновременно посеяны на жидкую и твёрдую питательны среды.
После получения роста культур на питательных средах на плотные питательные среды были внесены стерильные фильтраты, полученные из образцов фекалий пациентов инфекционного стационара. На средах Cryptococcus neoformans и Pseudomonas aeruginosa в каждой было получено по 2 образца разрушения культуры бактериофагами. Из полученных образцов материал был перенесен в жидкие среды, из которых через 36 часов были получены ФР по 2 для каждого микроорганизма. Данные ФР были объединены, заморожены в жидком азоте, разморожены. В полученный единый ФР культур обоих микроорганизмов добавляли хлорид натрия при 25° С до прекращения растворения, получался промежуточный продукт.
Промежуточный продукт вводили капельным способом (0,05 мл в капле, по 20 капель в минуту), в проточный раствор дважды дистиллированной воды (10 мл в минуту). Получался ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт разливали во флаконы по 100 мл, предназначенные для капельного дозирования жидкости, получая лекарственный препарат.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Готовый продукт вводили в масло какао (на 2 мл масло какао 1 мл готового продукта) и формировали суппозитории объёмом 5 мл. Таким образом, получался лекарственный препарат.
Применение суппозиториев ректально 3 раза в день в течение 15 дней привело к тому, что на 16 день в посеве мокроты Cryptococcus neoformans и Pseudomonas aeruginosa выявлены не были, но при этом как до лечения, так и после высевался Staphylococcus epidermalis.
Пример 7. Антибактериальная активность.
В отношении выявленного штамма Helicobacter pylori был получен бактериофаг в жидкой культуральной среде. Бактериофаг был выделен в виде ФР, содержащего 100 тыс. бактериофагов в 1 мл. ФР был дважды заморожен при -5° С, с последующим размораживанием. Было проведено центрифугирование таким образом, что в супернатанте не было выявлено бактериофагов с репликационной функцией. Так получали ФВН. Готовый продукт добавляли в жевательную резинку в количестве 1 мл ФВН на 1 порцию, получая готовый продукт. Так же готовый продукт добавляли в количестве 1 мл ФВН на 100 мл воды, предназначенной для питья. Применение модифицированной таким питьевой воды инфицированным Helicobacter pylori пациентом, от которого был получен штамм в течение 20 дней по 200 мл в сутки привело к тому, что при исследовании биоптатов антрального и фундального отдела желудка методами ПЦР и светооптической микроскопии с окраской по Романовскому-Гимзе через 35 дней после окончания приёма модифицированной питьевой воды не выявило наличие Helicobacter pylori.
Пример 8. Противогрибковая активность.
В отношении штамма Saccharomyces cerevisiae был получен бактериофаг в жидкой среде культивирования. Бактериофаг был выделен в виде ФР. Из фильтрата был получен стерильный фильтрат, содержащий бактериофаги с нарушенной репликационной функцией. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт добавляли в пиво (в том числе в процессе его приготовления). При этом добавление продукта не влияло на обычный технологический процесс, что подтверждает отсутствие влияния продукта на технологические штаммы микроорганизмов.
Пример 9. Антибактериальная и противогрибковая активность. При микробиологическом исследовании кожи пациента были выделены: Propionobacter acne, St. aureus, Candida albicans. В отношении штамма Propionobacter acne был получен бактериофаг в жидкой среде культивирования. В отношении штамма St. aureus был получен бактериофаг в жидкой среде культивирования. В отношении штамма Candida albicans был получен бактериофаг в жидкой среде культивирования. ФР были объединены в равных объёмных концентрациях. Был получен объединённый ФР, содержащий по 10 тыс. бактериофагов, активных в отношении каждого из указанных выше микроорганизмов. Объединённый ФР насыщали раствором хлоридом цезия до прекращения растворения хлорида цезия при температуре 37° С. После чего полученную жидкость объединяли с дистиллированной водой при соотношении скорости поступления ФВН с хлоридом цезия и дистиллированной воды как 1/20. Так получался ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт вводили в шампунь из соотношения 10 мл готового продукта на 100 мл шампуня. Применение шампуня пациентом ежедневно для мытья головы и тела привело к тому, что через 20 дней указанные выше условно- патогенные микроорганизмы (Propionobacter acne, St. aureus, Candida albicans) в посеве, взятом с поверхности тела пациента, не были выявлены. В то же время количество колониеобразующих единиц Staphylococcus epidermalis в посеве с кожи пациента до и после применения шампуня увеличилось в 1 ,5 раза.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 10. Антибактериальная активность.
Были получены культуры микроорганизмов: Micobact. flavum, Ps. Fluorescens, Bact. Indigonaceum, Aerobacter, Salmonella.
Из сточных вод были выделены бактериофаги, лизирующие полученные штаммы микроорганизмов каждый по отдельности. Бактериофаги были введены в культуры микроорганизмов, каждый в культуру того микроорганизма, в отношении которого был вирулентен бактериофаг.
Через 60 часов инкубации культур был получен стерильный фильтрат культур Micobact. flavum, Ps. Fluorescens, Bact. Indigonaceum, Aerobacter, Salmonella, инкубированных совместно с бактериофагами, к которым данные штаммы микроорганизмов были чувствительны. Был получен ФР, содержащий по 1 млн. бактериофагов, лизирующих Micobact. flavum, Ps. Fluorescens, Bact. Indigonaceum, Aerobacter, Salmonella в 1 мл.
ФР был дважды заморожен при -10° С и разморожен при +20° С, облучён ультрафиолетовым светом. Так был получен ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией. Готовый продукт вводили из расчёта 1 мл на 1000 мл коровьего молока. Молоко не подвергалось пастеризации и иным методам предотвращения микробной колонизации. Молоко хранилось в стерильном стеклянном флаконе, герметично закрытом стерильной пластиковой пробкой при температуре 20° С в течение 10 дней. После оценки органолептических показателей через 10 дней хранения не было выявлено каких-либо отличий по сравнению с таковыми до 10 дневного хранения.
Пример 11. Консервирующая добавка.
Вино, после прошествия периода времени, когда оно должно отвечать заявленным производителем органолептическим показателям (на момент готовности), приготовленное без использования консервантов, было разделено на 3 порции по 1000 мл каждая. Первая порция была обработана
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) ,
37
сжиганием в бутыли фосфора, вторая не обрабатывалась никак, в третью порцию ввели препарат. Препарат был получен путём фильтрации культур 3-х микроорганизмов идентификация которых не проводилась, полученных из не консервированного вина предыдущего урожая, в которые были введены образцы бактериофагов, уничтожающих эти микроорганизмы, после чего был получен ФР. Концентрация ФР составляла 100 тыс. вирусов каждого из 3-х штамов на 1 мл.
ФР был заморожен в жидком азоте и разморожен при +20° С. После этого ФР в десятикратно меньшем объёме вводили в дистиллированную воду. Получали ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией.
В образце вина, обработанном с использованием ФВН из расчёта 1 мл на 100 мл, по органолептическим показателям не было выявлено отличий по сравнению с образцом вина на момент его готовности.
Пример 12. Консервирующая добавка.
Для исследования использовали 2-х коров весом 545 и 560 кг перед забоем. Из говядины, доставленной в пункт реализации, были получены культуры микроорганизмов Proteus, Staphylococcus, Streptococcus Pseudomonas и Achromobacter. Из 2-х проб озёрной воды был получен ФР, из которого были получены бактериофаги, разрушающие каждый из бактериофагов по 1 из указанных микроорганизмов. Концентрация бактериофагов была увеличена путём культивирования на культурах чувствительных микроорганизмов. После этого вновь был получен ФР, содержащий 100 тыс. вирусов в отношении каждого микроорганизма в 1 мл.
ФР был обработан ультрафиолетовым светом в слое 2 мм. при экспозиции 5 сек. а образец. После этого, жидкость насыщалась хлоридом натрия при 25° С до прекращения растворения кристаллов соли и смешивалась в соотношении 1/10 с большей по объёму дистиллированной
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) водой. Получался ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией.
Готовый продукт, активный в отношении микроорганизмов Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas и Achromobacter, был введён внутривенно корове весом 545 кг за 1 час до забоя.
Коровы были забиты с интервалом 20 минут, вначале весом 545 кг, затем весом 560 кг. Через 1 час после забоя были оценены органолептические показатели мяса забитых коров весом 545 кг (образец 1) и 560 кг (образец 2). Органолептическая оценка не выявила различий.
Мясо коровы весом 545 кг хранилось при температуре +10° С в отдельном контейнере (образец 3).
Мясо коровы весом 560 кг хранилось при температуре +10° С в отдельном контейнере (образец 4).
Через 10 дней хранения были оценены органолептические показатели образцов мяса (образцы 3 и 4).
Сравнение органолептических признаков образца 3 по сравнению с образцами 1 и 2 выявило незначительное увеличение вязкости образца 3.
Сравнение образца 4 с образцами 1 и 2 выявило: появление у образца 4 запаха, оцененного как «гнилостный», изменение цвета поверхности образца в синюю сторону спектра, существенное повышение вязкости.
Пример 13. Консервирующая добавка.
Использовался ФВН, активный в отношении микроорганизмов Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas и Achromobacter и Aspergillus glaucus, полученный из ФР содержащий по 100 тыс. частиц вирусов, активных в отношении каждого из микроорганизмов Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas и Achromobacter и Aspergillus glaucus в 1 мл ФР. ФВН был получен путём замораживания и размораживания ФР, после чего был обработан ультрафиолетовым светом в 2 мм. объеме с экспозицией по 5 секунд на каждый образец. ФВН был
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией.
Готовый продукт был нанесён на поверхность 2 кг баранины в объёме 2 мл.
При хранении обработанного указанным способом мяса и необработанного при температуре +5° С в течение 10 дней было выявлено, что на поверхности обработанного образца рост микроорганизмов Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas и Achromobacter и Aspergillus glaucus не обнаружен.
Пример 14. Дезинфицирующее средство.
Из дерева, служившего частью дома, разрушившегося из-за неоднородности деревянных компонентов, были взяты образцы из которых были выделены культуры бактерий и грибов, в отношении которых (бактерий и грибов) были обнаружены бактериофаги, вызывающие их лизис. Всего было выявлено 3 гриба и 7 бактерий. Классификация микроорганизмов не проводилась. Из полученных бактериофагов был получен ФР, содержащий по 100 тыс. частиц бактериофагов с нарушенной репликационной функцией в 1 мл путём осмотического лизиса, а именно: ФР помещался в раствор хлорида натрия, в который добавлялся хлорид натрия при температуре 25° С до прекращения растворения соли в течение . 45 минут. После этого надосадочный раствор сливали и соединяли в соотношении 1/25 с дважды дистиллированной водой. Получался ФВН. Полученный продукт был обработан таким образом, что бы в его составе не было вирусов с сохранённой репликационной функцией.
Обработка деревянных конструкций готовым продуктом из расчёта 0,5 мл на м2 поверхности не выявила уменьшения плотности конструкций в течение 3 лет.
Пример 15. Определение специфической активности и острой токсичности препарата бактериальных вирусов с нарушенной
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) репликационной функцией в стандартных доклинических испытаниях.
В Санкт-Петербургском институте токсикологии было исследовано фармакологическое свойство бактериофага с нарушенной репликационной функцией [5]. Исследования проводились в сравнении с антибиотиками с известными МПК (минимально подавляющими концентрациями) методом диффузии в агар (in vitro) и внутрибрюшинным введением в модели генерализованной инфекции (см. таблицу 5).
На основании проведенных исследований (примеры 1- 15) можно сделать следующие выводы:
а) результаты токсикометрии, данные некропсии и наблюдений за экспериментальными животными в постинтоксикационном периоде острого отравления позволяют отнести лекарственную форму препаратов к V классу практически нетоксичных лекарственных веществ [5].
Следовательно, новый препарат обладает выраженным антимикробным действием в концентрациях, сопоставимых с эффективными дозами антибиотиков. Он обладает более широким спектром действия по сравнению с большинством антибиотиков, применяемых в медицинской практике.
б) Результаты изучения антибактериальной активности препаратов in vitro приведены в таблицах 6 и 7.
Результаты исследований, приведенные в таблице 6, свидетельствуют о высокой эффективности представленного бактериофага с нарушенной репликационной функцией в отношении тест-микрофлоры. На синегнойную палочку препараты действуют слабее.
Данные таблицы 7 подтверждают бактерицидное действие представленного бактериофага с нарушенной репликационной функцией по отношению к разным видам микробов.
В экспериментах in vivo установлено, что на модели, генерализованной стафилококковой инфекции мышей, представленный бактериофаг с
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) нарушенной репликационной функцией, проявил лечебный эффект. При его введении лишь одна мышь погибла в первые сутки опыта. Далее летальности животных не отмечалось.
В контрольной группе инфицированных животных, не получавших изучаемые препараты, отмечена 100% гибель мышей в течение первых же суток после заражения. Данные отражены в таблице 8.
ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ
В настоящее время имеются технические возможности для культивирования большинства известных бактерий и грибов. В каждом конкретном случае условия культивирования бактерий и грибов определяются конкретной совокупностью физических и химических условий среды, окружающей культивируемые бактерии и грибы. Тем не менее, именно возможность репликации бактерий и грибов является подтверждением их жизнеспособности. Таким образом, все известные бактерии и грибы в отношении которых доказана их жизнеспособность могут быть культивированы (выращены по желанию).
Известна изменчивость вирусов, используя которую можно естественным образом (выделяя из образцов окружающей среды) или искусственным образом (повторно заражая известными вирусами бактерии и грибы с целью получения генетически отличных образцов) получить вирусы, к которым чувствительны конкретные образцы бактерий и/или грибов.
Нельзя утверждать, что все таксономические классы бактерий и грибов описаны в настоящее время. Так, микроорганизм Helicobacter pylori был изначально описан, как Campylobacter pyloridis. Но, тем не менее, и в то время, была возможность выделения бактериофага, чувствительного к нему. Такая возможность была и на момент описания кокковых микробов в слизистой желудка, выявленных ранее. Таким образом, даже при отсутствии уверенности в обнаружении нового таксономического класса бактерий и грибов, но при наличии оснований в его участии в
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) нежелательных изменениях, возможно выявить вирус именно к этой бактерии или к этому грибу.
Известны различные способы лишения вирусов репликационной функции, при сохранении функции вирусов изменять жизнедеятельность клеток бактерий и грибов. Нами предложен ещё один такой ранее неизвестный способ.
Таким образом, предложенное техническое решение позволяет получать низкотоксичные агенты, обладающие способностью специфически связываться с бактериями и грибами, как с микро- биологически идентифицированными, так и с не идентифицированными, как в живых организмах, так и вне их, а также угнетать их жизнедеятельность.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Сравнительная характеристика бактериофагов и препаратов ферментов бактериофагов
Таблица 1
Figure imgf000044_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Продолжение таблицы 1
Figure imgf000045_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Сравнительные особенности бактериофагов с нарушенной и с сохранённое репликационной функцией
Таблица 2
Figure imgf000046_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Продолжение таблицы 2
Figure imgf000047_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Сравнительная характеристика бактериофагов и антибиотиков
Таблица 3
Figure imgf000048_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Продолжение таблицы 3
Figure imgf000049_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Сравнительные характеристики антибиотиков и препаратов на основе бактериофагов с нарушенной репликационной функцией
Таблица 4
Figure imgf000050_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Продолжение таблицы 4
Figure imgf000051_0001
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Минимальная подавляющая концентрация (МПК) для бактериофагов с нарушенной репликационной функцией in vitro (мкл/мл)
Таблица 5
Figure imgf000052_0001
* — и более; второй интервал минимальных подавляющих концентраций антибиотиков приводится для устойчивых штаммов возбудителей заболеваний
Антибактериальная активность бактериофагов с нарушенной репликационной функцией методом диффузии в агар
Таблица 6
Figure imgf000052_0002
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Антибактериальная активность бактериофагов с нарушенной репликационной функцией
( по данным метода серийных разведений)
Таблица 7
Figure imgf000053_0001
Примечание: "+" наличие роста, "-" отсутствие роста
Результаты лечения генерализованной стафилококковой инфекции мышей бактериофагами с нарушенной репликационной функцией
Таблица 8
Figure imgf000053_0002
Примечание: в числителе - число погибших мышей,
в знаменателе - число испытанных животных
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Список литературы:
1. PHAGE THERAPY: BACTERIOPHAGES AS ANTIBIOTICS Elizabeth Kutter, Evergreen State College, Olympia, WA 98505 - Nov. 15, 1997
2. US Patent. Lys К Endolysin Is Synergistic with Lysostaphin Against MRS A, Inventors: David M. Donovan Stephen C. Becker, IPC8 Class:
AA61K3848FI, USPC Class: 424 9467, Patent application number: 20100021450;
3. Пептидогликанлизирующие ферменты бактериофагов - перспективные противобактериальные агенты, К. А. МИРОШНИКОВ, О. В. ЧЕРТКОВ и авторы, Успехи биологической химии, т. 46, 2006, с. 65- 6985.
4. Министерство образования Российской Федерации, Кемеровский технологический институт пищевой промышленности, И.А. Еремина, Н.И. Лузина, О.В. Кригер, Микробиология продуктов растительного происхождения Учебное пособие, Кемерово 2003 г.
5. ФЕДЕРАЛЬНОЕ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ АГЕНТСТВО, ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ТОКСИКОЛОГИИ, «ОТЧЕТ об экспериментальном изучении фармакологической активности и токсичности препарата «Вицинале» производства ЗАО «Петрохим», Научный руководитель доктор медицинских наук, профессор СП. Нечипоренко, г. Санкт-Петербург, 2006г.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)

Claims

Формула изобретения
Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами, характеризующийся тем, что он содержит антибактериальные и/или противогрибковые вирусы, измененные так, что у них нарушена репликационная функция.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
PCT/UA2010/000034 2010-06-23 2010-06-23 Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами WO2011162733A1 (ru)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011136591/15A RU2011136591A (ru) 2010-06-23 2010-06-23 Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами
PCT/UA2010/000034 WO2011162733A1 (ru) 2010-06-23 2010-06-23 Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/UA2010/000034 WO2011162733A1 (ru) 2010-06-23 2010-06-23 Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2011162733A1 true WO2011162733A1 (ru) 2011-12-29

Family

ID=45371695

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/UA2010/000034 WO2011162733A1 (ru) 2010-06-23 2010-06-23 Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами

Country Status (2)

Country Link
RU (1) RU2011136591A (ru)
WO (1) WO2011162733A1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994010323A1 (en) * 1992-11-04 1994-05-11 Imperial Cancer Research Technology Limited Virus with modified binding moiety specific for the target cells
RU2109055C1 (ru) * 1996-11-27 1998-04-20 Дочернее предприятие "Биофаг" Научно-производственного объединения "Иммунопрепарат" Способ выделения бактериофагов
RU2186574C1 (ru) * 2001-01-24 2002-08-10 Яфаев Рауэль Хасанянович Препарат поливалентного бактериофага против синегнойной палочки, штаммы бактериофага bacteriophagum pseudomonas aeruginosa спбгма им. и.и. мечникова №05, №03, №06 и №07, используемые при приготовлении поливалентного препарата против синегнойной палочки
RU2247151C2 (ru) * 2002-05-06 2005-02-27 Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации" Способ получения полибактериофага

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994010323A1 (en) * 1992-11-04 1994-05-11 Imperial Cancer Research Technology Limited Virus with modified binding moiety specific for the target cells
RU2109055C1 (ru) * 1996-11-27 1998-04-20 Дочернее предприятие "Биофаг" Научно-производственного объединения "Иммунопрепарат" Способ выделения бактериофагов
RU2186574C1 (ru) * 2001-01-24 2002-08-10 Яфаев Рауэль Хасанянович Препарат поливалентного бактериофага против синегнойной палочки, штаммы бактериофага bacteriophagum pseudomonas aeruginosa спбгма им. и.и. мечникова №05, №03, №06 и №07, используемые при приготовлении поливалентного препарата против синегнойной палочки
RU2247151C2 (ru) * 2002-05-06 2005-02-27 Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации" Способ получения полибактериофага

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GOLDFARB D.M. ET AL.: "Gosudarstvennoe izdatelstvo meditsinskoy literatury", BACTERIOGRAFIYA, vol. 122, 1961, pages 148 - 159, 163-164 *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2011136591A (ru) 2014-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Al-Waili et al. Honey and microbial infections: a review supporting the use of honey for microbial control
RU2234945C2 (ru) Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья с самопроизвольно изменяющимися окислительно-восстановительными свойствами
RU2370532C2 (ru) Способ ферментации растительного материала и культивирования бактерий, экстракт ферментированного растительного материала, порошок экстракта ферментированного растительного материала и их применение
CN106470548A (zh) 抗微生物组合物
Zaccheo et al. Food hygiene and applied food microbiology in an anthropological cross cultural perspective
Ammar et al. Campylobacter as a major foodborne pathogen: A review of its characteristics, pathogenesis, antimicrobial resistance and control
TW201429480A (zh) 香椿萃取物之用途
Nyarko et al. Assessment of microbiological safety of tiger nuts (Cyperus esculentus L.) in the Cape Coast Metropolis of Ghana
Youssef et al. Prevalence of Listeria species in raw milk, ice cream and yogurt and effect of selected natural herbal extract on its survival.
Gómez-Aldapa et al. Acid and alcohol tolerance of Escherichia coli O157: H7 in pulque, a typical Mexican beverage
Adeniran et al. Microbiological assessment of probioticated ginger‐based beverages
RU2499600C1 (ru) Состав со стабилизированным окислительно-восстановительным потенциалом
Saleh Studies of the Growth and Toxin Production of Clostridium Botulinum in a Precooked Frozen Food-Inhibition by Lactic Acid Bacteria
Kumari et al. Potential Concern of Foodborne Pathogens in the Food Industry
Akhtar et al. Identification of microbial contamination of popular fruits of Bangladesh and assessment the effects of alternative preservatives instead of formalin
Belewu et al. Microbial evaluation of indigenous milk products with special reference to the bacterial flora of some public health importance
WO2011162733A1 (ru) Антибактериальный и/или противогрибковый компонент, обладающий свойством специфически связываться с бактериями и/или грибами
Ogundare et al. Biopreservative application of bacteriocins obtained from samples Ictalurus punctatus and fermented Zea mays
Hrustemović et al. Food pathogen of broiler chicken meat Campylobacter spp. and antibiotic resistance.
Zaman et al. The prevalence of E. coli O157: H7 in the production of organic herbs and a case study of organic lemongrass intended for use in blended tea
Ahmed et al. Microbiological quality analysis along with the drug resistance pattern of the identified bacteria of different types of locally produced sauces available in some popular fast food shops in Dhaka Metropolis
AM et al. Prevalence of some food poisoning microorganisms in some dairy products
Baron et al. Microbial spoilage
van den Honert et al. Living with Little Monsters: An Illustrated Household Guide to Managing the Hidden World of Microbes
Abu Ramouz et al. Prevalence and antibiotic susceptibility profiles of campylobacter, staphylococcus aureus, salmonella and E. coli from chicken carcasses

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 10853779

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2011136591

Country of ref document: RU

Kind code of ref document: A

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 10853779

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1